KR20170052627A

KR20170052627A - Cd40l에 대해 지시된 도메인 항체를 사용하여 자가면역 질환을 치료하는 방법

Info

Publication number: KR20170052627A
Application number: KR1020177009210A
Authority: KR
Inventors: 마렉 혼차렌코; 바이샬리 샤흐; 리신 랑; 우르비 아라스; 다이앤 쉐벨; 크리스틴 크랫; 캐런 프라이스; 수잰 수샤드
Original assignee: 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date: 2014-09-10
Filing date: 2015-09-10
Publication date: 2017-05-12
Also published as: IL251025A0; EA201790520A1; AU2015315063A1; JP2017528466A; US20230295321A1; BR112017004590A2; US20170306034A1; US11466091B2; SG11201701769TA; MX2017002841A; US20200216552A1; WO2016040571A1; CA2960819A1; EP3191522A1; CN106687133A

Abstract

인간 CD40L에 특이적으로 결합하는 항체 폴리펩티드를 사용하여 자가면역 질환, 예컨대 원발성 면역 혈소판감소증 (ITP), 실질 기관 이식 거부, 이식편-관련 질환, 심상성 천포창, 전신 경화증 및 중증 근무력증을 치료하는 방법이 제공된다. 항체 폴리펩티드는 혈소판을 활성화시키지 않는다. 방법은 1회 용량의 항체 폴리펩티드를 포함하는 적어도 1회 투여 주기를 포함할 수 있다. 용량은 약 75 mg 내지 약 1500 mg의 용량으로 정맥내로 투여될 수 있다. 방법은 인간 환자에서 혈소판 계수를 정상화시킨다.

Description

CD40L에 대해 지시된 도메인 항체를 사용하여 자가면역 질환을 치료하는 방법 {METHODS OF TREATING AUTOIMMUNE DISEASE USING A DOMAIN ANTIBODY DIRECTED AGAINST CD40L}

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 2014년 9월 10일에 출원된 미국 특허 가출원 번호 62/048,459를 35 U.S.C. §119(e)에 따라 우선권 주장하며, 상기 가출원은 그 전문이 본원에 포함된다.

기술 분야

인간 CD40L에 특이적으로 결합하는 항체 폴리펩티드를 사용하여 자가면역 질환, 예컨대 원발성 면역 혈소판감소증, 실질 기관 이식 거부, 이식편-관련 질환, 심상성 천포창, 전신 경화증 및 중증 근무력증을 치료하는 방법이 제공된다.

서열 목록

본 출원은 EFS-웹을 통해 ASCII 포맷으로 제출된 서열 목록을 함유하며, 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

원발성 면역 혈소판감소증으로도 공지되어 있는 특발성 혈소판감소성 자반증 (ITP)은 혈소판감소증과 연관될 수 있는 다른 원인 또는 장애의 부재 하에서 고립성 혈소판감소증 (100 x 10⁹개/L 미만의 말초 혈액 혈소판 계수)을 특징으로 하는 자가면역 장애이다. 문헌 [Rodeghiero et al., Blood, 113(11):2386-2393 (2009)]. ITP의 기저 병리생리상태는 전통적으로 항체-코팅된 혈소판의 파괴율 증가에 기인하였다. 추가로, 손상된 혈소판 생산이 ITP의 혈소판감소증의 원인이 되는 중요한 메카니즘으로서 나타났다. ITP의 임상 징후는 무 증상 내지 최악의 출혈에 이르는 범위로 고도로 가변적이다. 증상은 독점적으로는 아니지만 대체로 혈소판 계수와 관련이 있다. 문헌 [Rodeghiero et al., Blood, 113(11):2386-2393 (2009)].

ITP를 나타내는 환자의 1차 치료는 경구 또는 정맥내 코르티코스테로이드를 포함한다 (프레드니손이 가장 빈번하게 사용되는 스테로이드임). 초기 반응 후에, 용량이 감소될 경우 재발은 통상적이다. 문헌 [George et al., Blood, 88(1):3-40 (1996)]. 장기 반응은 단지 약 20-30% 환자에서만 관찰된다. 문헌 [Provan et al., Blood, 115:168-186 (2010)]. 스테로이드에 대해 비반응성인 자의 조기 관리는 약 80% 사례에서 반응과 연관된 정맥내 이뮤노글로불린 (IVIg)을 포함한다. 문헌 [Newman et al., Br. J. Haematol., 112(4):1076-1078 (2001)]. 그러나, 혈소판 계수는 종종 3-4주 이내에 치료전 수준으로 되돌아간다. 1차 요법에 실패한 만성 ITP를 갖는 환자의 치료는 매우 도전적인 과제이다. 문헌 [Provan et al., Blood, 115:168-186 (2010)]. 지속적 및 완전 반응을 유도할 기회는 이들 환자에서 낮으며; 따라서, 요법의 목적은 치료-관련 부작용을 최소화하면서 주요 (잠재적으로 치명적인 것을 포함함) 출혈을 예방하기 위해 "안전한" 혈소판 계수를 제공하는 것이다. 비장절제술은 단지 치유적 치료 양식이고, 비장절제술을 받은 환자의 2/3는 종종 추가의 요법 없이 지속되는 정상 혈소판 계수를 달성할 것이다. 문헌 [Ghanima et al., Blood, 120(5):960-969 (2012)]. 비장절제술을 수행하기 위한 또는 비장절제술의 반응 및 장기 유효성을 예측하기 위한 최적 시간에 관하여 어떠한 합의도 존재하지 않는다. 환자의 약 30%에서, 비장절제술은 만족스러운 반응을 유도하지 못하고, 이들 환자는 추가의 치료를 요구한다. 문헌 [Cuker et al., Hematol. Am. Soc. Hematol. Educ. Program 2010, 377-384 (2010)].

현행 ITP 치료는 환자의 가변적인 분율에서 이루어지고, 효능의 예측은 불가능하다. 더욱이, ITP 치료 (예를 들어, 코르티코스테로이드)는 기저 원인을 다루는 것 없이 질환의 파괴 성분을 다룬다. 장기 만성 사용을 위한 대부분의 요법 (비장절제술을 포함함)은 일반적으로 면역억제 및 일부 작용제에 대해서는 심지어 사망률과 연관된 유의한 내약성 문제를 갖는다. 소수의 작용제가 대조 임상 시험에서 시험되었고, 어떠한 것도 적은 혈소판 계수와 연관된 출혈의 유의한 감소를 입증하지 못했다. 대다수의 약물은 오프-라벨 처방되고 (예를 들어, 아자티오프린, 다나졸, 빈카 알칼로이드 및 리툭시맙), 만성 ITP를 갖는 환자에서 가변적인 및 종종 단지 일시적인 효능을 갖는다. 문헌 [Neunert et al., Blood, 117(16):4190-4207 (2011)]. 따라서, 만성 ITP를 갖는 환자의 나날의 임상 관리는 유의한 문제이다.

면역 및 염증 반응에서 CD40-CD40L 상호작용의 결정적인 역할은 이들을 병리학적 면역-염증 과정의 치료를 위한 유망한 표적으로 만들었다. 특정 CD40L 모노클로날 항체 (mAb)에 의한 CD40-CD40L 상호작용의 차단은 영장류에서 동종이식편 거부를 성공적으로 예방하고, 동물 모델에서 자가면역 질환 및 아테롬성동맥경화증을 치료한다. 문헌 [Montgomery et al., Transplantation, 74:1365-1369 (2002)]. 인간에서, 2종의 상이한 항-CD40L mAb 클론이 상이한 자가면역 질환의 치료를 위한 임상 시험에서 사용되었다. 문헌 [Maribel et al., Mol. Immunol., 45:937-944 (2008)]. 그러나, 모노클로날 항체는 혈전색전성 (TE) 합병증, 예컨대 아테롬성혈전성 중추 신경계 사건, 심근경색, 폐 색전증 및 심부 정맥 혈전증의 대단히 높은 발생률을 나타낼 수 있다. 예를 들어, 항-CD40L mAb 클론 hu5c8 (항-CD40L mAb, 비오젠(Biogen))의 유용성은 TE 합병증의 대단히 높은 발생률에 의해 제한된다. 이들 항체에 의한 TE는, 라이게이션되어 FcgRIIa 수용체를 통해 이웃 혈소판을 응집시켜 혈전 형성을 유발할 수 있는, mAb와 혈소판 상의 막-결합된 CD40L 또는 혈소판으로부터 누출된 sCD40L과의 보다 고차의 면역 복합체 (IC) 형성으로부터 일어나는 것으로 생각된다. 혈전색전증의 위험으로 인해 모든 진행중인 임상 시험이 중단되었다. 문헌 [Boumpas et al., Arthritis Rheum., 48:719-727 (2003)].

따라서, 혈전색전증의 위험 없이 ITP 및 다른 자가면역 장애를 갖는 대상체를 치료하기 위한 개선된 방법을 제공하는 것이 본 발명의 목적이다.

특정 측면에서, 본 발명은 개시되어 있는 CD40L 활성화를 수반하는 질환의 치료에 유용한, 인간 CD40L에 특이적으로 결합하여 그를 억제하는 항체 폴리펩티드 (또한 "항-CD40L 항체 폴리펩티드"로도 지칭됨)의 용도에 관한 것이다. 항체 폴리펩티드는 유리하게는 혈소판 응집을 일으키지 않는다. 궁극적으로, CD40L을 항체 폴리펩티드로 표적화하는 것은, 예를 들어 원발성 면역 혈소판감소증, 실질 기관 이식 거부, 이식편-관련 질환, 심상성 천포창, 전신 경화증 및 중증 근무력증으로 이어지는 자가면역 과정을 억제하고 지속적 질환 완화를 유도하기 위한 기회를 제공할 수 있다. 따라서, 항체 폴리펩티드는 자가면역 질환 환자에게 긴 지속적 치료 이익을 제공할 수 있다. 따라서, 항체 폴리펩티드는 현재 환자에게 이용가능하지 않은 신규 치료 양식을 제공한다. 모든 통상적인 요법에 실패한 자가면역 질환 대상체에 대한 치료 옵션의 결여를 고려하면, 특유의 작용 메카니즘 및 공지된 안전성 프로파일을 갖는 항체 폴리펩티드는 유리한 위험/이익 프로파일을 입증한다.

ITP에 대한 미충족 의료 필요는 특히 다음을 포함한다: 1) 비-선택적 면역억제제를 사용한 치료에 불내성이거나 (치료-연관 부작용으로 인함) 또는 상기 치료에 부적절하거나 (동반이환으로 인함) 또는 이용가능한 치료 옵션 (비장절제술을 포함함)에 대해 불응성인 환자에서 중증 만성 ITP의 관리 (여기서 생명-위협 출혈 위험은 높게 남아있고 삶의 질은 감소함); 2) 잠재적으로 치유적이고/거나 긴 지속적 완화를 유도하며 (PLT 파괴를 감소시키는 것에 초점을 맞춤) CS에 대한 필요성을 감소시키거나 제거할 수 있고 비장절제술을 대체하거나 유의하게 미룰 수 있는 보다 효과적이고 보다 안전한 요법.

치료 유효량의 항-CD40L 항체 폴리펩티드 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물이 제공된다. 제약 조성물은 면역억제제/면역조정제 및/또는 항염증제를 추가로 포함할 수 있다.

특정 실시양태에서, 면역 질환의 치료를 필요로 하는 환자에서 면역 질환을 치료하는 방법이 제공된다. 이러한 방법은 환자에게 치료 유효량의 본원에 기재된 항-CD40L 항체 폴리펩티드를 투여하는 것을 포함한다. 면역 질환은 자가면역 질환 또는 이식편-관련 질환일 수 있다. 면역 질환은 애디슨병, 알레르기, 강직성 척추염, 천식, 아테롬성동맥경화증, 귀의 자가면역 질환, 눈의 자가면역 질환, 자가면역 간염, 자가면역 이하선염, 결장염, 관상동맥 심장 질환, 크론병, 제1형 및/또는 제2형 당뇨병을 포함한 당뇨병, 부고환염, 사구체신염, 이식편-관련 질환, 그레이브스병, 길랑-바레 증후군, 하시모토병, 용혈성 빈혈, 특발성 혈소판감소성 자반증 (또한 원발성 면역 혈소판감소증으로도 공지됨), 염증성 장 질환, 재조합 약물 제품에 대한 면역 반응 (예를 들어, 혈우병환자에서의 인자 VII), 전신 홍반성 루푸스, 남성 불임증, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 천포창 (예컨대 심상성 천포창 및 낙엽상 천포창), 건선, 류마티스성 열, 류마티스 관절염, 사르코이드증, 경피증 (전신 경화증), 쇼그렌 증후군, 척추관절병증, 갑상선염, 이식 거부 및 혈관염으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 자가면역-매개 상태는 이환된 조직이 1차 표적이고 일부 경우에서는 2차 표적인 상태를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 이러한 상태는 AIDS, 아토피성 알레르기, 기관지 천식, 습진, 나병, 정신분열증, 유전성 우울증, 조직 및 기관의 이식 (예컨대 실질 기관 이식), 만성 피로 증후군, 알츠하이머병, 파킨슨병, 심근경색, 졸중, 자폐증, 간질, 아르투스 현상, 아나필락시스, 알콜 중독 및 약물 중독을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 추가로, 이식편-관련 질환은 실질 기관, 조직 및/또는 세포 이식 거부를 포함할 수 있다. 대안적으로, 이식편-관련 질환은 이식편 대 숙주 질환 (GVHD)이다. 이식편-관련 질환은 추가로 급성 이식 거부일 수 있다. 대안적으로, 이식편-관련 질환은 만성 이식 거부일 수 있다. 구체적 실시양태에서, 자가면역 질환은 특발성 혈소판감소성 자반증 (ITP)이다.

환자에게 치료 유효량의 항-CD40L 항체 폴리펩티드 (예를 들어, BMS-986004)를 투여하는 것을 포함하며, 여기서 적어도 1회 용량의 항체 폴리펩티드는 약 75 mg 내지 약 1500 mg의 용량으로 투여되는 것인, 환자에서 면역 질환을 치료하는 방법이 제공된다. 용량은 적어도 약 75 mg, 적어도 약 225 mg, 또는 적어도 약 675 mg일 수 있다. 용량은 약 75 mg, 약 225 mg, 약 675 mg, 또는 약 1500 mg일 수 있다. 대안적으로, 용량은 약 200 mg 내지 약 1200 mg, 또는 약 500 mg 내지 약 1000 mg의 범위일 수 있다. 임의로, 방법은 적어도 1회 투여 주기 (예를 들어, 2주)를 포함한다.

항체 폴리펩티드는 정맥내 투여를 위한 제약 조성물로 제제화될 수 있다. 제약 조성물은 제약상 허용되는 담체를 포함할 수 있다. 예를 들어, 제약 조성물은 10 mM 인산나트륨, pH 6.5, 25 mM 아르기닌 HCl, 및 250 mM 수크로스를 포함한다.

항체 폴리펩티드는 정맥내로 투여될 수 있다. 항체 폴리펩티드의 용량은 약 200 내지 약 1500 mg일 수 있다. 적어도 2회 용량이 투여될 수 있다. 임의로, 적어도 7회 용량이 투여될 수 있다. 다중 용량이 투여되는 경우에, 용량은 동일하거나 상이할 수 있다. 용량은 2주마다 1회 투여될 수 있다.

방법은 환자에서 혈소판 계수를 정상화시킬 수 있다. 임의로, 환자의 기준선 말초 혈액 혈소판 계수는 치료 후에 적어도 2배일 수 있다. 환자의 말초 혈액 기준선 혈소판 계수는 치료 후에 50,000개/mm³ 이상 또는 100,000개/mm³ 이상일 수 있다. 환자는 치료 후에 20,000개/mm³의 말초 혈액 혈소판 계수 증가를 나타낼 수 있다. 환자는 치료 전에 30,000개/mm³ 미만의 말초 혈액 혈소판 계수를 가질 수 있다. 환자는 치료 전에 100 x 10⁹ L 또는 50 x 10⁹ L 미만의 말초 혈액 혈소판 계수를 가질 수 있다. 환자는 치료 전에 비장절제될 수 있다. 임의로, 환자는 치료 전에 ITP에 대해 이전에 치료되었다. 대안적으로, 환자는 치료 전에 ITP에 대해 이전에 치료되지 않았다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 방법은 환자에게 면역억제제/면역조정제 및/또는 항염증제를 투여하는 것을 추가로 포함한다. 면역억제제/면역조정제 및/또는 항염증제 및 항-CD40L 항체 폴리펩티드는 순차적으로 또는 공동으로 투여될 수 있다.

또한, (a) 소정 용량의 항-CD40L 항체 폴리펩티드 (예를 들어, BMS-986004); 및 (b) 항체 폴리펩티드의 사용 지침서를 포함하는, 환자에서 면역 질환을 치료하기 위한 키트가 제공된다.

또한, 적어도 1회 용량의 항-CD40L 항체 폴리펩티드가 약 75 내지 약 1500 mg의 용량으로 투여되는 것인, 투여를 위한 항-CD40L 항체 폴리펩티드 (예를 들어, BMS-986004)가 제공된다.

또한, 면역 질환을 갖거나 그의 위험이 있는 환자의 치료를 위한 의약의 제조에 있어서 본원에 개시된 항-CD40L 항체 폴리펩티드의 용도가 제공된다. 추가로, 면역 질환의 적어도 1종의 증상의 완화를 필요로 하는 환자에서 상기 적어도 1종의 증상을 완화시키기 위한 의약의 제조에 있어서 본원에 개시된 항-CD40L 항체 폴리펩티드의 용도가 제공된다. 추가로, 각각의 주기에 대해 1회 용량의 항체 폴리펩티드가 약 75 내지 약 1500 mg의 용량으로 투여되는 것인, 적어도 1회 투여 주기에 사용하기 위한 항-CD40L 항체 폴리펩티드 (예를 들어, BMS-986004)가 제공된다.

항-CD40L 항체 폴리펩티드는 가변 도메인을 포함한다. 예시적인 항체 폴리펩티드는 단일 가변 도메인을 함유하는 도메인 항체 (dAb)의 형태이다. 대안적으로, dAb는, 예를 들어 인간 혈청 알부민 (HSA)과 같은 또 다른 항원에 결합할 수 있는 제2 가변 도메인을 포함하는 이중특이적 시약일 수 있다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 항체 폴리펩티드는 인간 CD40L에 특이적으로 결합하는 제1 가변 도메인을 포함하며, 여기서 CD40L은 서열식별번호(SEQ ID NO): 1의 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 제1 가변 도메인의 아미노산 서열은 (a) BMS2h-572-633의 CDR1 영역 (서열식별번호: 2)과 3개 이하의 아미노산이 상이한 CDR1 영역, (b) BMS2h-572-633의 CDR2 영역 (서열식별번호: 3)과 3개 이하의 아미노산이 상이한 CDR2 영역, (c) BMS2h-572-633의 CDR3 영역 (서열식별번호: 4)과 3개 이하의 아미노산이 상이한 CDR3 영역을 포함하고; 여기서 항체 폴리펩티드는 CD40에 대한 CD40L의 결합을 100 pM 내지 100 nM의 EC50으로 억제한다. 대안적으로, 제1 가변 도메인의 아미노산 서열은 BMS2h-572-633 (서열식별번호: 5)의 아미노산 서열과 10개 이하의 아미노산이 상이할 수 있다. 추가로, 제1 가변 도메인의 아미노산 서열은 서열식별번호: 5와 5개 이하의 아미노산이 상이할 수 있다. 제1 가변 도메인의 아미노산 서열은 또한 서열식별번호: 5와 2개 이하의 아미노산이 상이할 수 있다. 대안적으로, 제1 가변 도메인은 서열식별번호: 5와 1개 아미노산이 상이하다. 대안적으로, 항체 폴리펩티드의 가변 도메인은 서열식별번호: 5에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.

특정의 구체적 실시양태에서, 항체 폴리펩티드의 가변 도메인은 다음을 포함한다: (1) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 영역; (2) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 영역; 및 (1) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 갖는 CDR3 영역. 예를 들어, 항체 폴리펩티드의 가변 도메인은 서열식별번호: 5 (BMS2h-572-633)의 아미노산 서열을 포함한다. 바람직하게는, 항체 폴리펩티드는 BMS-986004이고, 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함한다.

또한, 인간 CD40L에 특이적으로 결합하는 제1 가변 도메인을 포함하는, 도메인 항체 (dAb)인 항체 폴리펩티드가 제공된다. 항체 폴리펩티드는 제1 가변 도메인 및 Fc 도메인을 포함하는 융합 폴리펩티드일 수 있다. 대안적으로, 융합 폴리펩티드는 IgG4 Fc 도메인을 포함할 수 있다. 융합 폴리펩티드는 IgG1 Fc 도메인을 또한 포함할 수 있다. 융합 폴리펩티드는 IgG1 Fc 도메인을 또한 포함할 수 있다. 대안적으로, 융합 폴리펩티드는 CT-긴 도메인을 포함할 수 있다. 융합 폴리펩티드는 CT-짧은 도메인을 또한 포함할 수 있다. 대안적으로, 융합 폴리펩티드는 N297Q 긴 Fc 도메인을 포함할 수 있다. 융합 폴리펩티드는 대안적으로 N297Q 짧은 Fc 도메인을 포함할 수 있다.

또한, 인간 CD40L에 특이적으로 결합하는 제1 가변 도메인을 포함하는 항체 폴리펩티드가 제공되며, 여기서 항체 폴리펩티드는 제2 항원에 특이적으로 결합하는 제2 가변 도메인을 추가로 포함하고, 여기서 제2 항원은 인간 CD40L 이외의 다른 항원이다. 제2 항원은 분화 클러스터 (CD) 분자 또는 주요 조직적합성 복합체 (MHC) 부류 II 분자일 수 있다. 대안적으로, 제2 항원은 혈청 알부민 (SA)일 수 있다.

도 1a는 아바타셉트 IgG1로부터의 변형된 Fc 테일에 융합된 V_{H 가변} 도메인 BMS2h-572-633을 포함하는 도메인 항체를 도시한다.
도 1b는 BMS-986004 (서열식별번호: 6)의 아미노산 서열을 제시한다. BMS-986004는 BMS2h-572-633 (서열식별번호: 5)의 가변 도메인 및 아바타셉트 IgG1로부터의 변형된 Fc 테일을 포함하는 Fc 융합체 단백질이다. Fc 융합 단백질은 분자량 77,984 달톤의 이량체이며, 각각의 폴리펩티드 쇄는 353개 아미노산으로 이루어진다. 가변 도메인은 인간 IgG1의 돌연변이된 Fc 구축물에 링커 (밑줄표시된 "AST" 잔기)에 의해 융합되며, 여기서 3개의 시스테인 잔기 (처음 3개의 밑줄표시된 "S" 잔기)는 세린으로 치환되고 1개의 프롤린 (마지막 밑줄표시된 "S" 잔기)는 세린 잔기로 치환된다.
도 2는 FDA 1b/2상 연구 용량 증량 개략도를 제시한다.
도 3은 대상체내 용량 증량을 위한 FDA 1b/2상 연구 개략도를 제시한다.

본 발명은 인간 CD40L에 특이적으로 결합하는 항체 폴리펩티드를 사용하여 자가면역 질환 (예를 들어, 원발성 면역 혈소판감소증)을 치료하는 방법을 제공한다. 항체 폴리펩티드는 혈소판을 활성화시키지 않고, 항체 폴리펩티드는 CD40L 활성화를 수반하는 질환, 예컨대 이식편-관련 질환 및 자가면역 질환의 치료에 유용하다.

"항-CD40L 항체 폴리펩티드" 및 "항체 폴리펩티드"는 본원에서 상호교환가능하게 사용된다. 한 측면에서, 항체 폴리펩티드는 단일 가변 도메인을 함유하는 도메인 항체일 수 있다. 항체 폴리펩티드는 또한 추가의 도메인, 예컨대 Fc 도메인을 포함할 수 있다. 예를 들어, 항체 폴리펩티드는 인간 혈청 알부민 (HSA)에 특이적으로 결합하는 제2 가변 도메인을 포함할 수 있다. 이러한 이중 특이적 항체 폴리펩티드는, 예를 들어 증가된 반감기를 가질 수 있다. 구체적 실시양태에서, 항체 폴리펩티드는 dAb BMS2h-572-633의 가변 도메인을 포함한다. 또 다른 구체적 실시양태에서, 항체 폴리펩티드는 dAb BMS2h-572-633의 결합과 경쟁한다.

"고정 용량"은 대상체의 체중에 상관없이 투여되는 용량이다.

"치료 유효량"은 (투여량에서 및 투여 기간 동안 및 투여 수단에 대해) 목적하는 치료 결과를 달성하는 양을 지칭한다.

본원에 사용된 "특이적 결합"은, 예를 들어 표면 플라즈몬 공명 (SPR)에 의해 측정 시에 약 1 μM 이하의 해리 상수 (K_d)로 항체 폴리펩티드가 항원에 결합하는 것을 지칭한다. 적합한 검정 시스템은 비아코어(BIACORE)® 표면 플라즈몬 공명 시스템 및 비아코어® 동역학적 평가 소프트웨어 (예를 들어, 버전 2.1)를 포함한다. 특이적 결합 상호작용에 대한 친화도 또는 K_d는 약 1 μM 이하, 약 500 nM 이하, 또는 약 300 nM 이하일 수 있다.

용어 "약"은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이해될 것이고, 사용되는 문맥 상에서 어느 정도 달라질 것이다. 일반적으로, 약은 언급된 값의 플러스/마이너스 10%인 값의 범위를 포괄한다.

본 상세한 설명에 따라, 하기 약어 및 정의가 적용된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태는 문맥에 달리 명백하게 기재되지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다는 것을 주목해야 한다. 따라서, 예를 들어 "항체"에 대한 언급은 복수의 이러한 항체를 포함하고, "투여량"에 대한 언급은 하나 이상의 투여량 및 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 그의 등가물 등을 포함한다.

1. CD40L 및 CD40L 활성

인간 CD40L에 결합하는 항체 폴리펩티드가 제공된다. CD40L은 또한 CD154, gp39, TNF-관련 활성화 단백질 (TRAP), 5c8 항원 또는 T-BAM으로도 공지되어 있다. 인간 CD40L에 대한 관련 구조적 정보는, 예를 들어 유니프롯(UniProt) 등록 번호 P29965에서 찾을 수 있다. "인간 CD40L"은 하기 아미노산 서열을 포함하는 CD40L을 지칭한다:

CD40L에 대한 본 항체 폴리펩티드의 결합은 CD40L 활성을 길항한다. "CD40L 활성"은 APC 상의 MHC 분자에 의한 T 세포 수용체 자극과 함께 APC 공동자극 및 활성화, 시토카인의 존재 하에서 모든 이뮤노글로불린 이소형의 분비, B 세포 증식의 자극, 시토카인 생산, 항체 부류 전환 및 친화도 성숙을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 예를 들어, X-연관 고-IgM 증후군을 갖는 환자는 그의 B 세포 상에 기능적 CD40을 발현하지만, 그의 활성화된 T 세포는, B 세포를 활성화시키고 이뮤노글로불린 이소형 전환을 유도하는 능력이 없는 결함있는 CD40L 단백질을 갖는다. 문헌 [Aruffo et al., Cell, 72:291-300 (1993)].

CD40L 활성은 다른 분자와의 상호작용에 의해 매개될 수 있다. "CD40 활성"은 CD40L과 하기 분자 사이의 기능적 상호작용을 포함한다: CD40 (CD40L 수용체), α5β1 인테그린 및 αIIbβ3. 예를 들어, CD40L은 다양한 APC, 예컨대 B 세포, 대식세포 및 수지상 세포 상에서, 뿐만 아니라 기질 세포, 혈관 내피 세포 및 혈소판 상에서 발현되는 그의 수용체인 CD40에 결합한다.

본원에 사용된 용어 "활성화시키다", "활성화시킨다" 및 "활성화된"은 주어진 측정가능한 CD40L 활성이 참조에 비해 적어도 10%, 예를 들어 적어도 10%, 25%, 50%, 75% 또는 심지어 100% 또는 그 초과 증가하는 것을 지칭한다. CD40L 활성은 길항제의 부재 하에서에 비해 활성이 적어도 10%, 예시적인 실시양태에서 적어도 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 97% 또는 심지어 100% (즉, 검출가능한 활성이 없음) 감소하는 경우에 "길항된" 것이다. 예를 들어, 항체 폴리펩티드는 일부 또는 모든 CD40L 활성을 길항할 수 있다. 한 실시양태에서, 항체 폴리펩티드는 B 세포 증식을 활성화시키지 않는다. 또 다른 실시양태에서, 항체 폴리펩티드는 T 세포 또는 수지상 세포 (DC)에 의한 시토카인 분비를 활성화시키지 않으며, 여기서 시토카인은 IL-2, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, IL-23, TNF-α 및 IFN-γ로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종의 시토카인이다.

2. 항체 폴리펩티드

항체 폴리펩티드는 가변 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 항체 폴리펩티드는 단일 가변 도메인을 함유하는 dAb의 형태이다. 항체 폴리펩티드는 디술피드 결합에 의해 상호연결된 2개의 중쇄 (H) 및 2개의 경쇄 (L)를 포함하는 전장 항-CD40L 이뮤노글로불린 분자일 수 있다. 이러한 실시양태에서, 각각의 쇄의 아미노 말단 부분은 약 100-120개 아미노산의 가변 도메인 (V_L 또는 V_H)을 포함한다. 그 안에 함유된 상보성 결정 영역 (CDR)이 주로 항원 인식을 담당하지만, 프레임워크 잔기도 에피토프 결합에 소정 역할을 할 수 있다. 각각의 중쇄의 카르복시-말단의 "절반"은 주로 이펙터 기능을 담당하는 불변 영역 (Fc)을 정의한다.

항체 폴리펩티드는 또한 CD40L에 특이적으로 결합하는 가변 도메인을 포함하는 전장 항-CD40L 이뮤노글로불린 분자의 부분을 포함하는 "단편"일 수 있다. 따라서, 용어 "항체 폴리펩티드"는, 예를 들어 항원-결합 중쇄, 경쇄, 중쇄-경쇄 이량체, Fab 단편, F(ab')₂ 단편, Fv 단편, 단일 쇄 Fv (scFv) 및 dAb를 포함한다. 따라서, 용어 "항체 폴리펩티드"는 재조합 조작 및 발현에 의해 제조된 폴리펩티드, 뿐만 아니라 하이브리도마 세포 클론에 의한 천연 재조합 및 분비에 의해 생산된 모노클로날 항체를 포함한다.

경쇄는 카파 (κ) 또는 람다 (λ)로 분류되고, 관련 기술분야에 공지된 바와 같이 특정한 불변 영역인 C_L을 특징으로 한다. 중쇄는 γ, μ, α, δ 또는 ε으로 분류되고, 각각 IgG, IgM, IgA, IgD 또는 IgE로서 항체의 이소형을 정의한다. 중쇄 불변 영역은 IgG, IgD 및 IgA의 경우 3개의 도메인 (CH1, CH2 및 CH3); 및 IgM 및 IgE의 경우 4개의 도메인 (CH1, CH2, CH3 및 CH4)으로 구성된다. 항-CD40L 항체는 임의의 이뮤노글로불린 부류 (IgA, IgD, IgG, IgM 및 IgE)로부터 선택된 중쇄 불변 영역을 가질 수 있다.

각각의 경쇄 가변 도메인 (V_L) 및 중쇄 가변 도메인 (V_H)은 아미노-말단에서 카르복시-말단으로 하기 순서로 배열된 3개의 CDR 및 4개의 프레임워크 영역 (FR)으로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 및 FR4. 경쇄의 3개의 CDR은 "LCDR1, LCDR2 및 LCDR3"으로 지칭되고, 중쇄의 3개의 CDR은 "HCDR1, HCDR2 및 HCDR3"으로 지칭된다.

본원에 사용된 용어 "Fc 도메인"은 문헌 [Kabat et al., Sequences of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Dept. Health & Human Services, Washington, D.C. (1991)]에 따라 한정된 CH2 및 CH3 불변 도메인을 포함하는 불변 영역 항체 서열을 지칭한다. Fc 도메인은, 예를 들어 IgG1 또는 IgG4 Fc 영역으로부터 유래될 수 있다.

가변 도메인은 Fc 도메인에 융합될 수 있다. 가변 도메인이 Fc 도메인에 융합되는 경우에, 가변 도메인 (dAb를 포함한 V_L 또는 V_H 도메인)의 카르복실 말단은 Fc CH2 도메인의 아미노 말단에 연결 또는 융합될 수 있다. 대안적으로, 가변 도메인의 카르복실 말단은 Fc CH2 도메인에 그 자체로 융합된 CH1 도메인의 아미노 말단에 연결 또는 융합될 수 있다. 단백질은 CH1과 CH2 도메인 사이에 힌지 영역을 전체적으로 또는 부분적으로 포함할 수 있다.

CDR은 항원과 특이적 상호작용을 형성하는 잔기의 대부분을 함유한다. 한 실시양태에서, 항체 폴리펩티드의 가변 도메인은 BMS2h-572-633의 CDR1, CDR2 및 CDR3 영역과 동일한 아미노산 서열을 갖거나 또는 BMS2h-572-633의 CDR1, CDR2 및 CDR3 영역과 각각 1, 2 또는 3개 아미노산이 상이한 CDR1, CDR2 및 CDR3 영역을 포함한다.

특정의 구체적 실시양태에서, 항체 폴리펩티드의 가변 도메인은 다음을 포함한다: (1) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 영역; (2) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 영역; 및 (1) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 갖는 CDR3 영역.

"도메인 항체" (dAb)는 항원, 예컨대 CD40L에 특이적으로 및 1가로 결합할 수 있는 단일 가변 (V_L 또는 V_H) 도메인을 포함한다. 예를 들어, dAb는 낙타류 dAb에 특징적인 V_HH 구조를 가질 수 있다. 본원에 사용된 "V_H 도메인"은 V_HH 구조를 포함하는 것으로 의도된다. 또 다른 실시양태에서, V_H 도메인 (본원에 실시양태로서 제시되는 모든 특색 및 특색의 조합을 포함함)은 V_HH 도메인 이외의 다른 것이다. dAb는 용액에서 동종- 또는 이종이량체를 형성할 수 있다. 임의의 특정한 이론에 의해 제한되지 않지만, 본원에 개시된 dAb는 혈소판 응집을 일으키지 않는 것으로 여겨지는데, 이는 돌연변이된 Fc 구축물을 함유하는 항체는 혈소판 표면 상의 FcγRIIa (또한 CD32a로도 공지됨)에 결합하지 않고 혈소판을 활성화시키지 않기 때문이다.

구체적 실시양태에서, 본 발명은 항-CD40L VH dAb BMS2h-572-633의 용도를 제공한다. CDR1 서열 (WELMG; 서열식별번호: 2); CDR2 서열 (GIEGPGDVTYYADSVKG; 서열식별번호: 3); 및 CDR3 서열 (KDAKSDY; 서열식별번호: 4)을 포함하는 BMS2h-572-633 (서열식별번호: 5)의 아미노산 서열이 하기에 제시된다.

BMS2h-572-633 (서열식별번호: 5; CDR1-3 영역은 밑줄표시됨):

본원에 사용된 용어 "가변 도메인"은 문헌 [Kabat et al., Sequences of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Dept. Health & Human Services, Washington, D.C. (1991)]에 정의된 이뮤노글로불린 가변 도메인을 지칭한다. 가변 도메인 내의 CDR 아미노산 잔기의 넘버링 및 위치지정은 널리 공지된 카바트(Kabat) 넘버링 규정에 따라 이루어진다.

용어 "인간"은 항체 폴리펩티드에 적용되는 경우에, 항체 폴리펩티드가 인간 이뮤노글로불린으로부터 유래된 서열, 예를 들어 프레임워크 영역 및/또는 CH 도메인을 갖는 것을 의미한다. 서열은 서열이 하기 중 어느 것인 경우에 인간 이뮤노글로불린 코딩 서열"로부터 유래된" 것이다: (a) 인간 개체로부터 또는 인간 개체로부터의 세포 또는 세포주로부터 단리되는 경우; (b) 클로닝된 인간 항체 유전자 서열의 라이브러리로부터 또는 인간 항체 가변 도메인 서열의 라이브러리로부터 단리되는 경우; 또는 (c) 상기 폴리펩티드 중 1종 이상으로부터의 돌연변이 및 선택에 의해 다양화되는 경우. 본원에 사용된 "단리된" 화합물은 화합물이 자연에서 자연적으로 회합되어 있는 적어도 1종의 성분으로부터 제거된 것을 의미한다.

항체 폴리펩티드는 다른 종, 예를 들어 마우스로부터의 항체의 투여에 의해 종종 유발되는 항-항체 면역 반응을 대체로 피하면서 환자에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 뮤린 항체는 관련 기술분야에 널리 공지된 절차에 따라 뮤린 CDR을 인간 가변 도메인 FR 상에 그라프팅함으로써 "인간화"될 수 있다. 그러나, 본원에 개시된 바와 같은 인간 항체는 뮤린 항체 서열의 유전자 조작이 필요없이 생산될 수 있다.

가변 도메인은 인간 배선 항체 유전자 절편에 의해 코딩되는 상응하는 프레임워크 영역과 동일한 아미노산 서열을 갖는 1개 이상의 FR을 포함할 수 있다. 예를 들어, 도메인 항체는 V_H 배선 유전자 절편 DP47, DP45 또는 DP38, V_κ 배선 유전자 절편 DPK9, J_H 절편 JH4b, 또는 J_κ 절편 J_κ1을 포함할 수 있다.

CD40L에 특이적으로 결합하는 능력을 보유시키면서 항체 폴리펩티드 서열에 대한 변화가 이루어질 수 있다. 구체적으로, 항체 폴리펩티드 (예를 들어, dAb)는 dAb BMS2h-572-633과 같이 CD40L에 특이적으로 결합하는 기능을 보유하는 변이체 가변 도메인을 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, 변이체 가변 도메인은 CD40L에 대한 특이적 결합에 대해 BMS2h-572-633과 경쟁할 수 있다. 하기 실시예에 개시된 바와 같은 오류-유발 친화도 성숙은 CD40L에 특이적으로 결합하는 변이체 서열을 갖는 항체 폴리펩티드를 제조 및 확인하기 위한 하나의 예시적인 방법을 제공한다.

특정 실시양태에서, 변이체 가변 도메인은 BMS2h-572-633 (서열식별번호: 5)의 가변 도메인과 10개 이하 또는 그 사이의 임의의 정수 값의 아미노산이 상이할 수 있으며, 여기서 변이체 가변 도메인은 CD40L에 특이적으로 결합한다. 대안적으로, 변이체 가변 도메인은 본 서열 목록에 열거된 서열에 비해 적어도 90% 서열 동일성 (예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 서열 동일성)을 가질 수 있다. 비-동일 아미노산 잔기 또는 2개의 서열 사이에 상이한 아미노산은 아미노산 치환, 부가 또는 결실을 나타낼 수 있다. 2개의 서열 사이에 상이한 잔기는 2개의 서열이 임의의 적절한 아미노산 서열 정렬 알고리즘, 예컨대 BLAST^SM에 의해 정렬되는 경우에 비-동일 위치로서 나타난다.

구체적 실시양태에서, 항체 폴리펩티드의 가변 도메인은 서열식별번호: 5 (BMS2h-572-633)의 아미노산 서열을 포함한다. 바람직하게는, 항체 폴리펩티드는 BMS-986004이고, 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함한다.

중쇄 및 경쇄 유전자의 V_L 또는 V_H 도메인의 경계에 관한 정보는 CD40L에 결합하는 것으로 공지된 항체 폴리펩티드를 코딩하는 클로닝된 중쇄 또는 경쇄 코딩 서열로부터 가변 도메인을 증폭시키기 위한 PCR 프라이머를 설계하기 위해 사용될 수 있다. 증폭된 가변 도메인은 관련 기술분야에 널리 공지된 기술을 사용하여 적합한 발현 벡터, 예를 들어 pHEN-1 (Hoogenboom et al., Nucleic Acids Res. 19:4133-4137 (1991)) 내로 삽입되고 단독으로 또는 또 다른 폴리펩티드 서열과의 융합체로서 발현될 수 있다. 개시된 아미노산 및 폴리뉴클레오티드 서열에 기반하여, 융합 단백질은 임의의 적합한 포유동물 숙주 세포주, 예컨대 CHO, 293, COS, NSO 등에서 단지 통상적인 기술을 사용하여 생산 및 정제되고, 이어서 단백질 A 친화도 크로마토그래피, 이온 교환, 역상 기술 등을 포함한 방법 중 하나 또는 조합을 사용하여 정제될 수 있다.

한 측면에서, 항체 폴리펩티드는 인간 CD40L에 특이적으로 결합하는 제1 가변 도메인을 포함하는 "이중 특이적" 항체 폴리펩티드이다. 이중 특이적 항체 폴리펩티드는 인간 CD40L 이외의 다른 제2 항원에 특이적으로 결합하는 제2 가변 도메인을 포함한다.

또 다른 실시양태에서, 제2 항원은, 예를 들어 면역 이펙터 세포의 세포 표면 분자 또는 가용성 분자, 예컨대 시토카인일 수 있다. 이중 특이성 항체 폴리펩티드의 결합은 CD40L을 길항하고 제2 항원의 생물학적 활성을 길항하기 위해 사용될 수 있다. 면역 이펙터 세포의 세포 표면 분자는 분화 클러스터 (CD) 분자를 포함한다. 대표적인 CD 마커는 인터넷 상의 하이퍼텍스트 전송 프로토콜 http://en.wikipedia.org/wiki/List_of_human_clusters_of_differentiation (2012년 8월 8일에 마지막으로 변경됨)에 열거되어 있다. 또한, 면역 이펙터 세포의 세포 표면 분자는 주요 조직적합성 복합체 (MHC) 부류 II 분자를 포함한다. 이들 세포 표면 분자에 대한 항체는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 이중 특이적 항체 폴리펩티드를 구축하기 위한 가변 도메인의 공급원으로 사용될 수 있다.

한 실시양태에서, 이중 특이적 리간드의 항체 폴리펩티드는 "아미노산 링커" 또는 "링커"에 의해 연결될 수 있다. 예를 들어, dAb는 아미노산 링커의 N-말단에 융합될 수 있고, 또 다른 dAb는 링커의 C-말단에 융합될 수 있다. 아미노산 링커는 임의의 길이일 수 있고, 아미노산의 임의의 조합으로 이루어질 수 있으며, 링커 길이는 연결된 도메인들 사이의 상호작용을 감소시키기 위해 비교적 짧을 수 있다 (예를 들어, 5개 이하의 아미노산). 링커의 아미노산 조성은 또한 벌키 측쇄를 갖는 아미노산 또는 2차 구조를 도입할 가능성이 있는 아미노산의 수를 감소시키기 위해 조정될 수 있다. 적합한 아미노산 링커는 3, 4, 5, 6, 7, 10, 15, 20 또는 25개 이하의 아미노산 길이를 갖는 것을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

제2 항원의 결합은 항체 폴리펩티드의 생체내 반감기를 증가시킬 수 있다. 예를 들어, 이중 특이적 항체 폴리펩티드의 제2 가변 도메인은 혈청 알부민 (SA), 예를 들어 인간 혈청 알부민 (HSA)에 특이적으로 결합할 수 있다. I에 결합하도록 포맷화된 항체 폴리펩티드는 동일한 비포맷화 항체 폴리펩티드에 비해 증가된 생체내 t-α ("알파 반감기") 또는 t-β ("베타 반감기") 반감기를 가질 수 있다. t-α 및 t-β 반감기는 물질이 신체 내에서 얼마나 신속히 분포되고 그로부터 제거되는지 측정한다. I에 대한 연결은, 예를 들어 I에 특이적으로 결합할 수 있는 제2 가변 도메인과 항체 폴리펩티드의 융합에 의해 달성될 수 있다. 항-인간 혈청 알부민 항체는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 인터넷 상의 하이퍼텍스트 전송 프로토콜 www.abcam.com/index.html에서 이용가능한 압캠(Abcam), 인간 혈청 알부민 항체 ab10241, ab2406 및 ab8940, 또는 인터넷 상의 하이퍼텍스트 전송 프로토콜 www.genwaybio.com에서 이용가능한 젠웨이(GenWay), ALB 항체를 참조한다. I에 특이적으로 결합하는 가변 도메인은 임의의 이들 항체로부터 수득된 다음, 관련 기술분야에 널리 공지된 재조합 기술을 사용하여 본 개시내용의 항체 폴리펩티드에 융합될 수 있다.

대안적으로, 항체 폴리펩티드의 I에 대한 연결은 통상의 기술자에게 널리 공지된 기술을 사용하여 항체 폴리펩티드 서열을 I 코딩 서열에 직접 융합시킴으로써 달성될 수 있다. I 코딩 서열은, 예를 들어 진뱅크(GENBANK)® 수탁 번호 NM000477에서 이용가능한 cDNA 서열로부터 유래된 프라이머를 사용하여 PCR에 의해 수득될 수 있다.

한 실시양태에서, I-연결된 도메인 항체 조성물의 tα-반감기는 10% 이상 증가한다. 또 다른 실시양태에서, I-연결된 도메인 항체 조성물의 tα-반감기는 0.25시간 내지 6시간의 범위이다. 또 다른 실시양태에서, I-연결된 도메인 항체 조성물의 tβ-반감기는 10% 이상 증가한다. 또 다른 실시양태에서, I-연결된 도메인 항체 조성물의 tβ-반감기는 12 내지 48시간의 범위이다.

또 다른 실시양태에서, 항체 폴리펩티드는 그의 생체내 반감기를 증가시키도록 PEG화에 의해 포맷화될 수 있다. 한 실시양태에서, PEG는 공유 연결된다. 또 다른 실시양태에서, PEG는 시스테인 또는 리신 잔기에서 항체 폴리펩티드에 연결된다. 또 다른 실시양태에서, PEG-연결된 항체 폴리펩티드는 적어도 24 kD의 유체역학적 크기를 갖는다. 또 다른 실시양태에서, 총 PEG 크기는 20 내지 60 kD이다. 또 다른 실시양태에서, PEG-연결된 도메인 항체는 적어도 200 kD의 유체역학적 크기를 갖는다.

PEG화는 N-히드록실숙신이미드 활성 에스테르, 숙신이미딜 프로피오네이트, 말레이미드, 비닐 술폰 또는 티올을 포함하나 이에 제한되지는 않는 여러 PEG 부착 모이어티를 사용하여 달성될 수 있다. PEG 중합체는 미리 결정된 위치에서 항체 폴리펩티드에 연결될 수 있거나, 또는 도메인 항체 분자에 무작위로 연결될 수 있다. 또한, PEG화는 도메인 항체에 부착된 펩티드 링커를 통해 매개될 수 있다. 즉, PEG 모이어티는 항체 폴리펩티드에 융합된 펩티드 링커에 부착될 수 있으며, 여기서 링커는 PEG 부착을 위한 부위 (예를 들어, 유리 시스테인 또는 리신)를 제공한다. 예를 들어 문헌 [Chapman et al., "PEGylated antibodies and antibody fragments for improved therapy: a review", Adv. Drug Deliv. Rev., 54(4):531-545 (2002)]에 개시된 바와 같이, 항체를 PEG화하는 방법이 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다.

항체 폴리펩티드는 또한 이량체, 삼량체, 사량체 또는 다른 다량체를 형성하도록 설계될 수 있다. 항체 폴리펩티드, 예를 들어 dAb는 융합 단백질로서 단량체의 발현, 단량체 사이의 펩티드 링커를 통한 2개 이상의 단량체의 연결, 또는 서로 직접 또는 디술피드 결합에 의한 링커를 통한 또는 2가, 3가 또는 다가 연결 모이어티 (예를 들어, 멀티-아암 PEG)에 의한 번역 후 단량체의 화학적 연결을 포함하나 이에 제한되지는 않는 관련 기술분야에 공지된 여러 방법에 의해 연결되어 다량체를 형성할 수 있다. 한 실시양태에서, 다량체는 CD40의 단일 분자에 결합할 수 있다.

3. 제약 조성물 및 치료 방법

특정 실시양태에서, 본 발명은 치료 유효량의 항-CD40L 항체 폴리펩티드 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는, 면역 질환을 치료하기 위한 제약 조성물을 제공한다. 제약상 허용되는 담체는, 예를 들어 물, 염수, 포스페이트 완충 염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등, 뿐만 아니라 그의 조합을 포함한다. 제약상 허용되는 담체는 융합 단백질의 보관-수명 또는 유효성을 증진시키는 미량의 보조 물질, 예컨대 습윤제 또는 유화제, 보존제 또는 완충제를 추가로 포함할 수 있다. 조성물은 투여 후에 활성 성분(들)의 신속, 지속 또는 지연 방출을 제공하도록 제제화될 수 있다. 적합한 제약 조성물 및 그의 제조 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, Gennaro, A. et al., eds., Mack Publishing Company (2005)]을 참조한다.

제약 조성물은 면역억제제/면역조정제 및/또는 항염증제를 추가로 포함할 수 있다. 면역 질환의 치료를 필요로 하는 환자에서 면역 질환을 치료하는 방법은 환자에게 치료 유효량의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함할 수 있다. CD40L-매개 T 세포 활성화의 길항은, 예를 들어 자가면역, 이식 거부 또는 알레르기 반응 동안 발생하는 바람직하지 않은 T 세포 반응을 억제할 수 있다. CD40L-매개 T 세포 활성화의 억제는 이들 질환의 진행 및/또는 중증도를 완화시킬 수 있다.

본원에 사용된 "환자"는 동물, 예를 들어 인간을 포함한 포유동물을 의미한다. 환자는 면역 질환으로 진단될 수 있다. "치료" 또는 "치료하다" 또는 "치료하는"은 증상, 장애, 상태 또는 질환의 진행 또는 중증도의 완화를 수반하는 과정을 지칭한다. "면역 질환"은 개체에서 세포성 및/또는 체액성 면역 반응을 포함한 면역 반응의 발생과 연관된 임의의 질환을 지칭한다. 면역 질환의 예는 이식편-관련 질환, 염증, 알레르기 및 자가면역 질환을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 자가면역 질환은 특발성 혈소판감소성 자반증 (ITP), 전신 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 류마티스 관절염, 당뇨병, 건선, 경피증, 아테롬성동맥경화증, 염증성 장 질환 및 궤양성 결장염으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

제약 조성물을 투여함으로써 치료될 수 있는 질환은 애디슨병, 알레르기, 강직성 척추염, 천식, 아테롬성동맥경화증, 귀의 자가면역 질환, 눈의 자가면역 질환, 자가면역 간염, 자가면역 이하선염, 결장염, 관상동맥 심장 질환, 크론병, 제1형 및/또는 제2형 당뇨병을 포함한 당뇨병, 부고환염, 사구체신염, 이식편-관련 질환, 그레이브스병, 길랑-바레 증후군, 하시모토병, 용혈성 빈혈, 특발성 혈소판감소성 자반증 (또한 원발성 면역 혈소판감소증으로도 공지됨), 염증성 장 질환, 재조합 약물 제품에 대한 면역 반응 (예를 들어, 혈우병환자에서의 인자 VII), 전신 홍반성 루푸스, 남성 불임증, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 천포창 (예컨대 심상성 천포창 및 낙엽상 천포창), 건선, 류마티스성 열, 류마티스 관절염, 사르코이드증, 경피증 (전신 경화증), 쇼그렌 증후군, 척추관절병증, 갑상선염, 이식 거부 및 혈관염으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 자가면역-매개 상태는 이환된 조직이 1차 표적이고 일부 경우에서는 2차 표적인 상태를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 이러한 상태는 AIDS, 아토피성 알레르기, 기관지 천식, 습진, 나병, 정신분열증, 유전성 우울증, 조직 및 기관의 이식 (예컨대 실질 기관 이식), 만성 피로 증후군, 알츠하이머병, 파킨슨병, 심근경색, 졸중, 자폐증, 간질, 아르투스 현상, 아나필락시스, 알콜 중독 및 약물 중독을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

특정의 구체적 실시양태에서, 본 발명은 항-CD40L 항체 폴리펩티드 (예컨대 BMS-986004)를 사용하여 특발성 혈소판감소성 자반증 (ITP)을 치료하는 방법을 제공한다. 방법은 환자에서 혈소판 계수를 정상화시킬 수 있다. 임의로, 환자의 기준선 말초 혈액 혈소판 계수는 치료 후에 적어도 2배일 수 있다. 환자의 말초 혈액 기준선 혈소판 계수는 치료 후에 50,000개/mm³ 이상 또는 100,000개/mm³ 이상일 수 있다. 환자는 치료 후에 20,000개/mm³의 말초 혈액 혈소판 계수 증가를 나타낼 수 있다. 환자는 치료 전에 30,000개/mm³ 미만의 말초 혈액 혈소판 계수를 가질 수 있다. 환자는 치료 전에 100 x 10⁹ L 또는 50 x 10⁹ L 미만의 말초 혈액 혈소판 계수를 가질 수 있다. 환자는 치료 전에 비장절제될 수 있다. 임의로, 환자는 치료 전에 ITP에 대해 이전에 치료되었다. 대안적으로, 환자는 치료 전에 ITP에 대해 이전에 치료되지 않았다.

제약 조성물은 단독으로 또는 면역억제제/면역조정제 및/또는 항염증제와 조합 요법으로 (즉, 동시에 또는 순차적으로) 투여될 수 있다. 상이한 면역 질환은 면역 질환을 치료하는데 유용한 특정 보조 화합물의 사용을 요구할 수 있으며, 이는 환자-대-환자 기준으로 결정될 수 있다. 예를 들어, 제약 조성물은 1종 이상의 적합한 아주반트, 예를 들어 시토카인 (예를 들어 IL-10 및 IL-13) 또는 다른 면역 자극제, 예를 들어 케모카인, 종양-연관 항원 및 펩티드와 조합되어 투여될 수 있다. 적합한 아주반트는 관련 기술분야에 공지되어 있다.

임의의 적합한 방법 또는 경로가 항체 폴리펩티드 또는 제약 조성물을 투여하기 위해 사용될 수 있다. 투여 경로는, 예를 들어 경구, 정맥내, 복강내, 피하 또는 근육내 투여를 포함한다. 예를 들어, 항체 폴리펩티드는 제약상 허용되는 담체를 포함할 수 있는, 정맥내 투여를 위한 제약 조성물로 제제화될 수 있다. 예를 들어, 제약 조성물은 10 mM 인산나트륨, pH 6.5, 25 mM 아르기닌 HCl 및 250 mM 수크로스를 포함할 수 있다. 치료 유효 용량이 제제 중에 포함된다.

투여되는 항체 폴리펩티드(들)의 치료 유효 용량은, 예를 들어 치료될 면역 질환의 유형 및 중증도, 조합 요법의 사용, 항체 폴리펩티드(들) 또는 제약 조성물의 투여 경로, 및 환자의 체중을 포함한 수많은 인자에 좌우된다. 도메인 항체의 치료 유효량에 대한 비제한적 범위는 환자의 체중에 대해 0.1-20 mg/kg, 및 한 측면에서, 1-10 mg/kg이다. 항체 폴리펩티드(들)의 용량은 질환 상태의 시험관내 및/또는 생체내 모델에서 CD40 길항작용을 위해 요구되는 항체 폴리펩티드(들)의 양에 의해 추가로 유도될 수 있다.

특정 실시양태에서, 항체 폴리펩티드는 약 75 내지 약 1500 mg의 용량으로 투여될 수 있다. 용량은 2주마다 1회 투여될 수 있다. 임의로, 용량은 적어도 75 mg, 적어도 225 mg, 적어도 675 mg, 약 75 mg, 약 225 mg, 약 675 mg, 또는 약 1500 mg일 수 있다. 예를 들어, 항체 폴리펩티드 100 내지 750 mg이 정맥내로 투여될 수 있다. 대안적으로, 용량은 약 200 mg 내지 약 1200 mg 또는 약 500 mg 내지 약 1000 mg의 범위일 수 있다. 방법은 적어도 1회 투여 주기 (예를 들어, 2주)를 포함한다. 임의로, 적어도 2회 용량이 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 적어도 7회 용량이 투여된다. 다중 용량이 투여되는 경우에, 용량은 동일하거나 상이할 수 있다. 예를 들어, 용량은 세트 치료 요법에 걸쳐, 예컨대 총 7회 용량에 대해 2주마다 1회 (예를 들어, 제1일/제0주, 제2주, 제4주, 제6주, 제8주, 제10주 및 제12주에) 투여될 수 있다.

하기 실시예는 단지 예시적이고, 관련 기술분야의 통상의 기술자가 본 개시내용을 읽었을 때 많은 변형 및 등가물이 그에게 분명할 것이기 때문에 어떠한 방식으로도 본 개시내용의 범주를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.

본 출원 전반에 걸쳐 인용된 모든 참고문헌, 진뱅크® 엔트리, 특허 및 공개된 특허 출원의 내용은 본원에 참조로 명백하게 포함된다.

실시예 1

임상 약리학 및 안전성

BMS-986004의 안전성 및 효능을 인간에서 건강한 및 KLH-챌린지된 남성 및 여성 (비-가임 여성) 대상체에서 이중-맹검, 무작위화, 위약-대조, 상승 단일 용량 연구에서 시험하였다 (최초 인간 연구). 위약 또는 BMS-986004를 0.6 mg (최소 예상 생물학적 효과 수준 [MABEL]), 1.3 mg, 3.75 mg, 18.75mg, 75 mg 및 225 mg의 용량 (각각 용량 패널 1-6을 나타냄)으로 75명의 건강한 대상체에게 투여하였다. 각각의 용량 패널 1-3에서의 9명의 대상체는 BMS-986004 (N=6) 또는 위약 (N=3)을 투여받도록 2:1 비로 무작위화하였다. 각각의 용량 패널 4-6에서의 16명의 대상체는 BMS-986004 (N=12) 또는 위약 (N=4)을 투여받도록 3:1 비로 무작위화하였다. 용량 패널 1-4에서의 대상체는 연구를 완료하였고, 용량 패널 5-6에서의 대상체는 연구를 완료하는 중이다.

심각한 유해 사건은 보고되지 않았다. 심각하지 않은 유해 사건은 75명의 대상체 중 43명 (57.3%)에서 보고되었다. 123건의 총 유해 사건이 보고되었다. 123건의 사건 중에서, 9건 (사건의 7.3%)은 치료 관련으로 지정되었고, 114건 (사건의 92.7%)은 비관련으로 지정되었다. 총 7명의 대상체는 관련 사건을 경험하였고, 용량 패널 3에서의 1명의 대상체 (1건의 치은 궤양화), 용량 패널 4에서의 3명의 대상체 (1건의 아프타성 구내염, 1건의 시야 결손, 3건의 두통 [동일한 대상체]), 용량 패널 5에서의 2명의 대상체 (1건의 근육통, 1건의 두통) 및 용량 패널 6에서의 1명의 대상체 (1건의 호흡곤란)를 포함한다. 가장 통상적으로 보고된 사건은 두통 (대상체의 18.7%), 비루 (대상체의 9.3%), 인두염 (대상체의 8.0%), 및 기침, 상기도 감염 (둘다 대상체의 6.7%)이었으며, 이때 사건의 대다수는 치료 비관련이었다.

신경계 장애의 기관계 분류 (SOC)는 최고 빈도 (대상체의 22.7%)를 갖는 가장 통상적으로 보고된 유해 사건을 설명한다. 가장 통상적으로 보고된 유해 사건은 두통 (대상체의 18.7%)이었다. 이러한 SOC에서의 모든 사건은 관련된 5건의 사건 (4건의 두통 및 1건의 시야 결손)을 제외하고 비관련이었다. 호흡기, 흉부 및 종격 장애, 근골격 및 결합 조직 장애, 감염 및 침입, 및 위장 장애의 SOC는 각각 대상체의 21.3%, 18.7%, 14.7% 및 13.3%의 빈도를 포함한다. 보고된 유일한 감염은 인두염 (대상체의 8%) 및 상기도 감염 (대상체의 6.7%)이었으며, 이들 모두는 비관련 및 등급 1 또는 2로 지정되었다. 기회 감염, 악성종양 및 혈전색전증 (TE) 사건의 보고는 존재하지 않았다.

용량 패널 5 (75 mg) 및 용량 패널 6 (225mg)의 분석은 유해 사건 프로파일이 사건의 빈도에 있어서 및 조합된 모든 용량 패널에 대한 유해 사건 프로파일로의 SOC에 따른 분포에 있어서 필적할만하다는 것을 나타냈다. 유해 사건의 전체 빈도는, 조합된 모든 용량 패널의 경우 57.3%와 비교하여, 각각 용량 패널 5 및 용량 패널 6에서 50.0% 및 43.8%였다.

임상 시험 조사자는 대상체를 정맥 및 동맥 TE 둘 다의 임의의 임상 징후에 대해 관찰하였다. 혈전색전증의 위험은 추가로 TE 바이오마커에서의 변화를 모니터링함으로써 평가하였다. 1차 TE 바이오마커의 세트 (즉, D-이량체, TAT, 프로트롬빈 F1 + 2, aPTT, 트로포닌 I 및 혈소판 계수)에서의 유의한 비정상적 변화는 확인되지 않았다. 추가로, 생체내 약물-유도된 혈소판-백혈구 응집 또는 시험관내 약물-유도된 증가된 혈소판-백혈구 응집능의 증거는 존재하지 않았다 (혈소판단핵구 및 혈소판-호중구 응집체를 혈소판 활성화의 감수성 마커로서 유동 세포측정법에 의해 다중 시점에서 측정하였음).

알라닌 아미노트랜스퍼라제 [ALT], 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 [AST] 및 총 빌리루빈을 포함한 간 기능을 모든 대상체에서 주의깊게 평가하였다. 임의의 간 기능 검사에서 임상적으로 유의한 변화는 존재하지 않았으며, 약물 유도된 간 손상의 지표 (eDISH 및 하이(Hy)의 법칙 평가에 따름)도 존재하지 않았다. 상용 ECG를 모든 대상체에 대해 수행하였으며, 투여 후 QTcF 값 >500 msec의 새로운 개시를 경험한 대상체는 없었다. 추가로, 대상체를 적혈구 (RBC) 계수, 헤모글로빈 농도, 적혈구용적률 및 망상적혈구의 백분율에 대해 면밀히 모니터링하였으며, 빈혈은 관찰되지 않았다. 조사자는 또한 대상체를 백혈구 파라미터에 대해 모니터링하였으며, 절대 호중구, 절대 림프구 및 CD4 림프구 계수를 포함한 실험실 값에 있어서의 임의의 놀라운 감소는 밝혀지지 않았다. 또한, 혈청 이뮤노글로불린 수준을 모니터링하였으며, IgG 수준은 단지 500 mg/dL 미만으로의 IgG의 일시적 감소를 나타낸 3명의 대상체 (1명의 대상체 용량 패널 4, 2명의 대상체 용량 패널 5)를 제외하고는 500 mg/dL 초과로 유지되었다. 안전성 문제로 인해 연구로부터 제거된 대상체는 없었다. 더욱이, 용량 증량을 중지시키는 안전성 문제/기준이 충족된 경우도 없었다.

실시예 2

BMS-986004의 약동학

BMS-986004의 반감기는 18.75 mg보다 높은 용량에서 안정하며, 이들 용량에서의 반감기는 대략 4-5일에 근접한다. 최대 혈청 농도는 주입의 종료 시에 발생하며, 이후 농도의 다중-지수 감소가 발생한다. 평균 노출 (C_max 및 AUC)은 18.75 mg으로부터 대략 용량 비례 방식으로 증가한다.

임상적으로 유의한 건강 위험은 초기 인간 (최초 인간) 연구에서 확인되지 않았으며, 비-임상 연구에서의 안전역은 유리하였다. 따라서, BMS-986004는 ITP 환자 집단에서 평가 중이다.

실시예 3

ITP 환자에서 BMS-986004의 전체 위험/이익 평가

BMS-986004 제약 조성물의 투여는 면역 혈소판감소성 자반증을 갖는 환자에서 혈소판 계수를 정상화시킬 수 있다. 환자의 기준선 말초 혈액 혈소판 계수는 치료 후에 적어도 2배일 수 있다. 환자의 말초 혈액 기준선 혈소판 계수는 치료 후에 50,000개/mm³ 이상 또는 100,000개/mm³ 이상일 수 있다. 환자는 치료 후에 20,000개/mm³의 말초 혈액 혈소판 계수 증가를 나타낼 수 있다.

ITP를 갖는 대상체에서 BMS-986004의 안전성, 효능, 용량 반응 및 약리학 (PK, 표적 연관 및 PD)을 평가하기 위한 1b/2상, 다중기관, 개방-표지 연구를 수행한다. 이러한 연구는 비교적 낮은 면역억제 효과를 나타냈고 초기 인간 연구에서 임상적으로 유의한 위험을 나타내지 않은 용량인 75 mg을 사용하여 개시한다. 인간 ITP 환자를 모든 누적 안전성 정보를 주의깊게 검토하면서 용량 패널에 상승 방식으로 (최저 용량으로서 75 mg으로 시작함) 순차적으로 등록시킨다. 누적 안전성 데이터는 초기 인간 연구에서 이용가능한 모든 데이터, 뿐만 아니라 ITP 연구 동안 수집된 추가의 데이터를 포함한다.

ITP 대상체는 BMS-986004로부터 임상 이익을 얻고, BMS-986004의 임상 개발에서 향후 연구의 용량 선택 및 설계를 유도하도록 돕는다. 1차 효능 평가는 적어도 ≥ 30,000개/mm³의 혈소판 계수, 기준선 계수로부터의 그의 혈소판 계수의 적어도 2배 증가 및 출혈의 부재를 달성하는 환자의 비율을 포함한다. (ITP에 대한 국제 연구 그룹에 따르면, "출혈의 부재"는 ITP와 무관할 수 있는 부차 출혈 증상, 예컨대 피부에서의 등급 1 출혈 증상의 단일 경우를 포함할 수 있다. 문헌 [Rodeghiero et al., Blood, 113(11):2386-2393 (2009)]을 참조한다.).

실시예 4

환자 포함 및 배제 기준

BMS-986004는 미국 혈액학 학회 (ASH) 가이드라인에 의해 정의된 바와 같이, 지속성 또는 만성 ITP를 앓고 있는 대상체에 사용될 수 있다. 인간 대상체는 치료 전에 30,000개/mm³ 미만의 말초 혈액 혈소판 계수를 가질 수 있다. 인간 환자는 치료 전에 100 x 10⁹ L 또는 50 x 10⁹ L 미만의 말초 혈액 혈소판 계수를 가질 수 있다. 이들 대상체는 면역억제 요법, 비장절제술 및 TPO 모방체/효능제를 포함한 통상적인 요법에 실패했을 수 있다. ITP에 대한 이전 치료는, 예를 들어 코르티코스테로이드, 이뮤노글로불린, 아자티오프린, 다나졸, 시클로포스파미드 및/또는 리툭시맙을 포함할 수 있다. 인간 환자는 치료 전에 비장절제되었을 수 있다. 대상체는 적어도 하나의 선행 ITP 요법 후에 불응성 또는 재발성일 수 있으며, 즉, 다른 선행 ITP 요법 후에 지속된 (3개월 초과 동안) 혈소판 계수 ≥ 50,000개/mm³을 달성하는데 실패했을 수 있다.

실시예 15에서의 연구를 위한 환자는 하기 기준에 기반하여 선택된다: 대상체 적격성을 결정하기 위한 스크리닝 평가를 연구 약물 투여 21일 전에 수행한다. 환자의 혈소판 계수 (스크리닝 및 치료전 기간 동안, 1주일 이내에 취한 2회 계수치 평균으로부터 계산함)는 35,000개/mm³ 미만이다. 환자의 혈소판 계수는 안정하고/거나 감소하고, 1주일 이내에 취한 2회 결정치의 평균을 기준으로 상승 추세가 나타나지 않을 수 있다.

스크리닝된 환자의 전혈구 계수는 하기를 제외하고는 참조 범위 (ITP 이외의 다른 장애는 나타내지 않는 백혈구 계수 [WBC] 차이를 포함함) 내에 있다:

여성의 경우 9 g/dL 및 남성의 경우 10 g/dL과 정상 하한치 (LLN) 사이의 헤모글로빈 수준을 갖는 대상체는, 빈혈이 ITP에 분명히 기인한 것이라면 (과도한 혈액 손실), 포함에 적격임;

1500개/μL 이상의 절대 호중구 계수 (ANC) (코르티코스테로이드 치료로 인한 상승된 WBC/ANC는 허용됨);

프로트롬빈 시간/국제 정규화 비 (PT/INR) 및 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT)은 공지된 응고항진 상태를 갖지 않으면서 정상 범위의 80% 내지 120% 내에 있다. 환자의 하기 임상 화학은 정상 참조 범위의 2배를 초과하지 않도록 모니터링된다: ALT, AST, 알칼리성 포스파타제, 및 빌리루빈 > 1.5배 정상 상한치 (ULN) (단리된 빌리루빈 >1.5xULN은 빌리루빈이 분획화되고 직접 빌리루빈이 <35%이면 허용됨). 정상 범위의 80 내지 120% 밖의 편차에 대한 환자의 알부민.

가임 여성 환자는 연구 약물 투여의 시작 전 24시간 이내에 음성 혈청 또는 소변 임신 검사 (최소 감수성 25 IU/L 또는 등가 유닛의 HCG)를 하였어야 한다. 여성 환자는 모유수유할 수 없다. 가임 여성 환자는 총 134일의 치료후 완료를 위해 연구 약물을 사용한 치료의 지속기간 (84일) 플러스 연구 약물의 5회 반감기 (20일) 플러스 30일 (배란 주기의 지속기간) 동안 피임을 사용하여야 한다. 가임 여성 환자와 성적 활동을 하는 남성은 총 194일의 치료후 완료를 위해 연구 약물을 사용한 치료의 지속기간 (84일) 플러스 연구 약물의 5회 반감기 (20일) 플러스 90일 (정자 교체의 지속기간) 동안 피임을 사용하여야 한다. 무정자 남성 및 이성과 성적 활동을 계속하지 않은 WOCBP는 피임제 요건이 면제된다. 그러나 그들은 여전히 임신 검사를 수행하여야 한다.

등록 환자는, 예를 들어 SLE, CLL, CVID, APS 또는 약물 유도된 혈소판감소증으로 인한 2차 면역 혈소판감소증을 갖지 않는다. 등록 환자는 또한 MDS (골수이형성 증후군)의 병력을 갖지 않는다. 등록 환자는 그의 혈소판감소증의 확인가능한 대안적 원인, 예컨대 비장비대, 패밀리 혈소판감소증, 균혈증, 패혈증 또는 요법이 요구되거나 요구되지 않는 활성 감염을 나타내지 않는다. 추가로, 등록 환자는 다음을 갖지 않는다:

만성 ITP 이외의 다른 임의의 중증 의학적 상태 (심장, 간 또는 신장 장애). (주: "중증"은 유해 사건에 대한 통상 용어 기준, 버전 4.03에 기재된 가이드라인에 따르면 대체로 등급 3 이상으로 정의됨);

마지막 24개월 이내에 혈전색전성 질환의 병력 (예를 들어, 일과성 허혈 발작 [TIA], 졸중 [CVA], 폐 색전증 [PE], 심부 정맥 혈전증 (DVT) 또는 혈전성 합병증의 병력);

유의한 심혈관 질환의 병력 (예를 들어, 울혈성 심부전 [CHF] 뉴욕 심장 학회 등급 III/IV, 혈우병 사건의 위험을 증가시키는 것으로 공지된 부정맥 [예를 들어, 심방 세동], 심박수에 대해 보정된 QT 간격 > 450 msec인 대상체, 협심증, 관상 동맥 스텐트 설치술, 혈관성형술, 관상 동맥 우회로 이식);

정맥천자 및/또는 정맥 접근 허용이 불가능함; 또는

환자는 또한 하기 신체 및 실험실 검사 소견에 대해 배제될 수 있다:

응고 바이오마커에서의 임상적으로 유의한 이상;

30일 내에 IVIg를 투여받지 않은 환자에서의 비정상적 (양성) 직접 쿰스 검사;

C형 간염 항체에 대한 양성 혈액 스크린;

HIV-1, -2 항체 또는 p24 항원에 대한 양성 혈액 스크린 (HIV 바이러스 RNA 검사는 조사자가 필요한 것으로 여기면 수행할 수 있음);

B형 간염 표면 항원 (HBsAg), B형 간염 표면 항체 (항-HBs) 및 B형 간염 코어 항체 (항-HBc)를 사용하는 스크리닝에 의해 나타난 바와 같이 활성 B형 간염에 대한 양성 검사 (부록 3 참조);

양성 퀀티페론(QuantiFERON) TB 검사;

기관 기능장애의 증거 또는 표적 집단과 일치하는 것을 너머 신체 검사, 활력 징후, ECG 또는 임상 실험실 결정치에서 정상으로부터 임의의 임상적으로 유의한 편차.

IV 투여된 생물학적 치료제에 대한 심각한 유해 반응 또는 과민성의 병력, 또는 임의의 유의한 약물 알레르기 (예컨대 아나필락시스 또는 간독성)의 병력을 갖는 환자는 또한 연구로부터 배제된다. 정신 또는 신체 (예를 들어, 감염성 질환) 질병의 치료에 대해 비자발적으로 감금되거나 강제적으로 구금된 죄수는 연구에 포함되지 않는다. 최종적으로, BMS-986004에 대한 선행 노출을 갖는 환자는 포함되지 않는다.

등록 환자는 또한 그들이 하기 의약을 사용하지 않았거나 또는 하기 나타난 기간 내에 하기 치료를 받지 않았다는 것을 나타냈다:

최초 투여 전 180일 이내:

o 정맥내 (IV) 시클로포스파미드;

o 수반되는 상태에 대해 투여된 전신 코르티코스테로이드의 3회 이상의 과정;

o 리툭시맙;

최초 투여 전 90일 이내:

o ITP의 치료를 위한 고용량 덱사메타손 (40 mg/일 IV);

최초 투여 전 60일 이내:

o 비-생물학적 임상시험용 작용제;

o 다나졸, 아자티오프린 및 코르티코스테로이드를 제외한 임의의 다른 면역억제제/면역조정제 (미코페닐레이트 모페틸, 시클로포스파미드, 시롤리무스를 포함함);

최초 투여 전 30일 이내:

o 비장절제술;

o 수혈;

o 정맥내 이뮤노글로불린;

o 10 mg/일 초과의 코르티코스테로이드 (프레드니손 또는 프레드니손 등가물).

실시예 5

1b/2상 연구 설계

연구는 3개의 기로 분류된다: 반응기 (6주), 완화기 (6주) 및 추적기 (4주). 스크리닝 후에, 총 40명의 평가가능한 대상체를 연구에 등록시킨다. 대상체는 그들이 연구 약물의 최초 4회 용량을 투여받고 제50일에 요구되는 안전성 및 효능 평가를 완료한 경우에 평가가능한 것으로 간주된다. 평가가능하지 않은 대상체를 대체하여 각각의 용량 패널에서 10명의 대상체의 계수를 유지한다.

대상체를 각각 10명의 대상체의 용량 패널에서 치료한다. 4개의 용량 패널을 상승 방식 (약 75 mg에서 약 1500 mg)으로 순차적으로 등록시키며, 이때 용량 강도는 정상 상태에서 면역억제의 증가된 수준을 제공하도록 선택된다.

BMS-986004를 총 7회 용량에 대해 IV 주입으로서 2주마다 1회 투여한다. 4회 용량을 6주 치료 기간에 걸친 반응기 동안 투여한다. 남아있는 3회 용량을 6주 치료 기간에 걸친 연구의 완화기 동안 투여한다. 대상체는 임상시험용 제품을 총 7회 용량에 대해 제1일/제0주, 제2주, 제4주, 제6주, 제8주, 제10주 및 제12주에 투여받는다.

각각의 용량 코호트는 10명의 새로운 대상체를 포함할 것이고, 대상체내 용량 증량 때문에 용량 코호트에 참여한 대상체의 수에 상관없이 제1일/제0주에 각 용량 수준의 투여받을 것이다. 새로운 코호트는, 75 mg 코호트에서 치료된 적어도 6명의 대상체가 반응기 (제6주)의 종료 시에 혈소판 반응 (R) (혈소판 계수 ≥ 30,000개/mm³ 및 기준선 계수로부터의 적어도 2배 증가 및 출혈의 부재)을 달성한다면 75 mg보다 낮은 용량으로 대상체를 치료하기 위해 개방된다. 새로운 코호트는 대상체내 용량 증량을 포함하여 다른 코호트와 동일한 스케줄을 따른다.

실시예 6

BMS-986004의 제조 및 정맥내 투여

BMS-986004는 시각적 검사 시에 미립자 물질을 함유할 수 있는 투명 내지 약간 유백색, 무색 내지 연황색 용액이다. 약물 제품은 20 mm 개구부, 유형 I 플린트 유리, 1-패널, 개방 표지를 갖는 10 cc 바이알에 함유된 보존제 무함유 즉시 사용가능한 용액이다. 약물 제품의 각각 바이알은 10 mM 인산나트륨, pH 6.5, 25 mM 아르기닌 HCl, 250 mM 수크로스 중에 표지된 양의 BMS-986004, 190 mg/바이알 (50 mg/mL)을 함유한다. 바이알, 바늘 시린지 (VNS) 홀드업을 설명하기 위해 13% 과다충전이 각각의 바이알에 포함된다. 이러한 약물 제제는 단지 정맥내 투여를 위해 사용된다.

IV 사용을 위한 BMS-986004 주사액의 희석을 멸균 일회용 시린지를 사용하여 수행한다. IV 투여 전에, BMS-986004 주사액을 0.9% 염화나트륨 주사액 (NS)으로 희석하여 1.5 내지 30 mg/mL 범위의 BMS-986004 농도를 갖는 투여 용액을 제조한다. 하기 표 1은 각각의 치료를 위한 총 용량 및 용량당 바이알의 수를 나타낸다.

표 1

투여 개요

연구 약물은 주입 펌프를 사용하여 주입으로서 투여한다. 제품은 IV 주입을 통해 프로토콜 특정 용량(들) 및 비율(들)로 용적식 펌프를 사용하여, 각각의 환자에 대해 최대 2시간에 걸쳐 주입한다.

활력 징후 (혈압, 심박수, 호흡률 및 온도)는 주입 전에 (주입 전 투여일 언제든지), 주입 동안 대략 15분마다, 주입의 종료 시에 (주입이 중지된 후 10분 이내에), 및 주입의 완료 후 대략 30분마다 조사자의 판단 시에 안정할 때까지 모니터링한다. 아나필락시스양-유사 주입 반응 또는 아나필락시스성 반응이 발생하는 경우에, 반응의 중증도에 의해 타당하다면 활력 징후를 보다 빈번하게 취한다. 또한, 연구 약물을 투여한 방문 시의 장소로부터 떠나기 전에 혈압 및 심박수를 취한다.

신체 검사, 활력 징후 측정, 12-리드 심전도 (ECG) 및 임상 실험실 평가를 투여 간격 전반에 걸쳐 선택된 시간에 수행한다. 대상체를 연구 전반에 걸쳐 유해 사건에 대해 면밀히 모니터링한다. 약동학 (PK) 분석을 위해 연구 약물 투여 후 336시간 이하 동안 혈액 샘플을 수집한다. 연구 동안 각각의 대상체로부터 대략 553 mL의 혈액을 채취한다. 연구의 대략적인 지속기간은 20주 (대략 140일)이다. 이는 21일 스크리닝 기간, 12주 치료 기간 및 1개월 추적 기간을 포함한다. 연구의 종료는 연구를 수행한 마지막 대상체의 마지막 방문일로서 정의된다.

실시예 7

바이오마커 평가

하기 항체 표적 연관, PD 및 질환-관련 바이오마커의 측정을 위해 혈액을 채취한다.

치료는 혈소판 반응/완전 반응 (R/CR), 혈소판 계수, CD40L 수용체 점유율, 혈소판 연관된 항혈소판 항체, 혈소판 Ag-특이적 B 세포, 혈소판 항원-특이적 B 세포, 혈장 가용성 유리 CD40L 수준, 혈장 가용성 총 CD40L 수준, 말초 혈액에서의 혈장 세포-연관된 전혈 유전자 발현, B 세포 레퍼토리 분석 및 면역 세포 계수 (T, B 및 NK)로 이루어진 군으로부터 선택된 바이오마커에 의해 측정가능한 적어도 1종의 치료 효과를 가져올 수 있다. 치료는 혈소판-백혈구 응집, 혈장 d-이량체, 혈장 트롬빈 항-트롬빈 (TAT), 혈청 트로포닌 1, 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT) 및 심전도검사 (ECG), C-반응성 단백질 (CRP), 이뮤노글로불린 (IgM, IgG, IgA), 면역 세포 계수 (T, B 및 NK) 및 표현형으로 이루어진 군으로부터 선택된 바이오마커에 의해 측정가능한 유해 효과를 가져오지 않을 수 있다.

1차 안전성 (TE) 바이오마커 평가

CD40L을 표적화하는 임상 개발에서의 이전 분자는 혈전색전증 (TE)를 유도는 잠재력을 나타냈다. BMS-986004의 비임상, 비-인간 영장류 및 단일 상승 용량 임상 연구로부터의 모든 데이터는 BMS-986004가 TE의 유도와 연관된 혈소판 활성화 또는 다른 활성을 소유하지 않는다는 결론과 일치한다. 추가로 BMS-986004를 투여한 대상체에서의 TE의 위험을 완화시키기 위해, 혈소판 활성화 및 TE 잠재력의 1차 허용되는 마커의 세트를 빈번한 간격으로 모니터링하고, 실시간으로 분석한다. 위험을 모니터링하고 잠재적 TE 사건의 영향을 최소화하기 위해 혈장 및 혈청을 수집한다. 응고항진 상태의 증거를 갖는 환자를 배제하기 위해 스크리닝 시에 프로트롬빈 시간 (PT) 및 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT)을 평가한다. 혈장에서의 D-이량체 및 트롬빈 항-트롬빈 (TAT)을 TE 위험의 척도로서 정량화한다. 혈청 트로포닌 I을 잠재적으로 TE-관련된 준임상 심근경색의 지표로서 모니터링한다. 이들 1차 안전성 바이오마커 측정으로부터의 데이터를 수집하고, 모든 이용가능한 임상 데이터의 철저한 검토의 맥락에서 주의깊게 평가하며, 이들을 사용하여 용량 증량 전에 진행/비-진행 결정을 내린다.

표적 연관 바이오마커 평가

생체내 표적 연관 (TE)은 CD40L 수용체 점유율 (RO) 검정을 사용하여 투여후 빈번한 간격으로 평가한다. 전혈에서 CD4+ T 세포 상의 CD40L에 대한 BMS-986004의 결합은 투여전 신호에 비해 경쟁적, 형광-표지된, CD40L-특이적 항체로부터의 신호의 감소의 유동 세포측정법-기반 측정에 의해 결정한다.

탐색적 바이오마커 평가

RO에 의한 표적 연관을 확인하는 것에 추가로, 질환-관련 및 경로-특이적 생체내 생물학적 활성의 증거를 제공하기 위해 탐색적 PD 바이오마커를 측정한다. 혈소판 연관된 항혈소판 항체 역가를 면역검정에 의해 측정하고, 혈소판 Ag-특이적 B 세포를 ELISPOT에 의해 열거하여 항혈소판 자가면역 활성에 대한 BMS-986004의 효과를 평가한다. B 세포 레퍼토리를 B 세포 수용체 유전자의 고처리량 서열분석에 의해 조사한다. 유리 및 총 가용성 CD40L을 표적 연관 및 표적 부하의 척도로서 각각 면역검정 및 LC/MS에 의해 측정한다. 전임상 및 단일-상승 용량 임상 연구에서 BMS-986004의 존재에 의해 조정되는 것으로 이전에 제시된 유전자, 뿐만 아니라 관심 세포 유형, 예컨대 형질 세포와 연관된 유전자의 말초 혈액 발현을 마이크로어레이 및/또는 RT-PCR 기반 기술에 의해 측정한다.

탐색적 안전성 바이오마커 평가

보호 면역에 대한 BMS-986004의 효과를 평가하기 위해 혈청 및 세포-기반 바이오마커를 평가한다. 체액성 면역을 모니터링하기 위해 혈청 이뮤노글로불린 (IgG, IgM, IgA) 수준을 측정한다. 바이러스 재활성화에 대한 보호 면역의 존재를 바이러스 혈청학 (항-EBV, 항-CMV, 항-HBV)을 측정함으로써 평가한다. 급성 염증에 대한 감시는 혈청 CRP의 규칙적 측정에 의해 지지된다. 최종적으로, 면역 세포 하위세트에 대한 BMS-986004의 반복 투여의 임의의 효과를 전혈 유동 세포측정법에 의해 규칙적 세포 열거 (T, B 및 NK 세포 계수) 및 세포 표현형결정에 의해 평가한다.

실시예 8

대상체내 용량 증량

대상체내 용량 증량은 만약 대상체가 연구의 반응기를 완료한다면 그 후에 발생한다. 대상체내 용량 증량 결정은 4주 치료 후에 안전성 정보 및 혈소판 계수의 검토에 기반한다. 대상체에 대한 용량을 증량하는 결정은 BMS-986004의 제4 용량을 투여한지 7일 후인 제50일에 혈소판 계수를 평가한 후에 이루어진다. 대상체는 임상적으로 유의한 반응이 제43일 및 제50일에 수행된 마지막 2회 연속 계수 시의 혈소판 계수의 측정에 기반하여 달성되지 않고 유리한 안전성 프로파일이 관찰되지 않는다면 다음 보다 높은 용량의 BMS-986004를 투여받는다. 임상적으로 유의한 반응은 혈소판 계수 ≥50,000개/mm³과 함께 치료 전 대상체의 기준선 혈소판 계수로부터의 적어도 20,000개/mm³의 증가 및 출혈의 부재를 달성하는 것으로 정의된다. 이어서, 대상체는 연구의 나머지 기간 (완화기) 동안 보다 높은 용량 수준이 투여되며, 그러한 용량의 임상시험용 제품을 제8주, 제10주 및 제12주에 투여받는다. BMS-986004를 사용한 적극 치료 기간은 용량에 상관없이 임의의 개별 대상체에 대해 12주를 초과하지 않을 수 있다.

대상체의 혈소판 계수가 2회 연속 혈소판 계수 측정에 의해 나타냈을 때 450,000개/mm³을 초과한다면, BMS-986004의 투여를 중지한다. 그렇지 않으면, 대상체는 연구에 남아있고, 혈소판 계수는 정규 연구 방문 스케줄에 기반하여 평가한다. BMS-986004의 투여는 임상적으로 적절하다면 단지 연구 관리자와 조사자 사이의 논의 후에만 재개되고, 의학적 판단 및 대상체의 안전성에 의해 좌우된다.

용량 증량에 관한 결정은 앞선 보다 낮은 용량 코호트에서 최초 5명의 대상체로부터 연구 제15일까지의 안전성 데이터를 포함하는 모든 누적 안전성 정보의 검토에 기반하여 이루어진다. 다음 보다 높은 코호트로의 증량은 코호트에서 5명의 대상체가 적어도 2주 동안 따랐고 중지 규칙 중 어떠한 것도 조금도 충족되지 않았을 경우에 발생한다. 중지 규칙 중 어떠한 것도 용량 패널에 존재하지 않는다면, 용량 증량은 다음 보다 높은 용량 수준 내에서 진행된다.

코호트에 대해 선택된 용량은 그러한 코호트에 대해 원래 계획된 용량을 초과하지 않으며, 즉, 코호트 C에 대해 선택된 용량은 675 mg보다 크지 않아야 하고 코호트 D에 대해서는 최대 1500 mg이어야 한다.

하기 열거된 중지 규칙을 사용하여 등록 환자를 다음 보다 높은 코호트로 증량하는 것이 안전한지 여부를 결정한다. 임의의 하기 기준이 충족된다면 다음 계획된 용량으로의 용량 증량은 진행하지 않는다 (유해 사건에 대한 통상 용어 기준 [CTCAE, 버전 4.0]에 의해 정의된 바와 같은 유해 사건 등급):

코호트에서 4명 이상의 대상체가 혈소판 계수 >450,000개/mm³을 가짐,

2명 이상의 대상체가 연구 의약과 관련된 것으로 결정된 동일한 기관계에서의 심각한 유해 사건 (등급 3 이상)을 가짐,

연구 팀 및 조사자에 의해 결정된 바와 같이 안전성 및/또는 내약성의 한계에 도달한 것으로 결정됨.

용량 증량을 중단하는 다른 이유는, 개별 대상체에서 단일의 심각한 유해 사건을 관찰한 경우, 주어진 용량 패널에서 및 용량 패널에 걸쳐 경향을 관찰한 경우, 및 연구 팀 및 조사자에 의해 결정된 바와 같이 안전성 및/또는 내약성의 한계에 도달한 것으로 결정한 경우를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

임의의 상기 기준이 용량 수준 내에서 충족된다면, 보다 높은 용량 수준으로의 진행은 보류하고, 연구에 걸쳐 이용가능한 모든 안전성 데이터를 평가하여 보다 높은 용량 수준으로 진행하는 위험을 추정한다. 검토는 상기 열거된 SAE를 경험한 모든 대상체(들)를 포함할 것이다. 추가로, 데이터 세트는 용량 패널, 전체 용량 패널로부터의 대상체, 또는 적절하다면 지금까지 치료된 모든 무작위화된 대상체를 포함할 수 있다. 용량 증량이 임의의 이들 소견으로 인해 중지된다면, 추가의 코호트는 동일한 또는 보다 낮은 용량의 임상시험용 화합물을 투여받을 수 있다. 용량 증량의 시기에, 새로운 코호트의 용량 수준은 누적된 안전성 데이터가 좌우하는 대로 보다 낮은 용량으로 조정된다. 연구 설계 개략도는 도 2 및 3에 제시된다.

본 실시양태는 상기 실시예를 참조하여 상세히 기재되었지만, 다양한 변형이 이들 실시양태의 취지로부터 벗어나지 않으면서 이루어질 수 있고 통상의 기술자에게 용이하게 공지될 것으로 이해된다.

SEQUENCE LISTING <110> Bristol-Myers Squibb Company <120> METHODS OF TREATING AUTOIMMUNE DISEASE USING A DOMAIN ANTIBODY <130> 12376-WO-PCT <150> 62/048459 <151> 2014-09-10 <160> 6 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 261 <212> PRT <213> Homo Sapien <400> 1 Met Ile Glu Thr Tyr Asn Gln Thr Ser Pro Arg Ser Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Leu Pro Ile Ser Met Lys Ile Phe Met Tyr Leu Leu Thr Val Phe Leu 20 25 30 Ile Thr Gln Met Ile Gly Ser Ala Leu Phe Ala Val Tyr Leu His Arg 35 40 45 Arg Leu Asp Lys Ile Glu Asp Glu Arg Asn Leu His Glu Asp Phe Val 50 55 60 Phe Met Lys Thr Ile Gln Arg Cys Asn Thr Gly Glu Arg Ser Leu Ser 65 70 75 80 Leu Leu Asn Cys Glu Glu Ile Lys Ser Gln Phe Glu Gly Phe Val Lys 85 90 95 Asp Ile Met Leu Asn Lys Glu Glu Thr Lys Lys Glu Asn Ser Phe Glu 100 105 110 Met Gln Lys Gly Asp Gln Asn Pro Gln Ile Ala Ala His Val Ile Ser 115 120 125 Glu Ala Ser Ser Lys Thr Thr Ser Val Leu Gln Trp Ala Glu Lys Gly 130 135 140 Tyr Tyr Thr Met Ser Asn Asn Leu Val Thr Leu Glu Asn Gly Lys Gln 145 150 155 160 Leu Thr Val Lys Arg Gln Gly Leu Tyr Tyr Ile Tyr Ala Gln Val Thr 165 170 175 Phe Cys Ser Asn Arg Glu Ala Ser Ser Gln Ala Pro Phe Ile Ala Ser 180 185 190 Leu Cys Leu Lys Ser Pro Gly Arg Phe Glu Arg Ile Leu Leu Arg Ala 195 200 205 Ala Asn Thr His Ser Ser Ala Lys Pro Cys Gly Gln Gln Ser Ile His 210 215 220 Leu Gly Gly Val Phe Glu Leu Gln Pro Gly Ala Ser Val Phe Val Asn 225 230 235 240 Val Thr Asp Pro Ser Gln Val Ser His Gly Thr Gly Phe Thr Ser Phe 245 250 255 Gly Leu Leu Lys Leu 260 <210> 2 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> CDR1 Region <400> 2 Trp Glu Leu Met Gly 1 5 <210> 3 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> CDR2 Region <400> 3 Gly Ile Glu Gly Pro Gly Asp Val Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 4 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> CDR3 REGION <400> 4 Lys Asp Ala Lys Ser Asp Tyr 1 5 <210> 5 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Variable Region <400> 5 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Trp Glu 20 25 30 Leu Met Gly Trp Ala Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Glu Gly Pro Gly Asp Val Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Val Gly Lys Asp Ala Lys Ser Asp Tyr Arg Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 6 <211> 353 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Fusion Protein <400> 6 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Trp Glu 20 25 30 Leu Met Gly Trp Ala Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Glu Gly Pro Gly Asp Val Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Val Gly Lys Asp Ala Lys Ser Asp Tyr Arg Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys 115 120 125 Thr His Thr Ser Pro Pro Ser Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser 130 135 140 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 145 150 155 160 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 165 170 175 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 180 185 190 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 195 200 205 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 210 215 220 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 225 230 235 240 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 245 250 255 Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 260 265 270 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 275 280 285 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 290 295 300 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 305 310 315 320 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 325 330 335 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 340 345 350 Lys

Claims

(1) 가변 도메인으로서, 그의 아미노산 서열이 BMS2h-572-633 (서열식별번호: 5)을 포함하거나 또는 서열식별번호: 5와 5개 이하의 아미노산이 상이한 가변 도메인; 및 (2) 인간 Fc 도메인을 포함하는 항체 폴리펩티드의 치료 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 적어도 1회 용량의 항체 폴리펩티드는 약 75 mg 내지 약 1500 mg의 용량으로 투여되는 것인, 환자에서 면역 질환을 치료하는 방법.
제1항에 있어서, 항체 폴리펩티드의 가변 도메인이 (1) 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 영역; (2) 서열식별번호: 3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 영역; 및 (1) 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 갖는 CDR3 영역을 포함하는 것인 방법.
제1항에 있어서, 항체 폴리펩티드의 가변 도메인이 서열식별번호: 5에 대해 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
제1항에 있어서, 항체 폴리펩티드가 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
제1항에 있어서, 항체 폴리펩티드가 BMS-986004인 방법.
제1항에 있어서, 면역 질환이 원발성 면역 혈소판감소증 (ITP)인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 약 75 mg, 약 225 mg, 약 675 mg 및 약 1500 mg으로부터 선택되는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 약 200 mg 내지 약 1200 mg인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 용량이 2주마다 1회 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 폴리펩티드가 정맥내 투여를 위한 제약 조성물로 제제화되는 것인 방법.
제10항에 있어서, 제약 조성물이 제약상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 폴리펩티드가 정맥내로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 2회 용량이 투여되고, 적어도 2회 용량이 상이한 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 2회 용량이 투여되고, 적어도 2회 용량이 동일한 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 7회 용량이 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 치료 유효량의 항체 폴리펩티드가 환자에서 혈소판 계수를 정상화시키는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 치료 후에 적어도 20,000개/mm³ 증가한 말초 혈액 혈소판 계수를 갖는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 치료 전에 30,000개/mm³ 미만의 말초 혈액 혈소판 계수를 갖는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 치료 전에 비장절제된 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 면역억제제/면역조정제 및/또는 항염증제를 인간 환자에게 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.