LU82369A1 - Sels mixtes d'acides amines essentiels ou semi-essentiels et de leurs analogues exempts d'azote,et utilisation pour traiter des desordres renaux - Google Patents

Description

L'invention concerne des sels mixtes d'acides aminés essentiels ou semi-essentiels et des produits analogues (désignés par analogues dans la suite), exempts d'azote, de ces acides, ainsi que l’utilisation de ces nouveaux 5 sels dans le traitement de désordres hépatiques et rénaux. Plus particulièrement, l’invention concerne de nouveaux composés en eux-mêmes, des compositions contenant des mélanges de ces nouveaux composés, et des procédés de traitement utilisant ces composés.

Les acides aminés essentiels dans le 10 corps humain sont les L-isoleucine, L-leucine, L-valine, L- . méthionine, L—phénylalacifflS, L-histidine, L-lysine, L-tryptophane et » L-thréonine. Des acides aminés semi-essentiels pour l’homme sont les L-thyrosine,L-cystine et L-cystéine, que l'on suppose nécessaires à IEB croissance optimale des enfants. L’arginine est essentielle pny les enf&nls qui manquent d ’un des enzymes du cycle de l’uiée^ mais elle n’est généralement pas considérée comme essentielle ou semi-essentielle chez l’homme normal, bien qu’elle puisse présenter une valeur nutritionneUs. L’ornithine n’est pas considérée non plus essentielle ou semi-essentielle pour l’homme, mais elle 20 peut remplacer l’arginine. Néanmoins, pour des questions de facilité de référence dans l’invention, on va grouper l’arginine et l’ornithine avec les acides aminés semi-essentiels et l’on va s’y référer ainsi, exceptés les combinaisons avec des analogues cétoniques à chaîne ramifiée, qui ont déjà été publiés dans la 25 demande US n° 887.570 de l’auteur.

Les désordres rénaux (comme l’urémie), les maladies hépatiques (comme 1 ’hyperammonémie et 1 ’encéphalLopairne portal-systémique), et d’autres maladies détruisant les protéines ou l’azote chez l’homme, entraînent de graves déficiences en 30 acides aminés essentiels et/ou semi-essentiels, qui sont nécessaires pour former des protéines dans le corps. Ainsi, des individus souffrant de désordres rénaux et hépatiques doivent, soit être privés ou restreints dans leur ingestion de protéines, à cause de l’incapacité des reins d’éliminer les déchets azotés, 35 soit ils présentent une intolérance aux protéines, due aux nausées, à 1’agitation,àla léthargie et aux processus physiques et mentaux qui peuvent survenir après l’ingestion de protéines.

Les traitements selon l’art antérieur de ces désordres, détruisant l’azote et les protéines, comprennent 9 .

déficience en protéines (voir US 2.457*820 de Howe et al·). De même, Bergstrom et al. décrivent dans US 3.764.703 l'utilisation il d’un mélange de huit acides aminés essentiels, éventuellement j combinés avec la L-arginine ou la L-histidine ou avec les deux, 5 que le brevet appelle des acides aminés '‘semi-essentiels” pour le traitement de conditions urémiques causées par une insuffi- « J sance rénale.

Plus récemment, le traitement de ces désordres a été perfectionné par l'utilisation de mélanges I s · , 5 10 d'analogues exempts d'azote des acides aminés essentiels, I nommément les analogues alpha-cétoniques et alpha-hydroxylés de I * la plupart des acides aminés essentiels, en commun avec les I * acides aminés essentiels eux-mêmes dont les analogues ne sont 1 * , j pas disponibles ou efficaces. Des exemples de mélangés et de ;j 15 traitements de ce type sont décrits et revendiqués dans les | brevets US 4.100.160, 4.100.161 et 4.100.293, du 11 Juillet 1978.

|i| Un autre traitement de ces désordres est décrit dans la demande

H

!' co-pendante n° 887.570 de l'auteur, présentée le 17 Mars 1978, jjj intitulée "Sels d'ornithine et d'arginine d'acides cétoniques à if 20 chaîne ramifiée, et utilisations dans les traitements de Î désordres hépatiques et rénaux".

Un obstacle important à 1'-utilisation d'acides aminés essentiels eux-mêmes ou de mélanges d'analogues S exempts d'azote d'acides aminés essentiels dans le traitement 25 de ces désordres détruisant l'azote ou les protéines est le j goût désagréable de ces produits. Ainsi, pratiquement tous les i acides aminés essentiels eux-mêmes et tous les analogues céto- * f niques (comme les acides libres) sont agressifs et désagréables, ij * ‘ jj Les sels de calcxum et de sodium des analogues ne sont pas I 30 aussi déplaisants que les acides aminés essentiels eux-mêmes, I mais on peut difficilement les traiter d’agréables, ce qui fait ] que l’utilisation orale de ces produits à des fins thérapeutiques • est limitée. Le seul produit par voie orale commercialisé dans j ce pays (USA) et contenant exclusivement des acides aminés j 35 essentiels est un produit commercialisé par 1ΘΕ laboratoires I M C Gaw sous la marque "AMINAID" et qui a un goût très dé s a- t j gréable. Ce goût désagréable peut être masqué par l'enrobage ou la dragéification des acides aminés essentiels ou de leurs 1 analogues, mais il reste que l'on se plaint encrre d'un arrière- 3

Un autre obstacle important à l'utilisation des acides aminés eux-mêmes est leur solubilité limitée dans l'eau, de sorte qu’ils ne peuvent être administrés par voie parentérale en solution concentrée. Par exemple, le ‘seul produit 5 commercialisé actuellement sur le marché US, contenant uniquement des acides aminés essentiels, pour injection, est un produit des laboratoires Mc Gaw. commercialisé sous la marque "NEPHRAMINE" Cette solution aqueuse à °/o de huit acides aminés essentiels ï (histidine exclue) est très proche de la limite de solubilité 10 à 0° C. Le volume d'eau qui doit être administré limite l’utilisation de ce produit, en particulier dans le cas de faiblesse * rénale importante.

Bien que la lysine et la thréonine soient très solubles, la tyrosine, et la cystine sont très insolubles 15 telles quelles. De ce fait, l'inclusion de tyrosine ou de cystine dans des solutions destinées à l'administration parentérale pour enfants a été impossible. La cystéine est assez soluble, mais elle s'oxyde spontanément en son dimère (la cystine) au sein de solutions neutres ou alcalines ou par exposition à l'air. Le 20 restant des acides aminés essentiels ou semi-essentiels présente une solubilité faible variable.

Les sels acides des acides aminés neutres, comme les sels chlorhydriques, sont très solubles. Cependant, les sels chlorhydriques sont assez acides en solution, et comme ils 25 ne peuvent exister au-dessus de pH2, ils ne sont jamais utilisés. D'un autre côté, les acides aminés basiques sont souvent utilisés comme chlorhydrates, car ils sont moins acides et existent au . » pH physiologique.

Les analogues d'acides alpha-cétoniques ^30 et alpha-hydroxylés sont, pour la plupart, des liquides miscibles à l'eau, à l'exception des analogues des tryptophane, phénylala-nine et tyrosine, qui sont des solides à solubilité limitée dans l'eau. Les sels de sodium de tous les analogues sont solubles, mais l'utilisation des sels de sodium est souvent empêchée par 35 la charge de sodium qu'elle implique, celle-ci pouvant être préjudiciable pour le patient ayant en particulier une maladie du foie ou des reins. Les sels de calcium des analogues sont plutôt insolubles.

Une variété de techniques plutôt com- k

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I Par exemple, lier la tyrosine à un autre acide amine comme l’ala- ; nine par une liaison peptidique, résout bien le problème de i la solubilité, mais c’est un moyen très coûteux. Les analogues cétoniques ou hydroxylés de la tyrosine sont certainement 5 efficaces, et quelque peu solubles, mais ils sont également très coûteux à produire.

Les problèmes ci-dessus de l’art anté- jj rieur sont résolus par les composés nouveaux de l’invention, qui I sont constitues par le produit réactionnel d’un acide amine \ 10 essentiel ou semi-essentiel avec un analogue exempt d'azote 3 d’un acide aminé essentiel ou semi-essentiel.'Les nouveaux û composés salins mixtes sont formés en milieu aqueux,puis l’eau 1 est éliminée pour obtenir un produit sec en poudre. Ces composés j| sont sans saveur ou ont une saveur agréable, et dans la plupart « 15 des cas, mais pas tous t il y a une augmentation substantielle de la solubilité dans l’eau des produits, si l’on compare à ! l’acide aminé et à l’analogue exempt d’azote le moins soluble que l’on a fait réagir pour former le composé.

^ Comme c’est le cas avec les analogues ^ 20 alpharcétoniques et alpha-hydroxylés tels quels des acides | aminés essentiels, les composés de l’invention sont efficaces | comme produits à transformer par l’organisme en acides aminés i i j essentiels ou semi-essentiels, utilisables par l’organisme pour ! la synthèse de protéines. Il s'en suit que des mélanges des 25 composés selon l'invention sont utiles dans le traitement de désordres rénaux ou hépatiques, et autres maladies détruisant ] l’azote ou les protéines, caractérisées par des déficiences en ] certains ou tous les acides aminés essentiels ou semi-essentiels 1 ·» * .dans l'organisme.

5 ^30 Les nouveaux composés de l'invention sont des sels formés par la réaction d’un acide aminé essentiel ou semi-essentiel avec l’analogue exempt d’azote d’un acide aminé essentiel ou semi-essentiel, en particulier un analogue alpha-cétonique ou alpha-hydroxylé de l'acide aminé. Les composés 33 peuvent être représentés de manière simple par la formule empirique suivante : i AN . xH£0 , dans laquelle A est un acide aminé essentiel ou semi-essentiel, i N est un analogue alpha-cétonique ou alpha-hydroxylé d’acide

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5 nombre positif qui n’est pas obligatoirement entier. Ainsi x peut représenter de l’eau d’hydratation ou bien de l’eau libre ou liée provenant du séchage incomplet du produit réactionnel, dans le cas où il n’est pas possible d’obtenir un produit complètement 5 anhydre. Suivant l’hypothèse développée plus loin, chaque composé peut exister sous la forme d’un mélange équilibré d’un * sel mixte avec la carbinolamine et la base de Schiff correspondantes.

* Les neuf acides aminés essentiels et les 10 cinq acides aminés semi-essentiels sont énumérés dans le tableau X, suivis dans la plupart des cas de leurs analogues alpha-cétoniques et alphâ-hydroxylés. Dans certains cas, les analogues exempts d’azote sont connus, ou supposés inefficaces comme matières de départ des acides aminés essentiels dans l’organisme, 15 et cette indication figure dans le tableau X, à la place du nom de l’analogue. Les analogues de l’arginine et de l’ornithine ne sont pas exempts d’azote et tendent à se cycliser, de sorte qu’ils sont probablement inefficaces comme matière de départ d’acide aminé.

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1 TABLEAU I

1 Acides aminés essentiels et semi-essentiels et leurs (analogues correspondants cétoniques et hydroxylés (analogues exempts d'azote) 5 Io- Acides aminés essentiels.(ΕΛΑ) t

Acides aminés neutres Analogues cétoniques Analogues hydroxyte

L-thréonine IE IE

L-valine acide Λ*-cétoisova- PIE

* lérique 4 ^ L-leucine acide ct> -cétoisoca- Plf£ * , proïque K .

1 , L-isoleucine acide (R,S)-*C-céto- PIE

-methylvalérique | L-méthionine acide cl -céto- ^-méthiol acide

I butyrique hydroxy- X-méthioJ

15 butyrique L-phénylalanine acide phénylpyruvique acide L-phényllac- tique L-tryptophane acide indolepyruvique acide indolelac- tique 2q Acides aminés basiques Analogues cétoniques Analogues hydroxylt

L-lysine IE IE

L-histidine acide imidazolepy- acide imidazole- | ruvique lactique II«- Acides aminés semi-essentiels 25

Acides aminés neutres Analogues cétoniques Analogues hydrcKvüé L-tyrosine acide p-hydroxyphényl- acide L-p-hydroxy- pyruvique phényl-lactique IL-cystine acide/5/S * -dithiodipy- acide L-yJ fi ’ -dith: ruvique dilactique i ο o ^ 5 L-cysteine acideyg —mercaptopyru- acide L-yJ -mercap· j vique tolactique | Acides aminés basiques Analogues cétoniques Analogues hydrordé | L-arginine NNF NNF !

35 L-ornithine NNF NNF

i, IE = inefficace comme matière de base d’acide aminé PIE = probablement inefficace comme matière de base d’acide aminé »mm _ __ _______l j#____i____l. to-ttty 7

Les acides aminés essentiels et semi-essentiels sont disponibles dans le commerce, et des procédés pour leur synthèse sont également connus. Dans le cas des acides aminés basiques, notamment la L-lysine, la L-histidine, la L-5 arginine et la L-ornithine, les acides aminés essentiels sont utilisés sous la forme de leurs bases libres. Dans le cas des acides aminés neutres, qui comprennent le reste des acides aminés essentiels et trois acides aminés semi-essentiels, ils sont utilisés sous la forme des acides aminés libres respectifs.

10 La plupart des analogues exempts d’azote ! des acides aminés essentiels ou semi-essentiels sont également disponibles dans le commerce, généralement sous la forme du sel de calcium ou de sodium de l’acide. Des procédés d'obtention des analogues exempts d'azote sont également connus. Les acides 15 libres des analogues peuvent être obtenus à partir de leurs sels, par addition d'un excès d'acide chlorhydrique, suivie d'une extraction à l'éther et d'une évaporation.

Chacun des acides aminés essentiels et semi-essentiels peut se combiner avec n'importe lequel des 20 analogues exempts d'azote, y compris la possibilité de combiner un acide aminé particulier avec un de ses analogues exempts d'azote. En conséquence, il y a en tout plus de 200 composés pouvant être, formés selon l'invention, même en excluant les éventuelles combinaisons avec les analogues qui pourraient être 25 inefficaces comme matières de base pour acide aminé. Toutes les • combinaisons possibles n'ont pas été essayées, mais nous avons exploré un nombre suffisant d'entre elles pour être raisonnable-- * ment certains qu'en tant que classe, ces composés nouveaux de l'invention présentent des avantages par rapport aux acides 30 aminés correspondants essentiels ou semi-essentiels, et par rapport à leurs analogues exempts d'azote correspondants, qu'ils soient utilisés sous forme de sels de sodium ou de calcium ou sous forme d'acides libres.

Des exemples de composés nouveaux de 35 l’invention, ayant été expérimentés, sont représentés dans le tableau II, avec leurs caractéristiques de solubilité et de saveur. A titre de comparaison, la solubilité du moins soluble des deux acides aminés essentiels ou semi-essentiels, auxquels le sel mi Y+.e rn-rrpsrinnrl a é + a rvppsentpfi dans la +.-rnï s Ί àme |.

ΐ 8 i î la quatrième colonne0 Dans certains cas, lorsque les deux acide* 1 aminés correspondants ont des solubilités voisines, les deux ! solubilités ont été incluses dans le tableau.

3 , , - I En général, les nouveaux produits selon I 5 l'invention ont un goût bien plus agréable que les acides J aminés essentiels ou semi-essentiels correspondants, ou que les | analogues exempts d'azote correspondants. Ainsi, les cc—posés n * de l’invention qui ont été testés sont généralement soit dé—* pourvus de saveur, soit possèdent un léger goût sucré qui est I ! 10 assez 'agréable. De plus, les composés de l'invention, considérés I ! ;ί en tant que classe, sont beaucoup plus solubles que les i'ides ! · !; · - aminés essentiels ou semi-essentiels correspondants et qns jj ' certains analogues exempts d'azote. Il est remarquable, tir ji exemple, que 1*acide aminé semi-essentiel très insoluble qu1 j! 15 est la L-tyrosine, devient facilement soluble en combinaison avec i ’ i: l'analogue cétonique de la leucine, par exemple.

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En général, les techniques de préparation j des nouveaux produits selon l'invention sont relativement simples jj et directes. Dans le cas des acides aminés essentiels basiques, M des quantités approximativement équimoléculaires de"la base i 5 libre de l'acide aminé choisi et de l'acide libre de l'analogue ί exempt d'azote choisi sont unis en suspension ou dissoutes dans j-l une quantité d'eau qui est plus que suffisante pour dissoudre le sel que l'on désire obtenir et qui est le produit de la réaction ; i !j entre la base libre et l'acide libre. Pour la dissolution, on. peut 11 | 10 utiliser une agitation et un léger chauffage.

i Au cours de la préparation des sels des j acides amines basiques, on a trouve que la courbe de dosage |j (avec le pH en ordonnée et le nombre de moles d'acide aminé ajouté par mole d'analogue exempt d'azote, en abscisse) obtenue ; 15 en ajoutant la base libre de l'acide aminé à l'analogue acide, i j présente un point d'inflexion qui se trouve coïncider avec le | point pour lequel des quantités équimoléculaires de la base libre ! et de l'analogue acide ont été combinées. Le point d'inflexion correspond également, du moins de façon approximative, au point 20 isoélectrique ou XP de la solution formée par le sel mixte. Pour cette raison, ce point d’inflexion sera désigné dans ce qui suit, pour la commodité, par "point isoélectrique" ou "XP", La figure jointe illustre la courbe de pH pour le dosage de l'acide alpha-cétoisocaproïque avec la base lysine libre. Comme on voit sur 1 25 la figure, IP est le point où le pH varie le plus avec la plus petite addition d'acide.

Le dosage de l'analogue acide par la base libre de l'acide aminé jusqu'au point isoélectrique est préférable car il est apparu qu'ainsi on obtient des composés selon l'inven-30 tion ayant le meilleur goût et probablement la solubilité la plus grande. On pense que la Saveur optimale est atteinte en ce point, car la base libre et l'analogue acide devraient être complètement combinés (en quantités équimoléculaires), de sorte qu’il ne devrait y avoir d’excès ni de la base libre ni de 35 l’analogue acide, pour produire une saveur désagréable par cet excès. Le dosage jusqu’au point isoélectrique est également avantageux, car il est souvent difficile d’assurer des quantités équimoléculaires de réactifs lorsqu’on travaille avec des liquides volatils (analogues acides) et des solides incomplète- 11

La solution résultante de produit est alors évaporée jusqu·à apparition d'un précipité. Le produit est obtenu en maintenant la solution a environ 4° C pendant la nuit, avec ou sans l’addition d'alcool ou d·acétone,”suivie de 5 filtration et de séchage. A la place de la précipitation, le produit peut être avantageusement récupéré par lyophilisation ou séchage par pulvérisation, pour éviter la distorsion du rapport molaire apparaissant lorsqu’on utilise un solvant organique.

En variante, la solution peut être utilisée telle quelle, ou 10 convenablement concentrée ou diluée pour l’utilisation en injection intraveineuse.

Lorsque l’acide aminé essentiel ou semi-essentiel est un acide aminé neutre, il est nécessaire d’utiliser un excès substantiel d’acide libre de l’analogue exempt d’azote 15 par rapport à l’acide aminé. L’acide libre en excès est dissous et éliminé par l'alcool utilisé dans l’étape de la précipitation. Autrement, la technique générale est la même.

Dans les deux cas, le.produit réactionnel , résultant est une poudre blanche sèche, qui n’est pas particuliè- 20 rement hygroscopique. Le produit de la réaction ne contient apparemment pas un excès d'acide libre ou de base libre, car la présence d'acides libres \qui sont des liquides) empêcherait la formation d'une poudre sèche, et la présence de base libre rendrait l'élimination de l’eau presque impossible.

25 Les sels formés par la réaction d'acides aminés neutres et d'analogues exempts d’azote sont quelque peu acides, donnant un pH d'environ 3 dans l’eau. Les sels formés . - à partir de L-lysine ou L-ar^inine et d'analogues divers exempts d'azote donnent un p‘:î d'environ 5 dans l'eau. Les sels .30 de L-hystidine donnent un pH de 4 à 4,5 dans l'eau.

La stabilité des composés nouveaux selon l’invention s'avère comparable à celle des sels de calcium ou de sodium correspondants ces analogues exempts d'azote.

Donc ils sont généralement stables à l’état sec à température 35 ambiante. Les sels se décomposent lentement en solution à la température ambiante, rapidement dans une solution à l’ébullition, et pas du tout en solution glacée.

Il paraît certain que les composés nouveaux selon l'invention présentent les mêmes effets physiolo- f t ? ) 12 a 4 I semi-essentiels et les analogues exempts d’azote auxquels ils correspondent. Il ne semble pas non plus que les composés aient d'autres effets sur l’organisme humain .que les effets des I acides aminés et des analogues exempts d’azote correspondants, ! 5 En conséquence, le choix d'un sel particulier selon l’invention, j devant être préparé et utilisé dans le traitement de désordres rénaux et hépatique's, sera basé sur essentiellement les mêmes critères qu’auparavant, lors de la sélection d’acides aminés essentiels ou semi-essentiels, ou d’analogues exempts d'azote.

10 Néanmoins, les caractéristiques de saveur et de solubilité ne . sont plus des facteurs de limitation.

Les nouveaux composés selon l'invention ne sont généralement pas utilisés individuellement, à moins ! d’indications montrant que le patient ne présente de déficience 15 qu’en deux sortes d'acides aminés essentiels ou semi-essentiels. Cependant, les patients atteints de maladies du foie et des reins, qui suivent un régime pauvre en protéines, sont à même de profiter des mélanges de produits selon l'invention, qui correspondent à plus de deux des acides aminés essentiels ou 20 semi-essentiels. En général, le choix des sels à préparer et à utiliser dans le traitement de patients atteints de désordres détruisant l'azote sera basé sur le degré de réduction des i ! concentrations des acides aminés individuels, essentiels ou j , 3 semi-essentiels, observe dans les cellules du plasma ou des I! 25 muscles du patient, j Lorsqu’on souhaite administrer des sels ] selon l'invention pour fournir plus de deux matières de base I.

d’acides amines essentiels ou semi-essentiels, cela peut s’effectuer de plusieurs manières différentes. Par exemple, des sels ‘30 séparés peuvent être préparés individuellement, chaque sel

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I correspondant à deux des acides amines essentiels ou semi- J essentiels, pour lesquels on souhaite des matières de base dans ! la composition thérapeutique. Les sels séparés sont alors ; mélangés sous forme de poudre sèche ou sous forme de solution, i 35 pour administration par voie orale ou parentérale, respectivement, j En variante, tous les acides aminés ! essentiels et/ou semi—essentiels et les analogues exempts i i d'azote à utiliser peuvent être mélangés dans le même milieu aqueux pour former un mélange de toutes les combinaisons possibles 13 cette procédure J les réactifs qui doivent être présents sous forme d'analogues exempts d'azote sont obtenus comme acides libres des analogues et mélangés à un volume approprié d'eau (la plupart sont des liquides miscibles à l'eau ou dés solides 5 de solubilité suffisamment élevée dans l’eau). A cette solution, on ajoute alors les* acides aminés essentiels et/ou semi-essentiels qui doivent former les cations des sels (les acides aminés basiques sont ajoutés sous forme de bases libres, alors que les acides aminés neutres sont ajoutés tels quels).

10 Lorsqu'on ajoute les acides aminés basiques, le pH du mélange monte, et à un pH d'environ 4 à 5» on arrête l'addition d'acides aminés basiques. L'eau est alors éliminée par évaporation et le résidu est redissous dans 1'éthanol, puis séché à l'air.

Dans le cas d'un acide aminé essentiel 13 ou semi-essentiel, comme la L-tyrosine, il peut être avantageux de simplement ajouter l'acide aminé tel quel au mélange sec de sels après leur préparation. Dans un tel cas, la tyrosine oud* autres acides aminés ajoutés secs ne pourraient pas entrer dans la réaction chimique ou former une nouvelle entité chimique.

20 Ainsi, les produits de l'invention exigent un milieu aqueux pour leur formation.

Excepté lorsqu'un acide aminé sec comme la L-tyrosine doit être utilisé dans le mélange, tous les composés de l'invention, seuls ou en combinaison, peuvent être 25 administrés par voie intraveineuse en solution aqueuse. Comme indiqué précédemment, le pH des solutions des composés nouveaux de l'invention utilisant des acides aminés basiques pour doser . · les analogues acides est environ ^»lorsqu'on dose jusqu'au point isoélectrique. Ainsi, par exemple au point isoéLectrique, •30 le pH du sel de lysine est d'environ 5,1 à 5,3» et le pH de l'alpha-céto isovalérate d'histidine est d'environ 4,3. Comme les sels selon l'invention sont si fortement associés qu'ils sont de très mauvais conducteurs, il est difficile de mesurer le pH de solutions diluées. Néanmoins, on a observé que l'ad-35 dition de 10 volumes d'eau à des solutions concentrées de sels n'altère pas le pH de manière appréciable.

Bien que l'acidité des solutions de sels de l'invention à un pH d'environ 5 puisse être irritante dans une veine périphérique, les solutions peuvent être administrées par i· 14 j important compte tenu des avantages de grande solubilité de ces J sels à ce pHe Ainsi la grande solubilité permet l’administration ; des doses nécessaires d'acides aminés essentiels avec une .i la quantité minimum d'eau pour des sujets ayant une capacité limitée “ 5 pour l'élimination de l'eau. C'est particulièrement important en cas d ' affection rénale aiguë, et important ttms une moindre mesure pour des patients souffrant de désordres chroniques (hépatiques ou rénaux.

Il y a un certain nombre de facteurs que 10 l'on doit prendre en considération pour déterminer si un acide i aminé essentiel ou semi-essentiel donné doit réagir sous forme S d'acide aminé tel quel ou sous la forme de son analogue hydro- xylé ou cétonique, en vue de former un composé nouveau selon f l'invention. Premièrement, comme indiqué dans le tableau X, un i I 15 certain nombre d'analogues sont soit inefficaces soit probable- Îment inefficaces, et dans ces cas il est probablement préférable d'utiliser l'acide aminé lui-même. Deuxièmement, les brevets précédents du demandeur, cités plus haut, indiquent que les acides cétoniques à chaîne ramifiée, en particulier, peuvent 20 exercer des effets anabolisants que ne partagent pas les acides aminés à chaîne ramifiée. Bien qu'il existe quelques contrever-ses concernant ces effets, le phénomène de "report'' ("carry ; over") qui a été observé de façon réitérée, à la suite de l'ad- ministration d'acides cétoniques à chaîne ramifiée, n'a pas été jj H 25 observé à la suite de l'administration des acides aminés à £ chaîne ramifiée eux-mêmes. De ce fait, dans le cas de valine, 2 leucine et isoleucine, il peut être préférable d'utiliser les || . . analogues cétoniques de ces produits, pour former les composés S de l'invention.

I . 30 Un troisième critère peut être le coût, I Ainsi par exemple l'analogue hydroxylé de la méthionine est î beaucoup moins coûteux que la méthfcnine elle-même. Quatrièmement, 5 comme le montre le tableau II, les nouveaux composés de l'inven- *i 9 I tion peuvent présenter des différences importantes en goût et I 35 en solubilité, de sorte que ces facteurs peuvent être détermi- y * nants selon que le composé est destiné à l’administration orale ou parentérale, respectivement.

L'invention sera mieux comprise à l'aide des exemples spécifiques, non limitatifs, décrits ci-après.

15 EXEMPLE 1

Les cellules du plasma ou des muscles de patients urémiques se sont avérées être déficientes en acides aminés essentiels comme les valine, leucine, isoleucine, histi-5 dine, thréonine et lysine, et aussi en acide semi-essentiel , la tyrosinee Les autres acides aminés, à savoir les phénylala-nine, méthionine et tryptophane ne semblent pas manquer. La déficience en valine e'st plus grande que la déficience en tout autre acide aminée En conséquence, un mélange de sels suivant 10 l'invention est préparé en faisant réagir les composés suivants, en milieu aqueux, dans les rapports molaires suivants ï 4 « parties d'acide alpha-céto-isovalérique, 1 partie d'acide alpha-céto-isocaproïque, 1 partie d'acide alpha-céto-bêta-méthylvale'rique, 1 partie d'histidine, 2 parties de thréonine 15 et 2 parties de lysine, conformément au mode opératoire suivant.

Les acides cétoniques libres (qui sont des liquides) sont pesés dans les proportions souhaitées, indiquées ci-dessus, et mélangés. Un volume de ce mélange est 20 ajouté à un volume d'eau. La portion de ihréonine est alors ajoutée sous forme d'acide aminé sec. La base libre de lysine est ajoutée à une solution presque saturée de base libre d'histidine, dans un rapport molaire de 2 : 1 . Cette solution basique est alors utilisée pour doser la solution précédente, 25 jusqu'à ce que la solution globale atteigne un pH dfeviron 4,5. L’eau est évaporée de cette solution à 40° C, jusqu'à apparition d'un trouble. Un petit volume d'éthanol est ajouté, et le * mélange est placé au réfrigérateur à 4° C pour la nuit. On ajoute alors cinq volumes d'éthanol et l'on recueille le produit •30 pas filtration, puis le sèche à 1’air;lorsque le produit est complètement sec, il est broyé avec une mole de tyrosine pour donner une composition contenant les produits de base de six acides aminés essentiels sous la forme de composés selon l'invention et un acide aminé semi-essentiel, la tyrosine, 35 telle quelle.

Il apparaît clairement que le mélange ci-dessus de produits réactionnels, avant l'addition de la tyrosine, est un mélange de composés nouveaux, plutôt qu'un simple mélange physique d'acides aminés essentiels ou semi- 16 marnes ingrédients sont mélangés sans addition, et élimination subséquente, de l'eau, il se forme une boue extrêmement malodo-j rante et agressive, et en l'absence d'eau, ils ne réagissent H pas complètement poux former les nouveaux composés.selon | 5 l'invention.

EXEMPLE 2

Une autre composition,qui peut être , ’ utilisée dans le traitement d'affections rénales, est préparée en mélangeant à l'état sec les composés nouveaux suivants de I 10 l'invention avec des acides aminés tels quels, dans les propor- jj tions suivantes : 1 part d'alpha-ceto-isovalérate de lysine, i ’ i; ‘ 1 part d’alpha-ceto-isovalérate d'histidine, 1 part d'alpha-ceto- j; ' isocaproate de lysine, 1 part d*alpha-ceto-bêta-méthylvalérate jj de lysine, 1 part de thréonine et 1 part de tyrosine. Chacun des 15 sels mixtes de lysine et d'histidine est préparé en titrant l’analogue alpha-cétonique dans l'eau avec la base libre de î lysine ou d'histidine, respectivement, jusqu'aux points isoé— lectriques respectifs. Chaque composé est recueilli sous forme sèche par précipitation et séchage, comme décrit plus haut.

20 Comme la thréonine et la tyrosine n’ont pas une saveure particulièrement mauvaise, elles sont utilisées telles quelles après l· i mélangé et broyage avec les sels secs de lysine et d’histidine.

Un avantage de cette composition sur celle de l'exemple 1 est que les composés nouveaux selon l'invention peuvent être prépa-25 rés et conservés sous forme sèche, et ensuite combinés juste : avant l'administration. Ce mélange peut être administré à des patients souffrant d'affections rénales en doses de 10 à. 15 grammes du mélange par jour.

EXEMPLE 3 30 Les composés nouveaux de l'invention peuvent être avantageusement utilisés dans les désordres hépatiques, en particulier 1 ' encé|iialopati]de^)ortal-systémique , en combinaison avec des sels d'ornithine d'acides cétoniques à chaîne ramifiée, publiés dans la demande co-pendante US 887.570. 35 Un mélange approprié de ce type comporte une mole de chacun des trois sels d'ornithine d'acide cétonxque à chaîne ramifiée, une mole de chacun des trois sels de lysine d’acide cétonique à chaîne ramifiée formés suivant l'invention, et une ou deux moles de threonine. Tous ces produits possèdent une saveur assez 17 D’autres compositions, constituées de mélanges de sels selon l’invention, pour le traitement de désordres rénaux ou hépatiques, et autres maladies détruisant l'azote» peuvent être obtenues par les spécialistes, suivant l'a présente 5 inventiono Par exemple, un mélange de composés représentant tous les neuf acides aminés essentiels, soit sous forme d’acide aminé soit sous forme d'analogue exempt d’azote, peut être préparé selon le procédé décrit plus haut« Un tel mélange de composés nouveaux est aussi efficace qu'un simple mélange des 10 neuf acides aminés essentiels tels quels, et présente l'avantage .d'être beaucoup plus agréable au palais, et donc acceptable pour administration thérapeutique orale.

Pour le traitement de pertes de protéines et de la malnutrition, on peut préparer une composition qui 15 contient tous les acides aminés essentiels plus l'arginine, sauf que la méthionine (dont les sels ont un goût désagréable) devrait plutôt être utilisés sous forme de gélules ou de comprimés, afin de masquer son goût.

De l'accroissement de solubilité et du 20 changement de saveur, qui apparaissant lorsqu'on combine les acides aminés essentiels ou semi-essentiels et leurs analogues exempts d'azote selon l'invention, il apparaît clairement que l'on a formé de nouvelles entités chimiques. Le fait que la courbe de dosage par addition de base libre à des analogues 25 d'acides présente un point d'inflexion, qui coïncide avec l'addition équimolaire, est également une bonne preuve de la création de nouvelles entités chimiques.

" * Bien que l'auteur ne désire pas être lié par une théorie particulière quelconque, il pense que la nouvelle 30 entité chimique puisse être présente en solution ou sous forme de poudre sèche ou l'une ou routes des trois différentes formes, comprenant : (1) un sel mixte dans lequel l'acide aminé est le cation et l'analogue acide cétonique ou hydroxylé est l'anion ; (2) une carbinolasiine ; et (3) la base de Schiff qui est formée 35 par déshydratation, spontanée et réversible de la carbinolamine. Ces trois formes devraient être en équilibre, dans des proportions relatives qui sont inconnues, mais qui peut être représenté par les formules ci-dessous, dans lesquelles est le squelette hydrocarboné de l'acide aminé essentiel ou semi- ' 18 : *\ ; ;ί | d'un acide aminé essentiel ou semi-essentiel! -¾ j Î1) Ro-CHC00H + R,-C-COO- sel mixte 2 « t 1 If NH 0 \ « 5 RP R1 1 , x I2 i1 I (2) HOOC-CHNHC-CO,OH carbinolamxne : 1 oh f jr I fl ; I 10 (3) H00C-CHN=C-C00H base de Schiff.

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Claims (9)

19 1Composés utilisables comme matière de base d’acides aminés essentiels et semi-essentiels dans l’organisme, caractérisés en ce qu’ils sont constitués par le 5 produit réactionnel d’un acide aminé essentiel ou semi-essentiel avec l’analogue exempt d'azote d'un acide aminé essentiel ou semi-essentiel, mais excluant les produits réactionnels de L-arginine et L-ornithine avec des analogues alpha-cétoniques à chaîne ramifiée d'acides aminés essentiels, ce produit 10 réactionnel étant formé en milieu aqueux. 2, - Composés selon la revendication 1, . caractérisés en ce que l’acide aminé essentiel appartient au groupe des L-isoleucine, L-leucine, L-valine, L-méthionine, L-phénylalanine, L-histidine, L-lysine, L-tryptophane et L-15 thréonine.

3. Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce que l'acide aminé semi-essentiel appartient au groupe des L-tyrosine, L-cystine, L-cystéine, L-arginine et L-ornithine. 20 4.- Composés selon la revendication 1, caractérisés en ce que l'analogue exempt d'azote de l’acide aminé essentiel ou semi-essentiel est choisi parmi les analogues alpha-cétoniques et alpha-hydroxylés de l'acide aminé considéré.

5·- Composés selon la revendication 1, 25 caractérisés en ce que le produit réactionnel est recueilli sous forme sèche par élimination de l'eau.

6,- Procédé pour la préparation des - * composés selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'acide aminé essentiel est un des acides aminés basiques, les L-lysine 30 et L-histidine, et que l'acide aminé essentiel et l'analogue exempt d'azote réagissent en quantité à peu près équimolaire.

7·- Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que l'analogue exempt d'azote est titré par la base libre de l'acide aminé basique jusqu'à atteinte du point 35 isoélectrique de la solution réactionnelle.

8.- Procédé pour préparer les composés selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'acide aminé essentiel ou semi-essentiel est un acide aminé neutre, et que l'analogue exempt d'azote est ajouté en excès substantiel à 20 ί i . à

9. Procédé pour préparer les composés Î selon la revendication 1, caractérisé en ce que les acides aminés essentiels L-lysine et L-histidine et les acides aminés semi-essentiels L-arginine et L-ornithine sont mis en réaction sous I1 5 forme de bases libres, et que les acides aminés essentiels ou semi-essentiels restants et les analogues exempts d'azote sont mis en réaction sous forme d'acides libres,

110,- Procédé selon la revendication 9» caractérisé en ce que la base libre et/ou l'acide libre sont ijf 10 dissous ou mis en suspension dass une quantité d'eau au moins il . j suffisante pour dissoudre le produit réactionnel. ;j 11,- Composition utilisable pour apporter il] des acides aminés essentiels et semi-essentiels à l'organisme, J caractérisée en ce qu'elle est constituée par un mélange de deux 15 sels ou plus, qui sont des produits réactionnels d'acides aminés ΙΊ ;! essentiels ou semi-essentiels avec des analogues exempts d'azote IJ d'acides aminés essentiels ou semi-essentiels, ces produits !j réactionnels étant formés en milieu aqueux, i I :3 12,- Composition selon la revendication I 20 11, caractérisée en ce que le mélange est formé en mélangeant deux I produits réactionnels ou plus en solution aqueuse ou sous forme I sèche, ïj 13.- Composition selon la revendication I 11, caractérisée en ce que le mélange est obtenu en formant les | 2.5 produits réactionnels dans le même milieu aqueux,

14. Composition selon la revendication j 11, caractérisée en ce que au moins un acide aminé sec, essentiel j _ , ou non, est ajouté au mélange après élimination de l'eau des I produits réactionnels, I . 30 15.- Composition selon la revendication ] 11, destinee au traitement de maladies renales chez l'homme, ! caractérisée en ce qu'elle est constituée par le produit réac- j tionnel des composés suivants, dans les proportions molaires approximatives indiquées : 35. parties d'acide alpha-céto-isovalérique i j 1 partie d'acide alpha-céto-isocaproxque 1 partie d'acide alpha-céto-bêta-methylvalérique I 1 partie d'histidine t j 1 partie de thréonine 21 le produit réactionnel étant formé en milieu aqueux par élimination de l’eau. lé.- Composition selon la revendication 159 caractérisée en ce qu’au produit réactionnel sec pulvérulent 5 on ajoute environ 1 partie de tyrosine. , 17»“ Procédé pour le traitement d’affec tions rénales chez l’homme, caractérisé en ce qu’il consiste en administration orale de doses efficaces de la composition selon la revendication 16. 10 18,- Composition selon la revendication 11 pour le traitement d’affections rénales chez l’homme, caractérisée en ce qu’elle est constituée par un mélange sec des composés suivants, dans les proportions molaires approximatives indiquées s 15. partie d’alpha-céto-isovalérate de lysine 1 partie d’alpha-cét o-is ovale'rate d’histidine 1 partie d’alpha-céto-isocaproate de lysine 1 partie d’alpha-céto-bêta-méthylvalérate de lysine 1 partie de thréonine 20. partie de tyrosine. 19. “ Composition selon la revendication 11 pour le traitement d’affections hépatiques chez l’homme, caractérisée en ce qu’elle est constituée par un mélange sec des composés suivants, dans les proportions molaires approximatives 25 indiquées : 1 partie de chacun des trois sels de lysine d’analogues d’acidescétoniques à chaîne ramifiée . * 1 partie de chacun des trois sels d’ornithine d'analogues d'acides cétoniques à chaîne ramifiée 30 1 ou 2 parties de thréonine. 20, - Composition selon la revendication 11 pour le traitement de pertes de protéines et malnutrition, caractérisée en ce que les produits réactionnels comprennent des sels d'arginine et huit acides aminés essentiels excepté la 35 méthionine, et que la méthionine est présente telle quelle en forme de gélules ou de comprimés. V