JPS6287086A - 遺伝子組換え大腸菌の遺伝子生産物を採取する方法および装置 - Google Patents

遺伝子組換え大腸菌の遺伝子生産物を採取する方法および装置

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JPS6287086A JP60226785A JP22678585A JPS6287086A JP S6287086 A JPS6287086 A JP S6287086A JP 60226785 A JP60226785 A JP 60226785A JP 22678585 A JP22678585 A JP 22678585A JP S6287086 A JPS6287086 A JP S6287086A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔発明の利用分野〕 本発明は、動物、植物及び微生物等から得た目的遺伝子
を導入した細胞を培養し、目的遺伝子を発現させてその
生産物を採取する方法に関する。
〔発明の背景〕
最近、宿主細胞のベクタープラスミド等に有用物質の生
産情報を有する遺伝子を組込んだ複合ＤＮＡ　（デオキ
シリボ核酸）を保持する宿主細胞を用いて、当該細胞に
上記有用物質を大量生産させる遺伝子組換え技術が発展
してきた。この技術により既にヒトインターフェロンや
インスリン等が生産されつつあり、大腸菌、酵母、枯草
菌、放線菌、動物細胞及び植物細胞等は宿主として利用
されてきている。
しかし、目的遺伝子を保持する遺伝子組換え細胞を用い
て目的の生産物を大量に工業生産する方法はまだ開発さ
れておらず、遺伝子組換え細胞の効率的な培養方法の開
発が急がれている。
遺伝子組換え細胞に目的の生産物を大量に生産させる方
法の一つとして、培養液中の細胞濃度を高めることが考
えられる。しかし、細胞濃度を上げるため基質を流加し
ても培養途中から菌体増殖が停止し、細胞濃度を上げる
ことが困難になる。
そこで、菌体増殖を停止させる原因となる抑制物質を除
去するために、培養液を断続的又は連続的に抜き出し遠
心分離により菌体を回収して再び培養槽に仕込む方法（
特開昭５３−２９９８５号公報）が提供されている。こ
れは酵母を対象としたもので、細胞を大量に生産させる
ためのプロセスであり、細胞に目的物質を生産させるた
めのプロセスでは□ない。
〔発明の目的〕
本発明の目的は、効率的な遺伝子組換え細胞の培養方法
を提供することにある。
〔発明の概要〕
本発明は、目的遺伝子、ベクター及びプロモータから成
る複合ＤＮＡを細胞内に保持し、かつ目的遺伝子の発現
能を有する細胞を培養し、目的遺伝子を発現させその生
産物を採取するに際し、該遺伝子組換え細胞の培養中に
増殖抑制物質を除去しまたは除去しながら細胞の増殖を
図る工程と誘導抑制物質を除去した後に目的物質の生産
を誘導させる工程より成ることを特徴とする遺伝子組換
え細胞の高効率培養方法を提供するものである。
本発明では遺伝子組換え細胞の高効率培養方法を示す具
体例として、プロモータにしｒｐ　（トリプトファン）
プロモータを用い、それにβ−ｇａｌ（β−ガラクトシ
ダーゼ）遺伝子を連結した複合プラスミドｐＴＲＥＺ　
１　　を保持する大腸菌８８１０１株による培養方法を
示す。
第４図に遺伝子組換え大腸菌を用いて流加培養を行った
結果を示す。溶存酸素濃度の上昇を指標として基質であ
るグルコース、カザミノ酸培地を流加した。１８時間目
には菌体濃度が１３．１　ｇ／Ｑに達したが、これ以後
菌体の増殖は停止した。
β−ｇａｌ生産を誘導させるため、誘導剤のＩＡ（３−
β−インドールアクリル酸）と栄養物質であるカザミノ
酸を３２時間目に添加したが、β−ｇａｌ生産は誘導さ
れなかった。このように、菌体増殖が停止するのは培養
上清液に菌体増殖やβ−ｇａｌ生産を抑制する物質が存
在するためではないかと考えられた。そこで、菌体が増
殖している１２時間目と停止した１９時間目の上清液に
新しい培地と新鮮な菌体を添加して培養した。その結果
を第２図に示す。１９時間目の上清液では菌体は全く増
殖せず、１２時間目でも比増殖速度は対隅の約半分であ
り極めて増殖が悪かった。一方、菌体の増殖活性を調べ
るため凍結保存した菌体を新鮮培地に接種したところ、
１２時間目と１９時間目の菌体の比増殖速度は対隅とほ
ぼ同じであり。
菌体増殖活性は低下していなかった。また、β−ｇａｌ
生産も誘導剤の添加により誘導された。以上から、培養
の経過につれて菌体の増殖とβ−ｇａｌ生産の誘導を抑
制する物質が蓄積することがわかった。
これらの検討結果から遺伝子組換え細胞の増殖を活発に
させ、刈胞濃度を上げるために培養中に蓄積する増殖抑
制物質を除去すること、さらには該細胞に目的物質の生
産を誘導させるために、誘導を抑制する物質を誘導前に
除去することを特徴とする本発明を生むに至った。とく
に、遺伝子組換え細胞に目的物質を誘導生産させる前に
誘導抑制物質を除去することにより、物質生産を効率化
する方法は本発明により初めて見い出されたものであり
、遺伝子組換え細胞培養においてきわめて重要な知見で
ある。
本発明において増殖抑制物質や誘導抑制物質を除去する
方法として次のようなものがある。培養液の一部を抜き
出し遠心分離により細胞を回収し再び培養槽に戻す方法
、抑制物質が低分子物質である場合は透析膜や限外濾過
膜などを用いて除去する方法またはイオン交換樹脂を用
いる方法などがある。
本発明において宿主としては前記した大腸菌以外の宿主
１例えば酵母、枯草菌、放線菌、動物細胞及び植物細胞
などについても、それらに適したプロモータを用いかつ
誘導させて目的物質を生産させる場合には本発明を適用
できる。また、目的物質の生産を誘導させるには、宿主
が大腸菌の場合にｔｒｐプロモータに対しては上記のＩ
Ａ（３−β−インドールアクリル酸）の添加が、Ｑａｃ
プロモータ、　ｔａｃプロモータに対してはＩＰＴＧ　
（イソプロピル−β−ローチオガラクトシド）等の添加
が、ＰＬプロモータに対しては培養液の温度を上昇させ
ることが有効である。目的物質の生産を誘導させる時に
添加する栄養物質としては、アミノ酸の混合物であるカ
ザミノ酸、アミノ酸、グルコース、酵母エキスなどが有
効である。
上記した抑制物質除去方法、誘導方法及び添加する栄養
物質に関しては、用いた宿主、抑制物質及び生産する目
的物質に応じて選択すれば良い。
つぎに本発明方法を実施するに必要な装置の一例を第３
図に示す。培養槽１内に培地と種細胞を入れ、導管１３
により培養槽１内に空気を吹込みつつ攪拌材２により培
養液を攪拌しながら遺伝子組換え細胞を培養する。この
時、培養槽１に設置した溶存＃素センサ６と溶存酸素計
５を用いて培養液毎の溶存酸素濃度を測定する。測定し
たデータは制御器３に送られ、７８存酸索癩度の変化を
監視し、溶存酸素濃度が急激に上昇した時点で定量ポン
プ９に信号を送り、基質槽７から基質を流加する。一定
時間の培養後、導管１６により培養液を抜き出し、抑制
物質除去器４により抑制物質を除去した後の細胞液を導
￥Ｆ１５により培養槽に戻す。細胞が高密度に達した時
点で、同じように抑制物質除去器４により抑制物質を除
去した後、定量ポンプ１０により誘導槽８から誘導剤と
基質を添加し、目的物質の生産を誘導させて、目的物質
の大量生産を行う。細胞内又は細胞外に生産された目的
物質は分離精製することにより製品となる。
〔発明の実施例〕
実施例１ 菌体：複合プラスミドｐＴＲＥＺ　１　　を保持する大
腸菌８８１０１株。
初発培地：Ｍ９−カザミノ酸培地、組成はＮＨ４ＣＱ　
１　ｇ、ＮａｚＨＰＯ４６ｇ−ＫＨｚＰＯｔ３ｇ、　　
ＮａＣＱ５ｇ、　　ＭｇＳ　０番・　７ＨｚＯＯ，１ｇ
、ＣａＣＱ　・２Ｈ２０１５ｍｇ、チアミン塩酸塩０．
１ｇ、プロリン０．１ｇ、トリプトファン０．０１　ｇ
、グルコース５ｇ、カザミノ酸２．５ｇ、酵母エキス１
．５ｇ、蒸留水ＩＱ、ＰＨ７，０である。なお本培地に
は複合プラスミドを保持する大腸菌のみを増殖させるた
め、アンピシリン（Ａｐ）を５０　ｍ　ｇ　／　Ｑ添加
した。
流加用培地ニゲルコース２００ｇ、プロリン４ｇ、カザ
ミノ酸１００ｇ、酵母エキス６０ｇ、トリプトファン０
．４　ｇ、蒸留水ＩＱ、ｐＨ７，０である。
培養条件：複合プラスミドを保持する大腸菌を５０　ｍ
　ＱのＭ９−カザミノ培養地を入れた５００ｍＱ容振と
うワラスコ４本に接種し、振どう培養機により、振幅７
Ｇ、振とう回数１１５回／ｍｉｎ、３７℃で一晩培養し
た。この種菌液２００ｍＱをＭ９−カザミノ培養地の入
った５Ｑジヤーフアーメンタに接種し、初発液４１２Ｑ
で３７℃、ｐＨ７，０通気量２Ｑ／ｍｉｎで培養を開始
した。培養中の溶存酸素濃度の変化を検知し、溶存酸素
濃度が急激に上昇した時点で流加用培地を５０ｍβ流加
した。
第１図に示すように２０時時間口遠心分離により培養上
清液を除き菌体を回収し再び新鮮培地に懸濁して基質を
流加したところ、２８゜５時間口に菌体濃度は１９．２
　ｇ／Ｑ　　の７ｇＪａ度に達した。
３１時時間口再度遠心分離して菌体を回収した後、新鮮
培地に患濁し、グルコースが消費された時点でＴＡを５
０　ｍ　ｇ　／　ｎとカザミノ酸２５　ｍ　ｇ　／　Ｑ
を添加したところβ−ｇａΩ生産量は添加前の１．４倍
に向上した。
〔発明の効果〕
以上詳述したように、本発明によれば、培養中に増殖抑
制物質や誘導抑制物質を除去するのみで高密度の細胞濃
度を達成出来かつ目的物質の生産を誘導出来る。
【図面の簡単な説明】
第１図は遺伝子組換え細胞の流加培養中に培養上清液の
除去を行った結果の一例を表わす図、第２図は培養液中
の増殖抑制物質により細胞増殖が抑制された例を表わす
図、第３図は本発明の培養装置例の概略図、第４図は遺
伝子組換え細胞の流加培養結果の一例を表わす図である
。 ］・・・培養槽、２・・・攪拌機、３・・・制御器、４
・・・抑制物質除去器、５・・・溶存酸素計、６・・・
溶算酸素センサ、７・・・基質槽、８・・・誘導槽、９
，１０・・・定量ポンプ、１１，１２，１３，１４，１
５．１６・・・導管。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、目的遺伝子、ベクター及びプロモータより成る複合
    ＤＮＡを細胞内に保持し、かつ目的遺伝子の発現能を有
    する遺伝子組換え細胞を培養し、目的遺伝子を発現させ
    てその生産物を採取する方法において、該遺伝子組換え
    細胞の培養中に蓄積する増殖抑制物質を除去しまたは除
    去しながら細胞の増殖を図る工程、目的物質の誘導を抑
    制する物質を除去する工程及び目的物質の生産を誘導さ
    せる工程を含むことを特徴とする遺伝子組換え細胞の培
    養方法。 ２、該目的物質の誘導を抑制する物質を除去する工程の
    次に該目的物質の生産を誘導させる工程を行うことを特
    徴とする特許請求の範囲第１項記載の遺伝子組換え細胞
    の培養方法。 ３、遺伝子組換え細胞が大腸菌、酵母、枯草菌、放線菌
    、動物細胞及び植物細胞であることを特徴とする特許請
    求の範囲第１項または第２項記載の遺伝子組換え細胞の
    培養方法。
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EP86114159A EP0219791B1 (en) 1985-10-14 1986-10-13 Process for culturing recombinant cells
KR1019860008553A KR890004020B1 (ko) 1985-10-14 1986-10-13 재조합균세포의 배양방법
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0227993A (ja) * 1988-07-15 1990-01-30 Nippon Shinyaku Co Ltd ｈＥＧＦの製法

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1987001129A1 (en) * 1985-08-15 1987-02-26 Amgen Fermentation methods for hepatitis vaccine production
PT84991B (pt) * 1986-06-06 1990-03-08 Genentech Inc Processo para a producao de actividador do plasminogenio biologicamente activo
JP2676511B2 (ja) * 1987-03-23 1997-11-17 株式会社日立製作所 酢酸を指標とした培養方法及びその装置
CA1322735C (en) * 1987-11-07 1993-10-05 Shinichiro Haze Microorganism having low acetate forming capability, and process for production of useful substrate using same
US5955323A (en) * 1996-08-01 1999-09-21 American Home Products Corporation Automated high-yield fermentation of plasmid DNA in Escherichia coli
US20030017554A1 (en) * 2000-11-15 2003-01-23 Mechthild Rieping Process for the fermentative preparation of L-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family
US20030054503A1 (en) * 2001-04-03 2003-03-20 Degussa Ag Process for the production of L-amino acids using strains of the family enterobacteriaceae that contain an attenuated dgsA gene
WO2003008606A2 (en) * 2001-07-18 2003-01-30 Degussa Ag Process for the preparation of l-amino acids using strains of the enterobacteriaceae family which contain an enhanced phob or phor gene
JPWO2003016907A1 (ja) * 2001-08-17 2004-12-02 エーザイ株式会社 生体試料中のラミニン５抗原の測定試薬及び測定方法
EP1498475A1 (en) * 2003-07-18 2005-01-19 Meristem Therapeutics S.A. Continuous plant cell bioreactor and method for continuous plant cell culture
GB0704025D0 (en) * 2007-03-02 2007-04-11 Ekb Technology Ltd Inhibitory product removal

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58501323A (ja) * 1981-08-13 1983-08-11 アメリカン　ナシヨナル　レツド　クロス 細胞生産抗ウイルス性物質の「ろ」過方法
JPS58141796A (ja) * 1982-02-18 1983-08-23 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd ペプチドの製造法
JPS59175877A (ja) * 1982-12-15 1984-10-04 バイオ−レスポンス・インコ−ポレ−テツド 培養方法および培養システム

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS49126882A (ja) * 1973-04-19 1974-12-04
US4282255A (en) * 1979-06-28 1981-08-04 State Of Oregon, By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of Oregon State University Method and starter compositions for the growth of acid producing bacteria and bacterial compositions produced thereby
BG49718A3 (bg) * 1983-07-15 1992-01-15 Bio- Technology General Corp Метод за получаване на полипептид със супероксиддисмутазна активност
EP0165613B1 (en) * 1984-06-22 1992-01-15 Hitachi, Ltd. Process for controlling culture of recombinants
JPH078231B2 (ja) * 1985-03-25 1995-02-01 株式会社日立製作所 培養制御方法及び培養制御装置

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58501323A (ja) * 1981-08-13 1983-08-11 アメリカン　ナシヨナル　レツド　クロス 細胞生産抗ウイルス性物質の「ろ」過方法
JPS58141796A (ja) * 1982-02-18 1983-08-23 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd ペプチドの製造法
JPS59175877A (ja) * 1982-12-15 1984-10-04 バイオ−レスポンス・インコ−ポレ−テツド 培養方法および培養システム

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0227993A (ja) * 1988-07-15 1990-01-30 Nippon Shinyaku Co Ltd ｈＥＧＦの製法

Also Published As

Publication number Publication date
EP0219791B1 (en) 1993-04-21
US5445948A (en) 1995-08-29
JPH07110232B2 (ja) 1995-11-29
EP0219791A2 (en) 1987-04-29
KR890004020B1 (ko) 1989-10-16
DE3688311T2 (de) 1993-10-28
EP0219791A3 (en) 1988-09-07
DE3688311D1 (de) 1993-05-27
KR870004130A (ko) 1987-05-07

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