KR20200048225A

KR20200048225A - 화합물 수득 방법

Info

Publication number: KR20200048225A
Application number: KR1020180130067A
Authority: KR
Inventors: 남기백; 고재영; 김용진; 신미숙
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2018-10-29
Filing date: 2018-10-29
Publication date: 2020-05-08
Also published as: CN111100179A; CN111100179B

Abstract

동백꽃 또는 동백꽃 알코올 추출물을 물에 넣어 혼합액을 제조한 후, 여기에 펙티나아제(pectinase)를 첨가해 효소추출하는 단계; 상기 효소추출하는 단계에서 수득한 반응액을 여과한 후 여과액을 농축하는 단계; 및 상기 농축된 여과액을 분리정제하는 단계를 포함하는, 하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 수득 방법 및 상기 수득 방법으로 수득된 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효 성분으로 포함하는 피부재생용 화장료 조성물을 제공한다.
[화학식 1]

(상기 화학식 1에서, 각 치환기는 명세서에 정의된 바와 같다.)

Description

화합물 수득 방법 {THE OBTAINING METHOD OF COMPOUND}

본 기재는 동백꽃으로부터 특정 화합물을 높은 수율로 수득하는 방법에 관한 것이다.

피부(skin)는 인체의 가장 외부를 덮고 있는 조직으로 인체를 보호하고 장벽기능을 하여 외부의 화학적, 물리적 충격으로부터 몸을 보호하는 일차적인 방어기능을 한다. 피부는 표피(epidermis)와 진피(dermis), 피하지방층(subcutis)의 3개의 층으로 구성되어 있으며, 가장 바깥층에 위치하고 있는 표피층은 95%가 각질형성세포(keratinocyte)로 구성되어있다. 표피의 각질형성세포는 피부에 침투하는 세균, 화학 물질 등에 효율적으로 방어하고, 다양한 사이토카인을 분비하여 피부의 염증반응과 면역반응에 관여한다. 또한, 각질형성세포의 이동과 증식은 상처치유와 피부 재생을 제공할 뿐만 아니라, 콜라젠(collagen) 합성을 유도하여 피부의 탄력 증진과 기저막 형성에 중요한 역할을 한다. 콜라젠은 α-chain에 따라 20종 이상의 콜라젠이 있으며, 사람의 피부에는 type I, III, IV, V, VI 및 VII 형 콜라겐이 분포하고 있다. 주로 type I 콜라젠은 피부 진피층의 85% 이상을 구성하고, type IV 콜라겐은 기저막(basement membrane)의 주요 구조 단백질로서, type I 및 IV 콜라겐의 합성은 피부의 탄력을 증진시키고, 기저막 형성을 향상시켜 피부 세포들의 부착과 증식이 조절되고, 유해물질을 선택적으로 투과하는 장벽기능의 향상과 표피와 진피의 상호작용 등을 제공하는 것으로 알려졌다. 이로 인해, 피부 표피 각질형성세포의 이동과 증식, 그리고 콜라젠 합성의 유도는 피부 재생과 상처치유 뿐만 아니라 피부 탄력을 증진시키고 건강한 피부가 유지되도록 도와준다.

최근 들어 진행된 급격한 사회화로 인해 오존층이 파괴되고, 야외에서의 활동 시간이 갈수록 많아짐에 따라, 자외선으로 인한 피부장벽 손상이 일어나고, 이는 다양한 피부질환을 일으키는 원인이 되고 있다.

종래에는 대부분의 화장료 조성물이 피부 보습, 미백, 주름개선 등에 효과가 있을 뿐, 피부재생과 관련해서는 어떠한 효능도 보이지 못했다. 이에 자외선 차단을 통해 피부재생을 돕는 효과를 가지는 화장료 조성물 개발 관련 연구에 대한 요구가 늘어나고 있다.

또한, 상기 화장료 조성물에 유효 성분으로 포함되는 피부재생을 돕는 효과를 가지는 화합물이 천연에서 추출되는 물질인데, 상기 화합물이 실험적으로 합성이 어려운 물질일 경우, 상기 화합물의 추출 시 수율이 매우 중요한 요소가 된다. 이에 실험적으로 합성이 어려운, 유효한 천연 추출물질을 높은 수율로 추출하는 방법에 대한 연구가 계속되고 있다.

일 구현예는 자외선으로부터 피부를 보호하고, 자외선이 조사되어 손상된 피부 부위에 피부재생 관련 유전자들의 발현량을 증가시켜 피부재생을 돕는 화합물을 동백꽃으로부터 높은 수율로 수득하는 방법을 제공하려는 것이다.

일 구현예에 따르면, 동백꽃 또는 동백꽃 알코올 추출물을 물에 넣어 혼합액을 제조한 후, 여기에 펙티나아제(pectinase)를 첨가해 효소추출하는 단계; 상기 효소추출하는 단계에서 수득한 반응액을 여과한 후 여과액을 농축하는 단계; 및 상기 농축된 여과액을 분리정제하는 단계를 포함하는, 하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 수득 방법을 제공한다.

[화학식 1]

상기 화학식 1에서,

R¹ 내지 R⁷은 각각 독립적으로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20 알킬기이다.

상기 R¹ 내지 R⁷은 각각 독립적으로 메틸기일 수 있다.

상기 혼합액의 pH는 2.5 내지 8 일 수 있다.

상기 펙티나아제는 검정곰팡이(Aspergillus niger)에서 분리한 것일 수 있다.

상기 검정곰팡이(Aspergillus niger)에서 분리된 펙티나아제는 Rapidase Sensation 또는 Peclyve LI 일 수 있다.

상기 펙티나아제는 상기 동백꽃 100 중량부에 대해 5 중량부 내지 1000 중량부로 첨가될 수 있다.

상기 효소추출하는 단계는 상기 펙티나아제가 첨가된 혼합액을 30℃ 내지 65℃에서 1시간 내지 120시간 동안 교반시킨 후, 비등 수욕조에서 10분 동안 가열하는 단계일 수 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 수득 함량은 상기 동백꽃 1 kg 당 10g 내지 20g 일 수 있다.

다른 일 구현예는 상기 수득 방법으로 수득된 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효 성분으로 포함하는 피부재생용 화장료 조성물을 제공한다.

일 구현예에 따르면, 본 발명의 수득 방법은, 피부재생용 화장료 조성물 제조에 필수적인 피부재생 효과를 가지는 특정 화합물을 동백꽃 1kg으로부터 10g 내지 20g의 함량으로 수득할 수 있다. 동백꽃 1kg 당 10g 내지 20g 함량의 특정 화합물을 추출하는 것은 획기적으로 높은 수율로서, 일 구현예에 따른 수득 방법을 이용하여 피부재생용 화장료 조성물 제조 시 비용을 크게 줄일 수 있다.

도 1은 실시예 1 내지 실시예 4 및 비교예 1 내지 비교예 8에 따른 시간에 따른 광분산 정도를 ELSD 장비로 분석한 그래프이다.
도 2는 일 구현예에 따른 수득 방법으로 수득된 화합물의 파장에 따른 흡광도를 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명의 구현예에 대하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 구현예에 한정되지 않는다.

본 명세서에서 피부재생이란, 자외선으로 손상된 피부 부위에 존재하는 wound healing 관여 유전자 및 세포증식 관여 유전자의 발현량을 증가시켜, 피부를 재생시키는 것을 의미하며, 피부에 대한 자외선을 차단시키는 의미도 있다. 다만, 본 명세서에서 언급되는 피부재생은 피부보습, 미백, 주름개선 등과는 무관하다.

본 명세서에서 층, 막, 영역, 판 등의 부분이 다른 부분 "위에" 있다고 할 때, 이는 다른 부분 "바로 위에" 있는 경우뿐만 아니라 그 중간에 또 다른 부분이 있는 경우도 포함한다. 반대로 어떤 부분이 다른 부분 "바로 위에" 있다고 할 때에는 중간에 다른 부분이 없는 것을 뜻한다.

본 명세서에서 특별한 언급이 없는 한, "치환" 내지 "치환된"이란, 본 발명의 작용기 중의 하나 이상의 수소 원자가 할로겐 원자(F, Br, Cl 또는 I), 히드록시기, 니트로기, 시아노기, 아미노기(NH₂, NH(R²⁰⁰) 또는 N(R²⁰¹)(R²⁰²)이고, 여기서 R²⁰⁰, R²⁰¹ 및 R²⁰²는 동일하거나 서로 상이하며, 각각 독립적으로 C1 내지 C10 알킬기임), 아미디노기, 하이드라진기, 하이드라존기, 카르복실기, 치환 또는 비치환된 알킬기, 치환 또는 비치환된 알케닐기, 치환 또는 비치환된 알키닐기, 치환 또는 비치환된 지환족 유기기, 치환 또는 비치환된 아릴기, 및 치환 또는 비치환된 헤테로고리기로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 치환기로 치환된 것을 의미한다.

본 명세서에서 특별한 언급이 없는 한, "알킬기"란 C1 내지 C20 알킬기를 의미하고, 구체적으로는 C1 내지 C15 알킬기를 의미하고, "사이클로알킬기"란 C3 내지 C20 사이클로알킬기를 의미하고, 구체적으로는 C3 내지 C18 사이클로알킬기를 의미하고, "알콕시기"란 C1 내지 C20 알콕시기를 의미하고, 구체적으로는 C1 내지 C18 알콕시기를 의미하고, "아릴기"란 C6 내지 C20 아릴기를 의미하고, 구체적으로는 C6 내지 C18 아릴기를 의미하고, "알케닐기"란 C2 내지 C20 알케닐기를 의미하고, 구체적으로는 C2 내지 C18 알케닐기를 의미하고, "알킬렌기"란 C1 내지 C20 알킬렌기를 의미하고, 구체적으로는 C1 내지 C18 알킬렌기를 의미하고, "아릴렌기"란 C6 내지 C20 아릴렌기를 의미하고, 구체적으로는 C6 내지 C16 아릴렌기를 의미한다.

본 명세서에서 특별한 언급이 없는 한, "(메타)아크릴레이트"는 "아크릴레이트"와 "메타크릴레이트" 둘 다 가능함을 의미하며, "(메타)아크릴산"은 "아크릴산"과 "메타크릴산" 둘 다 가능함을 의미한다.

본 명세서에서 별도의 정의가 없는 한, "조합"이란 혼합 또는 공중합을 의미한다. 또한 "공중합"이란 블록 공중합 내지 랜덤 공중합을 의미하고, "공중합체"란 블록 공중합체 내지 랜덤 공중합체를 의미한다.

본 명세서 내 화학식에서 별도의 정의가 없는 한, 화학 결합이 그려져야 하는 위치에 화학결합이 그려져 있지 않은 경우는 상기 위치에 수소 원자가 결합되어 있음을 의미한다.

본 명세서에서 별도의 정의가 없는 한, "＊"는 동일하거나 상이한 원자 또는 화학식과 연결되는 부분을 의미한다.

이하 일 구현예에 따른 수득 방법에 대해 설명한다.

일 구현예에 따른 수득 방법은 동백꽃으로부터 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 수득하는 방법에 대한 것으로서, 동백꽃 또는 동백꽃 알코올 추출물을 물에 넣어 혼합액을 제조한 후, 여기에 펙티나아제(pectinase)를 첨가해 효소추출하는 단계; 상기 효소추출하는 단계에서 수득한 반응액을 여과한 후 여과액을 농축하는 단계; 및 상기 농축된 여과액을 분리정제하는 단계를 포함한다.

[화학식 1]

상기 화학식 1에서,

상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 동백(Camellia japonica)꽃 추출물(카멜레노디올; camellenodiol)로서, 여러 피부재생 관여 유전자들(AQP3(Aquaporin-3), PPAR-α(peroxidase proliferator-activated receptor-alpha), PPAR-β(peroxidase proliferator-activated receptor-beta), K5(Cytokeratin 5), K14(Cytokeratin 14))의 발현레벨을 상승시킬 수 있어, 피부재생, 특히 자외선 조사로 인해 손상된 피부의 재생에 탁월한 효과를 가진다. 예컨대, 상기 화학식 1에서, R¹ 내지 R⁷은 각각 독립적으로 메틸기일 수 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 동백(Camellia japonica)꽃에 극미량 존재하는 성분으로서, 대량의 동백꽃 건조물을 수용성 에탄올로 추출 후 여과 및 감압 농축하여 추출물을 수득하고, 이를 HP-20과 silica 크로마토그래피법을 사용하여 극미량의 카멜레노디올(camellenodiol)을 정제할 수 있다. 다만, 현재까지 알려진 상기 추출 정제 방법만으로는 극미량만을 수득할 수 있어서, 이를 가지고 피부재생용 화장료 조성물 등을 제조하는 데 어려움이 있었으며, 상기 조성물을 제조하더라도 제조비용이 많이 소요되어 최종 제품의 가격이 너무 높아져 가격경쟁력이 저하되기에, 피부재생용 화장료 조성물 제조 및 이를 활용한 화장품 등의 제품 개발이 원활하게 이루어지지 않고 있었다.

그러나, 일 구현예에 따르면, 동백꽃(또는 이의 알코올 추출물) 함유 혼합액에 특정 효소를 사용하여 특정 조건 하에서 효소추출을 함으로써, 종래와는 확연히 다른, 매우 높은 수율로 피부재생에 탁월한 효과를 가지는 유효성분, 즉 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 수득할 수 있다. 예컨대, 일 구현예에 따른 수득 방법에 의하면, 상기 동백꽃 1 kg 당 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 10g 내지 20g 수득할 수 있다.

예컨대, 상기 혼합액의 pH는 2.5 내지 8, 예컨대 3 내지 5.5 일 수 있다. 상기 혼합액의 pH가 상기 범위일 경우, 동백꽃으로부터 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 수득율을 높일 수 있다.

예컨대, 상기 혼합액을 구성하는 알코올은 C1 내지 C4 저급 알코올, 예컨대 에탄올일 수 있다.

예컨대, 상기 동백꽃은 상기 혼합액 총량에 대해 0.1 중량% 내지 20 중량%로 포함될 수 있으며, 상기 동백꽃은 상기 물 및 알코올의 혼합액에 용해될 수 있다.

예컨대, 상기 펙티나아제는 검정곰팡이(Aspergillus niger)에서 분리한 것일 수 있다. 상기 검정곰팡이(Aspergillus niger)에서 분리된 펙티나아제가 다른 종에서 분리된 펙티나아제보다 우수한 수율로 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 수득하게 할 수 있다.

예컨대, 상기 검정곰팡이(Aspergillus niger)에서 분리된 펙티나아제는 Rapidase Sensation 또는 Peclyve LI 일 수 있다.

예컨대, 상기 펙티나아제는 건조 동백꽃 100 중량부에 대해 5 중량부 내지 1000 중량부로 첨가될 수 있다. 상기 펙티나아제가 상기 함량범위로 포함되지 않을 경우, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 종래 수준으로, 극미량만 수득될 수 있어, 바람직하지 않을 수 있다.

상기 효소추출하는 단계는 상기 펙티나아제가 첨가된 혼합액을 30℃ 내지 65℃, 예컨대 30℃ 내지 60℃, 예컨대 35℃ 내지 65℃, 40℃ 내지 55℃에서 1시간 내지 120시간, 예컨대 1시간 내지 72시간, 예컨대 24시간 내지 72시간 동안 교반시킨 후, 비등 수욕조에서 10분 동안 가열하는 단계일 수 있다. 상기 효소추출 단계가 상기 온도 및 시간 범위를 만족할 경우, 우수한 수율로 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 수득할 수 있다.

다른 일 구현예는 상기 수득 방법으로 수득된 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효 성분으로 포함하는 피부재생용 화장료 조성물, 예컨대 피부에 대한 자외선 차단용 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 약학적으로 유효한 양의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 단독으로 포함하거나 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부재생용 화장료 조성물의 경우, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 5 μM 내지 15 μM의 농도, 예컨대 5 μM 내지 10 μM의 농도, 예컨대 7.5 μM 내지 10 μM의 농도범위로 포함될 수 있다. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 5 μM 미만의 농도로 사용할 경우에는 표피 각질형성세포의 증식과 이동의 효과가 미미하여 피부재생 효과를 가질 수 없으며, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 15 μM 초과의 농도로 사용할 경우에는 세포독성이 나타나 인체에 해를 끼칠 수 있으므로 바람직하지 않다.

상기에서 "약학적으로 유효한 양"이란 상기 생리활성성분이 동물 또는 사람에게 투여되어 목적하는 생리학적 또는 약리학적 활성을 나타내기에 충분한 양을 말한다. 그러나 상기 약학적으로 유효한 양은 증상의 정도, 환자의 연령, 체중, 건강상태, 성별, 투여 경로 및 치료기간 등에 따라 적절히 변화될 수 있다.

또한, 상기에서 "약학적으로 허용되는"이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 것을 말한다. 상기 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.

본 명세서에서 "화장료"는, 미용 기능뿐만 아니라, 미용 기능 외에 추가적으로 의학적 기능을 가질 수 있는 모든 물질을 의미할 수 있다.

상기 피부재생용 화장료 조성물의 제형은 특별히 제한되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다.

예를 들면, 상기 피부재생용 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 세정제, 토닉, 정발제, 영양화장수, 에센스, 세럼, 트리트먼트, 컨디셔너, 샴푸, 로션, 양모제 또는 염모제 등의 화장료 조성물, 수중유(O/W)형, 유중수(W/O)형 등의 기초 화장료로 제형화될 수 있다. 또한, 상기 조성물은, 각각의 제형에 있어서 상기한 필수성분 이외에 다른 성분들은 기타 외용제의 종류 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적합하게 선정하여 배합할 수 있다. 예컨대, 자외선 차단제, 헤어 컨디셔닝제, 향료 등을 더 포함할 수 있다.

상기 피부재생용 화장료 조성물은 화장품학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유할 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및/또는 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적 방법에 따라 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시태양에서, 상기 피부재생용 화장료 조성물에 추가적으로 점증제를 함유할 수 있다. 본 발명의 피부재생용 화장료 조성물에 포함되는 점증제는 메틸 셀룰로스, 카르복시 메틸 셀룰로스, 카르복시 메틸 하이드록시 구아닌, 하이드록시 메틸 셀룰로스, 하이드록시에틸셀룰로스, 카르복시 비닐 폴리머, 폴리쿼터늄, 세테아릴 알콜, 스테아릭산, 카라기난 등을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 카르복시 메틸 셀룰로스, 카르복시 비닐 폴리머, 폴리쿼터늄 중에서 1종 이상을 사용할 수 있으며, 가장 바람직하게는 카르복시 비닐 폴리머가 될 수 있다.

본 발명의 일 실시태양에서 상기 피부재생용 화장료 조성물은 필요에 따라 적절한 각종의 기제와 첨가제를 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 발명자에 의해 용이하게 선정될 수 있다. 필요에 따라 허용 가능한 첨가제를 함유할 수 있으며, 예를 들면, 당업계에 통상적인 방부제, 색소, 첨가제 등의 성분을 추가로 포함할 수 있다.

방부제는 구체적으로 페녹시에탄올(Phenoxyethanol) 또는 1,2-헥산디올 (1,2-Hexanediol) 등이 될 수 있고, 향료는 인공향료 등이 될 수 있다.

그리고, 본원 발명의 일 실시태양에서 피부재생용 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함할 수 있다. 이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제, 정제수 등을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.

나아가 일 구현예에 따른 화장료 조성물은 상기 기술한 바와 같이 약학적 조성물로 사용할 수 있을 뿐만 아니라, 건강기능식품으로도 사용할 수 있다. 예컨대, 식품의 주원료, 부원료, 식품 첨가제, 기능성 식품 또는 음료로 용이하게 활용할 수 있다.

상기 "식품"이란, 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 기능성식품 및 음료를 모두 포함하는 것을 말한다.

상기 식품용 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합체, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 특수영양식품(예, 조제유류, 영, 유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 빵류, 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스낵류), 캔디류, 쵸코렛류, 껌류, 아이스크림류, 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실음료, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면스프 등)를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.

또한, 상기 "기능성 식품" 또는 "건강기능성 식품"이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물 공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체내조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 구체적으로는 건강 기능성 식품일 수 있다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

상기 건강보조식품의 종류로는 이에 제한되지는 않으나, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료 형태일 수 있다.

본원 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 이하, 본원 발명을 실시예에 의해 상세히 설명하기로 한다. 그러나 이들 실시예들은 본 발명을 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

(실시예)

실시예 1

동백꽃 1 ㎏에 정제수 20L 넣고, Aspergillus niger에서 분리한 효소인 펙티나아제(Rapidase Sensation 또는 Peclyve LI)를 넣어 효소추출 반응시킨다. 이 때, 상기 펙티나아제는 상기 (건조)동백꽃 100 중량부 대비 100 중량부를 첨가하였다. 상기 반응액을 여과한 다음, 여과액을 농축하고, 농축한 반응액을 흡착컬럼으로 분리정제하여, 하기 화학식 1-1로 표시되는 화합물이 함유된 분획 20 g을 얻었다.

[화학식 1-1]

(Average mass: 442.674 Da)

(Monoisotopic mass: 442.344696 Da)

실시예 2

상기 펙티나아제는 상기 동백꽃 100 중량부 대비 5 중량부를 첨가한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

실시예 3

상기 펙티나아제는 상기 동백꽃 100 중량부 대비 1000 중량부를 첨가한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

실시예 4

동백꽃 1kg 대신, 동백꽃 1 ㎏ 을 에탄올 수용액 20L 에 넣고 추출한 다음, 여과하여 잔사를 제거하고, 감압농축하여 얻은 동백꽃추출물 470 g을 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

비교예 1

펙티나아제 대신 갈락토시다아제(Galactosidase; Lactozyme Pure 6500L)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

비교예 2

펙티나아제 대신 갈락토시다아제(Galactosidase; Saphera 2600 L)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

비교예 3

펙티나아제 대신 갈락토시다아제(Galactosidase; Dairyzym Y 50 L)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

비교예 4

펙티나아제 대신 글루코스 옥시다아제(Glucose oxidase; Bakezyme GOP10000BG)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

비교예 5

펙티나아제 대신 글루코스 인버타아제(Invertase)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

비교예 6

펙티나아제 대신 글루코스 퍼옥시다아제(Peroxidase)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

비교예 7

펙티나아제 대신 글루코스 락타아제(Lactase)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

비교예 8

펙티나아제 대신 글루코스 아밀로글루코시다아제(Amyloglucosidase)를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 하였다.

화합물의 종류 확인

실시예 1에서 수득된 화합물이 상기 화학식 1-1로 표시되는 화합물인지 여부를 확인하기 위해, 파장에 따른 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다. 도 2로부터 상기 수득 화합물은 상기 화학식 1-1로 표시되는 화합물임을 확인하였다.

또한, 효소의 종류에 따라 상기 화학식 1-1로 표시되는 화합물이 수득되는지 여부를 확인하기 위해 시간에 따른 광 분산도를 측정하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다. 도 1로부터 효소로 펙티나아제를 사용한 경우에만 상기 화학식 1-1로 표시되는 화합물이 수득됨을 확인할 수 있다.

이상에서 본 발명의 바람직한 실시예들에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리 범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구 범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리 범위에 속하는 것이다.

Claims

동백꽃 또는 동백꽃 알코올 추출물을 물에 넣어 혼합액을 제조한 후, 여기에 펙티나아제(pectinase)를 첨가해 효소추출하는 단계;
상기 효소추출하는 단계에서 수득한 반응액을 여과한 후 여과액을 농축하는 단계; 및
상기 농축된 여과액을 분리정제하는 단계
를 포함하는,
하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 수득 방법:
[화학식 1]

상기 화학식 1에서,
R¹ 내지 R⁷은 각각 독립적으로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C20 알킬기이다.
제1항에서,
상기 R¹ 내지 R⁷은 각각 독립적으로 메틸기인 수득 방법.
제1항에서,
상기 혼합액의 pH는 2.5 내지 8인 수득 방법.
제1항에서,
상기 펙티나아제는 검정곰팡이(Aspergillus niger)에서 분리한 것인 수득 방법.
제4항에서,
상기 검정곰팡이(Aspergillus niger)에서 분리된 펙티나아제는 Rapidase Sensation 또는 Peclyve LI인 수득 방법.
제1항에서,
상기 펙티나아제는 상기 동백꽃 100 중량부에 대해 5 중량부 내지 1000 중량부로 첨가되는 수득 방법.
제1항에서,
상기 효소추출하는 단계는 상기 펙티나아제가 첨가된 혼합액을 30℃ 내지 65℃에서 1시간 내지 120시간 동안 교반시킨 후, 비등 수욕조에서 10분 동안 가열하는 단계인 수득 방법.
제1항에서,
상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 수득 함량은 상기 동백꽃 1 kg 당 10g 내지 20g인 수득 방법.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 수득 방법으로 수득된 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효 성분으로 포함하는 피부재생용 화장료 조성물.