JPS63239235A - インターフェロン投与による家畜の牛型呼吸系疾患合併症の防止方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は動物の保健の分野に関し、更に詳しくは牛型呼
吸系疾患合併症を減退される分野に関する。

発明の背景 通常鷺牛型呼吸系疾患合併症（ｂｏｖｉｎｅｒｅｓｐｉ
ｒａｔｏｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｃｏｍｐｌｅｘ　）　
（ＢＲＤ　）　’と呼ばれる、家畜の呼吸系疾患のいく
つかの形体が知られている。

牛型呼吸系疾患合併症は家畜産業における主な損害の原
因である。

いわゆる１輸送熱ｌと呼ばれるＢＲＤの一つの型は離乳
したばかシの子牛に、一般に飼育用地に移した後の第１
週目以内に起き、そこで取扱い、輸送又は悪天候の結果
、ストレスに曝される。

箋輸送熱Ｉは年間２億５千ないし１０億ドルの損失を伴
って北米家畜産業に影響を及ぼす最も広くゆきわたりそ
して経済的に重大な病気である。

％ＢｆＬＤ＃の他の型は亀地方病子牛肺炎（Ｅａｚｏｏ
ｔｉｃＣａｌｆ　Ｐｈｅｕｍｏｎｉａ　）　’でアリ、
一般に生れてから２〜３力月の牛舎に住む子牛に特に感
染する肺炎である。

群中の何頭かの子牛は激しい呼吸系疾患が発現しそして
死め。他の子牛は通常穏やかな疾患が発現し、それには
鼻および目の粘膜の刺激と鼻および眼の排出物を伴う。

これらの子牛は更に激しい型の疾病に発展するか、或い
は回復する。しかしながら、回復した子牛は２〜３週間
内に再発する危険がある。

Ｓ　ＢＲＤ　＃は肉牛に最も多いが、乳牛にも起こる。

全ての年令が感染し得るが、該疾患は群れに入れたばか
りの新たに買われた若い家畜（ｃａｔｔｌｅ）（本願で
は特に牛を云う）に最も発生する。その結果、新たに乳
牛を群れに導入すると、詳れに肺炎が発生するであろう
。

策士型呼吸疾患合併症ｌは呼吸管の損傷およびストレス
のような要素が組合されて起こるものと思われる。呼吸
管の損傷は牛庖疹ウィルス（ｂｏｖｉｎｅ　ｈｅｒｐｅ
ｓｖｉ　ｒｕｓ　）のようなウィルス又は種々の真菌プ
ラズマおよび／又はクラミド菌株により起り得る。スト
レスは、例えば離乳、去勢、混雑、温度変化およびパス
ツレラのような細菌の第２次感染によって起シ得る。ウ
ィルスとの戦いおよびストレスは組合さって家畜の免疫
低下を引き起こし得る。この免疫低下は次に、転移増殖
させ得る〔ヨセフ　エム、カミングス（Ｊｏｓｅｐｈ　
Ｍ、　ＣｕＣｕｍｍ１ｎ　）　、　’　飼育用地疾病お
よび寄生虫１１フイードロツト、ジー、ビー、トンプソ
ｙ　（Ｇ、　Ｂ、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ　）およびクレイト
ンシー、オー’メリー（Ｃ１ａｙｔｏｎ　ＣｏＯｏＭａ
ｒｙ）。

出版、リーおよび７エビガー（Ｌｅａ　ａｎｄ　Ｆｅｂ
ｉｇｅｒ。

フェラデルフィア、第３版、１９８５年参照）。

従って、亀輸送熱ｌ又は１地方的子牛肺炎′への感受性
には素因が非常に重要である。それらの中で最も優勢な
因子は物理的ストレス、薬剤および生理学的因子である
。

物理的ストレスには離乳、極端な温度および天候の急変
、湿直、不規則な飼料および水の供給、配給量の変化、
はこり、混雑、子牛の混合および閉じ込めが含まれる。

かかる因子によシ最近到着した子牛が感じるストレスは
肺炎の寄与する主な因子と考えられる。更に、子牛はし
ばしば、到着の２〜３日後内にワクチン注射され、角ｔ
−取られ、去勢され、ビタミンおよび抗生物質を与えら
れそして注射される。これらの操作は長い混雑した状態
でのトラック乗車後に疲労した家畜にも成される。

ストレスを生じさせる薬剤には、農作業中に発生するア
ンモニアガスおよび毒性ガスが含ま江る。

寄生虫の攻撃のような付随する病気もまた、感染に対す
る抵抗力に悪影響を及ぼすことが示された。

これらの全ての因子は、免疫系の低下（例えば好中球お
よびリンパ球機能の損傷を生じる内因性ステロイドの放
出）又は呼吸管内での私案分泌の麻痺又は阻止のような
病理学的変化を誘発する。

％ＢＲＤ　＃に係わる主なウィルスは牛庖疹ウィルスｆ
ｉＩ［ＢＨＶ−Ｉ又は感染性鼻気管炎（ｒｈｉｎｏｔｒ
ａｃｈｅｉｔｉｓ　）ウィルス〕、パラインフルエンザ
型５（ＰＩ−５）、生型ウィルス性下痢ウィルス（ＢＶ
Ｄ）および生型呼吸性シンチシャ／Ｉ／　（５ｙｎｃｉ
ｔｉａｌ　）つ４　ルス（ＢＲ８Ｖ　）である。

ウィルスはいくつかの機構により免疫低下を引き起す：
それらは例えばリンパ球機能を溶解するか機能的に損う
か、或いは体自体の殺菌機能の活性、特にダラム陰性細
菌を肺から除去するのに重要な大食細胞および好中球が
関係する活性を低下させる。

更に、ウィルスは大食細胞が抗体被覆細胞を摂食する能
力を変更する（減少したＦｃ受体活性ン。

細胞が摂取されても、該細胞はウィルス感染大食細胞に
よって効果的に殺吾されない。更に、ウィルス感染は肺
胞大食細胞による化学走性因子製造を低減させ、従って
肺への好中球移動度に大きく影響する。

ウィルス感染はまた好中球移動度を変更しモして好中球
の異常機能を誘発し得る。

最後に、肺胞大食細胞が、ウィルスの複製（ｒｅｐｌｉ
ｃａｔｉｏｎ　）又は食作用により、それらの細胞表面
上でウィルス性抗原を発現するなら、細胞毒性Ｔ細胞は
これらの細胞に向いそして更にそれらの機能を損うこと
ができる。

以前から知られているように、ウィルス感染とストレス
は、グラム陽性およびグラム陰性の両細胞による呼吸管
の癒着および転移増殖を増大させるようである。

肺を転移増殖させそして細菌性肺炎を引き起分は溶血性
肺炎菌（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ　ｈａｅｍｏｌｙｔｉ
ｃａ　）人−工によって引き起こされる。

溶血性肺炎菌に加えて、パスツレラ　ムルトシダ（Ｐ、
　ｍｕｌｔｏｃｉｄａ　）およびハエモフィルス７　ム
ヌｘ　（Ｅ（ａｅｍｏｐｈｉ　ｌｕｓ　ｓｏｍｎｕｓ　
）もまた、％ＢＲＪ）”を患う動物の呼吸管から通常単
離され、それらは種々の真菌性プラズ−ｒ　ｙａ（Ｍｙ
ｃｏｐｌａｓｍａ　５ｐｅｃｉｅｓ　）ｂｏｖｉｒｈｉ
ｎｉｓ　）　］でちる。

溶血性肺炎菌が鼻咽腔内で急速に成長した後、該細菌は
例えば肺内小滴（ｌｕｎｇ　１ｎｓｉｄｅ　ｄｒｏｐｌ
ｅｔｓ　）に入り得る。

更に溶血性肺炎菌は回線性細胞毒素（白血球毒素）を生
成し、該毒素は反すう動物の白血球の機能を損うか該白
血球を死滅させる。

細菌の食作用を営んだ後、肺胞の大食細胞および好中球
は損傷されるか死滅する。肺内で死滅し良好中球は、肺
炎によシ引き起こされる病亦の一田！＋ち１ ％　ＢＲＤ　Ｉは通常、家畜がストレスを感じた時から
３ないし１５日後に起こる。

罹患した子牛は通常元気がなく見えそして食欲がない。

粘液膿の真数出物と靜かなせきかあるのが共通している
。呼吸速度は毎分３０の正常値から８０ないし１００７
分に増加する。罹患した子牛はまた４０″ないし４ｔ５
℃の熱をもつ。

聴診器で肺を検査すると、通常気管支肺炎又は肋膜炎の
徴候が見られる。

溶血性肺炎菌は激しい肺の病変を生じる。フィブリン析
出と毛管血栓症がパスツレラ菌感染の二つの主な病理学
的％徴である。

家畜産業については、％ＢＲＤ’により生じる損失は動
物の死の結果だけでなく、取り扱い費用、重量減少、非
能率的な飼料利用、過大な労働、収用（ｃｏｎｄｅｍｎ
ａｔｉｏｎｓ　）および悪い成果（ｐｏｏｒ　ｐｅｒｆ
ｏｒｍｅｒｓ　）の結果でおり、それらの全ては病気の
結果生じるものである。

従って、％　ＢＲＤ　Ｉを適切に治療する可能性を求め
る一方、家畜の呼吸系疾患の発生および重症度をインタ
ー７°エロンの投与によシ低減させる示唆がなされた。

インターフェロン（ＩＦＮ）は三つのタイプ、即ちアル
ファくベータおよびガンマ、に分類される蛋白質の一族
である。分類はインターフェロン蛋白質の抗原特異性、
遺伝子組織、構造、ｐＨ感受性、細胞の由来および生物
学的活性に基づく。

種々のタイプのインターフェロンが牛、豚および人間の
ような動物から誘導できる。

呼吸系疾患の発生および重症度を減じるために家畜をイ
ンターフェロンで治療することの示唆はモデル研究によ
り支持されている。一つのモデル研究において、家畜に
庖疹ウィルス（ＢＨＶ−Ｉ）を感染させた。人間のイン
ター７エ胃ンを投与すると感染の重さを低減させること
が示された。ロネイ（Ｒｏｎｅｙ）外のＡｍ、Ｊ、　Ｙ
ｅｔ。

Ｒｅｓ、　４６．１２５１〜１２５５頁（１９８５年）
参照。

しかしながら、モデル研究は、家畜をそれらが販売小屋
（５ａｌｅｂａｒｎ　）　、飼育用地（ｆｅｅｄｌｏｔ
　）および家畜置場（５ｔｏｃｋｙａｒｄ　）を経て移
動されるに従い、実際の現場の条件下に置かれる場合の
ストレスおよび多様のウィルスおよび微生物の組合せ条
件に付させないので、不備である。

従って、成功したモデル研究は必ずしも、家畜を実際の
現場条件下で牛インターフェロンで処置すると感染性呼
吸系疾患に有効である、ということを意味しない。かか
る研究はまた、実際の現編条件下で感染性疾患の発生お
よび重症度を低減するためにインターフェロン接種する
最適条件を提供しない。

最良の時期および接種方法の問題が残っている。

従って、本発明の目的は、家畜（％に牛）にインターフ
ェロンを予防投与することにより、実際の現場条件下で
牛型呼吸系疾患合併症の発生および重症度を低減する方
法を提供することである。

上記の目的およびその他の目的は本発明の以下のｄ己裁
から明らかである。それらの目的は、牛を呼吸系疾患合
併症の発生および重症度を低減する方法を提供すること
により達成され、該方法は若い家畜に、感染性疾患発生
性ウィルス又は微生物の感染が臨床的病気の発生を引き
起こす前に、予防的有効量の牛インターフェロン゛を全
身投与することを特徴とする。

発明の開示 本発明で有用なインターフェロンは家畜から誘導された
アルファ、ベーター又はガンマインターフェロンでアリ
得る。インターフェロンは家畜から単離しそして精製す
るか、或いは組換えＤＮＡ技術によシ製造したものであ
り得る。

これらのすべての型のＩＦＮは罹病性細胞内でウィルス
複製を抑制す名のに直接役割を果すことができ、そして
免疫機能の調節に関与する。

全てのＩＦＮは免疫防御−食作用および細胞死滅を刺激
又は高揚することができる。

アルファ型インターフェロンは、ウィルス感染に応答し
てリンフ５球および白血球により分泌される。

ＤＮ人暗号書き換え牛インターフェロンのクローン生成
（ｃｌｏｎｉｎｇ）および記号淀現（ｅｘｐｒｅｓｓｉ
ｏｎ）によシ、牛ゲノムは二つの区別された類のＩＰＮ
−遺伝子、即ちＢｏＩＦＮ−αｌおよびＢｏ　Ｉ　ＦＮ
−α黛遺伝子類、を含むことが示された。これらの類は
それぞれ１０〜１２および１５〜２０の下位型から成る
。ＢｏＩＦＮ−αｚ１と遺伝コードで指定された、Ｂｏ
ＩＦＮ−α１族の下位型である遺伝子は、インヴイトロ
およびインヴイボにて活性を高めるために、細菌細胞内
でクローンが生成されそして記号で表現される。

組換え牛インター７エロンアルフ７１（γＢｏＩＦＮ−
α１１）、商標名でインターフェロン（Ｉｎｔｅｒｃｅ
−ｐｔＯｒ　）、は１６６のアミノ酸から構成される基
本的蛋白質である。その分子量は１９０００ダルトンで
ある。

調合されたインターフェロンは通常凍結乾燥形にて貯蔵
される。他の形には調合済注射液が含まれる。

本発明で使用するために、凍結乾燥されたインターフェ
ロンを投与用に希釈剤、好ましくは殺菌水、中でもどす
ことができる。

機能上もどされたインターフェロンを若い家畜に、皮下
注射器などによシ、便利な方法で全身投与する。全身投
与は筋肉内（好ましくは臀部の筋肉内）、皮下、静脈内
投与で行うことができる。

筋肉内投与が好ましい。

本願の目的に、着い家畜とは３日ないし１８力月、好ま
しくは６ないし１８力月の年令の離乳した家畜を意味す
る。

本廃明によると、インターフェロンの投与は鼻内投与で
あってもよい。しかし、全身投与、特に筋肉内投与は更
に便利でロシそして驚くべきことに少なくとも鼻内投与
と同じ程度に有効であるため、好ましい。

インターフェロンの投与量は予防的有効量でおる。下限
は約（Ｌ　５１ＩｖＩＰ’Ｎ／動物、好ましくは約１ｑ
　ＩＦＮ／動物、そして更に好ましくは約３ηＩ　ＦＮ
／動物である。

上限は、重大な副作用を生じることなく家畜が耐えられ
る最大量である。上限は、例えば約２５０ηＩ　ＦＮ／
動物、好ましくは約５０１１１Ｆ　ＩＦＮ／動物、そし
て最も好ましくは約Ｉ　ＯＷ　ＩＦＮ／動物である。

インターフェロンの最適量は約ｓ　ｒａｙ　ＩＦＮ／動
物ないし１ｏｌｑＩＦ’Ｎ／動物、好壕しくは約５ηＩ
ＦＮ／動物である。

機能的にもどされたインターフェロンはどのような濃度
であってもよい。例えば、５ηＩＦＮ／動物の量注入す
るには、２．５　ｌ９ＩＦＮ／ｄ　（希釈剤）　（Ｈｚ
Ｏ）の容液を準備しそして該溶液を２ｍｌ／動物の量注
入すると便利である。

薬力学的研究によシ例示されるように、初期に投与され
たインターフェロン全量の９０ｑ６以上が投与後１５時
間以内に除去される。

従って、家畜が感染性疫患−生起性微生物に感染する前
又は感染直後に、家畜にインターフェロンを接種するの
が好ましい。

ＩＦＮ投与の時期は、動物が病原体に曝される時期を基
準にして、７２時間前から２４時間後（−７２〜＋２４
時間）、好ましくは６０時間前から２４時間後（−６０
〜＋２４時間）でちる。

ＩＦＮ投与の正確なタイミングが重要である。

何故なら、殆んどの呼吸系疾患は販売小屋での動物の混
合、輸送又は飼育用地への入場直後に生じるからである
。

従って、本発明の好ましい態様においては、若い家畜の
ＩＦＮ接種は、販売小屋、家畜置場、又は飼育用地で肥
育する前に集合させた最初の機会に行う。

インターフェロンの効能および作用方法は本発明でイン
ヴイトロおよびインヴイボ実験の過程で示された。

ＩＮＦ投与の臨床的効能は、再生可能な疾患モデルを用
いたモデル研究ばかシでなく、現場試験によっても支持
された。

３０００ｆｉの子牛を鼻内処置しそして約７０００の動
物を筋肉内処置したことを含む臨床的現場試験の間、処
置に関係した悪い反応は見られなかった。インターセプ
ターを与えられそして同時に通常の飼育用地での処置お
よび肥育に伴なう処置療法、例えば駆虫、ワクチン注射
、外因寄生虫撲滅剤処理、同化製剤の挿入、焼印、飼育
促進のための着床（ｉｍｐｌａｎｔｉｎｇ　）および抗
生物質処理、を受けた動物に悪い影響は記録されなかっ
た。

対照研究で、インターセプターの庫内又は筋肉肉処理と
変性した生きたＩＢＲ／ＰＩ−３ウイルスワクチンのワ
クチン注射との同時処置は、動物に有害な影Ｖを及ぼさ
ずそしてワクチンの防御効果を損わないことが示された
。

牛型呼吸系疾患合併症の発生および重さの低減に関する
ＩＦＮ処置の効能は、死亡率および動物又はグルーグ尚
りの病気日数を著しく減少させ、そして凝薬対照物と比
較してＩＦＮ処理動物の重量増加および飼育効率を改善
した。

１地方的子牛肺炎Ｉの場合、感染性疾思−生起性ウィル
ス又は微生物に感染し九時点を基準にして０．７および
１４日目にインターフェロンを投与するのが有利である
ことが証明される。

以下に特定例を参照するが、それらは例示のためのみに
本願に含ませるのであって、本発明の限定するためでは
ない。

例 ｔ　牛−インターフェロン 牛インターフェロンの製造法は特願昭５８−２２４．６
９０号および欧州特許出願第８ａ６２２号（１９８３年
９月１４日発行）に１動物インターフエロン、それらの
製造法、それらを含む組成物、そのＤＮＡシーケンスコ
ーディングおよび記号表現、かかるシーケンスを含むビ
ヒクルおよびそれにより変形された細胞ｌの名称で開示
されている。特願昭５８−２２４，６９０号および欧州
特許出願筒８８，６２２号・の牛インターフェロンの製
造の記載を本願に参考用として包含させる。この記載は
該欧州出願の２１〜５７頁および対応する上記日本出願
公報の頁、およびそこで引用された参考文献、図面およ
び表、並びに牛インター、フェロンの製造についてのそ
の他の記載を含む。

γＢｏＩＦＮ−α１１の血清素因および生物学的有効性
を、集団の子牛に１０１９の投与量を１回、鼻内、筋肉
内および静脈内投与した後、検討した。

それぞれの半衰期は１５０から２７０分であった。全て
の適用方法で、合計投与量の９０％以上は投与後１５時
間以内で除去された。牛インターフェロンのレベルは、
投与ｉ２４時間までに検出可能値以下に下った。

筋肉内投与量の約４０チは循環系に有効であることが見
出された。

２５”ｖまでの投与量で１５日間連続して鼻内（ＩＮ）
投与して処置した動物に、インターフェロンによる毒性
効果は認められなかつ九。

１６日目のインターフェロンの血清レベルはバックグラ
ウンドレベルよシも僅かく高いだけであることが見出さ
れた。

以前の実験で、１頭当Ｊ１００ｊｌＦまでの投与量で１
回筋肉内（ＩＭ）投与は十分耐えられることが示された
。

最初のインターフェロンＩＭ投与の後に、一時的な穏や
かな白血球減少症および中程度の発熱反応が観察される
。白血球数および体温は２４時間から４日以内に正常に
もどる。

繰返し投与はこれらの低下に更に影響を与えず、動物の
臨床的成果にもインターフェロンの予防的価値にも影響
を及ぼさないようである。

ｒＢｏＩＦＮ−α１１の抗ウイルス効力を、牛起因の糧
々のウィルスと戦う生細胞系統について試験した。通常
単位Ｕ／ｍｊで表わされるか単位Ｕ／）蛋白質〔比放射
能（ｓｐｅｃｉｆｉｃａｃｔｉｖｉｔｙ　）　］に変換
される活性力価は、希釈度の逆数を示すが、ウィルス−
誘発細胞病理効果（ｃｙｔｏｐｈａｔｉｃ　ｅｆｆｅｃ
ｔｓ）　（斑点）を５０チ阻止する。

ｒＢｏＩＰＮ−ｄｌｌは通常殆んど％ＢＲＤ’を患う家
畜から単離されるウィルスの複製を阻止する。

ｂ）イン　ヴイトロでの免疫変調効果 イン　ヴイトロでの免疫変調効果を評価するために、生
食細胞（好中球、血液単細胞および肺胞大食細胞）をｒ
ＢｏＩＦＮ−α１１で処理する。

観察された効果は多様で、全ての５タイプの細胞による
細胞摂取の増大および肺胞大食細胞でのＰｃ受体活性の
増大、単核細胞およびポリモルフの直接およびランダム
な移動の阻止、酵素放出又は不活化の増大、過酸化水素
発生の増大および肺胞大食細胞およびＰＭＮ白血球によ
る超酸化アミン放出の減少を含む。

これらの効果は投与量および時期に依存する。

種々の白血球機能を、ＢＨＶ−Ｉ／パスツレラハエモリ
チカの試験的感染過程全体を通じて測定して、インター
フェロンはイン　ヴイトロで免疫変調に役割を果すか否
か、従って罹病率および死亡率を減少させることになる
か否かを調べた。

模型試験において、最大の免疫抑制が感染後４日目に生
じ、その時期は細菌感染による罹病率が最高となる時期
である。

十組換えインターフェロンの好中球移動および化学走性
に対する効果ｔ−調べるために、インターフェロン−処
理した又は凝集を投与した動物の末梢血液に存在する好
中球を、移動および化学走性試験で測定する。

両者の場合、好中球機能は感染の後に抑制される。

しかしながら、ＩＰＮ処ｉグループにおいて、好中球機
能は凝集投与したグループよりもずつと急速に正常に戻
る。

好中球機能の変調は、化学ルミネセンス試験で、反応性
酸素種の生成を測定することによシ更に示される。この
試験を用いて、工ＦＮ処理は、パスツレラ　ハエモリチ
カと戦う動物中で好中球が反応性酸素種を生成する能力
を劇的に増大させることが示される。

最初の研究で、７７０頭の雄の子牛（ｓｔｅｅｒｓ）を
購入し、トラックで販売小屋に輸送し、次に飼育用地に
輸送する。到着すると、動物を無作為に囲いに割り当て
る。各々の動物に２ｄ又は等制量の凝集中のγＢｏＩＦ
Ｎ−α１１を鼻孔当り５ｑ与える。

元気のなさ、食欲減退又は呼吸性症状の臨床的徴候を記
録する（付録参照）。病気の動物は抗生物質で処理する
。

結果を下記第１表に要約する。

第１表 凝集　　　３ａ２　　　　　１１９５６　　　　４６　
　　α９１ｔ　病気の動物数／動物全体数 呼吸系疾患を患う動物の数および１動物当りの病気日数
は著しく減少する。同様に、重量増加および飼育効率は
改良される。

研究用飼育用地で行った別の研究で、筋肉内注入で投与
したｒＢｏＩＦＮ−ａ工１　　（１０”ＰＩ　ＦＮ／動
物）又は凝集と共に鼻内点滴注入（５ｑＩＦＮ／鼻孔）
したｒＢｏＩＦＮ−ａｃｌの効果を比較する。

２００　ｋＦ重量範囲のシングルセックス子牛３０″０
頭を購入し、商業的販売小屋を通過させて適当な呼吸系
感染状態に曝し、そして商業的輸送実施に似せた条件下
で研究地にトラック輸送する。

インターフェロンの適用は、飼育用地に到着する６２〜
６４時間前の販売小屋で行う。

別の研究で、工ＦＮを飼育用地に到着した時点でのみ投
与する。

各投与方法についての病気の動物のパーセント、病気日
数、および死亡率パーセントを、インターフェロンを与
えない対照グループと比較する。その結果を下記の表に
示す。

第２表 ｉ牛への牛アルファーインターフェロンー工１投与の現
場研究結果１、　グループ内で：２１日間の観察期間に
おける病気日数合計／動物数。

上記の実験過程で、工Ｍ又はＩＮ投与されたｒＢｏＩＦ
Ｎα１−Ｉは、研究の初めの３週間の間Ｂ几りの重さお
よび発生の両者を明らかに低減したことが示された。

６−１地方的子牛肺炎ｌの現場試験 亀地方的子牛肺炎Ｉに対するｒＢＯＩＦＮ−α工１の効
果も、商業条件下にて評価する。

交配繁殖したｙ　メｙ　Ｉ　−／Ｉ／　（Ｓｉｍｍｅｎ
ｔａｌ）およびホルスタイン種の生後２〜３週間、重さ
５０〜６５輪の乳牛用子牛６０〜８０頭を種々の販売元
から購入し、販売小型に輸送しそして次にスト、オウビ
ｙ　（ａｔ、　Ａｕｂｉｎ）、スイス、のチバーガイギ
ー研究所に運ぶ。臨床的に健康な子牛のみを入れる。研
究前に病気の徴候が示された動物は排除する。

到着後、それらの子牛を秤量し、各々に札を付け、そし
て層形成無作為化（ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄｒａｎｄｏｍ
ｉｚａｔｉｏｎ　）　（性、重量）により、閉鎖した牛
舎内で処理グループ毎に二つの再現した囲いに割り当て
る。

それらを薬物を入れないミルク代替物で飼育する。これ
らの条件下で、高割合の子牛（７０〜９０％）が到着か
ら３〜１５日以内に自然にゝＢＲＤ＃を発現する。毎日
の臨床的検査を３週間行う。次のパラメーターを試験す
る：呼吸速度、咳、券排出、体温、食欲および行動（付
録１参照）。

第３表 病気の発生 実験子牛　処置２　　　　　　　　投与量　病　気の数
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　発生率＠）
１１　５８　対照／Ｈ！０　　°　　　　　　　−１６
／１９　（８５）ＩＦＮ　ｄ　　ｏ　　（１ｘ）　　　
　　　０．５　　１１／１８（６２）ＩＦＮ　ｄ　　Ｏ
（１ｘ）　　　　　　ｃ３．０　　１３／２１（４２）
２　５９　対照／Ｈ雪０　　　　　　　　　−　　１６
／１８（９０）ＩＦＮ　ｄ　Ｏ（ｌｘ）　　ａｏ　　１
６／２０（８０）ＩＦＮｄｏ、７，１４（３ｘ）　　　
５．０　　１０／２１（４８）５　７８　対照　　　　
　　　　　　　　　−２６／２９　（８９）ＩＦＮ　ｄ
　　Ｏ，４（２ｘ）　　　　　ａｏ　　　２０／２２（
９０）ＩＦＮ　ｄ　　Ｏ（ＩＸ）　　　　　５，０　　
１８／２７（６７）１、該グループ内で：病気の動物数
／全動物数２　首の筋肉に筋肉内注入（２ゴ溶液）ｄ　
牛舎に入れた日（０）を基準として、処置し九日第４表 １　１９　対照／Ｈ冨０　　　　　　　　　　−　　１
，８４１８　　ＩＦＮ　ｄ　　Ｏ（ＩＸ）　　　　　０
，５　１．２８２１　　ＩＦＮ　ｄ　　Ｏ（１ｘ）　　
　　　ｓ、ＯＬ１４２　１Ｂ　対照／Ｈ＊Ｏ−１，２ ２０ＩＦＮ　ｄ　　Ｏ（ＩＸ）　　５，０　１．１２１
　　ＩＦＮ　ｄ　　Ｏ，７，１４（３Ｘ）　　５．ＯＱ
、９０５　２９　対照　　　　　　　　　　　　　　−
１，３４２２ＩＦＮ　ｄ　　Ｏ，４（２Ｋ）　　　　５
，０　１ｊ６２７　　ＩＦＮ　ｄ　　Ｏ（ｌｘ）　　　
　ｓ、ｏ　　１，００１　該グループで＝２１日間の観
察期間中で病気日数の合計／動物数 全ての処置されたグループは、凝集対照と比較して臨床
的に改善された；病気の累積的発生および動物１頭当り
の病気日数は減少した。

インターセプターを週毎に０．７および１４日目に投与
すると、死亡率を５０チ以下に減少させた。

付録１ 症状の重さについて５種のカテゴリーを、正常に１の得
点をそして最も重い症状に得点５を与えて関係づける。

呼吸速度　　３５　　　　　　　　　　　　　　１３５
〜６０　　　　　　　　　　　２ 〉６０　　　　　　　　　　　　　３ せき　　　せきなし　　　　　　　　　　　１頻繁でな
い、痛みなＬＡ穏やか　　　２激しい、痛い、頻繁そし
て呼吸　　　３危機 真数出物　　なし　　　　　　　　　　　　　　　１漿
液　　　　　　　　　　　　　　　２粘液膿　　　　　
　　　　　　　　５ 聴　　診　　正常　　　　　　　　　　　　　　　１増
大し九気管支音　　　　　　　　　２音高イゴロゴロ鳴
る騒音と多く　　　。

の湿っぽいう音と肋膜炎の徴候 体　　温　　３９．５’　　　　　　　　　　　　　　
　　１３９．５＠〜４Ｉ１５’　　　　　　　　　２）
４（Ｌ１２　　　　　　　　　　　５体温は１日２回測
りそして平均 を記録する。

食　　欲　　通常　　　　　　　　　　　　　　　　１
減少　　　　　　　　　　　　　　　２食欲欠乏　　　
　　　　　　　　　　３挙　　動　　正常　　　　　　
　　　　　　　　　　１中程度に元気がない　　　　　
　　　２非常に元気なく瀕死状態　　　　　　５その他
の全ての臨床的症状も記録しなければならない（下痢、
関節炎） 全てのパラメーターに係数をかけて、全体平均値を出す
＠ 呼吸速度　　Ｘ３　　− せ　　　　　き　　　　　×　１　　　　−真数出物　
　×２　− 聴　　　診　　　×２　　一 体　　　温　　　×３　　− 食　　　欲　　　×５　　− 挙　　　動　　　×２　　− 合計　− 合計／１６＝全体平均値 病気の進行の分析は、全体平均値（ＯＭＶ）の進展、該
曲線下の面積（ＡＵＧ）およびＡＵＧとＯＭＶの進展か
ら得られる。処１法間の比較は、共変動（ｃｏｖａｒｉ
ａｎｃｅ　）分析により行われる。

特許出願人　チノく−ガイギー　アクチェンゲゼルシャ
フト

Claims (18)

【特許請求の範囲】
1. （１）感染性疾患−生起性ウィルス又は微生物に感染す
   る前に、若い家畜に予防的有効量の牛インターフェロン
   を全身投与することを特徴とする、牛型呼吸系疾患合併
   症の発生および重症度を低減する方法。
2. （２）牛インターフェロンがアルファー牛インターフェ
   ロンである、特許請求の範囲第１項の方法。
3. （３）アルファー牛インターフェロンがアルファー牛イ
   ンターフェロンＩ＿１である、特許請求の範囲第２項の
   方法。
4. （４）アルファー牛インターフェロンＩ＿１が組換えア
   ルファー牛インターフェロンＩ＿１である、特許請求の
   範囲第３項の方法。
5. （５）全身投与が筋肉内施用を含む、特許請求の範囲第
   １項の方法。
6. （６）インターフェロンの投与が販売小屋で行われる、
   特許請求の範囲第１項の方法。
7. （７）インターフェロンの投与が家畜置場で行われる、
   特許請求の範囲第１項の方法。
8. （８）インターフェロンの投与が飼育用地で行われる、
   特許請求の範囲第１項の方法。
9. （９）インターフェロンの予防的有効量が０．５ｍｇイ
   ンターフェロン／動物ないし２５０ｍｇインターフェロ
   ン／動物である、特許請求の範囲第１項の方法。
10. （１０）インターフェロンの予防的有効量が１ｍｇイン
    ターフェロン／動物ないし５０ｍｇインターフェロン／
    動物である、特許請求の範囲第１項の方法。
11. （１１）インターフェロンの予防的有効量が３ｍｇイン
    ターフェロン／動物ないし１０ｍｇインターフェロン／
    動物である、特許請求の範囲第１項の方法。
12. （１２）インターフェロンの予防的有効量がほぼ５ｍｇ
    インターフェロン／動物ないし１０ｍｇインターフェロ
    ン／動物である、特許請求の範囲第１項の方法。
13. （１３）牛インターフェロンの一回投与を行う、特許請
    求の範囲第１項の方法。
14. （１４）牛インターフェロンの繰返し投与を行う、特許
    請求の範囲第１項の方法。
15. （１５）牛インターフェロンの投与を、感染性疾患−生
    起性微生物又はウィルスに曝露した時点を基準にして０
    ．７および１４日目に行う、特許請求の範囲第１項の方
    法。
16. （１６）感染性疾患−生起性ウィルス又は微生物に感染
    する前に若い家畜に予防的有効量の牛インターフェロン
    を筋肉内投与することを特徴とする、牛型呼吸系疾患合
    併症の発生および重症度を低減する方法。
17. （１７）若い家畜が肥育前に集められた最初の機会に、
    該若い家畜に予防的有効量の牛インターフェロンを筋肉
    内投与することを特徴とする、牛型呼吸系疾患合併症の
    発生および重症度を低減する方法。
18. （１８）牛型呼吸系疾患合併症の発生および重症度を低
    減するために若い家畜を予防処置するための組換えアル
    ファー牛−インターフェロンＩ＿１の使用法。