JPS63129984A - α−アミノ−ε−カプロラクタム・ラセマ−ゼ - Google Patents
α−アミノ−ε−カプロラクタム・ラセマ−ゼInfo
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- JPS63129984A JPS63129984A JP27669686A JP27669686A JPS63129984A JP S63129984 A JPS63129984 A JP S63129984A JP 27669686 A JP27669686 A JP 27669686A JP 27669686 A JP27669686 A JP 27669686A JP S63129984 A JPS63129984 A JP S63129984A
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- racemase
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- amino
- dna
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/90—Isomerases (5.)
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- Genetics & Genomics (AREA)
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- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明はα−アミノ−ε−カプロラクタム（以下ＡＣＬ
と略す）・ラセマーゼとそれをコードするＤＮＡ配列に
関する。
と略す）・ラセマーゼとそれをコードするＤＮＡ配列に
関する。
［従来の技術］
ＡＣＬラセマーゼはＬ−ＡＣＬ加水分解酵素との共同作
用により、ＤあるいはＤＬ−ＡＣＬを虎刈としたＬ−リ
ジン生産に用いられている有用物質である（丁、Ｆｕｋ
ｕｍｕｒａ、Ａｇｒ、Ｂｉｏｌ、ｃｈｃｍ、、４１ 、
ｐ１３２７〜１３３０ （１９７７））。
用により、ＤあるいはＤＬ−ＡＣＬを虎刈としたＬ−リ
ジン生産に用いられている有用物質である（丁、Ｆｕｋ
ｕｍｕｒａ、Ａｇｒ、Ｂｉｏｌ、ｃｈｃｍ、、４１ 、
ｐ１３２７〜１３３０ （１９７７））。
従来、ＡＣＬラセマーゼ生産能をイ１する微生物としで
、アクロモバクタ−・オーバエ（Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃ
ｔｅｒ ｏｂａｅ）等数種の菌株が報告されている（丁
。
、アクロモバクタ−・オーバエ（Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃ
ｔｅｒ ｏｂａｅ）等数種の菌株が報告されている（丁
。
Ｆｕｋｕｍｕｒａ、Ａｇｒ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、
４１ 、 り １３２１〜１３２５ （１９７７））。
４１ 、 り １３２１〜１３２５ （１９７７））。
これらの公知の微生物から、ＡＣＬラセマーゼをコード
する遺伝子を取出し、遺伝子操作技術を適用すれば該酵
素の生産性を飛躍的に向上させることが期待される。
する遺伝子を取出し、遺伝子操作技術を適用すれば該酵
素の生産性を飛躍的に向上させることが期待される。
［発明が解決しようとする問題点］
本発明者らは、かかる状況に鑑みΩ１意工夫を成し、Ａ
ＣＬラセマーゼ蛋白質の全アミノ酸配列と、それをコー
ドする遺伝子ＤＮＡの塩基配列とを決定することに成功
し、もって本発明を完成するに至った。
ＣＬラセマーゼ蛋白質の全アミノ酸配列と、それをコー
ドする遺伝子ＤＮＡの塩基配列とを決定することに成功
し、もって本発明を完成するに至った。
［問題点を解決するための手段］
すなわち、本発明は全アミノ酸配列が判明しているＡＣ
Ｌラセマーゼと、それをコードする遺伝子ＤＮＡを提供
するものでおる。
Ｌラセマーゼと、それをコードする遺伝子ＤＮＡを提供
するものでおる。
本発明の酵素のアミノ酸配列は第１図に示す通りであり
、それをコードする遺伝子ＤＮＡの塩基配列の一例は第
２図に示す通りである。
、それをコードする遺伝子ＤＮＡの塩基配列の一例は第
２図に示す通りである。
以下本発明に関し、逐次詳細に説明する。
ＡＣＬラセマーゼをコードする遺伝子ＤＮＡはアクロモ
バクタ−・オーバエ（微工研菌奇第７７６号）の染色体
ＤＮＡから、あるいは特開昭６１−２０２６９３号公報
に記載の複合プラスミドｐＮＮ３６から１７ることがで
きるが、ｐＮＮ３６を使用した方が便利である。
バクタ−・オーバエ（微工研菌奇第７７６号）の染色体
ＤＮＡから、あるいは特開昭６１−２０２６９３号公報
に記載の複合プラスミドｐＮＮ３６から１７ることがで
きるが、ｐＮＮ３６を使用した方が便利である。
へ〇Ｌラセマーゼ生産菌としては細菌アクロ［バクター
・オーバエ（微工研菌奇第７７６号〉、あるいは該酵素
の構造遺伝子を有する複合プラスミドＤＮＮ４０で形質
転換された絹換え体犬腸菌（特願昭６１−８０４６９＞
を使用できるが、組換え体大腸菌を使用した方が便利で
ある。ＡＣＬラセマーゼは、この組換え体大腸菌から容
易に抽出精製することができる。
・オーバエ（微工研菌奇第７７６号〉、あるいは該酵素
の構造遺伝子を有する複合プラスミドＤＮＮ４０で形質
転換された絹換え体犬腸菌（特願昭６１−８０４６９＞
を使用できるが、組換え体大腸菌を使用した方が便利で
ある。ＡＣＬラセマーゼは、この組換え体大腸菌から容
易に抽出精製することができる。
本発明で用いるＡＣＬラセマーゼの精製法は特に限定し
ないが、前記の絹換え体大腸菌（特願昭６１−８０４６
９＞のフレンチプレス破砕液の遠心上澄を６５°Ｃ１１
０分で熱変性処理した後遠心し、１りられだ遠心上澄を
、陰イオン交換樹脂ｕＤＥＡＦトヨパール″（東洋ソー
ダ社製）を用いたカラムにかけクロマトグラフィーによ
り得た活性画分を、高速液体クロマトグラフィー（以下
ＨＰＬＣと略）にかけて精製する方法が簡便である。
ないが、前記の絹換え体大腸菌（特願昭６１−８０４６
９＞のフレンチプレス破砕液の遠心上澄を６５°Ｃ１１
０分で熱変性処理した後遠心し、１りられだ遠心上澄を
、陰イオン交換樹脂ｕＤＥＡＦトヨパール″（東洋ソー
ダ社製）を用いたカラムにかけクロマトグラフィーによ
り得た活性画分を、高速液体クロマトグラフィー（以下
ＨＰＬＣと略）にかけて精製する方法が簡便である。
精製酵素をより多ωに調製する場合は、“”ＤＥＡＥト
ヨパール″を用いたクロマトグラフィー後の活性画分を
“セファクリルＳ−２００”（ファルマシア社製）を用
いたゲルシ濾過カラムクロマトグラフィーで、あるいは
硫安を用いた結晶化で精製できる。
ヨパール″を用いたクロマトグラフィー後の活性画分を
“セファクリルＳ−２００”（ファルマシア社製）を用
いたゲルシ濾過カラムクロマトグラフィーで、あるいは
硫安を用いた結晶化で精製できる。
蛋白質のアミノ酸配列は例えば、網沢進 生化学、５７
．４７２−４８０（１９８５）に記載の常法で決めるこ
とができる。−例を挙げれば精製酵素をリジルエンドペ
プチダーゼで消化し、消化物をＨＰ Ｌ Ｃにかけて分
画し、分画された蛋白質断片をエドマン分解法による市
販のプロティン・シークエンサーにかけて蛋白質断片の
アミノ酸配列を決めることができる。こうして得られた
アミノ酸配列同士は遺伝子ＤＮＡの塩基配列と照合して
連結され、更に両前列が相互に確認できる。アミノ酸配
列が未知の部分もＤＮＡ塩基配列から、アミノ酸配列を
推定できる。
．４７２−４８０（１９８５）に記載の常法で決めるこ
とができる。−例を挙げれば精製酵素をリジルエンドペ
プチダーゼで消化し、消化物をＨＰ Ｌ Ｃにかけて分
画し、分画された蛋白質断片をエドマン分解法による市
販のプロティン・シークエンサーにかけて蛋白質断片の
アミノ酸配列を決めることができる。こうして得られた
アミノ酸配列同士は遺伝子ＤＮＡの塩基配列と照合して
連結され、更に両前列が相互に確認できる。アミノ酸配
列が未知の部分もＤＮＡ塩基配列から、アミノ酸配列を
推定できる。
ＤＮＡのＷＷ配列の解析は例えば、５ａｎ（Ｊ（！ｒ’
、 Ｆ、 。
、 Ｆ、 。
ｅｔ ａｔ、、 Ｐｒｏｃ、 Ｈａｔ、＾ｃａｄ、 Ｓ
ｃｉ、 Ｕ、Ｓ、、 ７４．５４６３−６７（１９７７
）に記載の通常の方法で行えるが、市販のＭ１３クロー
ニング・キットとＭ１３シークエンス・キット、更には
市販の塩基配列入力装置・自動編集装置を使うと能率的
である。
ｃｉ、 Ｕ、Ｓ、、 ７４．５４６３−６７（１９７７
）に記載の通常の方法で行えるが、市販のＭ１３クロー
ニング・キットとＭ１３シークエンス・キット、更には
市販の塩基配列入力装置・自動編集装置を使うと能率的
である。
活性は特開昭６０−２４４２８９号公報に示された方法
に従い旋光針を用いて測定できる。
に従い旋光針を用いて測定できる。
［実 施 例］
以下実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明する。
実施例１
（１）ＡＣＬラセマーゼの精製：
ＡＣＬラセマーピの構造遺伝子を有するＤＮＡ断片を、
ｔａｃプロモーターを有する市販のプラスミドｐＫＫ２
２３−３を改良したプラスミドに連結して作成した複合
プラスミドＤＮＮ４０を用いて形質転換したＡＣＬラセ
マーゼ高生産性大腸菌Ｅ、ｃｏ ｌ ｉＪＭ１０５ （
ｐＮＮ４０）（特願昭６１−８０４６９＞を、２ＹＴ培
地（１，６％トリプトン、１％イーストエキス、０．５
塩化ナトリウム、ｐＨ７，５＞中で３７°Ｃで坂ロフラ
スコで一晩培養した。これを２ＹＴ培地で３００倍に希
釈して、好気培養し、菌濃度５×１０８／Ｉｎｌの時点
でＩ Ｐ Ｔ Ｇ （１ｓｏｐｒｏｐｙｌβ−Ｄ −ｔ
ｈｉｏ−ＯａｔａｃｔＯ３ｉｄｅ）を１ｍＭとなるよう
に培地に加え、更に１４時間培養した後、遠心により集
菌した。集菌体８０ｇを、１０μｇ／ｍｆ！のＤＮａｓ
ｅを○む０．２５Ｍシヨ糖−２Ｘ１０−４Ｍピリドキサ
ールリン酸−１，５％メルカプトエタノール−Ｍリン酸
カリウム緩衝液（ｐＨ７．２＞の２ｇに懸濁した後、連
続フレンチプレス（）ｌａｎｔｏｎ Ｇａｕｌｉｎ，Ａ
ＰＶ Ｇａｕｌｉｎ社製）にて菌体を破砕した。この破
砕液の遠心上澄を、菌を懸濁したのと同じ溶液を用いて
蛋白質′ａ度２ｍｇ／ｄ！にまで希釈した後、６５°Ｃ
１０分加熱した。蛋白質濃度の定量は市販のプロティン
・アッセイキット（バイオラド社製）を用いた。
ｔａｃプロモーターを有する市販のプラスミドｐＫＫ２
２３−３を改良したプラスミドに連結して作成した複合
プラスミドＤＮＮ４０を用いて形質転換したＡＣＬラセ
マーゼ高生産性大腸菌Ｅ、ｃｏ ｌ ｉＪＭ１０５ （
ｐＮＮ４０）（特願昭６１−８０４６９＞を、２ＹＴ培
地（１，６％トリプトン、１％イーストエキス、０．５
塩化ナトリウム、ｐＨ７，５＞中で３７°Ｃで坂ロフラ
スコで一晩培養した。これを２ＹＴ培地で３００倍に希
釈して、好気培養し、菌濃度５×１０８／Ｉｎｌの時点
でＩ Ｐ Ｔ Ｇ （１ｓｏｐｒｏｐｙｌβ−Ｄ −ｔ
ｈｉｏ−ＯａｔａｃｔＯ３ｉｄｅ）を１ｍＭとなるよう
に培地に加え、更に１４時間培養した後、遠心により集
菌した。集菌体８０ｇを、１０μｇ／ｍｆ！のＤＮａｓ
ｅを○む０．２５Ｍシヨ糖−２Ｘ１０−４Ｍピリドキサ
ールリン酸−１，５％メルカプトエタノール−Ｍリン酸
カリウム緩衝液（ｐＨ７．２＞の２ｇに懸濁した後、連
続フレンチプレス（）ｌａｎｔｏｎ Ｇａｕｌｉｎ，Ａ
ＰＶ Ｇａｕｌｉｎ社製）にて菌体を破砕した。この破
砕液の遠心上澄を、菌を懸濁したのと同じ溶液を用いて
蛋白質′ａ度２ｍｇ／ｄ！にまで希釈した後、６５°Ｃ
１０分加熱した。蛋白質濃度の定量は市販のプロティン
・アッセイキット（バイオラド社製）を用いた。
熱処理した液の９．ＯＯＯＸｇ、１５分の遠心上？ｆｆ
ヲ１０倍ｆｆ１（７）０．２５Ｍシヨ１ｍ −２Ｘ １
０−”Ｍピリドキサールリン酸−０，０１％メルカプト
エタノール−１０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７，
２＞に対し４°Ｃ，２日間透析した後、この透析外液と
同一成分の溶液で平衡化した１１の゛ＤＥＡＥトヨパー
ル”６５０Ｍにチャージした。
ヲ１０倍ｆｆ１（７）０．２５Ｍシヨ１ｍ −２Ｘ １
０−”Ｍピリドキサールリン酸−０，０１％メルカプト
エタノール−１０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７，
２＞に対し４°Ｃ，２日間透析した後、この透析外液と
同一成分の溶液で平衡化した１１の゛ＤＥＡＥトヨパー
ル”６５０Ｍにチャージした。
カラムを１ｇの０．０５ＭＫＣｌで洗浄した後０゜１５
ＭＫＣＩで溶出し、フラクションコレクターを用いて分
画した。ＡＣＬラセマーゼ活性を有する両分につき、堀
尾武−らＢ［蛋白質・酵素の基礎実験法Ｊ Ｉ）２７５
−２７９（１９８１）に記載の方法による５ＤＳ−ポリ
アクリルアミドゲル電気泳動で純度を調べた。分子量４
万５千相当の大きざのＡＣＬラセマーゼのバンドの他に
、５万５千相当の大きさのバンドが少♀しかない両分を
、逆相１−Ｉ Ｐ Ｌ Ｃにかけて該酵素を精製した。
ＭＫＣＩで溶出し、フラクションコレクターを用いて分
画した。ＡＣＬラセマーゼ活性を有する両分につき、堀
尾武−らＢ［蛋白質・酵素の基礎実験法Ｊ Ｉ）２７５
−２７９（１９８１）に記載の方法による５ＤＳ−ポリ
アクリルアミドゲル電気泳動で純度を調べた。分子量４
万５千相当の大きざのＡＣＬラセマーゼのバンドの他に
、５万５千相当の大きさのバンドが少♀しかない両分を
、逆相１−Ｉ Ｐ Ｌ Ｃにかけて該酵素を精製した。
すなわち、蛋白予約８０／！！７を０．１％ＴＦＡ（ト
リフルオロ酢酸）に溶解し、逆相カラム”Ｉｎｅｒｔｓ
ｉ１３００−ＣＢカラム” （４，６Ｘ１００ｍ、粒径
５μｍ、ガスクロ工業社製）にかけ４５〜６０％アセト
ニトリル濃度勾配で溶出し、ＭＷ４万５壬の該酵素蛋白
を分取した。
リフルオロ酢酸）に溶解し、逆相カラム”Ｉｎｅｒｔｓ
ｉ１３００−ＣＢカラム” （４，６Ｘ１００ｍ、粒径
５μｍ、ガスクロ工業社製）にかけ４５〜６０％アセト
ニトリル濃度勾配で溶出し、ＭＷ４万５壬の該酵素蛋白
を分取した。
（２）酵素蛋白質の断片化：
前項で精製・分取した該酵素蛋白を４μ３／μｇとなる
よう３ｍＭジチオスレイトール−６Ｍ尿素−０，５ＭＴ
ｒｉｓ−ＨＣＩ （ｐＨ８，４＞に溶かし、４５℃、２
時間窒素シール下でイン４−ユベートした後、１／４聞
の４０ｍＭヨードアセトアミド溶液を添加し、暗所・室
温で２０分間インキュベートした。これに２．５倍量の
４Ｍ尿素−０，２Ｍ２−アミノ−２−メチル−１，３−
プロパンジオール°（ｐ）−１９，５＞と０．０４△Ｕ
リジルエンドペプチダーゼ（和光紬薬社製）とを加え、
３７℃−晩インキユベートした。含有蛋白質８０μ３相
当の反応液を０．１％ＴＦＡに溶かし、逆相カラム“”
ＴＳＫ−ＯＤＳ−８０ＴＭカラム″（４，６Ｘ１５０ｍ
、東洋ソーダ社製）にかけ、２０〜６０％アセトニトリ
ルの濃度勾配をかけて溶出した。その溶出パターンを第
３図に示す。
よう３ｍＭジチオスレイトール−６Ｍ尿素−０，５ＭＴ
ｒｉｓ−ＨＣＩ （ｐＨ８，４＞に溶かし、４５℃、２
時間窒素シール下でイン４−ユベートした後、１／４聞
の４０ｍＭヨードアセトアミド溶液を添加し、暗所・室
温で２０分間インキュベートした。これに２．５倍量の
４Ｍ尿素−０，２Ｍ２−アミノ−２−メチル−１，３−
プロパンジオール°（ｐ）−１９，５＞と０．０４△Ｕ
リジルエンドペプチダーゼ（和光紬薬社製）とを加え、
３７℃−晩インキユベートした。含有蛋白質８０μ３相
当の反応液を０．１％ＴＦＡに溶かし、逆相カラム“”
ＴＳＫ−ＯＤＳ−８０ＴＭカラム″（４，６Ｘ１５０ｍ
、東洋ソーダ社製）にかけ、２０〜６０％アセトニトリ
ルの濃度勾配をかけて溶出した。その溶出パターンを第
３図に示す。
（３）蛋白質断片のアミノ酸配列の決定：分取した、蛋
白質断片を含む両分をそれぞれ仝間をアプライド・バイ
オシステムズ社（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ
Ｉｎｃ、）の蛋白質シークエンサー４７０Ａを使用説
明書通りに用いてエドマン分解し、順次重じたＰ Ｔ
Ｈアミノ酸を島津製作所■高速液クロ” Ｌ Ｃ−４Ａ
”を用いて、Ｃ，１１，Ｗ、 １ｌｉｒ ｅｔ ａｔ
、。
白質断片を含む両分をそれぞれ仝間をアプライド・バイ
オシステムズ社（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ
Ｉｎｃ、）の蛋白質シークエンサー４７０Ａを使用説
明書通りに用いてエドマン分解し、順次重じたＰ Ｔ
Ｈアミノ酸を島津製作所■高速液クロ” Ｌ Ｃ−４Ａ
”を用いて、Ｃ，１１，Ｗ、 １ｌｉｒ ｅｔ ａｔ
、。
Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、 ９１
．４８６−４９３（１９８３）に記載の方法で同定した
。Ｎ末端側の４７個アミノ酸は精製酵素を２ｍ９／ｒｉ
ｄｌどなるよう０．１％ＳＤＳ溶液に溶かし、これの６
０μρをシークエンサーにかけた。
．４８６−４９３（１９８３）に記載の方法で同定した
。Ｎ末端側の４７個アミノ酸は精製酵素を２ｍ９／ｒｉ
ｄｌどなるよう０．１％ＳＤＳ溶液に溶かし、これの６
０μρをシークエンサーにかけた。
（４）遺伝子ＤＮＡの一次構造の解析：遺伝子ＤＮＡを
含む複合プラスミドｐＮＮ３２（微工研菌奇第７６１２
号）から、特開昭６１−２０２６９３号公報の方法に基
づき、ＡＣＬラセマーゼ構造遺伝子を含むプラスミドｐ
ＮＮ３６を作り、これから該遺伝子を含む３．５Ｋｂの
ＥＣ０ＲＩ−ＤＮＡ断片を調製した。この断片のＤＮＡ
塩基配列は、特開昭６１−２０２６９３号公報に記載さ
れたいわゆるショットガン・シーフェンシング法を用い
て解析した。
含む複合プラスミドｐＮＮ３２（微工研菌奇第７６１２
号）から、特開昭６１−２０２６９３号公報の方法に基
づき、ＡＣＬラセマーゼ構造遺伝子を含むプラスミドｐ
ＮＮ３６を作り、これから該遺伝子を含む３．５Ｋｂの
ＥＣ０ＲＩ−ＤＮＡ断片を調製した。この断片のＤＮＡ
塩基配列は、特開昭６１−２０２６９３号公報に記載さ
れたいわゆるショットガン・シーフェンシング法を用い
て解析した。
（５）蛋白質のアミノ酸配列および逓伝子ＤＮＡの塩基
配列の決定： 前項第（４）項のＤＮＡシークエンシングでは、Ｇ−Ｃ
が多いＤＮＡ塩基配列部分は、オートラジオグラフのラ
ダーが判読し難いところがあり、ショットガン法のみで
塩基配列の決定は難しかった。
配列の決定： 前項第（４）項のＤＮＡシークエンシングでは、Ｇ−Ｃ
が多いＤＮＡ塩基配列部分は、オートラジオグラフのラ
ダーが判読し難いところがあり、ショットガン法のみで
塩基配列の決定は難しかった。
そこで判読し雌い部分は、前項第（３）項に記したシー
フェンシング法で決定した蛋白質断片のアミノ酸配列を
参考にして解析し、塩基配列を決めた。またＮ末端およ
びＣ末端の塩基配列も蛋白質断片のアミノ酸配列から決
定した。
フェンシング法で決定した蛋白質断片のアミノ酸配列を
参考にして解析し、塩基配列を決めた。またＮ末端およ
びＣ末端の塩基配列も蛋白質断片のアミノ酸配列から決
定した。
第２図に決定した遺伝子ＤＮＡの全配列と、これに対応
する蛋白質断片の位置を示す。図中の丸卵内数字は第３
図のピークを示している。
する蛋白質断片の位置を示す。図中の丸卵内数字は第３
図のピークを示している。
第１図はα−アミノ−ε−カプロラクタム・ラセマーゼ
の全アミノ酸配列を、第２図は該ラセマーゼを］−ドす
る遺伝子ＤＮＡの全塩基配列を示す。第３図は該ラセマ
ーゼの溶出パターンを示す。
の全アミノ酸配列を、第２図は該ラセマーゼを］−ドす
る遺伝子ＤＮＡの全塩基配列を示す。第３図は該ラセマ
ーゼの溶出パターンを示す。
Claims (3)
- （１）第１図に示されるアミノ酸配列を有するα−アミ
ノ−ε−カプロラクタム・ラセマーゼおよびその同効物
。 - （２）第１図に示されるアミノ酸配列を有するα−アミ
ノ−ε−カプロラクタム・ラセマーゼをコードするＤＮ
Ａ配列。 - （３）第２図に示される塩基配列である特許請求の範囲
第（２）項記載のＤＮＡ配列。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27669686A JPS63129984A (ja) | 1986-11-21 | 1986-11-21 | α−アミノ−ε−カプロラクタム・ラセマ−ゼ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27669686A JPS63129984A (ja) | 1986-11-21 | 1986-11-21 | α−アミノ−ε−カプロラクタム・ラセマ−ゼ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63129984A true JPS63129984A (ja) | 1988-06-02 |
Family
ID=17573049
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP27669686A Pending JPS63129984A (ja) | 1986-11-21 | 1986-11-21 | α−アミノ−ε−カプロラクタム・ラセマ−ゼ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS63129984A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005080584A1 (ja) * | 2004-02-24 | 2005-09-01 | Kansai Technology Licensing Organization Co., Ltd. | α-アミノ-ε-カプロラクタムラセマーゼを用いた、D及びL-アミノ酸アミドの混合物の製造方法、D又はL-アミノ酸の製造方法、D又はL-アミノ酸アミドの製造方法 |
| EP1513946B1 (en) * | 2002-06-14 | 2007-05-16 | DSM IP Assets B.V. | Polypeptides having alpha-h-alpha amino acid amide racemase activity and nucleic acids encoding the same |
-
1986
- 1986-11-21 JP JP27669686A patent/JPS63129984A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| US7371555B2 (en) | 2002-06-14 | 2008-05-13 | Dsm Ip Assets B.V. | Polypeptides having α-H-α-amino acid amide racemase activity and nucleic acids encoding the same |
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