KR20200062242A - 모발 성장을 조절하는 조성물 및 방법 - Google Patents

Abstract

본 명세서는 모발 성장을 촉진시킬 수 있는, 전자 전달 사슬(Electron Transfer Chain; ETC) 억제제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 명세서는 모발 성장을 촉진시키는 방법, 또는 모발 성장에 영향을 주는 상태 또는 장애, 이를 테면 대머리 또는 탈모증을 치료하는 방법에 더 관계한다.

Description

모발 성장을 조절하는 조성물 및 방법

관련된 출원

본 출원은 2017년 9월 29일자로 제출된 미국 가특허출원 일련 번호 62/566,031을 청구한다. 본 출원의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 편입된다.

배경

모낭 줄기 세포 (hair follicle stem cells; HFSC)는 모발 주기의 시작 (휴지기-성장기 전이)과 상관되는 짧은 기간의 증식에 의해 중단되는 연속적인 정지 (휴지기) 라운드를 겪는다. HFSC의 증식 또는 활성화는 모발 주기의 진전의 전제 조건으로 잘 알려져 있다. 치료 옵션의 발전에도 불구하고, 대머리와 탈모증은 모든 개인에게 성공적으로 치료될 수 없는 상태가 지속된다. 기존 치료 중 일부는 사용자에게 불편하고, 다른 치료법은 외과 적 개입 또는 기타 침습적 절차를 필요로 한다. 추가적인 치료법이 요구된다.

발명의 요약

특정 측면에서, 본 명세서는 전자 전달 사슬 (Electron Transfer Chain; ETC)의 억제제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 특정 구체예들에서, 상기 약제학적 조성물은 국소 투여용으로 제형화된다.

특정 측면에서, 본 명세서는 모발 성장을 촉진시키는 방법을 제공하는데, 이 방법은 본원에서 기술된 환자에게 치료요법적 유효량의 조성물을 투여하는 것을 포함한다.

도면의 간단한 설명
도 1a-1d에서 ETC 억제제를 국소 처치하면 모발 주기를 촉진시킬 수 있음을 보여준다. 도 1a: 마우스를 50 일차(휴지기)에 면도하고, 2-3주 동안 격일로 펜포르민 (5uM)으로 국소 치료 하였다. 이미지는 10 일과 16 일차에 펜포르민 치료에 반응하여 새로운 색소 침착과 모발 성장을 보여 주며, H와 E 착색은 모발 주기의 진행을 확인한다(아래). 도 1b: 치료 및 대조군에서 모발 주기 변화의 정량화. 13 마리의 비히클 및 9 마리의 펜포르민 처리된 수컷 마우스에 대해 정량을 수행하였다. 도. 1c: 표피, 진피 및 피하 두께의 변화를 현미경으로 평가하고, 정량화하였다. 도. 1d: HFSCs 마커 (Sox9) 및 증식 마커 (Ki-67)에 대한 면역조직화학에서 HFSCs가 펜포르민, 로테논 및 안티마이신 A에 의한 ETC 억제에 대한 반응으로 활성화되었음을 보여 주었다. A와 C의 눈금 막대는 50 마이크로미터를 나타낸다. D의 눈금 막대는 25 마이크로미터를 나타낸다.
도 2a 및 2b에서는 국소 ETC 억제로 젖산염 생산이 증가됨을 보여준다. 도 2a: 마우스를 지시된 ETC 억제제로 48 시간 동안 국소적으로 처리 하였다. 전체 표피를 단리하고, 용해시키고, LDH 활성 분석을 수행하였다. 상대적인 LDH 활성은 2 마리의 상이한 동물에서 30 분에 걸친 활성 속도로 제시된다. 도 2b: 마우스를 ETC 억제제로 48 시간 (상단) 또는 10 일 (하단) 동안 국소적으로 처리하였다. 전체 표피를 분리하고, 대사산물을 추출하여, 대사체학(metabolomics) 처리하였다. 히트맵(Heatmap)은 해당작용(glycolysis) 및 TCA 주기와 관련된 대사 산물의 상대적인 수준을 나타낸다.
도 3a-3d에서 ETC 억제제를 국소 처치하면 모발 주기를 촉진시킬 수 있음을 보여준다. 도 3a: 마우스를 50 일차(휴지기)에 면도하고, 2-3주 동안 격일로 안티마이신 A 또는 로테논으로 국소 치료하였다. 이미지는 로테논 또는 안티마이신 A 치료에 반응하여 새로운 색소 침착을 보여 주며, H 및 E 착색은 모발 주기의 진행을 확인한다(아래). 도 3b: 치료 및 대조군에서 모발 주기 변화의 정량화. 13 마리의 비히클 처리, 11 마리의 로테논 처리 및 9 마리의 안티마이신 A 처리된 수컷 동물을 사용하여 정량화를 수행하였다. 도 3c: 표피, 진피 및 피하 두께의 변화를 현미경으로 평가하고, 정량화하였다. 도 3d: ETC 억제제의 국소 적용으로 인한 염증의 증거를 탐지하기 위해 면역 국소화(immunolocalization)를 수행하였다. 비히클 및 ETC 억제제 둘다로 처리된 피부는 인광체-EGFR (케모카인 수용체), CD11b (대식세포의 마커) 및 IL6 (케모카인)에 대해 면역착색되었다. 과형성 표피를 갖는 상처입은 동물의 비히클 처리된 피부를 염증의 마커에 대한 양성 대조군으로서 사용하였다. 눈금 막대는 50 마이크로미터를 나타낸다.
도 4a 및 4b. ETC 억제제로 치료하면, 노화된 마우스의 모발 주기를 가속화시킬 수 있다. 도 4a: 암컷 마우스를 17 월령에 면도한 후, 비히클 또는 표시된 ETC 억제제로 격일로 최대 30 일 동안 처리하였다. 시간 경과에 따라 촬영된 이미지는 ETC 억제가 노화된 마우스에서 면도 후 모발의 더욱 완벽한 재성장을 촉진한다는 것을 나타낸다. 두 쌍의 동물로부터 표현형 출현의 정량화는 오른쪽에 제시되어 있다. 제시된 데이터는 각각 10 마리의 마우스를 사용한 3 가지 독립적인 실험을 나타낸다. 도 4b, A에 묘사된 모발 주기 실험의 종료시 ETC 억제제로 처리된 피부로부터 분류된 HFSCs로부터 대사산물을 분리하였다. 히트맵은 표시된 대사산물의 상대적인 수준을 보여준다.

발명의 상세한 설명

많은 신호 경로가 성체 모낭 줄기 세포 (hair follicle stem cells; HFSCs)의 활성화 및 모발 주기 관리에 연루되어 있지만, 줄기 세포 제어의 세포 고유 메커니즘에 대해서는 덜 알려져 있다. 젖산염 생산은 모낭 줄기 세포 활성의 세포의 주요 고유 조절 인자로서 확인되었으며, 이는 세포 대사가 줄기 세포 활성화에 중요하다는 것을 시사한다. 유전자이식(transgenic) 방법은 전자 전달 사슬 (Electron Transfer Chain; ETC)의 유전자이식 차단이 모낭의 퇴화를 초래한다는 것을 제안하기 위해 사용되어 왔다. 그러나, 본 명세서는 ETC의 완전한 절제와 반대로, ETC 활성의 약리학적 폐기가 유의적인 세포 독성 없이, 모발 주기 활성화를 촉진할 수 있는 조성물 및 방법을 제공한다. 더욱이, 본원에 제공된 대사 데이터는 ETC 억제가 Ldh 효소에 대한 피루베이트 접근성을 증가시키고, 따라서 젖산염 생산을 증가시켜 모발 활성화를 촉진할 수 있음을 시사한다. 마지막으로, 이러한 유형의 ETC 억제는 노화된 생쥐에서 모발 주기를 가속화하기 위해 사용될 수 있다. 이러한 결과는 모낭 줄기 세포 활성화를 촉진하는 예상밖의 안전한 방법을 가리킨다.

지난 30 년 동안, HFSCs에 작용하여 정지(quiescence) 뿐만 아니라 활성화를 촉진하는 다수의 신호 전달 경로가 확인되었다. HFSC 조절의 고유 메카니즘과 관련하여, 표피에서 개별 세포 유형의 세포 대사에 대해서는 덜 알려져 있다. 일반적으로, 체세포는 포도당의 흡수와 처리에 의해 생성된 피루베이트로부터 에너지를 생산하기 위해 주로 전자 전달 사슬 (Electron Transfer Chain; ETC)을 사용하는 것으로 추정되며, 초기 배아 및 암 세포는 또한 피루베이트로부터의 젖산염의 생산에 의존하는 것으로 생각된다. HFSCs는 ETC를 통한 에너지 생산과, 젖산 생산의 균형을 유지한다. 표피에서 대사 활동을 정의하려는 기존 노력은 전체 모낭에 대한 효소 활동의 측정에 초점을 맞추었다. 또한, 여러 연구에서 ETC 구성 요소들의 삭제를 위해 전체 표피 (모낭 포함)를 표적으로 하는 유전자이식 모델을 사용했다. 이들 연구는 ETC의 유전자 봉쇄가 모낭의 퇴행을 초래한다고 시사했다. 그러나, ETC 복합체의 억제-ETC 복합체의 유전자 절제와 반대되는-가 세포 대사 또는 운명 결정에 영향을 미치는지 여부는 명확하지 않다.

본 명세서는 ETC 활성의 억제가 HFSCs의 증식을 유발하고, 모발 성장을 촉진한다는 것을 보여준다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "ETC 억제제"는 ETC 복합체 I, II, III, 또는 IV, 바람직하게는 ETC 복합체 I 또는 III를 억제시킬 수 있는 임의의 제제를 포함한다. 이들 복합체의 각 억제제는 당분야에 공지되어 있다. ETC 복합체 I의 억제제는 메트포르민, 펜포르민, 부포르민, 로테논, 에피베르베린, 피에리시딘 A, 아미탈, 캡사이신, 할로페리돌, 리스페리돈, 부피바카인, 리도카인, 할로탄, 단트로렌, 페닐오인, 클로피브레이트, 및 페노피브라트를 포함한다. ETC 복합체 II의 억제제는 말로네이트 나트륨, 테노일트리플루오아세톤, 시클로포스파미드, 및 케토코나졸을 포함한다. ETC 복합체 III의 억제제는 안티마이신 A, 아세타아미노펜, 이소플루란, 및 세보플루란을 포함한다. ETC 복합체 IV의 억제제는 세팔로리딘, 세파졸린, 및 세팔로틴을 포함한다. 특정 ETC 억제제들은 일반적으로 U.S. 특허 번호. 8,993,587에 기술되어 있으며, 이 전문이 본원에 참고자료에 편입된다.

특정 측면에서, 본 명세서는 전자 전달 사슬(Electron Transfer Chain; ETC)의 억제제를 포함하는, 국소 투여용으로 제형화된 약제학적 조성물을 제공한다. 본원에서 기술된 바와 같이, ETC 억제제는 HFSCs의 증식을 야기시키고, 이로 인하여 모발 성장을 촉진시킬 수 있다.

특정 구체예들에서, 상기 전자 전달 사슬 억제제는 전자 전달 사슬복합체 I, II, III, 또는 IV의 억제제다. 특정 구체예들에서, 상기 전자 전달 사슬 억제제는 메트포르민, 펜포르민, 부포르민, 로테논, 에피베르베린, 피에리시딘 A, 아미탈, 캡사이신, 할로페리돌, 리스페리돈, 부피바카인, 리도카인, 할로탄, 단트로렌, 페닐오인, 클로피브레이트, 페노피브라트, 말로네이트 나트륨, 테노일트리플루오아세톤, 시클로포스파미드, 케토코나졸, 안티마이신 A, 아세타아미노펜, 이소플루란, 세보플루란, 세팔로리딘, 세파졸린, 또는 세팔로틴; 또는 이의 약제학적으로 수용가능한 염이다.

특정 구체예들에서, 상기 전자 전달 사슬 억제제는 전자 전달 사슬복합체 I 또는 III의 억제제다. 특정 구체예들에서, 상기 전자 전달 사슬 억제제는 메트포르민, 펜포르민, 부포르민, 로테논, 에피베르베린, 피에리시딘 A, 아미탈, 캡사이신, 할로페리돌, 리스페리돈, 부피바카인, 리도카인, 할로탄, 단트로렌, 페닐오인, 클로피브레이트, 페노피브라트, 안티마이신 A, 아세타아미노펜, 이소플루란, 또는 세보플루란이다. 특정 구체예들에서, 상기 전자 전달 사슬 억제제는 로테논, 펜포르민, 또는 안티마이신 A이다.

특정 측면에서, 본 명세서는 본원에서 기술된 바와 같은 ETC 억제제를 포함하는 치료요법적 유효량의 조성물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 모발 성장을 촉진시키는 방법을 제공한다. 특정 구체예들에서, 상기 상태 또는 장애는 대머리 또는 탈모증이다.

약제학적 조성물

본 발명의 조성물 및 방법은 이를 필요로 하는 개체를 치료하는데 이용될 수 있다. 특정 구체예들에서, 상기 개체는 인간 또는 비-인간 포유동물과 같은 포유동물이다. 인간과 같은 동물에게 투여될 때, 조성물 또는 화합물은 바람직하게는 예를 들어, 본원에 개시된 바와 같은 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물로서 투여된다. 약제학적으로 허용가능한 담체는 당분야에 잘 알려져 있고, 예를 들면, 물 또는 생리학적 완충 식염수와 같은 수용액, 또는 글리콜, 글리세롤, 올리브 오일과 같은 오일, 또는 주사 가능한 유기 에스테르와 같은 다른 용매 또는 비히클을 포함한다. 바람직한 구체예들에서, 이러한 약제학적 조성물이 인간 투여용일 경우, 특히 침습적 투여 경로 (즉, 상피 장벽을 통한 수송 또는 확산을 우회하는 경로, 예컨대 주사 또는 이식)를 위한 경우, 수용액은 발열원(pyrogen)이 없거나 또는 실질적으로 발열원이 없다. 부형제는 예를 들어, 제제의 지연 방출에 영향을 주기 위한 또는 하나 또는 그 이상의 세포, 조직 또는 기관을 선택적으로 표적화하도록 하는 것으로 선택될 수 있다. 상기 약제학적 조성물은 정제, 캡슐 (스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 과립, 재구성용 동결건조제, 분말, 용액, 시럽, 좌제, 주사제 또는 이와 유사한 것들과 같은 투여 단위 형태일 수 있다. 상기 조성물은 또한 경피 전달 시스템, 예를 들어, 피부 패치에 존재할 수 있다. 상기 조성물은 또한 로션, 크림 또는 연고와 같은 국소 투여에 적합한 용액에 존재할 수 있다.

약제학적으로 허용가능한 담체는 예를 들어, 본원에 개시된 바와 같은 화합물과 같은 화합물의 안정화, 용해도 증가 또는 흡수를 위해 작용하는 생리학적으로 허용되는 제제를 함유할 수 있다. 이러한 생리학적으로 허용되는 제제는 예를 들어, 포도당, 수크로스 또는 덱스트란과 같은 탄수화물, 아스코르브산 또는 글루타티온과 같은 항산화제, 킬레이트제, 저-분자량 단백질 또는 다른 안정화제 또는 부형제를 포함한다. 생리학적으로 허용가능한 제제를 비롯하여, 약제학적으로 허용가능한 담체의 선택은 예를 들면, 상기 조성물의 투여 경우에 따라 달라진다. 조제물(preparation) 또는 약제학적 조성물은 자가-유화 약물 전달 시스템 또는 자가-미세유화 약물 전달 시스템일 수 있다. 상기 약제학적 조성물 (조제물)은 또한, 리포좀 또는 다른 중합체 매트릭스일 수 있으며, 이는 예를 들어, 본원에 개시된 바와 같은 화합물을 혼입할 수 있다. 예를 들어, 인지질 또는 다른 지질을 포함하는 리포좀은 제조 및 투여가 비교적 간단한 비독성이며, 생리학적으로 허용되며, 대사 가능한 담체이다.

구절 "약제학적으로 수용가능한"이란 건전한 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 기타 문제 또는 합병증 없이, 그리고 합당한 위해율(benefit/risk ratio)로 인간 및 동물 조직과의 접촉에 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물, 및/또는 투여 형태를 지칭한다.

구절 "약제학적으로 허용가능한 담체"란 본원에서 사용된 바와 같이, 약제학적으로 허용가능한 재료, 조성물 또는 비히클, 이를 테면, 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제, 용매 또는 포집화 물질을 의미한다. 각 담체는 제제의 다른 성분과 양립성이고, 환자에게 해롭지 않다는 의미에서 "허용가능" 해야 한다. 약제학적으로 허용되는 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 다음을 포함한다: (1) 유당, 포도당 및 자당과 같은 당류; (2) 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분; (3) 셀룰로오스 및 나트륨 카복시 메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 및 셀룰로오스 아세테이트와 같은 이의 유도체; (4) 분말로된 트라가탄; (5) 맥아; (6) 젤라틴; (7) 활석; (8) 코코아 버터 및 좌약 왁스와 같은 부형제; (9) 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유 및 대두유와 같은 오일; (10) 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜; (11) 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리올; (12) 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; (13) 한천; (14) 수산화 마그네슘 및 수산화 알루미늄과 같은 완충제; (15) 알긴산; (16) 발열원-없는 물; (17) 등장성 염수; (18) 링거 용액; (19) 에틸 알코올; (20) 인산 완충액; 그리고 (21) 약제학적 제형에 이용된 기타 비-독성 양립가능한 물질.

약제학적 조성물 (제조물)은 다음을 포함하는 다수의 투여 경로 중 임의의 것을 통하여 대상에게 투여될 수 있는데, 예를 들면, 경구 (예를 들어, 수성 또는 비-수성 용액 또는 현탁액, 정제, 캡슐 (스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 볼루스, 분말, 과립, 혀에 도포하기 위한 페이스트); 구강 점막(가령, 혀 아래)을 통한 흡수; 피하; 경피 (가령, 피부에 바르는 패치); 그리고 국소 (예를 들면, 피부에 바르는 크림, 연고, 또는 스프레이). 상기 화합물은 또한 흡입용으로 제형화될 수 있다. 특정 구체예들에서, 멸균 수에 화합물을 단순히 용해시키거나 또는 현탁시킬 수 있다. 적절한 투여 경로 및 그에 적합한 조성물의 세부 사항은 예를 들어, 미국 특허 번호. 6,110,973, 5,763,493, 5,731,000, 5,541,231, 5,427,798, 5,358,970 및 4,172,896 및 그에 인용된 특허에서 찾아볼 수 있다.

상기 제형은 편리하게는 단위 투여 형태로 제공될 수 있고, 약학 분야에 잘 알려진 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 숙주, 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 일반적으로 치료 효과를 생성하는 화합물의 양일 것이다. 일반적으로, 100% 중에서, 상기 양은 활성 성분의 약 1% 내지 약 99%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 70%, 가장 바람직하게는 약 10% 내지 약 30%의 범위일 것이다.

이들 제형 또는 조성물의 제조 방법은 활성 화합물, 예를 들어 본원에 개시된 바와 같은 화합물을 담체 및 임의선택적으로 하나 또는 그 이상의 보조 성분과 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 상기 제형은 본원에 개시된 바와 같은 화합물을 액체 담체, 또는 미세하게 분할된 고체 담체, 또는 이들 둘 모두와 균일하고 친밀하게 회합시킨 다음, 필요한 경우 생성물을 성형함으로써 제조된다.

경구 투여용으로 적합한 본 발명의 제형은 캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 카시에(cachets), 알약, 테블릿, 로젠지(풍미제 베이스, 보통, 슈크로스 및 아카시아 또는 트라가탄 이용), 냉동건조(lyophile), 분말, 과립, 또는 수성 또는 비-수성 액체에 용액 또는 현탁액, 수중유(oil-in-water) 또는 유중수(water-in-oil) 에멀션, 또는 엘릭시르(elixir) 또는 시럽, 또는 파스티렐스(pastilles) (비활성 베이스, 이를 테면 젤라틴 및 글리세린, 또는 슈크로스 및 아카시아 이용), 및/또는 구강 세척제 및 이와 유사한 것의 형태로 경구 투여될 수 있는데, 이들 각각은 활성 성분으로써, 본원에서 기술된 화합물의 사전 결정된 양을 함유한다. 조성물 또는 화합물은 볼루스(bolus), 연질약(electuary), 또는 페이스트로 또한 투여될 수도 있다.

경구 투여 ((스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함) 캡슐, 테블릿, 알약, 당의정, 분말, 과립 및 이와 유사한 것들)용 고형 투약형을 준비하기 위하여, 상기 활성 성분은 하나 또는 그 이상의 약제학적으로 수용가능한 담체, 이를 테면 구연산 나트륨 또는 인산 이칼슘, 및/또는 다음중 임의의 것과 혼합된다. (1) 충전제 또는 연장제, 이를 테면 전분, 락토즈, 슈크로즈, 포도당, 만니톨, 및/또는 규산; (2) 결합제, 이를 테면, 예를 들면, 카르복시메틸셀룰로오스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐 피롤리돈, 슈크로즈, 및/또는 아카시아; (3) 습윤제, 이를 테면 글리세롤; (4) 분해제, 이를 테면 한천-한천, 탄산 칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 규산염, 및 탄산 나트륨; (5) 용액 지체제, 이를 테면 파라핀; (6) 흡수 가속화제, 이를 테면 4급 암모늄 화합물; (7) 습윤제, 이를 테면, 예를 들면, 세틸 알코올 및 글리세롤 모노스테아레이트; (8) 흡수제, 이를 테면 카올린 및 벤토나이트 점토; (9) 윤활제, 이를 테면, 활석, 스테아레이트 칼슘, 스테아레이트 마그네슘, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 라우릴 술페이트 나트륨, 및 이의 혼합물; (10) 개질된 및 비개질된 시클로덱스트린과 같은 착화 제; 그리고 (11) 발색제. 캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함)의 경우, 테블릿 및 알약의 경우, 상기 약제학적 조성물은 완충제를 또한 포함할 수 있다. 유사한 형태의 고체 조성물은 가령, 락토스 또는 유당과 같은 부형제, 뿐만 아니라 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 및 이와 유사한 것을 이용하여 연질 및 경질 충전된 젤라틴 캡슐 안에 충전물로 이용될 수 있다.

정제는 임의로 하나 또는 그 이상의 보조 성분과 함께 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압착 정제는 결합제 (예를 들어, 젤라틴 또는 히드록시프로필메틸 셀룰로오스), 윤활제, 비활성 희석제, 보존제, 붕해제 (예를 들어, 전분 글리콜산 나트륨 또는 가교된 카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨), 표면-활성 또는 분산제를 사용하여 제조될 수 있다. 성형된 정제는 불활성 액체 희석제로 적신 분말 화합물의 혼합물을 적합한 기계에서 성형함으로써 제조될 수 있다.

당과(dragees), 캡슐(스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 알약 및 과립과 같은 약학 조성물의 정제 및 다른 고체 투여 형태는 선택적으로 장용 코팅 및 약제-제형 분야에 공지되어 있는 기타 코팅과 같은 코팅 및 쉘(shells)로 스코어링되거나 또는 제조될 수 있다. 이들은 또한 원하는 방출 프로파일을 제공하기 위하여, 예를 들면, 다양한 비율의 히드록시프로필메틸 셀룰로오스 및 다른 중합체 매트릭스, 리포좀 및/또는 미소구체를 사용하여, 활성 성분의 느린 방출 또는 제어된 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 이들은 예를 들어, 박테리아-막이(retaining) 필터를 통한 여과에 의해, 또는 멸균수 또는 사용 직전에 다른 멸균 주사용 매체에 용해될 수 있는 멸균 고체 조성물의 형태로 멸균제를 혼입함으로써 멸균될 수 있다. 이들 조성물은 또한 선택적으로 불투명화제를 함유할 수 있고, 임의로 위장관의 특정 부분에서 지연된 방식으로 활성 성분(들)만을 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 매립형(embedding) 조성물의 예는 중합체 물질 및 왁스를 포함한다. 상기 활성 성분은 또한 적절한 경우, 하나 또는 그 이상의 상기 기재된 부형제와 함께 마이크로-캡슐화된 형태일 수 있다.

경구 투여를 위한 액체 투약형은 약제학적으로 수용가능한 에멀션, 재구성용 동결건조제, 마이크로에멀션, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르를 포함할 수 있다. 활성 성분에 추가하여, 액체 투약형은 당분야에서 통상적으로 이용하는 비활성 희석제, 예를 들면, 물 또는 기타 용매, 시클로덱스트린 및 이의 유도체, 가용화 물질 및 유화제, 가령, 에틸 알코올, 이소프로필 알코올, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 오일 (가령, 목화씨, 땅콩, 옥수수, 검, 올리브, 피마자, 및 참깨유), 글리세롤, 테트라히드로퓨릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 및 이의 혼합물을 포함할 수 있다.

불활성 희석제 외에도, 경구 조성물은 이를 테면, 습윤제, 유화제 및 현탁제, 감미제, 향료, 착색제, 방향제 및 방부제와 같은 보조제를 포함할 수 있다.

현탁액은 활성 화합물 이외에, 예를 들면, 에톡시화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨, 및 소르비탄 에스테르, 미정질 셀룰로즈, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 한천-한천, 그리고 트라가탄 및 이들의 조합을 포함할 수 있다.

국소 또는 경피 투여를 위한 투약 형태는 분말, 스프레이, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 용액, 패치 및 흡입제를 포함한다. 활성 화합물은 멸균 조건 하에서 약제학적으로 허용되는 담체와 함께, 그리고 필요할 경우 임의의 보존제, 완충제 또는 추진제와 혼합될 수 있다.

연고, 페이스트, 크림 및 겔은 활성 화합물 이외에 동물 및 식물성 지방, 오일, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가탄, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 규산, 활석 및 산화 아연, 또는 이들의 혼합물을 함유할 수 있다.

분말 및 스프레이는 활성 화합물 이외에, 락토스, 활석, 규산, 수산화 알루미늄, 규산 칼슘 및 폴리아미드 분말 또는 이들 물질의 혼합물과 같은 부형제를 함유할 수 있다. 스프레이는 클로로플루오로탄화수소와 같은 통상적인 추진제 및 부탄 및 프로판과 같은 휘발성 비-치환된 탄화수소를 추가로 함유할 수 있다.

경피 패치는 본원에 개시된 바와 같은 화합물을 제어된 방식으로 신체로 전달하는 추가 이점을 갖는다. 이러한 투여 형태는 활성 매질에 활성 화합물을 용해 또는 분산시킴으로써 제조될 수 있다. 피부를 통한 화합물의 플럭스를 증가시키기 위해 흡수 증진제가 또한 사용될 수 있다. 이러한 플럭스의 속도는 속도 제어 막을 제공하거나 또는 화합물을 중합체 매트릭스 또는 겔에 분산시킴으로써 제어될 수 있다.

본원에 사용된 어구 "비경구 투여" 및 "비경구적으로 투여된"이란 장 및 국소 투여보다는, 일반적으로 주사에 의한 투여 방식을 의미하며, 정맥내, 근육내, 동맥내, 척수강내, 낭내(intracapsular), 안와내, 심장내, 피내, 복강내, 기관내, 피하, 표피하(subcuticular), 관절내, 피막하(subcapsular), 지주막아래, 척수내 및 흉골내 주사 및 주입를 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 비경구 투여에 적합한 약학 조성물들은 본 명세서의 하나 또는 그 이상의 활성 화합물과 하나 또는 그 이상의 약학적으로 허용되는 멸균 등장성 수성 또는 비수용액, 분산액, 현탁액 또는 유화액, 또는 사용 직전에 멸균 주사 용액 또는 분산액으로 재구성될 수 있는 멸균 분말을 포함할 수 있고, 여기에는 항산화제, 완충제, 정균제, 그리고 의도된 수령인의 혈액에 등장성인 제제를 제공하는 용지, 또는 현탁 또는 농후제가 포함한다.

본 발명의 약제학적 조성물에 사용될 수 있는 적합한 수성 및 비수성 담체의 예는 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 이와 유사한 것들), 그리고 이의 적절한 혼합물, 식물성 오일, 가령 올리브 오일, 그리고 주사가능한 유기 에스테르, 가령, 에틸 올레에이트를 포함한다. 적절한 유동성은 예를 들어, 코팅 물질, 가령, 레시틴의 사용, 분산액의 경우 요구되는 입자 크기의 유지 그리고 계면 활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.

이들 조성물은 또한 보존제, 습윤제, 유화제 및 분산제와 같은 보조제를 함유 할 수 있다. 미생물의 작용의 예방은 파라벤, 클로로부탄올 및 페놀 소르브산 및 이와 유사한 것들과 같은 다양한 항박테리아 및 항진균제를 포함시킴으로써 확보될 수 있다. 조성물에 설탕, 염화나트륨 등의 등장화제를 포함시키는 것이 바람직할 수도 있다. 추가적으로, 예를 들어, 모노스테아르산 알루미늄 및 젤라틴과 같은 흡수를 지연시키는 물질을 포함시킴으로써 주사가능한 약형의 연장된 흡수가 이루어질 수 있다.

일부 경우에, 약물의 효과를 연장시키기 위해, 피하 또는 근육 내 주사로부터 약물의 흡수를 늦추는 것이 바람직하다. 이는 수용해도(water solubility)가 불량한 결정질(crystalline) 또는 비정질(amorphous) 물질의 액체 현탁액을 사용함으로써 달성될 수 있다. 그 다음 약물의 흡수 속도는 그의 용해 속도에 의존하며, 이는 결국 결정 크기 및 결정 형태에 따라 달라질 수 있다. 대안으로, 비경구 투여된 약물 형태의 흡수 지연은 약물을 오일 비히클에 용해 또는 현탁시킴으로써 달성된다.

주사 가능한 데포(depot) 형태는 폴리락티드-폴리글리콜리드와 같은 생분해성 중합체에서 본 발명의 화합물의 미세캡슐화된 매트릭스를 형성함으로써 만들어진다. 약물 대 중합체의 비율, 및 사용되는 특정 중합체의 성질에 따라, 약물 방출 속도가 제어될 수 있다. 다른 생분해성 중합체의 예로는 폴리(오르토에스테르) 및 폴리(안하이드리드)를 포함한다. 데포 주사용 제형은 또한 약물을 신체 조직과 양립성인 리포좀 또는 마이크로에멀젼에 포획시킴으로써 제조된다.

본 발명의 방법에 사용하기 위하여, 활성 화합물은 그 자체로 제공되거나, 또는 예를 들면, 약제학적으로 허용가능한 담체와 조합된 활성 성분의 0.1 내지 99.5% (더욱 바람직하게는, 0.5 내지 90%)를 포함하는 약제학적 조성물로 제공될 수 있다.

도입 방법은 충전식 또는 생분해성 장치에 의해 제공될 수도 있다. 단백질성 바이오제약을 비롯한 약물의 제어된 전달을 위해 최근 몇 년 동안 다양한 서방형 중합체 장치가 개발되었고, 생체 내에서 시험되었다. 생분해성 및 비-분해성 폴리머를 포함하는 다양한 생체적합성 폴리머(하이드로겔 포함)는 특정 표적 부위에서 화합물의 지속 방출을 위한 임플란트를 형성하는데 사용될 수 있다.

상기 약제학적 조성물에서 활성 성분의 실제 투여량 수준은 환자에게 독성이 없으면서도, 특정 환자, 조성물 및 투여 방식에 대해 원하는 치료 반응을 달성하는데 효과적인 양의 활성 성분을 얻도록 변화시킬 수 있다.

선택된 투여량 수준은 이용되는 특정 화합물 또는 화합물의 조합, 또는 이의 에스테르, 염 또는 아미드의 활성, 투여 경로, 투여 시간, 사용되는 특정 화합물(들)의 배출 속도, 치료 기간, 사용된 특정 화합물(들)과 함께 사용되는 다른 약물, 화합물 및/또는 물질, 치료되는 환자의 연령, 성별, 체중, 상태, 전반적인 건강 및 이전의 병력, 및 의학 분야에서 잘 알려진 인자들이 포함된, 다양한 인자들에 따라 달라질 것이다.

당해 분야의 숙련가를 갖는 의사 또는 수의사는 필요한 약제학적 조성물의 치료요법적 유효량을 쉽게 결정하고, 처방할 수 있다. 예를 들어, 의사 또는 수의사는 원하는 치료 효과를 달성하고, 원하는 효과가 달성될 때까지 점차적으로 복용량을 증가시키기 위해 필요한 것보다 낮은 수준에서 약제학적 조성물 또는 화합물의 투여 용량을 시작할 수 있다. "치료요법적 유효량"은 원하는 치료 효과를 이끌어 내기에 충분한 화합물의 농도를 의미한다. 화합물의 유효량은 대상의 체중, 성별, 연령 및 병력에 따라 가변적일 것이라는 것은 일반적으로 인지된다. 상기 유효량에 영향을 미치는 다른 요인들은 환자 상태의 중증도, 치료될 장애, 화합물의 안정성, 그리고 원한다면, 본원 발명에서 기재된 화합물과 함께 투여되는 다른 유형의 치료제가 포함될 수 있으나, 이에 국한되지는 않는다. 상기 제제의 다중 투여에 의해 더 큰 전체 투여 용량이 전달될 수 있다. 효능 및 투여량을 결정하는 방법은 당업자에게 공지되어 있다 (Isselbacher 외. (1996) Harrison's Principles of Internal Medicine 13 ed., 1814-1882, 이는 본원에 참고자료에 편입됨).

일반적으로, 본 발명의 조성물 및 방법에 사용되는 활성 화합물의 적합한 일일 용량은 치료 효과를 생성하는데 사용되는 화합물의 효과적인 최저 용량일 것이다. 이러한 유효량은 일반적으로 상기 기재된 인자들에 따라 달라질 것이다.

원하는 경우, 유효한 일일 투여 용량의 활성 화합물은 선택적으로 단위 투여 형태로, 하루 종일 적절한 간격에서 1, 2, 3, 4, 5, 6 회 또는 그 이상의 하위-투여 용량으로 별도로 투여될 수 있다. 본 발명의 특정 구체예들에서, 상기 활성 화합물은 일일 2회 또는 3회 투여될 수 있다. 바람직한 구체예들에서, 상기 활성 화합물은 일일 1회 투여될 것이다.

이러한 치료를 받는 환자는 영장류, 특히 인간; 그리고 말, 소, 돼지, 양, 고양이 및 개와 같은 다른 포유 동물; 가금류; 그리고 일반적으로 애완 동물을 포함하는 치료를 요하는 임의의 동물이다.

특정 구체예들에서, 본 발명의 화합물은 단독으로 이용되거나, 또는 다른 유형의 치료제와 함께 공동으로 투여될 수 있다.

본 명세서는 본 발명의 조성물 및 방법에서 기술되는 제제의 약제학적으로 허용가능한 염의 이용을 포함한다. 특정 구체예들에서, 본 발명의 고려되는 염은 알킬, 디알킬, 트리알킬 또는 테트라-알킬 암모늄염을 포함하지만, 이에 국한되지는 않는다. 특정 구체예들에서, 본 발명의 고려되는 염은 L-아르기닌, 벤넨타민, 벤자틴, 베타인, 수산화 칼슘, 콜린, 딘올, 디에탄올아민, 디에틸아민, 2-(디에틸아미노)에탄올, 에탄올아민, 에틸렌디아민, N-메틸글루카민, 히드라바민, 1H-이미다졸, 리튬, L-리신, 마그네슘, 4-(2-히드록시에틸)몰포린, 피페라진, 칼륨, 1-(2-히드록시에틸)피롤리딘, 나트륨, 트리에탄올아민, 트로메타민 및 아연 염을 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 특정 구체예들에서, 본 발명의 고려되는 염은 Na, Ca, K, Mg, Zn 또는 다른 금속 염을 포함하지만, 이에 국한되지는 않는다. 특정 구체예들에서, 본 발명에서 고려되는 염은 다음을 포함하나, 이에 국한되지 않는다: 1-하이드록시-2-나프토산, 2,2-디클로로아세트산, 2-하이드록시에탄설폰산, 2-옥소글루타르산, 4-아세트아미도벤조산, 4-아미노살리실산, 아세트산, 아디프산, l-아스코르브산, l-아스파르트산, 벤젠설폰산, 벤조산, (+)-캄포르산, (+)-캄포르-10-설폰산, 카프리산 (데칸산), 카프로산(헥사논산), 카프릴산 (옥탄산), 탄산, 신남산, 구연산, 시클라민산, 도데실황산, 에탄-1,2-디설폰산, 에탄술폰산, 포름산, 푸마르산, 갈락타르산, 겐티스산, d-글루코헵톤산, d-글루콘산, d-글루쿠론산, 글루탐산, 글루타르산, 글리세로포스포르산, 글리콜산, 히푸르산, 브롬화수소산, 염산, 이소부티르산, 락트산, 락토비온산, 라우르산, 말레산, l-말산, 말론산, 만델산, 메탄설폰산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 나프탈렌-2-설폰산, 니코틴산, 질산, 올레산, 옥살산, 팔미트산, 파모산, 인산, 프로피온산, l-피로글루탐산, 살리실산, 세바스산, 스테아르산, 숙신산, 황산, l-타르타르산, 티오시안산, p-톨루엔술폰산, 트리플루오로아세트산 및 운데실렌산염.

상기 약제학적으로 허용가능한 산 부가 염은 또한 물, 메탄올, 에탄올, 디메틸포름아미드 및 이와 유사한 것들과 같은 다양한 용매화물로서 존재할 수 있다. 이러한 용매화물의 혼합물이 또한 제조될 수 있다. 이러한 용매화물의 공급원은 결정화 용매로부터, 결정화 또는 제조 용매에 고유하거나 또는 이러한 용매에 우연발생적일 수 있다.

라우릴 설페이트 나트륨 및 스테아레이트 마그네슘과 같은 습윤제, 유화제 및 윤활제 뿐만 아니라 착색제, 방출제(release agents), 코팅제, 감미제, 풍미제 및 방향제, 보존제 및 산화 방지제가 또한 조성물에 존재할 수 있다.

약제학적으로 허용가능한 항산화제의 예로는 다음을 포함한다: (1) 아스코르브산, 시스테인 히드로클로라이드, 중황산나트륨, 메타중아황산 나트륨, 아황산나트륨 및 이와 유사한 것과 같은 수용성 항산화제; (2) 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화된 히드록시아니솔 (BHA), 부틸화된 히드록시톨루엔 (BHT), 레시틴, 프로필 갈레이트, 알파-토코페롤 및 이와 유사한 것들과 같은 지용성(oil-soluble) 항산화제; 그리고 (3) 시트르산, 에틸렌디아민 테트라아세트산 (EDTA), 소르비톨, 타르타르산, 인산 및 등과 같은 금속-킬레이트제.

정의

본 명세서에서 달리 정의되지 않는 한, 본 출원에 사용된 과학 및 기술 용어는 당업자에게 일반적으로 이해되는 의미를 가질 것이다. 일반적으로, 본원에서 기술된 화학, 세포 및 조직 배양, 분자생물학, 세포 및 암 생물학, 신경생물학, 신경화학, 바이러스학, 면역학, 미생물학, 약학, 유전학 그리고 단백질 및 핵산 화학과 관련된 명명법 및 이의 기술들은 당업계에 잘 알려져 있고, 통상적으로 사용되는 것들이다.

본 명세서의 방법 및 기술은 다른 언급이 없는 한, 일반적으로 당업계에 널리 공지된 통상적인 방법에 따라 실행되며, 그리고 본 명세서 전반에 걸쳐 인용되고 논의된 다양한 일반적이고 보다 구체적인 참고 문헌에 기재된 바와 같이 수행된다. 가령, "Principles of Neural Science", McGraw-Hill Medical, New York, N.Y. (2000); Motulsky, "Intuitive Biostatistics", Oxford University Press, Inc. (1995); Lodish 외., "Molecular Cell Biology, 4th ed.", W. H. Freeman & Co., New York (2000); Griffiths 외., "Introduction to Genetic Analysis, 7th ed.", W. H. Freeman & Co., N.Y. (1999); 그리고 Gilbert 외., "Developmental Biology, 6th ed.", Sinauer Associates, Inc., Sunderland, MA (2000) 참고.

본 명세서에서 이용된 화학 용어는 다른 언급이 없는 한, 당분야에 이용되는 통상적인 용어에 따라 이용되며, "The McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms", Parker S., Ed., McGraw-Hill, San Francisco, C.A. (1985)에서 구체화된다.

본 출원에서 언급된 상기 모든 문헌 및 임의의 다른 공개, 특허 및 공개된 특허 출원은 본원에 구체적으로 참고자료로 편입된다. 상충되는 경우, 특정 정의를 포함하여 본 명세서가 우선 할 것이다.

본원에서 용어 "제제"는 화학적 화합물 (이를 테면, 유기 또는 무기 화합물, 화학적 화합물의 혼합물), 생물학적 거대 분자 (이를 테면, 핵산, 항체의 일부분을 포함하는 항체 뿐만 아니라 인간화된 항체, 키메라항체 및 인간 항체 그리고 단일클론 항체, 단백질 또는 이의 일부, 예를 들어, 펩티드, 지질, 탄수화물), 또는 박테리아, 식물, 진균 또는 동물 (특히 포유 동물) 세포 또는 조직과 같은 생물학적 물질로 만들어진 추출물을 지시하는데 이용된다. 제제에는 예를 들어, 구조가 알려진 제제와 구조가 알려지지 않은 제제가 있다.

"환자", "대상" 또는 "개체"는 상호 호환적으로 사용되며, 인간 또는 비-인간 동물을 지칭한다. 이러한 용어에는 인간, 영장류, 가축 (소, 돼지 등 포함), 반려 동물 (가령, 개, 고양이 등) 및 설치류 (가령, 마우스 및 렛)와 같은 포유류가 포함된다.

상태 또는 환자를 "치료하는"이란 임상 결과를 포함하여 유익하거나 바람직한 결과를 얻기 위한 단계를 수행하는 것을 의미한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 그리고 당분야에서 잘 인지되는 것과 같이, "치료"란 임상 결과를 포함하여 유익하거나 또는 바람직한 결과를 얻기 위한 접근법이다. 유익한 또는 바람직한 임상 결과는 탐지가능한지와 무관하게, 하나 또는 그 이상의 증상 또는 상태의 경감 또는 개선, 질병의 정도의 감소, 질병 상태의 안정화 (즉, 악화되지 않음), 질병의 확산 방지, 진행의 지연 또는 둔화, 질병 상태의 개선 또는 완화 그리고 차도(부분적으로 또는 전체적으로)를 포함할 수 있지만, 이에 국한되지는 않는다. "치료"는 또한 치료를 받지 않을 때, 예상 생존과 비교하여 생존 연장을 의미할 수 있다.

용어 "예방"은 당업계-인지되어 있는 것으로, 국소 재발 (예를 들어, 통증), 암과 같은 질병, 심부전과 같은 복합 증후군 또는 다른 의학적 상태와 관련하여 사용될 때, 본 기술 분야에서 잘 이해되고, 당해 조성물을 받지 않는 대상과 비교하였을 때, 대상에서 의학적 상태의 증후의 빈도를 감소시키거나 또는 증상 개시를 지연시키는 조성물의 투여를 포함한다. 따라서, 암 예방은 예를 들어, 치료되지 않은 대조군 집단에 비교하여, 예방적 치료를 받는 환자 집단에서 탐지가능한 암성 성장의 수를 통계적으로 및/또는 임상적으로 유의적인 양으로 감소시키고, 및/또는 미처리된 대조군 집단에 비교하여, 처리된 집단에서 탐지가능한 암성 성장의 출현의 지연을 포함한다.

대상에게 물질, 화합물 또는 제제를 "투여하는" 또는 "투여"란 당업자에게 공지된 다양한 방법 중 하나를 사용하여 수행될 수 있다. 예를 들어, 화합물 또는 제제는 정맥내, 동맥으로, 피내, 근육내, 복강내, 피하, 눈으로, 설하로, 경구로 (섭취에 의해), 비강내 (흡입에 의해), 척수내, 뇌안으로, 그리고 경피로(예를 들어, 피부 관을 통한 흡수에 의해) 투여될 수 있다. 화합물 또는 제제는 또한 재충전가능한 또는 생분해성 중합체 장치 또는 다른 장치, 예를 들어, 패치 및 펌프, 또는 제형에 의해 적절하게 도입될 수 있는데, 이들은 상기 화합물 또는 제제의 연장된, 느린 또는 제어된 방출을 제공한다. 투여는 또한 예를 들어, 한 번, 여러 횟수, 및/또는 하나 또는 그 이상의 연장된 기간에 걸쳐 수행될 수 있다.

대상에게 물질, 화합물 또는 제제를 투여하는 적절한 방법은 예를 들어, 대상의 연령 및/또는 물리적 상태 그리고 상기 화합물 또는 제제의 화학적 및 생물학적 특성(가령, 용해도, 소화성, 생체이용성, 안정성 및 독성)에 따라 달라질 것이다. 일부 구체예들에서, 화합물 또는 제제는 예를 들어, 섭취에 의해 대상에게 경구 투여된다. 일부 구체예들에서, 경구 투여된 화합물 또는 제제는 연장 방출 또는 서방형 제형이거나, 또는 이러한 서방형 또는 연장 방출형 장치를 사용하여 투여된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "공동(conjoint) 투여"라는 2개 또는 그 이상의 상이한 치료요법제를 투여하는 임의의 형태를 말하는데, 먼저 투여된 치료제가 체내에서 여전히 효과를 나타내는 동안 제 2 제제가 투여되는 것이다(예를 들어, 두 제제는 환자에게 동시에 효과적이며, 이는 두 제제의 공조 효과를 포함할 수 있다). 예를 들면, 상이한 치료 화합물은 동일한 제형 또는 별도 제형으로, 동시 또는, 순차적으로 투여될 수 있다. 따라서, 그러한 치료를 받는 개인은 다른 치료요법 제제의 결합된 효과로부터 이익을 얻을 수 있다.

약물 또는 제제의 "치료요법적 유효량" 또는 "치료요법적 유효한 투여용량"이란 대상에게 투여될 때, 의도된 치료 효과를 갖는 약물 또는 제제의 양이다. 완전한 치료요법적 유효한 투여용량은 반드시 한 용량의 투여에 의해 발생하는 것은 아니며, 일련의 용량을 투여 한 후에야 비로소 발생할 수 있다. 따라서, 치료요법적 유효량은 하나 또는 그 이상의 투여에 의해 투여될 수 있다. 대상에 필요한 정확한 유효량은 예를 들어, 대상의 체구, 건강 및 연령, 및 암 또는 MDS와 같은 치료될 상태의 성질 및 정도에 따라 달라질 것이다. 숙련된 작업자는 일상적인 실험에 의해 주어진 상황에 대한 유효량을 쉽게 결정할 수 있다.

실시예

지금부터 본 발명이 일반적으로 기술되며, 단지 본 발명의 특정 측면 및 구체예들은 예시하기 위한 목적으로 포함되는 것으로, 이에 본 발명을 제한하려는 의도는 아니며, 하기 실시예를 참조함으로써 보다 용이하게 이해될 것이다.

실시예 1: ETC 활성이 HFSC 활성화에 미치는 영향

ETC 활성의 조작이 HFSC 활성화에 영향을 미칠 수 있는지를 결정하기 위해, ETC 성분의 다양한 억제제를 모발 주기의 휴지기(resting phase) 동안 마우스에 국소적으로 적용하였다. 상기 국소 제형은 PLO Ultramax Gel (레시틴 오가노겔)에 활성 성분을 현탁시켜 제조하였다. 출생 후 50 일차에, 모낭은 휴지기 (telogen)에 있으며, 모낭의 줄기 세포가 70-80 일차에 다음 모발 주기가 시작될 때까지 정지되는 휴지기(quiescent)이다. 로테논, 펜포르민, 및 안티마이신 A는 차례로 복합체 I, 및 복합체 III의 억제제로 인정된다. 출생 후 47 일에 동물을 면도하고, 지시된 기간 동안 48 시간마다 면도된 부위를 표시된 화합물 또는 비히클로 처리 하였다. 3-4회 처리 (8-12 일) 후, ETC 억제제로 처리된 동물은 검은 마우스에서 피부의 색소 침착으로 판단하여, 육안으로 모발 주기 활성화의 징후를 나타내기 시작했으며, 반면, 비히클 처리된 마우스는 최소한 20 일 동안 유의적인 색소 침착을 나타내지 않았다. (도 1a 및 3a). 뮤린 피부의 표피는 모발 주기의 유도에 따라 색소침착되는데, 이는 모간(hair shaft)을 형성하기 위해 진행되는 각질 세포로의 색소 (멜라닌)를 주입하는 멜라닌 세포의 생성 뿐만 아니라, 모낭간(interfollicular) 표피에서의 이들 생성을 나타낸다. 따라서, ETC 억제제 처리된 마우스에서 8-12 일 후에 관찰된 색소침착의 유도는 이 처리에 의해 유도된 모발 주기 활성화를 나타내는 것으로 보인다.

실시예 2: ETC-억제된 조직의 병리

ETC 억제에 의해 유도된 색소 침착이 실제로 모낭 줄기 세포 활성화의 변화로 인한 것임을 입증하기 위해, 조직을 수거하고 병리학을 거친다. 조직학적 분석에 의해 ETC 억제제로 처리된 백스킨(backskin)의 모낭은 정상적인 휴지기에서 성장기로의 전이를 촉진시켰다(도 1b 및 3b). 이러한 발견은 또한 ETC의 유전자이식 폐색 (transgenic abrogation)이 모낭 퇴화를 초래한다는 것을 보여주는 기존 연구와는 완전히 대조적이었다.

실시예 3: 피부 두께 측정

ETC 억제에 의해 유도된 모발 주기 유도가 전형적인지 여부를 결정하기 위해, 피부 각층의 두께를 상이한 치료 단계에서 측정 하였다. 도 1c에서 나타낸 것과 같이, 모든 ETC 억제제는 표피, 진피, 그리고 특히 피하의 두께를 증가시켰고, 이는 지방세포의 강력한 확장을 시사한다. ETC 억제 피부의 분석에서 치료 일주일 후, ETC 억제에 반응하여 HFSC의 활성화 증거로써, HFSCs에서 Ki67의 상당한 증가를 나타났다 (도 1d 및 3d). ETC 억제제의 적용이 염증을 촉진시켰는지-이는 모발 주기 데이터의 해석을 흐리게 할 수 있음-를 결정하기 위하여, 치료 후 케모카인 반응의 다양한 마커 및 염증성 면역 세포의 존재를 평가하였다. ETC 억제에 대한 반응으로 이러한 조치에 의한 심각한 염증의 증거는 없었다 (도 3d).

실시예 4: 대사 측정

로테논, 펜포르민 및 안티마이신 A에 의한 ETC 억제의 세포 대사에 효과를 측정하기 위하여, 대사 경로의 두 가지 측정이 수행되었다. 먼저, 48 시간 동안 ETC 억제제로 처리된 표피로부터 단리된 세포에서 LDH 활성을 정량화하였다(도 2a). 다음으로, 대사체학을 48 시간 또는 10 일 동안 처리하거나 또는 처리없이, 분류된 HFSCs에 사용하였다. 이들 분석에서 로테논, 펜포르민 및 안티마이신 A에 의한 ETC 억제에 대한 반응으로 젖산염 수준 및 몇 가지 다른 해당작용 중간생성물(glycolytic intermediates)의 증가가 나타났다 (도 2b).

실시예 5: ETC 억제가 노화된 마우스에 미치는 영향

마우스가 나이듦에 따라, 모발 주기는 연장되는 것으로 알려져 있고, 면도시, 백스킨의 일부만이 1-2 개월 내에 모발의 재성장을 보여준다. 노화된 마우스의 다양한 배치(batches) (최소한 17 개월)를 ETC 억제제로 30 일 동안 처리하여, 이러한 대사 조작이 휴면(dormant) 모낭에서도 모발 주기를 자극할 수 있는지를 결정하였다. 펜포르민, 로테논 또는 안티마이신 A의 국소 적용은 모두 어린 마우스의 것과 비슷한 시간 경과 과정에서 전체 백스킨에 걸쳐 더욱 완전한 모발 재성장을 가져왔다(도 4a). 어린 동물과 마찬가지로, 이러한 ETC 억제제로 치료하면 대사체학에 의해 측정된 젖산염 풀(pool) 수준이 증가했다 (도 4b).

참고자료에 통합

여기에 언급된 모든 간행물 및 특허는 각각의 개별 간행물 또는 특허가 구체적으로 개별적으로 참조로 포함되도록 지시된 것처럼 본원에 전문으로 참고로 인용된다. 충돌이 있는 경우 정의를 포함하는 본 출원이 조정할 것이다.

등가물(EQUIVALENTS)

당해 발명의 특정 실시예들이 논의되었지만, 상기 명세서는 예시적이고, 이에 한정되지 않는다. 본 명세서 및 청구 범위를 검토하면, 본 발명의 많은 변형이 당업자에게 명백해질 것이다. 본 발명의 전체 범위는 그 균등 물의 전체 범위 및 명세서와 함께 청구항을 참조하여 그러한 변형과 함께 결정되어야 한다.

Claims (9)

1. 전자 전달 사슬 억제제 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 있어서, 이때 상기 약제학적 조성물은 국소 투여용으로 제형화된, 약제학적 조성물.
2. 청구항 1에 있어서, 이때 상기 전자 전달 사슬 억제제는 전자 전달 사슬복합체 I, II, III, 또는 IV의 억제제인, 약제학적 조성물.
3. 청구항 1에 있어서, 이때 상기 전자 전달 사슬 억제제는 메트포르민, 펜포르민, 부포르민, 로테논, 에피베르베린, 피에리시딘 A, 아미탈, 캡사이신, 할로페리돌, 리스페리돈, 부피바카인, 리도카인, 할로탄, 단트로렌, 페닐오인, 클로피브레이트, 페노피브라트, 말로네이트 나트륨, 테노일트리플루오아세톤, 시클로포스파미드, 케토코나졸, 안티마이신 A, 아세타아미노펜, 이소플루란, 세보플루란, 세팔로리딘, 세파졸린, 또는 세팔로틴; 또는 이의 약제학적으로 수용가능한 염인, 약제학적 조성물.
4. 청구항 2에 있어서, 이때 상기 전자 전달 사슬 억제제는 전자 전달 사슬복합체 I 또는 III의 억제제인, 약제학적 조성물.
5. 청구항 4에 있어서, 이때 상기 전자 전달 사슬 억제제는 메트포르민, 펜포르민, 부포르민, 로테논, 에피베르베린, 피에리시딘 A, 아미탈, 캡사이신, 할로페리돌, 리스페리돈, 부피바카인, 리도카인, 할로탄, 단트로렌, 페닐오인, 클로피브레이트, 페노피브라트, 안티마이신 A, 아세타아미노펜, 이소플루란, 또는 세보플루란인, 약제학적 조성물.
6. 청구항 5에 있어서, 이때 상기 전자 전달 사슬 억제제는 로테논, 펜포르민, 또는 안티마이신 A인, 약제학적 조성물.
7. 청구항 1-6중 임의의 하나에 따른 조성물의 치료요법적 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 모발 성장을 촉진시키는 방법.
8. 청구항 1-6중 임의의 하나에 따른 조성물의 치료요법적 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 모발 성장에 영향을 끼지는 상태 또는 장애를 치료하는 방법.
9. 청구항 8에 있어서, 이때 상기 상태 또는 장애는 대머리 또는 탈모증인, 방법.

Images