JPS6384481A - 細胞融合装置 - Google Patents
細胞融合装置Info
- Publication number
- JPS6384481A JPS6384481A JP61232873A JP23287386A JPS6384481A JP S6384481 A JPS6384481 A JP S6384481A JP 61232873 A JP61232873 A JP 61232873A JP 23287386 A JP23287386 A JP 23287386A JP S6384481 A JPS6384481 A JP S6384481A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell fusion
- ring
- cell
- microscope
- chamber
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Electromagnetism (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、電気刺激を利用して細胞どおしを融合させた
り、細胞に遺伝子などの高分子を導入させたりするため
の細胞融合装置に関するものである。
り、細胞に遺伝子などの高分子を導入させたりするため
の細胞融合装置に関するものである。
（従来の技術）
一対の対向する電極を有し、それらの電極間の空間に細
胞を懸濁させた細胞懸濁液を収容し、電極に電圧を印加
することによって細胞に電気刺激を与え、細胞どうしを
融合させたり、■胞に遺伝子などを導入させたりする細
胞融合チャンバが使用されている。
胞を懸濁させた細胞懸濁液を収容し、電極に電圧を印加
することによって細胞に電気刺激を与え、細胞どうしを
融合させたり、■胞に遺伝子などを導入させたりする細
胞融合チャンバが使用されている。
これまでは、細胞融合などは実験室の段階で小規模に行
なわれているに過ぎず、また細胞懸濁液の供給、電圧の
印加、細胞ｌ！Ｉ濁液の回収といったそれぞれの操作は
不連続に行なわれている。
なわれているに過ぎず、また細胞懸濁液の供給、電圧の
印加、細胞ｌ！Ｉ濁液の回収といったそれぞれの操作は
不連続に行なわれている。
（発明が解決しようとする問題点）
これまで細胞融合あるいは遺伝子導入などの操作を連続
的に、かつ、大量に処理しようとした細胞融合装置は存
在していない。
的に、かつ、大量に処理しようとした細胞融合装置は存
在していない。
本発明は細胞融合や遺伝子導入などの処理を連続的に行
なうとともに、大量処理も可能にし、また、これらの操
作を自動化することの可能な細胞融合装置を提供するこ
とを目的とするものである。
なうとともに、大量処理も可能にし、また、これらの操
作を自動化することの可能な細胞融合装置を提供するこ
とを目的とするものである。
（問題点を解決するための手段）
実施例を示す第１図を参照して説明すると、本発明の細
胞融合装置では、複数個の細胞融合チャンバ（２−１〜
２−ｎ）をリング状に連結するとともに、この連結され
た細胞融合チャンバのリング（２）を回転可能に支持し
、リング（２）の細胞融合チャンバ（２−１〜２−ｎ）
を１個ずつ送って回転させる送り機＊（２６，２８）を
設け、リング（２）を顕微鏡のステージ上を通過するよ
うに取りつけ、リング（２）の回転方向に沿って顕微鏡
のステージの位置（３０）の手前の位置の細胞融合チャ
ンバ（２−１）に細胞ｌ＠濁液を供給する供給機構（３
６，３８）を設け、顕微鏡のステージの位置（３０）の
細胞融合チャンバ（２−２）の一対の電極にそれぞれ当
接する摺動電極（３２゜３４）を設け、かつ、リング（
２）の最終段の位置（２−ｎ）には細胞懸濁液の回収機
構（４０゜４２．４４．４６）を設けた。
胞融合装置では、複数個の細胞融合チャンバ（２−１〜
２−ｎ）をリング状に連結するとともに、この連結され
た細胞融合チャンバのリング（２）を回転可能に支持し
、リング（２）の細胞融合チャンバ（２−１〜２−ｎ）
を１個ずつ送って回転させる送り機＊（２６，２８）を
設け、リング（２）を顕微鏡のステージ上を通過するよ
うに取りつけ、リング（２）の回転方向に沿って顕微鏡
のステージの位置（３０）の手前の位置の細胞融合チャ
ンバ（２−１）に細胞ｌ＠濁液を供給する供給機構（３
６，３８）を設け、顕微鏡のステージの位置（３０）の
細胞融合チャンバ（２−２）の一対の電極にそれぞれ当
接する摺動電極（３２゜３４）を設け、かつ、リング（
２）の最終段の位置（２−ｎ）には細胞懸濁液の回収機
構（４０゜４２．４４．４６）を設けた。
（実施例）
第１図は本発明の一実施例を示す概略平面図。
第２図は同実施例における細胞融合チャンバのリングの
一部を示す平面図、第３図は第１図におけるＡ−Ｂ線位
置での断面図である。
一部を示す平面図、第３図は第１図におけるＡ−Ｂ線位
置での断面図である。
２は細胞融合チ、ヤンバのリングであり、細胞融合チャ
ンバ２−１．２−２．・・・・・・２−ｎがリング状に
連結されている。
ンバ２−１．２−２．・・・・・・２−ｎがリング状に
連結されている。
細胞融合チャンバ２−１．２−２．・・・・・・２−ｎ
は、第２図及び第３図に示されるように、それぞれの細
胞融合チャンバの間は絶縁物のセパレータ４によって分
離されている。セパレータ４で分離された細胞融合チャ
ンバ２−１．２−２．・・・・・・２−ｎのそれぞれは
、リング内側の絶縁部材にてなるチャンバ本体６と、リ
ング外側の同じく絶縁部材にてなるチャンバ本体８とを
持ち、これらのチャンバ本体６，８の間に透明ガラス製
のリング状の底抜１０が嵌め込まれて接着されている。
は、第２図及び第３図に示されるように、それぞれの細
胞融合チャンバの間は絶縁物のセパレータ４によって分
離されている。セパレータ４で分離された細胞融合チャ
ンバ２−１．２−２．・・・・・・２−ｎのそれぞれは
、リング内側の絶縁部材にてなるチャンバ本体６と、リ
ング外側の同じく絶縁部材にてなるチャンバ本体８とを
持ち、これらのチャンバ本体６，８の間に透明ガラス製
のリング状の底抜１０が嵌め込まれて接着されている。
それぞれの細胞融合チャンバ２−１．２−２．・・・・
・・２−ｎでは、外側の電極１２と内側の電極１４が平
行に対向して設けられ、これらの電極１２，１４の対向
部分は下部においては垂直面を持ち、それらの上部はテ
ーパ状に広がっている。両電極１２゜１４の対向した垂
直面の部分で形成される空間１６は、細胞１フ濁液を収
容し、細胞に電気刺激を与える空間である。
・・２−ｎでは、外側の電極１２と内側の電極１４が平
行に対向して設けられ、これらの電極１２，１４の対向
部分は下部においては垂直面を持ち、それらの上部はテ
ーパ状に広がっている。両電極１２゜１４の対向した垂
直面の部分で形成される空間１６は、細胞１フ濁液を収
容し、細胞に電気刺激を与える空間である。
細胞融合チャンバのリング２は、第１図に示さるように
、台１８上に設けられた４個のローラ２０によってその
内側が支持され１台１８上で回転することができる。台
１８は第３図に示さるように、顕微鏡位置３０で顕微鏡
のステージ２２に固定され、細胞融合チャンバ２−ｉ、
２−２．・・・・・・２−ｎは顕微鏡のステージ２２上
を順次通過する。
、台１８上に設けられた４個のローラ２０によってその
内側が支持され１台１８上で回転することができる。台
１８は第３図に示さるように、顕微鏡位置３０で顕微鏡
のステージ２２に固定され、細胞融合チャンバ２−ｉ、
２−２．・・・・・・２−ｎは顕微鏡のステージ２２上
を順次通過する。
第３図において２４は顕微鏡の対物レンズである。
細胞融合チャンバのリング２の外側には各細胞融合チャ
ンバごとに１個ずつの爪２６が設けられており、台１８
上にはエアーシリンダ２８が設けられ、エアーシリンダ
２８が爪２６を押すことによって細胞融合チャンバのリ
ング２はローラ２゜によって規制された回転をする。細
胞融合チャンバのリング２は爪２６のピッチで、すなわ
ち細胞融合チャンバ１個ずつのピッチで回転させられて
いく。
ンバごとに１個ずつの爪２６が設けられており、台１８
上にはエアーシリンダ２８が設けられ、エアーシリンダ
２８が爪２６を押すことによって細胞融合チャンバのリ
ング２はローラ２゜によって規制された回転をする。細
胞融合チャンバのリング２は爪２６のピッチで、すなわ
ち細胞融合チャンバ１個ずつのピッチで回転させられて
いく。
いま、細胞融合チャンバ２−２が顕微鏡位置３０にある
ものとすると、この顕微鏡位置３０における細胞融合チ
ャンバには外側電極１２には摺動端子３２が押しつけら
れ、内側電極１４には摺動端子３４が押しつけられてい
る。摺動端子３２はマイナス側電源に接続され、摺動端
子３４はプラス側電源に接続される。
ものとすると、この顕微鏡位置３０における細胞融合チ
ャンバには外側電極１２には摺動端子３２が押しつけら
れ、内側電極１４には摺動端子３４が押しつけられてい
る。摺動端子３２はマイナス側電源に接続され、摺動端
子３４はプラス側電源に接続される。
細胞融合チャンバのリング２の回転方向（図で反時計方
向）に対して顕微鏡位置３０の細胞融合チャンバ２−２
の−っ手前の細胞融合チャンバ２−１の位置には、細胞
を懸濁させた細胞懸濁液を供給するホッパ３６が設けら
れ、ホッパ３６の細胞Ｓ濁液はシリンジピストン３８に
よって一定量だけ細胞融合チャンバ２−１に供給される
。
向）に対して顕微鏡位置３０の細胞融合チャンバ２−２
の−っ手前の細胞融合チャンバ２−１の位置には、細胞
を懸濁させた細胞懸濁液を供給するホッパ３６が設けら
れ、ホッパ３６の細胞Ｓ濁液はシリンジピストン３８に
よって一定量だけ細胞融合チャンバ２−１に供給される
。
細胞融合チャンバのリング２の回転方向に対して最終段
の細胞融合チャンバ２−ｎには、細胞懸濁液を回収する
回収口４０が設けられている。回収口４０はエアーシリ
ンダ４２によって上下動し、細胞融合チャンバ内にその
回収口を入れることができる。回収口４０は回収箱４４
を経て真空ポンプ４６で吸引され、融合の終った細胞が
回収箱４４に回収される。
の細胞融合チャンバ２−ｎには、細胞懸濁液を回収する
回収口４０が設けられている。回収口４０はエアーシリ
ンダ４２によって上下動し、細胞融合チャンバ内にその
回収口を入れることができる。回収口４０は回収箱４４
を経て真空ポンプ４６で吸引され、融合の終った細胞が
回収箱４４に回収される。
次に、本実施例の動作について説明する。
ホッパ３６からシリンジピストン３８によって一定量の
細胞懸濁液が細胞融合チャンバ２−１に供給される。次
にエアーシリンダ２８を駆動することによって細胞融合
チャンバ１個分だけ細胞融合チャンバのリング２を回転
させる。これによって細胞懸濁液の供給された細胞融合
チャンバ２−１が顕？＆鏡位置３０に送られるとともに
１回収口４０で回収されて空になった細胞融合チャンバ
２−ｎがホッパ３６の位置に送られる。顕微鏡位置３０
では細胞融合に必要な所定の電圧が摺動端子３２．３４
によって印加されるとともに、顕微鏡で融合状態が観察
される。エアーシリンダ２８を順次駆動していくことに
よって顕′＃鏡位置３０で電気刺激の与えられた細胞懸
濁液を持つ細胞融合チャンバが順次回収口４０のある位
置まで送られる。最終段の位置において回収口４０によ
って、融合操作の終った細胞懸濁液が回収される。
細胞懸濁液が細胞融合チャンバ２−１に供給される。次
にエアーシリンダ２８を駆動することによって細胞融合
チャンバ１個分だけ細胞融合チャンバのリング２を回転
させる。これによって細胞懸濁液の供給された細胞融合
チャンバ２−１が顕？＆鏡位置３０に送られるとともに
１回収口４０で回収されて空になった細胞融合チャンバ
２−ｎがホッパ３６の位置に送られる。顕微鏡位置３０
では細胞融合に必要な所定の電圧が摺動端子３２．３４
によって印加されるとともに、顕微鏡で融合状態が観察
される。エアーシリンダ２８を順次駆動していくことに
よって顕′＃鏡位置３０で電気刺激の与えられた細胞懸
濁液を持つ細胞融合チャンバが順次回収口４０のある位
置まで送られる。最終段の位置において回収口４０によ
って、融合操作の終った細胞懸濁液が回収される。
ホッパ３６からの細胞懸濁液の供給、顕微鏡位置３０で
の融合電圧の印加、電圧印加が終了した後の融合時間及
び３回収口４０からの細胞懸濁液の回収が連続的に行な
われ、かつ、これらの一連の操作はすべての細胞融合チ
ャンバ２−１．２−２゜・・・・・・２−ｎについて順
次行なわれていく。
の融合電圧の印加、電圧印加が終了した後の融合時間及
び３回収口４０からの細胞懸濁液の回収が連続的に行な
われ、かつ、これらの一連の操作はすべての細胞融合チ
ャンバ２−１．２−２゜・・・・・・２−ｎについて順
次行なわれていく。
エアーシリンダ２８によって細胞融合チャンバを送る回
転速度は、１ステップ当り１０〜２０秒程度である。そ
して細胞Ｓ濁液が供給され、細胞が沈降し、顕微鏡位置
において摺動端子３２，３４から細胞を泳動させる電気
泳動のための電圧印加と、融合させるためのパルス印加
を行ない、融合時間を経て最後に回収口４０から回収さ
れるまでの時間は約５〜１５分程度である。したがって
、これらの各ステップの処理時間と細胞融合チャンバの
リング２の回転速度を細胞融合チャンバの数に応じて調
整することができる。
転速度は、１ステップ当り１０〜２０秒程度である。そ
して細胞Ｓ濁液が供給され、細胞が沈降し、顕微鏡位置
において摺動端子３２，３４から細胞を泳動させる電気
泳動のための電圧印加と、融合させるためのパルス印加
を行ない、融合時間を経て最後に回収口４０から回収さ
れるまでの時間は約５〜１５分程度である。したがって
、これらの各ステップの処理時間と細胞融合チャンバの
リング２の回転速度を細胞融合チャンバの数に応じて調
整することができる。
（亮月の効果）
本発明の細胞融合装置では、複数個の細胞融合チャンバ
をリング状に連結し、このリングの細胞融合チャンバを
１個ずつ送って細胞懸濁液の供給、顕微鏡位置での電圧
の印加、電圧印加が終了した後の融合時間の待機及び回
収口からの細胞懸濁液の回収を連続的に行なうようにし
たので１次のような効果を達成することができる。
をリング状に連結し、このリングの細胞融合チャンバを
１個ずつ送って細胞懸濁液の供給、顕微鏡位置での電圧
の印加、電圧印加が終了した後の融合時間の待機及び回
収口からの細胞懸濁液の回収を連続的に行なうようにし
たので１次のような効果を達成することができる。
（１）単位時間に大量の細胞融合や遺伝子導入の処理を
行なうことができる。
行なうことができる。
（２）人手がかからず、自動制御を行なうことができる
。
。
（３）小型化が可能であり、クリーンベンチ内における
無菌操作を行なうことができる。
無菌操作を行なうことができる。
第１図は本発明の一実施例を示す概略平面図、第２図は
同実施例における細胞融合チャンバのリングの一部を示
す平面図、第３図は第１図におけるＡ−Ｂ線位置での断
面図である。 ２・・・・・・細胞融合チャンバのリング、２−１〜２
−ｎ・・・・・・細胞融合チャンバ、２０・・・・・・
ローラ、 ２２・・・・・・顕微鏡のステージ、 ２６・・・・・・爪。 ２８．４２・・・・・・エアーシリンダ、３０・・・・
・・顕微鏡位置。 ３２．３４・・・・・・摺動電極、 ３６・・・・・・ホッパ、 ３８・・・・・・シリンジピストン。 ４０・・・・・・回収口、 ４４・・・・・・回収箱、 ４６・・・・・・真空ポンプ。
同実施例における細胞融合チャンバのリングの一部を示
す平面図、第３図は第１図におけるＡ−Ｂ線位置での断
面図である。 ２・・・・・・細胞融合チャンバのリング、２−１〜２
−ｎ・・・・・・細胞融合チャンバ、２０・・・・・・
ローラ、 ２２・・・・・・顕微鏡のステージ、 ２６・・・・・・爪。 ２８．４２・・・・・・エアーシリンダ、３０・・・・
・・顕微鏡位置。 ３２．３４・・・・・・摺動電極、 ３６・・・・・・ホッパ、 ３８・・・・・・シリンジピストン。 ４０・・・・・・回収口、 ４４・・・・・・回収箱、 ４６・・・・・・真空ポンプ。
Claims (1)
- （１）複数個の細胞融合チャンバをリング状に連結する
とともに、この連結された細胞融合チャンバのリングを
回転可能に支持し、前記リングの細胞融合チャンバを１
個ずつ送って回転させる送り機構を設け、前記リングを
顕微鏡のステージ上を通過するように取りつけ、前記リ
ングの回転方向に沿って顕微鏡のステージの位置の手前
の位置の細胞融合チャンバに細胞懸濁液を供給する供給
機構を設け、顕微鏡のステージの位置の細胞融合チャン
バの一対の電極にそれぞれ当接する摺動電極を設け、か
つ、リングの最終段の位置には細胞懸濁液の回収機構を
設けた細胞融合装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61232873A JPS6384481A (ja) | 1986-09-29 | 1986-09-29 | 細胞融合装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61232873A JPS6384481A (ja) | 1986-09-29 | 1986-09-29 | 細胞融合装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6384481A true JPS6384481A (ja) | 1988-04-15 |
Family
ID=16946166
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61232873A Pending JPS6384481A (ja) | 1986-09-29 | 1986-09-29 | 細胞融合装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6384481A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63269977A (ja) * | 1987-04-30 | 1988-11-08 | Hitachi Ltd | 細胞融合方法 |
| JP2017514475A (ja) * | 2014-05-02 | 2017-06-08 | ロンザ ケルン ゲーエムベーハー | 大量のトランスフェクションのためのデバイス及び方法 |
| EP3862418A1 (en) * | 2020-02-07 | 2021-08-11 | Bühler AG | Device for treating cells |
| US12559709B2 (en) | 2020-02-07 | 2026-02-24 | Bühler AG | Modified treatment chamber for treating cells |
-
1986
- 1986-09-29 JP JP61232873A patent/JPS6384481A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63269977A (ja) * | 1987-04-30 | 1988-11-08 | Hitachi Ltd | 細胞融合方法 |
| JP2017514475A (ja) * | 2014-05-02 | 2017-06-08 | ロンザ ケルン ゲーエムベーハー | 大量のトランスフェクションのためのデバイス及び方法 |
| JP2019213539A (ja) * | 2014-05-02 | 2019-12-19 | ロンザ ケルン ゲーエムベーハー | 大量のトランスフェクションのためのデバイス及び方法 |
| EP3862418A1 (en) * | 2020-02-07 | 2021-08-11 | Bühler AG | Device for treating cells |
| WO2021156366A1 (en) * | 2020-02-07 | 2021-08-12 | Bühler AG | Device for treating cells |
| CN115038782A (zh) * | 2020-02-07 | 2022-09-09 | 布勒股份公司 | 用于处理细胞的装置 |
| US12559709B2 (en) | 2020-02-07 | 2026-02-24 | Bühler AG | Modified treatment chamber for treating cells |
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