KR20220161908A

KR20220161908A - 면역증진 또는 항바이러스용 조성물

Info

Publication number: KR20220161908A
Application number: KR1020210070223A
Authority: KR
Inventors: 최장기; 권은빈; 김영수; 정환석; 정철종; 백경연; 박석만; 공룡
Original assignee: (주)옥천당; 한국 한의학 연구원
Priority date: 2021-05-31
Filing date: 2021-05-31
Publication date: 2022-12-07
Anticipated expiration: 2041-05-31
Also published as: KR102738005B1

Abstract

본 발명은 압척초 또는 사삼의 용매 조추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 면역질환 개선 또는 예방용 식품 조성물, 면역질환 개선 또는 예방용 사료 조성물, 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 식품 조성물 및 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 사료 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 압척초 또는 사삼 추출물은 독성이나 부작용을 일으키지 않으면서 바이러스 또는 박테리아에 의한 감염을 예방 또는 치료할 수 있으며, 면역이 저하되거나 억제된 대상의 면역력 증진 또는 조절에 유용한 약학적, 식품 또는 사료 조성물로 이용될 수 있다.

Description

면역증진 또는 항바이러스용 조성물 {Composition for improving　immunity or for antiviral}

본 발명은 압척초 또는 사삼의 용매 조추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 면역질환 개선 또는 예방용 식품 조성물, 면역질환 개선 또는 예방용 사료 조성물, 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 식품 조성물 및 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 사료 조성물에 관한 것이다.

면역은 태어날 때부터 지니고 있는 선천 면역 (innate immunity)과 후천적으로 생활하면서 적응되어 얻어지는 획득 면역 (acquired immunity)으로 구분될 수 있다. 선천 면역은 일명 '자연 면역'이라고도 하며, 항원에 대해 비특이적으로 반응하고, 특별한 기억작용은 없는 것을 특징으로 한다.

최근 들어, 생체 내 선천적 방어 면역 시스템 중에서 인터페론 (interferon)에 의해 유도되는 선천성 면역분야가 주목을 받고 있는데, 인터페론 매개 면역의 활성화는 다양한 전염병 병원체에 대한 근본적인 예방 방법이 될 수 있기 때문이다. 이에, 인터페론 활성화 기전 연구 및 인터페론을 유도시킬 수 있는 면역조절제의 개발 및 연구가 활발하게 진행되고 있다.

한편, 병원체의 감염에 따른 선천 면역의 방어 기작의 하나로 사이토카인 같은 면역 인자가 분비되며, 이들에 의해 면역 반응이 일어나고, 병원체에 대한 방어가 이루어진다. 이에, 선천면역 반응을 유도함으로써 다양한 전염병 병원체에 대한 예방 및 치료 방법이 될 수 있으며, 이를 유도 시킬 수 있는 선천면역의 증진 제제에 대한 연구가 필요하다.

바이러스 (virus)는 라틴어로 독성물질을 의미하며, 세균여과지 (0.2 um)를 통과하는 일군의 감염형 병원성 입자이다. 바이러스는 숙주세포의 종류에 따라 박테리오파지, 식물 바이러스 및 동물 바이러스로 분류하기도 하며, 핵산의 종류에 따라 DNA 바이러스, RNA 바이러스로 분류할 수 있다. 최근 코로나 바이러스, 신종 플루 바이러스 및 조류 독감 바이러스 등 다양한 바이러스가 질병을 일으켜 사회적으로 큰 문제가 되었으며, 이에 따른 바이러스 질병의 효과적인 대책에 대한 고민이 사회적으로 큰 관심을 불러일으키고 있다.

현재, 바이러스성 질병을 예방하기 위한 가장 좋은 방법은 백신 접종이지만, 바이러스에 의한 질병의 경우, 대체로 많은 바이러스 혈청형 (아형) 생성 등에 따른 백신의 효율성 문제가 중요하게 제기되고 있다. 이러한 백신의 문제점을 보완해 줄 수 있는 바이러스 예방용 억제제의 개발 및 보급은 중요한 사항이며, 이를 위해 특히 바이러스에 대한 초기 방어시스템인 생체 내 선천적 면역 시스템을 자극하여 개체 동물의 면역력을 높여주는 예방 제제의 발굴 및 개발은 중요한 제제 개발 방법이 될 수 있다.

인플루엔자 바이러스 감염은 상기도 점막에 침입하여 기침, 콧물, 가래와 같은 감기 증상과 더불어 발열, 오한, 근육통, 두통, 식욕 부진 등의 심각한 증상을 동반하여 독감이라고 부른다. 인플루엔자 바이러스는 면역력이 약한 경우, 합병증을 일으키고, 다른 호흡기 바이러스에 비해 전염성이 매우 강하여 전 세계적으로 사람뿐만 아니라 동물의 건강을 위협하고 있다.

인플루엔자 바이러스의 증식을 억제하는 대표적인 항바이러스 제제로는 아만타딘 (amantadine)과 리만타딘 (rimantadine)이 있으나, 이들 두 가지 항바이러스 제제들은 혈청형 A형 인플루엔자에만 효과적이며, M2 단백질이 없는 B형 인플루엔자바이러스에는 효과가 없는 것으로 확인되었다. 또한, 아만타딘과 리만타딘은 사용 시 인플루엔자바이러스 M2 단백질의 이온채널기능에 영향을 미치지 못하는 변이 바이러스의 출현이 매우 쉽게 일어나는 단점이 있는 것으로 확인되고 있다. 이러한 단점을 보완하기 위하여 16종의 모든 혈청형 A형 인플루엔자바이러스와 혈청형 B형 인플루엔자바이러스에 효과적인 항바이러스 제제로 자나미비르 (zanamivir)와 오셀타미비르 (oseltamivir)가 개발되었다. 그러나 자나미비르는 흡입 및 정맥 투여해야 하는 단점이 있으며, 오셀타미비르는 경구투여가 가능하나 최근 내성 바이러스의 출현 보고와 경구투여 시 구토와 현기증의 부작용이 있어 단점으로 지적되고 있다.

이러한 상황 하에서, 최근 해외 및 국내에서 기존의 항바이러스 제제의 단점을 극복하고자 하는 많은 노력들이 이루어지고 있으며, 그 중의 하나로 국내에서는 생약 추출물 및 식물 추출물을 대상으로 항바이러스 효능에 대한 연구가 진행중이기는 하지만, 아직까지는 미비한 실정이므로, 기존의 항바이러스 제제의 단점을 극복하여 독성 및 부작용이 거의 없이 우수한 선천면역 증진 효과 및 항바이러스 활성을 발휘할 수 있는 생약 추출물을 유효성분으로 하는 조성물의 개발이 필요한 실정이다.

한편, 사삼 (Codonopsis lanceolate or Adenophorae Radix)은 초롱꽃과에 속하는 잔대의 뿌리를 말한다. 사삼은 우리나라, 일본, 중국 등에 자생하는 높이 50 내지 100 cm 내외의 다년생 초본으로서, 지상부 전체에 털이 밀생하고 뿌리는 비대하며, 꽃은 7 내지 9월에 자색의 종모양으로 피는 특징이 있다. 약재로 사용시 사삼은 뿌리를 사용하며, 특이한 방향이 있고 씹으면 점액성이 있으며 맛은 조금 달고 성질은 조금 차다. 사삼은 양음청폐 하여 진액을 보충하여 폐를 윤택하게 하고 거담지해의 효능이 있어 열을 식히며 담을 없애 인후건조, 마른기침, 가래, 해수, 천식 등에 쓰인다. 익위생진하여 위음 부족으로 입안이 마르고 인후가 건조하며 대변이 굳는 변비 증상 등에 사용한다.

또한, 압척초 (Commelina communis)는 닭의장풀 과에 속하며, 길가나 풀밭 등에서 흔히 볼 수 있는 일년생 풀로서 닭의장풀, 닭의 밑씻개 및 달개비 등으로 불린다. 잎, 줄기, 꽃 뿌리 등 모든 부분을 사용하며, 점액질이 많으며 맛은 달고 쓰며 성질은 차다. 압척초는 청열해독하여 고열, 통증, 홍조 등 열독을 다스리며, 이뇨통림 등의 효능을 가진다. 이외 한방에서 간질, 당뇨, 이뇨, 간염, 천식 및 고혈압 치료에 사용한다. 압척초의 전초에는 알칼로이드 성분인 1-carbomethoxy-ß-carboine, 노르하르만 (norharman) 및 하르만 (harman)등이 있으며, 혈압강화 작용, 항균효과 및 항산화 효과 등이 있는 것으로 보고되고 있다.

압척초 및 사삼은 이뇨, 천식 및 해열 등에 사용하며 항염작용 등 다양한 약리작용이 보고 되고 있다. 하지만, 아직까지 압척초 추출물 또는 사삼과 압척초의 복합 추출물을 이용한 선천면역 증진 효과를 통한 항바이러스 활성에 관하여는 보고된 바 없다.

이에 본 발명자들은 압척초 또는 사삼 추출물을 포함하는 면역질환 또는 바이러스 감염질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과, 압척초 또는 사삼 추출물이 면역질환 또는 바이러스 감염질환의 개선, 예방 또는 치료에 효과를 나타낸 다는 것을 규명함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.

이에, 본 발명의 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 개선 또는 예방용 사료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 사료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 추출물의 면역질환 예방 또는 치료 유효량으로 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는 면역질환 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 추출물의 바이러스 감염질환 예방 또는 치료 유효량으로 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는 바이러스 감염질환 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물의 면역질환 개선, 예방 또는 치료 용도에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물의 바이러스 감염질환 개선, 예방 또는 치료 용도에 관한 것이다.

이하 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.

본 발명의 일 양태는 압척초 (Commelina communis) 및 사삼 (Codonopsis lanceolate)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

본 명세서 상 "압척초"는 닭의장풀, 달개비, 닭의 밑씻개라고도 한다. 길가나 풀밭, 냇가의 습지에서 흔히 자란다. 줄기 밑 부분은 옆으로 비스듬히 자라며 땅을기고 마디에서 뿌리를 내리며 많은 가지가 갈라지나, 줄기 윗부분은 곧게 서고 높이가 15 내지 50cm이다. 잎은 어긋나고 달걀 모양의 바소꼴이며 길이가 5~7cm, 폭이 1 내지 2.5cm이다. 잎 끝은 점점 뾰족해지고 밑 부분은 막질 (종이처럼 반투명 한 것)의 잎집으로 된다. 꽃은 7~8월에 하늘색으로 피고 잎겨드랑이에서 나온 꽃줄기 끝의 포에 싸여 취산 꽃차례로 달린다. 봄에 어린잎을 식용한다. 한방에서 잎을 압척초라는 약재로 쓴다. 열을 내리는 효과가 크고 이뇨 작용을 하며 당뇨병에도 쓴다. 생잎의 즙을 화상에 사용한다.

본 명세서 상 "사삼"은 초롱꽃과 (Campanulaceae)에 속하는 잔대의 뿌리를 말한다. 사삼은 우리나라, 일본, 중국 등에 자생하는 높이 50 내지 100 cm 내외의 다년생 초본으로서, 지상부 전체에 털이 밀생하고 뿌리는 비대하며, 꽃은 7 내지 9 월에 자색의 종모양으로 피는 특징이 있다.

본 발명에 있어서 압척초는 뿌리, 줄기 잎으로 이루어진 군에서 선택된 1종인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 사삼은 뿌리인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서 상 "추출물"은 용매 조추출물을 포함하며, 상기 추출물은 용액, 농축물 또는 분말 상태일 수 있다. 또한, 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 헥산 및 디에틸에테르로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 얻어진 추출물인 것일 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 "추출물"은 물을 용매로 추출하여 얻어진 추출물인 것일 수 있으며, 예를 들어, 100 % 물을 용매로 추출하여 얻어진 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 면역질환은 선천 면역 질환인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 선천 면역은 항원에 대해 비특이적으로 반응하고, 특별한 기억 작용이 없으며, 우리몸에 세균이나 바이러스가 침투하였을 때 바로 작용하는 면역 체계이다. 선천 면역 질환은 감염에 대처하기 위한 일차적 방어로 유발되는 모든 질환을 의미하며, 예를 들어, 비특이적 감염, 기침 및 콧물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물의 제조 과정을 보다 상세하게 설명하면 다음과 같다:

압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종을 물로 세척하여 협착물을 제거하는 건조 단계;

상기 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종을 용매로 추출하는 추출물 추출 단계;

상기 추출물을 감압 농축하여 농축물을 제조하는 농축 단계; 및

상기 농축물을 동결 건조 및 분무건조하여 분말을 모으는 건조 단계.

상기 추출 단계는 액체 또는 고체 원료 중에 포함되어 있는 유용한 가용성 성분을 용매에 녹여 분리하는 방법으로, 상온 추출, 냉침 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 증기 추출, 환류 냉각 추출, 감압 또는 가압 추출을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 환류 추출을 이용할 수 있다. 환류 추출은 추출 용기 윗부분에 냉각 장치가 부착되어 있어, 증발하는 용매를 냉각 및 응축시켜 용액에서 증발하는 용매의 양을 최소화할 수 있다.

상기 추출 단계는 압척초 또는 사삼의 중량에 대하여 약 5 내지 20 부피배, 약 5 내지 15 부피배, 바람직하게는 8 부피배의 용매로 추출물을 추출하는 것일 수 있다.

상기 농축 단계는 액체 함량이 높은 액상 물질의 액체를 제거하여 고형물의 농도를 높이는 것으로, 본 발명에 있어서 감압 농축법을 이용하였다. 감압 농축은 감압하여 용매의 끓는점을 내려 용매를 빠르게 증발시켜 용액의 용질 농도를 높이는 것이다.

상기 건조 단계는 열풍 건조 (AD), 냉풍 건조, 진공 건조 (Vacuum Dry, VD), 분무 건조 (Spray Dry, SD) 및 동결 건조 (Freeze Dry, FD)로 수행할 수 있으며, 바람직하게는 동결 건조를 이용할 수 있다. 동결 건조는 물질을 동결시키고, 수증기의 부분압을 낮춰 얼음을 직접 증기로 승화시킴으로써, 용매를 제거하는 방법이다. 동결 건조 방법은 열에 민감한 물질의 손상을 최소화하고, 비활성화 하며, 수분의 침투가 용이하고 부스러지기 쉬운 구조이며, 정밀하고 깨끗한 충진이 가능하며, 빠르고 완벽한 재수화 (Rehydration)가 가능하다는 장점이 있다.

본 발명에 사용된 추출 방법은 통상적으로 사용되는 모든 방법일 수 있으며, 예를 들어, 열수 추출법, 냉침 추출법, 환류 냉각 추출법, 용매 추출법, 수증기 증류법, 초음파 추출법, 용출법, 압착법일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 추출 방법으로 추출된 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 추출 방법으로 추출된 추출물은 통상의 정제방법을 이용하여 정제될 수 있다.

본 발명에 있어서 추출물은 상기 추출 방법으로 추출된 추출물을 감압 농축 및 동결 건조 또는 분무 건조의 추가과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다.

본 발명에 있어서 추출물은 상기 추출 방법으로 추출된 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피 (thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피 (high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물의 약학적 유효량 및/또는 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학적 조성물로 이용될 수 있다.

본 명세서상의 용어 "약학적 유효량"은 상술한 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는데 충분한 양을 의미한다.

본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 인간을 포함하는 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여 방식은 통상적으로 사용되는 모든 방식일 수 있으며, 예컨대, 경구, 피부, 정맥, 근육, 피하 등의 경로로 투여될 수 있으며, 예를 들어, 경구로 투여될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여방식, 환자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다.

본 발명의 조성물은 상기 혼합 추출물 이외에 약학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제 및 희석제 등의 보조제를 추가로 함유하는 것일 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용할 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스 (sucrose) 또는 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다.

경구를 위한 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 연고제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제, 경피제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.

좌제의 제제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물을 인간에게 적용하는 구체예에 있어서, 본 발명의 생약 추출물 조성물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로 투여방식과 표준 약제학적 관행 (standard phamaceutical practice)을 고려하여 선택된 약제학적 담체와 혼합되어 투여될 수 있다.

예를 들면, 본 발명의 생약 추출물 함유 조성물은 전분 또는 락토오즈를 함유하는 정제 형태로, 또는 단독 또는 부형제를 함유하는 캡슐 형태로, 또는 맛을 내거나 색을 띄게 하는 화학 약품을 함유하는 엘릭시르 또는 현탁제 형태로 경구, 구강 내 또는 혀 밑 투여될 수 있다. 이러한 액체 제제는 현탁제 (예를 들면, 메틸셀룰로오즈, 위텝솔 (witepsol)과 같은 반합성 글리세라이드 또는 행인유 (apricot kernel oil)와 PEG-6 에스테르의 혼합물 또는 PEG-8과 카프릴릭/카프릭 글리세라이드의 혼합물과 같은 글리세라이드 혼합물)와 같은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 제형화 될 수 있다.

본 발명의 추출물 포함 조성물의 투여 용량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.

본 발명의 추출물 함유 조성물의 투여 용량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다. 예를 들어, 유효성분 함량을 기준으로 1일 투여량이 0.001 내지 2 g/kg, 바람직하게는 0.5 내지 500 ㎎/kg일 수 있다. 상기한 투여량은 평균적인 경우를 예시한 것으로서 개인적인 차이에 따라 그 투여량이 높거나 낮을 수 있다.

본 발명의 추출물 함유 조성물의 1일 투여량이 상기 투여 용량 미만이면 유의성 있는 효과를 얻을 수 없으며, 그 이상을 초과하는 경우 비경제적일 뿐만 아니라 상용량의 범위를 벗어나므로 바람직하지 않은 부작용이 나타날 우려가 발생할 수 있으므로, 상기 범위로 하는 것이 좋다.

본 발명의 다른 일 양태는 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 개선 또는 예방용 식품 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 있어서 압척초는 뿌리, 줄기 및 잎으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 면역질환은 선천 면역질환인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 식품 조성물에 함유된 유효성분으로서의 추출물의 함량은 식품의 형태, 소망하는 용도 등에 따라 적절하게 특별한 제한이 없으며, 예를 들어, 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1.5 g의 비율로 가할 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.

상기 음료는 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.

상기 외에 본 발명의 식품조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 식품조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 총 조성물 대비 0 내지 20 중량%의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. 이러한 첨가제의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.

본 발명에 있어서 식품 조성물은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공될 수 있다.

본 발명에 있어서 식품 조성물은 "건강기능성식품 조성물"인 것일 수 있으며, 건강기능성식품 조성물은 건강기능성식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.

본 발명에 있어서 건강기능성식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 '식품 첨가물 공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다. 예를 들어, 정제 형태의 건강기능성식품은 본 발명의 유효성분을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능성식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다. 캅셀 형태의 건강기능성식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다. 환 형태의 건강기능성식품은 본 발명의 유효성분과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다. 과립 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분의 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.

특히, 본 발명의 조성물을 인체에 투여하는 경우 천연추출물의 일반적 특성에 비추어 볼 때 다른 합성 의약품에 비해 부작용의 염려가 없을 것으로 사료되며, 실제로 규격화된 생약 조성물에 대한 독성 시험 결과 생체에 아무런 영향이 없는 것으로 판명되었다.

본 발명의 또 다른 양태는 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 개선 또는 예방용 사료 조성물에 관한 것이다.

본 명세서 상 "사료 조성물"은 반려동물용인 것일 수 있다.

본 발명에 있어서 반려동물은 개, 고양이, 소, 돼지, 기니피그, 양, 햄스터, 염소, 닭, 오리, 십자매, 금화조, 앵무새, 잉꼬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것일 수 있으며, 예를 들어, 개인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 또 다른 양태는 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.

본 발명에 있어서 바이러스 감염질환은 인플루엔자 바이러스의 감염으로 인한 질환인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서 상 "인플루엔자 바이러스"는 RNA를 핵산으로 각기 기능이 다른 8개의 분절을 암호화하는 A, B형과 7개의 분절을 암호화하는 C형으로 분류된다. 이중 A, B형이 주로 사람이 감염되는 주된 인플루엔자 바이러스로 헤마글루타닌 (Hemagglutinin; HA)과 뉴라미니다아제 (Neuraminidase; NA)라는 바이러스 표면 당단백질인 항원의 종류에 따라서 구분되고, 인플루엔자 바이러스의 명명은 형, 자연숙주, 아형, 분리지, 분리번호, 분리년도(HA와 NA 항원형)의 순서로 기재한다.

본 발명에 있어서 헤마글루티닌은 특정 항체에 대한 반응 여부에 따라 분류할 수 있으며, 예를 들어, H1 내지 H18로 분류 할 수 있다.

본 발명에 있어서 뉴라미니다아제는 특정 항체에 대한 반응 여부에 따라 분류할 수 있으며, 예를 들어, N1 내지 N11로 분류 할 수 있다.

본 발명에 있어서 인플루엔자 바이러스는 헤마글루티닌 및 뉴라미니다아제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 조합으로 이루어진 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 인플루엔자 바이러스 감염은 A형 인플루엔자 바이러스 감염에 의한 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 A형 인플루엔자 바이러스는 H1N1인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서 A형 인플루엔자 바이러스 유전체는 약 13,500개의 RNA 염기로 이루어져 있으며, 돌연변이나 유전체 분절교환에 의해 새로운 헤마글루타닌과 뉴라미니다아제, 즉, 새로운 항원을 갖는 변이주가 출연하기 쉬워 세계적으로 대유행을 일으킨다. 반면, B형 인플루엔자 바이러스는 항원성의 큰 변이가 일어날 가능성이 적고, 2가지 계통만 알려져 있어 A형에 비해 대유행의 가능성이 훨씬 적다.

본 발명의 또 다른 일 양태는 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 식품 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 일 양태는 압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 사료 조성물에 관한 것이다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 또는 사삼 추출물의 인플루엔자바이러스 (A/PR8/34-GFP virus)에 대한 항바이러스 활성을 보여주는 현광현미경 관찰 사진이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 또는 사삼 추출물의 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 활성을 유세포 분석기로 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물의 면역활성 지표 사이토카인인 TNF-α의 유도 분석 결과를 보여주는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물의 면역활성 지표 사이토카인인 IL-6 의 유도 분석 결과를 보여주는 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물을 7일간 투여 시 마우스의 체중 변화를 측정한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물의 투여 후 바이러스 감염 시 8일간의 생존률을 보여주는 그래프이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물의 투여 후 비장의 무게 변화를 보여주는 그래프이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물의 투여 후 흉선의 무게 변화를 보여주는 그래프이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물의 투여 후 마우스 혈청 내 TNF-α의 변화를 보여주는 그래프이다.
도 10은 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물의 투여 후 마우스 혈청 내 IL-6의 변화를 보여주는 그래프이다.
도 11은 본 발명의 일 실시예에 따른 압척초 및 사삼 추출물의 면역세포인 Raw264.7 세포와 마우스에서 항바이러스 효과를 보여주는 그래프이다.

이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.

제조예 1. 추출물의 제조

1-1. 사삼 추출물의 제조

사삼 뿌리 67 kg에 사삼 뿌리 중량 대비 8 배수인 정제수 536 kg을 넣고, 100 ℃에서 8시간 동안 추출한 후에 60 메시(mesh)의 필터에 여과하여 1차 열수 추출액을 얻었다. 그 다음, 사삼 뿌리 67 kg에 사삼 뿌리 중량 대비 5 배수인 정제수 335 kg을 넣고, 100 ℃에서 5시간 동안 추출 후, 60 메시의 필터에서 여과하여 2차 열수 추출액을 얻었다.

수득한 1차 열수추출액과 2차 열수추출액을 혼합한 후, 45 ℃에서 감압 농축하여 농축액을 얻었다. 그 다음, 농축액을 분무건조하여 최종적으로 사삼 열수추출 분말 11.8 kg을 수득하였다.

1-2. 압척초 추출물의 제조

압척초의 지상부 30 kg에 압척초 중량 대비 20 배수의 정제수 600 kg을 넣고, 100 ℃에서 8시간 동안 추출 후, 60 메시의 필터에 여과하여 1차 열수추출액을 얻었다. 그 다음, 압척초의 지상부 30 kg에 압척초 중량 대비 12 배수의 정제수 360 kg을 넣고, 100 ℃에서 8시간 동안 추출 후, 60 메시의 필터에 여과하여 2차 열수추출액을 얻었다.

수득한 1차 열수추출액과 2차 열수추출액을 혼합한 후, 45 ℃에서 감압 농축하여 농축액을 얻었다. 그 다음, 농축액을 분무건조하여 최종적으로 사삼 열수추출 분말 3.5 kg을 수득하였다.

1-3. 압척초 및 사삼 복합 추출물의 제조

사삼 17.5 kg 및 압척초 17.5 kg 총 35 kg에 복합물 중량 대비 12 배수의 정제수 420 kg을 넣고, 100 ℃에서 8시간 동안 추출 후, 60 메시의 필터에 여과하여 1차 열수 추출액을 얻었다. 그 다음, 사삼 17.5 kg 및 압척초 17.5 kg 총 35 kg에 복합물 중량 대비 8 배수의 정제수 280 kg을 넣고, 100 ℃에서 8시간 동안 추출 후, 60 메시의 필터에 여과하여 2차 열수 추출액을 얻었다.

수득한 1차 열수 추출액과 2차 열수 추출액을 혼합한 후, 45 ℃에서 감압 농축하여 농축액을 얻고, 농축액을 분무건조하여 최종적으로 압척초 및 사삼 복합 열수추출 분말 4.9 kg을 수득하였다.

실시예 1. 추출물의 항바이러스 활성 분석

인플루엔자 바이러스 (Influenza virus; A/PR8/34)에 대한 제조예 1로 제조한 사삼 추출물, 압척초 추출물, 압척초 및 사삼 복합 추출물의 항바이러스 활성을 분석하였다. 실험군은 음성 대조군으로 아무것도 처리하지 않은 세포군 (이하, CON), A/PR8/34-GFP 바이러스 감염군 (이하, Vehicle), 양성 대조군으로 A/PR8/34-GFP 바이러스 감염 세포에 1,000 units/ml의 IFN-ß를 처리한 세포군 (이하, IFN-ß), A/PR8/34-GFP 바이러스 감염군에 사삼 추출물 10 μg/mL 처리한 세포군 (이하, 사삼 10), A/PR8/34-GFP 바이러스 감염군에 압척초 추출물 10 μg/mL 처리한 세포군 (이하, 압척초 10) 및 A/PR8/34-GFP 바이러스 감염군에 압척초 및 사삼 추출물 10 μg/mL 처리한 세포군 (이하, 사압 10)으로 나누어 수행하였다. 그리고 실험 결과의 비교는 one-way ANOVA를 이용하여 그룹간의 차이를 통계적 유의성을 평가하였다. 유의확률이 ***P<0.005 대 Con, ***P<0.005 대 vehicle일 때 통계적으로 유의성을 인정하였다.

구체적으로, 24-웰 플레이트에 면역세포인 RAW 264.7 세포주(ATCC®　TIB-71™)을 배양한 후, 10% FBS (Fetal Bovine Serum, FBS)와 1% 페니실린 스트렙토마이신 (Penicillin streptomycin)이 첨가된 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's medium)에 각각의 추출물을 처리하여 18시간 동안 5 % CO₂, 37℃ 배양기에서 배양하였다.

배양이 끝난 후, 1% 페니실린 스트렙토마이신이 첨가된 DMEM에 A/PR8/34-GFP (10 MOI)로 감염시켰다. 감염 2시간 후, 감염액을 제거하고 PBS로 세척한 후 10% FBS와 1% 페니실린 스트렙토마이신이 첨가된 DMEM를 넣어준 후 24 시간 뒤 바이러스 감염 정도를 형광 현미경으로 GFP (Green fluorescent protein) 형광 이미지를 관찰하였고, 유세포분석기를 이용하여 GFP의 발현양을 정량하여, 그 결과를 하기 표 1 및 도 1, 2에 나타내었다.

	상대적 GFP 형광강도
CON	1
Vehicle	33.65
IFN-ß	2.6
사삼10	32.65
압척초10	18.5
사압 10	6.25

표 1 및 도 1, 2에서 확인할 수 있듯이, 사삼 10에서는 항바이러스 효과가 나타나지 않았으며 Vehicle과 거의 비슷한 수치를 나타내었다. 반면, 압척초 10은 세포 내 GFP 발현이 Vehicle에 비해 약 44% 감소를 보였으며, 사압 10에서는 세포내 GFP 발현이 대조군에 비해 약 77% 감소한 것을 확인할 수 있었다.

이를 통해, 면역세포에 압척초 추출물 또는 압척초 및 사삼 추출물을 전 처리 함으로서 GFP 발현의 감소를 확인하였으며, 이는 세포내의 바이러스 복제의 감소를 의미한다.

실시예 2. 추출물에 의한 면역활성 지표인 사이토카인 유도 분석

제조예 1로 제조한 사삼 추출물, 압척초 추출물, 압척초 및 사삼 복합 추출물의 면역인자 유도효과를 확인하기 위해 면역활성 지표인 사이토카인 유도 (pro-inflammatory Cytokine Induction) 분석을 수행하였다. 이때, 면역인자는 TNF-α (종양 괴사인자 알파, tumor necrosis factor-α) 및 IL-6 (인터루킨 6, Interleukin 6)을 확인하였다. 실험군은 음성 대조군으로 아무것도 처리하지 않은 세포군 (이하, CON), 면역반응 활성화를 위해 100 ng/mL의 LPS (Lipopolysaccharide)를 처리한 세포군 (이하, LPS), 압척초 및 사삼 추출물 10 μg/mL 처리한 세포군 (이하, 사압 10) 및 압척초 및 사삼 추출물 100 μg/mL 처리한 세포군 (이하, 사압 100)으로 나누어 수행하였다. 실험 결과의 비교는 one-way ANOVA를 이용하여 통계적 유의성을 평가하였다. 유의 확률이 **P<0.001와 ***P<0.005 대 CON일 때 통계적으로 유의성을 가진다고 인정하였다.

배양이 끝난 후, 각 웰의 배양액을 수거한 후 원심분리 (1500 rpm, 5분)한 후, TNF-α 및 IL-6의 생성정도를 ELISA 법으로 측정하였고, 그 결과를 하기 표 2 및 도 3, 4에 나타내었다.

	CON	LPS	사압10	사압100
TNF-α	100	1057.55	1086.3	1430.2
IL-6	100	1090.75	392.4	1130.3

표 2 및 도 3, 4에서 확인할 수 있듯이, CON 대비 사압 100은 TNF-α가 약 14 배 증가하였다. 또한, CON 대비 사압 100은 IL-6가 약 11배 증가하였다.

이를 통해서, 면역세포에서 압척초 및 사삼 추출물에 의해 면역활성 지표 사이토카인인 TNF-α 및 IL-6가 강하게 유도되는 것을 확인할 수 있었다.

실시예 3. 압척초 및 사삼 추출물의 바이러스 활성 평가

3-1. 마우스의 몸무게 변화 및 생존률

압척초 및 사삼 추출물의 바이러스 활성을 평가하였다. 실험군은 음성 대조군으로 바이러스에 감염시키지 않고 아무것도 투여하지 않은 세포군 (이하, CON), 양성 대조군으로 바이러스에 감염시키고 아무것도 투여하지 않은 세포군 (이하, virus 군), 바이러스에 감염시킨 후 200 mg/kg의 압척초 및 사삼 추출물을 투여시킨 군 (이하, 사압 200 mpk) 및 바이러스에 감염시킨 후 300 mg/kg의 압척초 및 사삼 추출물을 투여시킨 군 (이하, 사압 300 mpk)으로 나누어 수행하였다.

우선, 4-5 주령된 Balb/c 암컷 마우스에 압척초 및 사삼 추출물을 200 ul씩 7일간 구강으로 주입한 후 체중의 변화를 측정하여 도 5에 나타내었다.

도 5에서 확인할 수 있듯이, 바이러스 감염 전 마우스에 압적초 및 사삼 추출물을 투여하였을 때 체중의 변화가 나타나지 않았으며, 이를 통해 압적초 및 사삼 추출물에 독성이 없음을 확인할 수 있었다.

그 다음, 20 ul의 A/PR8/34 바이러스 (10 LD₅₀)를 마우스 비강으로 투여하여 감염시키고 감염 이후부터 8일간의 생존률을 도 6에 나타내었다.

도 6에서 확인할 수 있듯이, virus 군은 8일째 마우스의 생존율이 약 20 %였으나, 사압 200 mpk 및 사압 300 mpk는 각각 약 40 % 및 70%의 생존률을 나타내었다. 이를 통해서, 압적초 및 사삼 추출물을 투여하였을 때 바이러스에 대한 생존율이 증가하는 것을 확인할 수 있었다.

3-2. 마우스의 비장과 흉선 무게 및 면역활성 지표 사이토카인 측정

압척초 및 사삼 추출물의 바이러스 활성을 평가하였다. 실험군은 음성 대조군인 PBS를 투여한 군 (이하, PBS 투여군), 300 mg/kg의 압척초 및 사삼 추출물을 7일간 투여한 군 (이하, 사압 300 mpk)으로 나누어 수행하였다.

구체적으로, 4-5 주령된 Balb/c 암컷 마우스에 압척초 및 사삼 추출물을 200 ul씩 7일간 구강으로 주입하였다. 그 다음, 마우스의 비장과 흉선 무게를 측정하여 그 결과를 도 7, 8에 나타내었다.

도 7, 8에서 확인할 수 있듯이, PBS 투여군에 비해 사압 300 mpk 에서는 비장의 무게는 큰 변화가 없었지만, 흉선의 무게는 약 1.25배 증가한 것을 확인할 수 있었다.

또한, 마우스 혈액에서 혈청을 분리한 후 혈청 내 면역활성 지표 사이토카인인 TNF-α, IL-6의 변화를 측정하여, 그 결과를 도 9, 10에 나타내었다.

도 9, 10에서 확인할 수 있듯이, 마우스 혈청 내 TNF-α는 PBS 투여군 대비 사압 300 mpk는 약 2.4 배 증가한 것으로 나타났다. 또한, 마우스 혈청 내 IL-6는 PBS 투여군 대비 사압 300 mpk는 약 2.1배 증가한 것으로 나타났다.

이를 통해, PBS 투여군 대비 사압 추출물을 투여한 군은 면역활성 지표 사이토카인 증가에 우수한 효과를 나타내었으며, 면역활성 지표 사이토카인을 분비하는 장기의 발달에 영향을 줄 수 있음을 확인하였다.

실시예 4. 추출물의 NK 세포 활성 분석

압척초 및 사삼 추출물의 NK 세포 활성을 분석하였다. 마우스의 비장에서 분리한 비장 세포 (Splenocyte)와 YAC-1 세포를 공동 배양한 후, 추출물을 처리한 후 24시간 동안 배양하였다.

실험군은 음성 대조군으로 아무것도 처리하지 않은 세포군 (이하, CON), 5 ug/ml의 압척초 및 사삼 추출물을 처리한 군 (이하, 사압 5), 10 ug/ml의 압척초 및 사삼 추출물을 처리한 군 (이하, 사압 10)으로 나누어 수행하였다. 실험 결과의 비교는 one-way ANOVA를 이용하여 그룹 간의 차이를 통계적 유의성을 평가하였다. 유의 확률이 *P<0.05, **P<0.001와 ***P<0.005 대 CON일 때 통계적으로 유의성을 가짐을 인정하였다. 그리고 배양이 끝난 배지를 수거하여 LDH 분석법 (Lactate Dehydrogenase Assay)을 수행하여 그 결과를 도 11에 나타내었다.

도 11에서 확인할 수 있듯이, 압척초 및 사삼 추출물은 면역세포인 Raw264.7 세포와 마우스에서 항바이러스 상태를 유도하여 바이러스 감염을 억제함을 확인하였다. 이는 압척초 및 사삼 추출물이 세포 면역증진 및 NK 세포의 활성도 증가를 유도함으로서 바이러스 감염을 방어하는 것을 의미한다.

이를 통해, 사삼 및 압척초 추출물은 선천면역 반응에 대한 우수한 효과를 가지며, A형 인플루엔자 바이러스 감염에 대한 예방 효과를 갖음을 확인할 수 있었다.

Claims

압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서, 상기 압척초는 뿌리, 줄기 및 잎으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서, 상기 사삼은 뿌리인 것인, 면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서, 상기 면역질환은 선천 면역질환인 것인, 면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
제5항에 있어서, 상기 압척초는 뿌리, 줄기 및 잎으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 면역질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
제5항에 있어서, 상기 사삼은 뿌리인 것인, 면역질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
제5항에 있어서, 상기 면역질환은 선천 면역질환인 것인, 면역질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.
제9항에 있어서, 상기 압척초는 뿌리, 줄기 및 잎으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 면역질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.
제9항에 있어서, 상기 사삼은 뿌리인 것인, 면역질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.
제9항에 있어서, 상기 면역질환은 선천 면역질환인 것인, 면역질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.
압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제13항에 있어서, 상기 압척초는 뿌리, 줄기 및 잎으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제13항에 있어서, 상기 사삼은 뿌리인 것인, 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제13항에 있어서, 상기 바이러스 감염질환은 인플루엔자 바이러스의 감염으로 인한 질환인 것인, 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
제17항에 있어서, 상기 압척초는 뿌리, 줄기 및 잎으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
제17항에 있어서, 상기 사삼은 뿌리인 것인, 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
제17항에 있어서, 상기 바이러스 감염질환은 인플루엔자 바이러스의 감염으로 인한 질환인 것인, 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 식품 조성물.
압척초 및 사삼으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.
제21항에 있어서, 상기 압척초는 뿌리, 줄기 및 잎으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.
제21항에 있어서, 상기 사삼은 뿌리인 것인, 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.
제21항에 있어서, 상기 바이러스 감염질환은 인플루엔자 바이러스의 감염으로 인한 질환인 것인, 바이러스 감염질환 개선 또는 예방용 사료 조성물.