KR102000301B1 - 산화방지성 염증 조절제로서의 피라졸릴 및 피리미디닐 트리사이클릭 엔온 - Google Patents

산화방지성 염증 조절제로서의 피라졸릴 및 피리미디닐 트리사이클릭 엔온 Download PDF

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Abstract

본 명세서는, 화학식 I의 화합물들을 포함하는, 신규한 산화방지성 염증 조절제를 개시하며, 식 중 치환기들은 명세서에 정의되어 있다. 또한 이들 화합물을 포함하는 약학적 조성물, 키트 및 생산 제품을 제공한다. 이들 화합물을 제조하는데 유용한 제조방법 및 중간체, 그리고 이들 화합물을 이용하는 방법 및 그의 조성물을 또한 제공한다.

Description

산화방지성 염증 조절제로서의 피라졸릴 및 피리미디닐 트리사이클릭 엔온 {PYRAZOLYL AND PYRIMIDINYL TRICYCLIC ENONES AS ANTIOXIDANT INFLAMMATION MODULATORS}
본 발명은 2010년 12월 17일자로 출원된 미국 가출원 제61/424,601호에 따른 우선권을 주장하며, 그 내용은 본 명세서 내에 참조로서 포함되었다.
본 발명은 일반적으로는 생물 및 의약 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로는, 본 발명은 산화성 스트레스 및 염증에 관련된 질병들의 치료 및 예방을 위한 화합물, 조성물 및 방법에 관한 것이다.
자연적으로 발생하는 트라이터페노이드(triterpenoid), 올레아놀 산(oleanolic acid)의 항-염증 및 항-증식성 활성은 화학적 개변에 의해 향상되어왔다. 예를 들어, 2-시아노-3,12-디오옥소올레아나-1,9(11)-디엔-28-오익산(2-cyano-3,12-diooxooleana-1,9(11)-dien-28-oic acid)(CDDO) 및 관련 화합물들이 개발되었다(Honda 등, 1997; Honda 등, 1998; Honda 등, 1999; Honda 등, 2000a; Honda 등, 2000b; Honda, 등, 2002; Suh 등 1998; Suh 등, 1999; Place 등, 2003; Liby 등, 2005). 현재, 메틸 에스테르인 바르독솔론-메틸(bardoxolone-methyl)(CDDO-Me)이 당뇨 신장병 및 만성 신장 질환의 치료를 위해 II단계 임상실험 중에 평가되고 있다.
올레아놀산의 합성 트라이터페노이드 유사체가 마우스 대식세포에서 IFN-g에 의한 유도성 산화 질소 신타제(iNOS) 및 COX-2의 유도와 같은 세포 염증 과정의 억제제인 것으로 나타났다(문헌 Honda 등 (2000a); Honda 등 (2000b), 및 Honda 등 (2002); 이들은 모두 본 발명에 참고로 인용된다). 강하게 특화되지 않은 화합물임에도 불구하고, 트라이터페노이드의 다른 합성 유도체인 베툴린산(betulinic acid) 역시 세포 염증 과정의 억제제인 것으로 나타났다(Honda 등, 2006). 이러한 합성 트라이터페노이드 분자들의 약리학은 복잡하다. 올레아놀산으로부터 유도된 화합물들은 다중 단백질 타겟의 기능에 영향을 미치고, 이에 따라, 산화성 스트레스, 세포 주기 조절 및 염증과 관련된 몇몇 중요한 세포 신호 경로의 활성을 조절하는 것으로 나타났다(예를 들어, Dinkova-Kostova 등, 2005; Ahmad 등, 2006; Ahmad 등, 2008; Liby 등, 2007a). 비슷한 항-염증 특성을 나타냄에도 불구하고, 베툴린산의 유도체들은 약리학에 있어서 OA-유래의 화합물들에 비해 현저한 차이를 나타낸다.(Liby 등, 2007b).
일반적으로, 현재 채택된 트라이터페노이드 출발물질들이 다른 가능한 출발물질들에 비해 모든 적용을 위한 최적의 특성을 갖는지는 확실치 않다. 또한, 천연물 출발물질로부터 트라이터페노이드를 합성할 필요가 종종 있다. 고도로 정제된 트라이터페노이드를 제조하는 것은 고비용일 수 있고, 이러한 화합물들의 궁극의 원료인 식물체들의 유용성은 불리한 기후, 질병, 및 기타 환경적 요인에 따라 달라질 수 있다. 잠재적인 항산화 및 항염증 효과를 가진 화합물들에 의해 치료 및 예방될 수 있는 질병들의 광범위한 다양성, 및 이러한 질병들의 다양성 내에서 표출되는 충족되지 않은 높은 의학적 요구의 관점에서, 알려진 트라이터페노이드 유도체의 생리학적 활성 개요를 고려하면, 하나 이상의 징후의 치료를 위한 생물학적 활성 개요를 향상시킬 수 있는 다양한 구조를 가지는 새로운 화합물을 합성하는 것이 바람직하다. 따라서, 간단한 출발물질로부터 즉각적으로 합성될 수 있는 잠재적, 선택적 항산화/항-염증 화합물을 설계하는 것이 바람직한 목표이다.
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본 명세서는 피라졸릴 및 피리미딜 트리사이클릭 엔온류를 포함하고, 항-염증 및/또는 항산화 특성을 가지는 신규한 화합물, 이의 약학적 조성물, 이들을 제조하기 위한 방법, 및 이들을 사용하는 방법을 제공한다.
본 명세서의 하나의 실시태양에 있어서, 하기 화학식의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체(tautomer)를 제공한다:
Figure 112013064107039-pct00001
상기 식에서:
1 및 2로 표지된 원자들은 이중결합 또는 에폭시화된 이중결합으로써 서로 연결되고;
n은 1 또는 2 이고;
m은 0 또는 1 이고;
X는 -CN, -CF3, 또는 -C(O)Ra이고, 여기서 Ra는 -OH, 알콕시(C≤6), 알킬아미노(C≤6), 디알킬아미노(C≤6), 또는 -NHS(O)2-알킬(C1-4)이고;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
R1 및 R2는 함께 결합하여 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
R3은 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는 R3은 하기에서와 같이 R4와 함께 결합하거나; 단 R3은 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고;
R4는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 시아노, 또는 옥소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는 R4 는 하기에서와 같이 R3 또는 R5와 함께 결합되고;
R5는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는 R5 는 하기에서와 같이 R4 와 결합되거나; 단 R5는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고; 및
R6는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 시아노, 또는 옥소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
단, R3 및 R4가 함께 결합될 때, 화합물은 하기 화학식 Ia로 추가로 정의되고:
Figure 112013064107039-pct00002
상기 식에서 R7은 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
단, R4 및 R5가 함께 결합될 때, 화합물은 하기 화학식 Ib로 추가로 정의되고:
Figure 112013064107039-pct00003

상기 식에서 R8는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
일부 태양에서, 화합물은 추가로 하기의 화학식 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체(tautomer)로 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00004
상기 식에서:
n은 1 또는 2이고;
X는 -CN, -CF3, 또는 -C(O)Ra이고, 상기에서 Ra는 -OH, 알콕시(C≤6), 알킬아미노(C≤6), 디알킬아미노(C≤6), 또는 -NHS(O)2-알킬(C1-4)이고;
R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
R1 및 R2는 함께 결합되어 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
R3은 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 단 R3 는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고;
R5는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 단 R5는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고; 그리고
R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
일부 태양에서, 화합물은 추가로 하기의 화학식 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체(tautomer)로 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00005
상기 식에서:
R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
R1 및 R2 는 함께 결합되어 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
R3 는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 단 R3 는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고;
R5 는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 단 R5 는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고; 그리고
R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
일부 태양에서, 화합물은 추가로 하기의 화학식 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체(tautomer)로 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00006
상기 식에서:
R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
R3 는 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고; 그리고
R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
일부 태양에서, 화합물은 추가로 하기의 화학식 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체(tautomer)로 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00007
상기 식에서:
R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
R1 및 R2 는 함께 결합되어 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
R5 는 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고; 그리고,
R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
일부 태양에서, 화합물은 추가로 하기의 화학식 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체(tautomer)로 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00008
상기 식에서:
R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
R4 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
일부 태양에 있어서, 1 및 2로 표지된 원소들은 이중결합으로 연결된다. 일부 태양에 있어서, 1 및 2로 표지된 원소들은 에폭시화된 이중결합으로 연결된다. 일부 태양에 있어서, n은 1이다. 일부 태양에 있어서, n은 2다. 일부 태양에 있어서, n은 0이다. 일부 태양에 있어서, m은 1이다. 일부 태양에 있어서, X는 -CN이다. 일부 태양에 있어서, X는 -CF3이다. 일부 태양에 있어서, X는 수소이다.
일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 알킬(C≤8) 또는 치환된 알킬(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 또는 R2 는 알킬(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 메틸이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2 는 각각 메틸이다. 일부 태양에 있어서, R1은 메틸이고 R2 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 에틸이다. 일부 태양에 있어서, R1 은 메틸이고 R2 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R1 또는 R2 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2 는 각각 수소이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2 는 함께 결합되어 알칸디일(alkanediyl)(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2 는 함께 결합되어 1,4-부탄디일이다. 일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 페닐이다. 일부 태양에 있어서, R1은 페닐이고 R2 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 아랄킬(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 벤질이다. 일부 태양에 있어서, R1은 벤질이고 R2 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2 는 각각 벤질이다.
일부 태양에 있어서, R3 는 존재하지 않거나. 일부 태양에 있어서, R3 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R3은 알킬(C≤8), 아릴(C≤8), 아실(C≤8), 알콕시(C≤8) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다. 일부 태양에 있어서, R3은 알킬(C≤4) 또는 치환된 알킬(C≤4)이다. 일부 태양에 있어서, R3은 알킬(C≤4)이다. 일부 태양에 있어서, R3은 메틸이다. 일부 태양에 있어서, R3은 아릴(C≤8) 또는 치환된 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R3은 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R3은 페닐이다.
일부 태양에 있어서, R4 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R4 는 옥소이다. 일부 태양에 있어서, R4는 알킬(C≤8), 아릴(C≤8), 아실(C≤8), 알콕시(C≤8) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다. 일부 태양에 있어서, R4 는 알킬(C≤6) 또는 치환된 알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4 는 알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4 는 메틸, 이소프로필, t-부틸, 또는 사이클로프로필이다. 일부 태양에 있어서, R4는 할로알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 트리플루오로메틸이다. 일부 태양에 있어서, R4는 알콕시(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 메톡시 또는 에톡시이다. 일부 태양에 있어서, R4는 아릴(C≤8) 또는 치환된 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 페닐, 클로로페닐, 메틸페닐, 또는 메톡시페닐이다. 일부 태양에 있어서, R4는 헤테로아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 피리디닐 또는 피리미디닐이다. 일부 태양에 있어서, R4는 아실(C≤6) 또는 치환된 아실(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 에톡시카르보닐이다.
일부 태양에 있어서, R5 는 존재하지 않거나. 일부 태양에 있어서, R5 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R5 는 알킬(C≤8), 아릴(C≤8), 아실(C≤8), 알콕시(C≤8) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다. 일부 태양에 있어서, R5는 알킬(C≤6) 또는 치환된 알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R5는 알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R5는 메틸, 사이클로헥실, 또는 t-부틸이다. 일부 태양에 있어서, R5는 치환된 알킬(C≤4)이다. 일부 태양에 있어서, R5는 2-하이드록시에틸 또는 2,2,2-트리플루오로에틸이다. 일부 태양에 있어서, R5는 아릴(C≤8) 또는 치환된 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R5는 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R5는 페닐이다. 일부 태양에 있어서, R5는 아실(C≤8) 또는 치환된 아실(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R5는 아세틸, 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐, 또는 페닐카르보닐이다.
일부 태양에 있어서, R6 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R6는 시아노이다. 일부 태양에 있어서, R6는 할로이다. 일부 태양에 있어서, R6는 클로로 또는 브로모이다. 일부 태양에 있어서, R6는 알킬(C≤6) 또는 치환된 알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 메틸, 이소프로필 또는 사이클로헥실이다. 일부 태양에 있어서, R6는 아릴(C≤8), 헤테로아릴(C≤8), 또는 상기 기들 중 하나의 치환된 형태이다. 일부 태양에 있어서, R6는 아릴(C≤10)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 페닐, 메틸페닐 또는 나프틸이다. 일부 태양에 있어서, R6는 치환된 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 클로로페닐, 플루오로페닐 또는 메톡시페닐이다. 일부 태양에 있어서, R6는 헤테로아릴( C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 피리디닐, 피리미디닐, 메틸피라졸릴, 디메틸이속사졸릴, 메틸트리아졸릴, 또는 메틸테트라졸릴다. 일부 태양에 있어서, R6는 아랄킬(C≤12) 또는 치환된 아랄킬(C≤12)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 벤질이다. 일부 태양에 있어서, R6는 아미도(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 페닐카르보닐아미노이다. 일부 태양에 있어서, R6는 알키닐(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 에티닐이다. 일부 태양에 있어서, R6는 아실(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 아미노카르보닐 또는 디메틸아미노카르보닐이다. 일부 태양에 있어서, R6는 알콕시(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R6는 메톡시이다. 일부 태양에 있어서, 10번 탄소원자가 R 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 10번 탄소원자가 S 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 5번 탄소원자가 R 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 5번 탄소원자가 S 입체형상을 가진다.
일부 태양에 있어서, R7 또는 R8 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R7 또는 R8는 할로이다. 일부 태양에 있어서, R7 또는 R8는 브로모이다. 일부 태양에 있어서, R7 또는 R8는 아릴(C=8)이다. 일부 태양에 있어서, R7 또는 R8는 페닐이다.
일부 태양에 있어서, 화합물은 추가로 하기와 같이 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00009
Figure 112013064107039-pct00010
Figure 112013064107039-pct00011
Figure 112013064107039-pct00012
Figure 112013064107039-pct00013
Figure 112013064107039-pct00014

일부 태양에 있어서, 화합물은 추가로 하기와 같이 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00015
Figure 112013064107039-pct00016
Figure 112013064107039-pct00017
Figure 112013064107039-pct00018
다른 태양에 있어서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물들을 제공한다:
Figure 112013064107039-pct00019

다른 태양에 있어서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물들을 제공한다:
Figure 112013064107039-pct00020

다른 태양에 있어서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물들 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 호변 이성질체를 제공한다:
Figure 112013064107039-pct00021
상기 식에서:
R1 및 R2 는 각각 독립적으로:
수소, 하이드록시 또는 아미노; 또는
알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
R1 및 R2는 함께 결합되어 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 아렌디일(arenediyl)(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알케닐옥시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 알케닐아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
R3는:
수소, 하이드록시 또는 아미노, 또는
알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고; 그리고,
R4는:
수소; 또는
알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 알킬(C≤8) 또는 치환된 알킬(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2는 알킬(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2 는 메틸이다. 일부 태양에 있어서, R3 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R4는 아릴(C≤8) 또는 치환된 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 아릴(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 페닐이다. 일부 태양에 있어서, R4는 알킬(C≤6) 또는 치환된 알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 알킬(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 t-부틸이다. 일부 태양에 있어서, 10번 탄소원자가 R 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 10번 탄소원자가 S 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 5번 탄소원자가 R 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 5번 탄소원자가 S 입체형상을 가진다.
일부 태양에 있어서, 화합물들은 추가로 하기와 같이 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00022

다른 태양에 있어서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 호변이성질체를 제공한다:
Figure 112013064107039-pct00023
상기 식에서:
R1 및 R2은 각각 독립적으로:
수소, 하이드록시 또는 아미노; 또는
알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
R1 및 R2는 함께 결합되어 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 아렌디일(arenediyl)(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알케닐옥시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 알케닐아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고; 그리고
R3, R4, R5 및 R6는 각각 독립적으로:
수소, 하이드록시 또는 아미노, 또는
알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
일부 태양에 있어서, R1 또는 R2는 알킬(C≤8) 또는 치환된 알킬(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2 는 알킬(C≤8)이다. 일부 태양에 있어서, R1 및 R2 는 메틸이다. 일부 태양에 있어서, R4, R5 및 R6 는 수소이다. 일부 태양에 있어서, R3은 하이드록시이다. 일부 태양에 있어서, R4는 알콕시(C≤6) 또는 치환된 알콕시(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 치환된 알콕시(C≤6)이다. 일부 태양에 있어서, R4는 메톡시메톡시이다. 일부 태양에 있어서, 10번 탄소원자가 R 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 10번 탄소원자가 S 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 5번 탄소원자가 R 입체형상을 가진다. 일부 태양에 있어서, 5번 탄소원자가 S 입체형상을 가진다.
일부 태양에 있어서, 화합물들은 추가로 하기와 같이 정의된다:
Figure 112013064107039-pct00024

다른 태양에 있어서, 본 발명은 본 명세서에 기재된 어떠한 화학식에 따른 화합물 및 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 일부 태양에 있어서, 약학적 조성물은 추가로 하기와 같이 정의된다:
a) 본 명세서에 기재된 어떠한 화학식에 따른 화합물;
b) 상기 화합물의 거울상 이성질체인 상기 화합물의 광학적 이성질체; 및
c) 부형제.
일부 태양에 있어서, "상기 화합물의 양 : 상기 광학 이성질체의 양"의 비율이 대략 1:1이다. 일부 태양에 있어서, "상기 화합물의 양 : 상기 광학 이성질체의 양"의 비율이 대략 5:1이다. 일부 태양에 있어서, "상기 화합물의 양 : 상기 광학 이성질체의 양"의 비율이 대략 10:1이다. 일부 태양에 있어서, "상기 화합물의 양 : 상기 광학 이성질체의 양"의 비율이 대략 20:1이다.
기타 목적으로서, 본 명세서의 양태 및 이점은 이하의 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다. 그러나, 상세한 설명, 및 본 발명의 구체적인 태양을 나타내는 특정 실시예들은 단지 일례로 제시된 것으로서, 본 발명의 사상 및 범위 내에서의 다양한 변화 및 변경이 발명의 상세한 설명으로부터 당업자의 기술자에게 자명한 것으로 이해되어야 한다. 단지 특정 화합물이 하나의 특정한 일반적인 화학식으로 묘사되었다고 하더라도, 다른 일반적 화학식에도 포함될 수 없다는 것을 의미하지는 않는다.
본 발명의 태양에 대한 예시적 설명
본 명세서는 항산화성 및/또는 항-염증성을 갖는 신규한 화합물 및 조성물, 이들을 제조하는 방법, 및 질병의 치료 및/또는 예방을 포함하는, 이들을 이용하는 방법에 대해 기재하고 있다.
Ⅰ. 정의
화학적 기로 사용되는 경우, "수소"는 -H; "하이드록시"는 -OH; "옥소"는 =O; "할로"는 독립적으로 -F, -Cl, -Br 또는 -I; "아미노"는 -NH2; "하이드록시아미노"는 -NHOH; "니트로"는 -NO2; "이미노"는 =NH; "시아노"는 -CN; "이소시아네이트"는 -N=C=O; "아지도"는 -N3; 1가의 의미로서 "포스페이트"는 -OP(O)(OH)2 또는 이의 탈양성자화된 상태; 2가의 의미로서 "포스페이트"는 -OP(O)(OH)O- 또는 이의 탈양성자화된 상태; "메르캅토"는 -SH; "티오"는 =S; "설포닐"은 -S(O)2-; 및 "설피닐"은 -S(O)-를 의미한다.
화학식에 사용되는 경우, 기호 "-"는 단일결합, "="는 이중결합; 그리고 "≡"는 3중결합을 의미한다. "에폭시화된 이중결합"은
Figure 112013064107039-pct00025
기를 나타낸다. 기호 "
Figure 112013064107039-pct00026
"는 선택적인 결합으로서, 존재할 경우, 단일 또는 이중결합 중 하나를 나타낸다. 기호 "
Figure 112013064107039-pct00027
"는 단일결합 또는 이중결합을 나타낸다. 따라서, 예를 들어,
Figure 112013064107039-pct00028
의 구조는
Figure 112013064107039-pct00029
,
Figure 112013064107039-pct00030
,
Figure 112013064107039-pct00031
,
Figure 112013064107039-pct00032
및
Figure 112013064107039-pct00033
의 구조들을 포함한다. 해당 분야의 기술자에 의해 이해될 수 있듯이, 이들 중 어떠한 고리 원자도 이중결합 이상의 일부를 형성하지 않는다. 결합을 가로질러 표시된 기호 "
Figure 112013064107039-pct00034
"는 기의 결합부위를 가리킨다. 결합부위를 빠르고 명확하게 이해할 수 있도록 하기 위해, 큰 기들의 경우 통상적으로 이러한 방식으로만 정의된다. 기호 "
Figure 112013064107039-pct00035
"는 쐐기의 두꺼운 말단에 결합한 기가 "지면 밖으로" 결합된 단일결합을 의미한다. 기호 "
Figure 112013064107039-pct00036
"는 쐐기의 두꺼운 말단에 결합한 기가 "지면 내부로" 결합된 단일결합을 의미한다. 기호 "
Figure 112013064107039-pct00037
"는 입체형상(예를 들어, R 또는 S 중 하나) 또는 기하구조(예를 들어, E 또는 Z 중 하나)가 특정되지 않은 단일결합을 의미한다.
본 명세서 내에 도시된 구조에 있어서 원자가가 특정되지 않은 원자는 수소 원자가 그 원자에 결합된 것임을 함축적으로 나타낸다. 고리구조 상에 "떠 있는 기(floating group)"로서 "R"기가 표기된 경우, 예를 들면, 하기 화학식의 경우:
Figure 112013064107039-pct00038
안정된 구조를 형성하기만 한다면 R은 어떠한 고리원자에 결합된 어떠한 수소(표시된, 내재된, 또는 명확히 정의된 수소 포함)라도 대체할 수 있다.
융합된 고리구조 상에 "떠 있는 기(floating group)"로서 "R"기가 표기된 경우, 예를 들면, 하기 화학식의 경우:
Figure 112013064107039-pct00039
다르게 특정되지 않았다면 R은 융합된 고리들 중 하나의 어떠한 고리원자에 결합된 수소라도 대체할 수 있다. 안정된 구조를 형성하기만 한다면, 대체 가능한 수소에는 표시된 수소(예를 들어, 상기 화학식에서 질소에 결합된 수소), 내재된 수소(상기 화학식에 표시되지는 않았으나, 포함된 것으로 이해되는 수소), 명확히 정의된 수소, 및 고리 구조의 속성에 의존하여 존재하는 임의의 수소(예를 들어, X가 -CH-일 경우, X기에 결합된 수소)들이 포함된다. 상기 예시에 있어서, R은 융합된 고리 구조의 5-원 또는 6-원 고리 중 하나에 존재할 수 있다. 상기 화학식에서, 괄호로 기재된 "R" 바로 옆의 첨자 "y"는 가변 수량을 나타낸다. 다르게 특정되지 않는다면, 상기 수는 0, 1, 2 또는 2 초과의 어떠한 정수가 될 수 있고, 다만 고리 또는 고리 구조의 대체 가능한 수소의 최대값에 의해 한정된다.
이하의 기 및 계열에 있어서, 하기의 괄호로써 기재된 내용은 기/계열을 다음과 같이 추가로 정의한다: "(Cn)"은 기/계열 내의 탄소원자의 정확한 수 (n)을 정의한다. "(C≤n)"은 기/계열 내의 탄소원자의 최대의 수 (n)을 정의하며, 기 내에서의 가능한 최소값은 미정인데, 예를 들어, "알케닐(C≤8)"기 또는 "알켄(C≤8)"계열 내의 탄소수의 최소값은 2인 것으로 이해된다. 예를 들면, "알콕시(C≤10)"는 1 내지 10개의 탄소를 가지는 알콕시들을 나타낸다(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10, 또는 이로부터 도출되는 어떠한 범위(예를 들어, 3 내지 10개의 탄소원자)). (Cn-n')는 기 내의 탄소수의 최소값 (n) 및 최대값 (n') 모두를 정의한다. 이와 유사하게, "알킬( C2 -10)"은 2 내지 10개의 탄소원자를 가지는 알킬들을 나타낸다(예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10, 또는 이로부터 도출되는 어떠한 범위(예를 들어, 3 내지 10개의 탄소원자)).
본 명세서 내에서 사용된 "포화된"이라는 용어는, 이하에 명시된 경우를 제외하고는 탄소-탄소 이중결합 및 탄소-탄소 3중결합을 갖지 않도록 개조된 화합물 또는 기를 의미한다. 상기 용어는 예를 들면 탄소 산소 이중결합 또는 탄소 질소 이중결합 등의 탄소-헤테로원자 다중 결합을 배제하지는 않는다. 또한, 케토-엔올 토토머화 또는 이민/엔아민 토토머화의 일부로 수반될 수 있는 탄소-탄소 이중결합도 배제하지 않는다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "지방족"이라는 용어는 개조된 화합물/기가 비-방향족 탄화수소 화합물 또는 기 이외에, 비사이클릭 또는 사이클릭인 것을 의미한다. 지방족 화합물/기에 있어서, 탄소원자들은 직쇄, 측쇄, 또는 비-방향족 고리(알리사이클릭)로써 서로 결합될 수 있다. 지방족 화합물/기는 단일결합으로 연결되어 포화될 수 있거나(알칸류/알킬), 또는, 하나 이상의 이중결합(알켄류/알케닐), 또는 하나 이상의 3중결합(알킨류/알키닐)을 가져 불포화될 수 있다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "지방족"이라는 용어는 탄소 및 수소만이 존재하는 것을 의미한다. 상기 용어가 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 때, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 대체되었다는 것을 의미한다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알킬"이라는 용어는 결합부위로서 탄소원자를 가지고, 선형 및 가지달린 형, 사이클로, 사이클릭 또는 비사이클릭 (acyclic) 구조를 가지며, 탄소 및 수소 이외의 원자를 가지지 않는 1가의 포화된 지방족 기를 가리킨다. 따라서, 본 명세서에 사용된 사이클로알킬은 알킬의 부분집합이다.
-CH3 (Me), -CH2CH3 (Et), -CH2CH2CH3 (n-Pr), -CH(CH3)2 (iso-Pr), -CH(CH2)2 (사이클로프로필), -CH2CH2CH2CH3 (n-Bu), -CH(CH3)CH2CH3 (sec-부틸), -CH2CH(CH3)2 (iso-부틸), -C(CH3)3 (tert-부틸), -CH2C(CH3)3 (neo-펜틸), 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 및 사이클로헥실메틸 기들은 알킬기들의 비-제한적 예시들이다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알칸디일"이라는 용어는 결합부위로서 포화된 하나 또는 두개의 탄소원자를 가지고, 선형 및 가지달린 형, 사이클로, 사이클릭 또는 비사이클릭 구조를 가지며, 탄소-탄소 이중결합 또는 3중결합을 갖지 않고, 탄소 및 수소 이외의 원자를 가지지 않는 2가의 포화된 지방족 기를 가리킨다. -CH2- (메틸렌), -CH2CH2-, -CH2C(CH3)2CH2-, -CH2CH2CH2-, 및
Figure 112013064107039-pct00040
기들은 알칸디일 기들의 비-제한적 예시들이다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알킬리덴"이라는 용어는 2가의 기 =CRR'을 가리키는데, 여기서 R 및 R'는 각각 수소, 알킬이거나, 또는 R 및 R'이 함께 결합되어 적어도 2개 이상의 탄소 원자를 가지는 알칸디일을 나타낸다. 알킬리덴 기들의 비-제한적 예시에는: =CH2, =CH(CH2CH3), 및=C(CH3)2가 포함된다. 상기 용어들 중 어느 것도 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 때, 하나 이상의 수소가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 대체된 것을 나타낸다. 하기의 기들은 치환된 알킬기들의 비-제한적 예시이다: -CH2OH, -CH2Cl, -CF3, -CH2CN, -CH2C(O)OH, -CH2C(O)OCH3, -CH2C(O)NH2, -CH2C(O)CH3, -CH2OCH3, -CH2OC(O)CH3, -CH2NH2, -CH2N(CH3)2, 및 -CH2CH2Cl. "할로알킬"이라는 용어는 치환된 알킬의 부분집합으로서, 하나 이상의 수소가 할로기로 대체되어, 탄소, 수소 및 할로겐 이외의 다른 원자가 존재하지 않는 것이다. -CH2Cl기는 할로알킬의 비-제한적 예시이다. "알칸"은 H-R의 화합물을 가리키고, 여기서 R은 알킬이다. "플루오로알킬"이라는 용어는 치환된 알킬의 부분집합으로서, 하나 이상의 수소가 플루오로기로 대체되어 탄소, 수소 및 불소 이외의 다른 원자가 존재하지 않는 것이다. -CH2F, -CF3, 및 -CH2CF3의 기들은 플루오로알킬기들의 비-제한적 예시이다. "알칸"은 H-R의 화합물을 가리키고, 여기서 R은 알킬이다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알케닐"이라는 용어는 결합부위로 탄소원자를 가지고, 선형 또는 가지달린 형, 사이클로, 사이클릭 또는 비사이클릭 구조를 가지며, 적어도 하나의 비방향족 탄소-탄소 이중결합을 가지고, 탄소-탄소 3중결합을 갖지 않으며, 탄소 및 수소 이외의 다른 원자를 갖지 않는 1가의 불포화 지방족 기를 가리킨다. 알케닐기의 비-제한적 예시에는 -CH=CH2 (비닐), -CH=CHCH3, -CH=CHCH2CH3, -CH2CH=CH2 (알릴), -CH2CH=CHCH3, 및 -CH=CH-C6H5가 포함된다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알켄디일"이라는 용어는 결합부위로서 두개의 탄소원자를 가지고, 선형 및 가지달린 형, 사이클로, 사이클릭 또는 비사이클릭 구조를 가지며, 적어도 하나의 비방향족 탄소-탄소 이중결합을 가지고, 탄소-탄소 3중결합을 갖지 않으며, 탄소 및 수소 이외의 다른 원자를 갖지 않는 2가의 불포화 지방족 기를 가리킨다. -CH=CH-, -CH=C(CH3)CH2-, -CH=CHCH2-, 및
Figure 112013064107039-pct00041
기들은 알켄디일 기들의 비-제한적 예시이다. 상기 용어들이 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것을 의미한다. -CH=CHF, -CH=CHCl 및 -CH=CHBr 기들이, 치환된 알케닐기의 비-제한적 예시이다. "알켄"은 H-R의 화합물을 가리키고, 여기서 R이 알케닐이다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알키닐"이라는 용어는 결합부위로 탄소원자를 가지고, 선형 또는 가지달린 형, 사이클로, 사이클릭 또는 비사이클릭 구조를 가지며, 적어도 하나의 탄소-탄소 3중결합을 가지고, 탄소 및 수소 이외의 다른 원자를 갖지 않는 1가의 불포화 지방족 기를 가리킨다. 본 명세서 내에서 사용된 바, 알키닐이라는 용어는 하나 이상의 비-방향족 탄소-탄소 이중결합의 존재를 배제하지 않는다, -C≡CH, -C≡CCH3, 및 -CH2C≡CCH3기들은 알키닐기들의 비-제한적 예시이다. 알키닐이 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것이다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "헤테로아릴"이라는 용어는 결합부위로서 방향족 탄소원자 또는 질소원자를 가지고, 상기 탄소원자 또는 질소원자가 하나 이상의 방향족 고리 구조를 형성하며, 여기서 적어도 하나의 고리 원자가 질소, 산소 또는 황인 1가의 방향족기를 가리키며, 여기서 헤테로아릴기는 탄소, 수소, 방향족 질소, 방향족 산소 및 방향족 황 이외의 원자로는 구성되지 않는다. 본 명세서 내에서 사용된 바, 상기 용어는 방향족 고리 또는 방향족 고리 구조에 결합된 하나 이상의 알킬, 아릴, 및/또는 아랄킬기들의 존재(탄소수 제한이 허용되는 한)를 배제하지는 않는다. 하나 이상의 고리가 존재할 경우, 고리들은 융합 또는 비융합될 수 있다. 헤테로아릴기들의 비-제한적 예시에는 퓨라닐, 이미다졸릴, 인돌릴, 인다졸릴(Im), 이속사졸릴, 메틸피리디닐, 페닐피리디닐, 옥사졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피롤릴, 피리비디닐, 피라지닐, 퀴놀릴, 퀴나졸릴, 퀴녹살리닐, 트리아지닐, 테트라졸릴, 티에닐 및 트리아졸릴이 포함된다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "헤테로아렌디일"이라는 용어는 두개의 결합부위로서 두개의 방향족 탄소원자들, 두개의 방향족 질소원자들, 또는 하나의 방향족 탄소원자 및 하나의 방향족 질소원자를 가지고, 상기 원자들은 하나 이상의 방향족 고리구조를 형성하며, 여기서 하나 이상의 고리원자들은 질소, 산소 또는 황인 2가의 방향족기를 가리키고, 상기 2가의 기는 탄소, 수소, 방향족 질소, 방향족 산소 및 방향족 황 이외의 원자로는 구성되지 않는다. 본 명세서 내에서 사용된 바, 상기 용어는 방향족 고리 또는 방향족 고리 구조에 결합된 하나 이상의 알킬, 아릴, 및/또는 아랄킬기들의 존재(탄소수 제한이 허용되는 한)를 배제하지는 않는다. 하나 이상의 고리가 존재할 경우, 고리들은 융합 또는 비융합될 수 있다. 헤테로아렌디일기의 비-제한적 예시에는:
Figure 112013064107039-pct00042
가 포함된다.
상기 용어들이 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것이다. "아렌"은 H-R의 화합물을 가리키며, 여기서 R이 아릴이다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "아랄킬"이라는 용어는 -알칸디일-아릴의 1가의 기를 가리키는데, 여기서 알칸디일 및 아릴이라는 용어는 각각 전술한 정의와 동일한 방식으로 사용된 것이다. 아랄킬류의 비-제한적 예시에는: 페닐메틸(벤질, Bn) 및 2-페닐-에틸이 포함된다. 상기 용어가 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 알칸디일 및/또는 아릴로부터의 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 대체된 것이다. 치환된 아랄킬류의 비-제한적 예시에는: (3-클로로페닐)-메틸, 및 2-클로로-2-페닐-에트-1-일이 포함된다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "헤테로아릴"이라는 용어는 결합부위로서 방향족 탄소 원자 또는 질소 원자를 가지고, 상기 탄소 원자 또는 질소 원자가 하나 이상의 방향족 고리 구조를 형성하며, 여기서 적어도 하나의 고리 원자가 질소, 산소 또는 황인 1가의 방향족기를 가리키고, 상기에서 헤테로아릴기는 탄소, 수소, 방향족 질소, 방향족 산소 및 방향족 황 이외의 원자로는 구성되지 않는다. 본 명세서 내에서 사용된 바, 상기 용어는 방향족 고리 또는 방향족 고리계에 결합된 하나 이상의 알킬, 아릴, 및/또는 아랄킬의 존재(탄소수 제한이 허용되는 한)를 배제하지 않는다. 하나 이상의 고리가 존재할 경우, 고리들은 융합 또는 비융합될 수 있다. 헤테로아릴기의 비-제한적 예시에는 퓨라닐, 이미다졸릴, 인돌릴, 인다졸릴(Im), 이속사졸릴, 메틸피리디닐, 옥사졸릴, 페닐피리디닐, 피리디닐, 피롤릴, 피리미디닐, 피라지닐, 퀴놀릴, 퀴나졸릴, 퀴녹살리닐, 트리아지닐, 테트라졸릴, 티아졸릴, 티에닐, 및 트리아졸릴이 포함된다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "헤테로아렌디일"이라는 용어는 2개의 결합부위로서 두개의 방향족 탄소 원자, 두개의 방향족 질소 원자, 또는 하나의 방향족 탄소 원자 및 하나의 방향족 질소 원자를 가지고, 상기 원자들은 하나 이상의 방향족 고리 구조의 일부를 형성하며, 적어도 하나의 고리 원자가 질소, 산소 또는 황인 2가의 방향족기를 가리키며, 상기 2가의 기는 탄소, 수소, 방향족 질소, 방향족 산소 및 방향족 황 이이외의 원자로는 구성되지 않는다. 본 명세서 내에서 사용된 바, 상기 용어는 방향족 고리 또는 방향족 고리계에 결합되는 하나 이상의 알킬, 아릴, 및/또는 아랄킬의 존재(탄소수 제한이 허용되는 한)를 배제하지 않는다. 하나 이상의 고리가 존재할 경우, 고리들은 융합 또는 비융합될 수 있다. 헤테로아렌디일기의 비-제한적 예시에는:
Figure 112013064107039-pct00043
기들이 포함된다.
"치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것이다
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "헤테로사이클로"라는 용어는 결합부위로서 탄소 원자 또는 질소 원자를 가지고, 상기 탄소 원자 또는 질소 원자가 하나 이상의 비-방향족 고리 구조를 형성하며, 여기서 적어도 하나의 고리원자가 질소, 산소 또는 황인 1가의 비-방향족기를 가리키며, 상기 헤테로사이클로알킬기는 탄소, 수소, 질소, 산소 및 황 이외의 원자로는 구성되지 않는다. 본 명세서 내에서 사용된 바, 상기 용어는 고리 또는 고리계에 결합된 하나 이상의 알킬기의 존재(탄소수 제한이 허용되는 한)를 배제하지 않는다. 하나 이상의 고리가 존재할 경우, 고리들은 융합 또는 비융합될 수 있다. 헤테로사이클로알킬기의 비-제한적 예시에는 아지리디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 몰폴리닐, 티오몰폴리닐, 테트라하이드로퓨라닐, 테트라하이드로티오퓨라닐, 테트라하이드로피라닐, 및 피라닐이 포함된다. 상기 용어가 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것이다
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "아실"이라는 용어는 -C(O)R 기를 가리키며, 상기에서 R은 수소, 알킬, 아릴, 아랄킬 또는 헤테로아릴이며, 이들은 이전에 정의된 것들이다. -CHO, -C(O)CH3 (아세틸, Ac), -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH(CH3)2, -C(O)CH(CH2)2, -C(O)C6H5, -C(O)C6H4CH3, -C(O)CH2C6H5, -C(O)(이미다졸릴) 기들은 아실 기의 비-제한적 예시이다. "티오아실"은, -C(O)R 기의 산소 원자가 황 원자로 대체되어 -C(S)R 인 것을 제외하고는 동일한 방식으로 정의된다. 상기 용어들 중 하나가 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 하나 이상의 수소 원자(카르보닐 또는 티오카르보닐 기에 직접 결합된 수소 원자 포함)가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것이다. -C(O)CH2CF3, -CO2H (카르복실), -CO2CH3 (메틸카르복실), -CO2CH2CH3, -C(O)NH2 (카바모일), 및 -CON(CH3)2는 치환된 아실기의 비-제한적 예시이다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알콕시"라는 용어는 -OR 기를 가리키며, 여기서 R은 알킬로서, 이전에 정의된 것이다. 알콕시기의 비-제한적 예시에는: -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCH(CH2)2, -O-사이클로펜틸, 및 -O-사이클로헥실이 포함된다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알케닐옥시", "알키닐옥시", "아릴옥시", "아랄콕시", "헤테로아릴옥시" 및 "아실옥시"는 -OR로 정의되는 기를 가리키며, 여기서 R은 각각 알케닐, 알키닐, 아릴, 아랄킬, 헤테로아릴, 및 아실이다. "알콕시디일"이라는 용어는 -O-알칸디일-, -O-알칸디일-O-, 또는 -알칸디일-O-알칸디일- 의 2가의 기를 가리킨다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알킬티오"라는 용어는 -SR 기를 가리키며, 여기서 R은 이전에 정의된 알킬이다. 상기 용어들 중 어느 것도 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것이다. "알코올"이라는 용어는 이전에 정의된 알칸에 상응하는 것으로서, 적어도 하나의 수소 원자가 하이드록시기로써 대체된 것이다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알킬아미노"라는 용어는 -NHR 기를 가리키며, 여기서 R은 이전에 정의된 알킬이다. 알킬아미노의 비-제한적 예시에는: -NHCH3 및 -NHCH2CH3가 포함된다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "디알킬아미노"라는 용어는 -NRR' 기를 가리키며, 여기서 R 및 R'은 동일하거나 또는 상이한 알킬기가 될 수 있고, 또는 R 및 R'이 함께 결합되어 알칸디일을 나타낼 수 있다. 디알킬아미노의 비-제한적 예시에는: -N(CH3)2, -N(CH3)(CH2CH3), 및 N-피롤리디닐이 포함된다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알콕시아미노", "알케닐아미노", "알키닐아미노", "아릴아미노", "아랄킬아민", "헤테로아릴아미노", 및 "알킬설포닐아미노"라는 용어는 -NHR로 정의되는 기를 가리키는데, 여기서 R은 각각 알콕시, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아랄킬, 헤테로아릴, 및 알킬설포닐이다. 아릴아미노의 비제한적 예는 -NHC6H5이다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "아미도"(아실아미노)라는 용어는 -NHR 기를 가리키며, 여기서 R은 이전에 정의된 아실이다. 아미도 기의 비-제한적 예시는 -NHC(O)CH3이다. "치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알킬이미노"라는 용어는 2가의 기 =NR을 가리키며, 여기서 R은 이전에 정의된 알킬이다. "알킬아미노디일"이라는 용어는 2가의 기인 -NH-알칸디일-, -NH-알칸디일-NH-, 또는 -알칸디일-NH-알칸디일-을 가리킨다. 상기 용어들 중 어느 것도 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것이다. -NHC(O)OCH3 및 -NHC(O)NHCH3 기들은 치환된 아미도 기의 비-제한적 예시들이다.
"치환된"이라는 수식어 없이 사용될 때, "알킬설포닐" 및 "알킬설피닐"이라는 용어는 -S(O)2R 및 -S(O)R 기를 각각 가리키며, 여기서 R은 이전에 정의된 알킬이다. "알케닐설포닐", "알키닐설포닐", "아릴설포닐", "아랄킬설포닐" 및 "헤테로아릴설포닐"이라는 용어는 동일한 방식으로 정의된다. 상기 용어들 중 하나가 "치환된"이라는 수식어와 함께 사용될 경우, 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2에 의해 독립적으로 대체된 것이다.
본 명세서 내에서 사용된 바, "비대칭 보조제"(chiral auxiliary)는 반응의 입체선택성에 영향을 미칠 수 있으면서 제거 가능한 키랄 그룹을 가리킨다. 해당 분야의 기술자에게 이러한 화합물들은 친숙하며, 다수가 상업적으로 유통된다.
청구범위 및/또는 명세서 내에서 "포함하는"이라는 용어와 함께 단수 명사가 사용될 경우 이는 "하나"를 의미할 수 있으나, 이는 또한 "하나 이상", "적어도 하나", 및 "하나 또는 그 이상"의 의미와도 일치한다.
본 명세서 전반적으로, "약"이라는 용어는 수치를 측정하기 위해 채용된 장치 및 방법에 있어서의 오차의 내재적 편차, 또는 연구 과제들 사이에 존재하는 편차를 포함하는 수치를 가리키기 위해 사용된 것이다.
"포함하다" "가지다" 및 "함유하다"의 용어들은 개방된 연결동사들이다. 이들 중 하나 이상의 동사의 어떠한 활용형태, 예를 들면, "포함하는", "포함하고 있는", "가지는", "가지고 있는", "함유하는" 및 "함유하고 있는" 역시 개방되어 있다. 예를 들어, 하나 이상의 단계를 "포함하는", "가지는", 또는 "함유하는" 어떠한 방법도 상기 하나 이상의 단계만을 소유하도록 제한되지 않으며, 이외의 나열되지 않은 단계들도 포함될 수 있다.
"효과적인"이라는 용어는, 명세서 및/또는 청구범위에 사용될 경우, 목적된, 기대된, 또는 의도된 결과를 달성하기에 적절하다는 것을 의미한다.
화합물의 수식어로서 사용되는 "수화"라는 용어는 그 화합물이 하나 미만(예를 들어, 헤미하이드레이트), 하나(예를 들어, 모노하이드레이트), 또는 하나 이상(예를 들어, 디하이드레이트)의 물분자를 각 화합물 분자, 예를 들어 화합물의 고체 형태에 결합하여 가지고 있다는 것을 의미한다.
본 명세서 내에서 사용된 바, "IC50"라는 용어는 최대 반응의 50%가 얻어지는 억제량을 가리킨다. 상기 양적 측정치는 주어진 생물학적, 생화학적 또는 화학적 프로세스(또는 프로세스의 요소, 즉, 효소, 세포, 세포 수용체 또는 마이크로오가니즘)를 절반까지 억제하는데에 특정 의약 또는 기타 물질(억제제)이 얼만큼 필요한지를 가리킨다.
1차 화합물의 "이성질체"는, 각 분자가 1차 화합물로서는 동일한 치환체 원자들을 포함하나, 상기 원자들의 3차원 내에서의 입체형상이 상이한 분리된 화합물이다.
본 명세서 내에서 사용된 바, "환자" 또는 "대상"은 살아있는 인간, 원숭이, 소, 양, 염소, 개, 고양이, 쥐, 생쥐, 기니아 피그 등과 같은 포유동물 또는 유기체, 또는 이들의 유전자 삽입종들을 가리킨다. 특정 태양에서, 환자 또는 대상은 영장류이다. 인간 대상의 비-제한적 예시는 성인, 소년, 유아 및 태아이다.
본 명세서 내에서 일반적으로 사용되는 "약학적으로 허용 가능한"은, 정상적인 의학적 판단 내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 기타 문제 또는 적절한 이득/위험 비율에 상응하는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직, 기관, 및/또는 체액과 접촉시켜 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물, 및/또는 투약 형태를 가리킨다.
"약학적으로 허용 가능한 염"은, 상기 정의된 바, 약학적으로 허용 가능하고, 바람직한 약학적 활성을 가지는 본 발명의 화합물의 염을 의미한다. 이러한 염들은 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 및 이와 유사한 무기산; 또는 1,2-에탄디설폰산, 2-하이드록시에탄 설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 3-페닐프로피온산, 4,4'-메틸렌비스(3-하이드록시-2-엔-1-카르복실산), 4-메틸바이사이클로[2.2.2]옥트-2-엔-1-카르복실산, 아세트산, 지방족 모노- 및 디카르복실산, 지방족 황산, 방향족 황산, 벤젠설폰산, 벤조산, 캄포설폰산(camphorsulfonic acid), 탄산, 계피산(cinnamic acid), 시트르산, 사이클로펜탄 프로피온산, 에탄설폰산, 푸마르산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루탐산, 글리콜산, 헵탄산, 헥사노익산, 하이드록시나프토익산, 락트산, 라우릴황산, 말레산, 말산, 말론산, 만델산, 메탄설폰산, 뮤콘산, o-(4-하이드록시벤질)벤조산, 옥산산, p-클로로벤젠설폰산, 페닐-치환 알카노익산, 프로피온산, p-톨루엔설폰산, 피루브산, 살리실산, 스테아르산, 숙신산, 타르타르산, 터셔리부틸아세트산, 트리메틸아세트산, 및 이와 유사한 유기산과 형성된 산 첨가 염을 포함한다.
약학적으로 허용 가능한 염들은 또한, 존재하는 산성 양성자가 무기 또는 유기 염기와 반응할 수 있을 때 형성될 수 있는 염기 첨가 염도 포함한다. 허용가능한 무기 염기에는 수산화 나트륨, 탄산 나트륨, 수산화 칼륨, 수산화 알루미늄 및 수산화 칼슘이 포함된다. 허용가능한 유기 염기에는 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 트로메타민(tromethamine), N-메틸글루카민 및 이와 유사한 것이 포함된다. 본 발명의 어떠한 염의 일부를 형성하는 특정 음이온 또는 양이온도 염인 한 치명적이지 않고, 전체로서 약학적으로 허용 가능한 것으로 인식되어야 한다. 약학적으로 허용 가능한 염 및 이들의 제조 및 사용 방법의 추가 예시는 Handbook of Pharmaceutical Salts : Properties , and Use (P. H. Stahl & C. G. Wermuth eds., Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002)에 존재한다.
"예방" 또는 "예방하는"은:
(1) 질병의 위험 및/또는 사전노출이 있을 수 있으나, 어떠한 또는 모든 병리 또는 징후를 아직 경험하지 않거나 또는 나타나지 않은 대상 또는 환자 내에서의 질병의 발병을 억제하는 것, 및/또는
(2) 질병의 위험 및/또는 사전노출이 있을 수 있으나, 어떠한 또는 모든 병리 또는 징후를 아직 경험하지 않거나 또는 나타나지 않은 대상 또는 환자 내에서의 질병의 병리 또는 징후의 발현을 늦추는 것
을 포함한다.
"전구약물"은 체내 대사에 의해 본 발명에 따른 억제제로 전환될 수 있는 화합물을 의미한다. 전구약물 자체로는 주어진 목적 단백질에 대한 활성을 가지거나 가지지 않을 수 있다. 예를 들어, 하이드록시 기를 포함하는 화합물은, 체내 가수분해에 의해 하이드록시 화합물로 전환될 수 있는 에스테르로서 투여될 수 있다. 체내 가수분해에 의해 하이드록시 화합물로 전환될 수 있는 적합한 에스테르들은 아세테이트, 시트레이트, 락테이트, 포스페이트, 타르드레이트, 말로네이트, 옥살레이트, 살리실레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 푸마레이트, 말레이트, 메틸렌-비스-β-하이드록시나프토에이트, 겐티세이트(gentisates), 이세티오네이트(isethionates), 디-p-톨루오일타르트레이트, 메탄-설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트, 사이클로헥실-설파메이트, 퀴네이트, 아미노산의 에스테르, 및 이와 유사한 화합물이 포함된다. 유사하게, 아민기를 포함하는 화합물은, 체내 가수분해에 의해 아민 화합물로 전환될 수 있는 아미드로서 투여될 수 있다.
"포화된"이라는 용어가 원자를 지칭하며 사용될 경우, 그 원자가 단일 결합에 의해서만 연결되어 있다는 것을 의미한다.
"입체이성질체" 또는 "광학 이성질체"는, 주어진 화합물 내에서 동일한 원자들이 다른 동일한 원자들과 결합되어 있으나, 이들 원자들의 3차원 입체형상이 상이한 이성질체이다. "거울상 이성질체"는, 왼손과 오른손 같이 각각이 서로 거울상인, 주어진 화합물의 입체이성질체이다. "부분입체이성질체"는, 주어진 화합물에서 거울상 이성질체가 아닌 입체이성질체이다. 키랄 분자들은 비대칭 중심을 포함하는데, 입체중심(stereocenter) 또는 입체적 중심(stereogenic center)으로도 표현되며, 이는 2개의 기의 교환의 결과 입체이성질체가 되는 기들을 포함하는 분자 내의 어떠한 지점으로서, 반드시 원자일 필요는 없다. 유기 화합물 내에서, 비대칭 중심은 통상적으로 탄소, 인 또는 황 원자이며, 유기 및 무기 화합물 내에서 기타의 원자가 입체 중심이 되는 것도 가능하다. 한 분자가 다수의 입체이성질체를 제공하게 되는 복수의 입체중심을 가지는 것이 가능하다. 4면체의 입체적 중심(예를 들어, 4면체 탄소)에 의한 입체이성질체를 가지는 화합물에 있어서, 가상적으로 가능한 입체 이성질체의 총 수는 2n을 초과하지 않는데, 여기서 n은 4면체 입체중심의 수이다. 대칭성 분자들은 종종 가능한 최대수 보다 적은 수의 입체이성질체를 가진다. 거울상 이성질체의 50:50의 혼합물은 라세믹 혼합물이라 칭한다. 선택적으로는, 거울상 이성질체들의 혼합물은 거울상 입체적으로 농축되어, 하나의 거울상 이성질체의 양이 50%를 초과할 수 있다. 통상적으로, 거울상 이성질체 및/또는 부분입체이성질체는 해당 분야에 공지된 기술을 이용하여 분리 또는 단리될 수 있다. 입체 화학이 아직 규명되지 않은 것들의 입체 중심 또는 비대칭 축의 경우, 입체 중심 또는 비대칭 축은 R 형, S 형, 또는 라세믹 또는 비-라세믹 혼합물을 포함하는 R 및 S 형의 혼합물 내에 존재할 수 있는 것으로 여겨진다. 본 명세서 내에서 사용된 바, "다른 입체 이성질체가 실질적으로 없는"이라는 문구는 그 화합물이 ≤15%, 보다 바람직하게는 ≤10%, 더욱 더 바람직하게는 ≤5%, 또는 가장 바람직하게는 ≤1%의 다른 입체이성질체(들)를 함유한다는 것을 의미한다.
"유효량", "치료적으로 유효한 양" 또는 "약학적으로 유효한 양"은 질병 치료를 위해 대상 또는 환자에게 투여될 경우, 질병에 대한 치료에 효과를 나타내기에 충분한 양이라는 것을 의미한다.
"치료" 또는 "치료함"은:
(1) 질병의 병리 또는 증상을 겪거나 보이는 대상 또는 환자에게서 질병을 억제하는 것(예를 들어, 병리 및/또는 증상의 차후적인 진행을 저지하는 것),
(2) 질병의 병리 또는 증상을 겪거나 보이는 대상 또는 환자에게서 질병을 경감시키는 것(예를 들어, 병리 및/또는 증상을 반전시키는 것), 및/또는
(3) 질병의 병리 또는 증상을 겪거나 보이는 대상 또는 환자에게서 질병의 어떠한 측정 가능한 감소에 영향을 미치는 것
을 포함한다.
본 명세서에 사용된 기타 축약어들은 다음과 같다: DMSO, 디메틸 설폭사이드; NO, 산화질소; iNOS, 유도성 산화질소 신타제; COX-2, 사이클로 옥시게나아제-2; FBS, 소 태아 혈청; IFNγ 또는 IFN-γ, 인터페론-γ; TNFα 또는 TNF-α, 종양괴사인자-α; IL-1β, 인터루킨-1β; HO-1, 유도성 헴 옥시게나아제(inducible heme oxigenase).
상기 정의들은 본 명세서에 참조로 포함된 어떠한 참고문헌에서의 상반되는 정의를 대신한다. 그러나, 특정 용어들이 정의되었다는 사실이, 다른 정의되지 않은 어떠한 용어가 무한정이라고 가리키는 것으로 이해되어서는 안된다. 오히려, 사용된 모든 용어들은 본 발명을 설명하고 그에 따라 일반적인 기술자가 본 발명을 이해하고 실시할 수 있도록 하는 것으로 이해될 것이다.
Ⅱ. 화합물 및 합성법
본 명세서에 의해 제공되는 화합물들은 전술한 본 발명의 요약 부분, 및 청구범위에 나타나 있다. 이들은 실시예 부분에 제시된 방법들을 이용하여 만들어질 수 있다. 상기 방법들은 해당 분야의 기술자에 의해 적용되는 유기화학의 이론 및 기술을 이용하여 변경 및 최적화될 수 있다. 이러한 이론 및 기술들은, 예를 들면 본 명세서에서 참고로 포함된 [March's Advanced organic Chemistry : Reactions , Mechanisms , and Structure (2007)]를 통해 알 수 있다.
본 발명의 방법에 관련된 화합물들은 하나 이상의 비대칭적으로 치환된 탄소 또는 질소원자를 함유할 수 있고, 광학적으로 활성이거나 또는 라세믹 형태로 단리될 수 있다. 이에 따라, 특정 입체화학 또는 이성질체 형태가 구체적으로 명시되지 않은 경우, 구조의 모든 키랄, 부분입체성, 라세믹 형태, 및 모든 기하 이성질체 형태는 의도된 것이다. 화합물들은 라세미 화합물(racemate) 및 라세믹 혼합물, 단일 거울상 이성질체, 부분입체적 혼합물 및 개별적 부분입체이성질체들로 얻어질 수 있다. 일부 태양에서, 단일의 부분입체이성질체가 얻어진다. 본 발명의 화합물의 비대칭 중심은, IUPAC 1974 권고에 따라 정의된바, S 또는 R 입체형상을 가질 수 있다. 예를 들면, 입체이성질체들의 혼합물들은 이하의 실시예 부분에 설명된 기술들뿐만 아니라, 그 변형을 이용하여 분리될 수 있다.
본 발명의 화합물을 구성하는 원자들은 모든 동위원소 형태를 포함하는 것으로 의도되었다. 본 발명의 화합물은 동위원소적으로 개조되거나 농축된 하나 이상의 원자, 특히 약학적으로 허용 가능한 동위원소를 가진 것 또는 약학적 연구에 유용한 것들을 포함한다.
본 명세서 내에서 사용된 바, 동위원소는 같은 원자번호를 가지나 다른 질량을 가지는 원자들을 포함한다. 제한 없는 일반적인 예시에 따라, 수소의 동위원소는 중수소 및 삼중수소를 포함하고, 탄소의 동위원소는 13C 및 14C를 포함한다. 이와 유사하게, 본 발명의 화합물의 하나 이상의 탄소 원자가 실리콘 원자로 대체될 수 있는 것으로 여겨진다. 추가적으로, 본 발명의 화합물의 하나 이상의 산소 원자가 황 또는 셀레늄 원자로 대체될 수 있는 것으로 여겨진다.
본 발명의 화합물은 또한 전구약물 형태로 존재할 수 있다. 전구약물들이 약제의 수많은 바람직한 질(예를 들어, 용해도, 생물학적 이용가능성, 생산성 등)을 향상시키는 것으로 알려져 있는바, 본 발명의 일부 방법에 관련된 화합물들은 바람직하게는 전구약물 형태로 투여된다. 따라서, 본 발명은, 본 발명의 화합물의 전구약물뿐만 아니라, 전구약물을 투여하는 방법에 대해 고려하고 있다. 본 발명과 관련된 화합물들의 전구약물들은 화합물 내에 존재하는 작용기들을 개조함으로써 제조될 수 있는데, 상기 개조는 통상적인 조작에 의해 또는 체내에서 원래 화합물로 되돌릴 수 있는 것이다. 따라서, 전구약물들은 예를 들면 어떠한 기에 하이드록시, 아미노, 또는 카르복시기가 결합된 본 명세서 내의 화합물들을 포함하며, 전구약물은 대상에게 투여될 경우 하이드록시, 아미노, 또는 카르복실산 각각을 형성하도록 쪼개진다.
염이기만 하면, 본 발명의 어떠한 염의 일부를 형성하는 특정 음이온 또는 양이온도 치명적이지 않고, 전체로서 약학적으로 허용 가능하다는 것으로 이해되어야 한다. 약학적으로 허용 가능한 염 및 이들의 제조 및 사용방법의 추가적인 예시는 본 명세서 내에 참고로 포함된 [Handbook of Pharmaceutical Salts : Properties , and Use (2002)] 내에 기재되어 있다.
또한, 본 발명의 화합물이 체내에서 수소로 전환될 수 있는 치환기들을 포함하도록 추가로 변형된 것들을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 이는, 가수분해 및 가수소분해를 포함하는-그러나 이들에 제한되지 않는-효소적 또는 화학적 수단에 의해 수소 원자로 전환될 수 있는 기들을 포함한다. 가수분해 가능한 기들을 포함하는 예로는, 아실기, 옥시카르보닐기를 포함하는 기, 아미노산 잔기, 펩타이드 잔기, o-니트로페닐설페닐, 트리메틸실릴, 테트라하이드로피라닐, 디페닐포스피닐 및 이와 유사한 것들이 포함된다. 아실기의 예로는 포르밀, 아세틸, 트리플루오로아세틸 및 이와 유사한 것들이 포함된다. 옥시카르보닐기를 포함하는 기의 예로는, 에톡시카르보닐, tert-부톡시카르보닐(-C(O)OC(CH3)3), 벤질옥시카르보닐, p-메톡시-벤질옥시카르보닐, 비닐옥시카르보닐, β-(p-톨루엔설포닐)에톡시카르보닐, 및 이와 유사한 것들이 포함된다. 적합한 아미노산 잔기들에는 Gly (글리신), Ala (알라닌), Arg (아르기닌), Asn (아스파라긴), Asp (아스파르트산), Cys (시스테인), Glu (글루탐산), His (히스티딘), Ile (이소루신), Leu (루신), Lys (리신), Met (메티오닌), Phe (페닐알라닌), Pro (프롤린), Ser (세린), Thr (트레오닌), Trp (트립토판), Tyr (티로신), Val (발린), Nva (노르발린), Hse (호모세린), 4-Hyp (4-하이드록시프롤린), 5-Hyl (5-하이드록시리신), Orn (오르니틴) 및 β-Ala 잔기들이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다. 적절한 아미노산 잔기들의 예로는 보호기로 보호되는 아미노산 잔기들도 포함된다. 적합한 보호기의 예로는, 펩티드 합성에 통상적으로 채택되는 것들이 포함되는데, 아실기(포르밀 및 아세틸 등), 아릴메톡시카르보닐기(벤질옥시카르보닐 및 p-니트로벤질옥시카르보닐 등), tert-부톡시카르보닐기(-C(O)OC(CH3)3), 및 이와 유사한 것들이 포함된다. 적합한 펩타이드 잔기들에는 두개 내지 5개의 아미노산 잔기를 포함하는 펩타이드 잔기들이 포함된다. 이러한 아미노산 또는 펩타이드 잔기들은 D-형, L-형 또는 이들의 혼합물의 입체화학적 입체형상으로 존재할 수 있다. 또한, 아미노산 또는 펩타이드 잔기는 비대칭 탄소원자를 가질 수 있다. 비대칭 탄소원자를 갖는 적합한 아미노산에는 Ala, Leu, Phe, Trp, Nva, Val, Met, Ser, Lys, Thr 및 Tyr의 잔기들이 포함된다. 비대칭 탄소원자를 갖는 적합한 펩타이드 잔기에는 비대칭 탄소원자를 갖는 아미노산 치환체를 하나 이상 가지는 펩타이드 잔기들이 포함된다. 적합한 아미노산 보호기의 예로는, 펩타이드 합성에 통상적으로 채택되는 것들이 포함되는데, 아실기(포르밀 및 아세틸 등), 아릴메톡시카르보닐기(벤질옥시카르보닐 및 p-니트로벤질옥시카르보닐 등), tert-부톡시카르보닐기(-C(O)OC(CH3)3), 및 이와 유사한 것들이 포함된다. '체내에서 수소로 천환될 수 있는' 치환체의 다른 예로는, 환원적으로 제거 가능한 가수소분해성기가 포함된다. 환원적으로 제거 가능한 가수소분해성기의 적합한 예로는, 아릴설포닐기(o-톨루엔설포닐 등); 페닐 또는 벤질옥시로 치환된 메틸기(벤질, 트리틸 및 벤질옥시메틸 등); 아릴메톡시카르보닐기(벤질옥시카르보닐 및 o-메톡시-벤질옥시카르보닐 등); 및 할로에톡시카르보닐기(β,β,β-트리클로로에톡시카르보닐 및 β-요오도에톡시카르보닐 등)가 포함되는데, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화합물들은 또한, 본 명세서 내에 명시적으로 언급된, 또는 그 이외의 용도로 사용될 경우, 해당 분야 공지의 화합물들에 비해 더 효과적이고, 덜 독성이며, 더 오래 지속되고, 더 잠재적이며, 부작용을 덜 발생하고, 더 용이하게 흡수되며, 및/또는 더 나은 약동학적 프로파일(예를 들어, 더 높은 경구적 생체이용율 및/또는 더 낮은 청소율)을 가질 수 있으며, 및/또는 기타 유용한 병리학적, 물리적, 또는 화학적 특성들을 가질 수 있다.
Ⅲ. 생물학적 활성
본 발명의 몇몇 화합물들의 IFN-γ 유도(induced) NO 생성 억제의 분석 결과가 아래 표 1에 나타내어져 있다. 상기 표의 RAW264.7 하의 우측컬럼 내에서, 결과가 바르독솔론 메틸(RTA 402)과 비교되어 있다. NQO1-ARE 루시퍼라아제 리포터 분석 결과가 마지막 컬럼에 나타내어져 있다. 두가지 분석에 대한 상세 내용은 이하의 실시예 부분에 제공되어 있다. "키랄"이라고 표지된 화학식들을 제외하고는, 표 1에 나타낸 각 각 화합물들은 라세믹이다. 라세믹 화합물들의 경우, 보여지는 분자 구조는 두가지 거울상 이성질체 중 하나의 화학식이다. "키랄"이라고 표지된 화학식의 경우, 분자 구조는 우세하게 존재하는 입체이성질체를 보여준다.
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I. 염증 및/또는 산화 스트레스와 관련된 질병{ DISEASES ASSOCIATED WITH INFLAMMATION AND / OR OXIDATIVE STRESS }
염증은 감염성 또는 기생성 미생물에 대한 내성 및 손상된 조직의 회복을 제공하는 생물학적 과정이다. 염증은 통상적으로 국소화된 혈관확장, 발적, 종창 및 통증, 감염 또는 손상 부위로의 백혈구의 모임, 염증성 사이토킨, 예를 들어 TNF-α 및 IL-1의 생산, 및 반응성 산소 또는 질소 종, 예를 들어 과산화 수소, 초과산화물 및 퍼옥시나이트라이트의 생산을 특징으로 한다. 염증의 말기 단계에서, 상처 치유 과정의 부분으로서 조직 재형성, 혈관생성, 및 흉터 형성(섬유형성)이 발생할 수도 있다. 정상적인 상황 하에서, 상기 염증 반응은 조절되고 일시적이며, 일단 상기 감염 또는 손상이 적절하게 처리되었다면 조화로운 방식으로 해결된다. 그러나, 급성 염증은 조절 기전이 실패하는 경우 과도해지며 생명을 위협하게 될 수 있다. 한편으로, 염증은 만성적으로 될 수 있고 누적되는 조직 손상 또는 전신 합병증을 야기할 수 있다. 적어도 상기 제공된 증거를 근거로, 본 발명의 화합물을 염증 또는 염증 관련 질병의 치료 또는 예방에 사용할 수 있다.
전통적으로 염증 상태로 보지 않았던 다수의 중증 및 난치성 인간 질병, 예를 들어 암, 죽상동맥경화증, 및 당뇨병과 같은 질병은 염증 과정의 조절장애를 수반한다. 암의 경우에, 상기 염증 과정은 종양 형성, 진행, 전이 및 치료에 대한 내성과 관련된다. 오랫동안 지질 대사의 장애로서 보아왔던 죽상동맥경화증은 현재 주로 염증 상태인 것으로 이해되고 있으며, 이때 활성화된 대식세포가 죽상경화판의 형성 및 최종적인 파열에 중요한 역할을 한다. 염증 신호전달 경로의 활성화가 또한 인슐린 내성의 발생뿐만 아니라 당뇨성 고혈당증과 관련된 말초 조직 손상에 한 역할을 하는 것으로 나타났다. 반응성 산소 종 및 반응성 질소 종, 예를 들어 초과산화물, 과산화 수소, 산화 질소, 및 퍼옥시나이트라이트의 과도한 생산은 염증 상태의 특징이다. 조절장애된 퍼옥시나이트라이트 생산의 증거가 광범위한 질병들에서 보고되었다(문헌[Szabo et al., 2007]; [Schulz et al., 2008]; [Forstermann, 2006]; [Pall, 2007]).
류마티스성 관절염, 루푸스, 건선 및 다발성 경화증과 같은 자가면역 질병은 감염된 조직에서 염증 과정의 부적합하고 만성적인 활성화를 수반하며, 이는 면역계에서 자기 대 비-자기 인식 및 반응 기전의 기능이상으로부터 발생한다. 신경퇴행성 질병, 예를 들어 알쯔하이머병 및 파킨슨병에서, 신경 손상은 미세아교세포의 활성화 및 상승된 수준의 염증전 단백질, 예를 들어 유도성 산화 질소 신타제(iNOS)와 상관이 있다. 만성적인 기관부전, 예를 들어 신부전, 심부전, 간부전, 및 만성 폐쇄성 폐 질환은 만성적인 산화 스트레스 및 염증의 존재와 밀접하게 관련되며, 이는 섬유증의 발생 및 최종적인 기관 기능 상실을 도출한다. 대혈관 및 소혈관을 따라 늘어선 혈관 내피 세포의 산화 스트레스는 내피 기능이상을 도출할 수 있으며 이는 전신 심혈관 질환, 당뇨 합병증, 만성 신장 질환 및 다른 형태의 기관 부전, 및 다수의 다른 노화 관련된 질병, 예를 들어 중추 신경계 및 망막의 퇴행성 질병의 발생에 중요한 기여 인자인 것으로 여겨진다.
다수의 다른 질환들, 예를 들어 염증성 장 질환; 염증성 피부 질환; 방사선 요법 및 화학요법과 관련된 점막염; 눈 질환, 예를 들어 포도막염, 녹내장, 황반 변성, 및 다양한 형태의 망막병증; 이식 결함 및 거부; 허혈성 재관류 손상; 만성 통증; 뼈 및 관절의 퇴행성 상태, 예를 들어 골관절염 및 골다공증; 천식 및 낭성 섬유증; 발작 장애; 및 신경정신병학적 상태, 예를 들어 정신분열증, 우울증, 양극성 장애, 외상후 스트레스성 장애, 주의력 결핍 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 및 식사 장애, 예를 들어 거식증은 감염된 조직 중에 산화 스트레스 및 염증을 수반한다. 염증 신호전달 경로의 조절장애는 근육 이영양증을 포함한 근육 소모성 질병 및 다양한 형태의 악액질의 병리학에서 주요 인자인 것으로 여겨진다.
다양한 생명-위협적인 급성 질환들, 예를 들어 췌장, 신장, 간 또는 폐를 포함한 급성 기관 부전, 심근 경색 또는 급성 관상동맥 증후군, 졸중 (stroke), 패혈성 쇼크, 외상, 중증 화상, 및 과민증이 또한 조절장애된 염증 신호전달을 수반한다.
감염성 질병의 다수의 합병증들이 또한 염증 반응의 조질장애를 수반한다. 염증 반응은 침입하는 병원체를 죽일 수 있지만, 과도한 염증 반응은 또한 매우 파괴적일 수 있으며 일부의 경우 감염된 조직 손상의 주요 원인일 수 있다. 더욱 또한, 과도한 염증 반응은 또한 염증성 사이토킨, 예를 들어 TNF-α 및 IL-1의 과잉생산으로 인해 전신 합병증을 도출할 수 있다. 이는 중증 인플루엔자, 중증 급성 호흡기 증후군 및 패혈증으로부터 발생하는 사망의 한 인자인 것으로 여겨진다.
iNOS 또는 사이클로옥시게나제-2(COX-2)의 이상 또는 과잉 발현은 많은 질병 과정의 병인에 관련되었다. 예를 들어, NO는 강력한 돌연변이 유발요인이며(문헌[Tamir and Tannebaum, 1996]) 산화 질소는 또한 COX-2를 활성화시킬 수 있음(문헌[Salvemini et al., 1994])이 분명하다. 더욱 또한, 발암물질인 아족시메탄에 의해 유발된 래트 결장 종양에서 iNOS의 현저한 증가가 존재한다(문헌[Takahashi et al., 1997]). 올레아놀산의 일련의 합성 트라이터페노이드 유사체가, 마우스 대식세포에서 IFN-γ에 의한 유도성 산화 질소 신타제(iNOS) 및 COX-2의 유도와 같은 세포 염증 과정의 강력한 억제제인 것으로 나타났다. 문헌[Honda et al. (2000a)]; [Honda et al. (2000b)], 및 [Honda et al. (2002)](이들은 모두 본 발명에 참고로 인용된다)을 참조하시오.
하나의 태양에서, 본 발명에 개시된 화합물은 γ-인터페론에의 노출에 의해 유도된 대식세포 유래된 RAW 264.7 세포에서 산화 질소의 생산을 억제하는 그의 능력을 특징으로 한다. 상기 화합물은 또한 NQO1과 같은 산화방지성 단백질의 발현을 유도하고 COX-2 및 유도성 산화 질소 신타제(iNOS)와 같은 염증전 단백질의 발현을 감소시키는 그의 능력을 특징으로 한다. 이러한 성질들은 산화 스트레스 및 염증 과정의 조절장애를 수반하는 다수의 질병 및 질환, 예를 들어 암, 이온화 방사선에의 국소화된 노출 또는 전신 노출로부터의 합병증, 방사선 요법 또는 화학요법으로부터 생성되는 점막염, 자가면역 질병, 죽상동맥 경화증을 포함한 심혈관 질병, 허혈성 재관류 손상, 신부전 및 심부전을 포함한 급성 및 만성 기관 부전, 호흡기 질병, 당뇨병 및 당뇨 합병증, 중증 알러지, 이식 거부, 이식편 대 숙주병, 신경퇴행성 질병, 눈 및 망막의 질병, 급성 및 만성 통증, 골관절염 및 골다공증을 포함한 퇴행성 골 질병, 염증성 장 질환, 피부염 및 다른 피부병, 패혈증, 화상, 발작 장애, 및 신경정신병학적 질환의 치료에 적합하다.
이론에 얽매이고자 하는 것은 아니지만, 산화방지/소염성 Keap1/Nrf2/ARE 경로의 활성화가 본 발명에 개시된 화합물들의 소염 및 항암 성질 모두와 관련되는 것으로 여겨진다.
또 다른 태양에서, 본 발명에 개시된 화합물을, 하나 이상의 조직 중 상승된 수준의 산화 스트레스에 의해 야기되는 상태를 갖는 환자의 치료에 사용할 수 있다. 산화 스트레스는 비정상적으로 높거나 연장된 수준의 반응성 산소 종들, 예를 들어 초과산화물, 과산화 수소, 산화 질소, 및 퍼옥시나이트라이트(산화 질소와 초과산화물의 반응에 의해 형성된다)로부터 발생한다. 상기 산화 스트레스는 급성 또는 만성 염증을 동반할 수 있다. 상기 산화 스트레스는 미토콘드리아 기능이상에 의해, 면역 세포, 예를 들어 대식세포 및 호중구의 활성화에 의해, 이온화 방사선 또는 세포독성 화학요법제(예를 들어 독소루비신)와 같은 외부작용제에의 급성 노출에 의해, 외상 또는 다른 급성 조직 손상에 의해, 허혈/재관류에 의해, 불량한 순환 또는 빈혈에 의해, 국소 또는 전신 저산소증 또는 과산소증에 의해, 상승된 수준의 염증성 사이토킨 및 다른 염증-관련된 단백질에 의해, 및/또는 다른 비정상적인 생리 상태, 예를 들어 고혈당증 또는 저혈당증에 의해 유발될 수 있다.
심근 경색, 신부전, 이식 결함 및 거부, 졸중 (stroke), 심혈관 질병, 및 자가면역 질병의 모델을 포함한 다수의 상기와 같은 상태의 동물 모델에서, 상기 Nrf2 경로의 표적 유전자인 유도성 헴 옥시게나제(HO-1)의 발현을 자극하는 것은 현저한 치료 효과를 갖는 것으로 나타났다(예를 들어 문헌[Sacerdoti et al., 2005]; [Abraham & Kappas, 2005]; [Bach, 2006; Araujo et al., 2003]; [Liu et al., 2006]; [Ishikawa et al., 2001]; [Kruger et al., 2006]; [Satoh et al., 2006]; [Zhou et al., 2005]; [Morse and Choi, 2005]; [Morse and Choi, 2002]). 상기 효소는 유리 헴을 철, 일산화 탄소(CO), 및 빌리베르딘(이는 후속으로 효능 있는 산화방지 분자인 빌리루빈으로 전환된다)으로 붕괴시킨다.
또 다른 태양에서, 본 발명의 화합물을 염증에 의해 악화된 산화 스트레스로부터 발생되는 급성 및 만성의 조직 손상 또는 기관 부전을 예방 또는 치료하는데 사용할 수 있다. 상기 범주 내에 있는 질병의 예는 심부전, 간부전, 이식 결함 및 거부, 신부전, 췌장염, 섬유화성 폐 질병(특히 낭성 섬유증 및 COPD), 당뇨병(합병증 포함), 죽상동맥경화증, 허혈성-재관류 손상, 녹내장, 졸중 (stroke), 자가면역 질병, 자폐증, 황반 변성, 및 근육 이영양증을 포함한다. 예를 들어, 자폐증의 경우에, 중추 신경계에서 증가된 산화 스트레스가 상기 질병의 발병에 기여할 수도 있다는 연구가 제시되어 있다(문헌[Chauhan and Chauhan, 2006]).
증거는 또한 산화 스트레스 및 염증을 상기 중추 신경계의 다수의 다른 질환들, 예를 들어 정신병학적 질환, 예를 들어 정신병, 주우울증, 및 양극성 장애; 발작 장애, 예를 들어 간질; 통증 및 감각 증후군, 예를 들어 편두통, 신경병성 통증 또는 이명; 및 행동 증후군, 예를 들어 주의력 결핍 장애의 발병 및 병인과 연계시킨다. 예를 들어 문헌[Dickerson et al., 2007]; [Hanson et al., 2005]; [Kendall-Tackett, 2007]; [Lencz et al., 2007]; [Dudhgaonkar et al., 2006]; [Lee et al., 2007]; [Morris et al., 2002]; [Ruster et al., 2005]; [McIver et al., 2005]; [Sarchielli et al., 2006]; [Kawakami et al., 2006]; [Ross et al., 2003](이들 문헌은 모두 본 발명에 참고로 인용된다)을 참조하시오. 예를 들어, TNF, 인터페론-γ 및 IL-6을 포함한 상승된 수준의 염증성 사이토킨이 주요 정신 질환과 관련이 있다(문헌[Dickerson et al., 2007]). 미세아교세포 활성화가 또한 주요 정신 질환과 관련되었다. 따라서, 염증성 사이토킨을 하향조절하고 미세아교세포의 과도한 활성화를 억제하는 것이 정신분열증, 주우울증, 양극성 장애, 자폐 스펙트럼 장애, 및 다른 신경정신병학적 질환을 갖는 환자에게 이로울 수 있다.
따라서, 산화 스트레스만을 수반하거나 또는 염증에 의해 악화된 산화 스트레스를 수반하는 병리학에서, 치료는 환자에게 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 예를 들어 상기에 또는 본 명세서 전체를 통해 개시된 것들을 투여함을 포함할 수 있다. 치료를 산화 스트레스의 예측 가능한 상태(예를 들어 기관 이식 또는 암 환자에게 방사선 요법의 투여)에 앞서 예방학적으로 투여하거나, 또는 확립된 산화 스트레스 및 염증을 수반하는 환경에서 치료학적으로 투여할 수도 있다.
본 발명에 개시된 화합물을 일반적으로는 염증 상태, 예를 들어 패혈증, 피부염, 자가면역 질병 및 골관절염의 치료에 적용할 수 있다. 하나의 태양에서, 본 발명의 화합물을 사용하여, 예를 들어 Nrf2를 유도하고/하거나 NF-κB를 억제함으로써 염증성 통증 및/또는 신경병성 통증을 치료할 수 있다.
일부 실시태양에서, 본 발명에 개시된 화합물을 암, 염증, 알쯔하이머병, 파킨슨병, 다발성 경화증, 자폐증, 근위축성 측삭 경화증, 헌팅톤병, 자가면역 질병, 예를 들어 류마티스성 관절염, 루푸스, 크론병 및 건선, 염증성 장 질환, 병인이 산화 질소 또는 프로스타글란딘의 과잉 생산을 수반하는 것으로 여겨지는 모든 다른 질병, 및 산화 스트레스 단독 또는 염증에 의해 악화된 산화 스트레스를 수반하는 병리학과 같은 질병의 치료 및 예방에 사용할 수도 있다.
염증의 또 다른 태양은 프로스타글란딘 E와 같은 염증성 프로스타글란딘의 생산이다. 상기 분자는 혈관확장, 혈장 혈관밖유출, 국소 통증, 상승된 체온, 및 염증의 다른 증상들을 촉진한다. 상기 효소 COX-2의 유도성 형태는 그의 생산과 관련되며 염증을 일으킨 조직에서 높은 수준의 COX-2가 발견된다. 결과적으로, COX-2의 억제는 염증의 많은 증상들을 경감시킬 수 있으며 다수의 중요한 소염 약물들(예를 들어 이부프로펜 및 셀레콕시브)은 COX-2 활성을 억제함으로써 작용한다. 그러나, 최근의 연구는 사이클로펜테논 프로스타글란딘(cyPG)의 한 부류(예를 들어 15-데옥시 프로스타글란딘 J2, 또한 PGJ2로서 공지됨)가 염증의 조화로운 해결을 자극하는데 한 역할을 함을 입증하였다(예를 들어 문헌[Rajakariar et al., 2007]). COX-2는 또한 사이클로펜테논 프로스타글란딘의 생산과 관련된다. 결과적으로, COX-2의 억제는 염증의 완전한 해결을 방해할 수도 있으며, 이는 조직 중 활성화된 면역 세포의 지속을 잠재적으로 촉진하여 만성적인 "비정형(smoldering)" 염증으로 되게 한다. 이러한 효과는 오랜 기간 동안 선택적인 COX-2 억제제를 사용하는 환자의 심혈관 질병의 증가된 발병률의 원인이 될 수도 있다.
하나의 태양에서, 본 발명에 개시된 화합물을 사용하여, 산화환원-민감성 전사 인자의 활성을 조절하는 단백질 상의 조절성 시스테인 잔기(RCR)를 선택적으로 활성화시킴으로써 세포 내 염증-전 사이토킨의 생산을 조절할 수 있다. cyPG에 의한 RCR의 활성화는, 상기 산화방지 및 세포보호성 전사 인자 Nrf2의 활성을 효능 있게 유도하고 산화촉진 및 염증-전 전사 인자 NF-κB 및 STAT의 활성은 억제하는 사전 해결 프로그램을 개시시키는 것으로 나타났다. 일부 실시태양에서, 상기는 산화방지 및 환원 분자(NQO1, HO-1, SOD1, γ-GCS)의 생산을 증가시키고 산화 스트레스, 및 산화촉진 및 염증-전 분자(iNOS, COX-2, TNF-α)의 생산을 감소시킨다. 일부 실시태양에서, 본 발명의 화합물은, 상기 염증의 해결을 촉진하고 숙주에 대한 과도한 조직 손상을 제한함으로써 상기 염증 사건이 진행되는 세포가 비-염증 상태로 되돌아가게 할 수도 있다.
II . 약학 제형 및 투여 경로
본 명세의 화합물을 다양한 방법에 의해, 예를 들어 경구로 또는 주사(예를 들어 피하, 정맥 내, 복강 내 등)에 의해 투여할 수 있다. 투여 경로에 따라, 상기 활성 화합물을 산, 및 상기 화합물을 불활성화시킬 수도 있는 다른 자연적인 조건의 작용으로부터 보호하는 물질로 코팅할 수도 있다. 상기 화합물을 또한 질병 또는 상처 부위의 연속적인 재관류/관류에 의해 투여할 수도 있다.
비경구 투여 이외의 투여에 의해 상기 치료 화합물을 투여하기 위해서, 상기 화합물을 그의 불활성화를 방지하는 물질로 코팅하거나, 또는 상기 물질과 함께 투여할 필요가 있을 수도 있다. 예를 들어, 상기 치료학적 화합물을 적합한 담체, 예를 들어 리포솜 또는 희석제 중에서 환자에게 투여할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 희석제는 염수 및 수성 완충 용액을 포함한다. 리포솜은 통상적인 리포솜뿐만 아니라 유중 수적형 수중 유적형 CGF 유화액을 포함한다(문헌[Strejan et al., 1984]).
상기 치료학적 화합물을 또한 비경구, 복강 내, 척수 내, 또는 대뇌 내로 투여할 수도 있다. 분산액을 글리세롤, 액체 폴리에틸렌 글리콜, 및 이들의 혼합물 중에서 및 오일 중에서 제조할 수 있다. 통상적인 보관 및 사용 조건 하에서, 이들 제제는 미생물의 생육을 방지하기 위해서 보존제를 함유할 수도 있다.
주사용으로 적합한 약학 조성물은 멸균 수용액(수용성인 경우) 또는 분산액 및 멸균 주사 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 예를 들어 2009년 2월 13일자로 출원된, "지연 방출 경구 투여 조성물용의 CDDO-Me의 비결정성 고체 분산액"이란 표제 하의 제이 장(J. Zhang)의 미국 특허 출원(본 발명에 참고로 인용된다)을 참조하시오. 모든 경우에, 상기 조성물은 멸균성이어야 하고 주사성(syringability)이 용이한 정도로 유체이어야 한다. 상기 조성물은 제조 및 보관 조건 하에서 안정해야 하며 세균 및 진균과 같은 미생물의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다. 상기 담체는 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등)을 함유하는 용매 또는 분산 매질, 이들의 적합한 혼합물, 및 식물성 오일일 수 있다. 적합한 유동성을 예를 들어 레시틴과 같은 코팅제의 사용에 의해, 분산액의 경우 필요한 입자 크기의 유지에 의해, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지시킬 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산, 티메로살 등에 의해 성취될 수 있다. 많은 경우에, 등장화제, 예를 들어 당, 염화 나트륨, 또는 폴리알콜, 예를 들어 만니톨 및 솔비톨을 상기 조성물 중에 포함시키는 것이 바람직할 것이다. 상기 주사성 조성물의 연장된 흡수는 상기 조성물 중에 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 또는 젤라틴을 포함시킴으로써 발생시킬 수 있다.
멸균 주사 용액을, 상기 치료학적 화합물을 적합한 용매 중에 필요한 양으로, 필요에 따라 상기 열거한 성분들 중 하나 또는 성분들의 조합과 함께 혼입시킨 다음 멸균 여과함으로써 제조할 수 있다. 일반적으로, 분산액은 상기 치료학적 화합물을 기본 분산 매질 및 상기 열거한 것들 중 필요한 다른 성분들을 함유하는 멸균 담체에 혼입시킴으로써 제조한다. 멸균 주사 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 바람직한 제조 방법은 진공 건조 및 동결 건조이며, 이는 활성 성분(즉 치료학적 화합물) + 그의 앞서 멸균 여과된 용액으로부터의 임의의 추가적인 목적하는 성분의 분말을 제공한다.
상기 치료학적 화합물을 예를 들어 불활성 희석제 또는 동화 가능한 식용 담체와 함께 경구로 투여할 수 있다. 상기 치료학적 화합물 및 다른 성분들을 또한 경질 또는 연질 외피 젤라틴 캡슐로 둘러싸거나, 정제로 압착시키거나, 또는 환자의 식사에 직접 혼입시킬 수도 있다. 경구 치료 투여를 위해서, 상기 치료학적 화합물을 부형제와 함께 혼입하고 삼킬 수 있는 정제, 구강 정제, 트로키제, 캡슐, 엘릭서, 현탁액, 시럽, 카세제 등의 형태로 사용할 수 있다. 상기 조성물 및 제제 중의 상기 치료학적 화합물의 백분율은 물론 다양할 수 있다. 상기와 같은 치료학적으로 유용한 조성물 중의 상기 치료학적 화합물의 양은 적합한 투여량이 획득되도록 하는 양이다.
투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 비경구 조성물을 단위 투여형으로 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본 발명에 사용된 바와 같은 단위 투여형은 치료하려는 환자에게 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 지칭하며; 각각의 단위는 목적하는 약학 담체와 함께 목적하는 치료 효과를 생성시키도록 계산된 소정량의 치료학적 화합물을 함유한다. 본 발명의 단위 투여형에 대한 명세서는, (a) 상기 치료학적 화합물의 독특한 특징 및 성취하고자 하는 특정한 치료 효과 및 (b) 환자의 선택된 상태의 치료를 위한 상기와 같은 치료학적 화합물의 배합 기술에 고유한 규제에 의해 좌우되고 직접적으로 이에 따른다.
상기 치료학적 화합물을 또한 피부, 눈 또는 점막에 국소적으로 투여할 수도 있다. 한편으로, 폐로의 국소 전달을 원하는 경우 상기 치료학적 화합물을 건조 분말 또는 에어로졸 제형으로 흡입에 의해 투여할 수 있다.
활성 화합물을 환자의 상태와 관련된 상태를 치료하기에 충분한 치료 유효량으로 투여한다. 예를 들어, 화합물의 효능을, 인간에게서 상기 질병을 치료함에 있어서 효능을 예견할 수 있는 동물 모델 시스템, 예를 들어 실시예 및 도면에 도시된 모델 시스템에서 평가할 수 있다.
본 명세의 화합물 또는 환자에게 투여되는 본 명세의 화합물을 포함하는 조성물의 실제 투여량을 물리적 및 생리학적 인자, 예를 들어 연령, 성별, 체중, 상태의 중증도, 치료하려는 질병의 유형, 선행의 또는 동반하는 치료학적 중재, 환자의 특발증 및 투여 경로에 의해 결정할 수 있다. 이들 인자는 숙련가에 의해 결정될 수 있다. 투여를 맡고 있는 의사는 전형적으로 조성물 중의 활성 성분(들)의 농도 및 개별 환자에 적합한 용량(들)을 결정할 것이다. 임의의 합병증의 경우에 상기 투여량을 주치의가 조정할 수도 있다.
유효량은 전형적으로 하루 또는 수일간(투여 방식의 과정 및 상기 논의된 인자에 따라) 하루에 1 회 이상의 용량 투여로, 약 0.001 ㎎/㎏ 내지 약 1000 ㎎/㎏, 약 0.01 ㎎/㎏ 내지 약 750 ㎎/㎏, 약 100 ㎎/㎏ 내지 약 500 ㎎/㎏, 약 1.0 ㎎/㎏ 내지 약 250 ㎎/㎏, 약 10.0 ㎎/㎏ 내지 약 150 ㎎/㎏으로 다양할 것이다. 다른 적합한 용량 범위는 하루에 1 ㎎ 내지 10000 ㎎, 하루에 100 ㎎ 내지 10000 ㎎, 하루에 500 ㎎ 내지 10000 ㎎, 및 하루에 500 ㎎ 내지 1000 ㎎을 포함한다. 일부 특정한 실시태양에서, 상기 량은 하루에 750 ㎎ 내지 9000 ㎎의 범위로, 하루에 10,000 ㎎ 미만이다.
상기 유효량은 1 ㎎/㎏/일 미만, 500 ㎎/㎏/일 미만, 250 ㎎/㎏/일 미만, 100 ㎎/㎏/일 미만, 50 ㎎/㎏/일 미만, 25 ㎎/㎏/일 미만, 또는 10 ㎎/㎏/일 미만일 수도 있다. 한편으로 상기 유효량은 1 ㎎/㎏/일 내지 200 ㎎/㎏/일의 범위일 수도 있다. 예를 들어 당뇨병 환자의 치료에 관하여, 상기 단위 투여량은 치료하지 않은 환자에 비해 혈당을 40% 이상까지 감소시키는 양일 수 있다. 또 다른 실시태양에서, 상기 단위 투여량은 비-당뇨병 환자의 혈당 수준의 ±10%인 수준까지 혈당을 감소시키는 양이다.
다른 비제한적인 실시예에서, 용량은 또한 투여당 약 1 마이크로그램/㎏/체중, 약 5 마이크로그램/㎏/체중, 약 10 마이크로그램/㎏/체중, 약 50 마이크로그램/㎏/체중, 약 100 마이크로그램/㎏/체중, 약 200 마이크로그램/㎏/체중, 약 350 마이크로그램/㎏/체중, 약 500 마이크로그램/㎏/체중, 약 1 밀리그램/㎏/체중, 약 5 밀리그램/㎏/체중, 약 10 밀리그램/㎏/체중, 약 50 밀리그램/㎏/체중, 약 100 밀리그램/㎏/체중, 약 200 밀리그램/㎏/체중, 약 350 밀리그램/㎏/체중, 약 500 밀리그램/㎏/체중, 내지 약 1000 ㎎/㎏/체중 이상, 및 상기 범위에서 유도할 수 있는 임의의 범위를 또한 포함할 수 있다. 여기에 나열된 숫자들로부터 유도할 수 있는 범위의 비제한적인 예에서, 상술한 숫자들을 근거로 약 5 ㎎/㎏/체중 내지 약 100 ㎎/㎏/체중, 약 5 마이크로그램/㎏/체중 내지 약 500 밀리그램/㎏/체중 등의 범위를 투여할 수 있다.
몇몇 실시태양에서, 본 명세의 약학 조성물은 예를 들어 약 0.1% 이상의 본 명세의 화합물을 포함할 수 있다. 다른 실시태양에서, 본 명세의 화합물은 예를 들어 상기 단위의 중량의 약 2% 내지 약 75%, 또는 약 25% 내지 약 60%, 및 상기 범위 중에서 유도할 수 있는 임의의 범위를 차지할 수 있다.
상기 작용제의 단일 또는 수회 용량을 고려한다. 수회 용량의 전달을 위해 목적하는 시간 간격은 더 이상의 통상적인 실험을 사용하지 않고 당해 분야의 통상적인 숙련가에 의해 결정될 수 있다. 일례로서, 환자에게 대략 12 시간 간격으로 하루에 2 회 용량을 투여할 수 있다. 일부 실시태양에서, 상기 작용제를 하루에 1 회 투여한다.
상기 작용제(들)를 통상적인 스케줄로 투여할 수도 있다. 본 발명에서 사용된 바와 같이 통상적인 스케줄이란 소정의 지정된 기간을 지칭한다. 상기 통상적인 스케줄은 상기 스케줄이 미리결정되는 한, 길이가 동일하거나 상이한 시간의 기간을 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 통상적인 스케줄은 하루에 2 회, 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 매주, 매달, 또는 상기 범위 사이의 임의의 지정된 일수 또는 주수로 투여함을 포함할 수 있다. 한편으로, 상기 소정의 통상적인 스케줄은 첫 번째 주 동안은 매일 2 회, 이어서 수 개월 동안은 매일 1 회 등으로 투여함을 포함할 수 있다. 다른 실시태양에서, 본 발명은 상기 작용제(들)를 경구로 복용할 수 있고 음식 섭취에 따르거나 따르지 않는 타이밍을 제공한다. 따라서, 예를 들어 상기 작용제를, 환자의 식사 여부와 상관 없이, 매일 아침 및/또는 매일 저녁에 복용할 수 있다.
III . 복합 요법
본 발명의 화합물을 단독요법으로서 사용하는 것 이외에, 복합 요법으로도 사용할 수 있다. 유효한 복합 요법은 2 개의 작용제를 모두 포함하는 단일 조성물 또는 약물학적 제형으로, 또는 동시에 투여되는 2 개의 별도의 조성물 또는 제형으로 성취될 수 있으며, 여기에서 하나의 조성물은 본 발명의 화합물을 포함하고, 다른 것은 제 2 작용제(들)를 포함한다. 한편으로, 상기 요법은 수 분에서부터 수 개월에 이르는 간격에 의해 다른 작용제에 선행되거나 후행될 수 있다.
상기와 같은 복합 요법의 비제한적인 예는 본 발명의 하나 이상의 화합물과 또 다른 소염제, 화학요법제, 방사선 요법, 항우울제, 항정신병제, 항경련제, 기분 안정제, 감염방지제, 고혈압치료제, 콜레스테롤-강하제 또는 다른 혈중지질 조절제, 체중 감소 촉진제, 혈전치료제, 심혈관 사건, 예를 들어 심근경색 또는 졸중 (stroke)의 치료 또는 예방제, 당뇨병 치료제, 이식 거부 또는 이식편 대 숙주병 감소제, 관절염 치료제, 진통제, 천식 치료제 또는 다른 호흡기 질병 치료제, 또는 피부 질환의 치료 또는 예방제와의 병용을 포함한다. 본 발명의 화합물을 암에 대한 환자의 면역 반응을 개선시키도록 설계된 작용제, 예를 들어 비제한적으로 암 백신과 병용할 수도 있다. 본 발명에 참고로 인용된 문헌[Lu et al.(2011)]을 참조하시오.
IV . 실시예
하기의 실시예들은 본 발명의 바람직한 실시태양들을 설명하기 위해 포함된다. 당해 분야의 숙련가들은 하기의 실시예에 개시된 기법들이 본 발명의 실시에 잘 작용하도록 본 발명자에 의해 발견된 기법을 나타내며, 따라서 본 발명의 실시에 바람직한 방식들을 구성하는 것으로 간주될 수 있음을 알것이다. 그러나, 당해 분야의 숙련가들은 본 명세에 비추어, 개시되는 특정 실시태양들에 대해 다수의 변화를 수행할 수 있고 본 발명의 진의 및 범위로부터 이탈됨 없이 동일하거나 유사한 결과를 여전히 획득할 수 있음을 알 것이다.
방법 및 물질
산화 질소 생산 및 세포 생육성 .
RAW264.7 마우스 대식세포를 RPMI1640 + 0.5% FBS 중에서 30,000 세포/웰로 96-웰 플레이트에 3 회 도말하고 5% CO2 하에 37 ℃에서 배양하였다. 다음 날, 세포를 DMSO 또는 약물(0 내지 200 nM 용량 범위)로 2 시간 동안 전처리하고, 이어서 재조합 마우스 IFNγ(R&D 시스템스(Systems))로 24 시간 동안 처리하였다. 배지 중 산화 질소 농도를 그리스(Griess) 시약 시스템(프로메가(Promega))을 사용하여 측정하였다. 세포 생육력을 WST-1 시약(로슈(Roche))을 사용하여 측정하였다. IC50 값을 세포 생육력에 대해 표준화한 IFNγ 유도된 산화 질소 생산의 억제를 근거로 측정하였다.
NQO1 - ARE 루시페라제 리포터 분석.
본 분석은 배양된 포유동물 세포에서 Nrf2 전사 인자의 내생적인 활성의 정량적인 평가를 허용한다. NQO1-ARE 루시페라제 리포터 플라스미드로부터의 개똥벌레 루시페라제의 발현을, 인간 NADPH:퀴논 옥시도리덕타제 1(NQO1) 유전자(문헌[Xie et al., 1995])의 프로모터 영역에서 동정된 산화방지 반응 요소(ARE)에 상응하는 특이적인 인헨서 서열에 대한 Nrf2의 결합에 의해 조절한다. 상기 플라스미드는 상기 인간 NQO1-ARE를 포함하는 서열: 5'-CAGTCACAGTGACTCAGCAGAATCTG-3'(서열번호 1)을 HindIII/XhoI 클로닝 부위(젠스크립트 코포레이션(GenScript Corp.)(미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재))를 사용하여 pLuc-MCS 벡터에 삽입함으로써 제작되었다. 상기 분석을 10% FBS 및 100 U/㎖(각각)의 페니실린 및 스트렙토마이신이 보충된 DMEM(인비트로젠) 중에서 유지시킨 HuH7 세포에서 수행한다. 상기 분석을 위해서, 세포를 웰당 17,000 세포로 96-웰 플레이트에 도말한다. 24 시간 후에, 상기 세포를, 리포펙타민 200 형질감염 시약(인비트로젠(Invitrogen))을 사용하여 각각 50 ng의 NQO1-ARE 리포터 플라스미드 및 pRL-TK 플라스미드로 동시 형질감염시킨다. pRL-TK 플라스미드는 레닐라(Renilla) 루시페라제를 구성적으로 발현하며 형질감염 수준의 표준화를 위한 내부 대조군으로서 사용된다. 형질감염 후 30 시간째부터, 상기 세포를 화합물(0 내지 1 μM 범위의 농도)로 18 시간 동안 처리한다. 개똥벌레 및 레닐라 루시페라제 활성을 듀얼-글로(Dual-Glo) 루시페라제 분석[프로메가 코포레이션(Promega Corp., 미국 위스콘신주 매디슨 소재)]에 의해 분석하고, 상기 발광 신호를 L-Max II 광도계(몰레큘라 디바이시즈(Molecular Devices)) 상에서 측정한다. 개똥벌레 루시페라제 활성을 레닐라 활성에 대해 표준화하고, 표준화된 개똥벌레 활성의 비히클 대조군(DMSO)에 대한 유도 배수를 계산한다. 62.5 nM 농도에서의 유도 배수를, Nrf2 전사 활성을 유도하는 화합물들의 상대 효능을 비교하기 위해서 사용한다. 본 발명에 참고로 인용된 문헌[Xie T, Belinsky M, Xu Y, Jaiswal AK. ARE- and TRE-mediated regulation of gene expression. Response to xenobiotics and antioxidants. J Biol Chem. (1995) 270(12):6894-6900]을 참조하시오.
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합성 AIM 유도체들의 합성 및 특성
화합물 2: 에틸비닐케톤 (8.0 g, 95 mmol)을 THF (75 mL)에 넣고, 화합물 1 (10 g, 79 mmol) 및 트리에틸아민 (8.37 g, 82 mmol)을 가하였다. 이를 3 시간 동안 가열 환류하여 반응시켰다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 농축하였다. 얻어진 조 (crude) 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10 내지 20 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 2 (13.5 g, 81%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 211 [M+H]+.
화합물 3: 화합물 2 (13.5 g, 64.2 mmol)을 DMF (600 mL)에 넣고, (S)-페닐알라닌 (10.63 g, 64 mmol) 및 D-캠퍼설폰산 (735 g, 32 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 4 일 동안 교반하였다. 이어서 70 ℃ 에서 1 일 동안 가열하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 NaHCO3 포화수용액으로 희석하고 에테르로 추출한 다음 Na2S04로 건조한 후 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 3 (5.51 g, 45%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 193 [M+H]+.
화합물 4: NaBH4 (0.296 g, 7.8 mmol)의 에탄올 (40 mL) 중 용액을, 에탄올 (100 mL) 중 화합물 3 (5.51 g, 28.6 mmol)의 0℃ 용액에 가하였다. 0 ℃ 에서 이를 1 시간 동안 교반하여 반응시키고, 아세트산 (2.9 mL)으로 반응을 종료시켰다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 5 분간 교반하고, 이어서 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 20 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 4 (5.0 g, 90%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 195 [M+H]+.
화합물 5: 화합물 4 (3.05 g, 15.6 mmol)을 CH2C12에 넣고, 이어서 i-Pr2EtN 및 MOMCl을 가하였다. 3 일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 희석하고, 0.1 N HCl 및 브라인으로 세척하고, 이어서 Na2S04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 5 (3.35 g, 90%)을 엷은 황색 액체 상태로 수득하였다: m/z 239 [M+H]+.
화합물 6: 화합물 5 (3.0 g, 12.6 mmol)와 t-BuOH (965 mg, 13 mmol)의 THF (10 mL) 중 용액을, 리튬 와이어 (리튬 wire) (0.44 g, 64 mmol)의 -78 ℃ 액화암모니아 (50 mL) 중 용액에 가하였다. 2시간 동안 반응혼합물을 환류 교반하고, -78 ℃ 로 온도를 내렸다. 요오드화메틸 (9.5 g, 67 mmol)의 THF (25 mL) 중 용액을 가하였다. -78 ℃에서 2시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 물 (2 mL) 로 반응을 종료시켰다. 이어서 서서히 실온으로 온도를 올렸다. 반응혼합물을 에테르로 추출하고, 이어서 물 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 15 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 6 (0.90 g, 28%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 255 [M+H]+.
화합물 7: 사이클로헥산 중의 화합물 6 (0.90 g, 3.5 mmol), 에틸렌글리콜, 및 캠퍼설폰산의 혼합물을, 물의 공비적 제거 (azeotropic removal)와 함께, 16시간 동안 가열 환류하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 포화 NaHC03 로 세척하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 20 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 7 (0.59 g, 66%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 255 [M+H]+.
화합물 8: 화합물 7 (190 mg, 0.75 mmol)을 CH2Cl2에 넣고 피리디늄 다이크로메이트 및 MgS04을 가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고 EtOAc/CH2Cl2 (1/3)로 용출하여, 농축하여 화합물 8 (180 mg, 95%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 253 [M+H]+.
화합물 9: 화합물 8 (120 mg, 0.48 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 0 ℃ 로 온도를 내리고, 이어서 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하고, 반응혼합물의 온도를 실온으로 올렸다. 반응혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. t-BuOMe 및 1 N HCl로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 물로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 9 (120 mg, 90%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 281 [M+H]+.
화합물 10 및 11 : 화합물 9 (120 mg, 0.43 mmol) 및 메틸하이드라진 (35 mg, 0.7 mmol)의 에탄올 (15 mL)중의 혼합물을 60 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사물을 짧은 실리카 플러그 (plug)로 여과하고 (EtOAc로 용출), 농축하여 화합물 10 및 11 (125 mg, 정량적)을 오일형태로 수득하였다. m/z 291 [M+H]+.
화합물 12 및 13: 화합물 10 및 11 (0.40 g, 1.4 mmol)의 혼합물을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 3시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 포화 NaHC03 수용액으로 반응을 종료시킨 후 에테르로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 15% EtOAc 용액) 하여 화합물 12 및 13 (0.20 g, 59%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 247 [M+H]+.
화합물 14 및 15: 화합물 12 및 13 (0.20 g, 0.81 mmol)의 THF 용액을 LDA (2.0 당량)의 -78 ℃ THF 용액에 가하였다. -78 ℃ 에서 45 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 TsCN (1.5 당량)의 THF 용액을 가하였다. -78 ℃ 에서 추가로 45 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 1 N HCl (aq) 으로 반응을 종료시킨 후 실온으로 온도를 올렸다. 반응혼합물을 에테르로 추출하고, 이어서 물 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 25 % EtOAc 용액) 하여 화합물 14 및 15 (170 mg, 77%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 272 [M+H]+.
화합물 TX63341 및 TX63342: 화합물 14 및 15 (170 mg, 0.63 mmol)의 혼합물을 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약 2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 반응혼합물을 이어서 55 ℃에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 t-BuOMe로 희석하고, 물로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63342 (39 mg, 23%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, d 6 -DMSO) δ 8.44 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.69 (dd, 1H, J = 5.6, 15.7 Hz), 2.46 (ddd, 1H, J = 6.9, 11.6, 15.9 Hz), 2.16 (d, 1H, J = 11.6 Hz), 1.82 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); m/z 270 [M+H]+, 및 TX63341 (15 mg, 9%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.30 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 4.8, 15.7 Hz), 2.53 (ddd, 1H, J = 6.0, 12.3, 15.6 Hz), 2.27 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 1.95 (dd, 1H, J = 5.6, 13.3 Hz), 1.77 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.31 (s, 6H); m/z 270 [M+H]+.
화합물 17: 화합물 16 (10 g, 56 mmol)을 에탄올에 넣고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. NaBH4의 에탄올 용액을 가하였다. 0 ℃에서 2시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 아세트산으로 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사물을 짧은 실리카 플러그 (plug)로 여과하고 (헥산 중의 30% EtOAc 용액으로 용출), 농축하여 화합물 17 (9.3 g, 92%)을 점성의 액체로 수득하였다.
화합물 18: 화합물 17 (9.3 g, 52 mmol)을 CH2Cl2에 넣고, 이어서 i-Pr2EtN 및 MOMCl을 가하였다. 3 일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 희석하고, 0.1 N HCl 및 브라인으로 세척하고, 이어서 Na2S04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 30% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 18 (9.0 g, 78%)을 엷은 황색 액체 상태로 수득하였다: m/z 225 [M+H]+.
화합물 19: 화합물 18 (3.5 g, 16 mmol) t-BuOH에 넣고, KOt-Bu의 THF 용액을 가하였다. 10 분 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 온도를 10 ℃로 내리고, 이오도메탄 (iodomethane)을 가하였다. 30 분에 걸쳐 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 물로 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 Na2S04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 19 (1.7 g, 43%)을 엷은 황색 액체 상태로 수득하였다: m/z 253 [M+H]+.
화합물 20: 화합물 19 (4.31 g, 17.1 mmol), 에틸렌글리콜 및 p-톨루엔설폰산 수화물의 톨루엔 중의 혼합물을 물의 공비적 제거 (azeotropic removal)와 함께 하룻밤 가열 환류하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHC03 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 20 (4.26 g, 99%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 253 [M+H]+.
화합물 21 : 화합물 20 (4.65 g, 18.4 mmol)을 N2하 EtOH에 넣고, 10% Pd/C 을 가하였다. 플라스크를 H2로 엄격하게 퍼지(purge)시키고, 4일 동안 실온에서 교반하였으며, 처음 3일 후 10% Pd/C 을 추가로 더 가하였다. 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고 메탄올로 용출하고, 농축하여 화합물 21 (4.63 g, 99%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 255 [M+H]+.
화합물 22: 화합물 21 (58 mg, 0.28 mmol)을 CH2Cl2 에 넣고, 이어서 i-Pr2EtN 및 MOMCl을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반한 후 농축하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHC03 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 22 (72 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 255 [M+H]+.
화합물 23: 화합물 22 (70 mg, 0.28 mmol)의 THF 용액을 LDA (3.5 당량)의 -78 ℃ THF 용액에 가하였다. -78 ℃에서 30 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 TsCN (1.3 당량)의 THF 용액을 가하였다. -78 ℃ 에서 추가로 30 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 포화 NH4Cl 수용액으로 반응을 종료시킨 후 실온으로 온도를 올렸다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 15% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 23 (51 mg, 66%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다, m/z 280 [M+H]+.
화합물 TX63364: 화합물 23 (48 mg, 0.17 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.6 당량)을 가하고, 0 ℃에서 3시간 동안 반응혼합물을 교반하였는데 처음 2시간 후 l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.1 당량)를 더 가하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 60 ℃에서 4시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 희석하고, 1N HCl (aq), 포화 NaHC03 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 15% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63364 (41 mg, 86%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.94 (s, 1H),4.78 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 4.65 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 3.44 (s, 3H), 3.28 (dd, 1H, J = 4.3, 11.4 Hz), 2.00 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.59 (m, 3H), 1.49 (m, 1H), 1.36 (m, 1H), 1.24 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); m/z 278 [M+H]+.
화합물 TX63363: 화합물 TX63364 (28 mg, 0.10 mmol)을 THF에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 2일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 포화 NaHC03 수용액으로 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63363 (16 mg, 68%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 3.45 (dd, 1H, J = 4.3, 11.6 Hz), 1.92 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.61 (m, 3H), 1.44 (m, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 234 [M+H]+.
화합물 25: 화합물 21 (2.56 g, 10.1 mmol)을 CH2Cl2에 넣고 피리디늄 다이크로메이트을 10 분에 걸쳐 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 45 ℃로 출발물질이 소모될 때까지 가열하였으며, 박층 크로마토그래피로 확인하였다. 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고 CH2Cl2으로 용출하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 25 (2.36 g, 93%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 253 [M+H]+.
화합물 26: 화합물 25 (2.95 g, 11.7 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 0 ℃ 로 온도를 내리고, 이어서 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하고, 반응혼합물의 온도를 실온으로 올렸다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 물로 희석하고, 아세트산으로 pH를 7로 맞추었다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인 (aq)으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 26 (3.27 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 281 [M+H]+.
화합물 27: 화합물 26 (1.50 g, 5.35 mmol) 및 메틸하이드라진 (0.37 g, 8.03 mmol)의 에탄올 (100 mL) 중의 혼합물을 60 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, EtOAc) 하여 27 (1.50 g, 97%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 291 [M+H]+.
화합물 28: 화합물 27 (1.50 g, 5.17 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 3시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 포화 NaHC03 수용액으로 반응을 종료시킨 후 에테르로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 28 (1.10 g, 86%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 247 [M+H]+.
화합물 29: 화합물 28 (1.10 g, 4.47 mmol)의 THF 용액을, LDA (1.6 당량)의 -78 ℃ THF 용액에 가하였다. -78 ℃ 에서 45 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 TsCN (1.2 당량)의 THF 용액을 가하였다. -78 ℃ 에서 추가로 45 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 1 N HCl (aq) 으로 반응을 종료시킨 후 실온으로 온도를 올렸다. 반응혼합물을 에테르로 추출하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 29 (0.53 g, 44%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 272 [M+H]+.
화합물 TX63432 및 TX63445: 화합물 29 (530 mg, 1.95 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약 1시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 30 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63432 (155 mg, 29%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, d 6 -DMSO) δ 8.44 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.69 (dd, 1H, J = 5.6, 15.7 Hz), 2.46 (ddd, 1H, J = 6.9, 11.6, 15.9 Hz), 2.16 (d, 1H, J = 11.6 Hz), 1.82 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); m/z 270 [M+H]+, 및 TX63445 (28 mg, 4%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.43 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.65 (d, 1H, J = 6.2, 16.1 Hz), 2.44 (ddd,1H, J = 7.0, 11.8, 16.3 Hz), 2.15 (dd, 1H, J = 1.6, 12.1 Hz), 1.98 (dd, 1H, J = 7.1, 13.5 Hz), 1.87 (dq, 1H, J = 6.2, 12.0 Hz), 1.49 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 348, 350 (1 : 1) [M+H]+.
화합물 30: 사이클로헥실하이드라진 염산염 (0.245 g, 1.5 eq)과 트리에틸아민 (165 mg, 1.5eq)의 EtOH (5 mL) 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 화합물 26 (0.3 g, 1.07 mmol)의 EtOH (5 mL) 중 용액을 천천히 가하고, 30 분 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 이어서 60 ℃ 16시간 동안 가열하고, 이어서 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (헥산 중의 5 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 30 (0.14 g, 36%)을 진득진득한(gummy) 고체 상태로 수득하였다; m/z 359 [M+H]+.
화합물 31: 화합물 30 (0.14 g, 0.39 mmol)의 MeOH 용액을 3 N HCl (aq)으로 처리하고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 에테르 및 포화 NaHC03 (aq)으로 반응을 종료시켰다. 유기층을 분리하고, MgS04로 건조하고, 이어서 짧은 컬럼으로 여과 (실리카 겔, 헥산 중의 15 % EtOAc 용액)하여 화합물 31 (0.12 g, 98%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 315 [M+H]+.
화합물 32: 리튬 디이소프로필아마이드 (LDA)의 용액을, 0 ℃에서 디이소프로필아민의 THF 용액에 n-BuLi (1.6 M/ 헥산 중)을 가함으로써 제조한 후, 30 분 동안 교반하고, 이어서 반응혼합물을 -78 ℃로 냉각하였다. 화합물 31 (0.12 g, 0.39 mmol)의 THF 용액을 LDA 용액에 적가하였다. -78 ℃ 에서 45 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 p-톨루엔술포닐 시아나이드의 THF 용액을 가하였다. 45 분 동안 교반한 후에, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 반응혼합물을 에테르로 추출하고, 유기층들을 합하여 물 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 여과하고 증발시켰다. 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5% 내지 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 32 (60 mg, 46%) 을 고체 상태로 수득하였다; m/z 340 [M+H]+.
화합물 TX63444: l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 화합물 32 (60 mg, 0.17 mmol)의 DMF 용액에 0 ℃ 에서 가하였다. 2시간 동안 교반한 후에, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 55 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 실온으로 식힌 후, MTBE을 가하고, 반응혼합물을 물로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 25 % EtOAc 용액) 하여 TX63444 (35 mg, 59%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.04 (tt, 1H, J = 3.6, 11.7 Hz), 2.79 (dd, 1H, J = 5.2, 16.2 Hz), 2.56 (ddd, 1H, J = 6.9, 11.8, 15.9 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.4, 11.5 Hz), 2.15 (m, 2H), 1.88 (m, 4H), 1.76 (m,1H), 1.66 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.44 (m, 2H), 1.29 (s, 3H), 1.28 (m, 1H), 1.24 (s, 3H); m/z 338 [M+H]+.
화합물 33 및 34: tert-부틸하이드라진 염산염 (0.125 g, 1.0 mmol)을 에탄올 (25 mL)에 넣고, 여기에 트리에틸아민 (0.18 mL, 1.3 mmol)을 가하고, 약 30 분 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 화합물 26 (0.203 g, 0.72 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 5시간 동안 가열 환류하고 이어서 하룻밤 실온에서 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트 (50 mL)로 추출하고, 물 (20 mL) 및 브라인 (10 mL)으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액) 하여 두가지의 생성물, 화합물 33 (81 mg, 35%, 덜 극성인) 및 화합물 34 (91 mg, 36%, 더 극성인) 을 고체 상태로 수득하였다. 화합물 33: m/z 333 [M+H]+. 화합물 34: m/z 347 [M+H]+.
화합물 35: 화합물 33 (81 mg, 0.24 mmol)을 메탄올에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반한 후 이어서 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트 (50 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 35 (70 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 289 [M+H]+.
화합물 36: 화합물 35 (70 mg, 0.24 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, KH2P04 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 36 (69 mg, 90%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 317 [M+H]+.
화합물 37: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 36 (69 mg, 0.218 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트에 넣고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 37 (70 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 314 [M+H]+.
화합물 38: 화합물 37 (70 mg, 0.224 mmol)을 3/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하고, 55 ℃에서 5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2P04 (aq)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 38 (41 mg, 59%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 314 [M+H]+.
화합물 TX63450: 화합물 38 (41 mg, 0.13 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 다이브로모다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63450 (23 mg, 56%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.58 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 2.79 (dd, 1H, J = 5.7, 15.7 Hz), 2.56 (ddd, 1H, J = 7.3, 11.5, 15.8 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.6, 11.4 Hz), 1.87 (m, 2H), 1.56 (s, 9H), 1.49 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 312 [M+H]+.
화합물 39: 화합물 34 (91 mg, 0.26 mmol)을 메탄올에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (50 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 39 (68 mg, 86%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 303 [M+H]+.
화합물 40: 화합물 39 (68 mg, 0.22 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, KH2P04 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 40 (62 mg, 83%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 331 [M+H]+.
화합물 41 : 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 40 (62 mg, 0.19 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트에 넣고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 41 (66 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 328 [M+H]+.
화합물 42: 화합물 41을 3/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하고, 55 ℃에서 5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 42 (49 mg, 80%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 328 [M+H]+.
화합물 TX63451 : 화합물 42를 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약 30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63451 (33 mg, 68%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.39 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 3.28 (dd, 1H, J = 3.8, 16.6 Hz), 3.06 (dd, 1H, J= 12.2, 16.5 Hz), 2.58 (dd, 1H, J = 3.7, 12.1 Hz), 1.71 (s, 9H), 1.44 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.32 (s, 3H); m/z 326 [M+H]+.
화합물 43: 화합물 26 (300 mg, 1.07 mmol) 및 (2,2,2-트리플루오로에틸)하이드라진 (70% pure, 270 mg, 2.4 mmol)의 에탄올 (25 mL) 중의 혼합물을 60 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 45 % EtOAc 용액) 하여 43 (270 mg, 70%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 359 [M+H]+.
화합물 44: 화합물 43 (0.27 g, 0.75 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 44 (0.24 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 315 [M+H]+.
화합물 45: 화합물 44 (0.24 g, 0.75 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, KH2P04 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 45 (0.25 g, 96%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 343 [M+H]+.
화합물 46: 하이드록실아민 염산염 및 45 (0.25 g, 0.73 mmol) 에탄올 중의 혼합물을 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, 에틸아세테이트로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 46 (0.23 g, 93%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 340 [M+H]+.
화합물 47: 화합물 46 (0.23 g, 0.68 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ 용매로서 MeOH 중)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 47 (0.12 g, 52%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 340 [M+H]+.
화합물 TX63454: 화합물 47 (0.12 g, 0.35 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약 2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 30 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63454 (65 mg, 54%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.47 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.65 (m, 2H), 2.84 (dd, 1H, J = 5.7, 16.2 Hz), 2.59 (ddd, 1H, J= 7.0, 11.9, 16.1 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.1, 11.9 Hz), 1.90 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 338 [M+H]+.
화합물 48 및 49: 에탄올을 화합물 26 (204 mg, 0.73 mmol), 페닐하이드라진 염산염 (132 mg, 0.92 mmol) 및 소디움 아세테이트 삼수화물 (140 mg, 1.08 mmol)의 혼합물에 넣고 점진적으로 65 ℃로 가열하였다. 이어서 70 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액) 하여 48 (91 mg, 35%, 덜 극성인) 및 49 (135 mg, 51%, 더 극성인) 을 고체 상태로 수득하였다. 화합물 48: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 7.53 (s, 1H), 7.41 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 7.22 (t, 1H, J = 7.5 Hz), 3.98 (m, 4H), 2.80 (dd, 1H, J = 5.7, 15.9 Hz), 2.59 (ddd, 1H, J = 6.5, 11.6, 15.8 Hz), 2.36 (m, 1H), 1.99 (m, 2H), 1.77 (m, 4H), 1.37 (s, 3H), 1.09 (3H), 0.98 (s, 3H); m/z 353 [M+H]+. 화합물 49: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 7.56 (m, 4H), 7.46 (m, 1H), 3.93 (m, 4H), 2.98 (dd, 1H, J = 12.2, 16.7 Hz), 2.86 (dd, 1H, J = 4.0, 16.7 Hz), 2.32 (dd, 1H, J = 4.0, 12.2 Hz), 2.01 (m, 1H), 1.91 (m, 2H), 1.68 (m, 1H), 1.28 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 0.90 (s, 3H); m/z 367 [M+H]+.
화합물 50: 화합물 48 (86 mg, 0.24 mmol)을 메탄올에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (50 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 50 (69 mg, 92%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 309 [M+H]+.
화합물 51 : 화합물 50 (69 mg, 0.22 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, KH2P04 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 51 (73 mg, 97%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 337 [M+H]+.
화합물 52: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 51 (73 mg, 0.22 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트에 넣고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 52 (66 mg, 91%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 334 [M+H]+.
화합물 53: 화합물 52 (66 mg, 0.20 mmol)을 3/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하고, 55 ℃에서 5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 53 (53 mg, 80%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 334 [M+H]+.
화합물 TX63455: 화합물 53 (53 mg, 0.16 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약 30 분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사물을 반복된 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63455 (1.8 mg, 3%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.63 (s, 1H), 7.66 (m, 3H), 7.48 (m, 3H), 2.92 (dd, 1H, J = 4.8, 15.8 Hz), 2.67 (ddd, 1H, J = 6.5, 11.8, 15.8 Hz), 2.26 (dd, 1H, J = 2.4, 11.4 Hz), 1.97 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.28 (s, 3H); m/z 332 [M+H]+.
화합물 54: 화합물 49 (0.120 g, 0.33 mmol)을 메탄올 (20 mL)에 넣고, 1N HCl (aq, 2 mL)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트 (50 mL)에 넣고, 포화 NaHC03 (aq, 15 mL)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 54 (97.3 mg, 92%) 을 고체 상태로 수득하였다.
화합물 55: 화합물 54 (0.0973 g, 0.30 mmol)을 에틸포메이트(5 mL)에 넣고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중, 0.4 mL, 7.1 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, KH2P04 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 55 (100.7 mg, 95%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 351 [M+H]+.
화합물 56: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액 (aq, 3.2 mL, 0.32 mL)을 화합물 55 (100.7 mg, 0.29 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물 (2 mL)을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트에 넣고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 56 (75.4 mg, 76%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 348 [M+H]+.
화합물 57: 화합물 56 (75.4 mg, 0.22 mmol)을 3/1의 메탄올/THF 혼합물 (6 mL)에 녹이고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중, 0.24 mL, 4.3 mL)을 가하고, 55 ℃에서 약 5.5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트 (50 mL)로 추출하고, 브라인으로 세척하고 (10 mL), 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 57 (59.5 mg, 79%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 348 [M+H]+.
화합물 TX63456: 화합물 57 (59.5 mg, 0.17 mmol) 무수 DMF (1 mL)에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 다이브로모다이메틸히단토인 (31 mg, 0.109 mmol)을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘 (0.13 mL, 1.6 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 에틸아세테이트 (60 mL)로 추출하고, 브라인 (10 mL)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액) 하여 고체 (29.9 mg)를 수득하였다. 정제한 잔사를 다시 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액) 로 정제하여 고체를 수득하였다. 상기 고체를 Et20/EtOAc으로 분쇄하여 (triturated), 화합물 TX63456 (14.3 mg, 24%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.48-7.68 (m, 5H), 3.18 (dd, 1H, J= 8.0, 16.0 Hz), 3.02 (dd, 1H, J= 4.0, 16.0 Hz), 2.62 (dd, 1H, J= 4.0, 12.0 Hz), 1.56 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); m/z 346 [M+H]+.
화합물 58: 화합물 26 (1.200 g, 4.28 mmol)을 에탄올 (100 mL)에 넣고, 무수 하이드라진 (0.36 mL, 11.5 mmol)의 에탄올 (5 mL) 중 용액을 가하고, 2 시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 60 ℃에서 1시간 동안. 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에테르/에틸아세테이트으로 분쇄하여 (triturated), 화합물 58 (0.965 g, 82%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 277 [M+H]+.
화합물 59: 화합물 58 (280 mg, 1.01 mmol)을 메탄올에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트로 추출하고, 포화 NaHC03 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 59 (245.2 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 233 [M+H]+.
화합물 60: 화합물 59 (239 mg, 1.03 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, KH2P04 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 63 (264 mg, 99%)을 얻었다: m/z 261 [M+H]+.
화합물 61 : 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 60 (260 mg, 1.00 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트에 넣고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 61 (248.9 mg, 97%)을 얻었다: m/z 258 [M+H]+.
화합물 62: 화합물 61 (245 mg, 0.95 mmol)을 3/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/ MeOH 중)을 가하고, 55 ℃에서 5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 62 (204 mg, 83%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 258 [M+H]+.
화합물 TX63467: 화합물 62 (51 mg, 0.198 mmol) 및 DDQ (59 mg, 0.26 mmol)의 혼합물을 벤젠 (11 mL)에 넣고, 4.5시간 동안 반응혼합물을 환류 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피로 3번 (실리카 겔, 1.5% MeOH/CH2C12, 2% MeOH/CH2C12 및 EtOAc, 각각) 하여 고체를 수득하였다. 정제한 잔사를 에틸아세테이트 (40 mL)에 넣고, 포화 NaHC03 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 TX63467 (22 mg, 43%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 12.59 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 2.68-2.77 (m, 1H), 2.45-2.58 (m, 1H), 2.15-2.22 (m, 1H), 1.78-1.92 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); m/z 256 [M+H]+.
화합물 TX63462: TX63467 (12 mg, 0.047 mmol)을 포화 NaHC03 (aq, 0.5 mL) 및 THF (1.5 mL)의 혼합물에 넣고, 반응혼합물의 온도를 0 ℃로 내렸다. 메틸 클로로포메이트 (1 방울, 과량)을 가하고, 40 분 동안 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 메틸 클로로포메이트 (2 방울, 과량)을 더 가하고, 20 분 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (40 mL)로 추출하고, NaCl (aq, 10 mL)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 TX63462 (2.3 mg, 16%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.57 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 2.90 (dd, 1H, J = 8.0, 16.0 Hz), 2.58-2.68 (m, 1H), 2.19 (dd, 1H, J = 4.0, 12.0 Hz), 1.85-2.02 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 314 [M+H]+.
화합물 TX63463: TX63467 (12 mg, 0.047 mmol)을 포화 NaHC03 (aq, 0.5 mL) 및 THF (1.5 mL)의 혼합물에 넣고, 반응혼합물의 온도를 0 ℃로 내렸다. 아세틸 클로라이드 (1 방울, 과량)을 가하고, 40 분 동안 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 아세틸 클로라이드 (2 방울, 과량)을 더 가하고, 추가로 20 분 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (40 mL)로 추출하고, NaCl (aq, 10 mL)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 TX63463 (3.3 mg, 24%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.49 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 2.90 (dd, 1H, J = 4.0, 12.0 Hz), 2.69 (s, 3H), 2.57-2.68 (m, 1H), 2.19 (dd, 1H, J = 4.0, 12.0 Hz), 1.85-2.02 (m, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 298 [M+H]+.
화합물 63: 화합물 26 (300 mg, 1.07 mmol) 및 2-하이드라지닐에탄올 (130 mg, 1.7 mmol)의 에탄올 (5 mL) 중의 혼합물을, 60 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 1 % MeOH/EtOAc) 하여 화합물 63 (320 mg, 93%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 321 [M+H]+.
화합물 64: 화합물 63 (0.32 g, 1.0 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 64 (0.17 g, 62%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 277 [M+H]+.
화합물 65: 화합물 64 (0.17 g, 0.62 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2P04 (aq)로 희석하고, 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 65 (0.17 g, 91%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 305 [M+H]+.
화합물 66: 하이드록실아민 염산염 및 65 (0.17 g, 0.56 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 66 (0.18 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 302 [M+H]+.
화합물 67: 화합물 66 (0.18 g, 0.56 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 67 (0.18 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 302 [M+H]+.
화합물 TX63464: 화합물 67 (0.18 g, 0.56 mmol) 을 다이옥산에 녹였다. 피리디늄 브로미드 퍼브로마이드을 가하고, 실온에서 2시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 피리딘을 가하고, 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 0 to 2 % MeOH/EtOAc)로 정제하여 화합물 TX63464 (10 mg, 5%) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.21 (m, 2H), 4.01 (d, 1H, J = 5.1 Hz), 4.00 (d, 1H, J = 4.6 Hz), 2.81 (dd, 1H, J = 5.5, 16.1 Hz), 2.57 (ddd, 1H, J = 7.0, 11.8, 16.0 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.1, 11.7 Hz), 1.91 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 300 [M+H]+.
화합물 68: 화합물 27 (2.6 g, 9.0 mmol)을 CH2Cl2에 넣고, l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (1.7 g, 5.9 mmol)을 가하였다. 3시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 1N Na2C03로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 68 (1.8 g, 54%)을 진득진득한(gummy) 고체 상태로 수득하였다, m/z 369, 371 (1 : 1) [M+H]+.
화합물 69: 화합물 68 (1.3 g, 3.5 mmol), 페닐보론산 (645 mg, 5.3 mmol), Ph3P (190 mg, 0.73 mmol), K3P04 (2.24 g, 10.6 mmol) 및 DME (15 mL)의 혼합물에, 10 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(OAc)2 (80 mg, 0.35 mmol)을 가하고, 10 분 동안 계속 N2를 살포하였다. 반응혼합물을 85 ℃에서 9시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 30 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 69 (0.69 g, 53%) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다, m/z 367 [M+H]+.
화합물 70: 화합물 69 (0.69 g, 1.9 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 70 (0.64 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 323 [M+H]+.
화합물 71: 화합물 70 (0.64 g, 1.9 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 71 (0.61 g, 92%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 351 [M+H]+.
화합물 72: 하이드록실아민 염산염 및 71 (0.61 g, 1.7 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, 에틸아세테이트로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 72 (0.58 g, 96%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 348 [M+H]+.
화합물 73: 화합물 72 (0.58 g, 1.7 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 73 (435 mg, 75%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 348 [M+H]+.
화합물 TX63465: 화합물 73 (435 mg, 1.25 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약 2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 30 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63465 (0.3 g, 69%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 8.51 (s, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.44 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 2.55 (m 2H), 2.23 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 1.89 (dd, 1H, J = 5.0, 12.6 Hz), 1.82 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 346 [M+H]+.
화합물 74a-74l (반응식 16).
화합물 R 아릴 보론산 (1.5 eq ) Pd(OAc) 2 DME (mL) 수율 (%)
74a 3-Cl 1.1 mmol 0.1 eq. 3.1 78
74b 4-Cl 1.1 mmol 0.1 eq. 3.1 68
74c 2-Cl 1.1 mmol 0.1 eq. 3.1 78
74d 3-F 0.57 mmol 0.3 eq 6 74
74e 4-F 0.58 mmol 0.3 eq 6 70
74f 2-Me 0.8 mmol 0.1 eq. 2.3 64
74g 2-OMe 1.1 mmol 0.1 eq. 3.1 69
74h 3-Me 0.60 mmol 0.3 eq 6 67
74i 3-OMe 0.61 mmol 0.3 eq 6 58
74j 4-Me 0.73 mmol 0.1 eq. 2.1 70
74k 4-OMe 1.1 mmol 0.1 eq. 3.1 48
74l 2-F 0.93 mmol 0.1 eq. 2.6 71
일반 제조법 A: 화합물 68 (1.0 eq.)을 DME (사용량 참조: 표 2)에 넣고, PhB(OH)2 (사용량 참조: 표 2), Ph3P (0.2 eq.) 및 K3P04 (3.0 eq.)을 가하고, 반응혼합물에 10 분 동안 N2 가스 기포를 불어넣었다. Pd(OAc)2 (사용량 참조: 표 2)을 가하고, 반응혼합물에 10 분 동안 N2 가스 기포를 불어넣었다. 이어서 85℃에서 9시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 여과하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 74a: 0.23g, 78%: m/z 401, 403 (3: 1) [M+H]+.
화합물 74b: 0.2g, 68%: m/z 401, 403 (3: 1) [M+H]+.
화합물 74c: 0.23g, 78%: m/z 401, 403 (3: 1) [M+H]+.
화합물 74d: 0.1051g, 74%: m/z 385 [M+H]+.
화합물 74e: 0.0992g, 70%: m/z 385 [M+H]+.
화합물 74f: 0.13g, 64%: m/z 381 [M+H]+.
화합물 74g: 0.2g, 69%: m/z 397 [M+H]+.
화합물 74h: 0.097g, 67%: m/z 381 [M+H]+.
화합물 74i: 0.0872g, 58%: m/z 397 [M+H]+.
화합물 74j : 0.13g, 70%: m/z 381 [M+H]+.
화합물 74k: 0.14g, 48%: m/z 397 [M+H]+.
화합물 741: 0.17g, 71%: m/z 385 [M+H]+.
화합물 75a-75l (반응식 16).
화합물 R 74 ( mmol )
(출발물질들) 		HCl MeOH ( mL ) 수율 (%)
75a 3-Cl 0.57 3N, 0.9 mL 1.5 정량적
75b 4-Cl 0.5 3N, 0.4 mL 1.35 정량적
75c 2-Cl 0.50 3N, 0.4 mL 1.35 정량적
75d 3-F 0.27 1N, 1.6 mL 16.2 87
75e 4-F 0.26 1N, 1.6 mL 15.6 83
75f 2-Me 0.34 3N, 0.27 mL 0.92 정량적
75g 2-OMe 0.50 3N, 0.4 mL 1.35 정량적
75h 3-Me 0.255 1N, 1.5 mL 15.3 96
75i 3-OMe 0.22 1N, 1.3 mL 13.2 92
75j 4-Me 0.34 3N, 0.27 mL 0.92 정량적
75k 4-OMe 0.35 3N, 0.28 mL 0.95 97
75l 2-F 0.44 3N, 0.35 mL 1.2 정량적
일반 제조법 B: 화합물 74 (사용량 참조: 표 3)을 메탄올 (사용량 참조: 표 3)에 넣고, HCl (aq, 사용량 참조: 표 3)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트로 추출하고, 포화 NaHC03 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 75a: 210 mg, 정량적: m/z 357, 359 (3: 1) [M+H]+.
화합물 75b: 180 mg, 정량적: m/z 357, 359 (3: 1) [M+H]+.
화합물 75c: 180 mg, 정량적: m/z 357, 359 (3: 1) [M+H]+.
화합물 75d: 80.3 mg, 87%: m/z 341 [M+H]+.
화합물 75e: 79.7 mg, 83%: m/z 341 [M+H]+.
화합물 75f: 120 mg, 정량적: m/z 337 [M+H]+.
화합물 75g: 180 mg, 정량적: m/z 353 [M+H]+.
화합물 75h: 82.4 mg, 96%: m/z 337 [M+H]+.
화합물 75i: 71.5 mg, 92%: m/z 353 [M+H]+.
화합물 75j : 120 mg, 정량적: m/z 337 [M+H]+.
화합물 75k: 120 mg, 97%: m/z 353 [M+H]+.
화합물 751: 150 mg, 정량적: m/z 341 [M+H]+.
화합물 76a-76l (반응식 16).
화합물 R 75 ( mmol )
(출발물질들) 		HCO 2 Et ( mL ) MeONa (23% w/w , eq ) 수율 (%)
76a 3-Cl 0.588 4.7 10 97
76b 4-Cl 0.5 4 10 94
76c 2-Cl 0.5 4 10 94
76d 3-F 0.236 3.9 23.7 정량적
76e 4-F 0.234 3.9 23.7 91
76f 2-Me 0.356 2.8 10 96
76g 2-OMe 0.51 4.1 10 93
76h 3-Me 0.245 4.1 23.7 정량적
76i 3-OMe 0.20 3.3 23.7 정량적
76j 4-Me 0.356 2.8 10 92
76k 4-OMe 0.34 2.7 10 97
76l 2-F 0.44 3.5 10 92
일반 제조법 C: 화합물 75 (사용량 참조: 표 4)을 에틸포메이트에 넣고 (사용량 참조: 표 4), 및 30% NaOMe/메탄올 (사용량 참조: 표 4)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, KH2PO4 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 76a: 220 mg, 97%: m/z 385, 387 (3: 1) [M+H]+.
화합물 76b: 180 mg, 94%: m/z 385, 387 (3: 1) [M+H]+.
화합물 76c: 180 mg, 94%: m/z 385, 387 (3: 1) [M+H]+.
화합물 76d: 93 mg, 정량적: m/z 369 [M+H]+.
화합물 76e: 77.8 mg, 91%: m/z 369 [M+H]+.
화합물 76f: 125 mg, 96%: m/z 365 [M+H]+.
화합물 76g: 180 mg, 93%: m/z 381 [M+H]+.
화합물 76h: 90.2 mg, 정량적: m/z 365 [M+H]+.
화합물 76i: 75.8 mg, 99.6%: m/z 381 [M+H]+.
화합물 76j : 120 mg, 92%: m/z 365 [M+H]+.
화합물 76k: 125 mg, 97%: m/z 381 [M+H]+.
화합물 761: 150 mg, 92%: m/z 369 [M+H]+.
화합물 77a-77l ( 반응식 16).
화합물 R 76 ( mmol )
(출발물질들) 		NH 2 OH . HCl ( eq ) 수율 (%)
77a 3-Cl 0.57 2 정량적
77b 4-Cl 0.47 2 정량적
77c 2-Cl 0.47 2 정량적
77d 3-F 0.29 1.1 92
77e 4-F 0.21 1.1 94
77f 2-Me 0.34 2 정량적
77g 2-OMe 0.47 2 95
77h 3-Me 0.25 1.1 94
77i 3-OMe 0.20 1.1 87
77j 4-Me 0.33 2 정량적
77k 4-OMe 0.33 2 정량적
77l 2-F 0.41 2 정량적
일반 제조법 D: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액 (aq, 사용량 참조: 표 5)을, 화합물 76 (사용량 참조: 표 5)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트에 넣고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 77a: 220 mg, 정량적: m/z 382, 384 (3: 1) [M+H]+.
화합물 77b: 180 mg, 정량적: m/z 382, 384 (3: 1) [M+H]+.
화합물 77c: 180 mg, 정량적: m/z 382, 384 (3: 1) [M+H]+.
화합물 77d: 84 mg, 92%: m/z 366 [M+H]+.
화합물 77e: 72.1 mg, 94%: m/z 366 [M+H]+.
화합물 77f: 125 mg, 정량적: m/z 362 [M+H] .
화합물 77g: 170 mg, 95%: m/z 378 [M+H]+.
화합물 77h: 84.0 mg, 94%: m/z 362 [M+H]+.
화합물 77i: 66.0 mg, 87%: m/z 378 [M+H]+.
화합물 77j : 125 mg, 정량적: m/z 362 [M+H]+.
화합물 77k: 130 mg, 정량적: m/z 378 [M+H]+.
화합물 771: 150 mg, 정량적: m/z 366 [M+H]+.
화합물 78a-78l ( 반응식 16).
화합물 R 81 ( mmol )
(출발물질들) 		MeONa (30% w/w , eq ) 수율 (%)
78a 3-Cl 0.58 8 정량적
78b 4-Cl 0.47 8 95
78c 2-Cl 0.47 8 정량적
78d 3-F 0.23 20 정량적
78e 4-F 0.20 20 정량적
78f 2-Me 0.35 8 96
78g 2-OMe 0.45 8 정량적
78h 3-Me 0.23 20 86
78i 3-OMe 0.17 20 정량적
78j 4-Me 0.35 8 88
78k 4-OMe 0.34 8 정량적
78l 2-F 0.41 8 정량적
일반 제조법 E: 화합물 77 (사용량 참조: 표 6)을 3/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (사용량 참조: 표 6)을 가하고, 55 ℃에서 5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액) 하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 78a: 220 mg, 정량적: m/z 382, 384 (3: 1) [M+H]+.
화합물 78b: 170 mg, 95%: m/z 382, 384 (3: 1) [M+H]+.
화합물 78c: 180 mg, 정량적: m/z 382, 384 (3: 1) [M+H]+.
화합물 78d: 88 mg, 정량적: m/z 366 [M+H] .
화합물 78e: 93.4 mg, 정량적: m/z 366 [M+H]+.
화합물 78f: 120 mg, 96%: m/z 362 [M+H]+.
화합물 78g: 170 mg, 정량적: m/z 378 [M+H]+.
화합물 78h: 71.5 mg, 86%: m/z 362 [M+H]+.
화합물 78i: 72.0 mg, 정량적: m/z 378 [M+H]+.
화합물 78j : 110 mg, 88%: m/z 362 [M+H]+.
화합물 78k: 130 mg, 정량적: m/z 378 [M+H]+.
화합물 781: 150 mg, 정량적: m/z 366 [M+H]+.
반응식 16의 화합물.
화합물 R 82 ( mmol )
(출발물질들) 		DBDMH ( eq ) 피리딘 ( eq ) 수율 (%)
TX63485 3-Cl 0.58 0.55 10 57
TX63486 4-Cl 0.45 0.55 10 53
TX63491 2-Cl 0.47 0.55 10 67
TX63506 3-F 0.24 0.64 9.4 26
TX63507 4-F 0.20 0.64 9.4 37
TX63508 2-Me 0.33 0.55 10 34
TX63509 2-OMe 0.45 0.55 10 21
TX63512 3-Me 0.20 0.64 9.4 31
TX63513 3-OMe 0.19 0.64 9.4 24
TX63514 4-Me 0.30 0.55 10 55
TX63515 4-OMe 0.34 0.55 10 39
TX63519 2-F 0.41 0.55 10 50
일반 제조법 F: 화합물 78 (사용량 참조: 표 7) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 다이브로모 다이메틸히단토인 (사용량 참조: 표 7)을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약 30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘 (사용량 참조: 표 7)을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액) 하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
TX63485: 125 mg, 57%: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.20-7.48 (m, 4H), 3.81 (s, 3H), 2.68 (dd, 1H, J= 12.0, 4.0 Hz), 2.51-2.61 (m, 1H), 2.24 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 1.82-1.99 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 380, 382 (3: 1) [M+H]+.
TX63486: 89 mg, 53%: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.48 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.28 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 3.80 (s, 3H), 2.66 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.50-2.60 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 12.0, 2.0 Hz), 1.82-1.99 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 380, 382 (3: 1) [M+H]+.
TX63491 : 120 mg, 67%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.56 (s, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.45-7.25 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 2.60-2.39 (m, 2H), 2.29-2.20 (m, 1H), 1.91-1.85 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.31 (s, 3H); m/z 380, 382 (3: 1) [M+H]+.
TX63506: 22.5 mg, 26%: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.45- 7.52 (m, 1H), 7.10-7.18 (m, 2H), 7.04-7.08 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.69 (dd, 1H, J =12.0, 4.0 Hz), 2.52-2.62 (m, 1H), 2.24 (d, 1H, J= 8.0 Hz), 1.83-1.98 (m, 2H), 1.55 (s,3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 364 [M+H]+.
TX63507: 26.9 mg, 37%: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.16-7.28 (m, 2H), 7.28-7.30 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.66 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.49- 2.58 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 8.0, 2.0 Hz), 1.82-1.97 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s,3H), 1.26 (s, 3H); m/z 364 [M+H]+.
TX63508: 40 mg, 34%: 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.52 (s, 1H), 7.16-7.45 (m, 4H), 7.06 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 3.82 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 2.45-2.60 (m, 2H), 2.22 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 1.75-1.93 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 360 [M+H]+.
TX63509: 35 mg, 21%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.57 (s, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.23-7.18 (m, 1H), 7.08-7.03 (m, 2H), 3.85 (br s, 3H), 3.69 (s, 3H), 2.58-2.52 (m, 1H), 2.27 (m, 1H), 1.89 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 376 [M+H]+.
TX63512: 22.2 mg, 31%: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.38 (t, 1H, J = 4.0 Hz), 7.10-7.31 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 2.68 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.53-2.62 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.25 (dd, 1H, J = 8.0, 2.0 Hz), 1.82-1.96 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 360 [M+H]+.
TX63513: 17.1 mg, 24%: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.43 (t, 1H, J= 12.0 Hz), 6.85-7.01 (m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 2.70 (dd, 1H, J= 12.0, 4.0 Hz), 2.52-2.62 (m, 1H), 2.25 (dd, 1H, J = 12.0, 2.0 Hz), 1.82-1.98 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 376 [M+H]+.
TX63514: 60 mg, 55%: 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.50 (s, 1H), 7.29-7.38 (m, 4H), 3.75 (s, 3H), 2.47-2.62 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.23 (d, 1H, J = 12.0 Hz), 1.76-1.93 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 381 [M+H]+.
TX63515: 50 mg, 39%: 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.50 (s, 1H), 7.38 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.06 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 3.82 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 2.45-2.60 (m, 2H), 2.22 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 1.75-1.93 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 376 [M+H]+.
TX63519: 75 mg, 50%: 1H NMR (500 MHz, d 6 -DMSO) δ 8.51 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.43-7.34 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 2.45 (m, 1H), 2.23 (m, 1H), 1.84 (m, 2H), 1.47 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 364 [M+H]+.
화합물 79a: 화합물 68 (270 mg, 0.73 mmol), 3-피리디닐보론산 (1.5 당량), Ph3P (0.2 당량), K3PO4 (3.0 당량) 및 DME의 혼합물을, 10 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(OAc)2 (0.1 당량)을 가하고, 10 분 동안 계속 N2를 살포하였다. 반응혼합물을 85 ℃에서 9시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 30 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 79a (70 mg, 26%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 368 [M+H]+.
화합물 79b: 화합물 68 (290 mg, 0.79 mmol)을, 화합물 79a의 제조방법과 동일한 공정으로 4-피리디닐보론산과 반응시켜, 화합물 79b (140 mg, 49%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 368 [M+H]+.
화합물 80a: 화합물 79a (70 mg, 0.19 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 80a (60 mg, 97%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 324 [M+H]+.
화합물 80b: 화합물 79b (140 mg, 0.38 mmol)을 가지고 화합물 80a의 제조방법과 동일한 공정을 수행하여 화합물 80b (130 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 324 [M+H]+.
화합물 81a: 화합물 80a (60 mg, 0.19 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, 에틸아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 81a (70 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 352 [M+H]+.
화합물 81b: 화합물 80b (130 mg, 0.38 mmol)을 가지고 화합물 81a의 제조방법과 동일한 공정을 수행하여 화합물 81b (135 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 352 [M+H]+.
화합물 82a: 하이드록실아민 염산염 및 화합물 81a (70 mg, 0.19 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, 에틸아세테이트로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 82a (70 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 349 [M+H]+.
화합물 82b: 화합물 81b (135 mg, 0.38 mmol)을 가지고 화합물 82a의 제조방법과 동일한 공정을 수행하여 화합물 82b (135 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 349 [M+H]+.
화합물 83a: 화합물 82a (70 mg, 0.19 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 83a (70 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 349 [M+H]+.
화합물 83b: 화합물 82b (135 mg, 0.38 mmol)을 가지고 화합물 83a의 제조방법과 동일한 공정을 수행하여 화합물 83b (135 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 349 [M+H]+.
화합물 TX63503: 화합물 83a (65 mg, 0.19 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. Br2을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약 2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 0.5% Et3N을 함유하는 헥산 중의 5 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63503 (20 mg, 31%) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.69 (dd, 1H, J = 1.5, 4.8 Hz), 8.64 (d, 1H, J = 1.4 Hz), 8.53 (s, 1H), 7.69 (td, 1H, J = 1.8, 7.9 Hz), 7.46 (dd, 1H, J = 4.9, 7.3 Hz), 3.83 (s, 3H), 2.70 (dd, 1H, J = 4.8, 16.0 Hz), 2.58 (ddd, 1H, J = 6.8, 11.6, 15.9 Hz), 2.25 (dd, 1H, J = 1.9, 11.9 Hz), 1.92 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 347 [M+H]+.
화합물 TX63505: 화합물 83b (135 mg, 0.38 mmol)을 가지고 화합물 TX63503의 제조방법과 동일한 공정을 수행하여 화합물 TX63505 (35 mg, 27%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, d 6 -DMSO) δ 8.71 (d, 2H, J = 4.6 Hz), 8.51 (s, 1H), 7.51 (d, 2H, J = 4.5 Hz), 3.85 (s, 3H), 2.63 (m, 2H), 2.24 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.86 (m, 2H), 1.46 (s, 3H), 1.23 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 347 [M+H]+.
화합물 84: 화합물 18 (1.04 g, 4.64 mmol)을 t-BuOH 에 넣어 취한 후 이것을 KOt-Bu 의 t-BuOH 용액에 가하였다. 실온에서 5 분 동안 교반하여 반응시키고, 1 ,4-다이브로모부탄을 가하였다. 실온에서 80분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 45 ℃로 온도를 올려 출발물질이 소모될 때까지 가열하였으며, 박층 크로마토그래피로 확인하였다. 반응혼합물을 농축하고, 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 84 (1.006 g, 78%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 279 [M+H]+.
화합물 85: 화합물 84 (1.561 g, 5.61 mmol)을 N2하 EtOH에 넣고, 20% Pd(OH)2 을 가하였다. 파 쉐이커 병 (Parr shaker bottle)에 H2를 격렬하게 불어넣고 54 psi에서 작동시켰다. 플라스크를 하룻밤 실온에서 흔들었다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 6 내지 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 85 (0.493 g, 31%)을 오일형태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.72 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 4.59 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 3.38 (s, 3H), 3.11 (dd, 1H, J = 4.2, 11.6 Hz), 2.76 (dt, 1H, J = 5.9, 15.0 Hz), 2.44 (td, 1H, J = 7.5, 13.0 Hz), 2.32 (td, 1H, J = 3.4, 15.0 Hz), 2.22 (ddd, 1H, J = 2.9, 5.8, 13.8 Hz), 1.87 (m, 2H), 1.79 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.50 (m, 8H), 1.30 (m, 3H), 1.12 (s, 3H).
화합물 86: 화합물 85 (460 mg, 1.64 mmol), 에틸렌글리콜, 및 p-톨루엔설폰산 수화물의 톨루엔 중의 혼합물을, 물의 공비적 제거 (azeotropic removal)와 함께, 하룻밤 가열 환류하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHC03 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 86 (497 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 263 (M-H20+1).
화합물 87: 화합물 86 (497 mg, 1.64 mmol)을 CH2Cl2에 넣고 피리디늄 다이크로메이트를 10 분에 걸쳐 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 45 ℃로 출발물질이 소모될 때까지 가열하였으며, 박층 크로마토그래피로 확인하였다. 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고 CH2Cl2으로 용출하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 87 (359 mg, 73%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 279 [M+H]+.
화합물 88: 화합물 87 (352 mg, 1.26 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 온도를 0 ℃로 내리고, 이어서 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 반응혼합물의 온도를 실온으로 올렸다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 물로 희석하고, 아세트산으로 pH를 7로 맞추었다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 88 (384 mg, 99%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 307 [M+H]+.
화합물 89: 화합물 88 (227 mg, 0.74 mmol) 및 메틸하이드라진 (2.7 당량)의 에탄올 (100 mL) 중의 혼합물을, 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 60 ℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사물을 에테르/EtOAc으로 분쇄하여 (triturated), 화합물 89 (176 mg, 75%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 317 [M+H]+.
화합물 90: 화합물 89 (93 mg, 0.29 mmol)을 메탄올에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc로 추출하고, 포화 NaHC03 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 90 (83 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 273 [M+H]+.
화합물 91 : 화합물 90 (80 mg, 0.29 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 온도를 0 ℃로 내리고, 이어서 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 반응혼합물의 온도를 실온으로 올렸다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 91 (89 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 301 [M+H]+.
화합물 92: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 91 (87 mg, 0.29 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 92 (83 mg, 96%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 298 [M+H]+.
화합물 93: 화합물 92 (77 mg, 0.26 mmol)을 3/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 55 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2P04 (aq)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 93 (81 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 298 [M+H]+.
화합물 TX63487: 화합물 93 (81 mg, 0.26 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63487 (29 mg, 38%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.78 (dd, 1H, J = 4.8, 14.9 Hz), 2.55 (ddd, 1H, J = 7.5, 11.6, 15.3 Hz), 2.33 (dd, 1H, J = 2.8, 10.9 Hz), 2.27 (m, 1H), 1.83 (m, 5H), 1.63 (m, 3H), 1.44 (s, 3H), 1.27 (m, 1H); m/z 296 [M+H]+.
화합물 94: 화합물 89 (159 mg, 0.50 mmol)을 CH2Cl2 에 넣고, l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하였다. 2시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc로 희석하고, 포화 NaHC03 (aq) 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 94 (123 mg, 62%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 395, 397 (1 : 1) [M+H]+.
화합물 95: 화합물 94 (121 mg, 0.31 mmol), 페닐보론산 (56 mg, 0.46 mmol), Ph3P (18 mg, 0.07 mmol), K3P04 (210 mg, 0.99 mmol) 및 DME (10 mL)의 혼합물을, 10 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(OAc)2 (16 mg, 0.07 mmol)을 가하고, 10 분 동안 계속 N2를 살포하였다. 반응혼합물을 85 ℃에서 12시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 MgS04를 통과시켜 여과하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 95 (88 mg, 73%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다, m/z 393 [M+H]+.
화합물 96: 화합물 95 (84 mg, 0.21 mmol)을 메탄올에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 96 (79 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 349 [M+H]+.
화합물 97: 화합물 96 (75 mg, 0.21 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, KH2P04 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 97 (38 mg, 47%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 377 [M+H]+.
화합물 98: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 97 (38 mg, 0.10 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트에 넣고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 98 (38 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 374 [M+H]+.
화합물 99: 화합물 98 (38 mg, 0.10 mmol)을 3/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 55 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 99 (40 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 374 [M+H]+.
화합물 TX63504: 화합물 99 (40 mg, 0.10 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63504 (14 mg, 37%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 7.50 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 7.44 (t, 1H, J = 6.7 Hz), 7.34 (d, 2H, J = 7.0 Hz), 3.82 (s, 3H), 2.67 (d, 1H, J = 6.2 Hz), 2.56 (m, 1H), 2.40 (d, 1H, J = 10.4 Hz), 2.28 (m, 1H), 1.84 (m, 5H), 1.65 (m, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.28 (m, 1H); m/z 372 [M+H]+.
화합물 48 및 100: 화합물 26 (100 mg, 0.36 mmol)을 톨루엔 (10 ml)에 넣고, 5 분 동안 N2를 살포하고, 페닐하이드라진 (38 1, 0.38 mmol)을 가하였다. 바이알을 밀봉하고, 75 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 농축하였다. 잔사를 톨루엔 (10 mL)으로 취하고, p-톨루엔설폰산 수화물 (12 mg, 0.06 mmol)을 가하고, 이어서 반응혼합물에 3 분 동안 N2를 살포하였다. 80 ℃ 에서 하룻밤 교반하여 반응시키고, 이어서 실온에서 3일 동안. 반응혼합물을 농축하여 화합물 48 및 100의 혼합물을 얻었다: m/z 353 [M+H]+.
화합물 50 및 101: 화합물 48 및 100의 혼합물을 메탄올에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 EtOAc (50 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10 내지 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 50 (19 mg, 17%) 및 화합물 101 (57.1 mg, 52%) 을 고체 상태로 수득하였다: m/z 309 [M+H]+.
화합물 102: 화합물 101 (50.4 mg, 0.16 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 102 (61.4 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 337 [M+H]+.
화합물 103: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 102 (61.4 mg, 0.16 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 103 (48.5 mg, 89%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 334 [M+H]+.
화합물 104: 화합물 103 (47.5 mg, 0.14 mmol)을 3/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 55 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 104 (42.5 mg, 89%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 334 [M+H]+.
화합물 TX63524: 화합물 104 (42.5 mg, 0.13 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 25% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 TX63524 (11.8 mg, 28%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.60 (m, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.45 (m, 2H), 2.86 (ddd, 1H, J = 1.1, 5.7, 15.9 Hz), 2.65 (ddd, 1H, J = 6.7, 12.0, 16.1 Hz), 2.32 (dd, 1H, J = 1.9, 11.9 Hz), 1.95 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 332 [M+H]+.
화합물 105: 화합물 26 (0.282 g, 1.0 mmol)을 9:1의 EtOH/H20 중의 0.1 M 하이드록실아민 염산염 용액 (11 mL, 1.1 mmol)에 넣고, 트리에틸아민 (0.15 mL, 1.1 mmol)을 가하였다. 15 분 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 잠시 45 ℃로 온도를 올리고 하룻밤 실온에서 교반하였다. 반응혼합물을 60 ℃로 잠시 가열하여 사이클화가 확실하게 되도록 하고, 이어서 농축하고, EtOAc로 희석하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 유리질을 얻었다, m/z [M+H]+ 278.1
상기 중간체 (305 mg, 1.1 mmol)의 THF:MeOH (2:1) 용액을, 30% NaOMe (8 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 KH2P04 (포화)와 혼합하고 EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공하에서 농축하여 화합물 105 (0.297 g)을 얻었다. m/z [M+H] 278.1. 이 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다.
화합물 106: 화합물 105 (0.297 g, 1.1 mmol)을 EtOH (20 mL)에 넣고, 메틸하이드라진 (0.15 g, 3.26 mmol)을 EtOH (1 mL) 중의 용액 형태로 하여 실온에서 적가하였다. 반응혼합물을 하룻밤하고 추가 6시간 동안 가열 환류하였다. 반응혼합물을 식힌 후 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 18 g)에서 3: 1, 이어서 1 : 1, 헥산/EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하였다. 화합물 106 (62 mg, 18%)을 유리질 상태로 수득하였다, m/z [M+H]+ 306.2.
화합물 107: 화합물 106 (0.062 g, 0.20 mmol)을 EtOAc (7 mL)에 녹이고, 트리에틸아민 (0.06 mL, 0.4 mmol)을 가하고 이어서 염화벤조일 (0.069 g, 0.49 mmol)을 가한 후 3 일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, NaHC03 포화수용액 (10 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 어두운 색 오일로 만들어 화합물 107 (0.1145 g)을 수득하였으며, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다, m/z [M+H]+ 410.3.
화합물 108: 107 (114.5 mg, 0.28 mmol)의 MeOH (5 mL) 용액을 3N HCl (aq)으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2x25 mL) 및 포화 NaHC03 (aq)로 추출하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 108 (57 mg, 57%). m/z [M+H]+ 366.2.
화합물 109: 실온에서 108 (57 mg, 0.16 mmol)의 HCOOEt (2 mL) 중 용액에, 30% NaOMe의 MeOH (6 eq) 용액을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, 포화 KH2P04 용액으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2x25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공하에서 농축하여 화합물 109 (63 mg) 이를 추가의 정제 없이 사용하였다, m/z [M+H]+ 394.2.
화합물 110: 109 (0.063 g, 0.16 mmol)의 EtOH (2 mL) 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공하에서 농축하여 화합물 110 (0.0613 g)을 수득 하였으며, 이를 추가의 정제공정 없이 사용하였다. m/z [M+H]+ 391.2.
화합물 111: 화합물 110 (0.0613 g, 0.16 mmol)의 THF:MeOH (2:1) 용액에, 30% NaOMe (8 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 KH2PO4 (포화)와 혼합하고, EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공하에서 농축하여 화합물 111 (0.0493 g) 이를 추가의 정제 없이 사용하였다, m/z [M+H]+ 391.2.
화합물 TX63531: 0 ℃에서 화합물 111 (0.0493 g, 0.13 mmol)의 DMF 용액 (1 mL)에, l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (30 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 2: 1 DCM/EtOAc 으로 용출하여 화합물 TX63531 (5.8 mg, 11%)을 얻었다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 7.88 (d, 2H, J = 4.3 Hz), 7.60 (t, 1H, J= 5.6 Hz), 7.54 (br s, 1H), 7.51 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.60 (m, 1H), 2.44 (m, 1H), 2.14 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 1.79-1.66 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.07 (s, 3H); m/z [M+H]+ 389.2.
화합물 TX63524: 화합물 104 (42.5 mg, 0.13 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지(약30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63524 (11.8 mg, 28%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.60 (m, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.45 (m, 2H), 2.86 (ddd, 1H, J = 1.1, 5.7, 15.9 Hz), 2.65 (ddd, 1H, J = 6.7, 12.0, 16.1 Hz), 2.32 (dd, 1H, J = 1.9, 11.9 Hz), 1.95 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H). m/z 332 [M+H]+.
화합물 112: 17 (6.4 g, 36 mmol)의 THF (25 mL) 중 용액을, 리튬 (2 당량)의 -78 ℃ 액화암모니아(10 mL) 용액에 가하였다. -78 ℃ 에서 45 분 동안 교반하여 반응시키고, NH4Cl (10 g)으로 반응을 종료시킨 후 실온으로 온도를 올렸다. 반응혼합물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 112 (1.5 g, 23%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 183 [M+H]+.
화합물 113: 화합물 112 (1.5 g, 8.2 mmol), 에틸렌글리콜, 및 p-톨루엔설폰산 수화물의 벤젠 중의 혼합물을, 4시간 동안 물의 공비적 제거 (azeotropic removal)와 함께 가열 환류하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 물로 세척하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 113 (1.4 g, 75%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 227 [M+H]+.
화합물 114: 화합물 113 (1.4 g, 6.2 mmol)을 CH2Cl2 (100 mL)에 넣고, 이어서 MgS04 (150 mg) 및 PDC (2 당량)을 가하였다. 실온에서 2일 동안 교반하여 반응시켰다.반응혼합물을 실리카 패드로 여과하고(용출액: CH2Cl2) 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 114 (1.25 g, 90%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다, m/z 225 [M+H]+.
화합물 115: 화합물 114 (1.25 g, 5.57 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. KH2P04 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 물로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 115 (1.35 g, 96%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 253 [M+H]+.
화합물 116: 화합물 115 (1.35 g, 5.35 mmol) 및 메틸하이드라진 (1.6 당량)의 에탄올 중의 혼합물을, 60 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, EtOAc) 하여 화합물 116 (1.2 g, 85%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 263 [M+H]+.
화합물 117: 화합물 116 (1.2 g, 4.6 mmol)을 CH2Cl2 에 넣고 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.55 당량)을 가하였다. 실온에서 3시간 동안 교반하여 반응시켰다. 반응혼합물을 1 N Na2C03로 세척하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10 내지 30 % EtOAc 용액) 하여 화합물 117 (1.0 g, 64%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 341 , 343 (1 : 1) [M+H]+.
화합물 118: 화합물 117 (1.0 g, 2.9 mmol), 페닐보론산 (1.25 당량), Ph3P (0.3 당량), K3P04 (3 당량) 및 DME의 혼합물에, 10 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(OAc)2 (0.15 당량)을 가하고, 10 분 동안 계속 N2를 살포하였다. 반응혼합물을 85 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10 내지 30 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 118 (0.53 g, 53%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 339 [M+H]+.
화합물 119: 화합물 118 (0.53 g, 1.6 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 포화 NaHC03로 희석하고, EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 119 (0.42 g, 91%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 295 [M+H]+.
화합물 120: 화합물 119 (0.42 g, 1.4 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. KH2P04 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 120 (0.44 g, 96%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 323 [M+H]+.
화합물 121: 하이드록실아민 염산염 및 120 (0.44 g, 1.4 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 121 (445 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 320 [M+H]+.
화합물 122: 화합물 121 (445 mg, 1.4 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 122 (440 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 320 [M+H]+.
화합물 TX63540: 화합물 122 (440 mg, 1.4 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 15 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63540 (120 mg, 28%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.50 (t, 2H, J = 8.1 Hz), 7.45 (m, 1H), 7.35 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 3.83 (s, 3H), 2.64 (m, 4H), 2.51 (ddt, 1H, J = 1.7, 5.7, 12.3 Hz), 1.89 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 1.48 (s, 3H); m/z 318 [M+H]+.
화합물 123: 화합물 1 (30.0 g, 238 mmol)을 아세토니트릴에 현탁시키고, 반응혼합물의 온도를 0 ℃로 내렸다. 에틸비닐케톤 (25 g, 297 mmol) 및 트리에틸아민 (53 ml, 380 mmol)을 가하고, 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, KH2P04 (aq) 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 잔사를 벤젠 (250 mL)로 취하고, 피롤리딘 (5.0 ml, 60 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 48시간 동안 물의 공비적 제거 (azeotropic removal)와 함께 가열 환류하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 포화 NaHC03 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 20 % EtOAc 용액) 하여 황색 오일상태로 수득하였다. 상기 오일을 t-BuOMe (50 mL)으로부터 결정화하여 화합물 123 (18.59 g, 41%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다.
화합물 124: NaBH4 (0.64 g, 17 mmol)의 에탄올 (100 mL) 중 용액을, 화합물 123 (12.97 g, 67.5 mmol)의 0 ℃ 에탄올 (100 mL) 용액에 가하였다. 0 ℃에서 45 분 동안 교반하여 반응시키고, 아세트산 (7.7 mL, 135 mmol)으로 반응을 종료시켰다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 1시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 10% NH4OH (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액) 하여 화합물 124 (7.28 g, 56%) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다, m/z 195 [M+H]+.
화합물 125: 124 (6.1 g, 31 mmol)의 THF (25 mL) 중 용액을, 리튬 (2 당량)의 -78 ℃ 액화암모니아 (liq. NH3; 10 mL) 중 용액에 가하였다. -78 ℃ 에서 45 분 동안 교반하여 반응시키고, NH4Cl (10 g)으로 반응을 종료시킨 후 실온으로 온도를 올렸다. 반응혼합물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 125 (1.7 g, 28%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 197 [M+H]+.
화합물 126: 화합물 125 (1.7 g, 8.7 mmol), 에틸렌글리콜, 및 p-톨루엔설폰산 수화물의 벤젠 중의 혼합물을, 4시간 동안 물의 공비적 제거 (azeotropic removal)와 함께 가열 환류하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 물로 세척하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 126 (1.3 g, 62%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 241 [M+H]+.
화합물 127: 화합물 126 (1.3 g, 6.2 mmol)을 CH2Cl2 (100 mL)에 넣고, 이어서 MgS04 (150 mg) 및 PDC (2 당량)을 가하였다. 실온에서 2일 동안 교반하여 반응시켰다. 반응혼합물을 실리카 패드로 여과하고(용출액: CH2Cl2) 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 127 (1.18 g, 92%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다, m/z 239 [M+H]+.
화합물 128: 화합물 127 (0.67 g, 2.8 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. KH2P04 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 물로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 128 (0.75 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 267 [M+H]+.
화합물 129: 화합물 128 (0.75 g, 2.8 mmol) 및 메틸하이드라진 (1.6 당량)의 에탄올 중의 혼합물을, 60 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, EtOAc) 하여 화합물 129 (613 mg, 79%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 277 [M+H]+.
화합물 130: 화합물 129 (0.61 g, 2.2 mmol)을 CH2Cl2 에 넣고 l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.55 당량)을 가하였다. 실온에서 3시간 동안 교반하여 반응시켰다. 반응혼합물을 1 N Na2C03로 세척하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10 내지 30 % EtOAc 용액) 하여 화합물 130 (580 mg, 74%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 355, 357 (1 : 1) [M+H]+.
화합물 131 : 화합물 130 (0.58 g, 1.6 mmol), 페닐보론산 (1.25 당량), Ph3P (0.3 당량), K3P04 (3 당량) 및 DME의 혼합물을, 10 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(OAc)2 (0.15 당량)을 가하고, 10 분 동안 계속 N2를 살포하였다. 반응혼합물을 85 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10 내지 30 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 131 (360 mg, 63%) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다, m/z 353 [M+H]+.
화합물 132: 화합물 131 (0.33 g, 0.94 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 포화 NaHC03로 희석하고 EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 132 (300 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 309 [M+H]+.
화합물 133: 화합물 132 (0.30 g, 0.94 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. KH2P04 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 133 (300 mg, 95%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 337 [M+H]+.
화합물 134: 하이드록실아민 염산염 및 133 (0.30 g, 0.89 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 134 (300 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 334 [M+H]+.
화합물 135: 화합물 134 (0.30 g, 0.89 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 135 (300 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 334 [M+H]+.
화합물 TX63541 : 화합물 135 (0.30 g, 0.89 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 15 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63541 (97 mg, 33%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.45 (tt, 1H, J = 2.1, 7.3 Hz), 7.35 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.61 (m, 3H), 2.15 (dt, 1H, J = 2.1, 12.7 Hz), 2.04 (m, 1H), 1.75 (qd, 1H, J = 6.6, 12.7 Hz), 1.50 (s, 3H), 1.33 (s, 3H); m/z 332 [M+H]+.
화합물 TX63791 및 TX63792: 화합물 TX63541 (488.9 mg)의 거울상이성질체들 (enantiomers)을, 키랄(chiral) HPLC (CHIRALPAK IA, 5μ, 30x250 mm, 2:50:50 EtOH/EtOAc/헥산)를 사용하여 분리하여 2개의 잘 분해된 피크들을 얻었다. 하나가 3.98 분이었고, 이것이 화합물 TX63791 (206.2 mg, 99.6% ee)이었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 7.48 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 7.32 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.59 (m, 3H), 2.12 (t, 1H, J = 12.6 Hz), 2.01 (m, 1H), 1.73 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.0 Hz). 다른 하나는 5.04 분이었으며, 이것은 화합물 TX63792 (220.7 mg, 99.8% ee)이었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 7.48 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 7.32 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.59 (m, 3H), 2.12 (t, 1H, J = 12.6 Hz), 2.01 (m, 1H), 1.73 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.0 Hz).
화합물 136a-b: 화합물 48 (0.360 g, 1.02 mmol)을 실온에서 DCM (30 mL)에 넣고, N,N'-다이브로모다이메틸히단토인 (0.169 g, 0.59 mmol)을 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, 그 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 24 g)에서 10% EtOAc/헥산을 용출액으로 사용하여 화합물 136b (0.1057 g), m/z 433.0, [M+H]+; 및 화합물 136a (0.1141 g)을 얻었다. m/z 389.0, [M+H]+.
화합물 137: 화합물 136a (105.7 mg) 및 136b (114.1 mg)의 혼합물을 DME에 넣고, PhB(OH)2 (1.5 eq), Ph3P (0.2 eq.) 및 K3P04 (3.0 eq.)을 가하고, 반응혼합물에 10 분 동안 N2 가스 기포를 불어넣었다. Pd(OAc)2 (0.1 eq)을 가하고, 반응혼합물에 10 분 동안 N2 가스 기포를 불어넣었다. 이어서 85 ℃에서 9시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 여과하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 하여 상응 교차 커플된 생성물들 (corresponding cross coupled products)을 혼합물 형태로 수득하였으며 (a: 81.6 mg, b: 37.4 mg), 이것을 MeOH로 취하고, HCl (aq, 3N)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 포화 NaHC03 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 137 (108.9 mg)을 얻었다. m/z [M+H]+ 385.1.
화합물 138: 화합물 137 (0.116 g, 0.30 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 138 (134.2 mg, 100%). m/z [M+H]+ 413.1.
화합물 139: 하이드록실아민 염산염 및 117 (0.134 g, 0.33 mmol)의 EtOH 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 139 (124.9 mg, 94%), m/z [M+H]+ 410.2.
화합물 140: 화합물 139 (0.1249 g, 0.31 mmol)을 1/1의 MeOH/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 140 (119.5 mg, 94%), m/z [M+H]+ 410.2.
화합물 TX63544: 화합물 140 (0.1195 g, 0.29 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 5-30 % EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 TX63544 (60.9 mg, 52%). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.60 (s, 1H), 7.31-7.28 (m, 5H), 7.26-7.21 (m, 3H), 7.15-7.13 (m, 2H), 2.80 (dd, 1H, J = 5.1, 16.4 Hz), 2.67-2.60 (m, 1H), 2.28 (dd, 1H, J = 2.1, 11.6 Hz), 1.98-1.86 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z [M+H]+ 408.2.
화합물 141a: 화합물 68 (0.23 g, 0.62 mmol), 이소프로페닐 피나콜 보로네이트 (1.25 당량), Ph3P (0.3 당량), K3P04 (3 당량) 및 DME 중의 혼합물을, 10 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(OAc)2 (0.15 당량)을 가하고, 10 분 동안 계속 N2를 살포하였다. 반응혼합물을 85 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10 내지 30 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 141a (85 mg, 41%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 331 [M+H]+.
화합물 142a: 화합물 141a (85 mg, 0.26 mmol)을 N2 하에서 THF에 넣고, 10% Pd/C 을 가하였다. 플라스크를 H2로 엄격하게 퍼지(purge)시키고, 2일 동안 실온에서 교반하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하여 화합물 142a (85 mg, 99%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 333 [M+H]+.
화합물 143a: 화합물 142a (85 mg, 0.26 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 포화 NaHC03로 희석하고, EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 143a (70 mg, 95%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 289 [M+H]+.
화합물 144a: 화합물 143a (70 mg, 0.24 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. KH2P04 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 144a (80 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 317 [M+H]+.
화합물 145a: 하이드록실아민 염산염 및 144a (80 mg, 0.24 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 145a (80 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 314 [M+H]+.
화합물 146a: 화합물 145a (80 mg, 0.24 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 146a (75 mg, 99%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 314 [M+H]+.
화합물 TX63547: 화합물 146a (75 mg, 0.24 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 15 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63547 (11 mg, 15%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.05 (septet, 1H, J = 7.0 Hz), 2.84 (ddd, 1H, J = 7.0, 11.7, 15.7 Hz), 2.58 (ddd, 1H, J = 7.0, 11.7, 15.7 Hz), 2.16 (dd, 1H, J = 2.1, 11.9 Hz), 1.88 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.32 (d, 3H, J = 7.1 Hz), 1.29 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 7.1 Hz), 1.24 (s, 3H); m/z 312 [M+H]+.
화합물 141b: 화합물 68 (0.371 g, 1.00 mmol), K2C03 (0.417 g, 3.02 mmol), 1-사이클로헥세닐보론산 피나콜 에스테르 (0.269 g, 0.23 mmol) 및 다이옥산 (15 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 2-3 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(dppf)Cl2 (0.079 g, 0.097 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 약 5 분 동안 N2를 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 100 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 EtOAc (100 mL) 및 NaHC03 포화수용액 (30 mL)에 분배시키고, 상기 층들을 분리하고 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 오일을 얻었다. 상기 오일을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 19 g)에서 20% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피 하여 화합물 141b (151 mg, 40%) 을 유리질/백색 고체 상태로 수득하였다, m/z [M+H]+ 371.2.
화합물 142b: 화합물 141b (0.147 g, 0.40 mmol)을 EtOH (20 mL)에 넣고, 상기 플라스크에 질소가스를 불어넣었다. 10% Pd/C (0.035 g)을 가하고, 상기 플라스크를 회수하고 H2를 3회 불어넣고, 하룻밤하고 6시간 동안 H2 풍선하에 실온에서 교반하였다. 상기 촉매를 여과하여 제거하고 여액을 농축하여 화합물 142b (139 mg, 93%)을 맑은 폼/유리질 상태로 수득하였다, m/z [M+H]+ 373.1.
화합물 143b: 화합물 142b (0.139 g, 0.37 mmol)을 화합물 37a의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 143b (110.6 mg, 92%) 을 유리질/고체 상태로 수득하였다, m/z [M+H]+ 329.1.
화합물 144b: 화합물 143b (0.1106 g, 0.34 mmol)을 화합물 143a의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 144a (128 mg, 정량적인)을 수득하였다. m/z [M+H]+ 357.1.
화합물 145b: 화합물 144b (0.128 g, 0.36 mmol)을 화합물 144a의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 145a (111.4 mg, 89%)을 폼 상태로 수득하였다, m/z [M+H]+ 354.1.
화합물 146b: 화합물 145b (0.1114 g, 0.32 mmol)을 화합물 145a의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 146a (111.7 mg, 97%) 을 회색을 띤 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다, m/z [M+H]+ 354.0.
화합물 TX63591: 화합물 146b (0.111 g, 0.31 mmol)을 화합물 146a의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 TX63547을 얻고, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 12 g)에서 3: 1 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하고, 다시 실리카 겔 (230-400 메쉬, 8 g)에서 5% 메틸 tert-부틸에테르의 DCM 용액으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63591 (14 mg, 12%)을 얻었다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.82 (dd, 1H, J = 15, 5 Hz), 2.51-2.62 (m, 2H), 2.12 (dd, 1H, J=10, 2.5 Hz), 1.74-1.89 (m, 7H), 1.50-1.58 (m, 3H), 1.46 (s, 3H), 1.29-1.37 (m, 2H), 1.25 (s, 3H), 1.23 (s, 3H).
화합물 147: 화합물 68 (0.151 g, 0.41 mmol), K2C03 (0.176 g, 1.29 mmol), 벤질보론산 피나콜 에스테르 (0.176 g, 0.8 mmol), Pd(dppf)Cl2 (0.038 g, 0.0046 mmol) 및 다이옥산 (8 mL)을, 90 ℃에서 1.5시간 동안, 그리고 이어서 하룻밤 100 ℃에서 질소 하에 반응시켰다. Pd(dppf)Cl2 (0.041 g, 0.005 mmol)을 더 가하고, 반응혼합물을 120 ℃에서 하룻밤 가열하고, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 9.9 g)에서 용출액 5: 1 헥산/EtOAc로 이어서 3: 1 헥산/EtOAc로 크로마토그래피를 수행하여, 화합물 147을 탈할로겐화 출발물질 브로모피라졸과의 혼합물로서 오일 상태로 수득하였다, (0.0736 g), m/z [M+H]+ 381.1.
화합물 148: 화합물 147 (73.6 mg, 0.19 mmol)을 MeOH에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 포화 NaHC03로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 148 (58.8 mg) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 337.1 [M+H]+.
화합물 149: 화합물 148 (58.8 mg, 0.18 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 149 (74 mg) 을 고체 상태로 수득하였다. 이 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다.
화합물 150: 하이드록실아민 염산염 및 149 (74 mg, 0.2 mmol)의 EtOH 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 150 (71 mg) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 362.1 [M+H]+.
화합물 151: 화합물 150 (71 mg, 0.2 mmol)을 1/1의 MeOH/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 11 g)에서 50% 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 151 (23 mg) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z [M+H]+ 362.1.
화합물 TX63550: 화합물 151 (23 mg, 0.063 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. Br2을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 50% 헥산/EtOAc를 사용하여 칼럼크로마토그래피 (230-400 메쉬, 7g)하여, 화합물 TX63550 (8.3 mg)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.28 (dd, 2H, J = 7.3, 7.5 Hz), 7.21 (t, 1H, J = 7.3 Hz), 7.04 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 3.90 (s, 2H), 3.65 (s, 3H), 2.57 (dd, 1H, J = 5.9, 15.8 Hz), 2.35 (m, 1H), 2.14 (dd, 1H, J= 1.9, 11.8 Hz), 1.90-1.77 (m, 2H), 1.47 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.20 (s, 3H); m/z [M+H]+ 360.1.
화합물 152: 화합물 130 (355 mg, 1.28 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 포화 NaHC03로 희석하고, EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 152 (305 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 233 [M+H]+.
화합물 153: 화합물 152 (305 mg, 1.28 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. KH2P04 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 153 (330 mg, 99%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 261 [M+H]+.
화합물 154: 하이드록실아민 염산염 및 153 (330 mg, 1.27 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 154 (320 mg, 98%) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 258 [M+H]+.
화합물 155: 화합물 154 (320 mg, 1.24 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 155 (320 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다, m/z 258 [M+H]+.
화합물 TX63551: 화합물 155 (320 mg, 1.24 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지(약2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 15 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63551 (120 mg, 38%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 6.3, 16.0 Hz), 2.57 (m, 2H), 2.09 (dt, 1H, J = 1.8, 12.4 Hz), 2.02 (dd, 1H, J = 7.1, 13.7 Hz), 1.74 (m, 1H), 1.44 (s, 3H), 1.31 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z 256 [M+H]+.
화합물 156: 화합물 1 (2.50 g, 19.8 mmol)와 아크릴아마이드 (2.15 g, 30.2 mmol)의 Et3N (50 mL) 중 용액을 85 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 실온으로 식혔다. 그리고 갈색 고체를 여과 분리하였다. 상기 조 고체를 EtOAc으로 분쇄하여 (triturated), 화합물 156 (3.77 g, 96%) 을 밝은 갈색 고체 상태로 수득하였다, m/z 198 [M+H]+.
화합물 157: 화합물 156 (3.75 g, 19.0 mmol)을 HOAc (37.5 mL)에 넣고, 동일한 양 3개로 나누어 마이크로웨이브 바이알에 넣어 밀봉하였다. 각 바이알을 160 ℃에서 1시간 동안 마이크로웨이브 내에서 가열하였다. 얻어진 혼합물들을 합하고, EtOH (20 mL)로 희석하고, 20 분 동안 가열 환류하고, 이어서 실온으로 식혔다.. 반응혼합물을 여과하고 그 여액을 EtOAc 로 세척하여 화합물 157 (2.48 g, 73%) 을 밝은 갈색 고체 상태로 수득하였다, m/z 180 [M+H]+.
화합물 158: NaH (1.0 당량)을 화합물 157 (1.5 g, 8.4 mmol)의 0 ℃ DMF/THF (2.3/1, 30 mL) 중 용액에 가하고, 45 분 동안 반응혼합물을 교반하였다. MeI (1.5 당량)을 가하고, 반응혼합물의 온도를 실온으로 올렸다. 1.5시간 후 실온에서 포화 NH4Cl 으로 반응을 종료시킨 후 CH2Cl2로 추출하고, 이어서 물로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 0 내지 100 % EtOAc 용액) 하여 화합물 158 (1.1 g, 68%) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다, m/z 194 [M+H]+.
화합물 159: 화합물 158 (600 mg, 3.1 mmol)을 N2하 AcOH/water (19/1, 12 mL)에 넣고, Pt02 (120 mg) 을 가하였다. 플라스크를 H2로 엄격하게 퍼지(purge)시키고, 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고 EtOAc으로 용출하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 CH2Cl2 에 넣고, MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 159 (864 mg, 정량적)을 점성 오일 상태로 수득하였다. m/z 198 [M+H]+.
화합물 160: TPAP (107 mg, 0.30 mmol)을 실온에서 화합물 159 (864 mg, 3.1 mmol), NMO (770 mg, 6.6 mmol) 및 4 Å 분자체 (2 g)의 CH2C12 (40 mL) 중의 혼합물에 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 실리카 패드로 여과하고, 아세톤/CH2Cl2 (1/1, 100 mL)으로 용출하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 CH2Cl2 에 넣고, 1 N HCl (aq) 및 물로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 0 to 50 % 아세톤/헥산) 하여 화합물 160 (480 mg, 79%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다, m/z 196 [M+H]+.
화합물 161 : 화합물 160 (120 mg, 0.61 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 25% 소디움 메톡사이드 (25 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 1시간 동안 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다, 이어서 온도를 실온으로 올리고 2시간 동안 교반하였다. 12 N HCl (0.55 mL)으로 반응을 종료시킨 후, CH2C12로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 조 화합물 161을 얻었다: m/z 224 [M+H]+.
화합물 162: 조 화합물 161 및 메틸하이드라진 (52 L, 0.98 mmol)의 에탄올 (6.1 mL) 중의 혼합물을 60 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 0 to 10 % MeOH/CH2C12) 하여 화합물 162 (134 mg, 93%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 234 [M+H]+.
화합물 163: l,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (107 mg, 0.37 mmol)의 CH2C12 (3 mL) 중 용액을 실온에서 화합물 162 (134 mg, 0.57 mmol)의 CH2C12 (3 mL) 중의 용액에 가하였다. 실온에서 5 시간 동안 교반하여 반응시켰다. 반응혼합물을 직접, 칼럼 크로마토그래피를 연속적으로 수행하여 정제하였는데, 먼저 직접 로딩하고 (실리카 겔, 0 to 70 % 아세톤/헥산), 이어서 (실리카 겔, 0 to 5 % MeOH/CH2C12)에 로딩하였으며, 이로써 화합물 163 (87 mg, 49%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 312, 314 (1 : 1), [M+H]+.
화합물 164: 화합물 163 (87 mg, 0.28 mmol), 3-페닐보론산 (1.5 당량), Ph3P (0.2 당량), K3PO4 (3.0 당량) 및 DME의 혼합물에, 10 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(OAc)2 (0.1 당량)을 가하고, 10 분 동안 계속 N2를 살포하였다. 상기 반응 바이알을 밀봉하고, 110 ℃에서 2.5시간 동안 마이크로웨이브 내에서 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 0 to 65 % 아세톤/헥산)로 정제하여 화합물 164 (82 mg, 95%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. m/z 310 [M+H]+.
화합물 165: LDA (2.0 당량)의 THF 용액을 -78 ℃의 화합물 164 (40 mg, 0.13 mmol)의 THF (1.3 mL) 중의 용액에 가하였다. -78 ℃ 에서 30 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 PhSeCl (3 당량)의 THF (0.4 mL) 중 용액을 가하였다. -78 ℃ 에서 추가로 1시간 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 포화 NH4Cl (aq)으로 반응을 종료시킨 후 실온으로 온도를 올렸다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 이어서 물로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 0 내지 100 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 165 (27 mg, 45%) 황색 고체 상태로 수득하였다. m/z 466 [M+H]+.
화합물 166: 화합물 165 (27 mg, 0.058 mmol)을 EtOAc/THF (3/1, 1.2 mL)을 넣고, H2O2 (30%, 5 당량)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 Na2SO3 (aq) 및 물로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 0 내지 100 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 166 (16 mg, 90%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. m/z 308 [M+H]+.
화합물 167: 요오드 (2 당량)을 실온에서 화합물 166 (14.2 mg, 0.046 mmol)의 피리딘/CCl4 (1/2, 0.69 mL) 중의 용액에 가하였다. 5시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 16시간 동안 50 ℃에서, 그리고 마지막으로 20시간 동안 65 ℃에서 교반하였다. 반응혼합물을 실온으로 식히고, EtOAc로 희석하였다. 반응혼합물을 포화 Na2SO3 (aq), 물 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 0 내지 100 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 167 (12 mg, 60%) 황색 고체 상태로 수득하였다. m/z 434 [M+H]+.
화합물 TX63568: 화합물 167 (11 mg, 0.036 mmol), Zn(CN)2 (3 당량) 및 Pd(PPh3)4 (0.2 당량)을 가스가 제거된 DMF (0.5 mL)에 넣었다. 상기 바이알을 N2로 퍼지(purge)시키고, 밀봉하고, 20 분 동안 80 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 0 내지 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63568 (7.5 mg, 89%) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.49 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 7.43 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 7.32 (d, 2H, J = 6.9 Hz), 3.88 (dd, 1H, J = 2.8, 13.2 Hz), 3.80 (s, 3H), 3.12 (s, 3H), 2.72 (ddd, 1H, J = 1.3, 6.6, 16.4 Hz), 2.63 (ddd, 1H, J = 6.6, 11.4, 16.3 Hz), 2.30 (m, 1H), 2.00 (m, 1H), 1.35 (s, 3H); m/z 333 [M+H]+.
화합물 169: 화합물 25 (0.294 g, 1.17 mmol)을 DCM (50 mL)에 넣었다. 여기에 MgBr-Et2O (0.777 g, 3.0 mmol) 및 i-Pr2EtN (0.4 mL, 2.3 mmol)을 차례로 가하고, 반응혼합물을 실온에서 15 분 동안 교반 하였으며, 점점 오렌지색으로 변하였다. DCM (2 mL) 중의 염화벤조일 (0.342 g, 2.43 mmol)을 적가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. NaHCO3 포화수용액을 가하여 반응을 종료시켰다. 상기 층들을 분리하고 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 오일이 되도록 하여 조(crude) 화합물 168 을 얻을 수 있다. 잔사를 EtOH (25 mL)에 넣고, 이것을 하이드라진 일수화물 (0.63 g, 12.6 mmol)의 EtOH 용액으로 처리하고, 반응혼합물을 63 ℃에서 약 1 시간 동안 가열하고, 이어서 농축하여 노란색 오일을 얻었다. 상기 오일을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 15 g)에서 50% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피 하여 화합물 169 (158 mg, 38%)을 거의 맑은 오일상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 353.1.
화합물 170: 화합물 169 (0.158 g, 0.45 mmol)을 MeOH에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 포화 NaHCO3 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 170 (174 mg, 정량적)을 오일형태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 309.0.
화합물 171: 화합물 170 (0.169 g, 0.55 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, KH2PO4 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하여 화합물 171 (154.8 mg, 84%). m/z [M+H]+ 337.0.
화합물 172: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 171 (0.1548 g, 0.46 mmol)에 가하였다. EtOH/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 172 (128 mg, 83%) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 334.0.
화합물 173: 화합물 172 (0.128 g, 0.38 mmol)을 3:1의 MeOH/THF 혼합물에 녹이고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 55 ℃에서 5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 173 (129 mg, 정량적) 황색 유리질/고체 상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 334.0.
화합물 TX63579 : 화합물 173 (0.129 g, 0.39 mmol) 및 DDQ (1.3 eq)의 혼합물을, 벤젠에 넣었다. 4.5시간 동안 반응혼합물을 환류 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사물을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 11 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63579 (35.47 mg, 27%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, d 6 -DMSO) δ13.05 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.61 (d, 2H), 7.47 (dd, 2H, J = 7.4, 7.5 Hz), 7.35 (t, 1H, J = 7.4 Hz), 2.87 (dd, 1H, J = 5.5, 15.8 Hz), 2.76-2.69 (m, 1H), 2.26 (d, 1H), 1.98-1.86 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 1.15 (s, 3H); m/z [M+H]+ 332.0.
화합물 174: 아세트아미드 염산염 (0.68 g, 7.2 mmol)와 피페리딘 (0.60 g, 7.0 mmol)의 i-PrOH (10 mL) 중 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하고, 이어서 화합물 26 (0.20 g, 0.71 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 3일 동안 가열 환류하고, 이어서 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 25 % EtOAc 용액) 하여 화합물 174 (0.12 g, 56%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 303 [M+H]+.
화합물 175a: O-메틸이소우레아 헤미설페이트 (0.946g, 7.7 mmol) 및 피페리딘 (0.58 g, 6.8 mmol)을 iPrOH (15 mL)에 넣고, 약 15 분 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 화합물 174 (0.212 g, 0.76 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고 이어서 4일 동안 가열 환류하였다. 상기 iPrOH을 n-BuOH로 치환하고, O-메틸이소우레아 헤미설페이트 (0.432 g, 3.5 mmol)을 더 가하였다. 반응혼합물을 하룻밤 가열 환류하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc (80 mL)로 추출하고, 포화 수용액 NaHCO3 (15 mL) 및 브라인 (15 mL)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 20% EtOAc/헥산)하여 3가지 성분들의 혼합물을 수득하였다, (364 mg): m/z 319.2 [M+H]+.
화합물 175b-175o ( 반응식 31).
화합물 R 9 ( mmol ) Amidine ( mmol ) 피페리딘 ( mmol ) 수율 (%)
175b Me 0.71 7.2 7.0 56
175c i-Pr 1.091 10.93 6.60 63
175d H 1.081 10.85 6.46 75
175e Ph 1.091 11.24 6.77 75
175f t-Bu 1.07 7.3 5.35 52
175g CF3 1.07 10.7 5.35 88
175h 4-Cl-Ph 1.242 5.23 3.13 40
175i 2-Cl-Ph 1.25 5.58 3.23 Quant.
175j 3-Me-Ph 1.118 5.86 3.53 39
175k 4-MeO-Ph 1.258 5.4 3.23 32
175l Me-티아졸 1.19 5.75 3.43 Quant.
175m 3-피리딜 1.079 6.34 3.84 44
175n 4-피리딜 1.28 12.82 7.68 Quant.
175o 2-피리딜 1.09 6.34 3.84 95
일반 제조법 F: 화합물 174 (사용량 참조: 표 8), 치환된 아미딘 (사용량 참조: 표 8) 및 피페리딘 (사용량 참조: 표 8)을 i-PrOH (10 mL)에 넣고, 85 ℃에서 48시간 동안 밀봉된 튜브 내에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 CHCl3로 추출하고, NH4Cl (aq, 10%)과 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, EtOAc/헥산 or MeOH/CHCl3) 하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 175b: 0.12 g, 56%: m/z 303 [M+H]+.
화합물 175c: 0.2282 g, 63%: m/z 331 [M+H]+.
화합물 175d: 0.233 g, 75%: m/z 289 [M+H]+.
화합물 175e: 0.307 g, 75%: m/z 365 [M+H]+.
화합물 175f: 0.190 g, 52%: m/z 345 [M+H]+.
화합물 175g: 0.337 g, 88%: m/z 357 [M+H]+.
화합물 175h: 0.2 g, 40%: m/z 399, 401 (3:1) [M+H]+.
화합물 175i: 1.38 g, >100%: m/z 399/401 (39/14%) [M+H]+, 155/157 (100/36%).
화합물 175j: 0.164 g, 39%: m/z 379 [M+H]+.
화합물 175k: 0.161 g, 32%: m/z 395 [M+H]+.
화합물 175l: 0.92 g, >100%: m/z 386 (93%) [M+H]+, 143 (64%) 및 126 (100%).
화합물 175m: 0.172 g, 44%: m/z 366 [M+H]+.
화합물 175n: 1.05 g, >100%: m/z 366 (83%) [M+H]+ 및 190 (100%).
화합물 175o: 0.38 g, 95%: m/z 366 (100%) [M+H]+.
화합물 176a: 화합물 175a (0.364 g)을 MeOH에 넣고, HCl (aq, 1 N)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 포화 NaHCO3 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 혼합물 (0.336 g)을 수득하였다: m/z 275 [M+H]+.
화합물 176b-176o ( 반응식 31).
화합물 R 175b-o ( mmol ) 3N HCl ( mL ) 용매 수율 (%)
176b Me 0.50 Not given MeOH 정량적
176c i-Pr 0.69 2 MeOH (10 mL) 89
176d H 0.809 2 MeOH (10 mL) 93
176e Ph 0.844 2 MeOH:THF (1:1) (20 mL) 정량적
176f t-Bu 0.552 2 MeOH (10 mL) 84
176g CF3 0.944 2 MeOH (10 mL) 65
176h 4-Cl-Ph 0.502 4 MeOH:THF (1:1) (20 mL) 87
176i 2-Cl-Ph 1.25 5 MeOH (25 mL) 73
176j 3-Me-Ph 0.433 4 MeOH:THF (1:1) (20 mL) 96
176k 4-MeO-Ph 0.409 4 MeOH:THF (1:1) (20 mL) 88
176l Me-티아졸 1.19 5 mL (6N) MeOH (20 mL) 92
176m 3-피리딜 0.471 4 MeOH:THF (1:1) (20 mL) 정량적
176n 4-피리딜 1.28 5 mL (6N) MeOH (25 mL) 66
176o 2-피리딜 1.06 5 mL (6 N) MeOH (20 mL) 72
일반 제조법 G: 화합물 175b-o (사용량 참조: 표 9)을 용매 (사용량 참조: 표 9)에 넣고, HCl (aq) (사용량 참조: 표 9)을 가하였다. N2 하에 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 NH4OH (수용액, 10%)를 사용하여 pH~9-10로 염기성화하고, CHCl3 로 추출하고, 포화 NaCl (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 176b: 0.14 g, 정량적: m/z 259 [M+H]+.
화합물 176c: 0.176 g, 89%: m/z 287 [M+H]+.
화합물 176d: 0.184 g, 93%: m/z 245 [M+H]+.
화합물 176e: 0.287 g, 정량적: m/z 321 [M+H]+.
화합물 176f: 0.139 g, 84%: m/z 301 [M+H]+.
화합물 176g: 0.191 g, 65%: m/z 313 [M+H]+.
화합물 176h: 0.155 g, 87%: m/z 355, 357 (3:1) [M+H]+.
화합물 176i: 0.32 g, 73%: m/z 355/357 (100/74%) [M+H]+.
화합물 176j: 0.139 g, 96%: m/z 335 [M+H]+.
화합물 176k: 0.127 g, 88%: m/z 351 [M+H]+.
화합물 176l: 0.37 g, 92%: m/z 342 (100%), [M+H]+.
화합물 176m: 0.174 g, 100%: m/z 322 [M+H]+.
화합물 176n: 0.27 g, 66%: m/z 322 (100%), [M+H]+.
화합물 176o: 0.24 g, 72%: m/z 322 (100%), [M+H]+.
화합물 177a: 화합물 176a (0.336 g, 1.2 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (20 mL), 및 30% NaOMe/MeOH (1.56 mL, 28.4 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, KH2PO4 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 177a (0.152 g, 66%, 3단계에 걸쳐): m/z 303 [M+H]+.
화합물 177b-o ( 반응식 31).
화합물 R 176b-o ( mmol ) EtO 2 CH ( mL ) MeONa/ MeOH (30%w/w, mL ) 벤젠 ( mL ) 수율 (%)
177b Me 0.500 Not given Not given Not given 92
177c i-Pr 0.616 0.50 0.60 20 정량적
177d H 0.752 0.61 0.71 20 95
177e Ph 0.844 0.68 0.80 20 84
177f t-Bu 0.464 0.37 0.44 10 정량적
177g CF3 0.613 0.50 0.57 10 정량적
177h 4-Cl-Ph 0.437 0.35 0.41 10 99
177i 2-Cl-Ph 0.910 0.73 0.85 20 91
177j 3-Me-Ph 0.417 0.34 0.39 10 89
177k 4-MeO-Ph 0.362 0.30 0.34 10 정량적
177l Me-티아졸 1.10 0.89 1.0 25 94
177m 3-피리딜 0.471 0.38 0.44 10 83
177n 4-피리딜 0.850 0.68 0.80 20 정량적
177o 2-피리딜 0.76 0.62 0.72 20 82
일반 제조법 H: 화합물 176b-o (사용량 참조: 표 10) 및 에틸포메이트 (사용량 참조: 표 10)을 벤젠 (사용량 참조: 표 10)에 넣고, 30% NaOMe/MeOH (사용량 참조: 표 10)을 가하였다. N2 하에 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 포화 KH2PO4 (aq)과 포화 NaCl (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 177b: 0.13 g, 92%: m/z 287 [M+H]+.
화합물 177c: 0.206 g, 정량적: m/z 315 [M+H]+.
화합물 177d: 0.194 g, 95%: m/z 273 [M+H]+.
화합물 177e: 0.248 g, 84%: m/z 349 [M+H]+.
화합물 177f: 0.162 g, 정량적: m/z 329 [M+H]+.
화합물 177g: 0.228 g, 정량적: m/z 329 [M+H]+.
화합물 177h: 0.166 g, 99%: m/z 397, 399 (3:1) [M+H]+.
화합물 177i: 0.32 g, 91%: m/z 383/385 (100/42%), [M+H]+.
화합물 177j: 0.134 g, 89%: m/z 363 [M+H]+.
화합물 177k: 0.156 g, 정량적: m/z 379 [M+H]+.
화합물 177l: 0.38 g, 94%: m/z 392 (13%) [M+Na]+ 및 370 (100%) [M+H]+.
화합물 177m: 0.137 g, 83%: m/z 350 [M+H]+.
화합물 177n: 0.35 g, >100%: m/z 350 (100%) [M+H]+.
화합물 177o: 0.22 g, 82%: m/z 350 (100%) [M+H]+.
화합물 178a: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 (5.5 mL, 0.55 mmol) 용액을 화합물 177a (0.152 g, 0.5 mmol)에 가하였다. 에탄올/물의 9/1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 25% EtOAc/헥산) 하여 화합물 178a (18 mg, 12%): m/z 300 [M+H]+.
화합물 178b-178o ( 반응식 31).
화합물 R 177b-o ( mmol ) NH 2 OH . HCl ( mmol ) Ethanol ( mL ) 수율 (%)
178b Me 0.45 Not given Not given 정량적
178c i-Pr 0.616 0.921 10 96
178d H 0.712 1.065 10 88
178e Ph 0.711 1.065 10 정량적
178f t-Bu 0.464 0.69 10 정량적
178g CF3 0.613 0.92 10 85
178h 4-Cl-Ph 0.434 0.65 20 90
178i 2-Cl-Ph 0.82 1.24 20 정량적
178j 3-Me-Ph 0.369 0.55 10 정량적
178k 4-MeO-Ph 0.362 0.55 10 정량적
178l Me-티아졸 1.02 1.58 20 정량적
178m 3-피리딜 0.391 0.59 10 82
178n 4-피리딜 0.85 1.29 50 83
178o 2-피리딜 0.63 0.94 25 45
일반 제조법 I: 화합물 177b-o (사용량 참조: 표 11)을 EtOH (사용량 참조: 표 11)에 넣고, 하이드록실아민 염산염 (사용량 참조: 표 11)을 가하였다. 하룻밤 50 ℃에서 N2 하에 반응혼합물을 교반하였다 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 포화 NaHCO3 (aq)과 포화 NaCl (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 178b: 0.13 g, 정량적: m/z 284 [M+H]+.
화합물 178c: 0.183 g, 96%: m/z 312 [M+H]+.
화합물 178d: 0.168 g, 88%: m/z 270 [M+H]+.
화합물 178e: 0.247 g, 정량적: m/z 346 [M+H]+.
화합물 178f: 0.167 g, 정량적: m/z 326 [M+H]+.
화합물 178g: 0.175 g, 85%: m/z 338 [M+H]+.
화합물 178h: 0.149 g, 90%: m/z 380, 382 (3:1) [M+H]+.
화합물 178i: 0.31 g, ~100%: m/z 380/382 (100/63%) [M+H]+.
화합물 178j: 0.152 g, 정량적: m/z 360 [M+H]+.
화합물 178k: 0.146 g, 정량적: m/z 376 [M+H]+.
화합물 178l: 0.37 g, ~100%: m/z 367 (100%), [M+H]+.
화합물 178m: 0.111 g, 82%: m/z 347 [M+H]+.
화합물 178n: 0.24 g, 83%: m/z 347 (100%), [M+H]+.
화합물 178o: 0.097 g, 45%: m/z 347 (100%), [M+H]+.
화합물 179a: 화합물 178a (18 mg, 0.06 mmol)을 3:1의 MeOH/THF 혼합물 (1.6 mL)에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (0.066 mL, 1.18 mmol)을 가하였다. 55 ℃에서 5.5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 179a (13.3 mg, 74%).
화합물 179b-179o (반응식 31).
화합물 R 178b-o mmol MeONa/ MeOH (30%w/w, mL ) MeOH ( mL ) 수율 (%)
179b Me 0.45 Not given Not given 정량적
179c i-Pr 0.588 0.55 20 77
179d H 0.625 0.60 20 76
179e Ph 0.711 0.67 10 92
179f t-Bu 0.464 0.44 10 81
179g CF3 0.518 0.49 10 80
179h 4-Cl-Ph 0.392 0.37 10 92
179i 2-Cl-Ph 0.82 0.77 20 68
179j 3-Me-Ph 0.369 0.35 10 90
179k 4-MeO-Ph 0.362 0.34 10 91
179l Me-티아졸 1.02 0.96 20 82
179m 3-피리딜 0.320 0.30 10 72
179n 4-피리딜 0.71 0.66 20 정량적
179o 2-피리딜 0.28 0.27 25 65
일반 제조법 J: 화합물 178b-o (사용량 참조: 표 12)을 MeOH에 넣고 (사용량 참조: 표 12), 30% NaOMe/MeOH (사용량 참조: 표 12)을 가하였다. N2 하에 50 ℃에서 2시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 이어서 실온에서 하룻밤. 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 포화 NaHCO3 (aq)과 포화 NaCl (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 179b: 0.13 g, 정량적: m/z 284 [M+H]+.
화합물 179c: 0.141 g, 77%: m/z 312 [M+H]+.
화합물 179d: 0.128 g, 76%: m/z 270 [M+H]+.
화합물 179e: 0.225 g, 92%: m/z 346 [M+H]+.
화합물 179f: 0.123 g, 81%: m/z 326 [M+H]+.
화합물 179g: 0.140 g, 80%: m/z 338 [M+H]+.
화합물 179h: 0.137 g, 92%: m/z 380, 382 (3:1) [M+H]+.
화합물 179i: 0.21 g, 68%: m/z 380/382 (100/52%) [M+H]+.
화합물 179j: 0.119 g, 90%: m/z 360 [M+H]+.
화합물 179k: 0.123 g, 91%: m/z 376 [M+H]+.
화합물 179l: 0.31 g, 82%: m/z 367 (100%) [M+H]+.
화합물 179m: 0.080 g, 72%: m/z 347 [M+H]+.
화합물 179n: 0.25 g, >100%: m/z 347 (100%) [M+H]+.
화합물 179o: 0.063 g, 65%: m/z 347 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63528: 화합물 179a (13.3 mg, 0.044 mmol)을 무수 DMF (0.26 mL)에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 다이브로모다이메틸히단토인 (8.0 mg, 0.028 mmol)을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘 (0.034　mL, 0.416 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 25% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 TX63528 (6.5 mg, 50%). m/z 298 [M+H]+.
반응식 31의 화합물.
화합물 R 179b-o ( mmol ) DBDMH ( mmol ) 피리딘 ( mL ) 수율 (%)
TX63468 Me 0.45 Not given Not given 51
TX63534 i-Pr 0.454 0.273 0.37 38
TX63542 H 0.478 0.29 0.37 54
TX63552 Ph 0.652 0.392 0.53 51
TX63561 t-Bu 0.377 0.227 0.30 44
TX63567 CF3 0.415 0.248 0.34 38
TX63582 4-Cl-Ph 0.361 0.217 0.30 35
TX63612 2-Cl-Ph 0.56 0.28 0.45 67
TX63583 3-Me-Ph 0.330 0.199 0.27 35
TX63590 4-MeO-Ph 0.328 0.196 0.27 38
TX63628 Me-티아졸 0.84 0.42 0.70 23
TX63586 3-피리딜 0.232 0.140 0.20 26
TX63636 4-피리딜 0.71 0.35 0.60 51
TX63641 2-피리딜 0.18 0.091 0.15 25
일반 제조법 K: 화합물 179b-o (사용량 참조: 표 13)을 DMF (10 mL)에 녹이고, 그 용액의 온도를 N2하에서 0 ℃로 내렸다. 다이브로모다이메틸히단토인 (DBDMH) (사용량 참조: 표 13)을 가하고, 0 ℃에서 2시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 피리딘 (사용량 참조: 표 13)을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 50 ℃에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 포화 NaHCO3 (aq), 포화 KH2PO4 (aq) 및 포화 NaCl (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 대응하는 유도체들을 얻었다:
화합물 TX63468 : 65 mg g, 51%: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.88 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 3.00 (dd, 1H, J = 6.3, 17.2 Hz), 2.85 (ddd, 1H, J = 7.6, 11.4, 17.2 Hz), 2.73 (s, 3H), 2.21 (dd, 1H, J = 2.2, 12.5 Hz), 2.06 (m, 1H), 1.96 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); m/z 282 [M+H]+.
화합물 TX63534 : 53 mg, 38%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.88 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 3.18-3.27 (m, 1H), 3.00 (dd, 1H, J = 15.0, 10.0 Hz), 2.81-2.91 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 10.0, 5.0 Hz), 2.03-2.09 (m, 1H), 1.90-2.01 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.28 (s, 3H); m/z 310 [M+H]+.
화합물 TX63542 : 56.8 mg, 54%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ9.04 (br s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.55 (br s, 1H), 3.02 (dd, 1H, J = 6.1, 17.5 Hz), 2.92-2.84 (m, 1H), 2.20 (dd, 1H, J = 1.8, 12.6 Hz), 2.06-2.02 (m, 1H), 1.93 (dddd, 1H, J = 6.5, 12.0, 12.3, 12.6 Hz), 1.45 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z 268 [M+H]+.
화합물 TX63552 : 114 mg, 51%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.95 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.43 (m, 2H), 7.50 (m, 3H), 3.03 (dd, 1H, J = 6.1, 17.5 Hz), 2.92-2.85 (m, 1H), 2.25 (d, 1H, J = 12.4 Hz), 2.08-2.01 (m, 1H), 1.99-1.92 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 344 [M+H]+.
화합물 TX63561 : 54 mg, 44%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.81 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 2.95 (dd, 1H, J = 6.0, 17.3 Hz), 2.80 (dddd, 1H, J = 7.3, 8.8, 8.9, 11.4 Hz), 2.20 (dd, 1H, J = 1.9, 12.5 Hz), 2.03-1.99 (m, 1H), 1.91 (dddd, 1H, J = 6.4, 12.3, 12.5, 12.6 Hz), 1.43 (s, 3H), 1.39 (s, 9H), 1.28 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z 324 [M+H]+.
화합물 TX63567 : 52 mg, 38%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.70 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 3.12 (dd, 1H, J = 6.1, 18.1 Hz), 2.96 (dddd, 1H, J = 7.5, 9.1, 9.3, 10.9 Hz), 2.23 (dd, 1H, J = 2.1, 12.8 Hz), 2.12-2.08 (m, 1H), 1.98 (dddd, 1H, J = 6.6, 12.6, 13.0, 13.3 Hz), 1.49 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 336 [M+H]+.
화합물 TX63582 : 47 mg, 35%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.90 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.39 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 7.46 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 3.04 (dd, 1H, J = 5.8, 17.4 Hz), 2.92-2.85 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 1.8, 12.5 Hz), 2.08-2.04 (m, 1H), 2.01-1.93 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 378, 380 (100%:38%) [M+H]+.
화합물 TX63612 : 140 mg, 67%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.88 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 7.79-7.81 (m, 1H), 7.51-7.54 (m, 1H), 7.39-7.42 (m, 2H), 3.08 (dd, 1H, J=20, 5 Hz), 2.90-2.97 (m, 1H), 2.28 (dd, 1H, J=15, 2.5 Hz), 1.95-2.11 (m, 2H), 1.53 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 378/380 (100/39%) [M+H]+.
화합물 TX63583 : 30 mg, 35%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.95 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.23 (br s, 2H), 7.44-7.30 (m, 2H), 3.04-3.01 (m, 1H), 2.91-2.84 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.25 (d, 1H, J = 12.1 Hz), 2.07-1.95 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 358 [M+H]+.
화합물 TX63590 : 47 mg, 38%: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.98 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.43 (d, 2H, J = 10.0 Hz), 7.05 (d, 2H, J = 5.0 Hz), 3.92 (s, 3H), 3.05 (dd, 1H, J = 20.0, 5.0 Hz), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.28 (dd, 1H, J = 10.0, 5.0 Hz), 1.94-2.13 (m, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.29 (s, 3H); m/z 374 [M+H]+.
화합물 TX63628: 70 mg. 23%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.93 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 3.09 (dd, 1H, J = 6.2, 6.1 Hz), 2.93 (m, 1H), 2.86 (s, 3H), 2.28 (dd, 1H, J = 1.8, 1.8 Hz), 2.03 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.29 (s, 3H); m/z 365 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63586 : 21 mg, 26%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ9.69 (s, 1H), 8.91 (dt, 1H, J = 1.5, 8.0 Hz), 8.86 (s, 1H), 8.75 (dd, 1H, J = 1.0, 4.8 Hz), 8.63 (s, 1H), 7.62 (dd, 1H, J = 5.0, 7.9 Hz), 3.08 (dd, 1H, J = 6.0, 17.9 Hz), 2.93 (dddd, 1H, J = 7.3, 9.0, 9.0, 11.0 Hz), 2.25 (dd, 1H, J = 2.3, 12.6 Hz), 2.11-2.06 (m, 1H), 2.02-1.94 (dddd, 1H, J = 6.5, 12.5, 12.9, 13.5 Hz), 1.52 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 345 [M+H]+.
화합물 TX63636: 120 mg, 51%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.94 (s, 1H), 8.83 (d, 2H, J = 5.14), 8.68 (s, 1H), 8.32 (d, 2H, J = 5.45), 3.12 (dd, 1H, J = 6.17, 11.64, 6.04 Hz), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.30 (dd, 1H, J = 1.93, 10.6, 2.03), 2.17-1.97 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.31 (s, 3H); m/z 345 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63641: 15 mg, 25%: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.98 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.55 (d, 1H, J = 7.7), 7.92 (t, 1H, 7.2, 7.2), 7.49 (t, 1H, J = 5.25, 5.7), 3.14 (dd, 1H, J = 5.99, 12.01, 5.25 Hz), 3.04-2.91 (m, 1H), 2.31 (d, 1H, J = 11.88), 2.18-1.94 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.31 (s, 3H); m/z 345 (100%), [M+H]+.
화합물 180: 화합물 25 (1.4 g, 5.5 mmol)의 THF (10 mL) 중 용액을, 다이메틸 카보네이트 (6 당량) 및 NaH (과량)의 THF (10 mL) 중의 환류 중인 혼합물에 가하고, 3시간 동안 환류 교반하여 반응시켰다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 KH2PO4 (aq)으로 반응을 종료시키고 EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 180 (1.5 g, 87%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 311 [M+H]+.
화합물 181: 아세트아미드 염산염 (5.3 g, 55 mmol)와 피페리딘 (2.4 g, 28 mmol)의 i-PrOH (20 mL) 중 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다, 이어서 화합물 184 (1.5 g, 4.8 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 2일 동안 가열 환류하고, 이어서 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 15 내지 65 % EtOAc 용액) 하여 화합물 181 (0.95 g, 62%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 319 [M+H]+.
화합물 182: 화합물 185 (468 mg, 1.47 mmol)을 CHCl3 (15 mL)에 넣고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 트리에틸아민 (1.5 당량) 및 Tf2O (1.1 당량)을 가하고, 0 ℃에서 2시간 동안 교반하여 반응시켰다. 반응혼합물을 물로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 15% EtOAc 용액헥산 중의 15% EtOAc 용액, 83%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 451 [M+H]+.
화합물 183: 화합물 182 (548 mg, 1.22 mmol), 페닐보론산 (1.2 당량), Ph3P (0.36 당량), K3PO4 (3 당량) 및 DME의 혼합물을, 10 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(OAc)2 (0.18 당량)을 가하고, 10 분 동안 계속 N2를 살포하였다. 반응혼합물을 85 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 35 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 183 (380 mg, 83%)을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다: m/z 379 [M+H]+.
화합물 184: 화합물 183 (0.38 g, 1.0 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 포화 NaHCO3로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 184 (0.36 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 335 [M+H]+.
화합물 185: 화합물 184 (0.36 g, 1.0 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. KH2P04 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 184 (0.37 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 363 [M+H]+.
화합물 186: 하이드록실아민 염산염 및 185 (0.37 g, 1.0 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 하룻밤 50 ℃에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 186 (0.37 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 360 [M+H]+.
화합물 187: 화합물 186 (0.37 g, 1.0 mmol)을 2/1의 THF/메탄올 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 KH2P04을 첨가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 187 (0.37 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 360 [M+H]+.
화합물 TX63529 : 화합물 187 (0.37 g, 1.0 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약2시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 oC에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 25 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63529 (0.24 g, 67%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.86 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.50 (s, 3H), 2.88 (m, 1H), 2.76 (dd, 1H, J = 5.8, 17.0 Hz, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.36 (dd, 1H, J = 2.0, 12.4 Hz), 1.92 (m, 1H), 1.83 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 358 [M+H]+.
화합물 188: 화합물 26 (148 mg, 0.53 mmol) 및 우레아 (2 당량)의 다이옥산 중의 혼합물을, 3일 동안 환류 교반하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 MeOH로 취하고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 3일 동안 반응혼합물을 환류 교반하고, 이어서 실온으로 식히고, 아세트산 (0.2 mL) 및 물 (2 mL)로 희석하고, 농축하였다. 잔사를 1 N HCl (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 188 을 갈색 오일 상태로 수득하였다. m/z 305 [M+H]+.
화합물 189: 화합물 188을 MeOH에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하고,이어서 반응혼합물을 농축하고, 포화 NaHCO3, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 189 (98 mg, 71%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 261 [M+H]+.
화합물 190: 화합물 189 (98 mg, 0.38 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 추가로 에틸포메이트 (5 mL)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, KH2PO4 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 25-100% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 190 (52.7 mg, 49%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 289 [M+H]+.
화합물 191: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 190 (52.7 mg, 0.18 mmol)에 가하였다. EtOH/물의 9:1 혼합물을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 191 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 286 [M+H]+.
화합물 192: 화합물 191을 3:1의 MeOH/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 55 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. HOAc을 첨가하여 반응을 종료시킨 후 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 10% MeOH/CH2Cl2 )로 정제하여 화합물 192 (7.8 mg, 15%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 286 [M+H]+.
화합물 TX63553: 화합물 192 (7.8 mg, 0.027 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 8% MeOH/CH2Cl2), 이어서 분취 박층크로마토그래피 (실리카 겔, EtOAc)로 정제하여 화합물 TX63553 (2.4 mg, 31%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.74 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.23 (br s, 1H), 2.84 (dd, 1H, J = 6.5, 16.6 Hz), 2.71-2.64 (m, 1H), 2.14 (dd, 1H, J = 2.0, 12.5 Hz), 1.94-1.85 (m, 2H), 1.47 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.19 (s, 3H); m/z 284 [M+H]+.
화합물 193: 화합물 129 (898 mg, 3.37 mmol), 아세트아미드 염산염 (3.2 g, 34 mmol) 및 피페리딘 (2.0 ml, 20 mmol)의 i-PrOH (15 mL) 중 용액을 2일 동안 가열 환류하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CHCl3로 취하고, 10% NH4OH (aq) 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액) 하여 화합물 193 (464 mg, 48%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 289 [M+H]+.
화합물 194: 화합물 193 (464 mg, 1.61 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 16시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 10% NH4OH (aq)로 희석하고, CHCl3로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 193 (371 mg, 94%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 245 [M+H]+.
화합물 195: 화합물 194 (371 mg, 1.52 mmol)을 벤젠 (20 mL)에 넣고, 이어서 에틸포메이트 (1.25 mL) 및 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 16시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 농축하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 194 (371 mg, 90%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 273 [M+H]+.
화합물 196: 하이드록실아민 염산염 및 195 (371 mg, 1.36 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 16시간 동안 50 oC에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 포화 NaHCO3 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 196 (361 mg, 98%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 270 [M+H]+.
화합물 197: 화합물 196 (361 mg, 1.34 mmol)을 메탄올에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축한 후 EtOAc로 희석하고, 이어서 포화 KH2PO4 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 197 (287 mg, 80%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 270 [M+H]+.
화합물 TX63554 : 화합물 197 (287 mg, 0.80 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약1시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축한 후 EtOAc로 희석하고, 이어서 포화 KH2PO4 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63554 (145 mg, 51%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.89 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 2.96 (dd, 1H, J = 6.8, 17.5 Hz), 2.86 (ddd, 1H, J = 7.0, 10.9, 17.1 Hz), 2.74 (s, 3H), 2.60 (qd, 1H, J = 6.7, 13.1 Hz), 2.15 (m, 2H), 1.82 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.33 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z 268 [M+H]+.
화합물 198: 화합물 129 (330 mg, 1.24 mmol), 아세트아미드 염산염 (1.94 g, 12.4 mmol) 및 피페리딘 (0.74 ml, 7.5 mmol)의 i-PrOH (10 mL) 중 용액을 85 ℃에서 4일 동안 가열하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 CHCl3로 취하고, 10% NH4OH (aq) 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 20 % EtOAc 용액) 하여 화합물 198 (260 mg, 60%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 351 [M+H]+.
화합물 199: 화합물 198 (260 mg, 0.74 mmol)을 메탄올에 넣고, 3 N HCl (aq)을 가하였다. 16시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 10% NH4OH (aq)로 희석하고, CHCl3로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 199 (217 mg, 95%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. m/z 307 [M+H]+.
화합물 200: 화합물 199 (217 mg, 0.71 mmol)을 벤젠 (20 mL)에 넣고, 이어서 에틸포메이트 (1.25 mL) 및 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 16시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 농축하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 200 (216 mg, 91%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 335 [M+H]+.
화합물 201: 하이드록실아민 염산염 및 200 (216 mg, 0.65 mmol)의 에탄올 중의 혼합물을, 4시간 동안 50 oC에서 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3 (aq) 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 200 (190 mg, 89%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 332 [M+H]+.
화합물 202: 화합물 201 (190 mg, 0.57 mmol)을 메탄올에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 16시 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축한 후 EtOAc로 희석하고, 이어서 포화 KH2PO4 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 201 (228 mg, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 332 [M+H]+.
화합물 TX63569 : 화합물 202 (228 mg, 0.57 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약1시간) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축한 후 EtOAc로 희석하고, 이어서 포화 KH2PO4 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 TX63569 (68 mg, 36%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ9.01 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.49 (m, 2H), 7.55 (m, 3H), 3.04 (dd, 1H, J = 6.5, 17.8 Hz), 2.94 (ddd, 1H, J = 7.3, 11.3, 17.8 Hz), 2.64 (qd, 1H, J = 6.7, 12.7 Hz), 2.22 (m, 2H), 1.88 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.37 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z 330 [M+H]+.
화합물 203: 화합물 25 (0.297 g, 1.18 mmol)을 DCM (50 mL)에 넣고, MgBr-Et2O (0.776 g, 3.0 mmol)을 가하고 이어서 i-Pr2NEt (0.42 mL, 2.3 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 40 분 동안 교반 하였으며, 이 시간 동안 반응혼합물은 점점 오렌지색으로 변하였다. DCM (3 mL) 중의 염화벤조일 (0.347 g, 2.44 mmol)을 적가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. NaHCO3 포화수용액 (10 mL)으로 반응을 종료시킨 후, 상기 층들을 분리하고 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 붉은색을 띤 오일을 얻었다. 생성물의 존재는 질량분석법으로 확인하였다, MS: m/z [M+H]+ 357.0. 이 조 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다. 잔사를 EtOH (16 mL)로 취하고, 상기 용액을 통하여 5 분 동안 질소가스 기포를 불어넣었다 (bubbled through). 페닐하이드라진 (0.5 mL, 5.08 mmol)을 실린지 (syringe)로 가하고, 상기 단단히 밀봉한 바이알을 하룻밤 80 ℃ 에서 교반하면서 가열하였다. 실온으로 식힌 후 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, EtOAc (80 mL)로 취하고, KH2PO4 포화수용액 (15 mL) 및 NaHCO3 포화수용액 (15 mL)으로 세척하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 적색 오일을 얻었다. 생성물의 존재는 질량분석법으로 확인하였다, MS: m/z [M+H]+ 429.1. 이 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다. 조 케탈(ketal) 혼합물을 MeOH (20 mL)에 넣고, 1N HCl (4 mL)을 가하였다. 실온에서 하룻밤 교반하여 반응시키고, 이어서 농축하고, 잔사를 EtOAc 및 NaHCO3 포화수용액(20 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 적색 오일/고체를 얻었다. 상기 오일/고체를 3 회 연속적으로 실리카 겔 (230-400 메쉬, 26 g)에서 20% 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여, 더 극성인 이성질체 (203, 94.4 mg)와 미량의(minor) 덜 극성인 불순물을 수득하였다. MS: m/z [M+H]+ 385.1.
화합물 204: 화합물 203 (91 mg, 0.237 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 204 (90 mg)을 얻었다. m/z [M+H]+ 413.1.
화합물 205: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 203 (90 mg, 0.22 mmol)에 가하였다. 9:1 혼합물의 EtOH/H2O을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 10 g)에서 20% 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 205 (22.8 mg)을 희미한 황색 유리질 상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 410.1.
화합물 206: 화합물 205 (22.8 mg, 0.054 mmol)을 3:1의 MeOH/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 55 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 206 (22 mg) 을 회색을 띤 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. 이 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다.
화합물 TX63605 : 화합물 206 (22 mg, 0.038 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사물을 실리카 겔에서 3:1의 헥산/EtOAc로 2회 크로마토그래피 하고 이어서 3:1의 헥산/EtOAc 을 이용하여 분취 박층크로마토그래피 하여 화합물 TX63605 (4.5 mg) 을 유리질 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.73-7.76 (m, 2H), 7.36-7.60 (m, 9H), 3.00-3.08 (m, 1H), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.41-2.44 (m, 1H), 1.92-2.10 (m, 2H), 1.62 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z [M+H]+ 408.1.
화합물 208: 화합물 207 (4.0 g, 19 mmol)을 t-BuOH에 넣고, KOt-Bu의 t-BuOH 용액을 가하였다. 20 분 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고 이오도메탄 (iodomethane)을 가하였다. 45 분 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 포화 NH4Cl (aq)으로 반응을 종료시킨 후, 농축하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 208 (2.5 g, 55%)을 엷은 황색 액체 상태로 수득하였다: m/z 177 (M-CH3OCH2OH).
화합물 209: 화합물 208 (2.5 g, 10 mmol)을 N2하 EtOAc에 넣고, 10% Pd/C 을 가하였다. 플라스크를 H2로 엄격하게 퍼지(purge)시키고, 하룻밤 실온에서 교반하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하여 화합물 209 (2.5 g, 99%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.70 (d, 1H, J = 7 Hz), 4.61 (d, 1H, J = 7 Hz), 3.65 (t, 1H, J = 6 Hz), 3.38 (s, 3H), 2.58 (td, 1H, J = 7, 17 Hz), 2.25 (td, 1H, J = 7, 17 Hz), 1.91 (m, 3H), 1.77 (m, 2H), 1.53 (m, 1H), 1.23 (s, 6H), 1.10 (m, 1H), 1.01 (s, 3H).
화합물 210: 화합물 209 (2.5 g, 10 mmol), 에틸렌글리콜, 및 p-톨루엔설폰산 수화물의 톨루엔 중의 혼합물을, 3시간 동안 물의 공비적 제거 (azeotropic removal)와 함께 가열 환류하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 포화 NaHCO3 (aq) 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 CH2Cl2 에 넣고 PDC (1.5 당량)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 22시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고(용출액: CH2Cl2), 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 210 (1.8 g, 73%)을 무색 오일 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 3.90 (m, 4H), 2.33 (m, 1H), 2.10 (m, 2H), 1.94 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 1.72 (m, 2H), 1.49 (m, 1H), 1.26 (m, 1H), 1.25 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 0.88 (s, 3H)..
화합물 211: 화합물 210 (0.81 g, 3.4 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (8.2 mL), 온도를 0 ℃로 내리고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH, 9.6 mL)을 가하였다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 1시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 t-BuOMe로 희석하고, 온도를 0 ℃로 내리고, 진한HCl (4.25 mL)으로 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 211 (0.92 g, 정량적)을 점성 오일 상태로 수득하였다. m/z 267 [M+H]+.
화합물 212: 화합물 211 (0.90 g, 3.4 mmol) 및 메틸하이드라진 (0.20　g, 4.4 mmol)의 에탄올 (20 mL) 중의 혼합물을, 65 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 50 내지 75 % EtOAc 용액) 하여 화합물 212 (0.25 g, 27%)을 점성 오일 상태로 수득하였다. m/z 277 [M+H]+.
화합물 213: 화합물 212 (0.25 g, 0.91 mmol)을 THF에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 24시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 포화NaHCO3 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 213 (0.19 g, 90%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 233 [M+H]+.
화합물 214: 화합물 213 (0.27 g, 1.2 mmol)의 THF 용액을, -78 ℃ 의 LDA (2.5 당량)의 THF 용액에 가하였다. -78　℃ 에서 30 분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 TsCN (1.3 당량)의 THF 용액을 가하였다. -78 ℃ 에서 추가로 30분 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 포화 NH4Cl (aq)으로 반응을 종료시킨 후 실온으로 온도를 올렸다. 반응혼합물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 50 % EtOAc/CH2Cl2)로 정제하여 화합물 214 (0.24 g, 80%)을 고체 상태로 수득하였다. m/z 258 [M+H]+.
화합물 TX63436: 화합물 214 (90 mg, 0.35 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 0 ℃에서 1시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 이어서 온도를 실온으로 올리고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 60 oC 에서 하룻밤 교반하여 반응시키고. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 에틸아세테이트로 추출하고, 1 N HCl (aq), 포화 NaHCO3 (aq) 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사물을 EtOAc으로부터 재결정화하여 화합물 TX63436 (41 mg, 46%)을 결정성 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.24 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 2.95 (br t, 1H, J = 10 Hz), 2.82 (dd, 1H, J = 8, 15 Hz), 2.18 (dd, 1H, J = 10, 15 Hz), 1.81 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 256 [M+H]+.
화합물 216: 화합물 215 (2.8 g, 9.5 mmol)을 N2 하에서 THF (75 mL)에 넣고, 10% Pd/C (0.25 g) 을 가하였다. 반응혼합물을 0 ℃로 냉각시키고 플라스크를 H2로 엄격하게 퍼지(purge)시켰다. 0 ℃에서 8시간 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 하룻밤 실온에서 교반하였다. 플라스크를 다시 0 ℃로 식히고, 추가로 10% Pd/C (0.20 g)을 가하였다. 플라스크를 H2로 엄격하게 퍼지(purge)시키고, 0 ℃에서 8시간 동안 교반하여 반응시키고, 이어서 3일 동안 실온에서 교반하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하였다. 잔사를 MeOH (50 mL)로 취하고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH, 0.5 mL)을 가하였다. 실온에서 하룻밤 교반하여 반응시키고 이어서 농축하였다. 반응혼합물을 포화 NH4Cl (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 3 내지 5 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 216 (1.18 g, 42%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 297 [M+H]+.
화합물 217: 화합물 216 (0.95 g, 3.2 mmol), 에틸렌글리콜, 및 p-톨루엔설폰산 수화물의 톨루엔 중의 혼합물을, 3시간 동안 물의 공비적 제거 (azeotropic removal)와 함께 가열 환류하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 포화 NaHCO3 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 217 (1.09 g, 정량적)을 오일형태로 수득하였다. m/z 342 [M+H]+.
화합물 218: 화합물 217 (1.33 g, 3.91 mmol)을 THF에 넣고, TBAF 수화물 (1.1 당량)을 가하였다. 실온에서 3일 동안 교반하여 반응시키면서, 처음 8 및 24시간 경과 후에 TBAF 수화물 (0.55 당량)를 추가로 더 가하였다. 반응혼합물을 포화 NaHCO3 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 40 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 218 (0.83 g, 94%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 227 [M+H]+.
화합물 219: 화합물 218 (0.83 g, 3.67 mmol)을 CH2Cl2 에 넣고 PDC (1.5 당량)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고(용출액: CH2Cl2) 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 219 (0.82 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 225 [M+H]+.
화합물 220: 화합물 219 (0.80 g, 3.6 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 온도를 0 ℃로 내리고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 2시간 동안 교반하였다. 포화 NH4Cl (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 220 (0.90 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 253 [M+H]+.
화합물 221: 화합물 220 (0.70 g, 2.8 mmol) 및 메틸하이드라진 (0.32　g, 6.9 mmol)의 에탄올 (13 mL) 중의 혼합물을, 65 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 80 내지 100 % EtOAc 용액)을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. 얻어진 잔사를 THF에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 3 일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 포화 NaHCO3 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 221 (0.50 g, 83%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 219 [M+H]+.
화합물 222: 화합물 221 (225 mg, 1.03 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 온도를 0 ℃로 내리고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 2시간 동안 교반하였다. 포화 KH2PO4 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 222 (0.28 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 247 [M+H]+.
화합물 223: 화합물 222 (0.28 g, 1.03 mmol)을 에탄올/물의 9/1 혼합물에 넣고, 하이드록실아민 염산염을 가하였다. 하룻밤 60 oC에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 포화 NaHCO3 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 223 (0.26 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 244 [M+H]+.
화합물 224: 화합물 223 (0.25 g, 1.03 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4 을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 224 (0.15 g, 60%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 244 [M+H]+.
화합물 TX63533: 화합물 224 (150 mg, 0.62 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 0 ℃에서 1시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 이어서 온도를 실온으로 올리고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 이어서 60 ℃에서 2시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 희석하고, 1 N HCl (aq), 포화 NaHCO3 (aq) 및 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 수성의 분획들을 합하여 CHCl3로 추출하고, 이를 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사물들을 합하여 연속적으로 칼럼 크로마토그래피 하여 정제하였는데, 먼저 (실리카 겔, 50 % EtOAc/CH2Cl2)로 수행하고, 이어서 (실리카 겔, 2 % MeOH/CH2Cl2)로 수행하여 화합물 TX63533 (30 mg, 20%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.28 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.95 (ddd, 1H, J = 6.2, 10.8, 13.9 Hz), 2.86 (qd, 1H, J = 6.5, 13.7 Hz), 2.73 (dd, 1H, J = 6.1, 13.9 Hz), 2.46 (dd, 1H, J = 10.8, 13.9 Hz), 1.36 (s, 3H), 1.33 (d, 3H, J = 6.6 Hz); m/z 242 [M+H]+.
화합물 225: 화합물 216 (0.61 g, 2.1 mmol)을 MeCN에 넣고, 이어서 헥사메틸다이실라잔 (10 당량) 및 NaI (5 당량)을 가하고, 실온에서 5 분 동안 반응혼합물을 교반하였다. 클로로트리메틸실란 (5 당량)을 가하고, 실온에서 하룻밤 반응용액을 교반하였다. 반응혼합물을 포화 NH4Cl (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 짧은 실리카 패드로 여과하고 (EtOAc로 용출), 농축하였다. 잔사를 MeCN로 취하고, Pd(OAc)2 (2 당량)을 가하고, 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 짧은 실리카 패드로 여과하고 (EtOAc로 용출), 포화 NaHCO3 (aq) 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 10% EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 225 (0.48 g, 79%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. m/z 295 [M+H]+.
화합물 226: 화합물 225 (0.47 g, 1.6 mmol)의 THF 용액을, 0 ℃의 KHMDS (2 당량)의 THF 용액에 가하였다. 0 ℃에서 30 분 동안 반응용액을 교반하고, 이어서 요오드화메틸 (4 당량)을 가하였다. 0 ℃에서 30 분 동안 반응혼합물을 교반하고, 포화 NH4Cl (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 5 내지 10 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 226 (0.40 g, 81%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. m/z 309 [M+H]+.
화합물 227: 화합물 226 (0.39 g, 1.3 mmol)을 N2 하에서 THF에 넣고, 10% Pd/C 을 가하였다. 플라스크를 H2로 엄격하게 퍼지(purge)시키고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 여과하고 농축하여 화합물 227 (0.39 g, 99%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 311 [M+H]+.
화합물 228: 화합물 227 (0.39 g, 1.3 mmol)을 CH2Cl2 (2　ml)에 넣고, 이어서 메틸에틸다이옥솔란 (3 ml), 에틸렌글리콜 (1 방울), 및 p-톨루엔설폰산 (cat.)을 가하였다. 실온에서 2일 동안 반응용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 228 (0.44 g, 99%)을 오일형태로 수득하였다. m/z 355 [M+H]+.
화합물 229: 화합물 228 (0.44 g, 1.3 mmol)을 THF에 넣고, TBAF의 THF (1.0 M, 2 ml) 중 용액을 가하였다. 실온에서 4일 동안 교반하여 반응시키면서, 처음 24 및 48시간 경과 후에 TBAF 수화물 (0.65 당량) 를 추가로 더 가하였다. 반응혼합물을 포화 NaHCO3 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 40 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 229 (0.27 g, 89%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 241 [M+H]+.
화합물 230: 화합물 229 (0.27 g, 1.1 mmol)을 CH2Cl2에 넣고, PDC (1.5 당량)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 셀라이트로 여과하고(용출액: CH2Cl2) 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 20 % EtOAc 용액)로 정제하여 화합물 230 (0.24 g, 90%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 239 [M+H]+.
화합물 231: 화합물 230 (0.23 g, 0.97 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 온도를 0 ℃로 내리고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 2시간 동안 교반하였다. 포화 NH4Cl (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 231 (0.29 g, 정량적) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 267 [M+H]+.
화합물 232: 화합물 231 (0.29 g, 0.97 mmol) 및 메틸하이드라진 (90 mg, 2.0 mmol)의 에탄올 (0.5 mL) 중의 혼합물을, 65 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 75% EtOAc 용액) 하여 흰색 고체를 수득하였다. 얻어진 잔사를 THF에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 2일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 포화 NaHCO3 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 232 (0.17 g, 76%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 233 [M+H]+.
화합물 233: 화합물 232 (0.17 g, 0.73 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 온도를 0 ℃로 내리고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고 2시간 동안 교반하였다. 포화 KH2PO4 (aq)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 233 (0.19 g, 96%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 261 [M+H]+.
화합물 234: 화합물 233 (0.19 g, 0.73 mmol)을 에탄올/물의 8/1 혼합물에 넣고, 하이드록실아민 염산염을 가하였다. 하룻밤 60 oC에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 포화 NaHCO3 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 234 (0.17 g, 91%) 황색 고체 상태로 수득하였다. m/z 258 [M+H]+.
화합물 235: 화합물 234 (0.17 g, 0.66 mmol)을 1/1의 메탄올/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 50 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4 을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc로 추출하고, 이어서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 50 % EtOAc/CH2Cl2)로 정제하여 화합물 235 (0.12 g, 71%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. m/z 258 [M+H]+.
화합물 TX63559: 화합물 235 (0.12 g, 0.47 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 0 ℃에서 1시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 이어서 온도를 실온으로 올리고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 이어서 60 ℃에서 5시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 50 % EtOAc/CH2Cl2) 하여 화합물 TX63559 (85 mg, 71%) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.29 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.11 (dd, 1H, J = 6.3, 11.3 Hz), 2.67 (dd, 1H, J = 6.3, 13.8 Hz), 2.60 (dd, 1H, J = 11.4, 13.6 Hz), 1.40 (s, 6H), 1.32 (s, 3H); m/z 256 [M+H]+.
화합물 236: 화합물 68 (260 mg, 0.70 mmol)의 다이옥산 (4 mL) 중 용액에, Et3N (0.5 mL) 및 CuI (6.7 mg, 0.035 mmol)을 가하였다. 15 분 동안 질소가스 기포를 상기 혼합물에 불어넣었다. TMS-아세틸렌 (207 mg, 2.11 mmol) 및 (Ph3P)2PdCl2 (14.8 mg, 0.021 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 밀봉된 용기 내에서 80 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 반응혼합물을 식힌 후 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (20% EtOAc/DCM)하여 9 mg (3%)의 화합물 236 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 387.1 [M+H]+.
화합물 237: 화합물 236 (30 mg, 0.077 mmol)을 THF에 넣고 (3 mL) 및 1M HCl (0.5 mL)을 가하였다. 3일 동안 용액을 교반하고, 이어서 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 26 mg (98%)의 화합물 237을 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 343 [M+H]+.
화합물 238: 237 (26 mg, 0.076 mmol)의 에틸포메이트 (3 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.2 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. KH2PO4 포화수용액 (10 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 26 mg (>100%)의 화합물 238 을 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 299 [M+H]+.
화합물 239: 화합물 238 (0.076 mmol)을 EtOH (3 mL) 및 물 (0.5 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 염산염 (5.8 mg, 0.084 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 60 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (10 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 27 mg (>100%)의 화합물 239 을 황갈색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 296 [M+H]+.
화합물 240: 화합물 239 (0.076 mmol)을 THF에 넣고 (3 mL) 및 MeOH (1 mL) 및 NaOMe (0.1 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (10 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (1:4 EtOAc/DCM)하여 11 mg (50%)의 화합물 240 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 296 [M+H]+.
화합물 TX63651 : 화합물 240 (11 mg, 0.0.037 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (6.4 mg, 0.022 mmol)을 가하고, 3시간 동안 0℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.05 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 식힌 후 그 용액을 진공하에서 농축하여 갈색 오일을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (25% EtOAc/헥산)하여 6 mg (55%)의 화합물 TX63651 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.45 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.63 (s, 1H), 2.85-2.78 (dd, 1H, J = 5.9, 11.5, 5.6 Hz), 2.61-2.52 (m, 1H), 2.18-2.13 (dd, 1H, J = 1.9, 10.26, 1.9), 1.99-1.93 (m, 1H), 1.92-180 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS (APCI): m/z 294 [M+H]+ .
화합물 241: 화합물 68 (305 mg, 0.826 mmol)을 DMAc (5 mL)에 녹였다. 이 용액에 Zn(CN)2 (65 mg, 0.56 mmol), dppf (95 mg, 0.17 mmol) 및 Na2CO3 (90 mg, 0.83 mmol)을 가하였다. 10 분 동안 질소가스 기포를 상기 혼합물에 불어넣었다. Pd(OAc)2 (20 mg, 0.09 mmol)을 가하고, 10 분 동안 더 질소가스 기포를 불어넣었다. 현탁액을 120 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 25 mL 물로 반응을 종료시킨 후, 에테르 (2×50 mL)로 추출하였다. 유기층들을 농축하고, 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-20% EtOAc/헥산 으로 용출하여 화합물 241 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (0.21 g, 80% 수율). MS (APCI): [M+H]+ 316.
화합물 242: 241 (145 mg, 0.46 mmol)의 MeOH (5 mL) 중 용액을 3N HCl( aq ) (1.5 mL)으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2×25 mL) 및 포화 NaHCO3 ( aq ) (15 mL)로 추출하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 241을 폼 상태로 수득하였다 (120 mg, 96%). MS (APCI): [M+H]+ 272.
화합물 243: 실온에서 화합물 242 (120 mg, 0.44 mmol)의 HCOOEt (5 mL) 중 용액에, 30% NaOMe/MeOH (0.5 g, 6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, 포화 수용액 KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 243 (130 mg, 100% 수율). MS (APCI): [M+H]+ 300.
화합물 244: 화합물 243 (130 mg, 0.44 mmol)의 EtOH (5 mL) 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (62 mg, 2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 244 (130 mg, 100%). MS (APCI): [M+H]+ 297.
화합물 245 및 246: 화합물 244 (130 mg, 0.44 mmol)의 2 mL THF 및 1 mL MeOH 중 용액에, 30% NaOMe (0.66 g, 8 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 KH2PO4 (포화, 15 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 245 및 246의 혼합물 (130 mg, 100% 수율). MS (APCI): 297 [M+H]+ 및 315.
TX63613 및 TX63619: 화합물 245 및 246 (130 mg, 0.44 mmol)의 2 mL DMF 중의 혼합물에 0 ℃ 에서, DBDMH (72 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g, 30 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 10-100% EtOAc/헥산으로 용출하여 첫번째로, 덜 극성인 디카보니트릴 화합물 TX63613 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (50 mg, 39% 수율). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.36 (s, 1H), 3.98 (s, 3H), 2.90 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 2.64 (ddd, 1H, J=15, 10, 5 Hz), 2.12 (d, 1H, J=10 Hz), 1.98 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 1.86 (ddd, 1H, J=25, 15, 5 Hz), 1.45 (s, 3H), 1.28 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); MS (APCI): [M+H]+ 295; 이어서 두번째로, 더 극성인 카복사마이드 화합물 TX63619 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (10 mg, 8% 수율). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.46 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.85 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 2.62-2.66 (m, 1H), 2.15 (d, 1H, J=10 Hz), 1.89-1.92 (m, 1H), 1.71-1.84 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.10 (s, 3H); MS (APCI): [M+H]+ 313.
화합물 247: 화합물 241 (110 mg, 0.34 mmol)을, HCl로 포화된 10 mL MeOH에 가하고, 반응혼합물을 60 ℃에서 16시간 동안 밀봉된 병 내에서 가열하였다. 반응혼합물을 농축하고, K2CO3 (conc., 25 mL)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×5mL)로 추출하였다. 상기 추출물을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 247 을 백색 고체 상태로 수득하였다 (105 mg, 100% 수율). MS (APCI): m/z [M+H]+ 305.
화합물 248: 실온에서 화합물 247 (105 mg, 0.36 mmol)의 HCOOEt (5 mL) 중 용액에, 30% NaOMe/MeOH (0.2 g, 3eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, 포화 수용액 KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 247 (110 mg, 88% 수율). MS (APCI): m/z [M+H]+ 347.
화합물 249: 248 (110 mg, 0.32 mmol)의 EtOH (5 mL) 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (50 mg, 2eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고 EtOAc (2x25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 249 (110 mg, 100%). MS (APCI): m/z [M+H]+ 344.
화합물 250 및 251: 248 (110 mg, 0.32 mmol)의 THF+MeOH (2 mL + 1 mL) 중 용액에, NaOEt (1 mL EtOH 중 40 mg Na metal, 5 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 KH2PO4 (포화, 15 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 250 및 251의 혼합물 (110 mg, 100% 수율)을 얻었다. MS (APCI): m/z [M+H]+ 316 및 344.
화합물 TX63630 및 TX63631 : 화합물 250 및 251 (110 mg, 0.32 mmol)의 2 mL DMF 중의 혼합물에 0 ℃에서, DBDMH (51 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g, 40 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 10-100% EtOAc/헥산으로 용출하여 덜 극성인 에틸에스테르 화합물 TX63630 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (40 mg, 37% 수율). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.48 (s, 1H), 4.40-4.34 (q, 2H, J = 7.1, 7.2, 7.1 Hz), 4.15 (s, 3H), 3.10-3.00 (dd, 1H, J = 5.3, 12.32, 5.3 Hz), 2.75-2.63 (m, 1H), 2.18-2.12 (dd, 1H, J = 1.7, 10.49, 1.8), 2.01-1.93 (dd, 1H, J = 6.91, 6.44, 1.93), 1.92-1.81 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.44-1.37 (t, 3H, J = 7.13, 7.08), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); MS (APCI): m/z [M+H]+ 342. 그리고 더 극성인 산 화합물 TX63631을 회색을 띤 백색 고체 상태로 분리하였다 (13 mg, 13% 수율). 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ13.40 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 4.05 (s, 3H), 2.92 (dd, 1H, J = 5.6, 11.8, 5.6 Hz), 2.63-2.54 (m, 1H), 2.19-2.13 (m, 1H), 1.95-1.88 (m, 1H), 1.88-1.75 (m, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); MS (APCI): m/z [M+H]+ 314.
화합물 252: 241 (160 mg, 0.51 mmol)의 톨루엔 (5 mL) 중 용액에, 트리메틸실릴아자이드 (0.13 mL, 1.01 mmol)을 가하고 이어서 다이부틸틴 옥사이드 (13 mg, 0.051 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 하룻밤 110 ℃ 오일 배쓰 (oil bath)에서 가열하였다. 그 용액을 식히고, 압력용기(thick-walled vessel)에 옮겼다. 추가로 트리메틸실릴아자이드 (0.13 mL) 및 다이부틸틴 옥사이드 (13 mg)을 가하고, 그 용액을 하룻밤 130 ℃ 오일 배쓰에서 가열하였다. 식힌 후 MeOH (5 mL)을 가하고, 그 용액을 농축하고 진공 건조하여 0.26 g 의 조 화합물 252을 오렌지색 고체 상태로 수득하였다, MS (APCI): m/z 359.1 [M+H]+.
화합물 253a: 화합물 252을 DMF (5 mL)에 넣고, 탄산칼륨 (0.35 g, 2.55 mmol)을 가하고 이어서 요오드화메틸 (0.16 mL, 2.55 mmol)을 가하였다. 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (50% EtOAc/헥산)하여 112 mg (59%)의 화합물 253a 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 373.1 [M+H]+.
화합물 254a: 화합물 253a (108 mg, 0.29 mmol)을 THF에 넣고 (4 mL) 및 1M HCl (1 mL)을 가하였다. 3일 동안 용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 95 mg (100%)의 화합물 254a 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 329.0 [M+H]+.
화합물 255a: 254a (95 mg, 0.29 mmol)의 에틸포메이트 (4 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.5g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 100 mg (97%)의 화합물 254a 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 357.0 [M+H]+.
화합물 256a: 화합물 255a (100 mg, 0.28 mmol)을 EtOH (2 mL), THF (2 mL), 및 물 (0.5 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 염산염 (21 mg, 0.31 mmol)을 가하고, 실온에서 30 분 동안 교반하여 반응시켰다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다.그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 97 mg (98%)의 화합물 256a 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 354.0 [M+H]+.
화합물 257a: 화합물 256a (97 mg, 0.27 mmol)을 THF에 넣고 (3 mL) 및 MeOH (1 mL) 및 NaOMe (0.5 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하고 하룻밤 교반하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (1:3 EtOAc/DCM)하여 86 mg (89%)의 화합물 257a 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 354.0 [M+H]+.
화합물 TX63665 : 화합물 256a (86 mg, 0.24 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (42 mg, 0.15 mmol)을 가하고, 2시간 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.3 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (15% EtOAc/DCM)하여 64 mg (74%)의 화합물 TX63665 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.53 (s, 1H), 4.46 (s, 3H), 4.24 (s, 3H), 3.15 (dd, 1H, J = 6.1, 17.1 Hz), 2.78 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 1.87-2.05 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); MS (APCI): m/z 352.0 [M+H]+.
화합물 253b: 화합물 252 (0.41 mmol)을 DMF (3 mL)에 넣고, K2CO3 (0.28 g, 2.06 mmol)을 가하고 이어서 벤질브로마이드 (0.1 mL, 0.82 mmol)을 가하였다. 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (30-50% EtOAc/헥산)하여 47 mg (26%)의 화합물 253b 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 449.3 [M+H]+.
화합물 254b: 화합물 253b (44 mg, 0.098 mmol)을 THF에 넣고 (3 mL) 및 1M HCl (0.5 mL)을 가하였다. 2일 동안 용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 40 mg (100%)의 화합물 254b 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 405.3 [M+H]+.
화합물 255b: 254b (95 mg, 0.23 mmol)의 THF (3 mL) 및 에틸포메이트 (1 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.4 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 105 mg (>100%)의 화합물 255b 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 433.1 [M+H]+.
화합물 256b: 화합물 255b (0.23 mmol)을 EtOH (1 mL), THF (3 mL) 및 물 (0.5 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 염산염 (19 mg, 0.28 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 100 mg (100%)의 화합물 256b 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 430.2 [M+H]+.
화합물 257b: 화합물 256b (100 mg, 0.23 mmol)을 3:1의 THF/MeOH (4 mL)에 현탁시키고, NaOMe (0.4 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 70 mg (70%)의 화합물 257b 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 430.2 [M+H]+.
화합물 TX63729 : 화합물 257b (70 mg, 0.16 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N,N'-다이브로모다이메틸히단토인 (28 mg, 0.098 mmol)을 가하고, 90 분 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.3 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (5% EtOAc/DCM)하여 55 mg (79%)의 화합물 TX63729 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.47 (s, 1H), 7.38 (m, 5H), 5.81 (s, 2H), 4.18 (s, 3H), 3.08 (ddd, 1H, J = 1.6, 6.0, 17.1 Hz), 2.73 (ddd, 1H, J = 7.1, 11.7, 18.7, Hz), 2.18 (dd, 1H, J = 2.1, 12.1 Hz), 1.81-1.99 (m, 2H), 1.48 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); MS (APCI): m/z 428.2 [M+H]+.
화합물 253c: 조 화합물 252 (0.41 mmol)을 DMF (3 mL)에 넣고, K2CO3 (0.28 g, 2.05 mmol)을 가하고 이어서 이소프로필 요오드화물 (isopropyl iodide) (0.2 mL, 2.05 mmol)을 가하였다. 하룻밤 반응혼합물을 교반하하고, 물 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.18 g의 순수하지 않은 화합물 253c 을 갈색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 401.2 [M+H]+.
화합물 254c: 조 화합물 253c (0.18 g)을 THF에 넣고 (3 mL) 및 1M HCl (0.5 mL)을 가하였다. 5일 동안 용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 0.15 g의 조 오일 상태로 수득하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (30% EtOAc/헥산)하여 111 mg (76%)의 화합물 254c을 무색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 357.2 [M+H]+.
화합물 255c: 화합물 254c (0.11 g, 0.31 mmol)의 THF (3 mL) 및 에틸포메이트 (1 mL) 중의 용액을 얼음조에서 냉각시켰다. NaOMe (0.5 g, 30 wt% in MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 113 mg (95%)의 화합물 255c 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 385.1 [M+H]+.
화합물 256c: 화합물 255c (113 mg, 0.29 mmol)을 EtOH (1 mL), THF (2 mL) 및 물 (0.5 mL)에 넣고. 하이드록실아민 염산염 (25 mg, 0.35 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 111 mg (99%)의 화합물 256c 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): 382.2 [M+H]+.
화합물 257c: 화합물 256c (111 mg, 0.29 mmol)을 THF:MeOH (4 mL)에 현탁시키고, NaOMe (0.5 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 112 mg (100%)의 화합물 257c 을 밝은 황색 폼(foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 382.2 [M+H]+.
화합물 TX63734 : 화합물 257c (111 mg, 0.29 mmol)을 DMF (3 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N,N'-다이브로모다이메틸히단토인 (50 mg, 0.17 mmol)을 가하고, 90 분 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.5 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 식힌 후 그 용액을 농축하고 진공 건조하여 0.18 g의 밝은 갈색 고체. 플레쉬 크로마토그래피 (5% EtOAc/DCM)하여 75 mg (68%)의 화합물 TX63734 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.50 (s, 1H), 5.16 (septet, 1H, J = 6.7 Hz), 4.22 (s, 3H), 3.13 (ddd, 1H, J = 1.3, 6.0, 17.1 Hz), 2.77 (ddd, 1H, J = 7.1, 11.7, 17.1 Hz), 2.22 (dd, 1H, J = 2.2, 12.1 Hz), 1.94 (m, 2H), 1.71 (d, 6H, J = 6.7 Hz), 1.52 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS (APCI): m/z 380.2 [M+H]+.
화합물 258: 화합물 241 (115 mg, 0.36 mmol)을 EtOH (2 mL)에 현탁시키고, 하이드록실아민 (70 mg, 50% 용액/물)을 가하였다. 50 ℃에서 하룻밤 가열하고, 이어서 식히고 농축하여 흰색 고체로서 화합물 258을 얻었다. MS (APCI): m/z 349.1 [M+H]+.
화합물 259: 화합물 258 (0.36 mmol)을 다이옥산 (1 mL)에 현탁시키고, 다이메틸아세트아마이드 다이메틸아세탈 (146 mg, 1.09 mmol)의 다이옥산 (1 mL) 중 용액을 가하였다. 반응혼합물을 60 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 황색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (20% EtOAc/DCM)하여 130 mg (96%)의 화합물 259 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) 373.1 [M+H]+.
화합물 260: 화합물 259 (125 mg, 0.34 mmol)을 THF에 넣고 (4 mL) 및 1M HCl (1 mL)을 가하였다. 2일 동안 용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 110 mg (100%)의 화합물 260 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 329.1 [M+H]+.
화합물 261: 260 (110 mg, 0.33 mmol)의 THF (2 mL) 및 에틸포메이트 (2 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.6 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 120 mg (100%)의 화합물 261 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 357.1 [M+H]+.
화합물 262: 화합물 261 (119 mg, 0.33 mmol)을 EtOH (2 mL), THF (2 mL), 및 물 (0.5 mL)에 현탁시켰다. 하이드록실아민 염산염 (28 mg, 0.40 mmol)을 가하고, 실온에서 30 분 동안 교반하여 반응시켰다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (15% EtOAc/DCM)하여 90 mg (77%)의 화합물 262 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 354.1 [M+H]+.
화합물 263: 화합물 262 (90 mg, 0.25 mmol)을 THF (3 mL) 및 MeOH (1 mL)에 현탁시키고, NaOMe (0.5 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하였다 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 88 mg (98%)의 화합물 263 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 354.1 [M+H]+.
화합물 TX63723 : 화합물 263 (88 mg, 0.25 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (43 mg, 0.15 mmol)을 가하고, 90 분 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.4 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (5% EtOAc/DCM)하여 68 mg (78%)의 화합물 TX63723 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.41 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.02 (ddd, 1H, J = 1.3, 6.0, 17.3 Hz), 2.64 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.12 (dd, 1H, J = 2.1, 12.1 Hz), 1.75-1.94 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.16 (s, 3H); MS (APCI) m/z 352.1 [M+H]+.
화합물 264: 조 화합물 252 (0.41 mmol)을 피리딘 (3 mL)에 넣고, 아세트산 무수물 (0.42 mL, 4.44 mmol)을 가하였다. 그 용액을 110 ℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.35 g 의 어두운 갈색 오일을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (1:1 EtOAc/헥산)하여 225 mg의 순수하지 않은 화합물 264 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 373.1 [M+H]+.
화합물 265: 순수하지 않은 화합물 264 (0.22 g, 0.59 mmol)을 THF에 넣고 (3 mL) 및 1M HCl (0.5 mL)을 가하였다. 2일 동안 용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 0.20 g의 조 폼을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (1:1 EtOAc/헥산)하여 66 mg (34%)의 화합물 264 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 329.1 [M+H]+.
화합물 266: 화합물 265 (66 mg, 0.20 mmol)의 THF (2 mL) 및 에틸포메이트 (2 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.36 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 71 mg (99%)의 화합물 266 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 357.2 [M+H]+.
화합물 267: 화합물 266 (71 mg, 0.20 mmol)을 EtOH (1 mL), THF (2 mL) 및 물 (0.5 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 염산염 (17 mg, 0.24 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 하룻밤 50 ℃에서 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (1:1 EtOAc/DCM)하여 20 mg (28%)의 화합물 267 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 354.2 [M+H]+.
화합물 268: 화합물 267 (20 mg, 0.057 mmol)을 1:1의 THF/MeOH (2 mL)에 넣고, NaOMe (0.1 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (10 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 20 mg (100%)의 화합물 268 을 베이지색 폼 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 354.1 [M+H]+.
화합물 TX63735 : 화합물 268 (20 mg, 0.057 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N,N'-다이브로모다이메틸히단토인 (9.7 mg, 0.034 mmol)을 가하고, 90 분 동안 0 ℃. 피리딘 (0.1 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (10% EtOAc/DCM)하여 12 mg (60%)의 화합물 TX63735 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.46 (s, 1H), 4.23 (s, 3H), 3.06 (ddd, 1H, J =1.0, 6.0, 11.2 Hz), 2.75 (ddd, 1H, J = 7.2, 11.7, 17.1 Hz), 2.62 (s, 3H), 2.19 (dd, 1H, J = 2.0, 12.1 Hz), 1.95 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS (APCI): m/z 352.1 [M+H]+.
화합물 269: 화합물 241 (0.47 g, 1.49 mmol)의 EtOH (6 mL) 중 용액에 물 (3 mL)을 가하고 이어서 KOH (0.42 g, 7.45 mmol)을 가하였다. 실온에서 3일 동안 반응용액을 교반하였다. 포화 KH2PO4 용액을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.50 g (100%)의 화합물 269 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 334.2 [M+H]+.
화합물 270: DMA-다이메틸아세탈 (2 mL)을 화합물 269 (135 mg, 0.40 mmol)에 가하고, 반응혼합물을 80 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하여 270 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 403.3 [M+H]+.
화합물 271: 하이드록실아민 염산염 (36 mg, 0.52 mmol)을 다이옥산 (1 mL)에 현탁시키고, Et3N (0.073 mL, 0.52 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 수 분 동안 소니케이션 (sonication)하였다. 270 (0.40 mmol)의 다이옥산 (2 mL) 중 용액을 가하고 이어서 아세트산 (50 mg, 0.83 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 80 ℃에서 1시간 동안 가열하고, 이어서 추가로 하이드록실아민 염산염 (5 mg)을 가하고 이어서 아세트산 (100 mg)을 가하였다. 반응혼합물을 80 ℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 150 mg의 끈적거리는 흰색 폼을 수득하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (25% EtOAc/헥산)하여 86 mg (58%)의 화합물 271 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 373.2 [M+H]+.
화합물 272: 화합물 271 (83 mg, 0.22 mmol)을 THF에 넣고 (2 mL) 및 1M HCl (0.5 mL)을 가하였다. 2일 동안 반응용액을 교반하고, 이어서 포화 NaHCO3 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 75 mg (100%)의 화합물 272 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 329.1 [M+H]+.
화합물 273: 화합물 272 (73 mg, 0.22 mmol)을 THF (2 mL) 및 에틸포메이트 (1 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. NaOMe (0.4 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액(10 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 85 mg (>100%)의 화합물 273 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 357.1 [M+H]+.
화합물 274: 화합물 273 (0.22 mmol)을 THF에 넣고 (2 mL), EtOH (1 mL) 및 물 (0.5 mL). 하이드록실아민 염산염 (23 mg, 0.33 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (10 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 80 mg (>100%)의 화합물 274 을 밝은 황색 폼(foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 354.1 [M+H]+.
화합물 275: 화합물 274 (단계 5) (0.22 mmol)을 2:1의 THF/MeOH (3 mL)에 넣고, NaOMe (0.4 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하였다 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (10 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 78 mg의 밝은 황색 폼(foam)을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (25% EtOAc/헥산)하여 60 mg (77%)의 화합물 275 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 354.2 [M+H]+.
화합물 TX63760 : 화합물 275 (59 mg, 0.17 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N,N'-다이브로모다이메틸히단토인 (29 mg, 0.10 mmol)을 가하고, 90 분 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.3 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (5% EtOAc/DCM)하여 49 mg (84%)의 화합물 TX63760 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.46 (s, 1H), 4.24 (s, 3H), 3.16 (dd, 1H, J = 5.8, 17.7Hz), 2.80 (ddd, 1H, J = 7.1, 11.6, 17.5 Hz), 2.48 (s, 3H), 2.19 (dd, 1H, J = 1.7, 12.1 Hz), 1.95 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS (APCI): m/z 352.2 [M+H]+.
화합물 276: 화합물 269 (29 mg, 0.087 mmol)을 DMF-DMA (2 mL)중 슬러리 상태로 만들고 80 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하여 276 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 389.1 [M+H]+.
화합물 277: 화합물 276 (0.087 mmol)을 다이옥산 (1 mL)에 넣고, HOAc (4 방울s)을 가하고 이어서 메틸하이드라진 (1 방울)을 가하였다. 그 용액을 80 ℃에서 2시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하여 표제의 화합물 277 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 372.1 [M+H]+.
화합물 278: 화합물 277 (0.087 mmol)을 THF에 넣고 (3 mL) 및 1M HCl (0.5 mL)을 가하였다. 하룻밤 반응용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 28 mg (100%)의 화합물 278 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 328.1 [M+H]+.
화합물 279: 화합물 278 (28 mg, 0.087 mmol)의 에틸포메이트 (2 mL) 중의 용액을 얼음조에서 냉각시켰다. NaOMe (0.15 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. KH2PO4 포화수용액 (10 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 30 mg (97%)의 화합물 279 을 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 356.0 [M+H]+.
화합물 280: 화합물 279 (30 mg, 0.084 mmol)을 EtOH (3 mL) 및 물 (0.5 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 염산염 (9 mg, 0.13 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 60 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 포화 수용액 NaHCO3 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (10 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 28 mg (94%)의 화합물 280을 황갈색 폼 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 353.0 [M+H]+.
화합물 281: 화합물 280 (28 mg, 0.079 mmol)을 4:1의 THF/MeOH (2 mL)에 넣고, NaOMe (0.15 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하고 하룻밤 교반하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (10 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (2-5% MeOH/CHCl3)하여 22 mg (79%)의 화합물 280 을 맑은 유리질 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 353.0 [M+H]+.
화합물 TX63714 : 화합물 281 (21 mg, 0.060 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (10.2 mg, 0.15 mmol)을 가하고, 2시간 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.1 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (100% EtOAc)하여 15 mg (71%)의 화합물 TX63714 을 끈적거리는 흰색 폼 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.45 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 2.60 (m, 1H), 2.48 (ddd, 1H, J = 6.6, 11.4, 16.1 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.0, 12.0 Hz), 1.78-1.97 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.21 (s, 3H); MS (APCI): m/z 351.1 [M+H]+.
화합물 TX63587 : 화합물 TX63445 (0.052 g, 0.14 mmol), K3PO4 (0.086 g, 0.40 mmol), 4-페녹시페닐보론산 (0.047 g, 0.22 mmol) 및 디메톡시에탄 (6 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.014 g, 0.012 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 80 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 8g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63587 (25.3 mg) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.58 (s, 1H), 7.38 (dd, 2H, J = 7.6, 8.1 Hz), 7.25 (m, 2H), 7.17 (t, 1H, J = 7.5 Hz), 7.07 (d, 4H, J = 7.5 Hz), 3.83 (s, 3H), 2.65 (dd, 1H, J = 6.0, 16.1 Hz), 2.52 (m, 1H), 2.21 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 1.92 (dd, 1H, J = 6.6, 13.4 Hz), 1.83 (dddd, 1H, J = 6.0, 12.5, 12.8, 12.8 Hz), 1.55 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); m/z [M+H]+ 438.0.
화합물 TX63588 : 화합물 TX63445 (0.054 g, 0.146 mmol), K3PO4 (0.090 g, 0.42 mmol), 1-메틸-1H-피라졸-4-보론산 피나콜 에스테르 (0.048 g, 0.23 mmol) 및 디메톡시에탄 (6 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.016 g, 0.014 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 80 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 냉각되도록 한 후, 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 10 g)에서 50-100% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63588 (11.6 mg) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.47 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.68 (ddd, 1H, J = 1.1, 6.0, 15.8 Hz), 2.52 (dddd, 1H, J = 6.9, 7.9, 8.0, 11.6 Hz), 2.17 (dd, 1H, J = 1.9, 12.0 Hz), 1.92 (dd, 1H, J = 6.6, 13.5 Hz), 1.86 (m, 1H), 1.49 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.21 (s, 3H); m/z [M+H]+ 350.0.
화합물 TX63600 : 화합물 TX63445 (0.049 g, 0.141 mmol), K3PO4 (0.091 g, 0.43 mmol), 나프탈렌-2-보론산 (0.042 g, 0.28 mmol) 및 디메톡시에탄 (7 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.014 g, 0.012 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 이어서 바이알을 단단히 밀봉하고, 80 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 10 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63600 (23.2 mg) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.54 (s, 1H), 7.94 (d, 1H, J=5 Hz), 7.86-7.90 (m, 2H), 7.78 (br s, 1H), 7.54-7.56 (m, 1H), 7.42 (br d, 1H, J=10 Hz), 7.25 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.70 (dd, 1H, J=12.5, 5 Hz), 2.56-2.63 (m, 1H), 2.25 (dd, 1H, J=12.5, 2.5 Hz), 1.85-1.95 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z [M+H]+ 396.1.
화합물 TX63603 : 화합물 TX63445 (0.051 g, 0.146 mmol), K3PO4 (0.093 g, 0.44 mmol), 나프탈렌-1-보론산 (0.053 g, 0.35 mmol) 및 디메톡시에탄 (7 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.018 g, 0.016 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 이어서 바이알을 단단히 밀봉하고, 80 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 10 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63603 (17 mg)를 상호전환 회전장애이성질체들 (atropisomers)의 혼합물로서 황색 유리질 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.58 (s, 1H), 7.93-7.96 (m, 2H), 7.35-7.56 (m, 5H), 3.59 (s, 1.5H), 3.58 (s, 1.5H), 2.25-2.48 (m, 3H), 1.85-1.88 (m, 2H), 1.61 (s, 1.5H), 1.58 (s, 1.5H), 1.28 (s, 1.5H), 1.27 (s, 1.5H), 1.23 (s, 3H); m/z [M+H]+ 396.1.
화합물 TX63625 : 화합물 TX63445 (0.053 g, 0.152 mmol), K3PO4 (0.088 g, 0.42 mmol), 3,5-다이메틸이소옥사졸-4-보론산 (0.042 g, 0.30 mmol) 및 디메톡시에탄 (6 mL)을 혼합하고, 상기 교반된 혼합물에 3-5 분 동안 질소가스 기포를 불어넣었다. Pd(PPh3)4 (0.014 g, 0.013 mmol)을 가하고, 상기 교반된 혼합물에 3-5 분 동안 질소가스 기포를 불어넣었다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 80 ℃에서 하룻밤 교반하면서. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬 (mesh), 8 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하고 이어서 3:1의 헥산/EtOAc로 분취 박층크로마토그래피 (preparative thin layer chromatography) 하여 화합물 TX63625 (6.6 mg) 을 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.51 (s, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.49 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 2.36, 2.31 (s, s [1.5, 1.5] 3H), 2.25 (m, 1H), 2.20, 2.15 (s, s [1.5, 1.5] 3H), 2.1 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z: [M+H]+ 365.0.
화합물 TX63637 : 화합물 TX63445 (0.049 g, 0.141 mmol), K2CO3 (0.061 g, 0.44 mmol), 메틸보론산 (0.037 g, 0.64 mmol) 및 다이옥산 (8 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 1-2 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(dppf)Cl2 (0.0167 g, 0.023 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 1-2분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 90 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 9 g)에서 50% 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하고 다시 실리카 겔 (230-400 메쉬, 4 g)ㅇ에서 클로로메탄/메틸-t-부틸 에테르/MeOH, 200/20/1 으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63637 (20 mg) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.48 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 2.65 (dd, 1H, J = 5.9, 15.6 Hz), 2.44 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.15 (m, 1H), 1.82-1.97 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z: [M+H]+ 384.0.
화합물 282: 241 (175 mg, 0.55 mmol)의 THF (5 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. PhMgBr (1.1 mL, 1.0 M/THF, 1.1 mmol)을 가하고, 0 ℃에서 1시간 동안 반응용액을 교반하고, 이어서 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 추가로 PhMgBr (1.1 mL)을 가하고, 6시간 후에 또 추가로 PhMgBr (3.3 mL)을 가하였다. 하룻밤 동안 교반한 후에, 추가로 PhMgBr (3.3 mL)을 가하였다. 하룻밤 동안 교반한 후에, 그 용액을 얼음조에서 냉각시키고, 1M HCl (5 mL)을 서서히 가하여 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 1시간 동안 교반하였다. 6M HCl (2 mL)을 가하고, 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 추가로 THF (5 mL)을 가하고, 3일 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 포화 NaHCO3으로 중화시키고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.40 g의 오일을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (30% EtOAc/헥산)하여 0.21 g의 흰색 폼을 수득하였으며, 화합물 282 및 283 의 혼합물이었다, MS (APCI): m/z 395, 351 [M+H]+.
화합물 283: 화합물 282 및 283 (0.21 g)의 혼합물을 THF에 넣고 (4 mL) 및 1M HCl (1 mL)을 가하였다. 하룻밤 반응용액을 교반하고, 이어서 40 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 식힌 후 그 용액을 포화 NaHCO3 (25 mL)으로 중화시키고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.18 g (93%)의 화합물 283 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 351.0 [M+H]+.
화합물 284: 283 (0.18 g, 0.51 mmol)의 에틸포메이트 (3 mL) 중 용액을 얼음조에서 냉각시켰다. NaOMe (0.9g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, 포화 KH2PO4 (25 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 184 mg (97%)의 화합물 284 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 379.0 [M+H]+.
화합물 285: 화합물 284 (184 mg, 0.49 mmol)을 EtOH (2 mL), THF (5 mL) 및 물 (0.5 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 염산염 (37 mg, 0.53 mmol)을 가하고, 실온에서 30 분 동안 교반하여 반응시켰다. 이어서 50 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 추가로 하이드록실아민 염산염 (10 mg)을 가하고, 하룻밤 동안 가열을 계속하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 180 mg (98%)의 화합물 285 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 376.0 [M+H]+.
화합물 286: 화합물 285 (180 mg, 0.48 mmol)을 5:1의 THF/MeOH (6 mL)에 넣고, NaOMe (0.9 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합액을 농축하고, 포화 수용액 KH2PO4 (25 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 0.18 g 의 밝은 황색 폼(foam)을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (40% EtOAc/헥산)하여 150 mg (83%)의 화합물 286 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 376.0 [M+H]+.
화합물 TX63667 : 화합물 286 (150 mg, 0.40 mmol)을 DMF (3 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N,N'-다이브로모다이메틸히단토인 (69 mg, 0.24 mmol)을 가하고, 2시간 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.5 mL)을 가하고, 그 용액을 55 ℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (25% EtOAc/헥산)하여 135 mg (90%)의 화합물 TX63667 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.52 (s, 1H), 7.76 (m, 2H), 7.66 (m, 1H), 7.54 (m, 2H), 4.06 (s, 3H), 2.24-2.38 (m, 2H), 2.18 (m, 1H), 1.69-1.83 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); MS (APCI): m/z 374.1 [M+H]+.
화합물 287: N-클로로숙신이미드 (0.124 g. 0.93 mmol)을 화합물 27 (0.235 g, 0.81 mmol)의 디클로로메탄 (10 mL) 중의 교반된 혼합물에 가하고, 4 일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, 그 잔사를 EtOAc (80 mL)로 취하고, 그 용액을 수성의 NaHCO3 용액 (20 mL)로 세척하고, 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 287 (347.8 mg) 을 유리질/고체 상태로 수득하였다. 이 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다. m/z [M+H]+ 325.0, 326.9.
화합물 288: 화합물 287 (347.8 mg, 1.07 mmol)을 MeOH에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc (50　mL)로 추출하였다, 포화 NaHCO3 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 288 (198 mg, 76%), m/z: [M+H]+ 280.9, 282.8.
화합물 289: 화합물 288 (192 mg, 0.68 mmol)을 MeOH에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc (50　mL)로 추출하였다, 포화 NaHCO3 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 289 (189.8 mg, 91%). m/z [M+H]+ 308.9.
화합물 290: 화합물 289 (189.8 mg, 0.61 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, KH2PO4 (aq)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 12 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 290 (92.8 mg, 50%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. m/z: [M+H]+ 305.9.
화합물 291: 화합물 290 (89 mg, 0.29 mmol)을 3/1의 MeOH/THF 혼합물에 녹이고, 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하고, 55 ℃에서 5시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4 (aq)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 25% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 291 (88.6 mg) 을 유리질/폼(foam) 상태로 수득하였다. 이 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다.
화합물 TX63604 : 화합물 291 (88.6 mg, 0.29 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 다이브로모다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 25% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 TX63604 (52.5 mg, 60%) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.39 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 2.65 (dd, 1H, J=17.5, 7.5 Hz), 2.39-2.46 (m, 1H), 2.11 (app d, 1H, J=10 Hz), 1.94 (dd, 1H, J=12.5, 7.5 Hz), 1.82 (ddd, 1H, J=25, 12.5, 5 Hz), 1.45 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 1.21 (s, 3H); m/z [M+H]+ 303.9.
화합물 292: 106 (173 mg, 0.57 mmol)의 MeOH 용액을 3N HCl 용액으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2×25 mL) 및 포화 NaHCO3 용액 (15 mL)로 추출하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 292 을 수득하였으며 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
화합물 293: 화합물 292 (약 0.57 mmol, 앞 단계에서 얻어진)을 다이옥산 (10 mL) 및 물 (6 mL)에 넣고, 0 ℃로 식혔다. 트리에틸아민 (0.7 mL, 5 mmol), DMAP (0.013 g, 0.11 mmol), 및 Boc2O (0.167 g, 0.78 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 천천히 올라가도록 하였다. 3시간 후 Boc2O (0.48 g, 2.2 mmol)을 더 가하고, 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, MeCN로 취하였다. 촉매 DMAP 및 Boc2O (0.21 g, 1.0 mmol)을 더 가하고, 반응혼합물의 온도를 50 ℃로 올렸다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하였다. EtOAc을 가하고, 불용성 물질을 여과하여 제거하였다. 여액을 농축하고, THF (1 mL)에 다시 현탁시켰다. Boc2O (0.71 g, 3.3 mmol)을 더 가하고, 반응혼합물을 55 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 이어서 65 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 12 g)에서 50% EtOAc/헥산으로 크로마토그래피 하여, 화합물 293 및 bis-Boc 생성물들의 혼합물로서 최종화합물을 수득하였다, 0.0471 g. MS: m/z [M+H]+ 362.1, 462.2.
화합물 294: 실온에서 화합물 293 (47.1 mg, ~0.11 mmol)의 HCOOEt 용액에, 30% NaOMe/MeOH (6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, 포화 수용액 KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 294 (49.8 mg)을 얻었다. MS (APCI): [M+H]+ 390.1..
화합물 295: 294 (0.0498 g, 0.128 mmol)의 EtOH 용액에, NH2OH·HCl 염 (TEA으로 중화) 및 피리디늄 파라-톨루엔설포네이트의 MeOH 용액을을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 295 (91 mg)을 폼 상태로 수득하였다 (이 전체는 앞서의 실험과의 조합을 반영한다). m/z [M+H]+ 387.1.
화합물 296: 295 (0.091 g, 0.23 mmol)의 THF:MeOH 용액에, 30% NaOMe (8 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 KH2PO4 (포화, 15 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 296 (71 mg, 78%) 을 회색을 띤 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 387.1
화합물 TX63594 : 화합물 296 (0.071 g, 0.18 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 다이브로모다이메틸히단토인을 가하고, 0 ℃에서 2시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 TX63594 (8.7 mg, 12.5%). 1H NMR (500 MHz, d 6 -DMSO) δ8.42 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.52-3.55 (m, 1H), 2.31-2.36 (m, 1H), 2.11-2.13 (m, 1H), 1.75-1.86 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.39 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.12 (s, 3H); m/z [M+H]+ 385.1.
화합물 TX63642 : 화합물 TX63467 (0.021 g, 0.082 mmol)을 NaHCO3 포화수용액(0.5 mL) 및 THF (2.0 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. 염화벤조일의 THF 용액을 가하고, 0 ℃에서 수 분동안 반응혼합물을 교반한 후, 그 후에 염화벤조일 용액을 더 가하고, 수 분 동안 더 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc (40 mL) 및 브라인 (2 mL)에 분배시키고, 상기 층들을 분리하고 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 오일을 얻었다. 상기 오일을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 8 g)에서 10:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63642 (14 mg)을 맑은 유리질 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.44 (s, 1H), 8.12-8.15 (m, 3H), 7.68 (m, 1H), 7.57 (m, 2H), 2.96 (dd, 1H, J = 5.9, 16.7 Hz), 2.69 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 2.0, 12.0 Hz), 1.89-2.03 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); m/z [M+H]+ 360.0, 255.9 (M-PhCO).
화합물 TX63611: TX63579 (17 mg, 0.051 mmol)을 포화 NaHCO3 (aq, 0.5 mL) 및 THF (1.5 mL)의 혼합물에 넣고, 반응혼합물을 0 ℃로 식혔다. 아세틸 클로라이드 (1 방울, 과량)을 가하고, 40 분 동안 0 oC에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 아세틸 클로라이드 (2 방울, 과량)을 더 가하고, 추가 20 분 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 (40 mL)로 추출하고, NaCl (aq, 10 mL)로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산 중의 25% EtOAc 용액) 하여 화합물 TX63611 (2.9 mg, 15%) 을 맑은 유리질 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.50 (s, 1H), 7.40-7.46 (m, 3H), 7.26-7.30 (m, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.64-2.73 (m, 1H), 2.46-2.55 (m, 1H), 2.30-2.34 (m, 1H), 1.82-1.95 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z 298 [M+H]+.
화합물 297: 화합물 25 (1.4 g, 5.5 mmol)의 THF (10 mL) 중 용액을, 다이메틸 카보네이트 (6 당량)와 NaH (과량)의 THF (10 mL) 중의 환류 중인 혼합물에 가하였다. 3시간 동안 환류 교반하여 반응시켰다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 KH2PO4 (aq)으로 반응을 종료시키고 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 297 (1.5 g, 87%) 을 고체 상태로 수득하였다. m/z 311 [M+H]+.
화합물 298: 화합물 297 (1 g, 3.17 mmol), 메틸하이드라진 (300 mg, 6.5 mmol) 및 EtOH (15 mL)의 혼합물을, 60 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 EtOH를 제거하고, 얻어진 조 생성물을 20 mL의 디에틸에테르(diethyl ether)으로 처리하였다. 여과하여 침전물을 취하여 화합물 298 을 백색 고체 상태로 수득하였다 (450 mg, 46% 수율). MS: m/z [M+H]+ 307.
화합물 299: 298 (190 mg, 1.2 mmol)의 MeOH (5 mL) 중 용액을 3N HCl( aq ) (2 mL)으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하고, 포화 NaHCO3 ( aq ) (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 299 (165 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 263.
화합물 300: 실온에서 화합물 299 (165 mg, 0.62 mmol)의 HCOOEt (5 mL) 중 용액에, 30% NaOMe의 MeOH 용액 (1.3 g, 10 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 300 (180 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 291.
화합물 301: 화합물 300 (180 mg, 0.62 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액에, NH2OH-HCl (95 mg, 2eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 301 을 고체 상태로 수득하였다 (178 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 288.
화합물 302: 화합물 301 (178 mg, 0.62 mmol)의 2:1의 THF/MeOH (3 mL) 중 용액에, 30% NaOMe (1.2 g, 10eq)을 적가하고, 그 용액을 50 ℃에서 9시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 (25 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 물 및 브라인으로 세척하고, 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 302 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (175 mg, 99% 수율). MS: m/z [M+H]+ 288.
화합물 TX63676 : 302 (175 mg, 0.61 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃ 에서, 다이브로모다이메틸히단토인 (100 mg, 0.55 eq)를 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 20-55% EtOAc/헥산로 용출하여, 출발물질 시아노케톤과 시아노에논 생성물의 혼합물 (35 mg)을 모았다. 이 혼합물 (30 mg)을 DDQ (30 mg, 0.13 mmol)의 1 mL 벤젠 중 용액과 와 혼합하고, 16시간 동안 가열 환류하였다. 얻어진 혼합물을 10 mL EtOAc에 녹이고, 포화 NaHCO3 (2×15 mL)로 세척하였다. 유기층을 농축하고, 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 20-55% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63676 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (15 mg, 9% 수율). 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ8.46 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.09 (m, 1H), 1.95 (m, 2H), 1.66 (m, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.39 (m, 1H), 1.18 (s, 3H), 1.19 (s, 3H); MS: m/z [M+H]+ 286.
화합물 303a-b: 화합물 298 (670 mg, 2.18 mmol) 및 K2CO3 (910 mg, 6.55 mmol)의 15 mL DMF 중 혼합물에, 실온에서 MeI (625 mg, 4.4 mmol)을 가하였다. 16시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 100 mL 물로 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2x50 mL)로 추출하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 10-35% EtOAc/헥산으로 용출하여, 화합물 303a-b의 혼합물 (450 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 321.
화합물 304a-b: 303a-b (450 mg, 1.4 mmol)의 MeOH (10 mL) 중 용액을 3N HCl 용액 (4 mL)으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하고, 포화 NaHCO3 용액 (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 304a- b 의 혼합물을 오일 상태로 수득하였다 (390 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 277.
화합물 305a-b: 화합물 304a-b (390 mg, 1.4 mmol)의 6 mL HCOOEt 중 용액에 실온에서, MeOH 중 30% NaOMe 용액 (1.5 g, 6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 이어서 물에 붓고, KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 305a- b 의 혼합물 (425 mg, 100% 수율)을 수득하였다. MS: m/z [M+H]+ 305.
화합물 306a-b: 화합물 305a-b (425 mg, 1.4 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (195 mg, 2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 306a-b 을 오일상태로 수득하였다 (425 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 302.
화합물 307a-b: 306a-b (425 mg, 1.4 mmol)의 1:1의 THF/MeOH (4 mL)중 용액에, 30% NaOMe (2 g, 8 eq)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 (25 mL)와 혼합하고, EtOAc (2x25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 물 및 브라인으로 세척하고, 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 307a- b 의 혼합물을 오일상태로 수득하였다 (425 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 302.
화합물 TX63691 및 TX63692 : 307a-b (425 mg, 1.4 mmol)의 3 mL DMF 중 용액에 0 ℃에서, 다이브로모다이메틸히단토인 (222 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (2 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 10-50% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63691 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. Rf = 0.5 (헥산/EtOAc 1:3) (25 mg, 6% 수율); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.42 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 2.84 (ddd, 1H, J = 1.4, 5.9, 15.2 Hz), 2.59 (m, 1H), 2.11 (dd, 1H, J = 2.4, 11.7 Hz), 1.75-1.91 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.19 (s, 3H); MS: m/z [M+H]+ 300. 계속 용출시켜 황색 폼 (foam)을 수득하였다., Rf = 0.25 (헥산/EtOAc 1:3) (260 mg, 62% 수율), MS: m/z [M+H]+ 302. 이 물질 (260 mg)을 DDQ ×(200 mg, 0.88 mmol)의 10 mL 벤젠 중의 용액과 혼합하고, 16시간 동안 가열 환류하였다. 얻어진 혼합물을 25 mL의 EtOAc에 녹이고, 포화 NaHCO3 (2×25 mL)로 세척하였다. 유기층을 농축하고, 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 20-60% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63692 (60 mg, 15% 수율) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.34 (s, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.09 (m, 1H), 1.73-1.92 (m, 3H), 1.48 (s, 3H), 1.42 (m, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.21 (s, 6H); MS: m/z [M+H]+ 300.
화합물 308 및 TX63804 : 화합물 70 (0.48 g, 1.49 mmol) 및 IBX (1.67 g, 4 eq)의 DMF (8 mL) 중의 혼합물을, 65 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. NaHCO3 포화수용액 (25 mL)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2x50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-35%의 EtOAc/헥산으로 용출하여 표제의 화합물을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다, 308, Rf = 0.45 (헥산/EtOAc 3:2) (286 mg, 60% 수율), MS: m/z [M+H]+ 321. 화합물 TX63804 을 황색 폼 (foam) 상태로 분리하였다. Rf = 0.35 (헥산/EtOAc 3:2) (15 mg, 3% 수율). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.73 (d, 1H, J = 10.4 Hz), 7.39-7.51 (m, 5H), δ6.08 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 3.75 (s, 3H), 2.63-2.75 (m, 2H), δ2.54 (q, 1H, J = 13.2 Hz), 1.53 (s, 3H), 1.20 (s, 6H); MS: m/z [M+H]+ 335.
화합물 309: 308 (286 mg, 0.89 mmol)의 THF (5 mL) 중 용액 및 피리딘 (0.22 g, 3 eq)에, 요오드 (0.46 g, 2 eq)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 소디움 티오설페이트 포화용액 (25 mL)으로 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×30 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하였다. 진공 농축한 후에 화합물 309을 밝은 무색 고체 상태로 단리하였다 (395 mg, 100%), MS: m/z [M+H]+ 447.
화합물 TX63803 : 화합물 309 (0.2 g, 0.45 mmol) 및 CuI (0.22g, 2.5 eq)의 DMF (5 mL) 중의 혼합물을, 70 ℃에서 가열하였다. FSO2CF2CO2Me (1.3 g, 15 eq) 및 HMPA (1.4 g, 17 eq) 를 차례로 가하고, 반응혼합물을 70 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. NH4Cl 포화용액 (25 mL)으로 반응을 종료시킨 후 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하였다. 진공 농축한 후에 실리카 겔 크로마토그래피를 수행하였는데, 5-35%의 EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63803 을 백색 고체 상태로 수득하였다 (110 mg, 63%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.31 (s, 1H), 7.47 (m, 2H), 7.41 (m, 1H), 7.32 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.66 (dd, 1H, J = 5.9, 16.1 Hz), 2.54 (ddd, 1H, J = 6.6, 11.2, 15.9 Hz), 2.21 (d, 1H, J = 11.7 Hz), 1.86 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS: m/z [M+H]+ 389.
화합물 310a-b: 화합물 26 (0.72 g, 2.57 mmol), 3-아미노피라졸 (0.222 g, 2.67 mmol), p-톨루엔설폰산 수화물 (0.025 g, 0.12 mmol) 및 톨루엔 (70 mL)을, 딘스탁형 트랩 (Dean-Stark trap)을 사용하여 물의 제거와 함께 가열 환류하였다. 반응혼합물을 하룻밤 환류하고 식힌 후 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 EtOAc (80 mL)로 취하고, NaHCO3 포화수용액 (15 mL) 및 브라인 (15 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 황색 고체를 얻었다. 상기 고체를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 16 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여, 생성물(들)을 다음과 같이 수득하였다: 화합물 310a (410 mg, 49%) - 순수한 비극성 이성질체를 백색 고체 상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 328.0. 화합물 310b (56 mg, 6.7%) - 순수한 극성 이성질체를 황색 유리질 상태로 수득하였다. MS: m/z [M+H]+ 328.0.
화합물 311a: 화합물 311a (0.326 g, 1.15 mmol)을 MeOH에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 EtOAc (50 mL)로 추출하였다, 포화 NaHCO3로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 311a (303.5 mg, 100%). m/z [M+H]+ 283.9.
화합물 312a: 화합물 311a (0.326 g, 1.15 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 311a (393 mg)을 얻었다. m/z [M+H]+ 312.0.
화합물 313a: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 312a (0.393 g, 1.26 mmol)에 가하였다. 9:1 혼합물의 EtOH/H2O을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 313a (352 mg) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 309.0.
화합물 314a: 화합물 313a (0.3518 g, 1.14 mmol)을 3:1의 MeOH/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 55 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) to 313a (351 mg) 황색 고체 상태로 수득하였다. 이 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다.
화합물 TX63627 및 TX63615 : 화합물 314a (0.204 g, 0.66 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를, 50% 헥산/EtOAc를 사용하여 칼럼크로마토그래피 (230-400 메쉬, 18 g)하여 화합물 TX63627 (34.1 mg, 17%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ9.62 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.28 (s, 1H) 3.06 (m, 1H), 2.99 (m, 1H), 2.38 (d, 1H, J = 11.4 Hz), 2.12 (dd, 1H, 6.2, 5.9 Hz), 1.92 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.35 (s, 3H). m/z: [M+H]+ 306.9. 화합물 TX63615 (59.6 mg, 24%)을 백색 고체 상태로 분리하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ9.58 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 3.04 (dd, 1H, J=20, 5 Hz), 2.90-2.97 (m, 1H), 2.33 (d, 1H, J=10 Hz), 2.08 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 1.83-1.92 (m, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.32 (s, 3H); m/z [M+H]+ 384.9, 386.8.
화합물 TX63626 : 화합물 TX63615 (0.0486 g, 0.126 mmol), K3PO4 (0.086 g, 0.41 mmol), 페닐보론산 (0.024 g, 0.20 mmol) 및 디메톡시에탄 (6 mL)을 혼합하고, 상기 교반된 혼합물에 1-2 분 동안 질소가스 기포를 불어넣었다. Pd(PPh3)4 (0.015 g, 0.012 mmol)을 가하고, 상기 교반된 혼합물에 1-2 분 동안 질소가스 기포를 불어넣었다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 90 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 9.7 g)에서 50% 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하고, 이어서 다시 실리카 겔에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63626 (12.8 mg, 26%) 을 노르스름한 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ9.75 (s, 1H), 8.41 (d, 2H, J = 13.3 HZ), 8.03 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 7.50 (t, 1H, J = 7.6, 7.6 Hz), 7.33 (t, 1H, J = 7.2, 7.6 Hz), 3.07 (m, 1H), 2.98 (m, 1H), 2.30 (d, 1H, J = 12.4 Hz), 2.11 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 1.89 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.37 (s, 3H); m/z: [M+H]+ 383.0.
화합물 311b: 화합물 310b (0.0523 g, 0.16 mmol)을 MeOH에 넣고, 1 N HCl (aq)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 농축하였다. 반응혼합물을 EtOAc (50 mL)로 추출하고, 포화 NaHCO3로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를 칼럼크로마토그래피로 정제하여 화합물 311b (40.7 mg, 90%). m/z [M+H]+ 283.9.
화합물 312b: 화합물 311b (0.0407 g, 0.144 mmol)을 에틸포메이트에 넣고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 (aq)로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 312b (42.2 mg)을 얻었다. m/z [M+H]+ 312.0.
화합물 313b: 0.1 N 하이드록실아민 염산염 수용액을 화합물 312b (0.0422 g, 0.136 mmol)에 가하였다. 9:1 혼합물의 EtOH/H2O을 가하고, 하룻밤 50 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 취하고, 이어서 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 313b (43.7 mg) 황색 유리질 상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 309.0.
화합물 314b: 화합물 313b (0.0437 g, 0.14 mmol)을 3:1의 MeOH/THF 혼합물에 녹이고, 30% 소디움 메톡사이드 (30 wt% 용액/MeOH)을 가하였다. 55 ℃에서 6시간 동안 반응혼합물을 교반하고 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 포화 KH2PO4을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, 반응혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 잔사를 칼럼크로마토그래피 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산)로 정제하여 화합물 314b (44.5 mg)을 얻었다. 이 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다.
화합물 TX63617 : 화합물 314b (0.0445 g, 0.14 mmol) 무수 DMF에 녹이고, 그 용액의 온도를 0 ℃로 내렸다. 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 (약30분) 0 ℃에서 반응혼합물을 교반하였다. 이어서, 피리딘을 가하고, 반응혼합물을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 실온으로 식힌 후, 반응혼합물을 EtOAc로 추출하고, 브라인으로 세척하고, 이어서 MgS04로 건조하고, 농축하였다. 얻어진 조 잔사를, 50% 헥산/EtOAc을 사용하여 칼럼크로마토그래피 (230-400 메쉬, 10 g)로 정제하고 이어서 1% 메틸-t-부틸에테르/DCM을 사용하여 실리카 겔 (230-400 메쉬, 8 g) 상에서 정제하여, 화합물 TX63617 (18 mg, 33%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.96 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 3.14 (dd, 1H, J=16.4, 6.0 Hz), 2.96-3.03 (m, 1H), 2.27 (dd, 1H, J=11.9, 3.4 Hz), 2.00-2.11 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z: [M+H]+ 384.9, 386.9.
화합물 316a-b: 화합물 130, 315 및 불순물 X의 약간 순수하지 않은 혼합물 (1.96 g, 약 5.21 mmol, 화합물 130 를 주요 분획으로서 함유) 그리고 3N HCl (20 mL, 60 mmol)의 20 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 농후한 NH4OH 를 사용하여 pH ~10로 염기성화하고 이어서 CHCl3로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여, 화합물 316a-b 및 X의 분리되지 않는 혼합물 1.47 g (91%)을 밝은 황색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 317a-b 및 X: 화합물 316a-b 및 X의 약간 순수하지 않은 혼합물 (1.47 g, 약 4.73 mmol)과 에틸포메이트 (3.8 mL, 47.0 mmol)의 20 mL 벤젠 중의 교반 중인 용액에, MeOH 중의 NaOMe, 30 wt.% 용액 (4.4 mL, 23.4 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하여, 화합물 317a-b 및 X의 분리되지 않는 혼합물 1.51 g (94%)을 오렌지색 고체 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI): m/z 387 (78%) [M+H]+ 및 339/341 (91/100%) [M+H]+.
화합물 318a-b 및 X: 화합물 317a-b 및 X의 약간 순수하지 않은 혼합물 (1.51 g, 약 4.46 mmol) 그리고 하이드록실아민 염산염 (0.47 g, 6.76 mmol)의 20 mL 에탄올 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고, EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하여 화합물 318a-b 및 X의 분리되지 않는 혼합물 1.47 g (98%)을 어두운 갈색 거품으로 된 고체로 얻고, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 384 (79%) [M+H]+ 및 336/338 (90/100%).
화합물 319a-b 및 X: 화합물 318a-b 및 X의 약간 순수하지 않은 혼합물 (1.47 g 약 4.37 mmol)의 교반 중인 50 mL MeOH 중 용액에, 실온에서 N2 하 에서 NaOMe, 30 wt.% 용액 /MeOH (4.1 mL, 21.8 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하였다. 상기 샘플을 크로마토그래피 하여(실리카 겔, 50% EtOAc/헥산), 화합물 319a-b 및 X의 분리되지 않는 혼합물 0.81 g (55%)을 밝은 황색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 336/338 (96/100%) [M+H]+.
화합물 TX63606 및 TX63649 : 화합물 319a-b 및 X의 혼합물 (0.81 g, 2.40 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.38 g, 1.33 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (1.90 mL, 23.49 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하였다. 상기 샘플을 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 0.56 g (69%)의 화합물 TX63606 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.36 (s, 1H), 3.82 (s, 3H), 2.49-2.60 (m, 2H), 2.38-2.45 (m, 1H), 2.00-2.06 (m, 2H), 1.66-1.75 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.28 (br d, 3H, J=5 Hz); MS (APCI) m/z 334/336 (95/100%) [M+H]+. 모든 순수하지 않은 분획들을 상기 크로마토그래피로부터 취하여 합하고, 농축하고, 다시 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 25% EtOAc/헥산) 하여 0.019 g (2%)의 화합물 TX63649 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.21 (s, 1H), 4.00 (s, 3H), 2.51-2.63 (m, 2H), 2.38 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.32 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 334/336 (96/100%) [M+H]+.
화합물 TX63650 및 TX63656 : 화합물 TX63606 (0.102 g, 0.31 mmol), K3PO4 (0.190 g, 0.90 mmol), 3-메틸페닐보론산 (0.065 g, 0.48 mmol) 및 디메톡시에탄 (7 mL)을 혼합하고, 그 용액에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.022 g, 0.019 mmol)을 가하고, 그 용액에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 80 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식도록 한 후 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 10 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63650 (52 mg) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.48 (s, 1H), 7.34 (t, 1H, J = 7.6, 7.3 Hz), 7.22 (d, 1H, 7.7 Hz), 7.11 (d, 2H, 7.8 Hz), 3.77 (s, 3H), 2.53 (m, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.28 (d, 3H, J =6.8) ); m/z: [M+H]+ 346.1. 화합물 TX63656 (2.9 mg)을 황색 유리질 상태로 분리하였다. m/z [M+H]+ 344.0.
화합물 TX63659 및 TX63663 : 화합물 TX63606 (0.141 g, 0.42 mmol), K3PO4 (0.27 g, 1.27 mmol), 3-플루오로페닐보론산 (0.091 g, 0.65 mmol) 및 디메톡시에탄 (10 mL)을 혼합하고, 그 용액에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.027 g, 0.023 mmol)을 가하고, 그 용액에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 80 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고, 상기 용매를 고체로부터 따라내었다. 상기 액체를 농축하여 얻어진 잔사를, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 14 g)상에서 3:1의 헥산/EtOAc 를 사용하여 크로마토그래피법으로 정제하여 화합물 TX63659 (42 mg) 을 황색 폼 (foam)/유리질 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.51 (s, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.14 (m, 2H), 7.06 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.58 (m, 3H), 2.15 (m, 1H), 2.07 (m, 1H), 1.75 (m, 1H), 1.50 (s, 3H), 1.33 (d, 3H); m/z: [M+H]+ 350.0; 및 TX63663 (6.4 mg) 황색 유리질 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.32 (s, 1H), 7.48 (dd, 1H, J = 6.3, 7.79, 7.74), 7.15 (t, 1H, J = 8.49, 8.49), 7.12 (d, 1H, J = 7.67), 7.06-7.02 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.16-3.08 (m, 1H), 2.83-2.75 (m, 1H), 2.68-2.55 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.72 (s, 3H); m/z [M+H]+ 348.0.
화합물 TX63664 : 화합물 TX63606 (0.1209 g, 0.36 mmol), K3PO4 (0.227 g, 1.07 mmol), 3-메톡시페닐보론산 (0.083 g, 0.55 mmol) 및 디메톡시에탄 (8 mL)을 혼합하고, 그 용액에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.030 g, 0.026 mmol)을 가하고, 그 용액에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 80 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 15 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63664 (34 mg) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 7.42 (t, 1H, J = 7.83, 8.06), 6.96 (d, 1H, J = 8.38), 6.92 (d, 1H, J = 7.58), 6.87 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.67 (dd, 1H, J = 6.46, 9.77, 6.59 Hz), 2.62-2.54 (m, 2H), 2.16 (t, 1H, J = 12.86, 12.75), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.80-1.62 (m, 1H), 1.50 (s, 3H), 1.32 (d, 3H, J = 6.74); m/z: [M+H]+ 362.1.
화합물 320a: 화합물 130 (0.450 g, 1.27 mmol), K3PO4 (0.86 g, 4.05 mmol), 1-메틸피라졸-4-보론산 피나콜 에스테르 (0.554 g, 2.65 mmol) 및 디메톡시에탄 (20 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.122 g, 0.11 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 95 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 EtOAc (100 mL) 및 NaCl 포화수용액 (40 mL)에 분배시키고, 유기층을 MgS04로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 이렇게 하여 얻어진 오일을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 18 g)에서 EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 320a (374.5 mg) 을 황색 폼 (foam)/유리질 상태로 수득하였다. m/z [M+H]+ 357.1.
화합물 321a: 화합물 320a (0.371 g, 1.04 mmol)을 MeOH (15 mL) 및 1N HCl (5 mL)에 넣고, 3 일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 MeOH를 제거하고, 이어서 EtOAc (80 mL) 및 NaHCO3 포화수용액(15 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (321a, 285 mg). m/z: [M+H]+ 313.1.
화합물 322a: 화합물 321a (0.285 g, 0.91 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (30 mL) 및 30% NaOMe/MeOH (1.1 mL, 5.9 mmol)을 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 포화수용액(20 mL) 및 EtOAc (100 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 유리질을 얻었다 (322a, 323 mg). m/z: [M+H]+ 341.0.
화합물 323a: 하이드록실아민 염산염 (0.105 g, 1.52 mmol) 용액을 10:1의 EtOH/H2O (22 mL) 중의 화합물 322a (0.323 g, 0.95 mmol)에 가하였다. 반응혼합물을 잠시 50 ℃로 가열하고, 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, EtOAc (100 mL) 및 브라인 (20 mL)에 분배시키고, 상기 유기용액을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 폼/고체 (323a, 289 mg)를 얻었다. m/z: [M+H]+ 338.0.
화합물 324a: 화합물 323a (0.289 g, 0.86 mmol)을 1:1의 MeOH/THF, (20 mL)에 넣고, 30% NaOMe/MeOH (1.0 mL, 5.4 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 포화 KH2PO4 (20 mL) 및 EtOAc (100 mL)에 분배시키고, 상기 층들을 분리하고, 수층을 다시 EtOAc로 추출하였다. 유기층들을 합하여 MgS04로 건조하고, 여과하고 농축하여 324a (275 mg) 을 유리질/폼(foam) 상태로 수득하였다. m/z: [M+H]+ 338.0.
화합물 TX63690 : 화합물 324a (0.275 g, 0.82 mmol)을 벤젠 (30 mL)에 넣고, DDQ (0.220 g, 0.969 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 잠시 45 ℃로 온도를 올리어 어두운 침전물이 형성되었다. DCM (20 mL)을 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 이어서 EtOAc (80 mL)로 희석하고, NaHCO3 포화수용액 (2×20 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고, 여과하고 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 mesh)에서 50% EtOAc/DCM로 2회 크로마토그래피 하여 유리질을 얻었다. 얻어진 유리질을 에틸 에테르 (5 mL)에 넣고 실온에서 방치하여 고체를 형성시킨 후 여과하여 취한 후 에틸 에테르 (1 mL)로 세척하고, 공기 흐름 하에 건조하여 화합물 TX63690 (69 mg) 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.46 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 2.65 (m, 1H), 2.48-2.58 (m, 2H), 1.99-2.12 (m, 2H), 1.72 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz); m/z: [M+H]+ 336.0.
화합물 320b　: 화합물 130 (0.455 g, 1.28 mmol), K3PO4 (0.877 g, 4.14 mmol), 2-플루오로페닐보론산 (0.343 g, 2.48 mmol), 디메톡시에탄 (12 mL) 및 DMF (6 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.126 g, 0.11 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 95 ℃에서 2 일 동안 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 냉각되도록 한 후, 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 EtOAc (100 mL) 및 물 (20 mL)에 분배시키고, NaCl 포화수용액(20 mL)으로 세척하고, 상기 층들을 분리하고 수층들을 모아서 EtOAc (50 mL)로 세척하고, 유기층들을 합하여 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하고 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 19.7 g)에서 40% EtOAc/헥산 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 320b (134.6 mg) 을 맑은 유리질 상태로 수득하였다, m/z: [M+H]+ 371.1.
화합물 321b: 화합물 320b (0.1346 g, 0.36 mmol)을 MeOH (20 mL) 및 1N HCl (3 mL)에 넣고, 3 일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 MeOH를 제거하고, 이어서 EtOAc (50 mL) 및 NaHCO3 포화수용액에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 화합물 321b (108 mg) 을 폼/유리질 상태로 수득하였다. m/z: [M+H]+ 327.1.
화합물 322b: 화합물 321b (0.108 g, 0.33 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (10 mL) 및 30% NaOMe/MeOH (0.4 mL, 2.1 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다, 이어서 KH2PO4 포화수용액(10 mL) 및 EtOAc (80 mL)에 분배시켰다. 유기층을 브라인 (10 mL)로 추출하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 유리질을 얻었다 (322b, 111 mg). m/z: [M+H]+ 355.1.
화합물 323b: 0.1 M 하이드록실아민 염산염의 9:1의 EtOH/H2O (6 mL) 중 용액을, 화합물 322b (0.111 g, 0.31 mmol)에 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 에탄올을 제거하고, EtOAc (100 mL) 및 NaCl 포화수용액 (10 mL)에 분배시키고, 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 유리질을 얻었다 (323b, 113 mg). m/z: [M+H]+ 352.1
화합물 324b: 화합물 323b (0.113 g, 0.32 mmol)을 1:1의 MeOH/THF (6 mL)에 넣고, 30% NaOMe/MeOH (0.3 mL, 1.6 mmol)을 가하였다. 3일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 포화 KH2PO4 (15 mL) 및 EtOAc (100 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 324b (110.5 mg)을 폼 상태로 수득하였다. m/z: [M+H]+ 352.1.
화합물 TX63721 : 화합물 324b (0.1105 g, 0.31 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 반응혼합물을 0 ℃로 식혔다. N,N'-다이브로모다이메틸히단토인 (0.051 g, 0.18 mmol)을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 교반하였다. 피리딘 (0.2 mL, 2.4 mmol)을 가하고, 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고, 이어서 60 ℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 16.6 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63721 (45.7 mg) 을 회색을 띤 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.48 (s, 1H), 7.26-7.43 (m, 4H), 3.72 (s, 3H), 2.47-2.57 (m, 3H), 2.14 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 1.70 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.22 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z: [M+H]+ 350.1.
화합물 320c: 화합물 130 (0.450 g, 1.27 mmol), K3PO4 (0.866 g, 4.08 mmol), 4-피리딘보론산 (0.310 g, 2.58 mmol), 디메톡시에탄 (12 mL) 및 DMF (6 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.120 g, 0.10 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 이어서 바이알을 단단히 밀봉하고, 95 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 EtOAc (100 mL) 및 물 (20 mL)에 분배시키고, NaCl 포화수용액(20 mL)로 세척하고, 상기 층들을 분리하고 수층들을 모아서 EtOAc (50 mL)로 세척하였다. 유기층들을 합하여 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하고 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 20 g)에서 3% MeOH/EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 320c (404.4 mg) 을 백색 폼/고체 상태로 수득하였다. m/z: [M+H]+ 354.1.
화합물 321c: 화합물 320c (0.402 g, 1.14 mmol)을 MeOH (25 mL) 및 1N HCl (6 mL)에 넣고, 3일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 MeOH를 제거하고, 이어서 EtOAc (80 mL) 및 NaHCO3 포화수용액(15 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 폼/유리질을 얻었다 (321c, 342 mg). m/z: [M+H]+ 310.0.
화합물 322c: 화합물 321c (0.310 g, 1.0 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (30 mL), 및 30% NaOMe/MeOH (1.2 mL, 6.5 mmol)을 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 KH2PO4 포화수용액(40 mL) 및 EtOAc (100 mL)에 분배시켰다. 수층을 다시 EtOAc (50 mL)로 추출하고, 유기층들을 합하여 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 유리질을 얻었다 (322c, 330 mg). m/z: [M+H]+ 338.0.
화합물 323c: 0.1 M 하이드록실아민 염산염의 9:1의 EtOH/H2O (17.6 mL) 중 용액을, 화합물 322c (0.330 g, 0.98 mmol)에 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 에탄올을 제거하고, EtOAc (100 mL) 및 NaHCO3 포화수용액 (20 mL)에 분배시키고, 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 폼을 얻었다 (323c, 321 mg). m/z: [M+H]+ 335.1.
화합물 324c: 화합물 323c (0.321 g, 0.96 mmol)을 1:1의 MeOH/THF (20 mL)에 넣고, 30% NaOMe/MeOH (1.0 mL, 5.4 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 포화 KH2PO4 (20 mL) 및 EtOAc (150 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 324c (312 mg)을 폼 상태로 수득하였다. m/z: [M+H]+ 335.1.
화합물 TX63720 : 화합물 324c (0.312 g, 0.93 mmol)을 DCM (40 mL)에 넣었다. DDQ (0.252 g, 1.11 mmol)을 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, EtOAc (150 mL)에 분배시키고, 유기층을 NaHCO3 포화수용액 (50 mL)으로 세척하였다. 수층을 다시 EtOAc (100 mL)로 추출하고, 유기층들을 합하여 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 20 g)에서 2% MeOH/DCM 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 녹색을 띤 오일 상태로 수득하였다. 상기 오일을 헥산/Et2O으로 분쇄하여 (triturated), 화합물 TX63720 (38.5 mg) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.73 (bs, 2H), 8.45 (s, 1H), 7.29 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 2.50-2.70 (m, 3H), 1.98-2.14 (m, 2H), 1.72 (m, 1H), 1.44 ppm(s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z: [M+H]+ 333.1.
화합물 320d: 화합물 130 (0.450 g, 1.27 mmol), K3PO4 (0.873 g, 4.12 mmol), 3-피리딘보론산 (0.313 g, 2.61 mmol), 디메톡시에탄 (12 mL) 및 DMF (6 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.124 g, 0.11 mmol)을 가하고, 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 95 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 EtOAc (100 mL) 및 물 (20 mL)에 분배시키고, NaCl 포화수용액(20 mL)로 세척하였다. 수층들을 모아서 EtOAc (50 mL)로 세척하고, 유기층들을 합하여 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 20 g)에서 3% MeOH/EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 320d (416 mg) 을 백색 폼/유리질 상태로 수득하였다, m/z: [M+H]+ 354.1.
화합물 321d: 화합물 320d (0.413 g, 1.17 mmol)을 MeOH (25 mL) 및 1N HCl (6 mL)에 넣고, 3일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 MeOH를 제거하고, 이어서 EtOAc (80 mL) 및 NaHCO3 포화수용액(15 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 폼/유리질을 얻었다 (321d, 338 mg). m/z: [M+H]+ 310.0.
화합물 322d: 화합물 321d (0.303 g, 0.98 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (30 mL) 및 30% NaOMe/MeOH (1.2 mL, 6.5 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 KH2PO4 포화수용액 (40 mL) 및 EtOAc (100 mL)에 분배시켰다. 수층을 다시 EtOAc (50 mL)로 추출하고, 유기층들을 합하여 KH2PO4로 건조하고 여과하고 농축하여 유리질을 얻었다 (322d, 346 mg). m/z: [M+H]+ 338.0.
화합물 323d: 0.1 M 하이드록실아민 염산염의 9:1의 EtOH/H2O (16 mL, 1.6 mmol) 중 용액을, 화합물 322d (0.346 g, 1.03 mmol)에 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 에탄올을 제거하고, EtOAc (100 mL) 및 NaHCO3 포화수용액 (20 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 폼/고체 (323d, 299 mg)를 얻었다. m/z: [M+H]+ 335.1.
화합물 324d: 화합물 323d (0.289 g, 0.86 mmol)을 1:1의 MeOH/THF (20 mL)에 넣고, 30% NaOMe/MeOH (1.0 mL, 5.4 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 포화 KH2PO4 (20 mL) 및 EtOAc (150 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 324d (307 mg)을 폼 상태로 수득하였다. m/z: [M+H]+ 335.1.
화합물 TX63722 : 화합물 324d (0.307 g, 0.92 mmol)을 DCM (40 mL)에 넣고, DDQ (0.228 g, 1.004 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 여과하고 유기층을 NaHCO3 포화수용액 (50 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하였다. 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 18 g)에서 1.5% MeOH/DCM 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 녹색을 띤 오일 상태로 수득하였다. 상기 오일을 헥산/ Et2O으로 분쇄하여 (triturated), 화합물 TX63722 (40.3 mg) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.67 (m, 1H), 8.61 (bs, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.49 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.50-2.66 (m, 3H), 1.97-2.14 (m, 2H), 1.73 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz); m/z: [M+H]+ 333.1.
화합물 320e: 화합물 130 (0.453 g, 1.28 mmol), K3PO4 (0.882 g, 4.16 mmol), 피리미딘-5-보론산 (0.315 g, 2.6 mmol), 디메톡시에탄 (12 mL) 및 DMF (6 mL)을 혼합하고, 반응혼합물에 3-5 분 동안 N2를 살포하였다. Pd(PPh3)4 (0.118 g, 0.10 mmol)를 및 반응혼합물에 다시 3-5분 동안 살포하였다. 바이알을 단단히 밀봉하고, 95 ℃에서 하룻밤 교반하면서 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 EtOAc (100 mL) 및 브라인 (20 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하고, 잔사를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 18 g)에서 3% MeOH/EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 320e (333 mg) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다, m/z: [M+H]+ 355.2.
화합물 321e: 화합물 320e (0.333 g, 0.94 mmol)을 MeOH (25 mL)에 넣고, 1N HCl (6 mL)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 농축하여 MeOH를 제거하고, EtOAc (80 mL) 및 NaHCO3 포화수용액에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 고체 (321e, 280.9 mg)를 얻었다. m/z: [M+H]+ 311.2.
화합물 322e: 화합물 321e (0.2809 g, 0.91 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (34 mL) 및 30% NaOMe/MeOH (1.05 mL, 5.7 mmol)을 가하였다. 3일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 KH2PO4 포화수용액 (20 mL) 및 EtOAc (100 mL)에 분배시켰다. 유기층을 브라인 (10 mL)로 추출하고, 이어서 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 유리질을 얻었다 (322e, 280 mg). m/z: [M+H]+ 339.1.
화합물 323e: 하이드록실아민 염산염 (0.15 g, 2.2 mmol)의 10:1의 EtOH/H2O (22 mL) 중 용액을, 화합물 322e (0.280 g, 0.83 mmol)에 가하고, 3일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, EtOAc (100 mL) 및 NaHCO3 포화수용액 (10 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하고 방치하여 고체화하여 유리질을 얻었다. 상기 고체를 실리카 겔 (230-400 메쉬, 11 g)에서 EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 323e(180 mg)을 얻었다. m/z: [M+H]+ 336.1.
화합물 324e: 화합물 323e (0.180 g, 0.54 mmol)을 1:1의 MeOH/THF (10 mL)에 넣고, 30% NaOMe/MeOH (0.6 mL, 3.2 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였고, 이어서 포화 KH2PO4 (15 mL) 및 EtOAc (120 mL)에 분배시켰다. 유기층을 NaCl 포화수용액으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 여과하고 농축하여 324e (189 mg)을 폼 상태로 수득하였다. m/z: [M+H]+ 336.1.
화합물 TX63748 : 화합물 324e (0.189 g, 0.56 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 반응혼합물을 0 ℃로 식혔다. DMF (0.5 mL) 중의 브로민 (0.092 g, 0.58 mmol)을 가하고, 박층 크로마토그래피로 확인하여 출발물질이 모두 소모될 때까지 교반하였다. 피리딘 (0.45 mL, 5.6 mmol)을 가하고, 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고, 이어서 60 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 식히고 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 잔사를 EtOAc (100 mL) 및 NaHCO3 포화수용액 (50 mL)에 분배시키고, 상기 층들을 분리하고 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 황색 고체를 얻었다. 상기 고체를 에틸 에테르로 분쇄하고 (triturated), 여과하여, 화합물 TX63748 (108 mg)을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.25 (s, 1H), 8.74 (s, 2H), 8,44 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.59 (m, 3H), 2.08 (m, 2H), 1.75 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z: [M+H]+ 334.1.
화합물 325: 화합물 132 (431 mg, 1.4 mmol)와 IBX (1.6 g, 5.6 mmol)의 DMSO (7 mL) 중 용액을 65 ℃에서 7시간 동안 가열하였다. 50 mL 물로 반응을 종료시킨 후 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 상기 EtOAc 추출물을 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (실리카 겔, 5-25% EtOAc/헥산) 하여 화합물 325 을 백색 고체 상태로 수득하였다 (189 mg, 43%). MS: m/z [M+H]+ 307.
화합물 326: 화합물 325 (182 mg, 0.59 mmol), 요오드 (302 mg, 1.2 mmol) 및 피리딘 (145 mg, 1.8 mmol)의 THF (3 mL) 중의 혼합물을, 60 ℃에서 30시간 동안 가열하였다. 소디움 티오설페이트 (25 mL)로 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×25 mL)로 추출하고, 물로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 326을 밝은 무색 고체 상태로 수득하였다 (258 mg, 100%). MS: m/z [M+H]+ 433.
화합물 TX63829 : 화합물 326 (254 mg, 0.58 mmol) 및 CuI (0.28 g, 1.4 mmol)의 5 mL DMF 중의 혼합물을, 70 ℃에서 가열하였다. FSO2CF2CO2Me (1.7 g, 8.8 mmol) 및 HMPA (1.8 g, 10 mmol)을 차례로 가하고, 이어서 70 ℃에서 6시간 동안 유지시켰다. 상기 용매를 진공하에 제거하고, 얻어진 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (실리카 겔, 5-25% EtOAc/헥산) 하여 화합물 TX63829 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다 (95 mg, 42%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.27 (s, 1H), 7.35-7.48 (m, 3H), 7.28-7.32 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.49-2.65 (m, 3H), 2.10 (dt, 1H, J = 2.0, 12.8 Hz), 1.95-2.02 (m, 1H), 1.64-1.77 (m, 1H), 1.44 (s, 3H), 1.26 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]+ 375.
화합물 327: 화합물 130 (0.54 g, 1.52 mmol)을 DMA (6 mL) 및 징크 시아나이드 (120 mg, 1.02 mmol)에 넣고, dppf (169 mg, 0.30 mmol) 및 탄산나트륨 (161 mg, 1.52 mmol)을 가하였다. 10 분 동안 질소가스 기포를 상기 혼합물에 불어넣고, 이어서 Pd(OAc)2 (34 mg, 0.15 mmol)을 가하고, 10 분 동안 더 질소가스 기포를 불어넣었다. 반응혼합물을 이어서 120 ℃ 밀봉된 용기 내에서 하룻밤 가열하였다. 식힌 후 물 (25 mL)을 가하고, 반응혼합물을 에테르 (3×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 갈색 반고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (10% EtOAc/DCM)하여 0.41 g (90%)의 화합물 327 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 302 [M+H]+.
화합물 328: 화합물 327 (108 mg, 0.36 mmol)을 THF에 넣고 (4 mL) 및 1M HCl (1 mL)을 가하였다. 3일 동안 용액을 교반하고, 이어서 포화 NaHCO3 용액 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 91 mg (99%)의 화합물 328 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 257.9 [M+H]+.
화합물 329: 328 (90 mg, 0.35 mmol)의 THF (2 mL) 및 에틸포메이트 (2 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.6 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 105 mg (>100%)의 화합물 329 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 286 [M+H]+.
화합물 330: 화합물 329 (0.35 mmol)을 EtOH (2 mL), THF (2 mL) 및 물 (0.5 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 염산염 (27 mg, 0.38 mmol)을 가하고, 실온에서 30 분 동안 교반하여 반응시켰다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 추가로 하이드록실아민 염산염 (5 mg)을 가하고, 추가로 4시간 동안 50 ℃에서 계속 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 100 mg (100%)의 화합물 330 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 283 [M+H]+.
화합물 331: 화합물 330 (100 mg, 0.35 mmol)을 3:1 THF/MeOH (4 mL)에 현탁시키고, NaOMe (0.6 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하고 하룻밤 교반하였다. 그 용액을 농축하고, 포화 수용액 KH2PO4 (20 mL)을 가하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (10% EtOAc/DCM)하여 71 mg (72%)의 화합물 331 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 283.1 [M+H]+.
화합물 TX63725 : 화합물 331 (71 mg, 0.25 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (43 mg, 0.15 mmol)을 가하고, 90 분 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.4 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (5-10% EtOAc/DCM)하여 52 mg (74%)의 화합물 TX63725 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.28 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.81 (ddd, 1H, J = 1.2, 6.4, 17.2 Hz), 2.60 (m, 1H), 2.48 (m, 1H), 1.92-2.06 (m, 2H), 1,67 (m, 1H), 1.34 (s, 3H), 1.24 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI): m/z 281.1 [M+H]+.
화합물 332: 화합물 327 (0.29 g, 0.96 mmol)을 압력용기(heavy-walled vessel) 중의 톨루엔 (5 mL)에 넣었다. 트리메틸실릴아자이드 (0.25 mL, 1.92 mmol)을 가하고 이어서 다이부틸틴 옥사이드 (24 mg, 0.096 mmol)을 가하였다. 상기 용기를 밀봉하고, 하룻밤 130 ℃ 오일 배쓰에서 가열하였다. 식힌 후 MeOH (5 mL)을 가하고, 그 용액을 농축하고 진공 건조하여 0.45 g 황색 유리질을 얻었다. MS (APCI): m/z 345 [M+H]+. 이 물질을 DMF (5 mL)에 넣고, K2CO3 (0.66 g, 4.81 mmol)을 가하고 이어서 요오드화메틸 (0.30 mL, 4.81 mmol)을 가하였다. 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물 (25 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.40 g의 갈색 오일 상태로 수득하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (50% EtOAc/헥산)하여 147 mg (43%)의 화합물 332 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 373.1 [M+H]+.
화합물 333: 화합물 332 (177 mg, 0.49 mmol)을 THF에 넣고 (4 mL) 및 1M HCl (1 mL)을 가하였다. 3일 동안 용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 150 mg (97%)의 화합물 333 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 315 [M+H]+.
화합물 334: 화합물 333 (95 mg, 0.29 mmol)의 THF (2 mL) 및 에틸포메이트 (2 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.85 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 165 mg (100%)의 화합물 334 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 343.1 [M+H]+.
화합물 335: 화합물 334 (163 mg, 0.48 mmol)을 EtOH (3 mL), THF (3 mL), 및 물 (0.5 mL)에 현탁시켰다. 하이드록실아민 염산염 (37 mg, 0.53 mmol)을 가하고, 실온에서 30 분 동안 교반하여 반응시켰다. 이어서 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 145 mg (90%)의 화합물 335 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]+.
화합물 336: 화합물 335 (145 mg, 0.43 mmol)을 THF (4 mL) 및 MeOH (1 mL)에 현탁시키고, NaOMe (0.8 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하였다 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 148 mg의 황갈색 폼 (tan foam)을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (1:3 EtOAc/DCM)하여 125 mg (86%)의 화합물 336 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): 340.1 [M+H]+.
화합물 TX63719 : 화합물 336 (125 mg, 0.37 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (63 mg, 0.22 mmol)을 가하고, 2시간 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.5 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (10% EtOAc/DCM)하여 87 mg (70%)의 화합물 TX63719 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.46 (s, 1H), 4.41 (s, 3H), 4.20 (s, 3H), 3.06 (dd, 1H, J = 6.3, 17.3 Hz), 2.75 (ddd, 1H, J = 7.2, 11.6, 17.6 Hz), 2.55 (m, 1H), 2.01-2.13 (m, 2H), 1.76 (m, 1H), 1.44 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI): 338.1 [M+H]+.
화합물 337: 조 화합물 332 (1.29 mmol)을 피리딘 (5 mL)에 넣고, 아세트산 무수물 (0.25 mL, 2.64 mmol)을 가하였다. 그 용액을 110 ℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.40 g의 화합물 337을 어두운 갈색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 359.2 [M+H]+.
화합물 338: 조 화합물 337 (0.40 g, 1.12 mmol)을 THF에 넣고 (5 mL) 및 1M HCl (1 mL)을 가하였다. 3일 동안 용액을 교반하고, 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (75% EtOAc/헥산)하여 70 mg (20%)의 화합물 338 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 315.1 [M+H]+.
화합물 339: 화합물 338 (69 mg, 0.22 mmol)의 THF (2 mL) 및 에틸포메이트 (1 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.4 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 75 mg (100%)의 화합물 339 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 343.1 [M+H]+.
화합물 340: 화합물 339 (75 mg, 0.22 mmol)을 3:1 THF/EtOH (4 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 (34 mg, 50 wt% 용액/물)을 가하고, 1 시간 동안 교반하여 반응시켰다. 추가로 하이드록실아민 (34 mg)을 가하고, 하룻밤 실온에서 반응용액을 교반하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 70 mg의 황갈색 폼 (tan foam). 이 물질을 벤젠 (3 mL)에 현탁시키고, p-TsOH (1 mg)을 가하였다. 반응혼합물을 70 ℃에서 8시간 동안 가열하였다. 식힌 후 그 용액을 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 70 mg의 황갈색 폼 (tan foam)을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (1:2 EtOAc/DCM to 2:1 EtOAc/DCM)하여 35 mg (47%)의 화합물 340 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]+.
화합물 341: 화합물 340 (35 mg, 0.10 mmol)을 THF에 넣고 (2 mL) 및 MeOH (1 mL) 및 NaOMe (0.2 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 5시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (10 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 35 mg (100%)의 화합물 341을 황갈색 폼 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]+.
화합물 TX63857 : 화합물 341 (35 mg, 0.10 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (17.7 mg, 0.062 mmol)을 가하고, 1시간 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.2 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (20% EtOAc/DCM)하여 16 mg (46%)의 화합물 TX63857 을 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.43 (s, 1H), 4.22 (s, 3H), 3.01 (dd, 1H, J = 6.4, 17.2 Hz), 2.68-2.82 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.49-2.59 (m, 1H), 2.00-2.13 (m, 2H), 1.69-1.84 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI): m/z 338.0 [M+H]+.
화합물 342: 화합물 327 (0.71 g, 2.36 mmol)을 EtOH (10 mL)에 현탁시키고, 물 (5 mL)을 가하고 이어서 KOH (0.66 g, 11.8 mmol)을 가하였다. 4 일 동안 반응혼합물을 교반하고, 이어서 포화 KH2PO4 (50 mL)에 봇고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (25 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.75 g (100%)의 화합물 342 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 320.1 [M+H]+.
화합물 343: 화합물 342 (380 mg, 1.19 mmol)을 DMAc-DMA (3 mL)에 가하고, 반응혼합물을 80 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하고, 진공 건조하여 343 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 389.1 [M+H]+.
화합물 344: 하이드록실아민 염산염 (124 mg, 1.78 mmol)을 다이옥산 (4 mL)에 현탁시키고, Et3N (0.25 mL, 1.78 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 수 분 동안 소니케이션 (sonication)하였다. 343 (1.19 mmol)의 다이옥산 (4 mL) 중 용액을 가하고 이어서 아세트산 (0.36 g, 5.94 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 80 ℃에서 2시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각되도록 하였다. 반응혼합물을 포화 NaHCO3 (25 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (25 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (5-20% EtOAc/DCM)하여 295 mg (69%)의 화합물 344 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 359.1 [M+H]+.
화합물 345: 화합물 344 (290 mg, 0.81 mmol)을 THF에 넣고 (12 mL) 및 1M HCl (3 mL)을 가하였다. 4일 동안 반응용액을 교반하고, 이어서 포화 NaHCO3 (25 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (25 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 246 mg (97%)의 화합물 345 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 315.0 [M+H]+.
화합물 346: 화합물 345 (230 mg, 0.73 mmol)을 THF (6 mL) 및 에틸포메이트 (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. NaOMe (1.3 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 얼음조에서 냉각시키고, KH2PO4 포화수용액 (30 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (25 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 250 mg (100%)의 화합물 346 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 343.0 [M+H]+.
화합물 347: 화합물 346 (250 mg, 0.73 mmol)을 THF (6 mL), EtOH (3 mL) 및 물 (0.5 mL)에 현탁시켰다. 하이드록실아민 염산염 (76 mg, 1.10 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (25 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (25 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 250 mg (100%)의 화합물 347 을 밝은 황색 폼(foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]+.
화합물 348: 화합물 347 (0.73 mmol)을 3:1 THF/MeOH (8 mL)에 넣고, NaOMe (1.3 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하였다 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (40 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (25 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 250 mg 의 밝은 황색 폼(foam)을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (10-15% EtOAc/DCM)하여 190 mg (77%)의 화합물 348 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]+.
화합물 TX63872 : 화합물 348 (190 mg, 0.56 mmol)을 DMF (5 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (96 mg, 0.34 mmol)을 가하고, 2시간 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (1 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (5% EtOAc/DCM)하여 150 mg (79%)의 화합물 TX63872 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.42 (s, 1H), 4.23 (s, 3H), 3.10 (dd, 1H, J = 6.0, 17.2 Hz), 2.75-2.86 (m, 1H), 2.48-2.60 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.00-2.15 (m, 2H), 1.69-1.83 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI): m/z 338.0 [M+H]+.
화합물 349: 디에틸 옥살레이트 (5 g, 10eq)를 NaH (0.51 g, 오일 중 60%)의 THF (10 mL) 중 현탁액에 가하였다. 127 (0.8 g, 3.35 mmol)의 THF (10 mL) 중 용액을 가하였다. 16시간 동안 환류한 후, 반응혼합물을 식히고, 포화 KH2PO4으로 중화시키고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. EtOAc을 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하여 화합물 349 (1.1 g, 100%). MS: m/z [M+H]+ 311.
화합물 350: 화합물 349 (1.1 g, 3.35 mmol), 메틸하이드라진 (310 mg, 6.7 mmol) 및 EtOH (15 mL)의 혼합물을, 60 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 EtOH를 제거하고, 얻어진 조 생성물을 짧은 실리카 겔 충전 컬럼에서, 50% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 350 을 백색 고체 상태로 수득하였다 (220 mg, 19% 수율). MS: m/z [M+H]+ 349.
화합물 351: 화합물 350 (0.22 g, 0.63 mmol)의 MeOH (5 mL) 중 용액을 3N HCl(aq) (2 mL)으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하고 포화 NaHCO3(aq) (25 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 351 을 고체 상태로 수득하였다. (0.14 g, 73% 수율). MS: m/z [M+H]+ 305.
화합물 352: 화합물 351 (0.14 g, 0.46 mmol)의 5 mL HCOOEt 중 용액에 실온에서, 30% NaOMe/MeOH (0.4 g, 5 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, 포화 KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 352 (155 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 333.
화합물 353: 화합물 352 (155 mg, 0.46 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액에, NH2OH-HCl (75 mg, 2eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 353 (155 mg, 100%). MS: m/z [M+H]+ 330.
화합물 354: 화합물 353 (155 mg, 0.46 mmol)의 2:1의 THF/MeOH (3 mL) 중 용액에, MeOH 중의 30% NaOMe (0.95 g, 10 eq) 용액을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 (25 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 354 (140 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 302.
화합물 355: 화합물 354 (140 mg, 0.46 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃에서, DBDMH (92 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (0.4 g, 10 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 25-100% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 355 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (110 mg, 80% 수율). MS: m/z [M+H]+ 300.
화합물 TX63655 : 355 (110 mg, 0.36 mmol)의 5 mL THF 중 용액에 0 ℃에서, (COCl)2 (350 mg, 6 eq) 및 1 방울의 DMF을 가하고, 3시간 동안 실온에서 용액을 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔사를 피리딘 (5 mL)에 녹이고, 디메틸아민 염산염 (450 mg, 10 eq)을 가하고, 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 피리딘을 증발시킨 후, 얻어진 조 생성물을 실리카 컬럼 크로마토그래피로 정제하는데, 15-50% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63655 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (40 mg, 35% 수율). 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ8.39 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.98 (s, 3H), 2.93 (s, 3H), 2.76-2.67 (m, 1H), 2.46-2.40 (m, 2H), 2.20-2.05 (t, 1H, J = 2.37, 12.3, 12.5), 1.95-1.85 (m, 1H), 1.65-1.60 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.20-1.12 (d, 3H, J = 6.61); MS: m/z [M+H]+ 327.
화합물 356: n-BuLi (1.6 M/헥산, 0.6 mL, 0.96 mmol)을, DIPA (110 mg, 1.1 mmol)의 THF (2 mL) 중의 혼합물에 0 ℃에서 가하고, 30 분 동안 교반하고, 이어서 반응혼합물의 온도를 -78 ℃로 내렸다. 화합물 TX63570 (0.2g, 0.68 mmol)의 1 mL THF 중의 용액을 LDA 용액에 적가하였다. 반응혼합물을 -78 ℃에서 2시간 동안 교반시키고, 벤질브로마이드 (65 mg, 1.1 eq)의 1 mL THF 중의 용액을 가하였다. 2시간 동안 0 ℃에서 교반한 후에, 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 1N HCl (2 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 유기층들을 합하여 물 및 브라인으로 세척하였다. 얻어진 조 생성물을 플레쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 5-30% EtOAc/헥산)하여 화합물 356을 오일 상태로 수득하였다 (115 mg, 45%). MS (APCI): m/z [M+H]+ 383.
화합물 357: 화합물 356 (115 mg, 0.3 mmol)을 10% Pd/C (65 mg)와 함께 실온에서 THF (15 mL)에 녹였다. 반응혼합물을 수소풍선으로 처리하고, 2 일 동안 교반하고, 여과하고, 농축하여 화합물 357, 105 mg. MS (APCI): m/z [M+H]+ 385.
화합물 358: 화합물 357 (105 mg, 0.27 mmol)의 5 mL HCOOEt 중 용액에 실온에서, 30% NaOMe/MeOH (0.5 g, 10 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, 포화 수용액 KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 358 (110 g, 98% 수율). MS (APCI): m/z [M+H]+ 413.
화합물 359: 화합물 358 (105 mg, 0.26 mmol)의 5 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (85 mg, 2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 359 (110 mg, 100%). MS (APCI): m/z [M+H]+ 410.
화합물 360: 화합물 359 (110 mg, 0.26 mmol)의 2:1의 THF/MeOH (3 mL) 중의 용액에, 30% NaOMe (0.5 g, 5 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 9시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 KH2PO4 (포화, 15 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 360 (110 mg, 100% 수율). MS (APCI): m/z [M+H]+ 410.
화합물 TX63607 : 화합물 360 (110 mg, 0.26 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃ 에서, DBDMH (42 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g, 50 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-30% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63607 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (41 mg, 39% 수율). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.45 (s, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.37-7.42 (m, 1H), 7.23-7.30 (m, 4H), 7.11-7.19 (m, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.58 (br d, 1H, J=15 Hz), 3.07 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 2.84 (br d, 1H, J=10 Hz), 2.58 (dd, 1H, J=20, 5 Hz), 2.37-2.44 (m, 1H), 2.16-2.20 (m, 2H), 1.70-1.79 (m, 1H), 1.46 (s, 3H); MS (APCI): m/z [M+H]+ 408.
화합물 361: KHMDS (658 mg, 3.30 mmol)의 THF (6 mL) 중 용액을 -60 ℃로 냉각시켰다. TX63570 (482 mg, 1.65 mmol)의 THF (4 mL) 중 용액을 적가하였다. 그 용액을 0 ℃로 온도가 천천히 올라가도록 하고 30 분 동안 교반하였다. 그 용액을 -60 ℃로 다시 냉각시키고, 벤질브로마이드 (0.30 mL, 2.47 mmol)을 가하였다. 그 용액을 2시간에 걸쳐 실온으로 온도가 올라가도록 하였다. 포화 수용액 NH4Cl (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 0.67 g의 조 폼 (crude foam)을 얻고, 플레쉬 크로마토그래피 (10% EtOAc/DCM)하여 120 mg (15%)의 361 을 밝은 황색 폼(foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 473.1 [M+H]+.
화합물 362: 화합물 361 (120 mg, 0.25 mmol)을 10% Pd/C (65 mg) 실온에서 THF (15 mL)에 녹였다. 반응혼합물을 수소풍선으로 처리하고, 2일 동안 교반하고, 여과하고, 농축하여 화합물 362, 120 mg 을 얻었다. MS (APCI): m/z [M+H]+ 475.
화합물 363: 화합물 362 (120 mg, 0.25 mmol)의 4 mL HCOOEt 중 용액에 실온에서, 30% NaOMe/MeOH (0.3 g, 6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, 포화 수용액 KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 363 (120 mg, 95% 수율). MS (APCI): m/z [M+H]+ 503.
화합물 364: 화합물 363 (120 mg, 0.23 mmol)의 5 mL EtOH 중 용액에, NH2OH-HCl (85 mg, 2 eq)을 가하고, 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 364 (120 mg, 100%). MS (APCI): m/z [M+H]+ 500.
화합물 365: 화합물 364 (120 mg, 0.23 mmol)의 2:1의 THF/MeOH (3 mL) 중 용액에, 30% NaOMe (0.5 g, 5 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 12시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 KH2PO4 (포화, 15 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 365 (115 mg, 98% 수율). MS (APCI): m/z [M+H]+ 500.
화합물 TX63601 : 화합물 365 (115 mg, 0.23 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃에서, DBDMH (38 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g, 55 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 (5-30% EtOAc/헥산) 하여 화합물 TX63601 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (31 mg, 28% 수율). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.35 (s, 1H), 7.40-7.48 (m, 3H), 7.25-7.31 (m, 5H), 7.09-7.18 (m, 5H), 6.91 (d, 2H, J=10 Hz), 3.74 (s, 3H), 3.28 (d, 1H, 15 Hz), 3.18 (d, 1H, J=15 Hz), 2.92 (d, 1H, J=15 Hz), 2.62-2.69 (m, 2H), 2.36-2.43 (m, 2H), 2.16 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 2.02-2.08 (m, 1H), 1.65 (s, 3H); MS (APCI): m/z [M+H]+ 498.
화합물 366: 디이소프로필아민 (0.30 mL, 2.15 mmol)의 THF (2 mL) 중 용액을 -78 ℃로 냉각시키고, BuLi (1.6 M/헥산, 1.35 mL, 2.15 mmol)을 적가하였다. 그 용액을 냉각조로부터 제거해내어 15 분 동안 교반하였다. 그 용액을 -78 ℃로 다시 냉각시키고, TX63570 (0.21 g, 0.72 mmol)의 THF (3 mL) 중 용액을 적가하였다. 15 분 동안 반응용액을 교반하고, 이어서 얼음조에 옮기고, 30 분 동안 교반하였다. 그 용액을 -78 ℃로 다시 냉각시키고, 다이페닐이오도늄 클로라이드 (diphenyliodonium chloride) (0.227 g, 0.72 mmol)의 DMF (8 mL) 중 현탁액을 가하였다. 1시간 동안 -78 ℃에서 반응용액을 교반하고, 이어서 실온으로 온도가 올라가도록 하고 3시간 동안 교반하였다. NH4Cl 포화수용액 (20 mL)으로 반응을 종료시킨 후 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 0.33 g의 갈색 오일 상태로 수득하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (25% EtOAc/DCM)하여 80 mg (31%)의 366 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 369 [M+H]+.
화합물 367: 화합물 366 (76 mg, 0.019 mmol)을 THF (5 mL)에 넣고 질소하에서 10% Pd/C (20 mg)을 가하였다. 반응혼합물을 회수하고 H2로 퍼지(purge)시키고(3×), 및 H2 풍선하에 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 고운 프릿 (a fine frit)으로 여과하고, 여액을 농축하여 화합물 80 mg (>100%)의 367 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 371.1 [M+H]+.
화합물 368: 화합물 367 (75 mg, 0.20 mmol)의 에틸포메이트 (5 mL) 중 용액을 얼음조(ice bath)에서 냉각시켰다. NaOMe (0.55 g, 30 wt%/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. KH2PO4 포화수용액 (10 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 90 mg (>100%)의 368을 황갈색 폼 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 399 [M+H]+.
화합물 369: 화합물 368 (0.20 mmol)을 EtOH (3 mL) 및 물 (0.5 mL)에 넣었다. 하이드록실아민 염산염 (15 mg, 0.22 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 60 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 그 용액을 식히고 농축하였다. 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (10 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 90 mg (>100%)의 화합물 369을 황갈색 폼 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 396 [M+H]+.
화합물 370: 화합물 369 (0.20 mmol)을 2:1 THF:MeOH (3 mL)에 넣고, NaOMe (0.3 g, 30 wt%/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 4시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (10 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (1:2 EtOAc/DCM)하여 72 mg (91%)의 화합물 370 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): m/z 396.1 [M+H]+
화합물 TX63629 : 화합물 370 (71 mg, 0.18 mmol)을 DMF (2 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (31 mg, 0.11 mmol)을 가하고, 2시간 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.2 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 식힌 후 그 용액을 진공하에서 농축하여 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (20% EtOAc/DCM)하여 56 mg (79%)의 TX63629 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI): 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (s, 1H), 7.52-7.26 (m, 8H), 7.14 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.68 (d, 1H, J = 13.6), 2.72 (m, 1H), 2.54-2.39 (m, 2H), 2.67 (m, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.46 (m, 1H); m/z 394.1 [M+H]+.
화합물 371: 다이메틸 카보네이트 (3.1g, 10 eq)을 NaH (0.51 g, 오일 중60%)의 THF (10 mL) 중의 현탁액에 가하였다. 화합물 127 (0.8 g, 3.35 mmol)의 THF (10 mL) 중 용액을 가하였다. 16시간 동안 환류한 후, 그 용액을 식히고, KH2PO4 (conc.)으로 중화시키고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. EtOAc를 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하여 화합물 371 (1 g, 100%). MS: m/z [M+H]+ 297.
화합물 372: 아세트이미드아마이드 염산염 (3.2 g, 10 eq)와 피페리딘 (1.45 g, 5 eq)의 10 mL i-PrOH 중 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 조 화합물 371 (1 g, 3.35 mmol)의 5 mL 2-프로판올 중의 용액을 천천히 가하고, 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 반응혼합물을 2일 동안 가열 환류하고, 이어서 농축하였다. 반응혼합물을 에테르 (50 mL)와 혼합하였다. 생성물을 석출시키고, 여과하여, 물로 세척하여, 화합물 372 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (425 mg, 42% 수율). MS: m/z [M+H]+ 305.
화합물 373: 화합물 372 (0.4 g, 1.3 mmol)의 옥시염화인 (phosphorus oxychloride)(10 mL, 107 mmol) 중 현탁액에, 실온에서 DMF 2방울을 가하였다. 140 ℃에서 3시간 동안 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 이어서 농축하여 건조물이 되도록 하고, EtOAc (50 mL)로 희석하고, NaHCO3 (50 mL) 및 물 (50 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 건조하고 (MgSO4), 증발시켜 건조물이 되도록 하였다. 화합물 373을 조 황색 오일 상태로 수득하였으며 (385 mg, 100%), 이를 추가의 정제공정을 거치지 않고 사용하였다.
화합물 374: MeOH 중 30% NaOMe (1.2 g, 5 eq)을, 화합물 373의 무수 MeOH (10 mL) 중 용액을 교반하면서 여기에 적가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 3 시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 이어서 농축하여 건조물이 되도록 하고, EtOAc (35 mL)로 희석하고, 포화 KH2PO4 (25 mL)로 이어서 브라인으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 용매를 제거하였다. 실리카 겔 충전 컬럼 크로마토그래피 (5-40% EtOAc/헥산 gradient을 이용) 로 정제하여 화합물 374을 오일 상태로 수득하였다 (155 mg, 44% 수율). MS: m/z [M+H]+ 275.
화합물 375: 화합물 374 (155 mg, 0.56 mmol)의 5 mL HCOOEt 중 용액에, 30% NaOMe /MeOH (1 g, 10 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, 포화 KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 375. (170 mg, 100% 수율)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 303.
화합물 376: 화합물 375 (170 mg, 0.56 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (80 mg, 2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 376 (170 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 300.
화합물 377: 화합물 376 (170 mg, 0.56 mmol)의 2 mL THF 및 1 mL MeOH 중 용액에, 30% NaOMe (1 g, 10eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 9시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 (15 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 377 (170 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 300.
화합물 TX63646 : 화합물 377 (170 mg, 0.56 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃ 에서, DBDMH (90 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 15-40% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63646 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (50 mg, 30% 수율). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.92 (s, 1H), 4.00 (s, 3H), 2.80 (dd, 1H, J = 6.7, 18.3 Hz), 2.61 (s, 3H), 2.52-2.60 (m, 2H), 2.04-2.16 (m, 2H), 1.73 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.32 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]+ 398.
화합물 378: 밀봉가능한 바이알 내에서, 약간 순수하지 않은 화합물 371 (앞 단계에서 얻어진 조 생성물, 약 3.36 mmol)의 20 mL i-PrOH 중 용액을 고체 시클로프로판카복스이미드아마이드 염산염 (4.05 g, 33.59 mmol)으로 처리하고 이어서 피페리딘 (1.7 mL, 17.2 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플에 N2를 불어넣고, 밀봉하고, (블럭히터(block heater)를 이용하여) 90 ℃에서 72시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 0.85 g (77%)의 378 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 331 (100%) [M+H]+.
화합물 379: 화합물 378 (0.85 g, 2.58 mmol)의 10 mL MeOH 및 3N HCl (10 mL, 30 mmol) 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% 수용액 NH4OH 용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, CHCl3 로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.70 g (94%)의 379 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 287 (100%) [M+H]+.
화합물 380: 화합물 379 (0.70 g, 2.43 mmol) 및 N,N-다이이소프로필에틸아민 (0.47 mL, 2.70 mmol)의 24 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) 옥시염화인 (2.3 mL, 24.6 mmol)을 적가하였다. 상기 첨가 후, 상기 샘플을 80 ℃에서 N2 하 16시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고 이어서 조심스럽게 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.69 g (94%)의 380 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 305/307 (100/47%) [M+H]+.
화합물 381: 실온에서 N2 하에 있는, 화합물 380 (0.32 g, 1.07 mmol)의 10 mL THF:MeOH (1:1) 중의 용액을, MeOH 중의 NaOMe, 30 wt% 용액 (2.0 mL, 10.7 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.34 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 381 을 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 382: 약간 순수하지 않은 화합물 381 (0.34 g, 약 1.07 mmol) 및 에틸포메이트 (9.0 mL, 111.0 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (2.0 mL, 10.7 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.35 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 382 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 383: 약간 순수하지 않은 화합물 382 (0.35 g, 약 1.07 mmol) 및 하이드록실아민 염산염 (0.11 g, 1.58 mmol)의 25 mL EtOH 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고, EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.31 g (90%) 약간 순수하지 않은 화합물 383 을 황갈색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (ES) m/z 326 (100%) [M+H]+.
화합물 384: 약간 순수하지 않은 화합물 383 (0.31 g, 0.96 mmol)의 20 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (0.90 mL, 4.80 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 0.13 g (41%) 384 을 회색을 띤 백색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다.
화합물 TX63761 : 화합물 384 (0.13 g, 0.40 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.057 g, 0.20 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.33 mL, 4.08 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 0.030 g (23%)의 TX63761 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.88 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 7.0, 18.2 Hz), 2.52 (m, 2H), 2.16 (m, 1H), 2.06 (m, 2H), 1.68 (dq, 1H, J = 6.5, 12.8 Hz), 1.38 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 1.10 (m, 2H), 1.02 (m, 2H); MS (APCI) m/z 324 (100%) [M+H]+.
화합물 385: 밀봉가능한 바이알 내에서, 371 (앞 단계에서 얻어진 조 생성물, 약 4.20 mmol)의 15 mL n-BuOH 중 용액을 고체 2,2-다이메틸프로피온아미딘 염산염 (5.0 g, 36.6 mmol)으로 처리하고 이어서 피페리딘 (2.1 mL, 21.2 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플에 N2를 불어넣고, 밀봉하고, (블럭히터를 이용하여) 100 ℃에서 72시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 0.87 g (60%)의 화합물 385을 황갈색의 진득진득한 (tan gummy) 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 347 (100%) [M+H]+.
화합물 386: 화합물 385 (0.87 g, 2.50 mmol)와 N,N-다이이소프로필에틸아민 (0.48 mL, 2.76 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액에, 옥시염화인 (2.3 mL, 24.7 mmol)을 (주사기로) 적가하였다. 상기 첨가 후, 상기 샘플을 90 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온에서 하룻밤. 상기 샘플을 농축하고 이어서 조심스럽게 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.85 g (93%)의 386 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 365/367 (100/38%) [M+H]+.
화합물 387: 화합물 386 (0.42 g, 1.16 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 MeOH 중의 NaOMe, 30 wt% 용액 (1.1 mL, 5.9 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플에 N2를 불어넣고, 밀봉하고, 80 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.42 g (~100%)의 387 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 388: 화합물 387 (0.42 g, 1.16 mmol)와 3N HCl (10 mL, 30 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% 수용액 NH4OH 용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.34 g (92%)의 388을 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 317 (100%) [M+H]+.
화합물 389: 화합물 388 (0.34 g, 1.07 mmol) 및 에틸포메이트 (10 mL, 124 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (1.0 mL, 5.3 mmol)을 (주사기로) 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.36 g (97%)의 389 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 345 (100%) [M+H]+.
화합물 390: 화합물 389 (0.36 g, 1.04 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.11 g, 1.58 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고, EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.59 g (>100%)의 화합물 390 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 391: 약간 순수하지 않은 화합물 390 (앞 단계에서 얻어진 조 생성물, 약 1.04 mmol)의 10 mL MeOH:THF (1:1) 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (0.98 mL, 5.22 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 20% EtOAc/헥산) 하여 0.18 g (50%)의 화합물 391 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 342 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63853 : 화합물 391 (0.18 g, 0.52 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.075 g, 0.26 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.42 mL, 5.20 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 20% EtOAc/헥산) 하여 0.068 g (38%)의 화합물 TX63853 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.60 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.76 (dd, 1H, J = 6.4, 18.0 Hz), 2.51-2.60 (m, 2H), 2.00-2.15 (m, 2H), 1.60-1.75 (m, 1H), 1.36 (s, 12H), 1.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 340 (100%) [M+H]+.
화합물 392: KOt-Bu (250 mg, 1eq)을 무수 EtOH (20 mL)에 녹였다. 티오우레아 (1.7 g, 10 eq) 및 371 (950 mg, 3.2 mmol)을 상기 염기 용액에 가하였다. 반응혼합물을 16시간 동안 환류시켰다. 용매를 진공하에서 농축하여 거의 건조물로 얻은 후 잔사를 다시 물 (10 mL)에 녹였다. 그 용액을 3N HCl으로 중화시키고, 침전물을 취하고, 물로 세척하고, 진공 건조하여 화합물 392 (900 mg, 87% 수율). MS: m/z [M+H]+ 323.
화합물 393: 화합물 392 (900 mg, 2.79 mmol)을 DMF (10 mL)에 녹이고, K2CO3 (1.2 g, 3eq)을 가하고, 30 분 동안 반응혼합물을 교반하였다. MeI (0.8 g, 2 eq)을 적가하고, 2시간 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 물 (100 mL)로 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 유기층을 물 및 브라인으로 세척하고, 농축하여 화합물 393 (975 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 351.
화합물 394: 화합물 393 (975 mg, 2.79 mmol) 및 Pd (PPh3)4 (200 mg, 5 mol%)의 THF (20 mL) 중의 혼합물을 질소 하에서 교반하고 여기에, 페닐보론산 (1 g, 3eq) 및 CuTC (1.8 g, 3.5 eq)을 가하였다. 반응혼합물을 16시간 동안 가열 환류하였다. 상기 용매를 진공하에 제거하고, 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하는데 10-35% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 394 을 고체 상태로 수득하였다 (415 mg, 40% 수율). MS: m/z [M+H]+ 381.
화합물 395: 화합물 394 (455 mg, 1.2 mmol)의 MeOH (10 mL) 중 용액을 3N HCl(aq) (3 mL)으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하고, 포화 NaHCO3 ( aq ) (25 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 395을 오일 상태로 수득하였다 (405 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 337.
화합물 396: 화합물 395 (405 mg, 1.2 mmol)의 5 mL HCOOEt 중 용액에, 30% NaOMe/MeOH (1.3 g, 6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 이어서 물에 붓고, 포화 KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 396 (435 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 365.
화합물 397: 화합물 396 (435 mg, 1.18 mmol)의 20 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (170 mg, 2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 397 (430 mg, 98% 수율). MS: m/z [M+H]+ 362.
화합물 398: 화합물 397 (430 mg, 1.18 mmol)의 2 mL THF 및 2 mL MeOH 중 용액에, 30% NaOMe (1.7 g, 8 eq)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 (25 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 물 및 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 15-45% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 398 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (215 mg, 50% 수율). MS: m/z [M+H]+ 362.
화합물 TX63666 : 화합물 398 (210 mg, 0.58 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃ 에서, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (95 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 15-45% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63666 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (130 mg, 62% 수율). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.76 (s, 1H), 7.58 (m, 5H), 3.50 (s, 3H), 2.90 (m, 1H), 2.52-2.61 (m, 2H), 2.05-2.20 (m, 2H), 1.72 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.34 (d, 3H, J = 6.6 Hz); MS: m/z [M+H]+ 360.
화합물 399: 화합물 392 (2.6g, 8.06 mmol) 및 8.1 g 클로로아세트산 (10 eq)의 혼합물을, 100 ℃에서 1시간 동안 가열하고, 이어서 10 mL의 물을 가하고, 연이어 5시간 동안 더 가열하였다. 농후한 HCl (0.5 mL)을 가하고, 반응혼합물을 100 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 식히고, 50 mL의 얼음물을 가하였다. 여과하여 침전물을 취하고, 진공 건조하여 399 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (2.1 g, 93% 수율). MS: m/z [M+H]+ 263.
화합물 400: 화합물 399(2.03 g, 7.73 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (1,01 g, 1 eq)의 10 mL POCl3 중의 혼합물을, 90 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 얼음으로 반응을 종료시킨 후 생성물을 석출시키고, 여과하고, 진공 건조하여 화합물 400 을 갈색 고체 상태로 수득하였다 (2.1 g, 90% 수율). MS: m/z 299, 301 (3:2) [M+H]+.
화합물 401a-b: 화합물 400 (2.05 g, 6.85 mmol)와 NaOMe (1.85 g, 1.5 eq, 30%/MeOH)의 25 mL MeOH 중 용액을 50 ℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2×20 mL)로 추출하고, 물로 세척하고, 실리카 겔 칼럼에서 10-15% EtOAc/헥산으로 용출시켜 정제하였다. 수득된 첫번째 화합물은 화합물 401a (1.3 g, 65% 수율)이었다, MS: m/z 295, 297 (3:1) [M+H]+. 수득된 두번째 화합물은 화합물 401b (110 mg, 5.5% 수율)이었다, MS: m/z 291 [M+H]+.
화합물 402: 화합물 401a (130 mg, 0.44 mmol)의 5 mL HCOOEt 중 용액에, 30% NaOMe/MeOH (0.5 g, 6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 이어서 물에 붓고, KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 402 (140 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 319.
화합물 403: 화합물 402 (140 mg, 0.44 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (65 mg, 2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 403 (138 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 316.
화합물 404: 화합물 403 (138 mg, 0.44 mmol)의 2 mL THF 및 1 mL MeOH 중 용액에, 30% NaOMe (0.63 g, 8 eq)을 적가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 (15 mL)와 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 404 (136 mg, 100% 수율). MS: m/z [M+H]+ 316.
화합물 TX63718 : 화합물 404 (136 mg, 0.44 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃ 에서, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (70 mg, 0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-30% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63718 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (55 mg, 40% 수율). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.71 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 2.67 (dd, 1H, J = 7.0, 17.5 Hz), 2.37-2.51 (m, 2H), 1.95-2.06 (m, 2H), 1.62 (m, 1H),1.33 (s, 3H), 1.22 (d, 3H, J = 6.5 Hz); MS: m/z [M+H]+ 314.
화합물 TX63793 및 TX63794 : 화합물 TX63718 (32.7 mg)의 거울상이성질체들(enantiomers)을, 키랄 HPLC (CHIRALPAK IA, 5μ, 30×250 mm, 2:50:50 EtOH/EtOAc/헥산)를 사용하여 분리하여 2개의 잘 분해된 피크들을 얻었다. 하나가 4.04 분이었고, 이것이 화합물 TX63793 (17.6 mg, >99.9% ee)이었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.79 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 6.4, 18.0 Hz), 2.52 (m, 2H), 2.09 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.7 Hz). 그리고 다른 하나는 4.66 분이었고, 이것이 화합물 TX63794 (15.1 mg, 98.8% ee)이었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.79 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 6.4, 18.0 Hz), 2.52 (m, 2H), 2.09 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.7 Hz).
화합물 405a: 화합물 401b (0.25 g, 0.84 mmol)을 DME (6 mL) 및 DMF (3 mL)에 녹였다. 이 용액에, 피리딘-3-일-보론산 (125 mg, 1 mmol), Ph3P (85 mg, 0.32 mmol) 및 K3PO4 (0.54 g, 2.54 mmol)을 가하였다. 10 분 동안 질소가스 기포를 상기 혼합물에 불어넣었다. Pd(OAc)2 (35 mg, 0.16 mmol)을 가하고, 10 분 동안 더 질소가스 기포를 불어넣었다. 현탁액을 90 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고, 농축하고, 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-35%의 EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 405a 을 고체 상태로 수득하였다 (0.28 g, 98% 수율). MS: m/z [M+H]+ 338.
화합물 405b: 피리딘-4-일보론산 (125 mg, 1 mmol)을 화합물 401b의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 405 bb (270 mg, 95% 수율)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 338.
화합물 405c: 2-메톡시페닐보론산 (155 mg, 1 mmol)을 화합물 401b의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 405c (150 mg, 49% 수율)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 367.
화합물 405d: 페닐보론산 (155 mg, 1 mmol)을 화합물 401b의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 405d (185 mg, 65% 수율)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 337.
화합물 405e: 피리미딘-5-일보론산 (140 mg, 1.13 mmol)을 화합물 401b의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 405e (185 mg, 58% 수율)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 339.
화합물 406a: 화합물 405a (280 mg, 0.82 mmol)의 10 mL HCOOEt 중 용액에, 30% NaOMe/MeOH (6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 이어서 물에 붓고, KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 406a (300 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 366.
화합물 406b: 화합물 405b (270 mg, 0.82 mmol)을 화합물 406a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 406b (290 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 366.
화합물 406c: 화합물 405c (150 mg, 0.4 mmol)을 화합물 406a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 406c (120 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 395.
화합물 406d: 화합물 405d (185 mg, 0.51 mmol)을 화합물 406a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 406d (185 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 365.
화합물 406e: 화합물 405e (175 mg, 0.51 mmol)을 화합물 406a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 406e (185 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 367.
화합물 407a: 화합물 406a (300 mg, 0.82 mmol)의 20 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 407a (280 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 363.
화합물 407b: 화합물 406b (290 mg, 0.79 mmol)을 화합물 407a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 407b (290 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 363.
화합물 407c: 화합물 406c (120 mg, 0.3 mmol)을 화합물 407a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 407c (117 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 392.
화합물 407d: 화합물 406d (130 mg, 0.34 mmol)을 화합물 407a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 407d (120 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 376.
화합물 407e: 화합물 406e (185 mg, 0.5 mmol)을 화합물 407a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 407e (180 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 364.
화합물 408a: 화합물 407a (280 mg, 0.78 mmol)의 4 mL THF 및 2 mL MeOH 중 용액에, 30% NaOMe (8 eq)을 적가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 용액 (30 mL)와 혼합하고, EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 408a (220 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 363.
화합물 408b: 화합물 407b (290 mg, 0.79 mmol)을 화합물 408a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 408b (280 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 363.
화합물 408c: 화합물 407c (117 mg, 0.3 mmol)을 화합물 408a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 408c (117 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 392.
화합물 408d: 화합물 407d (120 mg, 0.32 mmol)을 화합물 408a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 408d (110 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 376.
화합물 408e: 화합물 407e (180 mg, 0.5 mmol)을 화합물 408a의 제조공정에 따라 처리하여 표제의 화합물 408e (180 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 364.
화합물 TX63724 : 화합물 408a (0.19 g, 0.52 mmol)을 0 ℃에서 2 mL DMF에 녹였다. Br2 (95 mg, 1.1 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (2 mL)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-45% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63724 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (45 mg, 24% 수율). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.60 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.77 (m, 1H), 8.67 (m, 1H), 7.48 (dd, 1H, J = 4.9, 7.8 Hz), 4.06 (s, 3H), 2.82 (ddd, 1H, J = 1.1, 6.8, 18.7 Hz), 2.47-2.64 (m, 2H), 2.03-2.13 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 1.40 (s, 3H), 1.25 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]+ 361.
화합물 TX63728 : 화합물 408b (0.28 g, 0.77 mmol)을 화합물 TX63724의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 TX63728 (25 mg, 9%)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.59 (s, 1H), 8.46 (bs, 2H), 8.06 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.56 (dd, 1H, J = 5.9, 18.9 Hz), 2.22-2.35 (m, 2H), 1.75-1.87 (m, 2H), 1.44 (m, 1H), 1.13 (s, 3H), 0.99 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]+ 361.
화합물 TX63727 : 화합물 408c (0.117 g, 0.3 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0℃ 에서, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-30% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 45 (80 mg)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.97 (s, 1H), 7.81 (dd, 1H, J = 1.8, 7.6 Hz), 7.42 (m, 1H), 7.04-7.09 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.85 (ddd, 1H, J = 1.0, 6.7, 18.5 Hz), 2.51-2.66 (m, 2H), 2.07-2.17 (m, 2H), 1.75 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]+ 390.
화합물 TX63769 : 화합물 408d (110 mg, 0.29 mmol)을 화합물 TX63727의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 TX63769 (75 mg, 69%)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.00 (s, 1H), 8.46 (m, 2H), 7.49 (m, 2H), 4.10 (s, 3H), 2.86 (ddd, 1H, J = 1.0, 6.8, 18.4 Hz), 2.59 (m, 2H), 2.13 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.31 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]+ 374.
화합물 TX63757 : 화합물 408e (180 mg, 0.5 mmol)을 화합물 TX63724의 제조공정에 따라 처리하여 화합물 TX63757 (100 mg)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.70 (s, 2H), 9.33 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 4.13 (s, 3H), 2.90 (ddd, 1H, J = 0.9, 6.6, 18.8 Hz), 2.63 (m, 2H), 2.16 (m, 2H), 1.77 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 1.33 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]+ 362.
화합물 409: 화합물 401b (515 mg, 1.75 mmol)을 DMAc (10 mL)에 녹였다. 이 용액에, Zn(CN)2 (135 mg, 1.15 mmol), dppf (200 mg, 0.36 mmol) 및 Na2CO3 (190 mg, 1.75 mmol)을 가하였다. 10 분 동안 질소가스 기포를 상기 혼합물에 불어넣었다. Pd(OAc)2 (40 mg, 0.018 mmol)을 가하고, 10 분 동안 더 질소가스 기포를 불어넣었다. 현탁액을 120 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 50 mL 물로 반응을 종료시킨 후, 에테르 (2×50 mL)로 추출하였다. 유기층들을 농축하고, 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-20% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 409 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (0.2 g, 40% 수율). MS (APCI): m/z [M+H]+ 286.
화합물 410: 화합물 409 (0.2 g, 0.7 mmol)의 10 mL HCOOEt 중 용액에, 30% NaOMe/MeOH (6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 이어서 물에 붓고, KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 410 (220 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 361.
화합물 411: 화합물 410 (0.22 g, 0.7 mmol)의 20 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 411 (60 mg, 30% 수율)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 358.
화합물 412: 화합물 411 (60 mg, 0.17 mmol)와 1 mL 트리에틸아민의 2 mL 아세토니트릴 중 용액을 85 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 진공하에 펌프하여 건조물이 되도록하여, 화합물 412 (60 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 358.
화합물 TX63730 : 화합물 412 (60 mg, 0.17 mmol)의 1 mL DMF 중 용액에 0 ℃ 에서, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-30% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63730 (25 mg, 41%)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.83 (s, 1H), 4.42 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 2.82 (m, 1H), 2.45-2.63 (m, 2H), 2.10 (m, 1H), 2.02 (dd, 1H, J = 2.7, 12.8 Hz), 1.70 (m, 1H), 1.39 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.37 (s, 3H), 1.25 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]+ 356.
화합물 413: 약간 순수하지 않은 화합물 372 (1.39 g, 약 4.20 mmol)와 N,N-다이이소프로필에틸아민 (0.80 mL, 4.60 mmol)의 20 mL 벤젠 중 용액에, (주사기로) 옥시염화인 (4.0 mL, 42.9 mmol)을 적가하였다. 상기 첨가 후, 상기 샘플을 90 ℃에서 N2 하 4시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고 이어서 조심스럽게 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 0.75 g (55%)의 화합물 413 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 323/325 [M+H]+ (100/91%).
화합물 414a: 화합물 413 (0.44 g, 1.36 mmol), N,N-다이이소프로필에틸아민 (1.00 mL, 5.74 mmol) 및 몰폴린 (0.24 mL, 2.75 mmol)의 10 mL i-PrOH 중 용액에 N2를 불어넣고, 밀봉하고, 90 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.50 g (98%)의 화합물 414a 을 밝게 황갈색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI): m/z 374 [M+H]+ (100%).
화합물 415a: 화합물 414a (0.50 g, 1.34 mmol)와 3 N HCl (5 mL, 15 mmol)의 5 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% NH4OH 수용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.37 g (84%)의 화합물 415a 을 황갈색 고체 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 330 [M+H]+ (100%).
화합물 416a: 약간 순수하지 않은 화합물 415a (0.37 g, 1.12 mmol) 및 에틸포메이트 (9.0 mL, 111.0 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (1.0 mL, 5.3 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.45 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 416a 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 417a: 약간 순수하지 않은 화합물 416a (0.45 g, 약 1.12 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.12 g, 1.73 mmol)의 20 mL EtOH 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고, CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.47 g (100%)의 어두운 황색 오일을 수득하였으며, 이는 TLC 및 MS에 의하여 확인한 바, 원하는 화합물 7a 및 비탈수 생성물 (undehydrated product)의 혼합물이었다. TLC (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 2 가지 성분들; Rf = 0.47 및 0.12. MS (ES) m/z 355 (100%) [M+H]+. 상기 혼합물 (전체량)와 약간의 (a pinch of) p-톨루엔설폰산 일수화물의 50 mL 벤젠 중 용액을 90 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하였다 (TLC 상, 잔존하는 아래쪽 성분이 나타나지 않았음). 상기 샘플을 식히고 농축하여 0.77 g (>>100%)의 화합물 417a 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 418a: 약간 순수하지 않은 화합물 417a (앞 단계에서 얻어진 조 혼합물 전체량, 약 1.12 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (1.1 mL, 5.9 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.37 g (94%)의 화합물 418a 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 TX63758 : 약간 순수하지 않은 화합물 418a (0.37 g, 1.05 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.15 g, 0.52 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (1.0 mL, 12 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 40% EtOAc/헥산) 하여 0.20 g (54%)의 화합물 TX63758 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.84 (s, 1H), 3.84 (ddd, 2H, J = 2.9, 6.4, 11.3 Hz), 3.75 (ddd, 2H, J = 2.8, 6.6, 11.2 Hz), 3.43 (ddd, 2H, J = 2.4, 6.4, 13.1 Hz), 3.22 (ddd, 2H, J = 2.4, 6.5, 13.1 Hz), 2.68 (m, 2H), 2.55 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.11 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI) m/z 353 [M+H]+ (100%).
화합물 414b: 화합물 413 (0.38 g, 1.17 mmol), N,N-다이이소프로필에틸아민 (0.72 mL, 4.13 mmol) 및 디메틸아민 염산염 (0.11 g, 1.35 mmol)의 10 mL n-BuOH 중의 혼합물에, N2를 불어넣고, 밀봉하고, 90 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 0.25 g (64%)의 화합물 414b 을 백색 왁스상 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 332 [M+H]+ (100%).
화합물 415b: 화합물 414b (0.25 g, 0.75 mmol)와 3N HCl (6 mL, 18 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% NH4OH 수용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.22 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 415b 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 416b: 약간 순수하지 않은 화합물 415b (앞 단계에서 얻어진 전체량, 약 0.75 mmol) 및 에틸포메이트 (6.1 mL, 75.5 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (1.42 mL, 7.57 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.25 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 416b 을 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 417b: 약간 순수하지 않은 화합물 416b (앞 단계에서 얻어진 전체량, 약 0.75 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.080 g, 1.15 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고, CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.23 g (98%) 황색 오일을 얻었으며, 이는 TLC 및 MS에 의하여 확인한 바, 원하는 화합물 417b 및 탈수되지 않은 생성물의 혼합물이었다. TLC (실리카 겔, 40% EtOAc/헥산) 2 가지 성분들; Rf = 0.38 및 0.06. MS (APCI) m/z 331 (M+19, 70%) 및 313 (M+1, 100%). 상기 혼합물 (전체량)와 약간의 (a pinch of) p-톨루엔설폰산 일수화물의 50 mL 벤젠 중 용액을 90 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하였다 (TLC 상, 잔존하는 아래쪽 성분이 나타나지 않았음). 상기 샘플을 식히고 농축한 후 CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.20 g (83%)의 화합물 417b 을 밝은 황색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 418b: 약간 순수하지 않은 화합물 417b (0.20 g, 0.63 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (1.2 mL, 6.4 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.20 g (99%) 약간 순수하지 않은 화합물 418b 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 TX63774 : 약간 순수하지 않은 화합물 418b (0.20 g, 0.62 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.088 g, 0.31 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.50 mL, 6.18 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 0.046 g (24%)의 화합물 TX63774 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 8.85 (s, 1H), 3.00 (s, 6H), 2.75 (m, 2H), 2.54 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.67 (s, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI) m/z 311 [M+H]+ (100%).
화합물 414c: 화합물 413 (0.44 g, 1.37 mmol), N,N-다이이소프로필에틸아민 (0.26 mL, 1.49 mmol) 및 n-부틸아민 (0.70 mL, 7.08 mmol)의 5 mL n-BuOH 중의 혼합물에, N2를 불어넣고, 밀봉하고, 90 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.59 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 414c 을 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 360 [M+H]+ (100%).
화합물 415c: 약간 순수하지 않은 화합물 414c (앞 단계에서 얻어진 전체량, 약 1.37 mmol)와 3N HCl (5 mL, 15 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% NH4OH 수용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, CHCl3로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.42 g (98%) 약간 순수하지 않은 화합물 415c 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 316 [M+H]+ (100%).
화합물 416c: 약간 순수하지 않은 화합물 415c (0.42 g, 1.34 mmol) 및 에틸포메이트 (10.8 mL, 133.7 mmol)의 20 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (1.25 mL, 6.66 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.60 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 416c 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 344 [M+H]+ (100%).
화합물 417c: 약간 순수하지 않은 화합물 416c (앞 단계에서 얻어진 전체량, 약 1.34 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.24 g, 3.45 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고, CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.58 g (>100%)의 어두운 황색 오일을 수득하였으며, 이는 TLC 및 MS에 의하여 확인한 바, 원하는 화합물 417c 및 탈수되지 않은 생성물의 혼합물이었다. TLC (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 2 가지 성분들; Rf = 0.42 및 0.06. MS (APCI) m/z 359 (M+19, 70%) 및 341 (M+1, 100%). 상기 혼합물 (전체량)와 약간의 (a pinch of) p-톨루엔설폰산 일수화물의 50 mL 벤젠 중 용액을 90 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하였다 (TLC 상, 잔존하는 아래쪽 성분이 나타나지 않았음). 상기 샘플을 식히고 농축한 후 CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.46 g (~100%)의 화합물 417c 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. (APCI) m/z 341 [M+H]+ (100%).
화합물 418c: 약간 순수하지 않은 화합물 417c (0.46 g, 약 1.34 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) NaOMe, 30 wt% 용액/MeOH (1.25 mL, 6.66 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 0.19 g (41%)의 화합물 418c 을 황색 오일 상태로 수득하였다.
화합물 TX63827 : 화합물 418c (0.19 g, 0.55 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.078 g, 0.27 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.44 mL, 5.44 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 0.079 g (43%)의 화합물 TX63827 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.91 (s, 1H), 4.39 (s, br, 1H), 3.49 (q, 1H, J = 7.2 Hz), 2.45-2.54 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.28-2.44 (m, 2H), 2.08-2.17 (m, 1H), 2.01 (dt, 1H, J = 2.4, 12.8 Hz), 1.68-1.81 (m, 1H), 1.50-1.62 (m, 3H), 1.31-1.45 (m, 2H), 1.37 (s, 3H), 1.26 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.94 (t, 3H, J = 7.6 Hz); MS (APCI) m/z 339 (100%) [M+H]+.
화합물 414d: 화합물 413 (0.40 g, 1.24 mmol) 및 THF 중 메틸아민, 2.0 M 용액 (3.1 mL, 12.4 mmol)의 10 mL i-PrOH 중의 혼합물에, N2를 불어넣고, 밀봉하고, 90 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 100% EtOAc) 하여 0.34 g (87%)의 화합물 414d 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 318 [M+H]+ (100%).
화합물 415d: 화합물 414d (0.34 g, 1.08 mmol) 및 3N HCl (6 mL, 18 mmol)의 12 mL MeOH:THF (2:1) 중의 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% NH4OH 수용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, CHCl3로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.26 g (87%) 약간 순수하지 않은 화합물 415d 을 밝은 황색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 416d: 약간 순수하지 않은 화합물 415d (0.26 g, 0.94 mmol) 및 에틸포메이트 (7.6 mL, 94.1 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (0.88 mL, 4.69 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.20 g (70%) 약간 순수하지 않은 화합물 416d 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 302 [M+H]+ (100%).
화합물 417d: 약간 순수하지 않은 화합물 416d (0.20 g, 0.65 mmol) 및 하이드록실아민 염산염 (0.069 g, 0.99 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고, CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.24 g (>100%) 황색 거품으로 된 고체를 얻었으며, 이는 TLC 및 MS에 의하여 확인한 바, 원하는 화합물 417d 및 탈수되지 않은 생성물의 혼합물이었다. TLC (실리카 겔, 5% MeOH/CHCl3) 2 가지 성분들; Rf = 0.44 및 0.13. MS (APCI) m/z 317 (M+19, 52%) 및 299 (M+1, 100%). 상기 혼합물 (전체량) 및 약간의 (a pinch of) p-톨루엔설폰산 일수화물의 50 mL 벤젠 중의 용액을, 90 ℃에서 N2 하 4시간 동안 가열하였다 (TLC 상, 잔존하는 아래쪽 성분이 나타나지 않았음). 상기 샘플을 식히고 농축한 후 CHCl3 및 10% 수용액 NH4OH 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.20 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 417d을 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 299 [M+H]+ (100%).
화합물 418d: 약간 순수하지 않은 화합물 417d (0.20 g, 약 0.65 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) MeOH 중 NaOMe, 30 wt% 용액 (0.61 mL, 3.25 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.17 g (89%)의 화합물 418d 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 TX63852 : 화합물 418d (0.17 g, 0.58 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.083 g, 0.29 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.47 mL, 5.81 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 75% EtOAc/헥산) 하여 0.044 g (25%)의 화합물 TX63852 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.93 (s, 1H), 4.48 (s, br, 1H), 3.05 (d, 3H, J = 4.4 Hz), 2.29-2.57 (m, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.09-2.13 (m, 1H), 2.03 (t, 1H, J = 13.2 Hz), 1.68-1.82 (m, 1H), 1.37 (s, 3H), 1.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 297 [M+H]+ (100%).
화합물 419a-b: 화합물 400 (0.56 g, 1.87 mmol) 및 Na 금속(200 mg, 8.7 mmol)의 15 mL EtOH 중의 용액 50 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc (2 ×25 mL)로 추출하고, 물로 세척하고, 실리카 겔 컬럼으로 정제하였다. 2가지의 화합물들을 10-15% EtOAc/헥산으로 용출시켜 단리하였다. 첫번째 화합물은 화합물 419a (160 mg, 28% 수율)이었으며, MS: m/z [M+H]+ 309, 311 (3:1). 두번째 화합물은 화합물 419b (210 mg, 35% 수율)이었다. MS: m/z [M+H]+ 319.
화합물 420: 화합물 419b (210 mg, 0.66 mmol)의 5 mL HCOOEt 중 용액에 실온에서, Na 금속(50 mg, 2.17 mmol)의 EtOH (5 mL) 중의 용액을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 물에 붓고, KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 420 (210 mg, 92% 수율). MS: m/z [M+H]+ 347.
화합물 421: 화합물 420 (0.21 g, 0.6 mmol)의 13 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc (2×25 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 421 (210 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 344.
화합물 422: 화합물 421 (0.21 g, 0.6 mmol)의 3 mL THF 및 1.5 mL MeOH 중 용액에, 30% NaOMe (8 eq)을 적가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 (20 mL)와 혼합하고, EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 422 (200 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 344.
화합물 TX63736 : 화합물 422 (200 mg, 0.58 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃ 에서, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-30% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63736 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (23 mg, 12%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.78 (s, 1H), 4.44 (t, 2H, J = 7.1), 4.42 (t, 2H, J = 7.0), 2.74 (ddd, 1H, J = 0.9, 6.7, 17.9 Hz), 2.51 (m, 2H), 2.08 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 1.45 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.40 (s, 3H), 1.39 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.30 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]+ 342.
화합물 423: 화합물 419a (0.16 g, 0.51 mmol)을 DME (6 mL) 및 DMF (3 mL)에 녹였다. 이 용액에, 페닐보론산 (80 mg, 0.65 mmol), Ph3P (85 mg, 0.32 mmol) 및 K3PO4 (0.33 g, 1.56 mmol)을 가하였다. 10 분 동안 질소가스 기포를 상기 혼합물에 불어넣었다. Pd(OAc)2 (35 mg, 0.16 mmol)을 가하고, 10 분 동안 더 질소가스 기포를 불어넣었다. 현탁액을 90 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 여과하고, 농축하고, 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-25% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 423 을 고체 상태로 수득하였다 (120 mg, 67% 수율). MS: m/z [M+H]+ 351.
화합물 424: 화합물 423 (120 mg, 0.34 mmol)의 2.5 mL HCOOEt 중 용액에, 30% NaOMe/MeOH (6 eq)을 적가하였다. 실온에서 하룻밤 반응혼합물을 교반하고, 이어서 물에 붓고, KH2PO4으로 산성화하였다. 반응혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 424 (130 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 379.
화합물 425: 화합물 424 (130 mg, 0.34 mmol)의 6.5 mL EtOH 중 용액에, NH2OH·HCl 염 (2 eq)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 물과 혼합하고, EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 425 (120 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 376.
화합물 426: 화합물 425 (120 mg, 0.32 mmol)의 1.5 mL THF 및 0.75 mL MeOH 중 용액에, 30% NaOMe (8 eq)을 적가하고, 그 용액을 50 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 포화 KH2PO4 (20 mL)와 혼합하고, EtOAc로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인으로 세척하고, MgS04로 건조하고, 진공 농축하여 화합물 426 (110 mg)을 얻었다. MS: m/z [M+H]+ 376.
화합물 TX63731 : 화합물 426 (110 mg, 0.29 mmol)의 2 mL DMF 중 용액에 0 ℃ 에서, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.55 eq)을 가하고, 2시간 동안 용액을 교반하였다. 피리딘 (1 g)을 가하고, 그 용액을 50 ℃에서 하룻밤 가열하였다. 진공 농축한 후에 잔사를 실리카 겔 칼럼에서 정제하고, 5-30% EtOAc/헥산으로 용출하여 화합물 TX63731 (75 mg, 69%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.02 (s, 1H), 8.46 (m, 2H), 7.50 (m, 3H), 4.60 (q, 2H, J = 7.1 Hz), 2.87 (ddd, 1H, J = 1.1, 6.8, 18.6), 2.61 (m, 2H), 2.14 (m, 2H), 1.76 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.46 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.32 (d, 3H, J = 6.8 Hz);
MS: m/z [M+H]+ 374.
화합물 427: 화합물 413 (0.38 g, 1.17 mmol)의 20 mL EtOH 중 용액에, 소디움 에톡사이드, 21 wt% 용액/EtOH (4.4 mL, 11.8 mmol)을 가하였다 (주사기로 적가함). 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고 (TLC, 실리카 겔, 30% EtOAc/헥산, 아직 미반응 출발물질이 보임) 이어서 70 ℃에서 8시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.52 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 427 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 428: 약간 순수하지 않은 화합물 427 (0.52 g, 약 1.17 mmol)와 3N HCl (4 mL, 12 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% NH4OH 수용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 0.28 g (84%)의 화합물 428 을 황갈색 고체 상태로 수득하였다.
화합물 429: 화합물 428 (0.28 g, 0.98 mmol) 및 에틸포메이트 (9.0 mL, 111.0 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) 소디움 에톡사이드, 21 wt% 용액/EtOH (3.7 mL, 9.9 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.30 g (96%) 약간 순수하지 않은 화합물 429 을 어두운 황색 유질의(oily) 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 430:화합물 429 (0.30 g, 0.94 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.10 g, 1.44 mmol)의 10 mL EtOH 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고, EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.30 g (>100%) 약간 순수하지 않은 화합물 430 을 황갈색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 431: 약간 순수하지 않은 화합물 430 (앞 단계에서 얻어진 전체량, 약 0.94 mmol)의 10 mL MeOH 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) EtOH 중 소디움 에톡사이드, 21 wt% 용액 (3.5 mL, 9.4 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 0.28 g (95%)의 약간 순수하지 않은 화합물 431 을 노란빛 도는 오렌지색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 TX63773 : 약간 순수하지 않은 화합물 431 (0.28 g, 0.89 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.13 g, 0.45 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.70 mL, 8.65 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 0.14 g (48%)의 화합물 TX63773 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.87 (s, 1H), 4.40 (q, 2H, J = 7.1 Hz), 2.75 (dd, 1H, J = 7.0, 18.5 Hz), 2.54 (s, 3H), 2.52 (m, 2H), 2.03 (m, 2H), 1.65 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.37 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.27 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI) m/z 312 [M+H]+ (100%).
화합물 432: 화합물 127 (0.964 g, 4.04 mmol)을 DCM (100 mL)에 넣고, MgBr2-Et2O (2.707 g, 10.5 mmol) 및 i-Pr2NEt (1.39 mL, 8.0 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 실온에서 30 분 동안 교반 하였으며, 이 시간 동안 반응혼합물은 점점 오렌지색으로 변하였다. 이어서, 염화벤조일 (1.17 g, 8.3 mmol)의DCM (3 mL) 중의 용액을 적가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 가온 환류하여 오렌지 색상을 점차 사라지게 하였다. 중탄산나트륨 포화수용액 (100 mL)가하고 실온에서 1시간 동안 교반하여 반응을 종료시켰다. 유기층을 분리하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 오일을 얻었다. 상기 오일을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 42 g)에서 10% EtOAc/헥산 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 432을 거의 맑은 오일상태로 수득하였다 (0.372 g, 27%). MS: m/z [M+H]+ 343.1.
화합물 433: 화합물 432 (0.372 g. 1.09 mmol)을 EtOH (40 mL)에 넣고, 하이드라진 일수화물 (0.244 g, 3.8 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 65 ℃에서 1시간 동안 가열하고, 이어서 실온에서 5일 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, 남은 휘발성물질을 진공하에 제거하고, 화합물 433을 오일/고체 상태로 수득하였다 (0.41 g). 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: m/z [M+H]+ 339.1.
화합물 434: 화합물 433 (0.41 g, 1.2 mmol)을 MeOH (35 mL) 및 1N HCl (3 mL)에 넣고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 MeOH를 제거하고, 이어서 EtOAc (60 mL) 및 중탄산나트륨 포화수용액에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고, 농축하여 화합물 434 을 오일/유리질 상태로 수득하였다 (0.3266 g). m/z [M+H]+ 295.1.
화합물 435: 화합물 434 (0.3266 g, 1.11 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (50 mL) 및 30% NaOMe/MeOH (1.8 mL, 9.7 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고, 이어서 KH2PO4 포화수용액 (20 mL) 및 EtOAc (125 mL)가 담긴 분별깔때기에 부었다. 유기층을 분리하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 오일/유리질을 얻었는데, 여기에는 다량의 출발물질이 함유되어 있으며, 이어서 에틸포메이트 (30 mL) 및 30% NaOMe/MeOH (1.2 mL, 6.48 mmol)와 하룻밤 실온에서 반응시켰다. 반응혼합물을 이전과 같이 워크업 (work up)하여, 화합물 435 을 황색 유리질 상태로 수득하였다 (0.247g, 70%, 3단계에 걸쳐). MS: m/z [M+H]+ 323.1.
화합물 436: 0.1 M 하이드록실아민 염산염의 9:1의 EtOH/물 (12 mL, 1.2 mmol) 중 용액을, 화합물 435 (0.247 g, 0.77 mmol)에 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 다음날 아침 반응혼합물을 50 ℃ 회전식 증발농축기에서 가열하고, 농축하여 건조물이 되도록 하였다. 얻어진 조 잔사물을 EtOAc (100 mL) 및 중탄산나트륨 포화수용액 (15 mL)에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 유리질을 얻었다. 상기 유리질을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 8 g)에서 50% EtOAc/헥산을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 436 을 유리질 상태로 수득하였다 (0.0844 g, 34%). MS: m/z [M+H]+ 320.1.
화합물 437: 이소옥사졸 436 (0.0844 g, 0.26 mmol)을 1:1의 MeOH/THF, (10 mL)에 넣고, 30% NaOMe/MeOH (0.2 mL, 1.08 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 포화 KH2PO4 (15 mL) 및 EtOAc (100 mL)에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, MgS04로 건조하고, 여과하고 농축하여 화합물 437 을 유리질 상태로 수득하였다 (0.085 g). MS: m/z [M+H]+ 320.1.
화합물 TX63836: 시아노케톤 437 (0.085 g, 0.26 mmol)을 DMF (2.5 mL)에 넣고, 반응혼합물을 0 ℃로 식혔다. 다이브로모다이메틸히단토인 (0.048 g,　0.17 mmol)을 가하고, 1.75 시간 동안 교반하여 반응시켰다. 무수 피리딘 (0.25 mL, 3.1 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 60 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 6 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 TX63836 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (0.0355 g, 43%, 2단계에 걸쳐). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.47 (s, 1H), 7.42-7.50 (m, 5H), 7.33-7.41 (m, 1H), 2.91 (dd, 1H, J = 6.4, 16.4 Hz), 2.70-2.82 (m, 1H), 2.51-2.62 (m, 1H), 2.05-2.18 (m, 2H), 1.69-1.85 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.31 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]+ 318.0.
화합물 TX63850: 화합물 TX63836 (0.015 g,　0.047 mmol)을 Ac2O (2 mL) 및 무수 NaOAc (0.013 g,　0.16 mmol)와 혼합하였다. 3일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 농축하여 건조물이 되도록 하고, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 1 g)에 4:1 헥산/EtOAc를 이용하여 여과하여 화합물 TX63850 을 유리질 상태로 수득하였다 (0.0052 g, 31%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.42 (s, 1H), 7.28-7.41 (m, 3H), 7.15-7.27 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.38-2.62 (m, 4H), 1.90-2.10 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.23 (d, 3H, J = 6.4 Hz); MS: m/z [M+H]+ 360.1.
화합물 TX63871: 화합물 TX63836 (0.015 g,　0.047 mmol)을 에틸클로로포메이트 (1 mL) 및 고체 NaHCO3 (0.056 g,　6.67 mmol)와 혼합하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 4 g)에서 3:1의 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하여 화합물 TX63871 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다 (0.014 g, 76%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.72 (s, 1H), 7.65-7.70 (m, 2H), 7.36-7.45 (m, 3H), 4.57 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.69-2.81 (m, 2H), 2.59-2.68 (m, 1H), 2.18 (dd, 1H, J = 1.2, 12.4 Hz), 2.02-2.10 (m, 1H), 1.62-1.74 (m, 1H), 1.67 (s, 3H), 1.51 (t, 3H, J = 6.8 Hz), 1.34 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]+ 390.1.
화합물 438: 화합물 127 (0.971 g, 4.1 mmol)을 DCM (50 mL)에 넣고, MgBr2-Et2O (2.90 g, 11.2 mmol) 및 i-Pr2NEt (2.4 mL, 13.8 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반 하였으며, 이 시간 동안 혼합물은 점점 오렌지색으로 변하였다. 피리딘-2-카복실산 클로라이드 염산염 (1.71 g, 9.6 mmol)을 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 과량의 중탄산나트륨 포화수용액을 가하여 반응을 종료시켰다. 얻어진 매우 어두운 반응혼합물을 농축하여 DCM을 제거하고, EtOAc (250 mL) 및 과량의 포화 KH2PO4을 가하였다. 유기층을 분리하고, MgS04로 건조하고 농축하여 화합물 438을 어두운 오일상태로 수득하였다 (1.09 g), 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: m/z [M+H]+ 344.1.
화합물 439: 조 화합물 438 (1.09 g. 3.2 mmol)을 EtOH (100 mL)에 넣고, 메틸하이드라진 (1.306 g, 28.4 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 70 ℃로 가열하고, EtOH을 더 가하고, 70 ℃에서 계속 가열하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, 이렇게 하여 얻어진 진한 색 오일을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 40 g) 상에서 50% 헥산/EtOAc으로 크로마토그래피 하고 이어서 EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 439 을 황색 오일/유리질 상태로 수득하였다 (0.1453 g, 10%, 2단계에 걸쳐). MS: m/z [M+H]+ 354.2.
화합물 440: 화합물 439 (0.1453 g, 0.41 mmol)을 MeOH (25 mL) 및 1N HCl (4 mL)에 넣고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응혼합물을 농축하여 MeOH를 제거하고, 이어서 EtOAc (100 mL) 및 중탄산나트륨 포화수용액에 분배시켰다. 유기층을 MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 440 을 오일/유리질 상태로 수득하였다 (0.1197 g, 94%). m/z [M+H]+ 310.1.
화합물 441: 화합물 440 (0.1197 g, 0.39 mmol)을 에틸포메이트에 넣고 (20 mL) 및 30% NaOMe/MeOH (0.6 mL, 3.24 mmol)을 가하였다. 3일 동안 실온에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 KH2PO4 포화수용액 (20 mL) 및 EtOAc (100 mL)가 담긴 분별깔때기에 부었다. 유기층을 분리하고, MgS04로 건조하고, 여과하고 농축하여 441 을 오렌지색 유리질 상태로 수득하였다 (0.1267 g, 96%). MS: m/z [M+H]+ 338.1.
화합물 442: 0.1 M 하이드록실아민 염산염의 9:1의 EtOH/물 (6 mL, 0.6 mmol) 중 용액을, 화합물 441 (0.1267 g, 0.37 mmol)에 가하고, 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하였다. 반응 종료 후 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고 (T = 50 ℃), 잔사를 EtOAc (100 mL) 및 중탄산나트륨 포화수용액 (10 mL)에 분배시켰다. 얻어진 유기 용액을 MgS04로 건조하고, 여과하고 농축하여 화합물 442 을 황색 유리질 상태로 수득하였다 (0.1053 g, 85%). MS: m/z [M+H]+ 335.1.
화합물 443: 화합물 442 (0.1053 g, 0.31 mmol)을 1:1의 MeOH/THF (10 mL)에 넣고, 30% NaOMe/MeOH (0.25 mL, 1.35 mmol)을 가하였다. 하룻밤 실온에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 포화 KH2PO4 (15 mL) 및 EtOAc (100 mL)에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, MgS04로 건조하고, 여과하고 농축하여 화합물 443 을 유리질 상태로 수득하였다 (0.1022 g, 99%). MS: m/z [M+H]+ 335.1.
화합물 TX63851: 화합물 443 (0.1022 g, 0.31 mmol)을 DMF (2.5 mL)에 넣고, 반응혼합물을 0 ℃로 식혔다. Br2 (0.055 g, 0.34 mmol)의 DMF (0.3 mL) 중의 용액을 가하고, 1.75 시간 동안 교반하여 반응시켰다. 무수 피리딘 (0.25 mL, 3.1 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 60 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 농축하여 건조물이 되도록 하고, EtOAc (80 mL) 및 중탄산나트륨 포화수용액 (10 mL)에 분배시켰다. 유기층을 브라인 (10 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 여과하고 농축하여 갈색 오일/유리질을 얻었다. 상기 오일을 실리카 겔 (230-400 메쉬, 8 g)에서 50% 헥산/EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하고, 다시 실리카 겔 (230-400 메쉬, 6 g) 상에서 50% 헥산/EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 TX63851 (0.0163 g, 16%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.65 (d, 1H, J = 4.4 Hz), 8.44 (s, 1H), 7.72 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.32 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.17-7.24 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 2.55-2.75 (m, 2H), 2.44-2.55 (m, 1H), 1.94-2.11 (m, 2H), 1.62-1.75 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.24 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]+ 333.1.
화합물 TX63849: 화합물 TX63690 (0.034 g,　0.10 mmol)을 아세토니트릴 (1 mL)에 넣고, 아큐플루오르 [Accufluor] (0.042 g,　0.126 mmol (based on 3 mmol/g)을 가하였다. 2시간 동안 80℃에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 3일 동안 실온에서. 아큐플루오르 (0.046 g,　0.138 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 하룻밤 80 ℃에서 가열하였다. 반응혼합물을 농축하고, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 6 g)에서 EtOAc으로 크로마토그래피 하고 이어서 5% THF/EtOAc 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하였다. 생성물을 함유하는 분획들을 다시, 실리카 겔 (230-400 메쉬, 2.8 g)에서 1.2% MeOH /DCM 을 용출액으로 사용하여 크로마토그래피 하여 화합물 TX63849 (0.005 g, 14%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.29 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.32 (s, 3H), 2.72 (d, 1H, J = 14.0 Hz), 2.40-2.51 (m, 1H), 1.45-1.96 (m, 4H), 1.22 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 1.12 (s, 3H); MS: m/z [M+H]+ 352.1.
화합물 444 및 445: 화합물 181 (1.663 g, 5.223 mmol)와 Et3N (1.0 mL, 5.94 mmol)의 CHCl3 (50 mL) 중 용액을 N2 하에서 0 ℃로 식히고, 메틸 트리플루오로메탄설포네이트 (1.0 mL, 8.8 mmol)을 적가하였다. 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하였다 하룻밤 이어서 포화 NaHCO3 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하였다. 크로마토그래피 (실리카 겔, 70% EtOAc /헥산)하여 화합물 444 (0.786 g, 33%) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다; MS (APCI) m/z 333 (M+1, 100); 및 445 (0.247 g, 10%) 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다; MS (APCI) m/z 333 (100) [M+H]+.
화합물 446: 화합물 444 (0.786 g, 2.365 mmol)와 3N HCl (4 mL, 12 mmol)의 20 mL MeOH:THF (1:1) 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 그 용액을 농축하고 이어서 CHCl3 및 10% 수용액 NH4OH에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 446 (0.633 g, 93%)을 거품으로 된 흰색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 289 (100%) [M+H]+.
화합물 447: 화합물 446 (1.8 mL, 22.3 mmol)의 벤젠 (10 mL) 중 용액에, (주사기로) NaOMe (30 wt%/MeOH, 2.0 mL, 10.7 mmol)을 N2 하에서 적가하였다 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고, 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 447 (0.502 g, 72%) 을 밝은 갈색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 317 (100%) [M+H]+.
화합물 448: 447 (0.502 g, 약 1.585 mmol)의 에탄올 (10 mL) 중 용액을 고체 하이드록실아민 염산염 (0.16 g, 2.30 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고, 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 448 (0.658 g, >100%) 을 밝은 갈색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 314 (100%) [M+H]+.
화합물 449: 약간 순수하지 않은 화합물 448 (0.658 g, 약 1.585 mmol)의 MeOH (10 mL) 중 용액을 NaOMe (MeOH 중의 30 wt% , 1.48 mL, 7.89 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 449 (0.578 g, >100%) 을 황색 거품으로된 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 314 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63584: 다이브로모다이메틸히단토인 (0.272 g, 0.951 mmol)을 약간 순수하지 않은 화합물 449 (0.578 g, 약 1.585 mmol)의 DMF (10 mL) 중의 교반 중인 용액에 0 ℃에서 N2 하에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (1.3 mL, 16.1 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 및 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하였다. 크로마토그래피 (실리카 겔, 2% MeOH/CHCl3)로 정제하여, 화합물 TX63584 (0.151 g, 31%)을 밝은 황색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.75 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 2.79 (dd, 1H, J = 6.1, 18.5 Hz), 2.57 (s, 3H), 2.46 (dddd, 1H, J = 7.4, 9.4, 9.4, 11.4 Hz), 2.06 (dd, 1H, J = 2.0, 12.8 Hz), 1.96 (dd, 1H, J = 7.3, 13.3 Hz), 1.76 (m, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.20 (s, 3H); MS (APCI) m/z 312 (100%) [M+H]+.
화합물 450: 화합물 445 (0.247 g, 0.742 mmol)와 3 N HCl (4 mL, 12 mmol)의 20 mL MeOH:THF (1:1) 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 그 용액을 농축하고 이어서 CHCl3 및 10% 수용액 NH4OH에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 450 (0.191 g, 89%) 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 289 (100%) [M+H]+.
화합물 451: 화합물 450 (0.191 g, 661 mmol) 및 에틸포메이트 (0.53 mL, 6.56 mmol)의 벤젠 (10 mL) 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) NaOMe (30 wt%/MeOH, 0.62 mL, 3.30 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 451 (0.211 g, >100%) 을 황색 오일/유리질 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 317 (100%) [M+H]+.
화합물 452: 약간 순수하지 않은 화합물 451 (0.211 g, 약 0.661 mmol)의 에탄올 (10 mL) 중 용액을 고체 하이드록실아민 염산염 (0.069 g, 0.99 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플을 50 ℃에서 N2 하 16시간 동안 가열하고, 실온으로 식히고, 농축하고, EtOAc 및 포화 NaHCO3에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 452 (0.176 g, 85%) 을 황색 오일/유리질 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 314 (100%) [M+H]+.
화합물 453: 화합물 452 (0.176 g, 0.561 mmol)의 MeOH (10 mL) 중 용액을 NaOMe (MeOH 중의 30 wt% , 0.53 mL, 2.82 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고, 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 453 (0.170 g, 96%) 을 진득진득한(gummy) 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 314 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63595: 다이브로모다이메틸히단토인 (0.093 g, 0.325 mmol)을 0 ℃ 에서 N2 하에 DMF (10 mL) 중 화합물 453 (0.170 g, 0.541 mmol)의 교반 중인 용액에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.44 mL, 5.44 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하였다. 크로마토그래피 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 로 정제하여 화합물 TX63595 (0.066 g, 39%) 을 회색을 띤 백색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, d 6 -DMSO) δ8.86 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.80 (dd, 1H, J=17.5, 7.5 Hz), 2.56 (s, 3H), 2.48-2.54 (m, 1H), 2.12 (dd, 1H, J=12.5, 2.5 Hz), 1.98 (app dd, 1H, J=12.5, 7.5 Hz), 1.78-1.87 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.21 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ197.6, 169.1, 167.9, 165.8, 165.0, 114.8, 114.6, 111.5, 53.9, 46.1, 44.8, 42.8, 27.1, 25.6, 25.4, 21.4, 17.9. MS (ES) m/z 312 (M+23, 100%) 및 312 (67%) [M+H]+.
화합물 454: 화합물 1 (4.67 g, 37.02 mmol)의 70 mL 아세토니트릴 중 현탁액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1-헥센-3-온 (5 g, 46 mmol, ~0.6% 4-메톡시페놀로 90+% 안정화된)을 적가하고 이어서 트리에틸아민 (8.25 mL, 59.19 mmol)을 적가하였다. 트리에틸아민의 첨가의 끝으로 감에 따라 모든 고체가 용액 중으로 녹아들어갔다. 황색 용액을 하룻밤 동안 실온으로 천천히 온도가 올라가도록 하였다. 반응혼합물을 농축하고, EtOAc에 녹이고, 포화 NaHCO3 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 8.85 g (>100%)의 조 화합물 454 황색 액체 상태로 수득하였다.황색 액체 상태로 수득하였다. (17%) [M+H]+.
화합물 455: 약간 크루드한(crude) 화합물 454 (앞에서 얻어진 전체량, 약 37.02 mmol)의 150 mL 아세토니트릴 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, 고체 (R,S)-페닐알라닌 (6.11 g, 36.99 mmol)을 가하고 이어서 고체 (1R)-(+)-10-캠퍼설폰산 (4.30 g, 18.51 mmol)을 가하였다. 상기 샘플을 N2 하 70 ℃에서 48시간 동안 가열하고, 실온으로 식히고, 이어서 여과하였다. 상기 고체를 아세토니트릴로 세척하고, 여액들 합하여 농축하고 이어서 조심스럽게 포화 NaHCO3 용액 및 디에틸에테르에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% CHCl3-10% EtOAc-40% 헥산). 분리가 덜 되었으며, UV로 관찰되는 성분을 함유하는 모든 분획들 (TLC, SiO2 [10% EtOAc-40% 헥산-50% CHCl3], Rf ~ 0.45)을 합하고, 농축하여 화합물 5.38 g (70%)의 순수하지 않은 화합물 455 을 밝은 황색 액체 상태로 수득하였다. (APCI) m/z 207 (100%) [M+H]+.
화합물 456: 순수하지 않은 화합물 455 ( 6.101 g, 29.575 mmol)의 100 mL EtOH 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 소디움 보로하이드라이드 (0.31 g, 8.19 mmol)의 50 mL EtOH 중의 약간 흐린 용액을 적가하였다. ~ 15 분 후(TLC상 출발물질이 남아 있지 않음), 차가운 상태의 상기 샘플에 아세트산 (3.4 mL, 59.4 mmol)을 적가하여 반응을 종료시키고, 실온에서 1시간 동안 교반하고 이어서 농축하였다. 상기에서 생성된 밝은 황색의 찐득찐득한 고체를, 5 mL 물을 함유하는 200 mL EtOAc에 녹이고, 과량의 고체 NaHCO3 로 건조하고 여과하여 5.92 g (96%)의 순수하지 않은 화합물 456 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 209 (100%) [M+H]+.
화합물 457: 약간 순수하지 않은 화합물 456 (5.92 g, 28.42 mmol) 및 3,4-다이하이드로-2H-피란 (3.6 mL, 39.6 mmol)의 100 mL CH2Cl2 중 0 oC N2 하 교반중인 용액에, 고체 p-톨루엔-술폰산 일수화물 (0.50 g, 2.63 mmol)을 한번에 가하였다. 상기 샘플은 즉시 어두워졌으며 (밝은 황색에서 갈색으로), 하룻밤동안 실온으로 온도가 천천히 올라가도록 하였다. 상기 어두운 샘플을 농축하고 이어서 헥산 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 , 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 헥산 중의 20 % EtOAc 용액) 하여 3.868 g (46%)의 화합물 457 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 293 (88%) [M+H]+ 및 191 (100%).
화합물 458: 액체 암모니아 (~5 mL)를 2-목(necked) 플라스크에서 -78 oC로 응축시켰다. 리튬 와이어 (0.185 g, 26.66 mmol, 2 eq)을 작은 양씩으로 분배하여 가하였다. 45 분 후, 리튬 와이어가 녹은 후 이어서 화합물 457 (3.868 g, 13.227 mmol)의 15 mL THF 중 용액을 적가하였다. 45 분 동안 -78 oC에서 반응혼합물을 교반하고 이어서 고체 염화암모늄 (5 g, 93 mmol)을 가하고, 암모니아가 증발되도록 하였다. 잔사를 100 mL 물에 녹이고 EtOAc (2x)로 추출하였다. 유기층들을 합하여 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 헥산 중의 10 % EtOAc 용액) 하여 2.649 g (68%)의 화합물 458 을 무색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 175 (100%) [M+H]+.
화합물 459: 화합물 458 (2.649 g, 8.997 mmol)와 피리디늄 p-톨루엔설포네이트 (0.23 g, 0.92 mmol)의 50 mL EtOH 중 용액을 70 oC에서 N2 하 6시간 동안 가열하고 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 , 농축하여 화합물 2.112 g (>100%) 약간 크루드한(crude) 화합물 459 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 211 (24%) [M+H]+ 및 175 (100%).
화합물 460: N2 하에서, 약간 크루드한(crude) 화합물 459 (2.112 g, 약 8.997 mmol), 에틸렌글리콜 (5.0 mL, 89.6 mmol) 및 p-톨루엔설폰산 일수화물 (0.171 g, 0.899 mmol)의 100 mL 벤젠 중 용액을 16시간 동안 딘스탁 (Dean-Stark) 조건하에 환류하였다. 상기 샘플을 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 2.388 g (>100%)의 조 화합물 460 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 255 (35%) [M+H]+ 및 175 (100%).
화합물 461: 약간 크루드한(crude) 화합물 460 (2.388 g, 약 8.997 mmol)의 100 mL CH2Cl2 중 용액을 실온에서 교반하면서 여기에, 고체 MgSO4 (1.08 g, 8.97 mmol)을 가하고 이어서 고체 피리디늄 다이크로메이트 (6.77 g, 17.99mmol)을 가하였다. 실온에서 24시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고, 100 mL의 디에틸에테르에 현탁시키고, 실온에서 30 분 동안 교반하고 여과하였다. 여액을 농축하고 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 헥산 중의 30 % EtOAc 용액) 하여 1.513 g (67%)의 화합물 461 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 253 (79%) [M+H]+ 및 173(100%).
화합물 462: 화합물 461 (1.513 g, 5.995 mmol) 및 에틸포메이트 (5 mL, 62 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 소디움 메톡사이드, 30 wt.% 용액/메탄올 (6 mL, 32 mmol)을 가하였다. 상기 샘플을 하룻밤 동안 실온으로 온도가 천천히 올라가도록 하였다. 상기 샘플을 EtOAc에 녹이고, 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 1.624 g (97%)의 화합물 462 을 진득진득한(gummy) 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 295 (100%) [M+H]+.
화합물 463: 화합물 462 (1.206 g, 4.303 mmol)의 EtOH (20 mL) 중 용액을 메틸하이드라진 (0.46 mL, 8.65 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플을 밀봉하고, 50 ℃에서 16시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고, 이어서 CHCl3 및 10% 수용액 NH4OH에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 헥산 중의 50 % EtOAc 용액) 화합물 463 (0.989 g, 78%)을 진득진득한(gummy) 흰색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 291 (100) [M+H]+.
화합물 464: 화합물 463 (0.320 g, 1.102 mmol)와 3 N HCl (4 mL, 12 mmol)의 MeOH/THF (1:1, 20 mL) 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 그 용액을 농축하고, 이어서 CHCl3 및 10% 수용액 NH4OH에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 464 (0.287 g, >100%) 을 밝은 황색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 247 (100%) [M+H]+.
화합물 465: 약간 순수하지 않은 화합물 464 (0.287 g, 약 1.102 mmol) 및 에틸포메이트 (0.89 mL, 11.02 mmol)의 벤젠 (10 mL) 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) NaOMe (30 wt%/MeOH, 1.0 mL, 5.5 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 465 (0.296 g, 98%) 을 황색 오일/유리질 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 276 (100%) 및 275 (90%) [M+H]+.
화합물 466: 화합물 465 (0.296 g, 약 1.077 mmol)의 EtOH (10 mL) 중 용액을 고체 하이드록실아민 염산염 (0.12 g, 1.73 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플을 50 ℃에서 N2 하 16시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 10% 수용액 NH4OH에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 466 (0.273 g, 93%)을 어두운 노란빛 도는 갈색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 273 (100%) 및 272 (86%) [M+H]+.
화합물 467: 화합물 466 (0.273 g, 1.006 mmol)의 MeOH (10 mL) 중 용액을 NaOMe (30 wt%/MeOH, 0.94 mL, 5.01 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 467 (0.226 g, 83%)을 어두운 황색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 273 (M+2, 100%) 및 272 (85%) [M+H]+.
화합물 TX63589: 화합물 467 (0.226 g, 0.834 mmol)의 DMF (10 mL) 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 고체 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-히단토인 (0.143 g, 0.500 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.68 mL, 8.41 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고 이어서 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 화합물 TX63589 (0.068 g, 30%) 을 회색을 띤 백색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.36 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.74 (dd, 1H, J = 15.0, 5.0 Hz), 2.50-2.55 (m, 2H), 2.19-2.31 (m, 2H), 1.95 (app dd, 1H, J = 15.0, 5.0 Hz), 1.62-1.71 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 0.81 (t, 3H, J = 7.5 Hz); MS (APCI) m/z 270 (100%) [M+H]+.
화합물 468: 화합물 462 (0.412 g, 1.471 mmol), 벤즈아미딘 염산염 (2.3 g, 16.68 mmol) 및 피페리딘 (0.87 mL, 8.80 mmol)의 2-프로판올 (10 mL) 중의 혼합물을, 밀봉된 바이알 내에서 85 ℃에서 96시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 10% 수용액 NH4OH에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 468 (0.910 g, >100%) 을 갈색빛 도는 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 365 (100) [M+H]+.
화합물 469: 약간 순수하지 않은 화합물 468 (0.910 g, 약 1.471 mmol)와 3 N HCl (10 mL, 30 mmol)의 MeOH/THF (1:1, 20 mL) 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 그 용액을 농축하고 이어서 CHCl3 및 10% 수용액 NH4OH 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 469 (0.778 g, >100%)을 어두운 황색의 진득진득한(gummy) 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 321 (100%) [M+H]+.
화합물 470: 약간 크루드한(crude) 화합물 469 (0.778 g, 약 1.471 mmol) 및 에틸포메이트 (1.20 mL, 14.80 mmol)의 벤젠 (10 mL) 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) NaOMe (30 wt%/MeOH, 1.40 mL, 7.46 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 470 (0.684 g, >100%) 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 349 (100%) [M+H]+.
화합물 471: 약간 순수하지 않은 화합물 470 (0.684 g, 약 1.471 mmol)의 EtOH (10 mL) 중 용액을 고체 하이드록실아민 염산염 (0.15 g, 2.16 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플을 50 ℃에서 N2 하 16시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 471 (0.639 g, >100%) 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 472: 약간 순수하지 않은 화합물 471 (0.639 g, 약 1.471 mmol)의 MeOH (20 mL) 중 용액을 NaOMe (MeOH 중의 30 wt% 용액, 1.38 mL, 7.36 mmol)으로 처리하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 화합물 472 (0.267 g, 52%) 을 회색을 띤 백색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 368 (100%) [M+Na]+ 및 346 (45%) [M+H]+.
화합물 TX63598: 화합물 472 (0.267 g, 0.773 mmol)의 DMF (10 mL)중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 고체 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-히단토인 (0.12 g, 0.42 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.63 mL, 7.79 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 화합물 TX63598 (0.209 g, 79%) 을 회색을 띤 백색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.96 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.44-8.46 (m, 2H), 7.48-7.53 (m, 3H), 3.01 (dd, 1H, J = 20.0, 5.0 Hz), 2.87-2.94 (m, 1H), 2.59 (app dt, 1H, J = 12.5, 5.0 Hz), 2.41 (td, 1H, J = 12.5, 3.3 Hz), 2.23-2.31 (m, 1H), 2.11-2.16 (m, 1H), 1.69-1.86 (m, 2H), 1.46 (s, 3H), 0.84 (t, 3H, J = 7.5 Hz); MS (ES) m/z 366 (100%) [M+H]+ 및 344 (37%) [M+H]+.
화합물 473: 화합물 463 (0.661 g, 2.275 mmol)의 CH2Cl2 (10 L) 중 용액을 교반하면서 여기에, 고체 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.36 g, 1.26 mmol)을 한번에 가하였다. 상기 용액은 즉시 노란빛 도는 오렌지색으로 변하고 모든 고체는 용액이 되었다. 실온에서 30 분 동안 반응용액을 교반하고 (TLC 상 출발물질이 남아 있지 않을 때까지), 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 화합물 473 (0.490 g, 58%) 을 무색 오일 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 369/371 (100/64%) [M+H]+.
화합물 474: 화합물 473 (0.490 g, 1.327 mmol), 인산칼륨 (potassium phosphate) (0.85 g, 4.00 mmol) 및 페닐보론산 (0.24 g, 1.97 mmol)의 DME (10 mL) 중 혼합물 (가스를 제거한)을 교반하면서 여기에, 고체 테트라키스(트리페닐포스핀) 팔라듐 (0) (0.153 g, 0.132 mmol)을 한번에 가하였다. 상기 샘플로부터 가스를 제거하고 (degassed), 80 ℃에서 N2 하 16시간 동안 가열하고, 식히고, 셀라이트 패드로 여과하였다. 여액을 농축하고, EtOAc에 녹이고, 1N NaOH, 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 화합물 474 (0.201 g, 41%) 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 367 (100%) [M+H]+.
화합물 475: 화합물 474 (0.201 g, 0.548 mmol)와 3N HCl (4 mL, 12 mmol)의 MeOH (20 mL) 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 상기 샘플을 농축하고 이어서 조심스럽게 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 475 (0.163 g, 92%) 을 회색을 띤 백색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 323 (100%) [M+H]+.
화합물 476: 화합물 475 (0.163 g, 0.505 mmol) 및 에틸포메이트 (4.1 mL, 50.8 mmol)의 벤젠 (10 mL) 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) NaOMe (30 wt% 용액/MeOH, 0.47 mL, 2.50 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 476 (0.187 g, >100%) 을 진득진득한(gummy) 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 351 (100%) [M+H]+.
화합물 477: 약간 순수하지 않은 화합물 476 (0.187 g, 약 0.505 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.53 g, 0.76 mmol)의 EtOH (20 mL) 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고, EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 477 (0.181 g, >100%) 을 어두운 노란빛 도는 갈색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 348 (100%) [M+H]+.
화합물 478: 약간 순수하지 않은 화합물 477 (0.181 g, 약 0.505 mmol) MeOH (20 mL) 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) NaOMe (30 wt% 용액/MeOH, 0.47 mL, 2.50 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 478 (0.204 g, >100%) 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 348 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63599: 약간 순수하지 않은 화합물 478 (0.204 g, 약 0.505 mmol)의 DMF (10 mL) 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.072 g, 0.252 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.63 mL, 7.79 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 KH2PO4 및 포화 NaCl 용액들로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 50% EtOAc/헥산) 하여 화합물 TX63599 (0.052 g, 30%, 4단계에 걸쳐) 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.48 (s, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.39-7.42 (m, 1H), 7.31-7.33 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.53-2.65 (m, 3H), 2.35 (t, 1H, J = 12.5 Hz), 2.22-2.25 (m, 1H), 1.95-1.99 (m, 1H), 1.66-1.70 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 0.82 (t, 3H, J = 7.5 Hz); MS (APCI) m/z 346 (100%) [M+H]+.
화합물 479: 하이드라진 염산염 (86 mg, 1.26 mmol)을 다이옥산 (2 mL)에 현탁시키고, 트리에틸아민 (0.18 mL, 1.26 mmol)을 가하고 이어서 아세트산 (0.19 g, 3.15 mmol)을 가하였다. 반응혼합물을 수 분 동안 소니케이션 (sonication)하였다. 276 (0.24 g, 0.63 mmol)의 다이옥산 (4 mL) 중 용액을 가하고, 반응혼합물을 70 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응혼합물을 식힌 후 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 0.215 g (96%)의 화합물 479 을 백색 고체 상태로 수득하였다. APCI MS: m/z 358.1 [M+H]+.
화합물 480: 소디움 하이드라이드 (72 mg, 1.80 mmol)을 DMF (2 mL)에 현탁시켰다. 화합물 479 (215 mg, 0.60 mmol)을 가하고, 30 분 동 반응혼합물을 교반하였다. 이소프로필 요오드화물 (0.30 mL, 3.01 mmol)을 가하고, 하룻밤 반응혼합물을 교반하였다. 포화 NH4Cl (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 밝은 황색 오일을 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (EtOAc)하여 190 mg (79%)의 화합물 480 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. APCI MS: m/z 400.2 [M+H]+.
화합물 481: 화합물 480 (185 mg, 0.46 mmol)을 THF에 넣고 (4 mL) 및 1M HCl (1 mL)을 가하였다. 2일 동안 반응용액을 교반하고, 이어서 포화 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 160 mg (97%)의 화합물 481 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. APCI MS: m/z 356.0 [M+H]+.
화합물 482: 화합물 481 (160 mg, 0.45 mmol)을 THF (4 mL) 및 에틸포메이트 (1 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. NaOMe (0.8 g, 30 wt. %/MeOH)을 적가하고, 그 용액을 실온으로 온도가 올라가도록 하고 하룻밤 교반하였다. KH2PO4 포화수용액 (20 mL)을 첨가하여 반응을 종료시킨 후, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고 농축하여 170 mg (98%)의 화합물 482 을 백색 고체 상태로 수득하였다. APCI MS: m/z 384.1 [M+H]+.
화합물 483: 화합물 482 (170 mg, 0.44 mmol)을 THF에 넣고 (4 mL), EtOH (2 mL), 및 물 (0.5 mL). 하이드록실아민 염산염 (46 mg, 0.66 mmol)을 가하고, 반응혼합물을 50 ℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하고 하룻밤 교반하였다. 농축한 후, 잔사를 포화 수용액 NaHCO3 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하고, 진공 건조하여 170 mg (100%)의 화합물 483 을 회색을 띤 백색 고체 상태로 수득하였다. APCI MS: m/z 381.1 [M+H]+.
화합물 484: 화합물 483 (170 mg, 0.44 mmol)을 THF (4 mL)에 넣고, MeOH (2 mL) 및 NaOMe (0.8 g, 30 wt. %/MeOH)을 가하였다. 그 용액을 50 ℃에서 3시간 동안 가열하고, 이어서 식히고 농축하였다. 포화 수용액 KH2PO4 (20 mL)을 가하고, 반응혼합물을 EtOAc (2×50 mL)로 추출하였다. 추출한 유기층들을 모아서 브라인 (20 mL)로 세척하고, MgS04로 건조하고, 농축하였다. 플레쉬 크로마토그래피 (70% EtOAc/DCM)하여 121 mg (72%)의 화합물 484 을 백색 폼 (foam) 상태로 수득하였다. APCI MS: m/z 381.1 [M+H]+.
화합물 TX63905: 화합물 484 (120 mg, 0.32 mmol)을 DMF (3 mL)에 넣고, 얼음조에서 냉각시켰다. N, N'-다이브로모다이메틸히단토인 (54 mg, 0.19 mmol)을 가하고, 90 분 동안 0 ℃에서 반응용액을 교반하였다. 피리딘 (0.5 mL)을 가하고, 그 용액을 60 ℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응용액을 식힌 후 농축하고 진공 건조하여 밝은 갈색 고체를 얻었다. 플레쉬 크로마토그래피 (3:1 EtOAc/DCM)하여 82 mg (69%)의 화합물 TX63905 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 4.52-4.63 (m, 1H), 4.17 (s, 3H), 3.08 (dd, 1H, J = 5.2, 17.2 Hz), 2.66-2.77 (m, 1H), 2.20 (dd, 1H, J = 2.0, 11.6 Hz), 1.80-1.99 (m, 2H), 1.58 (d, 6H, J = 6.8 Hz), 1.49 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); APCI MS m/z 379.1 [M+H]+.
화합물 TX63834 : 화합물 TX63465 (33 mg, 0.1 mmol)의 MeCN (5 mL) 중 용액을 30% H2O2 (0.27 mL)으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고, EtOAc (2×15 mL)로 추출하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (실리카 겔, 5-25% EtOAc/헥산) 하여 화합물 TX63834 을 백색 고체 상태로 수득하였다 (30 mg, 85%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.37-7.49 (m, 3H), 7.28-7.34 (m, 2H), 4.77 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.58 (dd, 1H, J = 5.6, 15.6 Hz), 2.36-2.54 (m, 2H), 1.72-1.80 (m, 1H), 1.58-1.70 (m, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.15 (s, 3H); MS: m/z [M+H]+ 362.
화합물 TX63848 : 화합물 TX64541 (80 mg, 0.24 mmol)의 MeCN (7 mL) 중 용액을 30% H2O2 (0.63 mL)으로 처리하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고, EtOAc (2×15 mL)로 추출하였다. 유기층을 MgS04로 건조하고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (실리카 겔, 5-35%의 EtOAc/헥산) 하여 화합물 TX63848 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다 (8 mg, 10%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.26-7.54 (m, 5H), 4.77 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.45-2.64 (m, 3H), 2.10-2.24 (m, 3H), 1.25-1.35 (m, 3H), 1.30 (s, 3H); MS: m/z [M+H]+ 348.
화합물 485 및 486: 화합물 152 (0.37 g, 1.59 mmol)의 20 mL CH2Cl2 중 용액을 0 ℃에서 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.23 g, 0.80 mmol)을 한번에 가하였다. 반응혼합물을 30 분 동안 교반하였다. 냉각된 상태에서, NaHCO3 포화용액 (~100 mL)으로 반응을 종료시켰다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 올리고, 농축하고 이어서 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하였다. 상기 샘플을 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 80% EtOAc/헥산) 하여 화합물 485 (0.27 g, 55%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다 (MS [APCI] m/z 311/313 (M+1, 91/100%) 그리고 화합물 486 (0.080 g, 14%) 을 백색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 359 (100%) [M+H]+..
화합물 487: 화합물 486 (0.080 g, 0.22 mmol) 및 에틸포메이트 (1.8 mL, 22.3 mmol)의 10 mL 벤젠중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) NaOMe (30 wt.% 용액/메탄올, 0.42 mL, 2.24 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 487 (0.067 g, 78%)을 황갈색 고체 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 387 (100%) [M+H]+..
화합물 488: 약간 순수하지 않은 화합물 487 (0.067 g, 0.17 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.018 g, 0.26 mmol)의 10 mL 에탄올 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고, CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 488 (0.067 g, ~100%)을 황갈색 고체 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 489: 약간 순수하지 않은 화합물 488 (0.067 g, 약 0.17 mmol)의 10 mL 메탄올:THF (1:1) 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) NaOMe (30 wt.% 용액/메탄올, 0.32 mL, 1.71 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 489 (0.054 g, 81%) 을 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 TX63776: 약간 순수하지 않은 화합물 489 (0.054 g, 0.14 mmol)의 5 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.020 g, 0.070 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.12 mL, 1.48 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 CHCl3 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 100% EtOAc) 하여 화합물 TX63776 (0.014 g, 27%) 황색 오일 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), [5.70 (s), 5.65 (s), 1H], [3.63 (s), 3.63 (s), 3H], 2.41 (m, 3H), 2.05 (app .dt, 2.2, 12.8, 1H), 1.93 (m, 1H), 1.65 (m, 1H), [1.53 (s), 1.52 (s), 3H], [1.50 (s), 1.49 (s), 3H], 1.37 (s, 3H), 1.21 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 382 (100%) [M+H]+.
화합물 490: 386 (0.42 g, 1.16 mmol)의 10 mL 에탄올 중 용액을 에탄올 중의 소디움 에톡사이드, 21 wt. % 용액 (2.2 mL, 5.9 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플에 N2를 불어넣고, 밀봉하고, 80 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 490 (0.40 g, ~92%) 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다.
화합물 491: 490 (0.40 g, 1.07 mmol)와 3 N HCl (10 mL, 30 mmol)의 10 mL 에탄올 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% NH4OH 수용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 491 (0.35 g, 99%) 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 331 (100%) [M+H]+.
화합물 492: 화합물 491 (0.35 g, 1.06 mmol) 및 에틸포메이트 (10 mL, 124 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) 에탄올 중 소디움 에톡사이드, 21 wt.% 용액 (2.0 mL, 5.4 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 492 (0.38 g, ~100%) 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 359 (100%) [M+H]+.
화합물 493: 화합물 492 (0.38 g, 1.06 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.11 g, 1.58 mmol)의 10 mL 에탄올 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고 이어서 실온에서 하룻밤 반응시켰다. 상기 샘플을 농축하고, EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 493 (0.33 g, 88%) 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였다, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 378 (100%) 및 356 (88%) [M+H]+.
화합물 494: 약간 순수하지 않은 화합물 493 (0.33 g, 0.93 mmol)의 20 mL 에탄올 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) 소디움 에톡사이드, 21 wt.% 용액/에탄올 (1.75 mL, 4.69 mmol)을 적가하였다. 실온에서 72시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하여 화합물 494 (0.32 g, 96 %)을 어두운 황색 거품으로 된 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 356 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63900: 화합물 494 (0.32 g, 0.89 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.125 g, 0.44 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.72 mL, 8.90 mmol)을 가하였다. 얼음조 (ice bath)를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 20% EtOAc/헥산) 이어서 차가운 헥산으로부터 결정화하여, 화합물 TX63900 (0.097 g, 31%) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.85 (s, 1H), 4.42 (q, 2H, J = 6.8 Hz), 2.53 (dd, 1H, J = 6.4, 18.4 Hz), 2.45-2.55 (m, 2H), 1.98-2.10 (m, 2H), 1.60-1.73 (m, 1H), 1.35 (s, 3H), 1.35 (t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.33 (s, 9H), 1.26 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 354 (100%) [M+H]+.
화합물 495: 화합물 127 (1.00 g, 4.20 mmol) 및 다이메틸 카보네이트 (7.1 mL, 84.2 mmol)의 10 mL THF 중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, 조금씩의 소디움 하이드라이드, 미네랄오일 중 60% 분산액 (0.67 g, 16.75 mmol)을 가하였다. 실온에서 1시간 동안 반응용액을 교반하고, 이어서 80 ℃에서 하룻밤. 상기 샘플을 실온으로 식히고, 농축하고 이어서 Et2O 및 포화 수용액 KH2PO4에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 중간체 케토-에스테르 (1.69 g, >100 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였다. 밀봉가능한 바이알 내에서, 상기 중간체 (약 4.20 mmol)의 10 mL 2-프로판올 중 용액을 고체 포름아미딘 아세테이트 (4.40 g, 42.26 mmol)으로 처리하고 이어서 피페리딘 (2.1 mL, 21.2 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플에 N2를 불어넣고, 밀봉하고, (블럭히터를 이용하여) 80 ℃에서 72시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고 이어서 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30-50% EtOAc/ 헥산) 하여 화합물 495 (0.189 g, 16 %) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 291 (100%) [M+H]+.
화합물 496: 화합물 495 (0.189 g, 0.652 mmol)와 N,N-다이이소프로필에틸아민 (0.125 mL, 0.718 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을에, (주사기로) 옥시염화인 (0.61 mL, 6.54 mmol)을 적가하였다. 상기 첨가 후, 상기 샘플을 90 ℃에서 N2 하 2시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고 이어서 조심스럽게 EtOAc 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 496 (0.172 g, 86%) 을 황갈색 고체 상태로 수득하였다. MS (APCI) m/z 309/311 (100/42%) [M+H]+.
화합물 497: 화합물 496 (0.172 g, 0.558 mmol)의 10 mL 메탄올 중 용액을 소디움 메톡사이드, 메탄올 중의 30 wt.% 용액 (0.52 mL, 2.77 mmol)으로 처리하였다. 상기 샘플에 N2를 불어넣고, 밀봉하고, 60 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 497 (0.151 g, 88%) 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 305 (100%) [M+H]+.
화합물 498: 화합물 497 (0.151 g, 0.496 mmol)와 3 N HCl (4 mL, 12 mmol)의 20 mL 메탄올 중 용액을 실온에서 N2 하 16시간 교반하였다. 반응혼합물을 농축하고, 식히고, 10% NH4OH 수용액을 사용하여 pH ~ 9-10로 염기성화하고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 498 (0.128 g, 99%) 을 어두운 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 261 (100%) [M+H]+.
화합물 499: 약간 순수하지 않은 화합물 498 (0.128 g, 0.492 mmol) 및 에틸포메이트 (4.0 mL, 50 mmol)의 10 mL 벤젠 중 용액을 교반하면서 여기에, (주사기로) 소디움 메톡사이드, 30 wt.% 용액/메탄올 (0.46 mL, 52.45 mmol)을 적가하였다. 실온에서 N2 하 48시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 499 (0.115 g, 82%) 을 밝은 황색 고체 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 289 (100%) [M+H]+.
화합물 500: 약간 순수하지 않은 화합물 499 (0.115 g, 약 0.401 mmol)와 하이드록실아민 염산염 (0.042 g, 0.604 mmol)의 10 mL 에탄올 중 용액을 50 ℃에서 N2 하 16시간 동안 가열하고, 식히고, 농축하고, CHCl3 및 포화 NaHCO3 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 500 (0.109 g, 95%) 을 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 286 (100%) [M+H]+.
화합물 501: 약간 순수하지 않은 화합물 500 (0.109 g, 0.381 mmol)의 10 mL 메탄올중 용액을 실온에서 N2 하 교반하면서 여기에, (주사기로) 메탄올 중 소디움 메톡사이드, 30 wt.% 용액 (0.36 mL, 1.92 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 반응혼합물을 교반하고, 농축하고 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고 농축하여 화합물 501 (0.096 g, 88%) 을 황색 오일 상태로 수득하였으며, 이를 정제하지 않고 사용하였다. MS (APCI) m/z 286 (100%) [M+H]+.
화합물 TX63874: 약간 순수하지 않은 화합물 501 (0.096 g, 0.338 mmol)의 10 mL DMF 중 용액을 0 ℃에서 N2 하 교반하면서 여기에, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸히단토인 (0.048 g, 0.168 mmol)을 한번에 가하였다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후에, 피리딘 (0.27 mL, 3.34 mmol)을 가하였다. 얼음조를 제거하고, 상기 샘플을 50 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 상기 샘플을 식히고, 농축하고 (DMF 및 피리딘의 대부분을 제거하기 위하여) 이어서 EtOAc 및 포화 KH2PO4 용액에 분배시켰다. 유기층을 포화 NaCl 용액으로 세척하고, 건조하고 (MgSO4), 여과하고, 농축하고, 크로마토그래피 하여 (실리카 겔, 30% EtOAc/헥산) 하여 화합물 TX63874 (0.028 g, 30%)을 황갈색 고체 상태로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 3.99 (s, 3H), 2.81 (dd, 1H, J = 6.4, 18.4 Hz), 2.49-2.64 (m, 2H), 2.00-2.15 (m, 2H), 1.64-1.77 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 8.8 Hz); MS (APCI) m/z 284 (100%) [M+H]+.
* * * * * * * * * * * * * * * *
여기에 개시되고 청구되어 있는 모든 제조방법들은 본 개시의 관점에서 과도한 실험없이도 수행되고 실시될 수 있다. 본 발명의 제조방법들이 바람직한 구현예들의 용어들로 기재되어 있지만, 당업계 숙련자들에게는 본 발명의 개념, 정긴 및 범위로부터 벗어남 없이 여기에 기재된 제조방법들 및 그 제조방법들의 단계들 혹은 이들 단계의 순서에 있어서 다양하게 변화시키는 것이 가능할 것이다. 더 구체적으로는, 화학적으로 그리고 생리학적으로 관련된 특정의 활성물질로, 여기에 기재된 활성물질들 대신에 동일하거나 유사한 결과를 얻을 수 있으면서 치환할 수도 있다. 이러한 유사 치환체들 및 변형체들은 모두 당업계 숙련자들에게, 첨부된 청구항들에서 정의된 바와 같은 본 발명의 정신, 범위 및 개념 안에서 취급된다.
SEQUENCE LISTING <110> ANDERSON, ERIC BOLTON, GARY L. CAPRATHE, BRADLEY JIANG, XIN LEE, CHITASE ROARK, WILLIAM H. VISNICK, MELEAN <120> PYRAZOLYL AND PYRIMIDINYL TRICYCLIC ENONES AS ANTIOXIDANT INFLAMMATION MODULATORS <130> REAT.P0066WO <140> UNKNOWN <141> 2011-12-19 <150> 61/424,601 <151> 2010-12-17 <160> 1 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 26 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 cagtcacagt gactcagcag aatctg 26

Claims (142)

  1. 하기 화학식의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체(tautomer):
    Figure 112016122560029-pct00195

    상기 식에서:
    1 및 2로 표지된 원자들은 이중결합 또는 에폭시화된 이중결합으로써 서로 연결되고;
    n은 1 또는 2 이고;
    m은 0 또는 1 이고;
    X는 -CN, -CF3, 또는 -C(O)Ra이고, 여기서 Ra는 -OH, 알콕시(C≤6), 알킬아미노(C≤6), 디알킬아미노(C≤6), 또는 -NHS(O)2-알킬(C1-4)이고;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
    R1 및 R2는 함께 결합하여 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
    R3는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는 R3는 하기에서와 같이 R4와 함께 결합하거나; 단 R3는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고;
    R4는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 시아노, 또는 옥소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는 R4 는 하기에서와 같이 R3 또는 R5와 함께 결합되고;
    R5는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는 R5 는 하기에서와 같이 R4 와 결합되거나; 단 R5는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고; 및
    R6는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 시아노, 또는 옥소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
    단, R3 및 R4가 함께 결합될 때, 화합물은 하기 화학식 Ia로 추가로 정의되고:
    Figure 112016122560029-pct00196

    상기 식에서 R7은 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
    단, R4 및 R5가 함께 결합될 때, 화합물은 하기 화학식 Ib로 추가로 정의되고:
    Figure 112016122560029-pct00197


    상기 식에서 R8는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
  2. 제1항에 있어서,
    추가로 하기 화학식으로 정의되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체:
    Figure 112016122560029-pct00198

    상기 식에서:
    n은 1 또는 2이고;
    X는 -CN, -CF3, 또는 -C(O)Ra이고, 상기에서 Ra는 -OH, 알콕시(C≤6), 알킬아미노(C≤6), 디알킬아미노(C≤6), 또는 -NHS(O)2-알킬(C1-4)이고;
    R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
    R1 및 R2 함께 결합되어 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
    R3는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 단 R3 는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고;
    R5는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 단 R5는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고; 그리고
    R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
  3. 제1항에 있어서,
    추가로 하기 화학식으로 정의되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체:
    Figure 112013064107039-pct00199

    상기 식에서:
    R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
    R1 및 R2 는 함께 결합되어 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
    R3 는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 단 R3 는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고;
    R5 는 존재하지 않거나, 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 단 R5 는 이에 결합한 원자가 이중결합의 일부를 형성하는 때에만 존재하지 않고; 그리고
    R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
  4. 제3항에 있어서,
    추가로 하기 화학식으로 정의되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체:
    Figure 112013064107039-pct00200

    상기 식에서:
    R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
    R3 는 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고; 그리고
    R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
  5. 제3항에 있어서,
    추가로 하기 화학식으로 정의되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체:
    Figure 112013064107039-pct00201

    상기 식에서:
    R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이거나; 또는
    R1 및 R2 는 함께 결합되어 알칸디일(C≤12), 알켄디일(C≤12), 알콕시디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
    R5 는 수소; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고; 그리고,
    R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
  6. 제1항에 있어서,
    추가로 하기 화학식으로 정의되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 호변이성질체:
    Figure 112016122560029-pct00218

    상기 식에서:
    R1 및 R2 는 각각 독립적으로 수소, 하이드록시, 할로, 또는 아미노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
    R4 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이고;
    R6 는 수소, 하이드록시, 아미노, 할로, 또는 시아노; 또는 알킬(C≤12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아랄킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로사이클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 아릴옥시(C≤12), 아랄콕시(C≤12), 헤테로아릴옥시(C≤12), 아실옥시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 아릴아미노(C≤12), 아랄킬아미노(C≤12), 헤테로아릴아미노(C≤12), 아미도(C≤12), 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태이다.
  7. 제1항에 있어서,
    1 및 2로 표지된 원자들이 이중결합으로 연결된 화합물.
  8. 제1항, 제2항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    X 가 -CN인 화합물.
  9. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1 또는 R2 가 알킬(C≤8)인 화합물.
  10. 제9항에 있어서,
    R1 및 R2 가 각각 메틸인 화합물.
  11. 제9항에 있어서,
    R1 가 메틸이고 R2 가 수소인 화합물.
  12. 제1항 내지 제3항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3 가 존재하지 않는 화합물.
  13. 제1항, 제6항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4 가 수소인 화합물.
  14. 제1항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4 가 옥소(oxo)인 화합물.
  15. 제1항, 제6항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4 가 알킬(C≤8), 아릴(C≤8), 아실(C≤8), 알콕시(C≤8) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태인 화합물.
  16. 제1항 내지 제3항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5 가 존재하지 않는 화합물.
  17. 제1항 내지 제3항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5 가 수소인 화합물.
  18. 제1항 내지 제3항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5 가 알킬(C≤8), 아릴(C≤8), 아실(C≤8) 또는 이들 중 어느 기의 치환된 형태인 화합물.
  19. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6 가 수소인 화합물.
  20. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6가 할로인 화합물.
  21. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6가 알킬(C≤6)또는 치환된 알킬(C≤6)인 화합물.
  22. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6 가 아릴(C≤8), 헤테로아릴(C≤8), 또는 상기 기들 중 하나의 치환된 형태인 화합물.
  23. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6가 알콕시(C≤8)인 화합물.
  24. 제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    10번 탄소원자가 R 입체형상을 가지는 화합물.
  25. 제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    10번 탄소원자가 S 입체형상을 가지는 화합물.
  26. 제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    5번 탄소원자가 R 입체형상을 가지는 화합물.
  27. 제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    5번 탄소원자가 S 입체형상을 가지는 화합물.
  28. 제1항에 있어서,
    추가로 하기와 같이 정의되는 화합물:
    Figure 112016122560029-pct00203

    Figure 112016122560029-pct00204

    Figure 112016122560029-pct00205

    Figure 112016122560029-pct00206

    Figure 112016122560029-pct00207
  29. 제1항에 있어서,
    추가로 하기와 같이 정의되는 화합물:
    Figure 112016122560029-pct00208

    Figure 112016122560029-pct00209

    Figure 112016122560029-pct00210
  30. 하기 화학식의 화합물:
    Figure 112016122560029-pct00211
  31. 하기 화학식의 화합물:
    Figure 112016122560029-pct00212
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  36. a) 제1항 내지 제7항 및 제28항 내지 제31항 중 어느 한 항의 화합물; 및
    b) 부형제
    를 포함하며, 다음의 질병 또는 질환을 치료 또는 예방하기 위한 약학적 조성물:
    암, 심혈관 질환, 자가면역 질병, 신경 퇴행성 질병, 만성 신장 질환, 당뇨병, 점막염, 염증성 장 질환, 피부염, 패혈증, 허혈성 재관류 손상, 인플루엔자, 골관절염, 골다공증, 췌장염, 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환, 낭성 섬유증, 다발성 경화증, 심근 경색, 졸중, 근육 이영양증, 악액질, 이식편 대 숙주병, 눈 질환, 또는 정신병학적 또는 신경정신병학적 질병 또는 질환.
  37. 제36항에 있어서, 심혈관 질환이 죽상 동맥 경화증인 것인 약학적 조성물.
  38. 제36항에 있어서, 자가면역 질병이 크론병, 류마티스성 관절염, 루푸스 또는 건선인 것인 약학적 조성물.
  39. 제36항에 있어서, 신경 퇴행성 질병이 알쯔하이머병, 파킨슨병, 근위축성 측삭 경화증 또는 헌팅톤병인 것인 약학적 조성물.
  40. 제36항에 있어서, 눈 질환이 포도막염, 녹내장, 황반 변성 또는 망막병증인 것인 약학적 조성물.
  41. 제36항에 있어서, 정신병학적 또는 신경정신병학적 질병 또는 질환이 정신병, 정신 분열증, 우울증, 양극성 장애, 발작 장애, 편두통, 신경 병성 통증, 이명, 외상 후 스트레스 장애, 주의력 결핍 장애, 자폐증, 또는 신경성 식욕 부진인 것인 약학적 조성물.
  42. 제41항에 있어서, 발작 장애가 간질인 것인 약학적 조성물.




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