JPS6321471B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPS6321471B2 JPS6321471B2 JP58043727A JP4372783A JPS6321471B2 JP S6321471 B2 JPS6321471 B2 JP S6321471B2 JP 58043727 A JP58043727 A JP 58043727A JP 4372783 A JP4372783 A JP 4372783A JP S6321471 B2 JPS6321471 B2 JP S6321471B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- medicinal
- medium
- tissue culture
- ammonium nitrate
- carrots
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
技術分野：
本発明は薬用にんじん（Panax ginseng C.A.
Meyer）組織培養物の培養法、特に、古来より有
用生薬として珍重されている薬用にんじん植物の
生組織の一部を組織培養して得られる組織培養物
を独特の改良培地で培養することにより天然薬用
にんじんと同じ粗サポニンや粗サポゲニンなどの
薬効主成分を多量に含有する薬用にんじん組織培
養物を高率で生産する方法に関する。
Meyer）組織培養物の培養法、特に、古来より有
用生薬として珍重されている薬用にんじん植物の
生組織の一部を組織培養して得られる組織培養物
を独特の改良培地で培養することにより天然薬用
にんじんと同じ粗サポニンや粗サポゲニンなどの
薬効主成分を多量に含有する薬用にんじん組織培
養物を高率で生産する方法に関する。
従来技術：
薬用にんじん例えばオタネにんじん、チクセツ
にんじん、アメリカにんじん、三七にんじんなど
の根は有用漢方薬として珍重され現在でも広く利
用されている。薬効として、強壮、長生、鎮静、
興奮、利尿作用などが明らかにされている。植物
としての薬用にんじんから得られる生薬の薬効主
成分に、サポニンとサポゲニンである。薬用にん
じんから抽出されるサポニンは多数の成分群Ro、
Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、RgおよびRhを含
むが薬効の中心をなすものはRbとRgである。Rb
は鎮静作用を有し、Rgは興奮作用を有するとい
われている。現在、野生の薬用にんじんはほとん
ど存在せず、栽培が行われている。栽培は大変む
ずかしく夏季冷涼な高地で排水のよい土地を用い
日覆その他特別な配慮を必要とする。いつたん栽
培すると20〜50年は同じ場所に連作不能であり、
その上、収穫までに４〜７年かかる。この様な理
由により非常に高価なものになつている。
にんじん、アメリカにんじん、三七にんじんなど
の根は有用漢方薬として珍重され現在でも広く利
用されている。薬効として、強壮、長生、鎮静、
興奮、利尿作用などが明らかにされている。植物
としての薬用にんじんから得られる生薬の薬効主
成分に、サポニンとサポゲニンである。薬用にん
じんから抽出されるサポニンは多数の成分群Ro、
Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、RgおよびRhを含
むが薬効の中心をなすものはRbとRgである。Rb
は鎮静作用を有し、Rgは興奮作用を有するとい
われている。現在、野生の薬用にんじんはほとん
ど存在せず、栽培が行われている。栽培は大変む
ずかしく夏季冷涼な高地で排水のよい土地を用い
日覆その他特別な配慮を必要とする。いつたん栽
培すると20〜50年は同じ場所に連作不能であり、
その上、収穫までに４〜７年かかる。この様な理
由により非常に高価なものになつている。
薬用にんじん組織培養物を工業的に組織培養す
るには、できるだけ単純な組成の培地を用いて高
収量を得る方法が望ましい。植物組織培養におい
て組織培養物の生長速度を上げかつ組織培養物の
収量を向上させるためには、従来から例えばMS
培地（Murashige and Skoog氏培地）、White氏
培地、Gantheret氏培地、Tulecke氏培地、
Morel氏培地、Linsmaier−Skoog、
Hildebrandt氏培地などの通常の植物組織培養用
基本培地が用いられ、これにカゼイン分解物、大
豆粉、コーンステイープリカー、さらにはビタミ
ン類を添加する方法が用いられる。しかし、これ
らの方法は、従来から用いられている上記基本培
地の培地組成を複雑化し、あるいはせつかく選別
した薬用にんじん組織培養物の性質を変質し薬効
成分の生産を抑制することにもなりかねない。
るには、できるだけ単純な組成の培地を用いて高
収量を得る方法が望ましい。植物組織培養におい
て組織培養物の生長速度を上げかつ組織培養物の
収量を向上させるためには、従来から例えばMS
培地（Murashige and Skoog氏培地）、White氏
培地、Gantheret氏培地、Tulecke氏培地、
Morel氏培地、Linsmaier−Skoog、
Hildebrandt氏培地などの通常の植物組織培養用
基本培地が用いられ、これにカゼイン分解物、大
豆粉、コーンステイープリカー、さらにはビタミ
ン類を添加する方法が用いられる。しかし、これ
らの方法は、従来から用いられている上記基本培
地の培地組成を複雑化し、あるいはせつかく選別
した薬用にんじん組織培養物の性質を変質し薬効
成分の生産を抑制することにもなりかねない。
発明の目的：
本発明の目的は、比較的単純な組成の培地を用
いて高収量で薬用にんじん組織培養物を培養する
培養法を提供することにある。本発明の他の目的
は、天然薬用にんじんと同じ薬効成分の粗サポニ
ンや粗サポゲニンを多量含有する薬用にんじん組
織培養物の培養法を提供することにある。
いて高収量で薬用にんじん組織培養物を培養する
培養法を提供することにある。本発明の他の目的
は、天然薬用にんじんと同じ薬効成分の粗サポニ
ンや粗サポゲニンを多量含有する薬用にんじん組
織培養物の培養法を提供することにある。
発明の要旨：
本発明の薬用にんじん組織培養物の培養法は、
薬用にんじんの生組織から得られる組織培養物を
硝酸アンモニウムを実質的に含有しない修正MS
培地で培養するもので、このことにより上記目的
が達成されうる。「硝酸アンモニウムを実質的に
含有しない」とは、MS培地としての処方せんか
ら硝酸アンモニウムを積極的に除くという意味で
あり、他の成分に由来する不純物として微量含ま
れる硝酸アンモニウムまでも除くという意味では
ない。
薬用にんじんの生組織から得られる組織培養物を
硝酸アンモニウムを実質的に含有しない修正MS
培地で培養するもので、このことにより上記目的
が達成されうる。「硝酸アンモニウムを実質的に
含有しない」とは、MS培地としての処方せんか
ら硝酸アンモニウムを積極的に除くという意味で
あり、他の成分に由来する不純物として微量含ま
れる硝酸アンモニウムまでも除くという意味では
ない。
実施例：
以下に本発明を実施例に基づいて詳述する。
シユクロース２重量％および３重量％そして硝
酸アンモニウム0.165重量％を含有する従来のMS
培地から硝酸アンモニウムを実施的に除去した
（硝酸アンモニウムを当初から含有しない）修正
MS培地150mlを300mlのエルレンマイヤーフラス
コに入れ高圧滅菌した。寒天0.9％を含むMS固形
培地にあらかじめ培養しておいた薬用にんじん組
織培養物８〜10ｇを上記修正MS培地に接種し毎
分90ストロークの往復振とう機にて25℃で５週間
振とう培養した。得られた組織培養物の乾燥重量
（50℃の温風乾燥機により恒重量になるまで乾燥
して得た重量）を測定して得た結果を従来のMS
培地を用いた比較例と共に図に示す。図から明ら
かなように、硝酸アンモニウムを実質的に含有し
ない修正MS培地で培養すると、シユクロース濃
度のレベルにかかわりなく、薬用にんじん組織培
養物の収量は、乾物量で40〜60％程度向上した。
これは全培養期間を通じて認められた。硝酸アン
モニウムによる生長抑制効果は、他のGamborg
培地などでも認められたが、MS培地において顕
著でありしかもその培地の調製が容易である。
酸アンモニウム0.165重量％を含有する従来のMS
培地から硝酸アンモニウムを実施的に除去した
（硝酸アンモニウムを当初から含有しない）修正
MS培地150mlを300mlのエルレンマイヤーフラス
コに入れ高圧滅菌した。寒天0.9％を含むMS固形
培地にあらかじめ培養しておいた薬用にんじん組
織培養物８〜10ｇを上記修正MS培地に接種し毎
分90ストロークの往復振とう機にて25℃で５週間
振とう培養した。得られた組織培養物の乾燥重量
（50℃の温風乾燥機により恒重量になるまで乾燥
して得た重量）を測定して得た結果を従来のMS
培地を用いた比較例と共に図に示す。図から明ら
かなように、硝酸アンモニウムを実質的に含有し
ない修正MS培地で培養すると、シユクロース濃
度のレベルにかかわりなく、薬用にんじん組織培
養物の収量は、乾物量で40〜60％程度向上した。
これは全培養期間を通じて認められた。硝酸アン
モニウムによる生長抑制効果は、他のGamborg
培地などでも認められたが、MS培地において顕
著でありしかもその培地の調製が容易である。
なお、本発明の実施例で用いた薬用にんじんか
ら組織培養物を取得する方法として、次の方法が
用いられた。薬用にんじんをよく水洗い後、茎と
根部分に分けて大きく切断し、例えばサラシ粉濾
液の様な殺菌剤にて滅菌し、その後滅菌水にてよ
く洗滌する。そして無菌的に適当な大きさ（例え
ば0.5〜1.0cm）に切断し組織片を寒天培地上に置
く。この寒天培地に含まれる培地としては各種の
無機塩にビタミン類、糖類を加えて成る既知の植
物組織培養地が用いられ得る。生長調節物質とし
ては、オーキシン類としてβ−インドール酢酸
（IAA）、α−ナフタリン酢酸（NAA）、２・４
−ジクロルフエノキシ酢酸（２・４−Ｄ）、そし
て、サイトカイニン類としてカイネチン、ジベレ
リンがそれぞれ単独または組合わせて添加され
る。こうすることにより、カルス化（脱分化）が
なされうる。ココナツミルク、酵母、カゼイン加
水分解物（カザミノ酸）等を単独または組合せて
添加することにより効率よくカルス化が行われう
る。カルス化は、暗所下、23〜28℃の条件で植物
組織片の細胞を増殖させることにより１週間目頃
より始まり約４週間でカルス化する。しかしなが
ら、このようにして得られる薬用にんじんカルス
にはサポニンやサポゲニンなどの薬効成分は含ま
れない。カルスが再分化していないからである。
ら組織培養物を取得する方法として、次の方法が
用いられた。薬用にんじんをよく水洗い後、茎と
根部分に分けて大きく切断し、例えばサラシ粉濾
液の様な殺菌剤にて滅菌し、その後滅菌水にてよ
く洗滌する。そして無菌的に適当な大きさ（例え
ば0.5〜1.0cm）に切断し組織片を寒天培地上に置
く。この寒天培地に含まれる培地としては各種の
無機塩にビタミン類、糖類を加えて成る既知の植
物組織培養地が用いられ得る。生長調節物質とし
ては、オーキシン類としてβ−インドール酢酸
（IAA）、α−ナフタリン酢酸（NAA）、２・４
−ジクロルフエノキシ酢酸（２・４−Ｄ）、そし
て、サイトカイニン類としてカイネチン、ジベレ
リンがそれぞれ単独または組合わせて添加され
る。こうすることにより、カルス化（脱分化）が
なされうる。ココナツミルク、酵母、カゼイン加
水分解物（カザミノ酸）等を単独または組合せて
添加することにより効率よくカルス化が行われう
る。カルス化は、暗所下、23〜28℃の条件で植物
組織片の細胞を増殖させることにより１週間目頃
より始まり約４週間でカルス化する。しかしなが
ら、このようにして得られる薬用にんじんカルス
にはサポニンやサポゲニンなどの薬効成分は含ま
れない。カルスが再分化していないからである。
薬用にんじんカルスを再分化させるために、こ
れをインドール酪酸2ppm、サイトカイニン
0.1ppmを含有するMS培地に置床し白色光を100
〜2000ルツクスの状態で照射する。カルスは再分
化する。同様に、株の選別をおこなつて天然薬用
にんじんと同様の薬効主成分粗サポニンおよび粗
サポゲニンを含有する組織培養物を得る。本株の
粗サポニン含量は乾燥重量で約７〜10％の程度で
あつた。
れをインドール酪酸2ppm、サイトカイニン
0.1ppmを含有するMS培地に置床し白色光を100
〜2000ルツクスの状態で照射する。カルスは再分
化する。同様に、株の選別をおこなつて天然薬用
にんじんと同様の薬効主成分粗サポニンおよび粗
サポゲニンを含有する組織培養物を得る。本株の
粗サポニン含量は乾燥重量で約７〜10％の程度で
あつた。
発明の効果：
本発明によれば、硝酸アンモニウムを実質的に
含有しない修正MS培地を用いることにより、天
然の薬用にんじんと同様の薬効主成分である粗サ
ポニンは粗サポゲニンを含有する薬用にんじん組
織培養物の収量を従来の硝酸アンモニウム
（0.165重量％）含有MS培地による収量の約40〜
60％程度高めることができる。本発明では、いう
までもなく、従来からも用いられているカゼイン
分解物、大豆粉、コーンステイープリカー、廃糖
密、ビタミン類などの添加を否定するものではな
い。
含有しない修正MS培地を用いることにより、天
然の薬用にんじんと同様の薬効主成分である粗サ
ポニンは粗サポゲニンを含有する薬用にんじん組
織培養物の収量を従来の硝酸アンモニウム
（0.165重量％）含有MS培地による収量の約40〜
60％程度高めることができる。本発明では、いう
までもなく、従来からも用いられているカゼイン
分解物、大豆粉、コーンステイープリカー、廃糖
密、ビタミン類などの添加を否定するものではな
い。
図は硝酸アンモニウムを修正したMS培地を用
いたときの薬用にんじん組織培養物の収量を示す
グラフである。
いたときの薬用にんじん組織培養物の収量を示す
グラフである。
Claims (1)
- １ 薬用にんじんの生組織から得られる組織培養
物を、硝酸アンモニウムを実質的に含有しない修
正MS培地で培養する薬用にんじん組織培養物の
培養法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58043727A JPS59169488A (ja) | 1983-03-15 | 1983-03-15 | 薬用にんじん組織培養物の培養法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58043727A JPS59169488A (ja) | 1983-03-15 | 1983-03-15 | 薬用にんじん組織培養物の培養法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59169488A JPS59169488A (ja) | 1984-09-25 |
| JPS6321471B2 true JPS6321471B2 (ja) | 1988-05-07 |
Family
ID=12671817
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58043727A Granted JPS59169488A (ja) | 1983-03-15 | 1983-03-15 | 薬用にんじん組織培養物の培養法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59169488A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102657095B (zh) * | 2012-05-25 | 2014-01-15 | 东北师范大学 | 一种人参高效组织培养和再生的方法 |
-
1983
- 1983-03-15 JP JP58043727A patent/JPS59169488A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS59169488A (ja) | 1984-09-25 |
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