KR20030000748A - 난황 단백질의 비열 살균 방법 - Google Patents
난황 단백질의 비열 살균 방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 난황 단백질을 단백질의 변성 온도 이하에서 고전압 전기장(high voltage electric fields) 처리를 하여 난황 단백질을 변성시키지 않고 미생물을 효율적으로 살균하는 비열 살균 방법에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로, 본 발명은 액상의 면역 난황 단백질 및 분말상의 난황 단백질을 전극을 갖는 특수 처리 용기에 넣거나 흘러 보내면서 순간적으로 고전압의 전기장을 가하여 단백질을 변성시키지 않고 이들 내에 들어 있는 일반 미생물이나 병원성 미생물을 불활성화시켜 저장 기간을 연장시키는 동시에 품질을 향상시키는 비열 살균 방법이다.
Description
본 발명은 펄스 전기장 (pulsed electric field, 이하 'PEF'라 한다)을 이용한 액상의 난황 단백질 또는 분말상 제품 중의 단백질을 변성시키지 않고 살균하는 비열 살균 방법에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로, 본 발명은 액상의 면역 단백질을 함유한 난황, 면역 단백질 농축물 및 분말상의 난황 단백질 함유 제품을 전극을 갖는 특수한 처리 용기에 넣은 상태 또는 용기를 통과시키면서 순간적으로 고전압의 펄스 전기장을 가하여 단백질을 변성시키지 않고 이들 내에 들어 있는 변패 미생물이나 병원성 미생물을 살균하여 면역단백질의 역가를 유지시키면서 저장 기간을 연장시키는 동시에 품질을 향상시키는 방법에 관한 것이다.
항체 의약이 유럽, 미국을 중심으로 급속히 주목을 받고 있는 동시에 건강 식품 분야에 새로운 카테고리의 항체 식품이 서서히 도입되기 시작하였다. 항체 식품은 항체 의약품과 함께 앞으로 급속히 신장될 것으로 기대된다. 항체란 면역시스템의 중심 물질로서 동물 체내에 병원균이나 독소등의 항원이 침입되면 생성되는 것으로 그 항원과 특이적으로 반응하는 물질이다. 그 기본적 구조가 글로부린(globulin)이란 단백질로 구성되어 있으므로 면역 글로부린이라 부른다. 항체식품은 항체 자체를 직접 입을 통하여 섭취하는 것이 가장 큰 특징이다. 식품에 함유되어 있는 항체의 첫째 기능은 주로 소화기관 내에서 항원이었던 바이러스나 병원균에 특이적으로 반응하여 이들 균의 증식을 억제하며, 체외로 배출시켜 균수를 감소시키므로서 소화기관내의 감염을 방지하는 동시에 체내로 침입을 방지한다. 또한 항체는 병원균과 바이러스가 신체와 면역 시스템에 주는 스트레스를 경감시키는 역할을 한다.
면역 달걀은 항체 생산 응답이 특히 높은 닭에 항원을 섭취시켜 이에 대한 항체를 난황내에 생산시킨 활성항체 함유소재이다. 최근 위궤양 및 십이지 궤양의 원인균으로 알려진 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)에 대한 항원을 산란계에 주사하여, 이 항원에 대한 항체를 난황에서 생성시킨 면역 난황(IgY, immunoglobulin yolk) 연구가 활발히 이루어지고 있다. 일본 특개평 40275232와 국내 특허 공고 98-81323에서는 면역화된 난황 항체를 함유하는 위궤양, 십이지 궤양 예방 식품 내지는 조성물에 대해 특허 청구하고 있다. 또한 대한민국특허 특0171540에는 충치 예방용 난황 단백질의 제조 방법에 대해 출원하였다. 현재 면역 난황을 첨가한 야쿠르트 제품이 항헬리코 식품으로 판매되고 있어 국내에서 면역 난황에 대한 관심이 높아지고 있다. 그러나 이와 같은 항체 식품을 어떻게 제품화하느냐가 문제로서 가공상 여러 가지 제약이 있다. 항체는 기능성 단백질이므로 가공 과정에서 단백질이 변성되면 그 기능성을 잃어버리게 된다. 일반적으로 단백질을 변성시키는 인자는 열, 유기용매, 산, 알카리, 환원제, 단백질 가수분해 효소등이다. 특히 가공 과정에서 가장 주의할 점은 열이다. 수분의 함유량에 영향을 받으나 항체는 약 55℃이상에서 현저히 변성되기 시작한다. 비극성 유기용매는 항체와 같은 수용성 단백질을 변성시킨다. 식품 가공에서 광범위하게 사용되는 에탄올은 물보다 비극성이므로 장시간 작용시키는 경우에는 주의하여야 한다. 산과 알칼리는 펩타이드(peptide) 결합 및 다이슬파이드(disulfide) 결합을 가수분해시키고, 환원제는 다이슬파이드 결합을 환원 절단하며, 단백질 가수분해 효소는 펩타이드 결합을 절단하는 작용을 하므로 주의하여야 한다.
현재 시판되고 있는 난황중에는 약 104∼106 cell/ml의 세균이 함유되어 있고 특히 살모넬라(Salmonella)균과 같은 장내 세균군이 검출되므로 난황이 함유된 식품을 가공할 때는 위생상 어떤 형태이던 살균 처리를 하지 않으면 안된다. 그러나 상기의 특허에 의해 만들어진 난황 단백질을 음료나 기타 발효유와 같은 제품에 이용할 경우 가공 공정상의 열처리에 의해 단백질이 변성되어 항체의 역가가 현저히 감소되므로 헬리코박터 파이로리를 저해하지 못한다. 따라서 목적하는 위궤양, 위염, 십이지장궤양등의 예방이나 치료효과를 기대할 수 없다. 또한 단백질의 변성에 의해 침전이 일어나 제품내에 침전물을 형성하여 제품의 성상에 좋지 않은 영향을 주게된다. 이와 같이 열에 민감한 항체 단백질의 역가를 유지하면서 가열 살균하는 방법으로 쉬미쯔(Shimizu)등은 30∼50 중량 %의 자당(sucrose)을 첨가하여 75∼80℃에서 15분간 열처리하는 방법을 보고하였다(J. of Food Science, 1994,59(4), 763∼772). 또한 김성훈등(국내특허공고 98-81323)은 난황액에 10∼30 중량 %의 설탕을 첨가하고 60∼65℃에서 2∼10분간 1∼3회 간헐적으로 살균 열처리하여 항체 역가를 유지하면서 일반 미생물 및 효모의 오염을 방지하였다고 보고하였다. 이와 같은 열처리 과정은 저온에서 비교적 짧은 시간이지만 미생물을 사멸시키기 위하여 항체 단백질의 변성온도이상의 온도에서 가열하여야하므로 단백질의 변성에 의한 어느 정도의 역가 손실은 불가피하며, 간헐 살균하므로 살균에 소요되는 시간이 길고 살균 공정이 복잡하며 효과적인 살균이 어렵다는 문제점이 있다. 따라서 본 발명에서는 단백질의 변성을 방지하기 위하여 설탕등을 첨가하여 열처리를 하는 기존의 살균 방법의 기술적 문제점을 해결하기 위하여 단백질을 변성시키지 않으면서 일반 세균, 병원성 및 부패 미생물을 효과적으로 살균할 수 있는 난황 단백질의 냉살균(cold sterilization) 방법을 제공하고자 한다.
본 발명은 펄스 전기장을 이용하여 난황 단백질을 변성시키지 않으면서 미생물을 효율적으로 살균하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
살균방법에 따른 생균수의 변화
최근 미생물을 사멸시키기 위한 새로운 방법으로서, 고전압 펄스 전기장 처리법이 세계적으로 활발히 연구되고 있다. 이 방법에 의하면 살균하고자 하는 액상 또는 분말 식품을 특수 제작한 고전압 펄스 전기장 처리 용기에 넣거나또는 처리 용기를 통과시키면서 순간적으로 고전압 펄스를 가하여, 식품내에 존재하는 미생물의 세포막을 파괴시켜 열을 가하지 않고도 효과적으로 미생물을 살균시킬 수 있다. 이 고전압 펄스 전기장에 의한 미생물의 불활성화는 처리중 온도가 거의 상승하지 않고 처리 시간이 매우 짧으며 연속 처리가 가능하고, 처리 후에 식품의 물리적·화학적 및 영양학적인 특성들이 거의 변하지 않으며, 재래 가열 조작에 비하여 에너지 소비량이 거의 1/10로 감소되기 때문에 최근 관심이 집중되고 있는 비열 살균 기술이다. 본 발명자들은 펄스 전기장 장치 개발, 펄스 전기장을 이용한 식품의 비열 살균 연구를 장기간 연구하여 왔으며, 특히 가열 살균이 어려운 기능성 식품 소재의 비열 살균법을 연구하는 과정에서 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 고전압 펄스 전기장에 의한 비열 살균 기술을 응용한 난황 단백질의 단백질을 변성시키지 않고 살균하는 방법으로서, 본 발명에 따르면 55℃이하에서 단백질을 변성시키지 않고 난황 단백질에 내재 또는 혼입된 변패 미생물과 병원성 미생물을 효과적으로 사멸시킬 수 있다. 본 발명의 적용대상은 난황 단백질로서 일반 달걀에서 분리한 난황, 면역화한 달걀에서 분리한 면역 난황, 면역 난황 농축물, 난황 단백질을 함유한 분말제품을 포함한다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다.
본 발명의 비열 살균 방법은 액상이나 분말상의 난황 단백질을 특수 제작한고전압 펄스 전기장 처리 용기에 넣거나 통과시키면서 전기장 세기 10 내지 100 kV/cm, 펄스 폭 0.1 ㎲ 내지 1 ms의 고전압 펄스를 1회 내지 1만회 적용시키는 단계를 포함한다.
본 발명의 난황 단백질의 비열 살균 방법에 사용하는 고전압 펄스 전기장 장치는 2개의 전극 사이에 액상의 난황 단백질은 넣거나 통과시키면서 고전압 전기장을 순간적으로 방전시켜 처리하는 장치로서, 이 장치의 기본적인 요소는 전원 장치 (power suppley), 에너지를 저장하기 위한 충전기 (capacitor), 저장된 에너지를 순간적으로 방전하는 스위치 (switch) 장치, 그리고 난황 단백질의 처리를 위한 처리 용기 (treatment chamber)로 이루어져 있다.
본 발명에 사용되는 고전압 펄스의 형태로는 익스포넨샬 웨이브 펄스 (exponential wave pulse), 구형파 (square wave pulse), 삼각파 (tirangular wave pulse), 양극파 (bipolar pulse), 진동파 (oscillatory pulse)이다.
이와 같은 고전압 펄스 전기장을 이용하여 본 발명에 따른 비열 효과와 함께 변패 미생물 및 병원성 미생물의 불활성화를 통해 살균 효과를 얻을 수 있는 기작은 고전압의 전기장이 미생물의 세포막을 손상시키는 것이 직접적인 원인이다. 즉, 세포막은 축전지로 간주할 수 있으며, 외부에서 강한 전기장이 가해지면 세포막 사이의 전위차가 증가하게 되고, 세포막 양쪽 표면에 발생된 전하는 반대 전하를 가지므로 두 전하사이에 인력이 작용하게 된다. 이러한 인력은 세포막을 압축시키고 막의 두께를 감소시킨다. 따라서, 두께가 감소된 세포막 사이의 인력은 더욱 증가하게 되고, 그 결과 인력은 세포막의 두께를 더욱 감소시킴과 동시에 세포막 양쪽의 같은 전하들은 반발력을 형성하게 된다. 이러한 작용이 계속되면 결국 세포막에 작은 구멍이 형성되고 외부 전기장의 세기가 일정 수준 이상이 되면, 비가역성 세공이 형성되어 세포막이 파괴되므로 미생물은 결국 사멸하게 된다. 또한, 방전시간은 ms (10-3 sec) 내지 ㎲ (10-6 sec) 단위에서 일어나며 펄스와 펄스 사이의 간격을 펄스 폭보다 훨씬 길게 만들어, 식품에 펄스를 반복 처리하여도 실제 처리시간은 매우 짧기 때문에, 식품은 거의 가열되지 않으면서 살균 효과를 얻을 수 있게 된다.
또한, 본 발명의 비열 살균 방법의 적용 대상인 난황 단백질의 단백질을 변성시키지 않는 범위에서 난황 단백질의 온도를 30 내지 55℃의 저온으로 가열하는 단계와 고전압 펄스 전기장 처리 단계를 병용하는 것이 더욱 바람직하다.
본 발명의 난황 단백질의 살균 방법은 상기 설명한 바와 같은 고전압 펄스에 의한 미생물의 불활성화 효과를 향상시키기 위하여 처리 온도를 30∼55℃로 상승시키는 방법이외 나이신과 같은 천연 항균 펩타이드를 미량 첨가함으로써 살균 효과를 현저히 향상시킬 수 있다. 펄스 전기장과 나이신은 전혀 성질이 다른 것이나 살균 기작이 공통적으로 세포막에 손상을 주어 세포를 불활성화 시킨다는데 착안하여 본 발명을 완성하였다.
나이신(Nisin)은 48개국에서 식품 보존제로 사용되고 있는 항균 펩타이드로서 50년이상 육류, 유제품,맥주등에 천연 식품 보존제로 사용되어 왔다. 나이신은 유산균인 락토코커스 락티스 서브스페시스 락티스 (Lactococcus lactissubsp.lactis)를 우유 기본 배지에 발효하여 생산한다. 나이신이 미생물을 불활성화하는 기작은 영양 세포의 세포막에 작용하여 세공을 형성시키므로서 세포내 물질이 외부로 유출되거나 심한 경우에는 라이시스 (lysis)를 일으키기 때문이다. 이와 같이 펄스 전기장과 나이신은 공통으로 세포막에 작용하여 세포를 불활성화시키기 때문에 펄스 전기장과 나이신을 동시에 처리하면 상승작용에 의하여 살균 효과가 증대되므로 본 발명의 효과를 향상시킬 수 있다. 처리 방법은 나이신을 일정량 시료에 첨가하고 곧바로 펄스 전기장을 처리하는 방법, 시료에 나이신을 첨가하고 10분∼2시간 정도 처리한 후에 펄스 전기장을 처리하는 방법, 펄스 전기장을 먼저 처리한 후에 나이신을 첨가하고 10분∼2시간 처리하는 방법으로 나눌 수 있다. 위 세가지 처리 방법 중 어느 방법이 효과적인가 하는 것은 시료의 형태, 살균 정도등에 따라 다르다. 그러나 어느 방법을 사용하던 펄스 전기장과 나이신을 병합처리하면 펄스 전기장 단독 처리할 경우보다 살균 효과가 향상된다. 이 때 시료에 첨가하는 나이신의 양은 시료와 사멸시키고자하는 균종에 따라 다르나 10∼104 IU/ml를 첨가하며, 바람직한 첨가량은 100∼1000 IU/ml이다. 또한 나이신의 살균 효과는 나이신을 첨가한 후 약 10분동안에 가장 크므로 처리 시간은 10분∼2시간이 바람직하며, 처리온도는 4∼50℃가 적당하다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명할 것이다.
실시예 1 : 난황의 익스포텐셜 웨이브 고전압 전기장 처리
시중에서 신선한 일반 달걀을 구입하여 난백을 제거하고 난황만을 분리하여 시료로 사용하였다. 난황을 전극 간격이 0.2 cm인 고전압 펄스 전기장 연속식 처리 용기에 통과시키면서 실온에서 10 내지 40 kV/cm의 전기장의 세기로 펄스폭 1㎲의 익스포넨샬 웨이브 펄스를 일정한 처리 시간을 가하였다. 처리한 난황을 단계적으로 희석(serial dilution)하여, 일반세균이 자랄 수 있는 영양 배지(nutrient agar)에 도말하여 30℃에서 24시간 배양한 후 자라난 콜로니(colony) 수를 계수하였으며, 또한 같은 시료를 장내 세균군이 자랄 수 있는 페트리 필름(petri film, 3M)에 접종하여 37℃에서 24시간 배양한 후 자라난 콜로니 수를 계수하여 그 결과를 하기 표 1과 표 2에 나타내었다.
표 1. 익스포넨샬 웨이브 펄스 처리시 난황의 일반 세균수 변화 (CFU/ml)
| 펄스수(처리시간, ㎲) | 10 kV/cm | 20 kV/cm | 30 kV/cm | 40 kV/cm |
| 무처리 | 8.5×105 | 8.5×105 | 8.5×105 | 8.5×105 |
| 200 | 1.7×105 | 8.4×104 | 4.3×104 | 9.2×103 |
| 500 | 6.7×104 | 7.6×103 | 1.2×103 | 7.6×102 |
| 1000 | 9.8×103 | 7.2×102 | 2.7×102 | 2.3×101 |
표 2. 익스포넨샬 웨이브 펄스 처리시 난황의 장내 세균수 변화 (CFU/ml)
| 펄스수(처리시간, ㎲) | 10 kV/cm | 20 kV/cm | 30 kV/cm | 40 kV/cm |
| 무처리 | 2.7×104 | 2.7×104 | 2.7×104 | 2.7×104 |
| 200 | 9.8×103 | 7.7×103 | 5.1×103 | 2.4×103 |
| 500 | 4.5×103 | 1.2×103 | 9.1×102 | 6.7×102 |
| 1000 | 8.7×102 | 5.4×102 | 2.7×102 | 8.4×101 |
실시예 2 : 난황의 스퀘어 웨이브 고전압 전기장 처리
난황을 전극 간격이 0.2 cm인 고전압 펄스 전기장 연속식 처리 용기에 통과시키면서 실온에서 10 내지 40 kV/cm의 전기장의 세기로 펄스폭 1㎲의 스퀘어 웨이브 펄스를 일정한 처리 시간을 가하였다. 처리한 난황을 단계적으로 희석(serial dilution)하여, 일반세균이 자랄 수 있는 영양 배지(nutrient agar)에 도말하여 30℃에서 24시간 배양한 후 자라난 콜로니(colony) 수를 계수하였으며, 또한 같은 시료를 장내 세균군이 자랄 수 있는 페트리 필름(petri film, 3M)에 접종하여 37℃에서 24시간 배양한 후 자라난 콜로니 수를 계수하여 그 결과를 하기 표 3과 표 4에 나타내었다.
표 3. 스퀘어 웨이브 펄스 처리시 난황의 일반 세균수 변화 (CFU/ml)
| 펄스수(처리시간, ㎲) | 10 kV/cm | 20 kV/cm | 30 kV/cm | 40 kV/cm |
| 무처리 | 8.5×105 | 8.5×105 | 8.5×105 | 8.5×105 |
| 200 | 9.1×104 | 3.2×104 | 6.6×103 | 1.2×103 |
| 500 | 2.4×104 | 1.1×103 | 8.8×102 | 2.9×101 |
| 1000 | 1.7×103 | 9.1×101 | 1.2×101 | 0. |
표 4. 스퀘어 웨이브 펄스 처리시 난황의 장내 세균수 변화 (CFU/ml)
| 펄스수(처리시간, ㎲) | 10 kV/cm | 20 kV/cm | 30 kV/cm | 40 kV/cm |
| 무처리 | 2.7×104 | 2.7×104 | 2.7×104 | 2.7×104 |
| 200 | 6.4×103 | 4.1×103 | 1.3×103 | 8.5×102 |
| 500 | 9.4×102 | 7.5×102 | 3.6×102 | 7.5×101 |
| 1000 | 2.7×102 | 9.9×101 | 7.9×101 | 0 |
실시예 3 : 면역 단백질 농축물의 고전압 펄스 전기장 처리와 저온 열처리의 병용
면역 달걀을 구입하여 다당류 첨가법(J. Agri. Food Chem., 2000, 48, 995-999)에 의하여 면역 단백질 농축물을 얻었다. 즉 면역 달걀을 증류수로 6배 희석한 후 펙틴을 0.15% 참가하고 pH 5로 조정하여 잘 교반한 후 30분간 4℃의 냉장고에 보관하였다. 연속 원심 분리기에 10000 g로 원심분리하여 침전물을 제거하고 면역 단백질을 함유한 상등액은 다시 10배로 진공 동결 농축하였다. 이와 같이 제조한 난황 면역 단백질 농축물을 전극 간격이 0.2 cm인 고전압 펄스 전기장 연속식 처리 용기에 통과시키면서 40℃의 저온 열처리를 병행하여 전기장 세기 10 내지 40 kV/cm의 전기장 세기로 펄스 폭 1 ㎲의 스퀘어 웨이브 펄스를 일정한 처리 시간을 가하였다. 처리한 난황 단백질을 단계적으로 희석(serial dilution)하여, 일반세균이 자랄 수 있는 영양 배지(nutrient agar)에 도말하여 30℃에서 24시간 배양한 후 자라난 콜로니(colony) 수를 계수하였으며, 또한 같은 시료를 장내 세균군이 자랄 수 있는 페트리필름(petri film, 3M)에 접종하여 37℃에서 24시간 배양한 후 자라난 콜로니 수를 계수하여 그 결과를 하기 표 5와 표 6에 나타내었다.
표 5. 면역 단백질 농축물의 고전압 펄스 전기장 처리와 저온 열처리 병용시 일반 세균수 변화 (CFU/ml)
| 펄스수(처리시간, ㎲) | 10 kV/cm | 20 kV/cm | 30 kV/cm | 40 kV/cm |
| 무처리 | 8.5×105 | 8.5×105 | 8.5×105 | 8.5×105 |
| 200 | 2.7×104 | 8.3×103 | 5.7×102 | 9.2×101 |
| 500 | 6.5×102 | 1.4×102 | 2.4×101 | 0 |
| 1000 | 1.5×101 | 8.7×100 | 0 | 0 |
표 6. 고전압 펄스 전기장 처리와 저온 열처리 병용시 장내 세균수 변화 (CFU/ml)
| 펄스수(처리시간, ㎲) | 10 kV/cm | 20 kV/cm | 30 kV/cm | 40 kV/cm |
| 무처리 | 2.75×104 | 2.75×104 | 2.75×104 | 2.75×104 |
| 200 | 1.1×103 | 9.2×102 | 6.4×102 | 6.1×101 |
| 500 | 2.4×102 | 8.8×101 | 2.9×100 | 0 |
| 1000 | 3.7×101 | 8.4×100 | 0 | 0 |
실시예 4 : 나이신 첨가에 의한 살균 효과 향상
실시예 3에서와 같이 조제한 난황 면역 단백질 농축물에 락토코커스 락티스 서브스페시스 락티스 (Lactococcus lactissubsp.lactis) A164가 생산하는 나이신을 100 IU/ml 첨가하고 25℃에서 1시간 처리하였다. 또한 나이신을 첨가한 면역 단백질 농축물을 실시예 3과 같은 조건 (10 kV/cm, 500 ㎲)에서 고전압 전기장 살균을 하여 그 결과를 그림 1에 비교하였다.
비교예 1 : 간헐 열처리에 의한 난황 단백질의 살균
실시예 3의 난황 면역 단백질 농축물에 20%의 설탕을 첨가하고 60℃에서 10분간 열처리한 후 실온으로 즉시 냉각한 후 2시간후에 다시 60℃에서 10분간 동일 방법으로 2번 간헐 살균한 후 일반 세균 및 장내 세균군을 실시예 3의 방법으로 측정하였다.
표 7. 간헐 살균에 의한 일반 세균 및 장내 세균수의 변화
| 세균수 | ||
| 무처리구 | 일반세균 | 8.5×105 |
| 장내세균 | 2.7×104 | |
| 간헐살균 처리구 | 일반세균 | 6.3×103 |
| 장내세균 | 2.2×102 |
실시예 5 : 고전압 펄스 전기장 처리에 따른 항체의 역가 변화
전술한 실시예 2, 3 및 4와 비교예 1의 시료에 함유된 역가를 측정하였다. 항체의역가는 아키타 등 (Akita and Nakai, J. Immunol. Mehtod 1993, 160, 207∼214)과 Chang 등 (Chang, et al., J. Agric. Food Chem., 2000, 48, 995-999)에 의한 RID 방법으로 측정하였다. 즉 3 % rabbit anti-chicken IgG와 0.02%의 NaN3를 함유한 플레이트를 만든 후 3 mm의 구멍을 내고 이 구멍에 chicken serum IgG 표준 용액을 넣어 표준 곡선을 작성한다. 표준 곡선 작성에 사용한 같은 플레이트에 처리한 시료의 액을 넣어 18∼48시간이 지난 후 구멍 주위에 생긴 투명한 원의 크기를 측정하여 표준 곡선으로부터 역가를 계산하였다.
| 처리 방법 | 항체 활성 (mg/ml) |
| 1. 처리 전 면역 난황 | 0.54 |
| 2. 펄스 전기장 처리 면역 난황 (실시예 2) | 0.54 |
| 3. 처리 전 농축 면역 단백질 | 8.51 |
| 4. 펄스 전기장 처리 농축 면역 단백질 (실시예 3) | 8.04 |
| 5. 펄스 전기장 및 나이신 처리 농축 면역 단백질 (실시예 4) | 8.23 |
| 6. 간헐 열 살균 농축 면역 단백질 (비교예 1) | 5.02 |
상기 실시예에서 확인된 바와 같이, 본 발명에 따른 난황 단백질의 고전압 전기장 비열 살균 공정에 의하여 일반 세균은 약 102 cell/ml로 감소되었으며, 장내 세균군은 전혀 검출되지 않았다. 더욱이 나이신을 첨가하므로서 살균 효과는 더욱 향상되어 약 10 cell/ml까지 감소되었으며 장내 세균은 전혀 검출되지 않아 매우 효과적으로 살균되었음을 알 수 있었다. 한편 항체 역가의 변화를 살펴보면 펄스 전기장 처리에 의하여 항체의 역가가 거의 손실되지 않아 항체 단백질이 펄스 전기장에 비하여 전혀 변성되지 않았음을 알 수 있다. 이에 비하여 저온에서 간헐 가열 살균한 경우 일반 세균은 약 103 cell/ml로 감소되었으며, 장내 세균군도 일부 검출되어 살균이 불충분함을 알 수 있으며, 항체의 활성도 약 40%이상 소실되었다. 결론적으로 고전압 전기장 처리에 의하여 난황 단백질을 변성시키지 않고 역가가 그대로 유지되면서 일반 미생물과 병원성 미생물의 오염을 억제할 수 있다.
Claims (3)
- 본 발명은 액상의 난황 단백질 및 분말상의 난황 단백질을 55℃이하에서 순간적으로 고전압의 전기장 처리를 하여 단백질을 변성시키지 않고 변패 미생물이나 병원성 미생물을 살균하는 방법
- 펄스는 익스포넨샬 웨이브 펄스(exponential wave pulse), 스퀘어 웨이브 펄스(square wave pulse), 삼각파(triangular wave pulse), 바이폴라 펄스(bioplar pulse) 또는 진동 펄스 (oscillatory pulse)이며, 처리 온도는 4∼55℃, 전기장의 세기는 10 내지 100 kV/cm, 펄스 폭은 0.1㎲ 내지 0.1 ms, 고전압 펄스를 1회 내지 1만회 적용시키는 것을 특징으로 하는 난황 단백질의 고전압 전기장 살균 방법
- 청구항 1에서 고전압 전기장 처리를 할 때 살균 효과를 향상시키기 위하여 난황 단백질에 천연 항균 단백질을 10∼104 IU/ml 첨가하는 것을 특징으로 하는 고전압 전기장 살균 방법
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| KR1020010036851A KR20030000748A (ko) | 2001-06-27 | 2001-06-27 | 난황 단백질의 비열 살균 방법 |
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| KR1020010036851A KR20030000748A (ko) | 2001-06-27 | 2001-06-27 | 난황 단백질의 비열 살균 방법 |
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ID=19711378
Family Applications (1)
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| KR1020010036851A Ceased KR20030000748A (ko) | 2001-06-27 | 2001-06-27 | 난황 단백질의 비열 살균 방법 |
Country Status (1)
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100775124B1 (ko) * | 2006-09-07 | 2007-11-08 | 삼성전자주식회사 | 플렉서블 전도성 폴리머 전극을 포함한 선도 유지 시스템 |
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- 2001-06-27 KR KR1020010036851A patent/KR20030000748A/ko not_active Ceased
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