LT3375B - Peptides and pharmaceutical composition containing them - Google Patents

Peptides and pharmaceutical composition containing them Download PDF

Info

Publication number
LT3375B
LT3375B LTIP717A LTIP717A LT3375B LT 3375 B LT3375 B LT 3375B LT IP717 A LTIP717 A LT IP717A LT IP717 A LTIP717 A LT IP717A LT 3375 B LT3375 B LT 3375B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
arg
pro
gly
ser
tic
Prior art date
Application number
LTIP717A
Other languages
English (en)
Inventor
Stephan Henke
Hiristo Anagnostopulos
Gerhard Breipohl
Jochen Knolle
Jens Stechl
Bernward Schoelkens
Hans-Wolfram Fehlhaber
Original Assignee
Hoechst Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoechst Ag filed Critical Hoechst Ag
Publication of LTIP717A publication Critical patent/LTIP717A/xx
Publication of LT3375B publication Critical patent/LT3375B/lt

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Išradimas priskiriamas naujiems bradikinin-antagonistinio veikimo peptidams, o taip pat farmakologinei kompozicijai, sudarytai jų pagrindu.
PCT paraiškoje Nr. 86/07263 aprašomi bradikininantagonistiniai peptidai, kuriuose, be kitko, peptidinio hormono bradikinino arba jo analogo L-Pro 7 pozicijoje pakeistas D-aminorūgštimi, kaip, pvz. D-Phe, D-Thi, D-Pal, CDP, MDY, D-Phg, D-His, D-Tp, D-Tyr, D-hPhe, D-Val, D-Ala, D-His, D-Ile, D-Leu ir DOMT.
Šio išradimo esmė buvo - surasti naujus bradikininantagonistėmis savybėmis pasižyminčius peptidus.
Šis uždavinys išsprendžiamas pagalba peptidų, kurių formulė:
A-B-C-E-F-K-(D)-Tic-G-M-F'-I (I) kurioje
A reiškia vandenilį, (C^-Cg) - alkanoilą arba (Cx-C6) alkanoilą, pakeistą karboksilo grupe, arba radikalą, kurio formulė II
R -N-CH-C-
(II) kurioje
R reiškia vandenilį, C^-Cg - alkanoilą arba C^-Cg alkanoilą, pakeistą hidroksifenilpropionilu;
R2 reiškia vandenilio atomą; ir
R3 reiškia Cį-Cg - alkilą, pakeistą amino, guanicido grupe, fenilu, pakeistu hidroksilo grupe.
B reiškia tiesioginę jungtį arba pagrindinę aminorūgštį, esančią L- arba D- konfigūracijoje, minėta aminorūgštis priklauso Arg, Lys ir Orn eilei, ir gali būti pakeistos šoninėje grandinėje benziloksikarbonilu, nitrogrupė, tozilu, nikotinoilu, -CO-NH-C6H6 arba 2, 3,
5-trimetil-4-metoksifenilsulfonilu;
C reiškia junginį pagal formulę Illa
G'-G'-C (Illa) kurioje G’ yra nepriklausomas radikalas, kurio formulė IV
-N-CH-C-
(IV) kurioje R4 ir R5 kartu su kitais atomais sudaro heterociklinę, monociklinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir keturius anglies atomus, sistemą, kuri gali būti pakeista hidroksigrupe arba grupe, turinčią 1 azoto atomą, 3 anglies atomus ir 1 deguonies atomą arba sudarančią heterociklinę, biciklinę žiedinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir 7 anglies atomus;
E reiškia L- arba D- konfigūracijos Phe, Trn arba Thia aromatinės aminorūgšties liekaną;
F reiškia L- arba D- konfigūracijos Ash, Cys, Gln, Orn, Ser, Trp, Phe, Thia aminorūgšties radikalą arba tiesioginę jungtį.
K reiškia radikalą -NH-(CH2) X-CO, kur X=l-2, arba reiškia tiesioginę jungtį.
(D) - Tie reiškia grupę, kurios formulė V
(V)
G reiškia tiesioginę jungtį arba formulė IV radikalą, kurio
-N-CH- οι, 1 5 II
R R5 O kurioje R4 ir R5 kartu su kitais atomais sudaro heterociklinę, monociklinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir keturius anglies atomus, arba sistemą, turinčią 1 azoto atomą, 3 anglies atomus ir 1 deguonies atomą arba sudarančią heterociklinę, biciklinę žiedinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir 7-9 anglies atomus;
F’ reiškia liekaną -NH-(CH2)4~, arba L- arba D- konfigūracijos Arg arba Ser aminorūgšties radikalą, kuris gali būti pakeistas ramnozilu arba 2, 3, 5-trimetil-4metoksifenilsulfonilu arba reiškia tiesioginę jungtį;
I reiškia amino arba hidroksigrupę, arba fiziologiškai priimtinas jų druskas.
Jeigu nieko kito nenurodyta, tai aminorūgšties radikalo pažymėjimas, be stereodeskriptoriaus reiškia, kad radikalas yra L-formoje (Šrioderis, Liubke, Peptidai, 1 tomas, Niujorkas, 1965, psl. ΧΧΙΙ-ΧΧΙΙΙ; Houben-Veil, Organinės chemijos metodai, tomai XV/1 ir 2, Štutgartas 1974) kaip pavyzdžiui:
Aad, Abu, yAbu, ABz, ξΑΒζ, ξΑσ3, Ach, Acp, Adpd, Ahb, Aib, ĖAib, Ala, PAla, Ala, Alg, Ali, Amą, Apl, Apm,
Apr, Arg, Asn, Asp, Asu, Aze, Azi, Bai, Bhp, Can, Cit, Cys, Cyta, Daad, Dab, Daad, Dap, Dapm, Dasu, Djen, Dpa, Dtc, Fel, Gln, Glu, Gly, Guv, hAla, hArg, hCys, hGln, hClu, His, hlle, hLeu, hLus, hMet, hPhe, hPro, hSer, hThr, hTrp, hTyr, Hyl, Hyp, eHyp, Ile, Ise, Iva, Kyn, Lant, Len, Leu, Lsg, Lys, PLys, Lys, met, Mim, Min, nArg, Nle, Nva, Oly, Orn, Pan, Pec, Pen, Phe, Phg, Pic, Pro, Pro, Pse, Pyc, Pyr, Pza, Qin, Ros, Sar, Sec, Sem, Ser, Thi, pThi, Thr, Thy, Thx, Tia, Tie, Tly, Trp,
Trta, Tyr, Vai.
IV formulėje heterociklinės žiedinės sistemos radikalas gali būti sekančių grupių heterociklų radikalai:
pirolidinas (A); piperidinas (B); tetrahidroizochinolinas (C) ; dekahidroizochinolinas (D) ; oktahidroindolas (E) ; oktahidrociklopenta (b)-pirolas (F) ; 2-azibiciklo(2.2.3)-oktanas (G); 3-azibiciklo (2.3.1)heptanas (H); 2-azispiro(4.4)-nonanas(J); spiro (biciklo(2.2.1)-heptan)-2,3-pirolidinas) (K); spiro ( (bi — ciklo(2.2.2)oktan)-2,3-pirolidinas) (L);2-azitriciklo (4.3.0.16'9)-dekanas (M); dekahidrociklohepta (b) pirolas (N); oktahidroizoindolas (O); oktahidrociklopenta (c)pirolas (P); 2,3,3a,4,5,7a-heksahidroindolas (O); tetrahidrotiazolas (R); 2-azibiciklo(3.1.0)heksanas (S) ; izoksoazolinas (T) ; pirozolidinas (U) ; hidroksiprolinas (V); kurie esant reikalui gali būti pakeičiami.
Aukščiau minėtuose radikaluose esantys heterociklai psl.2a žinomi pagal JAV paraiškas Nr. 4344349, 4374847, 4350704, EP paraiškas Nr. 50800, 51741, 51080, 49658, 49605, 29488, 46958, 52870, 271865, VFR paraiškas Nr. 3226768, 3151690, 3210496, 3211397, 3211676, 3227555, 3242151, 2346503 ir 3246757.
Be to, kai kurie iš šių heterociklų pateikiami VFR paraiškoje Nr. 3818850.3.
Jeigu specialiai nepažymėta, alkilas gali turėti tiesią ar besišakojančią atomų grandinę. Tai taip pat galioja ir tokiems radikalams, kaip, pvz. alkokcilas, arilalkilas arba alkanoilas. (C6-C12)-arilas dažniausiai reiškia fenilą, naftilą arba bifenilą. Atitinkamai galima sudaryti ir sudėtingesnius radikalus, kaip, pvz. ariloksilas, arilalkilas arba aroilas.
Halogenas reiškia fluorą, chlorą, bromą arba jodą, pirmenybę teikiant chlorui.
Iš druskų pageidautinos šarminių metalų druskos, arba žemės šarminių metalų druskos, druskos su fiziologiškai priimtinais aminais ir druskos, į kurių sudėtį įeina liekanos organinių ir neorganinių rūgščių, kaip druskos rūgštis, bromo vandenilio rūgštis, sieros rūgštis, fumaro rūgštis, citrinos rūgštis, malono rūgštis, acto rūgštis ir kt.
Labiau pageidaujami I formulės peptidai, kur
B reiškia argininą, diaminobutiroilą, arba atitinkamai aminogrupė šoninėje grandinėje gali punktuose aj arba a2) ;
liziną, ornitiną, 2,4L-homoarginino liekaną, kai arba guanidinogrupė, esanti būti pakeista A, kaip aprašyta
E reiškia L- arba D- konfigūracijos aromatinės aminorūgšties liekanos radikalą, kuris arilinėje dalyje gali būti pakeistas halogenu 2-oje, 3-oje arba 4-oje pozicijoje, tirozinas, 0-metiltirozinas, 2-piridilalaninas arba naftilalaninas;
F reiškia L- arba D- konfigūracijos pagrindinės aminorūgšties radikalą, pvz. argininą arba liziną, vienok guanidino grupė arba aminogrupė, esanti šoninėje grandinėje, gali būti pakeista A, kas aprašyta punkte aj arba a2), arba reiškia radikalą -NH-(CH2)n- kur n=28;
K- reiškia radikalą -NH-(CH2) X-CO, kur X=2-4, arba reiškia tiesioginę jungtį. Labiau pageidaujami yra junginiai, kurie atitinka formulę I, kurioje:
B reiškia argininą, ornitiną arba liziną, kai guanidino grupė arba aminogrupė, esanti šoninėje grandinėje yra nepakeista arba pakeista (C^-Cg) -alkanoilu, (C7-C10) ariloilu, (C3-C8)-heteroariloilu, (C1-C8)-alkisulfonilu arba (C6-C12)-arilsulfonilu, kai arilo, heteroarilo, ariloilo, arilsulfonilo ir heteroariloilo radikalai, kaip aprašyta punkte a2) gali būti pakeisti 1, 2, 3 arba 4 vienodais ar skirtingais radikalais;
E reiškia fenilalaniną, 2-chlorfenilalaniną, 3-chlorfenilalaniną, 4-chlorfenilalaniną, 2-fluorfenilalaniną,
3-fluorfenilalaniną, 4-fluorfenilalaniną, tiroziną, 0metiltiroziną arba β-(3-tinil)alaniną;
F reiškia paprastą jungtį; ir
M reiškia paprastą jungtį.
Labiausiai tinka peptidai pagal I formulę, kurioje:
A reiškia vandenilį, (D) - arba (L)-H-argininą, (D) arba (L)-H-liziną, arba (D)- arba (L)-H-ornitiną;
B reiškia argininas, ornitinas arba lizinas, kai guanidino grupė arba aminogrupė, esanti šoninėje grandinėje gali būti pakeista vandeniliu, (C^-Cg)LT 3375 B alkanoilu, (C7-C13) -ariloilu, (C8-C9) -heteroaloilu, (CxC8)-alkilsulfonilu arba (C6-C12) -arilsulfonilu, kur arilo, heteroarilo, ariloilo, arilsulfonilo ir heteroariloilo radikalai, reikalui esant gali būti pakeisti 1, 2, 3 arba 4 vienodais ar skirtingais radikalais, pasirinktais iš metoksilo arba halogeno.
C reiškia Pro-Pro-Gly, Hyp-Pro-Gly arba Pro-Hyp-Gly;
E reiškia Phe arba Thi;
F reiškia Ser, Hser, Leu, Lys, Vai, Nle, Ile arba Thr;
K reiškia paprastą jungtį; M reiškia paprastą jungtį;
G reiškia IV formulės heterociklinės žiedinės sistemos radikalą, kur geriau tinka heterociklų radikalai, kuriems priklauso pirolodinas (A); piperidinas (B); tetrahidroizochinolinas (C); eis- ir trans-deka20 hidroizochinolinas (D) ; cis-endo oktahidroindolas (E) ; cis-eksi-oktahidroindolas (E); trans-oktahidroindolas (E); cis-endo, cis-eski-, trans-oktahidrociklopentano(b)pirolas (F) arba hidroksiprolinas (V).
F' reiškia argininą, ir
I reiškia OH.
Labiausiai tinkamai I formulės peptidai yra:
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser(D)-Tic-Oic-Arg-OH
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-PPhe-Ser(D)-Tic-Oic-Arg-OH
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser(D)-Tic-Oic-Arg-OH
H- (D) -Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser (D) -Tic-Oic-Arg-OH
Išradime kalbama apie I formulės peptidų gavybos būdą, kuris apibūdinamas tuo, kad
a) fragmentas su C-galine laisva karboksiline grupe arba jo aktyvuotas darinys sujungiamas su atitinkamu laisvu N-galiniu aminogrupės fragmentu, arba
b) laipsniškai sukuriama peptido struktūra, gautame atitinkamai pagal (a) arba (b) junginyje, reikalui esant, atskeliama, viena ar kelios apsauginės grupės, kurios buvo prijungtos kitų funkcijų apsaugai, ir tokiu būdu gauti I formulės junginiai, reikalui esant, paverčiami i, fiziologiškai įsisavinamas druskas.
uretaninė apsauginė butiloksikarbonilinė pvz. tretinė grupė arba
Šiame išradime pateikti peptidai buvo gauti, naudojant žinomus peptidų cheminius būdus, pvz. pagal Houbenweyl, Methoden der organischen Chemie, Band 15/3, B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 86, 2149 (1963) arba
R. C. Shepard, Int. J. Peptide protein Res. 21, 118 (1983) . Kaip α-amino apsauganti grupė yra naudojama grupė, kaip, (Boc) apsauginė fluoretilmetoksikarbonilinė (Fmac). Reikalui esant, pvz. norint išvengti šalutinių reakcijų ar siekiant susintetinti specialius peptidus, funkcinės grupės, esančios aminorūgščių šoninėse grandinėse gali būti apsaugotos atitinkamomis apsauginėmis grupėmis (T.W.Greene, Protective Groups in organic Synthesis), ir pirmiausia tam naudojama Arg(Tos), Arg(Mts), Arg(mir), Arg(PMC), Asp(OBzl), Asp(OBut), Cys(4-MeBlz), Glu(OBzl), Glu(OBut), His(Tos), His(fmoc),
Lys(Cl-z), Lys(Boc), Met(o),
Thi(Bzl),
Cys(SBut) His(Dnp), Ser (Būt),
His(Trt), Ser (Bzl),
Thr(But), Trp(Mts),
Trp(CHO), Tyr(Bzl) arba Tyr(But).
Kietos fazės sintezė prasideda peptido C-gale, susirišant apsaugotą aminorūgštį su atitinkama derva. Tokios pradinės medžiagos gali būti gautos surišant apsaugomą aminorūgštį su modifikuota chlormetilo, hidroksimetilo, benzhidrilamino (BHA) arba metilbenzhidlamino (MBHA) grupės pagalba polistiroline arba poliakrilamidine derva esterine arba amidine jungtimi. Naudojamos kaip pagrindas dervos gali būti įsigytos komerciniais kanalais.
BHA- ir MBHA- dervos paprastai naudojamos tada, kai susintetintas peptidas C-gale turi turėti laisvą amido grupę. Jeigu peptidas C-gale turi turėti antrinę amido grupę, naudojamos chlormetilinė arba hidroksimetilinė derva ir atskėlimas vykdomas atitinkamų aminų pagalba. Jeigu, pavyzdžiui, norima gauti etilamidą, peptidas gali būti atskirtas nuo dervos etilamino pagalba, ir šoninės grandinės apsauginė grupė pašalinama vėliau atitinkamų reagentų pagalba. Jeigu peptido aminorūgšties tretinio butilo apsauginės grupės turi apsaugoti Šoninę grandinę, tai sintezė vykdoma Fmocapsauginės grupės pagalba, siekiant laikinai užblokuoti aminorūgšties α-aminogrupę, naudojant aprašytą pavz. R.C. Sherpard. J. Chem. Soc., Chem. Comm. 1983, 587 metodiką, kai arginino guanidino grupė apsaugoma piridin-perchlorato pagalba, o kitos funkcinės grupės aminorūgščių šoninėje grandinėje apsaugomos apsauginių benzilo grupių pagalba, kurios atskeliamos katalitiškai hidrinant (A. Felix et ai. J. Org. Chem. 13, 4194 (1978)) arba natriu skystame amoniake (W. Robetrts. J. Am. Chem. Soc. 76, 6303 (1954).
Atskėlus sujungtos su derva amonorūgšties apsauginę aminogrupę, atitinkamo reagento, pvz. trifluoracto rūgšties metileno chloride Šesant Boc apsauginei grupei) arba 20 % piperidino dimetilformamide tirpalu (esant Fmoc apsauginei grupei), aminorūgštys nuosekliai sujungiamos norima seka. Tarpiniame etape susidariusios peptidinės dervos prieš susirišimą su sekančiu aminorūgšties dariniu deblokuojamos aukščiau aprašytų reagentų pagalba.
aminorūgšties racemizacij ą
Kaip reagentai gali būti naudojami visi aktyvuojantys reagentai, naudojami peptidų sintezėje, pvz. HoubenWeil Organinės chemijos metodai, t.15/2, tokie kaip karbodiimidai, kaip N, N'-dicikloheksilkarbodimidas arba N-etil-N’-(3-dimetilaminopropil)karbodiimidas. Sujungimas su derva gali būti vykdomas aktyvuojančio reagento pagalba tiesiogiai prijungiant darini, bei, reikalui esant, su slopinančiu priedu, kaip 1-hidroksibenzotriazolu (HOBt) (W. Konig, R. Geiger, Chem. Ber. 103, 708 (1970) arba
3-hidroksi-4-okso 3,4-dihidrobenzotriazinu (HOObt) (W. Konig, R. Geiger, Chem. Ber. 103, 2054 (1970)) vienok pradinis aktyvavimas aminorūgšties kaip simetrinio anhidrido arba HOBt- arba HOObt-esterio gali būti vykdomas atskirai ir toks aktyvuotas tirpalas gali būti pridedamas prie peptinės dervos.
Aminorūgšties sujungimas arba aktyvavimas vienu iš aukščiau paminėtų aktyvuoj ančių reagentų gali būti vykdomas dimetilformamide, N’-metilpirolidone, metileno chloride arba šių tirpiklių mišinyje. Aktyvus aminorūgšties darinys paprastai naudojamas 1,5-4 didesniame, negu reikalinga, kiekyje. Jeigu Įvyksta nepilna sujungimo reakcija, ji yra kartojama, nevykdant peptidinės dervos aminogrupės deblokavimo.
Sėkminga reakcijos eiga gali būti kontroliuojama ninhidrino reakcijos pagalba, kaip aprašyta E. Kaiser et ai. Anai. Biochem. 34, 595 (1970). Sintezė taip pat gali būti automatizuota, pvz. panaudojant firmos Applied Biosystems peptidų sintezės programas, tiek sudaryti naujas. Pastarosios reikalingos naudojant aminorūgštis, apsaugotas Fmoc- grupėmis.
Po to, kai aukščiau aprašytu būdu susintetinamas peptidas, jis gali būti atskeltas nuo dervos skysto fluoro vandenilio (peptidams, gautiems pagal Boc metodą) arba trifluoracto rūgšties (peptidams, gautiems pagal Fmoc metodą) pagalba. Šie reagentai atskelia ne tik peptidą nuo dervos, bet ir kitas apsaugines šonines grandinės grupes. Tokiu būdu, naudojant BHA- ir MBHAdervas peptidas gaunamas rūgšties formoje. Naudojant BHA- ir MBHA- dervas, atskeliant fluoro vandeniliu ar trifluoracto rūgštimi, peptidas gaunamas rūgšties amido pavidale. Kiti peptido amido gavimo būdai aprašyti patentinėse VFR paraiškose nr. P37 11 866.8 ir P37 43 620.1. Čia peptido amidų atskyrimas nuo dervos vykdomas naudojant paprastai peptidų sintezėje naudojamas vidutinio stiprumo rūgštis (pvz. trifluoracto rūgštį), o katijonams neutralizuoti naudojami tokie junginiai, kaip pvz., fenolas, krezolas, triokrezolas, anizolas, etanditiolas, dimetilsulfidas, etilmetilsulfidas ir kt. naudojami tokiais atvejais, atskirai arba mišinyje. Trifluoracto rūgštis gali būti naudojama ir praskiesta atitinkamais tirpikliais, kai pvz. metilo chloridu.
Jeigu turi būti išsaugotos peptidinių šoninių grandininių tretinio butilo arba benzilo apsauginės grupės, susintetinto peptido atskyrimas vykdomas
1-procentinės praskiestos metilo chloride trifluoracto rūgšties pagalba (R. C. Shepard. J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1983, 587) . Jeigu turi būti išsaugotos tretinio butilo arba benzilo apsauginės grupės, naudojami atitinkami sintezės atskyrimo būdai.
Sintetinant peptidus C-galinės amidinės grupės, ω-amino- arba ω-guanidinalkilinės grupės pagalba taip pat naudojama Šepardo aprašyta derva.
Po sintezės apsaugotos šoninėje grandinėje peptidas atskiriamas nuo dervos ir toliau atitinkamo amino, ω-aminoalkilamino arba ω-guanidinalkilamino pagalba yra perdaromas, ir reikalui esant kitos grupės gali būti laikinai apsaugotos žinomais metodais.
Kitas peptidų gavimo ω-aminoalkilinės grupės pagalba būdas aprašytas VFR patentinėje paraiškoje Nr. 36 35 670.0.
Išradime pateikiami peptidai buvo sintetinami daugiausiai kietoje fazėje reakcijų pagalba, naudojant dvi apsauginių grupių taktikas.
Sintezė buvo vykdoma firmos Applied Biosystems peptidų sintezės automatiniu modeliu 430A, panaudojant Boc- ir Fmoc- apsauginių grupių metodą laikinam aaminogrupės blokavimui.
Naudojant Boc-apsauginę grupę, panaudotos gamintojo sudarytos sintezės programos.
Peptidų su laisva karboksiline grupe C-gale sintezė buvo vykdoma apdorotoje su atitinkama Boc-aminorūgštimi
4- (hidroksimetil) fenilacetamidometilpolistirolo dervoje (R. B. Merrifield. J. Org. Chem. 43, 2845 (1978)), pateiktoje Applied Biosystems firmos. Peptidamidams gauti buvo panaudota tos pačios firmos MBHA-derva.
Kai aktyvuoj antys reagentai naudojami N, N'-dicikloheksilkarbodiimidas arba N, N'-diizopropilkarbodiimidas. Aktyvavimas buvo vykdomas simetriniame anhidride, HOBt-eteryje arba NMP. Sujungimui buvo naudojama
2-4 aktyvuoto aminorūgšties darinio ekvivalentai. Jeigu susijungimo reakcija Įvykdavo nepilnai, ji buvo kartojama.
Naudojant Fmoc- apsauginę grupę laikinam α-amino grupės apsaugojimui sintezės firmos Applied Biosystems modeliu 430A buvo sudarytos naujos sintezės programos. Sintezė vyko ant firmos Bachem p-benziloksibenzilalkoholio dervos (S. Wang. J. Am. Chem. Soc. 95, 1328 (1973)), kuri buvo esterinama pagal žinomą metodiką (E. Atherton et ai. J. C. S. Chem. Comm. 1981, 336) atitinkamos aminorūgšties pagalba. Aminorūgšties darinių HOBt- ir HOObt- esterių pavidale aktyvavimas buvo vykdomas gamintojo pateiktose kapsulėse su aminorūgštimi pridedant diizopropilkarbodiimido tirpalą dimetilformamide į anksčiau gautą HOBt arba HOObt ir aminorūgšties darinio mišinį. Lygiai taip pat substancijoje gali būti naudojami gauti Fmocaminorūgšties-OObt-esteriai, paraiškoje Nr. 87107634.5.
atskėlimas buvo vykdomas kaip aprašyta EP Fmoc- apsauginės grupės 20 % piperidino dimetilforamide tirpalo pagalba reakcijos inde. Aminorūgšties darinio naudotas perteklius sudarė 1,52,5 ekvivalento. Jeigu susijungimas buvo nepilnas, jis, kaip ir Boc- metode, buvo kartojamas.
Išradime pateikti peptidai kiekvienas atskirai ar kartu pasižymi bradikinin-antagonistiniu poveikiu, kurį galima patikrinti įvairiais modeliais (Handbook of Exp. Pharmacol., Vol 25, Springer Verlag, 1970, S. 53-55), kaip pvz. izoliuotoje žiurkės gimdoje, jūros kiaulytės žarnoje arba jūros kiaulytės izoliuotoje plaučių arterijoje.
Išbandant išradime pateiktus peptidus jūros kiaulytės izoliuotoje plaučių arterijoje (Dunkin. Hartley) 400450 g svorio jūros kiaulytės numarinamos smūgiu į pakaušį.
Atidaroma krūtinės ląsta ir atsargiai išimama plaučių arterija. Supantys audiniai pašalinami ir arterija 45 0 kampu spirališkai supjaustoma.
Gautą 2,5 ilgio ir 3-4 cm pločio arterijos juostą fiksuoja 10 ml organinėje vonioje, užpildytoje tirpalu.
Tirpalo sudėtis mmol/1
NaCl 154 KC1 5,6 CaCl2 1,9 NaHCO3 2,4 gliukozė 5,0
Per tirpalą praleidžiama 95 % O2 ir 5 % CO2 mišinį ir pakaitina jį iki 37 °C. Vandenilio rodiklis yra 7,4, pradinė arterijos juostos apkrova - 1,0 g.
Izotoniniai susitraukimo pasikeitimai yra registruojami Hugo Zakso aukštadažnio modemo pagalba ir užrašomi kompensografu (BEC, Coerc Metrawatt SE460).
Po valandos nusistovėjus pusiausvyrai, pradedamas bandymas. Po to, kai juostos pasiekė didžiausią jautrumo laipsnį 2x10 7 mol/1 bradikinino dozei (bradikininas iššaukia arterijų juostų susitraukimą), 10 minučių veikia 5χ10'θ -5xl05 mol/1 peptidų dozė ir po naujos bradikinino dozės nustatomas jo veikimo efektyvumo sumažėjimas, lyginant su kontroliniu mėginiu.
Dalinio antagonistinio efekto nustatymui peptidai _5 _3 naudojami dozėse 1x10 -1x10 mol/1.
Apskaičiuotos pagal dozių poveikio grafikus IC50 reikšmės išradime pateiktiems peptidams parodytos 1 lentelėje.
Junginys IC50
H-(D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly'-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH 4,6xl0~6 H-(D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Thia-Arg-OH 2,lxl06 H-(D) -Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH 1,2xl0~5 H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Glo-(D)-Tic-Phe-Arg-OH 2,4xl05 H- (D) -Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-Arg (Mts) -OH 2, 5x10’5 H-(D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH 2,5xl0’7 H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH 1,9xl0’7 H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH 5,6xl0'8 H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gl y-lMa-Ser-p-Ala- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH 1,7x10 ~6
H-(D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-Gly- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH 3, 9xl0~7 H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Gly-(D)-Oic-Arg-OH 3,2xl07
H- (D) -Arg- (D) -Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH 4, 810-7
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Tic-Arg-OH 1,7x10 7 H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH 1,ΙχΙΟ'θ H-(D) -Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH 4,6xl08 H-(D)-Tyr-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH 6,2xl0’8 H- (D) -Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser- (D) -Tie- (D) -Oic-Arg-OH 2, 6xl09 H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH 5,4x10 9 H-(D)-Arg-Lys-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH 3,2x10 7 H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH 6,8xl0’9 H- (D) -Arg-Arg- (N02) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH 6, 4xl0 8
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH 4,2x10
H-(D)-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH 3,4x10
H-(D)-Arg-(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Dic-Arg-OH 3,0x10
H-(D)-Arg-(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Dic-Arg-OH 1,8x10
Terapinis išradimo peptidų panaudojimas galimas pataloginėse situacijose, kurias iššaukia bradikininas arba jam giminingi peptidai. Tai apima traumas, kaip, pvz. žaizdos, nudegimai, išbėrimai, nuogulos, anginą, artritus, astmą, alergines būsenas, rinitus, šoką, uždegimus, žemą kraujospūdį, skausmą Ir kt.
Todėl išradimas priskiriamas ir I formulės petidų panaudojimui kaip farmacines gydymo priemones, įjungiančias šiuos peptidus.
Farmaciniai preparatai turi efektyvų I formulės biologiškai aktyvios medžiagos kiekį - atskiras medžiagas ar jų mišinį - kartu su neorganiniu ar organiniu farmaciškai priimtinu vaistinių preparatų pagrindu.
Preparatai gali būti įvedami enteraliai, parenteraliai, pvz. įvedami po odą, į raumenis ar į veną po liežuviu, per nosį, per tiesiąją žarną, makštį, inhaliacijos būdu. Biologiškai aktyvaus preparato dozavimas priklauso nuo šiltakraujų gyvūnų rūšies, kūno svorio, amžiaus ir įvedimo būdo.
Farmakologiniai preparatai, aprašyti išradime, paruošiami pagal žinomas metodikas kaip tirpalai, mišiniai, granulės arba dražė.
įvedant aktyvius junginius per burną arba gleivinius dangalus, junginiai yra sumaišomi su tradicinėmis tam skirtomis medžiagomis, kaip medžiagomis-nešikliais, stabilizatoriais arba inertiniais tirpikliais ir žinomų būdų pagalba realizuojami standartinėmis formomis kaip tabletės, kapsulės, dražė, vandeniniai, spiritiniai arba riebaliniai tirpalai, arba suspencijos nešikliai gali būti naudojami gumiarabikas, magnezija, magnio karbonatas, kalio fosfatas, sacharozė, gliukozė arba krakmolas, pvz. kukurūzų krakmolas. Produktas gali būti tiek sausas tiek šlapias granuliatas. Kaip riebaliniai nešikliai arba tirpikliai gali būti naudojami augaliniai aliejai arba gyvuliniai riebalai, pvz. saulėgrąžų aliejus ir žuvies taukai.
Vietiniam naudojimui preparatas gali būti realizuotas kaip vandeninis arba riebalinis tirpalas, kremas, emulsija, žele, tepalas, ir, jeigu galima, vandens oro mišinio pavidalu, kada reikalui esant surišimas gali būti pagerintas pridedant polimerinių medžiagų.
Įvedimui per nosį junginiai sumaišomi su tam tikslui naudojamomis medžiagomis, kaip stabilizatoriais ir inertiniais tirpikliais, ir standartinių metodų pagalba paverčiami į atitinkamą pavidalą, kaip vandeninės, spiritinės, riebalinės suspensijos arba vandeniniai, spiritiniai, riebaliniai tirpalai. Į vandeninius preparatus, įvedamus per nosį, gali būti pridėta etillendiamin-N, N, N', N'-tetracto rūgšties, citrinos rūgšties ar jų druskų. Įvedimui per nosį gali būti naudojami dozatoriai-purkštuvai arba galimas realizavimas nosies laįų, nosies kremų pavidalu.
Inhaliacijai gali būti naudojami purkštuvai arba suspaustų inertinių dujų balionėliai. Įvedant biologiškai aktyvius preparatus ar jų fiziologiškai įsisavinamas druskas į veną, per odą, po oda ar į odą jie gali būti maišomi su pagalbinėmis medžiagomis.
Dėl to, kad kai kurių aprašytų vaistinių preparatų skilimo pusperiodis organizame yra trumpas, yra tikslinga naudoti lėtinančias skilimo medžiagas.
Vaistinės preparatų formos gali būti pvz. riebalinės kristalinės suspensijos, mikrokapsulės, lazdelės arba impantantai, kurie gali būti padaryti iš jų biologiškai skaidomų polimerų, kaip polipieno ir poliglikolino rūgšties kopolimerų arba žmogaus albumino.
Tinkama lokalinio ir inhaliacinio preparatų įvedimo tirpalo koncentracija yra 0,01 - 5 mg/ml diapozone, sistemiškai naudojant preparatus tinkamos koncentracijos yra 0,01 - 10 mg/kg.
Sutrumpinimų sąrašas
Sutrumpinimuose naudojami aminorūgščių pažymėjimai atitinka chemijoje naudojamų trijų simbolių kodavimą, aprašytą Europ. J. Biochem. 138, 9, (1984). Kiti naudojami sutrumpinimai pateikiami žemiau.
Acm acetamidometilas e-Ahx ε-aminoheksanoilas
Aoc eis, endo-3-azabiciklo(3.3.0)oktan-3-S-karbonilas
Hoc tretinis butiloksikarbonilas
Būt tretinis butilas
Bzl benzilas
Cl-z 4-chlor-benziloksikarbonilas
DMF dimetilforamidas
Dnp 2, 4-dinitrofenilas
Fmoc
Me
4-Mebzl
Mtr
Mts
NMP
Oic
Opr
Pmc
T FA
Tcs
Thia
Tie
Trt
9-fluorenilmetiloksikarbonilas metilas
4-metilbenzilas
4-metoksi-2,3,6-trimetilfenilsulfonilas mezitilen-2-sulfonilas
N-metilpirolidinas cis-endo-oktahidroindol-2-karbonilas izoksazolidin-3-ilkarbonilas
2,2,5,7,8-pentametilchroman-6-sulfonilas trifluoracto rūgštis
4-metilfenilsulfonilas
2-tienilalanilas
1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-ilkarbonilas tritilas
Žemiau pateikti pavyzdžiai paaiškina galimus peptidų sintezės kietoje fazėje metodus pagal išradimą, nesusiaurinant šio išradimo rėmų.
Buvo naudojami sekantys aminorūgščių dariniai:
Fmoc-Arg(Mtr)-OH, Boc(D)-Arg-OH, Fmoc-Arg(Pmc)-OH, Fmoc-Hyp-OH, Fmoc-Pro-OObt, Fmoc-Gly-OObt, Fmoc-Phe10 OObt, Fmoc-Ser(tBu)-OObt, Fmoc-(D)-Tic-OH, Fmoc-Gln-OH, Fmoc-Aoc-OH, Fmoc-Thia-OH, Fmoc-Opr-OH, Fmoc-(D)-AsnOH, Fmoc-p-Ala-Oh, Fmoc-Oic-OH.
Pavyzdys 1
Junginys H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-PheArg-OH buvo susintentintas firmos Applied Biosystems modelio 430A pagalba, naudojant Fmoc- metodą esterinio Fmoc-Arg(Mtr)-OH pagalba p-benziloksibenzilalkoholio dervoje iš firmos Novabiochem (įkrova 0,5 mmol/g dervos) . Buvo naudota 1 g dervos ir sintezė vyko pagal modifikuotą Fmoc- metodui sintezės programą.
Į sintezatoriaus patroną patalpino 1 mmol aminorūgšties darinio su laisva karboksiline grupe. Kartu buvo patalpinta 0,95 mmol HOCbt. Pradinis šių aminorūgščių aktyvavimas buvo atliekamas patrone, ištirpinant 4 ml dimetilforamido ir pridedant 2 ml 0,55 molinio diizopropilkarbodiimido tirpalo dimetilforamide.
Kitų aminorūgščių HOCbt-esteriai buvo ištirpinti 6 ml N-metilpirolidino ir poto, kaip altyvuotos aminorūgštys, buvo sujungti reikiamoje vietoje su deblokuota 20 % piperidino tirpalu dimetilformamidine derva. Pasibaigus sintezei, peptidas, pašalinus šoninių grandinių apsaugines grupes trifluoracto rūgštimi, naudojant tionizolą ir etanditiolą, atskeltas nuo dervos. Gautas nupylus trifluoracto rūgštį produktas daug kartų apdorotas acto rūgšties esterio pagalba ir centifuguojamas. Likęs produktas buvo chromatografuojamas Sefadex ZH20 kolonėlėje, eliuojant 10 %
acto rūgštimi. Turinčios sujungtos ir išdžiovintos švarų peptidą frakcijos
MS(FAB): 1984 (M+H)
Sekančių 2-24 pavyzdžių peptidai buvo pagaminti
analogiškai kaip pavyzdyje 1.
Pavyzdys 2
H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Pro- (D) -Ser- (D) -Tic-Phe-Arg-OH
MS (FAB): 1294 (M+H).
Pavyzdys 3
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.
MS (FAB) : 1306 (M+H) .
Pavyzdys 4
H- (D) -Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-Arg-OH.
MS (FAB): 1294(M+H).
Pavyzdys 5
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Gly-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.
MS (FAB) : 1335 (M+H) .
Pavyzdys 6
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.
MS (FAB): 1244 (M+H).
Pavyzdys 7
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Trp-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.
MS (FAB): 1393 (M+H).
Pavyzdys 8
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.
MS (FAB): 1250 (M+H).
Pavyzdys 9
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-(D)-Arg-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.
MS (FAB): 1333 (M+H).
Pavyzdys 10
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Opr-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.
MS (FAB): 1301 (M+H).
Pavyzdys 11
H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia- (D) -Gln- (D) -Tic-Thia-Arg-OH.
MS (FAB) : 1347 (M+H) .
Pavyzdys 12
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-ArgOH.
MS (FAB): 1307 (M+H).
Pavyzdys 13
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH.
MS (FAB): 1241 (M+H).
Pavyzdys 14
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-Arg-OH.
MS (FAB): 1397 (M+H).
Pavyzdys 15
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-p-Ala-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.
MS (FAB) : 1321 (M+H) .
Pavyzdys 16
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-Oh.
MS (FAB): 1230 (M+H).
Pavyzdys 17
H-(D)-Aoc-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.
MS (FAB): 1330 (M+H).
Pavyzdys 18
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Aoc-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.
MS (FAB): 1330 (M+H).
Pavyzdys 19
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1290 (M+H).
Pavyzdys 20
H-(D)-Arg-Arg-Opr-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.
MS (FAB): 1236 (M+H).
Pavyzdys 21
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Opr-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.
MS (FAB): 1236 (M+H).
Pavyzdys 22
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Opr-Arg-OH.
MS (FAB): 125 (M+H).
Pavyzdys 23
H- (D) -Arg- (D) -Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1290 (M+H).
Pavyzdys 24
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1290 (M+H).
Pavyzdžiai 25-27
H- (D) -Arg-Arg- (Mtr) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-Arg-OH ir
H- (D) -Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-Arg (Mtr) -OH ir
H- (D) -Arg-Arg (Mtr) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-Arg (Mtr) -OH buvo gaminami analogiškai kaip ir 1, bet apsauginių grupių atskėlimas nuo peptido šoninių grandinių ir peptido atskėlimas nuo dervos trifluoracto rūgšties pagalba buvo apribotas 30 minučių, esant kambario temperatūrai. Esant tokioms sąlygoms, vyksta Mtrapsauginės grupės arginine atskėlimas, i kuri galima nekreipti dėmesio. Dalinai deblokuoti peptidai išskiriami chromatografijos pagalba išvalomi.
25: H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.
MS (FAB): 1506 (M+H).
26: H- (D) -Arg-Arg (Mtr) -Pro-Hyp-Gly-Fhe-Sre- (D) -Tic-Ehe-Arg (Mtr) -OH.
MS (FAB): 1718 (M+H).
27: H- (D) -Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-Arg (Mtr) -OH.
MS (FAB): 1506 (M+H).
Sekančių pavyzdžių 28 - 31 peptidai buvo pagaminti ir išvalyti, kaip pavyzdžiuose 25 - 27.
Pavyzdys 28
H- (D) -Arg-Arg (Mtr) -Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Pro-Arg-OH.
MS (FAB): 1462 (M+H).
Pavyzdys 29
H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Pro-Arg (Mtr) -OH.
MS (FAB): 1462 (M+H).
Pavyzdys 30
H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH.
MS (FAB): 1453 (M+H).
Pavyzdys 31
H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1502 (M+H).
Pavyzdys 32
H-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-NH-(CH2) 4-NH2 .
Peptido sintezė buvo vykdoma 1 g aminometilinės dervos, kuri buvo modifikuota pagal EP paraiškoje Nr. 264802 aprašytą metodiką, grupe
C /
Fmoc-NH-(CH2) 4-NH-CO-O-CH2-C \\
C
C \
C-O-CH2-CH2-CO // c
ir naudojant Fmoc-aminorūgšties-OOBt esterius automatinio peptidų sintezatoriaus (firmos Applied Biosystems modelis 430A) pagalba bei panaudojant nuosavas modifikuotas sintezės programas. Tam tikslui į sintezatoriaus patroną patalpinta 1 mmol atitinkamo aminorūgšties darinio kartu su 0,95 mmol Fmoc-Arg(Mtr)OH, Fmoc-Hyp-OH ir Fmoc-(D)-Tic-OH. Pradinis reikaLT 3375 B lingos vietos aktyvavimas buvo patrone ištirpinant aminorūgšti, 4 ml dimetilforamido ir pridedant 2 ml 0,55-moliarinio diizopropilkarbodiimido tirpo dimetilformamide. Kitų aminorūgščių HOCbt-esteriai ištirpinti 6 ml N-metilpirolidino ir po to, kaip ir aktyvuotos reikiamoje vietoje aminorūgšties molekulės, buvo dukart sujungti. Po sintezės nuo dervos atskirtas peptid-4amino-butilamidas, kartu pašalinant trifluoracto rūgšties pagalba šonines apsaugines grupes. Katijonams surišti naudojamas tioanizolas ir m-krezolas. Gautas nupylus trifluoracto rūgšti, produktas apdorotas acto rūgšties esterio pagalba ir centrifuguojamas. Likęs produktas buvo chromatografuoj amas Sefadex S25 kolonėlėje, eliuojant viennormaline acto rūgštim. Turinčios švarų peptidą frakcijos buvo sujungtos ir išdžiovintos.
Analogiška 32 pavyzdžio procedūra buvo panaudota ir pavyzdžiuose 33-35.
Pavyzdys 33
H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-NH- (CH2) 4-NH2.
Pavyzdys 34
HOOC- (CH2) 2-O0-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-NH- (CH2) 4-NH2.
Pavyzdys 35
H3DC- (CEį) 2—CD— (D) -Arg-Hyp-Pro-Gly-Ehe-Ser- (D) -Tic-Fhe^H- (Clį) 4-Nfį.
Pavyzdžiai 36-161 buvo sintetinami pagal pavyzdyje 1 aprašytą metodiką.
Pavyzdys 36
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.
MS (FAB): 1307 (M+H).
Pavyzdys 37
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.
MS (FAB) : 1307 (M+H) .
Pavyzdys 38
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH.
MS (FAB): 1241 (M+H).
Pavyzdys 39
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-p-Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1361 (M+H).
Pavyzdys 40
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-p-Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1361 (M+H).
Pavyzdys 41
H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro)Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Pro-Phe-Arg-OH.
MS (FAB): 1397 (M+H).
Pavyzdys 42
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-Arg-OH.
MS (FAB) : 1397 (M+H) .
Pavyzdys 43
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1260 (M+H).
Pavyzdys 44
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1260 (M+H).
Pavyzdys 4 5
H-(D)-Arg-(D)-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1390 (M+H).
Pavyzdys 46
H-(D)-Arg-(D)-Arg-Phe-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1290 (M+H).
Pavyzdys 47
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Tic-Arg-OH.
MS (FAB): 1312 (M+H).
Pavyzdys 48
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Tic-Arg-OH.
MS (FAB): 1312 (M+H).
Pavyzdys 49
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1274 (M+H).
Pavyzdys 50
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1203 (M+H).
Pavyzdys 51
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Aoc-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1274 (M+H).
Pavyzdys 52
H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-p-Ala- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1274 (M+H).
Pavyzdys 53
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-p-Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1274 (M+H).
Pavyzdys 54
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Asp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1252 (M+H).
Pavyzdys 55
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Asp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1252 (M+H).
Pavyzdys 56
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Trp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS FAB): 1323.7 (M+H).
Pavyzdys 57
H-(D)-Tyr-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1297.7 (M+H).
Pavyzdys 58
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tia-(D)-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1304.6 (M+H).
Pavyzdys 59
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1304.6 (M+H).
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
Pavyzdys 60
MS (FAB): 1289 (M+H).
Pavyzdys 61
H-(D)-Arg-Lys-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-Oh.
MS (FAB): 1262 (M+H).
Pavyzdys 62
H-(D)-Arg-Lys-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1276 (M+H).
Pavyzdys 63
H-(D)-Arg-Lys-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1260 (M+H).
Pavyzdys 64
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1298 (M+H).
Pavyzdys 65
H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH>
MS (FAB): 1298 (M+H).
Pavyzdys 66
H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1282 (M+H).
Pavyzdys 67
H- (D) -Arg-Arg- (N02) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1329.7 (M+H).
Pavyzdys 68
H- (D) -Arg-Arg- (NO2) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1343 (M+H).
Pavyzdys 69
H-(FAB): 1327 (M+H).
Pavyzdys 70
H- (D) -Arg-Arg- (NO2) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1333 (M+H).
Pavyzdys 71
H- (D) -Arg-Arg (NO2) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 13449 (M+H).
Pavyzdys 72
Η-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1302 (M+H).
Pavyzdys 73
H-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-Oh.
MS (FAB): 1147 (M+H).
Pavyzdys 74
Η-Lys(-CO-NH-C6H5)-Pro-Hyp-Gly-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1233 (M+H).
Pavyzdys 75
Η-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1296 (M+H).
Pavyzdys 76
Η-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1219 (M+H).
Pavyzdys 77
Η-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1282 (M+H).
Pavyzdys 78
Ac-Arg-(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc—Arg-OH.
MS (FAB): 1324 (M+H).
Pavyzdys 79
H-D-Arg-Arg(Tos)-Phe-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1438 (M+H).
Pavyzdys 60
H-Arg(Tos)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1303 (M+H).
Pavyzdys 81
H-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB) : 1142 (M+H) .
Pavyzdys 82
Η-Lys (-CO-NH-C6H5) -Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1233 (M+H).
Pavyzdys 83
Η-Arg(Tos)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1296 (M+H).
Pavyzdys 84
Η-Lys(nikotinoilas)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1219 (M+H).
Pavyzdys 85
H-Arg(Tos)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1282 (M+H).
Pavyzdys 86
Ac-Arg(Tos)-Hyp-Pr)-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): (M+H).
Pavyzdys 87
H-D-Arg-Arg(Tos)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB) : (M+H) .
Pavyzdys 88
H-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB) : (M+H) .
Pavyzdys 89
H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1126 (M+H).
Pavyzdys 90
Η-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1217 (M+H).
Pavyzdys 91
Η-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1280 (M+H).
Pavyzdys 92
Η-Lys(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1203 (M+H).
Pavyzdys 93
Η-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1266 (M+H).
Pavyzdys 94
Ac-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1308 (M+H).
Pavyzdys 95
Η-Arg-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1422 (M+H).
Pavyzdys 96
H-Arg-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1148 (M+H).
Pavyzdys 97
Η-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Thia) Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1239 (M+H).
Pavyzdys 98
Η-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB) : (M+H) .
Pavyzdys 99
H-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1288 (M+H).
Pavyzdys 100
Ac-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1330 (M+H).
Pavyzdys 101
H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1444 (M+H).
Pavyzdys 102
H-Arg-Hyp-Pro-Thia-Ser-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1148 (M+H).
Pavyzdys 103
Η-Lys (-CO-NH-C6H5) -Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1239 (M+H).
Pavyzdys 104
Η-Lys(nikotinoilas)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1225 (M+H).
Pavyzdys 105
H-Arg(Tos)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1289 (M+H).
Pavyzdys 106
Ac-Arg(Tos)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1330 (M+H).
Pavyzdys 107
H-D-Arg-Arg(Tos)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1440 (M+H).
Pavyzdys 108
Η-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1225 (M+H).
Pavyzdys 109
Η-Lys(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1209 (M+H).
Pavyzdys 110
Η-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tip-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB) : 1272 (M+H) .
Pavyzdys 111
Ac-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg)OH.
MS (FAB): 1314 (M+H).
Pavyzdys 112
H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1428 (M+H).
Pavyzdys 113
H-D-Arg-Lys(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1365 (M+H).
Pavyzdys 114
H-D-Arg-Lys (-OD-NH-CgHs) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1379 (M+H).
Pavyzdys 115
H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1442 (M+H).
Pavyzdys 116
H-Lys-Lys-(nokotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1337 (M+H).
Pavyzdys 117
H-Lys-Lys (-CO-NH-CgHį) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1351 (M+H).
Pavyzdys 118
H-Lys-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1414 (M+H).
Pavyzdys 119
H-D-Arg-Lys (nikotinoilas) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1381 (M+H).
Pavyzdys 120
H-D-Arg-Lys (-OO-NH-CgHj) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1395 (M+H).
Pavyzdys 121
H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB):1458 (M+H).
Pavyzdys 122
H-Lys-Lys (-GO-NH-CgHs) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB) : 1367 (M+H) .
Pavyzdys 123
H-Lys-Lys (nikotinoilas) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1353 (M+H).
Pavyzdys 124
H-Lys-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1420 (M+H).
Pavyzdys 125
H-D-Arg-Lys(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1359 (M+H).
Pavyzdys 126
H-D-Arg-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB) : 1373 (M+H) .
Pavyzdys 127
H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1436 (M+H).
Pavyzdys 128
H-Lys-Lys(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1331 (M+H).
Pavyzdys 129
H-Lys-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1345 (M+H).
Pavyzdys 130
H-Lys-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1408 (M+H).
Pavyzdys 131
H-D-Arg-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB0: 1375 (M+H).
Pavyzdys 132
H-D-Arg-Lys (-OO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1389 (M+H).
Pavyzdys 133
H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1452 (M+H).
Pavyzdys 134
H-Lys-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB) : 1347 (M+H) .
Pavyzdys 135
H-Lys-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-S-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1361 (M+H).
Pavyzdys 136
H-Lys-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1424 (M+H).
Pavyzdys 137
H-D-Arg-Om (nikotinoilas) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg)OH.
MS (FAB): 1351 (M+H).
Pavyzdys 138
H-D-Arg-Om (Tos) -CD-NH-CgHs) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1428 (M+H).
Pavyzdys 139
H-Lys-Om (nikotinoilas) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB) : 1328 (M+H) .
Pavyzdys 140
Η-Lys-Orn (-αθ-ΝΗ-ΟθΗ5) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1337 (M+H).
Pavyzdys 141
H-D-Arg-Om (nikotinoilas) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB) : 1367 (M+H) .
Pavyzdys 142
H-D-Arg-Orn-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1381 (M+H).
Pavyzdys 143
H-Lys-Om (nikotinoilas) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1339 (M+H).
Pavyzdys 144
H-Lys-Orn (CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Arg-OH.
MS (FAB): 1353 (M+H).
Pavyzdys 145
H-D-Arg-Om (nikotinoilas) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1345 (M+H).
Pavyzdys 146
H-D-Arg-Orn (OO-NH-CgHį) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1359 (M+H).
Pavyzdys 147
H-Lys-Orn (nikotinoilas) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1317 (M+H).
Pavyzdys 148
H-Lys-Orn (CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1331 (M+H).
Pavyzdys 149
H-D-Arg-Om (nikotinoilas) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1361 (M+H).
Pavyzdys 150
H-D-Arg-Orn (CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1375 (M+H).
Pavyzdys 151
H-Lys-Om (nikotinoilas) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1333 (M+H).
Pavyzdys 152
H-Lys-Orn (CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1347 (M+H).
Pavyzdys 153
H-Lys-Lys-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB) : 1218 (M+H) .
Pavyzdys 154
H-Lys-Lys-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB) : 1234 (M+H) .
Pavyzdys 155
H-Lys-Lys-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1234 (M+H).
Pavyzdys 156
H-Lys-Lys-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1212 (M+H).
Pavyzdys 157
H-Lys-Lys-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
MS (FAB): 1228 (M+H).
Pavyzdys 158
H-Lys-Lys-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1232 (M+H).
Pavyzdys 159
H-Lys-Lys-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1248 (M+H).
Pavyzdys 160
H-Lys-Lys-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1226 (M+H).
Pavyzdys 161
H-Lys-Lys-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.
MS (FAB): 1243 (M+H).
162 - 164 pavyzdžiai gauti pagal analogiją su 31 pavyzdžiu, naudojant aprašytą EP paraiškoje Nr. 322348 dervą, kurios struktūra
Polistirolas
Pavyzdys 162
H-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-NH2.
MS (FAB): 1283 (M+H).
Pavyzdys 163
H-D-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-NH2.
MS (FAB): 1283 (M+H).
Pavyzdys 164
H-D-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-NH2.
MS (FAB): 1267 (M+H).

Claims (8)

  1. IŠRADIMO APIBRĖŽTIS
    1. Peptidai pagal I formulę
    A-B-C-E-F-K-(D)-Tic-G-M-F-I (I) , kurioje
    A reiškia vandenilį, (1-6)C-alkanoilą arba (l-6)C-alkanoilą, pakeistą karboksilo grupe, arba II formulės radikalą
    R1-N-CH-CΙ,Ι,ΙΙ dU,
    R R O kurioje R1 reiškia vandenilį, (1-6)C-alkanoilą arba (16)C-alkanoilą, pakeistą hidroksifenilpropionilu;
    R reiškia vandenilio atomą; ir
    R3 reiškia (1-6)C-alkilą, pakeistą amino guanidino grupe, fenilu, pakeistu hidroksilo grupe;
    B reiškia tiesioginę jungtį arba bazinę aminorūgštį, esančią L- arba D-konfigūracijoje, minėta aminorūgštis priklauso Arg, Lys ir Orn eilei, ir gali būti pakeista šoninėje grandinėje benziloksikarbanilu, nitrogrupė, tozilu, nikotinoilu, CO-NH-C6H5 arba 2,3,5-trimetil-4metoksifenilsulfonilu;
    C reiškia junginį pagal Illa formulę
    G'-G'-Cl (Illa), kurioje G’ nepriklausomai vienas nuo kito yra radikalas, kurio formulė IV
    -N-CH-C- (IV) kurioje R4 ir R5 kartu su kitais atomais sudaro heterociklinę, monociklinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir 4 anglies atomus, sistemą, kuri gali būti pakeista hidroksigrupe arba grupe, turinčia 1 azoto atomą, 3 anglies atomus ir 1 deguonies atomą arba sudarančią heterociklinę biciklinę žiedinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir 7 anglies atomus;
    E reiškia α-arba D-konfigūracijos Phe, Trn arba Thia aromatinės aminorūgšties liekaną;
    F reiškia L-arba D-konfigūracijos Asn, Cys, Gln, Orn, Ser, Trp, Phe, Thia aminorūgšties radikalą arba tiesioginę jungtį;
    K reiškia radikalą -NH-(CH2) X-CO, kur x=l-2, arba tiesioginę jungtį;
    (D)-Tie reiškia radikalą pagal V formulę
    O (V)
    G reiškia tiesioginę jungtį arba radikalą, kurio formulė IV
    -N-CN-CR4R5O
    4 5 kurioje R ir R kartu su kitais atomais sudaro heterociklinę monociklinę sistemą, turinčią 1 azoto tomą ir 4 anglies atomus, arba sistemą, turinčią 1 azoto atomą, 3 anglies atomus ir 1 deguonies atomą arba sudarančią heterociklinę biciklinę žiedinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir 7-9 anglies atomus;
    F* reiškia -NH-(CH2)4-, arba L- ar D-konfigūracijos Arg arba Ser aminorūgšties radikalą, kuris gali būti pakeistas ramnozilu arba 2,3,5-trimetil-4metoksifenilsulfonilu arba reiškia tiesioginę jungtį;
    1. reiškia amino arba hidroksigrupę, ir fiziologiškai priimtinos jų druskos.
  2. 2. I formulės peptidai pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad juose
    A reiškia vandenilį, acetilą, 3-karboksipropionilą, arba L- ar D-konfigūracijos aminorūgštį, kuri gali būti Arg, Lys, Tyr ir gali būti pakeista hidroksifenilpropionilu;
    B reiškia Arg, Arg(Mtr), Arg(NO2), Arg(Tos), Lys, Lys(OO-NH-CgHj), Lys (z), Lys (Nic), Om(Nic) arba Om (-CD-NH-CgH5), kai Arg, Lys ir Orn gali būti L- arba D-konfigūracijoje;
    C reiškia junginį pagal Illa formulę
    G'-G'-Cl (Illa), kurioje G' reiškia L-arba D-konfigūracijos imino rūgštį, kuri gali būti Hyp, Pro, Aoc, Opr ir dihidroPro;
    E reiškia L- arba D-konfigūracijos aromatinę aminorūgštį, kuri gali būti Phe, Thia ir Trp;
    F reiškia L-arba D-konfigūracijos gali būti Asn, Cys, Gln, Opr, Ser, arba reiškia tiesioginę jungtį;
    aminorūgštį, kuri Trp, Phe ir Thia,
    K reiškia radikalą -NH-(CH2) X-CO, kur x=l-2, arba reiškia tiesioginę jungtį;
    G reiškia tiesioginę jungtį arba L- ar D-konfiguracijos imino rūgštį, kuri gali būti Pro, Aoc, Opr, Tie ir Oic;
    F' reiškia -NH-(CH2)4- arba L- arba D-konf igūraci jos amino rūgštį, kuri gali būti Arg, Arg(Mtr) ir Ser, arba reiškia tiesioginę jungtį;
    į reiškia amino arba hidroksigrupę, ir fiziologiškai priimtinos jų druskos.
  3. 3. I formulės peptidai pagal apibrėžties 1 ir 2 punktus, besiskiriantys tuo, kad juose
    A reiškia vandenilį, acetilą, 3-karboksipropionilą, Arg, (D)-Arg, (D)-Tyr, Lys, acetil-(D)-Arg arba 4hidroksifenilpropionil-(D)-Arg;
    B reiškia Arg, D-Arg, Arg(Mtr), Arg(NO2), Arg(Tos), Lys, Lys(z), Lys(Nic), Lys(PAC), Orn(Nic) arba Orn(PAC), arba reiškia tiesioginę jungtį;
    C reiškia Hyp-Pro-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Aoc-Gly, OprPro-Gly, Pro-Opr-Gly, Pro-Pro-Gly, dehidro-Pro-Hyp-Gly arba D-Pro-Hyp-Gly;
    E reiškia Phe, Thia, (D)-Thia arba Trp;
    F reiškia (D)Asn, Cys, Gln, (D)-Gln, Opr, Ser, (D)-Ser, Trp, Phe arba Thia, arba reiškia tiesioginę jungtį;
    K reiškia Gly arba b-Ala arba reiškia tiesioginę jungtį;
    G reiškia Pro, Aoc, (D)-Aoc, Opr, Tie, Oic, (D)-Oic, (D,L)-Oic, (L)-(3aR, 7aS)Oic arba (L)-(3as, 7ar)Oic arba reiškia tiesioginę jungtį;
    į reiškia amino arba hidroksigrupę, ir fiziologiškai priimtinos jų druskos.
  4. 4. I formulės peptidas pagal apibrėžties 1-3 punktus, besiskiriantis tuo, kad jis gali būti:
    H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH
    H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH
    H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH
    H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH
    H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH ir jo fiziologiškai priimtina druska.
  5. 5. I formulės peptidas pagal apibrėžties 1-4 punktus, besiskiriantis tuo, kad jis yra H-(D)-ArgArg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Oic-Arg-OH ir jo fiziologiškai priimtina druska.
  6. 6. Peptidas pagal apibrėžties 1-5 punktus, besiskiriantis tuo, kad jis gali būti
    H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Aoc-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH
    H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Asp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH
    H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Asp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH
    H-(D) -Arg-Ser-(Rha)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH 5 (4-benzoilfenoksiacetil)-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-ThiaSer-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH
    Lys(benzoil-benzoil)-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser10 (D)-Tic-Aoc-Arg-OH.
  7. 7. I formulės peptidas pagal apibrėžties 1-6 punktus, skirtas patologinėms būsenoms, kurias iššaukia bradikininas ir giminingi bradikininui peptidai,
    15 gydyti.
  8. 8. Farmacinė kompozicija, skirta patologinėms būsenoms, kurias iššaukia bradikininas ir giminingi bradikininui peptidai, gydyti, besiskirianti tuo, kad
    20 turi efektyvų I formulės peptidų pagal apibrėžties 1-7 punktus kiekį atskirai arba kartu su neorganiniais ir organiniais farmacijoje naudojamais nešikliais.
LTIP717A 1988-11-24 1993-06-25 Peptides and pharmaceutical composition containing them LT3375B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3839581 1988-11-24

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LTIP717A LTIP717A (en) 1995-01-31
LT3375B true LT3375B (en) 1995-08-25

Family

ID=6367743

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LTIP717A LT3375B (en) 1988-11-24 1993-06-25 Peptides and pharmaceutical composition containing them

Country Status (5)

Country Link
BR (1) BR1100648A (lt)
DD (1) DD284030A5 (lt)
LT (1) LT3375B (lt)
RU (1) RU2083586C1 (lt)
ZA (1) ZA896068B (lt)

Citations (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US49658A (en) 1865-08-29 Improved process for treating ores
DE2346503A1 (de) 1973-09-15 1975-04-10 Hoechst Ag Verfahren zum faerben und bedrucken von cellulosehaltigen textilmaterialien
EP0029488A1 (de) 1979-09-19 1981-06-03 Hoechst Aktiengesellschaft Aminosäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Behandlung von Bluthochdruck
EP0046958A1 (de) 1980-08-30 1982-03-10 Hoechst Aktiengesellschaft Elektrophotographisches Aufzeichnungsmaterial und Verfahren zu seiner Herstellung
EP0049605A1 (en) 1980-10-03 1982-04-14 Warner-Lambert Company Substituted acyl derivatives of 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acids, salts thereof, pharmaceutical compositions containing the derivatives or salts, and the production of the same
EP0050800A1 (en) 1980-10-23 1982-05-05 Schering Corporation Carboxyalkyl dipeptides, processes for their production and pharmaceutical compositions containing them
EP0051080A1 (en) 1980-11-03 1982-05-12 Howard A. Fromson Aluminum lithographic plate with visible image and process
EP0051741A1 (de) 1980-11-06 1982-05-19 BASF Aktiengesellschaft Verfahren zur Herstellung eines kristallinen Aluminiumsilikates (Zeoliths) und dessen Verwendung als Katalysator
EP0052870A1 (de) 1980-11-25 1982-06-02 Hoechst Aktiengesellschaft Aminosäurederivate und Verfahren zu ihrer Herstellung
US4344349A (en) 1981-06-24 1982-08-17 Cordes Charles P Rim shot segment
US4350704A (en) 1980-10-06 1982-09-21 Warner-Lambert Company Substituted acyl derivatives of octahydro-1H-indole-2-carboxylic acids
US4374847A (en) 1980-10-27 1983-02-22 Ciba-Geigy Corporation 1-Carboxyalkanoylindoline-2-carboxylic acids
DE3226768A1 (de) 1981-11-05 1983-05-26 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Derivate der cis, endo-2-azabicyclo-(3.3.0)-octan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung
DE3151690A1 (de) 1981-12-29 1983-07-07 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt "neue derivate bicyclischer aminosaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung"
DE3210496A1 (de) 1982-03-23 1983-10-06 Hoechst Ag Neue derivate bicyclischer aminsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3211676A1 (de) 1982-03-30 1983-10-06 Hoechst Ag Neue derivate von cycloalka (c) pyrrol-carbonsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue cycloalka (c) pyrrol-carbonsaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3211397A1 (de) 1982-03-27 1983-11-10 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Spiro (4.(3+n))-2-aza-3-carbonsaeure-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung
DE3227555A1 (de) 1982-07-23 1984-01-26 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Thermoplastische formmasse
DE3242151A1 (de) 1982-11-13 1984-05-17 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue derivate tricyclischer aminosaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung, sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3246757A1 (de) 1982-12-17 1984-06-20 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue 2-azabicyclo(2.2.1)heptan-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie 2-azabicyclo(2.2.1)heptan-derivate als zwischenprodukte und verfahren zu deren herstellung
WO1986007263A1 (en) 1985-06-13 1986-12-18 Stewart John M Bradykinin antagonist peptides
EP0271865A2 (de) 1986-12-17 1988-06-22 Hoechst Aktiengesellschaft 2,3-Disubstituierte Isoxazolidine, Verfahren zu ihrer Herstellung, diese enthaltende Mittel und ihre Verwendung

Patent Citations (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US49658A (en) 1865-08-29 Improved process for treating ores
DE2346503A1 (de) 1973-09-15 1975-04-10 Hoechst Ag Verfahren zum faerben und bedrucken von cellulosehaltigen textilmaterialien
EP0029488A1 (de) 1979-09-19 1981-06-03 Hoechst Aktiengesellschaft Aminosäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Behandlung von Bluthochdruck
EP0046958A1 (de) 1980-08-30 1982-03-10 Hoechst Aktiengesellschaft Elektrophotographisches Aufzeichnungsmaterial und Verfahren zu seiner Herstellung
EP0049605A1 (en) 1980-10-03 1982-04-14 Warner-Lambert Company Substituted acyl derivatives of 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acids, salts thereof, pharmaceutical compositions containing the derivatives or salts, and the production of the same
US4350704A (en) 1980-10-06 1982-09-21 Warner-Lambert Company Substituted acyl derivatives of octahydro-1H-indole-2-carboxylic acids
EP0050800A1 (en) 1980-10-23 1982-05-05 Schering Corporation Carboxyalkyl dipeptides, processes for their production and pharmaceutical compositions containing them
US4374847A (en) 1980-10-27 1983-02-22 Ciba-Geigy Corporation 1-Carboxyalkanoylindoline-2-carboxylic acids
EP0051080A1 (en) 1980-11-03 1982-05-12 Howard A. Fromson Aluminum lithographic plate with visible image and process
EP0051741A1 (de) 1980-11-06 1982-05-19 BASF Aktiengesellschaft Verfahren zur Herstellung eines kristallinen Aluminiumsilikates (Zeoliths) und dessen Verwendung als Katalysator
EP0052870A1 (de) 1980-11-25 1982-06-02 Hoechst Aktiengesellschaft Aminosäurederivate und Verfahren zu ihrer Herstellung
US4344349A (en) 1981-06-24 1982-08-17 Cordes Charles P Rim shot segment
DE3226768A1 (de) 1981-11-05 1983-05-26 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Derivate der cis, endo-2-azabicyclo-(3.3.0)-octan-3-carbonsaeure, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung
DE3151690A1 (de) 1981-12-29 1983-07-07 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt "neue derivate bicyclischer aminosaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung"
DE3210496A1 (de) 1982-03-23 1983-10-06 Hoechst Ag Neue derivate bicyclischer aminsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3211397A1 (de) 1982-03-27 1983-11-10 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Spiro (4.(3+n))-2-aza-3-carbonsaeure-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung
DE3211676A1 (de) 1982-03-30 1983-10-06 Hoechst Ag Neue derivate von cycloalka (c) pyrrol-carbonsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie neue cycloalka (c) pyrrol-carbonsaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3227555A1 (de) 1982-07-23 1984-01-26 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Thermoplastische formmasse
DE3242151A1 (de) 1982-11-13 1984-05-17 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue derivate tricyclischer aminosaeuren, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung, sowie neue bicyclische aminosaeuren als zwischenstufen und verfahren zu deren herstellung
DE3246757A1 (de) 1982-12-17 1984-06-20 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue 2-azabicyclo(2.2.1)heptan-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende mittel und deren verwendung sowie 2-azabicyclo(2.2.1)heptan-derivate als zwischenprodukte und verfahren zu deren herstellung
WO1986007263A1 (en) 1985-06-13 1986-12-18 Stewart John M Bradykinin antagonist peptides
EP0271865A2 (de) 1986-12-17 1988-06-22 Hoechst Aktiengesellschaft 2,3-Disubstituierte Isoxazolidine, Verfahren zu ihrer Herstellung, diese enthaltende Mittel und ihre Verwendung

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A. FELIX ET AL.: "Rapid removal of protecting groups from peptides by catalytic transfer hydrogenation with 1,4-cyclohexadiene", J. ORG. CHEM., 1978, pages 4194 - 4196, XP002273767, DOI: doi:10.1021/jo00415a045
HOUBEN-WEYL: "Methoden der Organischen Chemie"
S. WANG: "p-Alkoxybenzyl Alcohol Resin and p-Alkoxybenzyloxycarbonylhydrazide Resin for Solid Phase Synthesis of Protected Peptide Fragments", J. AM. CHEM. SOC., 1973, pages 1328 - 1333, XP000615541, DOI: doi:10.1021/ja00785a602

Also Published As

Publication number Publication date
LTIP717A (en) 1995-01-31
DD284030A5 (de) 1990-10-31
RU2083586C1 (ru) 1997-07-10
BR1100648A (pt) 2000-02-08
ZA896068B (en) 1991-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA1340667C (en) Peptides having bradykinin antagonist action
KR0173976B1 (ko) 브라디키닌에 대하여 길항작용을 하는 펩타이드
JP3426639B2 (ja) Ｎ−末端に修飾を有するペプチド
US5648333A (en) Peptides having bradykinin antagonist action
FI109541B (fi) Menetelmä bradykiniiniantagonistien valmistamiseksi
LT3375B (en) Peptides and pharmaceutical composition containing them
LT3872B (en) Novel peptides and pharmaceutical compositions containing them

Legal Events

Date Code Title Description
SPCF Filing an spc

Free format text: PRODUCT NAME: ICATIBANTUM; REGISTRATION NO/DATE: EU/1/08/461/001 20080711

Spc suppl protection certif: PA2008015

Filing date: 20081105

Expiry date: 20130625

ND9D Filing a supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: ICATIBANTUM; REG. NO/DATE: EU/1/08/461/001 20080711

Spc suppl protection certif: PA2008015

Filing date: 20081105

SPCG Grant of an spc

Free format text: PRODUCT NAME: ICATIBANTUM; REGISTRATION NO/DATE: EU/1/08/461/001 20080711

Spc suppl protection certif: PA2008015,C3375

Filing date: 20081105

Expiry date: 20130625

Extension date: 20180626

MK9A Expiry of a patent

Effective date: 20130625