JPS6320830B2

JPS6320830B2 -

Info

Publication number: JPS6320830B2
Application number: JP53133773A
Authority: JP
Inventors: Takeo Yoshioka; Kenichi Yamamoto; Kaoru Yamada; Yasuyuki Kato; Yasutaka Shimauchi; Tomoyuki Ishikura
Original assignee: SANRAKU CO Ltd
Current assignee: SANRAKU CO Ltd
Priority date: 1978-11-01
Filing date: 1978-11-01
Publication date: 1988-04-30
Also published as: JPS5562088A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸骨格を有する新規化合物に関し、さらに詳し
くは一般式式中、R₁は水素原子又はメチル基を表わし、
R₂は置換又は未置換の炭化水素基を表わす、で示される２−（２−アセタミドエチルチオ）−６
−エチル又はイソプロピル−１−カルバ−２−ペ
ネム−３−カルボン酸エステルのＳ−オキシドに
関する。上記式（）の化合物は、従来の文献に未載の
新規化合物であり、Ｓ−オキシド基のとなりの２
位の炭素は有機化学研究者の予想に反して活性で
あり、チオール化合物の付加反応が容易におこる
と同時に、Ｓ−オキシド基が脱離基としてすぐれ
ているため、低温で速やかに１−カルバ−２−ペ
ネム骨格を再形成する。その特性の故に該式
（）の化合物は、２−位が他の基に置換された
薬理学的に活性の優れた有用な化合物を誘導する
ための合成中間体として利用することができる。上記式（）の化合物はＳ−オキシド部分に関
して、一対の立体異性体が存在し、上記式（）
にはその両者及びそれぞれ単独の異性体が包含さ
れる。上記式（）中、R₂によつて表わされる置換
又は未置換の炭化水素基としては、好ましくは水
素添加分解により離脱させ得るエステル形成性の
炭化水素残基を意味し、該炭化水素基は飽和又は
不飽和で、直鎖状、分岐鎖状、環式のいずれのタ
イプのものであつてもよく、炭素原子数25個ま
で、好ましくは20個までのものが適しており、例
えばアルキル（例：メチル、エチル、ｎ−もしく
はiso−プロピル、ｎ−、sec−、iso−もしくは
tert−ブチル、ｎ−ペンチル、iso−アミル、ｎ
−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−
デシル、ｎ−ドデシル）；アルケニル（例：ビニ
ル、アリル、２−ブテニル、３−メチル−２−ブ
テニル）；アルキニル（例：プロパルギル、エチ
ニル）；シクロアルキル（例：シクロプロピル、
シクロブチル、シクロヘキシル、４−メチルシク
ロヘキシル）；シクロアルキル−アルキル（例：
シクロヘキシルメチル、シクロヘキシルエチ
ル）；アラルキル（例：ベンジル、ベンズヒドリ
ル、トリチル、ｐ−メチルベンジル、ｐ−tert−
ブチルベンジル）；等が包含される。中でも低級
アルキル基及び炭素原子数７〜20個、特に７〜13
個のアラルキル基が好適である。本明細書において「低級」なる語はこの語が付
された基又は化合物が炭素原子６個まで、好まし
くは３個までを有することを意味する。上記炭化水素基は酸化に対して不活性な置換基
例えば、低級アルコキシ基、低級アルキルチオ
基、ニトロ基等の少なくとも１個を有することが
でき、かかる置換基を有する炭化水素基の具体例
には、メトキシメチル、エトキシメチル；メチル
チオメチル、エチルチオメチル、イソプロピルチ
オメチル；ｐ−ニトロベンジル、ｏ−ニトロベン
ジル、ｐ−ブロモベンジル、ｐ−メトキシベンジ
ル、ｏ−メトキシベンジルなどが挙げられる。かくして、本発明により提供される式（）の
化合物中、好適な群には、R₂が低級アルキル基
又は置換又は未置換の炭素原子数７〜20個、好ま
しくは７〜13個のアラルキル基を表わす場合の式
（）の化合物が包含される。式（）の化合物の代表例を例示すれば次のと
おりである：２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸−ベンジルエステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸ベンズヒドリルエステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸−（ｐ−ニトロベンジル）エステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸−（ｏ−ニトロベンジル）エステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸−メチルエステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸−トリチルエステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−イソプロピル−１−カルバ−２−ペネム−３−
カルボン酸−ベンジルエステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−イソプロピル−１−カルバ−２−ペネム−３−
カルボン酸−（ｐ−ニトロベンジル）エステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−イソプロピル−１−カルバ−２−ペネム−３−
カルボン酸−メチルエステル；２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−イソプロピル−１−カルバ−２−ペネム−３−
カルボン酸−トリチルエステル、など。また、本発明に従えば、R₁がメチル基であり
且つR₂は水素原子である場合の前記式（）の
化合物に相当する下記式で示される化合物又はその塩が提供される。上記式（）の化合物またはその塩は従来の文
献に未載の新規化合物であり、それ自体各種病原
菌に対する優れた抗菌活性を示すと共に、β−ラ
クタマーゼ生産性耐性菌に対する既知のβ−ラク
タム系抗生物質の抗菌力を増進する能力を有し、
抗菌剤又は抗菌力増進剤の有効成分として、細菌
感染症の予防、治療及び／または処置のために使
用することができる。また、上記式（）の化合物またはその塩は分
子中のＳ−オキシドの活性も利用して化学的に修
飾して、さらに抗菌活性に優れた有用性の高い誘
導体を合成する際の中間体としても使用すること
が可能である。上記式（）の化合物にはＳ−オキシド部分に
関し一対の立体異性体が存在する。式（）の化合物は遊離酸形又はその塩形のい
ずれの形態で存在することもできるが、一般に塩
形の方が安定性が高いので、医薬用途や他の誘導
体へ転換する場合の合成中間体として使用する場
合、或いは精製工程に付する場合等においては塩
形で用いる方が好適である。式（）の化合物の塩の例としては、例えば、
ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩の如きア
ルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩の
如きアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩の如き
その他の金属塩；アンモニウム塩；モノエチルア
ミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、モノ
エタノールアミン、ジエタノールアミン等の如き
第一級、第二級または第三級アミンによる塩；ベ
ンザチン塩、プロカイン塩等の他の有機塩基によ
る塩、などが包含され、中でも製薬学的に許容し
うる塩が好ましく、就中、ナトリウム塩、カリウ
ム塩などのアルカリ金属塩が好適である。上記式（）及び（）の化合物（Ｓ−オキシ
ド）は、本発明に従えば、一般式式中、R₁は前記の意味を有し、R₂′は水素原子
又は基R₂（ここで、R₂は前記の意味を有する）を
表わす、ただし、R₁が水素原子である場合には
R₂′は水素原子以外の基を表わすものとする、で示される化合物又はR₂′が水素原子である場合
の式（）の化合物の塩をＳ−酸化することによ
り製造することができる。上記式（）の化合物又はR₂′が水素原子であ
る場合の式（）の化合物またはその塩のＳ−酸
化は、それ自体公知の方法、例えばペニシリン
系、セフアロスポリン系などの硫黄含有β−ラク
タム系抗生物質のＳ−酸化に際して屡々利用され
る方法に従つて行なうことができる。例えば、前記式（）の化合物またはその塩
は、１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸骨
格に実質的に作用しない温和な酸化剤、即ち、過
安息香酸、オゾン、フエニルジクロロ・イオダイ
ド、過酸化水素、二酸化セレン、又はメタ過ヨー
ド酸ナトリウムなどと反応せしめられる。かかる
温和な酸化剤としては有機過酸が好適であり、特
に過安息香酸及びｍ−クロロ過安息香酸が挙げら
れ、最も好ましくはｍ−クロロ過安息香酸のよう
な置換過安息香酸が作用される。 R₂′が水素原子である場合の式（）の化合物
またはその塩と酸化剤との反応は、通常不活性極
性溶媒、例えば水；メタノール、エタノールなど
のアルコール類、酢酸、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメ
チルホルムアミド（DMF）、ジメチルスルホキシ
ド（DMSO）、ヘキサメチルホスホトリアミド
（HMPA）等の溶媒中で、そしてR₂′が置換又は
未置換の炭化水素である場合の式（）の化合物
と酸化剤との反応は、不活性溶媒、例えば塩化メ
チレン、クロロホルム、四塩化炭素等の溶媒中
で、室温またはそれ以下、好ましくは約−30゜〜
約20℃程度の温和な温度条件下に行なうのが有利
である。該反応はかかる条件下で通常３分間〜３
時間の間に終了せしめることができる。 R₂′が水素原子である場合の式（）の化合物
は塩の形で使用することが望ましく、その塩とし
ては式（）の化合物の塩について前述したもの
が挙げられ、中でもナトリウム塩が好適である。式（）の化合物またはその塩の酸化に使用さ
れる酸化剤の使用量は、酸化剤の種類や反応条件
等に応じて広範に変えることができるが、一般に
は、式（）の化合物又はその塩１モルに対して
0.3〜1.8モル当量、好ましくは0.7〜1.3モル当量
の範囲内が有用である。反応終了後、Ｓ−酸化生成物である前記式
（）の化合物または式（）の化合物もしくは
その塩は、それ自体公知の種々の方法に従つて単
離精製することができ、通常、カルボン酸型抗性
物質の単離精製に際して屡々作用される方法によ
り反応液から単離することができる。例えば、反
応終了後の反応液から固形分を去し、液にリ
ン酸緩衝液の如き緩衝液を添加して、該液のPH
が酸性側に傾かないよう保持しながら、該液
を、例えば活性炭、アンバーライトXAD−２（ロ
ーム・アンド・ハース社製）、ダイヤ・イオンPH
−20（三菱化成社製）などによる吸着とメタノー
ル／水、アセトン／水などによる溶出との組合
せ；ダウエツクス1X2（ダウケミカル社製）、ダウ
エツクス50X2（ダウケミカル社製）、QAE−セフ
アデツクスＡ−25（フアルマシア社製）などのイ
オン交換樹脂による吸着および溶出；セフアデツ
クスＧ−10（フアルマシア社製）、バイオゲルＰ−
２（バイオ・ラツド社製）などによるゲル過；
セルローズ、アビセルSF（アメリカン・ビスコー
ス社製）、DEAE−セルローズワツトマンDE−
32（ワツトマン社製）、DEAE−セフアデツクスＡ
−25（フアルマシア社製）、シリカゲル、アルミナ
などによるカラム法または薄層法のクロマトグラ
フイー；アセトンなどの溶剤添加による強制沈殿
法；凍結乾燥法；などをそれぞれ単独で或いは適
宜組合せて、さらに必要に応じて反復使用するこ
とにより、これら処理に付し、前記式（）の化
合物または式（）の化合物もしくはその塩を単
離することができる。かくして得られる遊離酸の式（）の化合物
は、それ自体公知の方法に従い、例えば炭酸水素
ナトリウム、りん酸ナトリウム、りん酸二カリウ
ム、２−メチルヘキサン酸カリウム、アンモニア
などの無機塩基、モノエチルアミン、ジメチルア
ミン、トリエチルアミン、モノエタノールアミ
ン、ジエタノールアミン、ベンザチン、プロカイ
ンなどの有機塩基で処理することにより、塩に変
えることができる。なお、R₂′が置換又は未置換の炭化水素である
場合の式（）の化合物は、例えば、反応終了後
水と混和しない溶媒；例えば塩化メチレン、ベン
ゼン、トルエンか又は酢酸エチルの如きエステル
類を加えて希釈し、PH8.7リン酸緩衝液又は炭酸
水素ナトリウム溶液で、次いでPH6.8リン酸緩衝
液で洗浄する。該溶媒層を乾燥し、減圧溜去した
後、バイオビーズＳ−シリーズのカラム（バイオ
ラツド社製）によるゲル過、次いで必要ならば
シリカゲルカラムによるクロマトグラフイーを組
み合せて処理し、式（）化合物を単離すること
ができる。上記方法で出発物質として使用しうる下記式式中、R₁及びR₂は前記の意味を有する、で示されるエステル誘導体は下記式式中、R₁は前記の意味を有する、で示される抗生物質PS−５もしくはPS−６又は
そのエステル形成性官能誘導体を、それ自体公知
のエステル化法、例えばペニシリン系、セフアロ
スポリン系等のカルボキシル基含有β−ラクタム
抗生物質のエステル化の際に屡々利用されている
方法により、エステル化することにより容易に製
造することができる。上記式（）において、R₁が水素原子である
場合の化合物は、本発明者らが先に見い出し、抗
出物質PS−５と命名した抗出物質であり、抗出
物質PS−５、又はその塩の生産方法及び精製単
離方法については、J.Antibiotics、31、480〜482
（1978）により既に公知である。一方、R₁がメチ
ル基である場合の化合物もまた本発明者らが先に
見い出し、抗出物質PS−６と命名した新規な抗
出物質であり、それは例えば土壌より分離される
抗出物質PS−６生産菌によつて生産される。そ
の代表的な生産菌としてはストレプトミセス・エ
スピーA271（微工研菌寄第3984号）が挙げられ
る。ストレプトミセス・エスピーA271の菌学的
特徴、並びに抗出物質PS−６の発酵生産方法及
び精製単離方法等については、本発明者らが先に
出願した特願昭52−121857号出願明細書中に詳細
に開示されており、本明細書においてはこれらの
引用を以つて説明に代える。上記式（）の化合
物のエステル化は、該式（）の化合物又はその
エステル形成性官能誘導体を式 R₂−Ｚ（）式中、R₂は前記の意味を有し、Ｚはハロゲン
原子、水酸基又はアルキル−もしくはアリールス
ルホニルオキシ基を表わす、の化合物と反応せしめることからなる方法によ
り、製造することができる。上記式（）の化合物のエステル形成性官能誘
導体としては、式（）のカルボン酸の有機又は
無機塩基との塩、酸ハライド、活性エステル、混
合酸無水物等が挙げられる。式（）の化合物又はそのエステル形成性官能
誘導体を式（）の化合物と反応させる場合、出
発物質として使用する式（）の化合物又はその
エステル形成性官能誘導体の種類によつて、反応
相手となる式（）の化合物のタイプ及び／又は
反応条件を使い分けることが有利であり、以下に
その代表的な組合せ及び反応条件について説明す
るが、本発明のエステル化法はこれらに限られる
ものではなく、式（）の化合物又はそのエステ
ル形成性官能誘導体と式（）の化合物との任意
の組合せによるエステル化も可能であることを理
解すべきである。 (i) 式（）の化合物又はその有機塩基、アルカ
リ金属もしくはアルカリ土類金属塩の、式R₂
−X₁（ただし、X₁はハロゲン原子、好ましくは
塩素、臭素又はヨウ素原子又はアルキル−もし
くはアリールスルホニルオキシ基、好適にはメ
チルオキシもしくはトシルオキシ基を表わし、
R₂は前記の意味を有する）の活性化合物によ
るエステル化：本エステル化は、例えば、ジメチルホルムア
ミド、ヘキサメチルホスホトリアミド、ジメチ
ルスルホキシド、アセトニトリル、テトラヒド
ロフラン、アセトン、ジオキサン等の如き不活
性溶媒中、通常約−50℃乃至反応混合物の還流
温度、好ましくは約０℃乃至室温において行な
うのが有利である。遊離の式（）のカルボン酸を出発物質とし
て使用する場合には、反応に際して、有機塩基
或いはアルカリ金属又はアルカリ土類金属の水
酸化物、炭酸塩又は重炭酸塩を、該式（）の
カルボン酸に対してほぼ当量乃至過剰量を加え
ることが望ましい。また、式（）の化合物の有機塩基、アルカ
リ金属又はアルカリ土類金属塩としては、特に
トリエチルアミン塩、ピリジン塩、ナトリウム
塩、カリウム塩、リチウム塩、マグネシウム塩
及びカルシウム塩が挙げられる。式（）の化合物は一般に酸性条件下で不安
定となる傾向があるので、上記エステル化反応
中、反応系が酸性条件となるのを防ぐため、反
応系にトリエチルアミン、ピリジン、重炭酸ナ
トリウム等の如き有機又は無機の塩基を存在さ
せておくことが望ましい。式（）の化合物又はその塩に対する上記活
性化合物の使用割合は臨界的ではないが、一般
に、式（）の化合物又はその塩１モルに対し
て、１〜10モル、好適には１〜５モルの量で使
用することができる。上記条件下に本エステル化は大体数分乃至十
数時間の間で終らせることができる。 (ii) 式（）の化合物の縮合剤の存在下における
式R₂−OH（ただし、R₂は前記の意味を有する）
のアルコールによるエステル化：本エステル化反応は、例えば、ジメチルホル
ムアミド、ヘキサメチルホスフオトリアミド、
アセトン、ジオキサン、クロロホルム、ジクロ
ロメタン等の不活性溶媒中、約−60℃乃至室温
好ましくは−50℃乃至０℃において行なうこと
ができる。使用し得る縮合剤としては、ジシクロヘキシ
ルカルボジイミド、ジエチルカルボジイミド、
Ｎ，N′−カルボニルジ（２−メチルイミダゾ
ール）等が挙げられ、これら縮合剤は式（）
の化合物に対してほぼ当モル乃至わずかに過剰
モル量で使用することができる。式（）の化合物に対する該アルコールの使
用割合は臨界的ではないが一般に、式（）の
化合物に対して、アルコールを大過剰量で使用
する。 (iii) 式（）の化合物の活性エステルの式R₂−
X₁（ただし、R₂及びX₁は前記の意味を有する）
の活性化合物によるエステル化；式（）の化合物の活性エステルとは、エス
テルが不安定で求電子試薬に対してカルボン酸
塩（殊にナトリウム塩）と同様な反応挙動を示
すエステルをいい、本発明において好適には構
造式式中、R₁は前記の意味を有し、R₅、R₆及び
R₇はそれぞれ独立に低級アルキル基を表わす、で示されるシリルエステル、特にトリメチルシ
リルエステル（R₅、R₆及びR₇＝CH₃）及びジ
メチル−tert−ブチルエステル（R₅及びR₆＝
CH₃；R₇＝tert−C₄H₉）が挙げられる。かかるシリルエステルは例えば、式（）の
化合物の有機塩基、アルカリ金属又はアルカリ
土類金属塩を、テトラヒドロフラン、ジオキサ
ン、ジメチルホルムアミド、ヘキサメチルフオ
スフオトリアミド等の不活性溶媒中で、約−50
℃乃至約50℃、好ましくは約−10℃乃至約30℃
の温度にて、トリアルキルハロシラン及び必要
に応じてヘキサメチルジシラザンの如き反応促
進剤を加え数分乃至数時間撹拌反応させること
により容易に製造することができる。上記活性エステルと活性化合物の反応は、例
えば、ジメチルホルムアミド、ヘキサメチルホ
スホトリアミド、ジメチルスルホキシド、アセ
トニトリル、テトラヒドロフラン、アセトン、
ジオキサン等の如き不活性溶媒中、通常約−50
℃乃至反応混合物の還流温度、好ましくは約０
℃乃至室温において行なうのが有利である。その際、式（）の化合物の活性エステルも
また酸性条件下で不安定となる傾向があるの
で、上記エステル化反応中、反応系が酸性条件
となるのを防ぐため、反応系にトリエチルアミ
ン、ピリジン、重炭酸ナトリウム等の如き有機
又は無機の塩基を存在させておくことが望まし
い。式（）の化合物の活性エステルに対する上
記活性化合物の使用割合は臨界的ではないが、
一般に、式（）の化合物の活性エステル１モ
ルに対して、１〜10モル、好適には１〜５モル
の量で使用することができる。上記条件下に本エステル化は大体数分乃至十
数時間の間で終らせることができる。 (iv) 式（）の化合物の混合酸無水物と式R₂−
OH（ただし、R₂は前記の意味を有する）によ
るエステル化：式（）の化合物の混合酸無水物は、下記構
造式式中、R₁は前記の意味を有し、R₃はアルキ
ル基、アルケニル基、アリール基又はアラルキ
ル基を表わす、によつて示され、前記式（）の化合物又はそ
の金属塩（例えばアルカリ金属塩又はアルカリ
土類金属塩）を式 X₂COOR₈ 式中、X₂はハロゲン原子であり、R₈は上記
の意味を有する、のハロギ酸エステルと反応させることにより製
造することができる。例えば、式（）の化合
物又はそのナトリウム、カリウム、リチウムも
しくはカルシウム塩を、ジメチルホルムアミ
ド、ヘキサメチルホスホトリアミド、ジメチル
スルホキシド、テトラヒドロフラン、アセトニ
トリルなどの非プロトン性溶媒中、必要に応じ
て、トリエチルアミン、ピリジン等の塩基の存
在下に、クロルギ酸エチル、クロルギ酸ブチル
などと反応させることにより、混合酸無水物と
することができる。このようにして製造される混合酸無水物は、
そのままで或いは反応混合物から一旦分離した
後、上記した如き非プロトン性溶媒中にて、モ
ル的に過剰量（該混合酸無水物１モルに対して
通常１〜50モル、好ましくは１〜10モルの）ア
ルコールと反応させる。反応温度は臨界的ではないが、一般に室温以
下の温度で充分であり、通常約−30℃乃至室温
が使用される。約10℃以下の冷却条件が有利で
ある。かくして反応は数分乃至数十時間で終了させ
ることができる。本発明の別の態様によれば、式（）の化合
物と、式 R₉＝N₂ （）式中、R₉は、１位の炭素原子が第一級又は
第二級炭素原子である場合の前記基R₂から、
該１位の炭素原子上に存在する水素原子１個を
除いた後に得られる２価の基を表わす、で示されるジアゾ化合物と反応させることによ
つても製造することができる。式（）の化合物と式（）のジアゾ化合物
との反応は、不活性溶媒、例えばジエチルエー
テル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエ
ーテル類；酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステ
ル類；ジクロロメタン、クロロホルム等のハロ
ゲン化炭化水素；メタノール、エタノール、ブ
タノール等のアルコール類；アセトニトリル等
の中で行なうことができ、その際の反応温度は
臨界的ではないが、一般に約−60〜約30℃、好
ましくは約−30〜約０℃の範囲内が有利であ
る。使用し得る式（）のジアゾ化合物の代表例
には、ジアゾメタン、ジアゾエタンの如きジア
ゾアルカン、及びフエニルジアゾメタン、ジフ
エニルジアゾメタンの如きジアゾアラルカンが
挙げられる。かかるジアゾ化合物の使用量は臨
界的ではないが、一般に式（）の化合物１モ
ルに対して、１〜10モル、特に１〜３モルの量
で使用するのが望ましい。かくして反応は通常数分乃至数時間の間に終
らせることができる。以上述べた本発明の方法により製造されるエス
テル誘導体のエステル化反応混合物からの分離及
び単離精製は常法に従つて行なうことができる。
例えば、反応混合物を水と非混和性の溶媒例えば
酢酸エチル、ベンゼン等で希釈し、PH６乃至PH
7.5のリン酸緩衝液で洗浄し、乾燥した後、濃縮
乾固し、次いでバイオ−ビーズ（Bio−Beads）
Ｓ−X₃（バイオ・ラツド社製）、セフアデツクス
LH−20（フアルマシア社製）等を用いるゲルク
ロマトグラフイー、シルカゲル、アルミナ、フロ
リジル等を用いる吸着クロマトグラフイーなどを
適宜組合せて精製することにより、目的とするエ
ステル誘導体を単離精製された形で回収すること
ができる。本発明により提供される前記式（）の化合物
は、前述したとおり、２−位に非常に活性の高い
（２−アセトアミドエチルスルフイニル）基を有
し、この基はチオール化合物の如き求核試薬と接
触すると極めて容易に基の交換反応を起し、他の
基と置きかわつた誘導体を生成するという、極め
て特異な性質を有することが判明した。しかして、式（）の化合物は、式（）の２
−位が他の基で置きかわつた誘導体へ導びくため
の中間体として工業上非常に有用な化合物であ
る。例えば、式（）の化合物は、塩基の存在下
に下記式 R₃−SH （）式中、R₃は低級アルキル基を表わす、で示されるチオール化合物と反応させるか、或い
は式（）の化合物の反応性誘導体と反応させる
ことによつて、下記式式中、R₁、R₂及びR₃は前記の意味を有する、の化合物にすることができ、次いでこれを水素添
加分解に付することにより、下記式式中、R₁及びR₃は前記の意味を有する、で示される化合物又はその塩に導びくことができ
る。本化合物又はその塩は優れた抗菌活性を有す
る。例えば下記式及びで示される化合物のナトリウム塩の抗菌活性は次
のとおりである：【表】【表】上記の抗菌活性は次の如くして測定したもので
ある。すなわち、ブレイン・ハート・インフユー
ジヨン培地“栄研”〔栄研化学(株)製〕を用いた液
体希釈検定法で、上記式（−ｃ）又は（−
ｄ）の化合物の黄色ブドー球菌FDA209P株
（Staphylococcus aureus FDA 209P）およびア
ルカリゲネス・フエカーリスＢ−326
（Alcaligenes faecalis Ｂ−326）などに対する最
小発育阻止濃度を測定した。検体を少量のメタノ
ールに溶解し、それをPH7.0ブレイン・ハート・
インフユージヨン培地“栄研”〔栄研化学(株)製〕
で希釈して、該エステル誘導体の濃度が100μ
ｇ／ml〜50μｇ／mlの範囲内に入るように、また
メタノールの濃度が10％以下になるようにした。
これを同じ培地で倍数希釈して、該化合物の希釈
系列を調整した。この希釈系列に、上記と同じブ
レイン・ハート・インフユージヨン培地に28℃で
18時間振盪培養して得た上記表に示す被験菌の種
母液を、接種後の菌数が大略１×10⁵／mlになる
ように接種し、35℃で20時間静置培養し、しかる
後生育の有無を観察し、生育の認められない最低
の濃度をその菌に対するその化合物の最小発育阻
止濃度とする。式（）の化合物と式（）のチオール化合物
との反応は、通常Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
（DMF）、テトラヒドロフラン（THF）、ジオキ
サン、ヘキサメチルホスホトリアミド
（HMPA）、グライム等の溶媒中、特にDMFで、
約−50℃またはそれ以下、好ましくは約−65゜〜
約−70℃という低温条件下に行なうのが有利であ
る。該反応はかかる条件下で通常20分間〜40分間
の間に終了せしめることができる。その際、式（）のチオール化合物をそのまま
使用する場合には、塩基の存在下で該反応を行な
うことが望ましく、使用可能な塩基としては、例
えば水素化ナトリウム、水素化カリウム、ナトリ
ウムアミド、カリウムアミド、水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム、ナトリウムエトキシド、ナ
トリウムメトキシド、カリウムブトキシド、等が
包含され、これら塩基は該チオール化合物１モル
に対して少なくとも0.9当量、好ましくはは1.0〜
1.2当量の割合で使用することが有利である。また、上記反応においては、塩基を存在させる
代りに、式（）のチオール化合物の反応性誘導
体を用いてもよく、かかる反応性誘導体の例とし
ては、ナトリウムエタンチオレート、ナトリウム
ブタンチオレート、カリウムエタンチオレート、
カリウムブタンチオレート等を挙げることができ
る。式（）のチオール化合物又はその反応性誘導
体の使用量は臨界的ではないが、一般には、式
（）の化合物１モルに対して少なくとも1.0モ
ル、好ましくは1.1〜1.5モルの割合で用いるのが
有利である。かくして、上記式（−ａ）の化合物が得ら
れ、このものは必要に応じてR₂′が置換又は未置
換の炭化水素基を表わす場合の前記式（）の化
合物について前述した如くして単離精製した後、
水素添加分解に付することにより、基R₂を離脱
せしめることができ、これによつて有用な上記式
（−ｂ）の化合物又はその塩に変えることがで
きる。式（−ａ）の化合物の水素添加分解は、それ
自体公知の方法に従つて行なうことができ、水素
添加分解は例えば、水；ジオキサン、テトラヒド
ロフラン等のエーテル類等の溶媒中で、PH８以上
の緩衝液の併用下に、酸化白金、パラジウム−炭
素、ラネーニツケル等の水添触媒の存在下で水素
で処理することにより行なうことができる。かくて得られる前記式（−ｂ）の化合物、殊
に式（−ｃ）又は（−ｄ）の化合物は、前述
した如き方法で、反応混合物から通常塩の形で単
離することができる。以上述べた式（−ｂ）の化合物またはその塩
並びに前記式（）の化合物またはその塩は、前
述したとおり、抗菌活性を示し、グラム陽性及び
グラム陰性細菌による感染症の予防、治療及び／
又は処置のための抗菌剤の活性成分として、人間
のみならず、人間以外の動物例えば哺乳動物、家
禽類、魚類等に対する細菌感染症の予防、治療、
処置等のために有効に使用することができる。前記式（−ｂ）または（）の化合物または
その塩は、経口的、局所的又は非経口的（静脈
内、筋肉内、腹腔内、など）に投与することがで
き、これらの投与方法に応じて、通常行なわれて
いる如く種々の薬剤形態に製剤して使用すること
ができる。例えば、本発明の式（）の化合物ま
たはその塩は製薬学的に許容し得る担体材料、希
釈剤などと共に、固体形態（例えば錠剤、カプセ
ル剤、粉剤、顆粒剤、糖衣錠、トローチ、粉末、
スプレー剤、坐薬など）、半固体形態（例えば軟
膏、クリーム、半固体状カプセル剤など）、或い
は液体形態（例えば、液剤、乳剤、懸濁剤、ロー
シヨン、シロツプ剤、注射剤、液体スプレーな
ど）に製剤することができる。前記式（−ｂ）又は（）の化合物またはそ
の塩を含有する単位投与剤型は、液体、半固体、
固体の如何を問わず、一般に0.1〜99重量％、好
ましくは10〜60重量％の活性成分を含有すること
ができる。次に後記実施例において用いる２−（アセタミ
ドエチルチオ）−６−イソプロピル−１−カルバ
−２−ペネム−３−カルボン酸ナトリウム塩
（PS−６・ナトリウム塩）の発酵生産例を参考例
として掲げる。 PS−６・ナトリウム塩の生産参考例：ストレプトミセス・エスピーA271
（Streptomyceg sp.A271）のフラスコ種母培養
液をつくり、これの100mlを15のSE−４培地を
入れた30容ジヤーフアメンタ−に接種した。28
℃にて200r.p.m.撹拌及び7.5／分通気で、24時
間培養し、この培養液１を100のAGB−42培
地（Ｌ−バリン0.5％を菌接種前に添加）を入れ
た200容、ステンレスタンク発酵槽に接種し、
28℃にて100rpm撹拌及び50／分通気で72時間
通気撹拌した。培養液の遠心上澄の抗菌力価は
450CCU／mlであつた。この培養液に３％（Ｗ／Ｖ）量のトプコパーラ
イト〔東興パーライト(株)製〕No.84を添加し、フイ
ルタープレスで過して、60の液をえた（全
抗菌活性25.5×10⁶CCU）。これ以後の操作は６℃の冷却条件下で行つた。先ず、液をダイヤイオンPA−306（三菱化成
社製）のイオン交換樹脂1.5を充填したカラム
中を通過させて脱色した（通過液中の全抗菌活性
12.6×10⁶CCU；収率49％）。この通過液を、ダイヤイオンHP−20（三菱化
成社製）３を充填したカラムに吸着させ、これ
を濃度が０から80％までの直線的に増加するアセ
トン水溶液合計10でグラジエント溶出法で溶出
し、１区分を500mlとして、その溶出液を分画し
た。各区分を下降法ペーパークロマトグラフイー
〔アセトニトリル120ml、PH7.5の1/10Ｍトリス
（ヒドロキシメチル）アミノメタン−塩酸緩衝液
30mlおよびPH7.5の1/10Ｍエチレンジアミン四酢
酸ナトリウム塩水溶液１mlから成る混合溶媒で展
開〕とビオオートグラフイーで分析し、区分No.３
からNo.５と区分No.６からNo.８の２活性区分を集め
た。前者は主として抗生物質PS−５を含有した。
後者は、抗生物質PS−６と抗生物質PS−５の混
合物であつた（後者の全抗菌活性は1.75×
10⁶CCU；収率6.8％）。但し、この中の抗生物質
PS−６の含有量は、全抗菌活性のおよそ10分の
１である。更に、この後者の分画をダイヤイオンPA−306
（三菱化成社製）を充填したカラム（3.0cm／30
cm）に吸着させ、これを濃度が０から4.5M／100
りん酸緩衝液PH8.0で緩衝したQAE−セフアデツ
クス（フアルマシア社製）（2.4cmφ×22cm）カラ
ムに吸着させ、食塩濃度が０から0.4Mまで直線
的に増加するＭ×100りん酸緩衝液で溶出し、１
区分を10ｇとしてその溶出液を分画した。各区分
を100倍希釈し、紫外線吸収およびビオアツセイ
で検出して、活性区分を集めた。更に混在する抗生物質PS−５を完全に除去す
るため、この活性区分をダイヤイオンHP−
20AG（三菱化成社製）を充填したカラム（1.2cm
φ×40cm）に吸着させ、濃度を10％から75％まで
直線的に増加させたメタノール水溶液合計300ml
で溶出し、１区分４ｇとして溶出液を分画した。
各区分を前述の下降法ペーパークロマトグラフイ
ーとビオオートグラフイーとで分析して、抗生物
質PS−５を含有する区分No.25から30％までの直
線的に増加する食塩水溶液合計２で溶出し、１
区分を20ｇとしてその溶出液を分画した。ビオア
ツセイで検出して活性区分を集めた（全抗菌活性
0.46×10⁶CCU；収率1.8％）。この活性区分をダ
イヤイオンHP−20を充填したカラム（1.7cmφ×
20cm）に吸着させ、10％アセトン水溶液で溶出し
た。溶出液を減圧下濃縮して、アセトンを留去し
た後、これを予かじめの活性区分と抗生物質PS
−６を含有する区分33から40の活性区分とを集め
た。抗生物質PS−６活性区分を濃縮し、メタノ
ールを留去した後、凍結乾燥した。得られた凍結
乾燥粉末を、更に精製するため、PH8.0、Ｍ／100
りん酸緩衝液１mlに溶解してセフアデツクスＧ−
10（フアルマシア社製）を充填したカラム（1.2cm
φ×80cm）にチヤージし、同じりん酸緩衝液にて
展開した。活性区分を集め、希苛性ソーダ溶液で
PHを8.3に調整した後、ダイヤイオンHP−20（三
菱化成社製）カラム（1.2cmφ×20cm）に吸着さ
せ、10％アセトン水溶液で溶出して脱塩した。こ
の活性区分を凍結乾燥して白色の凍結乾燥粉末
2.4mgを得た。同様な方法で製造をくりかえした。種母培地（SE−４）の組成ビーフエキストラクト（デイフコ）
0.3％（Ｗ／Ｖ）バクトートリプトン（デイフコ）
0.5 〃グルコース 0.1 〃可溶性でんぷん 2.4 〃酵母エキス 0.5 〃炭酸カルシウム 0.4 〃脱脂大豆粉 0.5 〃 PH7.5（殺菌前）生産培地（AGB−42）の組成マルトース 5.0％（Ｗ／Ｖ）可溶性でんぷん 1.0 〃グリセリン 0.3 〃乾燥酵母 3.0 〃食塩 0.5 〃りん酸二カリウム 0.05 〃硫酸マグネシウム（MgSO₄・7H₂O）
0.05 〃炭酸カルシウム（CaCO₃） 0.3 〃塩化コバルト（CoCl₂・6H₂O）
0.00013 〃 PH7.0（殺菌前）次に実施例を掲げて本発明をさらに説明する。実施例１２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−エチル
−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸・
ベンジルエステルの製造 J.Antibiotics、31、480〜482（1978）に記載し
た方法で製造した２−（２−アセタミドエチルチ
オ）−６−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３
−カルボン酸ナトリウム塩（以下PS−５ナトリ
ウム塩と略記する）1204mg（純度82％）の乾燥ジ
メチルホルムアミド（DMF）200ml溶液にトリエ
チルアミン4.75mlを加え、窒素気流中、−70℃に
て撹拌しながらベンジルブロマイド3.68mlを加え
た。室温にもどして３時間撹拌した後、反応混合
物を1000mlのベンゼンに注ぎ、0.1M、PH6.8リン
酸緩衝液300mlにて３回洗浄後、溶媒層を無水硫
酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を30℃以下にて減
圧留去後、少量のベンゼンに溶解し、ベンゼンを
展開剤としてバイオ・ビースＳ−X3を用いたカ
ラムクロマトグラフイー（120ｇ、3.2×75.0cm）
に付し、次いで各溶出フラクシヨンを薄層クロマ
トグラフイー（以下TLCと略記する）で確認し
て目的物含有フラクシヨンを集め、減圧下、溶媒
を溜去して無色粉末1081mgを得た（収率89.95
％）。〔α〕²¹ _D＋19.97゜（Ｃ0.33、CHCl₃）； UVλ^MeOH _naxｎｍ（ε）：318（11000）； IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3430（−CONH−）、1770（β−
lactam CO）、1665（ester CO、amide ）、
1510（amide ）； NMRδppm（CDCl₃）： 1.04（3H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、−CH₂ CH₃ ）、 1.70〜2.00（2H、ｍ〜、−CH₂ CH₃）、 1.96（3H、Ｓ〜、【式】）、 2.80〜3.60（7H、ｍ〜、3X−CH₂−、−CH−）、 3.94（1H、ｄｔ〜、Ｊ＝８Hz、Ｊ＝３Hz、Ｃ−５
Ｈ）、 5.21（1H、ｄ〜、Ｊ＝12Hz、−ＣＨ、Ｈ−Ar）、 5.38（1H、ｄ〜、Ｊ＝12Hz、−CH、Ｈ−Ar）、 5.90〜6.10（1H、ｂｒ〜、−ＮＨ）、 7.34（5H、ｓ〜−like Ar−Ｈ）； Mass ｍ／ｅ；388（M⁺）；実施例２２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−エチル
−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸−
ベンズヒドリルエステルの製造 PS−５ナトリウム塩100mgを乾燥DMF20mgに
溶解し、撹拌しながら、乾燥トリエチルアミン
143.7μ（PS−５ナトリウム塩に対し3.3倍モル）
を加え、−30℃に冷却した。次に再結晶して得た
新鮮なベンズヒドリルブロマイド231.5mg（PS−
５ナトリウム塩に対し３倍モル）を乾燥DMF10
mlに溶解した溶液を同温度で滴加した。滴加終了
後、反応温度を５℃にあげ一夜撹拌し、反応液を
200mlのベンゼンで希釈した後0.1M、PH6.8リン
酸緩衝液100mlで２回洗浄し、ベンゼン層を無水
硫酸ナトリウムで乾燥した。次いで溶媒を減圧下
留去し、バイオビーズＳ−X3カラム（20ｇ、1.2
×90cm）で展開精製し、表題の化合物11mgを得た
（収率11.7％）。〔α〕²¹ _D＋2.55゜（Ｃ0.33、CHCl₃）。 UVλ^MeOH _naxｎｍ（ε）：320（11219）。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3450（−CONH−）、1775（β−
lactam CO）、1675（ester−CO、amide ）、
1510（amide ）。 NMRδppm（CDCl₃）：1.06（3H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、
CH₃CH₂−）、1.94（3H、Ｓ〜、CH₃ CONH−）、
3.94（1H、ｄｔ〜、Ｊ＝９Hz、Ｊ＝３Hz、Ｃ−５
Ｈ）、5.92（1H、ｂｒ〜、NH）、6.90（1H、Ｓ〜、−
CHAr₂）、7.32（10H、Ｓ〜−like、−CHAr₂ ）。 Mass（ｍ／ｅ）：464（M⁺）、394（M⁺−EtCH＝Ｃ
＝Ｏ）。実施例３２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−エチル
−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸−
（ｐ−ニトロベンジル）エステルの製造 PS−５ナトリウム塩275mgを乾燥DMF20mlに
溶解し、室温にて撹拌しながらトリエチルアミン
197μを加えた。十分後、ｐ−ニトロベンジル
ブロマイド279mgを乾燥DMF5mlに溶かした溶液
を撹拌しながら５℃にて加え、同温度で３時間撹
拌した。反応終了後、反応混合物をベンゼン150
mlに注ぎ、0.1M、PH6.8の燐酸緩衝液100mlにて
３回洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減
圧下溶媒を溜去し、残留物をシリカゲル30ｇ
（1.8×30cm）を用いてカラムクロマトグラフイー
に付し、ベンゼン−アセトン（３：１）溶出区分
の溶媒溜去残留物として黄色結晶を得た。これを
ベンゼンより再結晶するとmp.163〜165℃の黄色
針状晶240mgを得た。〔α〕²¹ _D＋70.7゜（Ｃ１、CHCl₃）。 UVλ^CHCl3 _naxｎｍ（ε）：322（12800）、269（12000）
。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3460（NHCO）、1780（β−lactam
−CO）、1710（ester CO）、1675（amide ）、
1560（−NO₂）、1350（−NO₂）； NMR（CDCl₃）δ：1.04（3H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、
CH₂ CH₂ ）、1.90（2H、ｄｐ〜、Ｊ＝８Hz、Ｊ＝
２Hz、CH₃ CH₂ ）、1.96（3H、ｓ〜、
NHCOCH₃）、2.80〜3.60（7H、ｍ〜、3XCH₂、
CH）、3.98（1H、ｄｔ〜、Ｊ＝８Hz、Ｊ＝３Hz、
C₅−Ｈ）、5.19（1H、ｄ〜、Ｊ＝14Hz、−ＣＨ
HAr）、5.49（1H、ｄ〜、Ｊ＝14Hz、−CHＨAr）、
5.95（1H、brｓ〜、−ＮＨ−）、7.61（2H、ｄｄ〜、
Ｊ＝９Hz、Ｊ＝２Hz、ArＨ）、8.18（2H、ｄｄ〜、
Ｊ＝９Hz、Ｊ＝２Hz、ArＨ）。 Mass ｍ／ｅ：433（M⁺）、363（M⁺−EtCH＝Ｃ
＝Ｏ）。 Anal.Calcd.for C₂₀H₂₅O₆N₃S：Ｃ、55.43；Ｈ、
5.35；Ｎ、9.70.Found：Ｃ、55.29；Ｈ、5.24；
Ｎ、9.40. 実施例４２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−エチル
−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸・
メチルエステルの製造 PS−５・ナトリウム塩251mgを乾燥DMF20mg
に溶解し、撹拌しながら乾燥トリエチルアミン
1050.6μ（原料に対し10倍モル）を加えて、−30
℃に冷却した。次に新鮮なヨウ化メチル426.3μ
（原料に対し10倍モル）を乾燥DMF10mlに溶かし
た溶液を同温度で滴加した。滴加後、反応温度を
20℃とし、３時間撹拌し、反応液を300mlの酢酸
エチルで希釈し、飽和食塩水150mlで２回洗浄後、
酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。
次いで溶媒を減圧下留去し、バイオ−ビーズＳ−
X3カラム（20ｇ、1.2×90cm）で展開精製し、表
記の化合物100mgを得た。〔α〕²¹ _D＋72.23゜（Ｃ＝0.36、CHCl₃）。 UVλ^MeOH _naxｎｍ（ε）：315（10328）； IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3450（−COＮＨ−）、1775（β−
lactam CO）、1675（ester CO、amide ）。 NMRδppm（CDCl₃）：1.06（3H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、
−CH−CH₃ ）、1.70〜2.06（2H、ｍ〜、−CH₂ −
CH₃）、1.99（3H、ｓ〜、−NHCOCH₃ ）、2.90〜
3.56（7H、ｍ〜、3X−CH₂ −、−CH−）、3.83
（3H、ｓ〜、−CO₂ CH₃ ）、3.96（1H、ｄｔ〜、Ｊ＝
８Hz、Ｊ＝２Hz、Ｃ−５Ｈ）、6.20（1H、ｂｒ〜、
−NH）。 Mass ｍ／ｅ：312（M⁺）、242（M⁺−Et・CH＝
Ｃ＝Ｏ）。実施例５２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カル
ボン酸−ベンジルエステルの製造２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−エチル
−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸ベン
ジルエステル50mgを乾燥塩化メチレン５mlに溶解
し、氷水で冷却、撹拌しながら、ｍ−クロロ過安
息香酸28.74mg（原料に対し1.1倍モル）を乾燥塩
化メチレン１mlに溶かした液を滴加し、同温度で
15分間激しく撹拌した。反応終了後、塩化メチレ
ン50mlを加えて希釈し、0.1M、PH8.7およびリン
酸緩衝液それぞれ25mlでそれぞれ２回洗浄する。
溶媒層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溜
去し、直ちにベンゼン１mlに溶解した。ベンゼン
で予め膨潤させたバイオ・ビーズＳ−X3カラム
（1.2×75.0cm）に前記濃縮液を注加し、ベンゼン
で展開後、目的物質を含有するフラクシヨンを集
め、減圧下溶媒を溜去して無色乾固物53.5mgを得
た（収量102.8％）。〔α〕²¹ _D−43.96（Ｃ１、MeOH）。 UVλ^MeOH _naxｎｍ（ε）：307（4440）。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3400（−ＮＨ−CO−）、1790（β−
lactam CO）、1710（ester CO）、1670（amide
）、1520（amide ）、1040（SO）、1020
（SO）。 NMRδppm（CDCl₃）：1.04（3H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、
Ｊ＝３Hz、−CH₂−CH₃ ）、1.64〜2.02（2H、ｍ〜、
−ＣH₂ CH₃）、1.94（3H、ｓ〜、−COCH₃ ）、2.88
〜3.80（7H、ｍ〜、−ＣH₂ −、−ＣＨ−）、3.88〜
4.20（1H、ｍ〜、Ｃ−５Ｈ）、5.26（2H、ｓ〜、−Ｃ
H₂Ar）、7.36（5H、ｓ〜、Ar−Ｈ）。 Mass（ｍ／ｅ）：404（M⁺）実施例６２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カル
ボン酸−ベンズヒドリルエステルの製造２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−エチル
−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸−ベ
ンズヒドリルエステル７mgを乾燥塩化メチレン２
mlに溶解し、−30℃に撹拌冷却しつゝ、ｍ−クロ
ロ過安息香酸2.86mg（原料に対し1.1倍モル）を
乾燥塩化メチレン１mlに溶かした液を滴加し、同
温度で30分反応を行つた。反応終了後、予め試薬
の過酸と等モルのトリエチルアミン2.31μを加
えたベンゼン20mlを加えて希釈し、0.1M、PH
6.8、リン酸緩衝液10mlで２回洗浄した。無水硫
酸ナトリウムで乾燥後、ベンゼン溶液を約１mlま
で減圧下留去した。シリカゲルカラム1.5ｇ（0.9
×5.0cm、カーゼルゲル60、70−230メツシユ、エ
ー・メルク社製）にベンゼン−アセトン（９：
１）を通して予め湿潤させた後、上記濃縮液を注
加し、ベンゼン−アセトン（９：１）、（１：１）、
（３：７）、（２：８）の比に順次変えた混合溶媒
をそれぞれ、10ml、10ml、20ml、30mlで展開溶出
し、シリカゲルTLC（プレ・コーテツドTLCプレ
ート、シリカゲル60F254、エー・メルク社製）
で各フラクシヨンを確認し、目的物を含有するベ
ンゼン−アセトン（２：８）溶出区分を減圧濃縮
した。次いでバイオビーズＳ−X3カラム（1.2×
90.0cm）でゲル過精製し、表題の化合物4.2mg
を得た（収率58％）。〔α〕²¹ _D−64.04゜（Ｃ＝0.28、CHCl₃）。 UVλ^MeOH _naxｎｍ（ε）：308（5577）。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3450（NHCO−）、1790（β−
lactam CO）、1710（ester CO）、1670（amide
）、1515（amide ）、1040（SO）； NMRδppm（CDCl₃）：1.08（3H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、
−CH₂−CH₃ ）、1.92（3H、ｓ〜、−NHCOCH₃ ）、
4.08（1H、ｄｔ〜、Ｊ＝９Hz、Ｊ＝３Hz、Ｃ−
5H）、6.34（1H、ｂｒ〜、ＮＨ）、6.87（1H、ｓ〜、
−ＣＨAr₂）、7.32（10H、ｓ〜−like、−CHAr₂ ）。 Mass（ｍ／ｅ）：480（M⁺）。実施例７２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カル
ボン酸−（ｐ−ニトロベンジル）エステルの製
造。２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−エチル
−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸−
（ｐ−ニトロベンゼン）エステル240mgを乾燥塩化
メチレン25mlに溶解し−30℃に冷却した。ｍ−ク
ロロ過安息香酸104.9mgを12mlの乾燥塩化メチレ
ンに溶解して上記の溶液に撹拌しがら加え、同温
度で40分間反応させた。反応終了後、予め酢酸エ
チル100mlにトリエチルアミン0.09mlを加えて氷
冷した溶液を調製しておき、この中に反応液をあ
けた。５分間、氷冷し撹拌した後、酢酸エチル
100mlを加えて分液漏斗に移し、氷冷した0.1MPH
6.86燐酸緩衝液で４回洗浄した。溶液層を無水硫
酸ナトリウムで乾燥した後ベンゼンを加えて１ml
まで減圧濃縮した。濃縮液を予めベンゼン−アセ
トン（１：１）で湿潤したシリカゲルカラム18ｇ
（42ml、2.0×13.4cm、前出のシリカゲルに同じ）
に通導し、約50mlの同溶媒で展開すると、この区
分に原料が14.1mg溶出された。さらにベンゼン−
アセトン（１：２）約60mlで展開した後、ベンゼ
ン−アセトン（１：３）70mlで展開すると表題の
目的化合物が溶出された（収量211mg、89％）。こ
の物質のシリカゲルTLCプレート（前出のTLC
プレートに同じ）でのRf値はベンゼン−アセト
ン（１：２）で0.36を示した。〔α〕²¹ _D＋18.0゜（Ｃ１、CHCl₃）。 UVλ^CHCl3 _naxｎｍ（ε）：267（13079）、310（7775）
。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3460（−NHCO−）、1785（β−
lactam CO）、1720（ester CO）、1680（amide
）、1530（amide ）。 NMRδppm（CDCl₃）： 1.00（3H、ｔ〜、Ｊ＝7.0Hz、−CH₂ CH₃ ）、 1.70〜2.00（2H、ｍ〜、−CH₂ −CH₃）、 2.00（3H、ｓ〜、−NHCOCH₃ ）、 3.00〜3.88（7H、ｍ〜、3X−CH₂−、−CH−）、 3.92〜4.23（1H、ｍ〜、−CH−）、 5.12〜5.60（2H、ｄ〜−likeX2、−ＣＨ、HAr、−
CH、ＨAr）、 6.25〜6.55（1H、ｂｒ〜、−ＮＨ）、 7.52〜7.72（2H、ｄｄ〜−like、ArＨ）、 8.12〜8.28（2H、ｄｄ〜−like、ArＨ）。 Mass ｍ／ｅ：404（M⁺）（FD Mass）。実施例８２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カル
ボン酸−メチルエステルの製法。２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−エチル
−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸メチ
ルエステル143.7mgを乾燥塩化メチレン57mlに溶
解し−30℃に撹拌冷却しながら、ｍ−クロロ過安
息香酸87.32mg（原料に対し1.1倍モル）を乾燥塩
化メチレン28mlに溶かした液を滴加し、同温度で
30分反応を行つた。反応終了後、予めトリエチル
アミン70.58μを加えた酢酸エチル430mlで希釈
し、飽和食塩水140mlで２回洗浄した。無水硫酸
ナトリウムで乾燥した後、酢酸エチル溶液を減圧
下、濃縮、乾固し、ベンゼン−アセトン（９：
１）溶液約２mlに溶解し、シリカゲルカラム28ｇ
（1.7×16cm、前出のシリカゲルに同じ）に導い
た。ベンゼン−アセトン（１：１）（２：８）
（１：９）の展開溶媒で溶出し、溶媒比（１：９）
のフラクシヨンを集めて精製し、該エステルを得
た。〔α〕²¹ _D：74.23゜（Ｃ0.25、CHCl₃）。 UVλ^MeOH _naxｎｍ（ε）：303（5200）。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3450（NHCO）、 1790（β−lactam CO）、 1720（ester CO）、 1670（amide ）、 1510（amide ）、 1040（SO）。 NMRδppm（CDCl₃）：1.07（3H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、
−CH₂−CH₃ ）、1.70〜2.00（2H、ｍ〜、−CH₂ −
CH₃）、2.00（3H、ｓ〜、−NHCOCH₃ ）、2.90〜
3.90（7H、ｍ〜、3X−CH₂ −、−ＣＨ−）、3.89
（3H、ｓ〜、−CO₂CH₃）、Ｃ−５Ｈは前の3.89
（ｓ）とオーバーラツプ、6.60（1H、ｂｒ〜、−
NH）。 Mass ｍ／ｅ：328（M⁺）、（FDMass）。実施例９２−２・ブチルチオ−６−エチル−１−カルバ
−２−ペネム−３−カルボン酸−（ｐ−ニトロ
ベンジル）エステルの製造２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−エチル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸−（ｐ−ニトロベンジル）エステル150mgを
120mlの乾燥DMFに溶解し、−65℃に冷却した。
これに5.2mg／ml濃度のｎ・ブタン・チオール・
ナトリウム塩の乾燥DMF溶液7.5mlを滴加した。
原料と等モル量の試薬を加え、ひきつゞき−65℃
で30分反応させた。反応液をベンゼン400mlで希
釈し、次いで0.1M、PH6.8リン酸緩衝液500mlで
３回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、ベン
ゼンを減圧下溜去した。少量のベンゼンに溶解
し、予めベンゼンで湿潤させたシリカゲルカラム
（５ｇ、１×13cm、前出のシリカゲルと同じ）に
通し、ベンゼン−アセトン（80：１）で展開、分
離、精製し、更にベンゼンで膨潤させたバイオビ
ーズＳ−X3カラム（100ｇ、1.2×88cm）に通し
52.1mgの目的物を得た。（収率38.5％）。 UVλ^THF _naxｎｍ（ε）：322.5（11290）。〔α〕²¹ _D＋39.39゜（Ｃ0.917、THF）； IRν^CHCl3 _naxcm^-1：1765（β−lactam CO）、1695
（ester CO）。 NMRδppm（CDCl₃）：0.80〜1.18（6H、ｍ〜、2X−
CH₂ CH₃ ）、1.20〜2.00（6H、ｍ〜、2X−ＣH₂
−）、2.70〜3.30（5H、ｍ〜、2X−ＣH₂ −、−CH
−）、3.94（1H、ｄｔ〜、Ｊ＝９Hz、Ｊ＝３Hz、
Ｃ−５Ｈ）、5.19（1H、ｄ〜、Ｊ＝14Hz、−ＣＨ
HAr）、5.49（1H、ｄ〜、Ｊ＝14Hz、−CHＨ
Ar、）、7.62（2H、ｄｄ〜、Ｊ＝９Hz、Ｊ＝２Hz、
ArＨ、8.18（2H、ｄｄ〜、Ｊ＝９Hz、Ｊ＝２Hz、
ArＨ）。 Mass ｍ／ｅ：404（M⁺）、334（M⁺−EtCH＝Ｃ
＝Ｏ）。実施例 10 ２−ｎ・ブチルチオ−６−エチル−１−カルバ
−２−ペネム−３−カルボン酸・ナトリウム塩
の製造酸化白金10mgを15ml容試験管に秤り取り、２−
ｎ・ブチルチオ−６−エチル−１−カルバ−２−
ペネム−３−カルボン酸−（ｐ−ニトロベンジル）
エステル10mgをジオキサン３mlに溶解して加え、
次いで0.1M、PH8.4、リン酸緩衝液1.5mlを加え
た。これをパールの還元装置に入れ、室温、水素
圧４Kg／cm²で４時間反応を行つた。反応後、厚手
紙で触媒を去し、触媒を氷冷した0.01Mリン
酸緩衝液30mlで洗浄した。液と洗液を合せ、予
め0.01Mリン酸緩衝液で処理し５℃の低温室に設
置しておいたQAE−セフアデツクスＡ−25カラ
ム（1.1×20.0cm）吸着させ、０〜0.2M塩化ナト
リウム濃度勾配傾斜法（0.01Mリン酸緩衝液100
mlに0.2M塩化ナトリウムを含有した0.01Mリン
酸緩衝液100mlを使用）で溶出した。フラクシヨ
ン試験管には予め0.1Mリン酸緩衝液を0.5mlずつ
加えておき、フラクシヨン重量は５ｇとした。コ
マモナス・テリゲナ菌の検定板でみて、活性フラ
クシヨンを集め、最終の塩濃度が３％になるよう
に、飽和塩化ナトリウム溶液を加えた。これをダ
イヤイオンHP−20カラム（1.1×20.0cm）に吸着
させ、水洗後、20％アセトン−水で溶出し、各溶
出区分（フラクシヨン重量５ｇ）のうち、50μ
を取り１mlの水で希釈した液の紫外線スペクトル
（260〜320nｍ）を測定し、300nｍに吸収極大を
示す。溶出区分をあつめ、一昼夜、凍結乾燥し
た。（収量5.3mg、収率71.7％）。 UVλ_naxｎｍ（ε）：302（7550）（0.01Mリン酸緩
衝液中）； IRν^KBr _naxcm^-1：1752（β−lactam Ｃ＝Ｏ）、1600
（carboxylate）。 NMRδppm（D₂O）：0.93（3H、ｔ〜、−CH₂−
CH₃）、1.04（3H、ｔ〜、−CH₂・CH₃ ）、1.20〜
2.00（6H、ｍ〜、2X−CH₂ −）、2.50〜3.50（5H、
ｍ〜、−ＣＨ−、2X−ＣH₂ −）、4.02（1H、ｄｔ〜
ｔ、Ｊ＝9.0Hz、Ｊ＝3.0Hz、Ｃ−５Ｈ）。実施例 11 ２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−イソプ
ロピル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボ
ン酸・ベンジルエステルの製造 PS−６ナトリウム塩68mg（純度35％）の乾燥
DMF20ml溶液にトリエチルアミン109μを加え、
窒素気流中室温にて撹拌しながらベンジルブロマ
イド84μを加えた。４時間室温で撹拌した後、
反応混合物を100mlの酢酸エチルに注ぎ、0.1M、
PH6.8リン酸緩衝液40mlにて２回洗浄し、溶媒層
を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。30℃以下で減
圧溜去した後、少量のベンゼンに溶解し、ベンゼ
ンを展開剤として、バイオ・ビースＳ−X3のカ
ラムクロマトグラフイー（1.2×88cm）にかけ、
各フラクシヨンをTLCで確認して、目的物含有
フラクシヨンを集め、減圧下溶媒を溜去して白色
粉末を得た。これを更にシリカゲルを用いたカラ
ムクロマトグラフイー（４ｇ、1.0×10.3cm、前
出のシリカゲルと同じ）に通すと、ベンゼン−ア
セトン（３：１）の溶出液より単一スポツトのフ
ラクシヨンを得減圧下溜去して白色粉末17.4mgを
得た（収率61％）。TLCのRf値：0.36、〔ベンゼ
ン−アセトン（２：１）、シリカTLCプレート
（前出のシリカゲルTLCプレートに同じ）〕。 UVλ^MeOH _nax318nｍ。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3400（NH−Ｃ）、1765（β−lactam
CO）、1665（amiｄ〜ｅ）、1510（amiｄ〜ｅ
）。 NMRδppm（CDCl₃）：1.07（6H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、
−CH・ＣCH₃ ）₂）、2.00（3H、ｓ〜、−NHCOC
H₃）、4.05（1H、ｄｔ〜ｔ、Ｃ−5H）、5.31（1H、
ｄ〜、Ｊ＝12Hz、−ＣＨ、HAr）、5.47（1H、ｄ〜、
Ｊ＝12Hz、−CH、ＨAr）、6.07（1H、ｂｒ〜、Ｎ
Ｈ−）、7.46（5H、ｓ〜、Ar−Ｈ）。 MS ｍ／ｅ：402（M⁺）、318（M⁺−ｉ・Pr・CH
＝Ｃ＝Ｏ）。実施例 12 ２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−イソプロピル−１−カルバ−２−ペネム−３
−カルボン酸ベンジルエステルの製造２−（２−アセタミドエチルチオ）−６−イソプ
ロピル−１−カルバ−２−ペネム−３−カルボン
酸ベンジルエステル14.8mgの乾燥ジクロルメタン
２ml溶液を−25℃に冷却し、撹拌しながら窒素気
流中ｍ−クロロ過安息香酸8.7mgの乾燥ジクロル
メタン２ml溶液を滴加した。同温度で１時間撹拌
した後、反応混合物を酢酸エチル20mlで希釈し、
0.1M、PH8.8および0.1MPH6.8のリン酸緩衝液で
それぞれ洗浄し、酢酸エチル層を無水硫酸ナトリ
ウムで乾燥した。溶媒を減圧下溜去し、ベンゼン
１mlに溶解した後、シリカゲルカラム（２ｇ、
1.0×5.1cm、前出のシリカゲルに同じ）に通し、
ベンゼン−アセトンの混合溶媒で展開した。ベン
ゼン−アセトン（１：４）の溶出区分より白色粉
末2.8mgを得た。 TLCのRf値：0.45（ベンゼン−アセトン（１：
１）、前出のシリカゲルTLCプレートに同じ）。 UVλ^MeOH _nax307nｍ。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3400（−ＮＨCO）、1780（β−
lactam CO）、1710（ester CO）、1670（amide
）、1510（amide ）； NMRδppm（CDCl₃）：1.07（6H、ｔ〜、Ｊ＝７Hz、
−CH・（ＣH₃ ）₂）、1.98（3H、ｓ〜、−NHCO
CH₃）、4.12（1H、ｄｔ〜ｔ、Ｃ−5H）、5.29
（2H、ｓ〜、−ＣH₂ −Ar）、6.47（1H、ｂｒ〜、−Ｎ
Ｈ）、7.37（5H、ｓ〜−like、ArＨ）： MS（ｍ／ｅ）：418（M⁺）、（FD Mass）。実施例 13 ２−ｎ・ブチルチオ−６−イソプロピル−１−
カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸ベンジル
エステルの製造２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−イソプロピル−１−カルバ−２−ペネム−３−
カルボン酸−ベンジルエステル19mgを10mlの乾燥
DMFに溶解し、−65℃に冷却した。これにｎ・ブ
タンチオール・ナトリウム塩4.9mgの乾燥DMF溶
液１mlを滴加した。適加後、−65℃で30分反応さ
せ、反応液にベンゼン50mlを加えて希釈し、次い
で0.1MPH6.8リン酸緩衝液50mlで３回洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後、溶媒を減圧下溜
去した。少量のベンゼンに溶解しシリカゲルカラ
ム（１ｇ、0.8×3.4cm、前出のシリカゲルと同
じ）に通し、ベンゼン−アセトン（80：１）で展
開、分離、精製し、次いでベンゼンで膨潤させた
バイオビーズＳ−X3カラム（30ｇ、1.2×26.4cm）
に通し3.7mgの白色粉末を得た（収率22.1％）。 UVλ^THF _nax：322nｍ IRν^CHCl3 _naxcm^-1：1780（β−lactam CO）、1690
（ester CO）。 NMRδppm（CDCl₃）：0.80〜1.20（9H、ｍ〜、−CH
（CH₃）₂ 、−CH₂ CH₃ ）、1.20〜2.00（4H、ｍ〜、2X
−CH₂ −）、2.70〜3.60（6H、ｍ〜、2X−ＣＨ−、
2X−ＣH₂ −）、3.86〜4.18（1H、ｍ〜、Ｃ−５
Ｈ）、5.31（1H、ｄ〜、Ｊ＝12Hz、−ＣＨ、ＨAr）、
5.47（1H、ｄ〜、Ｊ＝12Hz、−CH、ＨAr）、7.45
（5H、ｓ〜−like、ArＨ）。 MS ｍ／ｅ：373（M⁺）。実施例 14 ２−ｎ・ブチルチオ−６−イソプロピル−１−
カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸・ナトリ
ウム塩の製造２−ｎ・ブチルチオ−６−イソプロピル−１−
カルバ−２−ペネム−３−カルボン酸−ベンジル
エステル7.1mgをジオキサン３mlに溶解し、酸化
白金７mgを加え、次いで0.1M、PH8.4りん酸緩衝
液1.5mlを加えた。この溶液を入れた試験度をパ
ールの装置に入れ、室温で水素圧７Kg／cm²、10時
間反応させた。反応終了後、触媒が漏れぬように
紙３枚をしいて過し、去した触媒を氷冷し
た0.01Mりん酸緩衝液25mlで洗浄した。液と洗
浄液を一緒にし、予め0.01Mりん酸緩衝液で緩衝
し、低温度に設置したQAE−セフアデツクスＡ
−25カラム（1.1×20.0cm）に吸着させ、０〜
0.2M塩化ナトリウム濃度勾配傾斜法（0.01Mり
ん酸緩衝液100mlに0.2M塩化ナトリウムを含有し
た0.01Mりん酸緩衝液100mlを使用）で溶出した。
フラクシヨン管には予め0.1Mりん酸緩衝液を0.5
mlずつを加えておき、１フラクシヨン重量は５ｇ
とした。コマモナス・テリゲナ菌の検定板で活性区分を
確認して、そのフラクシヨンを集め、最終の塩濃
度が３％になるように、飽和塩化ナトリウム溶液
を加えた。これをダイヤイオンHP−20カラム
（1.1×20.0cm）に吸着させ、水洗した後、20％ア
セトン−水で溶出し、各溶出区分（１フラクシヨ
ン＝５ｇ）から50μを取り、水１mlで希釈した
液の紫外線スペクトル（260〜320nｍ）を測定
し、300nｍ付近に吸収極大を示す、区分を集め、
一昼夜、凍結乾燥した（収量3.8mg）。 UVλ_naxｎｍ（ε）：302（＞7730）、（0.01Mりん酸
緩衝液中）。 IRν^KBr _naxcm^-1：1750（β−lactam CO）、1600
（Carboxylate）。 NMRδppm（D₂O）：0.92（3H、ｔ〜、Ｊ＝８Hz、−
CH₂−ＣH₃ ）、1.06（6H、ｄｄ〜、Ｊ＝８Hz、−
CH−（CH₃）₂ ）、1.20〜2.00（5H、ｍ〜、2X−Ｃ
H₂−、−CH−）、2.50〜3.50（5H、ｍ〜、2X−Ｃ
H₂．、−ＣＨ−）、4.00（1H、ｄｔ〜ｔ、Ｊ＝９Hz、
Ｊ＝３Hz、ｅ−５Ｈ）。実施例 15 ２−（２−アセタミドエチルスルフイニル）−６
−イソプロピル−１−カルバ−２−ペネム−３
−カルボン酸ナトリウム塩の製造抗生物質PS−６ナトリウム塩10.6mgを小試験
管内にとり、１mlの蒸留水に溶解した（PH7.0）
後、氷水で冷却した。これに7.2mg（抗生物質PS
−６ナトリウム塩に対して約1.1モル当量）のｍ
−クロロ−過安息香酸を加え、はげしく撹拌しな
がら氷冷下で約10分間反応せしめた。ｍ−クロロ
過安息香酸は完全には溶解しないが、撹拌中に明
らかな色調変化が観察された。反応後、生成した
ｍ−クロロ安息香酸の沈殿を過して除去し、そ
の液に0.1M、PH8.2、りん酸緩衝液２mlを加え
た。この溶液３mlをQAE−セフアデツクスＡ−
25（フアルマシア社製）（1.2cmφ×25cm）カラム
に通し、食塩濃度が０から0.4Mまで直線的に増
加する食塩含有の0.01M、PH8.2、りん酸緩衝液
140mlで、活性成分を溶出した。この活性区分を
集め、これに２％（Ｗ／Ｖ）の食塩を添加した
後、ダイヤイオンHP−20AG（三菱化成社製）
（1.2cmφ×25cm）カラムに吸着させ、濃度が０か
ら５％（Ｖ／Ｖ）まで直線的に増加するアセトン
水溶液で溶出して脱塩した。この活性区分を凍結
乾燥して、表記化合物のナトリウム塩の白色凍結
乾燥粉末5.5mgをえた。 UVλ_naxｎｍ：287、（0.01M、PH8.2、りん酸緩衝
液中）； IRν^KBr _naxcm^-1：1760（β−lactam−CO）、1660
（amide ）、1625（carboxylate）、1010〜
1030（−SO−）； NMRδppm（D₂O）：1.03（3H、ｄ〜、Ｊ＝７Hz、【式】）、 1.06（3H、ｄ〜、Ｊ＝７Hz、【式】）、 2.03（3H、ｓ〜、−NH・COCH₃ ）、3.15〜3.80
（Ｈ、ｍ、３−ＣH₂ −、【式】）、 4.08〜4.32（1H、ｍ〜、【式】）、 7.28〜7.36（1H、ｂｒ〜、【式】また、本実施例で得た２−（２−アセタミドエ
チルスルフイニル）−６−イソプロピル−１−カ
ルバ−２−ペネム−３−カルボン酸ナトリウム塩
は次の如き生物学的性質をしめした。抗菌スペクトル： PH7.0、ハート・インフユージヨン培地“栄研”
〔栄研化学(株)製〕を用いた寒天希釈検定法で測定
した最小発育阻止濃度を次表に示す。【表】

Claims

【特許請求の範囲】１一般式式中、R₁は水素原子又はメチル基を表わし、 R₂′は水素原子又は置換もしくは未置換の炭化
水素基を表わす、ただし、R₁が水素原子である
場合には、R₂′は水素原子以外の基を表わすもの
とする、で示される化合物。２ R₂′が水素原子、低級アルキル基又は置換も
しくは未置換の炭素原子数７〜20個のアラルキル
基を表わす、特許請求の範囲第１項記載の化合
物。