JPS63175003A - 水溶性ポリマーコンジュゲートおよびその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、水溶液から可逆的に沈殿可能であって、水性
媒質に可溶性である担体ポリマーと、それ；二化学的（
：結合された触媒活性化合物とより成るボリマーコンジ
ュケ゛−トに関する。本発明はこの種のポリマーコンジ
ュゲートの製造方法、およびそれらの均一系触媒反応、
％　ｌニバイオ触媒反応への使用にも関する。

担体結合触媒、特に担体績＠−（固定化）酵素は１例え
ば医学関連分析法、医薬品（抗生物質）および作物防護
物質の製造、食品の製造および光学活性物質（アミノ酸
のラセミ体分割）の取得など（二多くの用途を有する。

しかしながら、この１種の触媒の経済的使用が有利とな
るのは（通常極めて高価な）触媒が回収できる場合、す
なわち何回も使用できる場合だけである。これに対する
一つの解決策は、かかる触媒活性化合物の固定化である
。この形態の場合はそれらの触媒特性を保持しつつ簡単
に操作することができる。以下の固定化方法が報告され
ている。

１、　以下の方式による固体粒子上または中への触媒活
性化合物の固定（不均一系触媒）ニー（、＋？リマー）
マトリクスへの封入−吸　　着 一共有結合 一マイクロカプセル化 ２、共有結合による触媒活性化合物の水溶性ポリマーへ
の固定（均一系触媒） 固定触媒は、遊離型に比べしばしば安定している。

触媒活性化合物を固定するための水溶性担体ポリマー例
えばポリエチレングリコールの使用は、模型反応器にお
いて酵素およびコファクターを安定化させそしてそれら
の分子量を高める目的で採用されている。

不均一系触媒および模型反応器の使用は、高分子量で、
水不溶性の基質の反応、あるいは不溶性物質との反応に
は不適切である。

固定化可能で沈殿により回収できる水溶性ポリマーが開
発されれば、高分子量物質の処理および水不溶性物質と
の反応のいずれも可能となろう。

触媒活性化合物、特に酵素の固定化には多くの方法が知
られている。詳細な総論は例えばｒＭｅｔｈｏｄｓ　ｉ
ｎ　ＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙＪ　Ｖｏｌ、ＸＬｔＶ、”工
ｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄＥｎｚｙｍｅｓ″（Ａｃａｄｅｍ
ｉｃ　ＰｒｅＳｓ、１９７６）およびＪ　、Ｃｈｉｂｘ
ｔａ：工ｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ　Ｅｎｚｙｍｅｓ（Ｋｏ
ｄａｎｓｈａ　Ｌｔｄ、、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ人：　５
ｏｎｓ、１９７８）ｆ二掲載されている。しばしば記載
されている一つの方法は担体に対する酵素の吸着、また
はイオンもしくは共有による結合である１゜ 西独特許出願公告第２，２３７，３１６号明細書に記載
の担体物質は、反応性の基を含有するモノマー、架橋モ
ノマーおよび親水性モノマーの共重合により得られる膨
潤性架橋ビーズポリマーである。この文献に開示された
反応性の基は、ノ１０ゲノアルキル、エポキシド、カル
ボニルクロライド、カルボン酸無水物、カルボニルアジ
ド、カルボン酸フェニルエステルおよびヒドロキサム酸
基である。

西独科許出願公開第２７２２７５１号明細書は。

アクリル／メタクリルアミドおよび／またはメチレン−
ビス−アクリル／メタクリルアミドからの担体ポリマー
としてのビーズポリマーの製造を記載している。これら
のポリマーはまた場合によっては、ラジカル重合を受け
ることができかつオキシラン、カルボン酸無水物、カル
ボニルクロライド、カルボニルアジド、カルボン酸フェ
ニルエステルまたはヒドロキサム酸基を有する更なるコ
モノマーも含有している。

しかしながら、文献公知のこれら担体ポリマーは、すべ
て水に不溶であるという欠点を有している。酵素または
その他の触媒活性物質はこれらのポリマーに化学的に結
合できるものの、それらの活性は、それらが完全に利用
された場合よりもはるかに低い。これは化学的に結合さ
れた触媒活性化合物を有する溶存ポリマーに比べ活性面
積が依然として小さいためである。

温度上昇および／または塩類添加により綿状に沈殿し、
それ故に簡単な物理的分離方法（二より反応溶液から分
離し得る水溶性ボリマーコンシｊ、　）７”　−トが介
設見出された。更に、これらポリマーコンジュゲートの
沈殿点は広い温度範囲（約１０〜８０℃）で調整でき、
化学的に結合された触媒活性成分の個々の操作温度に適
合させることができる。沈殿点はモノマー組成を変える
ことにより調整される。綿状沈殿温度は、結合された触
媒活性成分の最も好ましい操作温度よりらほんのわずか
たけ高くなるように選択するのが有利である。

従って、本発明は、担体ポリマーとそれに化学的（−結
合された触媒活性化合物とより成る水溶性ポリマーコン
ジュゲートであって、温度を（好ましくは１０〜８０℃
の範囲で）高めることにより、および／または塩類の添
加により水溶液から可逆的に沈殿可能な水溶性担体ポリ
マーと触媒活性化合物とより成る前記水溶性ポリマーコ
ンジュゲートに関する。

以上および以下の記載において、触媒活性化合物は　酵
素、補辱素、抗原、抗体、金属、金！Ａ＠体（キラール
剤）、アミノ酸およびアフィニテイ物質特に酵素として
定義される。

好ましい水溶性で可逆的に沈殿可能なボリマーコンジュ
ゲ゛−トは、担体ポリマーが水に可溶であって、親水性
および／または疎水性の反復上ツマ一単位を含有するも
のである。

特に好ましい水溶性で可逆的に沈殿可能なポリマーコン
ジュゲートは、担体ポリマーが水に可溶であって、親水
性および／または疎水性の反復モノマ一単位のほかに、
触媒活性化合物が化学的に結合する反応性側鎖を有する
反復上ツマ一単位をも含有するものである、 格別に好ましい水溶性で可逆的に沈殿可能なポリマーコ
ンジュゲートは、水溶性担体ポリマーが、式１ ／Ｎ＼ Ｒ２ＴＥＨ５ （式中、Ｒ１およびＢ５は同一または異なっていて、水
素または直鎖状もしくは分枝鎖状のＣ１〜Ｃ３−アルキ
ルを表わし、モしてＲ２は直鎖状または分枝鎖状のＣ１
〜Ｃ３−アルキルを表わす）で示される反復上ツマ一単
位、および式■、■および■ 〔式中 Ｒ１は式■（二ついて示されたとおりの意味を有し、Ｒ
４は疎水性基であり、そして直鎖状Ｃ１〜Ｃ６−アルキ
ルを表わし、そして０３〜Ｃ６−アルキル基の場合には
分校鎖状または環状であってもよく　。

Ｒ５は活性化された基であり、モして６，４−エポキシ
シクロヘキシルであるかまたは式Ｖ１０・２．Ｒ６（Ｖ
） （式中Ａは酸素、硫黄またはＮＨ基であり、そして Ｒ６は−（Ｃ’Ｈ２）ｎ−Ｚ基（式中ｎは１〜６の数を
表わしセしてＺはアミノ、ヒドロキシル、カルボキシル
、カルボニルまたは１．２−エポキシエチルを表わす）
である）で示される置換分であり、 Ｘは親水性基でありセしてＯＨ、ＮＨ２またはＳＨ基を
表わし、そして Ｙは酸素または硫黄を表わす〕 で示される化合物から選択される少くとも一つの他の反
復上ツマ一単位から構成されるものである。

本発明は更に、温度上昇および／または塩類添加により
水溶液から可逆的に沈殿可能な水溶性担体ポリマーを、
場合により、担体ポリマーに存在する側鎖を予め化学的
に修飾した後、触媒活性化合物と反応させることより成
る本発明のボリマーコンジュゲ゛−トの製造方法にも関
する。

最後に１本発明は１本発明のポリマーコンジュゲートの
均一系触媒反応、特に均質バイオ触媒反応への使用にも
関する。

本発明を以下詳述する。

担体ポリマーは次の要件を満たさねばならない： ａ）　　１〜２０℃で水に完全に溶解すること。

ｂ）　　（好ましくは１０〜８０℃の温度範囲で）温度
を上げることにより、および／または塩類を添加するこ
とにより、沈殿可能であること。

Ｃ）温度または塩濃度を下げること）二より完全に再溶
解できる（可逆的に沈殿可能である）こと。

ｄ）他の可溶性ポリマーまたは固体の共存下においてさ
えも完全にかつ簡単に分離できること。

最初からこれらの要件を満たす担体ポリマーの例として
は、ポリ−Ｎ−アルキルアクリルアミド、ポリ−Ｎ−ア
ルキルアルキルアクリルアミド、または相当するモノマ
一単位のコポリマー、またはアルキル−セルロースなど
（ここで前記アルキル基は１〜４個の炭素原子を有し。

モして分枝鎖状または非分枝鎖状でありかつ飽和してい
る）が挙げられる。これらの種類の担体ポリマーは、（
別の目的に用いられるものではあるが）例えば、日本特
許公開６０／１７０−６０７、同第６０／１７０−６１
１８．同第６（１／１７０−６０９　マタハｒＨａｎｄ
ｂｏｏｋ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　５ｏｌｕｂｌｅ　ｇｕｎ
Ｂａｎｄ　　ｒｐｓｉｎｓＪ　、Ｒ，Ｌ、Ｄａｖｉｄｓ
ｃｎ、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｌｌｌ　ＢｏｏｋＣｏｍｐａｎ
ｙ　１９８０などに記載されている。

しかしながら、適当なコモノマーと共重合させることに
より、七ツマ−の重合により製造され全く可逆的に沈殿
し得ないか８０℃を超える沈殿点を有する水溶性ポリマ
ー例えばポリビニルエーテル、ポリビニルアセテートま
たはポリビニルアルコールなど（その他の水溶性ポリマ
ーは例えばｒＴ”ｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ　ｏｆ　Ｐｏ
ｌｙｍｅｒ　５ｃｉｅｎｃｅａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏ
ｇｙＪ　、　Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ　Ｐｕｂｌｉｓ
ｈｅｒｓＮｅｗ　Ｙｏｒｋ、Ｖｏｌ、１２，６１８〜６
２６頁、１９７１に示されている）を、約１０〜８０℃
の温度範囲で可逆的に沈殿可能で前記諸要件を満たす程
に「沈殿可能」：二することも一般に可能である。

このように、一般的に重合（−よって製造できるあらゆ
る水溶性で可逆的に沈殿可能なホリマーの沈殿点は、適
当なコモノマーと共重合させることにより広い範囲にわ
たって調整することができる。

適当なコモノマーは親水性または疎水性側鎖を有するも
のである。親水性コモノマーを組み込むと沈殿点が高温
側に移動し、また疎水性コモノマーを組み込むとそれは
低温側に移る。この種の適当なコモノマーは、ラジカル
重合を受けることができ、そして側鎖に以下の置換分、
例えば 親水性置換分：ＯＨ，ＮＨ２まタハＳＨ。

疎水性置換分：アルキル、アルキルオキシ、アルキルチ
オまたはアルキルアミノまたはアルキルオキシカルボニ
ルアルキルまたはアルキルカルボニルオキシアルキルま
たはフェニル、またはアルキル−、アルキルオキシ−、
アルキルチオ−またはアルキルアミノ−置換フェニル（
前述のアルキル基は１〜１８個の炭素原子を有し、また
それらアルキル基は分校状、非分枝状または環状であっ
てよくそしてアルキル基は好ましくは飽和されている） のうちの少くとも１個を有している七ツマ−である。

場合によっては、これらの置換分はスペーサー基を介し
て七ツマ一単位の重合可能部分に結合されていてもよい
。スペーサー基は、好ましくは１分枝または非分枝鎖状
の飽和０１〜Ｃ８−アルキレン、−アルキレンオキシ、
−アルキレンカルボニルまたは−アルキレンチオカルボ
ニル基から構成される。

担体ポリマーに対する触媒活性化合物の結合を容易にす
るために、そのポリマーは、場合：二よっては、反応性
の基で置換された更なるモノマ一単位を含有することも
できる（官能化された担体ポリマー）。このような反応
性の基としては例えば次のものが挙げられる：エチルー
またはシクロへキシルオキシラン、ＮＨ２、０Ｈ１Ｃ○
ＯＨまたはＣＨＯ基。それら反応性置換分は、場合によ
っては、ラジカル重合を受けることのできる七ツマ一部
分に対し前述のスに一す−基を介して結合されていても
よい。

好ましい担体ホリマーは、式Ｉで示される反復上ツマ一
単位と、式■、■および■で示される化合物から選択さ
れる少くとももう一つの反復モノマ一単位とで構成され
たものである。

特に好ましいポリマーは、 Ｒ１が水素、メチルまたはエチルを表わし、Ｒ２がエチ
ル、ｎ−または１−プロピルを表わし、Ｒ５が水素、メ
チルまたはエチルを表わし、Ｒ４が直鎖状または分枝状
０１〜Ｃ４−アルキルを表わし。

Ｒ５が６，４−エポキシシクロヘキシルまたは式■（式
中Ｒ６は−（ＣＨ２）ｎ−Ｚ基（式中ｎ＝１〜３であり
、セしてＺはカルボニルまたは１，２−エポキシエチル
を表わす）であり、そしてＡは酸１累またはＮＨ基であ
る）で示される置換分を表わし、 ＸがＯＨまたはＮＨ２基であり、そしてＹが酸素を表わ
す ものである。

担体ポリマーは、格別；二好ましくは、（式■で示され
る）Ｎ−イソプロピルアクリルアミドまたはｌ（−イソ
プロピルメタクリルアミドと、（式■、■および■で示
される）メタクリルアミド、アクリル酸メチル、および
グリシジルメタクリレートまたはグリシジルアクリレー
トから選択される化合物とから構成される。

担体ポリマーはただ一種の親水性または疎水性コモノマ
ー成分を含有するのが好都合である。

しかしながらこれら成分の混合物を用いることも完全に
可能である。

好ましく用いられる担体ポリマーは、式■で示される七
ツマ−の重量に基づき０．２〜８０を量チの式■、■お
よび■で示される化合物から選択されるコモノマー成分
（三種類の物質すべてを組合せることもできる）を含有
する。それらのこれらコモノマー含量は、好ましくは、
０．２〜４０重量％、特に好ましくは５〜４０重ｉ［で
ある。５式■％■および■で示される化合物の組合せを
用いる場合には、示された数値は、それらの合計重量に
関するものである。

弐■で示されるコモノマー成分が単独で、あるいは他の
ものと混合されて担体ポリマー中に存在する場合、他の
モノマーの重量に対する割合で示したそれらの重量は０
，２〜１５％が好ましい。０．２〜３％の重量割合が特
に好ましい。

沈殿温度と親水性または疎水性コモノマー含量との間に
は直線的な関係が存在する。この関係はコポリマー中の
（最終ポリマーに基づく）含有率（チ）を示す第１図か
ら明白であり、この図面は様々な割合のアクリル酸メチ
ル（ＡＭＥ）とメタクリルアミド（ＭＡＡ）を含有する
ポリ−Ｎ−ミープロピルアクリルアミド（ＰＩＰＡＭ）
についての関連性を例として示している。

このようにして、用途に応じて規定された沈殿温度を有
する担体ポリマーを製造することができる。

重合に必要であって購入できないモノマーは、簡単な方
法で製造できる。例えば（式■または「で示される）Ｎ
−アルキル−置換アクリル／メタクリルアミドは、アク
リロイル／メタクリロイルハライド、好ましくけアクリ
ロイル／メタクリロイルクロライドを所望のアルキル−
またはジ−アルキル−アミンと反応させることにより得
られる。

弐■およびＶで示されるアクリレートモノマーは、例え
ば、アクリロイル／メタクリロイルハライド、好ましく
はクロライドを適宜のアルコールまたはメルカプタンと
反応させることにより製造される。

式■で示されるモノマーは例えばアクリロイル／メタク
リロイル勺ライド、好ましくはクロライドをアルコール
、メルカプタンまたはｇ　−アミンと反応させることに
より製造できるが、置換分Ｚは場合によりこの反応に先
立ち適渦な保護基、例えばエステル、アセタール、エー
テルまたはトシレートなどで保護しておいてもよい１、 相当する高級アルキルアクリルアミドは、例えば２−エ
チル−または２−プロピル−アクロレインを例えばクロ
ム酸で酸化して相当するアクリル酸としくＯｒ　ｇａｎ
　ｉｋｕｍ　、○ｒｇａｎｉｓｃｈ　Ｃｈｅｍｉｓｃｈ
ｅｓＯｒｕｎｄｐｒａｋｔｉｋｕｍ（実用有機化学基礎
コース）、第１５改定版、第４４７頁、ＶＥＢ　Ｄｅｕ
ｔｓｃｈｅｒＶｅｒｌａｇｄｅｒ　Ｗｉｓｓｅｎｓｃｈ
ａｆｔｅｎ、Ｂｅｒｌｉｎ　１９７６参照〕１次いでそ
れらをカルボニルハライドに変えた後前述の如くアルコ
ールまたはアミンと反応させて目的とするアルキルアク
リルアミド／アクリル酸類とすることにより得られる。

担体ホリマーは（アルキルセルロースのように直接使用
できない場合には）モノマ一単位を溶媒、好ましくは水
中でラジカル重合させることにより得られる。

重合は、自体既知の方法で例えば紫外光または高エネル
ギー照射により開始されるが一般（二モノマー混合物に
可溶性のラジカル生成性開始剤によって開始される。適
当な開始剤としては例えば可溶性のはルオキソジサルフ
ェート類、ペンゾイルズルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチル
ヒドロペルオキシド、クメンにルオキシド、メチルエチ
ルケトンパルオキシド、ラウロイルはルオキシド、過安
息香酸ｔｅｒｔ−ブチル、ジ過フタル酸ｔｅｒｔ−ブチ
ル、アゾジイソブチロニトリル、２．２’−アゾビス（
２，４−ジメチルバレロニトリル）Ｓ２−フェニルアゾ
−２，４−ジメチル−４−メトキシバレロニトリル、２
−シアノ−２−プロピルアゾホルムアミド、アゾジイソ
ブチルアミド、またはジメチル、ジエチルまたはジブチ
ルアゾ−ビス−メチルバレレートなどが挙げられる。

アンモニウムはルオキソジサルフエート／チオ亜硫酸ナ
トリウム混合物を用いるのが好ましい。

モノマー量（二対し、約０．０１〜２重ｉ−％、好まし
くは０１〜１重ｉ［の開始剤が用いられる。

反応は、不活性気体雰囲気例えば窒素またはアルゴン中
で酸素を排除して行うのが好都合である。反応時間は１
０分〜１０時間、好ましくは′５０分〜５時１間である
。重合は任意の所望の時点で例えば空気または酸素を吹
込むことにより停止させることができる。反応は、もは
や粘度増加が全く検出できなくなったところで停止させ
るのが好ましい。反応温度は０〜４０℃、好ましくは０
〜２０℃である。

好ましいものとして使用される担体ポリマーを製造する
には、（既）二導入済みの式Ｉで示されるモノマー物質
の量に対し）０．２〜８０重量％、好ましくは０．２〜
６０重量％の式■、■および■で示される化合物から選
択される少くとも一種の七ツマ−が添加される。コモノ
マーの添加量は、式■、■および■で示される七ツマ−
の任意の所望の混合物で構成することもできるが。

沈殿温度調節を可及的に正確なものとするべく式■また
は川で示されるただ一種のコモノマー成分を用いた方が
より有利である。

担体ポリマーに式ＩＶで示される七ツマ一単位を含有さ
せる場合には、このモノマーは既（二導入済みの他のモ
ノマー量に対し０．２〜２０重量％。

好ましくは０．２〜１０重ｉ％の量で添加される。

溶媒中の全モノマーの総濃度は１〜３０重量％、好まし
くは５〜１５重量％である。

ポリマーの最終的組成割合（％）は定量的元素分析によ
ってのみ測定できる。使用された七ツマ−とポリマー中
のこれらモノマ一単位含量との間の正確な相関関係を確
立することは困難である。何故ならば、最終的な組成は
、多くのパラメータ例えば反応温度、時間および収率な
どに左右されるからである。こうした理由から、反応前
のモノマー組、成ではなくて担体ポリマー中のモノマ一
単位割合（％）が第１図にプロットされている。

次１；、前述の担体ポリマーを自体既知の方法により触
媒活性物質と反応させて本発明のポリマーコンジュゲー
トとする。触媒活性化合物とは、それらと接触した反応
物質には化学変化を生じさせることができるがそれら自
身はこの間に恒久的な構造的または化学的変化を受ける
ことのない物質として定義される。すなわち、それらは
それら自身、反応系から無変化の゛まま現われる。この
ような触媒活性成分としては例えば以下のものが挙げら
れる： ａ）金属または金属錯体（キラール剤）例えばエナンチ
オ選択的水素添加、重合またはヒドロホルミル化、ヒト
ｏ−７リル化（均質な遷移金属および貴金属触媒反応）
のため。

例えば次のものが挙げられる： ホスフィン錯体、例えば［ＲｈＣｔ（ＰＰｈ３　）！Ｓ
上ドイツ特許第９２０５１号参照、 ＣＣ０２（Ｃｏ）８〕、米国特許第３９９８８６４号参
照、〔Ｎａ２ＰｄＣ４４〕、ドイツ特許第２３３０３０
８号診照、［Ｒｈ２Ｃ４２（Ｃ２Ｈａ）４）、東ドイツ
特許第１３３１９９号参照、 （Ｐｈ＝フェニル）。

純粋な光学対掌体、特にアミノ酸の製造には、例えば次
のものが挙げられる： 次のもののホスフェート錯体、丁なわち、〔Ｐｈ２Ｃ１
２（Ｃ２Ｈ４）４　：］、西ドイツ特許第２７１８５５
５号、［Ｒｈ２Ｃｔｚ（Ｃｏｄ）　２）、西ドイツ特肝
：１２８２４８６１号、〔Ｒｈ（ＮＯｒｂａｎ）２Ｃ１
ｏ４〕、日本特許４５９９３０９０号、Ｃｏｄ　＝シク
ロオクタジエン、ｎｏｒｂａｎ＝ノルボルナジェン。

前記金属錯体（二おいて、遷移雀属は通常、末端−ＰＰ
ｈ　２基を有する有機基に配位される。

これらの有機基は同様にして前述の担体ポリマーの活性
側鎖に結合されることができ、この結合は、樹脂または
他の水不溶性担体ポリマーについての前述の多くの文献
に記載されている。

ｂ）アフィニティ物質 例えば、場合により高分子量の酵素を単離するため。ア
フィニティ物質とは、ポリマー担体（二対して共有結合
でき、それらの「遊離の」側鎖を以って櫨−特異的酵素
（これは担体ポリマー／基！／酵素コンジュゲートを反
応媒質から除去後（二基買から再び各局に離脱すること
ができそしてこのようにして単離することができる）に
結合する基質または基質類似体として定義される。これ
は例えば以下のものＣ二記載されている： 米国特許第５９４１６５７号（Ｄ−アミノ酸オキシダー
ゼ）、 ｒＩｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ　Ｅｎｚｙｍｅｓ、　Ｐｒｅ
ｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、　
　Ｒｅｃｅｎｔ　　ＡｄｖａｎｃｅｓＪ　　１９７９．
Ｊ、Ｃ。

ＪＯｈｎＳＯｎ著、 ｒｓｏｌｉｄ　Ｐｈａｓｅ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
、Ａｎａｌｙｔｉｃ　ａｎｄＳｙｎｔｈｅｔｉｃ　Ａｓ
ｐｅｃｔｓＪ、Ｗ、Ｈ，５Ｏｕｔｅｎ＋　Ｖｏｌｕｍｅ
　６６゜Ｃ）アミノ酸 例えば（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂（二類似した）タン
パク合成用のもの、例えばｒｓｏｌｉｄ　ＰｈａｓｅＢ
ｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　Ａｎａｌｙｔｉｃ　＆　５
ｙｎｔｈｅｔｉｃＡｓｐｅｃｔｓＪ　Ｗ、Ｈ，５ｃｏｕ
ｔｅｎ、　Ｖｏｌ、　６６　番照。

ｄ）抗体 ｅ）抗原 ｆ）酵素 例えば、下記のようなヒドロラーゼ群のもの。

プロテアーゼ：α−キモトリプシン、トリプシン、サー
モリシン、ペプシ ン。

ア７ラーセ：リパーゼ例えばカンジダ・シリンドラセア
（Ｃａｎｄｉｄａ　ｃｙｌｉｎ−ｄｒａｃｅａ　）から
、あるいはブタ膵臓から得られるもの。

エステラーセ：プタ肝臓エステラーセ、コリンエステラ
ーセ アミダーセ；ベニ７リンアーシラーゼ ｇ）補酵素 汐りえばアデノシン三燐酸（ＡＴＰ）またはニコチンア
ミド−アデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ／ＮＡＤＨ）、
米国特Ｗ！Ｆ第３９５７７４８号診照。

＃素および補酵素が待に通している。酵素の中でも、プ
ロテアーゼおよびアシラーゼの固定化が特に好ましい。

触媒活性化合物な担体に永久的（二結合させる一つの可
能な方法は共有結合である。このためには、担体ポリマ
ー上の反応性の基と触媒活性成分上の反応性の基とを、
例えばアミンまたはヒドロキシル基を介して反応させる
必要がある。

これはａ）溶解した担体ポリマーを触媒活性化合物と直
接反応させることによるか、あるいはｂ）反応条件が触
媒活性化合物に適していない場合には、担体ポリマーの
反応性側鎖を予め化学的１；修飾した後に、あるいはＣ
）「反応促進剤」を同時（二添加して、行われる。

担体ポリマーと触媒活性成分との直接反応の一例を以下
の反応スキームａ）１；示す。

使用できるエポキシド富有担体ポリマーの例は、オキシ
ラン宮有偶鎖、例えば１．２−エポキシエタン類または
３，４−エポキシシクロヘキサン類、を有するポリマー
である。

反応条件ａ）では結合され得ない触媒活性化合物（：対
しては、反応前に担体ポリマーの反応性側鎖を、反応が
より緩和な条件下に１行われ得るよう（二変える（化学
的（二修飾する）のが有利である（反応スキームｂ））
。例えばエポキシド基をまず加水分解的に開裂させてジ
オールを形成させ、次いでそれを例えばハロゲン化シア
ン、特（二臭化シアンと反応させてイミド炭酸ジエステ
ルとすることができ、このものは次に緩和な条件下に適
当な触媒活性化合物と反応させることができる（反応ス
キームｂ）参照）。

ｂ） この場合にも、エポキシド倉荷担体ポリマーから出発す
ることができる。

カルボキシル含有側鎖を有するポリマーは、例えばジア
ルキルカルボジイミド、特にジシクロへキシルカルボジ
イミド（ＤＣＣ）の存在下に触媒活性成分と反応させる
ことができる（反応スキームｃ））。この場合ＤＣＣは
「反応促進剤」として働く、すなわち、カルボン酸と触
媒活性成分のアミンまたはヒドロキシル基との反応を容
易にする。この反応は次のスキーム（二示されるように
して進行する。

Ｃ） 日＝担体ポリマー、■＝触媒活性化合物、Ｒ＝Ｃ１−Ｃ
ａ−フルキル／シクロアルキル。

反応性側鎖中にアミン、ヒドロキシルまたはカルボニル
基を有する担体ポリマーには、反応スキームａ）に従っ
て直接に、あるいは方法ｂ）またはＣ）の一方（：従っ
て触媒活性成分を負荷することができる。

触媒活性化合物を官能化担体ポリマ−１＝結合させるの
に最良の手順は、担体ポリマーをまず水性溶媒、好まし
くは水中に溶解させそして次（二適当な触媒活性化合物
！、純粋な物質として、あるいは同様に水性媒質中好ま
しくは水中に溶解させて添加することである。この間、
溶液の−１は好ましくは該適当な触媒活性物質ならび（
二担体ポリマーが安定である領域に維持されるべきであ
る。これは適当な緩衝剤を用いて行うのが好都合である
。種々の方法ａ）、ｂ）およびＣ）（二ついての好まし
い範囲は関連のスキーム中に示しである。反応時間は０
．１〜７０時間、好ましくは１０〜６０時間、特に２０
〜５５時間である。

反応温度は１〜６５℃、好ましくは６〜３０°Ｃ１特（
１５〜２５℃、とすべきである。

使用されそして場合；二よっては官能化される担体ポリ
マーと触媒活性化合物とのモル比は、好都合には、活性
化された側鎖１モルに対し少くとも１モルの触媒活性化
合物を存在させて、変換完了時にすべての利用可能な反
応性側鎖が触媒活性化合物により置挟されているように
すべきである。しかしながら、可及的（ユ変換を完全な
ものとするために、過剰の触媒活性物質を用いるのが有
利である。しかしながら、使用目的によっては、存在す
るすべての反応性側鎖を触媒活性化合物と反応させない
、すなわち化学量ｗｊｔよりも少量の触媒活性化合物を
用いることが全く適切である場合もある。

最後に、本発明のポリマーコンジュゲートを沈殿させ、
溶液から取り出し、そして場合（二よっては、１回また
は数回再沈殿させること１：より精製する。沈殿は、温
度を上げることにより、および／または塩類を添加する
ことにより行われる。

本発明のポリマーコンジュゲートの水溶性は二つの構造
的要素、すなわち担体ポリマーの親水性および疎水性側
鎖によって決まる。

本発明のポリマーコンジュゲートの熱的沈殿は、完全に
可逆的である。溶解状態のポリマーおよび沈殿状態のポ
リマーいずれも一旦その状態に達すると、比較的安定で
ある。

従ッてポリマーコンジュゲートを沈殿させるには二つの
方法が可能である。所定の塩濃度で温度を高めるか、ま
たは所定の温度（例えば室温）で塩類を溶液（二添加す
る。いずれの場合（二も、温度または塩類の影響を受け
て溶媒和外被が大きく不安定化され、疎水性基の影響が
支配的となるとき（二相分離が起きる。

ポリマーコンジュゲートの水溶性は、塩類、例えばＮａ
ＣＬの存在下に低下する。塩濃度とポリマーコンジュゲ
ートの溶解度との間には直線関係が存在することが明ら
かになった。

純粋な水中にポリマーコンジュゲートを溶解させるため
の臨界温度よりも低いあらゆる温度（；おいて、臨界塩
濃度の添加により、巨大分子の溶媒和外被が相分離が生
じる程度壕で破壊する、すなわち不安定化させることが
できる。

あらゆる塩類およびあらゆるイオンは、特徴的な綿状沈
殿力を有する。高度に溶媒和されたイオンは強い脱水効
果を有し、そしてそのようなイオンの場合、低濃度であ
っても巨大分子の溶媒和外被の脱離をひき起こす。低度
に溶媒和したイオンを用いて同じ効果を得る（二は、そ
れらをより多量に添加する必要がある。このことはＮａ
＋およびＮＨａ＋イオン（二よる沈殿テストで′８偵誌
される。その他のイオンの綿状沈殿力は、Ｆ、　Ｈｏｆ
ｍｅｉｓｔｅｒ　（Ｒ，Ｂｒｄｉ８ｋａ、　Ｇｒｕｎｄ
ｌａｇｅｎ　ｄｅｒｐｈｙｓｉ、ｋａｌｉｓｃｈｅｎ　
Ｃｈｅｍｉｅ　（基ｔｓｖａ理化学）、第１５版、ＶＥ
Ｂ　Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ　Ｖｅｒｌａｇ　ｄｅｒ　Ｗｉ
ｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｅｎ　。

Ｂｅｒｌｉｎ、　１９８２．第６６８〜６７２頁）の離
液順列により概算されうる。

沈殿力が低下するＩｌｉ　＋＝並べた系列隘イオ７．Ｑ
○、　　、ＳＯ２、ＰＯ４，７セｆ−ト−１ＣＬ−、Ｂ
ｒ−、Ｉ− 陽イオン：　Ｍｇ”　、Ｃａ”　、Ｎａ”　、Ｋ”　、
ＮＨａ”前掲のｊ前イオンと陰イオンとのあらゆる組合
せが本発明に適しており、例えば塩化カルシウム、硫酸
ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、具化ナ
トリウム、沃化ナトリウム、塩化カリウム、臭化カリウ
ム、沃化カリウム、ｋｂ酸カリウムなどがあげられ、特
に塩化ナトリウムが適する。

本発明のボリマーコンジュケ゛−トの綿状沈殿は、塩類
の存在下においても完全に可逆的である。温度および／
または塩濃度のパラメータを親水性効果が支配的となる
ように変えると、ボリマーコンジュケ゛−トは再び完全
（二溶解する。

第２図は濁度の温度依存性を実施例７のポリマーコンジ
ュゲートの０．１％強度溶液について示したものである
。濁度は光度測定（二より測定された。濁ａ１ｏｏ％は
ポリマーコンジュゲートの完全な沈殿に相当する。

本発明のポリマーコンジュゲートを沈殿させるには、そ
の溶液に、（溶存ポリマーコンジュゲートの本社に対し
）２〜９’Ｏ，ｉｉチ、好１しくは５〜７０重祉俤の塩
類を、好ましくは固体として、あるいはその他溶液の形
で添加することができる。

水のほか、本発明のボリマーコンジュゲ゛−トに適した
溶媒は完全１＝かつ無制限（二本と混和し得る有機溶媒
例えばメタノール、エタノールまたはアセトンを２０重
量％まで含有する水溶液である。

本＋ａ　明のポリマーコンジュゲートの主な長所は、そ
れらが水に可溶であり、そして可逆的１：かつ調節自在
１：沈殿可能であるというところＣ二ある。数回「便用
された」後であっても、すなわち、数回にわたり溶解お
よび再沈殿させた後であっても、これら担体ポリマー（
二結合した触媒活性物質の活性の低下はとるに足らない
程度にすぎない（実施例９参照）。

本発明のポリマーコンジュゲートを用いて、固定化され
た 酵　素 補酵素 抗　　体 抗　　原 アフィニティ物質 アミノ酸 金属または金属錯体（キラール剤） の触媒反応を均一相で行うことができ、また使用される
触媒活性物質を回収し数回にわたり使用することができ
る。これによって不均一系触媒反応の諸欠点、例えば ０存在する触媒の低い利用率 ０拡散の阻害（特（二高分子量の粒子の場合、触媒到達
度がほんのわずかにすぎない）０虜勾配による触媒失活
の可能性 ０担体物質の細孔径による前駆物質および生成物のサイ
ズの制約 ０細孔閉塞による活性低下 などが回避され、そして均一系触媒反応の長所、例えば Ｏ高い反応速度 ０高分子址基質の分解およびイ５飾 Ｏ高分子量産物の製造 ０不溶性産物との反応 などを完全（；いかすことができ、しかも従来よりこの
ため（二慣用されてきた複雑な分離法を用いる必費もな
い〇 以下、本発明を実施例により詳述する。

実施例　１ ４．２１のＮ−イソプロピルアクリルアミド（ＮＩＰＡ
Ｍ）および０．７６ｒのアクリル酸メチル（ＭＡ）を５
０−の脱気水）；溶解する。このモノマー溶液を酸素を
排除しつつ１５℃で平衡させる。まず１−の０．５重ｆ
ｔ％アンモニウムＲルオキソジサルフエートと１−の０
．５　Ｎ　ｍ　％チオ亜硫酸ナトリウムを水溶液として
前記モノマー溶液（二添加することにより重合を開始さ
せる。

９６分後に空気を吹込むことにより重合を停止させる。

一般的後処理： 濁りが現われるまで攪拌することなく反応溶液を加熱し
、そして結晶性塩化ナトリウムを激しく攪拌しながら添
加する。ポリマーが沈殿し、その固体をデカンテーショ
ンにより単離し、そしてポリマーを前述の如く水溶液か
ら更（１２回沈殿させる。

収率６５％（ポリマー１） 実施例　２〜４ 実施例１と同様にして、桟々のモノマー含量を有するコ
ポリマー′を、下記第１表（′−示すと２す、合成する
。

粥　　１　　表 １　　４．２　　０．７６　　１５　　　　　９６　　
６５．１　　９２／８．１２　　３．６　　１．２５　
　　５　　　　　６５　　　　Ｂ、９　　７３／２７５
　　３．２５　１３２　　１５　　　　２５３　　　Ｂ
５．９　　８３／１７４　　３．２２　１．６６　　１
５−５　　　２４０　　５２．１　　６９／３１中ポリ
マ一組成は溶媒としてデユーテロクロロホルムを用いプ
ロトン共鳴分ｉ法により測定した。

実施例　５ Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（４２）およびメタク
リルアミド（０，６ｙ）をモノマーとして用いて実施例
１と同様の操作を行う。３００分後に酸系な吹込むこと
により重合を停止させる。

精製後収率５２．４％（ポリマー５） 実施例　６〜８ オキシラン基を有するコポリマーの製造下記第２表に示
す反応条件下に実施例１と同様にして操作する。

６　　５．４　０．１４　　２５　　　４０　　　４７
　　５．４　０．１１　　２０　　　２４０　　　４Ｂ
　　　５．４　０．２９　　　４　　　４０　　　２２
重合は各場合（二本６〇−中で、ポリマー６およびポリ
マー７については１ｒｎｔのアンモニウムベルオキソジ
サルフエート（ｏ、ｓｘ＝％）および１ｍｌのチオ亜硫
酸ナトリウム（０−５重量％　）、またポリマー８につ
いては１−のアンモニウムベルオキソジサルフエートお
よび０．５−のチオ亜硫酸ナトリウムを用すて行った。

コポリマー６〜８の精製： アセトン１部を重合溶液２部に添加する。１２部のジエ
チルエーテルを激しく攪拌しながら添加する。ポリマー
が沈殿し、そしてエーテル相中二溶解されているモノマ
ーをデカンテーションによりとり出す。湿ったポリマー
塊を少量の７−１＝）ンに溶解させそしてジエチルエー
テル中に沈殿させる。この操作を数回繰り返し、次いで
生成物を吸引戸別しそして室温で真空下に乾燥させる。

エポキシド含量の測定： 得られるコポリマーのエボキンド含ｉは滴定法により測
定した。０．５２のコポリマーを５０−の蒸留水（：俗
解し、そして声を０．０１Ｎ水酸化ナトリウム溶液を用
いてＺＯに調整する。次いで、１５ゴの０．１３　Ｍチ
オサルフェート溶液を添加し、そして世を０．０１Ｎ塩
酸の添加１；より一定（７）に保つ（自＃嫡定）。

実施例　９ 実施例６〜８で得られたポリマーの１２サンプルを１０
０−の０．０５Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７，０）Ｅ室温で
溶解させる。その溶液Ｅ０．４ｆ（実施例６）、０．４
７１＜実施例７）または０．５　ｆ　（実施例８）のト
リプシンを添加する。次にそれら混合物を１５℃で２４
時間攪拌する。ポリマー／酵素コンジュゲートを実施例
１に記載の如くして精製する。得られる活性をポリマー
１ｙあたりの単位として測定したものを沈殿回数の関数
として第３図（二示す。

コンジュケ゛−トの酵素活性は、０．０５Ｍ）リス緩衝
液（ｐＨ７，５＋５ミリモルの塩化カルシウムを添加）
中でのＮ−ベンゾイル−Ｌ−アルギニンエチルエステル
の加水分解的開裂により、遊離トリプシンと比較して測
定する。１単位は、１分あたり１０−６モルの塩［Ｎ−
ベンゾイル−Ｌ−アルギニンエチルエステル塩屯塩を加
水分解する活性として定義される。

実施例　１０ 実施例８で得られたポリマー８の１２を１００−の２−
（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕
エタンスルホン酸緩衝液（ＨＥＰＥＳ緩衝液）中に室温
で溶解させる（ｆｌＨ７，３）。

０．８２のサーモリシンをこの溶液（二添加し、このも
のを次（二４℃で４８時間攪拌する。次に３０’に加温
し、そしてポリマー／酵素コンジュゲートを塩化ナトリ
ウムの添加；ユより沈殿させる。

この操作を、洗浄溶液の２８０　ｎｍでのＵＶ吸収が一
定となるのに十分な回数（約５回）反復する。

収率：　１．１ＥＭ’；　３０重ｇ％のサーモリシンを
含有する。

３−＜２−７９ルアクリロイル）グリ／ルーム−ロイシ
ンアミド（ＦＡＧＬＡ）の加水分解による開裂を用いて
活性を測定する。

この方法は、Ｊ、　Ｆｅｄｅｒ氏のｒ　Ｂｉ　ＯＣｈｅ
ｍｉ　ｃａｌａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ　　Ｒ５
５ｅｒｃｈ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ’。

Ｍｏ１．３２　（１９６８）、第３２６〜５６２頁に記
載されている。

操　　作： ３〜１０１１ｇのポリマーを０．０（１１１Ｍ燐酸塩緩
衝液（＄７．２）中の基！溶液（２，４５Ｘ１０−３Ｍ
）　１．５−に添加する。室温で１０分攪拌後、５０−
の１Ｎ塩改を添加する。開裂活性な逆相カラムでの）Ｉ
ＰＬＣｌ−よりＩｊｌｌｊ定する。

実施例　１１ 実施例８で得られたポリマーの０．５２を５０−の０．
０５Ｍ＠酸塩緩衝液（声７０）に溶解させる。

カンジダ・シリンドラセアからのリパーゼ０．４２をこ
の溶液に添加し、そして５℃で固定化する。このポリマ
ー／酵素コンジュゲートを実施例１の記載と同様にして
後処理する。

実施例　１２ 実施例８で得られたポリマーの０．２０８Ｓ’を５鮨の
塩化カルシウムを官有する４０−の水に溶解すせる。バ
チルス・マセランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｍａｃｅｒａｎ
ｓ　）からのシクロデキストリングリコジルトランスフ
ェラーゼ（ＥＣ２，３，１，１９＞約１６■をこの溶液
（二添加し、次いで１５℃で１８時間および５℃で５０
時間インキュベートする。

実施例１と同様（ニして７回沈殿させること（二より未
結合酵素をポリマー／岬累コンジュケ゛−トから除去す
る。

シクロデキストリングリコジルトランスフェラーゼの活
性は、次のようにして測定した＝５ｍＭ燐酸塩緩衝液（
關７．０　）および５チ彊度スターチ溶液（ポテトスタ
ーチ、Ｐａ５ｅｌｌｉ　（商標名））中の０．１１のポ
リマー／酵素コンジュゲートを用いて２５℃で開裂させ
る。

形成されたα−１β−およびγ−７クロデキストリンは
、アセトニトリル／水（６８１２）を用いるＨＰ　ＬＣ
で測定した。固定化吻は、可溶性＃素と同じα−１β−
およびγ−７クロデキストリンの生成物分布を示す。こ
のようにして得られた酵素／ポリマーコンジュゲートの
活性はポリマー１２あたり４５０単位であった。

【図面の簡単な説明】

第１図は、沈殿温度と親水性または疎水性コモノマー含
鎗との関係を示す図である。 第２図は、濁度の温度依存性を本発明のポリマーコンジ
ュゲートの一例について示す図である。 第３図は、本発明のポリマー／＃素コンジュゲートの数
例についての活性を沈殿回数の関数として示す図である
。 温度（ＱＣ） 濁度（＠／、）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）担体ポリマーとそれに化学的に結合された触媒活性
   化合物とより成る水溶性ポリマーコンジュゲートであっ
   て、温度を高めることによりおよび／または塩類の添加
   により水溶液から可逆的に沈殿可能な水溶性担体ポリマ
   ーと触媒活性化合物とより成ることを特徴とする水溶性
   ポリマーコンジュゲート。 ２）担体ポリマーが１０〜８０℃の沈殿点を有する特許
   請求の範囲第１項記載のポリマーコンジュゲート。 ３）触媒活性化合物が酵素、補酵素、抗原、抗体、金属
   、金属錯体、アフィニティ物質またはアミノ酸である特
   許請求の範囲第１項記載のポリマーコンジュゲート。 ４）担体ポリマーが親水性または疎水性モノマーの反復
   単位を含有する特許請求の範囲第１項記載のポリマーコ
   ンジュゲート。 ５）担体ポリマーが活性化されたモノマー反復単位を付
   加的に含有する特許請求の範囲第１または４項記載のポ
   リマーコンジュゲート。 ６）担体ポリマーがメチル−またはｎ−プロピルセルロ
   ースである特許請求の範囲第１項記載のポリマーコンジ
   ュゲート。 ７）担体ポリマーが、式 I ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１およびＲ＾３は同一または異なっていて
   、水素または直鎖状もしくは分枝鎖状のＣ＿１〜Ｃ＿３
   −アルキルを表わし、そしてＲ＾２は直鎖状または分枝
   鎖状のＣ＿１〜Ｃ＿３−アルキルを表わす）で示される
   化合物から選択される少くとも１種の反復モノマー単位
   および、式II、IIIおよびIV ▲数式、化学式、表等があります▼（II）▲数式、化学
   式、表等があります▼（III）▲数式、化学式、表等が
   あります▼（IV） 〔式中、 Ｒ＾１は式 I に示された意味を有し、 Ｒ＾４は疎水性基であり、そして直鎖状Ｃ＿１〜Ｃ＿６
   −アルキルを表わし、そしてＣ＿３〜Ｃ＿６−アルキル
   基である場合には分枝鎖状または環状で あつてもよく、 Ｒ＾５は活性基であり、そして３，４−エポキシシクロ
   ヘキシルであるかまたは式Ｖ ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ） （式中Ａは酸素、硫黄またはＮＨ基であり、そして Ｒ＾６は−（ＣＨ＿２）＿ｎ−Ｚ基（式中ｎは１〜６の
   数を表わし、そしてＺはアミノ、ヒドロキシル、 カルボキシル、カルボニルまたは１，２−エポキシエチ
   ルを表わす）である）で示される置換分であり、 Ｘは親水性基でありそしてＯＨ、ＮＨ＿２またはＳＨ基
   を表わし、そして、 Ｙは酸素または硫黄を表わす〕 で示される化合物から選択される少くとも１種の他の反
   復モノマー単位から構成される特許請求の範囲第１項記
   載のポリマーコンジュゲート。 ８）担体ポリマーが、式 I で示される反復モノマー単
   位、式IVで示されるもう一種の反復モノマー単位および
   、式IIおよびIIIで示される化合物から選択される０〜
   ２種類の更なる反復モノマー単位から構成される特許請
   求の範囲第７項記載のポリマーコンジュゲート。 ９）担体ポリマーが、式IIおよびIIIで示される化合物
   から選択される反復モノマー単位を含有する特許請求の
   範囲第８項記載のポリマーコンジュゲート。 １０）Ｒ＾１が水素、メチルまたはエチルを表わし、Ｒ
   ＾２がエチル、またはｎ−またはｉ−プロピルを表わし
   、 Ｒ＾３が水素、メチルまたはエチルを表わし、Ｒ＾４が
   直鎖状または分枝鎖状Ｃ＿１〜Ｃ＿４−アルキルを表わ
   し、 Ｒ＾５が３，４−エポキシシクロヘキシルまたは式Ｖ （式中Ｒ＾６は−（ＣＨ＿２）＿ｎ−Ｚ基（式中ｎ＝１
   〜３であり、そしてＺはカルボニルまたは１，２−エポ
   キシエチルを表わす）であり、そして Ａは酸素またはＮＨ基である）で示される置換分を表わ
   し、 ＸがＯＨまたはＮＨ＿２基を表わし、そしてＹが酸素を
   表わす、 特許請求の範囲第７項記載のポリマーコンジュゲート。 １１）式 I で示される化合物がＮ−イソプロピルアク
   リルアミドまたはＮ−イソプロピルメタクリルアミドで
   あり、式IIで示されるものがメタクリルアミドであり、
   式IIIで示されるものがアクリル酸メチルであり、そし
   て式IVで示されるものがグリシジルメタクリレートまた
   はグリシジルアクリレートである特許請求の範囲第７項
   記載のポリマーコンジュゲート。 １２）式II、IIIおよびIVで示される少くとも一種の化
   合物の重量割合が式 I で示されるモノマー単位の重量
   に対し０．２〜８０％である特許請求の範囲第７項記載
   のポリマーコンジュゲート。 １３）式IVで示されるモノマー単位の重量割合が式 I
   およびIIまたはIIIで示されるモノマー単位の重量に対
   し０．２〜１５％である特許請求の範囲第９項記載のポ
   リマーコンジュゲート。 １４）触媒活性化合物が式IVで示されるモノマー単位の
   活性基を介して化学的に結合される特許請求の範囲第８
   項記載のポリマーコンジュゲート。 １５）温度を高めることにより、および／または塩類の
   添加により水溶液から可逆的に沈殿可能な水溶性担体ポ
   リマーを触媒活性化合物と反応させることより成る特許
   請求の範囲第１項記載のポリマーコンジュゲートの製造
   方法。 １６）特許請求の範囲第１項記載のポリマーコンジュゲ
   ートの均一系触媒反応への使用。 １７）特許請求の範囲第１項記載のポリマーコンジュゲ
   ートの均一系バイオ触媒反応への使用。