JPS6289625A - 動物における胃腸病の治療方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

発明の背景 発明の分野 本発明はブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ或いはウマなどの動
物における胃腸病の治療方法に関する。 背景技術の簡単な説明 胃腸病は家畜における主たる経済的損失の原因である。 その様な病気の影響は動物の自らの免疫系がそれらの環
境内に存在し得る病原体からそれらを適切に保護する能
力が十分にない発達の新生児段階においてしばしば最大
である。多くの場合、胃腸病は死亡、或いは市場へのよ
り長いおよび農民に増大した経費をもたらす遅れた成長
速度に導（。たとえ動物が胃腸病から回復しても、失わ
れた生育日数およびそれに伴う動物を市場に出すまでの
遅れは農民にとって高価なものであり得る。 失われた生育の各々の日に対して動物は市場体重に到達
するために２日〜３日必要とするものと推定される。胃
腸病はウィルス或いは細菌が病因であり得るが、大腸菌
（Ｒｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ａｏｌｉ）により引起され
るものが中でも最も普通であり、衰弱させるものである
。 胃腸病を引起こす大腸菌の腸内青紫発生菌株は、プラス
ミドによりコード化されている細菌接着を介して感受性
動物の腸表皮細胞に結合する能力があるように思われる
。これらの大腸菌の病原的影響は次いで、この生物の保
有するプラスミドにより、またコード化されている胃腸
毒素（エンテロトキシン）の産生により引起される。 動物における胃腸病を予防或いは除去するために各種の
試みがなされている。例えば、米国特許第３，９５３，
６０９号明細書は経口的に動物にラクトバチルス・ラク
ティス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌユｕｓ　１ａｃｔｉｓ）
ＮＲＲＬ　Ｂ　−５６２８を餌として与えてその他の消
化系細菌の生育を制限する方法を開示している。この特
許には、この生物が腸の大腸菌の数を減少させることに
よりブタの赤子およびその他の新生児動物における劇症
下痢、下痢或いは大腸菌症の治療に特に有用であると述
べられている。またこの特許には、この菌株を分娩メス
ブタに使用してそれらの腸細菌を減少させることが出来
、それは次いで新生児ブタにおけるその様な細菌数を減
少させるであろうことも述べられている。 米国特許第３，３２０，１３０号明ｉ書はラクトバチル
ス・アシド７４　／ｌ／ス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉユニｕ
ｓ　ａｃｉｄｏ−ｐｈｌｌｕｓ）および非病原性大腸菌
の混合物を含有する医薬の製造方法を開示している。こ
の特許にはこの発明の薬剤が幼児および大人における大
腸炎、胃腸炎および全腸炎の治療に有用であると述べら
れている。 米国特許第４，３１４，９９５号明細書にはラクトパチ
＃／（ＦＲＩ　（ＬａｃｔｏｂａｃｉユニｕｓＦＲｆｆ
）菌株番号１９４６．２７７９．２７８０．２７８１或
いは２７８２を抗生物質と共に或いはなしに投与するこ
とを含む感染病の治療方法が開示されている。この方法
は胃炎および腸炎を有する患者の治療に使用することが
できると述べられているが、この治療はこれらの病気に
対する抗生物質と組合わせて行なわれることが奨められ
ている。 米国特許第３，３６９，９６９号明細書は抗生物質に耐
性を有する非病原性大腸菌をビフィズス或いはクロスト
リジウム細菌の存在と共に或いはなしに構成された薬剤
の製造方法を開示している。この特許にはこの薬剤は腸
フローラのバランスの欠如に関連した病気の治療に使用
することができると述べられている。更にこの薬剤の、
下痢を有する患者の治療における用途が開示されている
。 バロウ等（Ｂａｒｒｏｗ　ｅｔ　ａユ、）［ジャーナル
・オプ・アプライド・バクテリオロジ−（Ｊｏｕｒｎａ
ｌ　ｏｆＡｐｐｌｉｅｄ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）
　、４８　：　　１４７　（１９８０）　］により報告
された研究において、これらの著者達はラクトバチルス
−ファーメンタム（Ｌａｃｔｏ’ｂａｃｉｌｌｕｓｆｅ
ｒｍｅｎｔｕｍ）およびストレプトコッカス・サリバリ
ウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｈユ１ｖａｒｉ
ｕｓ　）の菌株のブタの胃の表皮への付着を検討した。 これらの著者は、ラクトバチルス・ファーメンタム菌株
１４およびストレプトコッカス・サリパリウス菌株３１
２の組合わせを４日間餌として与えることにより、胃お
よび十二指腸の両者において大腸菌の数の統計的に有意
な減少がもたらされたと報告している。 しかしながら、Ｌ、ファーメンタム菌株１４のみを４日
間投与した場合にはこれらの動物の冑にのみ大腸菌の数
の有意な減少があった。これらの著者は更に、この治療
は十二指腸中の大腸菌の数が組織のダラム当りなお１０
’個よりも大きかったので大腸菌により引起される下痢
に対抗するのに有効でありそうでないと述べている。こ
れらの著者は、例えばより多くの数の菌株１４を動物に
与えることにより、或いは菌株１４により産生される抑
制因子の濃縮形態の投与により、菌株１４の抗菌効果が
増大されるならば大腸菌による劇症下痢への何等かの効
果が得られるであろうと考察している。 ムラリダーラ等（Ｍｕｒａユ１ｈａｒａ　ａｔ　ａユ、
）〔ジャーナル・オプ・フード・プロチクシラン（Ｊｏ
ｕｒｎａユｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）４
０　：　　２８８．１９７７　”Ｊは、ラクトバシリ（
Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ　）を供給することによる子
ブタの腸組織および糞のフローラに与える効果を記載し
ている。これらの著者は、大腸菌の腸内毒素発生菌株に
よる攻撃前のラクトバチルス・ラクチス（Ｌａｃｔｏｂ
ａｃｉユ１ｕｓ　１ａｃｔｉｓ）菌株の濃縮物のみの投
与は動物を劇症下痢（白痢）から保護しなかったことを
見出した。白痢からの完全な保護は感染攻撃前にラクト
バチルス・ラクチスに加えてメスブタの初乳を受取った
動物にのみ見出された。 要約すると、背景技術は、従来の研究者は胃腸病を防止
或いは除去するために細菌予防法の使用を試みているが
、この様にして使用された生物は部分的にのみ効果的で
あったことを示している。 従って、動物における胃腸病の単純、非毒性、非−抗生
物質治療に対する必要性が継続している。 発明の概要 本発明において、胃腸病を有する或いは有する危険のあ
る動物（但し、ヒトを除く）に治ａ−ｉｔ−のラクトバ
チルス・ファーメンタム（ＬａｃｔｏｂａｃｉｌユＵＳ
ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）　　ＡＴＯＯ５３１１３を含有す
る組成物が与えられる。この生物は治療される動物の消
化管−随伴表皮細胞の表面上の特異的レセプターに結合
することが出来、それにより同一レセプターに結合する
腸内毒素発生生物の病原効果を抑制するものと思われる
。また、この生物はこれらの腸内毒素発生病原体の増殖
或いは付着を抑制する物質を産生ずることも可能である
。 或いはまた、Ｌ、　７アーメンタムＡＴｃｏ　５３１１
３は、動物を腸内毒素発生生物からｌ動物の免疫系を刺
戟することにより、或いは動物が胃腸病をより発生しに
くくなるように健康な消化管を維持するのを助けること
釦より４保護するとも考えられる。 即ち、本発明は、動物に有効量のラクトバチルス・ファ
ーメンタムａＴＯｃ　５３１１３　或いはその突然変異
体を投与することを特徴とする動物における胃腸病の治
療方法を提供するものである。 本発明はまたこの菌株、その突然変異体、およびそれを
含有する組成物も提供するものである。 好ましい実施態様の簡単な説明 胃腸病は冑および腸に関する或いは影響を及ぼす病気で
ある。本発明の方法において、胃腸病を有する或いは有
する危険のある動物に治療的に有効量のラクトバチルス
・７アーメンタムＡＴＯＯ５３１１３或いはその有効な
突然変異体が与えられる。 本発明の好ましい実施態様においては、治療的に有効量
のり、ファーメンタムＡＴＯＯ５３１１３が離乳動物に
投与される。 本発明の方法は、本発明の生物が非病原性であり、この
生物による如何なる悪影響の発生を伴なわない点におい
て極めて望ましいものである。また、重要であるのは本
発明による胃腸病の治療方法は抗生物質の補助的使用を
必要とせず、むしろ、感染性生物が消化管に伴う組織に
結合することを防止することにおいてむしろ感染性生物
を抑制する「自然」の機構に基づくものであるという事
実である。本発明のこの側面は、内申の抗生物質の存在
およびこれらの抗生物質が一般人の健康に有し得る影響
に対する増大する大衆の心配の面において有意義なもの
である。 本発明の生物は健康なブタ新生児の消化管から単離され
た。胃腸病を抑制するのに有効な生物体はラクトバチル
ス・ファーメンタムＡＴＣＯ５３１１３或いはその有効
な突然変異体である。その様な突然変異体は親株と等価
であると考えられる。 自然発生突然変異は微生物において普通に発生するもの
であり、また突然変異を各種公知の方法により意図的に
発生させることが出来ることが当業者にはよく知られて
いる。例えば、突然変異体は化学的、放射能および組換
え技術を用いて誘発することができる。表Ｉに示す如く
、化学的突然変異原はそれらの活性に基づき四つの主な
群に分けることができる。 表Ｉ ２−アミノプリン 脱アミン剤　　　　　　　亜硝酸、 ヒドロキシルアミン アルキル化剤　　　　　　　　エチルエタンスルホネー
ト、ニトロソグアニジン アクリジン誘導体　　　　アクリジンオレンジ、エチジ
ウムブロマイド これらの任意のものを本発明において使用することがで
きる。 放射線誘発突然変異は紫外線およびＸ線などのような変
異剤により引起こすことが出来る。突然変異が引起され
る主な機構は切断或いは組換えによる後複製修復の結果
性われるものである。 更に、突然変異は制限酵素を用いた組換え技術により発
生させることもできる。この技術の使用は大きいＤＮＡ
断片の削除或いは挿入を可能にするために＃に貴重であ
る。 突然変異が誘発される方法の如何を問わず、重要な問題
は突然変異体が治療上親株と閂様に機能することである
。換言すると、本発明は例えば成る種の糖類の発酵など
の小さな分類学上の変更のような小さい変化を生ずる突
然変異も包含するもった消化管表皮細胞レセプターに結
合する能力を有する複数の決定基を表現的に発現するこ
とを可能にする突然変異を包含する。 本発明が有効である胃腸病は根源的な病因が微生物的、
例えば細菌性或いはウィルス性である任意のものであり
得る。或いはまた本発明は、例えば重いウィルス性胃腸
炎、或いは正常な消化管細菌叢の回復を助けおよび日和
見病原体による住付きを防止するために高投与量抗生物
質治療後に正常な消化管細菌叢が除去されるか或いはバ
ランスを失っている動物においても有用である。 本発明を用いて治療することのできる胃腸病のなかには
下痢、大腸菌症および白痢がある。下痢は多くの異った
病原体を包含し、それらの中には細菌性およびウィルス
性のものがある。その様な病気は排便の異常な頻度およ
び液性により特徴付けられる。ここにおいて用いられる
大腸菌症という用語は大腸菌（ｌｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ
　ｃｏｌｉ）の感染による胃腸病を示す。白痢は激しい
胃腸病の形態である。この病気はブタ、ウシ、ヒツジ、
ヤギおよびウマなどの家畜に普通に見られる１種の下痢
である。しばしばこの病気の過程において、排便には後
期において血液を伴い、熱、脱水、抑うつが認められる
。通常、新生児動物に見られるように白痢はしばしば致
命的であり、農民にとって主たる経済的損失の源である
。新生動物はそれらの動物が病原体に対して免疫応答を
発達させるに十分な時間を有しなかったために特に白痢
発生病原体に対して冒されやすい。その代り、これらの
新生児動物は病気に対する受動的免疫保護のために母親
の初乳に頼っている。不幸にして、初乳により提供され
る保護の程度は動物に応じて相当に異り、部分的には母
親の年令および免疫学的経験に応じて異る。加えて、新
生児動物は未だ正常な消化管細菌叢を確立していないと
いう事実もま、た彼等を特に日和見病原体感染にかかり
やすくさせている。 若い動物はまた、母親から離乳し、固体食物に調整して
いる際Ｋ特に胃腸病にかかりやすい。この状況において
、動物はその母親の慰めおよび保護から引離され、見知
らぬ動物の一団に入れられる。消化管は高度に消化のよ
いミルクからより消化の悪い植物代用食（例えばトウモ
ロコシおよび大豆）に無理やりもってゆかれる。加えて
、離乳動物は新しい食物を如何にして食べるかを学ばな
ければならない。動物が離乳する場合に、農民の二つの
主たる心配事は動物に新しい食物を食べさせること、お
よび健康に保つことである。その後、動物が新しい食物
に順応した際に、農民は体重増加および食物効率の心配
をする。ストレスおよび食餌の変化が消化管のミクロフ
ローラに変化を起こすことが示されている。消化管の保
護的ミクロフローラが崩壊されると、これらの動物はよ
り白痢を発生しやすくなる。白痢は細菌、ウィルス或い
は両者が原因の場合がある。 離乳後の動物の生活の段階に際し、白痢はウィルス感染
による場合が最も多い。また、動物の主弁のこの時期に
おける胃腸病への高いかかりやすさは、動物が各種胃腸
病原体に対する自らの活性な保護免疫を発達させる前に
除去される授乳時に乳から受動的に獲得した保護的母親
の抗体の喪失により引起される可能性もある。ミクロ７
０−ラの或いは免疫学的遷移状態において消化管は日和
見病原体感染によりかかりやすいものと思われる。 しかしながら、動物が特別の胃腸病を発生する機構の如
何に拘らず、それはり、７アーメンタムＡ’ｒｃｃ　５
３１１３　を用いて改善することができる。 胃腸病からの保護はり、　７アーメンタム　ＡＴＯＯ５
３１１３或いはこの生物を含む組成物を保護が求められ
る動物に食物として与えることにより最も容易に達成す
ることができる。 組成物は液体、凍結乾燥或いはゲルの形態でよく、胃腸
病の治療のための追加の細菌株を含んでもよい。固体投
与形態において、組成物は本発明の生物を薬学的担体と
共に含んでなるものであってよい。この薬学的担体は水
性或いは非水性液体或いは固体の性質のものであってよ
い。固体投与形態において、本発明の組成物はスクロー
ス、ラクトース、デンプン或いはバーミキ島ライトのよ
うな不活性稀釈剤並びに潤滑剤を含んでよい。これらの
潤滑剤は組成物の消化管内の通過を助ける。 カプセル、錠剤および丸薬の場合には、単位投与形態は
また緩衝剤を含んでもよい。その他の経口投与の形態は
、また組成物の溶解を腸に到達するまで防止する腸溶性
被覆を用いて調製されてもよい。 本発明による組成物は１０”〜１０′２個の生育生物／
ｇ、より好ましくは１０４〜１０１０個の生育生物７ｇ
１最も好ましくは１０’〜１０”個の生育生物／ｇを含
有する。 経口投与用の液体投与形態は通常液体投与形態を含有す
る腸溶的に被覆されたカプセルよりなる。 適当な形態としては、通常用いられる不活性稀釈剤例え
ば精製水、砂糖、多糖類、ケイ酸ゲル、ゼラチン或いは
アルコールを含むエマルジ言ン、懸濁液、溶液、シロッ
プおよびエリキシルなどが挙げられる。これらの不活性
稀釈剤は本発明の治療効果には活性的には参加しない。 これらの不活性稀釈剤の他にその様な組成物はまた補助
剤、例えば湿潤剤、乳化およびＷ！濁剤、および甘味剤
、風味剤および香料などを含むことができる。 ある動物に対する投与範囲は体重および抗生物質の同時
投与に応じて異る。投与は単−或いは複数投与のいづれ
でも行うことが可能であり、１０３〜１０１２個の生育
生物／投与、より好ましくは１０４〜１０１０個の生育
生物／投与、最も好ましくは１０５〜１０８個の生育生
物／投与を含有する。 胃腸病からの保護はまた動物をり、ファーメンタムＡＴ
ｃｏ　５３１１３　の全細胞および／または細胞抽出物
で構成されるワクチンで免疫化することによっても達成
することができる。これらの細胞抽出物は当業者に周知
の各種技術により調製することができる。これらの抽出
物の重要な面は、それらが動物の免疫系を保護的に刺戟
して如何なる引続く胃腸病の病原体に対する＠露の効果
を改善することである。このワクチンは免疫学的な有効
量にて腸内的に或いは腸管外的のいづれＫよっても投与
することができる。本発明において使用される「免疫学
的な有効量」という用語は胃腸病の効果を改善するため
に動物の免疫系を感作するために必要なワクチンの量を
示すものである。 腸内投与によるワクチン投与は生育生物の経口投与に対
する上記説明の如く達成することができる。 動物の腸管外ワクチン投与は初物を皮下、筋肉内或いは
静脈内注射或いは鼻咽頭、粘膜或いは経皮吸収により免
疫化することにより行うことができる。腸管外投与用製
剤としては無菌或いは水性或いは非水性溶液、懸濁液お
よびエマルジョンを包含する。非水性溶媒の具体例とし
てはプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、
オリーブ油などの植物油およびオレイン酸エチルなどの
注射可能な有機エステル類が挙げられる。閉鎖包帯用担
体を用いて皮膚浸透性を増大させ、ワクチン吸収を高め
ることができる。これらの不活性稀釈剤の他に、その様
な組成物はまた補助剤（アジュバント）、湿潤剤、乳化
剤および懸濁剤も含むことができる。 ワクチン製剤はまたアジュバントを含むことが可能であ
る。アジュバントは特異的免疫応答を非特異的に強める
ために用いることのできる物質である。通常、アジュバ
ントおよび抗原が免疫系に投与前に混合されるか或いは
別々にしかし免疫化される動物の同一部位に投与される
。アジュバントはそれらの組成に基づき幾つかの群に大
まかに分けられる。これらの群は油性アジュバント（例
えば、フロイント完全アジュバントおよび不完全アジュ
バント）、鉱物塩（例えば、ＡＩＫ（ＳＯ２）２、ＡＩ
Ｎａ（ＳＯ２）　２、ＡＩＮａ４（ＳＯ２）、シリカ、
カオリン、および炭素）、ポリヌクレオチド類（例えば
、ボＩＪＩＯおよびポリＡＵ酸）、およびある種の天然
物質（例えば、ミコバクテリウム・ツバクロシス（Ｍｙ
ｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）
からのワックスＤ。 並ヒにコリネバクテリウム・パルバム　（Ｃｏｒｙｎｅ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｐａｒｖｕｍ）、ボルデテラ拳バ
ーチｚ　’／　ス（ＢＯｒ（ｌｆｌｌｔＥＩユｌａ　ｐ
ｅｒｔｕｓｓｉｓ　）およびプルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌ
ａ　）属の構成員に見出される物質）などが含まれる。 それらの物質の中でアジュバントとして％に有用である
のはサポニン類、例えば、Ｑ、ｕｉｌ　Ａ　（８ｕｌ）
ｅｒｆ０８　Ａ　／　８　、デンマーク）である。 複数の免疫化が利用される場合には本発明のワクチンに
よる免疫化の時期については多くの異った技術が存在す
る。本発明のワクチンを発現される動物の免疫応答のレ
ベルおよび発現の多様性を増大するために一回より多く
用いることが可能である。典型的には、複数の免疫化が
与えられる場合にはそれらは１〜２ケ月間間隔が空けら
れる。 ある動物に対する投与範囲は体重および抗生物質の同時
投与に応じて異る。投与は単−或いは複数投与とじ

【行
うことが出来、１０３〜１０１２個の生物／投与、より
好ましくは１０４〜１０１０個の生物／投与、最も好ま
しくは１０５〜１０８個の生物／投与を含む。 或いはまた、動物は数値が何等かのその他の測定により
表わされる場合、例えば全蛋白質濃度或いは細胞断片濃
度で表わされる場合には、これらの濃度の生物の等測量
を投与することができる。 本発明の組成物はラクトバチルス・ファーメンタムＡＴ
ＣＯ５３１１３に加えて、この生物の突然変異体或いは
例えばビフィズス或いはクロストリジウム細菌などのそ
の他の通常の消化管生物を含むことができる。 本発明はまた、本発明の成分を含んでなる冑腸病の治療
或いは予防に用いられる医薬或いは薬学的組成物の製造
方法にも関する。 当業者はその他の適当な稀釈剤および投与形態を実際に
知っているのであろうし、或いは日常的な実１験を用い
てそれらを確認することができるであろう。更に、各種
組成物の投与は当業者には通常の標準的技術を用いて行
うことができる。 以上の開示内容は本発明を一般的に説明するものである
。より完全な理解は次の具体例を参照することにより得
ることが出来、この具体例は例示を目的としてのみ与え
られるものであり、％に断りのない限り、本発明を限定
する趣旨のものではない。 例１ ラクトバチルス・ファーメンタム（Ｌａｃｔｏ’ｂａｃ
ｉｌｌｕｓｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）　（ＡＴＯｏ　５３１
１３）は健康なブタ新生児の消化管から単離されたダラ
ム陽性桿状菌である。 この生物の発酵プロフィールを表Ｈに示す。このプロフ
ィールは市販の試験系（Ｃ！ＨＬキット、ＤＭ８ラボラ
トリーズ、ダーツ・ミル、フレミングトン、ニューシャ
ーシー州）を用いて求められた。 表■ グリセロール　　　　−　　サリシン　　　　　　−エ
リスリトール　　　−　　　セロビオース　　　　−Ｄ
−アラビノース　　−　　マルトース　　　　　＋Ｌ−
アシビノース　　−　　　ラクトース　　　　　＋リボ
ース　　　　　　＋　　　メリビオース　　　　＋Ｄ−
キシロース　　　−　　サッカロース　　　　＋Ｌ−キ
シロース　　　−　　　トレハロース　　　　−アドニ
トール　　　　−　　イヌリン　　　　　−ベーターメ
チルーキ汐シト−メレチトース　　　　　−ガラクトー
ス　　　　＋　　　Ｄ−ラフィノース　　＋Ｄ−グルコ
ース　　　＋　　デンプン　　　　　　−Ｄ−フルクト
ース　　−　　　グリコーゲン　　　　　−Ｄ−マンノ
ース　　　−　　キシリトール　　　　−菌株ＡＴＯＯ
５３１１３はＤＬ−スレオニンを補給されたＭＲ８７’
　ｏ　、ｅ、　Ｃチャｙ’／−等（０ｈａｓｓｙ　ｅｔ
　ｔｈｌ、　）、ジャーナル・オプ・バクテリオロジ−
（Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）、
１２７　：　１５７６−１５７８．１９７６〕中におい
て増殖され、プラスミドフロフィールはアンダーメン等
（Ａｎｄｅｒｓｏｎ　ａｔ　ａｌ　）　、アプライド・
アンド・エンパイロンメンタル・マイクロバイオロジー
（Ａｐｐｌｉｅｄ　ａｎｃＬ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ
ａ１Ｍｉｃｒｏｂｉｏユ０ｇ７）　、４６　：　　５４
９−５５２　（１９８３）　　により説明されているよ
うにして求められた。プラスミドの大きさはＴＲｌ８−
ホウ酸緩衝液を用いて　アガロース（０，６ｅｌｙ　）
中の水平電気泳動を用いて樹立された〔マイヤー等（Ｍ
ｅｙｅｒｓ　ａｔ　ａユ、）、ジャーナル・オプ・バク
テリオロジ−（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂａｃ−ｔｅｒ
ｔｏｘｏｇｙ）　　１２７　：　１５２９−１５３７．
１９７６　〕。 ＡＴＣＯ５３１１３は表１１１１Ｃ示されるような各種
火きさの６個のプラスミドを有することが判明した。 表■ ラクトバチルス・ファーメンタム（Ｌａｃｔｂａ−ｃｉ
ｌｌｕｓ　ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）、ＡＴＣＯ５３１１３
中に存２７．７ ８．７ ４．３ ３．５ ２．６ ２．１ １メガダルトン 例２ 本発明の方法および組成物の効果をブタ新生児において
検討した。５匹のブタ新生児を生まれた直後に母親から
取出した。これらの動物は母親の初乳を介して受動免疫
が得られないように母親に授乳させなかった。これらの
動物を群に分は別々に収容した。群■の動物は無菌スキ
ムミルク中の１０　〜１０　　個のラクトバチルス・７
アーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｍ
ｅｎｔｕｍ）　ＡＴＯＯ５３１１３を経口的に受取った
。この治療投与量の受領稜８時間後にこれらの動物を無
菌スキムミルク中の１０８個の大腸菌（ｕ、００１１）
　Ｋ　−９９（ＮＡＤＯ１４７２）　を用いて攻撃した
。この生物はブタ中に白痢を引起すことが知られている
腸内病原菌である。群■の動物はラクトバチルス・７ア
ーメンタムＡ１’ＯＯ５３１１３により予備処理されず
経口的に１０８個の大冑菌区−９９（ＮＡＤＯ１４７２
）で感作された。群■ｌの動物は対照例としての役割を
果たし、如何なる生物も経口的に接種されなかった。全
ての動物は白痢による死亡時間について追跡された。得
られた結果を表片に示す。 表片 １　２　１０〜ｉｏ　　　　　１０”　　　　　死亡な
し２　２　−　　１０’　　　３２ ３　１　　　−　　　　　−　　　　　死亡なし本発明
の生物で予備処理された実験動物は公知の大腸菌の腸内
病原菌株を用いて攻盤された場合に白粥では死ななかっ
た。これは大腸菌に−９９（ＮＡＤＯ１４７２）に投与
後３２時間以内に迅速に白痢の特徴的徴候を示して死亡
した群■における動物とは鮮かに対照的である。対照動
物の生存は群■における動物の死亡が感染攻１１による
ものであり実験中に存在したその他の環境因子によるも
のでないことを示している。 例３ ３週令のブタ（混合種および性）を授乳期にあり固体食
物を与える前に母親から引離した。これらの動物にラン
ダムに耳に標識を付け、対照群或いは実験群に割当て２
ｍｌのプラセポゲル（対照群）或いはゲル中り、ファー
メンタムＡＴＯＯ５３１１３（６Ｘ　１０’の生物）を
含有するゲルを経口的に接種した。全ての動物を個々に
床より高い針金替中に収容した。食物および水は自由に
与えた。体重および下痢の観察は２１日間毎日記録し、
食物消費は毎週測定した。実験の各日に白痢を有した動
物の一啼口 ：ｌ　ｃＱ口 ＝１啼口 ＣＩＪ　　、、　　ロ ＝！！　　ロ （＝１−〜 ぺ　　　＝１啼口 八 へ１　　ロ　　ロ ｌ＋１１０口 一般的に、Ｌ、ファーメンタムＡＴＣＣ５３１１３を受
取った動物は遥かにより低い白痢の発生および重さを示
した。白痢を発生した対照群の９匹の動物のうち４匹は
７日以上継続する徴候を有した。 この実験の結果を表■にまとめて示す。 表■ 白痢に及ぼすり、７フーメンタム ＡＴＣＣ５３１１３の影響 対照１５７．２５（，７３）”　１４．７７（１，８２
）　　３７　　９　　５実験１５７．０１（，６９）　
１５．２４（１，２１）　　９　　４　　２ａ　　ＳＴ
Ｄ平均誤差 ｂ　　　日　　数 ２１日日月なお白痢を有した４匹の動物を殺し、病原体
としてのロータウィルスの診断が酵素結合免疫吸着アン
セイ（ＥＬＩ８Ａ）により確認された。 ＡＴＣＣ５３１１’３　細胞を含むゲルで処理された実
験群の動物はＡＴＣＣ５３１１３を受取らなかった対照
群の動物よりもロータウィルスによる風土病感染症に対
してより耐性であった（４動物対９動物）。 更に、ロータウィルス感染症を発生した実験群の動物は
対照群においてロータウィルス感染症を発生した動物よ
りも白痢の期間がはるかに短かった（２日対５日）。最
後に白痢の延ベブタ日数は実験群よりも対照群がはるか
に大きかった（後者対前者：３７日対９日）。 例４　゛ 動物が実験の１４日口の夕方に第二の投与量のプラセボ
ゲル（対照群）或いはり、ファーメンタムＡＴＣＣ５３
１１３含有ゲル（実験群）を受取った他は上記例３と同
様にして実験を行った。実験の各日に白痢を有した動物
の数を表■に示す。 圏１０口 ８１　　ロ　　ロ ａ２１　　　ロ　　ロ 司ロロ （町　。　。 気 八　　　町ロロ 一　　〇　　〇 −１ロ　　ロ 対照動物におげろ白痢の発生は二つの期間に起っている
。対照群における五つの白痢の症例は実験の３〜７日目
日月期に起った。白痢の七つの症例の第二の発生は１３
〜１６日目に起った。実験群の動物の遭遇した白痢の症
例の殆んどは実験の１４日口の見られた。］４４日の夕
方に両群の動物は第二の投与量のブラセボゲル（対照群
）或いはり、ファーメンタムを有するゲル（実験群）を
受取っｂこの時点において各群における４匹の動物は活
性な白痢感染症を有した。Ｌ、ファーメンタムを含有す
るゲルを受取った動物は１５日１に白痢の徴候を示さな
かった。これに対して対照群においては】４８目に白痢
を有した４匹の動物のうち３匹はなお１５日１にも感染
しており、加えて更に３匹の対照群の動物が白痢感染症
を発生した。 この実験の総合結果を表■にまとめて示す。 表■ し、ファーメンタムＡＴＣＣ５３１１３による複数の治
療の白痢の発生に及ぼす影響 対照１９”　６．５９（０，６６）ｂ１４．４３（１，
０３）　　２７　１４ｄ２実験２０　７．００（０，５
１）　　１７．０７（０，８８）ｃ５　　５　　１ａ　
１匹の動物が実験中に死亡 ｂ　　ＳＴＤ平均誤差 ｃ　　Ｏ，０６レベルで有意差有 ｄ　対照群中２匹の動物は白痢を２回発生した８　　　
日　　　数 実験群の動物は３〜７日目において対照群に見られた早
期の白痢感染症を発生しなかった。実験群に起った白痢
の症例は実験の後期（１４白目）であり、対照群におけ
る第二の白痢の発生と一致した。一般的に、実験群の動
物は対照群の動物よりもはるかに良好に行動した。実験
動物はより少ない白痢の症例を示しく５対１４）、また
実験動物が実際に白痢を発生した場合にも病気の期間は
白痢を発生した対照動物の僅かに半分であった。加えて
、実験群は対照群よりもはるかに少ない延ベブタ日数（
５日対２７日）を有した。実験動物が対照動物よりも有
意的忙より多量の固体食物を消費したという事実は実験
動物における固体食物に対するより迅速な調整を示して
いる（１７ボンド対１４ポンド）（約７．７　ｋｇ対約
６．３　ｋｇ　）。 この研究はり、ファーメンタムＡＴＣＣ５３１１３の投
与が動物の白痢を発生する見込みを遅延或いは防止する
ことができるのみならず、また、１４白目の第二の投与
により絃に示された如く、活性な白痢感染症を有する動
物における白痢の緩解を促進することを示している。 以上、本発明を十分に説明したが、絃に示される本発明
の趣旨或いは範囲から離れることなく多くの変更および
修正がなされ得ることは当業者に明らかであろう。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、動物（ヒトを除く）における胃腸病を治療する方法
   において該動物に有効量のラクトバチルス・ファーメン
   タム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｍｅｎｔｕ
   ｍ）ＡＴＣＣ５３１１３或いはその突然変異体を投与す
   ることを特徴とする方法。 ２、該胃腸病が白痢、下痢、或いは大腸菌症である、特
   許請求の範囲第１項記載の方法。 ３、該動物がブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ或いはウマであ
   る、特許請求の範囲第１項記載の方法。 ４、該動物が新生児動物である、特許請求の範囲第３項
   記載の方法。 ５、該動物が離乳動物である、特許請求の範囲第３項記
   載の方法。 ６、該治療方法が経口食餌によってなされる、特許請求
   の範囲第１項記載の方法。 ７、該経口食餌は細菌組成物を用いる、特許請求の範囲
   第６項記載の方法。 ８、該細菌組成物は液状、凍結乾燥状或いは丸薬状であ
   る、特許請求の範囲第７項記載の方法。 ９、該治療方法が腸管外投与である、特許請求の範囲第
   １項記載の方法。 １０、該腸管外投与が皮下、筋肉内或いは静脈内注射或
   いは鼻咽頭、粘膜或いは経皮吸収により行なわれる、特
   許請求の範囲第９項記載の方法。 １１、該腸管外投与は細菌組成物を用いる、特許請求の
   範囲第９項記載の方法。 １２、該組成物は追加の細菌菌株を含む、特許請求の範
   囲第７項或いは第１１項記載の方法。 １３、生物学的に純粋な培養菌ラクトバチルス・フアー
   メンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｍｅｎ
   ｔｕｍ）ＡＴＣＣ５３１１３或いはその胃腸病を予防す
   る突然変異体。 １４、ラクトバチルス・ファーメンタムＡＴＣＣ５３１
   １３或いはその突然変異体を薬学的担体と共に含んでな
   る組成物。 １５、該組成物が腸内投与される、特許請求の範囲第１
   ４項記載の組成物。 １６、該薬学的担体が液体或いは固体である、特許請求
   の範囲第１４項記載の組成物。 １７、該液体担体が水性或いは非水性である、特許請求
   の範囲第１６項記載の組成物。 １８、該固体担体が不活性稀釈剤である、特許請求の範
   囲第１６項記載の組成物。 １９、該不活性稀釈剤がスクロース、ラクトース、或い
   はデンプンである、特許請求の範囲第１８項記載の組成
   物。 ２０、該不活性稀釈剤が潤滑剤を含む、特許請求の範囲
   第１８項記載の組成物。 ２１、該組成物が腸溶性被覆内に含有されている、特許
   請求の範囲第１７項或いは第１８項のいづれかに記載の
   組成物。 ２２、該組成物が腸管外投与される、特許請求の範囲第
   １４項記載の組成物。 ２３、該腸管外投与が皮下、筋肉内或いは静脈内注射或
   いは鼻咽頭、粘膜或いは経皮吸収により行われる、特許
   請求の範囲第２２項記載の組成物。 ２４、該組成物がアジュバントを含有する、特許請求の
   範囲第２２項記載の組成物。 ２５、該アジュバントがサポニン誘導体である、特許請
   求の範囲第２４項記載の組成物。 ２６、該サポニン誘導体がＱｕｉｌＡである、特許請求
   の範囲第２５項記載の組成物。