KR0177832B1 - 감초 추출물을 사용한 조성물 - Google Patents

Abstract

여기에 개시한 것은 감초 추출물을 유산 발효시킴으로써, 감초 추출물이 갖는 항 궤양 작용이나 간 장해 보호 작용등의 약리작용(보건 예방 효과 및 보건 치료 효과)를 유지 내지 증강시키면서, 이 감초 추출물이 갖는 난점, 즉, 감미가 극히 강하기 때문에 먹기 어렵다고 하는 난점을 해소시킨 감초 추출물을 사용한 기능성 식품용 조성물 및 이 기능성 식품용 조성물을 함유시킨 기능성 식품이다.

Description

[발명의 명칭]

감초 추출물을 사용한 조성물

[발명의 상세한 설명]

[기술분야]

본 발명은 감초 추출물을 사용한 조성물에 관한 것이다.

[배경기술]

일본약국방에 기재되어 있는 감초(glycyrrhiza; National Formulary, 유럽약국방에서는 Liguirititiae Radix)는 옛부터 식품의 조미료나 약용으로서 사용되어 왔다. 특히 주성분인 글리시르르히진(Glycyrrhizin)은 자당의 150배의 감도가 있으며, 감미료로서 현재에도 널리 사용되고 잇다.

한편으로, 감초 추출물에는 항궤양 작용(Takagi, K., Ishii, Y. : Arzein Forsch, 17, 1544 (1967)) 이나 간 장해 보호 작용등의 약리 작용이 있다는 것이 알려져 있다.

그러나, 감초 추출물은 글리시르르히진이 비교적 다량으로 함유되어 있기 때문에, 감미가 극히 강하다. 이 때문에 감초 추출물을 식품용 조성물로서 사용할 경우에는 기호성의 면에서, 그 사용 방법 및 사용량이 한정되게 되어, 감초 추출물이 갖는 보건 예방 효과 및 보건 치료 효과를 충분히 활용하는 것이 극히 곤란하였다.

따라서, 본 발명의 제1목적은 감초 추출물이 갖는 보건 예방 효과 및 보건 치료 효과를 충분히 활용할 수가 있고, 또한 먹기쉬운 조성물을 제공하는데 있다.

또 본 발명의 제2의 목적은 감초 추출물이 갖는 보건 예방 효과 및 보건 치료 효과를 충분히 활용할 수가 있고, 또한 먹기쉬운 식품 및 복용하기 쉬운 의약을 제공하는데 있다.

[발명의 개시]

본 발명자들은 감초 추출물에 특정의 처리를 행함으로써, 감초가 원래 지니고 있는 보건 예방 효과 및 보건 치료 효과를 충분히 활용할 수가 있고, 또한 먹기쉬운 조성물이 얻어지는 것을 발견하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉, 상기 제1의 목적을 달성하는 본 발명의 조성물은 감초 수추출액을 유산 발효시켜서 얻은 발효액으로 이루어지고, 이소리쿠이리틴 1 중량부에 대하여 16 ~ 500 중량부의 유산 및 ⅓ ~ 10 중량부의 글리시르르히진을 함유함과 동시에, 하기의 성질 (1) 내지 (4)를 나타내는 것을 특징으로 한다.

(1) 265 ~ 275㎚ 부근 및 305 ~ 320㎚ 부근에 자외부 흡수를 나타낸다.

(2) 5 w/v % 수용액에 메탄올, 에탄올 또는 아세톤을 가하였을 때에 백색의 침전이 생긴다.

(3) 발효액은 실질적으로 감미를 갖지 않는다.

(4) 발효액은 발효된 후에 살균된다.

또 상기 제2의 목적을 달성하는 본 발명의 식품 및 의약은 상술한 본 발명의 조성물을 함유하는 것을 특징으로 하는 것이다.

[도면의 간단한 설명]

제1도는 본 발명의 기능성 식품용 조성물의 가시광선 영역 및 자외선 영역의 흡수 스펙트럼의 한 예를 나타낸 것이다. 제2도는 본 발명의 기능성 식품용 조성물의 가시광선 영역 및 자외선 영역의 흡수 스펙트럼의 다른 한 예를 나타낸 것이다.

[발명을 실시하기 위한 최선의 형태]

본 발명의 조성물은 식품 및 의약으로서 이용될 수 있는 조성물을 제조하기 위하여 감초속 식물에서 얻어지는 추출물을 원료로서 사용한다. 이 추출물로서는 감초 수추출액이 특히 바람직하다. 여기서 감초란 종래부터 감미료, 부형제, 한방약 등에 이용되고 있는 감초를 의미하고, 예를 들면 하기 식물이 예시된다.

·만주 감초

(glycyrrhiza uralenis Fisch, et DC.)

·광과 감초

(G. glabra Linne)

·스페인 감초

(G. glabra L var. typica Reg. et Herd)

·러시아 감초

(G. glabra L var. glandulifera Reg. et Herd)

·페르시아 감초

(G. glabra L var. violacea Boiss.)

이것들의 감초를 사용한 감초 수추출액은 감초에 1 ~ 1000 배량(w/w)의 물을 가하여, 5 ~ 140℃에서 0.1 ~72시간 가열 추출처리함으로써 얻어진다. 감초 수추출액을 얻는데 있어서는 생 감초를 그대로 이용할 수도 있으나, 감초의 건조물을 이용하는 것이 특히 바람직하다. 생감초 또는 그의 건조물은 전초(全草)이든, 전초의 일부(뿌리, 포복지(stolon. 등))이어도 좋으나, 특히 껍질을 제거한 뿌리의 건조물이나 껍질을 제거한 포복지의 건조물이 바람직하다. 건조물을 사용할 경우는, 분말로서 사용하는 것이 바람직하다. 또 감초 수추출액으로서, 종래부터 한방약에 이용되고 있는 감초 농축액을 1 ~ 1000 배량(w/w)의 물에 용해시킨 액이나 감초 조농축액을 1 ~ 1000 배량(w/w)의 물에 현탁시킨 액을 사용하여도 좋다. 본 발명에서는 이것들의 액도 감초 수추출액이라고 한다.

본 발명의 조성물은 상술한 바와 같이, 감초속 식물로부터 얻어지는 추출물을 유산 발효시켜서 이루어진다. 추출물로서 상술한 감초 수추출액을 사용한 경우, 본 발명의 조성물은 이 감초 수추출액을 유산 발효시켜서 얻은 발효액(이하, 이 발효액을 조성물 I이라고 하는 일이 있다)로 이루어진다. 또 본 발명의 조성물은 상기 발효액중의 수분을 제거하여 얻은 반고형 내지 고형의 물질(이하, 이 물질을 조성물 Ⅱ라고 하는 일이 있다)로 되어 있어도 좋다.

상기 감초 수추출액을 유산 발효시킴에 있어서 사용되는 균으로서는, 종래부터 유제품등을 얻기 위하여 이용되고 있는 유산균을 그대로 사용할 수가 있으나, 특히 락토바실루스(Lactobacillus) 속 또는 비피도박테륨(Bifido bacterium) 속의 유산균이 바람직하다. 이것들의 속의 유산균은 각각 단독으로 사용하여도 좋고 병용하여도 좋다. 또 이것들의 유산균으로서, 요구르트등의 유제품에 함유되는 유산균을 이 유제품과 함께 사용하여도 좋다.

감초 수추출액의 유산 발효는 감초 수추출액과, 유산균 또는 유산균을 함유하는 유제품을 혼재시켜서, 1 ~ 40℃의 통성 혐기적 상태하에 1일 ~ 1년 방치함으로써 수행할 수 있다. 이때, 유산균의 영양원으로서 한천 배지등을 필요에 따라 혼재시켜도 좋다. 유산균으로서, 유제품에 함유되는 유산균을 이 유제품과 함께 사용한 경우에는 이 유제품이 유산균의 영양원으로 되므로, 다른 영양원은 혼재시키지 않아도 된다.

이 유산 발효는, 발효액중에 함유되는 이소리쿠이리틴(isoliquiritin, 감초 유래의 성분), 유산(유산균의 대사 생산물) 및 글리시르르히진(감초 유래의 성분)의 양이 이소리쿠이리틴 1중량부에 대하여 유신 16 ~ 500중량부, 글리시르르히진 1/3 ~ 10중량부로 되도록 한다. 감초 수추출액에 함유되고 있던 이소리쿠이리틴 및 글리시르르히진은, 이 감초 수추출액이 유산발효되는 것에 수반하여 양적으로 저하한다. 또 발효액중의 유산의 양은 일반적으로 발효기간을 길게함에 따라 증가한다.

이소리쿠이리틴 1중량부에 대한 유산의 양이 16중량부 미만에서는 글리시르르히진의 양에 대한 유산의 양도 적기 때문에, 발효액은 매우 달아, 먹기 어렵다. 또 이소리쿠이리틴 1중량부에 대한 유산의 양이 500중량부를 초과하면, 글리시르르히진의 양에 대한 유신의 양도 많기 때문에, 발효액은 극히 시큼해져서 먹기 어렵다. 발효액중의 글리시르르히진의 양은 이미 서술했듯이 이소리쿠이리틴 1중량부에 대하여 ⅓ ~ 10중량부이다.

감초 수추출액을 상술한 바와 같이 하여 유산 발효시킴으로써 얻어지는 본 발명의 조성물(I)은 하기 a ~ g

a. 상술한 바와 같이 하여 얻은 유산 발효액 그 자체(이하, 발효액 A라고 하는 일이 있다).

b. 발효액 A에, 식품의 제조과정에서 통상 행해지는 멸균 처리, 특히 바람직하기는 가열 멸균을 행한것(이하, 발효액 B라고 하는일이 있다).

c. 발효액 A에 함유되는 불용물을 여과 또는 원심분리에 의해 제거한 액(이하, 발효액 C라고 하는 일이 있다).

d. 발효액 B에 함유되는 불용물을 여과 또는 원심분리에 의해 제거한 액(이하, 발효액 D라고 하는 일이 있다).

e. 발효액 C에 식품의 제조과정에서 통상 행해지는 멸균 처리, 특히 바람직하기는 가열 멸균을 행한것(이하, 발효액 E라고 하는 일이 있다).

f. 발효액 A, 발효액 B, 발효액 C, 발효액 D 및 발효액 E로 이루어진 군에서 선택된 적어도 2종의 발효액을 혼합시킨 액(이하, 발효액 F라고 하는 일이 있다).

g. 발효액 A, 발효액 F의 어느 하나의 발효액의 농축액(이하, 발효액 G라고 하는 일이 있다).

의 어느 하나의 발효액으로 되어 있어도 좋다. 본 발명에서는 이것들을 총칭하여, 감초 수추출액을 유산발효시켜서 얻은 발효액이라고 한다.

이것들의 발효액 A ~ 발효액 G의 어느 하나의 발효액중에도 이소리쿠이리틴 1중량부에 대하여 16 ~ 500중량부의 유산 및 1/3 ~ 10중량부의 글리시르르히진이 함유되어 있다. 또 이것들의 발효액은 어느 것이나, 265 ~ 275㎚ 부근 및 305 ~ 320㎚ 부근에 자외선 영역 흡수를 나타낸다. 그리고, 이것들의 발효액의 5w/v% 수용액은 어느 것이나, 메탄올, 에탄올 또는 아세톤을 가하였을 때에 백색의 침전이 생긴다.

한편, 본 발명의 조성물 Ⅱ은, 상술한 바와 같이 감초 수추출액을 유산 발효시킨 후의 발효액(상술한 조성물Ⅰ)에 함유되는 수분을 제거하여 얻은 반고형 내지 고형의 물질로 이루어진다. 조성물 Ⅰ에 함유되는 수분의 제거는 감압 농축 처리나 동결 건조 처리등의 상법에 의해 수행할 수가 있다.

이 조성물 Ⅱ중에도 이소리쿠이리틴 1중량부에 대하여 16 ~ 500중량부의 유산 및 1/3 ~ 10중량부의 글리시르르히진이 함유되어 있다. 또 이 조성물 Ⅱ의 수용액은 265 ~ 275㎚ 부근 및 305 ~ 320㎚ 부근에 자외선 영역 흡수를 나타낸다. 그리고, 이 조성물Ⅱ의 발효액의 5w/v% 수용액은 메탄올, 에탄올 또는 아세톤을 가하였을 때에 백색의 침전이 생긴다.

또한 본 발명의 조성물 Ⅰ 및 조성물 Ⅱ은 어느 것이나 일반적으로 다음과 같은 생물학적 특성을 나타낸다.

이와 같이 하여 이루어진 본 발명의 조성물 Ⅰ 및 조성물 Ⅱ는 어느 것이나, 간 보호작용, 항 궤양 작용, 지질과산화 억제작용 등의 약리 활성을 갖는다. 그리고, 이것들의 약리 활성은 일반적으로, 유산 발효의 전의 감초 수추출액보다도 강하다. 따라서 본 발명의 조성물(조성물 Ⅰ 및/또는 조성물 Ⅱ)를 그대로, 또는 다른 식품에 첨가하여 먹으므로써, 감초가 원래 지닌 보건 예방 효과 및 보건 치료 효과를 충분히 활용할 수가 있다. 또 본 발명의 조성물에는 적정도의 산미가 있어 감초가 원래 갖는 지속성이 강한 감미는 거의 느낄 수가 없다. 이 때문에, 본 발명의 조성물은 미각적으로도 먹기 쉽다. 또 다른 식품에 첨가한 경우에도 먹기 쉬운 식품이 얻어진다.

다음에 본 발명의 식품에 관하여 설명한다.

본 발명의 식품은 상술한 본 발명의 조성물을 함유한 식품으로 이루어진다. 기재로 되는 식품은 특히 한정되는 것은 아니고, 물, 청량 음료나 과실 음료등의 드링크류, 과자류, 빵류, 면류, 조미료등, 여러 가지의 식품을 기재로 할 수가 있다.

본 발명의 식품은 기재로 되는 식품의 제조공정에 상술한 본 발명의 조성물을 첨가하는 공정을 가함으로써 혹은 기재로 되는 식품의 제조 후에 상술한 본 발명의 조성물을 첨가하는 공정을 가함으로써, 용이하게 얻을 수가 있다. 이때, 필요에 따라 맛과 냄새 교정제를 첨가하여도 좋다.

본 발명의 식품에 있어서의 상술한 조성물의 함유량은 목적으로 하는 식품의 종류나 기호등에 따라 다르나, 감초가 원래 지닌 보건 예방 효과 및 보건 치료 효과를 충분히 활용하는데 있어 0.1중량% 이상으로 하는 것이 바람직하다.

이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 식품은, 본 발명의 조성물을 함유하고 있기 때문에 감초가 원래 지닌 보건 예방 효과 및 보건 치료 효과를 충분히 활용할 수 있는 식품이다. 또 미각적으로도 먹기 쉬우며, 또한 동일한 방법으로 본 발명의 의약을 제조할 수 있다.

이하, 본 발명의 조성물 및 식품 및 의약에 관하여, 각각 실시에를 들어서 설명한다.

[실시예 1]

[조성물 Ⅰ의 제조]

국방 감초분말(껍질 제거) 20g를 물 1ℓ에 가하여, 약90℃에서 1시간 가열 추출하였다. 냉각후 감초 분막을 포함한 채로의 추출액에, 유산균으로서 모리나가 비히다스[모리나가유업 (주) 제조의 요구르트의 상품명]에 함유되는 유산균을, 이 요구르트와 함께 가하고, 유리 용기에 옮겨서 마개로 밀폐한 후, 이 유리 용기를 전치하여 통성 혐기 상태로 하였다.

이후, 실온에서 2주간, 때때로,용기 전체를 진탕하는 것 이외는 방치하여 유산 발효시켰다.

2주일후, 유리용기의 내용물을 꺼내서 흡인 여과하여, 얻어진 여액을 90℃에서 90분간 가열 멸균하여, 본 발명의 조성물 Ⅰ 약 0.9ℓ를 얻었다.

얻어진 조성물 Ⅰ의 조성을, 하기의 조건하에 고속액체 크로마트그래피로 분석한 바, 이 조성물Ⅰ은 적어도 20성분으로 이루어진 것이 명백하게 되었다.

또한, 상기 조건하에 고속액체 크로마토그래피로 분석한 각 성분의 피이크 유지 시간 및 함유량을 표 1에 나타냈다.

또 얻어진 조성물의 가시광선 영역 및 자외선 영역의 흡수 스펙트럼을 제1도에 나타냈다.

[비교예 1]

모리나가 비히다스에 함유되는 유산균을 이 요구르트와 함께 가하지 않는 것 이외는 실시예 1과 동일하게 하여 조성물(감초 추출물)을 얻었다.

얻어진 조성물의 조성을 실시예 1과 같은 조건하에, 고속액체 크로마토그래피로 분석한 바, 이 조성물은 적어도 22성분으로 이루어지는 것이 명백하게 되었다.

또한 고속액체 크로마토그래피로 분석한 각 성분의 피이크 유지시간 및 함유량을 표 2에 나타냈다.

표 1과 표 2와의 비교에서 병백한 바와 같이 실시예 1에서 얻어진 본 발명의 조성물Ⅰ에 있어서는 글리시르르히진(표 1에 있어서의 피이크 번호 19의 성분 및 표 2에 있어서의 피이크 번호 20의 성분)의 함유량(상대치)이 1/5이하로 감소하고 있는 한편, 피이크 유지시간에서 2분 이내에 성분이 증가하고 있다.

[실시예 2 실시예 4]

[조성물Ⅰ의 제조]

본 발명의 조성물을 하기 요령으로 각각 제조하였다.

먼저 국방 감초 분말 30g을 증류수 1ℓ속에 현탁하고, 약 70℃에서 2시간 가열 추출하였다. 실온까지 냉각한 후, 감초 분말을 함유한 채로이 추출액에, 유산균으로서 모리나가 비히다스에 함유되는 유산균을 이 요구르트 200g와 함께 무균조작하에 가하고 유리 용기에 옮겨서 마개로 밀폐한 후, 이 유리 용기를 전치하여 통성 혐기 상태로 하였다.

이어서 30~35℃에서 3일간 때때로 용기 전체를 진탕하는 이외는 방치하여 유산 발효시켰다.

3일 후 유리 용기의 내용물(유산 발효액)을 자비하여 발효를 멈추게 하고 빙냉하여 실온까지 냉각시킨 후에 원심분리 하였다. 원심 분리 후에 상징액을 분취하여 본 발명의 조성물Ⅰ 약 0.8ℓ를 각각 얻었다.

각 실시에에서 얻은 조성물으 조성을 표 3에 나타냈다. 또 비교로서 국방 감초 분말 30g을 증류수 1ℓ에 현탁하고 약 70℃에서 2시간 가열 추출하여 얻은 감초 추출액의 조성도 표 3에 나타냈다.

* 1 : 괄호내의 수치는 이소리쿠이리틴 1중량부에 대한값을 나타낸다.

* 2 : 검출한게는 1㎍/ml.

표 3에서 명백한 바와 같이 각 조성물Ⅰ에는 이소리쿠이리틴 1중량부에 대하여 유산잉 16~500중량부의 범위내에서 함유되어 있는 동시에, 이소리쿠이리틴 1중량부에 대하여 글리시르르히진이 1/3~10중량부의 범위내에서 함유되어 있다. 이에 대하여 비교를 위해 열거한 감초 추출액에서는 유산은 통상 검출되지 않던가, 또는 표 3에 나타낸 바와 같이 그의 함유량은 극히 낮았다.

또 각 조성물Ⅰ을 5인의 성인남자에게 맛을 감상하게 한 바, 실시예 2, 실시예 3에서 얻어진 각 조성물Ⅰ에 관해서는 5인 전원으로부터 달지 않다는 회답을 얻었다.

또 실시예 4에서 얻어진 조성물Ⅰ에 관해서는 5인중 4인으로부터 달지 않다는 회답을 얻었다.

또 각 조성물Ⅰ을 각 물로 25배로 희석하여 이것들의 희석액의 가시광선 영역 및 자외선 영역의 흡수 스펙트럼을 실시예 1과 동일하게 하여 측정한 바, 어느 것의 조성물Ⅰ에서나 265 ~ 275㎚ 부근 및 305 ~ 320㎚ 부근에 자외선 영역 흡수가 인정되었다. 이것들의 측정 결과중, 실시예 2에서 얻어진 조성물Ⅰ의 가시광선 영역 및 자외선 영역의 흡수 스펙트럼을 제2도에 나타낸다.

또, 각 조성물Ⅰ에 관하여, 각각 5w/v% 수용액을 조제하고, 이것들의 수용액에 메탄올을 5배량 가한바, 어느것의 수용에서도 백색의 침전이 생겼다. 백색의 침전은 메탄올에 대신하여 에탄올을 가한 경우에도, 또 아세톤을 가한 경우에도 각각 생겼다.

[실시예 5]

[조성물Ⅰ의 제조]

국방 감초 분말(껍질 제거) 40g과 한천배거 5g을 물 1ℓ에 가하여 70℃에서 2시간 가열 추출하였다. 냉각후, 감초 분말 및 한천배지를 포함한 채로의 추출액에, 유산균으로서 락토바실루스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus)를 가하고, 이하, 실시예 1과 동일하게 하여 본 발명의 조성물Ⅰ 약 0.9ℓ를 얻었다.

[실시예 6]

[조성물Ⅰ의 제조]

국방 감초 분말(껍질 제거) 20g과 요구르트[상품명 : 메이지 블가리아 요구르트, 메이지 유업 (주) 제조] 5g을 물 1ℓ에 가하고, 70℃에서 2시간 가열 추출하였다. 냉각후, 감초 분말 및 요구르트를 함유한 채로의 추출액에, 유산균으로서 비피도박테륨 론검(Bifidobacterium longum)을 가하고 이하, 실시예 1과 동일하게 하여, 본 발명의 조성물Ⅰ 약 0.9ℓ를 얻었다.

[실시예 7]

[조성물Ⅰ의 제조]

스페인 감초의 전초 건조물 100g을 가늘게 잘라서 물 1ℓ에 가하고, 70℃에서 2시간 가열 추출하였다. 냉각후, 스페인 감초의 세절물을 포함한 채로의 추출액에 유산균으로서 락토바실루스 카세이(Lactobacillus casei)를 가하고 이하, 실시예 1과 동일하게 하여, 본 발명의 조성물Ⅰ 약 0.9ℓ를 얻었다.

[실시예 8 ~ 실시예 10]

[조성물 Ⅱ의 제조]

실시예 2 ~ 실시예 4에서 얻어진 각 조성물 Ⅰ을 각각 동결 건조시켜서, 9.5~15.8g의 고형물(조성물Ⅱ)을 얻었다.

각 조성물Ⅱ에 관하여, 각각 수용액을 조제하여, 각 수용액의 가시광선 영역 및 자외선 영역의 흡수 스펙트럼을 실시예 1과 동일하게 하여 측정한 바, 어느 수용액에서도 265 ~ 275㎚ 부근 및 305 ~ 320㎚ 부근에 자외선 영역 흡수가 인정되었다.

또, 각 조성물Ⅱ에 관하여, 각각 5w/v% 수용액을 조제하여 이것들의 수용액에 메탄올을 5배량 가한바, 어느 수용에서도 백색의 침전이 생겼다. 백색의 침전은 메탄올에 대신하여 에탄올을 가한 경우에도, 또 아세톤을 가한 경우에도 각각 생겼다.

[실시예 11]

[조상물 Ⅱ의 제조]

실시예 7에서 얻어진 조성물Ⅰ을 감압농축하여 연 농축액(조성물Ⅱ) 20g을 얻었다.

이 연 농축액의 수용액을 조제하고 이 수용액의 가시광선 영역 및 자외선 영역의 흡수 스펙트럼을 실시예 1과 동일하게 하여 측정한 바, 265 ~ 275㎚ 부근 및 305 ~ 320㎚ 부근에 자외선 영역 흡수가 인정되었다.

또 이 연 농축액의 5w/v% 수용액을 조제하고, 이 수용액에 메탄올을 5배량 가한바, 어느 수용에서도 백색의 침전이 생겼다. 백색의 침전은 메탄올에 대신하여 에탄올을 가한 경우에도, 또 아세톤을 가한 경우에도 각각 생겼다.

[약리 시험 1]

[4 염화 탄소 간장해에 대한 작용]

간 보호 작용을 검정하는데 확립된 방법인 4염화탄소에 의한 급성 간장해 모델 새앙쥐를 사용한 검정법[(Toxicol. Appl. Pharmacol. 67, 159(1983)]에 준하여 본 발명의 조성물Ⅰ이 갖는 간 보호 작용을 하기 요령으로 검정하였다.

먼저 체중이 30g 전후의 ICR계 수컷 새앙쥐를 23개체 준비하여 1군 4~5개체로 하여 5군으로 나누었다.

이어서, 5군중의 1군(4개체)는 대조군으로 하여 각 개체의 배부피하에 올리브유와 4염화 탄소르 용량비 10:1의 비율로 함유하는 혼합물을 체중 10g당 0.1㎖의 비율로 투여하여 급성 간염을 발증시켰다. 그리고 투여직 후, 투여 12시간 후 및 48시간 후에 각각 1개체 당 0.5㎖의 생리 식염액을 경구투여하고, 3회째의 생리 식염액 투여의 48시간후에 도살하여 채혈하고, 상기 방법에 따라, 혈청중의 GOT(글루타민산 옥살로 아세트산아미노기 전이 효소)량 및 GPT(글루타민산 피루브산아미노기 전이 효소)량을 측정하였다.

또 나머지의 4군은 실시예 1에서 얻어진 조성물 Ⅰ을 투여하는 군(실시예군 1,5개체), 실시예 5에서 얻어진 조성물Ⅰ을 투여하는 군(실시예군 2,4개체), 실시예 6에서 얻어진 조성물(감초 수추출액)을 투여하는 군(비교예군 1,5개체)으로 나누었다. 그리고, 이것들의 군의 개체에 관해서는 각각 대조군과 동일하게 하여 급성 간염을 발증시킨 후에, 생리 식염액에 대신하여 각 실시에에서의 얻어진 조성물Ⅰ 또는 비교예 1에서 얻어진 조성물을 경구 투여하고 그외는 대조군과 동일하게 하여 혈청중의 GOT량 및 GPT량을 측정하였다.

그것들의 결과를 표 4에 나타냈다.

* 1 : 단위는 unit/1이다.

* 2 : 스튜던트(student)의 t 검정에 있어서 위험율 5%에서 유효차.

* 3 : 스튜던트의 t 검정에 있어서 위험율 1%에서 유효차 있음.

표4에서 명백한 바와 같이 실시예 1, 실시예 5 및 실시예 6에서 얻어진 각 조성물Ⅰ을 투여한 실시예군 1, 실시예군 3에서는 대조군에 비하여 GOT량 및 GPT량이 상당히 적고, 또한 감초 수추출액을 투여한 비교예군 1의 GOT량 및 GPT량 보다도 적다.

이것으로 해서, 본 발명의 조성물Ⅰ의 간 보호 작용은 감초 수추출액의 간 보호 작용보다도 강하다는 것을 알 수 있다.

4염화탄소의 간독성의 일부는 생체내에서 생기는 CCl라디칼에 의한 지질 과산화 반응에 유래한다는 것이 명백하게 되어 있다. 그래서 본 발명의 조성물Ⅰ이 CCl에 의해 유발되는 지질 과산화 반응을 억제하느냐 않느냐를 하기의 약리시험 2에서 조사하였다.

[약리 시험2]

[지질 과산화 반응에 대한 항산화 작용]

검체용액으로서 실시예 2에서 얻어진 조성물Ⅰ과 실시예 2와 동일하게 하여 얻은 감초 수추출액에 실시예 2와 동일하게 하여 요구르트를 가한 것뿐인 것(이하, 발효 0일액이라고 하는 일이 있다)과, 이소리쿠이리틴의 알코올 용액을 사용하여 이것들의 검체용액에 관하여, 하기의 요령으로 항산화 작용 시험을 하였다.

먼저 쥐 간 미크로좀(microsome)을 상법에 다라 얻은 후에 1.15% KCI에 현탁하여 단백질을 2㎎/㎖의 비율로 함유하는 미크로좀 현탁액을 얻었다.

이어서 트리스-HCI 버퍼 500㎕에 이 미크로좀 현택액 100㎕와, NADPH 생성계 수용액(30mM의 NADP와, 80mM의 니코틴아미드를 함유) 200㎕와, 10% DMF 수용액으로 표 5에 표시한 농도로 조정한 검체 용액 100㎕을 가하고, 37℃에서 5분간 가온하였다.

다음에 4염화 탄소(100mM 10v/v% DMSO 용액) 100㎕을 가하여 37℃에서 20분간 가온하고, 빙냉에 의해 반응을 정지시킨 후, 반응액 1㎖에 관하여 티오바르비투르산(thiobarbituric acid) 법에 의해 과산화 지질의 생성량을 측정하였다. 검체 용액의 항 산화 작용은 블랭크와비교하여, 저해율(%)로 나타냈다.

또한 블랭크에서는 검체 용액에 대신하여 10% DMF 100㎕을, 또 NADPH 생성계 수용액 200㎕에 대신하여 물 100㎕를, 그리고 4염화 탄소(100mM 10v/v% DMSO 용액) 100㎕에 대신하여 10v/v% DMSO 용액 100㎕을 각각 가하였다.

결과를 표 5에 나타냈다.

표5에서 명백한 바와 같이 검체 용액의 농도가 같은 경우에는 조성물Ⅰ을 투여한 군의 지질 과산화 반응 저해율의 쪽이 발효 0일액을 투여한 군의 지질 과산화 반응 저해율 보다도 높다.

이것으로해서, 본 발명의 조성물Ⅰ의 항산화 작용은 발효 0일액의 항산화 작용보다도 강하다는 것을 알 수 있다. 그리고 이 결과에서도, 앞서의 약리시험 1에서 표시한 바와 같이 본 발명의 조성물Ⅰ이 간 보호 작용을 갖고 있다는 것을 알 수 있다. 또 이 간 보호 작용의 적어도 일부는 본 발명의 조성물Ⅰ이 갖는 항 산화 작용에 의거하는 것이라는 것을 알 수 있다.

[약리 시험 3]

[항 궤양 작용]

실시예 2에서 얻어진 조성물 1과 실시예 2와 동일하게 하여 얻은 감초 수추출액에 실시예 2와 동일하게 하여 요구르트를 가한 것 만의것(이하, 발효 0일액이라고 하는 일이 있다)에 관하여, 염산-에탄올 궤양에 대한 항 궤향 작용을 이하의 요령으로 시험하였다.

먼저, 체중이 180~220g의 SD계 수컷 쥐(5개체/군)를 24시간 절식시킨 후, 150㎖의 염산을 함유하는 60% 에탄올 용액(염산-에탄올 용액)을, 체중 100g당 0.5㎖의 용량으로 각 개체에 경구 투여하여, 염산-에탄올 궤양을 야기시켰다.

다음에, 염산-에탄올 용액의 투여로부터 1시간 후에 각 개체를 에테르 마취하여, 방혈도살하고 나서 위를 적출하였다. 그리고 적출한 위를 고정시킨 후에 선위부에 발생한 궤양의 길이를 측정하고, 각 개체마다에 발생한 궤양의 길이의 총계를 구하여 궤양 계수로 하였다.

또한 조성물Ⅰ 및 발효 0일액은, 각각 감압하에 농축하여, 1/4량으로 하고 나서 검체 용액으로서 사용하고, 이것들의 검체 용액은 체중 100g당 1㎖의 용량으로, 염산-에탄올 용액의 투여의 30분전에 각 개체에 경구투여 하엿다. 또 대조용으로는 검체 용액에 대신하여 검체 용액과 같은 용량의 증류수를 경구투여 하였다.

결과를 표 6에 나타냈다.

표 6에서 명백한 바와 같이 조성물Ⅰ을 투여한 군의 궤양 계수는 발효 0일액을 투여한 군의 궤양 계수 보다도 작다.

이것으로 해서, 본 발명의 조성물Ⅰ의 항 궤양 작용은 발효 0일액의 항 궤양 작용 보다도 강하다는 것을 알 수 있다.

[약리 시험 4]

[90일간의 중간 급성 독성시험 및 30일간의 회복 시험]

실시예 1에서 얻어진 본 발명의 조성물Ⅰ을, 5주된 위스타계 수컷 쥐에게 10㎖/개체의 비율로 90일간 연속 경구투여하고, 그후 30일간의 회복시험을 하였다.

이 결과, 투여기간중 및 회복기간중의 어느 경우에 있어서도 일반 상태, 체중, 혈액 화학적 검사, 요중 전해질등의 척도의 변화는 인정되지 않았다.

이 결과에서, 본 발명의 조성물Ⅰ에는 독성이 없다는 것이 명백하다.

[평가 시험]

실시예 1에서 얻어진 본 발명의 조성물Ⅰ을 물로 10배로 희석하여 약 4℃로 냉각한 것을 시험액으로하고, 이 시험액 40㎖를 22~55세의 성인 남자 평가자단 10명에게 주식전에 마시게하여 마신후에 평가를 들었다.

평가자단의 평가는 하기의 것이었다. 단, 복수의 회답을 인정하였다.

또 10명의 평가자단중에서 2일간 취기를 호소하고 있던 2명으로부터 마신후에 2일 취기로 인한 메스꺼림, 권태감이 해소되었다는 응답이 있었다.

[실시예 12]

[식품의 제조]

실시예 1에서 얻어진 조성물Ⅰ을 원재료의 하나로서 사용하여, 하기의 조성의 소프트 드링크(본 발명의 식품의 하나) 1000㏄를 얻었다.

[실시예 13]

[식품의 제조]

실시예 2에서 얻어진 조성물Ⅰ을 원재료의 하나로서 사용하여, 하기의 조성의 청량 음료(본 발명의 식품의 하나)를 얻었다.

[실시예 14]

[식품의 제조]

실시예 5에서 얻어진 조성물Ⅰ을 원재료의 하나로서 사용하여, 하기의 조성의 탄산 음료(본 발명의 식품의 하나) 1000㏄를 얻었다.

[실시예 15]

[식품의 제조]

실시예 6에서 얻어진 조성물Ⅰ을 원재료의 하나로서 사용하여 하기의 조성의 캐러멜(본 발명의 식품의 하나) 200g을 얻었다.

[실시예 16]

[식품의 제조]

실시예 11과 동일하게 하여 주성물Ⅱ(연농축액)을 20g을 얻고, 이 조성물Ⅱ를 원재료의 하나로서 사용하여 하기의 요령으로 쿠키(본 발명의 식품의 하나) 300g을 얻었다.

우선, 얻어진 연농축액(조성물Ⅱ) 20g과 설탕 100g과 버터 80g을 섞어 반죽한 후, 달걀 노른자위 1개, 밀가루 200g 및 적정량의 바닐라에센스(vanilla essence)를 가하고 다시 섞어 반죽하였다.

얻어진 혼합물을 4℃에서 일정시간 방치한 후, 통상의 쿠키의 제법에 따라, 조성물Ⅱ을 함유하는 쿠키 300g을 구어냈다.

[실시예 17]

[식품의 제조]

실시예 1에서 얻어진 조성물Ⅰ을 원재료의 하나로서 사용하고, 이 조성물Ⅰ을 함량이 1중량%로 되도록 우동의 원재료에 첨가한 후, 통상의 우동의 제법에 따라 우동(본 발명의 식품의 하나)을 얻었다.

실시예 12~실시예 17에서 얻어진 각 식품을 각각 5인의 성인 남자에게 맛을 보게한 바, 어느 식품에 관해서도, 미각적으로도 먹기 쉽다는 회답을 얻었다.

이상 설명한 바와 같이 본 발명의 조성물은 유산 발효전의 감초 수추출액보다도 강한 간 보호 작용, 항 궤양 작용, 지질과산화 억제 작용등의 약리 활성을 가지고 있다. 그리하여 본 발명의 조성물은, 그대로라도, 또 식품으로서도 먹기 쉽고, 의약으로서도 복용가능하다.

따라서, 본 발명에 의하면 감초가 원래 지니는 보건 예방 효과 및 보호 치료 효과를 용이하게, 또한 충분히 활용할 수가 있게 된다.

Claims (5)

1. 감초 수추출액을 유산 발효시켜서 얻은 발효액으로 이루어지고, 이소리쿠이리틴 1중량부에 대하여 16~500중량부의 유산 및 1/3~30중량부의 글리시르르히진을 함유하는 동시에, 하기 성질(1) 내지 (4)를 나타내는 것을 특징으로 하는 조성물. (1) 265 ~ 275㎚ 부근 및 305 ~ 320㎚ 부근에 자외선 영역 흡수를 나타낸다. (2) 5 w/v % 수용액에 메탄올, 에탄올 또는 아세톤을 가하였을 때에 백색의 침전이 생긴다. (3) 발효액은 실질적으로 감미를 갖지 않는다. (4) 발효액은 발효된 후에 살균된다.
2. 감초 수추출액을 유산 발효시킨 후에 발효액중의 수분을 제거하여 얻은 반고형 내지 고형의 물질로 이루어지고, 이소리코이리틴 1중량부에 대하여 16~500중량부의 유산 및 1/3~30중량부의 글리시르르히진을 함유하는 동시에, 하기 성질(1) 내지 (4)를 나타내는 것을 특징으로 하는 기능성 식품용 조성물. (1) 수용액으로 하였을 때에 265 ~ 275㎚ 부근 및 305 ~ 320㎚ 부근에 자외선 영역 흡수를 나타낸다. (2) 5 w/v % 수용액에 메탄올, 에탄올 또는 아세톤을 가하였을 때에 백색의 침전이 생긴다. (3) 발효액은 실질적으로 감미를 갖지 않는다. (4) 발효액은 발효된 후에 살균된다.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 발효액이 감초 수추출액을 1~40℃의 통기성 혐기적 상태 하에 1일 내지 1년 유산 발효시켜서 얻은 액인 조성물.
4. 제1항, 제2항 또는 제3항 중 어느 한 항에 기재된 조성물을 함유하는 것을 특징으로 하는 식품.
5. 제4항에 기재된 식품에 있어서, 상기 식품의 기재로 되는 식품이 물, 청량 음료 및 과실 음료로 이루어진 군에서 선택되는 하나인 식품.