KR20220119087A

KR20220119087A - 고체 상 추출을 위한 장치 및 방법

Info

Publication number: KR20220119087A
Application number: KR1020227024621A
Authority: KR
Inventors: 그레이엄 월터 맥로비; 임티아즈 아메드 칸; 조너썬 로버트 셰일즈
Original assignee: 지이 헬쓰케어 리미티드
Priority date: 2019-12-20
Filing date: 2020-12-17
Publication date: 2022-08-26
Also published as: CN114787109A; CA3165392A1; EP4077245A1; US20230022430A1; EP4077245B1; CN121372536A; AU2020409577A1; JP2025131571A; WO2021123073A1; GB201919016D0; US20250312782A1; JP2023507182A

Abstract

본 발명은 최적화된 고체 상 추출 (SPE) 정제 조건을 결정하기 위한 카세트를 제공하며, 여기서 상기 카세트는 (i) 제1 단부 및 제2 단부를 포함하는 유로; 및 (ii) 상기 유로를 따라 배향된 복수의 밸브를 포함하고, 여기서 상기 복수의 밸브 각각은 다수의 구성요소 중 하나에 선택적으로 유체 연결되고, 여기서 상기 구성요소는 (a) 1-5개 조성물 바이알; (b) 1-3개 SPE 카트리지; (c) 4-10개 용매 바이알; (d) 물 바이알; 및 (e) 이송 라인을 포함한다. 본 발명은 또한 조성물로부터 화합물에 대해 최적화된 SPE 정제 조건을 결정하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 (i) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 카세트를 제공하는 단계; (ii) 카세트가 상기 조성물 바이알(들)에 화합물의 조성물을 포함하거나 또는 상기 조 반응 바이알(들)에 이러한 조성물을 첨가하는 단계; (iii) 상기 조성물의 분취물을 상기 1-3개 SPE 카트리지 각각에 통과시키는 단계; (iv) 상기 4-10개 용매 바이알 중 적어도 4개로부터의 용매 분취물의 특정 조합을 SPE 카트리지 중 하나 이상에 통과시키는 단계로서, 여기서 상기 4-10개 용매 바이알 각각의 용매는 상이한 용매 또는 상이한 농도의 동일한 용매인 단계; (v) 상기 또는 각각의 SPE 카트리지로부터 정제될 화합물을 용리시키는 단계; (vi) 단계 (v)의 용리된 생성물을 평가하는 단계; 및 (vii) 각각의 카트리지 및 각각의 용매로부터의 단계 (v)의 용리된 생성물들을 비교하여 최적화된 정제 조건을 결정하는 단계를 포함한다.

Description

고체 상 추출을 위한 장치 및 방법

본 발명은 고체 상 추출 (SPE) 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 SPE 조건을 최적화하기 위한 장치 및 방법에 관한 것이다.

자동화된 합성 시스템은 방사성 의약품의 생산에 중요하다. 합성 시스템, 예컨대 패스트랩®(FASTlab) 합성기 (지이 헬쓰케어(GE Healthcare))는 임상 적용을 위한 선량 생산을 제공한다. 패스트랩 합성기는 방사성 의약품을 생산하기 위한 장치를 통해 방법을 수용하고 운용한다. 이러한 방사성 의약품의 예는 ¹⁸F-FLT ([¹⁸F]플루오로티미딘), ¹⁸F-FDDNP (2-(1-{6-[(2-[¹⁸F]플루오로에틸)(메틸)아미노]2-나프틸}에틸리덴)말로니트릴), ¹⁸F-FHBG (9-[4-[¹⁸F]플루오로-3-(히드록시메틸)부틸]구아닌 또는 [¹⁸F]-펜시클로비르), ¹⁸F-FESP ([¹⁸F]-플루오로에틸스피페론), ¹⁸F-p-MPPF (4-(2-메톡시페닐)-1-[2-(N-2-피리디닐)-p-[¹⁸F]플루오로벤즈아미도]에틸피페라진) 및 ¹⁸F-FDG ([¹⁸F]-2-데옥시-2-플루오로-D-글루코스) 등을 포함한다.

이러한 합성 시스템/장치는 제1 단부 및 제2 단부를 포함하는 유로; 및 상기 유로를 따라 배향된 복수의 밸브를 포함하고, 여기서 상기 복수의 밸브 각각은 일반적으로 시약 바이알, 화합물을 생성하는 과정의 하나 이상의 반응이 수행되는 반응 용기, 카트리지, 필터, 시린지, 튜빙, 및 특정 방사성 트레이서를 합성하기 위한 커넥터를 포함하는, 다수의 구성요소 중 하나에 선택적으로 유체 연결된 것인 카세트와 함께 사용된다. 상이한 방사성 의약품은 그 방사성 의약품에 맞춤화된 전용 카세트를 사용하여 제조된다. 장치는 장치를 통해 방사성 동위원소를 갖는 공급원 유체를 유도하여 화학 합성 과정을 달성하기 위해 스톱콕 및 시린지 각각을 작동시킬 수 있도록 구성요소가 협력적으로 맞물리도록 구성된다. 합성 시스템은 또한 화학 반응에 필요한 모든 열을 제공하기 위해, 제1 반응 용기를 수용하는 하나 이상의 (예를 들어 2개의) 가열 공동/가열 요소를 포함할 수 있다.

합성 시스템은 공급원 유체가 시약과 혼합하고, 적절한 정제 카트리지를 통해 화학 반응을 수행하고, 최종 생성물, 폐기물 등을 위한 적절한 바이알 용기로 출력 트레이서 및 폐기물 유체를 선택적으로 펌핑하도록 명령하기 위해 필요한 펌프, 시린지, 밸브, 가열 요소를 작동시킬 뿐만 아니라, 동기 가스 (예를 들어 질소)의 제공 및 진공의 적용을 제어하도록 프로그래밍된다. 출력 바이알에 수집된 유체는 일반적으로 정제 및/또는 분배를 위해 또 다른 시스템으로 투입되지만, 합성 시스템은 또한 정제된 (또는 부분 정제된 화합물)을 다시 추가 처리를 위해 시스템으로 복귀시키는 별도의 정제 시스템에 연결되거나 또는 이를 포함할 수 있다.

이러한 선행 기술의 자동화된 합성기는 WO 2007/042781에 기재되어 있다.

패스트랩 합성기와 같은 기존 합성 시스템은 일부 형태의 정제 단계를 포함할 수 있지만, 시스템은 정제 조건을 최적화하도록 설계된 것도 아니고, 최적화하는 것도 아니다. 선행 기술에 사용된 것 (예를 들어 패스트랩 시스템)과 같은 정제 방법은 SPE가 수동으로 수행되는, 기존 SPE 매니폴드 시스템을 사용하여 현재 최적화된다. 일반적으로 언제나 생성물의 제조 후, 상이한 정제 파라미터, 또는 파라미터들을 수반하기 때문에, 이러한 방식으로 적절한 정제 방법을 결정하는 것은 시간 소모적이다. 또한, 일단 적절한 정제 조건이 확인되면, 결과적인 정제 방법은 합성 시스템과 호환되기 위해 추가 적응 및 최적화를 필요로 한다.

시장에서 입수가능한 SPE 로봇의 수많은 예가 있다. 본 발명을 사용하는 주요 이점은 이미 존재하는 제조 장치를 사용하여 SPE 정제 방법이 신속하게 개발될 수 있게 한다는 것이다. SPE 방법을 기존 장치 (예를 들어, 패스트랩) 상으로 이전하는 데 걸리는 시간은 백본 장치가 둘 다 동일할 수 있기 때문에 효과적으로 사라진다.

기존 SPE 로봇은 본 발명에 일반적으로 사용된 것보다 많은 분획물을 수집하도록 설계된다. 분석에 더 적은 용리액의 분획물을 수집하는 능력은 현재 SPE 로봇에 대한 개선사항이다. 수집된 분획물이 많을수록, 불순물/생성물이 용리되는 곳에 대해 추론할 수 있는 것이 적다.

또한, 기존 SPE 로봇은 실험실에서 많은 공간을 차지한다. 본 발명은 실험실이 이미 자동화된 합성 시스템을 가진 경우 SPE 최적화 전용 장비의 추가적인 피스가 필요하지 않다는 장점을 제공한다.

예를 들어, 본 발명의 카세트는 하나의 시퀀스에 최대 6개의 상이한 이동 상으로 최대 3개 SPE 카트리지를 평가하도록 프로그래밍된 패스트랩 시스템과 함께 사용될 수 있다. 또한, 이것은 카트리지가 재사용될 수 있어, 이들을 반복적으로 시험할 수 있게 하여, 시간 및 카트리지의 비용 면에서 모두 절약되는 장점을 제공한다.

상기 설명한 바와 같이 시간의 척도를 줄이기 위해 생성물의 정제를 최적화하는 공정을 개발할 수 있고, 그것이 현재 합성기 시스템과 호환된다면 유익할 것이다.

본 발명은 화합물을 함유하는 조성물로부터, 바람직하게는 조 반응 혼합물로부터 그 화합물의 단리를 위한 SPE 정제 조건을 최적화하기 위한 장치를 제공한다. 조성물로부터 단리될 화합물은 임의의 방사성 또는 비-방사성 화합물일 수도 있고, 바람직하게는 방사성 화합물이 아닐 수도 있다. 본 발명의 제1 측면의 장치는 카세트로서 기술된다. 이러한 카세트는 장치의 독립적인 피스일 수 있고/거나 원래 부품의 일부를 대체하는, 이미 존재하는 장치에 맞는 장치의 피스일 수 있다.

제1 측면에서, 본 발명은 최적화된 고체 상 추출 (SPE) 정제 조건을 결정하기 위한 카세트를 제공하며, 여기서 상기 카세트는

(i) 제1 단부 및 제2 단부를 포함하는 유로; 및

(ii) 상기 유로를 따라 배향된 복수의 밸브

를 포함하고, 여기서 상기 복수의 밸브 각각은 다수의 구성요소 중 하나에 선택적으로 유체 연결되고,

여기서 상기 구성요소는

(a) 1-5개 조성물 바이알;

(b) 1-3개 SPE 카트리지;

(c) 4-10개 용매 바이알;

(d) 물 바이알; 및

(e) 이송 라인

을 포함한다.

본 발명의 카세트는 제1 단부 및 제2 단부를 포함하는 유로를 갖는다. 유로는 물질, 특히 유체, 예컨대 용매 및 조성물, 예를 들어 조 반응 혼합물을 운반하는데 적합한 채널이다. 조성물 바이알은 조 반응 혼합물 바이알, 단일 참조 표준 바이알 또는 참조 표준 혼합물 바이알일 수 있다. '조 반응 혼합물'은 하나 이상의 불순물을 갖는 혼합물에 원하는 생성물을 포함할 수 있다. '단일 참조 표준'은 단일 불순물, 예를 들어 원하는 생성물과 함께 흔히 생성되는 불순물일 수 있다. 유사하게, '참조 표준 혼합물'은 불순물의 혼합물, 예를 들어 원하는 생성물과 함께 흔히 생성되는 불순물의 혼합물일 수 있다.

'유체 연결된'이란, 유체가 바이알 안팎으로 그리고 (선택적으로) 밸브를 통해 카세트의 다른 부품으로 통과할 수 있다는 것을 의미한다. 적합한 밸브는 3개의 포트를 갖는 3-방향 밸브일 수 있고 3개 연관된 포트 중 임의의 2개를 서로 유체 연통시키면서 제3 포트를 유체 단리시키는 수단일 수 있다. 적합한 밸브는 또한 회전가능한 스톱콕을 포함하는 스톱콕 밸브일 수 있다.

카세트는 본 발명의 카세트가 제공되는 화합물의 합성을 위한 시스템 또는 장치, 예를 들어 공지된 패스트랩 시스템에 결합되거나, 또는 이와 호환될 수 있다. 본 발명의 카세트는 상기 기술된 바와 같이, 방사성 의약품 합성에 사용된 합성기 시스템과 호환되며, 특히 SPE 정제 조건을 최적화하도록 구성된다. 따라서 본 발명은 제품의 제조에 사용된 것과 동일한 시스템 및/또는 호환가능한 시스템에서 그 제품에 대한 최적화된 SPE 정제 공정의 결정을 가능하게 한다. 이것은 기존 방법에 비해 확실한 이점을 제공한다. 예를 들어, 정제 공정이 원하는 생성물의 제조에 사용된 것과 동일한 또는 호환가능한 시스템에서 최적화되기 때문에, 기존 방법과는 다르게, 정제 공정이 그 시스템에서 작동하기 위해 추가 적응이 필요하지 않다.

카세트는 한편으로 상이한 용매 (상이한 화학 조성 또는 상이한 농도)를 제공하는 용매 바이알과 SPE 카트리지의 조합을 제공하고, 다른 한편으로 SPE 및 용매의 대체 파라미터가 이용가능하고 최적의 정제 공정을 결정하도록 조합된 장치를 제공하도록 설계된다.

바람직하게, 카세트는

(i) 3개 SPE 카트리지 및 6개 용매 바이알; 또는

(ii) 2개 SPE 카트리지 및 8개 용매 바이알; 또는

(iii) 1개 SPE 카트리지 및 10개 용매 바이알

을 포함한다.

용매 바이알 중 하나를 사용하여 SPE 카트리지(들)를 컨디셔닝할 수 있다. 컨디셔닝은 SPE 카트리지를 통해 100% 용매를 통과시킨 다음, SPE 카트리지를 통해 물을 통과시킴으로써 수행될 수 있다. 이 경우, 정제에 사용된 용매 바이알의 수는 3개 SPE 카트리지에 대해 용매 바이알 5개, 2개 SPE 카트리지에 대해 용매 바이알 7개 그리고 1개 SPE 카트리지에 대해 용매 바이알 9개로 간주될 수 있다.

한 실시양태에서 본 발명의 카세트는 방사성 동위원소, 예를 들어 [¹⁸F]플루오라이드를 처리하기 위한 임의의 수단을 포함하지 않는다. 예를 들어, 카세트는 '이온-교환 카트리지', 예를 들어, 핵 반응 ¹⁸O(p,n)¹⁸F로부터 수용액이 통과될 때 ¹⁸F는 보유하고 ¹⁸O는 통과할 수 있게 하는 SPE 카트리지를 포함하지 않는다. 이러한 이온-교환 카트리지는 음이온 교환 카트리지, 예를 들어 4급 메틸암모늄 (QMA) 카트리지를 포함하고, 이들은 일반적으로 방사성 표지된 화합물의 방사성 합성을 위해 설계된 공지된 카세트에서 발견된다. 한 실시양태에서 카세트는 또한 '양이온성 반대이온'을 포함하지 않으며, 여기서 양이온성 반대이온은 크립탠드 또는 테트라알킬암모늄 염의 금속 착물 또는 루비듐 또는 세슘과 같은 크지만 연질인 금속 이온과 같은 양으로-하전된 반대이온일 수 있다.

한 실시양태에서 카세트는 반응 용기를 포함하지 않는다.

카세트는 선형 배열로 25개 밸브를 가질 수 있다. 카세트가 선형 배열로 25개 밸브를 갖고 카세트가 3개 SPE 카트리지 및 6개 용매 바이알을 포함하는 경우,

(i) 1-5개 조성물 바이알은 제2, 제12, 제13, 제14 및/또는 제16 밸브에 유체 연결되고, 바람직하게는 여기서 최대 3개 조성물 바이알이 사용되며;

(ii) 3개 SPE 카트리지는 바람직하게는 제18, 제20 및 제22 밸브에 유체 연결되고;

(iii) 6개 용매 바이알은 제4, 제5, 제7, 제8, 제9 및 제10 밸브에 유체 연결되고;

(iv) 물 바이알은 제15 밸브에 유체 연결된다.

카세트가 선형 배열로 25개 밸브를 갖고 카세트가 2개 SPE 카트리지 및 8개 용매 바이알을 포함하는 경우,

(i) 1-5개 조성물 바이알은 제2, 제12, 제13, 제14 및/또는 제16 밸브에 유체 연결되고, 바람직하게는 여기서 최대 2개 조성물 바이알이 사용되며;

(ii) 2개 SPE 카트리지는 바람직하게는 제20 및 제22 밸브에 유체 연결되고;

(iii) 8개 용매 바이알은 제4, 제5, 제7, 제8, 제9, 제10, 제17 및 제18 밸브에 유체 연결되고;

(iv) 물 바이알은 제15 밸브에 유체 연결된다.

카세트가 선형 배열로 25개 밸브를 갖고 카세트가 1개 SPE 카트리지 및 10개 용매 바이알을 포함하는 경우,

(i) 1-5개 조성물 바이알은 제2, 제12, 제13, 제14 및/또는 제16 밸브에 유체 연결되고, 바람직하게는 여기서 최대 1개 조성물 바이알이 사용되며;

(ii) 1개 SPE 카트리지는 바람직하게는 제22 밸브에 유체 연결되고;

(iii) 10개 용매 바이알은 제4, 제5, 제7, 제8, 제9, 제10, 제17, 제18, 제19 및 제20 밸브에 유체 연결되고;

(iv) 물 바이알은 제15 밸브에 유체 연결된다.

상기 기술된 카세트는

(v) 제3 밸브에 유체 연결된 시린지로서, 바람직하게는 1 mL 시린지인 시린지;

(vi) 제11 밸브에 유체 연결된 시린지로서, 바람직하게는 7 mL 시린지인 시린지;

(vii) 제24 밸브에 유체 연결된 시린지로서, 바람직하게는 7 mL 시린지인 시린지

를 추가로 포함할 수 있다.

상기 기술된 카세트는

(viii) 제1 밸브와 제25 밸브를 연결하는 튜빙

을 추가로 포함할 수 있다.

상기 기술된 카세트는

(ix) 제23 밸브에 유체 연결된 SPE 카트리지(들)로부터의 용리액을 위한 출력

을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 제2 측면에서, 본 발명은 조성물로부터 화합물에 대해 최적화된 SPE 정제 조건을 결정하는 방법을 제공하며, 상기 방법은

(i) 본 발명의 제1 측면에 따라 정의된 바와 같은 카세트를 제공하는 단계;

(ii) 카세트가 상기 1-5개 조성물 바이알 각각에 화합물의 조성물을 포함하거나 또는 상기 1-5개 조성물 바이알 각각에 이러한 조성물을 첨가하는 단계;

(iii) 상기 조성물의 분취물을 상기 1-3개 SPE 카트리지 각각에 통과시키는 단계;

(iv) 상기 4-10개 용매 바이알 중 적어도 4개로부터의 용매 분취물의 특정 조합을 SPE 카트리지 중 하나 이상에 통과시키는 단계로서, 여기서 상기 4-10개 용매 바이알 각각의 용매는 상이한 용매 또는 상이한 농도의 동일한 용매인 단계;

(v) 상기 또는 각각의 SPE 카트리지로부터 정제될 화합물을 용리시키는 단계;

(vi) 단계 (v)의 용리된 생성물을 평가하는 단계; 및

(vii) 각각의 카트리지 및 각각의 용매로부터의 단계 (v)의 용리된 생성물들을 비교하여 최적화된 정제 조건을 결정하는 단계

를 포함한다.

적어도 하나의 용매는 (i) 에탄올, (ii) 메탄올, (iii) 아세토니트릴, 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 대안적 유기 용매, 또는 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 상이한 용매를 사용하는 경우, 수성 용매 교환 단계가 포함되어야 하기 때문에, 생성물은 에탄올 또는 수성 에탄올로 용리되는 것이 바람직하다.

방법은 공정의 제1 단계로서 1-3개 SPE 카트리지를 컨디셔닝하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 카트리지는 100% 유기 용매 (메탄올, 에탄올 또는 아세토니트릴)로 컨디셔닝된 다음, 물로 컨디셔닝될 수 있다. 컨디셔닝에 사용된 유기 용매 및 물의 부피는 상이한 카트리지에 맞게 다양할 수 있다. 예를 들어, 7 mL의 유기 용매 및 7 mL의 물이 적합할 수 있다. 또는 더 적은 부피, 예를 들어 2 mL의 유기 용매가 적합할 수 있고, 이 경우 단 하나의 시린지로부터 용매를 사용하여 여러 카트리지를 컨디셔닝할 수 있다. 한 실시양태에서 용매가 완전히 제거되게 하기 위해 물이 가득한 시린지를 사용한다. 컨디셔닝 이후에, 조 생성물을 SPE 카트리지(들) 상에 로딩한다.

이어서 각각의 카트리지는 가변적 부피의 분획으로 이동 상 용리액으로 세척하며, 여기서 부피는 "더 세부사항" 즉 더 작은 부피와 "분석 시간" 즉 수집된 부피가 작을수록 더 많은 샘플을 분석해야 하는 것 사이의 절충안이다. 분획물 부피는 바람직하게는 1 mL이다. 용리액 분획물을 수집하고 예를 들어 분석용 HPLC에 의해 분석한다. 카트리지는 100% 유기 용매로 세정할 수 있고 공정 동안 상이한 이동 상 조성으로 다시 사용할 수 있도록 재컨디셔닝할 수 있다. 작업자 처리 시간을 최소화하기 위해, 샘플을 96-웰 플레이트에서 수집하고 자동샘플러 주입 시스템을 사용하는 HPLC 시스템 상에서 분석할 수 있다. 수집된 샘플을 밤새 분석한 다음 결과를 다음날 아침 해석할 수 있다. 임의의 적합한 방법, 예를 들어, HPLC, LC-MS 또는 TLC를 사용하여 단계 (vi)의 평가를 수행할 수 있다.

1, 2, 3, 4 또는 5개 조성물 바이알을 사용할 수 있다. 특히, 1, 2 또는 3개 조성물 바이알을 사용할 수 있다. 바람직하게는, 조성물 바이알의 수가 SPE 카트리지의 수와 동일할 수 있다.

용어 '용리'는 고체 상에 결합된 관심 화합물 또는 화합물들을 방출하기 위한 목적으로 SPE 카트리지를 통해 용액을 통과시키는 것을 말한다. 용리는 SPE 카트리지를 통해 그리고 수집용 이송 라인을 통해 적합한 용매를 통과시킴으로써 수행될 수 있고, 바람직하게는 여기서 수집이 96-웰 플레이트에 이루어진다. 적합한 용매는 SPE 카트리지로부터 관심 화합물들을 방출하는 역할을 하는 것이며, 관심 화합물의 화학적 특성 및 SPE 칼럼 화학물질의 성질에 따라, 예를 들어 유기 용매, 산성 용매, 또는 염기성 용매일 수 있다.

상기 방법은 불순물을 용리시키는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 불순물의 용리는 원하는 생성물을 용리시키는 상기 단계 (v) 전 및/또는 후에 수행될 수 있다. 바람직하게는, 불순물의 용리는 원하는 생성물을 용리시키는 상기 단계 (v) 전 및 후에 수행될 수 있다.

정제 공정은 조성물로부터 수득된 생성물이 적어도 95%, 바람직하게는 적어도 97%, 보다 바람직하게는 적어도 99%의 순도로 수득된 경우 이상적으로 효과적이다.

본 발명은 또한 본 발명의 제2 측면에 따라 정제된 바와 같은 화합물을 제공한다.

제3 측면에서, 본 발명은

(i) 제1 측면에 따른 카세트,

(ii) 1-5개 조성물 바이알;

(iii) 1-3개 SPE 카트리지;

(iv) 4-10개 용매 바이알;

(v) 물 바이알; 및

(vi) 이송 라인

을 포함하는 키트를 제공한다.

도면
도 1 내지 6은 비제한적인 방식으로 본 발명을 예시하기 위해 제공된다:
도 1은 3개 SPE 카트리지 및 6개 용매 바이알 (이동 상으로 표지됨)을 포함하는 본 발명의 카세트의 한 실시양태의 예를 제공한다.
도 2는 2개 SPE 카트리지 및 8개 용매 바이알 (이동 상으로 표지됨)을 포함하는 본 발명의 카세트의 한 실시양태의 예를 제공한다.
도 3은 1개 SPE 카트리지 및 10개 용매 바이알 (이동 상으로 표지됨)을 포함하는 본 발명의 카세트의 한 실시양태의 예를 제공한다.
도 4는 본 발명과의 비교를 위해 일반적으로 패스트랩 시스템과 함께 사용되는 카세트의 예를 제공한다.
도 5는 플루르피리다즈(Flurpiridaz) 조 생성물의 히드록시 불순물에 적용된 본 발명의 방법의 한 실시양태의 결과를 나타낸다.
도 6은 플루르피리다즈의 조 반응 혼합물에 적용된 본 발명의 방법의 한 실시양태의 결과를 나타낸다. 도 6에서, x 축은 부피 (1-41 ml)이고 y 축은 ug (0-25)이다.

실시예

하기 실시예는 비제한적인 방식으로 본 발명을 설명한다:

제1 실험은 0.1% 포름산 수용액 중 20, 30 및 40% 에탄올로 이루어진 이동 상과 화합물 GE-179를 포함하는 조 샘플을 사용하여 수행되었다. GE-179의 구조는 다음과 같다:

패스트랩 카세트를 도 1에 도시된 바와 같이 설정하였다. 모두 3개의 카트리지를 100% 에탄올 (2 mL)에 이어, 100% 물 (7 mL)로 컨디셔닝하였다. 조 생성물 (10% 에탄올 90% 물에 용해됨)을 3 x tC18 카트리지 상에 로딩하였다. 제1 카트리지를 20% 에탄올로, 제2 카트리지를 30% 에탄올로 그리고 제3 카트리지를 40% 에탄올로 세척하였다 (각각을 통해 18 mL, 수집된 1 mL 분획물). 54개 샘플을 96 웰 플레이트에서 수집하고 자동샘플러가 있는 분석용 HPLC 시스템을 사용하여 분석하였다. 생성된 데이터는 40% EtOH로, 처음 6 mL에서 카트리지로부터 모든 것이 용리되었고, 반면 20%로는 원하는 생성물 및 나중에 용리되는 모든 피크가 18 mL 세척 후 카트리지에 트래핑된다는 것을 보여주었다. 이러한 결과는 카트리지를 세척하기 위한 최적의 조건이 20%보다 크지만 40%보다 낮은 EtOH일 것임을 보여준다. 생성물의 최적의 선택적 용리를 결정하기 위해 동일한 기술을 사용한 추가 실험이 필요하다.

하기 구조를 갖는 플루르피리다즈의 정제에 관한 실험을 또한 수행하였다:

플루르피리다즈 조 생성물의 주요 불순물은 히드록시 불순물이며, 이는 하기 구조를 갖는다:

패스트랩 카세트를 도 2에 도시된 바와 같이 설정하였다. 두 카트리지를 모두 100% 에탄올 (7 mL)에 이어, 100% 물 (7 mL)로 컨디셔닝하였다. 히드록시 불순물 (1:10 에탄올:물에 용해됨)을 2 x tC18 카트리지 상에 로딩하였다. 제1 카트리지를 40% 아세토니트릴로 그리고 제2 카트리지를 35% 에탄올로 세척하였다 (각각을 통해 41 mL, 수집된 1 mL 분획물). 82개 샘플을 96 웰 플레이트에서 수집하고 자동샘플러가 있는 분석용 HPLC 시스템을 사용하여 분석하였다.

도 5는 히드록시 불순물이 35% 에탄올 (실선)에 비해 40% 아세토니트릴 (점선)로 더 타이트한 밴드로 용리된다는 것을 보여준다. 이러한 결과는 40% 아세토니트릴이 35% 에탄올보다 양호하고 14-21 mL의 세척 부피가 조 생성물로부터 주요 불순물을 제거하기에 충분하다는 것을 확인해 주었다. 35% 에탄올 용리에 상응하는 도 5의 선은 잘못된 데이터 포인트로 인한 급격한 하락을 포함한다는 점에 주목한다.

플루르피리다즈의 조 반응 혼합물로 실험을 반복하였다:

패스트랩 카세트를 도 3에 도시된 바와 같이 설정하였다. 카트리지를 100% 에탄올 (7 mL)에 이어, 100% 물 (7 mL)로 컨디셔닝하였다. 조 생성물 (약 20% 아세토니트릴 80% 수용액에 용해됨)을 tC18 카트리지 상에 로딩하였다. 카트리지를 40% 아세토니트릴로 세척하였다 (41 mL, 수집된 1 mL 분획물). 41개 샘플을 96 웰 플레이트에서 수집하고 자동샘플러가 있는 분석용 HPLC 시스템을 사용하여 분석하였다. 상기 히드록시 표준 실험으로부터의 정보와 조합한 경우, 도 6에 도시된 이러한 결과는 약 16 mL의 세척 부피가 생성물을 용리시키지 않고 히드록시 불순물을 제거하기에 충분하다는 것을 확인해 주었다. 매우 소량으로 존재하는 다른 불순물은 시아노 불순물 및 클로로 불순물이었다.

본원에 기술된 본 발명의 실시양태가 광범위한 유틸리티 및 적용이 가능하다는 것은 통상의 기술자에 의해 용이하게 이해될 것이다. 따라서, 본 발명은 예시적 실시양태와 관련하여 본원에서 상세하게 설명되지만, 이러한 개시내용은 실시양태의 실례 및 예시가 되고 예시적 실시양태를 가능하게 하는 개시내용을 제공하도록 이루어진 것으로 이해되어야 한다. 개시내용은 본 발명의 실시양태를 제한하거나 또는 달리 임의의 다른 그러한 실시양태, 적응, 변형, 수정 및 등가 배열을 배제하는 것으로 해석되도록 의도되지 않는다. 본 발명의 범주는 첨부된 청구범위에 의해 정의된다.

Claims

최적화된 고체 상 추출 (SPE) 정제 조건을 결정하기 위한 카세트이며, 여기서 상기 카세트는
(i) 제1 단부 및 제2 단부를 포함하는 유로; 및
(ii) 상기 유로를 따라 배향된 복수의 밸브
를 포함하고, 여기서 상기 복수의 밸브 각각은 다수의 구성요소 중 하나에 선택적으로 유체 연결되고,
여기서 상기 구성요소는
(a) 1-5개 조성물 바이알;
(b) 1-3개 SPE 카트리지;
(c) 4-10개 용매 바이알;
(d) 물 바이알; 및
(e) 이송 라인
을 포함하는 것인 카세트.
제1항에 있어서, [¹⁸F]플루오라이드를 처리하기 위한 임의의 수단을 포함하지 않는 카세트.
제1항 또는 제2항에 있어서,
(i) 3개 SPE 카트리지 및 6개 용매 바이알; 또는
(ii) 2개 SPE 카트리지 및 8개 용매 바이알; 또는
(iii) 1개 SPE 카트리지 및 10개 용매 바이알
을 포함하는 카세트.
제3항에 있어서, 파트 (i)에서, 카세트가 선형 배열로 25개 밸브를 갖고,
(i) 1-5개 조성물 바이알이 제2, 제12, 제13, 제14 및/또는 제16 밸브에 유체 연결되고, 바람직하게는 여기서 최대 3개 조성물 바이알이 사용되고;
(ii) 3개 SPE 카트리지가 제18, 제20 및 제22 밸브에 유체 연결되고;
(iii) 6개 용매 바이알이 제4, 제5, 제7, 제8, 제9 및 제10 밸브에 유체 연결되고;
(iv) 물 바이알이 제15 밸브에 유체 연결되는 것인 카세트.
제3항에 있어서, 파트 (ii)에서, 카세트가 선형 배열로 25개 밸브를 갖고,
(i) 1-5개 조성물 바이알이 제2, 제12, 제13, 제14 및/또는 제16 밸브에 유체 연결되고, 바람직하게는 여기서 최대 2개 조성물 바이알이 사용되고;
(ii) 2개 SPE 카트리지가 바람직하게는 제20 및 제22 밸브에 유체 연결되고;
(iii) 8개 용매 바이알이 제4, 제5, 제7, 제8, 제9, 제10, 제17 및 제18 밸브에 유체 연결되고;
(iv) 물 바이알이 제15 밸브에 유체 연결되는 것인 카세트.
제3항에 있어서, 파트 (iii)에서, 카세트가 선형 배열로 25개 밸브를 갖고,
(i) 1-5개 조성물 바이알이 제2, 제12, 제13, 제14 및/또는 제16 밸브에 유체 연결되고, 바람직하게는 여기서 최대 1개 조성물 바이알이 사용되고;
(ii) 1개 SPE 카트리지가 바람직하게는 제22 밸브에 유체 연결되고;
(iii) 10개 용매 바이알이 제4, 제5, 제7, 제8, 제9, 제10, 제17, 제18, 제19 및 제20 밸브에 유체 연결되고;
(iv) 물 바이알이 제15 밸브에 유체 연결되는 것인 카세트.
제4항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
(i) 제3 밸브에 유체 연결된 시린지로서, 바람직하게는 1 mL 시린지인 시린지; 및
(ii) 제11 밸브에 유체 연결된 시린지로서, 바람직하게는 7 mL 시린지인 시린지; 및
(iii) 제24 밸브에 유체 연결된 시린지로서, 바람직하게는 7 mL 시린지인 시린지
를 추가로 포함하는 카세트.
조성물로부터의 화합물의 단리를 위한 최적화된 SPE 정제 조건을 결정하는 방법이며,
(i) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 카세트를 제공하는 단계;
(ii) 카세트가 상기 1-5개 조성물 바이알 각각에 화합물의 조성물을 포함하거나 또는 상기 1-5개 조성물 바이알 각각에 이러한 조성물을 첨가하는 단계;
(iii) 상기 조성물의 분취물을 상기 1-3개 SPE 카트리지 각각에 통과시키는 단계;
(iv) 상기 4-10개 용매 바이알 중 적어도 4개로부터의 용매 분취물의 특정 조합을 SPE 카트리지 중 하나 이상에 통과시키는 단계로서, 여기서 상기 4-10개 용매 바이알 각각의 용매는 상이한 용매 또는 상이한 농도의 동일한 용매인 단계;
(v) 상기 또는 각각의 SPE 카트리지로부터 정제될 화합물을 용리시키는 단계;
(vi) 단계 (v)의 용리된 생성물을 평가하는 단계; 및
(vii) 각각의 카트리지 및 각각의 용매로부터의 단계 (v)의 용리된 생성물들을 비교하여 최적화된 정제 조건을 결정하는 단계
를 포함하는 방법.
제8항에 있어서, 불순물을 용리시키는 단계를 추가로 포함하며, 바람직하게는 여기서 불순물을 용리시키는 단계를 단계 (v) 전 및/또는 후에 수행하는 것인 방법.
제8항 또는 제9항에 있어서, 적어도 하나의 용매가 (i) 에탄올, (ii) 메탄올, (iii) 아세토니트릴, 또는 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제8항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (ii) 전에 1-3개 SPE 카트리지를 컨디셔닝하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 단계 (vi)의 평가를 HPLC, LC-MS 또는 TLC를 사용하여 수행하는 것인 방법.
제8항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 용리를, 유기 용매를 SPE 카트리지 및 수집용 이송 라인에 통과시킴으로써 수행하고, 바람직하게는 여기서 수집이 96-웰 플레이트에 이루어지는 것인 방법.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 1-5개 조성물 바이알이
(i) 1-5개 조 반응 혼합물 바이알;
(ii) 1-5개 단일 참조 표준 바이알; 또는
(iii) 1-5개 참조 표준 혼합물 바이알
이고,
바람직하게는 여기서 1, 2, 3, 4 또는 5개 조성물 바이알이 사용되고, 보다 바람직하게는 여기서 1, 2 또는 3개 조성물 바이알이 사용되는 것인 카세트 또는 방법.
(i) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 카세트,
(ii) 1-5개 조성물 바이알;
(iii) 1-3개 SPE 카트리지;
(iv) 4-10개 용매 바이알;
(v) 물 바이알; 및
(vi) 이송 라인
을 포함하는 키트.