KR20200035441A - Dlbcl 환자 하위그룹의 오비누투주맙 치료 - Google Patents

Dlbcl 환자 하위그룹의 오비누투주맙 치료 Download PDF

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Abstract

본 발명은, 개별적으로, 특별한 바이오마커-정의된 DLBCL 환자 및 신규한 DLBCL 환자 하위그룹을 치료하는데 사용하기 위한 오비누투주맙(또는 그의 작용성 등가물)에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 DLBCL의 치료가 필요한 환자에서 오비누투주맙(또는 그의 작용성 등가물)에 의해 DLBCL을 치료하는 방법에 관한 것으로, 여기서 상기 환자는 특별한 바이오마커-정의된 DLBCL 환자이거나, 또는 신규한 바이오마커-정의된 DLBCL 환자 하위그룹에 속한다. 본 발명은 추가로 특별한 바이오마커-정의된 DLBCL 환자/신규한 DLBCL 환자 하위그룹에서 DLBCL을 치료하기 위한 약학 조성물의 제조에 있어서의 오비누투주맙(또는 그의 작용성 등가물)의 용도에 관한 것이다. 추가로 본 발명은, 개별적으로, 특별한 DLBCL 환자/신규한 DLBCL 환자 하위그룹을 식별하는 방법 및 DLBCL의 신규한 형태 및 특별한 DLBCL 환자/신규한 DLBCL 환자 하위그룹을 진단하는 방법에 관한 것이다.

Description

DLBCL 환자 하위그룹의 오비누투주맙 치료
본 발명은, 개별적으로, 특별한 바이오마커-정의된 DLBCL 환자 및 신규한 DLBCL 환자 하위그룹을 치료하는데 사용하기 위한 오비누투주맙(obinutuzumab)(또는 그의 작용성 등가물)에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 DLBCL의 치료가 필요한 환자에서 오비누투주맙(또는 그의 작용성 등가물)에 의해 DLBCL을 치료하는 방법에 관한 것으로, 상기 환자는 특별한 바이오마커-정의된 DLBCL 환자이거나, 또는 신규한 바이오마커-정의된 DLBCL 환자 하위그룹에 속한다. 본 발명은 추가로 특별한 바이오마커-정의된 DLBCL 환자/신규한 DLBCL 환자 하위그룹에서 DLBCL을 치료하기 위한 약학 조성물의 제조에 있어서의 오비누투주맙(또는 그의 작용성 등가물)의 용도에 관한 것이다. 추가로 본 발명은, 개별적으로, 특별한 DLBCL 환자/신규한 DLBCL 환자 하위그룹을 식별하는 방법, 및 DLBCL의 신규한 형태 및 특별한 DLBCL 환자/신규한 DLBCL 환자 하위그룹을 진단하는 방법에 관한 것이다.
미만성 거대 B-세포 림프종(DLBCL: diffuse large B-cell lymphoma)은 공격적 비-호지킨 림프종(NHL: non-Hodgkin lymphoma)의 가장 흔한 유형이다. 항-CD20 단일클론성 항체(mAb) 리툭시맙(rituximab)(R)에 사이클로포스파미드(cyclophosphamide), 독소루비신(doxorubicin), 빈크리스틴(vincristine), 및 프레드니손(prednisone)(CHOP)을 더한 면역화학요법은, 이전에 치료되지 않은 후기 단계의 질환을 앓는 환자에 대한 표준 치료법이다[코이피어(Coiffier)의 문헌 "N. Engl. J. Med. 346, 2002, 235-242"; 틸리(Tilly)의 문헌 " Ann. Oncol. 26, 2015, v116-v125 (suppl 5)"; "종양학에서의 NCCN 임상 실습 가이드라인: 비-호지킨의 림프종(NCCN Clincal Practice Guidelines in Oncology: non-Hodgkin's lymphomas), Version 3. 2016"; 모두 www.NCCN.org 참조]. 연구에 의해 76%의 완전 반응 및 미확인 완전 반응(CR/CRu) 비율(GELA 실험)(상기 인용된 코이피어의 문헌), 및 77%의 2년간의 기능부전이 없는 생존율(failure-free survival)이 제시되었다[하버만(Habermann)의 문헌 "J. Clin. Oncol. 24, 2006, 3121-3127"]. DLBCL에 대한 제1선(1L)의 치료가 많은 환자들에게 치유력이 있지만[마우러(Maurer)의 문헌 "J. Clin. Oncol. 32, 2014, 1066-1073"], 차도가 없거나 재발된 20 내지 40%의 환자를 위하여 결과를 개선시킬 필요가 여전히 남아있고, 구제 요법에 의한 결과는 여전히 불충분 하다[진(Sehn)의 문헌 "Blood 125, 2015, 22-32"].
오비누투주맙[가자이바(Gazyva: 상표명)/가자이바로(Gazyvaro: 상표명) GA101; G]은, R에 비하여 직접적 세포 사멸 유도, 및 항체-의존성 세포 세포독성 및 식세포작용이 큰, 당조작된 제II형 항-CD20 mAb이다[허터(Herter)의 문헌 "Mol. Cancer Ther. 12, 2013, 2031-2042"; 모스너(Mossner)의 문헌 "Blood 115, 2010, 4393-4402"; EP-B1 제2380910호; 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호; 또한 일리지(Ilidge)의 문헌 "Expert Opin. Biol. Ther. 12(5), 2012, 543-5" 참조]. 이전에 치료되지 않았고 만성 림프구성 백혈병(CLL: chronic lymphocytic leukemia) 및 공존하는 증상(CLL11), 또는 소포성 림프종(FL; GALLIUM)을 앓는 환자의 3상 연구에서, G는 R에 비해 더욱 효과적임을 입증하였다[고에데(Goede)의 문헌 "N. Engl. J. Med. 370, 2014, 1101-1110"; 마르쿠스(Marcus)의 문헌 "N. Engl. J. Med. (Accepted May 2017: in press)"]. 더욱 소규모 연구에서, G 단독요법 및 G-CHOP는 DLBCL을 비롯한 비-호지킨 림프종(NHL)의 공격적인 형태에서 가능성을 입증하였다[모르쉬하우저(Morschhauser)의 문헌 "J. Clin. Oncol. 31, 2013, 2912-2919"; 젤레네츠(Zelenetz)의 문헌 "Blood 122, 2013, 1820"]. 또한 오웬(Owen)(Expert Opin. Biol. Ther. 12(3), 2012, 343-51)은 림프구증식 질환의 치료에 있어서의 오비누투주맙의 용도를 논의한다. 다중심, 개방-표지의 무작위화된 3상 임상 연구(GOYA; 추가의 세부사항을 위해 하기 참조)는 이전에 치료되지 않은 DLBCL을 앓는 환자에서 G-CHOP의 효능 및 안전성을 R-CHOP와 비교하였다. 그러나, GOYA에서, GOYA와 관련하여 초기에 치료되도록 의도된 전체 1L DLBCL 환자 그룹에 대하여 이전에 치료되지 않은 DLBCL(1L DLBCL)에서 G-CHOP는 R-CHOP에 비해 임상적 결과(예를 들어 무진행 생존율(PFS))를 개선시키지 않았다.
스코트(Scott)[Blood 123(8), 2014, 1214-7; JCO 33(26), 2015, 2848 57; Am. Soc. Clin. Oncol. Educ. Book 2015, 35:e458-66] 및 다른 저자들[노바코브스키(Nowakowski)의 문헌 "Am. Soc. Clin. Oncol. Educ. Book 2015, 35:e449-57"]은 나노스트링 림프2Cx(NanoString Lymph2Cx) 검사를 사용함으로써 DLBCL의 기원-세포(COO: cell-of-origin) 하위유형에 대한 유전자 발현-기반의 결정을 수행하였다(상기 인용된 스코트의 2014년 및 2015년 문헌). 특별히, 스코트(상기 인용된 2014년 및 2015년 문헌)는, 20-유전자 유전자 발현 검사 및 ∼ < 1900, ∼ 1900 - ∼ 2450 및 ∼ > 2450의 선형 예측자 스코어(LPS: Linear Predictor Score)에 기초하여, DLBCL의 COO 하위유형을 배중심(germinal-center) B-세포-유사 DLBCL(GCB DLBCL), 활성화된 B-세포-유사 DLBCL(ABC DLBCL) 및 분류되지 않은 DLBCL로 각각 지정하였다(상기 인용된 스코트의 2014년 문헌, 도 1 참조). 스코트(상기 인용된 2014년 및 2015년 문헌)는 또한 DLBCL의 이들 COO 하위유형에 대한 R-CHOP의 치료 효과를 평가하였다. 푼누스(Punnoose)(Blood 126, 2015, 3971; 또한 http://www.bloodjournal.org/content/126/23/3971 참조)는 베바시주맙(bevacizumab) + R-CHOP(NCT 00486759)를 평가하는 MAIN, III 상 실험으로부터 이전에 치료되지 않은 DLBCL을 앓는 환자에서 ABC 및 GCB COO 하위유형 내에서의 BCL2 및 MYC 단백질 발현의 출현율 및 예상값을 기술한다. 샬라-말라디(Challa-Malladi)(Cancer Cell 20, 2011, 728-40)에 따르면, β2-마이크로글로불린 및 CD58의 조합된 유전적 비활성화는 DLBCL에서 면역 인식으로부터의 빈번한 탈출을 나타낸다.
그러나, DLBCL의 치료에서의 이전의 성공(예를 들면 R, 특별히 R-CHOP에 의한 진보에 기인함)에도 불구하고, 일부 DLBCL 환자[문헌 "종양학에서의 NCCN 임상 실습 가이드라인: 비-호지킨의 림프종(NCCN clinical practice guidelines in oncology; non-Hodgkin's lymphoma), v 2.2015" 참조]의 경우 개선된 치료에 대한 충족되지 않은 의료 요구가 여전히 높다(상기 인용된 진의 문헌 참조).
따라서, 본 발명에 놓인 기술적 문제는 특정 환자에서 DLBCL의 개선된 치료를 제공하는 것이다.
상기 기술적 문제에 대한 해결책은 이후 본원에 제공되고 첨구된 청구범위에 특징지워져 있다.
놀랍게도 본 발명에 있어서, 모든 DLBCL 환자중 일부 환자는, 특별히 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과를 가지면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 것으로 밝혀졌다. 또한 놀랍게도 본 발명에 있어서, 특별히 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과를 가지면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 DLBCL 환자의 하위그룹이 식별/결정될 수 있는 것으로 밝혀졌다. 또한 놀랍게도 본 발명에 있어서, 특별히 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과를 가지면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 DLBCL 환자가 존재하는 것으로 밝혀졌다. 본 발명의 주요 목표는 이러한 특별한 DLBCL 환자 및 DLBCL 환자의 하위그룹이 각각 실제로 정의될 수 있다는 것이고, 또한 본원에서 "본원에 정의된 환자"로서 지칭된다. 본 발명의 추가의 목표는 이러한 환자가 바이오마커에 의해 정의될 수 있다는 것이다(또한 본원에 각각 "예측적 바이오마커" 및 "예측적 바이오마커-정의된 환자"로서 지칭됨).
특별히, GOYA의 탐구 분석에 기초하여, 본 발명에 있어서, GCB DLBCL 환자의 하위집합(들)(예를 들어 신규한 분자 소포성 림프종(FL)-유사 GCB DLBCL 환자 하위그룹) 및/또는 CD58에서 돌연변이를 갖고/갖거나 CD58의 발현이 낮은 DLBCL 환자에서 오비누투주맙이 리툭시맙(각각 CHOP 화학요법과 병용됨)에 비해 우수한 것으로 입증되었고, 이는 첨부된 실시예에 의해 예시된다. R에 비한 오비누투주맙의 우수성이 특정 환자, 특별히 본원에 정의된 환자에 대해 식별된 것은 최초의 일이다.
예를 들면, 본 발명에 있어서, R에 의한 치료(예를 들어 R-CHOP)에 비해 G에 의한 치료(예를 들어 G-CHOP)로부터 이점을 얻는 다음과 같은 바이오마커-정의된 DLBCL 환자가 식별/결정되었다:
ㆍ BCL2 전좌된 환자(예를 들면, 도 4 참조);
ㆍ BCL2 단백질 발현 양성 환자(예를 들면, 도 5 참조);
ㆍ BCL2 단백질 발현 양성인 BCL2 전좌된 환자(예를 들면, 도 6 참조);
ㆍ GCB DLBCL 환자의 하위집합(들). 이들은, 예를 들면, 다음과 같이 식별될 수 있다:
o 선형 예측자 스코어(LPS)의 컷오프(cutoff)에 의한 하위그룹 "강한-GCB" 환자(컷오프 미만의 LPS를 갖는 환자; 예를 들어 LPS ∼ 1900의 일반적 GCB DLBCL 컷오프와 비교할 경우)로의 GCB 환자의 하위그룹(COO) 분류(예를 들면, 도 7, 10 및 12 참조);
o 높은 BCL2 유전자 발현을 갖는 GCB 환자;
o BCL2 단백질 발현 양성인 GCB 환자;
o BCL2 전좌를 갖는 GCB 환자;
o BCL2 단백질 발현 양성인 BCL2 전좌를 갖는 GCB 환자(예를 들면, 도 8 참조);
ㆍ CD58 돌연변이된 환자 및/또는 CD58의 발현이 낮은 환자(예를 들면, 도 9 참조).
더욱 특별히, GOYA의 탐구 분석에 기초하여, 연속적 변수로서의 LPS의 평가가 R(특별히 R-CHOP)에 비해 G(특별히 G-CHOP)로부터 더욱 이점을 얻는 GCB 환자의 하위그룹을 식별하였음은 본 발명에 있어서 입증되고 첨부된 실시예에 의해 예시된다. 더 더욱 특별히, 유전자 발현(GE) 어레이 프로파일(array profile)(LPS에 의해 측정됨)의 가중된 발현은, GOYA에서 GCB 환자중에서 R 치료(예를 들어 R-CHOP)에 비해 유리한 G 치료(예를 들어 G-CHOP)로부터의 결과에서의 이점과 결부되는 것으로 관찰되었다.
이에 기초하여, R 치료에 비해 G 치료로부터 더 큰 이점을 갖는 환자의 강한-GCB DLBCL 하위그룹을 정의하는 새로운 LPS 컷오프가 결정될 수 있었다. 이러한 새로운 컷오프는 보통 GCB DLBCL에 할당되는 LPS 컷오프에 비해 실질적으로 적다(∼ <1900). 예를 들면, 749 이하의 새로운 LPS 컷오프가 다변량 모의실험 분석에서 결정되었다(도 10 참조). 이러한 예에 따라서, 749 이하의 LPS를 갖는 환자로서 정의된 '강한-GCB' 환자는, GOYA에서 평가가능한 DLBCL 환자중 25%(233/933) 및 평가가능한 GCB 환자중 43%(233/540)를 나타내었다. 다른 예로서, 725 이하의 새로운 LPS 컷오프는 다변량 모의실험 분석에서 결정되었다(도 10, 12 참조). 이러한 예에 따라서, '강한-GCB' 환자는 725 이하의 LPS를 갖는 환자로서 더욱 엄격하게 정의된다. 이들 환자는 GOYA에서 평가가능한 DLBCL 환자중 25%(229/933) 및 평가가능한 GCB 환자중 43%(229/540)를 나타낸다. 대략 725의 LPS 컷오프는 독립적 코호트(cohort)("본원에 정의된 환자"), 즉 강한-GCB DLBCL 환자에 대한 결과의 보기 드문 강인성(robustness) 및 높은 일반화 가능도(generalizability)를 반영하는 것으로 보였다. 이는 부트스트랩 모의실험(bootstrap simulation)에 의해 제시되었다.
G(G-CHOP)에 의해 치료된 강한-GCB 환자는, 예를 들면 무진행 생존율(PFS: progression-free survival), 무병 생존율(EFS), 및 전체 생존율(OS: overall survival)에 있어서, R(R-CHOP)에 의해 치료된 이들 환자에 비해 유의적으로 더 우수한 임상적 결과를 달성하였다(표 4 참조). 높은 수준의 안전성은 치료 섭생과 유사하였다.
파운데이션원(FoundationOne: 등록상표) 헴(FOH) 데이터에 대한 유전자-집합 강화 분석에서, 강한-GCB 환자는 "약한-GCB" 환자로서 지칭되는 다른 GCB 환자에 비하여 FL 체세포 돌연변이 보증마크(hallmark)에 대해 유의적으로 강화되는 것으로 추가로 특징지워 졌다[예를 들어 오발견 확률(FDR: false-discovery rates), 3.54e-9]. 특별히, BCL2 전좌 및 수 개의 m7-FLIPI 유전자(BCL2, BCL6, CD70, CDKN2A, CREBBP, EP300, IGH, MEF2B, MYC, MYD88, PCLO, TNFAIP3, TNFRSF14)에서의 돌연변이/돌연변이율은, 다른 DLBCL 환자에 비하여 강한-GCB 환자에서, 및/또는 BCL2 전좌를 갖고/갖거나 BCL2 발현이 높은 DLBCL 환자에서 매우 강화되었다(5% 미만의 FDR에서; 도 11). 중앙 병리학 검토시 강한-GCB 하위집합에서 형질전환된 무활동성(indolent) NHL에 대한 증거는 없었다.
요약하면, 무엇보다도, DLBCL, 특별히 GCB DLBCL의 신규한 임상적으로 및 분자적으로 구별되는 하위유형이 '강한-GCB'로서 지칭되는 하위유형으로서 식별되었다. 식별된 하위유형은 드 노보(de novo) DLBCL을 나타낸다. 이들은 FL의 분자 특징, 예컨대 FL-전형적 돌연변이를 나타내지만[모린(Morin)의 문헌 "Nature 476 (7360), 2011, 298-303" 참조], 이들은 FL과 임상적으로 상이하다. G(예를 들어 G-CHOP)에 의한 치료는, (GCB) DLBCL 환자("본원에서 정의된 환자"), 특별히 1L (GCB) DLBCL의 신규한 이들 하위집합에서, R(예를 들어 R-CHOP)에 의한 치료에 비해 실질적인 임상적 이점을 제공한다.
따라서, 본 발명은 유리하게는 오비누투주맙에 반응하는, 특별히 더욱 유리하게는 R에 비해 오비누투주맙에 더욱 반응하는 (GCB) DLBCL 환자의 하위집합(들)("본원에서 정의된 환자")을 식별/결정/진단하는 수단 및 방법을 제공한다. 식별/결정/진단은 몇몇 방식에 의해, 예를 들어 BCL2 전좌 및/또는 BCL2 단백질 과발현이 존재하는지의 여부, CD58에서 유전적 돌연변이(들)가 존재하는지의 여부 및/또는 CD58 발현이 저하되는지의 여부를 결정함으로써, 또는 가중된 유전자 발현을 프로파일링/결정하고(예를 들어 나노스트링 COO 검사에 의함) LPS에 대한 새로운 컷오프(본원의 다른 곳에 기재된 바와 같음)를 사용함으로써 수행될 수 있다.
더욱 특별히, 본 발명은 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 DLBCL 환자(DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자)를 식별하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 환자가 본원에서 정의된 환자인지의 여부를 결정함(하는 단계)(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써)을 포함한다.
본 발명은 추가로 오비누투주맙(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 의해 치료되어 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달될 수 있는 DLBCL의 형태를 환자에서 진단하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 환자가 본원에서 정의된 환자인지의 여부를 결정함(하는 단계)(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써)을 포함한다. 상기 방법은 (추가로) 환자가 본원에서 정의된 환자인 경우 상기 형태의 DLBCL을 진단함(하는 단계)을 포함한다.
본 발명은 또한 오비누투주맙, 또는 이의 작용성 등가물에 의한 본원에서 정의된 환자의 의료 개입/치료에 관한 것이다. 원칙적으로, 용어 "오비누투주맙"은 본원에 사용될 경우 또한 그의 작용성 등가물을 포괄한다(추가의 설명/정의를 위해 하기 참조).
하나의 양태에서, 본 발명은 본원에서 정의된 환자에서 DLBCL을 치료하는데 사용하기 위한 오비누투주맙에 관한 것이다.
이러한 사용에 있어서, 예를 들면, (i) 치료되는 환자가 본원에서 정의된 환자인지의 여부가 결정되었거나(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써), (ii) 치료되는 환자가 본 발명의 식별을 위한 방법에 따라서 식별되었거나, 또는 (iii) 치료되는 환자에서 DLBCL의 형태가 본 발명의 진단 방법에 따라서 진단된 것으로 구상된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 본원에서 정의된 환자에서 DLBCL을 치료하기 위해 사용하기 위한 오비누투주맙에 관한 것이고, 여기서 예를 들면, 상기 치료는 (i) 치료되는 (DLBCL) 환자가 본원에 정의된 바와 같은 환자인지의 여부를 결정하는 단계(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써), (ii) 본 발명의 식별 방법에 따라서 DLBCL 환자를 식별하는 단계, 또는 (iii) 본 발명의 진단 방법에 따라서 DLBCL의 형태를 환자에서 진단하는 단계를 포함한다.
결정/식별/진단(의 단계)에 있어서, (DLBCL) 환자의 샘플, 예를 들면 (DLBCL) 환자의 종양 샘플이 이용될 수 있다. 결정은 (DLBCL) 환자, 예를 들면 (DLBCL) 환자의 종양 샘플에서 이루어 질 수 있다. 본 발명에 따라서 이용되는 특별한 샘플의 비제한적인 예는 종양 조직/종양 생검, 더욱 특별히 포르말린-고정되고 파라핀-함침된 종양 조직/종양 생검의 샘플이다. 이러한 샘플은, 예를 들면, 상기 인용된 스코트의 2014년 및 2015년 문헌에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다. 다른 적합한 샘플은 본원의 다른 곳에 기재되어 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 DLBCL의 치료가 필요한 환자에서 DLBCL을 치료하는 방법에 관한 것이고, 여기서 상기 환자는 본원에서 정의된 환자이다. 이 방법은 DLBCL 치료법이 고려되는 환자의 샘플을 수득하는 단계 및/또는 상기 환자가 본원에서 정의된 환자인지의 여부를 결정하기 위해 환자의 샘플을 시험하는 단계를 포함할 수 있다. 본 발명의 치료 방법은 약학적으로 효과적인 양의 오비누투주맙을 치료되는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 것으로 구상된다. 이들 단계에 있어서, 특별히 (DLBCL) 환자의 (종양) 샘플을 시험하는 단계가 이용될 수 있다. 시험은 (DLBCL) 환자의 (종양) 샘플에서 이루어질 수 있다. 이용되는 "샘플"에 관하여 상기 본원 및 그 외에서 일컬어지는 내용은 필요한 부분만 약간 수정하여 여기서 적용된다. 이들 단계에 있어서, 특별히 시험 단계에 있어서(또는 그 단계 대신에), 또한 본 발명에 따른 식별 또는 진단 방법이 이용될 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 본원에서 정의된 환자에서 DLBCL을 치료하기 위한 약학 조성물의 제조에 있어서의 오비누투주맙의 용도에 관한 것이다. 상기 치료는 치료되는 (DLBCL) 환자가 본원에 정의된 바와 같은 환자인지의 여부를 본 발명에 따라 결정/식별/진단하는 단계를 포함할 수 있다. 결정/식별/진단 단계에 있어서, (DLBCL) 환자의 샘플, 예를 들면 (DLBCL) 환자의 종양 샘플이 이용될 수 있다. 결정은 (DLBCL) 환자의 샘플에서, 예를 들면 (DLBCL) 환자 (종양) 샘플에서 이루어질 수 있다. 이용되는 "샘플"에 관하여 본원 다른 곳에서 일컬어지는 내용은 필요한 부분만 약간 수정하여 여기서 적용된다. 유사하게, 용도 및 치료와 관련하여 상기 일컬어진 내용은 필요한 부분만 약간 수정하여 여기서 적용된다.
본 발명에 따라서 치료되는 환자("본원에서 정의된 환자")는, 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 오비누투주맙(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 의한 치료에 반응하는 환자, 특별히 DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자이다.
본 발명의 하나의 양태/실시태양(양태/실시태양 A)에서, 본원에서 정의된 환자(오비누투주맙에 의해 치료되는 환자)는 예측적 바이오마커-정의된 환자이다.
바이오마커는, 본원에서 정의된 환자(임의적으로 하나 이상의 다른 (예측적) 바이오마커와 조합됨), 즉 더욱 유리하게는 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 비해 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 환자를 식별하기 위해 사용될 수 있는 경우, 본 발명에 따라서 "예측적"이다. 더욱 특별히, 바이오마커는 치료 효과(즉 R 치료와 비교된 G 치료)가 바이오마커-정의된 환자의 하위 그룹 사이에서 상이한 경우 예측적이다. 이와 관련하여, 예측적 바이오마커(들)가 본원 다른 곳에서 정의된 바와 같은 바이오마커(들)인 것이 바람직하다. 본 발명에 있어서, 평가되는 예측적 바이오마커의 특별한 예는 CD58(예를 들어 내부의 유전적 돌연변이(들) 및/또는 이의 낮은 발현), BCL2(예를 들어 이의 전좌 및/또는 높은 발현) 및 유전자 TNFRSF13B, LIMD1, IRF4, CREB3L2, PIM2, CYB5R2, RAB7L1, 및 CCDC50 및 MME, SERPINA9, ASB13, MAML3, ITPKB, MYBL1, 및 S1PR2중 하나 이상(바람직하게는 모두)이다(예를 들어 이의 가중된 발현은 실질적으로 ∼ 1900 미만의 LPS를 생성함). 이와 관련하여, 특별히 양태/실시태양 B 내지 G에 있어서, 하기 본원에 개시된 내용을 또한 참고한다.
본 발명의 하나의 양태/실시태양(양태/실시태양 B)에서, 본원에서 정의된 환자(오비누투주맙에 의해 치료되는 환자)는 분자 소포성 림프종(FL)-유사 배중심 B-세포 (GCB) DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자이다.
이와 관련하여 "분자"는, 분자 수준에서, 환자가 FL 환자와 유사함을 의미한다(상기 인용된 모린의 문헌). 그러나, 임상적 수준에서/임상적으로, 환자는 FL 환자와 유사하지 않은 것으로 구상된다.
본 발명에 따라서, 이러한 양태/실시태양에 따른 분자 FL-유사 GCB DLBCL은 바람직하게는 본 발명에 따른 강한-GCB DLBCL로서 및/또는 BCL2 전좌를 갖고/갖거나 BCL2 발현이 높은 환자에서의 DLBCL로서 특징지워 진다(하기 양태/실시태양 D 및 E 참조).
본 발명에 따른 분자 FL-유사 GCB DLBCL로부터 고통받는 환자는 또한 BCL2, BCL6, CD70, CDKN2A, CREBBP, EP300, IGH, MEF2B, MYC, MYD88, PCLO, TNFAIP3 및 TNFRSF14로 구성된 군에서 선택된 하나 또는 (바람직하게는) 그 이상의 유전자에서 하나 또는 (바람직하게는) 그 이상의 돌연변이(들)를 갖는 환자로서 특징지워 질 수 있다. 비록 덜 바람직하지만, 본 발명에 따른 분자 FL-유사 GCB DLBCL로부터 고통받는 환자는 또한 BCL2, CREBBP, EP300, EZH2, MEF2B, PCLO, 및 TNFRSF14로 구성된 군에서 선택된 하나 또는 (바람직하게는) 그 이상의 유전자에서 하나 또는 (바람직하게는) 그 이상의 돌연변이(들)를 갖는 환자, CREBBP, EP300, EZH2, MEF2B 및 TNFRSF14로 구성된 군에서 선택된 하나 또는 (바람직하게는) 그 이상의 유전자에서 하나 또는 (바람직하게는) 그 이상의 돌연변이(들)를 갖는 환자, 또는 EZH2, MEF2B 및 TNFRSF14로 구성된 군에서 선택된 하나 또는 (바람직하게는) 그 이상의 유전자에서 하나 또는 (바람직하게는) 그 이상의 돌연변이(들)를 갖는 환자로서 특징지워 질 수 있다. 이와 관련하여, 적용가능한 돌연변이의 비제한적이지만 특별한 한가지 예는 BCL2 돌연변이, 특별히 BCL2 전좌이다(세부사항을 위해 하기 참조).
돌연변이(들)는, 예를 들면, 첨부된 실시예에 의존하여 식별될 수 있다. 파운데이션 메디슨(Foundation Medicine) 차세대 서열분석 검사, 파운데이션원(등록상표) 헴은, 예를 들면, 이와 관련하여 사용될 수 있다(판매업체의 매뉴얼에 따름).
본 발명의 하나의 양태/실시태양(양태/실시태양 C)에서, 본원에서 정의된 환자(오비누투주맙에 의해 치료되는 환자)는 CD58에서 하나 이상의 유전적 돌연변이(들)를 갖고/갖거나 CD58의 발현이 낮은 환자이다.
CD58(또한 상기 인용된 샬라-말라디의 문헌 참조)은 종양 세포의 면역 인식에 관여하고 종양 세포 상에서 발현하는 것으로 공지되어 있다. CD58은 효과자 CTL 및 NK 세포 상의 CD2에 결합한다(이로써 면역 효과자 세포의 활성화 신호를 제공함). CD58에서의 유전적 변형의 존재는 손실되거나 변형된 CD58 표면 발현과 연관된다(예를 들어 면역조직화학(IHC)에 의해 검출가능함). DLBCL 사건중 67%는 변형된 CD58 단백질 발현을 나타내고; GCB 및 ABC COO 하위그룹에서 동일한 비율을 갖는다. CD58을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열 및 CD58, 특별히 호모 사피엔스(Homo sapiens)(인간) CD58의 아미노산 서열은 당분야에 잘 공지되어 있다. 이들은, 예를 들면, 하기 인터넷 주소(URL: Uniform Resource Locator)에 의해 다운로드될 수 있다:
Figure pct00001
CD58, 특별히 호모 사피엔스(인간) CD58을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열은, 예를 들면, NCBI 등록 번호: XM_017002869.2(변이체 X1); NR_026665.1(변이체 3); NM_001779.2(변이체 1); NM_001144822.1(변이체 2)을 통해 이용가능하다. CD58, 특별히 호모 사피엔스(인간) CD58의 아미노산 서열은, 예를 들면, NCBI 등록 번호: XP_016858358.1(동형체 X1); NP_001138294.1(동형체 2); NP_001770.1(동형체 1)을 통해 이용가능하다. 호모 사피엔스(인간) CD58을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열의 일예는 서열 번호 11에 제시된다. 호모 사피엔스(인간) CD58의 아미노산 서열의 일예는 서열 번호 12에 제시된다.
원칙적으로, 본 발명에 있어서 "발현"은 유전자 발현, 즉 (1차) mRNA의 출현(전사 수준), 및 단백질 발현, 즉 단백질의 출현(번역 수준) 둘 다를 의미하는 것으로 구상된다.
(1차) mRNA의 출현은, 예를 들면, 동소 혼성화(ISH: in situ hybridization) 기법에 의해, 예를 들면 형광 ISH(FISH)에 의해 측정/검출될 수 있다. 각각의 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 장(Zhang)의 문헌[Chin. J. Cancer. Res. 23(2), 2011, 160-4(또한 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3587538/ 참조)]에 기재되어 있다. 유전자 발현/(1차) mRNA의 출현, 특별히 CD58 유전자 발현/(1차) CD58 mRNA의 출현은 또한 트루세크(TruSeq: 등록상표) RNA 서열분석[판매업체(일루미나(Illumina: 등록상표) 인코포레이티드(Inc.))의 매뉴얼에 따름]에 의해 평가될 수 있다.
단백질의 출현은, 예를 들면, IHC에 의해 측정/검출될 수 있다. 개별적인 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 푼누스의 상기 인용된 문헌(또한 http://www.bloodjournal.org/content/126/23/3971을 참조)에 기재되어 있다. 단백질 발현/단백질의 출현, 특별히 CD58 단백질 발현은 또한 상기 인용된 샬라-말라디의 문헌에 기재된 바와 같이 측정/검출될 수 있다.
일반적으로, CD58 발현 및 CD58 돌연변이를 평가하기 위한 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있다(예를 들면, 상기 인용된 샬라-말라디의 문헌). 게다가, 숙련가라면 소정의 CD58 발현이 본 발명에 따라서 "낮은"지의 여부 또는 본 발명에 따른 CD58 돌연변이(들)가 존재하는지의 여부를 쉽게 평가할 수 있다. 추가로, 숙련가라면 소정의 CD58 발현이 본 발명에 따라서 "낮음"으로 고려되는 경우와 비교하여, 또는 본 발명에 따른 CD58 돌연변이(들)가 존재하는 것으로 고려되는 경우와 비교하여 적합한 대조군을 쉽게 선택할 것이다. 이와 관련하여, 숙련가라면, 예를 들면, 상기 인용된 샬라-말라디의 문헌에 의존할 수 있다.
본 발명에 있어서, "CD58의 낮은 발현"은 CD58이, 특별히 적합한 대조군과 비교하여 실질적으로 더 낮은 수준에서 발현됨을 의미한다. 일반적으로, "CD58의 낮은 발현"은 본 발명에 따라서 CD58 발현이 본 발명에 따른 반응자[즉, 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 환자; "본원에서 정의된 환자"]에서의 CD58 발현 만큼 낮고/낮거나(예를 들어 ± 10% 이하, ± 7.5% 이하, ± 5% 이하, ± 3% 이하, ± 2% 이하, ± 1% 이하, 또는 심지어 ± 0%), 본 발명에 따른 비-반응자[즉, 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하지 않으면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 환자; "본원에서 정의된 비-환자"]에서의 CD58의 발현에 비해 더 낮음을 의미한다. 숙련가라면 이와 관련하여 CD58 발현이 "낮은" 경우를 쉽게 평가하고 적합한 대조군을 적용할 수 있다. 예를 들면 이와 관련된 대조군은 통상의 DLBCL 모집단, 더욱 특별히 본 발명에 따라서 분류된 환자의 하위그룹에 속하는 것으로 분류되지 않은 DLBCL 환자("본원에서 정의된 비-환자")일 수 있다. "CD58의 낮은 발현"은 대조군, 예를 들어 상기 언급된 대조군 사이의 중간 CD58 발현에 비해 더 낮은 CD58 발현일 수 있다. 예를 들면, "CD58의 낮은 발현" 및 CD58 발현의 "더 낮은 수준"은, 각각 본 발명에 따라서, 관찰된 GOYA 환자 사이의 중간 CD58 발현에 비해 더 낮은 CD58 발현일 수 있다.
CD58 (유전자) 발현의 유닛으로서, 정규화된 RPKM(Reads Per Kilobase Million)인 유닛 log2(nRPKM)가 사용될 수 있다. GOYA 환자 사이의 이러한 유닛을 사용한 중간 CD58 발현은 대략 5.3이다. 따라서, "CD58의 낮은 발현" 및 CD58 발현의 "더 낮은 수준"은, 개별적으로 본 발명에 따라서, 유닛 log2(nRPKM) 5.3에 상응하는 대조(군) 환자(들)(상기 참조)에서의 CD58 발현(대조(군) 환자(들)에서의 중간 CD58 발현)에 비해 더 낮은 CD58 발현일 수 있다. 달리 말하면, 본 발명에 따라서 치료되는 환자에서의 CD58 발현은 5.3의 유닛 log2(nRPKM)에 상응하는 대조(군) 환자(들)에서의 CD58 발현에 비해 실질적으로 더 낮을 수 있다. 즉, 본 발명에 따라서 치료되는 환자에서의 CD58 발현은 ≤ 5.2, ≤ 5.1, ≤ 5.0, ≤ 4.5, ≤ 4.0, ≤ 3.5, ≤ 3.0, ≤ 2.5 또는 ≤ 2.0의 유닛 log2(nRPKM)에 상응하는 CD58 발현일 수 있다.
상기 언급된 바와 같이, CD58은 종양 세포 및 B-세포의 표면 상에서 발현된다. 따라서, 하나의 특별한 양태에서, "CD58의 낮은 발현" 및 CD58 발현의 "낮은 수준"은, 개별적으로 본 발명에 따라서, CD58이 통상의 DLBCL 종양 세포 및/또는 통상의 DLBCL B-세포 상에서의 CD58 발현에 비해 실질적으로 더 낮은 수준으로 종양 세포 및/또는 B-세포 상에서 발현됨을 의미한다. 이와 관련하여 "통상의 DLBCL"은, 예를 들면, 종양 세포 및 B-세포가, 개별적으로, 본 발명에 따른 비-반응자, 바람직하게는 DLBCL 종양 세포 및 DLBCL B-세포로부터 유래되고, 개별적으로, 본원에서 정의된 환자로서 분류되지 않은 DLBCL 환자로부터 유래됨을 의미한다.
예를 들면, "CD58의 낮은 발현" 및 CD58 발현의 (실질적으로) "낮은 수준"은, 개별적으로 본 발명에 따라서, CD58이 특별히 적합한 대조군(예를 들어 통상의 DLBCL 환자/모집단; "본원에서 정의된 비-환자")에서의 CD58 발현과 비교하여 적어도 10% 미만, 적어도 20% 미만, 적어도 30% 미만, 적어도 40% 미만, 적어도 50% 미만, 적어도 75% 미만, 또는 적어도 100% 미만인 수준으로 발현됨을 의미한다. 이는 유전자 발현 및 단백질 발현 둘 다에 적용된다.
돌연변이, 특별히 CD58 돌연변이는, 예를 들면, 파운데이션원(등록상표) 헴(FOH) 패널(panel)을 사용함으로써 식별될 수 있다[예를 들면, 헤(He)의 문헌 "Blood 127(24), 2017, 3004-14" 참조; 또한 첨부된 실시예 참조].
본원에서 정의된 환자에서 존재할 수 있는(검출될 수 있는) CD58에서의 유전적 돌연변이의 예는 짧은-변이체 돌연변이 및/또는 유전자 복제수(copy-number) 변이체이다.
숙련가라면 본 발명에 따라서 CD58 발현 또는 CD58 돌연변이(들)를 평가/검출할 경우 사용되는 적절한 샘플을 쉽게 선택할 수 있다(시험 샘플로서 또는 대조 샘플로서).
낮은 CD58 발현이 존재하는지의 여부를 평가/검출하기 위해 본 발명에 있어서 이용되는 샘플(시험 샘플로서 또는 대조 샘플로서)의 특별한 예는 (CD58-발현) 종양의 샘플(예를 들어 생검) 및/또는 (CD58-발현) B-세포를 함유하는 샘플(예를 들어 생검)이다.
CD58 돌연변이(들)가 존재하는지의 여부를 평가/검출하기 위해 본 발명에 있어서 이용되는 샘플(시험 샘플로서 또는 대조 샘플로서)의 특별한 예는 DNA 샘플이다.
본 발명의 하나의 양태/실시태양(양태/실시태양 D)에서, 본원에서 정의된 환자(오비누투주맙에 의해 치료되는 환자)는 강한-GCB DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자이다.
본 발명에 따라서, 강한-GCB DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자는 유전자 TNFRSF13B, LIMD1, IRF4, CREB3L2, PIM2, CYB5R2, RAB7L1, 및 CCDC50(ABC DLBCL에서 과발현된 유전자); 및 MME, SERPINA9, ASB13, MAML3, ITPKB, MYBL1, 및 S1PR2 (GCB DLBCL에서 과발현된 유전자)중 하나 이상(바람직하게는 모두)(를 포함하는 유전자의 집합)의 (가중된) 발현을 결정함으로써 식별될 수 있다.
더욱 특별히, 강한-GCB DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자는 유전자 TNFRSF13B, LIMD1, IRF4, CREB3L2, PIM2, CYB5R2, RAB7L1, 및 CCDC50; 및 MME, SERPINA9, ASB13, MAML3, ITPKB, MYBL1, 및 S1PR2중 중 하나 이상, 바람직하게는 모두; 및, 임의적으로, 유전자 R3HDM1, WDR55, ISY1, UBXN4, 및 TRIM56(항존 유전자)중 하나 이상, 바람직하게는 모두(를 포함하는 유전자의 집합)가 특정하게 (가중되어) 발현하는 종양을 갖는 환자로서 정의될 수 있다.
본 발명의 이러한 양태/실시태양과 관련하여 가중된 유전자 발현이 평가되는 것으로 특별히 구상된다.
특별히, 본원에 개시된 유전자의 집합의 가중된 발현으로부터 생성된 선형 예측자 스코어(LPS)가 특정 컷오프 미만, 즉 실질적으로 보통 GCB DLBCL에 할당되는 LPS 컷오프 미만(∼ <1900)인 경우, GCB DLBCL은 "강한-GCB DLBCL"로 여겨진다. 유사하게, 본원에 개시된 유전자의 집합의 가중된 발현이 특정한 컷오프 결과 미만의 LPS, 즉 실질적으로 보통 GCB DLBCL에 할당되는 LPS 컷오프(∼ <1900) 미만의 LPS로부터 생성되는 본원에 개시된 유전자 세트의 가중된 발현에 상응할 경우, GCB DLBCL은 "강한-GCB DLBCL"로 여겨진다. 본 발명에 따라서, 특별한 컷오프, 즉 적용될 수 있는 LPS를 생성하는, 즉 "강한-GCB DLBCL"을 정의하는 컷오프의 예는, (약) ≤ 1200, (약) ≤ 1141, (약) ≤ 1100, (약) ≤ 756, (약) ≤ 750, (약) ≤ 749, (약) ≤ 745, (약) ≤ 725 또는 (약) ≤ 699의 컷오프이다. 바람직한 컷오프는 (약) ≤ 750, (약) ≤ 749 및 (약)≤ 725이다. 특별히 바람직한 컷오프는 (약) ≤ 750 및 (약) ≤ 725이다.
본 발명에 따라서, 즉 강한-GCB DLBCL의 결정/식별/진단에 따라서 이용되는 유전자의 집합은, 추가로 하나 이상의 항존 유전자, 예를 들면 항존 유전자 R3HDM1, WDR55, ISY1, UBXN4, 및 TRIM56중 하나 이상(바람직하게는 모두)을 포함할 수 있다. 이용되는 나머지 유전자중 하나 이상의 발현은 하나 이상의 항존 유전자(들), 예를 들어 본원에 정의된 바와 같은 항존 유전자(들)의 발현으로 정규화될 수 있다. 숙련가라면 하나 이상의 이들 다른 유전자(및 본 발명에 따라서 이용되는 유전자 세트에 포함될 수 있는 하나 이상의 다른 유전자(들))의 발현을 하나 이상의 항존 유전자에 근거하여, 예를 들면 상기 언급된 하나 이상의 항존 유전자에 근거하여 쉽게 정규화할 수 있다. 예를 들면, 적어도 1, 2, 3, 4 또는 5개의 (이들) 항존 유전자는 이와 관련하여 이용될 수 있다. 개별적 안내를 위해, 숙련가라면, 예를 들면, 상기 인용된 스코트의 2014년 및 2015년 문헌에 의존할 수 있다.
원칙적으로, 상기 언급된 유전자 세트중 단지 하위집합만을 포함하는 유전자 세트가 또한 본 발명에 따라서 이용될 수 있다. 예를 들면, 이러한 하위집합은 상기 언급된 유전자의 전체 집합중 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 또는 19개를 포함할 수 있다. 그러나, 더 많은 이러한 유전자가 평가될수록 더 바람직하다. 본 발명에 따라서 이용될 수 있는 이러한 유전자의 하위집합의 예는 유전자 TNFRSF13B, LIMD1, IRF4, CREB3L2, PIM2, CYB5R2, RAB7L1, 및 CCDC50중 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개, 유전자 MME, SERPINA9, ASB13, MAML3, ITPKB, MYBL1, 및 S1PR2중 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개, 또는 이들 2가지 유전자 세트의 유전자중 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 또는 14개를 포함하는 유전자의 하위집합이다. 원칙적으로, 더 많은 수의 유전자가 바람직하다.
본 발명에 있어서, 본원에 언급된 특별한 유전자 세트 또는 유전자 하위집합 뿐만 아니라; 하나 이상의 추가의 유전자(예를 들어 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 5개 이상, 6개 이상, 7개 이상, 8개 이상, 9개 이상, 10개 이상, 20개 이상, 30개 이상, 40개 이상, 50개 이상, 60개 이상, 70개 이상, 80개 이상, 90개 이상, 100개 이상, 150개 이상, 170개 이상, 또는 180개 이상의 추가의 유전자)를 포함하는 유전자의 (하위)집합이 본 발명에 따라서 평가될 수 있는 것으로 또한 구상된다. 이러한/이들 추가의 유전자(들)는, 예를 들면, GCB 및 ABC (및 분류되지 않은) DLBCL을 이들의 (가중된) 발현에 근거하여 분리/구별하는 것으로 알려진 (약 180개) 유전자중 하나 이상일 수 있다[특별히, 렌츠(Lenz)의 문헌 "N. Engl. J. Med. 359 (2), 2008, 2313-23" 및 또한 가이스(Geiss)의 문헌 "Nature Biotechnology 26 (3), 2008, 317-25"을 참조한다].
예를 들면, 본 발명에 따라서 평가되는 유전자 세트는, 상기 언급된 임의의 특별한 유전자 세트 또는 유전자 하위집합의 (적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 또는 19개의) 유전자, 및 예를 들면 GCB 및 ABC (및 분류되지 않은) DLBCL을 이들의 (가중된) 발현에 근거하여 분리/구별하는 것으로 알려진 (약 180개의) 유전자중 하나 이상의 추가의 유전자(예를 들어 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 5개 이상, 6개 이상, 7개 이상, 8개 이상, 9개 이상, 10개 이상, 20개 이상, 30개 이상, 40개 이상, 50개 이상, 60개 이상, 70개 이상, 80개 이상, 90개 이상, 100개 이상, 150개 이상, 170개 이상, 또는 180개 이상의 추가의 유전자)를 포함할 수 있다(상기 인용된 렌츠 및 가이스의 문헌 참조).
예를 들면, 하나(또는 그 이상)의 다른 유전자(들)는 상기 기재된 유전자 세트 또는 하위집합중 하나에, 예를 들어 상기 언급된 20, 15, 8 또는 7개 유전자의 패널중 하나에 부가될 수 있거나, 또는 상기 기재된 유전자 세트 또는 하위집합중 하나, 예를 들어 20, 15, 8 또는 7개 유전자의 패널의 유전자들중 하나(또는 그 이상)은 하나(또는 그 이상)의 다른 유전자(들)에 의해 대체될 수 있다.
양태/실시태양 D에 따라 이용되는 또 다른 유전자의 비제한적이나 바람직한 일예는 BLC2 유전자이다.
본 발명에 따라서 상기 언급된 유전자의 발현, 특별히 가중된 발현을 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법의 일례는 나노스트링(나노스트링 테크놀로지스 인코포레이티드, 미국 워싱턴주 시애틀 소재; 또한 상기 인용된 렌츠의 문헌 및 상기 인용된 가이스의 문헌 참조)에 의해 제공된다. 상기-언급된 유전자의 (가중된) 발현이 결정될 수 있는 비제한적인 특별한 예는 림프종 하위유형 결정 시험만을 사용하는 나노스트링 리서치[NanoString Research Use Only Lymphoma Subtyping Test(LST)] 검사이다. 또 다른 예는 트루세크(등록상표) RNA 도구[일루미나(등록상표) 인코포레이티드]이다. 추가의 예는 라이트(Wright)의 문헌[PNAS 100 (17), 2003, 9991-6]에 기재되어 있다. 또한 상기 인용된 라이트의 문헌에 (가중된) 유전자 발현 분석을 위한 임의의 적합한 패널에 대한 일반적인 적용성이 기재되어 있다.
(가중된) 발현을 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법의 언급된 예에 따라서, 강한-GCB DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자는 또한 보통 GCB DLBCL에 할당되는 LPS(∼ <1900; 예를 들면 개별 컷오프에 대해 상기 참조) 미만의 LPS를 생성하는 (가중된) 유전자 발현을 갖는 종양을 앓는 환자로서 정의될 수 있고, 여기서 LPS는 나노스트링 LST, 예를 들어 LST만을 사용하는 나노스트링 리서치(나노스트링 테크놀로지스 인코포레이티드, 미국 워싱턴주 시애틀 소재)로부터, 나노스트링 패널에서 유전자의 (가중된) 유전자 발현으로서 유래된다[또는 이러한 (가중된) 유전자 발현에 상응하는 (가중된) 유전자 발현을 갖는 종양]. 예를 들면, 상기 언급된 특별한 유전자는 나노스트링 패널에 존재할 수 있다.
강한-GCB DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자는 또한 보통 GCB DLBCL에 할당되는 LPS(∼ <1900; 예를 들면 개별 컷오프에 대해 상기 참조) 미만의 LPS를 갖는/생성하는 (가중된) 유전자 발현을 하는 종양을 갖는 환자로서 정의될 수 있고, 여기서 LPS는 (가중된) 유전자-발현 프로파일링에 의해(예를 들면 상기 기재된 바와 같은 나노스트링 LST를 사용함으로써) COO 분류로부터 생성된다[또는 이러한 (가중된) 유전자 발현에 상응하는 (가중된) 유전자 발현을 갖는 종양].
원칙적으로, COO 분류(예를 들어 강한-, 분류되지 않은- 및 약한-GCB DCBCL로)는, 유전자-발현 프로파일링, 특별히 가중된 유전자-발현 프로파일링[예를 들어나노스트링 LST(예를 들면, LST만을 사용하는 나노스트링 리서치)(나노스트링 테크놀로지스 인코포레이티드, 미국 워싱턴주 시애틀 소재) 사용]에 근거할 수 있다.
원칙적으로, "LPS"의 의미는 당분야에 공지되어 있고, 따라서 숙련가에 의해 본 발명과 관련하여 이해된다. 특별히, 본 발명에 따른 LPS는 연속적 변수이다(예를 들어 나노스트링 LST에 존재할 수 있는 본원에 언급된 유전자의 유전자 발현을 위한 가중된 평균). GOYA에서 평가된 환자의 합에서, LPS는 -1138 내지 4504의 범위이다. 정상적으로, 상기 언급된 바와 같이, LPS는 환자를 COO 하위그룹인 GCB DLBCL, ABC DLBCL, 및 분류되지 않은 DLBCL로 분류하기 위해 사용된다(상기 내용 및 상기 인용된 스코트의 2014년 및 2015년 문헌 참조). 디폴트(default) COO 알고리즘은 GCB 또는 ABC인 경향에 대하여 ≥ 90% 컷오프에 기초한 GCB/ABC 분류(분류되지 않은 것은 완충제로서 작용함)에 의한 베이즈의 방법(bayesian approach)을 사용한다.
더욱 특별히, 본 발명에 따른 LPS는 유전자 발현 프로파일링에 이용되는 유전자[예를 들어 유전자의 언급된 (하위)집합에 포함된 상기 언급된 유전자]의 발현의 가중된 합인 것으로 구상된다. 유전자 발현의 가중합은 하기 수학식 I에 따라 계산될 수 있다:
[수학식 I]
LPS(X) = ΣjαjXj
상기 식에서,
X는 각각의 샘플을 나타내고,
Xj는 유전자 j에 대한 유전자 발현이고,
αj는 유전자 j에 대한 계수이다[또한 상기 인용된 라이트의 문헌; 특별히, "유전자 발현 데이터(Gene Expression Data)" 및 "DLBCL 하위그룹 예측자의 공식화(Formulation of the DLBCL Subgroup Predictor)" 섹션 참조; 본원에 참고로 인용됨].
일반적으로, 당분야의 숙련가는 유전자의 발현, 특별히 유전자의 가중된 발현을 본 발명의 교시에 따라서 결정할 수 있다. 개별적 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면 상기 인용된 라이트의 문헌; 특별히, "유전자 발현 데이터" 및 "DLBCL 하위그룹 예측자의 공식화" 섹션에 기재되어 있고; 이는 본원에 참고로 인용된다. 상기 인용된 라이트의 문헌은, 예를 들면, 가중된 유전자 발현 알고리즘이 어떻게 사용될 수 있으며 이것이 유전자 발현 플랫폼, 예컨대 나노스트링 LST 등의 전반에 어떻게 전달될 수 있는지에 대한 개요를 서술한다. 비교가능한 안내가 또한 상기 인용된 렌츠의 문헌에 제공된다.
본 발명에 따른, 특별히 상기 기재된 바와 같은 강한-GCB DLBCL 분류와 관련하여, 다음 사항이 추가로 고려될 수 있다:
다변량 콕스(Cox) 회귀 및(/또는) 엘라스틱 넷 페널티 회귀(elastic net penalized regression)(알파 = 0.5)는 바이오마커 치료 효과를 평가하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들면 나노스트링 LST 및 개별 LPS에 기초하여, 치료 효과를 위한 최적 컷오프를 식별하기 위한 모의실험은 교차 검증 및(/또는) 부트스트래핑(bootstrapping)을 사용하여 수행될 수 있다. 다중 시험 조정은 오발견 확률(FDR)을 추정함으로써, 예를 들면 벤자미니-호크버그(Benjamini-Hochberg) 절차를 사용하여 실행될 수 있다(예를 들어 유의성 < 5% FDR). 경로 강화(pathway enrichment) 분석은 유전자-집합 강화에 의해, 예를 들어 MSigDB 보증마크에 의해 정의된 유전자 세트 및(/또는) 준비된 FL 체세포 돌연변이 보증마크 유전자 세트를 사용함으로써 수행될 수 있다. 특별히 LPS 컷오프(예를 들어 본원 다른 곳에 기재된 바와 같음)는 모의실험 분석(들), 바람직하게는 다변량 모의실험 분석(들)에서 결정될 수 있다. LPS 컷오프(예를 들어 본원 다른 곳에 기재된 바와 같음)의 강인성은 부트스트랩 모의실험에 의해 제시될 수 있다. 더욱이, 예를 들어 나노스트링 LST로부터의 LPS의 특정한 가중된 알고리즘을 사용하는 대신에, 예를 들면, 또 다른 발현 분석 패널[예를 들어 트루세크(등록상표) RNA 도구(일루미나(등록상표) 인코포레이티드)]의 결과에 대한 주요 성분 분석으로부터의 제1 주요 성분은, 예를 들면 상기-언급된 유전자(예를 들어, GCB 및 ABC를 분리하는 것으로 공지된 ∼180 유전자중 하나 이상)를 유전자 발현에 의해 평가하여 적용될 수 있다. 또한 본 발명에 따라서 (나노스트링 LST-유래된) LPS 및 제1 주요 성분 사이의 매우 높은 상관관계가 존재하는 것으로 제시되었다.
본 발명의 하나의 양태/실시태양(양태/실시태양 E)에서, 본원에서 정의된 환자(오비누투주맙에 의해 치료되는 환자)는 BCL2 전좌를 갖고/갖거나 BCL2 발현이 높은 환자이다. 바람직하게는, BCL2 발현이 높은 BCL2 전좌된 환자는 이러한 양태/실시태양과 관련하여 구상된다.
BCL2[또한 상기 인용된 장의 문헌; 상기 인용된 푼누스의 문헌; 이크발(Iqbal)의 문헌 "Clin Cancer Res 17(24), 2011, 7785-95"; 이크발의 문헌 "JCO 24(6), 2006, 961-8"; 후(Hu)의 문헌 "Blood 121(20), 2013, 4021-31"; 존슨(Johnson)의 문헌 "JCO 30(28), 2012, 3452-67"; 그린(Green)의 문헌 "JCO 30(28), 2012, 3460-67" 참조]는 과발현될 경우 미토콘드리아의 세포자멸 경로를 방해하는 항-세포자멸 단백질인 것으로 공지되어 있다. BCL2는 DLBCL 환자의 종양에서 발현되는 것으로 공지되어 있다. BCL2를 인코딩하는 뉴클레오티드 서열 및 BCL2, 특별히 호모 사피엔스(인간) BCL2의 아미노산 서열은 당분야에 공지되어 있다. 이들은, 예를 들면, 다음의 인터넷 주소(URL)에 의해 다운로드될 수 있다:
Figure pct00002
. BCL2, 특별히 호모 사피엔스(인간) BCL2를 인코딩하는 뉴클레오티드 서열은, 예를 들면, NCBI 등록 번호: XM_017025917.2(변이체 X3); XM_011526135.3(변이체 X2); XR_935248.3(변이체 X1); NM_000657.2(변이체 베타); NM_000633.2(변이체 알파)를 통해 이용가능하다. BCL2, 특별히 호모 사피엔스(인간) BCL2의 아미노산 서열은, 예를 들면, NCBI 등록 번호: XP_016881406.1(동형체 X2); XP_011524437.1(동형체 X1); NP_000648.2(동형체 베타); NP_000624.2(동형체 알파)를 통해 이용가능하다. 호모 사피엔스(인간) BCL2를 인코딩하는 뉴클레오티드 서열의 일예는 서열 번호 13에 제시된다. 호모 사피엔스(인간) BCL2의 아미노산 서열의 일예는 서열 번호 14에 제시된다.
"발현"과 관련하여 상기 본원에 일반적으로 인용되므로, (1차) mRNA의 측정/검출 및 단백질의 측정/검출은 필요한 부분만 약간 수정하여 여기서 적용된다.
일반적으로, BCL2 발현 및 BCL2 전좌를 측정/검출하기 위한 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 상기 인용된 장의 문헌 및 상기 인용된 푼누스의 문헌에 기재되어 있다. 게다가, 숙련가라면 소정의 BCL2 발현이 본 발명에 따라서 "높은"지의 여부 또는 본 발명에 따른 BCL2 전좌(들)가 존재하는지의 여부를 쉽게 평가할 수 있다. 더욱이, 숙련가라면 소정의 BCL2 발현이 본 발명에 따라서 "더 높음"으로 고려되는 경우와 비교하여, 또는 본 발명에 따른 BCL2 전좌가 존재하는 것으로 고려되는 경우와 비교하여 적절한 대조군을 쉽게 선택할 수 있다. 이와 관련하여, 숙련가라면, 예를 들면, 상기 인용된 장의 문헌 및 상기 인용된 푼누스의 문헌에 의존할 수 있다
BCL2 발현은, 예를 들면, 벤타나(Ventana) 면역조직화학(IHC) 검사에 의해, 예를 들면 벤타나 연구용 IHC 검사(BCL2 항체 클론 124)(공급업체의 매뉴얼 참조)에 의해 평가될 수 있다. 예를 들면, 높은 BCL2 발현은 이와 관련하여 ≥ 50% 종양 세포에서 중간 또는 강한 염색으로서 정의될 수 있다(추가의 세부사항을 위해 하기 참조).
BCL2 단백질 발현/BCL2 단백질의 출현은 또한 상기 인용된 푼누스의 문헌, 상기 인용된 이크발의 2011년 및 2006년 문헌, 상기 인용된 후의 문헌, 상기 인용된 존슨의 문헌, 상기 인용된 그린의 문헌에 기재된 바와 같이 측정/검출될 수 있다. (1차) mRNA의 유전자 발현/출현, 특별히 (1차) BCL2 mRNA의 특별히 BCL2 유전자 발현/출현은, 예를 들면, 상기 인용된 장의 문헌에 기재된 바와 같이, 또는 트루세크(등록상표) RNA 서열분석[일루미나(등록상표) 인코포레이티드; 판매업체의 매뉴얼에 따름]을 사용함으로써 평가될 수 있다.
본 발명에 있어서, "BCL2의 높은 발현"은 BCL2가, 특별히 적합한 대조군에 비하여, 실질적으로 더 높은 수준으로 발현됨을 의미한다. 일반적으로, 본 발명에 따라서 "BCL2의 높은 발현"은 BCL2 발현이 본 발명에 따른 반응자[즉, 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 환자; "본원에서 정의된 환자")에서의 BCL2 발현 만큼 높고/높거나(예를 들어 ± 10% 이하, ± 7.5% 이하, ± 5% 이하, ± 3% 이하, ± 2% 이하, ± 1 % 이하 또는 심지어 ± 0%), 본 발명에 따른 비-반응자[즉, 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하지 않으면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 환자; "본원에서 정의된 비-환자"]에서의 BCL2의 발현에 비해 더 높음을 의미한다. 숙련가라면 BCL2 발현이 이와 관련하여 "높은" 경우를 쉽게 평가하고 적합한 대조군을 적용할 수 있다. 예를 들면, 이와 관련된 대조군은 통상의 DLBCL 모집단, 더욱 특별히 본 발명에 따라서 분류된 환자의 하위그룹에 속하는 것으로 분류되지 않은 DLBCL 환자("본원에서 정의된 비-환자")일 수 있다. "BCL2의 높은 발현"은 대조군, 예를 들어 상기 언급된 대조군 사이의 중간 BCL2 발현에 비해 더 높은 BCL2 발현일 수 있다. 예를 들면, "BCL2의 높은 발현" 및 BCL2 발현의 "더 높은 수준"은, 개별적으로 본 발명에 따라서, GOYA에서 평가된 환자 사이의 중간 BCL2 발현에 비해 더 높은 BCL2 발현일 수 있다.
본 발명에 있어서 BCL2 발현이 "높은"지의 여부가 고려될 수 있는 기초하에서 대조군의 일예는 정상적인, 즉 비-종양 조직, 더욱 특별히 정상적인, 즉 비-종양 림프 조직이다. 조직은 DLBCL 환자로부터 유래될 수 있다. 예를 들면, 치료되는 DLBCL 환자로부터 유래될 수 있다. 그러나, 원칙적으로, 조직은 또한 정상적인/건강한 피험체의 조직일 수 있다.
본 발명에 있어서 BCL2 발현이 "높은"지의 여부가 고려될 수 있는 기초하에서 대조군의 바람직한 일예는 본 발명에 따른 비-반응자("본원에서 정의된 비-환자")로부터의 종양 조직, 더욱 특별히 림프 종양 조직이다. 조직이 비-반응성 DLBCL 환자(DLBCL 환자인 "본원에서 정의된 비-환자")로부터 유래되는 것이 바람직하다.
BCL2 발현은, 종양 세포의 ≥ 30%, ≥ 40%, ≥ 50% 또는 ≥ 60%가 BCL2를 발현하는 경우(예를 들면 IHC 검사에서 BCL2 염색을 나타내는 경우), 특별히 중간 내지 강한 BCL2 발현을 나타내는 경우(예를 들면 IHC 검사에서 중간 내지 강한 BCL2 염색을 나타내는 경우) "높은" 것으로 고려된다.
BCL2 발현, 특별히 "높은" BCL2 발현은 BCL2를 발현하는 종양 세포의 백분율 및 이들 세포에서의 BCL2 발현의 강도 둘 다를 포함하는 것이 바람직하다.
소정의 BCL2 발현이 본 발명에 따라서 "높은"지의 여부를 평가할 때, 숙련가라면 또한 상기 인용된 이크발의 2011년 및 2006년 문헌, 상기 인용된 후의 문헌, 상기 인용된 존슨의 문헌, 및 상기 인용된 그린의 문헌에 의존할 수 있을 것이다.
더욱 일반적인 "BCL2의 높은 발현" 및 BCL2 발현의 (실질적으로) "더 높은 수준"은, 개별적으로 본 발명에 따라서, 특별히 적합한 대조군(예를 들어 통상의 DLBCL 환자/모집단; "본원에서 정의된 비-환자")에서의 BCL2 발현과 비교하여, BCL2가 적어도 10% 더 높은, 적어도 20% 더 높은, 적어도 30% 더 높은, 적어도 40% 더 높은, 적어도 50% 더 높은, 적어도 75% 더 높은, 또는 적어도 100% 더 높은 수준으로 발현됨을 의미한다. 이는 유전자 발현 및 단백질 발현 둘 다에 적용된다.
"BCL2 전좌(들)"의 의미는 당분야에 잘 공지되어 있다. 전형적으로, "BCL2 전좌"는 BCL2 및 IgH(염색체 14 및 18 포함) 사이의 유전자 융합이다. BCL2 전좌(들)는, 예를 들면, 상기 인용된 장의 문헌에 기재되어 있다. BCL2 전좌는, 예를 들면, BCL2 이중 색 분리(Dual Color Break Apart) 기술[바이시스(Vysis), 애봇 몰레큘라(Abbott Molecular)]을 사용함으로써, 특별히 바이시스 LSI 이중 색 분리 FISH 프로브를 사용함으로써[예를 들어 5%(전형적으로 사용됨) 또는 50%에서의 (FISH) 컷오프를 가짐]; 공급업체의 매뉴얼에 따라 평가/검출될 수 있다. BCL2 전좌는 또한 파운데이션 메디슨 차세대 서열분석 검사, 파운데이션원(등록상표) 헴에 의해 평가/검출될 수 있다(공급업체의 매뉴얼에 따라; 또한 상기 인용된 헤의 문헌 참조). BCL2 전좌를 평가/검출하기 위한 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 상기 인용된 장의 문헌 및 상기 인용된 헤의 문헌에 기재되어 있다.
숙련가라면 BCL2 전좌(들) 또는 BCL2 발현을 평가/검출할 경우 사용되는 적절한 샘플을 본 발명에 따라서 쉽게 선택할 수 있다(시험 샘플로서 또는 대조 샘플로서).
높은 BCL2 발현이 존재하는지의 여부를 평가/검출하기 위해 본 발명에 있어서 이용되는 샘플(시험 샘플로서 또는 대조 샘플로서)의 특별한 예는 (BCL2-발현) 종양의 샘플(예를 들어 생검)이다.
BCL2 전좌(들)가 존재하는지의 여부를 평가/검출하기 위해 본 발명에 있어서 이용되는 샘플(시험 샘플로서 또는 대조 샘플로서)의 특별한 예는 DNA 샘플이다.
본 발명의 하나의 양태/실시태양(양태/실시태양 F)에서, 본원에서 정의된 환자(오비누투주맙에 의해 치료되는 환자)는 상기 양태/실시태양 A, B, C, D 및 E에 언급된 환자 정의들중 임의의 2가지, 임의의 3가지, 임의의 4가지 또는 임의의 5가지 정의의 조합/교차에 의해 정의된다. 즉, 환자는 양태/실시태양 A 및 B; A 및 C; A 및 D; A 및 E; B 및 C; B 및 D, B 및 E; C 및 D; C 및 E; A, B 및 C; A, C 및 D; A, D 및 E; A, B 및 D; A, B 및 E; A, C 및 E; B, C 및 D; B, C 및 E; B, D 및 E; C, D 및 E; A, B, C 및 D; A, C, D 및 E; B, C, D 및 E; 및 A, B, D 및 E에 언급된 환자 정의의 조합/교차에 의해 정의될 수 있다. 양태/실시태양 D 및 E에 따른 정의를 포함하는 조합/교차가 바람직하다.
본 발명의 하나의 양태/실시태양(양태/실시태양 G)에서, 본원에서 정의된 환자(오비누투주맙에 의해 치료되는 환자)는 상기 양태/실시태양 D 및 E(또는 A, D 및 E)에 언급된 환자 정의의 조합/교차에 의해 정의된다. 즉, 이러한 양태/실시태양에 따른 본원에서 정의된 환자는 (i) 강한-GCB DLBCL을 앓고/이로부터 고통받고; (ii) BCL2 전좌를 갖고/갖거나 BCL2 발현이 높은 환자이다. 환자 정의의 이러한 조합/교차는 바람직한 본원에서 정의된 환자를 정의한다.
일반적으로, 본 발명과 관련하여 사용될 경우, "대조군"의 비제한적인 예는 바람직하게는 "비-반응자" 대조군, 예를 들면 본원에서 정의된 특별한 DLBCL로부터 고통받지 않고("본원에서 정의된 비-환자"), 본 발명에 따라서 리툭시맙(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)과 비교하여 오비누투주맙(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 유리하게 반응하지 않는 것으로 알려진 1명 이상의 환자로부터 수득된 샘플/세포/조직이다. "비-반응자" 대조군에 대한 또 다른 예는, 생체외 시험에서, 리툭시맙(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)과 비교하여 오비누투주맙(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 개선된 반응을 나타내지 않는 세포주/샘플/세포/조직이다. "대조군"의 또 다른 비제한적인 예는 "내부 표준", 예를 들면 정제되거나 합성적으로 생산된 단백질, 펩티드, DNA 및/또는 RNA, 또는 이의 혼합물이고, 여기서 단백질/펩티드/DNA/RNA의 각각의 양은 본원에 기재된 "비-반응자" 대조군을 사용하여 측정된다.
원칙적으로, 본 발명에 있어서 치료되는 환자는 DLBCL 환자인 것으로 구상된다. 달리 말하면, 환자는 DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자이다. 따라서, 상기 양태/실시태양 A, B, C, D, E, F, G중 임의의 양태/실시태양과 관련하여 정의된 환자는, 개별적으로, DLBCL 환자 및 DLBCL을 앓는/이로부터 고통받는 환자인 것으로 특별히 구상된다. 그러나, 예를 들면 본원에 정의된 바와 같은 환자, 특별히 상기 양태/실시태양 A 내지 G중 하나(또는 그 이상)에서 정의된 바와 같은 환자인 것으로 결정/식별/진단되기 이전(또는 이후)에 소정의 환자는 DLBCL 환자인 것으로 반드시 진단될 필요는 없다. 그러나, 본 발명에 따라서 치료되는 환자는 제1 단계에서 DLBCL 환자, 또는 적어도 림프종 환자인 것으로 진단되고, 제2 단계에서 본원에서 정의된 환자, 특별히 상기 양태/실시태양 A 내지 G중 하나(또는 그 이상)에서 정의된 바와 같은 환자인 것으로 결정/식별/진단되는 것이 바람직하다. 원칙적으로, 본 발명에 따라서, 소정의 환자는 제1 단계에서 또한 본원에서 정의된 환자인 것으로 결정/식별/진단되고, 제2 단계에서 DLBCL 환자, 또는 적어도 림프종 환자인 것으로 진단될 수 있다. 그러나, 후자의 선택사항은 덜 바람직하고, 언급된 바와 같이, 치료되는 환자가 (DLBC)L 환자인지의 여부를 진단하는 (외부 또는 후속적) 단계가 생략될 수도 있다.
소정의 환자가 본 발명에 따라서 치료되어야 하는지의 여부를 담당 의사가 선택하는 방식의 비제한적인 예는 아래에 제공된다:
예를 들면 림프종의 임상적 의심을 증가시키는 이상성(예를 들어 림프절 비대)을 갖는 환자로부터, (종양) 샘플(예를 들어 (종양) 생검)이 채취될 수 있다. (종양) 샘플은 (DLBC)L 양성으로서 진단될 수 있다(예를 들어 병리학자에 의해). 이는 상기 언급된 2개의 단계중 하나일 수 있다. 언급된 바와 같이, 이러한 단계는 생략될 수 있다. (종양) 샘플(예를 들어 (종양) 조직/생검)(의 나머지)로부터, 또는 동일하거나 또 다른 환자의 또 다른 (종양) 샘플로부터, 또는 동일하거나 또 다른 환자의 또 다른 종양으로부터, 단백질, RNA(예를 들어 (1차) mRNA) 및/또는 DNA가 추출될 수 있다. 이어서 본원에서 정의된 환자는 결정/식별/진단될 수 있고, 즉 이어서 본 발명에 따른 바이오마커 분석/분석들은 샘플링된 단백질, RNA(예를 들어 (1차) mRNA) 및/또는 DNA에 의해 수행될 수 있다. 예를 들면, 샘플은 가중된 유전자 발현 검사(예를 들어 나노스트링 LST를 사용함으로써)에 의해 분석되어 LPS를 수득하고, CD58에서의 유전적 돌연변이(들) 및/또는 CD58의 낮은 발현에 대해 시험되고/되거나 BCL2 전좌 및/또는 높은 BCL2 발현에 대해 시험된다. 이어서 분석/분석들의 결과는 환자를 본 발명에 따라서 정의된 DLBCL 하위그룹로 분류할 수 있다. 달리 말하면, 분석/분석들의 결과는 이어서 환자가 "본원에서 정의된 환자"인지의 여부를 분류할 수 있다. 이는 상기 언급된 2개의 단계중 나머지 하나일 수 있다(즉 의무적 단계).
바이오마커 분석/분석들의 비제한적인 예는 본 발명에 따라서 하기와 같이 이용될 수 있다: 종양 샘플, 예를 들면 진단용 종양 샘플(예를 들어 조직 생검), 예를 들면 포르말린-고정되고/되거나 파라핀-함침된 샘플을 환자로부터 채취할 수 있다. RNA(또는 단백질 또는 DNA)를 추출하고 유전자 발현을 강한-GCB 분류, CD58 전좌/낮은 발현 및/또는 BCL2 돌연변이(들)/낮은 발현에 대해 분석할 수 있다. DNA를 추출하여 CD58 돌연변이(들)를 평가할 수 있다. 조직 절편, 특별히 종양 조직 절편을 절단하고, 예를 들어 IHC 및/또는 (F)ISH 분석을 위해 함침시킬 수 있다.
언급된 바와 같이, 본 발명에 있어서 본원에서 정의된 환자를 치료하기 위해 오비누투주맙, 또는 오비누투주맙의 작용성 등가물을 사용하는 것으로 구상된다.
오비누투주맙 그 자체는 당분야에 잘 공지되어 있고, 예를 들면, EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호에 기재되어 있다. 오비누투주맙 그 자체에 대한 추가의 세부사항을 위해 하기를 참조한다.
또한 "오비누투주맙의 작용성 등가물"의 의미는 숙련가에게 명백하다. 특별히, 용어 "오비누투주맙의 작용성 등가물"은, 리툭시맙(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 비해 본원에서 정의된 환자를 치료하기 위해 더욱 적합한 항체(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨), 특별히 인간화된 제II형 항-CD20 항체를 지칭한다. 달리 말하면, 이러한 용어는, 본원에서 정의된 환자가 리툭시맙에 의한 치료와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 반응하도록 이러한 환자를 치료할 수 있는 특징 및 작용 방식(MOA: mode of action)을 갖는 항체, 특별히 인간 제II형 항-CD20 항체를 지칭한다. 더욱 특별히, 용어 "오비누투주맙의 작용성 등가물"은 오비누투주맙 그 자체와 동일한 특징 및 생물학적 기능, 특별히 항체가 리툭시맙에 비해 본원에서 정의된 환자를 치료하기에 더욱 적합하도록 만드는, 오비누투주맙 그 자체와 동일한 생물학적 기능을 갖는 항체, 특별히 인간 제II형 항-CD20 항체를 지칭한다.
본 발명에 따라서 오비누투주맙의 등가물(및 오비누투주맙 그 자체)의 가장 관련된 특징 및 MOA의 예는 본원 다른 곳에 정의되어 있다. 이들은 숙련가에 의해 쉽게 결정될 수 있다.
원칙적으로, 본 발명에 있어서 용어 "오비누투주맙의 작용성 등가물"은 또한오비누투주맙의 바이오시밀러(biosimilar)를 포함하는 것으로 구상된다. 특별히, 상기 용어의 의미는 리툭시맙에 비해 본원에서 정의된 환자를 치료하기에 더욱 적합한 오비누투주맙의 임의의 바이오시밀러를 또한 포함하도록 구상된다. 달리 말하면, "오비누투주맙의 작용성 등가물"은 본원에서 정의된 환자가 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 반응하도록 이러한 환자를 치료할 수 있는 오비누투주맙의 바이오시밀러일 수 있다. 일반적으로, "바이오시밀러"의 의미는 당분야에 잘 공지되어 있다. 이와 관련하여, "바이오시밀러"는 본래의 생물 의약품의 거의 동일한 복제품인 생물 의약품인 것으로 알려져 있고, 또한 팔로우-온 생물제제(follow-on biologic) 또는 후속 진입 생물제제(subsequent entry biologic)로서 공지되어 있다. 바이오시밀러는 본래의 "혁신자(innovator)" 제품의 공식적으로 승인된 형태이다. 이와 관련하여, 예를 들면, 유사 생물 의약품에 대한 EMEA 가이드라인(EMEA guidline Similar Biological Medicine Products)(CHMP/437/04 London, 2005)을 참조한다.
본 발명에 있어서, 오비누투주맙, 특별히 오비누투주맙의 작용성 등가물은:
(a) 서열 번호 1에 제시된 중쇄 가변성 영역 및 서열 번호 2에 제시된 경쇄 가변성 영역(이러한 경쇄 가변성 영역은 또한 KV1 경쇄 가변성 영역으로서 공지되어 있고; "KV1"은 뮤린 B-Lyl 단일클론성 항체의 인간화된 경쇄 가변성 영역을 나타냄; EP-B1 제2380910호 참조);
(b) (a)의 중쇄 가변성 영역의 특이성 결정 잔기를 갖는 중쇄 가변성 영역 및 (a)의 경쇄 가변성 영역의 특이성 결정 잔기를 갖는 경쇄 가변성 영역; 또는
(c) 서열 번호 3과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 핵산 서열에 의해 인코딩되는 중쇄 가변성 영역 및 서열 번호 4와 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 핵산 서열에 의해 인코딩되는 경쇄 가변성 영역(더 높은 값이 바람직함)을 포함하는 항체, 특별히 인간화된 제II형 항-CD20 항체인 것으로 구상된다.
본 발명에 있어서 이용되는 오비누투주맙, 특별히 오비누투주맙의 작용성 등가물은 단일클론성 항체, 특별히 단일클론성 인간화된 제II형 항-CD20 항체인 것이 바람직하다.
본 발명에 따라서 이용되는 항체는 제II형 항-CD20 항체, 특별히 인간화된 제II형 항-CD20 단일클론성 항체, 또는, 바람직하게는 당조작된 Fc 영역, 특별히 이후 본원에 정의된 바와 같은 당조작된 Fc 영역을 포함하는 항체인 것이 특별히 바람직하다. 본 발명에 따라서, 이러한 항체, 또는 본 발명에 따라서 이용되는 임의의 항체는, 특별히 비교가능한 제I형 항-CD20 항체 및/또는 당조작되지 않은 항체(예를 들어 리툭시맙)에 비해 실질적으로 더 높은 수준의 ADCC 활성을 나타내는 것이 추가로 바람직하다.
"제II형" 항-CD20 항체의 의미는 당분야에 잘 공지되어 있다. 일반적으로, 항-CD20 단일클론성 항체는 림프종 세포를 근절함에 있어서 이들의 작용 기작에 근거하여 2개의 구별되는 범주로 나눠진다. 제I형 항-CD20 항체는 주로 보체를 이용하여 표적 세포를 살해하는 반면, 제II형 항체는 상이한 기작, 주고 세포자멸에 의해 작동된다. 리툭시맙 및 1F5는 제I형 항-CD20 항체의 예인 반면, B 1은 제II형 항체의 예이다. 예를 들어, 크라그(Cragg)의 문헌[Blood 103(7), 2004, 2738-2743]; 틸링(Teeling)의 문헌[Blood 104(6), 2004, 1793-1800]을 참조하고, 이의 전체 내용은 본원에 참고로 인용된다. 또한 오비누투주맙 그 자체는 제II형 항체이다. 예를 들어 EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호를 참조하고, 이의 전체 내용은 본원에 참고로 인용된다.
숙련가라면 오비누투주맙의 중쇄 및 경쇄 가변성 영역의 관련된 특이성 결정 잔기를 알고 있고, 적어도 이를 쉽게 결정할 수 있다. 개별적 안내에 대하여, 숙련가라면, 예를 들면, EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호에 의존할 수 있다.
하나의 양태에서, 본 발명에 있어서 사용될 경우, 특별히 상기 (b) 및 (c)에서 정의된 오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물은, 무엇 보다도, 하기 특징들중 하나 이상을 갖는 것으로 구상된다:
(i) CD20-양성 인간 세포와 함께 배양될 경우 리툭시맙을 사용하는 동일한 조건하에 대조군에 비해 더 높은 수준의 세포자멸을 유도하는 능력;
(ii) 리툭시맙과 비교하여 증가된 CD20+ 종양 B-세포 살해를 일으키는 능력;
(iii) 리툭시맙과 비교하여 증가된 직접적 세포 사멸을 일으키는 능력[이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 대안적 결합 기하구조에 기인함(예를 들어 엘보-힌지(elbow hinge)-변형)];
(iv) 리툭시맙에 비해 감소된 보체-의존성 세포독성(CDC)을 일으키는 능력[이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 대안적 결합 기하구조에 기인함(예를 들어 엘보-힌지-변형)];
(v) 리툭시맙과 비교하여 증가된 항체-의존성 세포 세포독성(ADCC)을 일으키는 능력(이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 당조작된 Fc 영역에 기인함);
(vi) 리툭시맙과 비교하여 증가된 항체-의존성 세포 식세포작용(ADCP)을 일으키는 능력(이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 당조작된 Fc 영역에 기인함);
(vii) 리툭시맙과 비교하여 증가된 FcγRIII 수용체에 대한 친화도(이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 당조작된 Fc 영역에 기인함);
(viii) CD20에 결합할 경우, 리툭시맙에 비해 더 낮은 표면 CD20의 내재화를 촉발시키는 능력.
또 다른 양태에서, 본 발명에 있어서 이용될 경우, 특별히 상기 (b) 및 (c)에 정의된 오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물은, 무엇 보다도, 하기 MOA중 하나 이상을 나타내는 것으로 구상된다:
(i) CD20-양성 인간 세포와 함께 배양될 경우 리툭시맙을 사용하는 동일한 조건하에 대조군에 비해 더 높은 수준의 세포자멸을 유도하는 능력;
(iii) 리툭시맙과 비교하여 증가된 직접적 세포 사멸을 일으키는 능력[이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 대안적 결합 기하구조에 기인함(예를 들어 엘보-힌지-변형)];
(iv) 리툭시맙에 비해 감소된 보체-의존성 세포독성(CDC)을 일으키는 능력[이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 대안적 결합 기하구조에 기인함(예를 들어 엘보-힌지-변형)];
(v) 리툭시맙과 비교하여 증가된 항체-의존성 세포 세포독성(ADCC)을 일으키는 능력(이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 당조작된 Fc 영역에 기인함);
(vi) 리툭시맙과 비교하여 증가된 항체-의존성 세포 식세포작용(ADCP)을 일으키는 능력(이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 당조작된 Fc 영역에 기인함);
(vii) 리툭시맙과 비교하여 증가된 FcγRIII 수용체에 대한 친화도(이론에 얽매이려는 것은 아니지만, 이는 당조작된 Fc 영역에 기인함);
(viii) CD20에 결합할 경우, 리툭시맙에 비해 더 낮은 표면 CD20의 내재화를 촉발시키는 능력.
본 발명에 따라서 이용되는 항체의 관련된 특징(예를 들어 생물학적 기능, MOA)을 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 잘 공지되어 있고 숙련가에 의해 쉽게 적용될 수 있다.
세포자멸의 수준, 특별히 소정의 항체가 CD20-양성 인간 세포와 함께 항온처리될 경우 리툭시맙을 사용하는 동일한 조건하에 대조군에 비해 더 높은 수준의 세포자멸을 유도할 수 있는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 WO 제2005/044859호에 기재되어 있다.
본 발명에 따라서 "더 높은 수준의 세포자멸"은, 리툭시맙의 비교가능한 적용으로부터 생성된 세포자멸 수준과 비교할 경우, 예를 들면, 적어도 1.2-배 더 높거나, 적어도 1.5-배 더 높거나, 적어도 2-배 더 높거나, 적어도 3-배 더 높거나, 적어도 4-배 더 높거나, 적어도 5-배 더 높거나, 또는 적어도 10-배 더 높다.
CD20+ 종양 B-세포 살해, 특별히 리툭시맙과 비교하여 증가된 CD20+ 종양 B-세포 살해가 존재하는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호에 개시되어 있다. 본 발명에 따라서, CD20+ 종양 B-세포 살해는, 이것이, 리툭시맙의 비교가능한 적용으로부터 생성된 CD20+ 종양 B-세포 살해와 비교하여, 예를 들면, 적어도 1.2-배 더 높거나, 적어도 1.5-배 더 높거나, 적어도 2-배 더 높거나, 적어도 3-배 더 높거나, 적어도 4-배 더 높거나, 적어도 5-배 더 높거나, 또는 적어도 10-배 더 높은 경우 "증가된다".
직접적 세포 사멸, 특별히 리툭시맙과 비교하여 증가된 직접적 세포 사멸이 존재하는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호에 개시되어 있다. 본 발명에 따라서, 직접적 세포 사멸은, 이것이 리툭시맙의 비교가능한 적용으로부터 생성된 직접적 세포 살해와 비교하여, 적어도 1.2-배 더 높거나, 적어도 1.5-배 더 높거나, 적어도 2-배 더 높거나, 적어도 3-배 더 높거나, 적어도 4-배 더 높거나, 적어도 5-배 더 높거나, 또는 적어도 10-배 더 높은 경우 "증가된다".
CDC, 특별히 리툭시맙에 비해 감소된 CDC가 존재하는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 상기 인용된 허터의 문헌, 상기 인용된 모스너의 문헌, EP-B1 제238090호, 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호, 제WO 2015/067586호 및 제WO 2016/207312호에 개시되어 있다. 본 발명에 따라서, CDC는, 리툭시맙의 비교가능한 적용으로부터 생성된 CDC와 비교하여, 예를 들면, 적어도 1.2-배 미만, 적어도 1.5-배 미만, 적어도 2-배 미만, 적어도 3-배 미만, 적어도 4-배 미만, 적어도 5-배 미만, 또는 적어도 10-배 미만인 경우 "감소된다".
용어 "보체-의존성 세포독성(CDC)"은 보체의 존재하에 본 발명에 따라 이용되는 항체에 의한 인간 종양 표적 세포의 용해를 지칭한다. 바람직하게는, CDC는 보체의 존재하에 본 발명에 따라 이용되는 항-CD20 항체에 의해 CD20 발현 세포의 제조물을 처리함으로써 측정된다. CDC는 항체가, 예를 들면 100 nM의 농도에서, 예를 들면, 4 시간 후, 예를 들면, 종양 세포의 20% 이상의 용해(세포 사멸)를 유도하는 경우 발견된다. 검사는 바람직하게는 51Cr 또는 Eu 표지화된 종양 세포 및 방출된 51Cr 또는 Eu의 측정에 의해 수행된다. 대조군은 리툭시맙의 존재, 및 임의적으로, 항체의 부재하의 종양 표적 세포와 보체의 항온처리를 포함한다. 숙련가라면 경우에 따라 쉽게 CDC 검사의 이러한 특별한 예를 적용함으로써 본 발명에 따라서 사용되는 항체의 적용시 리툭시맙의 적용과 비교하여 CDC 활성이 감소되는지의 여부를 시험할 수 있다.
ADCC, 특별히 리툭시맙과 비교하여 증가된 ADCC가 존재하는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 상기 인용된 허터의 문헌, 상기 인용된 모스너의 문헌, 토비나이(Tobinai)의 문헌[Adv. Ther. 34, 2017, 324-56], EP-B1 제2380910호, 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호, 제WO 2015/067596호 및 제WO 2016/207312호에 개시되어 있다. 본 발명에 따라서, ADCC는, 더욱 일반적으로, 이것이, 예를 들면, 리툭시맙의 비교가능한 적용으로부터 생성된 ADCC와 비교하여 적어도 1.2-배 더 높거나, 적어도 1.5-배 더 높거나, 적어도 2-배 더 높거나, 적어도 3-배 더 높거나, 적어도 4-배 더 높거나, 적어도 5-배 더 높거나, 또는 적어도 10-배 더 높은 경우 "증가된다".
하나의 비제한적인 승인된 시험관내 ADCC 검사는 다음과 같다:
1) 검사는 항체(CD20)의 항원-결합 영역에 의해 인식되는 표적 항원을 발현하는 것으로 알려진 표적 세포를 사용하고;
2) 검사는 무작위적으로 선택된 건강한 공여자의 혈액으로부터 단리된 인간 말초 혈액 단핵 세포(PBMC: peripheral blood mononuclear cell)를 효과자 세포로서 사용하고;
3) 검사는 하기 프로토콜에 따라서 실행되고:
i) 표준 밀도 원심분리 절차를 사용하여 PBMC를 단리하고, RPMI 세포 배양 배지중 5 x 106 세포/㎖로 현탁시키고;
ii) 표적 세포를 표준 조직 배양 방법에 의해 성장시키고, 90% 보다 높은 생존력을 갖는 대수 성장기로부터 수거하고, RPMI 세포 배양 배지에서 세척하고, 100 마이크로-퀴리(micro-Curie)의 51Cr에 의해 표지화하고, 세포 배양 배지에 의해 2회 세척하고, 세포 배양 배지에 105 세포/㎖의 밀도로 재현탁시키고;
iii) 100 마이크로리터의 상기 최종 표적 세포 현탁액을 96-웰 미량적정 플레이트의 각각의 웰에 옮기고;
iv) 항체를 세포 배양 배지에서 4000 ng/㎖로부터 0.04 ng/㎖까지 연속 희석시키고 50 마이크로리터의 생성된 항체 용액을 96-웰 미량적정 플레이트중의 표적 세포에 첨가하여, 상기 전체 농도 범위를 포괄하는 다양한 항체 농도를 3중으로 시험하고;
v) 최대 방출(MR: maximum release) 대조군을 위해, 표지화된 표적 세포가 함유된 플레이트중 3개의 추가적인 웰에 항체 용액(상기 iv) 대신에 비-이온성 세척제[노니뎃(Nonidet), 시그마(Sigma), 세인트 루이스 소재]의 2%(VN) 수용액 50 마이크로리터를 제공하고;
vi) 자발적 방출(SR: spontaneous release) 대조군을 위해, 표지화된 표적 세포가 함유된 플레이트중 3개의 추가적인 웰에 항체 용액(상기 iv) 대신에 50 마이크로리터의 RPMI 세포 배양 배지를 제공하고;
vii) 이어서 96-웰 미량적정 플레이트를 50 x g에서 1 분 동안 원심분리하고, 1 시간 동안 4℃에서 항온처리하고;
viii) 50 마이크로리터의 PBMC 현탁액(상기 i)을 각각의 웰에 첨가하여 25:1의 효과자:표적 세포 비를 수득하고, 플레이트를 5% C02 분위기하에 37℃에서 4 시간 동안 항온처리기에 두고;
ix) 각각의 웰로부터 무세포 상청액을 수거하고, 실험적으로 방출된 방사능(ER)을 감마 계수기에 의해 정량화하고;
x) 특정 용해 백분율을 식 (ER-MR)/(MR-SR) x 100에 따라서 각각의 항체 농도에 대해 계산함[여기서 ER은 항체 농도에 대해 정량화된 평균 방사능(상기 ix 참조)이고, MR은 MR 대조군(상기 v 참조)에 대해 정량화된 평균 방사능(상기 ix 참조)이고, SR은 SR 대조군(상기 vi 참조)에 대해 정량화된 평균 방사능(상기 ix 참조)임];
4) "증가된 ADCC"는 상기 시험된 항체 농도 범위 내에서 관찰되는 특정 용해의 최대 백분율에서의 증가로서, 및/또는 상기 시험된 항체 농도 범위 내에서 관찰되는 특정 용해의 최대 백분율의 절반을 달성하기 위해 필요한 항체의 농도에서의 감소로서 정의된다. ADCC에서의 증가는 상기 검사에 의해 측정되고, 동일한 항체에 의해 중재되며, 동일한 유형의 숙주 세포에 의해 당분야의 숙련가에게 알려진 동일한 표준 생산, 정제, 제형화 및 저장 방법을 사용하여 생산되지만, GnTIII을 과발현시키도록 조작된 숙주 세포에 의해 생산되지 않은 ADCC에 비례한다. 숙련가라면, ADCC 활성이 본 발명에 따라서 사용되는 항체의 적용시 리툭시맙의 적용과 비교하여 증가되는지의 여부를 시험할 수 있도록, 경우에 따라, ADCC 검사의 이러한 특별한 예를 쉽게 적용할 수 있다.
ADCP, 특별히 리툭시맙과 비교하여 증가된 ADCP가 존재하는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 상기 인용된 허터의 문헌 및 상기 인용된 모스너의 문헌에 개시되어 있다. 본 발명에 따라서, ADCP는, 이것이, 예를 들면, 리툭시맙의 비교가능한 적용에 의해 생성된 ADCP와 비교하여 적어도 1.2-배 더 높거나, 적어도 1.5-배 더 높거나, 적어도 2-배 더 높거나, 적어도 3-배 더 높거나, 적어도 4-배 더 높거나, 적어도 5-배 더 높거나, 또는 적어도 10-배 더 높은 경우 "증가된다".
FcγRIII 수용체에 대한 친화도, 특별히 FcγRIII 수용체에 대하여 리툭시맙과 비교하여 증가된 친화도가 존재하는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 상기 인용된 토비나이의 문헌에 개시되어 있다. 본 발명에 따라서, FcγRIII 수용체에 대한 친화도는, 이것이, 예를 들면, 리툭시맙의 비교가능한 적용에 의해 생성된 FcγRIII 수용체에 대한 친화도와 비교하여 적어도 1.2-배 더 높거나, 적어도 1.5-배 더 높거나, 적어도 2-배 더 높거나, 적어도 3-배 더 높거나, 적어도 4-배 더 높거나, 적어도 5-배 더 높거나, 또는 적어도 10-배 더 높은 경우 "증가된다".
표면 CD20의 내재화를 촉발시키는 능력(항-CD20 항체에 결합할 경우), 특별히 리툭시맙에 비해 표면 CD20의 더 작은 내재화를 촉발시키는 능력(오비누투주맙에 결합할 경우)이 존재하는지의 여부를 결정하기 위해 사용될 수 있는 수단 및 방법은 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 림(Lim)의 문헌[Blood 118(9), 2011, 2530-40]에 개시되어 있다.
본 발명에 따라서, 표면 CD20의 내재화는, 이것이, 예를 들면, 리툭시맙의 비교가능한 적용에 의해 생성된 표면 CD20 내재화를 촉발시키는 능력과 비교하여 적어도 1.2-배 미만, 적어도 1.5-배 미만, 적어도 2-배 미만, 적어도 3-배 미만, 적어도 4-배 미만, 적어도 5-배 미만, 또는 적어도 10-배 미만인 경우 "더 적다".
언급된 바와 같이, 본 발명에 있어서 이용되는 오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물은 당조작된 Fc 영역을 포함하는 것이 본 발명에 있어서 바람직하다. 이와 관련하여, 또한 EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호를 참조하고; 이의 전체 내용은 참고로 본원에 인용된다.
본 발명에 있어서 이용되는 항체의 Fc-영역은 당조작되어, 항체가 상기 언급된, 더욱 특별히 상기 섹션 (v), (vi) 및 (vii)에 언급된 특징 및 MOA중 하나 이상을 개별적으로 갖는 것이 특히 바람직하다. 섹션 (v)의 특징/MOA는 이와 관련하여 가장 바람직하다(ADCC에서의 증가).
본 발명에 있어서 이용되는 오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물은 상기 당조작된 Fc 영역에 결합된 비-푸코실화 올리고당의 분율이 증가할 수 있다. 본 발명에 있어서 이용되는 오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물은 상기 당조작된 Fc 영역에 결합된 이등분된, 비-푸코실화 올리고당의 분율이 증가할 수 있다. 본 발명에 있어서 이용되는 오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물은 당조작되지 않은 항체와 비교하여, 및/또는 리툭시맙과 비교하여 인간 FcγRIII 수용체로의 결합을 유의적으로 더 높은 수준으로 가질 것이다.
언급된 바와 같이, 본 발명에 있어서 이용되는, 특별히 상기 (b) 및 (c)에서 정의된 오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물은, 당조작되지 않은 항체와 비교하여, 및/또는 리툭시맙과 비교하여 유의적으로 더 높은 수준의 ADCC 활성을 나타내는 것이 본 발명에 있어서 바람직하다. 이론에 얽매이려는 것은 아니지만, ADCC 활성의 유의적으로 더 높은 수준은 당조작된 Fc 영역로부터 생성된다(상기 참조).
당분야의 숙련가라면 항체의 Fc-영역을 쉽게 당조작하여, 본 발명에 따라서 이용되는, 예를 들어, 상기 언급된 항체를 관련 특징(들)/MOA(들)이 회수되는 방식으로 달성할 수 있다. 게다가, 숙련가라면 본 발명에 따라서 비-푸코실화 올리고당의 분율에서의 증가 및 이등분된 비-푸코실화 올리고당의 분율에서의 증가가 무엇인지를 쉽게 추론할 수 있다. 이와 관련하여, 숙련가라면, 무엇 보다도, EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호에 의해 제공되는 안내에 의존할 수 있고; 이의 내용은 본원에 참고로 인용된다. 이러한 증가의 비제한적인 예는 (당조작되지 않은 항체에 비하여) 적어도 1.2-배, 적어도 1.5-배, 적어도 2-배, 적어도 3-배, 적어도 4-배, 적어도 5-배 또는 적어도 10-배의 증가이다.
본 발명에 따라서, 2개(또는 그 이상)의 핵산 서열에 있어서 용어 "동일성" 또는 "동일한" 또는 "동일성 퍼센트" 또는 "동일성 백분율" 또는 "서열 동일성"은, 당분야에 공지된 바와 같은 서열 비교 알고리즘을 사용하거나 수동 정렬 및 육안 검사에 의해 측정되고, 비교 창에서 또는 지정된 영역 상에서 최대 관련성에 대해 비교되고 정렬될 경우, 동일하거나, 동일한 뉴클레오티드의 특정화된 백분율(바람직하게는 적어도 80% 동일성, 더욱 바람직하게는 적어도 85%, 90%, 95%, 96%, 97% 또는 98%의 동일성, 가장 바람직하게는 적어도 99%의 동일성)을 갖는 2개(또는 그 이상)의 서열 또는 하위서열을 지칭한다. 예를 들면, 80% 내지 90% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열은 실질적으로 동일한 것으로 고려될 수 있다. 이러한 정의는 또한 시험 서열의 보체에 적용된다. 기재된 동일성은 적어도 약 15 내지 25개의 뉴클레오티드 길이의 영역, 적어도 약 50 내지 100개 뉴클레오티드 길이의 영역 또는 적어도 약 800 내지 1200개 뉴클레오티드 길이의 영역(또는 서열의 전체 길이) 상에서 존재할 수 있다. 당분야의 숙련가라면, 당분야에 공지되 바와 같이, 예를 들면, CLUSTALW 컴퓨터 프로그램[톰슨(Thompson)의 문헌 "Nucl. Acids Res. 2 (1994), 4673-4680"] 또는 FASTDB[브루트래그(Brutlag)의 문헌 "Comp. App. Biosci. 6 (1990), 237-245"]에 기초한 알고리즘을 사용하여 서열 사이의 동일성 퍼센트를 결정하는 방법을 알 것이다.
비록 FASTDB 알고리즘이 전형적으로 서열에서의 내부의 비-부합 결실 또는 부가, 즉, 갭(gap)을 그의 계산에 고려하지 않을 지라도, 이는 % 동일성의 과대추정을 방지하기 위해 수동으로 보정될 수 있다. 그러나, CLUSTALW는, 서열 갭을 그의 동일성 계산에 고려한다. 또한 BLAST 및 BLAST 2.0 알고리즘[알트슐(Altschul)의 문헌 "(1997) Nucl. Acids Res. 25:3389-3402"; 알트슐의 문헌 "(1993) J. Mol. Evol. 36:290-300"; 알트슐의 문헌 "(1990) J. Mol. Biol. 215:403-410"]이 당분야의 숙련가에게 이용가능하다. 핵산 서열을 위한 BLASTN 프로그램은 디폴트로서 11의 단어 길이(W), 10의 예측값(E), M = 5, N = 4, 및 양쪽 스트랜드의 비교를 사용한다. BLOSUM62 스코어링 매트릭스(scoring matrix)[헤니코프(Henikoff)의 문헌 "(1989) PNAS 89:10915"]는 50의 정렬값(B), 10의 예측값(E), M = 5, N = 4, 및 양쪽 스트랜드의 비교를 사용한다.
핵산 서열에서 뉴클레오티드 잔기가 소정의 뉴클레오티드 서열에서의 특정 위치에 상응하는지의 여부를 결정하기 위해, 숙련가라면 당분야에 잘 공지되어 있는 수단 및 방법, 예를 들어, 정렬을 수동으로 사용하거나 또는 예컨대 본원에 언급된 컴퓨터 프로그램을 사용할 수 있다. 예를 들면, 기본 국소 정렬 조사 도구(BLAST: Basic Local Alignment Search Tool)(상기 인용된 알트슐의 1997년 문헌; 상기 인용된 알트슐의 1993년 문헌; 상기 인용된 알트슐의 1990년 문헌)를 대표하는 BLAST 2.0은 국소 서열 정렬을 조사하기 위해 사용될 수 있다. 상기 논의된 바와 같이, BLAST는 서열 유사성을 결정하기 위해 뉴클레오티드 서열의 정렬을 생산한다. 정렬의 국소적 성질로 인하여, BLAST는 정확한 부합성을 결정하거나 유사한 서열을 식별하는데에 특히 유용하다. BLAST 알고리즘 출력값의 기본 단위는 고-득점 분절 쌍(HSP: High-scoring Segment Pair)이다. HSP는 임의적이지만 동일한 길이의 2개의 서열 단편으로 구성되는데, 이들의 정렬은 국소적으로 최대치이고, 이에 대한 정렬 스코어는 사용자가 설정한 역치 또는 컷-오프 스코어를 충족하거나 초과한다. BLAST 접근법은 질의(query) 서열 및 데이터베이스 서열 사이의 HSP를 구하여서, 발견된 임의의 부합성의 통계적 유의성을 평가하고 유의성에 대한 사용자-선택된 역치를 충족시키는 유일한 부합성을 보고하는 것이다. 매개변수 E는 데이터베이스 서열 부합성을 보고하기 위한 통계적으로 유의적인 역치를 달성한다. E는 전체 데이터베이스 조사와 관련하여 HSP(또는 HSP의 집합)의 기회 발생(chance occurrence)에 대한 예측된 빈도의 상한치로서 해석된다. 부합성이 E를 충족시키는 임의의 데이터베이스 서열은 프로그램 출력값으로 보고된다. BLAST를 사용하는 유사한 컴퓨터 기법(상기 인용된 알트슐의 1997년 문헌; 상기 인용된 알트슐의 1993년 문헌; 상기 인용된 알트슐의 1990년 문헌)은 뉴클레오티드 데이터베이스, 예컨대 GenBank 또는 EMBL에서 동일하거나 관련된 분자를 조사하기 위해 사용된다. 이러한 분석은 다중 막-근거 혼성화(multiple membrane-based hybridization)에 비해 훨씬 신속하다. 또한, 컴퓨터 조사의 감도는 임의의 특별한 부합성이 정확한 것으로 분류되는지 유사한 것으로 분류되는지의 여부를 결정하기 위해 변형될 수 있다. 조사의 근거는 다음과 같이 정의되는 생성물 스코어이고:
(서열 동일성 % × 최대 BLAST 스코어%) / 100
2개의 서열 사이의 유사도 및 서열 부합된 서열의 길이 둘 다를 고려한다. 예를 들면, 40의 생성물 스코어에 의해, 부합성은 1 내지 2% 오차내에서 정확할 것이고; 70에서, 부합성은 정확할 것이다. 유사한 분자는 보통 15 내지 40의 생성물 스코어를 나타내는 것을 선택함으로써 식별되지만, 더 낮은 스코어는 관련된 분자를 식별할 수 있다. 서열 정렬을 생성할 수 있는 프로그램에 대한 또 다른 예는 당분야에 알려진 바와 같은 CLUSTALW 컴퓨터 프로그램[톰슨(Thompson)의 문헌 "(1994) Nucl. Acids Res. 2: 4673-4680"] 또는 FASTDB[브루트래그(Brutlag)의 문헌 "(1990) Comp. App. Biosci. 6: 237-245"]이다.
일반적으로, 용어 "항체", "항체들" 또는 "이의 작용성 등가물"은, 본원에 사용될 경우 당분야에 인식된 용어이고, 공지된 항원에 결합하는 분자 또는 분자의 활성 단편, 특별히 면역글로불린 분자 및 면역글로불린 분자의 면역학적으로 활성인 부분, 즉 항원에 면역특이적으로 결합하는 결합 자리를 함유하는 분자를 지칭한다. 면역글로불린은, 원칙적으로, 면역글로불린 분자의 임의의 유형(IgG, IgM, IgD, IgE, IgA 및 IgY)이거나, 또는 부류(IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 분자의 하위부류일 수 있다.
"항체"는 본 발명의 범주내에서 단일클론성 항체, 다중클론성 항체, 키메라성 항체, 단일 쇄 항체, 이중특이적 항체, 유인원화된 항체, 인간 항체 및 인간화된 항체 뿐만 아니라 이의 활성 단편을 포함하는 것으로 의도된다. 공지된 항원에 결합하는 분자의 활성 단편의 예로는, 상기 언급된 임의의 항체 및 단편의 Fab 면역글로불린 발현 라이브러리 및 에피토프-결합 단편의 생성물을 비롯하여 Fab 및 F(ab')2 단편이 포함된다. 이들 활성 단편은 다수의 기법에 의해 특별한 항체(예를 들어 오비누투주맙)으로부터 유래될 수 있다. 예를 들면, 정제된 단일클론성 항체는 펩신과 같은 효소에 의해 분할될 수 있고, HPLC 겔 여과된다. 이어서 Fab 단편을 함유하는 적절한 분별물은 수집되고 막 여과 등에 의해 농축될 수 있다. 항체의 활성 단편의 단리를 위한 일반적 기법에 대한 추가의 설명을 위해, 예를 들면, 카우(Khaw, B. A.) 등의 문헌[J. Nucl. Med. 23:1011-1019 (1982)]; 및 루소(Rousseaux) 등의 문헌[Methods Enzymology, 121:663-69, Academic Press, 1986]을 참조한다.
"인간화된 항체"는, 그의 CDR이 인간 이외의 공여자 면역글로불린으로부터 유래되고, 분자의 나머지 면역글로불린-유래된 부분이 하나(또는 그 이상) 인간 면역글로불린(들)으로부터 유래되는 조작된 항체의 유형을 지칭한다. 인간화된 항체는 추가로 골격구조 영역중 하나 이상이 인간(또는 영장류) 아미노산을 갖는 가변성 영역을 갖는 항체를 지칭한다. 또한, 골격구조 지지 잔기는 결합 친화도를 보존하기 위해 변경될 수 있다. "인간화된 항체"를 수득하기 위한 방법은 당분야의 숙련가에게 잘 알려져 있다[예를 들어, 퀸(Queen) 등의 문헌 "Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86:10029-10032 (1989)", 호지슨(Hodgson) 등의 문헌 "Bio Technoloy, 9:421 (1991)"]. "인간화된 항체"는 대동물, 예컨대, 예를 들면, 토끼에서 친화도-성숙된 인간-유사 다중클론성 항체를 생산할 수 있게 하는 신규한 유전적 조작법에 의해 또한 수득될 수 있다(http://www.rctech.com/bioventures/therapeutic.php).
용어 "단일클론성 항체"는 또한 당분야에 잘 인식되어 있고, 단일 클론으로부터 실험실에서 대량 생산되고 단지 하나의 항원을 인식하는 항체를 지칭한다. 단일클론성 항체는 전형적으로 정상적인 단기-수명의 항체-생산 B 세포를 빨리 성장하는 세포, 예컨대 암 세포(때때로 "불멸의" 세포로서도 지칭됨)에 융합시킴으로써 만들어진다. 생성된 혼성 세포, 또는 하이브리도마(hybridoma)는 신속히 증식하여 다량의 항체를 생산하는 클론을 생성한다.
용어 "항원"은 유기체에서, 특별히 동물, 더욱 특별히 인간을 비롯한 포유동물에서 면역 반응을 유도할 수 있는 실체 또는 이의 단편을 지칭한다. 이 용어는 면역원, 및 항원성에 책임이 있는 영역 또는 항원 결정자를 포함한다.
본원에 사용될 경우, 용어 "가용성"은 수용액에 부분적으로 또는 완전히 용해됨을 의미한다.
또한 본원에 사용될 경우, 용어 "면역원성"은 항체, T-세포, 및 면역원성 제제에 대해 인도되는 기타 반응성 면역 세포의 생산을 유도하거나 증진시키고, 인간 또는 동물에서 면역 반응에 기여하는 물질을 지칭한다.
용어 "하이브리도마"는 당분야에 인식되어 있고, 항체-생산 세포 및 불멸의 세포, 예를 들어 다발성 골수종 세포의 융합에 의해 생산된 세포를 지칭하는 것으로 당분야의 숙련가에 의해 이해된다. 이러한 혼성 세포는 항체의 연속적 공급을 가능하게 한다. 융합 방법에 대한 더욱 상세한 설명을 위해 상기 "단일클론성 항체"의 정의를 참조한다.
하나의 실시태양에서, 오비누투주맙의 작용성 등가물은 오비누투주맙 그 자체의 불변성 중쇄 영역(예를 들어 서열 번호 5의 아미노산 위치 120 내지 449), 또는 오비누투주맙 그 자체의 불변성 경쇄 영역(예를 들어 서열 번호 6의 아미노산 위치 116 내지 219), 또는 오비누투주맙 그 자체의 불변성 중쇄 및 경쇄 영역 둘 다를 포함하는 것으로 구상된다. 오비누투주맙의 작용성 등가물에 포함된 불변성 중쇄 및 경쇄 영역의 아미노산 서열은 오비누투주맙 그 자체의 불변성 중쇄 및/또는 경쇄 영역의 아미노산 서열에 100% 동일할 수 있다. 그러나, 이는 또한 이러한/이들 아미노산 서열(들)로부터 어느 정도 달라질 수 있다. 예를 들면, 이는 오비누투주맙 그 자체의 개별적 아미노산 서열에 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 동일할 수 있다. 그러나, 이러한 변이체 불변성 중쇄 및/또는 경쇄 영역은 여전히 개별적으로 오비누투주맙 및 오비누투주맙의 작용성 등가물의 관련 특징(세부사항을 위해 상기 참조), 특별히 본원에 정의된 바와 같은 당조작된 특징에 기여하고, 개별적으로 본원에 정의된 바와 같은 ADCC 활성의 유의적으로 더 높은 수준에 기여하도록 구상된다.
가장 바람직하게는, 본 발명에 따라서 사용되는 항체는 오비누투주맙 그 자체이다[또한 공지된 가자이바(상표명)/가자이바로(상표명) 및 GA101; 문헌 "WHO Drug Information 27(1), 2013, 90, Recommended INN: List 69"]. 언급된 바와 같이, 오비누투주맙은 당분야에 잘 공지되어 있고, 예를 들면, EP-B1 제2380910호 및 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호에 기재되어 있다. 오비누투주맙은 하기 구조를 갖는다:
중쇄
Figure pct00003
경쇄
Figure pct00004
디설파이드 가교 위치
Figure pct00005
글리코실화 자리
H CH2 N84.4
299, 299"(이등분된 비-푸코실화된 올리고당에서 강화됨)
항체 리툭시맙[의약품 명칭: 맙테라(MabThera: 등록상표); 또한 리툭산(Rituxan: 등록상표)으로서 공지됨]은 또한 당분야에 공지되어 있다. 이는, 예를 들면, EP-B1 제1005870호(예를 들어 도 4 및 5)에 기재되어 있다. 리툭시맙의 중쇄의 아미노산 서열은 서열 번호 9에 도시되어 있다. 리툭시맙의 경쇄의 아미노산 서열은 서열 번호 10에 제시된다.
본 발명에 따라서, 숙련가라면 환자가 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 비해 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 대해 유리하게 반응하는지의 여부를 쉽게 평가할 수 있다. 특별히, 치료의 임상적 결과 또는 임상적 종점이 이와 관련하여 평가될 수 있다. 이와 관련하여 평가될 수 있는 임상적 결과/임상적 종점은 숙련가에게 이용가능하고, 예를 들면, 상기 인용된 고에데의 문헌, 오웬(Owen)의 문헌[Expert Opin. Biol. Ther. 12(3), 2012, 343-51] 및 일리지(Illidge)의 문헌[Expert Opin. Biol. Ther. 12(5), 2012, 543-5] 및 첨부된 실시예에 기재되어 있다.
본 발명에 따라서 평가되는 임상적 결과의 바람직한 예는 무진행 생존율(PFS), 전체 생존율(OS) 및/또는 무병 생존율(EFS)이다. 본 발명에 따라서 리툭시맙에 비한 오비누투주맙의 우수성은 하나 이상의 임상적 종점에 근거하여 결정될 수 있다. 원칙적으로, 본 발명에 따라서, 용어 "임상적 결과"는 치료 동안의 시간을 지칭하도록 구상되고, 용어 "임상적 종점"은 치료의 종료시(또는 종료 후) 시간을 지칭하도록 구상된다. 본 발명에 따라서, 임상적 종점은 1차 임상적 종점일 수 있다. 특별하지만 비제한적인 임상적 결과 및 임상적 종점은 첨부된 실시예에 기재되어 있다.
숙련가라면 소정의 임상적 결과가 본 발명에 따라서 개선되었는지, 즉 리툭시맙에 의한 치료와 비교하여 개선되었는지의 여부를 쉽게 결정할 수 있다. 예를 들면, 이와 관련하여 "개선된"은 임상적 결과[오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 의한 치료로부터 생성됨]가 리툭시맙에 의한 비교가능한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)로부터 생성된 임상적 결과에 비해 적어도 3% 더 높거나, 적어도 5% 더 높거나, 적어도 7% 더 높거나, 적어도 10% 더 높거나, 적어도 15% 더 높거나, 적어도 20% 더 높거나, 적어도 25% 더 높거나, 적어도 30% 더 높거나, 적어도 40% 더 높거나, 적어도 50% 더 높거나, 적어도 75% 더 높거나, 적어도 100% 더 높거나, 또는 적어도 120% 더 높음을 의미한다.
임상적 결과/임상적 종점이 평가되는 시간은 숙련가에 의해 쉽게 결정될 수 있다. 원칙적으로, 이는 2가지 치료(오비누투주맙 치료 대 리툭시맙 치료) 사이의 임상적 결과/임상적 종점에서의 차이가 (유의적으로) 명백하게 되는 시점에서 결정된다. 이러한 시간은, 예를 들면, 치료 시작 후 적어도 1 개월, 적어도 2 개월, 적어도 3 개월, 적어도 6 개월, 적어도 12 개월, 적어도 18 개월, 적어도 24 개월, 적어도 30 개월, 적어도 36 개월, 적어도 42 개월, 또는 적어도 48 개월일 수 있다.
바람직하게는, 본 발명에 따라서 치료되는 (DLBCL) 환자는 인간 환자/인간이다. 가장 바람직하게는, 본 발명에 따라서 치료되는 (DLBCL) 환자는 1L DLBCL 인간 환자이다. 이는 DLBCL 환자가 이전에 치료되지 않은 DLBCL 환자임을 의미한다. 그러나, 원칙적으로, 또한 다른 환자, 예를 들면 인간 이외의 환자, 예를 들면, 애완용 동물(예를 들어 개, 고양이, 토끼, 래트 또는 마우스), 가축(예를 들어 소, 돼지, 양), 말 또는 조랑말, 또는 조류(예를 들어 닭, 칠면조, 앵무새)가 본 발명에 따라서 치료될 수 있다. 또한 다른 온혈 동물이 본 발명에 따라서 치료될 수 있다. 언급된 바와 같이, 특별히 본 발명에 있어서, 본원에서 정의된 환자는 리툭시맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 오비누투주맙에 의한 치료(특별히 화학요법과 병용됨, 더욱 특별히 CHOP 화학요법과 병용됨)에 반응하는 것으로 구상된다.
본 발명에 있어서 사용되는 항체(즉 오비누투주맙 또는 이의 작용성 등가물)는 추가의 제제와 병용하여 투여될 수 있다. 예를 들면, 하나 이상의 추가적인 다른 세포독성제 또는 화학치료제(들), 또는 이러한 제제(들)의 효과를 증진시키는 이온화 방사선이 공투여될 수 있고; 개별적 예를 위해 예를 들면, EP-B1 제2380910호, 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호, 제WO 2015/067586호 및 제WO 2016/207312호를 참조한다.
용어 "병용하여 투여되는" 또는 "공투여", "공투여하는", "병용 치료법" 또는 "병용 치료"는 본원에 기재된 항체, 및 본원에 기재된 나머지 제제(들)를, 예를 들어 별도의 제형/적용(또는 하나의 단일한 제형/적용)으로서 투여함을 지칭한다. 공-투여는 순서에 있어서 동시적이거나 순차적일 수 있고, 여기서 바람직하게는 양쪽(또는 모든) 활성제가 동시에 그들의 생물 활성을 부가하는 시간 기간이 존재한다. 상기 항체 및 상기 추가의 제제(들)는 동시에 또는 순차적으로(예를 들어 정맥내(i.v.)), 예를 들면 연속 주입을 통해 공-투여된다. 치료제 둘 다가 순차적으로 공투여되는 경우, 용량은 2가지 별도의 투여로 동일한 날짜에 투여되거나, 또는 제제중 하나는 1일에 투여되고 제2 제제는 2 내지 7일, 바람직하게는 2 내지 4일에 공투여될 수 있다. 이와 같이, 하나의 실시태양에서, 용어 "순차적으로"는 제1 성분의 투약 이후 (약) 7 일 이내, 바람직하게는 제1 성분의 투약 이후 (약) 4 일 이내를 의미하고; 용어 "동시에"는 동일한 시간을 의미한다. 항체 및/또는 추가의 제제(들)의 유지 용량과 관련하여 용어 "공투여"는, 치료 주기가 약물 둘 다에 대해 적절한 경우, 예를 들어 매주인 경우 유지 용량이 동시에 공투여될 수 있거나, 또는 추가의 제제가, 예를 들어, 1일 내지 3일마다 투여되고 상기 항체가 매주 투여됨을 의미한다. 또는 유지 용량은 1일 또는 수일 이내에 순차적으로 공투여됨을 의미한다.
항체에 더하여, 임의적으로 다른 제제(들)와 병용하여, 또한 (a) 화학치료제(들) 또는 표적화된 치료법이 적용될 수 있다. 공-투여될 수 있는 이러한 추가적인 화학치료제로는, 제한되지 않지만, 항-신생물제, 예를 들면 알킬화제, 예컨대 질소 머스터드(nitrogen mustard), 예컨대 메클로에타민(mechlorethamine), 사이클로포스파미드, 이포스파미드(ifosfamide), 멜팔란(melphalan) 및 클로람부실(chlorambucil); 질소원, 예컨대 카무스틴(carmustine)(BCNU), 로무스틴(lomustine)(CCNU), 및 세무스틴(semustine)(메틸-CCNU); 테모달(Temodal)(TM)[테모졸라미드(temozolamide)], 에틸렌이민/메틸멜라민, 예컨대 트리에틸렌멜라민(TEM), 트리에틸렌, 티오포스포르아미드[티오테파(thiotepa)], 헥사메틸멜라민[HMM, 알트레타민(altretamine)]; 알킬 설포네이트, 예컨대 부설판(busulfan); 트리아진(triazine), 예컨대 다카바진(dacarbazine)(DTIC); 대사길항물질, 예를 들면 엽산 유사체, 예컨대 메토트렉세이트(methotrexate) 및 트리메트렉세이트(trimetrexate), 피리미딘 유사체, 예컨대 5-플루오로우라실(5FU), 플루오로데옥시우리딘, 겜시타빈(gemcitabine), 시토신 아라비노시드[AraC, 시타라빈(cytarabine)], 5-아자시티딘(azacytidine), 2,2'-디플루오로데옥시티딘(difluorodeoxycytidine), 퓨린 유사체, 예컨대 6-머캅토퓨린, 6-티오구아닌, 아자티오프린(azathioprine), T-데옥시코포마이신(deoxycoformycin)[펜토스타틴(pentostatin)], 에리트로하이드록시노닐아데닌(erythrohydroxynonyladenine)(EHNA), 플루다라빈(fludarabine) 포스페이트, 및 2-클로로데옥시아데노신[클라드리빈(cladribine), 2-CdA]; 천연 생성물, 예를 들면 항유사분열 약물, 예컨대 파클리탁셀(paclitaxel), 빈카 알칼로이드, 예컨대 빈블라스틴(vinblastine)(VLB), 빈크리스틴, 및 비노렐빈(vinorelbine), 탁소테레(taxotere), 에스트라무스틴(estramustine), 및 에스트라무스틴 포스페이트; 피포도필로톡신(pipodophylotoxin), 예컨대 에토포시드(etoposide) 및 테니포시드(teniposide); 항생물질, 예컨대 악티노마이신(actinomycin) D, 다우노마이신(daunomycin)[루비도마이신(rubidomycin)], 독소루비신, 미톡산트론(mitoxantrone), 이다루비신(idarubicin), 블레오마이신(bleomycin), 플리카마이신(plicamycin)[미트라마이신(mithramycin)], 미토마이신(mitomycin) C, 및 악티노마이신(actinomycin); 효소, 예컨대 L-아스파라기나아제(asparaginase); 인터페론-알파, IL-2, G-CSF 및 GM-CSF와 같은 생물 반응 변형제; 기타 제제, 예를 들면 백금 배위결합 착체, 예컨대 옥살리플라틴(oxaliplatin), 시스플라틴(cisplatin) 및 카보플라틴(carboplatin), 안트라세네디온(anthracenedione), 예컨대 미톡산트론(mitoxantrone), 치환된 우레아, 예컨대 하이드록시우레아, 메틸하이드라진 유도체, 예를 들면 N-메틸하이드라진(MIH) 및 프로카바진(procarbazine), 부신피질 억제제, 예컨대 미토탄(mitotane)(o, p-DDD) 및 아미노글루테티미드(aminoglutethimide); 호르몬 및 길항물질, 예를 들면 부신피질 스테로이드 길항물질, 예컨대 프레드니손 및 등가물, 덱사메타손(dexamethasone) 및 아미노글루테티미드(aminoglutethimide); 겜자르(Gemzar)(상표명)[겜시타빈(gemcitabine)], 프로게스틴(progestin), 예컨대 하이드록시프로게스테론 카프로에이트, 메톡시프로게스테론 아세테이트 및 메게스트롤 아세테이트; 에스트로겐, 예컨대 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol) 및 에티닐 에스트라디올(ethinyl estradiol) 등가물; 항에스트로겐, 예컨대 타목시펜(tamoxifen); 안드로겐, 예를 들면 테스토스테론 프로피오네이트 및 플루옥시메스테론(fluoxymesterone)/등가물; 항안드로겐, 예컨대 플루타미드(flutamide), 고나도트로핀(gonadotropin)-방출 호르몬 유사체 및 류프롤라이드(leuprolide); 및 비-스테로이드계 항안드로겐, 예컨대 플루타미드가 포함된다. 후성적 기작을 표적화하는 치료법, 예컨대 제한되지 않지만, 히스톤 데아세틸라아제(histone deacetylase) 저해제, 탈메틸화제[예를 들어, 비다자(Vidaza)] 및 전사 억제의 해방(ATRA) 치료법이 또한 항원 결합 단백질과 병용될 수 있다. 하나의 실시태양에서, 화학치료제는 탁산(taxane)[예를 들어 파클리탁셀(paclitaxel)(탁솔: Taxol), 도세탁셀(docetaxel)[탁소테레(Taxotere)], 변형된 파클리탁셀[예를 들어, 아브락산(Abraxane) 및 오팍시오(Opaxio)], 독소루비신, 수니티닙(sunitinib)[수텐트(Sutent)], 소라페닙(sorafenib)[넥사바르(Nexavar)], 및 기타 멀티키나아제(multikinase) 저해제, 옥살리플라틴(oxaliplatin), 시스플라틴(cisplatin) 및 카보플라틴(carboplatin), 에토포시드(etoposide), 겜시타빈(gemcitabine), 및 빈블라스틴으로 구성된 군에서 선택된다. 하나의 실시태양에서, 화학치료제는 탁산[예를 들어 탁솔(파클리탁셀)], 도세탁셀(탁소테레), 변형된 파클리탁셀(예를 들어, 아브락산 및 오팍시오)로 구성된 군에서 선택된다. 하나의 실시태양에서, 추가적인 화학치료제는 5-플루오로우라실(5-FU), 류코보린(leucovorin), 이리노테칸(irinotecan), 또는 옥사플라틴으로부터 선택된다. 하나의 실시태양에서, 화학치료제는 5-플루오로우라실, 류코보린 및 이리노테칸[폴피리(FOLFIRI)]이다. 하나의 실시태양에서, 화학치료제는 5-플루오로우라실, 및 옥살리플라틴[폴폭스(FOLFOX)]이다.
하나의 바람직한 실시태양에서, 본원에 정의된 항체(즉 오비누투주맙 및 그의 작용성 등가물)는 화학요법과 병용되어, 예를 들면 CHOP 화학요법(더욱 바람직함)과 함께, 또는 CHOP 화학요법의 변형, 예컨대 CHOEP 화학요법, CHOP-14 화학요법 또는 ACVBP 화학요법과 함께 투여될 수 있다(예를 들면, 하기 첨부된 실시예, 및 또한 EP-B1 제2380910호, 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호 및 상기 인용된 스코트의 2014년 및 2015년 문헌 참조). 그러므로, 하나의 바람직한 실시태양에서, 공-투여되는 추가적인 화학치료제는 사이클로포스파미드, 하이드록시다우노루비신(hydroxydaunorubicin), 온코베인(oncovein), 프레드니손 또는 프레드니솔론(prednisolone) 및, 임의적으로, 에토포시드로 구성된 군에서 선택된다.
본 발명에 있어서 사용되는 항체는 조성물, 특별히 약학 조성물에 포함될 수 있다. 약학 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다.
적합한 약학 조성물 및 약학적으로 허용가능한 담체는 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, EP-B1 제2380910호, 국제 특허출원 공개공보 제WO 2005/044859호, WO 제2015/067586호 및 제WO 2016/207312호에 기재되어 있다.
따라서, 또 다른 양태에서, 본원에 정의된 바와 같은 항체, 또는 이의 항원-결합 부분을 함유하는 조성물, 예를 들어 임의적으로 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 제형화되는 약학 조성물이 본 발명에 따라서 이용되는 것으로 구상된다.
본원에 사용될 경우, "약학적으로 허용가능한 담체"는 생리학적으로 화합성인 임의의 및 모든 적합한 용매, 분산 매질, 코팅제, 항균제 및 항곰팡이제, 등장성 및 흡수/재흡수 지연제 등을 포함한다. 바람직하게는, 약학 조성물 및 담체는, 개별적으로 주사 또는 주입에 적합하다.
약학적으로 허용가능한 담체는 멸균 수용액 또는 분산액, 및 멸균 주사용 용액 또는 분삭액의 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 약학적으로 활성인 물질을 위한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당분야에 공지되어 있다. 물에 더하여, 담체는, 예를 들면, 등장성 완충된 염수 용액일 수 있다.
허용가능한 담체, 부형제, 또는 안정화제는 이용되는 투여량 및 농도에서 수여자에게 무독성인 것으로 구상되고, 완충제, 예컨대 인산염, 시트르산염, 및 기타 유기산; 아스코르브산 및 메티오닌을 비롯한 항산화제; 보존제(예컨대 염화 옥타데실디메틸벤질 암모늄; 염화 헥사메토늄; 염화 벤즈알코늄, 염화 벤제토늄; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜(catechol); 레소르시놀(resorcinol); 사이클로헥사놀; 3-펜타놀; 및 m-크레솔); 저분자량(약 10개 미만 잔기)의 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 라이신; 단당류, 이당류, 및 다른 탄수화물, 예컨대 글루코스, 만노스, 또는 덱스트란; 킬레이트화제, 예컨대 EDTA; 당분, 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염-형성 대이온, 예컨대 나트륨; 금속 복합체(예를 들어 Zn-단백질 복합체); 및/또는 비-이온성 계면활성제, 예컨대 트윈(TWEEN: 상표명), 플루로닉스(PLURONICS: 상표명) 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG: polyethylene glycol)을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물/항체는 당분야에 공지된 다양한 방법에 의해 투여될 수 있다. 당분야의 숙련가에게 인식되는 바와 같이, 투여 경로 및/또는 방식은 원하는 결과에 따라 달라질 것이다.
선택되는 투여 경로와 무관하게, 적합한 수화된 형태로 사용될 수 있는 본 발명의 화합물, 및/또는 본 발명의 약학 조성물은 당분야의 숙련가에게 공지된 종래의 방법에 의해 약학적으로 허용가능한 투여형으로 제형화된다.
적절하게 적용되는 예시적인 항체 제형은 본 발명에 따라서 이용될 수 있고 국제 특허출원 공개공보 제W0 98/56418호에 기재되어 있다. 이러한 공보는 2 내지 8℃에서 2년 저장의 최소 보관 수명을 갖는, 40 mg/㎖의 항체, 25 mM 아세트산염, 150 mM 트레할로스, 0.9% 벤질 알코올, 0.02% 폴리소르베이트 20을 포함하는 액체 다중용량 제형(pH 5.0)을 기재한다. 또 다른 항체 제형은 9.0 mg/㎖의 염화 나트륨, 7.35 mg/㎖의 시트르산 나트륨 이수화물, 0.7 mg/㎖의 폴리소르베이트 80, 및 주사용 멸균수(pH 6.5)중 10 mg/㎖ 항체를 포함한다.
본 발명의 약학 조성물중 활성 구성성분의 실제 투여량 수준은 환자에게 독성이지 않으면서 특별한 환자, 조성물, 및 투여 방식을 위해 원하는 치료학적 반응을 달성하기 위해 효과적인 활성 구성성분의 양(효과량)을 수득하기 위해 달라질 수 있다. 선택된 투여량 수준은 이용되는 본 발명의 특별한 조성물, 또는 이의 에스테르, 염 또는 아미드, 투여 경로, 투여 시간, 이용되는 특별한 화합물의 배출 속도, 이용되는 특별한 조성물과 병용되는 다른 약물, 화합물 및/또는 물질, 치료되는 환자의 연령, 성별, 체중, 증상, 일반적 건강 및 이전 병력, 및 의학 분야에 공지된 유사한 (기타) 인자를 비롯한 다양한 약물동력학적 인자에 따라 좌우될 것이다.
용어 "치료의 방법" 또는 이의 등가물은, 예를 들면, DLBCL, 및 본원에서 정의된 환자에 적용될 경우, 개별적으로, 예를 들면, 환자에서 DLBCL 종양 세포의 수를 감소 또는 제거하거나, 또는 DLBCL 종양의 증후를 완화시키기 위해 고안된 작용의 절차 또는 과정을 지칭한다. 그러나 DLBCL을 "치료하는 방법"은, DLBCL 종양 세포가 사실상 제거되거나, 세포의 수가 사실상 감소되거나, DLBCL 종양의 증후가 사실상 완화됨을 반드시 의미할 필요는 없다. 종종, DLBCL을 치료하는 방법은 심지어 성공의 낮은 가능성으로 수행될 것이지만, 그럼에도 불구하고 환자의 병력 및 추정된 생존 기대치는, 특별히 리툭시맙 치료와 비교하여, 전체적으로 유리한 작용 과정을 유도할 것으로 고려된다.
항체는, 조사자, 수의사, 의사 또는 다른 임상가에 의해 추구되는, 예를 들면 조직, 계통, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 유발할 개별 화합물 또는 조합물의 양인 "치료 효과량"(또는 단순히 "효과량")으로 환자에게 투여됨(되어야 함)이 자명하다.
(공-)투여의 양 및 (공-)투여의 시기 선택은 치료되는 환자의 유형(종, 성별, 연령, 체중 등) 및 증상, 및 치료되는 질환 또는 증상의 위중성에 따라 좌우될 것이다. 항체, 및 임의적으로 추가의 제제는 적합하게는 한번에 또는 일련의 치료로, 예를 들어 동일한 날짜 또는 이후의 날짜에 환자에게 (공-)투여된다.
질병의 유형 및 위중성에 따라서, 본원에 정의된 항체의 약 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg(예를 들어 0.1 내지 20 mg/kg)이 환자에게 공투여하기 위한 초기 후보 투여량이다.
오비누투주맙/오비누투주맙의 작용성 등가물(더욱 특별히 G-CHOP)에 대한 특별하지만 비제한적인 투여 계획(투여 경로 및 투여량 포함)의 예는 첨부된 실시예(특별히 GOYA 연구와 관련하여 적용되는 연구 고안 및 치료를 상세히 기재하는 실시예 1 및 실시예 2)에 기재되고, 이에 의해 제공된다. 숙련가라면, 필요할 경우, G 투여 계획의 이러한 예를 본 발명에 따라서 적절할 수 있는 임의의 다른 G 투여 계획에 쉽게 적응시킬 수 있다.
본 발명에 따라서 이용되는 항체 및 약학 조성물은, 개별적으로, 지시 매뉴얼 또는 지시 인쇄물과 함께 제공될 수 있다. 지시 매뉴얼/인쇄물은 숙련가/담당 의사를 위해 본원에서 정의된 DLBCL 환자를 본 발명에 따라서 어떻게 치료하는지에 대한 안내를 포함할 수 있다. 예를 들면, 지시 매뉴얼/인쇄물은 본원에 기재된 투여 방식/투여 섭생(예를 들면 투여 경로, 투여량 섭생, 투여 시간, 투여 빈도)에 대한 안내를 포함할 수 있다. 특별히, 지시 매뉴얼/인쇄물은 치료되는 환자, 즉 본원에서 정의된 환자에 대한 정보를 포함할 수 있다. 원칙적으로, 오비누투주맙, 치료되는 환자, 투여 방식/투여 섭생(투여량 등 포함) 등에 관하여 본원의 다른 곳에서 언급된 내용이 지시 매뉴얼/인쇄물에 포함될 수 있다.
본 발명에 있어서 이용되는 바람직한 샘플은 환자의 종양 조직(예를 들어 생검으로서)으로부터 유래된다. 예를 들면, 포르말린-고정되거나, 바람직하게는 파라핀-함침된 종양 조직이 이용될 수 있다(예를 들어 대물 슬라이드 상의 종양 조직의 절편). 그러나, 또한 다른 샘플, 예를 들면, 다른 조직의 절편/생검, 혈액 샘플, 혈청 샘플, 또는 기타 체액 샘플 등이 본 발명에 있어서 이용되는 것으로 구상된다.
본 명세서에서, 특허/특허출원을 포함한 다수의 문헌이 언급된다. 이들 문헌의 개시내용은, 본 발명의 특허성에 대한 관련사항을 고려하지 않으면서, 본원에 참고로 전체가 인용된다. 더욱 구체적으로, 모든 언급된 문헌은, 각각의 개별적 문헌이 구체적으로 및 개별적으로 참고로 인용되는 것으로 지시되는 것과 동일한 정도로 참고로 인용된다.
이제 본 발명은 하기 도면 및 실시예를 참조하여 설명될 것이고, 이는 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
도 1
GOYA에서의 환자의 성향.
*'중단된'은 연구 (항체) 치료가 중단된 환자를 지칭한다.
†중간 관찰 시간은 각각의 그룹에서 29 개월이었고; 완료된 치료는 연구 (항체) 치료가 완료된 환자를 지칭한다. 환자는 IPI 스코어(낮음/낮음-중간, 높음-중간, 및 높음-위험), CHOP 주기의 계획된 수(8 대 6), 및 지리학적 영역(서유럽, 동유럽, 남부 및 중앙 아메리카, 북부 아메리카, 아시아 및 기타 지역)에 의해 무작위로 계층화되었다. G-CHOP, 오비누투주맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손/프레드니솔론; R-CHOP, 리툭시맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손/프레드니솔론.
도 2
GOYA에서 PFS 및 OS의 카플란-마이어(Kaplan-Meier) 추정값.
(A) 치료에 의한 연구자-평가된 PFS(1차 종점), 치료-목적의 모집단, (B) 치료에 의한 OS, 치료-목적의 모집단, (C) 기원-세포 데이터를 갖는 환자에서 기원-세포 하위유형(연구 치료와 무관함)에 의한 연구자-평가된 PFS. ABC, 활성화된 B-세포-유사; CI, 신뢰 구간; GCB, 배중심 B-세포-유사; G-CHOP, 오비누투주맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손; HR, 위험 비; OS, 전체 생존율; PFS, 무진행 생존율; R-CHOP, 리툭시맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손.
도 3
GOYA 환자 하위그룹에서 연구자-평가된 PFS에 대한 계층화되지 않은 위험 비.
(A) 무작위 계층화 인자 및 (B) 기선 특징.
ABC, 활성화된 B-세포-유사; CI, 신뢰 구간; DLBCL, 미만성 거대 B-세포 림프종; ECOG PS, 동부 종양학 협력 그룹(Eastern Cooperative Oncology Group) 기능 상태; GCB, 배중심 B-세포-유사; G-CHOP, 오비누투주맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손; IPI, 국제 예후 지수(International Prognostic Index); KM, 카플란-마이어; PFS, 무진행 생존율; R-CHOP, 리툭시맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손. *절외(extranodal) 침범에 대하여 eCRF에 "예"를 체크하는 경우; 절외 자리가 0인 14명의 환자는 오류로 체크되었다.
도 4
GOYA에서 BCL2 전좌된 환자에서의 가자이바 이점
도 5
GOYA에서 BCL2 단백질 발현 양성 환자에서의 가자이바 이점
도 6
GOYA에서 BCL2 단백질 발현 양성인 BCL2 전좌된 환자에서의 가자이바 이점
GOYA에서 BCL2 IHC(양성/음성) 및 BCL2 FISH(양성/음성)에 의해 정의된 사분면에서의 치료에 대한 평가. 가자이바 우수성은 BCL2 IHC+/FISH+ 환자에 특이적인 것으로 보여짐.
도 7
GOYA에서 선형 예측자 스코어의 다양한 컷오프에 의해 정의된 GCB의 하위그룹에서의 가자이바 이점
A: FOREST 도표 25%-36% 컷오프(%)
B: FOREST 도표 25%-50% 컷오프(%)
C: < 749의 LPS 컷-오프에서 1차 종점(INV-PFS)에 대한 강한-GCB 하위그룹에서의 가자이바의 이점.
□ 강한-GCB GOYA 환자에서의 HR*(95% CI)
- PFS: 0.33[0.18 - 0.63], p-값 = 0.0007
□ 강한-GCB 환자는 LPS < 749를 갖는 GOYA에서 모든 DLBCL 환자의 25%(n = 233/933)를 나타낸다.
□ 강한-GCB 환자는 GOYA에서 GCB 환자의 43%(n = 233/540)를 구성한다.
도 8
GOYA에서 BCL2 전좌되고 BCL2 단백질 발현 양성인 GCB 환자에서의 가자이바 이점
도 9
GOYA에서 CD58 돌연변이된 환자 및/또는 CD58 유전자 발현이 낮은 환자에서의 가자이바 이점
도 10
COO 분석(N = xx)에 의한 바이오마커-평가가능한 환자에서 무진행 생존율에 미치는 R-CHOP에 비한 G-CHOP의 이점에 대한 LPS 컷오프의 다변량 자극 최적화
GOYA 고유 데이터에서 강한-GCB 치료 효과에 대한 LPS 컷오프 최적화. *치료, 국제 예후 지수, 화학요법 주기의 수(6 또는 8), 및 지리학적 영역에 대해 조정되는 다변량 HR. 청색 선, HR의 점 추정값, 황색 선, 95% CI; CI, 신뢰 구간; COO, 기원-세포; HR, 위험 비; LPS, 선형 예측자 스코어.
도 11
GOYA에서 강한-GCB 환자 # 의 분자 특징.
강한-GCB 환자는 FL 체세포 돌연변이 보증마크의 유의적으로 더 높은 출현율을 갖는다.
(A) FL 체세포 돌연변이 보증마크*(임의의 돌연변이 유형)의 출현율.
(B) BCL2 전좌†의 출현율.
#강한- 내지 약한-GCB를 특징짓기 위해 평가되는 기타 바이오마커(여기서, 출현율에서의 어떠한 유의적인 차이도 식별되지 않았음)는: 유전자 발현, 기질적-1/2 유전자 특징, 면역-반응 1/2 유전자 특징, CD20, 및 PTEN에 의해; 단백질 발현, BCL2, MYC, 및 BCL2/MYC 이중-발현자에 의해; 및 유전자 전좌, MYC 전좌 및 BCL2/MYC 더블-히트(double-hit)에 의해서였다. ABC, 활성화된 B-세포; DLBCL, 미만성 거대 B-세포 림프종; FDR, 오발견 확률; FISH, 형광 동소 혼성화; FL, 소포성 림프종; GCB, 배중심 B-세포; NGS, 차세대 서열분석.
도 12
부트스트랩 샘플 전반에 걸친 최적 LPS 컷오프의 분포
□ "최소 HR 규칙"을 사용하여 식별되는 최적의 LPS의 강인성 및 일반화 가능도를 추가로 시험하기 위한 부트스트랩 다변량 모의실험.
□ 부트스트랩 샘플 전반에 걸친 극단 피이크는 LPS = 725에서이다.
□ 그의 특유의 피이크를 갖는 LPS 분포는 치료 효과 신호의 강인성을 지지한다.
□ 새로운 잠재적인 확증적 연구를 위해 제안되는 최적의 LPS 컷오프는 LPS≤ 725이다.
- 조직학적으로 모든 GOYA 바이오마커 분석은 강한-GCB를 < 749(GOYA에서 환자의 25%)로서 정의하였고, 이러한 OBRF에 존재하는 바이오마커 분석을 포함한다.
- n = 4명의 환자이고, 이때 725 < LPS < 749이며, 모두 G-CHOP(1 사례)이다.
도 13
치료-목적의 모집단에서 다음의 항-림프종 치료까지의 시간(2차 종점)에 대한 카플란-마이어 추정값
CI, 신뢰 구간; G-CHOP, 오비누투주맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손/프레드니솔론; HR, 위험 비; R-CHOP, 리툭시맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손/프레드니솔론.
도 14
COO 하위유형에 의해 하위분류된, COO 데이터를 갖는 환자에서 치료 부문에 의한 연구자-평가된 PFS의 카플란-마이어 추정값
(A) GCB; (B) ABC; (C) 분류되지 않음.
ABC, 활성화된 B-세포-유사; CI, 신뢰 구간; COO, 기원-세포; GCB, 배중심 B-세포-유사; G-CHOP, 오비누투주맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손/프레드니솔론; HR, 위험 비; R-CHOP, 리툭시맙 + 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손/프레드니솔론.
본 발명은 또한 하기 표를 참고한다.
[표 1]
기선 환자 및 질환 특징(치료-목적의 모집단)
Figure pct00006
[표 2]
효능 종점의 요약(치료-목적의 모집단)
Figure pct00007
[표 3]
각 그룹(바람직한 용어 수준에서: 안전성 모집단)에서 5% 이상의 환자에 의해 보고된 등급 3 내지 5의 AE 및 위중한 AE를 포함한 AE에 대한 요약
Figure pct00008
[표 4]
강한-GCB 및 모든 다른 환자에서의 임상적 결과에 미치는 G-CHOP 및 R-CHOP의 효과
Figure pct00009
[표 5]
연구 약물 노출
Figure pct00010
[표 6]
계통 기관 부류(SOC: System Organ Class) 및 바람직한 용어에 의해 열거된, 각각의 치료 부문에서 적어도 10%(바람직한 용어 수준에서)의 발병률을 갖는 임의의 등급의 AE를 보고하는 환자의 수(및 %)(안전성 모집단)
Figure pct00011
[표 7]
바람직한 용어 또는 미리정의된 범주로서 특별히 흥미로운 AE의 요약(안전성 모집단)
Figure pct00012
실시예 1 - 일반적 재료 및 방법
나노스트링 LST 검사에 대한 설명
달리 지시되지 않는다면, 나노스트링 LST 검사를 본 발명에 있어서 판매업체(나노스트링 테크놀로지스 인코포레이티드, 미국 워싱턴주 시애틀 소재)의 매뉴얼에 따라 수행하였다. 검사에 대한 추가의 안내는 상기 인용된 스코트의 2014년 및 2015년의 문헌에 제공된다.
COO 검사의 개요
나노스트링의 LST 유전자 발현 검사를 개발하여 엔카운터(nCounter: 등록상표) 분석 시스템 상에서 COO 하위유형을 식별할 수 있었다. 나노스트링 기술과 함께, 엔카운터(등록상표) 유전자 발현 검사는, 역전사 또는 증폭을 사용하지 않으면서 엔카운터 리포터 프로브(nCounter Reporter Probe)로 칭해지는 분자 바코드(barcode)에 의해 mRNA를 검출하는 초민감성의 고도로 복합화된 방법을 제공한다(상기 인용된 가이스의 문헌). mRNA의 검출은 디지털 검출, 및 색 코딩된 프로브 쌍의 이용을 통한 표적 분자의 직접적인 분자 바코딩에 근거한다. 프로브 쌍은 그의 5' 단부 상의 신호를 운반하는 리포터 프로브, 및 포획 프로브로 구성된다. 색 코드는 6개 위치를 운반하고, 각각의 위치는 4개 색중 하나일 수 있고, 이에 따라 표적으로의 직접적 혼성화를 위해 단일 웰에 함께 혼합될 수 있는 매우 다양한 태그를 허용하면서도 여전히 개별적으로 분해되고 데이터 수집 동안 식별될 수 있다. 나노스트링 리포터 및 포획 프로브 기술은 색-코딩된 바코드를 운반하는 리포터 프로브 및 데이터 수집을 위해 착체가 고정화될 수 있도록 하는 포획 프로브를 이용한다.
mRNA를 표적화하기 위해 과량의 견본 RNA를 주문제작된 LST 프로브 쌍과 혼합하여 각각의 표적이 프로브 쌍을 발견하도록 보장한다. 혼성화 이후, 과량의 미결합된 프로브를 씻어내고, 표적/프로브 복합체를 데이터 수집을 위한 카트리지(cartridge)에 고정화시켰다. 데이터 수집을 엔카운터(등록상표) 디지털 분석기에서 실행하였다. 디지털 영상을 처리하고, 샘플 정규화 및 데이터 분석을 위해 준비된 쉼표 분리된 값(CSV: comma separated value) 형식으로 바코드 카운트를 도표화하였다. 데이터 분석 이전에, 각각의 샘플을, 합성 RNA 기준 대조군 전사물 및 항존 유전자로부터 생성된 기준 카운트로 정규화시킨다.
환자 샘플에서의 COO 상태의 결정
LST 검사는 20가지 유전자에 대한 각각의 환자의 유전자 발현 데이터를 생성한다(표 5 참조). 이들 유전자중 5가지는 항존 기준 유전자인 반면, 15가지의 나머지 유전자는 GCB를 ABC로부터 구별하고, 구체적으로 8가지의 유전자는 ABC-유사 DLBCL에서 과발현되는 것으로 알려져 있고, 7가지 유전자는 GCB-유사 DLBCL에서 과발현되는 것으로 알려져 있다(상기 인용된 스코트의 2014년 문헌에 근거함).
[표 8]
나노스트링 LST 검사에서의 20가지 유전자 목록
Figure pct00013
선형 예측자 스코어(LPS)는 유전자 발현 데이터에 근거하여 각각의 환자에 대해 계산된다. LPS는 LST 검사에서 20가지 유전자의 유전자 발현의 가중합이다:
[수학식 I]
LPS(X) = ΣjαjXj
상기 식에서,
Xj는 유전자 j에 대한 유전자 발현이고,
αj는 유전자 j에 대한 계수이다.
이어서 각각의 환자에 대한 LPS를 미리정의된 역치에 대해 비교하여 환자에 대한 DLBCL COO 하위유형을 결정한다. 개별적인 LPS 스코어를 위해, ABC 하위유형의 일부일 것인지 GCB 하위유형의 일부일 것인지의 여부에 대해 가능성을 결정한다. ABC일 가능성이 90% 보다 큰 종양은 ABC로 고려되는 반면, 90% 보다 큰 GCB일 가능성은 GCB로 고려된다. ABC 또는 GCB일 가능성이 90% 미만인 종양은 분류되지 않는 것으로 고려된다(상기 인용된 스코트의 2014년 및 2015년 문헌).
G-CHOP 및 R-CHOP 섭생
환자는 2가지 면역화학요법 섭생중 하나에 의한 치료를 제공받을 것이다:
ㆍ G-CHOP(연구 부문): 오비누투주맙과 병용된 CHOP 화학요법
ㆍ R-CHOP(대조군 부문): 리툭시맙과 병용된 CHOP 화학요법
오비누투주맙 및 리툭시맙은 이러한 프로토콜의 목적을 위한 연구용 의약품으로서 고려된다.
연구 부문에서, 오비누투주맙은 8 주기의 경우 각각의 21-일 주기의 1일째 1000 mg의 절대적(일정한) 용량으로 IV 주입에 의해 투여될 것이다. 주기 1 동안, 오비누투주맙을 또한 8 및 15일에 주입할 것이다. 오비누투주맙 및 CHOP 둘 다가 제공되는 날짜의 오비누투주맙의 투여는 화학요법 투여가 시작되기 적어도 30 분 전에 완료되어야 한다. 오비누투주맙 주입의 기간이 CHOP 주입의 투여를 다음날 필요하게 만든다면, CHOP 화학요법은 오비누투주맙 투여 후 다음 날에 제공될 수 있다. CHOP 화학요법은 섹션 4.5.3.a 및 표 5에 기재된 바와 같이 최대 6 또는 8 주기 동안 제공될 것이다. 단지 6 주기의 CHOP 화학요법이 투여되어야 한다면(표 5 참조), 오비누투주맙의 주기 7 및 8은 21일 마다의 계획상으로 단독요법으로 제공될 것이다. 연구의 대조군 부문에서, 375 mg/㎡ 용량의 리툭시맙은 8 주기의 경우 각각의 21-일 주기의 1일째 IV 주입에 의해 투여될 것이다. 리툭시맙은 CHOP 이전에 투여될 것이고, 주입은 완료되어야 하고, 환자는 CHOP를 시작하기 적어도 30 분 전에 관찰된다. 리툭시맙 주입의 기간이 CHOP 주입의 투여를 다음날 필요하게 만든다면, CHOP는 2일째 제공될 수 있다. 단지 6 주기의 CHOP 화학요법이 투여되어야 한다면(표 5 참조), 리툭시맙의 주기 7 및 8은 21일 마다의 계획상으로 단독요법으로 제공될 것이다.
리툭시맙 및 화학요법의 용량은 스크리닝 평가에서 환자의 체중에 기초하여 계산되어야 한다(-14일 내지 -1일). 모든 후속적인 용량을 위한 스크리닝으로부터 체중에서 10% 보다 큰 변화의 경우, 리툭시맙 및 화학요법의 용량은 이에 따라 변형되어야 한다. 용량 조정을 일으키는 체중은 추가의 용량 조절을 위한 새로운 기준 중량으로서 취해질 것이다. 섹션 3.6.1.c에 주지된 바와 같이, ASCO, EORTC, 및 ESMO 가이드라인에 따라서 60세 이상의 환자 및 동반질병을 갖는 환자의 경우 G-CSF의 사용이 권고된다. 이는 G-CHOP에 의해 치료된 모든 환자의 경우 주기 1에서 매우 권고된다.
오비누투주맙(기술적 데이터)
a. 제형
오비누투주맙은 명목상 1000 mg의 오비누투주맙(G3 재료)을 함유하는 50-㎖의 약학 등급 유리 바이알에서 단일-용량의 멸균 액체 제형으로서 제공된다. 제형화된 약품은 히스티딘, 트레할로스, 및 폴록사머 188에 제형화된 25 mg/㎖의 약물 물질(G3)로 구성된다. 바이알은 41 ㎖를 함유한다(2.5% 과충전됨). 추가의 세부사항을 위해, 오비누투주맙 연구자의 브로셔(Obinutuzumab Investigator's Brochure)를 참조한다.
b. 취급 및 저장
오비누투주맙 약품에 대해 권고된 저장 조건은 2℃ 내지 8℃에서 광 보호되는 것이다. 0.9% 염화 나트륨(NaCl)에서의 오비누투주맙 희석을 위한 화학적 물리학적 사용 안정성은 24 시간 동안 2℃ 내지 8℃ 및 주위 온도에서 주위 실내광하에 입증되었다. 제조된 희석된 생성물은 즉시 사용되어야 한다. 즉시 사용되지 않는다면, 사용 저장 시간 및 사용 전 조건은 사용자의 책임이고, 정상적으로 2℃ 내지 8℃에서 24 시간 보다 더 길지 않다. 오비누투주맙은 동결되거나 진탕되지 않아야 한다. 부드럽게 혼합한다. 모든 전달 절차는 엄격한 무균성 기법에 대한 고수를 필요로 한다. 잠재적 흡착으로 인해 추가적인 라인내 필터를 사용하지 않는다. 추가의 세부사항을 위해, 오비누투주맙 연구자의 브로셔를 참조한다.
c. 오비누투주맙 용량 및 계획
오비누투주맙은 8 주기의 경우 각각의 21-일 주기의 1일째 1000 mg의 절대적(일정한) 용량으로 IV 주입에 의해 투여될 것이다. 오비누투주맙은 CHOP 이전에 투여될 것이고, 환자는 CHOP를 시작하기 30분 전에 관찰되어야 한다. CHOP가 오비누투주맙 치료법의 긴 기간으로 인해 1일에 완료되지 않는다면, CHOP 화학요법은 2일에 투여될 수 있다. 주기 1 동안, 오비누투주맙은 또한 8일 및 15일에 주입될 것이다. CHOP 화학요법이 주기 7 및 8에 제공되지 않는다면, 오비누투주맙은 단독요법으로서 투여될 것이다.
d. 오비누투주맙 제조
IV 주입을 위해 의도된 오비누투주맙 약품은, 0.9% NaCl이 함유된 주입 백내로 약품을 4 mg/㎖의 최종 약물 농도로 희석시킴으로써 제조된다. 0.9% NaCl이 함유된 250-㎖ 주입 백을 사용하여, 40 ㎖의 염화 나트륨을 회수하여 버린다. 40 ㎖의 오비누투주맙을 단일 유리 바이알로부터 회수하여 주입 백내로 주입한다(바이알에 남은 임의의 사용되지 않은 오비누투주맙 부분을 버린다). 주입 백을 부드럽게 뒤집어서 용액을 혼합하고; 진탕시키지 않는다. 폴리비닐 클로라이드(PVC), 폴리우레탄 (PUR), 또는 폴리에틸렌을 제품 접촉면으로서 갖는 투여 세트, 및 폴리올레핀, 폴리프로필렌(PP), PVC, 또는 폴리에틸렌을 제품 접촉면으로서 갖는 IV 백은 상용가능하고 사용될 수 있다. 판지 상자 상에 찍힌 유효 기간이 지난 오비누투주맙을 사용하지 않는다.
e. 오비누투주맙 투여
오비누투주맙은 완전한 응급 소생 설비가 즉각적으로 이용될 수 있는 임상적 환경에서 환자(입원 환자 또는 외래 환자)에게 투여되어야 하고, 환자는 항상 연구자의 밀접한 감시하에 놓여야 한다. 급속 정맥 주사(IV push) 또는 일시 정맥 주사(IV bolus)로서 투여하지 않는다. 제1의 주입 종료 후, IV 주사선 또는 중심 정맥 카테터는, 필요할 경우 IV 약물을 투여할 수 있게 하기 위해서, 2 시간 이상 동안 제자리에 유지되어야 한다. 2 시간 이후 부작용이 발생하지 않는 경우, IV 주사선을 제거하거나 중심 정맥 카테터를 제거한다. 후속적인 주입을 위해, 진입부(IV 주사선 또는 중심 정맥 카테터를 통해서)는 주입 종료로부터 적어도 1 시간 동안 제자리에 유지되어야 하고, 1 시간 이후 부작용이 발생하지 않는 경우, IV 진입부를 제거할 수 있다. 오비누투주맙의 투여 이전에, 섹션 4.3.5, 일반적 예방책(종양 용해 증후군의 예방 및 예비투약의 사용에 관한 안내를 위함)을 참조한다. 오비누투주맙의 제1 및 후속적 주입에 대한 지시사항은 표 9에 제시된다.
[표 9]
오비누투주맙의 제1 및 후속적 주입물의 투여
Figure pct00014
오비누투주맙은 전용 주사선을 통해 느리게 IV 주입되어야 한다. IV 주입 펌프는 오비누투주맙의 주입 속도를 조절하기 위해 사용되어야 한다. 급속 정맥 주사 또는 일시 정맥 주사로서 투여하지 않는다. 오비누투주맙 및 CHOP 둘 다 제공되는 날에, 오비누투주맙은 CHOP 이전에 투여될 것이고, 환자는 CHOP를 시작하기 30분 전에 관찰되어야 한다. CHOP 화학요법은 오비누투주맙 투여와 동일한 날짜에 제공될 수 없다면 그 다음날 투여될 수 있다. CHOP와 병용되어 제공되는(주기 1 내지 6 또는 주기 1 내지 8의 1일) 각각의 오비누투주맙 주입 이전에, 환자는 CHOP 섭생의 각각의 주기에 대해 특정화된 경구 프레드니손(100 mg)의 1일 용량을 섭취해야 한다. 연구자에 의해 적절한 것으로 여겨질 경우 IRR의 위험이 높은 환자에 대하여 코르티코스테로이드(예를 들어, 100 mg의 IV 프레드니솔론 또는 등가물)의 예방학적 사용이 또한 고려될 수 있고, 또한 오비누투주맙 주입 이전에 투여되어야 한다. IRR 및 아나필락시스(anaphylaxis)를 처치하기 위해, 섹션 4.3.6.a 및 표 3을 참조한다.
CHOP 화학요법
CHOP는 DLBCL의 치료를 위한 표준 치료법으로서 고려된다. CHOP 화학요법을 8 주기로 투여할 것인지 6 주기로 투여할 것인지의 여부를 연구하기 전에, 중심 선택에 의해 자리를 선택할 것이다.
a. 투여량 및 투여
CHOP 화학요법은 IV 사이클로포스파미드, IV 독소루비신, 급속 정맥 주사로 투여되는 빈크리스틴, 및 경구적 프레드니손 또는 프레드니솔론으로 구성된다. 표준 CHOP는 6 내지 8의 21-일 주기 동안 투여될 것이다. 주기 7 및 8에서 CHOP 화학요법은 6 대 8의 계획된 주기에 대한 중심 예상 선택(center's prospective choice)에 따라 투여되어야 한다.
ㆍ 1일에 사이클로포스파미드 750 mg/㎡을 정맥내 투여함
ㆍ 1일에 독소루비신 50 mg/㎡을 정맥내 투여함
ㆍ 1일에 빈크리스틴 1.4 mg/㎡을 급속 정맥내 투여함(권고된 최대치는 2.0 mg임)
ㆍ 1 내지 5일에 프레드니손 100 mg/일을 경구적으로(PO) 투여함
주석: 프레드니손의 용량은 미국 국립 통합 암 네트워크(National Comprehensive Cancer Network)의 권고(2010)에 따르고, 이는 크루츠만(Cruzman) 등의 문헌(1999); 히데만(Hiddemann) 등의 문헌(2005)에 근거하였다. 프레드니손이 이용될 수 없거나 선택 치료법이 아닌 국가에서는 프레드니손은 프레드니솔론(1:1-전환, 100 mg)으로 대체될 수 있거나, 프레드니손/프레드니솔론에 접근할 수 없는 국가 또는 지역에서는 이는 80 mg의 메틸프레드니솔론으로 대체될 수 있다.
CHOP는 각각의 연구 지역에서 리툭시맙 또는 오비누투주맙 주입 이후 표준 제조 및 주입 절차에 따라서 투여될 것이다. 제조, 투여, 및 저장 가이드라인을 위한 특정한 패키지 삽입물을 참조한다. 연구자의 재량하에, 빈크리스틴의 용량은 최대한 2 mg일 수 있다. 70세 이상인 환자의 경우, 빈크리스틴은 최대한 1.5 mg일 수 있다. BSA는 기관 표준에 따라 최대한 2 ㎡일 수 있다.
오비누투주맙 또는 리툭시맙 및 CHOP가 동일한 날짜에 투여되도록 계획될 경우, 프레드니손(100 mg)을 오비누투주맙 또는 리툭시맙 주입 이전에 제공하도록 권고된다. 오비누투주맙 또는 리툭시맙 투여는 CHOP(사이클로포스파미드, 빈크리스틴, 및 아드리아마이신(adriamycin)) 주입을 적용하기 적어도 30분 이전에 완료되어야 한다. 연구자 또는 지역(예를 들어, 수송의 이유로 인함)에 의해 강하게 선호되는 경우, 리툭시맙 또는 오비누투주맙의 투여는 예비-투약에 의해 CHOP의 투여 1일 전에 허용된다(섹션 4.3.5에 정의됨). 또한, 환자가 IRR(높은 종양 부담, 높은 말초 림프구 수)에 대한 증가된 위험에 처한 경우, 항체(리툭시맙 또는 오비누투주맙) 주입을 2일에 걸쳐 분리하는 것이 허용된다. 또한, 오비누투주맙 또는 리툭시맙 주입 동안 부작용을 겪는 환자에서, 오비누투주맙의 투여는 필요할 경우 다음날 지속될 수 있다. 1 주기 1일 용량의 오비누투주맙이 분할될 경우, 양쪽 주입은 적절한 예비-투약에 의해 제1 주입 속도로 수행되어야 한다(표 2 참조). CHOP가 주기의 1 일에 비해 더 늦게 시작된다면, 21일의 규칙적인 화학요법 간격을 유지하기 위해, 그 다음 주기의 계획된 1일은 CHOP가 실제로 개시되는 날로부터 계산되어야 한다.
실시예 2 - 이전에 치료되지 않은 DLBCL에서의 오비누투주맙 또는 리툭시맙(+ CHOP)[로슈(Roche) GOYA(B021005) 3상 임상 연구에 대한 설명]
환자
적격의 환자는 18세 이상이고: 이전에 치료되지 않은, 조직학적으로 서류상 기록된 CD20-양성 DLBCL(지역 병리학 실험실에서 평가되는 경우); 1 이상의 2-차원적으로 측정가능한 병변(컴퓨터 단층촬영[CT] 스캔에서 > 1.5 cm의 가장 큰 치수); 0 내지 2의 동부 종양학 협력 그룹 기능 상태; 적절한 혈핵학적 기능, 간 기능, 및 신장 기능; ≥ 50%의 좌심실 박출률; 및 ≥ 2의 국제 예후 지수(IPI) 스코어를 가졌다(또한 환자는 1의 IPI 스코어를 갖고 벌키한 질환이 존재하거나 존재하지 않는 60세 이하의 환자, 및 0의 IPI 스코어 및 벌키한 질환, 즉 ≥ 7.5 cm의 병변을 갖는 환자임). 모든 포함/배제 기준은 아래에 상세화된다. 모든 환자는 사전 동의서를 제공하였다.
모든 포함 및 배제 기준
환자는 연구 참가를 위해 다음의 기준을 충족시켜야 했다:
1. 사전 동의서
2. 하기 항목을 사용하여 조직학적으로 서류상 기록된, 이전에 치료되지 않은 CD20-양성 미만성 거대 B-세포 림프종(DLBCL):
a. 검토를 위해 병리학 보고가 이용가능해야 하고 소급적 중앙 실험실 확인을 위해 조직 블록이 발송된다.
b. 포르말린-고정되고 파라핀-함침된 조직 블록이 바람직하지만; 상이한 고정액을 사용하는 국가에서는, 임의의 이용가능한 조직 블록이 허용될 것이고, 고정제 유형에 대한 기록이 포함된다.
c. 조직 블록이 이용가능하지 않은 경우, 15개의 염색되지 않은 슬라이드(3 내지 5 ㎛ 두께)가 허용될 것이다.
d. 임의적인 로슈 임상 보관소 샘플 및 필요한 탐구 바이오마커 샘플은 동일한 조직 블록으로부터 수득될 것이다. 중앙 실험실 확인이 제출된 재료상에서 수행될 수 없는 경우, 진단을 위해 사용되는 염색된 슬라이드가 또한 요청될 수 있다.
3. 다음중 하나의 국제 예후 지수(IPI) 질환 위험 군에 있는 환자: 높음, 높음-중간, 또는 낮음-중간.
a. 낮은 위험군의 환자가 적격이지만, 7.5 cm 이상의 병변으로서 정의되는 벌키한 질환과 무관하게 1의 IPI 스코어를 갖거나 벌키한 질환을 가지면서 0의 IPI 스코어를 가져야 한다.
b. 주석: 벌키한 질환을 갖지 않고 단지 연령으로 인하여 IPI이 1인 환자(즉 다른 위험 인자가 없는 60세를 넘는 환자)는 본 실험에 적격하지 않다.
4. 컴퓨터 단층촬영 스캔 상에서 가장 큰 치수로 1.5 cm를 초과하는 것으로 정의된 적어도 하나의 2차원적으로 측정가능한 병변.
5. 연구 프로토콜 절차에 순응하는 능력 및 의지.
6. 18세 이상의 연령.
7. 0, 1, 또는 2의 동부 종양학 협력 그룹 기능 상태.
8. 심장 다중-게이트 획득 스캔(multiple-gated acquisition scan) 또는 심초음파검사 상에서의 50% 이상의 좌심실 박출률.
9. 다음과 같이 정의된 적절한 혈액학적 기능(광범위한 골수 침범에 의해 확립되는 기저 질환에 기인하지 않는 경우, 또는 연구자에 따른 DLBCL에 의한 비장의 침범에 부차적인 비기능항진증에 기인하지 않는 경우):
a. 9 g/dl 이상의 헤모글로빈;
b. 1.5 x 109/ℓ 이상의 절대 호중구 수;
c. 75 x 109/ℓ 이상의 혈소판 수.
10. 수술적으로 불임이 아닌 남성의 경우: 치료 기간 동안 및 오비누투주맙 또는 리툭시맙의 마지막 투약 후 3 개월 이상까지 차단 피임법의 사용에 동의하거나, 또는 어느 쪽이든 더 긴 CHOP 화학요법에 대한 기관의 가이드라인에 따라 동의하고, 이들의 파트너가 추가적인 피임 방법, 예컨대 경구 피임약, 자궁내 피임 장치, 차단 피임법, 또는 살정제 젤리를 사용해야 한다는 요청에 동의한다.
11. 수술적으로 불임이 아닌 임신 가능성이 있는 여성의 경우: 치료 기간 동안 및 오비누투주맙 또는 리툭시맙의 마지막 투약 후 12 개월 이상까지 2가지 적절한 피임 방법, 예컨대 경구 피임약, 자궁내 피임 장치, 또는 차단 피임법의 살정제 젤리와의 병용된 사용에 동의하거나, 또는 어느 쪽이든 더 긴 CHOP 화학요법에 대한 기관의 가이드라인에 따라 동의한다.
하기 기준중 어느 것이라도 충족시키는 환자는 연구 참가에서 배제되었다:
1. 인간화된 또는 뮤린 단일클론성 항체에 대한 심각한 알레르기성 또는 과민성 반응, 또는 뮤린 생성물 또는 CHOP 또는 오비누투주맙의 임의의 성분에 대한 공지된 민감성 또는 알레르기의 병력.
2. 안트라사이클린(anthracycline)의 이전 수여를 비롯하여, CHOP의 임의의 개별 성분에 대한 사용 금지 사유.
3. 형질전환 림프종을 앓는 환자 및 3b 단계의 소포성 림프종을 앓는 환자.
4. 림프절 생검 또는 국소 방사선조사를 제외한, DLBCL에 대한 이전 치료법.
5. 또 다른 증상(예를 들어, 류마티스 관절염)에 대한 세포독성 약물 또는 리툭시맙에 의한 이전 치료, 또는 항-CD20 항체의 이전 사용.
6. 주기 1을 시작한지 3 개월 이내의 임의의 단일클론성 항체의 이전 사용.
7. 림프종 증후군 조절 이외의 목적의 코르티코스테로이드 사용: > 30 mg/일의 프레드니손 또는 등가물.
a. 30 mg/일 이하의 프레드니손 또는 등가물에 의한 코르티코스테로이드 치료를 받은 환자는 무작위화(주기 1, 1일) 이전에 적어도 4주 기간 동안 안정한 용량 상태에 있는 것으로 문서에 기록되어 있어야 한다.
b. 연구 치료를 시작하기 이전에 림프종 증후군 조절을 위해 글루코코르티코이드(glucocorticoid) 치료가 급히 필요한 경우, 프레드니손 100 mg 또는 등가물을 최대 5일 동안 제공할 수 있지만, 모든 종양 평가는 글루코코르티코이드 치료를 시작하기 이전에 완료되어야 한다.
8. 원발성 중추신경계(CNS) 림프종, 및 림프종, 맨틀(mantle) 세포 림프종에 의한 2차 CNS 침범, 또는 버킷(Burkitt) 림프종으로의 형질전환에 대한 조직학적 증거, 원발성 종격동 DLBCL, 원발성 삼출 림프종, 형질모세포성(plasmablastic) 림프종 및 원발성 피부 DLBCL.
9. 무작위화 이전 28일 이내의 생 백신에 의한 백신 접종.
10. 주기 1을 시작하기 전 28일 이내의 임의의 연구용 치료법.
11. 프로토콜에 대한 순응성 또는 결과의 해석에 영향을 줄 수 있는 다른 악성종양의 병력.
a. 연구 이전의 임의의 시점에서 치유적으로 치료된 기저 또는 편평상피 세포 암종, 또는 피부의 흑색종, 또는 자궁 경부의 상피내암(in-situ carcinoma)의 병력을 갖는 환자는 적격이다.
b. 치유적 목적으로 수술에 의해서만 치료된 임의의 다른 악성 종양 및 등록 전 5년 이상 동안 치료 없이 차도를 나타내는 악성 종양을 갖는 환자는 적격이다.
12. 프로토콜에 대한 순응성 또는 결과의 해석에 영향을 줄 수 있는 제어되지 않는 심각한 공존 질환, 예컨대 심각한 심장혈관 질환[예컨대 뉴욕 심장 학회 분류(New York Heart Association Class) III 또는 IV 심장 질환, 최근 6 개월 이내의 심근 경색, 불안정한 부정맥, 또는 불안정한 협심증] 또는 폐 질환(폐색성 폐 질환 및 기관지경련의 병력 포함)에 대한 증거.
13. 진단용 이외의 최근의 대수술(주기 1의 시작 전 4주 이내).
14. 하기 임의의 비정상적인 실험실 검사 수치(이들 이상성중 어떠한 것도 기저 질환인 림프종에 기인하지 않는 경우):
a. 정상 상한치의 1.5 배를 넘는 크레아티닌(ULN; 크레아티닌 소거율이 정상이 아닌 경우), 또는 40 ㎖/분 미만의 계산된 크레아티닌 소거율[콕크로프트-가울트(Cockcroft-Gault) 공식 사용].
b. 2.5 x ULN 초과의 아스파테이트 아미노전달효소 또는 알라닌 아미노전달효소.
c. 1.5 x ULN 이상의 총 빌리루빈(bilirubin): 길베르트(Gilbert) 질환을 갖는 것으로 문서상 기록된 환자는 총 빌리루빈이 3.0 x ULN 이하인 경우 등록될 수 있다.
d. 치료학적 항응고요법의 부재하에 1.5 x ULN을 초과하는 국제 표준화 비율.
e. 홍반성 항응고제의 부재하에 1.5 x ULN을 초과하는 부분 트롬보플라스틴 시간(partial thromboplastin time) 또는 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간.
15. 주기 1의 시작 전 4주 이내의 공지된 활성 세균, 바이러스, 곰팡이, 마이코박테리아, 기생충, 또는 기타 감염[손발톱 바닥(nail bed)의 곰팡이 감염 제외], 또는 정맥내 항생제에 의한 치료 또는 입원을 필요로 하는 임의의 주요 감염 에피소드(종양 열을 제외한 항생제 치료 과정의 합병증과 관련함).
16. 활성 또는 잠복 결핵이 의심되는 환자.
a. 잠복 결핵은 양성 인터페론-감마 방출 검사에 의해 확인될 필요가 있다.
17. 만성 B형 간염 감염에 대한 양성 시험 결과(양성 HBsAg 혈청테스트로서 정의됨).
a. HBV DNA가 검출불가능한 경우, 잠재 또는 이전 B형 간염 감염(양성 총 간염 B 코어 항체 및 음성 HBsAg로서 정의됨)을 앓는 환자가 포함될 수 있다. 이들 환자는 매달 DNA 시험을 감수해야 한다.
18. C형 간염에 대한 양성 시험 결과(HCV 항체 혈청테스트 시험).
a. HCV 항체에 대해 양성인 환자는, 폴리머라아제 연쇄 반응이 HCV RNA에 대하여 음성인 경우에만 적격이다.
19. HIV 혈청 반응 양성 상태의 공지된 병력.
a. 알려지지 않은 HIV 상태를 갖는 환자의 경우, 국소 조절이 요구된다면 선별시 HIV 시험을 수행할 것이다.
20. 인간 T-림프친화적 1 바이러스(HTLV)에 대한 양성 결과.
a. 풍토성 국가(일본 및 멜라네시아, 및 카리브해 연안, 남부 아메리카, 중앙 아메리카, 및 사하라 사막 이남의 아프리카에 있는 국가) 지역의 환자에 대해 HTLV 시험이 요구된다.
21. 확인된 진행성 다초점 백질뇌병증의 병력을 갖는 환자.
22. 임신 또는 수유.
23. 12 개월 미만의 기대 수명.
연구 고안 및 치료
GOYA는 다중심, 개방-표지의 무작위화된 3상 연구이다. 환자를 무작위화하여(1:1 비), G(주기 1의 1, 8, 및 15일, 및 주기 2 내지 8의 1일에 1000 mg으로 정맥내[IV]), 또는 R(주기 1 내지 8의 1일에 375 mg/㎡으로 IV)의 8회의 21-일 주기 + 하기 용량에서의 CHOP의 6 또는 8 주기를 제공한다: 사이클로포스파미드 750 mg/㎡ IV(1일); 독소루비신 50 mg/㎡ IV(1일); 빈크리스틴 1.4 mg/㎡ IV(1일, 최대 2.0 mg); 및 프레드니손 100 mg/일 경구 투여(1 내지 5일). 양쪽 부문에 대한 CHOP 주기의 수는 사전에 각각의 연구 지역와 일치되었고; 단지 6회의 CHOP 주기가 투여될 경우, 항체는 주기 7 및 8 동안 단독요법으로서 투여되었다. 벌키한 질환 또는 절외 질환의 초기 자리에서의 미리-계획된 방사선요법은 마지막 항체 주기의 1일로부터 8주 이내에 및 치료-종료 평가가 완료된 후에 허용되었다. 예비 투약, 허용되는 공존 치료법, 및 투약 지연/감소에 대한 허용 이유에 관한 세부사항은 보충 부가자료(Supplementary Appendix)에 제공된다. 무작위화는 계획된 화학요법 주기의 수(CHOP의 6/8 주기), IPI 스코어, 및 지리학적 영역(서유럽, 동유럽, 남부 아메리카 및 중부 아메리카, 북부 아메리카, 및 아시아 및 기타 지역)에 따른 계층화에 의한 음성 자동 응답 시스템(interactive voice-response system)을 통해서이다.
GOYA는 유럽 임상 시험 지시문서(European Clinical Trial Directive)(유럽 센터의 경우) 및 의약품 임상시험 실시기준(Good Clinical Practice)을 위한 국제 조화 회의(ICH: International Conference on Harmonization)의 가이드라인에 따라 수행되었다. 프로토콜은 참여 센터의 윤리 위원회에 의해 승인되었고, "ClinicalTrials.gov"에 등록되었다(NCT01287741).
예비-투약, 용량 변경, 및 허용된 치료법
오비누투주맙(G) 또는 리툭시맙(R)의 투여 이전에 모든 환자에게 아세트아미노펜(acetaminophen) 및 항히스타민제를 경구적으로 예비-투약하였다. 사이클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니손(CHOP) 투여는 G 또는 R을 투여한지 적어도 30분 후에 투여되는 것이 권고된다. 각각의 주기에서 G 또는 R이 CHOP와 함께 제공되는 경우, 경구용 프레드니손의 1일 용량을 항체 주입 이전에 투여하였다. 추가적인 글루코코르티코이드 치료법은 또한 주입-관련된 반응의 위험이 높은 것으로 고려되는 환자에게 투여될 수 있다. 종양 용해 예방[적절한 수화 및 알로푸리놀(allopurinol)]은 종양 부담이 높고 종양 용해의 위험이 있는 것으로 고려되는 환자를 위해 권고되었다. 치료 용량은 등급 3 또는 4의 혈액학적 독성 또는 등급 2 내지 4의 비-혈액학적 독성의 사례에서 2주 이하 동안 지연되었고; 독성이 해결되지 않는 경우, 환자를 연구 치료에서 철회시켰다. 용량 감소는 화학요법에 대해 허용되었지만, G 또는 R에 대해 허용되지 않았다.
G-CSF에 의한 예방은 60세 이상이고/이거나 동반질병을 갖는 환자에 대해서, 및 주기 1 동안 G-CHOP 부문의 모든 환자에 대해 권고되었다. G-CSF는 또한 호중구감소증의 치료에 대해 허용되었다. 화학요법(CHOP 이외), 면역요법, 호르몬 치료법[피임약, 호르몬-대체 치료법, 또는 메게스트롤(megestrol) 아세트산염 이외], 및 림프종을 치료할 목적의 임의의 치료법의 사용은 금지되었다(방사선요법에 대하여, 주요 본문 참조).
연구 종점 및 평가
1차 연구 종점은, 무작위화한 날짜로부터 임의의 원인에 의한 질환 진행, 재발, 또는 사망의 최초 발생까지의 시간으로서 정의된, 연구자-평가된 무진행 생존율(PFS)이었다. 편견을 배제하고 1차 분석을 뒷받침하기 위해, PFS는 또한 독립적 검토 위원회(IRC: Independent Review Committee)에 의해 평가되었다. 2차 종점은 전체 생존율(OS), 무병 생존율(EFS), CR 속도, 전체 반응 속도(ORR, CR 및 부분 반응 포함), 무질환 생존율(DFS: disease-free survival), 반응의 기간, 다음 항-림프종 치료까지의 시간(TTNT), 및 안전성을 포함하였다. PFS는 또한 DLBCL 기원-세포(COO) 하위그룹에서 분석되었다(배중심 B-세포-유사[GCB], 활성화된 B-세포-유사[ABC], 및 분류되지 않음; 탐구 분석). COO 분류는 림프종 하위유형 결정 시험만을 사용하는 나노스트링 리서치(나노스트링 테크놀로지스 인코포레이티드, 미국 워싱턴주 시애틀 소재)를 사용하는 유전자-발현 프로파일링에 근거하였다. 연구자에 의해 정기적인 임상 및 실험실 검사 및 CT 스캔을 사용하여 악성 림프종에 대한 수정된 반응 기준(Revised Response Criteria for Malignant Lymphoma)[체슨(Cheson)의 문헌 "J Clin Oncol 25, 2007, 579-586"]에 따라 종양 반응 및 진행을 평가하였다. 18F-플루데옥시글루코스 양전자 방출 단층촬영술(FDG-PET: fludeoxyglucose positron emission tomography) 스캔(PET 스캐너에 의한 자리에서 의무적임)을 받은 환자의 경우, FDG-PET 결과를 합한 별도의 반응 평가를 수행하였다. 1차 종점 분석은 종래의 CT 스캔을 사용하는 모든 환자에 대한 평가에 근거하였다. 마지막 연구 치료 후 4 내지 8주(CT) 또는 6 내지 8주(FDG-PET) 후에, 또는 초기 중단되는 경우 더 빨리 반응을 평가하였다.
실험실 평가, 바이탈 사인(vital sign) 측정값, 및 물리적 검사로부터 식별되는 이상성을 포함하는 모든 부작용(AE) 및 위중한 AE(SAE)를 모니터링하고 기록함으로써 안전성을 평가하였다. 국립 암 연구소(National Cancer Institute)의 부작용에 대한 일반적 용어 기준(Common Terminology Criteria for Adverse Events) v4.0 실험실 안전성 평가를 사용하여 AE를 등급화하였다. 실험실 안전성 평가는 일반 혈액검사 및 혈액 화학, 및 면역학적 매개변수의 시험을 포함하였다. 독립적인 데이터 모니터링 위원회(IDMC: independent data monitoring committee)는 주기적인 안전성 검토를 수행하였다.
통계적 분석
샘플 크기를 계산하여 R-CHOP에 비교되는 G-CHOP에 의한 질환 진행, 재발, 또는 사망의 위험에서의 25% 감소(즉, 0.75의 R-CHOP에 비교되는 G-CHOP의 PFS 위험 비[HR])를 검출할 수 있었고, 이때 0.05의 2-측 알파 수준(two-sided alpha level) 및 80% 검정력(power)을 가졌다. 이를 달성하고 5%의 연간 이탈율을 허용하도록, 405건의 PFS 사례가 1차 분석을 위해 필요하였고, 3년에 걸쳐 1,400명의 환자의 등록을 필요로 하였다.
효능 평가를 모든 무작위화된 환자가 포함된 치료-목적의(ITT) 모집단에서 수행하였다. 안전성 분석 모집단은 임의의 연구 약물(항체 또는 CHOP)을 제공받은 모든 환자를 포함하였다. 2-측 수준 0.05 계층화된 로그-랭크 시험을 사용하여 PFS의 치료 비교를 수행하였다. 카플란-마이어 방법을 사용하여 각각의 치료 부문에 대한 PFS 분포를 추정하였다. 95% 신뢰 구간(CI)을 포함하는 계층화된 콕스 비례-위험 분석을 사용하여 치료 효과의 추정값을 HR로서 표현하였다
IDMC는 3가지 공식적인 잠정적 분석에서 효능 및 안전성을 평가하였다; 2가지는 무용성을 위해서이고, 한가지는 효능을 위해서이다. 미리 계획된 하위그룹 분석은 COO 하위유형을 비롯한 선택된 기선 환자 특징이 PFS에 미치는 영향을 평가하였다.
결과
개요
29 개월의 중간 관찰 이후, 연구자-평가된 PFS 사례의 수는 G(201, 28.5%) 및 R(215, 30.2%)에 의해 유사하였고; 계층화된 위험 비는 0.92였고(95% 신뢰 구간, 0.76 내지 1.11; P = .39); 3-년 PFS 비율은 개별적으로 70% 및 67%였다. 독립적으로 검토된 PFS의 2차 종점인 다른 시간-대-사례 종점, 및 종양 반응 속도는 부문 사이에서 유사하였다. 탐구 하위그룹 분석에서, 배중심 B-세포-유사 하위유형을 갖는 환자는 치료와 무관하게 활성화된 B-세포-유사 하위유형 환자에 비해 더 우수한 PFS를 가졌다. 등급 3 내지 5 부작용(AE; 73.7% 대 64.7%) 및 위중한 AE(42.6% 대 37.6%)의 빈도는 G-CHOP에 의해 더 높았다. 치명적 AE 빈도는 G-CHOP의 경우 5.8%였고, R-CHOP의 경우 4.3%였다. 가장 통상적인 AE는 백혈구감소증(G-CHOP, 48.3%; R-CHOP, 40.7%), 주입-관련 반응(36.1%; 23.5%), 메스꺼움(29.4%; 28.3%), 및 변비(23.4%; 24.5%)였다.
환자 특징 및 치료
환자는 29개 국가에서 207개 센터에 등록하였다. 총 1,418명의 환자를 2011년 7월 내지 2014년 6월 사이에 무작위화시켜 G-CHOP(n = 706) 또는 R-CHOP(n = 712)를 제공하고, 1,188명의 환자(G-CHOP, 587; R-CHOP, 601)에서 계획된 치료를 완료하였다(도 1). AE는 양쪽 부문에서 연구 (항체) 치료 중단의 주요 원인이었고, 이는 G-CHOP 부문에서 더욱 빈번한 것으로 보고되었다. 진행성 질환의 결과로서의 연구 (항체) 치료 중단은 G-CHOP 부문과 비교하여 R-CHOP 부문에서 대략 2배의 빈도였다. 인구통계학적 및 기선 질환 특징은 2가지 부문 사이에서 잘 균형을 이루었다(표 1). COO 하위그룹 정보는 933명의 환자에 대해 이용가능하였고; 하위유형에 의한 분포는 잘-균형을 이루었으며, COO 하위유형 내의 부문 사이에 임상적으로 관련된 차이는 없었다. COO 정보가 누락된 이유는 다음과 같다: 바이오마커 평가를 불가능하게 하는 제한된 중국 샘플 수출 허가(n = 252), 중앙 실험실에 의해 확인되지 않은 CD20-양성 DLBCL(n = 102; 이들 환자가 치료 부문 사이에서 균형을 이루었음을 주지한다: G-CHOP, n = 53; R-CHOP, n = 49), 및 누락된/부적절한 조직(n = 131).
노출의 중간 기간은 G의 경우 25.3(범위, 1 내지 32)주이고, R의 경우 25.3(0 내지 32)주였다. G 및 R의 용량 강도는 개별적으로 95.3% 및 99.1%의 환자에 대해 90%를 초과하였다. 양쪽 부문에서의 대부분의 환자(> 88%)에게 각각의 CHOP 성분의 계획된 용량의 90% 이상을 제공하였다. 항체 투약 지연은 G-CHOP 부문에서 더욱 통상적이었다: 적어도 1회의 7일 이하의 지연(G-CHOP, 34.9%; R-CHOP, 30.0%) 및 7일 초과의 지연(G-CHOP, 13.1%; R-CHOP, 9.1%)(표 5). 새로운(계획되지 않은) 항-림프종 치료를 103명의 환자(G-CHOP, 49; R-CHOP, 54)에게 질환 진행 이전에 제공하였는데, 연구 치료 완료 이후 남은 질환의 징후를 갖는 23명의 환자(G-CHOP, 9; R-CHOP, 14), 및 질환 진행 이후의 227명의 환자(G-CHOP, 102; R-CHOP, 125)에 대한 방사선요법을 포함한다.
효능
2016년 4월 30일자, 및 29 개월 이후의 중간 관찰에 따라, ITT 모집단에서 연구자-평가된 PFS 사례의 수는 G-CHOP(201, 28.5%) 및 R-CHOP(215, 30.2%)의 경우 유사하였고, 계층화된 HR은 0.92(95% CI, 0.76 내지 1.11 ; P = .3868)였다. 추정된 3-년 PFS 비율은 개별적으로 69.6% 및 66.9%였다(도 2a; 표 2).
2차 종점은 1차 종점과 일치하였고, 이때 IRC-평가된 PFS 또는 임의의 다른 시간-대-사례 종점(OS, EFS, DFS, 및 TTNT)에 대하여 치료 부문 사이에 임상적으로 유의적인 차이는 없었다(도 2b, 표 2, 도 13).
하위그룹 및 탐구 분석
G-CHOP 대 R-CHOP의 효능(연구자-평가된 PFS에 대한 계층화되지 않은 HR)은, CHOP를 6 대 8 주기로 제공받은 환자를 비롯한 선택된 환자 하위그룹 전반에 걸쳐 일반적으로 유사하였다(도 3).
상이한 COO 하위유형(연구 치료와 무관함)을 갖는 환자에서 PFS의 카플란-마이어(Kaplan-Meier) 분석은, GCB 하위유형이 ABC 또는 분류되지 않은 하위유형에 비해 더 우수한 결과와 연관되었음을 시사하였다. PFS에 대한 HR은, ABC-GCB를 비교할 경우 1.71(95% CI, 1.31 내지 2.23)이고, 분류되지 않음-GCB를 비교할 경우 1.57(95% CI, 1.14 내지 2.15)이며, ABC-분류되지 않음을 비교할 경우 1.08(95% CI 0.77 내지 1.52)이었고(도 2c); 3-년 PFS 비율은 GCB, ABC, 및 분류되지 않은 하위유형에 대해 개별적으로 75%, 59%, 및 63%였다. 연구자-평가된 PFS의 탐구 분석에서, 이용가능한 COO 데이터를 갖는 933명의 환자의 경우 R-CHOP에 비한 G-CHOP에 대한 계층화된 HR은 0.82(95% CI, 0.64 내지 1.04)였고, 이는 ITT 모집단에 대한 잠재적 선택 편향을 제안한다. GCB COO 하위그룹에서 540명의 환자에 대한 계층화된 HR은 0.72였고(95% CI, 0.51 내지 1.03; 3-년 PFS, 79%[G-CHOP] 대 71%[R-CHOP]); 치료 그룹 사이의 PFS에 있어서 임상적으로 의미있는 차이는, ABC 하위유형(HR, 0.86[95% CI, 0.57 내지 1.29]; 3-년 PFS, 61% 대 58%)을 갖는 243명의 환자 또는 분류되지 않은 COO 하위유형(HR, 1.02[95% CI, 0.60 내지 1.75]; 3-년 PFS, 62% 대 64%; 도 14)을 갖는 150명의 환자에서 찾아볼 수 없었다.
안전성
안전성 모집단에서, 임의의 등급의 적어도 하나의 AE를 겪은 환자의 비율은 G-CHOP 및 R-CHOP 부문에서 유사하였다(개별적으로, 97.0%[683/704] 및 93.5%[657/703])(표 3). 양쪽 부문에서 가장 통상적인 AE는 호중구감소증(G-CHOP, 48.3%; R-CHOP, 40.7%), 주입-관련 반응(IRR; 36.1%; 23.5%), 메스꺼움(29.4%; 28.3%), 및 변비(23.4%; 24.5%)였다(표 6). 등급 3 내지 5의 AE는, SAE(42.6%[300/704] 대 37.6%[264/703])와 마찬가지로, G-CHOP 부문(73.7%[519/704] 대 64.7%[455/703])에서 더욱 통상적이었다. 양쪽 부문에서 가장 통상적인 등급 3 내지 5의 AE는 호중구감소증(G-CHOP, 46.2%; R-CHOP, 38.1%), 감염(19.2%; 15.5%), 열성 호중구감소증(17.5%; 15.2%), 및 백혈구감소증(13.6%; 10.1%)이었다(표 3).
특별히 흥미로운 AE의 분석은 임의의 등급(뿐만 아니라 등급 3 내지 5의 AE 및 SAE)의 감염, 호중구감소증, IRR, 심장 사례, 혈소판감소증, 및 출혈성 사례가 R-CHOP에 비해 G-CHOP에 의해 더욱 통상적임을 보여주었다(표 7). 중요하게는, 간염 B 재활성화의 비율은 R-CHOP(0.9%)에 비해 G-CHOP(2.3%)에 의해 더 높았고, 대부분의 사례는 등급 1 또는 2였고, 등급 3 또는 4의 사례는 두가지 부문 사이에서 잘 균형을 이루었다(G-CHOP 0.3% 대 R-CHOP 0.3%). 특별히 흥미로운 모든 다른 AE 그룹, 즉 기회 감염, 종양 용해 증후군, 2차 악성종양, 및 위장관 천공(농양 배제)은 두 부문에서 유사한 빈도로 발생하였다(표 7).
각각의 부문에서 환자의 유사한 비율에게 연구 동안 적어도 1회 용량의 G-CSF를 제공하였다(G-CHOP, 611[86.5%]; R-CHOP, 586[82.3%]).
R-CHOP 부문에 비해 G-CHOP 부문에서 더 높은 비율의 환자가 AE에 기인하여 1개 이상의 연구 치료 성분을 중단하였다(84[11.9%] 대 60[8.5%]). 치명적 AE를 71명의 환자가 경험하였고(G-CHOP, 5.8%[41/704]; R-CHOP, 4.3%[30/703]) 표 3에 상세히 기재되어 있다.
논의
이전에 치료되지 않은 DLBCL을 앓는 환자에 대한 현행 연구에서, G-CHOP 및 R-CHOP는 모든 시간-대-사례 종점에 대하여 유사한 효능을 나타내었고, 연구자-평가된 PFS의 1차 연구 종점은 충족되지 않았다. 공격성 NHL을 갖는 모집단에서 R-CHOP에 비한 G-CHOP의 우수성의 결여는 CLL 및 FL에서 G를 평가한 연구 결과와 모순된다. GALLIUM 연구에서, G-기반의 유도 및 유지 치료법은 1,202명의 이전에 치료되지 않은 FL 환자에서 연구자-평가된 PFS를 R-기반의 치료법에 비해 유의적으로 개선시켰다(상기 인용된 마르쿠스의 문헌). G 및 R 둘 다 3상 CLL11 연구에서 클로람부실과 병용될 경우, G는 또한 치료되지 않은 CLL 환자(n = 663)에서 PFS를 R에 비해 연장시켰다(상기 인용된 고에데의 문헌).
FL 및 CLL 환자에서 G-기반의 치료법의 이점이 제공되므로, GOYA에서 DLBCL 환자에서 G-CHOP의 이점의 결여는 예상되지 않았다. 이는 단순히 무활동성 림프구증식 질환, 예컨대 FL 및 CLL, 및 공격성 질환, 예컨대 DLBCL 사이의 생물학적 및 임상적 프로파일에서의 차이로부터 생성되었을 것이다[렌츠(Lenz)의 문헌 "N. Engl. J. Med. 362, 2010, 1417-1429"; 상기 인용된 림의 문헌]. 실제로, 오비누투주맙은 덜 공격적이거나 FL과 같이 배중심으로부터 유래된 림프종에서 더욱 유리할 수 있다. 배중심으로부터 유래되고 다른 DLBCL 하위유형에 비해 더욱 FL과 유사한 것으로 공지되며[모린(Morin)의 문헌 "Nature 476 2011, 298-303"; 샤퍼(Shaffer)의 문헌 "Nat. Rev. Immunol. 2, 2002, 920-932"], ABC 및 분류되지 않은 하위유형에 비해 더욱 우호적인 예후 및 상이한 면역 미세환경을 갖는 GCB 하위유형에 대하여 GOYA에서 R-CHOP에 비해 G-CHOP가 유리한 경향은 상기 결과를 지지하는 것으로 보인다. 오비누투주맙 및 리툭시맙의 상이한 작용 방식은 또한 FL 및 DLBCL에서 이들 제제의 차등적 이점에 있어서 일정 역할을 할 수 있지만, 이러한 진술을 뒷받침하는 어떠한 데이터도 이용가능하지 않다. GOYA 바이오마커 데이터의 진행중인 분석은 이들 차이에 대한 추가의 이해를 제공할 것이다. 주목할만 하게는, 주기 1에서의 투약 중지 및 생략은 G-CHOP에 의해 더욱 빈번하였는데, 이는 AE(IRR 및 혈구감소증)의 더 높은 비율을 반영하고; 이는 R-CHOP와 비교된 효능 이점의 결여에 기여했을지도 모른다.
리툭시맙이 최초로 CHOP에 첨가된 이후 결과가 극적으로 개선된 이래로(상기 인용된 코이피어의 문헌), DLBCL 환자의 처치시 큰 진보는 이루어지지 않았다. 무작위화 시험은 주기들 사이의 단축된 간격의 이점[컨닝햄(Cunningham)의 문헌 "Lancet 381, 2013, 1817-1826"], 또는 고-용량 화학요법에 의한 강화 및 자가 줄기 세포 이식으로부터의 이점[스티프(Stiff)의 문헌 "N. Engl. J. Med. 369, 2013, 1681-1690"; 쉬미츠(Schmitz)의 문헌 "Lancet Oncol 13, 2012, 1250-1259']을 보여주는데 실패했고; 보르테조밉(bortezomib)의 R-CHOP로의 첨가 또한 비-GCB DLBCL를 앓는 환자의 무작위화 시험에서의 결과를 개선시키지 못했으며[레오나르드(Leonard)의 문헌 "Blood 126, 2015, 811"], 레날리도미드(lenalidomide)에 의한 유지는 OS를 개선시키지 않았다[티에블레몬트(Thieblemont)의 문헌 "Blood 128, 2016, 471"]. DLBCL의 공격적 행동이 제공되므로, 상이한 작용 방식을 갖는 신규 항-CD20 항체에 의해 리툭시맙을 대체하는 것은 화학요법에 대한 무반응성을 극복하기에 충분하지 않을 수 있다. 약물-컨주게이트화 항체 또는 항-BCL2 제제의 R-CHOP와의 병용은, 최근의 1/2 상 연구의 예비 결과에 의해 제시되듯이, 더욱 유망할 수 있다[젤레네츠(Zelenetz)의 문헌 "Blood 128, 2016, 3032"; 틸리(Tilly)의 문헌 "Blood 128, 2016, 1853"].
유전자-발현 프로파일링을 사용하는 COO 상태의 결정은, GCB 및 ABC 기원의 하위유형을 포함하여, DLBCL의 생물학적으로 구별되는 하위유형을 식별하였다[렌츠(Lenz)의 문헌 "Proc Natl Acad Sci USA 105, 2008, 13520-13525"; 스코트(Scott)의 문헌 "J. Clin. Oncol. 33, 2015, 2848-2856"]. 이들 분자 하위유형은, DLBCL에 대한 현행 세계 보건 기구(World Health Organization) 분류에서 이들의 포함에 의해 반영되는 바와 같이, 종양발생 및 치료 결과에 대해 중요하게 관여한다[스웨어드로우(Swerdlow)의 문헌 "Blood 127, 2016, 2375-2390"]. GCB 하위유형을 갖는 환자는 전형적으로 더욱 유리한 결과를 갖는 반면, ABC 하위유형은 화학요법 또는 면역화학요법(R-CHOP 포함)에 따른 열등한 결과와 연관되고, 의료 요구가 충족되지 못한 위험성이 큰 환자 집단을 나타낼 수 있다(소급 연구에서 제시됨)(상기 인용된 렌츠의 문헌 "Proc. Natl. Acad. Sci. USA"; 상기 인용된 스코트의 2015년 문헌). GOYA는 COO의 임상적 결과에 대한 영향을 평가하는 가장 큰 유망한 연구이다. COO 하위유형에 의한 PFS의 비교는 GCB DLBCL에서의 더 우수한 결과와 일치하였고, 이때 HR은 ABC를 갖는 환자에서 질환 진행의 위험이 GCB 하위유형에 비해 70% 증가함을 지시한다. 분류되지 않은 하위그룹에 대한 결과는 ABC 하위그룹의 결과와 유사하였고, 이는 몇몇 선행 연구에서 보고된 사항과 대조적이다(상기 인용된 스코트의 2015년 문헌). 흥미롭게는, COO 분류는 ORR 및/또는 다른 유망하게 정의된 연구에서 PFS의 예비 평가, 예컨대 REMoDL-B[다비에스(Davies)의 문헌 "Blood 126, 2015, 812"] 또는 PYRAMID(상기 인용된 레오나르드의 문헌)(이들 연구가 상이한 COO 검사를 사용하였지만)와 상관관계가 없다. DLBCL의 COO 하위유형을 목표로 하는 특정 치료는 결과를 개선시키기 위한 대안의 전략을 제공할 수 있다. B-세포 수용체 또는 NF-κB 경로에 대한 선택적 표적화는, 레날리도미드 또는 이브루티닙(ibrutinib)을 R-CHOP와 함께 평가하는 2상 연구의 결과에 의해 제안되는 바와 같이, 예를 들면, DLBCL 하위유형(ABC 또는 비-GCB)에서 유리한 것으로 입증될 수 있다[노바코브스키((Nowakowski)의 문헌 "J Clin Oncol 33, 2015, 251-257"; 비톨로(Vitolo)의 문헌 "Lancet Oncol. 152014, 730-737"; 유네스(Younes)의 문헌 "Lancet Oncol 15, 2014, 1019-1026"]. 이들 전략은 현재 무작위화된 3상 연구에서 평가중이다.
G-CHOP-치료된 환자 사이에서 보고된 AE의 프로파일 및 성질은 새로운 안전성 신호없이 예상된 바와 같았다. 등급 3-5 AE, SAE, 및 AE에 의한 치료 중단의 발생은 R-CHOP 그룹에 비해 G-CHOP 그룹에서 약간 더 높았고, 다른 연구에서 보고된 결과와 일치하였다. 이들 차이는 G 및 R의 상이한 구조 및 생물학적 특징에 기인할 수 있다.
결론적으로, 현행 연구에 따르면, G-CHOP는 이들 환자를 위한 표준 치료를 유지하는 R-CHOP와 비교하여 이전에 치료되지 않은 DLBCL을 앓는 환자의 거대 모집단에서 PFS를 개선시키지 않은 것으로 입증되었다. 새로운 안전성 신호는 확인되지 않았다.
실시예 3 - DLBCL의 신규 하위그룹에서 리툭시맙에 비한 오비누투주맙의 우수성(예측적 바이오마커-정의됨; GOYA 3상 임상 연구의 탐구 분석에 대한 설명 및 결과)
실시예 3.1 - 가자이바(상표명)-CHOP는 DLBCL의 바이오마커-정의된 하위집합에서 리툭시맙-CHOP에 비해 우수하다 - 로슈 GOYA(BO21005) ph3 임상 실험으로부터의 결과
요약
리툭시맙(R) + CHOP 화학요법은 이전에 치료되지 않은 미만성 거대 B-세포 림프종(DLBCL)에서의 표준 치유법이다. 오비누투주맙(G)은 당조작된, 제II형 항-CD20 단일클론성 항체이다. GOYA는 이전에 치료되지 않은 후기-단계의 DLBCL에서 G-CHOP 및 R-CHOP를 비교하는 무작위화된 3상 연구였다. 1L DLBCL에서의 GOYA 시험은 그의 1차 종점을 충족시키지 않았지만[계층화된 HR, PFS: 0.92(95% CI 0.76 내지 1.12)], GALLIUM 시험은 1L FL에서 리툭시맙에 비한 가자이바의 우수성을 입증하였다(HR 0.66, 95% CI 0.51 내지 0.85; 현재 출원중). GOYA의 탐구 분석에서, 리툭시맙에 비한 가자이바(상표명)의 우수성은 GCB DLBCL 환자의 하위집합 및/또는 CD58에서 돌연변이를 갖고/갖거나 CD58의 발현이 낮은 환자에서도 발견된다. 이는 DLBCL의 바이오마커-정의된 하위그룹에서 가자이바 이점이 최초로 확인된 것이다. 결과로부터, 가자이바에 반응하는 GCB DLBCL 환자의 하위집합(들)은 몇몇 방식으로, 예를 들어 BCL2 전좌 및 BCL2 단백질 과발현을 결정함으로써, 또한 유전자 발현 프로파일링을 측정함으로써, 예를 들어 선형 예측자 스코어 LPS에 대한 신규한 컷오프를 사용하는 나노스트링 기원-세포(COO) 검사에 의해 식별될 수 있음을 알 수 있다.
방법
하위그룹 배중심 B-세포(GCB), 활성화된 B-세포(ABC), 및 분류되지 않은 세포로의 기원-세포(COO) 분류는 림프종 하위유형 결정 시험만을 사용하는 나노스트링 리서치(나노스트링 테크놀로지스 인코포레이티드, 미국 워싱턴주 시애틀 소재)를 사용하는 유전자-발현 프로파일링에 근거하였다. 선형 예측자 스코어(LPS)는 GOYA에서 -1138 내지 4504의 범위를 갖는 연속 변수(나노스트링 림프종 하위유형 결정 검사에서 유전자의 유전자 발현에 대한 가중된 평균)이다. 정상적으로, LPS를 사용하여 환자를 COO 하위그룹인 GCB, ABC, 분류되지 않음으로 분류하였다. 디폴트 COO 알고리즘은 GCB 또는 ABC인 경향에 대하여 90% 이상의 컷-오프에 근거하는 GCB/ABC 분류에 의한 베이즈의 방법을 사용한다(분류되지 않은 하위그룹은 완충물로서 작용함). LPS는 임상적 결과에 대해 최초로 직접 분석되었다. GOYA 시험에 있어서 탐구 비-특이적 분석에서 치료 효과(G-CHOP 대 R-CHP의 효능)를 평가하기 위한 연속 변수로서 LPS를 처리하였다. BCL2 이중 색 분리(바이시스, 애봇 몰레큘라)를 사용하고, 파운데이션 메디슨 차세대 서열분석 검사, 파운데이션원 헴에 의해 BCL-2 전좌를 평가하였다. 벤타나 연구용 IHC 검사를 사용하여 BCL-2 단백질 발현을 평가하였다(BCL2 항체 클론, 124). 트루세크(등록상표) RNA 접근 라이브러리 예비 키트를 사용하여 GOYA 시험에서 전체-전사체 유전자 발현을 평가하였다. 파운데이션원 헴 유전자 패널을 사용하여 CD58 돌연변이를 식별하였다.
결과
R(R-CHOP)에 비해 G(G-CHOP)로부터 이점을 갖는, DLBCL의 바이오마커-정의된 하위그룹을 식별하였다:
ㆍ BCL2 전좌된 환자(도 4 참조)
ㆍ BCL2 단백질 발현 양성 환자(도 5 참조)
ㆍ BCL2 단백질 발현 양성인 BCL2 전좌된 환자(도 6 참조)
ㆍ GCB DLBCL 환자의 하위집합. 이들은 다음과 같이 식별될 수 있다:
o 선형 예측자 스코어의 신규한 컷오프에 의해 신규한 하위그룹 "강한-GCB"로 분류된 GCB 환자의 신규한 하위그룹(컷오프 미만의 LPS를 갖는 환자)(도 7 참조)
o 또는 높은 BCL2 유전자 발현을 갖는 GCB 환자
o 또는 BCL2 단백질 발현 양성인 GCB 환자
o 또는 BCL2 전좌를 갖는 GCB 환자
o 또는 BCL2 전좌를 갖고 BCL2 단백질 발현 양성인 GCB 환자(도 8)
ㆍ 일반적으로, CD58 돌연변이된 환자, 및/또는 CD58의 발현이 낮은 환자(도 9 참조)
실시예 3.2 - DLBCL의 신규한 분자의 FL-유사 하위그룹에서의 리툭시맙에 비한 오비누투주맙의 우수성 - 3상 GOYA 시험으로부터의 결과
방법
GOYA는 1418명의 DLBCL 환자(pts)에서 1L G-CHOP를 R-CHOP와 비교하는 개방-표지의 무작위화된 3상 연구였다. 치료 이전에 수집되고 중앙 실험실에서 소급적으로 시험된, 포르말린 고정되고 파라핀-함침된 종양 조직 상에서 바이오마커 시험을 수행하였다. LST만을 사용하는 나노스트링 리서치(나노스트링 테크놀로지스 인코포레이티드, 미국 워싱턴주 시애틀 소재)를 사용하여 933명의 환자에서 COO를 평가하였다. 분자 특징화를 위해 사용된 추가적인 바이오마커 분석은 파운데이션원(등록상표) 헴(FOH) 패널(n = 499명 환자)을 사용하는 467개 유전자에 대한 DNA-표적화된 서열분석을 포함하였고, 552명의 환자에서 트루세크(등록상표) RMA 서열분석을 사용하여 전체-전사체 유전자 발현을 평가하였다. 바이시스 LSI 이중 색 분리 FISH 프로브를 사용하여 BCL2 전좌를 식별하였고(n = 644명 환자; FISH 컷-오프, 50%), 벤타나 연구용 IHC 검사를 사용하여 BCL2 발현을 평가하였으며(BCL2 항체 클론, 124); BCL2+ IHC를 종양 세포의 50% 이상에서의 중간/강한 염색으로서 정의하였다. 다변량 콕스 회귀 및 엘라스틱 넷 페널티 회귀(알파 = 0.5)를 사용하여 바이오마커 치료 효과를 평가하였다. 또한, 부트스트랩 모의실험을 수행하여 최적 LPS를 식별함으로써(나노스트링 LST), GOYA에서 관찰된 치료 효과의 강인성 및 독립적 연구 모집단의 치료 효과의 일반화 가능도를 반영하였다. 벤자미니-호크버그 절차(유의도, < 5% FDR)를 사용하여 FDR을 추정함으로써 다중 시험 조정을 실행하였다. 최근 공개된 검토내용에 근거하여, MSigDB 보증마크에 의해 정의된 유전자 세트 및 제조된 FL 체세포 돌연변이 보증마크 유전자 세트를 사용하여 유전자-집합 강화에 의해; 초기하(hypergeometric test) 시험을 사용하여 경로 강화 분석을 수행하였다. 모든 환자는 바이오마커 분석에 동의하였다.
결과
연속 변수로서의 LPS의 평가는 G-CHOP로부터 이점을 얻는 GCB 환자의 하위그룹을 식별하였다. 특별히, 배중심 유전자 발현 프로파일의 강한 발현(LPS에 의함)은 GOYA에서의 환자들 사이에서 R-CHOP에 비한 G-CHOP에 의한 치료 결과에서의 이점과 연결된다. 부트스트랩 모의실험은 G-CHOP 이점을 예측하기 위한 최적의 LPS 컷-오프(≤ 725)를, 가장 낮은 LPS 스코어를 갖는 GOYA 환자의 25%(233/933)로서 식별하였다. 이들 환자는 특별히 '강한-GCB' 환자로 지칭되고, GOYA에서 평가가능한 GCB 환자중 43%(233/540)를 구성한다. G-CHOP에 의해 치료된 강한-GCB 환자는 연구자-평가된 무진행 생존율(HR = 0.33, p = 0.0007), 무병 생존율(HR = 0.47, p = 0.003), 및 전체 생존율(HR = 0.41, p = 0.019)에 있어서 R-CHOP에 의해 치료된 환자에 비해 유의적으로 더 우수한 임상적 결과를 달성하였다(도 10, 12; 표 4 참조). 다변량 분석에서, 관찰된 이점은 기선 인구통계 자료 및 질환 특징과 무관하였다. 안전성은 섭생과 유사하였다. 강한-GCB 환자의 분자 특징화를 위해 FOH, 트루세크 RNA, 및 BCL2 IHC/FISH GOYA 데이터를 사용하였다. FOH 데이터에 대한 유전자-집합 분석에서, 다른 GCB 환자와 비교하여, 강한-GCB 환자에서는 FL 환자('약한-GCB': FDR, 3.54e-9)의 특징인 돌연변이가 유의적으로 강화되었다. 특별히, 몇몇 m7-FLIPI 유전자에서의 BCL2 전좌 및 돌연변이는 강한-GCB 환자 대 다른 DLBCL 하위그룹에서 매우 강화되었다(도 11). 중앙 병리학 검토에 있어서 강한-GCB 하위집합에서의 형질전환된 무활동성 NHL에 대한 어떠한 증거도 존재하지 않았다.
결론
GOYA 시험으로부터의 데이터를 분석함으로써, 모든 DLBCL 환자중 적어도 대략 25%를 포함하는 임상적으로 및 분자적으로 구별되는 신규한 GCB DLBCL의 하위그룹('강한-GCB'로서 지칭됨)이 식별되었다. 이러한 구별되는 하위그룹은 유전자-발현 프로파일링(예를 들면, 나노스트링 LST 검사에서 725 미만의 LPS 컷오프를 사용함)에 의해 식별될 수 있고, 또한 FL 환자에서 통상적으로 식별되는 돌연변이를 특징으로 한다(상기 인용된 모린의 문헌). G-CHOP에 의한 치료는 1L DLBCL 환자의 이러한 신규한 하위집합에서 R-CHOP에 비해 실질적인 임상적 이점을 제공한다.
본 발명은 하기 뉴클레오티드 및 아미노산 서열을 참고한다:
서열 번호 1:
오비누투주맙의 중쇄 가변성 영역의 아미노산 서열.
마우스-인간 키메라성 폴리펩티드.
Figure pct00015
서열 번호 2:
오비누투주맙의 KV1 경쇄 가변성 영역의 아미노산 서열.
마우스-인간 키메라성 폴리펩티드.
Figure pct00016
서열 번호 3:
오비누투주맙의 중쇄 가변성 영역을 인코딩하는 핵산 서열.
마우스-인간 키메라성 DNA.
Figure pct00017
서열 번호 4:
오비누투주맙의 KV1 경쇄 가변성 영역을 인코딩하는 핵산 서열.
마우스-인간 키메라성 DNA.
Figure pct00018
서열 번호 5:
오비누투주맙의 중쇄의 아미노산 서열. 가변성 영역은 아미노산 위치 1 내지 119를 포함한다.
Figure pct00019
서열 번호 6:
오비누투주맙의 KV1 경쇄의 아미노산 서열. 가변성 영역은 아미노산 위치 1 내지 115를 포함한다.
Figure pct00020
서열 번호 7:
오비누투주맙의 중쇄 가변성 영역의 핵산 서열(B-HH6).
Figure pct00021
서열 번호 8:
오비누투주맙의 KV1 경쇄 가변성 영역을 인코딩하는 핵산 서열.
Figure pct00022
서열 번호 9:
리툭시맙의 중쇄의 아미노산 서열.
리툭시맙 중쇄 키메라성
Figure pct00023
서열 번호 10:
리툭시맙의 경쇄의 아미노산 서열.
리툭시맙 경쇄 키메라성
Figure pct00024
서열 번호 11:
호모 사피엔스(인간) CD58을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열의 예(변이체 1).
Figure pct00025
서열 번호 12:
호모 사피엔스(인간) CD58의 아미노산 서열의 예(동형체 1).
Figure pct00026
서열 번호 13:
호모 사피엔스(인간) BCL2를 인코딩하는 뉴클레오티드 서열의 예(변이체 알파).
Figure pct00027
Figure pct00028
Figure pct00029
서열 번호 14:
호모 사피엔스(인간) BCL2의 아미노산 서열의 예(동형체 알파).
Figure pct00030
SEQUENCE LISTING <110> F. Hoffmann-La Roche AG NanoString Technologies, Inc. <120> Obinutuzumab treatment of a DLBCL patient subgroup <130> AA1470 PCT S3 <140> PCT/EP2018/071462 <141> 2018-08-08 <150> US 62/542,489 <151> 2017-08-08 <160> 14 <170> BiSSAP 1.3 <210> 1 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> The heavy chain variable region of obinutuzumab; mouse-human chimeric polypeptide <400> 1 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Tyr Ser 20 25 30 Trp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Val Phe Asp Gly Tyr Trp Leu Val Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 2 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> The KV1 light chain variable region of obinutuzumab; mouse-human chimeric polypeptide <400> 2 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Val Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val 115 <210> 3 <211> 357 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleic acid sequence encoding the heavy chain variable region of obinutuzumab; mouse-human chimeric DNA <400> 3 caggtgcaat tggtgcagtc tggcgctgaa gttaagaagc ctgggagttc agtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttccggata cgccttcagc tattcttgga tcaattgggt gcggcaggcg 120 cctggacaag ggctcgagtg gatgggacgg atctttcccg gcgatgggga tactgactac 180 aatgggaaat tcaagggcag agtcacaatt accgccgaca aatccactag cacagcctat 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagaaatgtc 300 tttgatggtt actggcttgt ttactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357 <210> 4 <211> 345 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleic acid sequence encoding the KV1 light chain variable region of obinutuzumab; mouse-human chimeric DNA <400> 4 gatatcgtga tgacccagac tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gcccgccagc 60 attagctgca ggtctagcaa gagcctcttg cacagcaatg gcatcactta tttgtattgg 120 tacctgcaaa agccagggca gtctccacag ctcctgattt atcaaatgtc caaccttgtc 180 tctggcgtcc ctgaccggtt ctccggatcc gggtcaggca ctgatttcac actgaaaatc 240 agcagggtgg aggctgagga tgttggagtt tattactgcg ctcagaatct agaacttcct 300 tacaccttcg gcggagggac caaggtggag atcaaacgta cggtg 345 <210> 5 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> the heavy chain of obinutuzumab <400> 5 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Tyr Ser 20 25 30 Trp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Gly Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Val Phe Asp Gly Tyr Trp Leu Val Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220 Thr His Thr Cys Pro 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60 attagctgca ggtctagcaa gagcctcttg cacagcaatg gcatcactta tttgtattgg 120 tacctgcaaa agccagggca gtctccacag ctcctgattt atcaaatgtc caaccttgtc 180 tctggcgtcc ctgaccggtt ctccggatcc gggtcaggca ctgatttcac actgaaaatc 240 agcagggtgg aggctgagga tgttggagtt tattactgcg ctcagaatct agaacttcct 300 tacaccttcg gcggagggac caaggtggag atcaaacgta cggtg 345 <210> 9 <211> 451 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> the heavy chain of rituximab <400> 9 Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Asn Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Thr Tyr Tyr Gly Gly Asp Trp Tyr Phe Asn Val Trp Gly 100 105 110 Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ala Ala 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ccaacaaata tatggtgttg tgtatgggaa 240 tgtaactttc catgtaccaa gcaatgtgcc tttaaaagag gtcctatgga aaaaacaaaa 300 ggataaagtt gcagaactgg aaaattctga attcagagct ttctcatctt ttaaaaatag 360 ggtttattta gacactgtgt caggtagcct cactatctac aacttaacat catcagatga 420 agatgagtat gaaatggaat cgccaaatat tactgatacc atgaagttct ttctttatgt 480 gcttgagtct cttccatctc ccacactaac ttgtgcattg actaatggaa gcattgaagt 540 ccaatgcatg ataccagagc attacaacag ccatcgagga cttataatgt actcatggga 600 ttgtcctatg gagcaatgta aacgtaactc aaccagtata tattttaaga tggaaaatga 660 tcttccacaa aaaatacagt gtactcttag caatccatta tttaatacaa catcatcaat 720 cattttgaca acctgtatcc caagcagcgg tcattcaaga cacagatatg cacttatacc 780 cataccatta gcagtaatta caacatgtat tgtgctgtat atgaatggta ttctgaaatg 840 tgacagaaaa ccagacagaa ccaactccaa ttgattggta acagaagatg aagacaacag 900 cataactaaa ttattttaaa aactaaaaag ccatctgatt tctcatttga gtattacaat 960 ttttgaacaa ctgttggaaa tgtaacttga agcagctgct ttaagaagaa atacccacta 1020 acaaagaaca agcattagtt ttggctgtca tcaacttatt atatgactag gtgcttgctt 1080 tttttgtcag taaattgttt ttactgatga tgtagatact tttgtaaata aatgtaaata 1140 tgtacacaag tga 1153 <210> 12 <211> 250 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Met Val Ala Gly Ser Asp Ala Gly Arg Ala Leu Gly Val Leu Ser Val 1 5 10 15 Val Cys Leu Leu His Cys Phe Gly Phe Ile Ser Cys Phe Ser Gln Gln 20 25 30 Ile Tyr Gly Val Val Tyr Gly Asn Val Thr Phe His Val Pro Ser Asn 35 40 45 Val Pro Leu Lys Glu Val Leu Trp Lys Lys Gln Lys Asp Lys Val Ala 50 55 60 Glu Leu Glu Asn Ser Glu Phe Arg Ala Phe Ser Ser Phe Lys Asn Arg 65 70 75 80 Val Tyr Leu Asp Thr Val Ser Gly Ser Leu Thr Ile Tyr Asn Leu Thr 85 90 95 Ser Ser Asp Glu Asp Glu Tyr Glu Met Glu Ser Pro Asn Ile Thr Asp 100 105 110 Thr Met Lys Phe Phe Leu Tyr Val Leu Glu Ser Leu Pro Ser Pro Thr 115 120 125 Leu Thr Cys Ala Leu Thr Asn Gly Ser Ile Glu Val Gln Cys Met Ile 130 135 140 Pro Glu His Tyr Asn Ser His Arg Gly Leu Ile Met Tyr Ser Trp Asp 145 150 155 160 Cys Pro Met Glu Gln Cys Lys Arg Asn Ser Thr Ser Ile Tyr Phe Lys 165 170 175 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acgctgggag aacagggtac gataaccggg agatagtgat 540 gaagtacatc cattataagc tgtcgcagag gggctacgag tgggatgcgg gagatgtggg 600 cgccgcgccc ccgggggccg cccccgcacc gggcatcttc tcctcccagc ccgggcacac 660 gccccatcca gccgcatccc gggacccggt cgccaggacc tcgccgctgc agaccccggc 720 tgcccccggc gccgccgcgg ggcctgcgct cagcccggtg ccacctgtgg tccacctgac 780 cctccgccag gccggcgacg acttctcccg ccgctaccgc cgcgacttcg ccgagatgtc 840 cagccagctg cacctgacgc ccttcaccgc gcggggacgc tttgccacgg tggtggagga 900 gctcttcagg gacggggtga actgggggag gattgtggcc ttctttgagt tcggtggggt 960 catgtgtgtg gagagcgtca accgggagat gtcgcccctg gtggacaaca tcgccctgtg 1020 gatgactgag tacctgaacc ggcacctgca cacctggatc caggataacg gaggctggga 1080 tgcctttgtg gaactgtacg gccccagcat gcggcctctg tttgatttct cctggctgtc 1140 tctgaagact ctgctcagtt tggccctggt gggagcttgc atcaccctgg gtgcctatct 1200 gggccacaag tgaagtcaac atgcctgccc caaacaaata tgcaaaaggt tcactaaagc 1260 agtagaaata atatgcattg tcagtgatgt accatgaaac aaagctgcag gctgtttaag 1320 aaaaaataac acacatataa acatcacaca 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agaacctgcc tgtgtcccag cttggaggcc 2220 tggtcctgga actgagccgg ggccctcact ggcctcctcc agggatgatc aacagggcag 2280 tgtggtctcc gaatgtctgg aagctgatgg agctcagaat tccactgtca agaaagagca 2340 gtagaggggt gtggctgggc ctgtcaccct ggggccctcc aggtaggccc gttttcacgt 2400 ggagcatggg agccacgacc cttcttaaga catgtatcac tgtagaggga aggaacagag 2460 gccctgggcc cttcctatca gaaggacatg gtgaaggctg ggaacgtgag gagaggcaat 2520 ggccacggcc cattttggct gtagcacatg gcacgttggc tgtgtggcct tggcccacct 2580 gtgagtttaa agcaaggctt taaatgactt tggagagggt cacaaatcct aaaagaagca 2640 ttgaagtgag gtgtcatgga ttaattgacc cctgtctatg gaattacatg taaaacatta 2700 tcttgtcact gtagtttggt tttatttgaa aacctgacaa aaaaaaagtt ccaggtgtgg 2760 aatatggggg ttatctgtac atcctggggc attaaaaaaa aaatcaatgg tggggaacta 2820 taaagaagta acaaaagaag tgacatcttc agcaaataaa ctaggaaatt tttttttctt 2880 ccagtttaga atcagccttg aaacattgat ggaataactc tgtggcatta ttgcattata 2940 taccatttat ctgtattaac tttggaatgt actctgttca atgtttaatg ctgtggttga 3000 tatttcgaaa gctgctttaa aaaaatacat gcatctcagc gtttttttgt ttttaattgt 3060 atttagttat ggcctataca ctatttgtga gcaaaggtga tcgttttctg tttgagattt 3120 ttatctcttg attcttcaaa agcattctga gaaggtgaga taagccctga gtctcagcta 3180 cctaagaaaa acctggatgt cactggccac tgaggagctt tgtttcaacc aagtcatgtg 3240 catttccacg tcaacagaat tgtttattgt gacagttata tctgttgtcc ctttgacctt 3300 gtttcttgaa ggtttcctcg tccctgggca attccgcatt taattcatgg tattcaggat 3360 tacatgcatg tttggttaaa cccatgagat tcattcagtt aaaaatccag atggcaaatg 3420 accagcagat tcaaatctat ggtggtttga cctttagaga gttgctttac gtggcctgtt 3480 tcaacacaga cccacccaga gccctcctgc cctccttccg cgggggcttt ctcatggctg 3540 tccttcaggg tcttcctgaa atgcagtggt gcttacgctc caccaagaaa gcaggaaacc 3600 tgtggtatga agccagacct ccccggcggg cctcagggaa cagaatgatc agacctttga 3660 atgattctaa tttttaagca aaatattatt ttatgaaagg tttacattgt caaagtgatg 3720 aatatggaat atccaatcct gtgctgctat cctgccaaaa tcattttaat ggagtcagtt 3780 tgcagtatgc tccacgtggt aagatcctcc aagctgcttt agaagtaaca atgaagaacg 3840 tggacgtttt taatataaag cctgttttgt cttttgttgt tgttcaaacg ggattcacag 3900 agtatttgaa aaatgtatat atattaagag gtcacggggg ctaattgctg gctggctgcc 3960 ttttgctgtg gggttttgtt acctggtttt aataacagta aatgtgccca gcctcttggc 4020 cccagaactg tacagtattg tggctgcact tgctctaaga gtagttgatg ttgcattttc 4080 cttattgtta aaaacatgtt agaagcaatg aatgtatata aaagcctcaa ctagtcattt 4140 ttttctcctc ttcttttttt tcattatatc taattatttt gcagttgggc aacagagaac 4200 catccctatt ttgtattgaa gagggattca catctgcatc ttaactgctc tttatgaatg 4260 aaaaaacagt cctctgtatg tactcctctt tacactggcc agggtcagag ttaaatagag 4320 tatatgcact ttccaaattg gggacaaggg ctctaaaaaa agccccaaaa ggagaagaac 4380 atctgagaac ctcctcggcc ctcccagtcc ctcgctgcac aaatactccg caagagaggc 4440 cagaatgaca gctgacaggg tctatggcca tcgggtcgtc tccgaagatt tggcaggggc 4500 agaaaactct ggcaggctta agatttggaa taaagtcaca gaattaagga agcacctcaa 4560 tttagttcaa acaagacgcc aacattctct ccacagctca cttacctctc tgtgttcaga 4620 tgtggccttc catttatatg tgatctttgt tttattagta aatgcttatc atctaaagat 4680 gtagctctgg cccagtggga aaaattagga agtgattata aatcgagagg agttataata 4740 atcaagatta aatgtaaata atcagggcaa tcccaacaca tgtctagctt tcacctccag 4800 gatctattga gtgaacagaa ttgcaaatag tctctatttg taattgaact tatcctaaaa 4860 caaatagttt ataaatgtga acttaaactc taattaattc caactgtact tttaaggcag 4920 tggctgtttt tagactttct tatcacttat agttagtaat gtacacctac tctatcagag 4980 aaaaacagga aaggctcgaa atacaagcca ttctaaggaa attagggagt cagttgaaat 5040 tctattctga tcttattctg tggtgtcttt tgcagcccag acaaatgtgg ttacacactt 5100 tttaagaaat acaattctac attgtcaagc ttatgaaggt tccaatcaga tctttattgt 5160 tattcaattt ggatctttca gggatttttt ttttaaatta ttatgggaca aaggacattt 5220 gttggagggg tgggagggag gaagaatttt taaatgtaaa acattcccaa gtttggatca 5280 gggagttgga agttttcaga ataaccagaa ctaagggtat gaaggacctg tattggggtc 5340 gatgtgatgc ctctgcgaag aaccttgtgt gacaaatgag aaacattttg aagtttgtgg 5400 tacgaccttt agattccaga gacatcagca tggctcaaag tgcagctccg tttggcagtg 5460 caatggtata aatttcaagc tggatatgtc taatgggtat ttaaacaata aatgtgcagt 5520 tttaactaac aggatattta atgacaacct tctggttggt agggacatct gtttctaaat 5580 gtttattatg tacaatacag aaaaaaattt tataaaatta agcaatgtga aactgaattg 5640 gagagtgata atacaagtcc tttagtctta cccagtgaat cattctgttc catgtctttg 5700 gacaaccatg accttggaca atcatgaaat atgcatctca ctggatgcaa agaaaatcag 5760 atggagcatg aatggtactg taccggttca tctggactgc cccagaaaaa taacttcaag 5820 caaacatcct atcaacaaca aggttgttct gcataccaag ctgagcacag aagatgggaa 5880 cactggtgga ggatggaaag gctcgctcaa tcaagaaaat tctgagacta ttaataaata 5940 agactgtagt gtagatactg agtaaatcca tgcacctaaa ccttttggaa aatctgccgt 6000 gggccctcca gatagctcat ttcattaagt ttttccctcc aaggtagaat ttgcaagagt 6060 gacagtggat tgcatttctt ttggggaagc tttcttttgg tggttttgtt tattatacct 6120 tcttaagttt tcaaccaagg tttgcttttg ttttgagtta ctggggttat ttttgtttta 6180 aataaaaata agtgtacaat aagtgttttt gtattgaaag cttttgttat caagattttc 6240 atacttttac cttccatggc tctttttaag attgatactt ttaagaggtg gctgatattc 6300 tgcaacactg tacacataaa aaatacggta aggatacttt acatggttaa ggtaaagtaa 6360 gtctccagtt ggccaccatt agctataatg gcactttgtt tgtgttgttg gaaaaagtca 6420 cattgccatt aaactttcct tgtctgtcta gttaatattg tgaagaaaaa taaagtacag 6480 tgtgagatac tg 6492 <210> 14 <211> 239 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Met Ala His Ala Gly Arg Thr Gly Tyr Asp Asn Arg Glu Ile Val Met 1 5 10 15 Lys Tyr Ile His Tyr Lys Leu Ser Gln Arg Gly Tyr Glu Trp Asp Ala 20 25 30 Gly Asp Val Gly Ala Ala Pro Pro Gly Ala Ala Pro Ala Pro Gly Ile 35 40 45 Phe Ser Ser Gln Pro Gly His Thr Pro His Pro Ala Ala Ser Arg Asp 50 55 60 Pro Val Ala Arg Thr Ser Pro Leu Gln Thr Pro Ala Ala Pro Gly Ala 65 70 75 80 Ala Ala Gly Pro Ala Leu Ser Pro Val Pro Pro Val Val His Leu Thr 85 90 95 Leu Arg Gln Ala Gly Asp Asp Phe Ser Arg Arg Tyr Arg Arg Asp Phe 100 105 110 Ala Glu Met Ser Ser Gln Leu His Leu Thr Pro Phe Thr Ala Arg Gly 115 120 125 Arg Phe Ala Thr Val Val Glu Glu Leu Phe Arg Asp Gly Val Asn Trp 130 135 140 Gly Arg Ile Val Ala Phe Phe Glu Phe Gly Gly Val Met Cys Val Glu 145 150 155 160 Ser Val Asn Arg Glu Met Ser Pro Leu Val Asp Asn Ile Ala Leu Trp 165 170 175 Met Thr Glu Tyr Leu Asn Arg His Leu His Thr Trp Ile Gln Asp Asn 180 185 190 Gly Gly Trp Asp Ala Phe Val Glu Leu Tyr Gly Pro Ser Met Arg Pro 195 200 205 Leu Phe Asp Phe Ser Trp Leu Ser Leu Lys Thr Leu Leu Ser Leu Ala 210 215 220 Leu Val Gly Ala Cys Ile Thr Leu Gly Ala Tyr Leu Gly His Lys 225 230 235

Claims (28)

  1. (a) 서열 번호 1에 도시되거나 서열 번호 5에 포함된 중쇄 가변성 영역(아미노산 잔기 1 내지 119; 상기 인용된 EP-B1 제2380910호에 개시된 서열 번호 40) 및 서열 번호 2에 도시되거나 서열 번호 6에 포함된 경쇄 가변성 영역(아미노산 잔기 1 내지 115; 상기 인용된 EP-B1 제2380910호에 개시된 서열 번호 76);
    (b) (a)의 중쇄 가변성 영역의 특이성 결정 잔기를 갖는 중쇄 가변성 영역 및 (a)의 경쇄 가변성 영역의 특이성 결정 잔기를 갖는 경쇄 가변성 영역; 또는
    (c) 서열 번호 3 또는 서열 번호 7에 80% 이상 동일성인 핵산 서열에 의해 인코딩되는 중쇄 가변성 영역(상기 인용된 EP-B1 제2380910호에 개시된 서열 번호 39) 및 서열 번호 4 또는 서열 번호 8에 80% 이상 동일성인 핵산 서열에 의해 인코딩되는 경쇄 가변성 영역(상기 인용된 EP-B1 제2380910호에 개시된 서열 번호 75)을 포함하고,
    리툭시맙(rituximab)에 의한 치료와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 오비누투주맙(obinutuzumab)에 의한 치료에 반응하는 환자에서 미만성 거대 B-세포 림프종(DLBCL: diffuse large B-cell lymphoma)을 치료하는데 사용하기 위한
    인간화된 제II형 항-CD20 항체.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 임상적 결과가 무진행 생존율(PFS: progression free survival), 전체 생존율(OS: overall survival) 및/또는 무병 생존율(EFS: event free survival)인 항체.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 환자가 예측적 바이오마커(biomarker)-정의된 환자인 항체.
  4. 제1항 내지 제3항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 환자가:
    (i) 분자 소포성 림프종(FL: follicular lymphoma)-유사 배중심 B-세포(GCB: germinal-center B-cell) DLBCL을 앓는 환자; 및/또는
    (ii) CD58에서 유전적 돌연변이(들)를 갖고/갖거나 CD58의 발현이 낮은 환자인 항체.
  5. 제1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서, 특별히 제4(i)항에 있어서,
    상기 환자가
    (i) 강한-GCB DLBCL을 앓는 환자; 및/또는
    (ii) BCL2 전좌를 갖고/갖거나 BCL2 발현이 높은 DLBCL 환자인 항체.
  6. 제1항 내지 제5항중 어느 한 항에 있어서, 특별히 제5(i)항에 있어서,
    상기 환자(강한-GCB DLBCL을 앓는 환자)가 유전자 TNFRSF13B, LIMD1, IRF4, CREB3L2, PIM2, CYB5R2, RAB7L1, 및 CCDC50; 및 MME, SERPINA9, ASB13, MAML3, ITPKB, MYBL1, 및 S1PR2중 하나 이상(바람직하게는 모두)을 포함하는 유전자 세트의 발현을 결정함으로써 식별되는 항체.
  7. 제5(i)항 또는 제6항에 있어서,
    강한-GCB DLBCL을 앓는 상기 환자가, 1141 미만의 선형 예측자 스코어(LPS: Linear Predictor Score)를 생성하는 유전자 TNFRSF13B, LIMD1, IRF4, CREB3L2, PIM2, CYB5R2, RAB7L1, 및 CCDC50; 및 MME, SERPINA9, ASB13, MAML3, ITPKB, MYBL1, 및 S1PR2중 하나 이상(바람직하게는 모두)을 포함하는 유전자 세트가 가중되어 발현하는 종양을 갖는 환자인 항체.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서,
    상기 유전자 세트가 유전자 R3HDM1, WDR55, ISY1, UBXN4, 및 TRIM56중 하나 이상(바람직하게는 모두)을 추가로 포함하는 항체.
  9. 제6항 내지 제8항중 어느 한 항에 있어서,
    제6항 또는 제7항에 정의된 상기 하나 이상의 유전자의 발현이 제8항에 정의된 하나 이상(바람직하게는 모두)의 유전자의 발현으로 정규화되는 항체.
  10. 제7항 내지 제9항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 LPS가 하기 수학식 I에 따라서 계산되는 상기 유전자의 발현의 가중합인 항체:
    [수학식 I]
    LPS(X) = ΣjαjXj
    상기 식에서,
    Xj는 유전자 j에 대한 유전자 발현이고,
    αj는 유전자 j에 대한 계수이다.
  11. 제6항 내지 제10항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 유전자의 발현이 림프종 하위유형 결정 시험만을 사용하는 나노스트링 리서치[NanoString Research Use Only Lymphoma Subtyping Test(LST)][나노스트링 테크놀로지스 인코포레이티드(NanoString Technologies, Inc.), 미국 워싱턴주 시애틀 소재]에 의해 결정되는 항체.
  12. 제7항 내지 제11항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 LPS가 1100 이하인 항체.
  13. 제7항 내지 제12항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 LPS가 749 이하인 항체.
  14. 제7항 내지 제13항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 LPS가 725 이하인 항체.
  15. 제1항 내지 제14항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체가 당조작된(glycoengineered) Fc 영역을 포함하는 항체.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 항체에서 상기 당조작된 Fc 영역에 결합된 비-푸코실화 올리고당의 분율이 증가되는 항체.
  17. 제15항 또는 제16항에 있어서,
    상기 항체에서 상기 당조작된 Fc 영역에 결합된 이등분된 비-푸코실화 올리고당의 분율이 증가되는 항체.
  18. 제1항 내지 제17항중 어느 한 항에 있어서, 특별히 제15항에 있어서,
    상기 항체가 당조작되지 않은 항체에 비하여 및/또는 리툭시맙에 비하여 유의적으로 더 높은 수준으로 인간 FcγRIII 수용체에 결합하는 항체.
  19. 제1항 내지 제18항중 어느 한 항에 있어서, 특별히 제15항에 있어서,
    상기 항체가 당조작되지 않은 항체에 비하여 및/또는 리툭시맙에 비하여 유의적으로 더 높은 수준의 ADCC 활성을 갖는 항체.
  20. 제1항 내지 제19항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체가 오비누투주맙[가자이바(Gazyva: 상표명)/가자이바로(Gazyvaro: 상표명); GA101]인 항체.
  21. 제1항 내지 제20항중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 추가적인 다른 세포독성제 또는 화학치료제(들), 또는 이러한 제제(들)의 효과를 증진시키는 이온화 방사선이 투여되는 항체.
  22. 제1항 내지 제21항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체가 CHOP 화학요법과 병용되어 투여되는 항체.
  23. 제1항 내지 제22항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체가 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물에 포함되는 항체.
  24. 환자가 제1항 내지 제14항중 어느 한 항에서 정의된 환자인지의 여부를 결정함(결정하는 단계)(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써)을 포함하는, 리툭시맙에 의한 치료와 비교하여 개선된 임상적 결과에 도달하면서 오비누투주맙에 의한 치료에 반응하는 DLBCL 환자(DLBCL을 앓거나 이로부터 고통받는 환자)를 식별하는 방법.
  25. 환자가 제1항 내지 제14항중 어느 한 항에서 정의된 환자인지의 여부를 결정함(결정하는 단계)(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써), 및 환자가 제1항 내지 제14항중 어느 한 항에서 정의된 환자인 경우, 리툭시맙에 의한 치료와 비교하여 개선된 임상적 결과가 도달되도록 오비누투주맙에 의해 치료될 수 있는 DLBCL의 형태를 진단함을 포함하는,
    리툭시맙에 의한 치료와 비교하여 개선된 임상적 결과가 도달되도록 오비누투주맙에 의해 치료될 수 있는 DLBCL의 형태를 환자에서 진단하는 방법.
  26. 제1항 내지 제23항중 어느 한 항에 있어서,
    (i) 상기 환자가 제1항 내지 제14항중 어느 한 항에서 정의된 환자인지의 여부가 결정되었거나(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써),
    (ii) 상기 환자가 제24항의 방법에 따라서 식별되었거나, 또는
    (iii) DLBCL의 형태가 제25항의 방법에 따라서 상기 환자에서 진단되어진 항체.
  27. 제1항 내지 제23항중 어느 한 항에 있어서,
    상기 치료가, (i) 치료되는 환자가 제1항 내지 제14항중 어느 한 항에서 정의된 환자인지의 여부를 결정하는 단계(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써), (ii) DLBCL 환자를 제24항의 방법에 따라서 식별하는 단계, 또는 (iii) DLBCL의 형태를 제25항의 방법에 따라서 환자에서 진단하는 단계를 포함하는 항체.
  28. DLBCL의 치료가 필요한 환자가 제1항 내지 제14항중 어느 한 항에서 정의된 환자이고,
    환자가 제1항 내지 제14항중 어느 한 항에서 정의된 환자인지의 여부를 결정하는 단계(예를 들어 환자의 (종양) 샘플을 사용함으로써), 및
    제1항 및 제15항 내지 제23항중 어느 한 항에서 정의된 항체를 약학적으로 효과적인 양으로 상기 환자에게 투여하는 단계를 포함하는,
    DLBCL의 치료가 필요한 환자에서 DLBCL을 치료하는 방법.
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