KR20160144501A - L. 류테리 ler03 및/또는 l. 살리바리우스 ls06을 포함하는 항-종양 화학요법, 백혈병 치료 또는 보조 요법을 받는 개체에서 바이러스 또는 박테리아 감염을 치료하거나 예방하는데 사용하기 위한 조성물 - Google Patents
L. 류테리 ler03 및/또는 l. 살리바리우스 ls06을 포함하는 항-종양 화학요법, 백혈병 치료 또는 보조 요법을 받는 개체에서 바이러스 또는 박테리아 감염을 치료하거나 예방하는데 사용하기 위한 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료에 대한 보조 요법으로 사용하기 위한 조성물에 관한 것이다. 상기 조성물은 전염증성 사이토카인(Th1) 인터페론 INF-감마(이러한 사이토카인은 현저한 항바이러스 및/또는 항균 활성을 나타냄)의 생성을 강하게 자극할 수 있는 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879의 균주, 및/또는 수지상 세포(수지상 세포는 현저한 항바이러스 및/또는 항균 활성을 나타냄) 생성을 강하게 자극할 수 있는 박테리아 균주 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037을 포함하거나, 바람직하게는 이들로 구성되는 혼합물로 구성된다. 또한, 상기 조성물은 섭취시 박테리아 엑소폴리사카라이드 EPS를 생성시킬 수 있는 박테리아 균주; 및/또는 식물 다당류, 예를 들어, 타라 검(tara gum); 및/또는 알로에 아르보레센스 겔; 및/또는 겔화제, 예를 들어, 소듐 알기네이트 및/또는 틴달화된 박테리아 세포로 내재화되는 고도로 생물 이용가능한 아연의 화합물 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
Description
본 발명은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료에 대한 보조 요법으로 사용하기 위한 조성물에 관한 것이다. 상기 조성물은 전염증성 사이토카인(Th1) 인터페론 INF-감마(이러한 사이토카인은 현저한 항바이러스 및/또는 항균 활성을 나타냄)의 생성을 강하게 자극할 수 있는 박테리아 락토바실러스 류테리(Lactobacillus reuteri) LRE 03 DSM 23879의 균주, 및/또는 수지상 세포(수지상 세포는 현저한 항바이러스 및/또는 항균 활성을 나타냄) 생성을 강하게 자극할 수 있는 박테리아 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius) LS06 DSM 26037의 균주를 포함하거나, 바람직하게는 이들로 구성되는 혼합물로 구성된다. 또한, 상기 조성물은 섭취시 박테리아 엑소폴리사카라이드 EPS를 생성시킬 수 있는 박테리아 균주; 및/또는 식물 다당류, 예를 들어, 타라 검(tara gum); 및/또는 알로에 아르보레센스(Aloe arborescens) 겔; 및/또는 겔화제, 예를 들어, 소듐 알기네이트 및/또는 틴달화된 박테리아 세포로 내재화되는 고도로 생물 이용 가능한 아연의 화합물 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
종양학에 관하여, 현재의 의학 요법은 화학요법, 내분비 요법, 면역 반응 개질제를 이용한 치료 및 분자-표적화 약물을 이용한 치료를 포함하는 것으로 공지되어 있다. 항종양 화학요법의 주요 목적은 어떤 세포 주기 단계에서든 신생물 세포를 사멸시키고, 따라서 원발성 종양 및 전이 종괴 둘 모두를 감소시키는 것이다.
항종양 화학요법 치료가 면역계 활성을 감소시키고, 손상된 면역계가 바이러스 및 박테리아 감염에 대해 유기체를 보호할 수 없는 것이 공지되어 있다.
또한, 화학요법(chemo)이 주로 종양에 영향을 미치나, 불행하게도, 이는 또한 건강한 조직, 특히 신속한 증식 및 전환을 갖는 건강한 조직, 예를 들어, 식도, 위 및 장 점막에 대한 부작용을 야기시켜, 점막염, 구역, 구토, 설사, 영양 흡수장애 및 이에 따른 영양실조를 발생시키는 것이 공지되어 있다.
따라서, 모든 화학요법의 공통 분모는 면역억제를 차례로 야기시키는 골수 독성 및 주로 그람-음성 박테리아 및 진균, 예를 들어, 칸디다(Candida)에 의해 야기되는 결과적인 감염, 위장 상피 독성 및 장 미생물무리 독성(화학요법 항생제)이다.
보조 요법을 확립시킴으로써 화학요법의 부작용을 중화시킬 수 있는(물론, 특정 범위 내에서) 동반 요법이 없이는 효과적인 화학요법 용량의 투여가 가능하지 않을 것이다.
따라서, 화학요법 치료에 전형적인 부작용을 감소시킬 수 있는 자연적이고 내성이 좋은 해법을 갖는 것이 바람직할 것이다.
이러한 이유로, 종양의 치료에 이용되는 화학요법의 증상 및 부작용, 특히 화학요법 치료 동안 일반적으로 영향을 받는 식도, 위 및 장 점막에 대한 손상을 예방하고/하거나 감소시키기 위해 보조 요법을 갖는 것이 여전히 필요하다. 따라서, 점막, 예를 들어, 식도 점막, 위 점막 및 장 점막의 적합한 보호 및 방어를 갖는 것이 필수적이다.
또한, 면역계의 효능을 회복시키기 위해 면역계를 자극(면역자극)시킴으로써 면역계에 대해 작용할 수 있는 화학요법에 대한 보조 요법을 갖는 것이 여전히 필요한데, 이는 화학요법이 박테리아 및 바이러스에 대한 신체의 감수성을 발생시키는 면역계 효능의 감소를 수반하여 박테리아 및 바이러스 감염의 발생을 야기시키기 때문이다.
다양한 종에 속하는 박테리아 균주의 광범위한 그룹에 대한 장기간의 집중적인 연구 활동 후, 본 출원인은 상기 언급된 필요를 충족시킬 수 있는 특정 박테리아 균주를 확인하고 선택하였다.
본 발명의 목적은 하기와 같다:
- 부다페스트 협약하에서 DSMZ - 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 젤쿨투렌 게엠베하(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH)에 Probiotical SpA에 의해 2010년 8월 5일에 기탁된 수탁번호 DSM 23879를 갖는 락토바실러스 류테리 LRE03으로 확인되는 락토바실러스 류테리 종에 속하는 박테리아 균주, 및/또는
- 부다페스트 협약하에서 DSMZ - 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 젤쿨투렌 게엠베하에 Probiotical SpA에 의해 2012년 6월 6일에 기탁된 수탁번호 DSM 26037을 갖는 락토바실러스 살리바리우스 LS06으로 확인되는 락토바실러스 살리바리우스 종에 속하는 박테리아 균주.
본 출원인은 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주가 전염증성 사이토카인(Th1) 인터페론 INF-감마의 생성을 자극하는 이의 입증되고 놀라운 능력(실험 부분 참조)으로 인해 현저한 항바이러스 및/또는 항균 활성을 나타내는 것을 발견하였다. 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주는 인터페론 감마 IFN-감마의 내인성 생성에 대한 놀라운 면역자극 활성을 나타낸다. 본 출원인에 의해 선택된 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주는 전염증성 사이토카인(Th1) 인터페론 INF-감마의 자극을 통해 항미생물 및 전염증성 작용을 발휘하는 면역계의 점막 수준에서의 활성화로 인해 놀라운 면역조절 활성을 나타낸다. 내인성 사이토카인 생성은 외인성 사이토카인의 경우에서와 같은 사이토카인의 주입 투여와 대조적으로 독성을 야기시키지 않는다.
본 출원인은 또한 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주가 수지상 세포 생성을 자극하는 이의 입증되고 놀라운 능력(실험 부분 참조)으로 인해 현저한 항바이러스 및/또는 항균 활성을 나타내는 것을 발견하였다. 수지상 세포는 위험한 미생물, 예를 들어, 바이러스 및 박테리아의 외부 공격으로부터 유기체를 보호하는데 있어서 면역계를 돕는다.
최종적으로, 본 출원인은 부다페스트 협약하에서 DSMZ - 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 젤쿨투렌 게엠베하에 Anidral S.r.l. Company(현재, Probiotical S.p.A)에 의해 2007년 3월 20일에 기탁된 수탁번호 DSM 19188을 갖는 락토바실러스 퍼먼툼(Lactobacillus fermentum) LF11로 확인되는 락토바실러스 퍼먼툼 종에 속하는 박테리아 균주가 결과로서 발생하는 만성 장내세균 불균형(dysbiosis) 상태로 인해 화학요법 약물로 치료된 환자에서 종종 발생하는 칸디다 감염의 발생, 지속 또는 증식에 대해, 특히 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 칸디다 크루세이(Candida krusei), 칸디다 글라브라타(Candida glabrata) 및 칸디다 파라프실로시스(Candida parapsilosis) 종에 대해 불리한 장 환경을 발생시키고 유지시킬 수 있는 것을 발견하였다. 시험관내 억제 데이터는 균주 L. 퍼먼툼 LF11 DSM19188의 작용 메커니즘이 유기산이 아닌 특정 분자, 예를 들어, 박테리오신, 세포외 단백질 또는 과산화수소를 적어도 부분적으로 기초로 하는 것을 강하게 암시한다.
박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주, 및/또는 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주, 및/또는 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성되는 박테리아의 혼합물(i)이 본 발명의 목적이다.
한 구체예에서, 상기 혼합물(i)은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 항바이러스제 및/또는 항균제로 사용하기 위해 또는 대안적으로 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 위, 식도 및 장 점막의 보호에서 사용하기 위해,
- 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주, 또는
- 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주, 또는
- 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성된다.
또 다른 구체예에서, 박테리아의 혼합물(i)은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 항바이러스제 및/또는 항균제로 사용하기 위해 또는 대안적으로 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 위, 식도 및 장 점막의 보호에서 사용하기 위해,
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주 및 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주, 또는
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주, 또는
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성된다.
또 다른 구체예에서, 박테리아의 혼합물(i)은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 항바이러스제 및/또는 항균제로 사용하기 위해 또는 대안적으로 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 위, 식도 및 장 점막의 보호에서 사용하기 위해, 3:2:1, 3:1:1, 2:1:1, 2:2:1, 1:1:1 중 하나로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주, 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성된다.
박테리아의 혼합물(i)은 1x108 UFC/혼합물 g 내지 1x1012 UFC/혼합물 g, 바람직하게는 1x109 UFC/혼합물 g 내지 1x1011 UFC/혼합물 g으로 포함되는 박테리아 세포 농도를 갖는다. 본 발명의 상황 내에서, 모든 상기 기재된 혼합물은 간결함을 위해 "본 발명의 박테리아의 혼합물 또는 박테리아의 혼합물들"로 언급된다.
간결함을 위해 "본 발명의 조성물 또는 조성물들"로 이하 언급되는 디렉티브 93/42/EEC 규정에 따른 물질로 의미되는 약학적 조성물 또는 식품 조성물 또는 보충 제품 조성물 또는 의료 장치 조성물이 본 발명의 또 다른 목적이며, 상기 조성물은 하기를 포함하거나, 대안적으로 하기로 구성된다:
(i) 상기 기재된 바와 같은 본 발명의 박테리아의 혼합물, 및/또는
(ii) 박테리아 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) ST10 DSM 25246의 균주 및 타라 검(tara gum)(식물 다당류)(상기 균주는 섭취시 제자리에서 엑소폴리사카라이드(EPS)를 생성시킬 수 있고, 이는 타라 검의 존재하에서 소위 "점막접착성 겔화 복합체"를 형성함), 및/또는
(iii) 검, 바람직하게는 알기네이트, 또는 이의 유도체, 및/또는 겔, 바람직하게는 알로에 겔, 또는 이의 유도체를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성되는 혼합물, 및/또는
(iv) 고도로 동화 가능한 아연의 공급원, 및/또는
(v) 신체에 의해 허용 가능한 하나 이상의 식품 등급 또는 약학 등급의 부형제 및/또는 첨가제 및/또는 코-포뮬런트(co-formulant).
본 발명의 한 목적인 한 구체예에서, 본 발명의 조성물은 (i) 본 발명의 박테리아의 혼합물 및 (v) 신체에 의해 허용 가능한 하나 이상의 식품 등급 또는 약학 등급의 부형제 및/또는 첨가제 및/또는 코-포뮬런트를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성되며, 상기 조성물은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 항바이러스제 및/또는 항균제로 사용하기 위하거나, 대안적으로 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 위, 식도 및 장 점막의 보호에서 사용하기 위한 것이다.
본 발명의 한 목적인 또 다른 구체예에서, 본 발명의 조성물은 (i) 본 발명의 박테리아의 혼합물, (ii) 박테리아 스트렙토코커스 써모필러스 ST10 DSM 25246의 균주 및 타라 검(식물 다당류)(상기 균주는 섭취시 제자리에서 엑소폴리사카라이드(EPS)를 생성시킬 수 있고, 이는 타라 검의 존재하에서 소위 "점막접착성 겔화 복합체"를 형성함) 및 (v) 신체에 의해 허용 가능한 하나 이상의 식품 등급 또는 약학 등급의 부형제 및/또는 첨가제 및/또는 코-포뮬런트를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성되며, 상기 조성물은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 항바이러스제 및/또는 항균제로 사용하기 위하거나, 대안적으로 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 위, 식도 및 장 점막의 보호에서 사용하기 위한 것이다. 상기 점막접착성 겔화 복합체는 위장관 전체에 걸쳐 기계적 장벽 효과를 제공할 수 있다. 박테리아 엑소폴리사카라이드(EPS)는 박테리아 스트렙토코커스 써모필러스 ST10 DSM 25246의 균주에 의해 제자리에서 생성되는 엑소폴리사카라이드이다. 박테리아 스트렙토코커스 써모필러스 ST10 DSM 25246의 균주는 부다페스트 협약하에서 DSMZ - 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 젤쿨투렌 게엠베하에 Probiotical S.p.A에 의해 2011년 9월 19일에 기탁되었다. 본 발명의 조성물은 조성물 g 당 1x108 내지 1X1012개의 스트렙토코커스 써모필러스 ST10 DSM 25246의 살아 있는 세포, 바람직하게는 조성물 g 당 1x109 내지 1x1011개의 스트렙토코커스 써모필러스 ST10 DSM 25246의 살아 있는 세포를 포함한다.
본 발명의 한 목적인 또 다른 구체예에서, 본 발명의 조성물은 (i) 본 발명의 박테리아의 혼합물, (ii) 박테리아 스트렙토코커스 써모필러스 ST10 DSM 25246의 균주 및 타라 검(식물 다당류)(상기 균주는 섭취시 제자리에서 엑소폴리사카라이드(EPS)를 생성시킬 수 있고, 이는 타라 검의 존재하에서 소위 "점막접착성 겔화 복합체"를 형성함), (iii) 검, 바람직하게는 알기네이트, 또는 이의 유도체 및/또는 겔, 바람직하게는 알로에 겔, 또는 이의 유도체를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성되는 혼합물 및 (v) 신체에 의해 허용 가능한 하나 이상의 식품 등급 또는 약학 등급의 부형제 및/또는 첨가제 및/또는 코-포뮬런트를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성되며, 상기 조성물은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 항바이러스제 및/또는 항균제로 사용하기 위하거나, 대안적으로 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 위, 식도 및 장 점막의 보호에서 사용하기 위한 것이다. 상기 혼합물 (iii)은 검, 바람직하게는 알기네이트, 또는 이의 염 및/또는 겔, 바람직하게는 알로에 겔, 또는 이의 유도체를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성된다. 알기네이트, 또는 이의 유도체는 바람직하게는 소듐 알기네이트이다. 알로에 생성물, 또는 이의 유도체는 바람직하게는 알로에 아르보레센스(Aloe arborescens), 바람직하게는 동결 건조된 형태의 알로에 아르보레센스이다. 알로에 아르보레센스는 바람직하게는 동결 건조된 형태이다. 한 구체예에서, 본 발명의 조성물은 1:50(알기네이트:알로에) 내지 50:1, 바람직하게는 1:30(알기네이트:알로에) 내지 30:1로 포함되는 중량비의 소듐 알기네이트 및 동결 건조된 알로에 아르보레센스를 포함한다.
또한, 본 출원인은 면역계(IS) 활성화가 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주 및/또는 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주에 의해 촉진된 작용에 더하여 매우 고도로 생체 이용가능한 아연을 통해 또한 획득될 수 있는 것을 발견하였다. 매우 높은 생체이용률은 아연이 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis) 종에 속하는 박테리아 균주의 틴달화된 박테리아 세포로 내재화된 아연의 형태라는 사실로 인한 것이며, 바람직하게는 본 출원인에 의해 선택된 균주는 참조로서 본원에 포함되는 유럽 특허 출원 번호 08789404호의 목적인 2005년 12월 23일에 DSMZ에 기탁된 박테리아 비피도박테리움 락티스 Bb 1 DSM 17850의 균주이다.
기본적으로, 본 출원인은 틴달화된 세포(비활성화된 세포)로 내재화된 고도로 생체 이용가능한 아연이 면역계(IS), 특히 비독성의 내인성 사이토카인, 예를 들어, 인터페론-감마를 생성하는 T-림프구의 생성을 담당하는 가슴샘을 활성화시킬 수 있는 것을 발견하였다.
본 발명의 한 목적인 또 다른 구체예에서, 본 발명의 조성물은 (i) 본 발명의 혼합물, (ii) 박테리아 스트렙토코커스 써모필러스 ST10 DSM 25246의 균주 및 타라 검(식물 다당류)(상기 균주는 섭취시 제자리에서 엑소폴리사카라이드(EPS)를 생성시킬 수 있고, 이는 타라 검의 존재하에서 소위 "점막접착성 겔화 복합체"를 형성함), (iii) 검, 바람직하게는 알기네이트, 또는 이의 유도체, 및/또는 겔, 바람직하게는 알로에 겔, 또는 이의 유도체를 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성되는 혼합물, (iv) 비피도박테리움 락티스 종에 속하는 박테리아 균주의 틴달화된 박테리아 세포로 내재화된 아연 형태의 고도로 동화 가능하고 생체 이용가능한 아연의 공급원(상기 균주는 바람직하게는 박테리아 비피도박테리움 락티스 Bb 1 DSM 17850의 균주임) 및 (v) 신체에 의해 허용 가능한 하나 이상의 식품 등급 또는 약학 등급의 첨가물 및/또는 코-포뮬런트 및/또는 제형화 공학 성분을 포함하거나, 대안적으로 이들로 구성되며, 상기 조성물은 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 항바이러스제 및/또는 항균제로 사용하기 위하거나, 대안적으로 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 위, 식도 및 장 점막의 보호에서 사용하기 위한 것이다. 상기 고도로 동화 가능하고 생체 이용가능한 아연의 공급원(iv)은 균주 비피도박테리움 락티스 Bb1 DSM 17850의 박테리아 틴달화된 생성물(BioMan S.r.l. Company(Italy)에 의해 DSMZ - 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 젤쿨투렌 게엠베하에 2005년 12월 23일에 기탁된 ProbioZinc®)의 형태의 유기 아연으로 제공된다. 균주 비피도박테리움 아니말리스 아종 락티스(Bifidobacterium animalis ssp. lactis) Bb1 DSM 17850의 박테리아 틴달화된 생성물은 10 내지 50 mg/조성물 g, 바람직하게는 20 mg/조성물 g으로 포함되는 양으로 존재한다.
본 발명의 상기 언급된 조성물 모두는 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료에 대한 보조 요법으로 사용하기 위해 효과적으로 적용 가능하다. 또한, 본 발명의 조성물은 종양의 치료에 이용되는 화학요법에 통상적인 증상 및 부작용, 특히 화학요법 치료 동안 일반적으로 영향을 받는 식도, 위 및 장 점막에 야기되는 손상을 예방하고/하거나 감소시키기 위해 보조 요법으로서 사용하는데 효과적으로 적용 가능하다. 최종적으로, 본 발명의 조성물은 면역계에 대한 보조 요법으로서 사용하기 위해 효과적으로 적용되는데, 이는 화학요법이 박테리아 및 바이러스에 대한 신체의 감수성을 발생시키는 면역계 효능의 감소를 수반하여 박테리아 및 바이러스 감염의 발생을 야기시키기 때문이다.
궁극적으로, 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제 또는 캡슐로서의 약학적 형태의 제조를 가능케 하기 위한 식품 등급 또는 약학 등급의 부형제 및/또는 첨가제 및/또는 코-포뮬런트를 포함한다.
본 발명의 조성물은 조성물 g 당 1x108 내지 1x1012의 살아 있는 박테리아 세포 UFC, 바람직하게는 조성물 g 당 1x109 내지 1x1011의 살아 있는 박테리아 세포 UFC를 포함한다. 본 발명의 조성물은 바람직하게는 4-12주 동안 매일 1-2회 투여되도록 권장된다.
본 발명의 조성물은 겔화 및 점막접착성 특성으로 인해 섭취 몇분 이내에 요변 특성에 의해 하이드로겔을 형성할 수 있고, 이에 의해 일차 위장관 내에서 기관의 점막에 대한 병원성 미생물 부착에 대한 기계적 장벽 작용을 발생시키고, 이에 따라 장의 벽을 통한 미생물의 전위 및 면역계 기능의 손상이 발생하는 경우에 기초가 되는 결과로서 발생하는 인접 기관 감염의 위험을 감소시키는 적합한 양의 타라 검으로 구성된다. 상기 장벽 효과는 미생물 스트렙토코커스 써모필러스 ST10에 의해 제자리에서 생성되고, 이에 의해 자가 조절되는 기계적 메커니즘만을 통해 주위 환경의 점도를 증가시키는 엑소폴리사카라이드(EPS)의 동시 존재에 의해 달성되고, 위장관 전체에 있게 된다. 상기 박테리움의 섭취는 인간 장 내에 겔화 분자의 공급원을 전달하며, 이에 따라 타라 검에 대한 충분히 보충적인 작용을 발휘한다.
상기 언급된 점막접착성 겔화 복합체는 고려되어야 하는 혁신적인 특성을 가지며, 식물 타라 검은 이의 장 통과 동안 상재 미생물무리에 의해 단계적으로 분해되고, 이에 의해 이의 기계적 방해의 겔화 분말이 점진적으로 감소된다. 식물 검 작용의 단계적 감소는 주로 회장 및 결장에서 작용하는 박테리아 균주 스트렙토코커스 써모필러스 ST10 DSM 25246에 의해 제자리에서 생성되는 엑소폴리사카라이드(EPS)의 장내강 내에서의 방출의 점진적 증가에 의해 효과적으로 상쇄된다.
따라서, 타라 검 및 제자리에서 생성되는 엑소폴리사카라이드(EPS)의 상승작용적 조합은 위장관 전체에 걸친 겔화 분자의 존재를 보장하고, 생성물의 기계적 장벽 작용을 최대화하고 최적화시킨다. 따라서, 기관의 내강 내의 친수성 겔의 존재, 생성 및 유지는 식물 검의 작용이 최대인 첫번째 영역 및 제자리에서 생성되는 엑소폴리사카라이드(EPS)의 작용이 최대인 두번째 영역에 의해 처음으로 실제로 완전한 것으로 간주될 수 있다.
겔화 활성을 갖는 2개의 성분인 동결 건조된 알로에 아르보레센스(Alagel™)(예를 들어, 1,5 그램/용량) 및 소듐 알기네이트(예를 들어, 50 mg/용량)의 존재로 인해, 본 발명의 조성물은 식도, 위 및 장 점막을 보호하기 위한 기계적 장벽 효과를 보장할 수 있다. 또한, 소듐 알기네이트는 위식도 역류에 대한 기계적 방해 활성, 뿐만 아니라 식도염 및 위염에 대한 물리적 보호 활성을 갖는다. 이런 식으로, 알로에 아르보레센스 및 소듐 알기네이트의 조합은 종양 질병을 갖는 개체에서 화학요법 치료의 부작용을 더욱 내성이 있게 만들 수 있다. 또한, 식도, 위 및 장 점막의 물리적 보호 작용 외에 알로에 아르보레센스 생성물은 식도 및 위장 수준 둘 모두에서 특히 편모 미생물에 관하여 물리적-기계적 방해를 통해 병원성 균주의 부착 능력을 감소시킬 수 있다. 알로에 생성물은 또한 위 및 장 투과성을 감소시킴으로써 상기 기관의 생리학적 장벽 효과의 회복에 기여할 수 있고, 장으로부터 박테리아 전위의 위험을 낮추기 위해 타라 검 및 엑소폴리사카라이드(EPS)와 상승작용적으로 작용할 수 있다. 또한, 알로에 아르보레센스는 항염증 활성을 가지며, 따라서 점막 수준에서 추가의 보호를 제공한다.
전체 작용 메커니즘에 비추어, 본 발명의 조성물은 종양 질병을 갖는 개체에서 화학요법 치료의 부작용, 특히 박테리아 감염에 대해 더욱 내성이 되도록 할 수 있다.
또한, 하기를 포함하거나 대안적으로 하기로 구성되는 본 발명의 혼합물(i)(1x108 UFC/혼합물 g 내지 1x1012 UFC/혼합물 g, 바람직하게는 1x109 UFC/혼합물 g 내지 1x1011 UFC/혼합물 g으로 포함되는 박테리아 세포 농도를 가짐)의 본 발명의 조성물 내의 존재는 점막접착성 겔화 복합체, 알로에 아르보레센스 및 소듐 알기네이트의 메커니즘에 보충적인 메커니즘에 의해 상기 언급된 장벽 효과를 강화시키는 것을 보장한다:
- 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주, 또는
- 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주, 또는
- 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주, 또는
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주 및 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주, 또는
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주, 또는
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주, 또는
- 3:2:1, 3:1:1, 2:1:1, 2:2:1, 1:1:1 중 하나로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주, 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주.
게다가, 균주 L. 류테리 LRE03 DSM 23879는 인터페론-감마(IFN-γ)의 내인성 생성을 유의하게 자극할 수 있다. 면역계의 일차 세포에 의한 사이토카인, 특히 인터페론-감마 INF-감마의 방출을 유도하는 균주 L. 류테리 LRE03 DSM 23879의 능력은 이의 건강한 성인 개체의 말초 혈액으로부터 분리된 PBMC(말초 혈액 단핵 세포)와의 공동-인큐베이션에 의해 정량되었다. 결과는 480 pg/ml, 즉, 대조군보다 47배 더 큰 농도를 갖는 IFN-감마 분비의 자극을 나타내었다. IFN-감마 생성이 비-자극 조건(기준선)에 비해 자극 5일 후에 배양 상층액에서 평가되었다.
인터페론-감마(IFN-γ)는 다른 인터페론과 유사한 바이러스 및 박테리아 감염에 대한 방해 특성, 및 세포골격 및 세포 막의 변화, 종양유전자 생성물 발현의 조절 및 세포 분화 과정의 조절(정상 및 종양 세포 둘 모두에서 유사분열의 거의 모든 단계의 연장)에 의해 매개되는 비-생리학적 세포 증식에 대한 방해 특성을 갖는다. IFN-γ는 또한 신체의 면역 반응에 특화된 세포, 예를 들어, 대식세포, 단핵구, 호중구 및 특화되지 않은 세포, 예를 들어, 혈소판, 내피 및 상피 세포, 섬유모세포 및 실질 세포 모두의 활성을 자극함으로써 주요하고 특징적인 면역조절 효과를 나타낸다.
본 발명의 조성물로부터 유래되고, 알로에 및 소듐 알기네이트에 의해 매개되는 장벽 효과의 추가의 강화는 미생물 비피도박테리움 락티스 Bb1에 의해 내재화된 적합한 양의 고도로 동화 가능한 아연(2 mg/용량)의 존재에 의해 보장된다. 고도로 생체 이용가능한(내재화된) 아연은 틴달화된(비활성화된) 세포의 형태이다. 이러한 형태의 아연은 매우 생체 이용가능하며, 따라서 유기체에 의해 더욱 용이하게 동화 가능하다. 생체 이용가능하고 유기체에 의해 즉시 동화 가능한 아연 이온은 림프구의 형성/생성을 담당하는 가슴샘에 대한 중요한 역할 및 작용을 한다.
박테리아 비피도박테리움 락틱(Bifidobacterium lactic) Bb 1 DSM 17850의 균주는 BioMan S.r.l. Company(Italy)에 의해 2005년 12월 23일에 DSMZ에 기탁되었다. 게다가, 박테리아 비피도박테리움 락틱 Bb 1 DSM 17850의 균주는 액체 배양 배지에서의 이의 성장 동안 세포 내부에 아연을 축적할 수 있다. 세포 내부에 축적된 식이성 아연(ProbioZinc®)은 Transwell 시스템에서 Caco-2 세포에서 수행된 시험관내 연구에서 제시된 바와 같이 아연 글루코네이트보다 17배 및 아연 설페이트보다 31.5배 더 큰 동화성을 갖는다. 미량 원소 아연의 높은 동화성은 매우 낮은 투여량에서도 결핍 상태를 효과적으로 상쇄시킨다. 또한, 아연은 면역계, 특히 CD4+ T-림프구(헬퍼 T-림프구)로 분화하는 경우에 일련의 사이토카인, 예를 들어, IL-12 및 IFN-γ를 분비하는 T-림프구의 생성이 발생하는 기관인 가슴샘과 관련한 중요한 역할을 하는 것으로 공지되어 있다. 상기 아연의 작용 메커니즘은 균주 L. 류테리 LRE03 DSM 23879의 작용 메커니즘과 상승작용적이다.
상기에 더하여, 균주 L. 류테리 LRE03 DSM 23879 및 L. 퍼먼툼 LF11 DSM 19188은 그람-음성 박테리아에 대한 방해 작용을 통해 겔화 복합체, 알로에 및 소듐 알기네이트에 의해 매개되는 위장 점막을 보호하기 위한 장벽 효과의 강화를 매개하며, 주로 균주 L. 퍼먼툼 LF11 DSM 19188은 대장균군 박테리아, E. 콜리 및 칸디다 속의 진균에 대해 직접 작용한다. 화학요법을 받는 개체에서 위장관의 중증 감염을 발생시킬 수 있는 대장균군 박테리아인 에스케리키아 콜리(Escherichia coli), 엔테로박터 클로아카에(Enterobacter cloacae) 및 클렙시엘라 뉴모니아에(Klebsiella pneumoniae) 종과 특히 관련된 잠재적 그람-음성 병원체에 대한 현저한 장벽 작용을 갖는 미생물이 선택되었다. 상기 연구 활동에 따라, 균주 L. 퍼먼툼 LF11 DSM 19188이 성공적으로 선택되었다.
또한, 균주 L. 퍼먼툼 LF11 DSM 19188은 특히 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 칸디다 크루세이(Candida krusei), 칸디다 글라브라타(Candida glabrata) 및 칸디다 파라프실로시스(Candida parapsilosis) 종에 대해 입증된 바와같이 칸디다 속의 효모에 대한 장벽 효과를 또한 확립하고 보유할 수 있다. 특히, 균주 L. 퍼먼툼 LF11 DSM 19188은 결과로서 발생하는 만성 장내세균 불균형 조건의 결과 및 표현과 같은 화학요법 약물로 치료된 환자에서 종종 발생하는 칸디다 감염의 발생, 지속 또는 증식에 바람직하지 않은 장 환경을 발생시키고 유지시킬 수 있다.
시험관내 억제 데이터는 균주 L. 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 작용 메커니즘이 유기산이 아닌 특정 분자, 예를 들어, 박테리오신, 세포외 단백질 또는 과산화수소를 적어도 부분적으로 기초로 하는 것을 강하게 암시한다.
흥미롭게도, 기계적 활성을 갖는 본 발명의 목적인 조성물의 성분은 특히 편모 미생물과 관련하여 물리적-기계적 방해를 통해 병원성 균주의 부착 특성을 감소시킴으로써 주로 작용하는 반면, 박테리아 L. 류테리 LRE03 DSM 23879, 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037 및 L. 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주는 점막 표면에 부착할 수 없고 따라서 위장 내강에 남아 있을 수 없게 되는 병원체(바이러스 및 박테리아 및 효모)에 대한 상기 언급된 방해에 대한 보조 효과를 발휘한다.
상기에 비추어, 본 발명의 목적인 조성물의 작용 메커니즘은 식도, 위 및 장 점막의 물리적 보호를 위한 기계적 장벽 효과의 확립 및 유지이며, 이는 또한 특히 편모 균주에 관한 병원성 균주의 부착 능력을 감소시킨다. 또한, 생성물의 기계적 장벽 효과는 통상적으로 화학요법 치료 동안 증가된 장 점막의 생리학적 투과성을 회복시킬 수 있다.
일차 장벽 효과의 강화 효과는 바이러스 감염 및 비-생리학적 세포 증식을 방해할 수 있는 사이토카인의 내인성 분비의 자극, 뿐만 아니라 항박테리아 및 항-칸디다 활성을 갖는 특정 분자의 합성이며, 이에 의해 항종양 화학요법 약물로 치료되는 개체에 대한 추가 보호를 제공한다.
전체 작용 메커니즘에 비추어, 본 발명의 목적인 조성물은 종양 질병을 갖고 화학요법을 받는 개체, 뿐만 아니라 후천 면역결핍 증후군(AIDS)을 갖는 개체에서의 항레트로바이러스 치료 및 백혈병 치료에서 보조 요법으로 사용하기 위해 효과적으로 적용된다.
실험 부분
본 출원인은 하기 기재되는 바와 같이 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE 03 (ID1777) DSM 23879의 균주의 면역조절 특성을 시험하였다.
특히, 선천 면역과 관련된 사이토카인 및 후천 면역을 담당하는 사이토카인 둘 모두를 분석하기 위해 다양한 자극 시간 후에 연구를 수행하였다.
a) 박테리아 배양 및 성장 조건
첫째로, 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879의 균주의 박테리아 배양물을 특정 성장 조건하에서 제조하였다. 균주를 37℃에서 자동온도조절 배쓰에서 Man Rogosa Sharpe(MRS) 배지 중에서 배양하였다. 면역조절 실험과 관련하여, 약 16시간의 성장 기간 후, 박테리아를 지수 성장 단계에 도달시키기 위해 상기 언급된 조건하에서 6시간 동안 계대 배양하였다. 이후, 이들을 멸균 인산염-완충 염수(PBS, pH 7.2)로 2회 세척하였고, 세포의 생리학적 상태 및 수를 제조업체의 설명서에 따라 Becton Dickinson Company에 의해 시판되는 상업 키트 "액체 비드를 갖는 Cell Viability Kit"를 이용하여 세포형광측정(cytofluorimetric) 기술로 결정하였다. 따라서, 세포를 예비 실험에서 확립된 최적 농도로 발생시켰고, 이후의 시험에서 이용하였다.
b) 말초 혈액 단핵 세포 분리
다음으로, 말초 혈액 단핵 세포를 분리시켰다. 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 밀도 구배 원심분리에 의해 분리시켰다. 이를 위해, Immuno-transfusion Service of Ospedale di Borgomanero(Italy)로부터의 건강한 공여자의 20 ml의 "백혈구연층(buffy coat)"을 각각의 실험에 사용하였고, 이에 따라 200x106 PBMC/연층의 평균 수득량을 획득하였다. 분리된 세포의 양을 단핵 세포와 다형핵 세포 사이의 식별을 가능케 하는 터크 염료(Turk's dye)를 이용하여 버커 챔버(Burker's chamber)에서의 세포 수에 의해 결정하였다. 세포를 10% 열 비활성화된 소 태아 혈청(FCS, Gibco), 1% 글루타민 및 25 mM Hepes가 보충된 RPMI-1640 성장 배지(Invitrogen) 중 2x106 세포/ml의 농도로 발생시켰다.
c) PBMC 자극
다음으로, 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 박테리아 균주로 자극시켰다. 분리 후, PBMC를 1일 및 5일 동안 박테리아 균주로 자극시켰다. 각각의 실험에 대한 내부 대조군은 다음과 같았다:
음성 대조군: PBMC 단독
1일 대조군:
1 μg/ml 지질다당류(LPS; 에스케리키아 콜리, 혈청형 055:B5, Sigma Chemicals Co., St. Louis, MO)로 자극된 PBMC.
5일 대조군:
1 μg/ml 식물적혈구응집소(PHA-P; Sigma Chemicals Co., St. Louis, MO)로 자극된 PBMC.
다양한 분석 시간에서, 배양물을 10분 동안 1500 rpm에서 원심분리시켰다. 상층액을 취하고, 분석때까지 -20℃에서 저장하였다. 세포를 이후의 시험을 위해 이용하였다.
d) 세포 증식 분석
이후, 세포 증식 분석을 수행하였다. 브로모데옥시유리딘(BrdU) 핵 표지화 프로토콜을 이용하여 세포형광측정 기술에 의해 세포 증식을 평가하였다. 이러한 방법을 삼중수소 티미딘을 이용한 더욱 전통적인 방사선표지 시스템에 대한 대안으로서 개발하였다. 특히, 세포 배양물에 20 μM 최종 농도로 5-브로모-2'-데옥시유리딘(BrdU) 및 2'-데옥시시티딘(dC)의 혼합물을 첨가하였다. 가습화된 대기, 5% CO2 하에서 37℃에서 16시간의 인큐베이션 후, 세포 증식을 세포형광측정 기술에 의해 분석하였다. 배양 상층액을 수거하고, 분석때까지 -20℃에서 저장하였다. 고정 및 세포벽 투과화 후, 세포 DNA를 항-BrdU FITC-컨쥬게이션된 모노클로날 항체(mAb)(Becton Dickinson)로 표지시켰다. 세포를 Becton Dikinson Company로부터의 세포형광측정 FACScalibur 및 분석 프로그램 CellQuest를 이용하여 세포의 제조로부터 24시간 이내에 분석하였다.
결과를 자극의 존재하에서 증식하는 세포의 백분율 및 자극의 부재하에서 증식하는 세포의 백분율의 비로 계산되는 세포 증식 지수(P.I.)로 표현하였다. 2보다 큰 P.I. 값을 허용되는 것으로 간주하였다(컷오프 값). 모든 실험에서, 대조군으로서 미토겐(PHA)을 이용한 자극은 항상 컷오프 값보다 컸고, 이는 PBMC가 살아 있고, 증식 능력을 갖는 것을 확증한다.
e) 개별적 세포 부분모집단을
특성규명하는
분자의 분석
다음으로, 개별적 세포 부분모집단을 특성규명하는 분자의 분석을 수행하였다. 면역표현형 특성규명과 관련하여, 세포를 플루오레세인 이소티오시아네이트(FITC), 피코에리트린(PE) 또는 페리디닌 엽록소 단백질(PerCP)에 컨쥬게이션된 하기 모노클로날 항체(mAb)의 다양한 조합으로 어두운 곳에서 30분 동안 인큐베이션하였다: CD3, CD4, CD8, CD14, CD16, CD19, CD20, CD56, HLA-DR. 인큐베이션 후, 샘플을 세척하고, 1% 파라포름알데하이드를 함유하는 용액으로 고정시키고, 4℃에서 저장하였다. 제조로부터 24시간 이내에, 샘플을 세포형광측정 FACScalibur에 의해 분석하였고, 세포를 분석으로부터의 오염물질 세포 조직파편을 배제하도록 선택하였다.
f) 사이토카인 투여
다음으로, 사이토카인 투여를 수행하였다. 배양 상층액 내의 사이토카인 농도를 E.L.I.S.A. 검정(효소-결합 면역흡착 측정법)에 의해 결정하였다. 특히, 사이토카인(IL-4, IL-10, IFN-γ 및 IL-12p70) 투여를 위해, eBioscence Company, San Diego CA로부터의 키트 "Human ELISA Ready-SET-Go"를 이용하였다.
g) 통계 분석
쌍을 이룬 스튜던츠 t 검정을 이용한 통계 분석을 수행하였다. p<0.05 값을 유의한 것으로 간주하였다.
결과
i) 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879의 균주에 의해 유도된 증식 반응을 결정하였다. 세포 증식의 시험관내 분석은 면역계 기능을 연구하기 위한 매우 유용한 생물학적 파라미터이다. 시험된 박테리아 균주가 림프구 증식의 유도에 영향을 미칠 수 있는지의 여부를 분석하기 위해, 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879로 자극시켰다. T-림프구 폴리클로날 증식을 유도할 수 있는 분열촉진 자극인 식물적혈구응집소(PHA)를 양성 대조군으로 이용하였다. PBMC를 Transfusion Service of Ospedale S.S. Trinita, Borgomanero(Novara)로부터 평균 40세 연령(21-52세 범위)의 4명의 건강한 남성 공여자의 말초 정맥혈 샘플로부터 분리시켰다.
세포 증식 지수(P.I., 상기 기재된 방법 참조)가 보고되는 도 1에 제시된 바와 같이, 모든 자극 조건 하에서의 PBMC 증식 반응은 자극의 부재(기준선)하에서보다 유의하게 높았다.
도 1에서, 4개의 독립적인 실험의 평균 ± 평균의 표준 오차(S.E.M.)가 제시된다. 통계적 유의성을 스튜던츠 t 검정을 이용하여 계산하였다. p < 0.05 값은 기준선(자극되지 않은 PBMC)에 비해 통계적으로 유의한 것으로 간주되어야 한다.
ii) 다양한 세포 부분모집단에 대한 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879의 효과를 평가하였다. 시험된 프로바이오틱 균주를 이용한 자극 후에 세포 부분모집단이 증식하도록 유도된 것을 검출하기 위해, 다중파라미터 흐름세포측정법 분석을 수행하였다. 이후의 도면(도 2 및 도 3)은 자연 및 후천 면역 반응 둘 모두와 관련된 주요 세포 부분모집단의 백분율을 제시한다.
iia) 자연 면역. 1일 후, 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03(DSM 23879)을 이용한 자극은 전체 수지상 세포 백분율에서의 변화(계통-/HLA-DR+)를 야기시켰다.
도 2에서, 4개의 독립적 실험의 증식 반응 평균 ± S.E.M.이 제시된다. 통계적 유의성을 스튜던츠 t 검정을 이용하여 계산하였다. p < 0.05 값은 기준선(자극되지 않은 PBMC)에 비해 통계적으로 유의한 것으로 간주되어야 한다.
iib) 후천 면역. 5일 후, 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879를 이용한 자극은 헬퍼 T-림프구(CD3+/CD4) 백분율에서의 유의한 증가를 야기시켰다.
도 3에서, 12개의 독립적 실험의 평균 ± S.E.M.이 제시된다. 통계적 유의성을 스튜던츠 t 검정을 이용하여 계산하였다. p < 0.05 값은 기본 조건(자극되지 않은 PBMC)에 비해 통계적으로 유의한 것으로 간주되어야 한다.
iii) 사이토카인 분비. 면역 반응과 관련된 세포 부분모집단에 의해 분비되는 다양한 스펙트럼의 사이토카인은 특정 항원성 자극에 대한 반응에서 사용되는 효과기 시스템을 선택하는데 있어서 중요한 역할을 한다. T-림프구는 세포-매개 면역의 주요 효과기 및 조절 세포이다. 항원 또는 병원성 작용제에 반응하여, T-세포는 성장 및 분화에 필요하며, 다른 면역적격 세포의 활성화 인자로서의 다양한 사이토카인을 합성하고, 분비한다. 시험된 박테리아 균주가 PBMC에 의한 다양한 사이토카인 분비를 유도하는지의 여부를 연구하기 위해, 상기 세포를 1일 및 5일 동안 활성화시켰다. 배양 상층액에 방출되는 사이토카인(IL-12p70, IFN-γ 및 IL-4)의 양을 E.L.I.S.A. 검정에 의해 측정하였다.
iv) 주로 전염증성 작용을 갖는 사이토카인. 주로 전염증성 작용을 갖는 사이토카인의 주요 대표로서 사이토카인 IL-12p70 및 IFN-γ의 유도를 평가하였다. 도 4에 제시된 바와 같이, 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03(DSM 23879)는 기본 조건에 비해 시험된 사이토카인 둘 모두의 유의한 증가를 유도할 수 있다.
v) 주로 면역조절 작용을 갖는 사이토카인. 주로 면역조절 작용을 갖는 사이토카인의 주요 대표로서 사이토카인 IL-4의 유도를 평가하였다. 도 4에 제시된 바와 같이, 시험된 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03(DSM 23879)는 기본 조건에 비해 사이토카인 IL-4 분비의 감소를 유도할 수 있는 것으로 제시되었다.
도 4에서, 4개의 독립적 실험의 평균 ± S.E.M.이 제시된다. 통계적 유의성을 스튜던츠 t 검정을 이용하여 계산하였다. p < 0.05 값은 기준선(자극되지 않은 PBMC)에 비해 통계적으로 유의한 것으로 간주되어야 한다. 사이토카인 IL-12p70의 생성을 자극 1일 후에 배양 상층액에서 평가하였다. IFN-γ 및 IL-4 생성을 자극 5일 후에 배양 상층액에서 평가하였다.
박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879를 이용한 자극 후의 PBMC에 의해 분비된 사이토카인의 투여량에 대한 데이터는 전염증성 사이토카인을 유의하게 증가시키는 균주 자체의 능력을 뒷받침하였다. 특히, 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879는 비-자극 조건(기준선, 도 5)에 비해 사이토카인 IL-12p70 및 사이토카인 IFN-γ의 분비를 각각 6배 및 47배까지 증가시켰다.
사이토카인 IFN-γ 분비를 자극하는 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03 DSM 23879의 현저한 능력을 고려하여, 본 연구의 결과를 모두 Probiotical S.p.A. 콜렉션에 속하는 다른 박테리아 균주를 이용한 실험으로부터 획득된 결과와 비교하였다. 특히, 기준선에 비한 증가, 즉, 비-자극 조건(기준선)에 비한 IFN-γ 양의 배수 변화를 비교하였다.
표 1에 제시된 바와 같이, 박테리아 균주 락토바실러스 류테리 LRE 03(DSM 23879)은 동일 종의 균주 및 모두 락토바실러스 속에 속하는 다양한 종의 균주 둘 모두에 비해 최적 IFN-γ 유도제를 발생시켰다.
표 1에서, 기준선에 비한 다양한 락토바실리 및 비피도박테리아를 이용한 자극에 의해 유도된 사이토카인 IFN-γ의 증가가 제시된다.
실험 부분
본 출원인은 하기에 기재되는 바와 같은 박테리아 균주 락토바실러스 살리바리우스 LS 06 DSM 26037의 면역조절 특성을 시험하였다.
특히, 미생물학적 관점 및 분자 관점 둘 모두로부터 이전에 특성규명된 프로바이오틱 균주 락토바실러스 살리바리우스 LS 06 DSM 26037의 전체 순환 수지상 세포에 대한 면역조절 특성을 평가하였다. 특히, 자극 24시간 후, 건강한 성인 공여자로부터의 말초 혈액 단핵 세포에서의 DC를 선택함에 의한 다중파라미터 흐름세포측정법 분석을 수행하였다.
a) 박테리아 배양 및 성장 조건
균주를 37℃에서 자동온도조절 배쓰에서 Man Rogosa Sharpe(MRS) 배지 중에서 배양하였다. 면역조절 실험과 관련하여, 약 16시간의 성장 기간 후, 박테리아를 지수 성장 단계에 도달시키기 위해 상기 언급된 조건하에서 6시간 동안 계대 배양하였다. 따라서, 이들을 멸균 인산염-완충 염수(PBS, pH 7.2)로 2회 세척하였고, 세포의 생리학적 상태 및 수를 제조업체의 설명서에 따라 Becton Dickinson Company에 의해 시판되는 상업 키트 "액체 비드를 갖는 Cell Viability Kit"를 이용하여 세포형광측정 기술로 결정하였다. 이후, 세포를 예비 실험에서 확립된 최적 농도로 발생시켰고, 이후의 시험에서 이용하였다.
b) 말초 혈액
단핵
세포 분리
말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 밀도 구배 원심분리에 의해 분리시켰다. 이를 위해, Immuno-transfusion Service of Ospedale di Borgomanero로부터의 건강한 공여자의 20 ml의 "백혈구연층"을 각각의 실험에 사용하였고, 이에 따라 200x106 PBMC/연층의 평균 수득량을 획득하였다. 분리된 세포의 양을 단핵 세포와 다형핵 세포 사이의 식별을 가능케 하는 터크 염료(Turk's dye)를 이용하여 버커 챔버(Burker's chamber)에서의 세포 수에 의해 결정하였다. 세포를 10% 열 비활성화된 소 태아 혈청(FCS, Gibco), 1% 글루타민 및 25 mM Hepes가 보충된 RPMI-1640 성장 배지(Invitrogen) 중 2x106 세포/ml의 농도로 발생시켰다.
c) PBMC 자극
분리 후, PBMC를 박테리아 균주로 24시간 동안 자극하였다. 각각의 실험에 대한 내부 대조군은 다음과 같았다: 음성 대조군:
PBMCs 단독; 1일 대조군: 1 μg/ml 지질다당류(LPS; 에스케리키아 콜리, 혈청형 055:B5, Sigma Chemicals Co., St. Louis, MO)로 자극된 PBMC.
자극 후, 배양물을 10분 동안 1500 rpm에서 원심분리하였다. 이후, 상층액을 방출시키고, 세포를 이후의 시험에 사용하였다.
d) 전체 수지상 세포 분석
면역표현형 특성규명과 관련하여, 세포를 플루오레세인 이소티오시아네이트(FITC) 또는 페리디닌 엽록소 단백질(PerCP)에 컨쥬게이션된 하기 모노클로날 항체(mAb)의 다양한 조합으로 어두운 곳에서 30분 동안 인큐베이션하였다: CD3, CD14, CD16, CD19, CD20, CD56 및 HLA-DR. 인큐베이션 후, 샘플을 세척하고, 1% 파라포름알데하이드를 함유하는 용액으로 고정시키고, 4℃에서 저장하였다. 제조로부터 24시간 이내에, 샘플을 세포형광측정 FACScalibur에 의해 분석하였고, 세포를 분석으로부터의 오염물질 세포 조직파편을 배제하도록 선택하였다.
e) 통계 분석
쌍을 이룬 스튜던츠 t 검정을 이용한 통계 분석을 수행하였다. p < 0.05 값을 유의한 것으로 간주하였다.
결과: 수지상 세포에 대한 박테리아 균주 효과
수지상 세포 조절에 대한 시험된 프로바이오틱 균주의 효과를 결정하기 위해, 다중파라미터 흐름세포측정법 분석을 수행하였다.
도 6A에 제시된 바와 같이, 24시간 후, 균주 LS 06을 이용한 자극은 전체 수지상 세포(계통-/HLA-DR+) 백분율의 유의한 증가를 유도하였다.
특히, 박테리아 균주 L. 살리바리우스 LS 06(DSM 26037)은 비-자극 조건(기준선, 도 6B)에 비해 전체 수지상 세포의 백분율을 7배까지 증가시켰다.
도 6B에서, 12개의 독립적 실험의 평균 ± S.E.M.이 제시된다. 통계적 유의성을 스튜던츠 t 검정을 이용하여 계산하였다. p < 0.05 값은 기준선(자극되지 않은 PBMC)에 비해 통계적으로 유의한 것으로 간주되어야 한다.
표 2에서, 기준선에 비한 다양한 락토바실리 및 비피도박테리아를 이용한 자극에 의해 유도된 수지상 세포의 증가가 제시된다.
결론
데이터는 박테리아 균주 L. 살리바리우스 LS 06이 표준 기본 조건에 비해 전체 DC 백분율의 유의한 증가를 유도한 것을 입증하였다. 특히, 박테리움 LS 06은 전체 DC 백분율을 7배까지 증가시켰다.
본 연구에서 특성규명되는 균주 L. 살리바리우스 LS 06과 같은 수지상 세포를 조절할 수 있는 박테리아에 의한 장 집락화는 면역학적 불균형을 특징으로 하는 질병에서 매우 중요한 인자이다.
표 1
표 2
Claims (10)
- - DSMZ - 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 젤쿨투렌 게엠베하(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH)에 Probiotical SpA에 의해 2010년 8월 5일에 기탁된 수탁 번호 DSM 23879를 갖는 락토바실러스 류테리(Lactobacillus reuteri) LRE03으로 확인되는 락토바실러스 류테리 종에 속하는 박테리아의 균주, 및/또는
- DSMZ - 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 젤쿨투렌 게엠베하에 Probiotical SpA에 의해 2012년 6월 6일에 기탁된 수탁 번호 DSM 26037을 갖는 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius) LS06으로 확인되는 락토바실러스 살리바리우스 종에 속하는 박테리아의 균주로 구성된 혼합물을 포함하는,
항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 항바이러스제 및/또는 항균제로 사용하기 위한 조성물. - 제 1항에 있어서, 상기 조성물이 하기를 추가로 포함하는 혼합물로 구성되는 조성물:
- DSMZ - 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 젤쿨투렌 게엠베하에 Anidral S.r.l. Company(현재, Probiotical S.p.A)에 의해 2007년 3월 20일에 기탁된 수탁 번호 DSM 19188을 갖는 락토바실러스 퍼먼툼(Lactobacillus fermentum) LF11로 확인되는 락토바실러스 퍼먼툼 종에 속하는 박테리아의 균주. - 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 조성물이 1x108 UFC/혼합물 g 내지 1x1012 UFC/혼합물 g, 바람직하게는 1x109 UFC/혼합물 g 내지 1x1011 UFC/혼합물 g으로 포함되는 박테리아 농도를 갖는 혼합물을 포함하는 조성물.
- 제 3항에 있어서, 상기 혼합물이 하기를 포함하거나, 대안적으로 하기로 구성되는 조성물:
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주 및 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주, 또는
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주, 또는
- 1:5 내지 5:1, 바람직하게는 1:3 내지 3:1, 더욱 더 바람직하게는 1:2 내지 2:1 또는 1:1로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주. - 제 3항에 있어서, 상기 혼합물이 하기를 포함하거나, 대안적으로 하기로 구성되는 조성물:
- 3:2:1, 3:1:1, 2:1:1, 2:2:1, 1:1:1 중 하나로 포함되는 중량비의 박테리아 락토바실러스 류테리 LRE03 DSM 23879의 균주, 박테리아 락토바실러스 살리바리우스 LS06 DSM 26037의 균주 및 박테리아 락토바실러스 퍼먼툼 LF11 DSM 19188의 균주. - 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) ST10 DSM 25246으로 확인되는 스트렙토코커스 써모필러스 종에 속하는 박테리아의 균주 및 타라 검(tara gum)을 추가로 포함하고, 상기 균주가 투여되는 경우 제자리에서 엑소폴리사카라이드를 생성할 수 있는 조성물.
- 제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 검, 바람직하게는 알기네이트, 또는 이의 유도체, 더욱 더 바람직하게는 소듐 알기네이트를 추가로 포함하는 조성물.
- 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 알로에 겔, 또는 이의 유도체, 바람직하게는 알로에 아르보레센스(Aloe arborescens) 겔을 추가로 포함하고, 더욱 더 바람직하게는 동결 건조된 알로에 아르보레센스 겔인 조성물.
- 제 1항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 BioMan S.r.l. Company에 의해 2005년 12월 23일에 DSMZ에 기탁된 수탁 번호 DSM 17850을 갖는 비피도박테리움 락틱(Bifidobacterium lactic) Bb 1으로 확인되는 비피도박테리움 락틱 종에 속하는 박테리아의 균주를 추가로 포함하고, 상기 균주가 액체 배양 배지에서의 이의 성장 동안 세포 내부에 아연을 축적시킬 수 있는 조성물.
- 제 1항 내지 제 9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 항종양 화학요법 치료, 후천 면역결핍 증후군 치료 및 백혈병 치료를 받는 개체에서 위, 식도 및 장 점막을 보호하기 위해 사용되는 조성물.
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| ITUB20155700A1 (it) * | 2015-11-18 | 2017-05-18 | Probiotical Spa | Composizioni con azione sinergica tra un complesso gelificante muco-aderente contro il passaggio degli antigeni, e batteri immunomodulanti anti-IL17 per uso nel trattamento delle malattie autoimmuni e neurodegenerative IL17 dipendenti. |
| ITUA20162013A1 (it) | 2016-03-24 | 2017-09-24 | Probiotical Spa | Composizione a base di batteri lattici per il trattamento contemporaneo di infezioni vaginali di origine micotica e batterica. |
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| DE202020104290U1 (de) * | 2019-07-24 | 2020-11-25 | Syngen Biotech Co.,Ltd. | Zusammensetzung aus Streptococcus Thermophilus vom Stamm ST4 als ein Hilfsstoff eines Chemotherapeutikums zur Besserung von Diarrhoe, Appetitstörungen und zur Gewichtserhaltung |
| KR102273663B1 (ko) * | 2020-10-29 | 2021-07-05 | 주식회사 에치와이 | 코팅 프로바이오틱스 및 이를 포함하는 식품 조성물, 이의 제조방법 |
| CN113215063B (zh) * | 2021-06-16 | 2023-02-21 | 中国药科大学 | 一种唾液乳杆菌及其应用 |
| CN115181682B (zh) * | 2022-02-10 | 2023-10-03 | 江南大学 | 一株高富集有机锌的发酵乳杆菌 |
Family Cites Families (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2199305T3 (es) * | 1995-12-21 | 2004-02-16 | Biogaia Ab | Uso de lactobacillus reuteri para inhibir criptosporidiosis en mamiferos. |
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| ITMI20051510A1 (it) | 2005-08-02 | 2007-02-03 | Proge Farm Srl | Uso di specifici batteri lattici per la preparazione di composizioni iunomodulanti |
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| KR101001767B1 (ko) | 2008-11-04 | 2010-12-15 | 주식회사한국야쿠르트 | 항 인플루엔자 바이러스 효능을 갖는 락토바실러스 루테리 에이취와이7501 및 이를 유효성분으로 함유하는 제품 |
| US20100143305A1 (en) * | 2008-12-08 | 2010-06-10 | James Allen Lemke | Treatment of hiv and aids using probiotic lactobacillus reuteri |
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| ITMI20110679A1 (it) | 2011-04-20 | 2012-10-21 | Giovanni Mogna | Composizione comprendente batteri probiotici in grado di ripristinare l effetto barriera proprio dello stomaco che viene perso durante il trattamento farmacologico dell iperacidita gastrica. |
| ITRM20110477A1 (it) | 2011-09-09 | 2013-03-10 | Giovanni Mogna | Composizione comprendente n-acetilcisteina e/o lisozima microincapsulato gastroprotetto in associazione con batteri probiotici in grado di ripristinare l'effetto barriera proprio dello stomaco che viene perso durante il trattamento farmacologico dell |
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| ITMI20121328A1 (it) * | 2012-07-30 | 2014-01-31 | Probiotical Spa | Composizione per dispositivo medico comprendente ceppi di batteri produttori di esopolisaccaridi in associazione con gomme e/o gelatine. |
| CN107106629B (zh) | 2014-05-05 | 2021-01-12 | G·莫格纳 | 通过双重免疫生物刺激来治疗肿瘤、获得性免疫缺陷综合征和白血病的疗法 |
| KR20160144501A (ko) | 2014-05-05 | 2016-12-16 | 지오바니 모그나 | L. 류테리 ler03 및/또는 l. 살리바리우스 ls06을 포함하는 항-종양 화학요법, 백혈병 치료 또는 보조 요법을 받는 개체에서 바이러스 또는 박테리아 감염을 치료하거나 예방하는데 사용하기 위한 조성물 |
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