KR20110011706A

KR20110011706A - 신규한 치환 피리딘-2-온 및 피리다진-3-온

Info

Publication number: KR20110011706A
Application number: KR1020107029040A
Authority: KR
Inventors: 놀란 제임스 듀드니; 라마 케이 콘드루; 브레들리 이 로; 얀 루; 조엘 맥킨토시; 티모시 디 오웬스; 마이클 소스
Original assignee: 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 2008-06-24
Filing date: 2009-06-15
Publication date: 2011-02-08
Anticipated expiration: 2029-06-15
Also published as: CO6382183A2; EP2297142B1; ES2552320T3; US20120129845A1; BRPI0914657A2; AU2009264400B2; PH12012502374A1; MA32487B1; CN103709148A; US20140194413A1; TWI396537B; CN102066366B; MX2010013191A; PE20100851A1; PH12012502375A1; WO2009156284A1; HK1152940A1; US7902194B2; NZ588819A; US8822457B2

Abstract

본 발명은 화학식 I 내지 IV 에 따른 5 -페닐-1H-피리딘-2-온 및 6-페닐-2H-피리다진-3-온 유도체를 개시하는데: 식 중, 변수 R, X, Y¹, Y², Y^2', Y³, Y⁴, n 및 m 은 본원에 기재된 바와 같이 정의되고, 이는 Btk 를 저해한다. 본원에 개시된 화합물은 Btk 의 활성을 조절하고, 과다한 Btk 활성과 연합된 질환 치료에 유용하다. 상기 화합물은 추가로 일탈적인 B-세포 증식과 연관된 염증 및 자가면역 질환, 예컨대 류마티스 관절염 치료에 유용하다. 또한, 화학식 I 내지 IV 의 화합물 및 하나 이상의 담체, 희석제 또는 부형제를 함유하는 조성물이 개시된다.

Description

신규한 치환 피리딘-2-온 및 피리다진-3-온{NOVEL SUBSTITUTED PYRIDIN-2-ONES AND PYRIDAZIN-3-ONES}

본 발명은 Bruton's 타이로신 키나아제 (Btk) 를 저해하고, 일탈적 B-세포 활성화에 의해 야기되는 자가면역 및 염증 질환의 치료에 유용한 신규한 유도체의 용도에 관한 것이다. 본원에 기재된 신규한 5 -페닐-1H-피리딘-2-온 및 6-페닐-2H-피리다진-3-온 유도체는 관절염 치료에 유용하다.

Btk 는 타이로신 키나아제의 Tec 패밀리의 구성원이며, 조기 B-세포 발생 및 성숙 B-세포 활성화 및 생존의 중요한 조절자인 것으로 나타났다 (Khan et al . Immunity 1995 3:283; Ellmeier et al. J. Exp . Med . 2000 192:1611). 인간에서 Btk 의 돌연변이는 X-연관 무감마글로불린혈증 (XLA) 상태를 유도한다 (리뷰는, Rosen et al . New Eng . J. Med . 1995 333:431 and Lindvall et al . Immunol . Rev. 2005 203:200). 상기 환자들은 면역이 저하되고, B-세포의 부전된 돌연변이, 감소된 면역글로불린 및 말초 B-세포 수준, 줄어든 T-세포 비의존성 면역 응답성 뿐만 아니라 BCR 자극 후 감쇠된 칼슘 동원성을 나타낸다.

자가면역 및 염증 질환에서의 Btk 의 역할에 대한 증거는 또한 Btk-결핍 마우스 모델에 의해 제공된다. 전신성 홍반 루푸스 (SLE) 의 전임상적 쥐과동물 모델에서, Btk-결핍 마우스 모델은 질환 진행의 현저한 완화를 나타냈다. 추가로, Btk-결핍 마우스는 콜라겐-유도성 관절염에 대해 내성이다 (Jansson and Holmdahl Clin. Exp . Immunol . 1993 94:459). 선별적 Btk 저해제는 마우스 관절염 모델에서 투여량 의존적 효능을 증명했다 (Pan et al ., Chem . Med Chem . 2007 2:58-61).

Btk 는 또한 질병 프로세스에 수반될 수 있는 B-세포 이외의 세포에 의해 발현된다. 예를 들어, Btk 는 비만 세포에 의해 발현되며, Btk-결핍 골수 유도성 비만 세포는 부전된 항원 유도성 과립화를 증명한다 (Iwaki et al. J. Biol. Chem. 2005 280:40261). 이는 알러지 및 천식과 같은 병리학적 비만 세포 응답성 치료에 Btk 가 유용할 수 있음을 보여준다. Btk 활성이 부재하는 XLA 환자로부터의 단핵구는, 자극 후 감소된 TNF 알파 제조를 나타낸다 (Horwood et al. J Exp Med 197:1603, 2003). 따라서, TNF 알파 매개성 염증은 소형 분자 Btk 저해제에 의해 조절될 수 있다. 또한, Btk 는 아폽토시스에서 역할을 하는 것으로도 보고된 바 있으며 (Islam and Smith Immunol. Rev. 2000 178:49), 따라서 Btk 저해제는 특정한 B-세포 림프종 및 백혈병 치료에 유용할 것이다 (Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201:1837).

본원에 기재된 신규한 5 -페닐-1H-피리딘-2-온 및 6-페닐-2H-피리다진-3-온 유도체는 관절염 치료에 유용하다.

본 발명은 신규한 5-페닐-1H-피리딘-2-온 및 6-페닐-2H-피리다진-3-온 유도체, 특히 화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 그의 염을 제공한다:

[식 중:

R 은 H, -R¹, -R¹-R²-R³, -R¹-R³ 또는 -R²-R³ 이고; 여기서

R¹ 은 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이고, R^1' 로 임의치환되고; 여기서 R^1' 은 저급 알킬, 히드록시, 저급 히드록시알킬, 저급 알콕시, 할로겐, 니트로, 아미노, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 시아노 또는 저급 할로알킬이고;

R² 는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)N(R^2'), -(CH₂)_q 또는 -S(=O)₂ 이고; 여기서 R^2' 는 H 또는 저급 알킬이고; q 는 1, 2 또는 3 이고;

R³ 은 H 또는 R⁴ 이고; 여기서 R⁴ 는 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 알킬, 시클로알킬, 알킬 시클로알킬, 시클로알킬 알킬, 헤테로시클로알킬, 알킬 헤테로시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬 알킬이고, 하나 이상의 저급 알킬, 히드록시, 옥소, 저급 히드록시알킬, 저급 알콕시, 할로겐, 니트로, 아미노, 시아노, 저급 알킬술포닐 또는 저급 할로알킬로 임의치환되고;

X 는 CH 또는 N 이고;

Q 는 N 이고;

Y¹ 는 H 또는 저급 알킬이고;

Y² 는 Y^2a 또는 Y^2b 이고; 여기서, Y^2a 는 H 또는 할로겐이고; Y^2b 는, 하나 이상의 Y^2b' 로 임의치환된 저급 알킬이고; Y^2b' 는 히드록시, 저급 알콕시 또는 할로겐이고;

각각의 Y^2' 는 독립적으로 Y^2a' 또는 Y^2b' 이고; 여기서, Y^2a' 는 할로겐이고; Y^2b' 는 하나 이상의 Y^2'b' 로 임의치환된 저급 알킬이고; 여기서, Y^2'b' 는 히드록시, 저급 알콕시 또는 할로겐이고;

n 은 0, 1, 2 또는 3 이고;

Y³ 은 H, 할로겐, 또는 저급 알킬이고, 여기서 저급 알킬은 히드록시, 저급 알콕시, 아미노 및 할로겐으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의치환되고;

m 은 0 또는 1 이고;

Y⁴ 는 Y^4a, Y^4b, Y^4c 또는 Y^4d 이고; 여기서,

Y^4a 는 H 또는 할로겐이고;

Y^4b 는, 저급 할로알킬, 할로겐, 히드록시, 아미노, 시아노 및 저급 알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의치환된 저급 알킬이고;

Y^4c 는, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 히드록시, 아미노 및 저급 알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의치환된 저급 시클로알킬이고;

Y^4d 는 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 아미노임].

더 구체적으로, 본 발명은 화학식 I, II, III 또는 IV 에 따른 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 그의 염을 제공한다:

[식 중:

R 은 H, -R¹, -R¹-R²-R³, -R¹-R³ 또는 -R²-R³ 이고; 여기서

X 는 CH 또는 N 이고;

Y¹ 는 H 또는 저급 알킬이고;

n 은 0, 1, 2 또는 3 이고;

m 은 0 또는 1 이고;

Y⁴ 는 Y^4a, Y^4b, Y^4c 또는 Y^4d 이고; 여기서,

Y^4a 는 H 또는 할로겐이고;

Y^4d 는 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 아미노임].

첫번째 구현예에서, 본 발명은 Y¹ 이 메틸인 화학식 I, II, III 또는 IV 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 X 가 CH 인 화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 m 이 0 인 화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 n 이 0 인 화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 Y² 가 메틸 또는 히드록시메틸인 화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 Y⁴ 가 저급 알킬; 또는 Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a)

의 기; 또는 Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기; 또는 Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c)

의 기; 또는 Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d)

의 기인 화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진인 화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 R 이 -R²-R³ 이고, 여기서 R² 가 C(=O)NH 이고, R³ 가 저급 알킬인 화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 Y¹ 이 메틸인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 X 가 CH 인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 m 이 0 이고, n 이 0 인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 Y² 가 히드록시메틸인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, m 이 0 이고, n 이 0 인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 X 가 CH 이고, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, m 이 0 이고, n 이 0 인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

화학식 I 의 한 구현예에서, 본 발명은 Y⁴ 가, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a)

의 기인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

본 발명은, Y⁴ 가, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b)

의 기인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

본 발명은, Y⁴ 가, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c)

의 기인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

본 발명은, Y⁴ 가, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기

인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

본 발명은, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가, 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진인 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

화학식 I 의 한 구현예에서, X 는 N 이고, n 는 0 이고, m 은 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 는 N 이고, n 은 0 이고, m 은 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y² 가 메틸이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시에틸이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y² 는 할로겐이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 메틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시에틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 할로겐이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 I 의 상기 구현예의 한 변형예에서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y⁴ 는 저급 알킬이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는 저급 알킬이다.

화학식 I 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 -R²-R³ 이고; 여기서, R² 이 -C(=O)NH 이고; R³ 이 H 또는 R⁴ 이고; R⁴ 가 저급 알킬이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 I 의 상기 구현예의 한 변형예에서, R 이 -R²-R³ 이고; 여기서, R² 이 -C(=O)NH 이고; R³ 이 H 또는 R⁴ 이고; R⁴ 가 저급 알킬이다.

화학식 I 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이고, X 이 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 I 의 상기 구현예의 한 변형예에서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 가 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진이다.

화학식 I 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, Y² 가 히드록시메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 화학식 II 의 화합물을 제공한다.

본 발명은, Y¹ 가 메틸인 화학식 II 의 화합물을 제공한다.

본 발명은, X 가 CH 인 화학식 II 의 화합물을 제공한다.

본 발명은, m 이 0 이고, n 이 0 인 화학식 II 의 화합물을 제공한다..

본 발명은, Y² 가 히드록시메틸인 화학식 II 의 화합물을 제공한다..

본 발명은, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기인 화학식 II 의 화합물을 제공한다..

화학식 II 의 한 구현예에서, X 는 N 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 메틸이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시에틸이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 는 할로겐이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 II 의 상기 구현예의 변형예에서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진이다.

화학식 II 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 -R²-R³ 이고; R² 이 -C(=O)NH 이고; R³ 이 H 또는 R⁴ 이고; R⁴ 가 저급 알킬이다.

화학식 II 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 R¹ 이고; R¹ 은 R^1' 로 임의치환된 피라졸릴이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y⁴ 는 저급 알킬이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는 저급 알킬이다.

화학식 II 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 -R²-R³ 이고; 여기서, R² 이 -C(=O)NH 이고; R³ 이 H 또는 R⁴ 이고; R⁴ 가 저급 알킬이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는 저급 알킬이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 II 의 상기 구현예의 변형예에서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서 R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진이다.

화학식 II 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 -R²-R³ 이고; 여기서, R² 가 -C(=O)NH 이고; R³ 이 H 또는 R⁴ 이고; R⁴ 가 저급 알킬이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

화학식 II 의 상기 구현예의 변형예에서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 가 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진이다.

화학식 II 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 화학식 III 의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y¹ 이 메틸이고, X 는 CH 인 화학식 III 의 화합물을 제공한다.

본 발명은 m 이 0 이고, n 이 0 인 화학식 III 의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y² 가 히드록시메틸인 화학식 III 의 화합물을 제공한다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, X 가 N 이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 N 이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 N 이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 는 CH 이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 는 CH 이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, X 는 CH 이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 메틸이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시에틸이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 할로겐이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 CH 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 III 의 상기 구현예의 변형예에서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진이다.

화학식 III 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 -R²-R³ 이고; 여기서, R² 이 -C(=O)NH 이고; R³ 이 H 또는 R⁴ 이고; R⁴ 가 저급 알킬이다.

화학식 III 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 R¹ 이고; R¹ 은 R^1' 로 임의치환된 피라졸릴이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 N 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 CH 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 N 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 CH 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 N 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 CH 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

화학식 III 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, X 가 N 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

본 발명의 또다른 구현예는 화학식 IV 의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y¹ 이 메틸이고 X 가 CH 인 화학식 IV 의 화합물을 제공한다.

본 발명은 m 이 0 이고, n 이 0 인 화학식 IV 의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y² 가 히드록시메틸인 화학식 IV 의 화합물을 제공한다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, X 가 N 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 메틸이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시에틸이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 는 할로겐이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, X 는 CH 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 는 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 IV 의 상기 구현예의 한 변형예에서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진이다.

화학식 IV 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 -R²-R³ 이고; 여기서, R² 이 -C(=O)NH 이고; R³ 이 H 또는 R⁴ 이고; R⁴ 가 저급 알킬이다.

화학식 IV 의 상기 구현예의 또다른 변형예에서, R 이 R¹ 이고; R¹ 은 R^1' 로 임의치환된 피라졸릴이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y⁴ 는 저급 알킬이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는 저급 알킬이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는 저급 알킬이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y² 가 히드록시메틸이고, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 가 CH 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

화학식 IV 의 한 구현예에서, Y¹ 가 메틸이고, X 가 N 이고, n 이 0 이고, m 이 0 이고, Y⁴ 는, Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d) 의 기이다.

또다른 구현예에서, 본 발명은 하기 표 I 에 수록한 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 화학식 I 내지 IV 의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 염증 및/또는 자가면역 상태 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 화학식 I 내지 IV 의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 관절염 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 류머티즘 관절염 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 천식 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 루푸스 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증 및/또는 자가면역 상태 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 관절염 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 B-세포 증식 저해 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 Btk 활성 저해 방법으로서, 상기 Btk 저해제 화합물이 Btk 활성의 시험관내 생화학적 검정에서 50 마이크로몰농도 이하의 IC₅₀ 을 나타내는 방법을 제공한다.

상기 방법의 한 변형예에서, Btk 저해제 화합물은 Btk 활성의 시험관내 생화학적 검정에서 100 나노몰농도 이하의 IC₅₀ 을 나타내는 방법을 제공한다.

상기 방법의 한 변형예에서, Btk 저해제 화합물은 Btk 활성의 시험관내 생화학적 검정에서 10 나노몰농도 이하의 IC₅₀ 을 나타내는 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 항염증 화합물을 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체와 병용하여 치료가 필요한 환자에게 병용투여하는 것을 포함하는 염증 상태 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 본 발명은 치료 유효량의 항염증 화합물을 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체와 병용하여 치료가 필요한 환자에게 병용투여하는 것을 포함하는 관절염 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 치료 유효량의 상기 화학식의 임의의 하나의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 림프종 또는 BCR-ABL1⁺ 백혈병 세포 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합되어 있는 상기 화학식의 하나 이상의 Btk 저해제 화합물 또는 그의 변형체를 함유하는 약제학적 조성물을 제공한다.

본 발명은 Q, R, X, Y¹, Y², Y³, Y⁴, n 및 m 이 상기 본원에 정의된 바와 같은 화학식 I-1 내지 I-3, 화학식 II-1 내지 II-4, 화학식 III-1 내지 III-14, 및 화학식 IV-1 내지 IV-4 의 Btk 저해제 화합물을 포함하는, 화학식 I 내지 IV 의 화합물을 제공한다.

본 발명의 한 구현예에서, 화학식 I-1 내지 I-3 의 예시된 Btk 저해제 화합물을 포함하는 화학식 I 에 따른 화합물이 제공된다. 본 발명의 또다른 구현예에서, 화학식 II-1 내지 II-4 의 예시된 Btk 저해제 화합물을 포함하는 화학식 II 에 따른 화합물이 제공된다. 본 발명의 또다른 구현예에서, 화학식 III-1 내지 III-14 의 예시된 Btk 저해제 화합물을 포함하는 화학식 III 에 따른 화합물이 제공된다. 본 발명의 또다른 구현예에서, 화학식 IV-I 내지 IV-4 의 예시된 Bkt 저해제 화합물을 포함하는 화학식 IV 에 따른 화합물이 제공된다.

어구 "상기 본원에 정의된 바와 같이" 는 본원에 제공된 각각의 군에 대한 최대 범위의 정의 또는 더 넓은 청구범위를 지칭한다. 하기에 제공하는 모든 기타 구현예에서, 각각의 구현예에 존재할 수 있고, 명쾌하게 정의되지 않는 치환기들은 본원에 제공되는 최대 범위의 정의를 유지한다.

화학식 I 내지 IV 의 화합물은 Bruton's 타이로신 키나아제 (Btk) 를 저해한다. 상류방향 키나아제에 의한 Btk 의 활성화는 포스포리파아제-C 의 활성화를 초래하고, 이는 이어서 전염증성 매개체들의 방출을 자극한다. 화학식 I 내지 IV 의 화합물은, 3,4-디히드로-2H-이소퀴놀린-1-온, 2,3-디히드로-1H-퀴나졸린-4-온, 2H-이소퀴놀린-1-온, 3H-퀴나졸린-4-온, 1H-퀴놀린-4-온, 2H-프탈라진-1-온 또는 3,4-디히드로-2H-벤조[e][1,2]티아진 1,1-디옥시드의 치환 측쇄를 5-페닐-1H-피리딘-2-온 및 6-페닐-2H-피리다진-3-온 고리 시스템 상에 혼입시키고 있는데, 이는 상기 이환 측쇄가 없는 유사체에 비해 예상치 않게 증강된 저해 활성을 나타낸다. 더욱이, 저해 활성은 Y² 가 히드록시메틸로 임의치환된 저급 알킬인 경우 증강된다. 화학식 I 내지 IV 의 화합물은 관절염 및 기타 항염증 및 자가면역 질환 치료에 유용하다. 따라서, 화학식 I 내지 IV 에 따른 화합물은 관절염 치료에 유용하다. 화학식 I 내지 IV 의 화합물은 세포에서의 Btk 저해 및 B-세포 발생 조절에 유용하다. 본 발명은 추가로 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합되어 있는 화학식 I 내지 IV 의 화합물을 함유하는 약제학적 조성물을 포함한다.

본원에 사용된 대표 단수는 하나 이상의 그 실체를 지칭한다; 예를 들어, 화합물은 하나 이상의 화합물 또는 적어도 하나의 화합물을 지칭한다. 마찬가지로, 대표 단수, "하나 이상" 및 "적어도 하나" 는 본원에서 호환하여 사용될 수 있다.

본 명세서에 사용된 바와 같이, 활용된 어구에서든 또는 청구범위의 실체에서든, 용어 "포함하다" 및 "포함" 은 제약을 두지 않는 의미를 갖는 것으로서 해석되어야 한다. 즉, 상기 용어는 어구 "그 이상을 가진" 또는 "그 이상을 포함하는" 과 동의어로 해석되어야 한다. 프로세스의 문맥에서 사용되는 경우, 용어 "포함" 은 적어도 언급한 단계를 포함하지만, 추가적인 단계를 포함할 수도 있다는 것을 의미한다. 화합물 또는 조성물의 문맥에서 사용되는 경우, 용어 "포함" 은 화합물 또는 조성물이 적어도 언급된 특징 또는 성분을 포함하나, 추가적인 특징 또는 성분을 포함할 수도 있다는 것을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같이, 달리 구체적으로 언급되지 않는다면, 용어 "또는" 은 "양자포함" 의 "포괄적" 의미로 사용되지, "양자택일" 의 "배제적" 의미로 사용되지 않는다.

용어 "독립적으로" 는 본원에서 변수들이 동일한 화합물 내에 상동이거나 또는 상이한 정의를 갖는 변수의 존재 또는 부재와 상관없이 임의의 경우에 적용된다는 것을 의미하기 위해 이용된다. 따라서, "R" 이 2 회 출현하고, "독립적으로 탄소 또는 질소" 인 것으로 정의되는 화합물에서, 두 "R" 이 모두 탄소가 될 수도 있고, 두 "R" 이 모두 질소가 될 수도 있고, 또는 1 개의 "R" 이 탄소이고 나머지가 질소일 수도 있다.

본 발명에서 채용되거나 또는 청구되는 화합물을 묘사하고 기재하는 임의의 부분 또는 화학식에서 임의의 변수가 1 회 이상 나타나는 경우, 각 경우에 있어서의 그의 정의는 매 경우마다 그의 정의와 독립적이다. 또한, 치환기들 및/또는 변수들의 조합은 상기 화합물이 안정한 화합물을 제공할 때에만 허용된다.

결합 말단의 "*" 또는 결합을 통과하여 그려진 "

" 기호들은 각각 분자의 일부분인 그의 나머지에 대한 관능기 또는 기타 화학물 부분의 결합 지점을 나타낸다. 따라서, 예를 들어:

고리 시스템 내에 그려진 (별개의 꼭지점에 연결된 것이 아님) 결합은 해당 결합이 적합한 임의의 고리 원자에 결합될 수 있음을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "임의의" 또는 "임의로는" 은 후속하여 기재되는 사건 또는 상황이, 반드시 그럴 필요는 없지만, 일어날 수도 있음을 의미하며, 상기 기재는 해당 사건 또는 상황이 발생하는 경우 및 그렇지 않은 경우를 모두 포함한다. 예를 들어, "임의치환된" 은 임의치환된 부분이 수소 또는 치환기를 포함할 수 있음을 의미한다.

어구 "임의적 결합" 은 해당 결합이 존재하거나 또는 존재하지 않을 수 있음을 의미하고, 상기 기술은 단일, 이중 또는 삼중 결합을 포함한다. 치환기가 "결합" 또는 "부재" 로 지정된다면, 해당 치환기에 연결된 원자는 직접 연결되어 있다.

용어 "약" 은 본원에서, 대략, 정도, 대충 또는 근방을 의미하기 위해 이용된다. 용어 "약" 이 수치 범위와 연계하여 사용된 경우, 이는 설정한 수치값의 상하 범위로 연장하여 그 범위를 변경한다. 일반적으로, 용어 "약" 은 본원에서 수치값을 언급한 값의 상하로 20% 의 변동폭으로 변경하기 위해 이용된다.

화학식 I 내지IV 의 특정 화합물은 호변체를 나타낼 수 있다. 호변체 화합물들은 2 가지 이상의 상호변환가능한 종으로서 존재할 수 있다. 양성자이전성 호변체는 두 원자들 사이에서의 공유결합으로 결합된 수소 원자의 이동으로 초래된다. 호변체는 일반적으로 평형으로 존재하며, 개별 호변체로 단리하려는 시도는 일반적으로, 그의 화학적 및 물리적 특성이 화합물들의 혼합물과 일치하는 혼합물을 제공한다. 평형의 위치는 분자내 화학적 특징에 좌우된다. 예를 들어, 아세트알데히드와 같은 많은 지방족 알데히드 및 케톤에서는 케토 형태가 우세한 반면, 페놀에서는 에놀 형태가 우세하다. 공통적인 양성자이전성 호변체에는, 케토/에놀 (-C(=O)-CH-

-C(- OH)=CH-), 아미드/이미드산 (-C(=O)-NH-

-C(-OH)=N-) 및 아미딘 (-C(=NR)-NH-

-C(-NHR)=N-) 호변체가 포함된다. 뒤의 두가지는 특히 헤테로아릴 및 복소환 고리에서 일반적이고, 본 발명은 화합물들의 모든 호변체 형태를 포함한다.

본원에 사용된 과학기술용어는, 달리 정의되지 않는 한, 본 발명이 속하는 분야의 당업자가 일반적으로 이해하는 의미를 갖는다. 당업자에게 공지된 각종 방법론 및 재료들이 본원에 언급된다. 약학의 일반적인 법칙을 설정하는 표준 참고문헌에는, Goodman 및 Gilman 의 The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001) 이 포함된다. 당업자에게 공지된 임의의 적합한 재료 및/또는 방법이 본 발명의 수행에 이용될 수 있다. 그러나, 바람직한 재료 및 방법은 기술된다. 달리 언급하지 않는 한 하기 상세한 설명 및 실시예에서 언급하는 재료, 시약 등은 시판 공급원으로부터 입수가능하다.

본원에 기술된 정의가 "헤테로알킬아릴", "할로알킬헤테로아릴", "아릴알킬헤테로시클릴", "알킬카르보닐", "알콕시알킬", 등과 같은 화학적으로 관련있는 조합을 형성하기 위해 덧붙여질 수 있다. 용어 "알킬" 이 "페닐알킬" 또는 "히드록시알킬" 에서와 같이, 또다른 용어에 후속해 접미사로 사용되는 경우, 이는 기타 구체적으로 호명되는 기로부터 선택되는 1 내지 2 개의 치환기로 치환된 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭하는 것을 의도한다. 따라서, 예를 들어 "페닐알킬" 은 1 내지 2 개의 페닐 치환기를 가진 알킬기를 지칭하고, 따라서 벤질, 페닐에틸 및 비페닐을 포함한다. "알킬아미노 알킬" 은 1 내지 2 개의 알킬아미노 치환기를 가진알킬기이다. "히드록시알킬" 에는, 2-히드록시에틸, 2-히드록시프로필, 1- (히드록시메틸)-2-메틸프로필, 2-히드록시부틸, 2,3-디히드록시부틸, 2-(히드록시메틸), 3-히드록시프로필 등이 포함된다. 따라서, 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "히드록시알킬" 는 하기 정의되는 헤테로알킬기의 하위셋트를 정의하기 위해 이용된다. 용어 -(아르)알킬은 비치환 알킬 또는 아르알킬기를 지칭한다. 용어 (헤테로)아릴 또는 (헤트)아릴은 아릴 또는 헤테로아릴기를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "아실" 은, R 이 수소 또는 본원에 정의된 바와 같은 저급 알킬인 화학식 -C(=O)R 의 기를 의미한다. 본원에 사용된 용어 "알킬카르보닐" 은 R 이 본원에 정의된 바와 같은 알킬인 화학식 C(=O)R 의 기를 의미한다. 용어 C₁ _-6 아실은 6 개의 탄소 원자를 포함하는 기 C(=O)R 를 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "아릴카르보닐" 은, R 이 아릴기인 화학식 C(=O)R 의 기를 의미하고; 본원에 사용된 용어 "벤조일" 은 R 이 페닐인 "아릴카르보닐" 기이다.

본원에 사용된 용어 "알킬" 은, 1 내지 10 개의 탄소 원자를 포함하는 비분지형 또는 분지형 사슬의, 포화, 1 가 탄화수소 잔기를 의미한다. 용어 "저급 알킬" 은 1 내지 6 개이 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔기를 의미한다. 본원에 사용된 용어 "C₁ _-10 알킬" 은 1 내지 10 개의 탄소로 이루어진 알킬을 지칭한다. 알킬기의 예시에는, 이에 제한되지 않으나, 메틸, 에틸, 프로필, i-프로필, n-부틸, i-부틸, t-부틸 또는 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 헥실, 헵틸 및 옥틸을 포함하는 저급 알킬기가 포함된다.

"페닐알킬" 또는 "히드록시알킬" 에서와 같이, 용어 "알킬" 이 또다른 용어의 접미사로 사용되는 경우, 이는 기타 구체적으로 호명된 기로부터 선택되는 1 내지 2 개의 치환기로 치환된, 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭하는 것을 의도로 한다. 따라서, 예를 들어, "페닐알킬" 은 R' 이 페닐 라디칼이고, R" 이 본원에 정의된 알킬렌 라디칼인 라디칼 R'R"- 을 지칭하고, 페닐알킬 부분의 결합 지점은 알킬렌 라디칼 상에 있을 것으로 이해될 것이다. 아릴알킬 라디칼의 예시에는, 이에 제한되지 않으나, 벤질, 페닐에틸, 3-페닐프로필이 포함된다. 용어 "아릴알킬", "아릴 알킬" 또는 "아르알킬" 은 R' 이 아릴 라디칼이라는 점을 제외하고 유사하게 해석된다. 용어 "헤테로아릴 알킬" 또는 "헤테로아릴알킬" 은 R' 이 임의로 아릴 또는 헤테로아릴 라디칼이라는 점을 제외하고 유사하게 해석된다.

본원에 사용된 용어 "알킬렌" 또는 "알킬레닐" 은, 달리 언급되지 않는 한, 1 내지 10 개의 탄소 원자의 2 가 포화 선형 탄화수소 라디칼 (예를 들어, (CH₂)_n) 또는 2 내지 10 개의 탄소 원자의 분지형 포화 2 가 탄화수소 (예를 들어, -CHMe- 또는 -CH₂CH(i-Pr)CH₂-) 를 의미한다. 메틸렌의 경우를 제외하고, 알킬렌기의 개방된 원자가 (open valences) 는 동일한 원자에 결합되지 않는다. 알킬렌 라디칼의 예시에는, 이에 제한되지 않으나, 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 2- 메틸-프로필렌, 1,1-디메틸-에틸렌, 부틸렌, 2-에틸부틸렌이 포함된다.

본원에 사용된 용어 "알콕시" 는, 알킬이 상기와 같이 정의된 -O-알킬기, 예컨대, 이성질체를 포함하는, 메톡시, 에톡시, n-프로필옥시, i-프로필옥시, n-부틸옥시, i-부틸옥시, t-부틸옥시, 펜틸옥시, 헥실옥시를 의미한다. 본원에 사용된 "저급 알콕시" 는, 상기에 정의된 "저급 알킬" 기가 있는 알콕시기를 의미한다. 본원에 사용된 "C₁ _-10 알콕시" 는 알킬이 C₁ _- ₁₀ 인 -O-알킬을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "알콕시알킬" 은, R' 가 본원에 정의된 알콕시 라디칼이고, R" 가 본원에 정의된 알킬렌 라디칼인 라디칼 R'R"- 을 지칭하기 위해 이용되며, 알콕시알킬 부분의 결합 지점은 알킬렌 라디칼 상에 있을 것으로 이해될 것이다. C₁ _-6 알콕시알킬은 알킬 부분이, 해당 기의 알콕시 부분의 탄소 원자를 제외하고, 1 내지 6 개의 탄소 원자로 이루어진 기를 의미한다. C₁ _- ₃알콕시-C₁ _- ₆알킬은 알킬 부분이 1 내지 6 개의 탄소 원자로 이루어지고, 알콕시 부분이 1 내지 3 개의 탄소로 이루어진 기를 의미한다. 예시는, 이성질체를 포함하는, 메톡시메틸, 메톡시에틸, 메톡시프로필, 에톡시메틸, 에톡시에틸, 에톡시프로필, 프로필옥시프로필, 메톡시부틸, 에톡시부틸, 프로필옥시부틸, 부틸옥시부틸, t-부틸옥시부틸, 메톡시펜틸, 에톡시펜틸, 프로필옥시펜틸이다.

본원에 사용된 용어 "히드록시알킬" 은 상이한 탄소 원자 상의 1 내지 3 개의 수소 원자가 히드록실기로 치환된 알킬 라디칼을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "알킬술포닐" 및 "아릴술포닐" 은 R 이 각각 알킬 또는 아릴이고, 알킬 및 아릴은 본원에서 정의된 바와 같은 화학식 -S(=O)₂R 의 기를 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "헤테로알킬술포닐" 은 R 이 본원에 정의된 바와 같은 "헤테로알킬" 인 화학식 -S(=O)₂R 의 기를 가리킨다.

본원에 사용된 용어 "시클로알킬" 은 3 내지 8 개의 탄소 원자를 포함하는 포화 탄소환 고리를 지칭하는데, 즉 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 아다만틸, 시클로헵틸, 시클로옥틸 또는 옥타히드로-펜탈렌-1-일이다. 본원에 사용된 "C₃ _-7 시클로알킬" 은 탄소환 고리 내에 3 내지 7 개의 탄소로 이루어진 시클로알킬을 지칭한다.

"아릴" 은 단환-, 이환- 또는 삼환 방향족 고리로 이루어진 1 가 환형 방향족 탄화수소 부분을 의미한다. 아릴기는 본원에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 아릴 부분의 예시에는, 이에 제한되지 않으나, 임의치환된 페닐, 나프틸, 페난트릴, 플루오레닐, 인데닐, 아줄레닐, 옥시디페닐, 비페닐, 메틸렌디페닐, 아미노디페닐, 디페닐술피딜, 디페닐술포닐, 디페닐이소프로필리데닐, 벤조디옥사닐, 벤조디옥실릴, 벤족사지닐, 벤족사지노닐, 벤조피페라디닐, 벤조피페라지닐, 벤조피롤리디닐, 벤조모르폴리닐, 메틸렌디옥시페닐, 에틸렌디옥시페닐, 등이 포함된다. 아릴기는 임의로는 본원에 정의된 바와 같은 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬 고리에 융합될 수 있다. 헤테로시클로알킬기에 융합된 아릴기의 예시에는, 3,4-디히드로-1H-퀴놀린-2-온, 3,4-디히드로-2H-벤조[1,4]옥사진 및 1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린이 포함된다. 바람직한 아릴에는 임의치환된 페닐 및 임의치환된 나프틸이 포함된다.

본원에 사용된 용어 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족" 은 1 개 이상의 N, O 또는 S 헤테로원자를 포함하고 나머지 고리 원자는 탄소인, 고리마다 4 내지 8 개의 원자를 포함하는 1 개 이상의 방향족 고리를 가진 5 내지 12 개의 고리 원자의 단환, 이환 또는 삼환 라디칼을 의미하고, 헤테로아릴 라디칼의 결합 지점은 방향족 고리 위에 있을 것으로 이해될 것이다. 당업자에게 널리 공지된 바와 같이, 헤테로아릴 고리는 그의 모든 탄소 카운터 파트에 비해 덜한 방향족 특징을 갖는다. 따라서, 본 발명의 목적을 위해서는, 헤테로아릴기는 단지 소정의 방향족 특징만을 가질 필요가 있다. 헤테로아릴 부분의 예시에는, 5 내지 6 개의 고리 원자 및 1 내지 3 개의 헤테로원자를 가진 단환 방향족 복소환이 포함되고, 이에 제한되지 않으나, 히드록시, 시아노, 알킬, 알콕시, 티오, 저급 할로알콕시, 알킬티오, 할로, 할로알킬, 알킬술파밀, 알킬술포닐, 할로겐, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 아미노알킬, 알킬아미노 알킬, 및 디알킬아미노 알킬, 니트로, 알콕시카르보닐 및 카르바모일, 알킬카르바모일, 디알킬카르바모일, 아릴카르바모일, 알킬카르보닐아미노 및 아릴카르보닐아미노로부터 선택되는 1 개 이상, 바람직하게는 1 또는 2 개의 치환기로 치환된, 피리디닐, 피리미딜, 피라지닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸, 이속사졸, 티아졸, 이소티아졸, 트리아졸린, 티아디아졸 및 옥사디아졸린이 포함된다. 이환 부분의 예시에는, 이에 제한되지 않으나, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 벤조푸릴, 벤조티오페닐, 벤족사졸, 벤즈이속사졸, 벤조티아졸 및 벤즈이소티아졸이 포함된다. 이환 부분은 어느 고리든 임의로 치환될 수 있다; 그러나 결합 지점은 헤테로 원자를 포함하는 고리 상에 있다.

본원에 사용된 용어 "헤테로시클로알킬", "헤테로시클릴" 또는 "복소환" 은, 고리마다 3 내지 8 개 원자의, 1 개 이상의 탄소 원자 및 1 개 이상의 고리 헤테로 원자 (N,0 또는 S(=0)_0- ₂ 로부터 선택됨) 를 포함하는 1 개 이상의 고리, 바람직하게는 1 내지 2 개의 고리, 또는 3 개의 고리로 이루어진 1 가 포화 고리 라디칼을 의미하고, 여기서 결합 지점은 탄소 원자 또는 헤테로원자를 통하는 것일 수 있고, 달리 언급되지 않으면, 임의로는 히드록시, 옥소, 시아노, 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 할로알콕시, 알킬티오, 할로, 할로알킬, 히드록시알킬, 니트로, 알콕시카르보닐, 아미노, 알킬아미노, 알킬술포닐, 아릴술포닐, 알킬아미노술포닐, 아릴아미노술포닐, 알킬술포닐아미노, 아릴술포닐아미노, 알킬아미노 카르보닐, 아릴아미노 카르보닐, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노로부터 선택되는 1 개 이상, 바람직하게는 1 또는 2 또는 3 개의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있다. 복소환 라디칼의 예시에는, 이에 제한되지 않으나, 아제티디닐, 피롤리디닐, 헥사히드로아제피닐, 옥세타닐, 테트라히드로퓨라닐, 테트라히드로티오페닐, 옥사졸리디닐, 티아졸리디닐, 이속사졸리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 테트라히드로피라닐, 티오모르폴리닐, 퀴녹살리디닐 및 이미다졸리닐이 포함된다.

일반적으로 사용된 약어에는 다음과 같은 것이 포함된다: 아세틸 (Ac), 아조-비스-이소부티릴니트릴 (AIBN), 대기압 (Atm), 9-보라비시클로[3.3.1]노난 (9-BBN 또는 BBN), tert-부톡시카르보닐 (Boc), 디-tert-부틸 피로카르보네이트 또는 boc 무수물 (BOC₂O), 벤질 (Bn), 부틸 (Bu), Chemical Abstracts Registration Number (CASRN), 벤질옥시카르보닐 (CBZ 또는 Z), 카르보닐 디이미다졸 (CDI), 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (DABCO), 디에틸아미노 황 트리플루오라이드 (DAST), 디벤질리덴아세톤 (dba), 1,5-디아자비시클로[4.3.0]논-5-엔 (DBN), 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU), N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (DCC), 1,2-디클로로 에탄 (DCE), 디클로로메탄 (DCM), 디에틸 아조디카르복실레이트 (DEAD), 디-이소-프로필아조디카르복실레이트 (DIAD), 디-이소-부틸알루미늄히드라이드 (DIBAL 또는 DIBAL-H), 디-이소-프로필에틸아민 (DIPEA), N,N-디메틸 아세트아미드 (DMA), 4-N,N-디메틸아미노피리딘 (DMAP), N,N-디메틸포름아미드 (DMF), 디메틸 술폭시드 (DMSO), 1,1'-비스-(디페닐포스피노)에탄 (dppe), 1,1'-비스-(디페닐포스피노)페로센 (dppf), 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (EDCI), 에틸 (Et), 에틸 아세테이트 (EtOAc), 에탄올 (EtOH), 2-에톡시-2H-퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르 (EEDQ), 디에틸 에테르 (Et₂O), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N'N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 아세트산 (HATU), 아세트산 (HOAc), 1-N-히드록시벤조트리아졸 (HOBt), 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC), 이소프로판올 (IPA), 리튬 헥사메틸 디실라잔 (LiHMDS), 메탄올 (MeOH), 융점 (mp), MeSO₂- (메실 또는 Ms), 메틸 (Me), 아세토니트릴 (MeCN), m-클로로퍼벤조산 (MCPBA), 질량 스펙트럼 (ms), 메틸 t-부틸 에테르 (MTBE), N-브로모숙신이미드 (NBS), N-카르복시안하이드라이드 (NCA), N-클로로숙신이미드 (NCS), N-메틸모르폴린 (NMM), N-메틸피롤리돈 (NMP), 피리디늄 클로로크로메이트 (PCC), 피리디늄 디크로메이트 (PDC), 페닐 (Ph), 프로필 (Pr), 이소-프로필 (i-Pr), 평방인치 당 파운드 (psi), 피리딘 (pyr), 실온 (rt 또는 RT), tert-부틸디메틸실릴 또는 t- BuMe₂Si (TBDMS), 트리에틸아민 (TEA 또는 Et₃N), 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 1-옥실 (TEMPO), 트리플레이트 또는 CF₃SO₂- (Tf), 트리플루오로 아세트산 (TFA), 1,1'--비스-2,2,6,6-테트라메틸헵탄-2,6-디온 (TMHD), O-벤조트리아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TBTU), 박층 크로마토그래피 (TLC), 테트라히드로퓨란 (THF), 트리메틸실릴 또는 Me₃Si (TMS), p-톨루엔술폰산 모노히드레이트 (TsOH 또는 pTsOH), 4-Me-C₆H₄SO₂- 또는 토실 (Ts), N-우레탄-N-카르복시안하이드라이드 (UNCA). 접두어 노르말 (n), 이소 (i-), 2 차 (sec-), 3 차 (tert-) 및 네오를 포함하는 통상적인 명명법은, 알킬 부분에 사용될 때 그의 일반 명칭을 갖는다 (J. Rigaudy 및 D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.).

본원에 사용된 용어 "관절염" 은, 급성 류머티즘 관절염, 만성 류머티즘 관절염, 클라미디아성 관절염, 만성 흡수성 관절염, 유미성 관절염, 장 질환과 관련있는 관절염, 사상충 관절염, 임균 관절염, 통풍 관절염, 혈우병 관절염, 비대 관절염, 연소성 만성 관절염, 라임병에서의 관절염, 네오나탈 포울 (neonatal foal) 관절염, 결절 관절염, 조직흑갈증성 관절염, 건선 관절염 또는 화농 관절염 또는, BTK 의 저해를 위해 충분한 투여량으로 화학식 I 내지 V 의 화합물의 치료유효 투여량을 포유류에게 투여하는 것을 필요로 하는 관련 질환들이다.

본 발명의 화합물은 자가면역 상태 또는 장애가 있는 대상체 치료에 이용될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "자가면역 상태" 등은, 동물의 면역계에 의해 초래되는 질환, 장애 또는 상태를 의미한다. 자가면역 장애는, 동물의 자신의 면역계가 잘못하여 자신을 공격함으로써 동물 자신의 신체의 세포, 조직 및/또는 장기를 표적으로 하는 것이다. 예를 들어, 자가면역 반응은 다발성 경화증에서의 신경계 및 크론 병에서의 장 내에서 일어난다. 전신성 홍반 루푸스 (루푸스), 병에 걸린 조직 및 장기는 동일 질환이 있는 개인들에서 특히 다양할 수 있다. 루푸스가 있는 어떤 환자는 병에걸린 피부 및 연결조직을 가질 수 있는 반면, 다른 환자는 병에 걸린 피부, 신장 및 폐를 가질 수 있다. 궁극적으로, 면역계에 의한 특정 조직에 대한 손상은, 제 1 형 당뇨병에서의 췌장의 인슐린 생산 세포의 파괴에서와 같이 영구적일 수 있다. 본 발명의 화합물 및 방법을 이용하여 개선될 수 있는 구체적인 자가면역 장애에는, 이에 제한됨없이, 신경계의 자가면역 장애 (예를 들어, 다발성 경화증, 중증근육무력증, 자가면역 신경병증, 예컨대 길랑 바레 및 자가면역 포도막염), 혈액의 자가면역 장애 (예를 들어, 자가면역 용혈 빈혈, 악성 빈혈 및 자가면역 혈소판감소증), 혈관의 자가면역 장애 (예를 들어, 측두동맥염, 항인지질 증후군, 맥관염, 예컨대 베게너 육아종증 및 베체트병), 피부의 자가면역 장애 (예를 들어, 건선, 포진피부염, 보통천포창, 및 백반증), 위장관계의 자가면역 장애 (예를 들어, 크론 병, 궤양 대장염, 원발성 담즙성 간경병증 및 자가면역 간염), 내분비선의 자가면역 장애 (예를 들어, 제 1 형 또는 면역-매개성 당뇨병, 그레이브스 병, 하시모토 갑상샘염, 자가면역 난소염 및 고환염, 및 부신의 자가면역 장애); 및 다중 장기의 자가면역 장애 (연결 조직 및 근골격계 질환 포함) (예를 들어, 류머티즘 관절염, 전신성 홍반 루푸스, 공피증, 다발근육염, 피부근육염, 척추관절증, 예컨대 강직성 척추염 및 쇼렌 증후군) 또는 BTK 저해를 위해 충분한 투여량으로 화학식 I 내지 V 의 화합물의 치료 유효 투여량을 포유류에 투여하는 것을 필요로 하는 기타 관련 질환이 포함된다. 추가로, 기타 면역계 관련 질환, 예컨대 이식편 대 숙주 질환 및 알러지성 장애가 또한 본원에서의 면역 장애의 정의에 포함된다. 대다수의 면역 장애가 염증에 의해 유발되므로, 면역 장애 및 염증 장애로 간주되는 장애들 사이에는 약간의 중복이 있다. 본 발명의 목적을 위해, 상기 중복되는 장애의 경우, 이는 면역 장애 또는 염증 장애의 어느 것으로든 간주될 수 있다. 본원에서 "면역 장애의 치료" 는 면역 장애, 상기 질환의 징후 또는 상기 질환에 대한 소인을 가진 대상체에, 자가면역 장애, 그의 징후 또는 그에 대한 소인을 치료, 경감, 변경, 영향제공 또는 예방을 목적으로, 본 발명의 화합물 또는 조성물을 투여하는 것을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, 용어 "천식" 은 가역적 기도 차단, 기도 염증 및 각종 자극에 대한 증가된 기도 응답성을 특징으로 하는 폐 질환, 장애 또는 상태를 의미한다.

용어 "치료하다", "치료", 또는 "치료함" 은 요법적 치료 및 예방 또는 방지 처치의 두가지 모두를 의미하며, 여기서 그 목적은 바람직하지 않은 생리학적 변화 또는 장애, 예컨대 암의 발생 또는 확산을 방지 또는 완화 (경감) 하는 것이다. 이익 또는 바람직한 임상 결과에는, 이에 제한되지 않으나, 검출가능하거나 또는 검출가능하지 않은, 징후의 완화, 질병 정도의 약화, 질환의 안정화 (즉, 악화되지 않는) 상태, 질환 진행의 지연 또는 완화, 질환 상태의 완화 또는 경감, 및 차도 (부분적이든 또는 전체적이든) 가 포함된다. "치료" 는 또한 치료를 받지 않은 경우의 예상 연명에 비해 길어진 연명을 의미할 수도 있다. 치료가 필요한 이에는, 이미 상태 또는 장애가 있는 이들 뿐만 아니라, 해당 상태 또는 장애에 걸리기 쉬운 이 또는 해당 상태 또는 질환을 방지하고자 하는 이들이 포함된다. 예를 들어, 염증 상태 치료는, 염증의 정도 또는 중증도를 감소시키는 것을 의미한다. 상기 감소는, 이에 제한되지 않으나, 염증의 완전한 제거를 의미할 수 있다. 예를 들어, 상기 감소는, 본원에 개시되거나 또는 당업자에게 공지된 임의의 적합한 측정 기법 또는 검정법으로 측정시, 비치료 또는 대조군 대상체에 비해, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 100% 감소, 또는 이들 값 사이의 임의의 지점을 포함한다.

본 발명에 포함되고 본 발명의 범위에 속하는 대표적인 화합물들의 예시는 하기 표에 제공한다. 이들 예시 및 후속하는 제법은 당업자로 하여금 본 발명을 더욱 명백하게 이해하고 실행할 수 있게 하기 위해 제공된다. 이것은 본 발명을 제헌하는 것으로 간주되어서는 안되며, 단지 그의 설명 및 대표예인 것이다.

일반적으로, 본원에 사용된 명명법은 IUPAC 체계 명명법의 세대를 위한AUTONOM™ v.4.0, a Beilstein Institute 전산화 시스템을 근거로 한다. 도시된 구조 및 주어진 구조에 대한 명칭 사이에 차이가 있을 때, 도시된 구조에 더 비중이 있다. 추가로, 구조의 입체화학 또는 구조의 일부분이, 예를 들어 굵은선 또는 빗금선으로 표시되어 있지 않으면, 해당 구조의 구조 또는 일부분은 그의 모든 입체화학을 포함하는 것으로 해석된다.

표 I 은 화학식 I 내지 IV 의 피리디논 및 피리다지논 화합물의 예시를 도시한다:

표 I.

본원에 기재된 피리미딘 및 피리딘 유도체는 키나아제 저해제, 특히 Btk 저해제이다. 이들 저해제는, 포유류에서의 Btk 저해 및/또는 B-세포 증식 저해에 응답성인 질환들을 포함하는, 키나아제 저해에 응답성인 하나 이상의 질환 치료에 유용할 수 있다. 임의의 특정 이론에 구애됨이 없이, 본 발명의 화합물들과 Btk 의 상호작용은 Btk 활성의 저해를 그 결과로 제공하고, 따라서 이들 화합물의 약제학적 유용성을 제공한다. 따라서, 본 발명은 Btk 활성 저해 및/또는 B-세포 증식 저해에 응답성인 질환을 가진 포유류, 예를 들어 인간에서의, 유효량의 본원에서 제공되는 하나 이상의 화합물 실체를 상기 질환을 가진 포유류에게 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법을 포함한다. 유효 농도는, 예를 들어 화합물의 혈중 농도를 검정하여 실험적으로, 또는 생물이용능을 계산하여 이론적으로 정해질 수 있다. Btk 에 추가하여 영향을 받을 수 있는 기타 키나아제에는, 이에 제한되지 않으나, 기타 타이로신 키나아제 및/또는 세린/트레오닌 키나아제가 포함된다.

키나아제는 증식, 분화 및 사멸 (아폽토시스) 와 같은 기본적인 세포 프로세스를 제어하는 신호전달 경로에서 중요한 역할을 한다. 비정상적 키나아제 활성은, 여러가지 암 및/또는 염증 질환, 및 급성 염증 반응을 포함하는 광범위한 질병에 연루되어 있다. 중요한 세포 신호전달 경로에서의 키나아제의 다면적인 역할은 키나아제 및 신호전달 경로를 표적으로 하는 신규한 약물을 밝혀내는 유의한 기회를 제공한다.

구현예에는 Btk 활성 및/또는 B-세포 증식의 저해에 응답성인 자가면역 및/또는 염증 질환 또는 급성 염증 반응을 가진 환자의 치료 방법이 포함된다.

본 발명에 따른 화합물 및 조성물을 이용하여 영향을 받을 수 있는 자가면역 및/또는 염증 질환에는, 이에 제한되지 않으나 하기의 것이 포함된다: 건선, 알러지, 크론병, 과민성 대장증후군, 쇼렌 질환, 조직 이식 거부 및 이식 장기의 초급성 거부반응, 천식, 전신성 홍반 루푸스 (및 관련 신염증후군), 피부근육염, 다발성 경화중, 맥관염 (ANCA-관련 및 기타 맥관염), 자가면역 용혈 및 혈소판감소 상태, 굿파스처 증후군 (및 관련 사구체신염 및 폐출혈), 죽상동맥경화증, 류머티즘 관절염, 만성 특발 저혈소판 자색반병 (ITP), 애디슨 질환, 파킨슨씨 병, 알츠하이머 병, 당뇨, 패혈 쇼크 및 중증근육무력증.

본원에 제공되는 하나 이상의 화학물 실체를 항염증제와 병용하여 투여하는 치료 방법이 본원에 포함된다. 항염증제에는, 이에 제한되지 않으나, NSAID, 비특이적 및 COX-2 특이적 시클로옥시게나아제 효소 저해제, 금 화합물, 코르티코스테로이드, 메토트렉세이트, 종양 괴사 인자 수용체 (TNF) 수용체 안타고니스트, 면역억제제 및 메토트렉세이트가 포함된다.

NSAID 의 예시에는, 이에 제한되지 않으나, 이부프로펜, 플루르비프로펜, 나프록센 및 나프록센 나트륨 디클로페낙, 디클로페낙 나트륨 및 이소프로스톨의 배합물, 술린닥, 옥사프로진, 디피우니살, 피록시캄, 인도메타신, 에토돌락, 페노프로펜 칼슘, 케토프로펜, 칼슘, 나트륨 나부메톤, 술파살라진, 톨메틴 나트륨 및 히드록시클로로퀸이 포함된다. NSAID 의 예시에는 또한 COX-2 특이적 저해제, 예컨대 셀레콕시브, 발데콕시브, 루미라콕시브 및/또는 에토리콕시브가 포함된다.

일부 구현예에서, 항염증제는 살리실레이트이다. 살리실레이트에는, 이에 제한되지 않으나, 아세틸살리실산 또는 아스피린, 나트륨 살리실레이트 및 콜린 및 마그네슘 살리실레이트가 포함된다.

항염증제는 또한 코르티코스테로이드이다. 예를 들어, 코르티코스테로이드는 코르티손, 덱사메타손, 메틸프레드니손, 프레드니손, 프레드니솔론, 프레드니솔론 나트륨 포스페이트 또는 프로드니손이 포함된다.

추가적인 구현예에서, 항염증제는 금 화합물, 예컨대 금 나트륨 티오말레이트 또는 아우라노펜이다.

본 발명은 또한, 항염증제가 디히드로 폴레이트 리덕타아제 저해제, 예컨대 메토트렉세이트 또는 디히드로오로테이트 디히드로게나아제 저해제, 예컨대 레플루노마이드와 같은 대사 저해제인 구현예를 포함한다.

본 발명의 다른 구현예는, 하나 이상의 항염증 화합물이 항-C5 모노클로날 항체 (예컨대, 에쿨리주마브 또는 펙셀리주마브), TNF 안타고니스트, 예컨대 엔타네르셉트 또는 항-TNF 알파 모노클로날 항체인 인플릭시마브인 배합물에 관한 것이다.

본 발명의 또다른 구현예는, 하나 이상의 활성제가 면역어게제 화합물, 예컨대 메토트렉세이트, 레플루노마이드, 시클로스포린, 타크롤리무스, 아자티오프린 및 마이코페놀레이트 모페틸로부터 선택되는 면역억제제인 배합물에 관한 것이다.

BTK 를 발현하는 B-세포 및 B-세포 전구체는, 이에 제한되지 않으나, B-세포 림프종, 림프종 (호지킨 및 비-호지킨 림프종 포함), 털모양 세포 림프종, 다발 골수종, 만성 및 급성 골수성 백혈병 및 만성 및 급성 림프구 백혈병을 포함하는, B-세포 악성의 병리에서 중요하다.

BTK 는 B-계열 림프구 세포에서의 Fas/APO-I (CD-95) 사멸 유도성 신호전달 복합체 (DISC) 의 저해제로 나타났다. 백혈병/림프종 세포의 운명은 DISC 에 의해 활성화되는 카스파아제의 대립적 전-아폽토시스성 유효성 및 BTK 및/또는 그의 기질이 수반되는 상류 항-아폽토시스 조절 메커니즘 사이의 균형에 좌우된다 (Vassilev et al, J. Biol. Chem. 1998, 274, 1646-1656).

BTK 저해제는 화학감작제로서 유용하다는 점을 발견했고, 따라서 기타 화학치료제, 특히 아폽토시스를 유도하는 약물과의 병용에 유용하다. 화학감작성 BTK 저해제와의 병용에 이용될 수 있는 기타 화학치료 약물의 예시에는, 토포이소머라아제 I 저해제 (캄프토테신 또는 토포테칸), 토포이소머라아제 II 저해제 (예를 들어, 다우노마이신 및 에토포사이드), 알킬화제 (예를 들어, 시클로포스파마이드, 멜팔란 및 BCNU), 튜뷸린 대상 화합물 (예를 들어, 택솔 및 빈블라스틴),및 생물학적 제 (예를 들어, 항체, 예컨대 항 CD20 항체, IDEC 8, 면역독소 및 싸이토카인) 가 포함된다.

Btk 활성은 또한 염색체 9 번 및 22 번의 일부의 전좌로 초래되는 bcr-abl 융합 유전자를 발현하는 일부 백혈병과 연관되어 있다. 이러한 비정상은 만성 골수성 백혈병에서 일반적으로 관찰된다. Btk 는 bcr-abl 세포에서 아폽토시스를 면하는 하류방향 생존 신호를 개시하는 bcr-abl 키나아제에 의해 구성적으로 포스포릴화된다 (Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201(11):1837-1852)

본 발명의 화합물은 광범위한 경구 투여 형태 및 담체에 제형화될 수 있다. 경구 투여는, 정제, 코팅된 정제, 드라제, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 에멀전, 시럽 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 본 발명의 화합물은, 다른 투여 경로들 중 특히, 연속 (정맥내 드립) 국소 비경구, 근육내, 정맥내, 피하, 경피 (침투 증강제를 포함할 수 있음), 협측, 비강, 흡입 및 좌제를 포함하는 기타 투여 경로로 투여될 때 효능적이다. 바람직한 투여 방식은 일반적으로, 활성 성분에 대한 환자의 응답성 및 고통의 정도에 따라 조정될 수 있는 편리한 매일 투여량 요법을 이용하는 경구형이다.

본 발명의 화합물 및 그의 약제학적으로 이용가능한 염은, 하나 이상의 통상적인 부형제, 담체 또는 희석제와 함께, 약제학적 조성물 및 단위 투여량의 형태로 할 수 있다. 약제학적 조성물 및 단위 투여량 형태는, 추가적인 활성 화합물 또는 주성분 (principles) 의 존재 또는 부재 하에, 통상적인 비율의 통상적인 성분들로 이루어질 수 있고, 단위 투여량 형태는 채용될 의도하는 매일 투여량 범위에 상응하는 임의의 적합한 유효량의 활성 성분을 포함할 수 있다. 약제학적 조성물은, 정제 또는 충전된 캡슐, 반고형제, 분말, 서방성 제형물과 같은 고체로, 또는 용액, 현탁액, 에멀전, 엘릭서 또는 경구용의 충전된 캡슐과 같은 액체로; 또는 직장내 또는 질내 투여용의 좌제의 형태로; 또는 비경구적 용도를 위한 멸균 주사 용액의 형태로 채용될 수 있다. 전형적인 제제는 약 5% 내지 약 95% 활성 화합물 또는 화합물들 (w/w) 을 포함할 것이다. 용어 "제제" 또는 "투여 형태" 는 활성 성분의 고체 및 액체 제형물의 두가지 모두를 포함하는 것을 의도로 하며, 당업자는 활성 성분이 표적 장기 또는 조직 및 원하는 투여량 및 약동학적 파라미터에 좌우되는 상이한 제제로 존재할 수 있음을 인지할 것이다.

본원에 사용된 용어 "부형제" 는 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로나 또는 그밖에도 바람직하지 않은 것이 아닌 화합물을 지칭하고, 수의학적 용도 뿐만 아니라 인간 약제학적 용도를 위해 허용가능한 부형제를 포함한다. 본 발명의 화합물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로는 의도하는 투여 경로 및 표준 약제학적 실시를 감안하여 선택되는 하나 이상의 적합한 약제학적 부형제, 희석제 또는 담체와 혼합되어 투여된다.

"약제학적으로 허용되는" 은, 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로나 또는 그밖에도 바람직하지 않은 것이 아닌, 약제학적 조성물 제조에 유용한 것을 의미하고, 수의학적 용도 뿐만 아니라 인간 약제학적 용도로 허용되는 것이 포함된다.

활성 성분의 "약제학적으로 허용되는 염" 형태는 또한, 처음에는 비-염 형태에는 부재하는 활성 성분에 대한 바람직한 약동학적 특성을 의미할 수 있고, 심지어는 신체에서의 그의 치료 활성과 관련하여 활성 성분의 약력학에 긍정적으로 영향을 줄 수도 있다. 어구, 화합물의 "약제학적으로 허용되는 염" 은, 약제학적으로 허용되고, 본 발명의 바람직한 약학적 활성을 보유하는 염을 의미한다. 상기 염에는 하기한 것이 포함된다: (1) 염산, 히드로브롬산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나; 또는 아세트산, 프로피온산, 헥산산, 시클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-히드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 1,2-에탄-디술폰산, 2-히드록시에탄술폰산, 벤젠술폰산, 4-클로로벤젠술폰산, 2-나프탈렌술폰산, 4-톨루엔술폰산, 캄포르술폰산, 4-메틸비시클로[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카르복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트리메틸아세트산, 3 차 부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 히드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산 등과 같은 유기산으로 형성된 산 부가염; 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어, 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온 또는 알루미늄 이온에 의해 치환되거나; 또는 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 트로메타아민, N-메틸글루카민 등과 같은 유기 염기로 배위되는 경우 형성되는 염.

고체 형태 제제에는, 분말, 정제, 필, 캡슐, 샤쉐, 좌제 및 분산가능한 과립이 포함된다. 고체 담체는, 희석제, 풍미제, 가용화제, 윤활제, 현탁제, 결합제, 보존제, 정제 붕해제 또는 봉입 재료로서도 작용할 수 있는 하나 이상의 물질일 수 있다. 분말에서, 담체는 일반적으로, 미세하게 쪼개진 활성 성분과 함께 혼합물을 이루는 미세하게 쪼개진 고체이다. 정제에서, 활성 성분은 일반적으로 적합한 비율로 필요한 결합 용량을 가진 담체와 혼합되고, 원하는 모양 및 크기로 압착된다. 적합한 담체에는, 이에 제한되지 않으나, 마그네슘 카르보네이트, 마그네슘 스테아레이트, 탈크, 당, 락토오스, 펙틴, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 저융점 왁스, 코코아 버터 등이 포함된다. 고체 형태 제제는, 활성 성분에 추가하여, 색소, 풍미제, 안정화제, 완충제, 인공 및 천연 당화제, 분산제, 증점제, 가용화제 등을 포함할 수 있다.

액체 제형물이 또한 경구 투여에 적합하고, 에멀전, 시럽, 엘릭서, 수용액, 수성 현탁액을 포함하는 액체 제형물이 포함된다. 여기에는 사용 직전에 액체 형태 제제로 변환시키려는 의도의 고체 형태 제제가 포함된다. 에멀전은 용액, 예를 들어 수성 프로필렌 글리콜 용액에서 제조될 수 있거나, 또는 레시틴, 소르비탄 모노올레에이트 또는 아카시아와 같은 에멀전화제를 포함할 수 있다. 수용액은, 활성 성분을 물에 용해시키고, 적합한 색소, 풍미제, 안정화제 및 증점제를 첨가하여 제조될 수 있다. 수성 현탁액은 미세하게 쪼개진 활성 성분을, 천연 또는 합성 검, 수지, 메틸 셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스 및 기타 널리 공지된 현탁제와 같은 점성질 물질과 함께 물에 분산시켜 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물은 비경구 투여용 (예를 들어, 주사, 예를 들어 볼루스 주사 또는 연속 주입에 의한 투여) 으로 제형화될 수 있고, 앰플, 예비충전 주사기, 소용량 주입물 또는 보존제가 첨가된 다중-투여량 용기에 단위 투여량 형태로 제시될 수 있다. 조성물은, 오일성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액, 또는 에멀전의 형태로, 예를 들어 수성 폴리에틸렌 글리콜 중의 용액과 같은 형태를 취할 수 있다. 오일성 또는 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예시에는, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일 (예를 들어, 올리브 오일), 및 주사가능한 유기 에스테르 (예를 들어, 에틸 올레에이트) 가 포함되고, 보존제, 습윤제, 에멀전화제 또는 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형보조제를 포함할 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 멸균 고체의 무균 분리에 의해 또는 적합한 비히클, 예를 들어 멸균되고 발열원이 없는 물을 이용하여 사용 전 구성하기 위한, 용액으로부터의 동결건조에 의해 수득되는 분말 형태일 수 있다.

본 발명의 화합물은 표피에 연고, 크림 또는 로션으로서, 또는 경피 팻치로서 국소 투여하기 위해 제형화될 수 있다. 오일 및 크림은, 예를 들어 적합한 증점제 및/또는 겔화제를 첨가하여 수성 또는 오일성 염기를 이용해 제형화될 수 있다. 로션은 수성 또는 오일성 염기를 이용해 제형화될 수 있고, 또한 일반적으로 하나 이상의 에멀전화제, 안정화제, 분산제, 현탁제, 증점제 또는 착색제를 포함할 것이다. 구강에서의 국소 투여에 적합한 제형물에는, 일반적으로는 수크로오스 및 아카시아 또는 트라가칸트인 풍미화된 베이스 중에 활성 성분을 함유하는 마름모제; 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로오스 및 아카시아와 같은 불활성 염기 중에 활성 성분을 함유하는 사탕형 알약; 및 적합한 액체 담체에 활성 성분을 함유하는 마우스워시가 포함된다.

본 발명의 화합물은 좌제로 투여하기 위해 제형화될 수 있다. 지방산 글리세리드 또는 코코아 버터의 혼합물과 같은 저융점 왁스를 먼저 용융시키고, 활성 성분을, 예를 들어 교반하면서 균일하게 분산시킨다. 이어서, 용융된 균질 혼합물은 통상적인 크기의 성형틀에 부어 냉각시키고, 고형화시킨다.

본 발명의 화합물은 질내 투여용으로 제형화될 수 있다. 활성 성분에 추가하여 상기 담체들을 포함하는 페사리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포제 또는 스프레이가 당업계에서 적당한 것으로 공지되어 있다.

본 발명의 화합물은 비강 투여용으로 제형화될 수 있다. 용액 또는 현탁액은 통상적인 수단, 예를 들어 점적기, 피펫 또는 스프레이를 이용하는 통상적인 수단에 의해 비강으로 직접 적용된다. 제형물은 단일 또는 다중 투여량 형태로 제공될 수 있다. 점적기 또는 피펫의 후자의 경우, 이는 적당한 예정된 부피의 용액 또는 현탁액을 환자에게 투여하여 달성될 수 있다. 스프레이의 경우, 이는 예를 들어 계량 분무 스프레이 펌프 (metering atomizing spray pump) 를 수단으로 하여 달성될 수 있다.

본 발명의 화합물은 비강내 투여를 포함하는, 특히 호흡기에 대한 에어로졸 투여를 위해 제형화될 수 있다. 화합물은 일반적으로, 예를 들어 5 마이크론 이하 정도의 작은 입자 크기를 갖는다. 상기 입자 크기는, 당업계에 공지된 수단, 예를 들어 마이크로화 (micronization) 에 의해 수득될 수 있다. 활성 성분은 클로로플루오로 탄소 (CFC), 예를 들어 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄 또는 디클로로테트라플루오로에탄, 또는 이산화탄소 또는 기타 적합한 기체와 같은 적합한 추진체를 이용한 압축 팩에 제공된다. 에어로졸은 또한 통상적으로 레시틴과 같은 계면활성제를 포함할 수 있다. 약물의 투여량은 계량된 밸브로 제어될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 드라이 분말, 예를 들어 락토오스, 전분, 전분 유도체, 예컨대 히드록시프로필메틸 셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘 (PVP) 와 같은 적합한 분말 베이스 중의 화합물의 분말 믹스의 형태로 제공될 수 있다. 분말 담체는 비강에서 겔을 형성할 것이다. 분말 조성물은 예를 들어, 흡입기를 수단으로 분말이 투여될 수 있는, 젤라틴 또는 블리스터 팩의 캡슐 또는 카트리지 내에 단위 투여량 형태로 제시될 수 있다.

원하는 경우, 제형물은 활성 성분의 지속 또는 제어 방출 투여를 위해 맞춰진 장용 코팅을 이용해 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 경피 또는 피하 약물 전달 장치 내에 제형화될 수 있다. 상기 전달 시스템은 화합물의 지연 방출이 필요할 때 및 치료 요법에 대한 환자의 준수가 중요할 때 유리하다. 경피 전달 시스템에서의 화합물들은 종종 피부-접착성 고체 지지체에 결합된다. 관심대상의 화합물들은 또한 침투 증강제, 예를 들어, 아존 (1-도데실아자-시클로헵탄-2-온) 과 병용될 수 있다. 지속 방출 전달 시스템은 수술에 의해 또는 주사에 의해 피하층으로 피하삽입된다. 피하 이식물은 지용성 멤브레인, 예를 들어 실리콘 고무 또는 생분해성 중합체, 예를 들어 폴리아세트산에 화합물을 봉입시킨다.

약제학적 담체, 희석제 및 부형제와 함께 하는 적합한 제형물은, 다음 문헌에 기재되어 있다: Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, E.W. Martin 편저, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania. 숙련된 제형과학자는 본 발명의 조성물을, 불안정하게 하거나 또는 그의 치료 활성에 지장을 주지 않으면서도, 특별한 투여 경로를 위한 다양한 제형물을 제공하기 위해 명세서의 교시에 따라 제형물을 개질할 수 있다.

본 발명의 화합물을 물 또는 기타 비히클에 더욱 가용성이 되도록 하기 위한 개질은, 예를 들어 소소한 수식 (염 제형화, 에스테르화 등) 으로 쉽게 달성될 수 있고, 이는 당업자에게 널리 공지되어 있다. 본 발명의 화합물의 약동학적 특성을 환자에게 최대한의 이익을 제공하도록 조정하기 위한 특별한 화합물의 투여 경로 및 투여 요법을 개질하는 것도 당업자에게 널리 공지되어 있다.

본원에 사용된 용어 "치료 유효량" 은 개인에서 질환의 징후를 감소시키기 위해 필요한 양을 의미한다. 투여량은 각각의 특별한 경우세어 개인의 필요조건에 맞춰질 것이다. 해당 투여량은, 치료할 질환의 심각성, 환자의 연령 및 일반적인 건강 상태, 환자가 처방받는 중인 기타 의약, 투여 경로 및 형태 및 관련 의료진의 선호성 및 경험과 같은 많은 인자들에 좌우되는 광범위한 한계 내에서 다양할 수 있다. 경구 투여용으로, 1 일 약 0.01 내지 약 1000 mg/체중 kg 의 매일 투여량이 단독요법 및/또는 병용 요법에서 적당할 수 있다. 바람직한 매일 투여량은, 1 일 약 0.1 내지 약 500 mg/체중 kg 이고, 더욱 바람직하게는 0.1 내지 약 100 mg/체중 kg 이고, 가장 바람직하게는 1.0 내지 약 10 mg/체중 kg 이다. 따라서, 70 kg 성인에 대한 투여에 대해서는 투여량 범위는 1 일 약 7 mg 내지 0.7 g 이다. 매일 투여량은 단일 투여량으로, 또는 일반적으로 1 일 1 내지 5 회 투여량으로 분할 투여량으로 투여될 수 있다. 일반적으로, 치료는 화합물의 최적 투여량보다는 더 적은, 더 적은 투여량으로 개시된다. 이후, 개별 환자에 대한 최적 효과에 도달할 때까지, 투여량은 조금씩 증가된다. 본원에 기재된 질환 치료에서 당업자는, 지나친 실험과정 없이도, 개인의 지식, 경험 및 본 출원의 개시내용을 바탕으로, 주어진 질환 및 환자를 위한 본 발명의 화합물의 치료 유효량을 가늠할 수 있을 것이다.

약제학적 제제는 바람직하게는 단위 투여량 형태이다. 상기 형태에서, 제제는 적당량의 활성 성분을 포함하는 단위 투여량으로 분할되어 있다. 단위 투여량 형태는, 따로따로 나누어진 분량의 제제를 포함하도록 포장된 제제일 수 있고, 예컨대 바이알 또는 앰플에 포장된 정제, 캡슐 분말이다. 또한, 단위 투여량 형태는 캡슐, 정제, 샤쉐 또는 마름모제 자체일 수 있거나, 또는 적당한 갯수의 포장된 형태의 것일 수 있다.

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실시예

실시예 1: 1- 메틸 -4-(6-니트로-피리딘-3-일)-피페라진

10 mL 디메틸술폭시드 중의 5-브로모-2-니트로-피리딘 (2.0Og, 9.85mmol) 에, 칼륨 카르보네이트 (2.72g, 19.7mmol), 1-메틸피페라진 (1.64mL, 14.8mmol), 및 테트라부틸암모늄 요오다이드 (36mg, 0.097mmol) 를 첨가하고, 120℃ 까지 18 시간 동안 가열했다. 혼합물을 1M 수성 HCl 를 이용해 산성으로 만들고, DCM 및 물 사이에 분배했다. 수층은 2M 수성 나트륨 카르보네이트를 이용하여 염기성으로 만들고, DCM 으로 추출했다. 유기층을 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 물로 분쇄하여 1-메틸-4-(6-니트로-피리딘-3-일)-피페라진 (1.82g, 8.19mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 223.1 (M+H)⁺.

실시예 2: 5-(4- 메틸 -피페라진-1- 일 )-피리딘-2- 일아민

1-메틸-4-(6-니트로-피리딘-3-일)-피페라진 (1.748g, 7.865mmol) (실시예 1) 을 3O mL 메탄올 내에서 175 mg 의, 탄소 상 10% 팔라듐과 함께 수소 기체 분위기 하에 5 시간 동안 교반했다. 이를 여과하고, 진공에서 농축하여 5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아민 (1.485g, 7.724mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 193.1 (M+H)^+.

실시예 3: 5- 브로모 -1- 메틸 -3-[5-(4- 메틸 -피페라진-1-일)-피리딘-2- 일아미 노]-1H-피리딘-2-온

5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아민 (1.06g, 5.53mmol) (실시예 X), 3,5-디브로모-1-메틸- 1H-피리딘-2-온 (1.23g, 4.61mmol), 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9- 디메틸잔텐 (400mg, 0.691mmol) 및 세슘 카르보네이트 (4.5Og, 13.8mmol) 에, 45mL 1,4-디옥산 및 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) (422mg, 0.461mmol) 을 첨가했다. 이것을 120℃ 오일 욕에서 아르곤 하에 6 시간 동안 가열했다. 이를 에틸아세테이트 및 묽은 수성 중탄산나트륨 사이에 분배했다. 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피 (2 내지 5% 메탄올/DCM 를 이용한 구배 용출) 로 정제하여, 5-브로모-1-메틸-3-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온 (484mg, 1.28mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 380.0 (M+H)⁺.

실시예 4: 5- 브로모 -1- 메틸 -3-(5-모르폴린-4-일-피리딘-2- 일아미노 )-1H-피리딘-2-온

상기 화합물은 5-브로모-1-메틸-3-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온과 유사하게 제조했다. MS (ESI) 365.0 (M+H)⁺.

실시예 5: 5- 브로모 -1- 메틸 -3-(l- 메틸 -1H- 피라졸 -3- 일아미노 )-1H-피리딘-2-온

3,5-디브로모-1-메틸-1H-피리딘-2-온 (469mg, 1.76mmol), 1-메틸-1H-피라졸-3-일아민 (205mg, 2.11mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) (80mg, 0.087mmol), 2,2'-비스(디페닐포스피노-1,1'-비나프탈렌 (82mg, 0.13mmol) 및 세슘 카르보네이트 (801mg, 2.46mmol) 를, 1OmL 톨루엔이 있는 밀봉된 바이알에 넣었다. 이를 130℃ 에서 18 시간 동안 가열했다. 결과로서 수득한 혼합물을 50 mL 물에 부었다. 이를 에틸아세테이트로 추출했다. 에틸아세테이트 층을 식염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피 (에틸아세테이트/헥산으로 용출) 로 정제하여, 5-브로모-1-메틸-3-(1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1H-피리딘-2-온 (271 mg, 0.957mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 284.9 (M+H)⁺.

실시예 6: 5- 브로모 -1- 메틸 -3-(5-모르폴린-4- 일메틸 -피리딘-2- 일아미노 )-1H- 피리딘-2-온

5-브로모-1-메틸-3-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온 (2.3 g, 5.9mmol) 을 3OmL THF 에 용해시켰다. 보란 THF 착물 (2.5g, 29mmol) 을 첨가했다. 18 시간 동안의 교반 후, 이를 진공에서 농축했다. 에탄올을 첨가했다. 이를 1 시간 동안 환류시켰다. 이를 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-1-메틸-3-(5-모르폴린-4-일메틸-피리딘-2-일아미노)-1H-피리딘-2-온 (5OOmg, 1.32mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 381.0 (M+H)⁺.

실시예 7: (6- 클로로 -피리딘-3-일)-(4- 메틸 -피페라진-1-일)- 메타논

3OmL DMF 중의 6-클로로-니코틴산 (3.00g, 19.0mmol) 의 용액에 (벤조-트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (10.9g, 20.9mmol), 1-메틸-피페라진 (2.3Og, 22.1mmol) 및 트리에틸아민 (2.18g, 21.5mmol) 을 첨가했다. 18 시간 동안의 교반 후, 이를 에틸 아세테이트 및 물 사이에 분배했다. 에틸아세테이트 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피 (3% 메탄올/DCM 로 용출) 로 정제하여, (6-클로로-피리딘-3-일)-(4-메틸-피페라진-1-일)-메타논 (2.5Og, 9.33mmol) 을 수득했다.

실시예 8: 5- 브로모 -1- 메틸 -3-[5-(4- 메틸 -피페라진-1-카르보닐)-피리딘-2-일- 아미노]-1H-피리딘-2-온

10 mL DMF 중의 (6-클로로-피리딘-3-일)-(4-메틸-피페라진-1-일)-메타논 (2.0Og, 7.46 mmol) (실시예 7) 의 용액에 3-아미노-5-브로모-1-메틸-1H-피리딘-2-온 (1.80g, 8.95mmol) 및 나트륨 히드라이드 (537mg, 22.4mmol) 를 첨가했다. 18 시간 동안의 교반 후, 이를 물로 켄칭했다. 이를 에틸아세테이트로 추출했다. 에틸아세테이트 층을 무수 나트륨 설페이트 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피 (0 내지 5% 메탄올/DCM 의 구배 용출) 로 정제하여, 5-브로모-1-메틸-3-[5-(4-메틸-피페라진-1-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온 (900mg, 1.94mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 406.0 (M+H)⁺.

실시예 9: 2-(3- 브로모 -2- 메틸 - 페닐 )-3-(3-디메틸아미노- 페닐아미노 )-아크릴산 에틸 에스테르

(3-브로모-2-메틸-페닐)-아세트산 벤질 에스테르 (421mg, 1.32mmol) 를 에틸 포르메이트 (2.5mL, 31mmol) 에 용해시켰다. 나트륨 히드라이드 (95%, 67mg, 2.6mmol) 를 첨가했다. 30 분간의 교반 후, 이를 1M 수성 HCl 로 켄칭했다. 이를 에틸 아세테이트 및 물 사이에 분배했다. 에틸 아세테이트 층을 물로 세척하고, 식염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 농축했다.

상기 물질 일부와 N,N-디메틸-벤젠-1,3-디아민 (96mg, 0.70mmol) 을 1 mL 에탄올 내에서 18 시간 동안 교반했다. 이를 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피 (5 내지 20% 에틸 아세테이트/헥산 구배 용출) 로 정제하여, 2-(3-브로모-2-메틸-페닐)-3-(3-디메틸아미노-페닐아미노)-아크릴산 에틸 에스테르 (164mg, 0.407mmol) 를 수득했다. MS (ESI) 405.0 (M+H)⁺.

실시예 10: 6- 클로로 - 피리다진 -3- 일아민

3,6-디클로로-피리다진 (7.5 g, 50.35 mmol) 에탄올성 암모니아 (100 mL) 에 용해시키고, 130℃ 에서 밤새 가압 용기 내에서 가열했다. 이어서, 에탄올을 감압 하에 증발시키고, 미정제물을 EtOAc/헥산 (6:4) 을 이용하는 실리카 겔 (230-400 메쉬) 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 고체로서 수득했다 (4 g, 61 %).

실시예 11: 4- 브로모 -6- 클로로 - 피리다진 -3- 일아민

6-클로로-피리다진-3-일아민 (4 g, 31 mmol) (실시예 10) 의 메탄올 (60 mL) 중 용액에 NaHCO₃ (5.2 g, 62 mmol) 를 첨가했다. 반응 혼합물을 30 분 동안 RT 에서 교반한 후, Br2 (4.9 g, 31 mmol) 를 적가했다. 이어서, 결과로서 수득한 반응 혼합물을 추가적으로 16 h 동안 RT 에서 교반했다. 반응 완료 후, 반응 물질은 감압 하에 농축하고, 미정제물을 EtOAc/헥산 (8:2) 을 이용하는 실리카 겔 (100-200 메쉬) 크로마토그래피로 정제하여, 4-브로모-6-클로로-피리다진-3-일아민 (2.3 g, 36 %) 을 고체로서 수득했다.

실시예 12: 4- 브로모 -6- 클로로 -2H- 피리다진 -3-온

NaNO₂ (1 g, 13.20 mmol) 의 진한 H₂SO₄ (15 mL) 중의 냉각시킨 용액 (0 내지 5℃) 에, 50 mL 의 아세트산 중의 4-브로모-6-클로로-피리다진-3-일아민 (2.3 g, 11 mmol) (실시예 11) 을 첨가했다. 이어서, 반응 혼합물을 1 시간 동안 20℃ 에서 교반한 후, 물 (75 mL) 을 첨가하고, 5 h 동안 RT 에서 교반을 지속했다. 반응 혼합물을 EtOAc 로 추출하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축하고, 미정제물을 EtOAc/헥산 (8:2) 을 이용하는 실리카 겔 (100-200 메쉬) 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물 (2.2 g, 95 %) 을 황색 고체로서 수득했다.

실시예 13: 4- 브로모 -6- 클로로 -2- 메틸 -2H- 피리다진 -3-온

4-브로모-6-클로로-2H-피리다진-3-온 (5.02g, 23.97 mmol) (실시예 12) 을 40 ml DMF 에 용해시켰다. 세슘 카르보네이트 (9.37g, 28.76 mmol) 를 첨가했다. 5 분 후, 요오도메탄 (5.103g, 35.95 mmol) 을 20 분에 걸쳐 적가했다. 반응 혼합물을 3 시간 동안 RT 에서 교반했다. 침전물을 여과제거하고, 농축하고, 결과로서 수득한 잔사를 20 ml DCM 으로 처리했다. 불용성 물질을 다시 여과제거하고, DCM 으로 세척했다. 여과액을 진공에서 농축하여, 4-브로모-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온 (5.223 g, 23.37 mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 224.9 (M+H)⁺

실시예 14: 6- 클로로 -2- 메틸 -4-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -3- 일아미노 )-2H- 피리다진 -3-온

1-메틸-1H-피라졸-3-아민 (806 mg, 8.3 mmol) 을 40 ml 디옥산에 용해시켰다. 칼륨 tert-부톡시드 (1.793g, 15.98 mmol) 를 첨가했다. 최종적으로, 4-브로모-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온 (1.7 g, 7.61 mmol) 을 첨가하고, 혼합물을 3 시간 동안 상온에서 교반했다. 반응 혼합물을 첨가하고, 상기 혼합물을 3 시간 동안 상온에서 교반했다. 반응 혼합물을 150 ml 삼각 플라스크에 옮기고, 15 ml 1 M 염산 수용액으로 산성화시킨 후, pH 가 약 8 에 이를 때까지 포화 중탄산나트륨 용액으로 처리했다. 이를 각각 100 ml 의 DCM 로 2 회 추출하고; 유기상을 나트륨 설페이트로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하여, 1.5 g 의 밝은 오렌지색 고체를 수득했다. 상기 미정제 물질을 DCM 및 헥산의 혼합물로 미분화했다. 현탁액을 여과제거하여, 결과로서 수득한 필터 케이크를 고진공 하에 건조시켜 6-클로로-2-메틸-4-(l-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-2H-피리다진-3-온 (967 mg, 4.03 mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 240.0 (M+H)⁺

실시예 15: 4- 브로모 -2-(2- 브로모 -에틸)- 벤젠술포닐 클로라이드

클로로술폰산 (17 mL) 을 1-브로모-3-(2-브로모-에틸)-벤젠 (5 g, 19 mmol) 에 0℃ 에서 적가했다. 혼합물을 0℃ 에서 1 시간 동안 교반한 후, 3 시간 동안 rt 에서 교반했다. 혼합물을 얼음물에 서서히 첨가하고, 메틸렌 클로라이드로 추출하고, 조합한 유기층을 감압 하에 증발시켜, 4.3 g 의 미정제 4-브로모-2-(2- 브로모-에틸)-벤젠술포닐 클로라이드를 수득하여, 후속 단계에 직접 이용했다. MS (ESI) 342.9 (M-Cl+OH)^-.

실시예 16: 5-[3-(6- 브로모 -1,1- 디옥소 -3,4- 디히드로 -1H-1λ6- 벤조 [e] [1,2]티아진-2-일)-2-( tert -부틸-디메틸- 실라닐옥시메틸 )- 페닐 ]-3-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2- 일아미노 ]-1H-피리딘-2-온

5-[3-아미노-2-(tert-부틸-디메틸-실라닐옥시메틸)-페닐]-1-메틸-3-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온 (0.2 g, 0.36 mmol), 4-브로모-2-(2-브로모-에틸)-벤젠술포닐 클로라이드 (0.4 g, 1.08 mmol) (실시예 15) 및 DIPEA (1 mL) 의 디클로로 에탄 (10 mL) 중의 혼합물을 120℃ 에서 30 분 동안 전자레인지에서 처리한 후, 4-브로모-2-(2-브로모-에틸)-벤젠술포닐 클로라이드 (0.4 g, 1.08 mmol) 및 DIPEA (1 mL) 을 첨가하고, 120℃ 에서 30 분 동안 전자레인지에서 처리했다. 상기 프로세스를 3 회 반복한 후, 혼합물을 농축하여 진한 잔사를 수득했다. 실리카 겔 크로마토그래피 (메틸렌 클로라이드/아세톤) 에 의한 정제로 0.15 g 의 5-[3-(6-브로모-1,1-디옥소-3,4-디히드로-1H-1λ6-벤조[e][1,2]티아진-2-일)-2-(tert-부틸-디메틸-실라닐옥시메틸)-페닐]-3-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온을 연한색 고체로 수득했다. MS (ESI) 796.2 (M+H)⁺.

실시예 17: 5-[3-(6- 브로모 -1,1- 디옥소 -3,4- 디히드로 -1H-1λ6- 벤조 [e] [1,2]티아진-2-일)-2- 히드록시메틸 - 페닐 ]-1- 메틸 -3-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온 ( IV -I)

5-[3-(6-브로모-1,1-디옥소-3,4-디히드로-1H-1λ6-벤조[e][1,2]티아진-2-일)-2-(tert-부틸-디메틸-실라닐옥시메틸)-페닐]-3-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온 (0.05 g, 0.06 mmol), 진한 HCl (1 mL) 의 메탄올 (10 mL) 중의 혼합물을 rt 에서 30 분 동안 교반했다. 상기 혼합물을 고체 Na₂CO₃ 를 이용하여 중화하고, 농축하여 진한 잔사를 수득했다. 실리카 겔 크로마토그래피 (메틸렌 클로라이드/아세톤) 에 의한 정제로, 0.01 g 의 5-[3-(6-브로모-1,1-디옥소-3,4-디히드로-1H-1λ6-벤조[e][1,2]티아진-2-일)-2-(tert-부틸-디메틸-실라닐옥시메틸)-페닐]-1-메틸-3-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-피리딘-2-온을 연한색 고체로 수득했다. MS (ESI) 682.0 (M+H)⁺.

실시예 18: (4- tert -부틸-2-니트로- 페닐에티닐 )- 트리메틸 - 실란

트리플루오로-메탄술폰산 4-tert-부틸-2-니트로-페닐 에스테르 (3.715g, 11.35mmol), 디-클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) (336mg, 0.478mmol), 요오드화 구리 (168mg, 0.882mmol) 에, DMF (45mL), 트리에틸아민 (1.72g, 17.0mmol), 및 트리메틸실릴-아세틸렌 (2.229g, 22.70mmol) 을 첨가했다. 결과로서 수득한 혼합물을 90℃ 에서 질소 분위기 하에 15 분 동안 가열했다. 이를 에틸아세테이트 및 물 사이에 분배했다. 에틸아세테이트 층을 식염수로 세척하고, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, CH₂Cl₂ 로 용출시키는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, (4-tert-부틸-2-니트로-페닐에티닐)-트리메틸-실란 (3.193g, 11.61 mmo 1) 을 수득했다.

실시예 19: 4- tert -부틸-1- 에티닐 -2-니트로-벤젠

(4-tert-부틸-2-니트로-페닐에티닐)-트리메틸-실란 (3.167g, 11.51mmol) (실시예 18) 및 칼륨 카르보네이트 (3.18g, 23.0mmol) 를 75mL 메탄올에서 20 분 동안 교반했다. 결과로서 수득한 혼합물을 에틸아세테이트 및 물 사이에 분배했다. 에틸아세테이트 층을 식염수로 세척하고, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 0 내지 5% 구배의 에틸아세테이트/헥산을 이용한 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 4-tert-부틸-1-에티닐-2-니트로-벤젠 (1.91Og, 9.398mmol) 을 수득했다.

실시예 20: 4- tert -부틸-2-니트로-벤조산

4-tert-부틸-1-에티닐-2-니트로-벤젠 (1.662g, 8.176mmol) (실시예 19) 을 20mL 사염화탄소, 2OmL 아세토니트릴 및 4OmL 물에 용해시켰다. 과요오드산 (9.322g, 40.89 mmol) 을 첨가한 후, 루테늄(III)클로라이드 히드레이트 (85mg, 0.41mmol) 를 첨가했다. 90 분의 교반 후, 결과로서 수득한 혼합물을 물로 희석하고, 3 부의 DCM 로 추출했다. 조합한 DCM 층을 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하여 4-tert-부틸-2-니트로-벤조산 (1.924g, 86.19mmol) 을 수득했다.

실시예 21: 2-아미노-4- tert -부틸-벤조산

4-tert-부틸-2-니트로-벤조산 (199mg, 8.91mmol) (실시예 20) 및 탄소 상 10% 팔라듐 (40mg) 을 6mL 에탄올에서 수소 분위기 하에 3 시간 동안 교반했다. 결과로서 수득한 혼합물을 여과하고, 진공에서 농축하여 2-아미노-4-tert-부틸-벤조산 (177mg, 0.916mmol) 을 수득했다.

실시예 22: 7- tert -부틸-3-[2- 메틸 -3-(4,4,5,5- 테트라메틸 -[1,3,2] 디옥사보로란 -2-일)- 페닐 ]-3H- 퀴나졸린 -4-온

2-아미노-4-tert-부틸-벤조산 (78mg, 0.41mmol) (실시예 21) 의 2mL 트리메틸오르토포르메이트 중의 용액을 105℃ 까지 30 분 동안 가열했다. 결과로서 수득한 용액을 진공에서 농축했다. 2mL 톨루엔 중의 2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-페닐아민 (1OOmg, 0.41mmol) 을 첨가했다. 결과로서 수득한 혼합물을 환류에서 1 시간 동안 가열하고, 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피 (15% 에틸아세테이트/헥산) 로 정제하여, 7-tert-부틸-3-[2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 (68mg, O.16mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 419.2 (M+H)^+.

실시예 23: 7- tert -부틸-3-(2- 메틸 -3-{1- 메틸 -5-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2- 일아미노 ]-6-옥소-1,6- 디히드로 - 피리다진 -3-일}- 페닐 )-3H- 퀴나졸린 -4-온 (1-3)

6-클로로-2-메틸-4-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온 (56mg, O.16mmol), 7-tert-부틸-3-[2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 (68mg, 0.16mmol) (실시예 22), 테트라키스(트리페닐-포스핀)팔라듐(O) (19mg, O.O16mmol), 및 나트륨 카르보네이트 (52mg, 0.49mmol) 의, 2mL 1,2-디메톡시에탄 및 1mL 물 중의 용액을 마이크로파 합성기 상에서 170℃ 로 12.5 분 동안 가열했다. 결과로서 수득한 혼합물을 에틸아세테이트 및 물 사이에 분배했다. 에틸아세테이트 층을 식염수로 세척하고, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 예비 TLC (10%MeOH/CH₂Cl₂) 로 정제하여, 7-tert-부틸-3-(2-메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-디히드로-피리다진-3-일}-페닐)-3H-퀴나졸린-4-온 (26.4mg, 0.044mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 606 (M+H)⁺.

실시예 24: 7- tert -부틸-3-(2- 메틸 -3-{1- 메틸 -5-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2- 일아미노 ]-6-옥소-1,6- 디히드로 - 피리다진 -3-일}- 페닐 )-2,3- 디히드로 -1H- 퀴나졸린-4-온 ( II -4)

7-tert-부틸-3-(2-메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-디히드로-피리다진-3-일}-페닐)-3H-퀴나졸린-4-온 (11 mg, 0.018 mmol) (I-3) 및 나트륨 시아노보로히드라이드 (1.3 mg, 0.019 mmol) 의 1 mL 메탄올 중 혼합물에 메탄올 중 2M 염산 한 방울을 첨가해 pH 를 3 으로 했다. 45 분 동안 교반 후, 결과로서 수득한 혼합물을 에틸아세테이트 및 묽은 수성 NaHCO₃ 사이에 분배했다. 에틸아세테이트 층을 식염수로 세척하고, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 예비 TLC (5% MeOH/CH₂Cl₂) 로 정제하여, 7-tert-부틸-3-(2-메틸-3-{1-메틸-5-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-디히드로-피리다진-3-일}-페닐)-2,3-디히드로-1H-퀴나졸린-4-온 (6.5mg, 0.01 lmmol) 을 수득했다. MS (ESI) 608 (M+H)⁺.

실시예 25: (6-아미노-피리딘-3-일)-모르폴린-4-일- 메타논

모르폴린 (9.0Og, 103mmol) 의 40OmL 에탄올 중 용액에 N-(3-디메틸-아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드(10.Og, 52.2mmol), 1-히드록시벤조-트리아졸(7.00g, 51.8mmol) 및 6-아미노니코틴산 (6.0Og, 43.4mmol) 을 첨가했다. 18 시간 동안의 교반 후, 잔류 고체를 여과했다. 이를 10OmL 메탄올 및 10OmL DCM 의 혼합물로 분쇄하여, (6-아미노-피리딘-3-일)-모르폴린-4-일-메타논 (3.08g, 14.9mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 208.1 (M+H)+.

실시예 26: 6- 클로로 -2- 메틸 -4-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2- 일아미 노]-2H- 피리다진 -3-온

(6-아미노-피리딘-3-일)-모르폴린-4-일-메타논 (2.921g, 14.11mmol) (실시예 25) 을 5OmL DMF 에 현탁시키고 0℃ 로 냉각시켰다. 미네랄 오일 중의 나트륨 히드라이드 60% 현탁액 (847mg, 21.2mmol) 을 첨가했다. 이를 RT 에서 30 분 동안 교반하고, 0℃ 로 냉각시켰다. 4,6-디클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온 (1.256g, 7.056mmol) 을 첨가했다. 2 시간 후, 이를 포화 암모늄 클로라이드 수용액 및 에틸아세테이트 사이에 분배했다. 에틸아세테이트 층을 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피 (2% MeOH/CH₂Cl₂) 로 정제하여, 6-클로로-2-메틸-4-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온 (732mg, 2.09mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 350.1 (M+H)+.

실시예 27: 4,6- 디클로로 -2H- 피리다진 -3-온

100 mL 아세트산 중의 3,4,6-트리클로로-피리다진 (34.39g, 187.5mmol) 를 환류에서 3 시간 동안 가열했다. 결과로서 수득한 혼합물을 RT 로 냉각시키고 여과했다. 여과액을 에틸아세테이트로 희석했다. 이를 물로 3 회 세척하고, 식염수로 세척하고, 무수 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피 (30% 에틸아세테이트/헥산) 로 정제하여, 4,6-디클로로-2H-피리다진-3-온 (6.143g, 37.23mmol) 을 수득했다. MS (ESI) 165.0 (M+H)^+.

실시예 28: 4- tert -부틸-N-(2-히드록시-1,1-디메틸-에틸)- 벤즈아미드

30.95 g (347 mmol) 의 2-아미노-2-메틸-1-프로판올을 교반 바아 및 격막이 있는 500 mL 삼각 플라스크에 칭량하여 넣었다. 200 mL CH₂Cl₂ 를 첨가했다. 질소 분위기를 확립하여 유지했다. 용액을 얼음/물 조에서 교반했다. 34 mL (174 mmol) 의 4- tert-부틸벤조일 클로라이드를 30 분에 걸쳐 적가했다. 백색 침전이 형성되었다. RT 에서 밤새 교반했다. 여과로 고체를 제거하고, CH₂Cl₂ 로 세척했다. 회전증발기 상에서 여과액으로부터 용매를 제거하고, 60°/4 torr 에서 건조시켜, 45.79 g 의 표제 화합물을 연황색 수지로 수득했다. MS (ESI) 248 (M - H)^-.

실시예 29: 2-(4- tert -부틸- 페닐 )-4,4-디메틸-4,5- 디히드로옥사졸

상기에서 제조한 4-tert-부틸-N-(2-히드록시-1,1-디메틸-에틸)-벤즈아미드 전부 (174 mmol) (실시예 28) 를 교반 바아 및 격막이 있는 500 mL 둥근바닥 플라스크에 충전시켰다. 질소 분위기를 확립 및 유지했다. 50 mL (685 mmol) 의 티오닐 클로라이드를 20 분에 걸쳐 적가했다. 플라스크를 힛 건 (heat gun) 으로 데워, 수지 일부를 용해시키고 반응을 개시했다. 반응 혼합물을 고체화시켰다. 플라스크를 힛 건으로 데워, 고체 전부를 용해시켰다. RT 로 냉각시켰다. 얇은 스트림 중의 반응 용액을 500 mL 의 교반 Et₂O 에 부었다. 백색 침전에 형성되었다. 침전물을 여과로 수집하고, Et₂O 로 철저히 세척했다. 수집한 고체를 300 mL 물에 용해시키고, 25% NaOH 로 중화했다. 2 x 200 mL Et₂O 를 이용해 황색 수용액을 추출했다. 상기 황색 추출물을 200 식염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 회전증발기 상의 용매를 제거하여 28.50 g 의 표제 화합물을 왁스질 백색 고체로 수득했다. MS (ESI) 232 (M + H)⁺.

실시예 30: 5- tert -부틸-2-(4,4-디메틸-4,5- 디히드로 - 옥사졸 -2-일)- 벤즈알데히드

오븐 건조 250 mL 3 구 둥근바닥 플라스크에 열량계, 교반 바아, 격막 및 질소 주입구를 설치했다. 8.02 g (34.7 mmol) 의 2-(4-tert-부틸-페닐)-4,4-디메틸-4,5-디히드로-옥사졸 (실시예 29) 을 첨가했다. N₂ 분위기를 확립 및 유지했다. 100 mL 의 무수 THF 를 첨가했다. 투명한 용액을 -78°로 냉각했다. 빠르게 교반하고, 17 mL (43 mmol) 의, 헥산 중 n-부틸의 2.5 M 용액을 10 분에 걸쳐 적가했다. 투명한 호박색 용액을 -20°에서 4 hr 동안 교반했다. 반응 혼합물이 탁한 붉은 호박색으로 변했다. 혼합물을 -78°로 냉각시켰다. 빠르게 교반하고, 온도를 -60°미만으로 유지할 속도로 12 mL 의 DMF 를 적가했다. -78°에서 15 분 동안 교반했다. -20°에서 1 hr 동안 교반했다. RT 에서 1 hr 동안 교반했다. 100 mL 의 0.5 M 수성 KHSO₄ 로 켄칭했다. 수상은 여전히 강한 염기성이었다. pH 가 약 2 가 될 때까지 1.0 M KHSO₄ 를 더 첨가했다. 300 mL Et₂O 를 이용해 2 상 용액을 희석했다. 상이 분리되고, 100 mL Et₂O 를 이용해 수상을 추출했다. 조합한 유기상을 200 mL 식염수로 세척하고, K₂CO₃ 상에서 건조시켰다. 120 g 의 실리카 겔을 통해 여과하고, 300 mL Et₂O 를 통해 세척하여, 베이스라인 불순물을 제거했다. 회전증발기 상에서 용매를 제거하여, 8.18 g 의 표제 화합물을 투명한 황색 용액으로 수득했다. MS (ESI) 260 (M+H)⁺.

실시예 31: 5- tert -부틸-3- 에톡시 -3H- 이소벤조퓨란 -1-온

3.66 g (14.1 mmol) 의 5-tert-부틸-2-(4,4-디메틸-4,5-디히드로-옥사졸-2-일)-벤즈알데히드 (실시예 30) 를, 교반 바아 및 환류 콘덴서가 장치된 200 mL 둥근바닥 플라스크에 칭량해 넣었다. 75 mL 의 에탄올을 첨가하고, 교반하여 투명한 용액을 수득했다. 50 mL 의 50% 수성 황산을 첨가했다. 환류에서 22 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 400 mL 물에 부었다. 수성 혼합물을 200 mL CH₂Cl₂ 로 2 회 추출했다. 유기 추출물을 조합하고, 200 mL 식염수로 세척했다. Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 회전증발기 상에서 용매를 제거했다. 고진공 하에 건조시켜 2.9 g 의 표제 화합물을 오프 화이트 고체로 수득했다. MS (ESI) 235 (M + H)⁺.

실시예 32: 6- tert -부틸-2H- 프탈라진 -1-온

2.9 g (12 mmol) 의 5-tert-부틸-3-에톡시-3H-이소벤조퓨란-1-온 (실시예 31) 을, 교반 바아 및 캡이 장치된 50 mL 둥근바닥 플라스크에 칭량해 넣었다. 10 mL (130 mmol) 의 히드라진 모노히드레이트를 첨가했다. 15 mL 의 글라시알 아세트산을 첨가했다. 100° 에서 밤새 교반했다. 반응 혼합물을 200 mL 의 교반 중인 물에 첨가했다. 고체를 여과로 수집하고, 물로 세척했다. 고진공 하에 건조시켜 2.24 g 의 표제 화합물을 오프-화이트 고체로 수득했다. MS (ESI) 203 (M + H)⁺.

실시예 33: 2- 브로모 -6-(6- tert -부틸-1-옥소-1H- 프탈라진 -2-일)- 벤즈알데히드

5.90 g (22.4 mmol) 의 2,6-디브로모벤즈알데히드, 1.80 g (8.90 mmol) 의 6-tert-부틸-2H- 프탈라진-1-온 (실시예 32), 6.02 g (18.5 mmol) 의 세슘 카르보네이트, 179 mg (0.940 mmol) 의 요오드화 구리 (I), 및 428 mg (1.87 mmol) 의 4,7-디메톡시-1,10-페난트롤린을 칭량하여, 교반 바아 및 격막 캡이 장치된 100 mL 반응 플라스크에 넣었다. 50 mL 의 무수 디옥산을 첨가했다. 반응 혼합물을 질소로 15 분간 일소했다. 100° 에서 18 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 200 mL 의 10% MeOH/CH₂Cl₂ 및 200 mL 의 물 사이에 분배했다. 상을 분리하고, 수상을 100 mL 의 10% MeOH/CH₂Cl₂ 로 2 회 추출했다. 조합한 유기 추출물을 200 mL 의 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 용매를 회전증발기 상에서 제거했다. 미정제물을 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 2.37 g 의 표제 화합물을 오프-화이트 고체로 수득했다. MS (ESI) 이중항 385, 387 (M + H)⁺.

실시예 34: 2-(6- tert -부틸-1-옥소-1H- 프탈라진 -2-일)-6-{1- 메틸 -5-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2- 일아미노 ]-6-옥소-1,6- 디히드로 -피리딘-3-일}- 벤즈알데히드

149 mg (0.338 mmol) 의 1-메틸-3-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥소보롤란-2-일)-1H-피리딘-2-온 및 116 mg (0.301 mmol) 의 2-브로모-6-(6-tert-부틸-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-벤즈알데히드 (실시예 33) 를 칭량하여, 교반 바아 및 격막 캡이 장치된 4 mL 반응 바이알에 넣었다. 2.5 mL 의 디옥산을 첨가했다. 0.33 mL (0.92 mmol) 의, 0.91 g/mL 세슘 카르보네이트 수용액을 첨가했다. 혼합물에 질소를 10 분간 살포했다. 13 mg (0.016 mmol) 의, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐(II) 클로라이드의 DCM 과의 1 : 1 착물을 첨가했다. 혼합물에 질소를 5 분간 살포했다. 바이알을 캡으로 밀봉하고, 95°에서 90 분간 교반했다. 반응물을 RT 로 냉각시키고, 15 mL CH₂Cl₂ 로 희석하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 0.45 μM 주사기 필터를 통해 여과하고, 용매를 회전증발기 상에서 제거했다. 미정제물을 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 129 mg 의 표제 화합물을 연황색 고체로 수득했다. MS (ESI) 619 (M + H)⁺.

실시예 35: 6- tert -부틸-2-(2- 히드록시메틸 -3-{1- 메틸 -5-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2- 일아미노 ]-6-옥소-1,6- 디히드로 -피리딘-3-일}- 페닐 )-2H- 프탈라진 -1-온 ( III -4)

121 mg (0.20 mmol) 의 2-(6-tert-부틸-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-6-{1-메틸-5-[5-(모르폴린-4-카르보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-디히드로-피리딘-3-일}-벤즈알데히드 (실시예 34) 를 칭량하여, 교반 바아 및 격막이 장치된 20 mL 반응 바이알에 넣었다. 4 mL 의 CH₂Cl₂ 및 2 mL MeOH 를 첨가하고, 교반하여 투명한 호박색 용액을 수득했다. 1.1 mL (0.29 mmol) 의 새롭게 제조한, MeOH 중의 나트륨 보로히드라이드의 10 mg/mL 용액을 첨가했다. RT 에서 3 시간 동안 교반했다. 반응물을 5 mL 의 포화 수성 NH₄Cl 를 이용해 켄칭했다. 5 mL 의 CH₂Cl₂ 를 반응 혼합물에 첨가하고, 상을 분리했다. 유기상을 5 mL 식염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 용매를 회전증발기 상에서 제거했다. 2 mL 아세토니트릴을 잔사에 첨가하고, 바이알을 초음파욕에 침잠시켰다. 잔사를 잠시간 용해시킨 후, 백색 침전물을 신속하여 용액으로부터 결정화시켰다. 5 mL Et₂O 를 혼합물에 첨가하고, 침전물을 여과로 수집했다. 고진공 하에 건조시켜 95 mg 의 표제 화합물을 오프-화이트 고체로 수득했다. MS (ESI) 621 (M + H)⁺.

실시예 36: Bruton's 타이로신 키나아제 ( Btk ) 저해 검정

본 검정은 여과를 통해 방사활성 33P 포스포릴화 생성물의 포획이다. Btk, 바이오틴화 SH2 펩티드 기질 (Src 유사체), 및 ATP 의 상호작용은 펩티드 기질의 포스포릴화를 유도한다. 바이오틴화 생성물은 스트렙타비딘 세파로오스 비드에 결합되어 있다. 모든 결합되어 있는, 방사표지된 생성물들은 신틸레이션 카운터로 검출된다.

검정 플레이트는 96-웰 폴리프로필렌 (Greiner) 및 96-웰 1.2 μm 친수성 PVDF 필터 플레이트 (Millipore) 이다. 본원에서 보고되는 농도는 최종 검정 농도이다: DMSO 중의 10 내지 100 μM 화합물 (Burdick and Jackson), 5 내지 10 nM Btk 효소 (His-태그됨, 전장), 30 μM 펩티드 기질 (Biotin-Aca-AAAEEIYGEI-NH2), 100 μM ATP (Sigma), 8 mM 이미다졸 (Sigma, pH 7.2), 8 mM 글리세롤-2-포스페이트 (Sigma), 200 μM EGTA (Roche Diagnostics), 1 mM MnCl₂ (Sigma), 20 mM MgCl₂ (Sigma), 0.1 mg/ ml BSA (Sigma), 2 mM DTT (Sigma), 1 μCi 33P ATP (Amersham), 20% 스트렙타비딘 세파로오스 비드 (Amersham), 50 mM EDTA (Gibco), 2 M NaCl (Gibco), 2 M NaCl w/ 1% 인산 (Gibco), microscint-20 (Perkin Elmer).

IC₅₀ 측정값은, 표준 96-웰 플레이트 검정 템플레이트로부터 제조된 데이터를 이용하여, 화합물마다 10 개의 데이터 포인트로부터 계산한다. 1 개의 대조군 화합물 및 7 개의 미지 저해제를 각각의 플레이트에서 시험하고, 각 플레이트는 2 회씩 가동했다. 일반적으로, 화합물들은 100 μM 로 출발하여 3 nM 로 종결하는 하프-로그 (half-log) 로 희석했다. 대조군 화합물은 스타우로스포린 (staurosporine) 이었다. 백그라운드 (Background) 는 펩티드 기질 부재 하에 카운트했다. 전체 활성은 펩티드 기질의 존재 하에 측정했다. 하기의 프로토콜을 Btk 저해 측정에 이용했다.

1) 시료 준비: 시험 화합물들을 검정 완충액 (이미다졸, 글리세롤-2-포스페이트, EGTA, MnCl₂, MgCl₂, BSA) 에서 하프-로그 증가율로 희석했다.

2) 비드 제조

a.) 비드를 500 g 에서 원심분리하여 헹굼

b.) 비드를 PBS 및 EDTA 를 이용하여 재건하여 20% 비드 슬러리를 제조함

3) 기질없이 반응 믹스를 예비인큐베이션하고 (검정 완충액, DTT, ATP, ³³P ATP), 기질 (검정 완충액, DTT, ATP, ³³P ATP, 펩티드 기질) 과 30℃ 에서 15 분간 혼합함.

4) 검정 시작을 위해, 효소 완충액 (이미다졸, 글리세롤-2-포스페이트, BSA) 중의 10 μL Btk 및 lOμL 의 시험 화합물을 10 분 동안 RT 에서 예비 인큐베이션함.

5) 기질의 부재 또는 존재 하에 30 μL 반응 혼합물을 Btk 및 화합물에 첨가함.

6) 50 μL 전체 검정 믹스를 30 분 동안 30℃ 에서 인큐베이션함.

7) 40 μL 의 검정물을 필터 플레이트 내 150 μL 비드 슬러리에 옮겨 반응을 중단함.

8) 다음 단계에 따라 30 분 후 필터 플레이트를 세척함

a. 3 x 250 μL NaCl

b. 3 x 1% 인산을 포함하는 250 μL NaCl

c. 1 x 250 μL H₂O

9) 플레이트를 1 h 동안 65℃ 에서 또는 밤새 RT 에서 건조시킴

10) 50 μL microscint-20 를 첨가하고, ³³P cpm 을 신틸레이션 카운터 상에서 계수함.

cpm 으로 된 미가공 데이터로부터 백분율 활성을 계산함

백분율 활성 = (시료 - bkg) / (전체 활성 - bkg) x 100

단일-부위 투여량 응답성 S 형 모델을 이용해, 백분율 활성으로부터 IC₅₀ 계산

y = A + ((B - A) / (1 + ((x / C)^D))))

x = 화합물 농도, y = % 활성, A = 최소값, B = 최대값, C = IC₅₀, D = I (기울기)

대표적인 결과들이 하기 표 II 에 있다:

표 II.

실시예 37:

B-세포 활성화의 저해 - 라모스 ( Remos ) 세포에서의 B 세포 FLIPR 검정

본 발명의 화합물에 의한 B-세포 활성화의 저해를, 항-IgM 자극 B 세포 응답성에 대한 시험 화합물의 유효성을 측정하여 증명했다.

B 세포 FLIPR 검정은 항-IgM 항체에 의한 자극으로부터 세포내 칼슘 증가의 잠재적 저해제의 유효성을 측정하는 세포 기재 기능적 방법이다. 라모스 세포 (인간 Burkitt's 림프구 세포주. ATCC-No. CRL-1596) 를 성장 배지 (하기 기재함) 에서 배양했다. 검정 하루 전, 라모스 세포를 새로운 성장 배지 (상기와 동일) 에 재현탁시키고, 조직 배양 플라스크에서 0.5 x 10⁶/mL 의 농도로 설정했다. 검정 당일, 세포를 계수하고, 조직 배양 플라스크에서 1μM FLUO-3AM(TefLabs 카탈로그 번호 0116, 무수 DMSO 및 10% 플루론산 중에 제조) 를 보충한 성장 배지 내에서 1 x 10⁶/mL 의 농도로 설정하고, 37℃ (4% CO₂) 에서 1 시간 동안 인큐베이션했다. 세포외 염료를 제거하기 위해, 세포를 원심분리 (5 분, 1000 rpm) 로 수집하고, FLIPR 완충액 (하기에 기재) 중에 1 x 10⁶ 세포/mL 로 재현탁시킨 후, 96-웰 폴리-D-라이신 코팅된 흑색/투명 플레이트 (BD 카탈로그 번호 356692) 에 웰 당 1 x 10⁵ 세포로 나누어 담았다. 시험 화합물을 100 μM 내지 0.03 μM (7 가지 농도, 하기에 기재) 범위의 다양한 농도로 첨가하고, 세포와 함께 30 분 동안 RT 에서 인큐베이션했다. 라모스 세포 Ca² ⁺ 신호전달을, 10 μg/mL 항-IgM (Southern Biotech, 카탈로그 번호 2020-01) 첨가로 자극하고, FLIPR (Molecular Devices, 48O nM 에서 여기하는 아르곤 레이저를 이용하는 CCD 카메라를 이용해 96 웰 플레이트의 이미지를 캡춰함) 상에서 측정했다.

배지/완충액:

성장 배지: L-글루타민이 있는 RPMI 1640 (Invitrogen, 카탈로그 번호 61870-010), 10%

우태아 혈청 (FBS, Summit Biotechnology 카탈로그 번호 FP-100-05); 1 mM 나트륨 피루베이트 (Invitrogen 카탈로그 번호 11360-070).

FLIPR 완충액: HBSS (Invitrogen, 카탈로그 번호 141175-079), 2 mM CaCl₂ (Sigma 카탈로그 번호 C-4901), HEPES (Invitrogen, 카탈로그 번호 15630-080), 2.5 mM Probenecid (Sigma, 카탈로그 번호 P-8761), 0.1% BSA (Sigma, 카탈로그 번호 A-7906), 11 mM 글루코오스 (Sigma, 카탈로그 번호G-7528)

화합물 희석 상세사항:

최고 최종 검정 농도 100 μM 를 달성하기 위해서는, 24 μL 의 10 mM 화합물 원액 용액 (DMSO 중에 제조) 을 직접 576 μL 의 FLIPR 완충액에 첨가했다. 시험 화합물을 FLIPR 완충액 (Biomek 2000 로봇식 피펫) 에 첨가하여, 하기의 희석안을 결과로 제공했다: 비히클, 1.00 × 10^-4 M, 1.00 × 10^-5, 3.16 × 10^-6, 1.00 × 10^-6, 3.16 × 10^-7, 1.00 × 10^-7, 3.16 × 10^-8.

칼슘의 세포내 증가는 최대-최소 통계 (max - min statistic) (Molecular Devices FLIPR 컨트롤 및 통계 추출 소프트웨어를 이용해, 자극 항체의 첨가에 의해 초래된 정점으로부터 나머지 기저선을 차감) 를 이용하여 보고했다. IC₅₀ 는 비선형 곡선 피트 (GraphPad Prism software) 를 이용하여 결정했다.

실시예 38: 마우스 생체내 콜라겐-유도성 관절염 ( mCIA )

제 0 일에, 마우스에 완전 프루인트 (Complete Freund's) 아쥬반트 (CFA) 중의 타입 II 콜라겐의 에멀전으로 꼬리 시작점 또는 등의 몇개 지점에 (i.d.) 주사했다. 콜라겐 면역화에 후속하여, 동물들에서 21 내지 35 일 정도에 관절염이 발생했다. 관절염의 발병은 제 21 일째의 불완전 프루인트 (Incomplete Freund's) 아쥬반트 (IFA; i.d.) 중의 콜라겐의 전신적 투여로 동기화 (부스팅) 되었다. 동물들은, 부스팅에 대한 시그널인 임의의 경미한 관절염의 발생에 대해 제 20 일 이후 매일 검사했다 (1 또는 2 의 스코어; 하기 스코어 설명 참조). 부스팅 후, 마우스는 예정된 시간 및 투여 빈도에 대해 매일 (QD) 또는 매일 2 회 (BID) 후보 치료제를 이용해 스코어링 및 투여 (일반적으로 2 내지 3 주) 했다.

실시예 39: 래트 생체내 콜라겐-유도성 관절염 ( rCIA )

제 0 일에, 래트에, 불완전 프루인트 아쥬반트 (IFA) 중의 소 타입 II 콜라겐의 에멀전을 이용해, 등의 여러 지점에 피하 주사 (i.d.) 로 주사했다. 콜라겐 에멀전의 부스터 주사는 제 7 일 정도에, (i.d.) 로 꼬리의 시작점 또는 등의 다른 부위에 제공했다. 관절염은 일반적으로 최초 콜라겐 주사 후 12 내지 14 일째에 관찰되었다. 동물들은 하기 (관절염의 평가) 에 기재된 바와 같이 제 14 일 이래로 관절염 발생에 대해 평가했다. 동물들에게는 2 차적 공격 시험에 시작하여 예정된 시간 (일반적으로 2 내지 3 주) 동안 매일 (QD) 또는 매일 2 회 (BID) 의 투여 빈도로 예방적 방식으로 후보 치료제를 투여했다.

실시예 40: 관절염 평가:

두가지 모델 (실시예 38 및 39) 에서, 발 및 사지 관절의 발생한 염증을 하기 기재된 기준에 따라 4 개 발의 평가를 수반하는 스코어링 시스템을 이용하여 정량화했다:

스코어링: 1= 발 또는 발가락 하나의 부종 및/또는 홍조.

2= 2 개 이상 관절에서의 부종.

3= 관련된 2 개 이상 관절과 함께 발의 전체적 부종.

4= 전체 발 및 발가락들의 심각한 관절염.

평가는 기저선 측정을 위해 제 0 일에 했고, 실험 종결 때까지 첫번째 싸인 또는 매 주 3 회까지 부종시 다시 개시했다. 각 마우스에 대한 관절염 지수는 개별 발의 4 개 스코어를 합해 수득하여, 동물마다 16 의 최대 스코어를 수득했다.

실시예 41: 래트 생체내 천식 모델

수컷 Brown-Norway 래트를 0.2 ml alum 중의 100 μg 의 OA (오브알부민으로 i.p. 로 3 주간 매 주 1 회씩 감작시켰다 (제 0, 7 및 14 일). 제 21 일 (최종 감작 후 1 주) 에, 래트를 비히클 또는 화합물 제형물로 피하 q.d. 투여하고, 0.5 시간 후 OA 에어로졸 공격 (45 분간 1% OA) 하고, 공격 4 또는 24 시간 후 종결했다. 희생시, 혈청 및 혈장을 각각 혈청학적 분석 및 PK 를 위해 모든 동물로부터 수집했다. 기관내 캐뉼라 (tracheal cannula) 를 삽입하고, 폐를 PBS 로 3 회 세척했다. BAL 액을 전체 백혈구 수 및 감별 백혈구 카운트 (differential leukocyte count) 에 대해 분석했다. 세포 분취액 (20 내지 100 μl) 중의 전체 백혈구 수를 Coulter Counter 로 측정했다. 감별 백혈구 카운트를 위해, 50 내지 200 μl 의 시료를 Cytospin 에서 원심분리하고, 슬라이드를 Diff-Quik 로 염색했다. 단핵구, 호산구, 호중구 및 림프구를 표준 형태학적 기준을 이용하여 광학 현미경 하에 계수하고, 백분율로 나타냈다. Btk 의 대표적인 저해제는, OA 감작 및 공격 래트의 BAL 에서 대조군 수준에 비해 감소된 전체 백혈구 계수를 나타냈다.

실시예 42: 약제학적 조성물

경구 투여용 조성물 (A)

성분들을 혼합하고, 각각 약 100 mg 을 포함하는 캡슐로 조제했다; 1 개 캡슐은 대략 전체 1 일 투여량을 포함했다.

경구 투여용 조성물 (B)

성분들을 조합하고 메탄올과 같은 용매를 이용하여 과립화했다. 이어서, 제형물을 적당한 타정기를 이용하여 정제 (약 20 mg 의 활성 화합물 포함) 로 제조했다.

경구 투여용 조성물 (C)

성분들을 혼합하여 경구 투여용 현탁액을 제조했다.

비경구 제형물 (D)

활성 성분을 주사용수 일부분에 용해시킨다. 이어서, 충분한 양의 나트륨 클로라이드를 교반과 함께 첨가하여 용액을 등장성으로 만든다. 상기 용액을 주사용수 잔부로 중량에 도달하도록 하고, 0.2 마이크론 멤브레인 필터를 통해 여과하고, 멸균 조건 하에 포장했다.

좌제 제형물 (E)

성분들을 함께 용융시키고, 스팀욕에서 혼합하고, 2.5 g 총 중량을 포함하는 성형틀에 붓는다.

국소 제형물 (F)

상기 본 발명은 명백함 및 이해를 목적으로 설명 및 실시예를 수단으로 더욱 상세하게 기재되었다. 당업자에게는 변화 및 개질이 첨부된 특허청구범위의 범위 내에서 실행가능하다는 것이 자명할 것이다. 따라서, 상기 기술한 내용은 설명을 의도로 하는 것일 뿐 제한을 의도로 하지는 않는다는 것이 이해될 것이다. 따라서, 본 발명의 범위는 상기 기술한 내용을 참고로 하여 결정되는 것이 아니라, 하기 첨부되는 특허청구범위 및 상기 청구범위가 표방하는 것의 전체 등가물을 참조하여 결정되어야 한다.

본원에 인용된 모든 특허, 특허 출원 및 공보는, 본원에 그의 전부가, 각 개별 특허, 특허 출원 또는 공보가 개별적으로 언급된 것과 마찬가지로 참고문헌으로 포함된다.

Claims

화학식 I, II, III 또는 IV 의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 그의 염:

[식 중:
R 은 H, -R¹, -R¹-R²-R³, -R¹-R³ 또는 -R²-R³ 이고; 여기서
R¹ 은 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이고, R^1' 로 임의치환되고; 여기서 R^1' 은 저급 알킬, 히드록시, 저급 히드록시알킬, 저급 알콕시, 할로겐, 니트로, 아미노, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 시아노 또는 저급 할로알킬이고;
R² 는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)N(R^2'), -(CH₂)_q 또는 -S(=O)₂ 이고; 여기서 R^2' 는 H 또는 저급 알킬이고; q 는 1, 2 또는 3 이고;
R³ 은 H 또는 R⁴ 이고; 여기서 R⁴ 는 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 알킬, 시클로알킬, 알킬 시클로알킬, 시클로알킬 알킬, 헤테로시클로알킬, 알킬 헤테로시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬 알킬이고, 하나 이상의 저급 알킬, 히드록시, 옥소, 저급 히드록시알킬, 저급 알콕시, 할로겐, 니트로, 아미노, 시아노, 저급 알킬술포닐 또는 저급 할로알킬로 임의치환되고;
X 는 CH 또는 N 이고;
Y¹ 는 H 또는 저급 알킬이고;
Y² 는 Y^2a 또는 Y^2b 이고; 여기서, Y^2a 는 H 또는 할로겐이고; Y^2b 는, 하나 이상의 Y^2b' 로 임의치환된 저급 알킬이고; Y^2b' 는 히드록시, 저급 알콕시 또는 할로겐이고;
각각의 Y^2' 는 독립적으로 Y^2a' 또는 Y^2b' 이고; 여기서, Y^2a' 는 할로겐이고; Y^2b' 는 하나 이상의 Y^2'b' 로 임의치환된 저급 알킬이고; 여기서, Y^2'b' 는 히드록시, 저급 알콕시 또는 할로겐이고;
n 은 0, 1, 2 또는 3 이고;
Y³ 은 H, 할로겐, 또는 저급 알킬이고, 여기서 저급 알킬은 히드록시, 저급 알콕시, 아미노 및 할로겐으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의치환되고;
m 은 0 또는 1 이고;
Y⁴ 는 Y^4a, Y^4b, Y^4c 또는 Y^4d 이고; 여기서,
Y^4a 는 H 또는 할로겐이고;
Y^4b 는, 저급 할로알킬, 할로겐, 히드록시, 아미노, 시아노 및 저급 알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의치환된 저급 알킬이고;
Y^4c 는, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 히드록시, 아미노 및 저급 알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의치환된 저급 시클로알킬이고;
Y^4d 는 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 아미노임].
제 1 항에 있어서, Y¹ 가 메틸인 화합물.
제 1 항에 있어서, X 가 CH 인 화합물.
제 1 항에 있어서, m 이 0 인 화합물.
제 1 항에 있어서, n 이 0 인 화합물.
제 1 항에 있어서, Y² 가 메틸 또는 히드록시메틸인 화합물.
제 1 항에 있어서, Y⁴ 가 할로겐, 저급 알킬; 또는 Y⁵ 가 H, 할로겐, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (a)
의 기; 또는 Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (b)
의 기; 또는 Y⁵ 및 Y⁶ 이 독립적으로 H 또는 저급 알킬인 화학식 (c)
의 기; 또는 Y⁵ 및 Y⁶ 가 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 저급 할로알킬인 화학식 (d)
의 기인 화합물.
제 1 항에 있어서, R 이 -R¹-R²-R³ 이고; 여기서, R¹ 이 페닐 또는 피리딜이고; R² 이 -C(=O) 이고; R³ 이 R⁴ 이고; R⁴ 가 하나 이상의 저급 알킬로 임의치환된 모르폴린 또는 피페라진인 화합물.
치료유효량의 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 Btk 저해제 화합물을, 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 염증 및/또는 자가면역 상태, 예를 들어 관절염의 치료, 또는 B-세포 증식 저해 방법.
하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합되어 있는, 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 Btk 저해제 화합물을 함유하는 약제학적 조성물.
염증 및/또는 자가면역 상태의 치료용 의약 제조에서의 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항의 화학식 I 의 화합물의 용도.
상기 기재된 발명.