KR20170066476A - 골다공증의 예방 및 치료를 위한 치환된 방향족 화합물 및 약제학적 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 대상체에서 골다공증의 예방 및/또는 치료를 위한, 골 형성의 자극을 위한, 골 개조의 자극을 위한, 조골세포의 분화 및 무기질화의 자극을 위한, 골 재흡수의 저해를 위한 그리고 아디포넥틴의 혈청 수준의 조절을 위한 화합물의 용도에 관한 것이다. 이러한 용도는 화학식 I의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에서 발견되었다:

식 중, A는 C₅ 알킬, C6 알킬, C₅　알켄일, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3 또는 4임)이고; R₁은 H, F 또는 OH이며; R₂는 H, F, OH, C6 알킬, C₅알켄일, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3 또는 4임)이고; R₃은 H, F, OH 또는 CH2Ph이며; R₄는 H, F, 또는 OH이고; Q는 1) (CH₂)_mC(O)OH(여기서 m은 1 또는 2임), 2) CH(F)-C(O)OH, 3) CF₂-C(O)OH 또는 4) C(O)-C(O)OH이다.

Description

골다공증의 예방 및 치료를 위한 치환된 방향족 화합물 및 약제학적 조성물{SUBSTITUTED AROMATIC COMPOUNDS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF OSTEOPOROSIS}

본 발명은 의약 분야에 관한 것이다. 본 발명의 특정 양상들은 골다공증의 예방 또는 치료를 위한 화합물, 약제학적 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다.

뼈는 끊임없이 전환되고 골 개조(bone remodeling)로서 알려진 과정으로 대체되는 고도로 역동적인 조직이다. 뼈를 개조할 수 있는 능력은, 오래된 뼈나 손상된 조직이 재생되고 골격의 구조가 기계적 요구에 가장 효율적으로 적응할 수 있는 것을 확실하게 해준다. 골 개조는 몇 주 동안 지속되는 재흡수 단계에서 파골 세포에 의한 오래된 뼈의 제거로 시작된다. 조골세포는 이어서 침식 공동으로 이동하여 3개월 또는 4개월에 걸쳐 새로운 뼈를 침착시킨다. 정상적인 골격에서, 골 개조는 아래에 포설된 새로운 뼈의 양이 제거된 뼈의 양과 동일하고 이에 따라서 건강한 골 질량을 유지시키도록 파골세포와 조골세포의 활성을 결합시킨다. 그러나 골 재흡수가 뼈 형성을 초과하면, 골의 순 손실(net loss)이 있게 된다. 결과적인 상태인 골다공증은 과도한 골 재흡수와 후속의 낮은 골 질량과 함께 뼈의 취약성 증가를 특징으로 한다.

골다공증은 단위 부피당 골 질량이 적절한 기계적 지지를 위해 요구되는 수준 이하로 감소되는 것을 특징으로 하는 다양한 원인의 골 질환에 사용되는 일반적인 용어이다(Krane, S.M. et al., "Metabolic Bone Disease" in Harrison's Principles of Internal Medicine, page 1889, Edition 11 (1987)). 골다공증의 한 형태는 노인 인구에 소비되는 건강 보조금의 상당 부분을 담당하는 노인성 골다공증이다(Resnick, N.M. et al. "Senile Osteoporosis Reconsidered", JAMA 261, 1025-1029 (1989)). 다른 두 가지 가장 일반적인 형태의 골다공증은 폐경전 또는 폐경후 골다공증과 코르티코스테로이드 유도 골다공증이다. 만성 신장 질환(chronic kidney disease: CKD) 환자는 무기질 대사의 변화와 그 후속의 골 구조의 변화의 결과로서의 골다공증을 포함할 수 있는 골 질환을 발생시킬 수 있다. 대부분의 이러한 변화는 신장 기능의 점진적인 감소로 악화된다. 실제로, 아래 단락에 요약된 바와 같이, 골다공증의 발병 확률을 증가시키는 여러 병적 상태가 발생할 수 있다. 골연화증-유사 골다공증은 칼슘의 손실과 같은 골다공증의 많은 증상을 공유한다. 골감소증은 정상적인 골밀도보다 낮지만 골다공증에서 관찰되는 것만큼 낮지는 않은 것을 지칭한다. 이것은 골다공증에 대한 전구체로 간주된다. 불완전 골형성증은 뼈 골절로 되는 경향이 있는 취약한 뼈를 특징으로 하는 선천성 골 장애이다. 골화석증증은 뼈가 단단하지만 정상보다 더 부서지기 쉬운 희귀 유전 질환이다. 골괴사증은 뼈에 대한 혈액 공급의 손실로 인해 뼈가 죽어 붕괴되는 질환이다. 골의 파제트병은 뼈의 과도한 분해와 형성에 이은 골 개조의 해체에 의해 초래된다.

공지된 바와 같이, 하기와 같은 각종 질환 및 병태가 골다공증을 초래할 수 있다: 류마티스성 관절염, 루푸스 및 다발성 경화증을 포함하는 자가면역 질환; 셀리악병(celiac disease), 염증성 장 질환, 위절제술 및 위장관 우회 시술을 포함하는 위장관 장애; 당뇨병, 부갑상선 기능항진증, 갑상선중독증 및 쿠싱 증후군(Cushing's syndrome)을 포함하는 내분비/호르몬 장애; 백혈병, 림프종, 다발성 골수종, 낫세포 빈혈병(골수 장애) 및 지중해빈혈(thalassemia)을 포함하는 혈액학적 장애; 유방암 및 전립선암을 포함하는 암; 우울증, 파킨슨병 및 척수 손상을 포함하는 신경 장애; 폐(COPD, 폐기종), 간 및 만성 신장 질환을 포함하는 장기 질환; 강직성 척추염; AIDS/HIV; 뼈의 골절; 섭식 장애 및 영양실조를 포함하는 빈약한 식이; 및 폐경(폐경전 및 폐경후).

역사적으로, 조골세포는 파골세포의 발달 및 따라서 골 흡수의 제어에서 마스터 세포(master cell)로 간주되어 왔다. 이제 면역계의 세포와 골세포 사이의 상호 작용이 골 재흡수의 조절에 대한 생각을 재정의했다. 파골세포의 확인과 골 파괴에서의 그의 역할은 표적화된 치료가 재흡수 능력을 감소시키는 것을 가능하게 한다. 그러한 치료법은 파골세포 분화를 촉진시키는 주요 사이토카인 중 하나 인 NFκB 리간드의 수용체 활성제(RANKL)를 간섭할 수 있는 제제의 사용을 포함한다. 이것은 암젠사(Amgen)에 의해 개발된 인간화 항-RANKL 항체(데노수맙(Denosumab)) 및 재조합 Fc오스테오프로테게린(Fcosteoprotegerin: Fc-OPG)의 사용을 통해 달성될 수 있다. 두 제품 모두 골 손실의 전임상 모델에서 효능을 입증하였고, 데노수맙은 임상 시험을 통해 진행 중이고; Fc-OPG는 면역 부작용으로 인해 임상 시험에서 제외되었다. 파골세포 활성의 다른 저해제는 비스포스포네이트, c-src 저해제, 카텝신 K 저해제 및 염소 채널 CLC7의 저해제를 포함한다(Gillespie, M.T. (2007) Arthritis Research & Therapy, Volume 9, No. 2, pp. 103-105). 특히, 비스포스포네이트는, 질소 함유 비스포스포네이트(알드로네이트, 이반드로네이트, 파미드로네이트 및 졸레드로네이트를 포함함)가 γ/δT 림프구의 증식을 촉진시키는 한편 질소-무함유 비스포스포네이트(예를 들어, 클로드로네이트)는 그러하지 않다는 점을 유의해야하지만, 관절염의 설치류 모델에서 골 손실을 제한하는 데 성공했다(Gillespie, M.T. (2007) Arthritis Research & Therapy, Volume 9, No. 2, pp. 103-105).

가장 최근의 치료 전략은 골다공증의 발병을 지연시키기 위하여 칼슘의 골 손실을 감소시키고자 시도한다(Dawson-Hughes, B. et al., "A controlled trial of the effect of calcium supplementation on bone density in postmenopausal women" NEJM 323, 878-883 (1990)). 이와 같이, 골다공증 치료에 가장 일반적으로 사용되는 화합물은 비스포스포네이트 약물 부류에 속한다. 그들은 골에 열성적으로 결합하고 골 재흡수를 저해하기 위해 파골 세포에 의해 내재화된다. 비스포스포네이트는 경구 또는 정맥내 경로로 투여될 수 있다. 알렌드로네이트(포스막스(Fosmax)(상표명), 경구)는 폐경기 골다공증 치료에 가장 일반적으로 처방되는 약물이다. 기타 미국 FDA 승인된 비스포스포네이트는 리세드로네이트(악토넬(Actonel)(상표명), 경구), 에티드로네이트(디드로넬(Didronel)(상표명), 경구), 졸레드로네이트(아클라스타(Aclasta)(상표명), 주입) 및 파미드로네이트(아레디알(Aredial)(상표명), 주입)이다. 경구 비스포스포네이트는 위장 부작용과 연관된다. 비스포스포네이트와 연관된 부작용은 일반적으로 가장 흔한 골절 부위인 골 경부에서가 아니라 대퇴골(femur)(대퇴골(thigh bone))의 비정상적인 골절을 포함한다. 그러나, 골다공증과 연관된 일반적인 고관절 골절의 빈도와 비교할 때 비스포스포네이트의 장기 사용과 연관된 이러한 골절은 드물다. 그럼에도 불구하고, 장기간의 비스포스포네이트 사용이 골의 전환을 과도하게 억제하여 그 후속으로 골의 미세 균열을 치료하는 어려움, 이러한 균열의 전파 및 궁극적으로 비정형 골절을 초래할 수 있다는 우려가 있다. 부가적으로, 식도암의 위험 증가는 경구 비스포스포네이트의 장기간 사용과 연관된다. 또한 비스포스포네이트 사용, 특히 졸레드로네이트(Zoledronate) 및 알렌드로네이트(Alendronate)가 심방 세동의 위험 인자로보고된 바 있다. 마지막으로, 암의 치료를 위해 정맥내 투여된 비스포스포네이트는 턱의 골괴사증과 연관되었다.

부갑상선 호르몬(1 내지 84 PTH)은 칼슘 항상성 및 간헐 투여시 골 개조에 대한 동화 작용에 중심적인 역할을 한다. 미국 FDA에 의해 승인된 테리파라타이드(포르테오(Forteo))는 뼈의 골절 위험이 높은 남성과 폐경 후 여성의 골다공증 치료에 사용되는 PTH의 일부분(아미노산 1-34)의 재조합 형태이다. 이것은 뼈의 골절의 치유를 가속화시키기 위하여 일부 허가범위외 사용(use off-label)을 발견할 수 있다. 테리파라타이드는 조골세포 형성을 촉진시키고 조골세포의 세포 자멸사를 예방한다. 그러나 테리파라타이드의 뼈에 대한 동화 작용에도 불구하고, 골다공증의 치료에 대한 사용은 동물 모델에서 골육종의 연관된 높은 빈도로 인해 감시되어 왔다. 따라서 테리파라타이드는 골 종양의 위험이 높은 환자에게 사용이 권장되지 않는다.

장기 호르몬 대체 요법(심혈관 장애, 자궁 및 암 등)의 잠재적 악영향의 결과로서, 이는 더 이상 골다공증의 예방에 권장되지 않는다. 이와 같이, 이것은, 타목시펜(Tamoxifen) 및 랄록시펜(Raloxifene)에 의해 예시되는 바와 같이, 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(Selective Estrogen Receptor Modulator: SERM) 부류의 약물의 도입에 의해 다소 대체되었다. 랄록시펜 염산염은 폐경기 여성에서 골다공증을 예방하기 위해 에비스타(Evista)로 미국 FDA에 의해 승인되었다. 사실상, 매일 경구 알렌드로네이트(비스포스포네이트)와 직접 비교한 결과, 매일 경구 랄록시펜이 뼈의 골절의 위험을 줄이는 데 동등하게 효과적인 것이 입증되었다. 그러나, 랄록시펜의 부작용은 치명적인 뇌졸중 및 정맥 혈전 색전증의 증가된 위험을 포함한다. 다른 부작용은 다리 부종, 호흡 곤란 및 시력 변화를 포함한다.

데노수맙은 골다공증, 치료-유도된 골 손실, 골 전이, 다발성 골수종 및 뼈의 거대 세포 종양의 치료를 위한 완전 인간 모노클로날 항체이다. 데노수맙은 폐경기 여성에서 골다공증을 예방하기 위해 프롤리아(Prolia)로 미국 FDA의 승인을 받았고, 고형 종양에서 골전이가 있는 환자의 골격 관련 증상을 예방하기 위해 엑스게바(Xgeva)로 승인받았다. 이 항체는 많은 골 손실 조건에서 골 제거를 위하여 주요 신호로서 역할하는 단백질인 RANKL(RANK 리간드)에 결합하여 이를 저해한다. 파골세포 전구체(전-파골세포)는 RANK 수용체를 발현한다. RANKL의 후속 결합은 수용체의 활성화 및 전-파골세포의 파골세포로의 숙성화를 유도한다. 그러나, 데노수맙의 부작용은 비뇨기 및 호흡기 감염, 백내장, 변비, 발진 및 관절통을 포함한다.

이상으로부터 알 수 있듯이, 골다공증의 예방 및/또는 치료에는 여러 가지 옵션이 있지만, 이러한 선택은 골다공증의 예방 및/또는 치료에 이용 가능한 보편적인 약물이 없다는 사실을 암시한다. 상기로부터 또한 명백한 바와 같이, 인용된 치료 옵션들 각각은 다수의 부작용을 동반한다. 실제로, 인간의 사용에 대해 승인된 상기의 약물과 부작용은 과학 문헌에 잘 기록되어 있다. 예를 들어, 골다공증 및 현재 치료법과 이의 부작용에 관한 비교적 최근의 검토 논문은 ["Osteoporosis - a current view of pharmacological prevention and treatment" Das, S. Crockett, J.C. Drug Design, Development and Therapy 7, 435-448 (2013)]이다. 이와 같이, 골다공증의 예방 및/또는 치료를 위해 (특히, 장수 증가 및 이에 따른 약물 투여 지속 기간의 관점에서) 보다 보편적이고 더 안전한 약물에 대한 필요성이 존재한다. 따라서 새로운 치료법에 대한 요구가 있다.

아스트라제네카 아베(AstraZeneca AB)에게 양도된 미국 특허 제6,372,728호(2002)는 비스포스포네이트의 개선된 경구 제형, 예컨대, 알렌드로네이트를 기술한다. 이 특허에 따르면, 많은 비스포스포네이트의 경구 생체 이용률은 식사 사이에 1 내지 10%이다. 개선된 제형은 중간-쇄 글리세라이드 흡수 촉진제를 사용한다. 펜실베니아 대학(University of Pennsylvania)에 양도된 미국 특허 제5,070,108호(1991)는 에트레티네이트와 같은 레티노이드로 골다공증 치료를 주장하고 있다. 건선의 치료를 위해 FDA에 의해 처음 승인되었지만, 출생 결함의 위험이 높으므로 에트레티네이트는 북미 시장에서 제외되었다. 오다나카팁(Odanacatib)은 골다공증 및 골 전이의 치료를 위하여 임상 개발 하에 있는 효소 카텝신 K의 저해제인 신약이다.

본 발명은 골다공증에 걸렸거나 또는 걸리기 쉬운 환자에 대해서 새로운 치료 방법, 화합물 및 약제학적 조성물에 대한 필요를 해소하는 것을 목적으로 한다.

본 발명의 추가적인 특징은 본 명세서의 논의, 도면 및 설명의 검토로부터 명백해질 것이다.

본 발명의 일반적 양상은 본 명세서에 정의된 화학식 I에 따른 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 약제학적 용도에 관한 것이다.

특정 양상은 골다공증의 예방 및/또는 치료를 위한 화합물 및 조성물의 용도에 관한 것이다. 소정 양상들은, 대상체에서 각종 형태의 골다공증에 대한 예방적 유효 및/또는 치료적 유효 제제로서의, 본 명세서에 정의된 화학식 I에 따른 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에 관한 것이다. 특정 실시형태에 따르면, 대상체는, 골 손실, 뼈의 골절 등으로 고생하거나 이들로 고생하기 쉬운 자이다.

특정 실시형태에 따르면, 본 발명의 화합물 및 조성물은 골 형성을 자극하고/하거나 골 개조를 자극하고/하거나 조골세포의 분화(differentiation) 및 무기질화(mineralization)를 자극하고/하거나 골 재흡수를 저해하는데 유용하다.

본 발명의 특정 양상은 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 몇몇 실시형태에 있어서, 골다공증은 폐경후의 골다공증(원발성 제1형), 원발성 제2형 골다공증, 속발성 골다공증 비정상적으로 높은 파골세포형성, 골연화증-유사 골다공증, 골감소증, 불완전 골형성증, 골화석증, 골괴사증, 골의 파제트병(Paget's disease of bone), 저인산염혈증 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 특정 실시형태에 있어서, 골다공증 폐경후 골다공증(원발성 제1형), 원발성 제2형 골다공증 또는 속발성 골다공증이다. 더욱 구체적인 실시형태에 있어서, 골다공증은 폐경후 골다공증(원발성 제1형)이다.

본 발명은 또한 본 발명의 화합물이 대상체에서 이하의 생물학적 활성들 중 하나 이상을 발현하는 치료 방법에 관한 것이다: 파골세포형성의 저해; 자극된 파골세포 전구체 세포에 의한 인터류킨-12(IL-12) 생성의 자극; 골 세포 내 산 포스파타제 활성의 저감(파골세포형성의 저감을 입증함); 골 내 오스테오프로테게린(OPG)에 대한 NF-κB 리간드의 수용체 활성제(RANKL)의 비(RANKL/PG 비)의 감소(이는 파골세포형성의 저감을 나타냄); 골 내 콜라겐 함량의 증가; 및 아디포넥틴의 혈청 수준의 조절(예컨대, 증가).

다른 양상에 따르면, 본 발명의 양상은, 골 손실의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에 있어서, 화합물의 투여는 칼슘의 손실을 저감시킨다. 일 실시형태에 있어서, 대상체는 골다공증을 앓고 있거나 이에 걸리기 쉬운 자이다. 일 실시형태에 있어서, 대상체는 폐경후 여성이다.

다른 양상에 따르면, 본 발명은 파골세포형성을 저해하는 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 파골세포 전구체 세포를 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하되, 여기서 화합물은 전구체 세포의 파골세포로의 분화를 저해한다.

다른 양상에 따르면, 본 발명은 자극된 파골세포 전구체 세포에 의해 인터류킨-12(IL-12) 생성을 자극시키는 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 상기 자극된 파골세포 전구체 세포를 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하되, 여기서 증가된 IL-12 생성은 화합물의 존재 하에 측정 가능하다.

다른 양상에 따르면, 본 발명은 골 세포 내 산 포스파타제 활성을 저감시키는 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 골 세포를 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하되, 여기서 저감된 포스파타제 활성은 화합물의 존재 하에 측정 가능하다.

다른 양상에 따르면, 본 발명은 골 세포 내 NF-κB 리간드의 수용체 활성제/오스테오프로테게린 비(RANKL　/OPG 비)의 발현 및/또는 활성을 저감시키는 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 골 세포를 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함한다.

다른 양상에 따르면, 본 발명은 골 내 콜라겐 함량을 증가시키는 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 골을 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함한다.

다른 양상에 따르면, 본 발명은 골 형성을 자극시키고/시키거나 골 개조를 자극시키고/시키거나 조골세포의 분화 및 무기질화를 자극시키고/시키거나 골 재흡수를 저해하는 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 상기 골 내 조골세포를 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함한다.

다른 양상에 따르면, 본 발명은 대상체에서 아디포넥틴의 혈청 수준을 조절하기 위한 방법에 관한 것으로, 당해 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에 있어서, 대상체는 비만인 및/또는 당뇨병 환자이다.

본 발명의 추가의 양상은 상기 언급된 방법들에 관한 것으로, 이들 방법은 비스포스포네이트, 오다나카팁, 알렌드로네이트, 리세드로네이트, 에티드로네이트, 졸레드로네이트, 파미드로네이트, 테리파라타이드, 타목시펜, 랄록시펜 및 데노수맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 약물을 동시에 투여하는 단계를 더 포함한다.

본 발명의 다른 관련된 양상은, 약제, 예컨대, 골다공증의 예방 및/또는 치료를 위한 약제의 제조를 위한 화학식 I의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 다른 특정예는 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 골다공증을 예방 및/또는 치료하기 위한 약제학적 조성물이다. 다른 특정 예는, 표 1에 정의된 바와 같은 화합물을 포함하는, 골다공증을 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 약제학적 조성물, 특히 화합물 I 및/또는 화합물 XXXI을 포함하는 약제학적 조성물이다. 관련된 양상은 본 명세서에 정의된 바와 같은 치료적 유효량의 약제학적 조성물을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다.

다른 양상에 따르면, 본 발명은, 골다공증의 예방 및/또는 치료에서 사용하기 위한, 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 이들 포함하는 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 추가 양상은 다음의 설명, 청구범위 및 본 명세서의 일반적 사항으로부터 당업자에게 명백할 것이다.

도 1은, 실시예 2에 따른, RAW264.7 세포 내 LPS-유도된 파골세포형성에 대한 화합물 I의 효과를 나타내는 사진 패널이다.
도 2는, 실시예 2에 따른, 화합물 I이 LPS-자극된 RAW264.7 세포 내 IL-12의 생성을 유발하는 것을 입증하는 막대 그래프이다.
도 3은, 실시예 3에 따른, 난소 절제된(OVX) 래트의 체중에 대한 화합물 I의 효과를 입증하는 선 그래프이다.
도 4는, 실시예 4에 따른, 난소 절제된(OVX) 래트의 소변 내 칼슘에 대한 화합물 I의 효과를 입증하는 막대 그래프 패널이다.
도 5는, 실시예 4에 따른, 난소 절제된(OVX) 래트의 혈청 내 산 포스파타제 활성에 대한 화합물 I의 효과를 입증하는 막대 그래프 패널이다.
도 6은, 실시예 4에 따른, 난소 절제된(OVX) 래트 경골 내 파골세포 마커의 RANKL/OPG mRNA 발현에 대한 화합물 I의 효과를 입증하는 막대 그래프이다.
도 7은, 실시예 4에 따른, 래트의 대퇴골의 골간단(metaphyse) 내 콜라겐 함량에 대한 화합물 I의 효과를 입증하는 막대 그래프이다.
도 8은, 실시예 4에 따른, 래트의 대퇴골의 골간단 내 콜라겐 함량에 대한 화합물 I의 효과를 나타내는 사진 패널이다.
도 9는, 실시예 5에 따른, 화합물 XIV가 골 형성 및 개조의 변형의 마커인 혈청 아디포넥틴 수준을 증가시키는 것을 입증하는 도트 그래프이다.

본 발명은 화학식 I의 화합물, 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 이를 포함하는 조성물 및 이의 용도를 개시한다. 본 발명의 각종 실시형태들은 하기를 포함한다:

A) 본 발명의 화합물

일 양상에 따르면, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 약제학적 용도에 관한 것이다:

식 중,

A는 C₅ 알킬, C₆ 알킬, C₅ 알켄일, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3 또는 4임)이거나; 또는 바람직하게는 C₅ 알킬, C₅ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3임)이거나; 또는 바람직하게는 C₆ 알킬, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 4임)이거나; 또는 바람직하게는 직쇄 C₅ 알킬, C₆ 알킬, C₅ 알켄일, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3 또는 4임)이거나; 또는 바람직하게는 직쇄 C₅ 알킬, C₅ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3임)이고;

R₁은 H, F 또는 OH이거나; 또는 바람직하게는 H 또는 OH이며;

R₂는 H, F, OH, C₅ 알킬, C₆ 알킬, C₅ 알켄일, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3 또는 4임)이거나; 또는 바람직하게는 H, F, OH, C₅ 알킬, C₅ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3임)이거나; 또는 바람직하게는 H, F, OH, C₆ 알킬, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 4임)이거나; 또는 바람직하게는 H, F, OH, 직쇄 C₅ 알킬, C₆ 알킬, C₅ 알켄일, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3 또는 4임)이거나; 또는 바람직하게는 H, F, OH, 직쇄 C₅ 알킬, C₅ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃(여기서 n은 3임)이거나; 또는 바람직하게는 H, OH, F 또는 C₅ 알킬이거나; 또는 바람직하게는 H, OH, F 또는 직쇄 C₅ 알킬이고;

R₃은 H, F, OH 또는 CH₂Ph이거나; 또는 바람직하게는 H, F 또는 OH이거나; 또는 바람직하게는 H 또는 OH이고;

R₄는 H, F 또는 OH이거나; 또는 바람직하게는 H 또는 OH이며;

Q는 하기이다:

1) (CH₂)_mC(O)OH(여기서 m은 1 또는 2임),

2) CH(F)-C(O)OH,

3) CF₂-C(O)OH, 또는

4) C(O)-C(O)OH.

특정 실시형태에 따르면, A는 C₅ 알킬 또는 C₆ 알킬이다.

특정 실시형태에 따르면, R₁은 H 또는 OH이다.

특정 실시형태에 따르면, R₂는 H, F, OH, C₅ 알킬 또는 C₆ 알킬이다.

특정 실시형태에 따르면, R₃은 H 또는 OH이다.

특정 실시형태에 따르면, R₄는 H 또는 OH이다.

특정 실시형태에 따르면, Q는,

1) (CH₂)_mC(O)OH(여기서 m은 1 또는 2임),

2) CH(F)-C(O)OH, 또는

3) CF₂-C(O)OH이다.

특정 실시형태에 따르면, Q는,

1) (CH2)_mC(O)OH(여기서 m은 1임),

2) CH(F)-C(O)OH,

3) CF₂-C(O)OH, 또는

4) C(O)-C(O)OH이다.

특정 실시형태에 따르면, Q는,

1) (CH₂)_mC(O)OH(여기서 m은 1임),

2) CH(F)-C(O)OH, 또는

3) CF₂-C(O)OH이다.

특정 실시형태에 따르면, Q는 (CH₂)_mC(O)OH(여기서 m은 1 또는 2임)이다.

다른 실시형태에 따르면, 화합물은, A가 C₅ 알킬 또는 C₆ 알킬이고; R₁은 H, F 또는 OH이며; R₂는 H, F, OH, C₅ 알킬 또는 C₆ 알킬이고; R₃은 H, OH 또는 CH₂Ph이며; R₄는 H, F 또는 OH이고; 그리고 Q는 (CH₂)_mC(O)OH(여기서 m은 1 또는 2임)인, 화학식 I의 것이다.

다른 실시형태에 따르면, 화합물은, A는 C₅ 알킬이고; R₁은 H이며; R₂는 H 또는 C₅ 알킬이고; R₃은 H이며; R₄는 H이고; 그리고 Q는 (CH₂)_mC(O)OH(여기서 m은 1임)인, 화학식 I의 것이다.

A, Q, R₁, R₂, R₃ 및 R₄의 임의의 조합에 대응하는 화학식 I의 화합물 또는 이의 특정 또는 바람직한 실시형태는 본 발명에 의해 명확하게 목표로 된다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "알킬"은 선형 배열로 특정된 수의 탄소 원자를 갖는 직쇄의 포화된 지방족 탄화수소 기를 포함하는 것으로 의도된다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "알켄일"은, 특정된 수의 탄소 원자를 갖되, 적어도 2개의 탄소 원자는 서로 이중 결합에 의해 결합되고, 그리고 E 또는 Z 위치화학(regiochemistry) 및 이들의 조합을 갖는, 불포화 직쇄 탄화수소기를 의미하는 것으로 의도된다.

화학식 I의 화합물의 예는, 이하의 표 1에 나열된 화합물 I 내지 XXIV를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 바람직한 실시형태에 있어서, 화합물은 화합물 I 내지 XXIV 중 어느 하나의 화합물의 산 형태 또는 약제학적으로 허용 가능한 염으로 표시된다.

출원인은 구조가 본 발명의 화합물들 중 일부의 구조에 관한 것인 화합물을 어딘가 다른 곳에 기재하였다. 예를 들어, 국제 PCT 특허 공개 번호 WO 2010/127448, WO　2010/127440 및 WO　2014/138906(이들은 그들의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)에 개시된 화합물을 참조한다. 따라서, 특정 실시형태에 있어서, 이들 PCT 출원에 개시된 어느 하나 또는 모든 화합물은 본 발명의 범위로부터 배제된다.

염

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"은 염기 부가염을 의미하는 것으로 의도된다. 약제학적으로 허용 가능한 염의 예는 또한 예를 들어 문헌[Berge et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm . Sci . 66, 1-19 (1977)]에 기재되어 있다. 약제학적으로 허용 가능한 염은 통상적인 화학적 방법에 의해 산성 잔기를 함유하는 모 제제로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 수중에서 또는 유기 용매 중에서 또는 이들의 2가지의 혼합물 중에서 이들 제제의 유리 산 형태를 적절한 염기의 화학량론적 양과 반응시킴으로써 제조된다. 염은 제제의 최종 단리 또는 정제 동안 또는 그의 유리 산 형태로 본 발명의 정제된 화합물을 원하는 대응하는 염기와 개별적으로 반응시키고, 이렇게 형성된 염을 단리시킴으로써 동일 반응계에서 제조될 수 있다.

화학식 I의 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염은 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 리튬, 암모늄, 망간, 아연, 철, 또는 구리의 염기 부가염으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직한 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염은 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 또는 리튬 염일 수 있다. 더 바람직하게는 약제학적으로 허용 가능한 염은 나트륨이다.

기재된 화합물의 모든 산, 염 및 다른 이온성 및 비-이온성 형태는 본 발명의 화합물로서 포함된다. 예를 들어, 화합물이 본 명세서에서 산으로 표시된다면, 화합물의 염 형태가 또한 포함된다. 마찬가지로, 화합물이 염으로서 표시된다면, 산 형태가 또한 포함된다.

전구약물

소정의 실시형태에 있어서, 화학식 I로 표시되는 본 발명의 화합물(여기서 상기 화합물은 유리 카복실산 형태로 존재함)은, 또한 모든 약제학적으로 허용 가능한 염, 등전자 등가물, 예컨대, 테트라졸 및 이들의 전구약물 형태를 포함할 수 있다. 후자의 예는 알코올 또는 아미노산을 포함하는 아민과 화학식 I에 의해 정의된 유리산의 반응 시 얻어진 약제학적으로 허용 가능한 에스터 또는 아마이드를 포함한다.

카이럴성

본 발명의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 전구약물은 하나 이상의 비대칭 중심, 카이럴 축 및 카이럴 면을 함유할 수 있고, 따라서 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 다른 입체이성질체 형태가 생길 수 있으며, (R)- 또는 (S)-와 같은 절대 입체화학 용어로 정의될 수 있다. 본 발명은 모든 이러한 가능한 이성질체뿐만 아니라 그의 라세미체 및 광학적으로 순수한 형태를 포함하는 것으로 의도된다. 광학적으로 활성인 (+) 및 (-), (R)- 및 (S)-이성질체는 카이럴 신톤(synthon) 또는 카이럴 시약을 사용하여 제조될 수 있거나, 또는 통상적인 기법, 예컨대 역상 HPLC를 사용하여 분해될 수 있다. 라세미 혼합물이 제조될 수 있으며, 이후에 개개의 광학 이성질체로 분리되거나 또는 이들 광학 이성질체는 카이럴 합성에 의해 제조될 수 있다. 거울상이성질체는 당업자에게 공지된 방법에 의해, 예를 들어, 결정화, 기체-액체 또는 액체 크로마토그래피, 하나의 거울상이성질체와 거울상이성질체 특이적 시약의 선택적 반응에 의해 이후에 분리될 수 있는 부분 입체이성질체 염의 형성에 의해 분해될 수 있다. 또한 원하는 거울상이성질체가 분리 기법에 의해 다른 화학적 실체(entity)로 전환되는 경우, 그 다음에 원하는 거울상이성질체 형태를 형성하기 위하여 추가적인 단계가 필요하다는 것이 인식될 것이다. 대안적으로, 특이적인 거울상이성질체는 광학적으로 활성인 시약, 기질, 촉매 또는 용매를 사용하여 비대칭 합성에 의해 또는 비대칭 변화에 의해 하나의 거울상이성질체를 다른 것으로 전환시킴으로써 합성될 수 있다.

본 발명의 소정의 화합물은 쌍성 이온 형태(Zwitterionic form)로 존재할 수 있으며, 본 발명은 이들 화합물 및 이들의 혼합물의 쌍성 이온 형태를 포함한다.

수화물

추가로, 본 발명의 화합물은 또한 수화 형태 및 무수 형태로 존재할 수 있다. 본 명세서에 기재된 화학식들 중 임의의 화학식의 수화물은 1수화물로서 또는 다가수화물(polyhydrate)의 형태로 존재할 수 있는 본 발명의 화합물로서 포함된다.

B) 제조 방법

일반적으로, 본 발명의 모든 화합물은 용이하게 입수 가능한 및/또는 통상적으로 제조 가능한 출발물질, 시약 및 통상적인 합성 과정을 사용하여 임의의 통상적인 방법에 의해 제조될 수 있다. 특히 관심 잇는 것은 문헌[Hundertmark, T.; Littke, A.F.; Buchwald, S.L.; Fu, G.C. Org . Lett . 12, 1729-1731 (2000)]의 작업이다.

본 명세서에서의 실시예 부문은, 화합물 I 내지 XXVI의 합성을 위한 일반적 반응식 및 제한 없이, 구체적 예를 제공한다.

C) 약제학적 용도

본 명세서에서 나타내고 예시되는 바와 같이, 본 발명의 화합물은 유리한 약제학적 특성을 가지며, 이들 화합물은 대상체에서 유용한 약제학적 용도를 가질 것이다. 본 발명자에 의해 상정되는 의학적 및 약제학적 용도는, 각종 형태의 골다공증의 예방 및/또는 치료를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "골다공증"은 뼈의 골절의 위험 증가를 초래할 수 있는 골 질량 및 밀도의 감소를 특징으로 하는 진행성 골 질환을 지칭한다. 용어 "골다공증"은 원발성 제1형 골다공증 또는 폐경후 골다공증(폐경 후의 여성에서 가장 통상적임), 원발성 제2형 골다공증(일반적으로 75세 이후의 여성 및 남성 둘 다에서 발생함), 및 속발성 골다공증(임의의 연령에서 일어날 수 있고, 그 형태는 만성 취약한 의학적 문제 또는 질환, 또는 글루코코르티코이드 등과 같은 약물의 장기적인 사용에 기인됨(이 질환은 이어서 스테로이드- 또는 글루코코르티코이드-유도 골다공증이라 불릴 수도 있음))을 포함한다. 본 명세서에서 이용되는 바와 같이, "골다공증"은 또한 비정상적으로 높은 파골세포형성, 골연화증-유사 골다공증, 골감소증, 불완전 골형성증, 골화석증, 골괴사증, 골의 파제트병, 저인산염혈증 및 이들의 조합 등과 같은 의 손실을 수반하는 골 장애를 포함한다.

공지된 바와 같이, 각종 질환 및 병태가 골다공증을 초래할 수 있고, 그리고 본 발명은 하나 이상의 이들 원인에 직접 또는 간접적으로 관련된 골다공증을 예방 및/또는 치료하는데 유용할 수 있다:

류마티스성 관절염, 루푸스 및 다발성 경화증을 포함하는 자가면역 질환;

셀리악병, 염증성 장 질환, 위절제술 및 위장관 우회 시술을 포함하는 위장관 장애;

당뇨병, 부갑상선 기능항진증, 갑상선중독증 및 쿠싱 증후군을 포함하는 내분비/호르몬 장애;

백혈병, 림프종, 다발성 골수종, 낫세포 빈혈병(골수 장애) 및 지중해빈혈을 포함하는 혈액학적 장애;

유방암 및 전립선암을 포함하는 암;

우울증, 파킨슨병 및 척수 손상을 포함하는 신경 장애;

폐(COPD, 폐기종), 간 및 만성 신장 질환을 포함하는 장기 질환;

강직성 척추염;

AIDS/HIV;

뼈의 골절;

섭식 장애 및 영양실조를 포함하는 빈약한 식이; 및

폐경전 및 폐경후 골다공증 및 코르티코스테로이드 유발 골다공증.

일 실시형태에 있어서, 골다공증은 원발성 제1형 골다공증 또는 폐경후 골다공증이다. 다른 실시형태에 있어서 골다공증은 원발성 제2형 골다공증이다.

용어 "대상체"는 골다공증이 발생할 수 있거나, 또는 이러한 질환에 걸리기 쉬운 살아 있는 유기체를 포함한다. 용어 "대상체"는 동물, 예컨대, 포유동물 또는 조류를 포함한다. 바람직하게는, 대상체는 인간, 말, 개 및 고양이를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아닌 포유동물이다. 몇몇 실시형태에 있어서, 마우스는 포유동물의 범위로부터 배제된다. 더욱 바람직하게는, 대상체는 인간이다. 가장 바람직하게는, 대상체는 치료를 필요로 하는 인간 환자이다. 바람직한 실시형태에 있어서, 대상체는 이하의 병태들 중 어느 하나를 지니거나 걸려 있는 사람이다: 원발성 제1형 골다공증, 폐경후 골다공증, 폐경(폐경전 및 폐경후), 원발성 제2형 골다공증, 75세 초과인 노인, 뼈의 골절, 골다공증, 만성 취약한 의학적 문제 또는 질환, 글루코코르티코이드 등과 같은 약제의 장기적인 사용, 비정상적으로 높은 파골세포형성, 골연화증-유사 골다공증, 골감소증, 불완전 골형성증, 골화석증, 골괴사증, 골의 파제트병, 저인산염혈증 및 이들의 조합. 바람직한 실시형태에 있어서, 대상체는 폐경후 여성이다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, "예방하는" 또는 "예방"은 적어도 질병 또는 장애를 획득할 위험(또는 이에 대한 감수성)의 가능성(즉, 질병에 노출될 수 있거나 또는 질병에 취약할 수 있지만, 아직 질병의 증상을 경험하거나 또는 나타내지 않은 환자에서 질병의 임상적 증상들 중 적어도 하나가 발생하는 것)의 감소를 지칭하는 것으로 의도된다. 이러한 환자를 확인하기 위한 생물학적 및 생리적 변수가 본 명세서에 제공되며, 이는 또한 의사에게 잘 공지되어 있다. 바람직한 실시형태에 있어서, "예방하는" 또는 "예방"은 골 질량 및/또는 골 밀도의 감소를 예방하고/하거나 뼈의 골절의 위험을 저감시키는 것을 지칭한다.

용어 대상체의 "치료" 또는 "치료하는"은 질환 또는 병태, 질환 또는 병태의 증상 또는 질환 또는 병태의 위험(이에 대한 감수성)을 지연시키거나, 안정화시키거나, 낫게 하거나, 치유하거나, 완화시키거나, 경감시키거나, 변경시키거나, 교정하거나, 덜 악화시키거나, 호전시키거나, 개선시키거나 또는 영향을 미칠 목적으로 대상체에 대한 본 발명의 화합물의 적용 또는 투여(또는 대상체로부터의 세포 또는 조직에 본 발명의 화합물의 적용 또는 투여)를 포함한다. 용어 "치료하는"은 임의의 객관적 또는 주관적 변수, 예컨대 감퇴; 차도; 악화 속도의 감소; 질병 중증도 의 감소; 안정화, 증상의 감소 또는 대상체가 손상, 병리 또는 병태를 더 견딜 수 있게 만드는 것; 악화 또는 쇠퇴 속도의 늦춤; 최종 악화 지점을 덜 쇠약하게 만드는 것; 또는 대상체의 신체 또는 정신적 웰빙을 개선시키는 것을 포함하는, 손상, 병리학 또는 병태의 치료 또는 개선에서 임의의 성공 징후를 지칭한다. 몇몇 실시형태에 있어서, 용어 "치료하는"은 대상체의 기대 수명을 증가시키고/시키거나 추가적인 치료가 요구되기 전에 지연시키는 것을 포함할 수 있다. 바람직한 실시형태에 있어서, "치료하는" 또는 "치료"는 골 질량 및/또는 골 밀도를 증가시키고/시키거나 뼈의 골절의 치유를 증가시키는 것을 지칭한다.

또한, 몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물은 골다공증의 예방 및/또는 치료를 위하여 단일요법용으로 이용된다. 다른 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물은 골다공증의 치료에 이용되는 약물을 포함하지만, 이것으로 제한되는 것은 아닌 이미 승인된 약물과 병용해서 사용된다. 본 발명의 화합물과 병용하여 사용될 수 있는 공지된 골다공증-관련 제제의 예는 비스포스포네이트, 오다나카팁, 알렌드로네이트, 리세드로네이트, 에티드로네이트, 졸레드로네이트, 파미드로네이트, 테리파라타이드, 타목시펜, 랄록시펜, 및 데노수맙을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

따라서, 본 발명에 따른 치료 방법은 또한 다른 치료적으로 유효한 제제의 투여와 함께, 본 발명에 따른 적어도 1종의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 공동-투여를 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 추가의 양상은 유효량의 제1 제제 및 제2 제제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체의 동반 요법적 치료 방법(concomitant therapeutic treatment method)에 관한 것으로, 여기서 제1 제제는 화학식 I에서 정의된 바와 같고, 제2 제제는 앞서 본 명세서에 정의된 바와 같은 장애 또는 질환 중 어느 하나의 예방 또는 치료를 위한 것이다. 본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 어구 "동반 요법적 치료" 또는 "와 동반하여"에서와 같이 용어 "동반" 또는 "동반하여"는 제2 제제의 존재 하에 제1 제제를 투여하는 것을 포함한다. 동반 요법적 치료 방법은 제1, 제2, 제3 또는 추가적 제제가 공동-투여되는 방법을 포함한다. 동반 요법적 치료 방법은 또한 제1 또는 추가적 제제가 제2 또는 추가적 제제의 존재 하에 투여되는 방법을 포함하고, 여기서 제2 또는 추가적 제제는, 예를 들어, 이전에 투여되어 있을 수도 있다. 동반 요법적 치료 방법은 상이한 작용제로서 단계적으로 시행될 수 있다. 예를 들어, 하나의 작용제는 제1 제제를 대상체에게 투여할 수 있고, 그리고 제2 작용제가 대상체에게 투여될 수 있으므로, 제2 제제 및 투여 단계는 동시에 시행될 수 있거나 또는 거의 동시에 또는 제2 제제(및/또는 추가적 제제)의 존재 하에 투여 후 제1 제제(및/또는 추가적 제제)가 있는 한, 떨어진 시각에 시행될 수 있다. 작용제 및 대상체는 동일한 실체(예컨대, 인간)일 수 있다.

따라서, 본 발명은 또한 상기 언급된 질환 또는 병태 중 어느 하나의 증상 또는 합병증을 예방, 저감 또는 제거하는 방법에 관한 것이다. 이 방법은 본 발명의 적어도 하나의 화합물을 포함하는 제1 약제학적 조성물 및 1종 이상의 추가의 활성 성분을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 모든 활성 성분은 치료될 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상 또는 합병증을 저해, 저감 또는 제거하기에 충분한 양으로 투여된다. 일 양상에 있어서, 제1 및 제2 약제학적 조성물의 투여는 적어도 약 2분만큼 시간적으로 이격된다. 바람직하게는 제1 제제는 본 명세서에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 예컨대, 나트륨염이다. 제2 제제는 앞에서 부여된 화합물(예컨대, 골다공증의 예방 및/또는 치료를 위해 사용되는 제제 또는 약물)의 일람표로부터 선택될 수 있다.

파골세포형성의 저해

파골세포는 골 조직을 재흡수하는 골 세포의 하나의 유형이다. 파골세포는 산 및 콜라게나제를 분비함으로써 분자 수준에서 골을 해체한다. 이 과정은 골 재흡수로서 공지되어 있다. 파골세포형성은 파골세포의 전구체의 파골세포로의 분화를 지칭한다. 골다공증의 예방 및/또는 치료에서, 파골세포형성을 저감시키는 것이 바람직하다.

조골세포는 골을 합성하는 세포의 하나의 유형이다. 조골세포는 간충직 줄기 세포로부터 발생된다. 골다공증의 예방 및/또는 치료에서, 조골세포 분화를 자극시키는 것이 바람직하다.

이하에 실시예에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물은 파골세포형성을 저해 및/또는 저감시킬 수 있다. 이것은 예를 들어 하기에 의해 입증된다: TRAP 세포의 부재(실시예 2; 도 1); LPS-자극된 RAW264.7 세포 내 IL-12 생성의 강력한 유도(실시예 2 및 3); 생체내 칼슘 손실의 저감(실시예 4, 도 4); 생체내 산 포스파타제 활성의 저감(실시예 4, 도 5); 생체내 RANKL/OPG의 mRNA 발현의 감소(실시예 4, 도 6); 생체내 콜라겐 함량의 증가(실시예 4, 도 7 및 도 8); 및 아디포넥틴의 혈청 수준의 증가(실시예 5, 도 9).

이들 결과는 파골세포의 활성의 저해 및/또는 저감을 통해서 골다공증을 예방/치료하는 본 발명의 화합물의 능력을 시사한다.

이 결과는 또한, 칼슘 손실을 포함하지만, 이것으로 제한되는 것은 아닌 골 손실을 예방 및/또는 저감시키는 본 발명의 화합물의 능력을 입증한다. 따라서, 이들 결과는 조골세포 분화의 자극을 통해서 골다공증을 예방/치료하는 본 발명의 화합물의 능력을 더욱 시사한다.

인터류킨 -12(IL-12) 생성의 자극

이하의 실시예에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물은 LPS의 존재 하에 IL-12의 생성을 유도시킨다. 이러한 결과는, IL-12의 유도의 결과로서 골다공증을 예방 및/또는 치료하는 이러한 화합물의 능력을 시사한다. 이것은 IL-12가 파골세포형성에 대한 직접 저해 효과를 지니는 것을 교시하는 과학 문헌에 의해 뒷받침된다.

따라서, 몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 자극된 파골세포 전구체 세포에 의한 생성을 포함하지만, 이것으로 제한되는 것은 아닌 인터류킨-12(IL-12) 생성의 자극시키는데 유용하다.

산 포스파타제 활성의 저감

이하의 실시예에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물은, 난소 절제된 래트의 혈청에서 측정된 바와 같이, 효소적 산 포스파타제 활성을 저감시킨다. 이러한 결과는 효소적 산 포스파타제 활성의 저감의 결과로서 골다공증을 예방 및/또는 치료하는 이러한 화합물의 능력을 시사한다.

따라서, 몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 골 세포 내 산 포스파타제 활성을 저감시키는데 유용하다.

NF -κB 리간드의 수용체 활성제( RANKL )의 발현 저감

이하의 실시예에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물은, 난소 절제된 래트에서 측정된 바와 같이, RANKL의 mRNA 발현을 저감시킨다. 이러한 결과는 RANKL의 발현 및/또는 생물학적 활성의 저감의 결과로서 골다공증을 예방 및/또는 치료하는 이러한 화합물의 능력을 시사한다.

따라서, 몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 골 세포 내 RANKL의 발현 및/또는 활성을 저감시키는데 유용하다.

콜라겐 함량의 증가

이하의 실시예에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물은, 난소 절제된 래트의 대퇴골의 골간단에서 측정된 바와 같이, 골 내 콜라겐의 함량을 증가시킨다. 이러한 결과는 골 내 콜라겐 함량의 증가에 의해 입증된 바와 같이 골다공증을 예방 및/또는 치료하는 이러한 화합물의 능력을 시사한다.

따라서, 몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 살아있는 골 내 콜라겐 함량을 증가시키는데 유용하다.

아디포넥틴의 수준의 증가

이하의 실시예에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물은 비만 당뇨병 마우스의 혈청에서 측정된 바와 같이 아디포넥틴의 수준을 증가시킨다. 이러한 결과는 골 형성, 개조 및 무기질화를 자극시키고/시키거나, 골 재흡수를 저해함으로써 골다공증을 예방 및/또는 치료하는 화합물의 능력을 시사한다.

따라서, 몇몇 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 골 형성의 자극을 위하여 그리고/또는 골 개조의 자극을 위하여 그리고/또는 조골세포의 분화 및 무기질화의 자극을 위하여 그리고/또는 골 재흡수의 저해를 위하여 유용하다.

D) 약제학적 조성물 및 제형

본 발명의 관련된 양상은 본 명세서에 기재된 본 발명의 화합물(예컨대, 화학식 I의 화합물)의 1종 이상을 치료적 유효량으로 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 이전에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 약제학적 조성물은, 골다공증의 예방 및/또는 치료에; 파골세포형성의 저해에; 자극된 파골세포 전구체 세포에 의한 인터류킨-12(IL-12) 생성의 자극에; 골 세포 내 산 포스파타제 활성의 저감에; 골 세포 내 NF-κB 리간드의 수용체 활성제(RANKL)의 발현의 저감에; 골 내 콜라겐 함량의 증가에, 골 형성의 자극에; 골 개조의 자극에; 골 무기질화의 자극에; 그리고/또는 골 재흡수의 저해에 유용할 수 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "치료적 유효량"은, 특정 장애, 질환 또는 병태를 치료하거나 또는 예방하기 위하여 대상체에게 투여될 때, 그 장애, 질환 또는 병태의 이러한 치료 또는 예방을 달성하기에 충분한 화합물의 양을 의미한다. 투약량 및 치료적 유효량은 사용된 구체적 제제의 활성, 대상체의 연령, 체중, 일반적 건강상태, 성별 및 식이요법, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도, 및 임의의 약물 병용, 적용가능하다면, 의사가 바라는 화합물의 대상체에 대한 효과(예컨대, 골 질량 및/또는 골 밀도의 증가(또는 이의 감소의 저감), 뼈의 골절의 위험의 저감 등을 포함하는 인자들에 의해 입증된 바와 같은 전체적 또는 부분적 반응) 및 화합물의 특성(예컨대, 생체이용가능성, 안정성, 효력, 독성 등) 및 대상체가 고통 받고 있는 특정 장애를 포함하는 다양한 인자에 따라서 다를 수 있다. 추가로, 치료적 유효량은 대상체의 혈액 변수(예컨대, 칼슘 수준, 지질 프로파일, 인슐린 수준, 혈당증), 질환 상태의 중증도, 장기 기능 또는 기저 질환 또는 합병증에 좌우될 것이다. 이러한 적절한 용량은 본 명세서에 기재된 검정을 포함하는 임의의 이용가능한 검정을 사용하여 결정될 수 있다. 본 발명의 1종 이상의 화합물이 인간에서 투여될 때, 의사는, 예를 들어, 우선 상대적으로 낮은 용량을 처방하고, 이후에 적절한 반응이 얻어질 때까지 용량을 증가시킬 수 있다. 투여될 용량은 궁극적으로 종양학자의 재량일 것이다. 그러나, 일반적으로, 본 발명의 화합물에 대한 용량은 인간에서 약 1 내지 약 50 ㎎/㎏/일의 범위일 수 있다. 선택된 실시형태에 있어서, 이 범위는 인간에서 1 내지 30 ㎎/㎏/일일 수 있다. 선택된 실시형태에 있어서, 이 범위는 인간에서 1 내지 20 ㎎/㎏/일일 수 있다. 선택된 실시형태에 있어서, 이 범위는 인간에서 5 내지 18 ㎎/㎏/일일 수 있다. 선택된 실시형태에 있어서, 이 범위는 인간에서 1 내지 18 ㎎/㎏/일일 수 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "약제학적 조성물"은 본 명세서에 정의된 화학식 I에 따른 본 발명의 적어도 1종의 화합물 및 적어도 1종의 약제학적으로 허용 가능한 담체, 희석제, 비히클 또는 부형제의 존재를 지칭한다. 본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용 가능한 담체", "약제학적으로 허용 가능한 희석제" 또는 "약제학적으로 허용 가능한 부형제"는, 제한 없이, 대상체, 바람직하게는, 인간에서 사용하기에 허용 가능한 임의의 애주번트, 담체, 부형제, 활택제, 감미제, 희석제, 보존제, 염료/착색제, 향미 증진제, 계면활성제, 습윤제, 분산제, 현탁제, 안정제, 등장제, 용매, 에멀전화제 또는 캡슐화제, 예컨대, 리포좀, 사이클로덱스트린, 캡슐화 폴리머 전달 시스템 또는 폴리에틸렌글라이콜 매트릭스를 의미하는 것으로 의도된다. 이는 바람직하게는 동물에서, 더 바람직하게는 인간에서 사용을 위한 연방 또는 주정부의 규제 기관에 의해 승인되거나 또는 승인가능한 또는 미국 약전에서 또는 다른 일반적으로 인식된 약전에서 열거된 화합물 또는 조성물을 지칭한다. 약제학적으로 허용 가능한 비히클은, 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글라이세롤, 프로필렌 글라이콜 및 액체 폴리에틸렌 글라이콜), 이들의 적합한 혼합물 및 식물성 오일을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 비히클의 추가적인 예는 하기를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다: 주사용수 USP; 수성 비히클, 예컨대, 하기로 제한되는 것은 아니지만, 염화나트륨 주사액, 링거 주사액, 덱스트로스 주사액, 덱스트로스 및 염화나트륨 주사액 및 락트산 링거 주사액; 수혼화성 비히클, 예컨대, 하기로 제한되는 것은 아니지만, 에틸 알코올, 폴리에틸렌 글라이콜 및 프로필렌 글라이콜; 및 비수성 비히클, 예컨대, 하기로 제한되는 것은 아니지만, 옥수수유, 면실유, 땅콩유, 참깨유, 에틸 올레이트, 아이소프로필 미리스테이트 및 벤질 벤조에이트. 미생물 작용의 방지는 항박테리아 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로뷰탄올, 페놀, 아스코르브산, 티메로살 등에 의해 달성될 수 있다. 많은 경우에, 등장제, 예를 들어 당, 염화나트륨 또는 폴리알코올, 예컨대, 만니톨 또는 솔비톨이 조성물 중에 포함된다. 주사가능한 조성물의 장기적인 흡수는 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 또는 젤라틴을 조성물 내에 포함함으로써 초래될 수 있다.

본 발명의 조성물은 본 명세서에 정의된 화학식 I의 1종 이상의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 유도체, 염, 전구약물, 유사체 및 이성질체 또는 거울상이성질체를 포함할 수 있다. 활성 화합물의 제형은 장용, 점액(설하, 폐 및 직장을 포함함), 비경구(근육내, 피부내, 피하 및 정맥내를 포함함) 또는 국소(연고, 크림 또는 로션을 포함함) 투여에 적합한 형태로 약제학적 조성물을 제공하도록 제조될 수 있다. 제형은, 적절한 경우에, 분리된 투약량 단위로 편리하게 제공될 수 있고, 그리고 약제학적 제형 분야에서 충분히 공지된 방법들 중 임의의 것에 의해 제조될 수 있다. 모든 방법은 활성 약제학적 성분을 필요가 기술되는 경우 액체 담체 또는 미세하게 분할된 고체 담체 또는 둘 다와 합치는 단계를 포함한다. 필요한 경우, 상기 제형은 활성 약제학적 성분의 지속적인 방출을 제공하도록 채용될 수 있다. 당업계에 충분히 공지된 지속된 방출 제형은 협측 주사, 연속 주입, 생체 적합성 중합체 또는 리포솜의 사용을 포함한다.

E) 키트

본 발명의 화합물은, 키트의 부분으로서, 선택적으로 용기(예를 들어, 포장, 박스, 바이알 등)를 포함하여 포장될 수 있다. 키트는 본 명세서에 기재된 방법에 따라 상업적으로 사용될 수 있고, 본 발명의 방법에서 사용하기 위한 설명서를 포함할 수 있다. 추가적인 키트 성분은 산, 염기, 완충제, 무기염, 용매, 항산화제, 보존제 또는 금속 킬레이터를 포함할 수 있다. 추가적인 키트 성분은 순수한 조성물로서 또는 하나 이상의 추가적인 키트 성분을 포함하는 수용액 또는 유기 용액으로서 존재한다. 키트 성분의 어떤 것 또는 모두는 선택적으로 완충제를 추가로 포함한다.

본 발명의 화합물은 동시에 또는 동일한 투여 경로에 의해 환자에게 투여될 수 있거니 또는 그렇지 않을 수도 있다. 따라서, 본 발명의 방법은, 의사에 의해 사용될 때, 환자에게 2가지 이상의 활성 성분의 적절한 양의 투여를 단순화할 수 있다.

본 발명의 전형적인 키트는 본 명세서에 정의된 화학식 I로서 정의된 바와 같은 본 발명에 따른 적어도 1종의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 단위 투약 형태(unit dosage form), 및 적어도 1종의 추가적인 활성 성분의 단위 투약 형태를 포함한다. 본 발명의 화합물과 함께 사용될 수 있는 추가적인 활성 성분의 예는, 본 발명의 화합물과 병용하여 사용될 수 있었던 본 명세서에서 앞서 나타낸 바와 같은 약물(예컨대, 골다공증의 치료에 사용되는 약물) 중 어떤 것을 포함하지만, 이것으로 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 키트는 1종 이상의 활성 성분을 투여하기 위하여 사용될 수 있는 약제학적으로 허용 가능한 비히클을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 활성 성분이 비경구 투여를 위해 재구성되어야 하는 고체 형태로 제공된다면, 키트는 활성 성분이 용해되어 비경구 투여에 적합한 미립자-유리 멸균 용액을 형성할 수 있는 적합한 비히클의 밀봉 용기를 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 비히클의 예는 본 명세서에서 앞서 제공되어 있다.

실시예

이하의 실시형태는 본 발명의 실시를 더욱 예시하지만 이의 제한을 위해 의도된 것은 아니다.

실시예 1 : 소정의 대표적인 화합물의 제조를 위한 실험적 절차

모든 HPLC 크로마토그램 및 질량 스펙트럼은 분석 C18 칼럼(250×4.6㎜, 5 마이크론)을 사용하여 용리액으로서 0.01% TFA와 함께 15 내지 99% CH₃CN-H₂O의 5분에 걸친 구배 및 2 ㎖/분의 유량으로 HP 1100 LC-MS 애질런트(Agilent) 기기 상에서 기록되었다.

화합물 I : 변형된 소노가시라 절차( Sonogashira procedure)를 이용한 (3- 펜 틸페닐)아세트산의 나트륨염의 합성

단계 1

에탄올(100㎖) 중 3-브로모페닐아세트산(5.02g, 23.33 m㏖)의 용액/현탁액에 농황산(1㎖)을 첨가하였다. 무색의 고체를 이어서 80℃에서 하룻밤 교반하였다. 이 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트(25㎖), 물(25㎖)로 희석시키고, 두 층을 분리시켰다. 수성 층을 에틸 아세테이트(2×25㎖) 및 염수(20㎖)로 추출하였다. 합한 유기층을 NaHCO₃의 포화용액(2×25㎖), 염수(25㎖)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하였다. 용액의 여과 후, 이를 건조 상태로 증발시켰다. 이것을 밝은 황색 오일(5.4g, 95%)을 제공하였다. ¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 1.26 (t, J = 4.7 Hz, 3H), 3.57 (s, 2H), 4.15 (Q, J = 7.0 및 14.3 Hz, 2H), 7.17-7.26 (m, 2H), 7.38-7.44 (m, 1H), 7.44 (d, J　= 1.56 Hz, 1H).

단계 2

에틸 (3-브로모페닐)아세테이트(0.3g, 1.24 m㏖)와 테트라뷰틸암모늄 플루오라이드 수화물(0.97g, 3.72 m㏖)의 혼합물을 밀봉된 시험관에서 PdCl₂(PPh₃)₂(26㎎, 0.037 m㏖; 3 몰%) 및 1-펜틴(367㎕, 3.72 m㏖)으로 처리하였다. 이 시험관을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 물로 처리하고, 다이에틸 에터로 추출하였다. 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 에틸 아세테이트/헥산 0:1 내지 2:98로 용리시키는 바이오타지(Biotage)(상표명) 25 M 칼럼(실리카) 상에서의 정제에 의해 에틸 (3-(펜틴-1-일)페닐)아세테이트를 담황색 오일로서 제공하였다(0.23g, 79%).

단계 3

질소 분위기 하에 에탄올(5㎖) 중 에틸[3-[펜틴-1-일]페닐]-아세테이트(0.23g, 0.98 m㏖)에 탄소 상 Pd(10%, 25㎎, 10% w/w)를 첨가하였다. 이 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 하룻밤 격렬하게 교반하였다. 용액을 여과시키고 팔라듐/탄소를 에탄올(20㎖)로 세척하였다. 여과액을 실리카겔로 농축시켰다. 조질의 생성물을 10% 헥산/에틸 아세테이트의 혼합물을 이용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켰다. 맑은 오일이 얻어졌다(0.21g, 90%).

단계 4

테트라하이드로퓨란(5㎖), 메탄올(1.5㎖) 및 물(1.5㎖) 중 에스터(0.2g, 0.9 m㏖)의 용액에 수산화리튬(0.09g, 3.6 m㏖)을 0℃에서 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 하룻밤 실온에서 교반하였다. 불용물을 여과시키고, 여과액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 이어서 2M HCl로 처리하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 조질의 물질을 에틸 아세테이트/헥산(0:10 내지 4:6)을 용리액으로서 이용하는 40ℓ 바이오타지 칼럼(실리카) 상에서 정제시켰다. 이것은 순수한 (3-펜틸페닐)아세트산(0.19g, 99%)을 백색 고무질의 고체로서 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 0.90 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.28-1.38 (m, 4H), 1.61 (qt, J = 7.6 Hz, 15.0 Hz, 2H), 2.58 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 7.07 (m, 3H), 7.20 (m, 1H); LRMS (ESI): m/z 207 (MH⁺); HPLC: 4분.

단계 5

에탄올(4㎖) 및 물(1㎖) 중 상기 산(0.19g, 0.82 m㏖)의 교반된 용액에 중탄산나트륨(0.07g, 0.82 m㏖)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 이 용매를 증발시키고, 백색 고무질 고체를 물에 용해시키고, 이 용액을 동결건조시켰다. 이것은 (3-펜틸페닐)아세트산의 순수한 나트륨염(0.17g, 92%)을 백색 고체로서 제공하였다. mp 110-112℃; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.28-1.37 (m, 4H), 1.60 (qt, J = 7.4 Hz, 15.0 Hz, 2H), 2.56 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.43 (s, 2H), 6.96 (m, 1H), 7.12 (m, 3H); LRMS (ESI): m/z 207 ((MH⁺); HPLC: 4분.

화합물 II : 3-(3- 펜틸페닐 )프로피온산의 나트륨염

상기 화합물은 3-옥소-3-브로모페닐프로피온산 에틸 에스터에서 시작하여 화합물 I에 대한 것과 마찬가지로 제조하였다. 케톤기와 이중 결합은 수소 압력 하에 에탄올 중 팔라듐/탄소를 이용해서 동시에 환원시켰다. 백색 고체; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.14-7.10 (m, 1H), 7.04-7.00 (m, 2H), 6.95-6.93 (m, 1H), 2.88-2.84 (m, 2H), 2.55 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.44-2.40 (m, 2H), 1.63-1.55 (m, 2H), 1.35-1.28 (m, 4H), 0.90 (m, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 179.3, 141.2, 140.8, 126.7, 126.4, 124.0, 123.8, 38.6, 34.2, 31.2, 29.9, 29.8, 20.9, 11.7; LRMS (ESI): m/z 203 (MH⁺-CO-NaOH); HPLC: 4.5분.

화합물 III : 3-(3- 뷰틸페닐 )프로피온산의 나트륨염

단계 1

둥근 바닥 플라스크(250㎖)에 아이소프탈알데하이드(1.0g, 7.5 m㏖)에 이어서, 다이클로로메탄(100㎖)를 칭량해 넣었다. 압력 평형을 이룬 분별 깔때기를 통해서 다이클로로메탄(25㎖) 중 메틸 (트라이페닐-포스포라닐리덴) 아세테이트(2.7g, 8.2 m㏖)를 실온에서 첨가하였다. 이 반응물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 이 혼합물을 실리카겔의 작은 패드 상에서 여과시키고, 다이클로로메탄(150㎖)으로 세척하였다. 용매를 이어서 감압 하에 증발시키고, 조질의 생성물은 추가의 정제 없이 다음 단계에서 사용되었다.

단계 2

프로필트라이페닐포스포늄 브로마이드(3.2g, 8.2 m㏖)를 둥근 바닥 플라스크에, 질소 하에 배치하고, 건조 THF(5㎖)를 첨가하였다. 플라스크를 얼음/아세톤(-10℃) 욕에서 냉각시키고, n뷰틸리튬(헥산 중 2.5M, 3.28㎖, 8.2 m㏖)을 서서히 첨가하였다. 이 혼합물은 이어서 30분 동안 교반하자 암색으로 변하였다, 얼음/아세톤(-10℃) 욕에 질소 하에 건조 THF(5㎖) 중 이전의 단계로부터의 조질의 반응 혼합물을 배치하였다. 포스포늄 용액을 상기 알데하이드 용액에 -10℃에서 서서히 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온으로 서서히 가온시키고, 4시간 동안 교반하였다. 포화 염화암모늄 용액(10㎖)을 첨가하고, 유기 층을 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과 후 실리카겔을 첨가하여 드라이팩을 얻었다. 이 화합물을 SP1(에틸 아세테이트/헥산)으로 정제시켰다. 이것은 예상된 생성물(8.8g, 54%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.70-7.65 (m, 1H), 7.45-7.24 (m, 4.5H), 6.45-6.28 (m, 2.5H), 5.70-5.67 (m, 0.5H), 3.78 (m, 3H), 2.34-2.20 (m, 2H), 1.10-1.03 (m, 3H).

단계 3

둥근 바닥 플라스크(25㎖)에 에틸 아세테이트(10㎖)에 용해된, 상기 불포화 에스터(140㎎, 0.65 m㏖)를 배치하였다. 이 용액에 활성탄 Pd/C 상의 10% 팔라듐(10㎎)을 첨가하였다. 플라스크를 격막(septum)으로 막고, 수소 밸룬을 상부에 배치하였다. 플라스크를 3회 수소로 퍼지시키고, 이 반응물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 이 고체를 이어서 셀라이트(Celite)(상표명) 상에서 여과시켰다. 실리카겔을 첨가하였으며, 드라이팩(drypack)이 제조된다. 0 내지 20% 에틸 아세테이트/헥산을 이용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 목적으로 하는 생성물(124㎎, 87%)을 제공하였다. LRMS (ESI): m/z 221 (MH⁺); HPLC: 5.0분.

단계 4

둥근 바닥 플라스크에 에스터(124㎎, 0.56 m㏖)에 이어서 메탄올(4㎖) 및 수산화리튬(118㎎, 2.8 m㏖)을 배치하였다. 물(1㎖)을 첨가하고, 이 반응물을 17시간 교반 하에 50℃에서 가열하였다. 이 반응물을 분별 깔때기로 옮기고, HCl(1M)로 4 미만의 pH로 산성화시키고, 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과 후 증발시켰다. 조질의 물질을 HPLC/워터스(Waters)에 의해 정제시켰다. 이것은 백색 고체(80㎎, 70%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.16-7.12 (m, 1H), 7.01-6.96 (m, 3H), 2.88-2.84 (m, 2H), 2.57-2.53 (m, 4H), 1.60-1.52 (m, 2H), 1.37-1.28 (m, 2H), 0.91(t, 3H, J = 7.3Hz); LRMS (ESI): m/z 205 (M-H); HPLC: 4.2분.

단계 5

플라스크(20㎖)에 상기 산(80㎎, 0.39 m㏖)에 이어서 NaHCO₃(33㎎, 0.39 m㏖) 및 물(8㎖)을 배치하였다. 이 혼합물에 아크릴로나이트릴(3㎖)을 첨가하고, 이 반응물을 초음파 처리하고 가열 후, 거의 모든 고체가 용액으로 될 때까지 교반하였다. 이 용액을 나일론 필터 상에서 여과시켰다. 드라이아이스/아세톤 욕에서 바이알을 넣음으로써 물이 고형화되고, 하룻밤 동결견조시킨다. 이것은 목적으로 하는 생성물을 백색 고체로서 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.14-7.10 (m, 1H), 7.04-6.93 (m, 3H), 2.88-2.84 (m, 2H), 2.57-2.54 (m, 2H), 2.44-2.40 (m, 4H), 1.61-1.53 (m, 2H), 1.39-1.30 (m, 2H), 0.93(t, 3H, J = 7.3Hz);¹³C NMR (101 MHZ, CD₃OD): δ 142.7, 142.4, 128.2, 128.0, 125.6, 125.4, 125.3, 40.1, 35.5, 33.9, 32.7, 22.2, 13.1; LRMS (ESI): m/z 251.0 (m, MNa⁺), 229.0 (w, MH⁺), 189.2 (100%, 아실리움 이온 [M - Na⁺ + 2H⁺ -H2O]); HPLC: 4.1분.

화합물 IV : E -(3- 펜트 -1-엔일- 페닐 )아세트산의 나트륨염.

상기 화합물은 E-(3-펜트-1-엔일-페닐)아세트산 메틸 에스터로 출발하여 화합물 I에 대한 것과 마찬가지로 제조하였다. 후자는 스즈키(Suzuki) 조건 하에서 3-브로모페닐 아세트산 메틸 에스터를 트랜스-1-펜테닐보론산피나콜 에스터와 반응시킴으로써 제조하였다. 백색 고체; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 7.32 (s, 1H), 7.11-7.18 (m, 3H), 6.35 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 6.20-6.27 (m, 1H), 3.44 (s, 2H), 2.19 (m, 2H), 1.45-1.54 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.4, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ = 179.26, 138.25, 137.92, 130.32, 130.04, 128.06, 127.59, 126.60, 123.52, 45.21, 35.06, 22.52, 12.89; LRMS (ESI): m/z 205 (MH⁺); HPLC: 4.1분.

화합물 V : 2-(3-( 헥스 -1-엔일] 페닐 )아세트산의 나트륨염.

상기 화합물은 화합물 VII에 대한 것과 마찬가지로 메틸 2-(3-브로모페닐)아세테이트 및 (E)-헥스-1-엔일보론산피나콜 에스터의 스즈키 커플링(Suzuki coupling)에 이어서; 화합물 I에 대한 것과 마찬가지로 에스터 가수분해 및 나트륨염 형성을 행함으로써 제조하였다. 백색 고체: ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.33 (s, 1H), 7.12-7.19 (m, 3H), 6.35 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 6.20 (dt, J = 15.8, 6.8 Hz, 1H), 3.46 (s, 2H), 2.17-2.22 (m, 2H), 1.33-1.49 (m, 4H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 179.35, 138.27, 137.95, 130.27, 130.16, 128.10, 127.61, 126.64, 123.56, 45.24, 32.66, 31.67, 22.16, 13.22; LRMS (ESI): m/z 263.1 (100%, M + Na⁺); HPLC: 4.4분.

화합물 VI : 2-(3- 헥실페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 화합물 VII에 대한 것과 마찬가지로 메틸 2-(3-브로모페닐)아세테이트와 (E)-헥스-1-엔일보론산피나콜 에스터의 스즈키 커플링에 이어서; 화합물 I에 대한 것과 마찬가지로 수소화, 에스터 가수분해 및 나트륨염 형성에 의해서 제조하였다. 백색 고체; ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.14 (dd, J = 7.8, 7.6 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 7.00 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.34 (s, 2H), 2.46 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 1.41-1.48 (m, 2H), 1.10-1.18 (m, 6H), 0.70 (t, J = 6.8 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, D₂O): δ 181.23, 143.98, 137.46, 129.47, 128.73, 126.63, 126.48, 44.58, 35.14, 31.12, 30.94, 28.23, 22.13, 13.53; LRMS (ESI): m/z 265 (100%, M + Na⁺); HPLC: 4.6분.

화합물 VII : 3- 하이드록시 -5- 펜틸페닐아세트산의 나트륨염

단계 1

아세톤(100㎖) 중 메틸 [3,5-다이하이드록시페닐]아세테이트(2.1g, 11.5 m㏖)의 용액을 탄산칼륨(2.4g, 17.4 m㏖), 요오드화칼륨(383㎎, 2.31 m㏖) 및 벤질 브로마이드(1.5㎖, 12.7 m㏖)으로 처리하고, 이 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 이 반응물을 물로 희석시키고, 다이클로로메탄(x3)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 중 증발시켰다. 조질의 물질을 40% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 바이오타지(상표명)40M 칼럼(실리카) 상에서 정제시켜 메틸 [3-벤질옥시-5-하이드록시페닐]아세테이트(1.0g, 33%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.32-7.42 (m, 5H), 6.48 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.38-6.39 (m, 2H), 4.99 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.53 (s, 2H).

단계 2

0℃에서 다이클로로메탄(15㎖) 중 벤질 에터(1.04g, 3.8 m㏖)의 용액을 N-페닐-비스(트라이플루오로설포닐)이미드(1.40g, 3.9 m㏖)로 처리하고, 이어서 트라이에틸아민(0.6㎖, 4.1 m㏖)을 서서히 첨가하였다. 이 반응물을 0℃에서 1시간 동안, 이어서 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물로 희석시키고, 이어서 다이에틸에터(x 2)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 1M 수성 수산화나트륨, 물(x 2) 및 포화 수성 염화나트륨으로 세척하고, 이어서 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과 후 진공 중 증발시켜, 조질의 생성물을 제공하였다. 25% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 바이오타지(상표명) 40M 칼럼(실리카) 상에서의 정제에 의해 메틸 [3-벤질옥시-5-트라이플루오로메탄설포닐옥시페닐]아세테이트(1.2g, 79%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.36-7.46 (m, 5H), 6.98 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.63 (s, 2H).

단계 3

다이메톡시에탄(5㎖) 중 E-1-펜텐-1-일보론산피나콜 에스터(0.8g, 3.9 m㏖)의 용액을 다이메톡시에탄(5㎖) 중 트라이플레이트(1.2g, 3.0 m㏖)의 용액으로 처리하였다. 이 용액을 팔라듐(0)(0.7g, 0.6 m㏖) 및 2M 수성 탄산나트륨(1.3㎖, 2.6 m㏖)으로 처리하였다. 이 혼합물을 이어서 90℃에서 3일 동안 가열하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트(상표명)를 통해서 여과시켰다. 여과액을 진공 중 증발시키고, 조질의 물질을 5% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 바이오타지(상표명) 25M 칼럼(실리카) 상에서 정제시켜, 메틸 [3-벤질옥시-5-[펜트-1-엔일]페닐]아세테이트(0.4g, 40%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.36-7.47 (m, 5H), 6.90-6.92 (m, 2H), 6.79 (dd, J = 2.0, 2.0 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 6.24 (dt, J = 15.9, 6.8 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 2.20 (td, J = 7.4, 6.8 Hz, 2H), 1.51 (dt, J = 7.4 Hz, 2H), 0.98 (t, J = 7.4 Hz, 3H).

단계 4

에탄올(13㎖) 중 상기 알켄(0.4g, 1.2 m㏖)의 용액을 탄소 상 1% 팔라듐(40㎎)으로 처리하였다. 이 혼합물을 수소의 1기압 하에 실온에서 하룻밤 교반하였다. 이 반응물을 여과하고, 진공 중 증발시키고, 15% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 바이오타지(상표명) 25S 칼럼(실리카) 상에서 정제시켜, 메틸 [3-하이드록시-5-펜틸페닐]아세테이트(0.3g, 93%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6.64 (s, 1H), 6.58-6.60 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.55 (s, 2H), 2.51 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.55-1.59 (m, 2H), 1.28-1.34 (m, 4H), 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 3H).

단계 5

에탄올(12㎖) 중 에스터(0.3g, 1.3 m㏖)의 용액을 물(3㎖) 및 수산화리튬(155㎎, 6.4 m㏖)으로 처리하고, 이 혼합물을 실온에서 하룻밤 격렬하게 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100㎖)로 희석시키고; 다이클로로메탄으로 세척하고; 이어서 1M 염산 수용액으로 pH 1로 산성화시키고, 다이클로로메탄(x 3)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨(0.3g, 95%) 상에서 건조시켰다. 이 물질은 추가의 정제 없이 이용되었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6.66 (s, 1H), 6.58-6.59 (m, 2H), 3.55 (s, 2H), 2.52 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.55-1.59 (m, 2H).

단계 6

에탄올(6㎖) 및 물(6㎖) 중 상기 산(0.27g, 1.23 m㏖)의 용액을 중탄산나트륨(0.1g, 1.2 m㏖)으로 처리하고, 이 반응물을 실온에서 수 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 중 농축시키고, 이 용액을 물로 희석시키고, 여과시키고(0.2㎛), 동결 건조시켜 나트륨 [3-하이드록시-5-펜틸페닐]아세테이트를 백색 고체로서 제공하였다(0.3g, 95%). mp 63-66℃; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.63 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 3.36 (s, 2H), 2.48 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.55-1.62 (m, 2H), 1.26-1.38 (m, 4H), 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 177.79, 155.31, 142.36, 137.62, 119.08, 111.66, 111.18, 43.70, 34.17, 29.95, 29.56, 20.87, 11.64; LRMS (ESI): m/z 445.2 (2M - 2Na⁺ + 3H⁺), m/z 223 (M - Na⁺ + 2H⁺); HPLC: 3.5분.

화합물 VIII : 2-(4- 하이드록시 -3- 펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은, 예를 들어 VII에 대한 것과 마찬가지로 벤질 2-(4-(벤질옥시)-3-브로모페닐)아세테이트와 (E)-펜트-1-엔일보론산피나콜 에스터의 스즈키 커플링에 이어서; 수소화에 의해 제조하였다. 백색 고체; 용융점 192-195℃; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.01 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.93 (dd, J = 8.2, 2.3 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.35 (s, 2H), 2.53 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.54-1.61 (m, 2H), 1.30-1.37 (m, 4H), 0.90 (t, J = 7.2 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 180.25, 153.20, 130.54, 128.80, 128.76, 127.10, 114.49, 44.45, 31.84, 30.10, 29.73, 22.52, 13.31; LRMS (ESI): m/z 245.2 (55%, MH⁺), 177.4 (100%, M - CO₂Na); HPLC: 1.9분.

화합물 IX : 2-(2- 하이드록시 -3- 펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

단계 1

메탄올(40㎖) 중 2-(2-하이드록시페닐)아세트산 (3.00g, 19.7 m㏖)의 용액을 황산(0.95㎖, 17.8 m㏖)으로 처리하고, 이 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(250㎖)로 희석시키고, 이 용액을 물(2 x 150㎖)로 그리고 포화 수성 염화나트륨(150㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 뜨거운 헥산으로부터의 재결정에 의해 메틸 2-(2-하이드록시페닐)아세테이트(2.83g, 87%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.20 (ddd, J = 7.7, 7.4, 1.8 Hz, 1H), 7.09-7.11 (m, 1H), 6.94 (dd, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 6.88 (ddd, J = 7.4, 7.4, 1.2 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.69 (s, 2H).

단계 2

테트라하이드로퓨란(30㎖) 중 메틸 2-(2-하이드록시페닐)아세테이트(1.00g, 6.0 m㏖), 트라이페닐포스핀(2.37g, 9.0 m㏖) 및 펜트-1-덴-3-올(0.78g, 9.0 m㏖)의 용액을 질소 하에 0℃로 냉각시키고, 다이아이소프로필 아조다이카복실레이트(1.86㎖; 9.0㎖)를 10분에 걸쳐서 적가하였다. 이 반응물을 이어서 60℃에서 21.5시간 동안 가열하였다. 용매를 진공 중 증발시키고, 잔사를 헥산 중 5% 에틸 아세테이트로 추출하였다. 이 추출물을 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 헥산 중 0 내지 3% 에틸 아세테이트로 용리시키는 바이오타지(상표명) SP1 시스템(120g 실리카 카트리지) 상에서의 정제에 의해 메틸 2-(2-(펜트-1-엔-3-일옥시)페닐)아세테이트(0.39g, 28%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.21-7.26 (m, 1H), 7.20 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.91 (ddd, J = 7.4, 7.4, 1.0 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.84 (ddd, J = 17.4, 10.7, 6.0 Hz, 1H), 5.26 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 5.22 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.63 (dt, J = 6.0, 6.0 Hz, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 1.71-1.87 (m, 2H), 1.02 (t, J = 7.5 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 172.58,. 156.28, 137.75, 131.19, 128.50, 123.87, 120.52, 116.66, 113.18, 79.76, 52.00, 36.61, 28.71, 9.62.

단계 3

N-메틸-2-피롤리돈(1.0㎖) 중 메틸 2-(2-(펜트-1-엔-3-일옥시)페닐)아세테이트(0.24　g, 1.0　m㏖)의 용액을 바이오타지 개시제(Biotage Initiator) 중에서 마이크로파 방사선으로 180℃에서 30분 동안, 이어서 15분 동안 조사하였다. 이 용액을 에틸 아세테이트(25㎖)로 희석시키고, 이어서 물(4 x 25㎖)로 그리고 포화 수성 염화나트륨(25㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 헥산 중 0 내지 7% 에틸 아세테이트로 용리시키는 바이오타지(상표명) SP1 시스템(40g 실리카 카트리지) 상에서의 정제에 의해 메틸 (E)-2-(2-하이드록시-3-(펜트-2-엔일)페닐)아세테이트(0.89g, 37%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.09 (s, 1H), 7.08 (dd, J = 7.4, 1.6 Hz, 1H), 7.01 (dd, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 7.6, 7.4 Hz, 1H), 5.59-5.70 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.69 (s, 2H), 3.41 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 2.04-2.11 (m, 2H), 1.01 (t, J = 7.4 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 174.31, 153.53, 134.44, 129.86, 129.32, 128.62, 127.13, 121.08, 120.82, 52.79, 37.59, 34.17, 25.77, 13.97.

단계 4

메틸 (E)-2-(2-하이드록시-3-(펜트-2-엔일)페닐)아세테이트(0.14g, 0.6 m㏖)를, 메탄올을 용매로서 이용한 것 이외에, 화합물 I, 단계 3에 대한 것과 마찬가지로 수소화시켜 메틸 2-(2-하이드록시-3-펜틸페닐)아세테이트(0.11g, 76%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.57 (s, 1H), 7.11 (dd, J = 7.4, 1.6 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 7.4, 1.6 Hz, 1H), 6.84 (dd, J = 7.4, 7.4 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.70 (s, 2H), 2.68 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 1.61-1.67 (m, 2H), 1.36-1.43 (m, 4H), 0.93 (t, J = 7.0 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 175.01, 153.48, 131.75, 129.98, 128.75, 120.74, 120.60, 53.01, 38.30, 32.10, 30.50, 29.91, 22.87, 14.34.

단계 5

메틸 2-(2-하이드록시-3-펜틸페닐)아세테이트(0.11g, 0.5 m㏖)를, 아크릴로나이트릴/물(4:1)을 용매로서 이용해서 화합물 I, 단계 4에 대한 것과 마찬가지로 가수분해시켜, 2-(2-하이드록시-3-펜틸페닐)아세트산(0.57g, 57%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8.70 (br s, 1H), 7.09 (dd, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 6.98 (dd, J = 7.4, 1.6 Hz, 1H), 6.84 (dd, J = 7.6, 7.4 Hz, 1H), 3.68 (s, 2H), 2.62 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 1.57-1.65 (m, 2H), 1.31-1.40 (m, 4H), 0.91 (t, J = 7.0 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 179.89, 152.79, 130.92, 130.04, 128.98, 121.08, 120.24, 37.74, 32.02, 30.34, 29.78, 22.80, 14.30.

단계 6

2-(2-하이드록시-3-펜틸페닐)아세트산(22㎎, 0.098 m㏖)을 화합물 I, 단계 5에 대한 것과 마찬가지로 나트륨염으로 전환시켜 나트륨 2-(2-하이드록시-3-펜틸페닐)아세테이트(24㎎, 98%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.91 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 6.87 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 6.66 (dd, J = 7.5, 7.5 Hz, 1H), 3.49 (s, 2H), 2.59 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.55-1.62 (m, 2H), 1.28-1.38 (m, 4H), 0.90 (t, J = 7.0 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 180.26, 154.27, 130.75, 128.21, 127.90, 124.24, 119.23, 42.91, 31.83, 30.21, 29.82, 22.51, 13.29; LRMS (ESI 음성): m/z 220.8 (100%, M - Na⁺); UPLC (시스템 A): 5.0분. UPLC 시스템 A: 이동상 A = 10 mM 수성 암모늄 폼에이트; 이동상 B = 아크릴로나이트릴; 고체상 = HSS T3 칼럼; 구배 = 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

화합물 X : 2-(3- 플루오로 -5- 펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

단계 1

0℃에서 질소 하에, 테트라하이드로퓨란(6㎖) 중 3-브로모-5-플루오로벤조산(2.74g, 12.5 m㏖)의 용액을 보란-테트라하이드로퓨란복합체(1M, 15㎖, 15 m㏖)으로 12분에 걸쳐서 조금씩 처리하고, 이 반응물을 이어서 0℃에서 70분 동안 그리고 실온에서 22시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 메탄올(10㎖)의 첨가에 의해 반응 중지시키고, 이 메탄올성 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 메탄올로부터, 이어서 에틸 아세테이트로부터의 공증발과 함께 진공 중 증발시켜, 조질의 생성물을 제공하였다. 이 물질을 에틸 아세테이트(200㎖)에 용해시키고, 이 용액을 0.5M 수성 수산화나트륨(200㎖)으로 그리고 포화 수성 염화나트륨(100㎖)으로 세척하고; 그 후 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과하고 진공 중 증발시켜 3-브로모-5-플루오로벤질 알코올(1.79g, 67%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.29 (s, 1H), 7.15 (ddd, J _HF = 8.2 Hz, J _HH = 2.2, 1.8 Hz, 1H), 7.00-7.02 and 7.02-7.04 (dm, J _HF = 9.2 Hz, J _HH = unresolved, 1H), 4.66 (s, 2H), 2.04 (br s, 1H); ¹⁹F NMR (377 MHz, CDCl₃): δ -111.05 (dd, J _HF = 9.3, 8.0 Hz, 1F); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 162.87 (d, J _CF = 250.6 Hz), 145.42 (d, J _CF = 6.9 Hz), 125.45 (d, J _CF = 3.1 Hz), 122.69 (d, J _CF = 9.2 Hz), 118.01 (d, J _CF = 24.6 Hz), 112.51 (d, J _CF = 21.5 Hz), 63.60 (d, J _CF = 2.3 Hz).

단계 2

다이클로로메탄(45㎖) 중 3-브로모-5-플루오로벤질 알코올(1.79g, 8.39 m㏖) 및 트라이페닐포스핀(3.65g, 10.10 m㏖)의 용액을 사브로민화탄소(3.34g, 10.10 m㏖)로 조금씩 10분에 걸쳐서 처리하고, 이 반응물을 이어서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 용매 진공 중 증발시키고, 잔사를 다이에틸에터(50㎖)로 처리하였다. 얻어진 백색 슬러리를 실온에서 교반하고, 이어서 셀라이트(상표명)를 통해서 여과시켰다. 잔사를 다이에틸에터(2 x 50㎖)로 세척하고, 합한 여과액과 세척액을 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 2% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 실리카 패드 상에서의 정제에 의해 3-브로모-5-플루오로벤질 브로마이드(2.21g, 98%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.33 (s, 1H), 7.18 (ddd, J _HF = 8.2 Hz, J _HH = 2.0, 2.0 Hz, 1H), 7.05 (ddd, J _HF = 9.0 Hz, J _HH = 1.8, 1.6 Hz, 1H), 4.38 (s, 2H); ¹⁹F NMR (377 MHz, CDCl₃): δ -110.19 내지 -110.14 (m, 1F); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 162.67 (d, J _CF = 252.1 Hz), 141.61(d, J _CF = 8.5 Hz), 128.17 (d, J _CF = 3.1 Hz), 122.94 (d, J _CF = 10.0 Hz), 119.39 (d, J _CF = 24.6 Hz), 115.34 (d, J _CF = 22.3 Hz), 31.31 (d, J _CF = 2.3 Hz).

단계 3

물(0.35㎖) 중 사이안화나트륨(0.38g, 7.73 m㏖)의 현탁액을 다이메틸폼아마이드(2.6㎖) 중 3-브로모-5-플루오로벤질 브로마이드(1.38g, 5.15 m㏖)의 용액으로 처리하고, 이 반응물을 밀봉된 시험관에서 75℃에서 3시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 실온까지 냉각시키고, 에틸 아세테이트(50㎖) 및 2.5% w/v 수성 중탄산나트륨(100㎖) 간에 분배시켰다. 수성 상을 추가의 부분의 에틸 아세테이트(50㎖)로 추출하고; 합한 추출물을 물(2 x 50㎖)로 그리고 포화 수성 염화나트륨(50㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과 후, 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 10% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 바이오타지(상표명) 40iM 칼럼(실리카) 상에서의 정제에 의해 2-[3-브로모-5-플루오로페닐]아크릴로나이트릴(0.64g, 58%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.26-7.28 (m, 1H), 7.17-7.19 & 7.19-7.21 (dm, J _HF = 8.0 Hz, J _HH = 미분해, 1H), 6.98-7.00 & 7.00-7.02 (dm, J _HF = 8.8 Hz, J _HH = 미분해, 1H), 3.73 (s, 2H); ¹⁹F NMR (377 MHz, CDCl₃): δ -109.46 (dd, J _HF = 8.0, 8.0 Hz, 1F); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 162.90 (d, J _CF = 252.1 Hz), 133.95 (d, J _CF = 8.5 Hz), 127.24 (d, J _CF = 3.8 Hz), 123.53 (d, J _CF = 10.0 Hz), 119.22 (d, J _CF = 23.8 Hz), 117.00, 114.50 (d, J _CF = 23.1 Hz), 23.30 (d, J _CF = 1.5 Hz).

단계 4

다이메톡시에탄(13㎖) 중 아릴 브로마이드(0.55g, 2.58 m㏖) 및 (E)-1-펜텐-1-일보론산피나콜 에스터(0.61g, 3.13 m㏖)의 용액을 물(3㎖) 중 탄산나트륨(0.55g, 5.17 m㏖)의 용액으로 처리하였다. 용액을 질소로 탈산소화하고, 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0.15g, 0.13 m㏖; 5 몰%)으로 처리하였다. 이 혼합물을 이어서 밀봉된 시험관에서 90℃에서 17시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 실온까지 냉각시키고, 에틸 아세테이트(50㎖)와 1M 염산 수용액(50㎖) 간에 분배시켰다. 유기 상을 포화 수성 염화나트륨(30㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과 후, 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. (3%) 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 바이오타지(상표명) 40iM 칼럼(실리카) 상에서의 정제에 의해 (E)-2-[3-플루오로-5-[펜트-1-엔일]페닐]아크릴로나이트릴(0.43g, 82%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.04 (s, 1H), 6.97 (ddd, J _HF = 9.8 Hz, J _HH = 2.0, 1.5 Hz, 1H), 6.82-6.85 (m, 1H), 6.31 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 6.25 (ddd, J = 15.8, 5.9, 0 Hz, 1H), 3.68 (s, 2H), 2.18 (td, J = 7.2, 5.4 Hz, 2H), 1.49 (qt, J = 7.4, 7.4 Hz, 2H), 0.95 (t, J = 7.4 Hz, 3H); ¹⁹F NMR (377 MHz, CDCl₃): δ -112.93 (dd, J _HF = 10.6, 9.3 Hz, 1F); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 163.43 (d, J _CF = 246.0 Hz), 141.44 (d, J _CF = 8.5 Hz), 133.99, 132.37 (d, J _CF = 8.5 Hz), 128.42 (d, J _CF = 2.3 Hz), 121.60 (d, J _CF = 3.1 Hz), 117.66, 113.40 (d, J _CF = 23.1 Hz), 112.21 (d, J _CF = 22.3 Hz), 35.22, 23.49 (d, J _CF = 2.3 Hz), 22.51, 13.94.

단계 5

메탄올(42㎖) 중 페닐아크릴로나이트릴 유도체(0.43g, 2.10 m㏖)의 용액을 수성 수산화나트륨(5M; 21㎖, 105 m㏖)으로 처리하고, 이 혼합물을 밀봉된 시험관에서 75℃에서 4.5시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 6M 염산 수용액(21㎖)으로 반응중지시키고; 실온에서 10분 동안 교반하고; 이어서 에틸 아세테이트(2 x 75㎖)로 추출하였다. 유기 추출물을 포화 수성 염화나트륨(75㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과 후, 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 70% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 바이오타지(상표명) 40iM 칼럼(실리카) 상에서의 정제에 의해 목적으로 하는 생성물의 메틸 에스터(0.09g, 18%), 및 대략 95% 순수한 (E)-2-[3-플루오로-5-[펜트-1-엔일]페닐]아세트산(0.22g, 48%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 11.17 (br s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.98 (ddd, J _HF = 9.8 Hz, J _HH = 2.0, 1.8 Hz, 1H), 6.85 (ddd, J _HF = 9.0 Hz, J _HH = 1.8, 1.6 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 6.25 (dt, J = 15.8, 6.4 Hz, 1H), 3.62 (s, 2H), 2.17-2.22 (m, 2H), 1.51 (qt, J = 7.4, 7.4 Hz, 2H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 3H); ¹⁹F NMR (377 MHz, CDCl₃): δ -114.10 (dd, J _HF = 9.3, 9.3 Hz, 1F).

단계 6

아세톤(5㎖) 중 상기 부분-정제된 산(0.28g, 1.26 m㏖)의 용액을 탄산칼륨(0.26g, 1.90 m㏖), 요오드화칼륨(0.04g, 0.25 m㏖) 및 벤질 브로마이드(0.18㎖, 1.5 m㏖)로 처리하고, 이 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(25㎖)와 1M 염산 수용액(25㎖) 간에 분배시켰다. 유기 상을 이어서 포화 수성 염화나트륨(25㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과 후, 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 5% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시키는 바이오타지(상표명) 40iM 칼럼(실리카) 상에서의 정제에 의해 벤질 (E)-2-[3-플루오로-5-[펜트-1-엔일]페닐]아세테이트(0.3g, 75%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.32-7.40 (m, 5H), 7.03 (s, 1H), 6.97 (ddd, J _HF = 10.0 Hz, J _HH = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 6.86 (ddd, J _HF = 9.0 Hz, J _HH = 2.0, 1.7 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 6.23 (dt, J = 15.8, 6.5 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 3.64 (s, 2H), 2.17-2.23 (m, 2H), 1.52 (qt, J = 7.4, 7.4 Hz, 2H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz, 3H); ¹⁹F NMR (377 MHz, CDCl₃): δ -114.34 (dd, J _HF = 9.3, 9.3 Hz, 1F); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 171.08, 163.32 (d, J _CF = 244.4 Hz), 140.65 (d, J _CF = 7.7 Hz), 136.17 (d, J _CF = 8.5 Hz), 135.93, 133.05, 128.95 (d, J _CF = 3.1 Hz), 128.84, 128.52 (d, J _CF = 9.2 Hz), 128.48, 123.09 (d, J _CF = 2.3 Hz), 114.78 (d, J _CF = 22.3 Hz), 111.46 (d, J _CF = 22.3 Hz), 67.04, 41.26 (d, J _CF = 1.5 Hz), 35.27, 22.63, 14.00.

단계 7

에틸 아세테이트(2㎖) 중 벤질 에스터 (0.16g, 0.50 m㏖)의 용액을 탄소 상의 팔라듐(1% w/w Pd; 15㎎)으로 처리하였다. 이 혼합물을 수소로 탈기시키고, 1 기압의 수소 하에 실온에서 하룻밤 교반하였다. 이 반응물을 여과시키고, 진공 중 증발시켜 2-[3-플루오로-5-펜틸페닐]-아세트산(0.11g, 97%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 11.47 (br s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.81-6.86 (m, 2H), 3.62 (s, 2H), 2.60 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 1.58-1.66 (m, 2H), 1.28-1.41 (m, 4H), 0.92 (t, J = 6.8 Hz, 3H); ¹⁹F NMR (377 MHz, CDCl₃): δ -114.34 (dd, J _HF = 9.3, 9.3 Hz, 1F); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 178.15, 163.08 (d, J _CF = 246.0 Hz), 145.02 (d, J _CF = 7.7 Hz), 135.04 (d, J _CF = 8.5 Hz), 125.49 (d, J _CF = 2.3 Hz), 114.49 (d, J _CF = 20.8 Hz), 113.83 (d, J _CF = 22.3 Hz), 41.01 (d, J _CF = 1.5 Hz), 35.87 (d, J _CF = 1.5 Hz), 31.67, 31.03, 22.74, 14.24.

단계 8

에탄올(3㎖) 중 상기 산(0.11g, 0.49 m㏖)의 용액을 물(0.75㎖) 중 중탄산나트륨(0.041g, 0.49 m㏖)의 용액으로 처리하고, 이 반응물을 실온에서 17시간 동안 교반하였다. 에탄올을 진공 중 증발시키고, 잔류 수성 시럽을 물(10㎖)로 희석시키고, 여과시키고(0.2㎛), 동결건조시켜 나트륨 2-[3-플루오로-5-펜틸페닐]아세테이트를 백색 고체로서 제공하였다(0.12g, 99%). mp 120-123℃; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.94 (s, 1H), 6.87 (ddd, J _HF = 9.8 Hz, J _HH = 2.0, 2.0 Hz, 1H), 6.70 (ddd, J _HF = 10.0 Hz, J _HH = 2.0, 2.0 Hz, 1H), 3.45 (s, 2H), 2.56 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.58-1.63 (m, 2H), 1.26-1.39 (m, 4H), 0.90 (t, J = 7.0 Hz, 3H); ¹⁹F NMR (377 MHz, CD₃OD): δ -117.54 (dd, J _HF = 10.0, 10.0 Hz, 1F); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 178.66, 163.04 (d, J _CF = 242.9 Hz), 145.07 (d, J _CF = 7.7 Hz), 140.42 (d, J _CF = 8.5 Hz), 125.03 (d, J _CF = 2.3 Hz), 112.99 (d, J _CF = 22.3 Hz), 112.30 (d, J _CF = 20.8 Hz), 44.96, 35.53 (d, J _CF = 1.5 Hz), 31.46, 31.00, 22.45, 13.30; HPLC: 1.2분.

화합물 XI : 2-(2- 플루오로 -3- 펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 3-브로모-2-플루오로벤조산에서 출발하여 화합물 X에 대한 것과 마찬가지로 제조하였다. 백색 고체; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.13 (ddd, J _HF = 7.0 Hz, J _HH = 7.4, 1.9 Hz, 2H), 7.03 (ddd, J _HF = 7.0 Hz, J _HH = 7.4, 1.9 Hz, 1H), 6.97 (dd, J _HH = 7.4, 7.4 Hz, 1H), 3.51 (d, J _HF = 1.4 Hz, 2H), 2.61 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.56-1.63 (m, 2H), 1.28-1.40 (m, 4H), 0.90 (t, J = 6.9 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 178.21, 159.70 (d, J _CF = 242.9 Hz), 129.07 (d, J _CF = 4.6 Hz), 128.88, 128.43 (d, J _CF = 5.4 Hz), 125.02 (d, J _CF = 17.7 Hz), 123.31 (d, J _CF = 4.6 Hz), 37.89 (d, J _CF = 3.8 Hz), 31.55, 29.98, 28.91 (d, J _CF = 3.1 Hz), 22.41, 13.26; ¹⁹F NMR (377 MHz, CD₃OD): δ -126.09 내지 -126.05 (m, 1F); LRMS (ESI): m/z 220.0 (M - CO₂Na + 아크릴로나이트릴), 179.4 (M - CO₂Na); HPLC: 1.2분.

화합물 XII : 2-(4- 플루오로 -3- 펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 화합물 VII에 대한 것과 마찬가지로 메틸 2-(3-브로모-4-플루오로페닐)아세테이트로부터 스즈키 커플링에 의해서; 이어서 화합물 I에 대한 것과 마찬가지로 수소화, 에스터 가수분해 및 염 형성으로부터 제조하였다. 출발 에스터는 2-(3-브로모-4-플루오로페닐)아세트산을 메탄올과 황산의 존재 하에 반응시켜 제조하였다. 백색 고체; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.16 (dd, J _HF = 7.4 Hz, J _HH = 2.3 Hz, 2H), 7.08 (ddd, J _HF = 5.0 Hz, J _HH = 8.3, 2.3 Hz, 1H), 6.88 (dd, J _HF = 10.1 Hz, J _HH = 8.3 Hz, 1H), 3.40 (s, 2H), 2.59 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.55-1.63 (m, 2H), 1.28-1.40 (m, 4H), 0.90 (t, J = 7.0 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 179.12, 159.88 (d, J _CF = 240.6 Hz), 133.88 (d, J _CF = 3.8 Hz), 131.26 (d, J _CF = 4.6 Hz), 128.78 (d, J _CF = 16.1 Hz), 127.96 (d, J _CF = 8.5 Hz), 114.26 (d, J _CF = 23.1 Hz), 44.38, 31.51, 30.00, 28.76 (d, J _CF = 1.5 Hz), 22.36, 13.18; ¹⁹F NMR (377 MHz, CD₃OD): δ -126.45 내지 -126.40 (m, 1F); LRMS (ESI): m/z 225.2 (M - Na⁺ + 2H⁺); HPLC: 1.9분.

화합물 XIII : ( RS )-2- 플루오로 -2-(3- 펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 화합물 I에 대한 것과 마찬가지로 에틸 2-플루오로-2-(3-펜틸페닐)아세테이트로부터 제조하였다. 에스터는 에틸 2-(3-펜틸페닐)아세테이트를 테트라하이드로퓨란 중 -78℃에서 리튬 다이아이소프로필아마이드 및 N-플루오로벤젠설폰이미드와 반응시켜 제조하였다. 백색 고체; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.34 (s, 1H), 7.30 (dd, J = 7.6, 1.4 Hz, 1H), 7.24 (dd, J = 7.6, 7.6 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 7.4, 1.0 Hz, 1H), 5.53 (d, J _HF = 51.3 Hz, 1H), 2.60 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.59-1.65 (m, 2H), 1.27-1.39 (m, 4H), 0.76 (t, J = 6.9 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 173.73 (d, J _CF = 23.9 Hz), 141.34, 136.37 (d, J _CF = 20.0 Hz), 126.79 (d, J _CF = 2.3 Hz), 126.40, 125.41 (d, J _CF = 5.4 Hz), 122.84 (d, J _CF = 5.4 Hz), 90.34 (d, J _CF = 183.4 Hz), 34.13, 29.91, 29.65, 20.85, 11.64; ¹⁹F NMR (377 MHz, CD₃OD): δ -168.83 (d, J _HF = 51.7 Hz, 1F); LRMS (ESI 음성): m/z 223.0 (100%, M - Na⁺); HPLC: 4.1분.

화합물 XIV : 나트륨 2-[3,5- 다이펜틸페닐 ] 아세테이트

단계 1

질소 하에 0℃에서 다이클로로메탄(20㎖) 중 메틸 2-[3,5-다이하이드록시페닐]아세테이트(1.00g, 5.49 m㏖) 및 N-페닐-비스(트라이플루오로메틸설포닐)이미드(4.31g, 12.1 m㏖)의 현탁액을 트라이에틸아민(1.68㎖, 12.1 m㏖)으로 처리하였다. 맑은 용액이 형성되었다. 이 반응물을 이어서 질소 하에 0℃에서 2시간 동안, 그리고 실온에서 21시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 에틸 아세테이트(100㎖)로 희석시키고, 이 용액을 0.5M 수성 수산화나트륨(2 x 100㎖)으로, 그리고 포화 수성 염화나트륨(75㎖)으로 세척하고; 이어서 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 에틸 아세테이트/헥산 0:1 내지 1:9로 용리시키는 바이오타지(상표명) 40iM 칼럼(실리카) 상에서의 정제에 의해 메틸 2-[3,5-비스(트라이플루오로메틸설포닐옥시)페닐]아세테이트(2.23g, 91%)를 옅은 오일로서 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.32 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 7.18 (dd, J = 2.2, 2.2 Hz, 1H), 3.72 (s, 5H); 19F NMR (377 MHz, CDCl₃): δ -73.20 (s, 3F); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 170.05, 149.48, 139.01, 122.95, 118.87 (q, JCF = 320.5 Hz), 114.42, 52.62, 40.29.

단계 2

1,2-다이메톡시에탄(25㎖) 중 아릴 비스(트라이플레이트)(2.23g, 4.99 m㏖) 및 (E)-1-펜텐-1-일보론산피나콜 에스터(2.45g, 12.5 m㏖)의 용액을 물(8㎖) 중 탄산나트륨(1.59g, 15.0 m㏖)의 용액으로 처리하였다. 이 용액을 질소로 탈산소화시키고, 이어서 테트라키스(트라이페닐포스핀) 팔라듐(0.58g, 0.50 m㏖)으로 처리하였다. 이 혼합물을 90℃에서 밀봉된 시험관에서 17시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 실온으로 냉각시키고 에틸 아세테이트(200㎖)와 1M 염산 수용액(150㎖)으로 분배시켰다. 유기 상을 5% 수성 중탄산나트륨(150㎖)로, 그리고 포화 수성 염화나트륨(150㎖)으로 세척하고; 이어서 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과 후, 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 에틸 아세테이트/헥산 0:1 내지 3:97로 용리시키는 바이오타지(상표명) 40iL 칼럼(실리카) 상에의 정제에 의해 메틸 2-[3,5-다이[(E)-1-펜트-1-엔일]페닐] 아세테이트를 과잉량의 (E)-1-펜텐-1-일보론산피나콜 에스터(1.12g, 61%)와의 분리 불가능한 10:4 혼합물로서 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.21 (s, 1H), 7.10 (d, J = 1.3 Hz, 2H), 6.34 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 6.22 (dd, J = 15.8, 6.7 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.55 (s, 2H), 2.18 (tdd, J　= 6.8, 6.8, 1.0 Hz, 2H), 1.49 (qt, J = 7.4, 7.2 Hz, 2H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 172.04, 138.59, 134.47, 131.34, 129.97, 125.57, 122.75, 52.07, 41.32, 35.39, 22.77, 13.97.

단계 3

에틸 아세테이트(1㎖) 및 메탄올(1㎖) 중 불포화된 화합물(1.12g, 78.5% w/w, 3.07 m㏖)의 용액을 탄소 상의 팔라듐(10% w/w Pd; 0.12g)로 처리하였다. 이 혼합물을 수소로 탈기시키고, 1기압의 수소 하에 실온에서 22시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 여과시키고, 진공 중 증발시켜 메틸 2-[3,5-다이펜틸페닐] 아세테이트를 펜틸보론산피나콜 에스터와의 분리 불가능한 10:4 혼합물로서 제공하였다(0.86g, 76%). ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6.93 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 2.58 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 1.58-1.66 (m, 2H), 1.32-1.38 (m, 4H), 0.91 (t, J = 6.8 Hz, 3H).

단계 4

아크릴로나이트릴(24㎖) 중 메틸 에스터(0.86g, 79% w/w, 2.34 m㏖)의 용액을 물(6㎖) 중 수산화리튬(0.28g, 11.7 m㏖)의 용액으로 처리하고, 이 반응물을 실온에서 22시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 1M 염산 수용액(55㎖)으로 반응중지시키고, 이어서 에틸 아세테이트(100㎖)로 추출하였다. 유기 추출물을 포화 수성 염화나트륨(50㎖)으로 세척하고; 이어서 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과 후, 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 에틸 아세테이트/헥산 0:1 내지 1:4로 용리시키는 실라셉(SiliaSep) 실리콘 옥사이드 칼럼 상에서의 정제에 의해 2-[3,5-다이펜틸]페닐] 아세트산을 무색 오일로서 제공하였다(0.55g, 84%). ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6.99 (s, 3H), 3.65 (s, 2H), 2.63 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 1.64-71 (m, 2H), 1.36-1.44 (m, 4H), 0.97 (t, J = 6.9 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 178.96, 143.55, 133.21, 127.93, 127.06, 41.47, 36.13, 31.94, 31.47, 22.86, 14.34.

단계 5

에탄올(12㎖) 중 상기 산(0.48g, 1.75 m㏖)의 용액을 물(3㎖) 중 중탄산나트륨(0.15g, 1.75 m㏖)의 용액으로 처리하고, 이 반응물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 에탄올을 진공 중 증발시키고, 잔류 수성 시럽을 물(50㎖)로 희석시키고, 여과시키고(PES, 0.2㎛), 동결건조시켜 나트륨 2-[3,5-다이펜틸페닐] 아세테이트를 백색 고체(0.52g, 정량적)로서 제공하였다. mp 225-230℃; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD + D₂O): δ 6.92 (s, 2H), 6.76 (s, 1H), 3.41 (s, 2H), 2.50 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.52-1.59 (m, 2H), 1.23-1.33 (m, 4H), 0.85 (t, J = 6.9 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD + D₂O): δ 179.99, 142.66, 137.63, 126.66, 126.16, 45.11, 35.61, 31.36, 31.19, 22.41, 13.47; LRMS (ESI): m/z 277.5 (w, [M - Na+ + 2H+]), 231.1 (100%, 카복시기의 손실로부터의 트로필리움 이온); HPLC: 3.0분.

화합물 XV : 2-(3,5- 다이헥실페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 화합물 XIV에 대한 것과 마찬가지로 (E)-헥스-1-엔일보론산피나콜 에스터로부터 제조하였다. 백색 고체; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.96 (s, 2H), 6.79 (s, 1H), 3.43 (s, 2H), 2.54 (d, J = 7.7 Hz, 4H), 1.55-1.63 (m, 4H), 1.28-1.36 (m, 12H), 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 6H); 13C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 179.68, 142.38, 137.82, 126.55, 126.07, 45.30, 35.87, 31.83, 31.67, 29.02, 22.61, 13.42; LRMS (ESI): m/z 322.0 (100%, M - Na+ + H+ + NH₄+) and 259.0 (35%, M - CO₂Na); UPLC (시스템 A): 8.9분. UPLC 시스템 A: 이동상 A = 10 mM 수성 중탄산암모늄; 이동상 B = 아크릴로나이트릴; 고체상 = HSS T3 칼럼; 구배 = 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

화합물 XVI : 2-(2- 하이드록시 -3,5- 다이펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

단계 1

아크릴로나이트릴(17㎖) 중 2,4-다이브로모-6-(브로모메틸)페놀(3.5g, 10.0 m㏖)이 용액을 사이안화나트륨(2.5g, 50.0 m㏖)의 용액으로 처리하고, 이 반응물을 1시간 동안 환류 하에 100℃에서 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(100㎖)에 부었다. pH를 1M 염산 수용액으로 10에서 8로 조정하고, 이 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 250㎖)로 추출하였다. 합한 추출물을 1M 염산 수용액(250㎖)으로 그리고 포화 수성 염화나트륨(250㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 아세톤에 의한 추출; 여과; 및 진공 중 증발에 의해 2-(3,5-다이브로모-2-하이드록시페닐)아크릴로나이트릴(2.6g, 90%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, d6-아세톤): δ 8.75 (br s, 1H), 7.69 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 3.92 (s, 2H); ¹³C NMR (101MHz, d6-아세톤): δ 151.31, 134.51, 131.92, 122.80, 117.43, 111.89, 111.53, 18.70.

단계 2

2-(3,5-다이브로모-2-하이드록시페닐)아크릴로나이트릴(2.6g, 9.0 m㏖)을 황산(2.5㎖), 아세트산 (2.5㎖) 및 물(2.5㎖)의 혼합물로 처리하고, 2시간 동안 환류 하에 125℃에서 가열하였다. 이 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 얼음(50㎖)과 물(50㎖)의 혼합물에 붓고, 이어서 얼음이 녹을 때까지 교반하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트(250㎖)로 추출하고; 이 추출물을 이어서 물(100㎖)로 그리고 포화 수성 염화나트륨(100㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 2-(3,5-다이브로모-2-하이드록시페닐)아세트산(3.1g)을 제공하였다. 이 물질은 추가의 정제 또는 특성규명 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 3

메탄올(17㎖) 중 조질의 2-(3,5-다이브로모-2-하이드록시페닐)아세트산(3.1g, 9.0 m㏖)의 용액을 황산(0.43㎖, 8.1 m㏖)으로 처리하고, 이 반응물을 분위기 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 메탄올을 진공 중 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(270㎖)에 용해시켰다. 이 용액을 물(2 x 200㎖)로 그리고 포화 수성 염화나트륨(130㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 헥산 중 0-20% 에틸 아세테이트로 용리시키는 바이오타지(상표명) SP1 시스템(120g 실리카 카트리지) 상에서의 정제에 의해 메틸 2-(3,5-다이브로모-2-하이드록시페닐)아세테이트(1.4g, 49%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.52 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.42 (br s, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.65 (s, 2H); 13C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 172.06, 150.60, 133.74, 133.50, 123.94, 112.62, 111.77, 52.78, 36.61.

단계 4

아세톤(5㎖) 중 메틸 2-(3,5-다이브로모-2-하이드록시페닐)아세테이트(0.5g, 1.54 m㏖)의 용액을 탄산칼륨(0.26g, 1.86 m㏖), 요오드화칼륨(0.05g, 0.32 m㏖) 및 벤질 브로마이드(0.20㎖, 1.7 m㏖)로 처리하고, 이 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 아세톤을 진공 중 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(50㎖)와 1M 염산 수용액(50㎖) 간에 분배시켰다. 유기 상을 포화 수성 염화나트륨(50㎖)으로 세척하고; 황산나트륨 상에서 건조시키고; 여과하고 진공 중 증발시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 헥산 중 0 내지 10% 에틸 아세테이트로 용리시키는 바이오타지(상표명) SP1 시스템(40g 실리카 카트리지) 상에서의 정제에 의해 메틸 2-(2-(벤질옥시)-3,5-다이브로모페닐)아세테이트(0.6g, 95%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.48-7.51 (m, 2H), 7.37 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.34-7.43 (m, 3H), 4.99 (s, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.60 (s, 2H); 13C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 171.26, 153.79, 136.56, 135.38, 133.57, 132.04, 128.82, 128.64, 128.52, 118.69, 117.56, 75.53, 52.50, 35.86.

단계 5

메틸 2-(2-(벤질옥시)-3,5-다이브로모페닐)아세테이트(0.3g, 0.73 m㏖) 및 (E)-펜트-1-엔일보론산피나콜 에스터(0.4g, 1.79 m㏖)를 화합물 I, 단계 2에 대한 것과 마찬가지로 커플링시켜, 메틸 2-(2-(벤질옥시)-3,5-다이((E)-펜트-1-엔일)페닐)아세테이트(0.21㎎, 72%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.50 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.44 (dd, J = 7.2, 7.2 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.38 (dd, J = 7.2, 7.2 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 6.32 (dt, J = 15.8, 7.0 Hz, 1H), 6.22 (dt, J = 15.8, 6.8 Hz, 1H), 4.87 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 2.20-2.29 (m, 4H), 1.50-1.60 (m, 4H), 1.01 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 1.00 (t, J = 7.4 Hz, 3H); 13C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 172.49, 153.59, 137.58, 134.35, 132.91, 131.91, 130.84, 129.53, 128.78, 128.32, 128.30, 128.24, 127.26, 125.21, 123.89, 75.89, 52.21, 35.94, 35.74, 35.42, 22.87, 22.77, 14.07, 14.06.

단계 6

메틸 2-(2-(벤질옥시)-3,5-다이((E)-펜트-1-엔일)페닐)아세테이트(0.2g, 0.53 m㏖)를 화합물 I, 단계 3에 대한 것과 마찬가지로 수소화시켜, 메틸 2-(2-하이드록시-3,5-다이펜틸페닐)아세테이트(0.12g, 73%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.37 (s, 1H), 6.92 (d, J = 2.1 Hz, 2H), 6.77 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 2.65 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.51 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 1.58-1. 66 (m, 4H), 1.31-1.41 (m, 8H), 0.93 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 0.92 (t, J = 6.9 Hz, 3H); 13C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 175.01, 151.27, 135.14, 131.48, 129.92, 128.52, 120.30, 52.95, 38.35, 35.34, 32.15, 31.86, 31.74, 30.61, 30.03, 22.87, 22.83, 14.34, 14.31.

단계 7

메틸 2-(2-하이드록시-3,5-다이펜틸페닐)아세테이트(0.2g, 0.53 m㏖)를 화합물 I, 단계 4에 대한 것과 마찬가지로 가수분해시켜 락톤화된 물질과 혼합된 조질의 생성물을 제공하였다. 작은 부분을 헥산 중 0 내지 100% 에틸 아세테이트로 용리시키는 바이오타지(상표명) SP1 시스템(120g 실리카 카트리지) 상에서 정제시켜 2-(2-하이드록시-3,5-다이펜틸페닐)아세트산(13.5㎎)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 10.5 (br s, 1H), 6.89 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.32 (br s, 1H), 3.66 (s, 2H), 2.58 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 2.48 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 1.52-1. 63 (m, 4H), 1.26-1.37 (m, 8H), 0.90 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H).

단계 8

2-(2-하이드록시-3,5-다이펜틸페닐)아세트산(13.5㎎, 0.046 m㏖)을 화합물 I, 단계 5에 대한 것과 마찬가지로 나트륨염으로 전환시켜 나트륨 2-(2-하이드록시-3,5-다이펜틸페닐)아세테이트(11㎎, 77%)를 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.46 (s, 2H), 2.56 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.50-1. 61 (m, 4H), 1.25-1.37 (m, 8H), 0.90 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 3H); 13C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 180.33, 151.94, 133.47, 130.37, 128.21, 127.81, 123.99, 42.90, 34.97, 31.81, 31.60, 31.40, 30.25, 29.88, 22.51, 22.45, 13.29, 13.24; LRMS (ESI 음성): m/z 291.2 (100%, M - Na+); UPLC (시스템 B): 7.7분. UPLC 시스템 B: 이동상 A = 0.1% 수성 폼산; 이동상 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산; 고체상 = HSS T3 칼럼; 구배 = 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

화합물 XVII : 2-(3,5- 다이헥실 -2- 하이드록시페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 (E)-헥스-1-엔일보론산피나콜 에스터를 이용해서 화합물 XVI에 대한 것과 마찬가지로 제조하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.46 (s, 2H), 2.56 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.50-1. 60 (m, 4H), 1.27-1.37 (m, 12H), 0.89 (t, J = 6.6 Hz, 3H), 0.88 (t, J = 6.80 Hz, 3H); LRMS (ESI 음성): m/z 319 (100%, M - Na+); UPLC (시스템 B): 8.7분. ULC 시스템 B: 이동상 A = 0.1% 수성 폼산; 이동상 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산; 고체상 = HSS T3 칼럼; 구배 = 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

화합물 XVIII : 2-(4- 하이드록시 -3,5- 다이펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 2-(3,5-다이브로모-4-하이드록시페닐)아세트산으로부터 화합물 XVI에 대한 것과 마찬가지로 제조하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.87 (s, 2H), 3.33 (s, 2H), 2.55 (t, J = 7.7 Hz, 4H), 1.53-1. 61 (m, 4H), 1.31-1.37 (m, 8H), 0.90 (t, J = 7.0 Hz, 6H); LRMS (ESI 음성): m/z 291.1 (100%, M - Na+); UPLC (시스템 B): 6.8분. UPLC 시스템 B: 이동상 A = 0.1% 수성 폼산; 이동상 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산; 고체상 = HSS T3 칼럼; 구배 = 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

화합물 XIX : 2-(3,5- 다이헥실 -4- 하이드록시페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 2-(3,5-다이브로모-4-하이드록시페닐)아세트산 및 (E)-헥스-1-엔일보론산피나콜 에스터로부터 화합물 XVI에 대한 것과 마찬가지로 제조하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.46 (s, 2H), 2.56 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.50-1.60 (m, 4H), 1.27-1.37 (m, 12H), 0.89 (t, J = 6.6 Hz, 3H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LRMS (ESI 음성): m/z 319.1 (100%, M - Na+); UPLC (시스템 B): 7.6분. UPLC 시스템 B: 이동상 A = 0.1% 수성 폼산; 이동상 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산; 고체상 = HSS T3 칼럼; 구배 = 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

화합물 XX : 2-(4- 플루오로 -3,5- 다이헥실페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 3,5-다이브로모-4-플루오로벤질 브로마이드 및 (E)-헥스-1-엔일보론산피나콜 에스터에서 출발하여 화합물 XVI에 대한 것과 마찬가지로 제조하였다. 3,5-다이브로모-4-플루오로벤질 브로마이드는 3,5-다이브로모-4-플루오로톨루엔을 80℃에서 아크릴로나이트릴 중 N-브로모숙신이미드 및 아조비스아이소뷰티로나이트릴로 브로민화시켜 제조하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.98 (d, JHF = 7.0 Hz, 2H), 3.38 (s, 2H), 2.57 (t, J = 7.7 Hz, 4H), 1.54-1.61 (m, 4H), 1.28-1.37 (m, 12H), 0.89 (t, J = 6.7 Hz, 6H); 19F NMR (377 MHz, CD₃OD): δ -132.17 (d, JHF = 6.6 Hz, 1F); 13C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 179.44, 158.11 (d, JCF = 239.8 Hz), 133.26 (d, JCF = 3.8 Hz), 128.73 (d, JCF = 5.4 Hz), 128.56 (d, JCF = 16.9 Hz), 44.52, 31.69, 30.35 (d, JCF = 1.5 Hz), 28.98, 28.97 (d, JCF = 3.1 Hz), 22.51, 13.29; LRMS (ESI 음성): m/z 321.0 (100%, M - Na+); UPLC (시스템 B): 9.2분. UPLC 시스템 B: 이동상 A = 0.1% 수성 폼산; 이동상 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산; 고체상 = HSS T3 칼럼; 구배 = 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

화합물 XXI : 2-(4- 플루오로 -3,5- 다이펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

상기 화합물은 3,5-다이브로모-4-플루오로벤질 브로마이드에서 출발하여 화합물 XVI에 대한 것과 마찬가지로 제조하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6.98 (d, JHF = 6.8 Hz, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.57 (t, J = 7.6 Hz, 4H), 1.54-1.62 (m, 4H), 1.28-1.37 (m, 8H), 0.90 (t, J = 7.0 Hz, 6H); 19F NMR (377 MHz, CD₃OD): δ -132.34 (d, JHF = 6.6 Hz, 1F); 13C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 179.41, 158.10 (d, JCF = 239.8 Hz), 133.26 (d, JCF = 3.8 Hz), 128.72 (d, JCF = 4.6 Hz), 128.56 (d, JCF = 16.9 Hz), 44.51, 31.54, 30.07, 28.92 (d, JCF = 3.1 Hz), 22.38, 13.22; LRMS (ESI 음성): m/z 293.0 (100%, M - Na+); UPLC (시스템 B): 8.4분. UPLC 시스템 B: 이동상 A = 0.1% 수성 폼산; 이동상 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산; 고체상 = HSS T3 칼럼; 구배 = A 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

화합물 XXII : 2-(2-벤질-3,5- 다이펜틸페닐 )아세트산의 나트륨염

표제의 화합물은 메틸 2-(2-벤질-3,5-다이((E)-펜트-1-엔일)페닐)아세테이트로부터 화합물 XIV에 대한 것과 같이 제조하였다. 후자는 화합물 XIV의 증대로부터 부산물(1.1% 수율)로서 단리되었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.17 (dd, J = 7.3, 7.3 Hz, 2H), 7.09 (dd, J = 7.3, 7.3 Hz, 1H), 6.97-6.99 (m, 3H), 6.86 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.55 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.49 (t, J = 7.8Hz, 2H), 1.59-1.67 (m, 2H), 1.31-1.45 (m, 6H), 1.21-1.26 (m, 4H), 0.91 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 0.82 (t, J = 7.0 Hz, 3H); ¹³C NMR (101 MHz, CD₃OD): δ 179.48, 141.46, 141.24, 140.47, 137.46, 133.70, 128.36, 128.05, 127.86, 127.75, 125.42, 43.25, 35.54, 33.90, 33.61, 31.86, 31.65, 31.25, 30.96, 22.49, 22.40, 13.31, 13.23; LRMS (ESI 음성): m/z 365.0 (20%, M - Na⁺), 321.1 (100%, M - CO₂Na); UPLC (시스템 B): 9분. (UPLC 시스템 B: 이동상 A = 0.1% 수성 폼산; 이동상 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산; 고체상 = HSS T3; 구배 = 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.)

화합물 XXIII : 나트륨 2-[3,5- 다이[( E )-펜트-1-엔일]페닐 ]아세테이트

표제의 화합물은, 수소화 단계를 생략한 것 이외에는, 화합물 XIV에 대해서와 같은 절차를 이용해서 제조하였다. mp 226-30℃; ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7.18 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 15.9 Hz, 2H), 2.23 (dt, J = 15.9, 6.7 Hz, 2H), 3.44 (s, 2H), 2.14-2.19 (m, 4H), 1.49 (tq, J = 7.4, 7.4 Hz, 4H), 0.95 (t, J = 7.3 Hz, 6H); ¹³C NMR (101MHz, CD₃OD): δ 179.41, 138.34, 138.06, 130.30, 130.16, 125.26, 121.60, 45.24, 35.10, 22.55 & 12.98; LRMS (음성 모드): m/z 271 (w, [M - Na⁺]), 227.2 (100%, [M - Na⁺ - CO₂]); UPLC: 8분. (UPLC; 조건 용매 A = 수중 0.1% 폼산; 용매 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산; 구배: 0.7 ㎖/분에서 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.)

화합물 XXIV : 나트륨 3-[3,5- 다이펜틸페닐 ] 프로파노에이트

표제의 화합물은 3-[3,5-다이브로모페닐]프로판산에서 시작하여 화합물 XIV에 대해서와 같은 절차를 이용해서 제조하였다. mp 211-217℃; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6.73 (s, 1H), 6.68 (s, 2H), 2.73-2.77 (m, 2H), 2.42-2.46 (m, 2H), 2.38 (t, J = 7.8 Hz, 4H), 1.43-1.51 (m, 4H), 1.19-1.28 (m, 8H), 0.83 (t, J = 6.9 Hz, 6H); ¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃): δ 182.55, 142.93, 141.85, 125.96, 125.77, 39.80, 36.13, 32.77, 31.99, 31.47, 22.79 및 14.27; LRMS (음성 모드): m/z 289.4 (100%, [M - Na⁺]); UPLC: 9분. (UPLC: 조건 용매 A = 수중 0.1% 폼산, 용매 B = 아크릴로나이트릴 중 0.1% 폼산, 구배: 0.7 ㎖/분에서 10분에 걸쳐서 A 중 5 내지 100% B.

실시예 2: LPS -자극된 RAW264 .7 세포에 대한 화합물의 효과; 파골 전구세포.

박테리아-유도된 세포벽 산물인 LPS는 오랫동안 골 손실의 전개에서 주된 인자로서 인지되어 왔다. LPS는 골 재흡수에서 중요한 역할을 하며, 이는 염증 세포의 동원, 사이토카인(예컨대, 인터류킨-6(IL-6), IL-12 및 종양 괴사 인자-a(TNF-a))의 합성 및 파골세포 형성 및 분화의 활성화를 수반한다.

RAW264.7 세포는 파골세포의 전구체이며, NF-κB 리간드의 수용체 활성제(RANKL) 또는 지질다당류(Lipopolysaccharide)(LPS)를 포함하는 수개의 인자에 의해 구별될 수 있다. 파골세포는 고 발현 또는 타트레이트 저항성 산 포스파타제(TRACP) 및 매트릭스 메탈로프로테이나제-9(MMP-9)(이는 파골세포의 마커로서 사용될 수 있음)를 특징으로 한다. 카프르산의 존재 하에 인큐베이팅된 RAW264.7 세포는 IL-12 생성의 증가 그리고 포스파타제(TRAP)-양성 세포(TRAP 발현, 파골세포 분화 마커)의 저감을 초래하는 것으로 판명되었다(Wang et al., J. Biol. Chem. (2006), Vol. 281, No. 45, pp.34457-64). 또한, LPS는 유도성 일산화질소 신타제(iNOS) mRNA 수준 및 일산화질소(NO) 생산을 강력하게 상향조절하는 하는 한편, 카프르산은 이들을 저해하였다. 부가적으로, 카프르산은 또한 단핵구 화학주성 단백질-1(MCP-1) mRNA 발현을 저해하였다.

TRAP(파골세포 마커) 및 IL-12에 대한 선택된 화합물의 효과는, 파골세포형성의 저감을 위한 양성 대조군으로서의 카프르산과 비교하여, 쥣과 파골세포 전구체 세포주인 RAW264.7 세포에서 수행되었다(Park et al. (2011) PLOS One Volume 6, Issue 11, 8 pages). RAW264.7 세포는 카프르산 또는 화합물 I의 존재 또는 부재 하에 LPS(1ug/㎖)과의 인큐베이션에 의해 분화되었다. 3 내지 5일째에, 파골세포 형성은 타트레이트-저항성 산 포스파타제(TRAP) 염색을 이용해서 평가하였다.

도 1은 TRAP의 고 발현(암색 염색)에 의해 입증된 바와 같이 RAW264.7 세포 내 LPS의 파골세포형성 효과를 나타낸다. 카프르산 및 화합물 I과의 인큐베이션은, 대조군 및 LPS-유도된 세포 그리고 TRAP 없는 세포가 파골세포 내에서 세포가 분화되지 않은 것을 나타내는 관찰 가능한 상이한 표현형을 나타낸다.

또한 카프르산이 LPS-자극된 RAW264.7 내 IL-12의 생성을 증가시키는 것이 보고된 바 있다(Wang et al., J. Biol. Chem. (2006), Vol. 281, No. 45, pp.34457-64). 카프르산은 또한 공지된 파골세포형성 저해제이므로, 실험은 화합물 I이 IL-12 생성의 촉진 및 증가를 가능하게 할 수 있었는지의 여부를 결정하기 위하여 수행되었다. RAW264.7 세포를 37℃에서 95% 공기-5% 이산화탄소의 습한 분위기에서 화합물의 존재 또는 부재 하에 21시간 동안 100 ng/㎖의 LPS와 함께 배양시켰다. 제조업자(비디 바이오사이언시스사(BD Biosciences)) 권장에 따라서 IL-12 ELISA를 사용하여 배양 배지 내 IL-12 농도를 측정하였다. 도 2는 각종 농도의 화합물 I의 존재 하에 LPS-자극된 RAW264.7 세포 내 IL-12 생성의 강력한 유도를 나타낸다.

실시예 3 : LPS -자극된 RAW264 .7 세포 내 IL-12 생성에 대한 화학식 I의 화합물의 효과; 파골 전구세포.

IL-12는 또한 파골세포 형성을 저해하는 것으로 보고되어 있다(Horwood and al. (2001) J. of Immunology, Volume 166, No. 8, pp. 4915-4921). 실시예 1에서 입증된 바와 같이 화합물　I의 존재 시 인큐베이팅된 LPS-자극된 RAW264.7은 IL-12를 증가시키고 파골세포형성(TRAP)을 저감시킨다. 시험관내 IL-12 생성 검정은 파골세포형성의 잠재적인 저해제를 선별하는데 이용되었다. 표 2는 IL-12 생성에 대한 화학식I의 대표적인 화합물의 효과를 나타낸다. 이들 모든 화합물은 IL-12 생성의 상당한 증가를 유발하였다.

이들 결과는 시험된 화합물이 LPS의 존재에서 IL-12의 생성을 유발한다는 것을 입증한다. IL-12의 생성을 자극하는 능력은 본 발명의 화합물이 IL-12 유발의 결과로서 골다공증을 예방 및/또는 치료하는데 유용할 수 있다는 것을 의미한다. 이것은, IL-12가 파골세포형성에 대한 직접 저해 효과를 갖는 것을 교시하는, 실시예 1 및 2에서 상기 언급된 참고문헌들에 의해 뒷받침된다.

실시예 4 : 난소 절제된- 래트 모델에서 골다공증의 저감에 대한 화합물 I의 효과.

인간과 비교해서, 래트의 골격 질량은 그의 수명 동안 예상보다 긴 기간 안정적으로 유지되지만, 래트는 이를 성호르몬 결핍으로 만들기 위하여 그리고 폐경 후 암컷에서 생기는 골 손실의 가속화를 자극시키기 위하여 난소 절제를 행할 수 있다. 난소 절제는 래트에서 골 손실을 유도하고, 폐경후 골 손실은 많은 유사한 특징을 공유한다. 이들은 재흡수 초과 형성과 함께 골 전환 속도의 증가; 초기의 신속한 골 손실 단계에 이어서 더욱 느려지는 단계; 피질골보다 더 큰 망상 골 손실; 칼슘의 장 흡수 감소; 비만에 의한 골에 대한 일부 보호; 및 에스토로겐, 타목시펜, 비스포스포네이트, 부갑상선 호르몬, 칼시토닌 및 절제에 의한 요법에 대한 유사한 골격 반응을 포함한다. 이들 광범위한 유사성은 난소 절제된 래트 골 손실 모델이 폐경후 골 손실에 관련되는 문제를 연구하기 위하여 적합하다는 강력한 증거이다.

스프래그 다우리 래트(Sprague Dawley rat)(250g)를 0일째에 난소 절제(OVX)하였다. 이 래트를 제14일에서 제68일까지 화합물 I(200 ㎎/㎏)로 위관영양법에 의해 처리하였다. 상이한 파라미터(체중, 칼슘 손실, 파골세포 마커(RANKL 및 TRAP mRNA 발현), 콜라겐 함량 및 조직학)의 평가는 제68일에 수행하였다.

도 3은 난소 절제된 래트의 체중의 증가를 나타낸다("폐경후 비만"과 유사함). 화합물 I은 난소 절제된-유도 비만을 저감시켰다.

도 4는 난소 절제된 래트에서 칼슘 손실에 대한 화합물 I의 효과를 나타낸다. 칼슘 손실은 제28일에서 제56일까지 난소 절제된 래트로부터의 소변에서 검출된다. 화합물 I은 난소 절제된 래트에서 칼슘 손실을 유의하게 저감시켰다.

또한, 혈청 중 산 포스파타제 활성이 파골세포형성의 표시인 것은 공지되어 있다(Park et al. (2011) PLOS One Volume　6, Issue 11, pp. 1-8). 혈청 산 포스파타제 활성이 측정되었고, 이 활성은 제28일에서 제56일까지 난소 절제된 래트에서 유의하게 증가한다(도 5). 그러나, 화합물 I은 난소 절제된 래트의 혈청 중 산 포스파타제 활성을 감소시키며(도　5), 이 감소는 파골세포형성의 성공적인 저감을 나타낸다.

도 6은 래트 경골에서 제68일째에 RANKL/OPG의 mRNA 발현 비에 대한 화합물 I의 효과를 나타낸다. 도시된 바와 같이, RANKL/OPG mRNA 발현은 골다공증이 전개 중인 래트에서 증가된 반면, 화합물　I에 의한 처리로 감소되었으며; 이 감소는 파골세포형성의 성공적인 저감을 나타낸다.

골 손실의 결과로서, 콜라겐 함량이 감소된다. 이것은 난소 절제된 래트에서 관찰되었다. 화합물 I은 난소 절제된 래트의 대퇴골의 골간단에서의 콜라겐 함량을 증가시켰고, 이것은 골 손실의 저감을 시사한다(도　7).

도 8은 대퇴골의 골간단의 조직학적 골 절편의 대표적인 사진을 나타낸다. 화합물 I은 대퇴골의 골간단 부분에서 골 손실을 저감시켰다.

실시예 5 : 당뇨성 비만(db/db) 마우스의 모델에서의 혈청 아디포넥틴에 대한 화학식 I의 화합물의 효과.

아디포넥틴이 골 형성 및 재건을 자극시킬 뿐만 아니라, 골 재흡수를 저해하는 것은 문서화되어 있었고, 이는 아디포넥틴이 골 질량의 음성 조정제일 수 있는 것을 시사한다(Lubkowska et al. (2014) Disease Markers, Volume 2014, Article ID975178, 14　pages). 또한, 대부분의 시험관내 연구는 아디포넥틴이 조골세포의 분화 및 무기질화뿐만 아니라, 포도당 대사 및 지방 질량을 조절하는 호르몬으로서 작용하는 오스테오칼신을 자극시키는 것은 입증된 바 있다(Lubkowska et al. (2014)). 조골세포 및 파골세포에 대한 그리고 결과적으로 골 개조에 대한 아디포넥틴의 잠재적인 영향은 내분비계와 지방 대사 간의 상호관계와 가능하게 연관된다(Lubkowska et al. (2014)).

본 발명의 선택된 화합물이 혈청 아디포넥틴 수준에 영향을 미칠 수 있는지를 결정하기 위하여, 제II형 당뇨병/비만의 모델을 사용하였다. 요약하면, db/db 마우스(6주령)를 신장절제하고, 113일 동안 화합물 XIV(구조는 상기 표 1에 나타나 있음)로 처리하였다. 혈청 아디포넥틴 수준은 마우스 아디포넥틴 효소-연결 면역흡착 검정 키트(R&D 시스템즈사)로 결정하였다.

도 9는 비만 db/db 당뇨병 마우스에서 측정된 바와 같은 혈청 아디포넥틴 수준을 예시한다. 혈청 아디포넥틴 수준은 비처리된 db/db 마우스에서 감소된 반면, 화합물 XIV에 의한 처리는 아디포넥틴의 수준을 모의 동물의 수준으로 증가시켰으며, 이는 이 화합물이 골다공증을 예방 또는 저감시키는 것을 시사한다. 화합물 XIV의 변이체, 특히 유사한 화학 구조를 가진 화합물은, 또한 아디포넥틴의 수준을 증가시키고, 그리고 골다공증을 예방 및/또는 저감시킬 수 있다. 화합물　XIV의 화학적 변이체의 비제한적인 목록은 상기 표 1에 나타낸 화합물 XV 내지 XXIV(및 이의 임의의 약제학적으로 허용 가능한 염)를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

표제들은 특정 부문을 위치시키는데 도움을 주고 기준을 위하여 본 명세서에 포함된다. 이들 표제는 그에 기재된 개념의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않으며, 이러한 개념은 전체 명세서를 통하여 다른 부분에서 이용가능성을 가질 수 있다. 따라서, 본 발명은 본 명세서에 나타낸 실시형태로 제한되는 것으로 의도되지 않지만, 본 명세서에 개시된 원칙 및 신규한 특징과 일치되는 가장 넓은 범주를 부여하는 것이다.

단수 형태는, 달리 문맥에서 명확하게 표시되지 않는 한, 대응하는 복수의 지시대상을 포함한다.

달리 표시되지 않는 한, 본 명세서 및 청구범위에서 사용된 성분의 양, 반응 조건, 농도, 특성 등을 표현하는 모든 숫자는 용어 "약"에 의해 모든 예에서 변형되는 것으로 이해된다. 적어도, 각각의 수치적 변수는 적어도 보고된 유의한 숫자의 수에 비추어서 그리고 통상적인 반올림법을 적용함으로써 해석되어야 한다. 따라서, 달리 반대로 표시되지 않는 한, 본 명세서 및 첨부되는 청구범위에서 제시된 수치적 변수는 얻어지도록 추구된 특성에 따라서 다를 수 있는 근사값이다. 넓은 범주의 실시형태를 제시하는 수치적 범위 및 변수가 근사값이긴 하지만, 구체적 예에 제시된 수치적 값은 가능한 정확한 것으로 보고된다. 그러나 임의의 수치적 값은 본질적으로 실험의 변화, 시험 측정, 통계적 분석 등으로부터 초래되는 특정 오류를 포함한다.

본 명세서에 기재된 실시예 및 실시형태는 단지 예시적인 목적을 위한 것이며, 그것에 비추어 다양한 변형 및 변화가 당업자에 의해 제시될 수 있고, 이는 본 발명 및 첨부되는 청구범위의 범주 내에 포함된다는 것이 이해된다.

Claims (34)

1. 골다공증의 예방 및/또는 치료를 필요로 하는 대상체에게 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법:
   

   

   
   식 중,
   A는 C₅ 알킬, C₆ 알킬, C₅ 알켄일, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃이되, n은 3 또는 4이고;
   R₁은 H, F 또는 OH이며;
   R₂는 H, F, OH, C₅ 알킬, C₆ 알킬, C₅ 알켄일, C₆ 알켄일, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ 또는 CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃이되, n은 3 또는 4이고;
   R₃은 H, F, OH 또는 CH₂Ph이며;
   R₄는 H, F 또는 OH이고;
   Q는
   1) (CH₂)_mC(O)OH,
   2) CH(F)-C(O)OH,
   3) CF₂-C(O)OH, 또는
   4) C(O)-C(O)OH이되,
   m은 1 또는 2이다.
2. 제1항에 있어서,
   A는 C₅ 알킬 또는 C₆ 알킬인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   R₂는 H, F, OH, C₅ 알킬 또는 C₆ 알킬인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
   R₃은 H, OH 또는 CH₂Ph인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
   Q는 (CH₂)_mC(O)OH이되, m은 1 또는 2인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
6. 제1항에 있어서,
   A는 C₅ 알킬 또는 C₆ 알킬이고; R₁은 H, F 또는 OH이며; R₂는 H, F, OH, C₅ 알킬 또는 C₆ 알킬이고; R₃은 H, OH 또는 CH₂Ph이며; R₄는 H, F 또는 OH이고; 그리고 Q는 (CH₂)_mC(O)OH이되, m은 1 또는 2인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
7. 제1항에 있어서,
   A는 C₅ 알킬이고; R₁은 H이며; R₂는 H 또는 C₅ 알킬이고; R₃은 H이며; R₄는 H이고; 그리고 Q는 (CH₂)_mC(O)OH이되, m은 1인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 화합물은 이하의 구조들로 표시되는 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법:
   

   

   
   

   
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 화합물은 이하의 구조로 표시되거나, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법:
   

   

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10. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 화합물은 이하의 구조로 표시되거나, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법:
    

    

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11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 약제학적으로 허용 가능한 염은 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 리튬, 암모늄, 망간, 아연, 철, 또는 구리로 이루어진 군으로부터 선택된 금속 반대이온을 포함하는 염기 부가염인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 약제학적으로 허용 가능한 염은 나트륨인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 골다공증은 폐경후 골다공증(원발성 제1형), 원발성 제2형 골다공증, 속발성 골다공증, 비정상적으로 높은 파골세포형성, 골연화증-유사 골다공증, 골감소증, 불완전 골형성증, 골화석증, 골괴사증, 골의 파제트병, 저인산염혈증 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    골다공증은 폐경후 골다공증(원발성 제1형), 원발성 제2형 골다공증 또는 속발성 골다공증인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
15. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    골다공증은 폐경후 골다공증(원발성 제1형)인, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법.
16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 화합물의 투여는 상기 대상체에게 하기 생물학적 활성들 중 하나 이상을 초래하는, 골다공증의 예방 및/또는 치료 방법:
    - 파골세포형성의 저해;
    - 파골세포형성의 저감;
    - 골 내 인터류킨-12(IL-12) 생성의 자극;
    - 골 내 산 포스파타제 활성의 저감;
    - 골 내 오스테오프로테게린(OPG)에 대한 NF-κB 리간드의 수용체 활성제(RANKL)의 비(RANKL/OPG 비)의 감소;
    - 골 내 콜라겐 함량의 증가; 및
    - 아디포넥틴의 혈청 수준의 조절.
17. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 골 손실의 예방 및/또는 저감을 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 골 손실을 예방 및/또는 저감시키는 방법.
18. 제17항에 있어서,
    상기 화합물은 칼슘의 손실을 저감시키는, 골 손실을 예방 및/또는 저감시키는 방법.
19. 제17항 또는 제18항에 있어서,
    상기 대상체는 골다공증을 앓거나 또는 이에 걸리기 쉬운, 골 손실을 예방 및/또는 저감시키는 방법.
20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 폐경후 여성인, 방법.
21. 파골세포 전구체 세포를 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하되, 상기 화합물은 상기 전구체 세포의 파골세포로의 분화를 저해하는, 파골세포형성을 저해하는 방법.
22. 자극된 파골세포 전구체 세포를 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하되, 증가된 IL-12 생성은 상기 화합물의 존재 하에 측정 가능한, 자극된 파골세포 전구체 세포에 의해 인터류킨-12(IL-12) 생성을 자극시키는 방법.
23. 골 세포를 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하되, 저감된 포스파타제 활성은 상기 화합물의 존재 하에 측정 가능한, 골 세포 내 산 포스파타제 활성을 저감시키는 방법.
24. 골 세포를 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하는, 골 세포 내 NF-κB 리간드의 수용체 활성제/오스테오프로테게린 비(RANKL/OPG 비)의 발현 및/또는 활성을 저감시키는 방법.
25. 골 세포를 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하는, 골 내 콜라겐 함량을 증가시키는 방법.
26. 골 세포를 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염과 접촉시키는 단계를 포함하는, 골 형성을 자극시키고/시키거나 골 개조(bone remodeling)를 자극시키고/시키거나 조골세포의 분화(differentiation) 및 무기질화(mineralization)를 자극시키고/시키거나 골 재흡수를 저해하는 방법.
27. 아디포넥틴의 혈청 수준의 조절을 필요로 하는 대상체에게 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 아디포넥틴의 혈청 수준을 조절하는 방법.
28. 제27항에 있어서,
    상기 화합물은 이하의 구조들로 표시되는 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 대상체에서 아디포넥틴의 혈청 수준을 조절하는 방법:
    

    

    
    

    
29. 제27항 또는 제28항에 있어서,
    상기 화합물은 이하의 구조로 표시되거나 이의 약제학적으로 허용 가능한 염인, 대상체에서 아디포넥틴의 혈청 수준을 조절하는 방법:
    

    

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30. 제27항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 비만인 및/또는 당뇨병 환자인, 대상체에서 아디포넥틴의 혈청 수준을 조절하는 방법.
31. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서,
    비스포스포네이트, 오다나카팁, 알렌드로네이트, 리세드로네이트, 에티드로네이트, 졸레드로네이트, 파미드로네이트, 테리파라타이드, 타목시펜, 랄록시펜 및 데노수맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 약물을 동시에 투여하는 단계를 더 포함하는, 방법.
32. 골다공증의 예방 및/또는 치료에서의, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 용도.
33. 골다공증의 예방 및/또는 치료용의 약제의 제조를 위한, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 용도.
34. 골다공증의 예방 및/또는 치료에서 사용하기 위한, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.

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