LU509043B1

LU509043B1 - Molekulare maschine und herstellungsverfahren für einen dendrobium officinale polysaccharid-extrakt und dessen anwendung als antioxidans und anti-aging-mittel

Info

Publication number: LU509043B1
Application number: LU509043A
Authority: LU
Inventors: Wenhu Zhou; Yiran Ma; Hong Qin; Qi Deng
Original assignee: Hunan Union Health Science And Tech Research Institute Co Ltd
Priority date: 2024-07-03
Filing date: 2024-11-25
Publication date: 2025-05-26
Also published as: CN118416531A; CN118416531B

Abstract

Die vorliegende Anwendung bezieht sich auf das technische Gebiet der Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt und stellt eine molekulare Maschine und ein Herstellungsverfahren für einen Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt und dessen antioxidative und Anti-Aging-Anwendungen zur Verfügung, wobei die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine ein erstes funktionelles Motiv und ein zweites funktionelles Motiv umfasst; und das erste funktionelle Motiv und das zweite funktionelle Motiv durch Wasserstoffbrückenbindung verbunden sind; Das erste funktionelle Motiv ist ein Milchsäuremolekül und das zweite funktionelle Motiv ist mindestens eines von einem Betainmolekül, einem Bitartinmolekül oder einem Lävulinsäuremolekül; wobei das Dendrobium officinale Polysaccharid O-Acetyl-β-D-glucopyranosid umfasst und das Rückgrat des O-Acetyl- β-D-glucopyranosids aus D-Mannose und D-Glucose besteht, die durch eine β-1,4-glycosidische Bindung verbunden sind; Die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine wird verwendet, um die Erkennungsbindung der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschine an die Dendrobium officinale Polysaccharide anzutreiben, einschließlich des Antreibens der Erkennungsbindung der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschine an die β-1,4- glycosidischen Bindungen der Dendrobium officinale Polysaccharide durch die Affinität der Wasserstoffbindung, was die Effizienz der Extraktion der Dendrobium officinale Polysaccharide verbessert.

Description

Molekulare Maschine und Herstellungsverfahren für einen Dendrobium officinale LUS09043

Polysaccharid-Extrakt und dessen Anwendung als Antioxidans und Anti-Aging-Mittel

Technischer Bereich

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das technische Gebiet der Dendrobium officinale

Polysaccharid-Fxtrakt und insbesondere auf eine molekulare Maschine und ein

Herstellungsverfahren für einen Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt und dessen

Anwendung als Antioxidans und Anti-Aging-Mittel.

Technologie im Hintergrund

Dendrobium officinale, eine krautige Heilpflanze der Gattung Dendrobium aus der Familie der Orchidaceae, ist hauptsächlich in Anhui, Sichuan, Zhejiang, Yunnan und Jiangxi in China zu finden. Moderne Forschungen haben ergeben, dass Dendrobium reich an Polysacchariden,

Flavonoiden und Polyphenolen ist, die eine hervorragende antioxidative, entzündungshemmende, alterungshemmende und virushemmende Wirkung haben. Daher ist es von großer Bedeutung, das

Extraktionslôsungsmittel und -verfahren für den Hauptwirkstoff Polysaccharid zu erforschen.

Derzeit sind die wichtigsten Extraktionslôsungsmittel für Dendrobium officinale

Polysaccharide Wasser und organische Losungsmittel. Bei der Wasserextraktionsmethode gibt es eine geringe Extraktionseffizienz, Verunreinigungen und andere Probleme, die organischen

Lösungsmittel, die bei der Extraktionsmethode mit organischen Lösungsmitteln verwendet werden, sind giftig und umweltschädlich, entflammbar und explosiv, die anschließende Trennung ist schwierig, die Nachweiskosten sind zu hoch, und die traditionellen Alkohollôsungsmittel für

Polysaccharide haben eine geringe Löslichkeit, die für die Extraktion von Polysacchariden verwendet wird, haben eine geringe Effizienz.

Der Stand der Technik leidet unter dem Problem der niedrigen Kosten Effizienz der

Extraktion von Polysacchariden von Dendrobium officinale.

Inhalt der Erfindung

Die vorliegende Anwendung stellt eine molekulare Maschine und ein Herstellungsverfahren fiir einen Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt und dessen antioxidative und Anti-Aging-

Anwendungen bereit, um das Problem der hohen Effizienz und der niedrigen Kosten der

Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt zu lösen.

In einem ersten Aspekt stellen Ausführungsformen der vorliegenden Anwendung eine molekulare Maschine auf Milchsäurebasis bereit, die ein erstes funktionelles Basiselement und ein zweites funktionelles Basiselement umfasst;

Das erste funktionelle Basiselement ist mit dem zweiten funktionellen Basiselement durch

Wasserstoffbrückenbindungen verbunden;

Das erste funktionelle Basiselement ist ein Milchsäuremolekül, und das zweite funktionelle

Basiselement ist mindestens eines von einem Betainmolekiil, einem Pikrinsäuremolekül oder einem Lävulinsäuremolekül;

Wobei das Dendrobium officinale Polysaccharid O-Acetyl-B-D-Glucan umfasst, wobei die

Hauptkette des O-Acetyl-B-D-Glucans D-Mannose und D-Glucose umfasst, die durch eine B-1,4- glycosidische Bindung verbunden sind;

Die auf Milchsäure basierende molekulare Maschinerie zum Antreiben der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinerie, um eine Erkennungsbindung an ein Dendrobium officinale

Polysaccharid durch die Affinität der Wasserstoffbindung herzustellen, umfassend das Antreiben der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinerie, um eine Erkennungsbindung an die 3- 1,4-Glykosidenbindung des Dendrobium officinale Polysaccharids durch die Affinität der

Wasserstoffbindung herzustellen; LUS09043 wobei, wenn das zweite funktionelle Gruppenelement das Betainmolekül ist, die molekulare

Maschine die molekulare Strukturformel CH3CH(OH)COO-H-OOCCH2N(CH3)3 hat.

In einem zweiten Aspekt stellen Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung ein

Verfahren zur Herstellung einer molekularen Maschine auf Milchsäurebasis, wie im ersten Aspekt beschrieben, bereit, das die folgenden Schritte umfasst: Mischen von mindestens einem der

Elemente Betain, Picloram oder Levulin mit der Milchsäure, um eine Mischung zu erhalten.

Wärmebehandlung des Gemischs, bis die Viskosität des Gemischs 200 mPass~500 mPaes beträgt, um eine Molekularmaschine auf Milchsäurebasis zu erhalten; wobei die Wärmebehandlung bei einer Temperatur von 30 °C bis 60 °C erfolgt.

In einem dritten Aspekt stellen Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung ein

Verfahren zur Herstellung eines Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts bereit, das die folgenden Schritte umfasst:

Schritt S100, Mischen von Dendrobium-Pulver mit einer Lösung einer molekularen

Maschine auf Milchsäurebasis und anschließende Verstärkungsbehandlung mit Ultraschall, um den Dendrobium-Extrakt zu erhalten;

Schritt S200, Zentrifugieren des Dendrobium-Extrakts, Entnahme der oberen Schicht der klaren Flüssigkeit nach der Zentrifugation und Filtrieren derselben, um den Dendrobium officinale

Polysaccharid-Extrakt zu erhalten;

Wobei der gelöste Stoff in der Milchsäure-basierten Molekülmaschinenlösung eine

Milchsäure-basierte Molekülmaschine ist, wie im Inhalt des ersten Aspekts beschrieben, und/oder eine Milchsäure-basierte Molekülmaschine ist, die durch das Herstellungsverfahren hergestellt wurde, wie im Inhalt des zweiten Aspekts beschrieben.

In einem vierten Aspekt stellen Ausführungsformen der vorliegenden Anwendung eine antioxidative und Anti-Aging-Anwendung bereit, die auf einem Dendrobium officinale

Polysaccharid-Extrakt basiert, der durch ein Herstellungsverfahren wie in einem der dritten

Aspekte beschrieben hergestellt wurde, und die ein Hautpflegeprodukt umfasst, das aus dem

Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt als Rohmaterial hergestellt wurde, das für die antioxidative und Anti-Aging-Reparatur der menschlichen Haut verwendet wird.

Verglichen mit dem Stand der Technik ist die vorteilhafte Wirkung der vorliegenden

Anwendung:

In einem ersten Aspekt der vorliegenden Anwendung wird eine molekulare Maschine auf

Milchsäurebasis bereitgestellt, die eine erste funktionelle Einheit und eine zweite funktionelle

Einheit umfasst; die erste funktionelle Einheit und die zweite funktionelle Einheit sind durch

Wasserstoffbindung verbunden; die erste funktionelle Einheit ist ein Milchsäuremolekül, und die zweite funktionelle Einheit ist mindestens eines von einem Betainmolekül, einem

Absinthinmolekül oder einem Lävulinsäuremolekül; Das Dendrobium officinale Polysaccharid umfasst ein O-Acetyl-B-D-Glucan, wobei die Hauptkette des O-Acetyl-B-D-Glucans aus D-

Mannose und D-Glucose besteht, die durch eine B-1,4-glykosidische Bindung verbunden sind; Auf

Milchsäure basierende molekulare Maschinerie zum Treiben einer erkennbaren Bindung der auf

Milchsäure basierenden molekularen Maschinerie an Dendrobium officinale Polysaccharide durch die Affinität von Wasserstoffbindungen, umfassend das Treiben einer erkennbaren Bindung der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinerie an die B-1,4-glykosidischen Bindungen der

Dendrobium officinale Polysaccharide durch die Affinität der Wasserstoffbindungen. Die vorliegende Anwendung bildet eine auf Milchsäure basierende molekulare Maschinerie durch

Wasserstoffbrückenbindungen von intermolekularen Wechselwirkungen zwischen einek509043

Milchsäuremolekül und mindestens einem Betainmolekül, einem Bitartinmolekül oder einem

Lävulinsäuremolekül Die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine der vorliegenden

Anwendung, wenn sie Dendrobium officinale Polysaccharide extrahiert, treibt die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine an, um eine Erkennungsverbindung mit Dendrobium officinale

Polysacchariden durch die Affinität von Wasserstoffbindungen herzustellen, umfassend das

Antreiben der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschine, um eine Erkennungsverbindung mit den P-1,4-glycosidischen Bindungen der Dendrobium officinale Polysaccharide durch die

Affinität der Wasserstoffbindungen herzustellen. Es verbessert die Ubertragungsrate des

Wirkstoffs in Dendrobium, und gleichzeitig kann es die Aktivität des Wirkstoffs beibehalten und die Stabilität des Wirkstoffs innerhalb von Dendrobium verbessern, und es kann auch die Zellulose in der Zellwand von Dendrobium auflösen und dissoziieren, was die Permeabilität der Zellwand von Dendrobium verbessert, und die Loslichkeit der aktiven Komponente innerhalb der Zelle von

Dendrobium verbessert, und somit die Effizienz der Extraktion von Dendrobium officinale

Polysacchariden verbessert.

Der zweite Aspekt der vorliegenden Anwendung stellt ein Verfahren zur Herstellung einer molekularen Maschine auf Milchsäurebasis wie im Inhalt des ersten Aspekts bereit, das die folgenden Schritte umfasst: Mischen von mindestens einem von Betain, Picloram oder Levulin mit Milchsäure, um eine Mischung zu erhalten. Das Gemisch wird einer Erhitzungsbehandlung unterzogen, bis die Viskosität des Gemischs 200 mPass~500 mPass beträgt, um die molekulare

Maschine auf Milchsäurebasis zu erhalten; wobei die Temperatur der Erhitzungsbehandlung 30 °C bis 60 °C beträgt; Durch die Synthese der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschine mit einer vorbestimmten Viskosität durch das Erhitzungs- und Rührverfahren, das die Temperatur und die Dauer der Erhitzungsbehandlung steuert, kann die molekulare Maschine der vorliegenden

Anwendung bei Raumtemperatur stabil, geklärt, transparent und homogen bleiben, und es ist keine

Trennung im nachfolgenden Prozess erforderlich, wodurch der Herstellungsprozess der auf

Milchsäure basierenden molekularen Maschine vereinfacht wird; Darüber hinaus ist der

Syntheseprozess der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinen der vorliegenden

Anwendung zu 100 % atomökonomisch, grün und wirtschaftlich, biokompatibel, sicher und ungiftig und besitzt eine dreidimensionale geordnete Struktur, die den effektiven Einschluss der aktiven Substanzen durch intermolekulare Kräfte erleichtert.

In einem dritten Aspekt der vorliegenden Anwendung wird ein Verfahren zur Herstellung eines Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts bereitgestellt, das die folgenden Schritte umfasst: Schritt S100, Mischen eines Dendrobium officinale-Pulvers mit einer molekularen

Maschinenlôsung auf Milchsdurebasis und anschließende Durchführung einer

Intensivierungsbehandlung mit Ultraschall, um den Dendrobium officinale Extrakt zu erhalten;

Schritt S200, Zentrifugieren des Dendrobium officinale Extrakts, Entnehmen der oberen Schicht der klaren Flüssigkeit nach der Zentrifugationsbehandlung und Filtrieren derselben und Erhalten des Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts; wobei der gelöste Stoff in der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinenlösung die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine im Inhalt des ersten Aspekts ist, und/oder die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine ist, die durch das Herstellungsverfahren im Inhalt des zweiten Aspekts hergestellt wurde; Verglichen mit dem Stand der Technik, da die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine verwendet wird, um das Dendrobium officinale Polysaccharid ohne die Verwendung eines Enzyms für die

Katalyse zu extrahieren, treibt die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine die auf

Milchsäure basierende molekulare Maschine dazu an, eine Erkennungsverbindung mit deh}509043

Dendrobium officinale Polysaccharid durch die Affinität der Wasserstoffbindung herzustellen, was die Rate der Übertragung des Wirkstoffs in Dendrobium officinale verbessert. Die

Extraktionswirkung der Polysaccharide im Dendrobium officinale Extrakt der vorliegenden

Anwendung ist 2,35-mal effektiver als die der wässrigen Extraktion und 1,86-mal effektiver als die des enzymatischen Zelluloseaufschlusses; In der Milchsäure-basierte molekulare Maschine

System konnen die Polysaccharid-Verbindungen stabil fiir 4 Monate ohne Zersetzung existieren, ist die Stabilität besser Milchsäure-basierte molekulare Maschine kann effektiv hemmen das

Wachstum von Mikroorganismen und verhindern, dass die Polysaccharid-Extrakte von

Verschlechterung, die Polysaccharid-Extrakte sind in der Raumtemperatur und natürliches Licht für 4 Monate Zeit der mikrobielle Gehalt der einzelnen Mikroorganismen nicht über die Norm;

Gleichzeitig kann durch die gekoppelte Ultraschallverstärkung die Auflösung und Dissoziation der

Zellulose in der Zellwand von Dendrobium officinale beschleunigt werden, wodurch der Gehalt an Polysacchariden effektiv erhöht wird, aber auch die Menge an Lösungsmitteln reduziert wird,

Verunreinigungen reduziert werden, die Ubertragungsrate des Wirkstoffs verbessert wird, das

Problem der Verwendung von organischen Lösungsmitteln und Restproblemen gelöst wird, um eine qualitativ hochwertige und stabile Produktion zu erreichen und die Verwertungsrate des

Wirkstoffs und die Wertschöpfung zu verbessern.

Ein vierter Aspekt der vorliegenden Anwendung ist eine antioxidative und Anti-Aging-

Anwendung eines Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts auf der Grundlage eines

Zubereitungsverfahrens gemäß einem der Inhalte des dritten Aspekts, die ein Hautpflegeprodukt umfasst, das aus dem Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt als Rohstoff für die antioxidative und Anti-Aging-Reparatur der menschlichen Haut hergestellt wird, Da der extrahierte Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt nicht abgetrennt werden muss, synergiert die auf Milchsäure basierende molekulare Maschinerie in dem Polysaccharid-Extrakt mit den Polysaccharid-Verbindungen, die auf die Hautpflegeprodukte aufgetragen werden, um die

Wirkungen von Antioxidans, Anti-Aging, Peeling und Befeuchtung der menschlichen Haut auszuüben.

Beschreibung der beigefügten Zeichnungen

Um die technischen Lösungen in den Ausführungsformen oder dem Stand der Technik der vorliegenden Erfindung deutlicher zu veranschaulichen, werden die begleitenden Zeichnungen, die in der Beschreibung der Ausführungsformen oder des Standes der Technik verwendet werden, im Folgenden kurz vorgestellt, und es wird offensichtlich sein, dass die begleitenden Zeichnungen in der folgenden Beschreibung einige der Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung sind, und dass für eine Person mit gewöhnlichen Fachkenntnissen auf dem Gebiet andere begleitende

Zeichnungen auf der Grundlage dieser Zeichnungen erhalten werden können, ohne kreative Arbeit zu leisten.

Bild 1 ist ein Flussdiagramm eines Verfahrens zur Herstellung eines Dendrobium officinale

Polysaccharid-Extrakts, der in der vorliegenden Anmeldung vorgesehen ist;

Bild 2 ist ein Infrarotspektrogramm der molekularen Maschinerie und der synthetischen

Monomere des Lactobetains der vorliegenden Anmeldung;

Bild 3 ist ein schematisches Diagramm der thermogravimetrischen Kurve der Lactobetain-

Molekularmaschine und des synthetischen Monomers der vorliegenden Anmeldung;

Bild 4 ist ein Diagramm der quantenchemischen Berechnungsanalyse der Lactobetain-

Molekularmaschine Al der vorliegenden Anmeldung, wobei (a) ein Diagramm der

Strukturoptimierung der Lactobetain-Molekularmaschine ist; (b) ein Diagramm der Analyse ab4509043 elektrostatischen Oberflächenpotentials der Lactobetain-Molekularmaschine ist; und (c) ein

Diagramm der Analyse der Indikatorfunktion des Wechselwirkungsbereichs der Lactobetain-

Molekularmaschine ist; 5 Bild 5 zeigt ein schematisches Diagramm der Veränderung des Polysaccharidgehalts des

Polysaccharid-Extrakts von Dendrobium officinale der vorliegenden Anmeldung bei verschiedenen Platzierungszeiten unter natürlichem Licht bei Raumtemperatur;

Bild 6 zeigt ein schematisches Diagramm des DPPH- Radikalfängertests des Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts (Lactobetain-Molekularmaschine) der vorliegenden Anmeldung;

Bild 7 zeigt ein schematisches Diagramm des Hydroxylradikal-Fängertests des

Polysaccharid-Extrakts von Dendrobium officinale (Lactobetain-Molekularmaschine) der vorliegenden Anmeldung;

Bild 8 zeigt ein schematisches Diagramm der Wirkung des Dendrobium officinale

Polysaccharid-Extrakts (Lactobetain-Molekularmaschine) der vorliegenden Anwendung auf die

Aktivität von Fibroblasten in der menschlichen Hautschicht;

Bild 9 zeigt ein schematisches Diagramm der Wirkung des Polysaccharid-Extrakts aus

Dendrobium officinale (Lactobetain-Molekularmaschine) der vorliegenden Anwendung auf den

Gehalt an menschlichem Typ-I-Kollagen;

Bild 10 zeigt ein schematisches Diagramm der Wirkung des Polysaccharid-Extrakts von

Dendrobium officinale (Lactobetain-Molekularmaschine) der vorliegenden Anwendung auf den relativen Gehalt an MMP-1;

Bild 11 zeigt ein schematisches Diagramm der Wirkung des Polysaccharid-Extrakts von

Dendrobium officinale (Lactobetain-Molekularmaschine) der vorliegenden Anwendung auf den relativen Gehalt an MMP-3.

Detaillierte Beschreibung

Um die technischen Probleme, technischen Losungen und vorteilhaften Wirkungen, die durch die vorliegende Anwendung gelöst werden sollen, klarer und verständlicher zu machen, wird die vorliegende Anwendung im Folgenden in Kombination mit Ausführungsbeispielen näher beschrieben. Es ist zu verstehen, dass die hierin beschriebenen spezifischen Ausführungsformen nur zur Erläuterung der vorliegenden Anwendung dienen und nicht dazu gedacht sind, die vorliegende Anwendung einzuschränken.

In der vorliegenden Anwendung bedeutet der Begriff „und/oder“, der eine

Assoziationsbeziehung zwischen den assoziierten Objekten beschreibt, dass drei Arten von

Beziehungen bestehen können, z. B. A und/oder B, was bedeuten kann: das Vorhandensein von A allein, das Vorhandensein sowohl von A als auch von B und das Vorhandensein von B allein. A und B können im Singular oder Plural stehen. Das Zeichen „/“ zeigt im Allgemeinen an, dass die vorher und nachher verbundenen Objekte in einer „oder‘“-Beziehung stehen.

In der vorliegenden Anmeldung bedeutet „mindestens eines“ eines oder mehrere, und „mehr als eines“ zwei oder mehrere. Der Ausdruck „mindestens eine (einer) der folgenden“ oder ähnliche

Ausdrücke beziehen sich auf eine beliebige Kombination dieser Elemente, einschließlich einer beliebigen Kombination von einzelnen (einem) oder mehreren (einem) Elementen. Zum Beispiel kann „mindestens eines (von) a, b oder c“ oder „mindestens eines (von) a, b und c“ ausgedrückt werden: a, b, c, a-b (d.h. a und b), a-c, b-c, oder a-b-c, wobei a, b, c jeweils einfach oder mehrfach sein kann.

Es sollte verstanden werden, dass in verschiedenen Ausführungsformen der vorliegenden

Anwendung die Größe der laufenden Nummer jedes der oben genannten Prozesse nicht dt&/509043

Reihenfolge der Ausführung impliziert, und einige oder alle der Schritte kônnen parallel oder sequentiell ausgeführt werden, und die Reihenfolge der Ausführung jedes der Prozesse sollte durch seine Funktion und inhärente Logik bestimmt werden, ohne eine Finschränkung des Prozesses der

Umsetzung der Vorschriften der vorliegenden Anwendung darzustellen. Die in den

Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung verwendeten Begriffe dienen ausschließlich der

Beschreibung der jeweiligen Ausführungsform der Vorschriften und sollen die vorliegende

Anmeldung nicht einschränken. Die in den Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung und den beigefügten Ansprüchen verwendeten Singularformen von „ein“, „sagte“ und „der“ schließen auch die Mehrzahlform ein. Es sei denn, aus dem Kontext geht eindeutig etwas anderes hervor.

Die Gewichte der relevanten Komponenten, die in der Spezifikation der Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung erwähnt werden, können sich nicht nur auf die spezifischen Inhalte der Komponenten beziehen, sondern können auch das proportionale Verhältnis der Gewichte der

Komponenten anzeigen, und daher ist jede Vergrößerung oder Verkleinerung der Inhalte der relevanten Komponenten in Übereinstimmung mit der Spezifikation der Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung innerhalb des Umfangs der Offenlegung der Spezifikation der

Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung. Insbesondere kann die in der Beschreibung der

Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung beschriebene Masse in ug, mg, g, kg und anderen in der chemischen Industrie bekannten Masseneinheiten angegeben werden.

Die Begriffe „erste“ und „zweite“ werden nur zu beschreibenden Zwecken verwendet, um

Zwecke wie Stoffe voneinander zu unterscheiden, und sind nicht so zu verstehen, dass sie eine relative Bedeutung anzeigen oder implizieren oder implizit die Anzahl der angegebenen technischen Merkmale festlegen. Ohne vom Anwendungsbereich der Verordnungen abzuweichen, kann zum Beispiel das erste XX auch als zweites XX bezeichnet werden, und ebenso kann das zweite XX auch als erstes XX bezeichnet werden. Somit kann ein mit „erstes“, „zweites“ definiertes Merkmal ausdrücklich oder implizit ein oder mehrere solcher Merkmale umfassen.

Um das Verständnis der vorliegenden Erfindung zu erleichtern, wird im Folgenden eine umfassendere und detailliertere Beschreibung der vorliegenden Erfindung in Verbindung mit den beigefügten Zeichnungen der Beschreibung und den bevorzugten Ausführungsformen gegeben, aber der Schutzbereich der vorliegenden Erfindung ist nicht auf die folgenden spezifischen

Ausführungsformen beschränkt.

Sofern nicht anders definiert, haben alle im Folgenden verwendeten technischen Begriffe die gleiche Bedeutung, wie sie dem Fachmann geläufig ist. Die hier verwendete Terminologie dient nur der Beschreibung bestimmter Ausführungsformen und soll den Schutzbereich der vorliegenden Erfindung nicht einschränken.

Sofern nicht anders angegeben, können die verschiedenen Rohstoffe, Reagenzien,

Instrumente und Ausrüstungen usw., die in der vorliegenden Erfindung verwendet werden, auf dem Markt erworben oder durch bestehende Methoden hergestellt werden.

Eine molekulare Maschine, eine Maschine, die aus molekularen Substanzen besteht, die eine bestimmte Funktion ausüben können, hat die Eigenschaften der geringen Größe, der Vielfalt, der

Selbstmontage, der Selbstanpassung, der großen Bandbreite der Polarität und der starken

Gestaltbarkeit usw. Eine molekulare Maschine kombiniert die oben genannten Komponenten durch intermolekulare Wechselwirkungen (Wasserstoffbrückenbindungen, Van-der-Waals-Kräfte, elektrostatische Gravitationskräfte usw.) und hat eine wohldefinierte Mikrostruktur und makroskopische Eigenschaften. LUS09043

Ein erster Aspekt einer Ausführungsform der vorliegenden Anmeldung stellt eine molekulare

Maschine auf Milchsäurebasis bereit, die eine erste funktionelle Einheit und eine zweite funktionelle Einheit umfasst; die erste funktionelle Einheit und die zweite funktionelle Einheit sind durch Wasserstoffbrückenbindung verbunden; die erste funktionelle Einheit ist ein

Milchsäuremolekül und die zweite funktionelle Einheit ist mindestens eines von einem

Betainmolekül, einem Picosidinmolekül oder einem Lävulinsäuremolekül; wobei das Dendrobium officinale Polysaccharid ein O-Acetyl-B-D-Glucan umfasst, wobei die Hauptkette des O-Acetyl-

B-D-Glucans D-Mannose und D-Glucose umfasst, die durch eine ß-1,4-glykosidische Bindung verbunden sind; Die auf Milchsäure basierende molekulare Maschinerie wird verwendet, um die auf Milchsäure basierende molekulare Maschinerie anzutreiben, um eine Erkennungsbindung an das Dendrobium officinale Polysaccharid herzustellen, einschließlich des Antreibens der auf

Milchsäure basierenden molekularen Maschinerie, um an die ß-1,4-glycosidische Bindung des

Dendrobium officinale Polysaccharids durch die Affinität der Wasserstoffbindung zu binden.

Wenn das zweite funktionelle Gruppenelement ein Betainmolekül ist, hat die molekulare Maschine die molekulare Strukturformel CH3CH(OH)COO-H-OOCCH:2N(CH3)s.

Die vorliegende Anwendung bildet eine auf Milchsäure basierende molekulare Maschine durch Wasserstoffbrückenbindung einer spezifischen Bindungslänge einer intermolekularen

Wechselwirkung zwischen einem Milchsäuremolekül und mindestens einem von einem

Betainmolekil, einem Pikosidinmolekül oder einem Levulinsäuremolekül. In der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschine der vorliegenden Anwendung bilden die Hydroxylgruppe des

Milchsäuremoleküls und die Carbonylgruppe von mindestens einem der Betainmoleküle, des

Pikrinsäuremoleküls oder des Levulinsäuremoleküls Wasserstoffbrückenbindungen mit

Bindungslängen, die kleiner sind als der van-der-Waals-Radius, und daher ist die Stabilität der auf

Milchsäure basierenden molekularen Maschine relativ hoch. Wenn die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine der vorliegenden Anwendung Dendrobium officinale Polysaccharide extrahiert, treibt die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine die auf Milchsäure basierende molekulare Maschine dazu an, eine Erkennungsverbindung mit Dendrobium officinale

Polysacchariden durch die Affinität der Wasserstoffbrückenbindung herzustellen, was die

Ubertragungsrate der Wirkstoffe in Dendrobium officinale verbessert, und gleichzeitig kann sie die Aktivität der Wirkstoffe beibehalten, und sie verbessert die Stabilität der Wirkstoffe innerhalb von Dendrobium officinale. Es kann auch die Zellulose in der Zellwand von Dendrobium officinale auflösen und dissoziieren, was die Durchlässigkeit der Zellwand von Dendrobium officinale verbessert, die Auflösung der aktiven Komponenten in der Zellwand von Dendrobium officinale verbessert und dann die Effizienz der Extraktion der Polysaccharide von Dendrobium officinale verbessert.

In einigen Ausführungsformen hat die Wasserstoffbindung eine Bindungslänge von 1 A~2 A, wobei die Wasserstoffbindungs-Bindungslänge die Bindungslänge zwischen den Wasserstoff (H)-

Atomen und den Sauerstoff (O)-Atomen im Betainmolekül ist, und die kürzere Bindungslänge gewährleistet, dass das erste funktionelle Basiselement und das zweite funktionelle Basiselement eine größere Wechselwirkungskraft haben und nicht leicht zerstört werden, und die molekulare

Maschinerie stabil bleiben kann, wodurch die molekulare Maschinerie erleichtert wird, sich mit dem Dendrobium officinale Polysaccharid zu verbinden.

In einigen Ausführungsformen beträgt das molare Verhältnis des ersten funktionellen

Basiselements zum zweiten funktionellen Basiselement 1:(0,25~4), und ein molares Verhältnis im

Bereich von 1:(0,25~4) verbessert die Wirkung der molekularen Maschine auf Milchsäurebast$/509043 bei der Extraktion des Dendrobium officinale Polysaccharids. Weiterhin produzierte die auf

Milchsäure basierende molekulare Maschine, die mit einem molaren Verhältnis von 1:1 zwischen dem ersten funktionellen Gruppenelement und dem zweiten funktionellen Gruppenelement gebildet wurde, die höchste Ausbeute an Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt.

In einigen Ausführungsformen ist das Dendrobium officinale Polysaccharid eine

Polysaccharidstruktur, die eine Vielzahl von Monosacchariden einschließlich Glucose, Mannose und Galactose umfasst, die durch glykosidische Bindungen verbunden sind, und die auf

Milchsäure basierende molekulare Maschine wird durch die Affinität der

Wasserstoffbrückenbindungen angetrieben, sich mit den verschiedenen Monosacchariden des

Dendrobium officinale Polysaccharids zu verbinden. Dadurch wird die Übertragungsrate des

Wirkstoffs in Dendrobium officinale erhöht, die Ausbeute des Dendrobium officinale

Polysaccharid-Extrakts, der auf der Grundlage der molekularen Maschine auf Milchsäurebasis hergestellt wird, wird erhöht, und somit wird die Effizienz der Extraktion des Dendrobium officinale Polysaccharids erhöht.

Ein zweiter Aspekt von Ausführungsformen der vorliegenden Anmeldung stellt ein Verfahren zur Herstellung einer molekularen Maschine auf Milchsäurebasis wie im ersten Aspekt des Inhalts bereit, das die folgenden Schritte umfasst: Mischen von mindestens einem von Betain, Pikrinsäure oder Lävulinsäure mit Milchsäure, um eine Mischung zu erhalten. Das Gemisch wird einer

Wärmebehandlung unterzogen, bis die Viskosität des Gemisches 200 mPass~500 mPaes beträgt, wobei die Temperatur der Wärmebehandlung 30 °C bis 60 °C beträgt.

Verständlicherweise ist das molare Verhältnis des ersten funktionellen Gruppenelements zum zweiten funktionellen Gruppenelement 1:(0,25~4), und die innere Struktur der molekularen

Maschine, die durch die verschiedenen molaren Verhältnisse des ersten funktionellen

Gruppenelements und des zweiten funktionellen Gruppenelements gebildet wird, ist unterschiedlich. Dementsprechend ist die Wirkung der molekularen Maschine auf Milchsäurebasis, die die molekulare Maschine auf Milchsäurebasis antreibt, um eine Erkennungsverbindung mit dem Dendrobium officinale Polysaccharid durch die Affinität der Wasserstoffbindung herzustellen, unterschiedlich, und die Wirkung ihrer Polysaccharidausbeute zur Herstellung des Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts ist ebenfalls unterschiedlich. Beispielhaft ist das Molverhältnis von Betain zu Milchsäure, das zum Mischen verwendet wird, eines von 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, und die hergestellte molekulare Maschine auf Milchsäurebasis verbessert die Stabilität des Wirkstoffs innerhalb des Dendrobiums und verbessert auch die Durchlässigkeit der Dendrobium officinale

Zellwand. Die Löslichkeit der Wirkstoffe innerhalb der Dendrobium officinale Zelle wird verbessert und die Transferrate der Wirkstoffe im Dendrobium officinale erhöht, wodurch die

Effizienz der Extraktion des Dendrobium officinale Polysaccharids erhöht und auch die Kosten der Extraktion des Dendrobium officinale Polysaccharids gesenkt werden, da keine Enzyme zur

Katalyse der Extraktion benötigt werden. Vorzugsweise beträgt das Molverhältnis von Betain zu

Milchsäure, das zum Mischen verwendet wird, 1: 1. In dieser bevorzugten Ausführungsform verbessert die hergestellte Molekularmaschine auf Milchsäurebasis weiter die Löslichkeit der intrazellulären aktiven Komponenten von Dendrobium officinale, verbessert weiter die

Transferrate der aktiven Bestandteile in Dendrobium officinale, wodurch die Effizienz der

Extraktion von Dendrobium officinale Polysacchariden weiter verbessert wird, und reduziert die

Kosten der Extraktion von Dendrobium officinale Polysacchariden. Daher hat der Polysaccharid-

Extrakt, der zur Herstellung des Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts verwendet wird,

eine höhere Polysaccharidausbeute und wird zur Extraktion von Dendrobium officinat&509043

Polysaccharid mit besserer Leistung verwendet.

Die vorliegende Anwendung synthetisiert die auf Milchsäure basierende molekulare

Maschine durch ein Erhitzungs- und Rührverfahren, das die Temperatur und die Dauer der

Erhitzungsbehandlung steuert, und die molekulare Maschine der vorliegenden Anwendung kann bei Raumtemperatur stabil, geklärt, transparent und homogen bleiben, ohne dass eine anschließende Trennung erforderlich ist, wodurch der Herstellungsprozess der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschine vereinfacht wird; Darüber hinaus ist der Syntheseprozess der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschine der vorliegenden Anwendung zu 100 % atomôkonomisch, grün und wirtschaftlich, biokompatibel, sicher und ungiftig und besitzt eine dreidimensionale geordnete Struktur, die das effektive Einfangen des Wirkstoffs durch intermolekulare Kräfte erleichtert.

In einigen Ausführungsformen wird mindestens eines von Betain, Picloram oder Levulin mit

Milchsäure gemischt und dann erhitzt, um die molekulare Maschine auf Milchsäurebasis zu erhalten, umfassend: Mischen von Milchsäure und mindestens einem von Betain, Picloram oder

Levulin, um eine Mischung zu erhalten. Die Mischung wird auf 30 °C~60 °C erhitzt und das

Rühren der Mischung wird bei 30 °C~60 °C für 3 h~8 h durchgeführt, bis die Viskosität der

Mischung 200 mPass~500 mPaes beträgt, um die molekulare Maschine auf Milchsäurebasis zu erhalten; Das Verfahren zur Herstellung der molekularen Maschinen auf Milchsäurebasis wurde durch Zugabe von Wasser zu den molekularen Maschinen auf Milchsäurebasis zur Verdünnung optimiert, um die molekulare Maschinenlösung auf Milchsäurebasis zu erhalten.

Wie in Bild 1 gezeigt, stellt ein dritter Aspekt der Ausführungsformen der vorliegenden

Anwendung ein Verfahren zur Herstellung eines Polysaccharid-Extrakts von Dendrobium officinale bereit, das die folgenden Schritte umfasst:

Schritt S100, Mischen des Dendrobium officinale Pulvers mit der molekularen

Maschinenlösung auf Milchsäurebasis und anschließende Verstärkungsbehandlung durch

Ultraschall, um den Dendrobium officinale Extrakt zu erhalten;

Schritt S200, Zentrifugieren des Dendrobium officinale Extrakts, Entnahme der oberen klaren

Flussigkeit nach der Zentrifugation und Filtrieren, um den Dendrobium officinale Polysaccharid-

Extrakt zu erhalten;

Wobei der gelöste Stoff in der auf Milchsäure basierenden Molekülmaschinenlôsung die auf

Milchsäure basierende Molekülmaschine gemäß dem Inhalt des ersten Aspekts ist und/oder die auf Milchsäure basierende Molekülmaschine ist, die durch das Herstellungsverfahren gemäß dem

Inhalt des zweiten Aspekts hergestellt wurde.

Verglichen mit dem Stand der Technik, da die Milchsäure-basierte molekulare Maschine verwendet wird, um die Polysaccharide von Dendrobium officinale zu extrahieren, gibt es keine

Notwendigkeit, ein Enzym für die Katalyse zu verwenden, und die Milchsäure-basierte molekulare

Maschine treibt die Milchsäure-basierte molekulare Maschine mit den Polysacchariden von

Dendrobium officinale durch die Affinität der Wasserstoffbindung für die Anerkennung zu verbinden, die die Rate der Übertragung des Wirkstoffs in Dendrobium officinale verbessert. Die

Wachstum von Mikroorganismen und verhindern, dass die Polysaccharid-Extrakte vdr/909043

Gleichzeitig kann durch die gekoppelte Ultraschallverbesserung die Auflösung und Dissoziation von Zellulose in der Zellwand von Dendrobium officinale beschleunigt werden, wodurch der

Polysaccharidgehalt effektiv erhöht wird, aber auch die Menge an Lösungsmitteln verringert wird,

Verunreinigungen reduziert werden, die Übertragungsrate der Wirkstoffe verbessert wird, das

Problem der Verwendung von organischen Lösungsmitteln und Rückständen gelöst wird und eine qualitativ hochwertige und stabile Produktion erreicht wird, die Nutzungsrate der Wirkstoffe und der Mehrwert verbessert werden.

In einigen Ausführungsformen umfasst die Vorbehandlung des Dendrobiums zur Gewinnung des Dendrobiumpulvers: Waschen des Dendrobiums mit Wasser und Gefriertrocknen des

Dendrobiums bei einer vorgegebenen Trocknungstemperatur; Das getrocknete Dendrobium officinale wird zerkleinert und gesiebt und bei niedriger Temperatur konserviert, wobei die

Gefriertrocknungszeit 1h~6h beträgt, die voreingestellte Trocknungstemperatur bei -20°C~70°C liegt und die Zerkleinerung und Siebung eine 60-Mesh-Siebung ist. Die TeilchengrôBe des durch

Sieben erhaltenen Dendrobium officinale Pulvers ist nicht größer als 0,3 mm, und die Temperatur der Niedrigtemperatur-Konservierung beträgt -10°C~20°C, wodurch der Vorbehandlungsprozess von Dendrobium officinale optimiert wird und die aktiven Substanzen oder Wirkstoffe in

Dendrobium officinale erhalten bleiben. Die TeilchengrôBe des Dendrobium officinale Pulvers ist nicht größer als 0,3 mm, d.h. wenn die Teilchengröße des Dendrobium Pulvers kleiner oder gleich 0,3 mm ist, kann es eine größere Kontaktfläche mit den Dendrobium officinale officinale

Polysacchariden haben, was die Extraktionswirkung der Dendrobium officinale Polysaccharide verbessert.

In einigen Ausführungsformen ist das Masse-Volumen-Verhältnis des Dendrobium officinale

Pulvers und der molekularen Maschinenlôsung auf Milchsäurebasis in Schritt S100 1:5 g/mL~70 g/mL; dh. 1 g des Dendrobium officinale Pulvers wird mit 5 mL~70 mL der molekularen

Maschinenlôsung auf Milchsäurebasis gemischt, was für die Extraktion von Polysacchariden aus dem Dendrobium officinale effektiv ist. Fine auf Milchsäure basierende molekulare

Maschinenlosung von weniger als 5 ml ist nicht in der Lage, das Polysaccharid im Dendrobium officinale innerhalb eines bestimmten Zeitraums ausreichend zu extrahieren, während eine auf

Milchsäure basierende molekulare Maschinenlôsung von mehr als 70 ml keinen signifikanten

Effekt auf die Erhöhung der Effizienz des Polysaccharids im Dendrobium officinale hat;

In einigen Ausführungsformen beträgt die Konzentration der molekularen Maschinenlôsung auf Milchsäurebasis in Schritt S100 5 Gew.-% bis 80 Gew.-%, d.h. die Konzentration der molekularen Maschinenlôsung auf Milchsäurebasis nach Verdünnung mit Wasser beträgt 5 Gew.-% bis 80 Gew.-%, um die Verbesserung der Effizienz der Extraktion von Polysacchariden aus dem

Dendrobium officinale zu erleichtern. Außerdem ist das Wasser reines Wasser oder ultrareines

Wasser, um die Auswirkungen von Verunreinigungen auf die Extraktion zu verringern.

In einigen Ausführungsformen sind die Parameter der Ultraschall-Verstärkungsbehandlung in Schritt S100: die Temperatur der Ultraschall-Verstärkungsbehandlung beträgt 30 °C~80 °C, die

Dauer der Ultraschall-Verstärkungsbehandlung beträgt 0,5 h~2 h, und die Ultraschallenergie beträgt 100 W~500 W; Die Annahme der Parameter der intensiven Ultraschallbehandlung in dieser

Ausführungsform kann die Extraktion von Dendrobium officinale Polysacchariden effizienter durchführen, und aufgrund der starken Vibration, die durch die Ultraschallwellen des

Ultraschallextraktionsprozesses erzeugt wird, kann die Extraktionszeit reduziert werden, währert 509043 die Struktur und die biologische Aktivität der Wirkstoffe unverändert beibehalten werden kann, und bioaktive Substanzen können effizient und kostengünstig und ohne Kontamination gewonnen werden, und somit eine grüne und hocheffiziente Extraktion der Wirkstoffe des Dendrobiums realisieren.

In einigen Ausführungsformen wird nach Schritt S100 und vor Schritt S200 ferner der pH-

Wert des Dendrobium officinale Extrakts auf einen vorbestimmten pH-Wert eingestellt; die

Einstellung des pH-Werts des Dendrobium officinale Extrakts auf den vorbestimmten pH-Wert ermöglicht die Abtrennung der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinerie von dem

Dendrobium officinale Polysaccharid und verbessert die Reinheit des Dendrobium officinale

Polysaccharids. Ferner ist der vorbestimmte pH-Wert größer als 6,5 und kleiner als 7,0; der vorbestimmte pH-Wert liegt im Rahmen der vorliegenden Ausführungsform und kann die auf

Milchsäure basierende molekulare Maschinerie effektiver von den Dendrobium officinale

Polysacchariden trennen und die Reinheit der Dendrobium officinale Polysaccharide weiter verbessern.

In einigen Ausfithrungsformen sind die Parameter der Zentrifugalbehandlung in Schritt S200: die Rotationsgeschwindigkeit der Zentrifugalbehandlung beträgt 6000 r/min ~ 12000 r/min, die

Dauer der Zentrifugalbehandlung beträgt 5 min ~ 15 min, die Filtrationsmembran der

Zentrifugalbehandlung ist eine Filtrationsmembran für die organische Phase, und die PorengrôBe der Filtrationsmembran für die organische Phase ist nicht größer als 0,45 um; Die

Zentrifugalbehandlung unter Verwendung der Zentrifugalbehandlungsparameter in dieser

Ausführungsform kann Verunreinigungen wirksam entfernen und die Konzentration des

Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts verbessern.

Ein vierter Aspekt der Ausführungsform der vorliegenden Anwendung stellt eine antioxidative und Anti-Aging-Anwendung eines Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts auf der Grundlage eines Herstellungsverfahrens wie in einem der vierten Aspekte bereit, die ein

Hautpflegeprodukt umfasst, das aus dem Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt als ein für die antioxidative und Anti-Aging-Reparatur der menschlichen Haut zu verwendendes Rohmaterial hergestellt ist.

Die Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakte der vorliegenden Anwendung fiir antioxidative und Anti-Aging-Anwendungen müssen nicht isoliert werden, und die auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinen in den Polysaccharid-Extrakten synergieren mit

Polysacchariden in Hautpflegeanwendungen mit antioxidativer, antioxidativer, peelender und feuchtigkeitsspendender Wirkung auf die menschliche Haut.

In einigen Ausfithrungsformen wird der Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt auch in Zytotoxizitätstests, Hautpflastertests oder herkömmlichen neun Tests für Kosmetika verwendet, wodurch die Anwendungsszenarien des Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts erweitert werden.

Um die obigen Implementierungsdetails und Vorgänge der vorliegenden Anwendung für das technische Personal auf dem Gebiet klar verständlich zu machen, sowie die molekulare

Maschinerie der Ausfithrungsformen der vorliegenden Anwendung, die Zubereitungsmethode des

Extrakts und die fortschreitende Leistung der Antioxidans- und Anti-Aging-Anwendungen signifikant zu verkörpern, ist das Folgende ein Beispiel, um die obigen technischen Lösungen mittels einer Anzahl von Ausführungsformen zu illustrieren.

Herstellungsbeispiel 1

Ein Verfahren zur Herstellung einer Molekularmaschine auf Milchsäurebasis, wobei Betaht/909043 mit Milchsäure in einem Molverhältnis von 1:1 gemischt wird, um ein Gemisch zu erhalten; das

Gemisch einer Wärmebehandlung unterzogen wird, bis die Viskosität des Gemisches 325 mPa-s beträgt, um eine viskose flüssige Molekularmaschine auf Milchsäurebasis A1 zu erhalten;

Wobei die Temperatur der Wärmebehandlung 50 °C und die Dauer der Wärmebehandlung 6

Stunden beträgt.

Herstellungsbeispiel 2

Ein Verfahren zur Herstellung einer Molekularmaschine auf Milchsäurebasis, wobei das

Molverhältnis von Betain zu Milchsäure auf 1:2 eingestellt wurde, die Viskosität des Gemisches 308 mPa-s betrug und die übrigen Schritte und Parameter die gleichen waren wie in

Herstellungsbeispiel 1, um eine Molekularmaschine auf Milchsäurebasis A2 zu erhalten.

Herstellungsbeispiel 3

Ein Verfahren zur Herstellung einer Molekularmaschine auf Milchsäurebasis, bei dem das

Molverhältnis von Betain zu Milchsäure auf 1:3 eingestellt wurde, die Viskosität des Gemisches 280 mPa-s betrug und die restlichen Schritte und Parameter die gleichen waren wie die von

Herstellungsbeispiel 1, um eine Molekularmaschine A3 auf Milchsäurebasis herzustellen.

Herstellungsbeispiel 4

Molverhältnis von Betain zu Milchsäure auf 1:4 eingestellt wurde, die Viskosität des Gemisches 271 mPaes betrug und die restlichen Schritte und Parameter die gleichen waren wie die des

Herstellungsbeispiels 1, und eine Molekularmaschine auf Milchsäurebasis A4 hergestellt wurde.

Herstellungsbeispiel 5

Ein Verfahren zur Herstellung einer molekularen Maschine auf Milchsäurebasis, wobei

Betain durch Picloram ersetzt wird und die übrigen Schritte und Parameter die gleichen wie in

Herstellungsbeispiel 1 sind, um eine molekulare Maschine auf Milchsäurebasis AS herzustellen.

Herstellungsbeispiel 6

Ein Verfahren zur Herstellung einer molekularen Maschine auf Milchsäurebasis durch

Ersetzen von Betain durch Lävulinsäure, wobei die übrigen Schritte und Parameter die gleichen sind wie in Herstellungsbeispiel 1, um eine molekulare Maschine auf Milchsäurebasis A6 herzustellen.

Vergleich mit Herstellungsbeispiel 1

Ein Verfahren zur Herstellung einer auf Milchsäure basierenden molekularen Maschine, wobei Betain durch Cholinchlorid ersetzt wird und die restlichen Parameter die gleichen sind wie in Herstellungsbeispiel 1, um eine auf Milchsäure basierende molekulare Maschine DA1 herzustellen.

Testbeispiel 1: Infrarotspektralanalyse von Lactobetain-Molekülmaschinen

Ob die Milchsäure-basierte Molekülmaschine erfolgreich synthetisiert wurde, wurde durch die Analyse der Verschiebungen und Verbreiterungen der wichtigsten funktionellen Gruppen der

Milchsäure-Betain-Molekülmaschinen A1 bis A4 und der synthetisierten Monomere, Betain und

Milchsäure, mittels eines Infrarot-Spektroskopie-Analysators bestimmt.

Konkret wurden die zu untersuchenden Proben der auf Milchsäure basierenden molekularen

Maschinen A1 bis A4, die Betains und der Milchsäure mit KBr im Verhältnis von 1:50 gemischt bzw. gepresst, und der Wellenlängen-Scanbereich war 500 ¢cm™'~4000 cm’. Wie in Bild 2 dargestellt, zeigt Bild 2 die Infrarotspektren der Milchsäure-Betain-Molekularmaschinen A1 bis

A4, der synthetischen Monomere Betain und Milchsäure, wobei 1:1 die Milchsäure-Betain-

Molekularmaschine A1, 1:2 die Milchsäure-Betain-Molekularmaschine A2, 1:3 die Milchsäurb 509043

Betain-Molekularmaschine A3 und 1:4 die Milchsäure-Betain-Molekularmaschine A4 bezeichnet.

Bei der Milchsäure ist der breitere Absorptionspeak um 3450 cm”! auf die Hydroxylgruppe an der

Carboxylgruppe in der Milchsäure zurückzuführen, und der breitere Absorptionspeak bei etwa 1680 cm”! ist auf die Carbonylgruppe in der Milchsäure zurückzuführen. Für Betain erschienen zwei Absorptionspeaks bei 3300 cm”! und 1620 cm”!, die das Vorhandensein von Hydroxyl- und

Aminogruppen in Betain bestätigen. Bei den Milchsäurebetainen A1 bis A4 weisen drei starke und verbreiterte Absorptionspeaks bei etwa 3635 cm”! ~ 3097 cm, 1784 em”! ~ 1682 em”!, 1677 cm”! ~ 1525 cm“, die gegenüber den jeweiligen charakteristischen Peaks der Monomere verschoben sind, auf das Vorhandensein von -COOH---NH-Wasserstoffbindungen hin. Die Bildung von

Wasserstoffbrücken führt zu einer Abnahme der Schwingungsfrequenz und einer Verbreiterung der Spektralbande, was zu einer Verschiebung, Verbreiterung und sogar Uberlappung der charakteristischen Peaks der beiden Komponenten führt.

Testbeispiel 2: Thermogravimetrische Kurvenanalyse von Molekülmaschinen auf

Milchsäurebasis

Fin thermogravimetrischer Analysator, Modell Mettler TGA2, wurde verwendet, um die thermische Stabilität und thermische Zersetzung der Milchsäure-Betain-Molekularmaschinen A1 bis A4, der synthetischen Monomere Betain und Milchsäure zu analysieren. Die Versuchsproben der Milchsäure-Betain-Molekularmaschinen A1 bis A4, des Betains und der Milchsäure wurden durch Stickstoff geschützt, und die Temperaturerhôhungsrate wurde auf 10 °C/min eingestellt, und die Temperatur wurde von Raumtemperatur 25 °C auf 600 °C erhôht, und die Kurven der thermogravimetrischen Analysen (Thermogravimetric Analyzer, TGA) wurden aufgezeichnet, um die Zersetzungstemperaturen der entsprechenden Proben zu erhalten. Die thermogravimetrischen

Kurven der Lactobetain-Molekularmaschinen A1 bis A4, der synthetischen Monomere Betain und

Milchsäure sind in Bild 3 schematisch dargestellt, wobei 1:1 die Lactobetain-Molekularmaschine

A1, 1:2 die Lactobetain-Molekularmaschine A2, 1:3 die Lactobetain-Molekularmaschine A3 und 1:4 die Lactobetain-Molekularmaschine A4 bezeichnet. Wie in Bild 3 zu sehen ist, verlangsamen die Zersetzungstemperaturen der Lactobetain-Molekularmaschinen Al bis A4 den

Gewichtsreduktionsgradienten zwischen ihren reinen Rohstoffkomponenten. Die thermische

Stabilität der Lactobetain-Molekularmaschine ist im Vergleich zu monomerer Milchsäure etwas besser.

Testbeispiel 3: Quantenchemische Berechnungsanalyse einer auf Lactobetain basierenden molekularen Maschine

Bild 4 zeigt die quantenchemische Berechnungsanalyse der molekularen Maschine A1 von

Lactobetain, wie in Bild 4 dargestellt. (a) ist das Diagramm der Strukturoptimierung; (b) ist das

Diagramm der Analyse des elektrostatischen Oberflächenpotentials (Electrostatic surface potential,

ESP); (c) das Analysediagramm der Indikatorfunktion für die Interaktionsregion (Interaction region indicator function, IRI);

Wie in (a) in Bild 4 gezeigt, konvergierten die Geometrieoptimierung und die

Frequenzberechnung der Milchsäure-Betain-Molekülmaschine und es wurde keine imaginäre

Frequenz gefunden, was darauf hindeutet, dass die aktuelle Struktur an den lokalen Minima der potenziellen Energieoberfläche liegt und stabil existieren kann. Es gibt eine wechselwirkende

Wasserstoffbindung zwischen der Hydroxylgruppe der Milchsäure und der Carbonylgruppe des

Betains, und die Bindungslänge der Wasserstoffbindung beträgt in dieser Ausführungsform 1,41046 À, und der Gruppenabstand zwischen Milchsäure und Betain in der Milchsäure-Betain-

Molekülmaschine ist kleiner als der van der Waals-Radius. Basierend auf der optimierten Struktk}/509043 der Milchsäure-Betain-Molekularmaschine werden die Wechselwirkungsgruppen zwischen Betain und Milchsäure durch eine Infrarotspektralanalyse gegenseitig bestätigt.

Der Mechanismus der Bildung der molekularen Maschinerie von Milchsäurebetain wurde mit Hilfe von ESP qualitativ analysiert, wie in Bild 4(b) dargestellt. Der Carboxylbereich von

Betain ist elektronegativ und ein großer Bereich um das eingekapselte Stickstoffatom ist elektropositiv. Die Hydroxylregion der Milchsäure ist elektropositiv und die Carboxylregion 1st elektronegativ. Nach der Bildung der molekularen Maschinerie von Betainlactat werden der elektropositive Bereich des Betains und der elektronegative Bereich der Milchsäure zueinander hingezogen, um eine stabile molekulare Maschinenstruktur zu bilden. Die Indikatorfunktion für

Wechselwirkungsbereiche (IRI) wurde verwendet, um die molekularen van-der-Waals-Kräfte, die

Wasserstoffbrückenbindungen und die räumliche AbstoBung zu charakterisieren, wie in (c) in Bild 4 dargestellt, wobei die blaue Farbe in der Wechselwirkungsbeziehung für starke anziehende

Wechselwirkungen wie Wasserstoffbrückenbindungen steht und die rote Farbe für einen starken räumlichen Widerstand, wobei es für die Atome der entsprechenden zwei Bereiche umso schwieriger ist, sich zueinander anzuziehen, je stärker der räumliche Widerstand ist; und der große grüne Bereich im Übergang steht für die schwachen van-der-Waals-Wechselwirkungskräfte. Der große grüne Bereich der Wechselwirkungskraft zwischen Betain und Milchsäure zeigt an, dass zwischen Betain und Milchsäure eine van-der-Waals-Kraft besteht, und die kleine blaue Scheibe zwischen Hydroxyl- und Carboxylgruppe zeigt an, dass zwischen Betain und Milchsäure auch eine starke Wasserstoffbrückenbindungs-Wechselwirkungskraft besteht.

Ausführungsform 1: (1) Milchsäure-basierte molekulare Maschinenlösung mit einer Konzentration von 10 Gew.-% wurde unter Verwendung von Milchsäure-basierter molekularer Maschine Al als Lösungsmittel und ultrareinem Wasser als Lösungsmittel hergestellt. (2) Dendrobium officinale Pulver wurde der Milchsäure-basierten molekularen

Maschinenlösung hinzugefügt, und der Extrakt wurde durch Ultraschall-

Intensivierungsbehandlung erhalten.

Das Massen-Volumen-Verhältnis von Dendrobium officinale Pulver und Milchsäure- basierter molekularer Maschinenlösung war 1g:50mL; die Parameter der intensiven

Ultraschallbehandlung: die Extraktionstemperatur war 60°C, die Extraktionsdauer war 1h, die

Ultraschallleistung war 300W; die Partikelgröße des Dendrobium officinale Pulvers war nicht größer als 0,3mm. (3) Stellen Sie den pH-Wert des Dendrobium officinale Extrakts auf 6,6 ein, zentrifugieren

Sie den oben genannten Dendrobium officinale Extrakt, wobei der Zentrifugationsparameter 10000 U/min betrug, zentrifugieren Sie 15 Minuten lang, nehmen Sie die obere Schicht des

Uberstands nach der Zentrifugation und filtrieren Sie sie, und die Filtermembran, die fiir die

Filtration verwendet wurde, war eine 0,45-um-Filtermembran fiir die organische Phase, um einen

Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt zu erhalten, der auf der molekularen Maschinerie von Milchsäurebetain basiert, und wurde als Extraktionslôsung B1 bezeichnet.

Ausführungsform 2:

Die Herstellungskonzentration der Lactobetain-Molekularmaschinenlésung in Schritt (1) von

Ausführungsform 1 wurde auf 20 Gew.-% eingestellt, der pH-Wert des Dendrobium officinale

Extrakts wurde auf 6,7 eingestellt, und die übrigen Schritte und Parameter waren die gleichen wie in Ausführungsform 1, und der Extrakt B2 wurde hergestellt.

Ausführungsform 3: LU509043

Einstellen der Zubereitungskonzentration der Lactobetain-Molekularmaschinenlôsung in

Schritt (1) von Ausfithrungsform 1 auf 30 Gew.-%, Einstellen des pH-Werts des Dendrobium officinale Extrakts auf 6,75, und die restlichen Schritte und Parameter waren die gleichen wie die von Ausführungsform 1, um den Extrakt B3 herzustellen.

Ausfiihrungsform 4:

Schritt (1) von Ausfithrungsform 1 auf 40 Gew.-%, Einstellen des pH-Werts des Dendrobium officinale Extrakts auf 6,8, und die restlichen Schritte und Parameter waren die gleichen wie die von Ausführungsform 1, um den Extrakt B4 herzustellen.

Ausführungsform 5:

Die Herstellungskonzentration der Lactobetain-Molekularmaschinenlôsung in Schritt (1) in

Ausführungsform 1 wurde auf 50 Gew.-% eingestellt, der pH-Wert des Dendrobium officinale

Extrakts wurde auf 6,9 eingestellt, und die übrigen Schritte und Parameter waren die gleichen wie in Ausführungsform 1, und der Extrakt BS wurde hergestellt.

Ausführungsform 6:

Ersetzen des gelösten Stoffes in Schritt (1) von Ausführungsform 4 von der auf Milchsäure basierenden Molekülmaschine A1 durch die auf Milchsäure basierende Molekülmaschine AS, und die verbleibenden Schritte und Parameter waren die gleichen wie die von Ausführungsform 4, und die Extraktlôsung B6 wurde hergestellt.

Ausführungsform 7:

Ersetzen des gelösten Stoffes in Schritt (1) von Ausführungsform 4 von einer

Molekularmaschine Al auf Milchsäurebasis durch eine Molekularmaschine A6 auf

Milchsäurebasis, und die restlichen Schritte und Parameter waren die gleichen wie in

Ausführungsform 4, um die Extraktionslosung B7 herzustellen.

Vergleichendes Beispiel 1:

Der gelöste Stoff in Schritt (1) von Beispiel 4 wurde durch eine Molekülmaschine auf

Milchsäurebasis A1 mit einer Molekülmaschine auf Milchsäurebasis DA1 ersetzt, und die übrigen

Schritte und Parameter waren die gleichen wie die von Beispiel 4, um den Extrakt DBI herzustellen.

Vergleichendes Beispiel 2:

Eine Herstellung eines Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts (Wasser), die spezifischen Schritte sind wie folgt: (1) Herstellung eines wässrigen Extrakts: Dendrobium officinale-Pulver wird zu ultrareinem

Wasser gegeben und eine verstärkte Ultraschallbehandlung wird durchgeführt, um einen wässrigen

Extrakt zu erhalten, wobei das Massen-Volumen-Verhältnis von Dendrobium officinale-Pulver zu

Wasser 1 g:50 ml beträgt und die Parameter der verstärkten Ultraschallbehandlung sind: die

Extraktionstemperatur beträgt 60 °C, die Extraktionszeitdauer beträgt 1 h und die

Ultraschallleistung beträgt 300 W; und die TeilchengroBBe des Dendrobium officinale-Pulvers ist nicht größer als 0,3 mm. (2) Extraktion: der obige Extrakt wurde zentrifugiert, wobei der Zentrifugationsparameter 10.000 r/min für 15 min betrug, und die obere Schicht der klaren Flüssigkeit wurde entnommen und filtriert, und die fur die Filtration verwendete Filtermembran war eine 0,45 um Filtermembran für die organische Phase, und die überschüssigen Verunreinigungen wurden entfernt, und der

Extrakt DB2 wurde hergestellt.

Vergleichendes Beispiel 3: LUS09043

Fine Herstellung eines Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts (Cellulase), die einzelnen Schritte sind wie folgt: (1) Herstellung der enzymatischen Lösung: Cellulase wird in Zitronensäurepuffer aufgelöst, um eine enzymatische Lösung zu erhalten; die Konzentration von Cellulase und Zitronensäure beträgt 1 mg/ml. (2) Extraktion: Dendrobium officinale-Pulver wurde der enzymatischen Lösung für eine gewisse Zeit hinzugefügt und dann erhitzt, um das Enzym zu inaktivieren, um den Cellulase-

Extrakt zu erhalten, das Massen-Volumen-Verhältnis von Dendrobium officinale-Pulver zur enzymatischen Lösung war 1g:50mL, und die Enzymextraktionszeit war 2h, die

Enzymextraktionstemperatur war 40°C, und die erhitzte Temperatur zur Inaktivierung des Enzyms war 80°C, und die entsprechende Zeit war 25min. Der obige Extrakt wurde zentrifugiert, wobei der Zentrifugationsparameter 10000 U/min betrug, 15 Minuten lang zentrifugiert wurde und die obere Schicht der klaren Flüssigkeit entnommen und filtriert wurde, und die für die Filtration verwendete Filtermembran war eine 0,45-um-Filtermembran für die organische Phase, und die überschüssigen Verunreinigungen wurden entfernt, so dass der Extrakt DB3 hergestellt wurde.

Testbeispiel 4: Test der Polysaccharidausbeute von Extrakten mit verschiedenen

Konzentrationen von molekularen Maschinenlôsungen auf Milchsäurebasis und verschiedenen

Arten von Extrakten

Basierend auf jeder der oben genannten 7 Ausführungsformen und den 3 unterschiedlichen

Verhältnissen wurde jeder der Extrakte auf die Polysaccharidausbeute der Extrakte gemäß der folgenden Methode getestet: 50 mg der Extrakte B1 bis B7 der obigen 7 Ausführungsformen und der Extrakte DB1 bis

DB3 der 3 Verhiltnispaare wurden in 250-mL-Glasreagenzgläser eingewogen und mit destilliertem Wasser auf jeweils 250 mL verdünnt.

Dann wurden 1 mL der verdünnten Extrakte in 10 mL Glasreagenzgläser und 1 mL destilliertes Wasser in 2 mL Glasreagenzgläser gegeben, und 1 mL wässrige Phenollôsung mit 5 % volumetrischer Konzentration und 5 mL konzentrierte Schwefelsäure mit 98 % volumetrischer

Konzentration wurden in jedes der 10 mL Glasreagenzgläser gegeben.

Dann wurde jedes 10-mL-Glasrôhrchen gut geschüttelt und 30 Minuten lang stehen gelassen, und die Absorption wurde bei 490 nm mit einem UV-Spektrophotometer gemessen und anhand einer Glukose-Standardkurve analysiert und berechnet, um die jeder Extraktionslôsung entsprechende Polysaccharidausbeute zu erhalten. Die Polysaccharidausbeute ist das Verhältnis zwischen der tatsächlich bei der Extraktion gewonnenen Polysaccharidmenge und dem gesamten

Polysaccharid im rohen Dendrobium officinale Pulver und wird im Allgemeinen als Prozentsatz ausgedrückt.

Die Berechnungsformel für die Polysaccharidausbeute lautet:

Polysaccharidausbeute = (tatsächlich gewonnene Polysaccharidmenge/Gesamteinsatz an

Rohstoffen) x 100 %.

Dabei ist die tatsächlich gewonnene Polysaccharidmenge das Gewicht des Polysaccharids im

Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt (d. h. der Extraktionslösung), der Gesamteinsatz an

Rohstoffen das Gesamtgewicht des in die Extraktion eingebrachten Dendrobium-Rohstoffpulvers und die Polysaccharidausbeute der Ausbeutungsindex des extrahierten Polysaccharids.

Die Polysaccharidausbeuten der Extrakte, die durch die sieben Ausführungsformen bzw. drei kontrastierenden Verhältnisse hergestellt wurden, sind in Tabelle 1 dargestellt, und verschiedene

Kombinationen und Konzentrationen von Lactobetain-Molekularmaschinen extrahierter/ 909043

Polysaccharide besser als die traditionelle Wasserextraktion und enzymatische Prozesse. Unter ihnen war der Extraktionseffekt von Lactobetain-basierten molekularen Maschinen am besten, und die Extraktionseffizienz war am höchsten, wenn die Konzentration 40 Gew.-% betrug, die so hoch wie 197,6 mg/g war, was 2,35mal höher war als die der Wasserextraktionsmethode (84,2 mg/g) und 1,86mal höher als die der cellulolytischen Enzymverdauungsmethode (106,2 mg/g), und es hat eine breite Marktanwendung Aussicht. Molekulare Maschinen auf Milchsäurebasis haben nicht nur eine höhere Extraktionseffizienz, sondern sind auch grüne Lösungsmittel mit entzündungshemmender, feuchtigkeitsspendender und Anti-Falten-Wirkung, und ihre

Verwendung kann Abfälle reduzieren, die Prozessabwicklung vereinfachen und Kosten senken.

Tabelle 1 Polysaccharidausbeute der Extrakte B1 bis B7 und der Extrakte DB1 bis DB3 beute mg/g mg/g

E > 2: 20wt% Carnitin 3: 30wt% 1: Cholinchlorid 4: 40wt% 2: Wasserextraktion 5: 50wt% 3: Enzymatische

Extraktion

Ausführungsform 8:

Die Konzentration von 40 Gew.-% der Milchsäure-Betain-Molekularmaschinenlôsung aus

Ausführungsform 4 wurde genommen, die Extraktionstemperatur der Ultraschall-

Intensivierungsbehandlung wurde auf 30°C eingestellt, und die restlichen Schritte und Parameter waren die gleichen wie die von Ausführungsform 4, und der Extrakt B8 wurde hergestellt.

Ausführungsform 9:

Die Konzentration von 40 Gew.-% Betainlactat-Molekularmaschinenlôsung aus

Ausführungsform 4 wurde genommen, und die Extraktionstemperatur der verstärkenden

Ultraschallbehandlung wurde auf 40°C eingestellt, und die übrigen Schritte und Parameter waren die gleichen wie die von Ausführungsform 4, und der Extrakt B9 wurde hergestellt.

Ausführungsform 10:

Die Konzentration von 40 Gew.-% Betainlactat-Molekularmaschinenlôsung aus

Ausführungsform 4 wurde genommen, die Extraktionstemperatur der Ultraschall-

Verstärkungsbehandlung wurde auf 50°C eingestellt, und die restlichen Schritte und Parameter waren die gleichen wie die von Ausführungsform 4, und der Extrakt B10 wurde hergestellt.

Ausführungsform 11:

Die Konzentration von 40 Gew-% Betainlactat-Molekularmaschinenlôsung von

Ausführungsform 4 wurde genommen, und die Extraktionstemperatur der

Ultraschallverstärkungsbehandlung wurde auf 70°C eingestellt, und der Rest der Schritte und

Parameter waren die gleichen wie die von Ausführungsform 4, und die Extraktionslösung B11 wurde hergestellt.

Testbeispiel 5: Test der Polysaccharidausbeute der Extrakte bei verschiedenen

Extraktionstemperaturen der Ultraschall-Intensivierungsbehandlung LU509043

Ausgehend von den in den obigen Ausführungsformen 4, 8 bis 11 hergestellten Extrakten B6,

B8 bis B11 wurde die Polysaccharidausbeute der Extrakte getestet, und die Polysaccharidausbeute jedes Extrakts, der bei verschiedenen Extraktionstemperaturen hergestellt wurde, ist in Tabelle 2 dargestellt, die zeigt, dass die Polysaccharidausbeute mit steigender Temperatur allmählich zunimmt, aber bei einer höheren Extraktionstemperatur von 70 °C leicht abnimmt.

Tabelle 2: Polysaccharidausbeute der einzelnen Extrakte, die bei unterschiedlichen

Extraktionstemperaturen hergestellt wurden.

Ausführungsform 12:

Die Konzentration von 40 Gew.-% der Lactobetain-Molekularmaschinenlôsung aus

Ausführungsform 4 wurde genommen und die Extraktionsdauer der Ultraschall-

Intensivierungsbehandlung wurde auf 0,25 h eingestellt. Die übrigen Schritte und Parameter waren die gleichen wie in Ausführungsform 4, und die Extraktionslôsung B12 wurde hergestellt.

Ausführungsform 13:

Die Konzentration von 40 Gew-% Betainlactat-Molekülmaschinenlôësung aus

Ausführungsform 4 wurde genommen, und die Extraktionsdauer der

Ultraschallverstärkungsbehandlung wurde auf 0,5 h eingestellt. Die übrigen Schritte und

Parameter waren die gleichen wie in Ausführungsform 4, und der Extrakt B13 wurde hergestellt.

Ausführungsform 14:

Die Konzentration von 40 Gew-% Betainlactat-Molekülmaschinenlôësung aus

Ausführungsform 4 wurde genommen und die Extraktionsdauer der Ultraschall-

Verstärkungsbehandlung auf 1,5 h eingestellt. Die übrigen Schritte und Parameter waren die gleichen wie in Ausführungsform 4, und der Extrakt B14 wurde hergestellt.

Ausführungsform 15:

Man nahm die Konzentration von 40 Gew.-% Lactobetain-Molekularmaschinenlôsung aus

Ausführungsform 4 und stellte die Extraktionsdauer der Ultraschall-Intensivierungsbehandlung auf 2,0 h ein. Die übrigen Schritte und Parameter waren die gleichen wie in Ausführungsform 4, und der Extrakt B15 wurde hergestellt.

Testbeispiel 6: Test der Polysaccharidausbeute der Extrakte mit unterschiedlichen

Extraktionsdauern der Ultraschallverstärkungsbehandlung

Ausgehend von den in den obigen Ausführungsformen 4, 13 bis 15 hergestellten Extrakten

B6, B13 bis B15 wurde die Polysaccharidausbeute der Extrakte jeweils getestet, und die

Polysaccharidausbeute der mit unterschiedlichen Extraktionszeiten hergestellten Extrakte ist in

Tabelle 3 dargestellt, und es kann festgestellt werden, dass die Polysaccharidausbeute innerhalb von 1 h allmählich anstieg, aber die Polysaccharidausbeute blieb im Wesentlichen unverändert oder nahm bei einer längeren Extraktionszeit sogar leicht ab. Dies ist darauf zurückzuführen, dass die Extraktionszeit zu lang ist, die Extraktion an ihre Grenzen stößt und mit zunehmender Dauer die lokal hohe Temperatur des Ultraschalls dazu führt, dass einige Verbindungen zu zerfalld 909043 beginnen.

Tabelle 3: Polysaccharidausbeute der Extrakte, die mit unterschiedlichen Extraktionszeiten hergestellt wurden.

Testbeispiel 7: Test der Polysaccharidausbeute von Extrakten mit unterschiedlichen

Einlagerungszeiten unter natürlichem Licht bei Raumtemperatur

Der aus Ausführungsform 4 erhaltene Extrakt B4 mit einer Massenkonzentration von 40

Gew.-% der Lactobetain-Molekülmaschinenlösung, einer Extraktionstemperatur von 60°C für die ultraschallunterstützte Behandlung und einer Extraktionsdauer von 1 h für die ultraschallunterstützte Behandlung wurde unter natürlichem Licht bei Raumtemperatur platziert, und die Polysaccharidkonzentration in der Probe des Extrakts B4 wurde nach 7, 15, 30, 60 bzw. 120 Tagen der Platzierung getestet, und die Ergebnisse der Tests sind in Bild 5 dargestellt: Bild 5 zeigt ein schematisches Diagramm der Veränderungen des Polysaccharidgehalts von Extrakt B4 bei verschiedenen Einlagerungszeiten unter natürlichem Licht bei Raumtemperatur. Als die

Einlagerungszeit von 7 Tagen begann und sich bis zu 120 Tagen bewegte, blieb die

Polysaccharidkonzentration von Extrakt B4 im Wesentlichen unverändert mit einer leichten

Abnahme. Dies deutet darauf hin, dass die Polysaccharide in dem Milchsäure-Betain-

Molekularsystem stabil existieren können und sich innerhalb von 4 Monaten nicht zersetzen, wobei die Stabilität relativ gut ist.

Testbeispiel 8: Auswirkung unterschiedlicher Lagerungszeiten unter natürlichem Licht bei

Raumtemperatur auf den mikrobiologischen Gehalt der Extrakte

Der in Ausführungsform 4 hergestellte Extrakt B4 wurde unter natürlichem Licht bei

Raumtemperatur gemäß den „Mikrobiologischen Testmethoden‘“ in der „Technischen

Spezifikation für die Sicherheit von Kosmetika“ (Ausgabe 2015) gelagert. Nach 7, 15, 30, 60 und 120 Tagen wurden die Proben des Extrakts B4 auf Gesamtbakterien, Gesamtschimmelpilze/Hefen,

Staphylococcus aureus, hitzebeständige coliforme Keime und Pseudomonas aeruginosa untersucht, und die Ergebnisse sind in Tabelle 4 aufgeführt. Der mikrobiologische Gehalt der einzelnen

Mikroorganismen entsprach in verschiedenen Zeitintervallen dem Technischen Kodex für die

Sicherheit von Kosmetika und überschritt die Norm nicht. Dies deutet darauf hin, dass die

Lactobetain-Molekularmaschine das mikrobielle Wachstum wirksam hemmen und die

Verschlechterung des Polysaccharid-Extrakts verhindern kann.

Tabelle 4 Ergebnisse des Keimgehalts im Extrakt B4 nach unterschiedlicher

Einwirkungszeit unter natürlichem Licht bei Raumtemperatur 7 Tage 15 Tage 30 Tage 60 Tage 120 Tage

Bakterien TTT LUS09048 . <500CFU/g <500CFU/g <500CFU/g <500CFU/g <500CFU/g msgesamt

Schimmelpilze/H efepilze <100CFU/g <100CFU/g <100CFU/g <100CFU/g <100CFU/g insgesamt

Staphylococcus Nicht Nicht Nicht Nicht Nicht aureus nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen

Hitzebeständige Nicht Nicht Nicht Nicht Nicht

Coliforme nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen

Pseudomonas Nicht Nicht Nicht Nicht Nicht aeruginosa nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen nachgewiesen

Testbeispiel 9: Test zum Abfangen von DPPH-Radikalen bei Extrakten

Der Extrakt B4, der unter den optimalen Extraktionsbedingungen von Ausführungsform 4 erhalten wurde, wurde wie folgt auf das Abfangen von DPPH-Radikalen getestet.

Ein Probenröhrchen (T), ein Probenhintergrundröhrchen (To), ein DPPH-Röhrchen (C) und ein Lösungsmittelhintergrundröhrchen (Co) wurden eingerichtet, und drei parallele Röhrchen wurden für jede getestete Konzentration des Probenröhrchens (T) des Extrakts B4 eingerichtet, um jeweils mit verschiedenen getesteten Massenkonzentrationen der Extraktlösung konfiguriert zu werden (0,0625 mg/ml, 0,125 mg/ml, 0,25 mg/ml, 0,5 mg/ml, 1 mg/ml, 2 mg/ml), wobei das

Lösungsmittel der Extraktlösung Wasser ist.

Beispielhaft wurde der DPPH-Radikalfängertest mit der Extraktlosung in einer

Massenkonzentration von 1 mg/ml durchgeführt, wobei das folgende Probenröhrchen (T), der

Probenhintergrund (To), das DPPH-Röhrchen (C) und der Lösungsmittelhintergrund (Co) eingerichtet wurden:

Probenröhrchen (T): 1 ml Extraktlösung (Massenkonzentration von 1 mg/ml) + 2 ml Wasser + 1 ml DPPH-Ethanollösung (DPPH-Konzentration von 0,04 mg/ml);

Probenhintergrundröhrchen (To): 1 ml Extraktlösung (Massenkonzentration von 1 mg/ml) + 2 ml Wasser + 1 ml 95%ige Ethanollösung;

DPPH-Röhrchen (C): 3 ml Wasser + 1 ml DPPH-Ethanollösung (DPPH-Massekonzentration: 0,04 mg/ml);

Lösungsmittel-Hintergrundröhrchen (Co): 3 ml Wasser + 1 ml 95%ige Ethanollösung.

Die Lösung in jedem der oben genannten Reaktionsröhrchen wurde in eine Küvette pipettiert und die Absorptionswerte wurden jeweils bei 517 nm bestimmt. Die DPPH-Radikalfängerraten der Extrakte mit unterschiedlichen Massenkonzentrationen wurden mit der DPPH-

Fängerratenformel berechnet, und die spezifischen Ergebnisse sind in Abbildung 6 dargestellt.

DPPH Abfangrate für freie Radikale (%) = (1 — => x 100% wobei T der Absorptionswert des Probenrôhrchens, To der Absorptionswert des

Probenhintergrundrôhrchens, C der Absorptionswert des DPPH-Rôhrchens und Co der

Absorptionswert des Lôsungsmittelhintergrundrôhrchens ist.

Wie in Bild 6, die ein schematisches Diagramm der DPPH-Radikalfängerkurven für jede unterschiedliche Massenkonzentration des Extrakts B4 darstellt, zu sehen ist, gab es einen signifikanten Unterschied in der Fängigkeit von DPPH durch den Extrakt bei eink}/509043

Massenkonzentration von 0,5 mg/mL des Extrakts B4 (p < 0,05), was darauf hinweist, dass der

Extrakt B4 eine bessere Fängigkeitswirkung auf DPPH hat. Und die DPPH-Fangrate stieg allmählich mit der Erhöhung der Massenkonzentration von Extrakt B4.

Testbeispiel 10: Test zum Fangen von Hydroxylradikalen von Extrakten

Der Extrakt B4, der unter den optimalen Extraktionsbedingungen von Ausführungsform 4 erhalten wurde, wurde wie folgt auf den Abbau von Hydroxylradikalen getestet.

Man richtet ein Probenrôhrchen (A Probe), ein Verlustrohrchen (A verlust) und ein unbeschädigtes Röhrchen (A unbeschädigt) ein, wobei für die Probenrôhrchen (T) für jede

Massenkonzentration der Extraktlosung drei parallele Röhrchen einzurichten sind, die jeweils mit einer anderen Massenkonzentration der Extraktlôsung konfiguriert sind, und das Lösungsmittel für die Verdünnung der Extraktlosung ist Wasser.

A Probe (d.h. Probenrôhrchen): 1 mL o-Diazophen-Ethanol-Losung (Konzentration 5 mmol/L) + 2 mL Phosphatpuffer (Konzentration 0,2 mol/L) + 1 ml Extraktlôsung + 1 mL

Eisensulfat-Losung (5 mmol/L) + 1 mL H2O2-Lösung (Konzentration 0,1% v/v);

A Verlust (d.h. verlorenes Röhrchen): 1 mL o-Diazophen-Ethanollôsung (Konzentration 5 mmol/L) + 2 mL Phosphatpuffer (Konzentration 0,2 mol/L) + 1 ml Reinstwasser + 1 mL

Eisensulfatlösung (5 mmol/L) + 1 mL H202-Lösung (Konzentration 0,1% v/v);

A unbeschädigt (d.h. kein Röhrchen beschädigt): 1 mL o-Diazophen-Ethanollôsung (Konzentration 5 mmol/L) + 2 mL Phosphatpuffer (Konzentration 0,2 mol/L) + 1 mL

Eisensulfatlösung (5 mmol/L) + 2 mL Reinstwasser.

Das obige Probenröhrchen (A Probe), das Verluströhrchen (A verlust) und das unbeschädigte

Röhrchen (A unbeschädigt) wurden 1 h lang in ein Wasserbad bei 37 °C gestellt, und die Absorption der darin enthaltenen Lösungen wurde bei einer Wellenlänge von 536 nm bestimmt, um A probe, A

Verlust bZW. A unbeschädigt ZU erhalten.

A Probe À Vertust

Hydroxylradikalfängigkeit (*%) = —— —m— X 100%

À unbeschädigt” DS Verbast wobei A Probe die Extinktion der Lösung im Probenrôhrchen, À vertust die Extinktion der Lösung im Verluströhrchen und A unbeschädigt die Extinktion der Lösung im unbeschädigten Röhrchen ist.

Wie in Bild 7 gezeigt, die ein schematisches Diagramm der Hydroxylradikal-Fangkurven für

Jede unterschiedliche Massenkonzentration des Extrakts B4 darstellt, gab es einen signifikanten

Unterschied in der Fängigkeit von Hydroxylradikalen durch den Extrakt B4 bei 0,5 mg/mL (p < 0,05), was darauf hindeutet, dass der Extrakt B4 eine bessere Fängigkeitswirkung auf

Hydroxylradikale hat, und die Fängigkeit von Hydroxylradikalen wurde mit der Erhöhung der

Massenkonzentration des Extrakts B4 allmählich erhöht.

Testbeispiel 11: Zytotoxizitätstest von Extrakten

Eine Anwendung einer auf Milchsäure basierenden Molekularmaschine für Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt: Eine auf Milchsäure basierende Molekularmaschine für

Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt (Lactobetain-Molekularmaschine) wurde zur

Durchführung von Zytotoxizitätstests verwendet.

Der Extrakt B4, der unter den optimalen Extraktionsbedingungen von Ausführungsform 4 gewonnen wurde, wurde auf Zytotoxizität gegen Fibroblasten der menschlichen Hautschicht getestet.

Prinzip: Die Lebensfähigkeit der Zellen wird durch die Stoffwechselaktivität bestimmt. MTH/509043 (Thiazolylblau) wird in lebenden Zellen metabolisch abgebaut, wobei blau-violetter, unlöslicher

Methylschlamm entsteht, und die Zahl der lebenden Zellen korreliert mit der Farbe des

Methylschlamms, die mit einem Photometer gemessen wird, nachdem er in Alkoholen gelöst wurde.

Schritte: (1) Humane Keratinozyten und humane Hautfibroblasten in 96-Well-Platten mit

Kulturmedium, 100 uL pro Well, beimpfen und 24 h lang inkubieren. (2) Nachdem die Zellen 24 Stunden lang an der Wand angeheftet waren, wurde das Medium verworfen, und 100 uL verschiedener Massenkonzentrationen der B4-Extraktlösung (0,25 mg/mL, 0,5 mg/mL, 1 mg/mL, 2 mg/mL, 4 mg/mL, 8 mg/mL, 16 mg/mL) wurden in jede Vertiefung der

Probengruppe gegeben. Zusätzlich wurden eine Leerwertgruppe (keine B4-Extraktlösung, 100 ul

Kulturmedium zugeben) und eine Negativgruppe (keine B4-Extraktlösung, 100 ul Zellsuspension mit Kulturmedium zugeben) gebildet, wobei jede Massenkonzentration der Probengruppe, der

Leerwertgruppe und der Negativgruppe jeweils 3 Vertiefungen umfasste, so dass insgesamt 54

Vertiefungen gebildet wurden. (3) Nachdem die Zellen 24 Stunden lang bebrütet und kultiviert wurden, wurden 10 ul MTT (Thiazolylblau)-Losung in jede Vertiefung gegeben, und die Zellen wurden für 4 Stunden in den

Inkubator gestellt. (4) Das Kulturmedium verwerfen, 150 ul DMSO (Dimethylsulfoxid) in jede Vertiefung geben und die Absorption bei 490 nm (OD490 nm) nach 10-minütigem Schütteln messen und dann mit der Negativgruppe vergleichen, die nicht mit der B4-Lösung des Extrakts der Prüfsubstanz behandelt worden war, und die Ergebnisse berechnen.

Relative Zellüberlebensrate (%) = TestODagonm, x 100%

NegOD4gonm

Dabei ist TestOD4oonm die durchschnittliche OD490-nm-Extinktion der B4-Extraktlôsung der Prifsubstanz; NegOD4oonm -die durchschnittliche OD490-nm-Extinktion der negativen

Kontrollgruppe.

Wie in Bild 8 gezeigt, ist Bild 8 ein schematisches Diagramm des Trends der relativen

Überlebensrate von menschlichen Hautschichtfibroblasten in Zytotoxizitätstests mit verschiedenen Massenkonzentrationen der Extrakt-B4-Lôsung der vorliegenden Anwendung.

Wenn die relative Überlebensrate der Zellen mehr als 90 % oder mehr beträgt, kann daraus geschlossen werden, dass die B4-Extraktlôsung in der entsprechenden Konzentration keine biotoxische Wirkung hat und eine gute Biokompatibilität aufweist. Bei menschlichen

Hautfibroblasten lag die relative Uberlebensrate des Extrakts B4 in einer Konzentration von 2 mg/mL bei über 90 %, und er wies eine gute Biokompatibilität auf. Daher wurde die

Testkonzentration von 2 mg/mL für den anschließenden Anti-Aging-Test an menschlichen

Hautfibroblasten ausgewählt.

Testbeispiel 12: Test der Wirkung des Extrakts auf den Gehalt an menschlichem Kollagen vom Typ I

Der in Ausführungsform 4 hergestellte Extrakt B4 wurde auf seine Wirkung auf den menschlichen Kollagengehalt vom Typ I getestet:

Prinzip: Ausgehend von Fibroblasten der menschlichen Hautschicht wird die straffende und faltenverhindernde Wirkung der zu prüfenden Proben durch den Nachweis von Veränderungen des

Synthesegehalts von menschlichem Typ-I-Kollagen beurteilt; Typ-I-Kollagen ist einer der

Hauptbestandteile der extrazellulären Matrix der Dermis, der von dermalen Fibroblaster 909043 intrazellulär durch die Synthese von extrazellulär sezerniertem Typ-I-Kollagen synthetisiert und dann nach Abspaltung der Telopeptide durch die Wirkung der präterminalen Kollagenpeptidase zu

Kollagenfasern polymerisiert wird. Daher kann die straffende und faltenverhindernde Wirkung der zu prüfenden Proben anhand der Menge des von den Fibroblasten nach der Verabreichung ausgeschiedenen Typ-I-Kollagens beurteilt werden.

Schritte: (1) Ausbreitung einer Plattenkultur menschlicher Hautfibroblasten in 24-Well-Platten. (2) Herstellung der Lösung: Herstellung von Arbeitslösungen mit unterschiedlichen

Massenkonzentrationen des Extrakts B4, der positiven Kontrollgruppe (d.h. PC-Gruppe) und der negativen Kontrollgruppe (d.h. NC-Gruppe).

Negative Kontrollgruppe: Kulturmedium;

Positivkontrollgruppe: 100 mg/mL Konzentration von Vc (Vitamin C);

Probengruppe 1: 0,5 mg/ml Konzentration des Extrakts B4 mit Wasser als Lösungsmittel;

Probengruppe 2: 1,0 mg/mL Konzentration von Extrakt B4 mit Wasser als Lösungsmittel;

Probengruppe 3: 2,0 mg/ml Konzentration des Extrakts B4, Lösungsmittel ist Wasser; (3) Dosierung: Nach dem oben genannten Testprotokoll, eine negative Kontrollgruppe, eine positive Kontrollgruppe, insgesamt fünf Gruppen von verschiedenen Massenkonzentrationen von

Extrakt B4-Losung, jede Gruppe von drei komplexen Brunnen insgesamt 15 Vertiefungen, um 24-

Well-Platte, wenn die Fusionsrate von menschlichen Dermatofibroblasten erreicht 40% bis 60%, die Gruppe, um das Medikament hinzufügen, wurde jeder Brunnen auf die entsprechenden 250 pL der Arbeitslôsung hinzugefügt, und die Wirkung der Zugabe des Medikaments für 72 h. Das

Medikament wurde verwendet, um den Inhalt des menschlichen Typ-I-Kollagen mit ELISA-Kits zu bestimmen. (4) Der ELISA-Kit wurde verwendet, um den Gehalt an menschlichem Typ-I-Kollagen im

Zellüberstand jeder Gruppe zu bestimmen.

Wie in Bild 9 gezeigt, ist Bild 9 ein schematisches Diagramm der Auswirkungen verschiedener Massenkonzentrationen der Extrakt-B4-Losung und der Kontrollgruppe auf den

Gehalt an menschlichem Typ-I-Kollagen, d.h. der relative Gehalt an menschlichem Typ-I-

Kollagen, der durch verschiedene Massenkonzentrationen der Extrakt-B4-Lôsung und der

Kontrollgruppe in dieser Anwendung getestet wurde.

Schlussfolgerungen des Tests: (1) Im Vergleich zur NC-Gruppe war die Hochregulierung des menschlichen Typ-I-

Kollagengehalts in der PC-Gruppe signifikant (P < 0,05), was darauf hinweist, dass die

Positivkontrolle dieses Tests wirksam war. (2) Im Vergleich zur NC-Gruppe stieg der Gehalt an menschlichem Typ-I-Kollagen in der

B4-Extraktlosung bei den Testkonzentrationen von 0,5 mg/mL, 1 mg/mL und 2 mg/mL an (P < 0,05), und mit zunehmender Konzentration stieg der Gehalt an menschlichem Typ-I-Kollagen.

Dies bedeutet, dass die B4-Extraktlôsung die Fähigkeit hat, die Synthese von menschlichem Typ-

I-Kollagen bei Konzentrationen von 0,5 mg/mL, 1 mg/mL und 2 mg/mL zu fördern, und dass sie in jedem der oben genannten Konzentrationsbereiche eine Anti-Falten- und Straffungswirkung hat.

Testbeispiel 13: Prüfung der MMP-1-Freisetzung von Extrakten aus Fibroblasten der menschlichen Hautschicht

Der in Ausfithrungsform 4 hergestellte Extrakt B4 wurde auf die Freisetzung von MMP-1 aus menschlichen Hautschichtfibroblasten getestet.

Prinzip: Der Testkit verwendet die Doppelantikörper-Sandwich-Enzymimmunoassay / 509043

Technologie. Der spezifische Anti-Human-MMP-1-Antikörper ist auf einer enzymmarkierten

Platte mit hoher Affinität vorbeschichtet. Standardlösungen, zu untersuchende Proben und biotinylierte Nachweisantikörper werden in die Vertiefungen der Platte gegeben. Nach der

Inkubation bindet das in den Proben vorhandene MMP-1 an den Festphasen-Antikörper und den

Nachweisantikörper. Nach dem Waschen, um ungebundenes Material zu entfernen, wird mit

Meerrettichperoxidase markiertes Streptavidin (Streptavidin-HRP) hinzugefügt. Nach dem

Waschen wird das chromogene Substrat TMB zugegeben, und die Farbe wird unter Ausschluss von Licht entwickelt; der Farbton der Farbreaktion ist proportional zur Konzentration von MMP- 1 in der Probe.

Schritte: (1) Ausbreitungskultur von menschlichen Hautfibroblasten wurde in 24-Well-Platten für 18 bis 24 Stunden durchgeführt. (2) Waschen Sie die Zellen zweimal mit PBS-Puffer und bereiten Sie das Erhaltungsmedium mit verschiedenen Massenkonzentrationen des Extrakts B4, der positiven Kontrollgruppe (d.h.

PC-Gruppe) und der negativen Kontrollgruppe (d.h. NC-Gruppe) vor.

Negative Kontrollgruppe: Kulturmedium;

Positivkontrollgruppe: 100 mg/mL Konzentration von Vc (Vitamin C);

Probengruppe 3: 2,0 mg/ml Konzentration des Extrakts B4, Lösungsmittel ist Wasser; (3) Drug-Zusatz: nach dem oben genannten Testprotokoll, eine negative Kontrollgruppe, eine positive Kontrollgruppe, insgesamt fünf Gruppen von verschiedenen Massenkonzentrationen von

Well-Platte, wenn die Fusionsrate von menschlichen Dermatofibroblasten erreicht 40% bis 60%, die Gruppe fur die Zugabe des Medikaments, bzw., jedes gut wurde hinzugefügt, um die entsprechende Arbeitslosung von 250 uL, die Zugabe des Medikaments wirkte für 72 h. Das

Medikament wurde in die Arbeitslôsung hinzugefügt, und die Arbeitslôsung wurde zu jedem

Brunnen hinzugefügt, und das Medikament wirkte für 72 Stunden. (4) Der ELISA-Kit wurde verwendet, um den Gehalt an MMP-1 im Zellüberstand jeder

Gruppe zu bestimmen.

Wie in Bild 10 dargestellt, zeigt Abb. 10 das schematische Diagramm des Tests des relativen

MMP-1-Gehalts für den MMP-1-Freisetzungstest von Fibroblasten der menschlichen Hautschicht mit verschiedenen Massenkonzentrationen der B4-Extraktlôsung und der Kontrollgruppe.

Schlussfolgerung des Tests: (1) Es gab eine signifikante Abnahme (P<0,05) des MMP-1-Gehalts in der PC-Gruppe im

Vergleich zur NC-Gruppe, was darauf hinweist, dass die Positivkontrolle für diesen Test wirksam war. (2) Im Vergleich zur NC-Gruppe wurde eine signifikante Abnahme (P<0,05) des MMP-1-

Gehalts der B4-Extraktlôsung bei den getesteten Konzentrationen von 0,5 mg/mL, 1 mg/mL und 2 mg/mL festgestellt, wobei der MMP-1-Gehalt mit zunehmender Konzentration abnahm. Dies bedeutet, dass die Lösung des Extrakts B4 in der Lage ist, die Sekretion von MMP-1 bei

Konzentrationen von 0,5 mg/mL, 1 mg/mL und 2 mg/mL zu hemmen, und dass sie in jedem dieser

Konzentrationsbereiche eine Anti-Falten- und Straffungswirkung hat.

Testbeispiel 14: Prüfung der MMP-3-Freisetzung von Extrakten aus der menschlichen

Hautschichtfibroblasten LU509043

Der in Ausfithrungsform 4 hergestellte Extrakt B4 wurde auf die Freisetzung von MMP-3 aus menschlichen Hautschichtfibroblasten getestet.

Prinzip: Die Bestrahlung von kultivierten Fibroblasten mit UVA (langwellige ultraviolette

Strahlung) führt zu einer hohen mRNA-Expression von MMP-3 (Matrix-Metalloproteinase), und das Ausmaß des Abbaus der extrazellulären Matrix ist eng mit MMP-3 verbunden. Wenn

Hautzellen MMPs übermäßig exprimieren, wird die Struktur der extrazellulären Matrix der Dermis stark geschädigt, insbesondere die normale Struktur der Kollagenfasern und der elastischen Fasern.

Ein In-vitro-Modell der vorzeitigen Alterung menschlicher Hautfibroblasten wurde verwendet, um die vorzeitige Alterung durch UV-Licht zu induzieren. Die Anti-Falten-Wirkung des Extrakts B4 wurde durch die Bestimmung des Gehalts an Matrix-Metalloproteinase-3 (MMP-3) in der extrazellulären Matrix bewertet.

Schritte: (1) Die Ausbreitungskultur von menschlichen Hautfibroblasten in 24-Well-Platten wurde 18 bis 24 Stunden lang durchgeführt. (2) Flüssigkeitszubereitung: Herstellung von Arbeitslôsungen mit unterschiedlichen

Negativkontrollgruppe: Kulturmedium;

Positivkontrollgruppe: 100 mg/mL Konzentration von Ve (Vitamin C);

Probengruppe 2: 1,0 mg/ml Konzentration des Extrakts B4 mit Wasser als Lösungsmittel;

Probengruppe 3: 2,0 mg/ml Konzentration des Extrakts B4, Losungsmittel ist Wasser; (3) Medikamentenzugabe: nach dem obigen Testprotokoll, eine negative Kontrollgruppe, eine positive Kontrollgruppe, insgesamt 5 Gruppen unterschiedlicher Qualität Konzentrationen von Extrakt B4-Losung, jede Gruppe von 3 Replikat-Vertiefungen für insgesamt 15 Vertiefungen, um 24-Well-Platte, wenn die Fusionsrate von menschlichen Dermatofibroblasten erreicht 40% bis 60%, die Gruppe wurde auf das Medikament hinzugefügt, und jede Vertiefung wurde auf die entsprechenden 250 ul der Arbeitslôsung hinzugefügt, und die Wirkung der Zugabe des

Medikaments für 72 h. Die Gruppe wurde mit frischem Medium für 4 Stunden bestrahlt, und dann wurde jede Vertiefung mit frischem Medium bestrahlt. (4) UVA-Stimulation: Nach 4 Stunden Verabreichung des Medikaments wurde die UVA-

Bestrahlung gemäß dem oben genannten Testprotokoll für die Gruppen durchgeführt, die stimuliert werden mussten; nach Beendigung der Bestrahlung wurde das alte Medium in jeder

Vertiefung durch frisches Medium ersetzt und in den Zellkulturbrutschrank gestellt, um die

Kultivierung für 20 Stunden fortzusetzen. (5) Der ELISA-Kit wurde zur Bestimmung des MMP-3-Gehalts im Zellüberstand jeder

Gruppe verwendet.

Wie in Bild 11 dargestellt, zeigt Bild 11 ein schematisches Diagramm des Vergleichs des relativen Gehalts an MMP-3 zwischen verschiedenen Massenkonzentrationen der B4-

Extraktlösung und der Kontrollgruppe für den MMP-3-Freisetzungstest an menschlichen

Dermalschichtfibroblasten.

Schlussfolgerung: (1) Im Vergleich zur NC-Gruppe war der MMP-3-Gehalt in der PC-Gruppe signifikant verringert, was darauf hindeutet, dass die positive Kontrolle dieses Tests wirksam war.

(2) Im Vergleich zur NC-Gruppe zeigte die B4-Extraktlösung eine signifikante Abnahnt&/509043 (P<0,05) des MMP-3-Gehalts bei den getesteten Konzentrationen von 0,5 mg/mL, 1 mg/ML und 2 mg/mL, wobei der MMP-3-Gehalt mit steigender Konzentration stärker abnahm. Dies bedeutet, dass die Lösung des Extrakts B4 die Fähigkeit besitzt, die MMP-3-Sekretion bei Konzentrationen von 0,5 mg/mL, 1 mg/mL und 2 mg/mL zu hemmen, und in jedem der oben genannten

Konzentrationsbereiche eine Anti-Falten- und Straffungswirkung aufweist.

In der vorliegenden Erfindung wurden die vorbereiteten molekularen Maschinen auf

Milchsäurebasis in Verbindung mit einem ultraschallunterstützten Extraktionsverfahren verwendet, um die Polysaccharidverbindungen von Dendrobium officinale zu extrahieren, und die treibende

Kraft für die Bildung der molekularen Maschinen auf Milchsäurebasis wurde auf molekularer

Ebene durch Infrarotspektroskopie und quantenchemische Berechnungsanalyse analysiert; Dann wurden die optimalen Extraktionsbedingungen durch einen einseitigen Versuchsplan ermittelt:

Lactobetain-Molekularmaschinen-Konzentration von 40 Gew.-%, Extraktionstemperatur von 60°C und Extraktionszeit von 1 Stunde.

Die Ausbeute an Polysacchariden im endgültigen Dendrobium officinale Polysaccharid-

Extrakt (auch Extrakt genannt) betrug 197,6 mg/g und war damit 2,35Mal höher als bei der

Wasserextraktionsmethode (84,2 mg/g). Lactobetain-Molekularmaschinen haben nicht nur eine höhere Extraktionseffizienz, sondern sind auch grüne Lösungsmittel mit entzündungshemmenden, feuchtigkeitsspendenden und faltenverhindernden Figenschaften, und ihre Verwendung reduziert den Abfall, vereinfacht die Prozessabwicklung und senkt die Kosten. Der aus der obigen

Zubereitung gewonnene Dendrobium officinale Extrakt, dessen Hauptbestandteile

Polysaccharidverbindungen, molekulare Maschinen auf Milchsäurebasis und Wasser sind, kann als neues kosmetisches Rohmaterial verwendet werden, das ausgezeichnete antioxidative, faltenverhindernde, feuchtigkeitsspendende und andere Wirkungen aufweist.

Das Vorstehende ist nur eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Anmeldung und soll die vorliegende Anmeldung nicht einschränken, und alle Änderungen, gleichwertigen

Ersetzungen und Verbesserungen, die im Rahmen des Geistes und der Grundsätze der vorliegenden

Anmeldung vorgenommen werden, fallen in den Schutzbereich der vorliegenden Anmeldung.

Claims

Ansprüche LU509043

1. Eine molekulare Maschine auf Milchsäurebasis, dadurch gekennzeichnet, dass sie ein erstes funktionelles Motiv und ein zweites funktionelles Motiv umfasst; Das erste funktionelle Basiselement ist mit dem zweiten funktionellen Basiselement durch Wasserstoffbrückenbindungen verbunden; Das erste funktionelle Basiselement ist ein Milchsäuremolekül, und das zweite funktionelle Basiselement ist mindestens eines von einem Betainmolekül, einem Absinthinmolekül oder einem Lävulinsäuremolekül; Wobei das Dendrobium officinale Polysaccharid O-Acetyl-B-D-Glucan umfasst, wobei die Hauptkette des O-Acetyl-ß-D-Glucans D-Mannose und D-Glucose umfasst, die durch eine ß-1,4- glykosidische Bindung verbunden sind; Die auf Milchsäure basierende molekulare Maschinerie zum Antreiben der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinerie, um eine Erkennungsbindung an ein Dendrobium officinale Polysaccharid durch die Affinität der Wasserstoffbindung herzustellen, umfassend das Antreiben der auf Milchsäure basierenden molekularen Maschinerie, um eine Erkennungsbindung an die ß- 1,4-Glykosidenbindung des Dendrobium officinale Polysaccharids durch die Affinität der Wasserstoffbindung herzustellen; Wobei, wenn das zweite funktionelle Gruppenelement das Betainmolekül ist, die molekulare Maschine die molekulare Strukturformel CH3CH(OH)COO-H-OOCCH2N(CH3)3 hat.

2. Fine molekulare Maschine auf Milchsäurebasis nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das molare Verhältnis des Elements der ersten funktionellen Gruppe zu dem Element der zweiten funktionellen Gruppe 1:(0,25~4) beträgt.

3. Ein Verfahren zur Herstellung einer molekularen Maschine auf Milchsäurebasis nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass es die folgenden Schritte umfasst Mischen des Betains, des Piclorams oder des Levulins mit der Milchsäure, um ein Gemisch zu erhalten, Erhitzen des Gemischs, bis die Viskosität des Gemischs 200 mPa-s bis 500 mPa-s beträgt, um eine Molekularmaschine auf Milchsäurebasis zu erhalten; Wobei die Temperatur der Erhitzungsbehandlung 30 °C bis 60 °C beträgt.

4. Ein Herstellungsverfahren für einen Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt, dadurch gekennzeichnet, dass es die folgenden Schritte umfasst: Schritt S100, Mischen des Dendrobium officinale Pulvers mit einer Lösung einer molekularen Maschine auf Milchsäurebasis und anschließende Intensivierungsbehandlung mit Ultraschall, um einen Dendrobium officinale Extrakt zu erhalten; Schritt S200, Zentrifugieren des Dendrobium officinale Extrakts, Entnahme der oberen Schicht der klaren Flüssigkeit nach der Zentrifugation und Filtrieren derselben, um einen Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt zu erhalten; Wobei der gelöste Stoff in der auf Milchsäure basierenden Molekülmaschinenlôsung eine auf Milchsäure basierende Molekülmaschine gemäß Anspruch 1 oder 2 ist, und/oder eine auf Milchsäure basierende Molekülmaschine ist, die durch das Herstellungsverfahren gemäß Anspruch 3 hergestellt wurde.

5. Das Herstellungsverfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass das Massen- Volumen-Verhältnis des Dendrobium officinale Pulvers und der molekularen Maschinenlôsung auf Milchsäurebasis in Schritt S100 1:5 g/mL~70 g/mL beträgt; und/oder die TeilchengrôfBe des Dendrobium officinale Pulvers nicht größer als 0,3 mm ist.

6. Das Herstellungsverfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass dt&/509043 Konzentration der molekularen Maschinenlôsung auf Milchsäurebasis in der Stufe S100 5 Gew.-% bis 80 Gew.-% beträgt.

7. Das Herstellungsverfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass die Parameter der Ultraschall-Verstärkungsbehandlung in Schritt S100 sind: die Temperatur der Ultraschall- Verstärkungsbehandlung ist 30 °C~80 °C, die Dauer der Ultraschall-Verstärkungsbehandlung ist 0,5 h~2 h, und die Ultraschallenergie ist 100 W~500 W.

8. Das Herstellungsverfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass die Parameter der Zentrifugalbehandlung in dem Schritt S200 sind: die Rotationsgeschwindigkeit der Zentrifugalbehandlung beträgt 6000 r/min ~ 12000 r/min, die Dauer der Zentrifugalbehandlung beträgt 5 min ~ 15 min, und die Filtrationsmembran der Zentrifugalbehandlung ist eine Filtrationsmembran der organischen Phase, und die Porengrofle der Filtrationsmembran der organischen Phase ist nicht größer als 0,45 um.

9. Die antioxidative und Anti-Aging-Anwendung eines Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakts auf der Grundlage eines Zubereitungsverfahrens nach einem der Ansprüche 4 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass sie ein Hautpflegeprodukt umfasst, das aus dem Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt zur Verwendung bei der antioxidativen und Anti- Aging-Reparatur der menschlichen Haut hergestellt ist.

10. Die antioxidative und Anti-Aging-Anwendung von Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, dass der Dendrobium officinale Polysaccharid-Extrakt auch fiir Zytotoxizitätstests, Pflastertests der menschlichen Haut oder kosmetische Routinetests verwendet wird.