KR890010202A - 사람 단백질 c의 지모겐 형태의 발현용 벡터 및 화합물 - Google Patents

사람 단백질 c의 지모겐 형태의 발현용 벡터 및 화합물 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

사람 단백질 C의 지모겐 형태의 발현용 벡터 및 화합물
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 4개의 부분으로 구성되며, 출발 플라스미드 pLAPC의 작제(construction)에 사용되는 출발물질인 플라스미드 pLPC에 대한 작제방법을 도식적으로 나타낸 것이다, 제1도, 부분 A는 BK 바이러스 및 플라스미드 pdBPV-MMTneo로부터 플라스미드 pBKneol의 작제를 설명한다. 제1도, 부분 B는 아데노바이러스 2 및 플라스미드 pSV2cat로부터 플라스미드 pLPcat의 작제를 설명한다.

Claims (27)

  1. 아미노 말단으로부터 카복시 말단까지, a) γ -카복실화되고, 분비된 단백질의 시그날 펩티드 및 프로펩티드 ; b) 사람 단백질 C의 경 쇄(light chain) ; c) 디펩티드 리진-아르기닌, 아르기닌-리진, 리진-리진, 또는 아르기닌-아르기닌 ; 및 d) 하기의 아미노산 잔기 서열을 함유하는 단백질에 대한 암호와 서열을 함유함을 특징으로 하는 DNA 화합물.
    상기 서열에서, R1은 PHE, GLY, TYR 또는 TRP이고, R2는 VAL 또는 PRO이며, R3는 ASP 또는 ASN이고, ARG는 아르기닌이며, ASN은 아스파라긴이고, ASP는 아스파르트산이며, -COOH는 카복시 말단이고, CYS는 시스테인이며, GLN은 글루타민이고, GLU는 글루탐산이며, GLY는 글리신이고, HIS는 히스티딘이며, ILE는 이소로이신이고, LEU는 로이신이며, LYS는 리진이고, MET는 메티오닌이며, PHE는 페닐알라닌이고, PRO는 프롤린이며, SER는 세린이고, THR는 트레오닌이며, TRP는 트립토판이고, TYR은 티로신이며, VAL은 발린이다.
  2. 제1항에 있어서, 시그날 펩티드 및 프로펩티드가 초기 사람 단백질 C의 시그날 펩티드 및 프로펩티드인 DNA 화합물.
  3. 제1항 또는 2항에 있어서, 디펩티드가 리진-아르기닌인 DNA 화합물.
  4. 제3항에 있어서, DNA에 의해 암호화된 폴리펩티드가 하기와 같은 DNA 화합물.
    상기 서열에서, -H2N은 아미노 말단이고, R1은 PHE, GLY TYR 또는 TRP이며, R2는 PRO 또는 VAL 이고, R3는 ASP 또는 ASN이다.
  5. 제1항, 2항, 3항 또는 4항의 DNA 화합물을 함유함을 특징으로 제조합 DNA 발현 벡터.
  6. 제5항에 있어서, R1이 PHE이고, R2가 PRO이며, R3가 ASP인 벡터.
  7. 제6항에 있어서, 플라스미드 pLPC-167F인 벡터.
  8. 제5항에 있어서, R1이 GLY이고, R2가 PRO이며, R3가 ASP인 벡터.
  9. 제8항에 있어서, 플라스미드 pLPC-167G인 벡터.
  10. 제5항의 벡터로 형질전환된 진핵 숙주 세포.
  11. 제10항에 있어서, 293/pLPC-167F인 진핵 숙주 세포.
  12. 제10항에 있어서, 293/pLPC-167G인 진핵 숙주 세포.
  13. 제10항에 있어서, AV12/pLPC-167F인 진핵 숙주 세포.
  14. 제10항에 있어서, AV12/pLPC-167G인 진핵 숙주 세포.
  15. (A) (i) 아미노 말단으로부터 카복시 말단까지, a)- 카복실화되고, 분비된 단백질의 시그날 펩티드 및 프로-펩티드 ; b) 사람 단백질 C의 경 쇄 ; c) 디펩티드 LYS-ARG, ARG-LYS, LYS-LYS 또는 ARG-ARG ; 및 d) 하기 아미노산 잔기 서열을 함유하는 아미노산 잔기 서열을 암호화하는 DNA 서열 ; 및 (ii) DNA 서열의 발현을 유발하도록 위치한 프로모터를 함유하는 재조합 DNA 벡터로 진핵 숙주 세포를 형질전환시키고 ; (B) 단계 (A) 에서 형질전환된 숙주 세포를 DNA 서열의 발현을 허용하는 조건하에서 배양하는 단계를 포함함을 특징으로 하여, 진핵 숙주 세포로부터의 분비시 사람 단백질 C의 지모겐 형태의 재조합 생성 방법.
    상기 서열에서, R1은 PHE, GLY, TYR 또는 TRP이고, R2는 VAL 또는 PRO이며, R3는 ASP 또는 ASN이고, ARG는 아르기닌이며, ASN은 아스파라긴이고, ASP는 아스파르트산이며, -COOH는 카복시 말단이고, CYS는 시스테인이며, GLN은 글루타민이고, GLU는 글루탐산이며, GLY는 글리신이고, HIS는 히스티딘이며, ILE는 이소로이신이고, LEU는 로이신이며, LYS는 리진이고, MET는 메티오닌이며, PHE는 페닐알라닌이고, PRO는 프롤린이며, SER는 세린이고, THR는 트레오닌이며, TRP는 트립토판이고, TYR은 티로신이며, VAL은 발린이다.
  16. 제15항에 있어서, 재조합 DNA 발현 벡터가 플라스미드 pLPC-167F인 방법.
  17. 제15항에 있어서, 재조합 DNA 발현 벡터가 플라스미드 pLPC-167G인 방법.
  18. 제15항에 있어서, 숙주 세포가 293 또는 AV12숙주 세포인 방법.
  19. 제18항에 있어서, 단계(B)에서 배양된 숙주 세포가 293/pLPC-167F, 293/p-LPC-167G, AV12/pLPC-167F 또는 AV12/pLPC-167G 숙주 세포인 방법.
  20. 하기의 아미노산 잔기 서열을 갖는 단백질 C 지모겐.
    상기 서열에서, H2N은 아미노 말단이고, R1은 PHE, GLY, TYR 또는 TRP이며, R2는 VAL 또는 PRO이고, R3는 ASP 또는 ASN이며, ARG는 아르기닌이고, ASN은 아스파라긴이며, ASP는 아스파르트산이고, -COOH는 카복시 말단이며, CYS는 시스테인이고, GLN은 글루타민이며, GLU는 글루탐산이고, GLY는 글리신이며, HIS는 히스티딘이고, ILE는 이소로이신이며, LEU는 로이신이고, LYS는 리진이며, MET는 메티오닌이고, PHE는 페닐알라닌이며, PRO는 프롤린이고, SER는 세린이며, THR는 트레오닌이고, TRP는 트립토판이며, TYR은 티로신이고, VAL은 발린이다.
  21. 제20항에 있어서, R1이 PHE이고, R2가 PRO이며, R3가 ASP인 지모겐.
  22. 제20항에 있어서, R1이 GLY이고, R2가 PRO이며, R3가 ASP인 지모겐.
  23. 지혈 조절제로서의 제20항, 21항 또는 22항의 지모겐의 용도.
  24. 하기와 같은, 활성화된 사람 단백질 C의 경 쇄 및 중 쇄(heavy chain)를 함유함을 특징으로 하는 활성화된 단백질 C 분자.
    상기 서열에서, H2N-은 아미노 말단이고, ALA는 알라닌이며, ARG는 아르기닌이고, ASN은 아스파라긴이며, ASP는 아스파르트산이고, -COOH는 카복시-말단이며, CYS는 시스테인이고, GLN은 글루타민이며, GLU는 글루탐산이고, GLY는 글리신이며, HIS는 히스티딘이고, ILE는 이소로이신이며, LEU는 로이신이고, LYS는 리진이며, MET는 메티오닌이고, PHE는 페닐알라닌이며, PRO는 프롤린이고, SER는 세린이며, THR는 트레오닌이고, TRP는 트립토판이며, TYR은 티로신이고, VAL은 발린이다.
  25. 지혈 조절제로서의 제24항의 활성화된 단백질 C의 용도.
  26. 제20항의 지모겐을, 이를 위한 약제학적으로-허용가능한 담체와의 혼합물 형태로 함유함을 특징으로 하는 약제학적 제제.
  27. 제24항의 활성화된 단백질 C를, 이를 위한 약제학적으로-허용가능한 담체와의 혼합물 형태로 함유함을 특징으로 하는 약제학적 제제.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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