KR0177295B1 - 이소퀴놀린 화합물을 함유하는 항우울제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 하기 구조식의 이소퀴놀린 화합물을 함유하는 항우울제에 관한 것으로, 파파베린, 에타베린과 같은 이소퀴놀린 화합물은 칼슘 길항 작용이 있으며 항우울제로서의 활성을 가지고 있을 뿐 아니라, 기존의 항우울제와 함께 사용할 경우 항우울제 효능을 상승시키는 효과를 가지므로 더욱 강력하고 탁월한 항우울 작용을 보여준다.

여기에서, X는 수소 또는 알킬을 의미한다.

Description

이소퀴놀린 화합물을 함유하는 항우울제

제1도는 PC12 세포에서 L형 전압 의존성 칼슘 이온 통로를 통한 칼슘 유입에 대하여, 파파베린(A), 에타베린(B) 및 니페디핀(C)의 작용을 보여주는 그래프이고.

제2도는 에타베린의 투여 용량에 따른 항우울제 효능을 보여주는 그래프이고.

제3도는 에타베린과 다른 항우울제를 병용 투여하였을 경우 항우울제 효능의 상승 작용을 보여주는 그래프이다.

본 발명은 이소퀴놀린 화합물을 함유하는 항우울제에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항울제로서의 활성을 가지고 있을 뿐 아니라, 기존의 항우울제와 함께 사용할 경우 항우울제 효능을 상승시키는 효과를 나타내는 에타베린 등 이소퀴놀린 화합물에 관한 것이다.

이소퀴놀린 알칼로이드 계통의 화합물로서 파파베린(papaverine)과 에타베린(ethaverine)은 다음 구조식에서도 볼 수 있듯이 매우 유사한 구조를 갖는 동족체 들이다.

파파베린은 비특이적으로 평활근을 이완시키고, 전체 순환계, 심장 혈관계 및 뇌혈관계에 있어서 세동맥을 확장시킬 수 있으며, 고용량을 비경구 투여하였을 경우 A-V 노드 및 심실 전도를 억제하여 부정맥을 일으킬 수도 있는 것으로 알려져 있다.

한편, 파파베린의 테트라에틸 동족체인 에타베린도 항경련제로 사용되기도 하는데, 그의 작용에 관해서는, 심장 근육세포의 이완에 사용되는 칼슘 길항물질인 베라파밀(verapamil)이 세포막에 결합하는 것을 경쟁적으로 저해(Wang 및 Rosenberg, Mol. Pharmacol., 40, 750-755(1991))한다는 보고가 있다. 또한, 부신 암에서 유래된 PC12 세포에서 에타베린이 L형 전압 의존성 칼슘 이온 통로를 차단하여 카테콜아민의 분비를 억제한다는 것은 본 발명자들에 의하여 조사된 바 있다(Suh 및 Kim, Biochem. Pharmacol., 47, 1262-1266(1994)).

칼슘길항제는 고혈압, 협심증, 부정맥 등의 치료제로 개발되어 왔으나, 우울증의 치료에도 일부 사용되어 왔다. L형 칼슘 길항제로서 특이적 활성을 갖는 에타베린에 대하여 항우울제 시험방법을 실시한 결과 항우울제 효능이 있음이 밝혀짐으로써, 에타베린이나 파파베린과 같은 이소퀴놀린 화합물을 우울증의 치료에 사용할 수 있는 가능성이 제시되었다.

즉, 본 발명의 목적은 에타베린, 파파베린 등 이소퀴놀린 화합물을 항우울제로 사용하기 위한 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에서는 하기 구조식의 이소퀴놀린 화합물을 함유하는 항우울제 조성물을 제공한다.

여기에서, X는 수소 또는 알킬을 나타내며, 바람직하게는 메틸 또는 에틸을 의미한다.

상기 본 발명의 화합물은 공지 화합물인 파파베린(상기 구조식에서 X가 메틸인 화합물) 또는 에타베린(상기 구조식에서 X가 에틸인 화합물)의 합성 방법에 준하여 통상의 방법에 따라 제조될 수 있다.

이하 본 발명의 이소퀴놀린 화합물의 항우울제 효능에 대하여 설명한다. 본 발명의 화합물 중 파파베린과 에타베린의 칼슘 길항 작용여부를 확인하기 위해, 칼슘 이온 형광 지시약을 표지한 PC12 세포에서 세포막의 탈분극을 일으켜 L형 전압 의존성 칼슘 이온 통로를 통한 칼슘 유입을 일으킨 다음, 파파베린, 에타베린 및 기존의 L형 칼슘 길항제로 알려진 니페디핀(nifedipine)을 처리하면서 칼슘 이온 유입량의 변화를 형광 강도로서 측정하였다. 그 결과, 에타베린은 니페디핀과 동일한 칼슘 길항제 활성을 나타내었으며, 에타베린을 처리한 세포에서는 니페디핀이 더 이상 칼슘유입을 억제하지 못하는 것으로 보아 에타베린은 L형전압 의존성 칼슘 이온 통로에 대해 특이적인 저해효과가 있음을 알 수 있다. 파파베린 역시 에타베린과 마찬가지로 전압 의존성 칼슘 이온 통로에 대한 칼슘 길항 효과가 관찰되었다.

한편, 에타베린을 쥐의 복강내 투여하고 물에서 헤엄치게 하는 항우울제 시험 방법(behavioral despair test)에 따라 시험한 결과, 에타베린 용량을 20mg/kg까지 증가시켰을 때 뚜렷한 항우울 효과가 나타났다.

또한, 에타베린을 이미프라민과 같은 기존의 항우울제와 병용투여하였을 경우 매우 양호한 상승효과를 보여주었는데, 이는 베라파밀과 같은 기존의 L형 칼슘 길항제에서는 볼 수 없는 작용이다.

즉, 에타베린 등의 이소퀴놀린계 화합물은 L형 전압 의존성 칼슘 이온 통로에 대하여 칼슘 길항 효과를 가질 뿐 아니라, 베라파밀과 같은 기존의 칼슘 길항제와는 달리 항우울제 효능을 나타내며, 이미프라민과 같은 기존의 항우울제와 병용 투여시 상승작용을 나타내므로 더욱 강력하고 탁월한 항우울제 효능을 얻을 수 있다.

또한 본 발명의 이소퀴놀린계 항우울제 화합물은 상기와 같은 효과 실험시 많은 수의 래트에 단독 투여 또는 다른 항우울제와 병용투여하였으나, 어느 경우에도 특별한 부작용이나 독성을 나타내지 않았으며 외관상으로도 아무 이상을 보이지 않았다. 이는 파파베린이나 에타베린 등 본 발명의 화합물이 이미 안정성이 확보되어 임상적으로 사용되고 있는 약물이라는 사실과도 일치하는 것이다.

본 발명의 이소퀴놀린계 항우울제 화합물은 0.1 내지 1000mg/kg, 바람직하게는 1내지 100mg/kg의 용량 범위내에서, 단독 또는 다른 항우울제 화합물과 병용하여, 경구 또는 비경구적으로 투여할 수 있다.

이하에서는 본 발명을 실시예에 의하여 구체적을 설명한다.

단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명이 이들만으로 제한되는 것은 아니다.

[실시예 1]

파파베린의 L형 전압 의존성 칼슘 길항 작용

세포내 칼슘 이온 농도는 형광표지시약인 fura-2 (Molecular Proves 사, 미국)를 사용하여 측정하였다. 3μM의 fura-2/AM이 들어 있는 RPMI 1640 배지에 PC12 세포(ATCC)를 40분 동안 배양한 다음, 록크 용액(Locke's solution; 154 mM NaAC1, 5.6 mM KCL, 2.2 mM CaCl₂, 1.2 mM MgCl₂, 10mM포도당 및 5mMHEPES, pH 7.4)으로 세척하였다, 세포 내로 들어간 fura-2가 세포 밖으로 빠져나오는 것을 방지하기 위하여 실험하는 모든 용액에 250μM의 설핀피라존을 첨가하였다. 실험중에는 록크 용액의 온도를 37℃로 일정하게 유지하면서 세포 현탁액을 교반하였다.

세포 밖에 고농도의 KC1용액을 가하여 세포 밖 K⁺농도를　높여서　세포막의탈분극을　유도하였다．파파베린은　ＫＣ１을　처리하기　３분　전부터　전처리하였으며，대조군으로는　같은　양의　에탄올을　전처리하였다．세포　내의　형광도　변화는，　３４０ｎｍ와　３８０ｎｍ에서　번갈아가면서　여기시키고　５００ｎｍ에서　방출되는　값을　구한　다음　그　비율을　구하고（３４０／３８０），　그린키비츠　등의　방법（Ｇｒｙｎｋｉｅｗｉｃｚ，　ｅｔ　ａｌ．Ｊ．Ｂiol　Ｃｈｅｍ．　２６０，　３４４０－３４５０（１９８５））에　따라　칼슘　농도로　변환시켰다．

제１ａ도는　ＰＣ１２세포에서　Ｌ형　전압　의존성　칼슘　이온　통로를　칼슘　유입에　대하여，　파파베린의　작용을　보여주는　그래프로서，　실선은　대조군에　의한　칼슘　이온　농도 변화를　나타내고　점선은　파파베린　２０μＭ 농도에서　칼슘　이온　농도의　변화를　나타낸다．　여기에서　보듯이，　파파베린은　Ｌ형　전압　의존성　칼슘　이온　통로의　저해활성이　있음을　알　수　있다．

［실시예　２］

에타베린　Ｌ형　전압의　의존성　칼슘　길항　작용

실시예　１에서와　같이，　ｆｕｒａ－２／ＡＭ을　ＰＣ１２　세포에　표지시하고　７０ｍＭ　ＫＣ１을　처리하여　세포막의　탈분극을　유도함으로써　전압　의존성　칼슘　이온　통로를 통한　칼슘　유입을　일으킨　다음，　에타베린과　니페디핀（ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ）을　순차적으로　처리하면　세포내　칼슘　이온의　변화를　관찰하였다．

제１ｂ，ｃ도는　ＰＣ１２세포에서　Ｌ형　전압　의존성　칼슘이온　통로를　통한　칼슘　유입에　대하여，　에타베린（Ｂ）과　니페디핀（Ｃ）의　작용을　보여주는　그래프이다．　여기에서　보듯이，　에타베린은　기존의　Ｌ형　칼슘　길항제로　알려진　니페디핀과　동일한　활성을　나타내었으며，　에타베린을　처리한　세포에서는　니페디핀이　더　이상　칼슘　유입을　억제하지　못하는　것으로　보아　에타베린도　Ｌ형　전압　의존성　칼슘　이온　통로에　있어서의　칼슘　유입에　대하여　특이적인　저해　효과가　있음을　알　수　있다．

［실시예３］

에타베린의　항우울제　효능　시험

래트（Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ）를　여러　그룹으로　나누어，　각각　약물을　５，　１０，　１５　및　２０ｍｇ／ｋｇ의　용량으로　하루　１회씩　１０일　동안　복강내　주사하고　항우울제　시험방법（ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ　ｄｅｓｐａｉｒ　ｔｅｓｔ）에　따라　시험하였다．

유리　실리더에　２５℃의　물을　높이　２５ｃｍ가　되도록　채우고　약물을　주사한　래트를　실린더에　넣어　１５분　동안　헤엄치게　한　후　꺼내어　３７℃의　건조실에서　３０분동안　말린　다음，　다시　실린더에　넣어　５분　동안에　수영하는　시간과　가만히　떠　있는　시간을　측정하였다．　이때　대조군으로는　약물　대신　증류수를　주사하여　동일한　방법으로　시험한　다음，　처리군의　결과와　비교하여　항우울제　활성을　측정하였다．　

제２도는　에타베린의　투여 용량에　따른　항우울제　효능을　보여주는　그래프이다．　여기에서　보면，　에타베린의　쥐의　복강내　투여량을　２０ｍｇ／ｋｇ까지　점차　증가시킬　때　뚜렷한　항우울제　효능이　나타남을　알　수　있다．

［실시예４］

에타베린과　항우울제의　병용　효과　시험

래트（Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ）를　여러　그룹으로　나누어，　각각의　그룹에　대하여　에타베린　１０ｍｇ／ｋｇ단독，　이미프라민　２０ｍｇ／ｋｇ＋에타베린１０ｍｇ／ｋｇ, 베라파일 10mg/kg　단독，　그리고　이미프라민　２０ｍｇ／ｋｇ＋베라파밀　１０ｍｇ／ｋｇ을　하루　１회씩　１０일　동안　복강내　주사하고　실시예３에서와　같은　방법으로　항우울제　시험방법(ｂｅｈａｖｉｏｒal ｄｅｓｐａｉｒ ｔｅｓｔ）에　따라　시험하였다．

제３도에　에타베린과　다른　항우울제를　병용　투여하였을　경우　항우울제　효능의　상승작용을　보여주는　그래프이다．　여기에서　보면，　에타베린을　１０ｍｇ／ｋｇ　투여하였을　경우　항우울제　효능은　있으나，　현재　항우울제로　사용되고　있는　아미프라민을　２０ｍｇ／ｋｇ　투여한　것보다는　효과가　약간　떨어진다．　그러나　에타베린　１０ｍｇ／ｋｇ을　이미프라민　２０ｍｇ／ｋｇ과　함께　투여하였을　경우에는　매우　양호한　상승효과를　보여주었다．　반면에　이미　알려진　Ｌ형　칼슘　길항제인　베라파밀을　１０ｍｇ／ｋｇ투여하였을　때에는　에타베린의　경우와는　달리　항우울제　효능이　거의　없었으며，　이미　프라민과　병용　투여하였을　경우에도　이미프라민의　항우울　효과를　전혀　상승시키지　못하였다．

이상에서　살펴　본　바와　같이，　본　발명의　이소퀴놀린계화합물은　칼슘　이온　통로에　대한　칼슘　길항작용을　가지고　있을　뿐　아니라，　베라파밀과　같은　기존의　칼슘　길항제와는　달리　항우울　효과가　있으며，　이미프라민과　같은　기존의　항우울제와　병용　투여시에는　상승작용을　나타내어　더욱　강력하고　탁월한　항우울　효과를　나타내는　것을　알　수　있다．

Claims (4)

1. 하기　구조식의　이소퀴놀린　화합물을　함유하는　항우울제　조성물；

   여기에서，　Ｘ는　수소　또는　알킬을　의미한다．
2. 제１항에　있어서，　상기　Ｘ가　메틸　또는　에틸인　것을　특징으로　하는　조성물．
3. 제１항에　있어서，　상기　이소퀴놀린　화합물이　에타베린인　것을　특징으로　하는　조성물．
4. 제１항에　있어서，　다른　항우울제와　병용투여시　상승효과를　갖는　조성물．