MC1998A1

MC1998A1 - Composes pour le traitement des maladies hyperproliferatibes et procede de preparation

Info

Publication number: MC1998A1
Application number: MC902029A
Authority: MC
Inventors: Giuseppe Baggiolini Enrico; Michael Hennessy Bernard; Shiuey Shian-Jan; Arthur Truitt Gary; Radoje Uskokovic Milan
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1988-01-20
Filing date: 1989-01-19
Publication date: 1990-01-26
Also published as: ES2033467T3; GR3004786T3; PH25605A; CA1337529C; NO890239D0; JPH0764806B2; IL88989A0; ZA8923B; DE58901056D1; FI90764C; AU2864489A; JPH029861A; NO175429C; HUT49317A; NO175429B; DK169945B1; FI90764B; IE890157L; ATE74350T1; BG60530B2

Description

RAN 4212/54 X 12717

F. HOFFMANN-LA ROCHE & CIE, Société Anonyme

C0I4P03ES POUR LE TRAITEMENT DES MALADIES HYPERPROLIFERATIVES Er PROCEDE DE PREPARATION

1

L'invention concerne des composés de formule

HO>"'N^Nr dans laquelle R est un hydrogène ou un hydroxy et A est -Csc-, -CH=CH- de configuration E ou -CH2-CH2-, des compositions pharmaceutiques comprenant un, deux ou plus de deux 5 composés de formule I et l'utilisation de ces composés pour fabriquer ces compositions qui sont utiles dans le traitement des maladies de la peau hyperprolifératives, comme le psoriasis, et pour le traitement des maladies néoplasiques, comme la leucémie.

10 Des exemples des groupes alkyle en 0^-04 auxquels on se réfère ci-dessous sont les groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle et t-butyle. Des exemples des groupes aryl(alkyle en C1-C4) sont les groupes benzyle, phénéthyle et phénylpropyle. Des exemples de groupes aryles sont les 15 groupes phényle et p-tolyle. Halogène désigne le brome, le chlore, le fluor ou l'iode.

Les composés de formule I de l'invention sont les composés A à F tels que définis ci-dessous : A : l,25-dihydroxy-16-déhydrocholécalciférol; 20 B : 25-hydroxy-16-déhydrocholécalciférol;

C : 1,25-dihydroxy-16,23E-bisdéhydrocholécalciférol;

D : 25-hydroxy-16,23E-bisdéhydrocholécalciférol;

E : l,25-dihydroxy-16-déhydro-23-didéhydrocholécalciférol;

1-

2

et

F : 25-hydroxy-16-déhydro-23-didéhydrocholécalciférol;

parmi lesquels on préfère les composés 1,25-dihydroxylés A, C et E.

5 Les composés de formules la et Ib (englobés dans la formule I) peuvent être préparés comme le décrivent les schémas 1, 2 et 3 par réaction d'un composé de formule I correspondant contenant, au lieu de deux ou trois groupes hydroxy, deux ou trois groupes hydroxy protégés, de formule 10 -OSi(R1,R2/R3)

dans laquelle R]_ et R3 sont des groupes alkyle en C]_-C4 et R2 est un groupe alkyle en C1-C4, aryle ou aryl(alkyle en C1-C4), avec un agent capable d'éliminer les groupes protecteurs .

3

Schéma 1

rH U

H

où A est tel que décrit ci-dessus et R]_ et R3 sont indépendamment des groupes alkyle en 0^-04 et R2 est indépendamment un groupe alkyle en 0^-04, aryle ou aryl(alkyle en-02-04).

Schéma 2

5

Schéma 3

où R]_, R2 et R3 sont tels que décrits ci-dessus, X est un chlore, un brome ou un iode et Ts est un groupe tosyle. Les intermédiaires de formule II, englobant ceux de

6

formules lia, Ilb et IIc, sont nouveaux et font partie de 1'invention.

Dans le schéma 1, le composé de formule II est transformé en un composé de formul-e IVa ou IVb par réaction avec 5 le composé correspondant de formule dans laquelle Ph est un groupe phényle; R4 est H ou -OSifRi, R2, R3) et Ri, R2 et R3 sont tels que décrits ci-dessus.

La réaction est effectuée à une température de -60 à 10 90°C, de préférence à -75°C, dans un solvant organique polaire aprotique, par exemple de l'éther anhydre ou de préférence du tétrahydrofuranne (THF) anhydre, en présence d'une base forte, comme un alkyl-lithium, par exemple le butyl-li-thium.

15 Les groupes protecteurs d'un composé de formule IVa ou

IVb sont éliminés par réaction avec un sel de fluor, par exemple du fluorure de tétrabutylammonium, dans un solvant organique polaire, par exemple de l'éther ou de préférence du THF, pour donner un composé correspondant de formule la 20 ou Ib.

Dans le schéma 2, le composé de formule V est oxydé en composé de formule VI par traitement avec un agent oxydant, par exemple le chlorochromate de 2,2'-bipyridinium, ou de préférence le chlorochromate de pyridinium, dans un solvant 25 organique aprotique comme le chlorure de méthylène.

Le composé de formule VI est transformé en un composé de formule Ilb, par réaction avec, par exemple, un (trial-kylsilyl)imidazole, comme le (triméthylsilyl)imidazole, dans un solvant organique aprotique comme le THF, ou de préfé

III

rence le chlorure de méthylène.

On peut également hydrogéner partiellement le composé de formule V en composé de formule VII en le faisant réagir avec un agent réducteur, par exemple 1'aluminohydrure de lithium, de préférence en présence d'un alcoxyde de métal alcalin, par exemple le méthylate de sodium, dans un solvant organique aprotique, par exemple l'éther ou, de préférence, le THF, à la température de reflux (environ 68°C pour le THF), pendant environ 10-20 heures.

Le composé résultant de formule VII est oxydé en composé de formule VIII par traitement avec un agent oxydant tel que décrit ci-dessus pour l'oxydation de V en VI.

Le composé de formule VIII est transformé en un composé de formule lia par réaction avec un (trialkylsilyl)imidazole, comme décrit ci-dessus pour la transformation de VI en Ilb.

Dans le schéma 3, on fait réagir le composé de formule X, dans de l'éther, de préférence du THF, à la température de reflux, avec du magnésium. On traite la solution de Grignard résultante avec de l'iodure cuivreux, puis on ajoute le composé de formule IX.

On fait réagir le composé de formule XI résultant avec un sel fluorure, en particulier le fluorure de tétrabutylam-monium, dans de l'éther ou de préférence du THF.

Le composé de formule XII obtenu peut être oxydé comme décrit ci-dessus pour l'oxydation de V en VI.

Le composé de formule XIII résultant est transformé en un composé de formule Ile par réaction avec un (trialkylsilyl) imidazole, comme décrit ci-dessus pour la transformation de VI en Ilb.

Pour préparer un composé de formule IX, on peut faire réagir le composé de formule

8

OH

XIV HO

(Tetrahedron 40, 1984, 2283) avec un agent de tosylation, comme un halogénure de p-toluènesulfonyle, par exemple le chlorure, dans une base organique, par exemple la collidine ou de préférence la pyridine. On transforme ensuite le composé résultant de formule

OTs

XV HO

en un composé de formule IX par réaction d'un chlorure de trialkylsilyle, par exemple le chlorure de triméthylsilyle, en présence d'imidazole et dans un solvant organique aprotique, par exemple le THF ou le chlorure de méthylène.

Pour préparer un composé de formule X, on peut transformer un composé de formule

X-CH2CH2COCH3 XVI

en un composé de formule

X-CH2CH2C(CH3)2-OH XVII

où X est tel que ci-dessus, par réaction avec un réactif de Grignard méthylé, comme le bromure de méthylmagnésium, dans de l'éther. Le composé de formule XVII est transformé en un composé de formule X par réaction avec un chlorure de trialkylsilyle, comme décrit ci-dessus pour la transformation de XV en IX.

Pour préparer le composé de formule V, on fait réagir le composé de formule XV ci-dessus avec un agent formant un cyanure, par exemple le cyanure de sodium, dans un solvant

organique aprotique, par exemple le diméthylsulfoxyde (DMSO), à une température comprise entre 80 et 100°C, pendant 1 à 5 heures, pour obtenir un composé de formule

A VIII

HO

Ce composé est transformé en composé de formule

CHO

XIX

HO

par réaction avec un agent réducteur, par exemple l'hydrure de diisobutylaluminium, puis par hydrolyse avec, par exemple, un acide minéral comme l'acide chlorhydrique. La réaction est effectuée dans un solvant organique aprotique, par exemple le chlorure de méthylène, à une température d'environ -10 à 10°C, pendant environ 20 à 90 minutes. Le composé de formule XIX est transformé en composé de formule par réaction avec un mélange de triphénylphosphine, de té-trabromure de carbone et de poussière de zinc, dans un solvant organique aprotique, par exemple le chlorure de méthylène, pendant environ 1 à 30 heures.

Le composé de formule XX est transformé en composé de formule

H

i

XX

HO

10

XXI

par réaction avec une base forte, par exemple le butylli-thium, dans un solvant aprotique polaire, par exemple le THF, à une température d'environ -80 à -70°C, pendant environ 1 à 3 heures. Le composé de formule XXI est transformé en composé de formule

XXII

MeaSiO

par réaction avec le (triméthylsilyl)imidazole dans un solvant organique aprotique, par exemple le THF ou le chlorure de méthylène. Ce composé est transformé en composé de formule

XXIII

MesSiO

par réaction avec une base forte, par exemple le butylli-thium, puis avec de l'acétone. La réaction est effectuée dans un solvant organique aprotique, par exemple le THF, à une température d'environ -80 à -60°C. Le composé de formule XXIII est déprotégé pour donner le composé de formule V (dans le schéma 2) par réaction avec un sel de fluor, par exemple le fluorure de tétrabutylammonium, dans un solvant organique, par exemple l'éther ou le THF.

11

Les composés de formule I stimulent la différenciation et diminuent la prolifération des kératinocytes humains. Ce sont par conséquent des composés utiles comme agents dans le traitement des affections cutanées hyperprolifératives,

comme le psoriasis, les carcinomes baso-cellulaires, les troubles de la kératinisation et la kératose. Les composés de formule I sont également utiles comme agents dans le traitement des maladies néoplasiques, comme la leucémie.

L'activité des composés de formule I comme agents pour le traitement des maladies de peau hyperprolifératives peut être mise en évidence, par exemple, par les protocoles d'essai connus dans la technique, tels qu'indiqués dans The Society for Investigative Dermatology, 1986, 709-714. Les effets des composés A à F ci-dessus sur la différenciation morphologique des kératinocytes humains cultivés, comparés à l'effet du 1,25-dihydroxycholécalciférol (composé X) sont exprimés dans les tableaux 1 à 4 ci-dessous, en nombre (xlO^) de kératinocytes. humains dans la culture. Un composé qui provoque la différenciation des cellules basales en cellules de l'épithélium malpighien et en cellules d'enveloppe est utile comme agent dans le traitement des maladies de la peau caractérisées par des troubles de la kératinisation, comme le psoriasis.

Composé

Dose (M)

Total

Tableau Nombre basai

1

de cellules épithélium

Cxio4) enve

Témoin

133±5

118±4

15±1

18±2

X

10-10

122±4

103 ±2

19 ±2

23±1

10"8

112±6

89±2

2 3 ±4

30±3

10-6

9 5 ±7

64 ±6

3 1 ± 1

34±2

A

10-10

132±8

115±7

17±1

27 ±2

10"8

128±10

106±8

22 ±2

3 3 ±2

10"6

101±7

71±5

30±2

39±2

B

10-10

133±6

115±5

18±1

25± 1

10"8

131±4

109±2

22±2

29±2

10"6

104±4

74±3

30±1

3 3 ± 1

12

Tableau

2

Composé

Dose (M)

Nombre de cellules

(xio4)

Total basai épithélium enveloppe

Témoin

123±7

105±6

18 ± 1

74 ±7

X

10-10

10-8

10-6

116±9 101±10 8 3 ±5

9 5 ±8 75±8 57±4

21 ± 1 2 6 ±2 26±1

91 + 4 12 2 ±11 146±16

c

10-10

10-8

10-6

117±4 108±3 80±7

92±2 80±2 54±6

2 5 ±2 2 8 ± 1 2 6 ± 1

103±6 128±3 15 3 ± 1

D

10-10 10-8 10"6

113±7 111±7 94±3

93±6 86±3 68±1

Tableau

3

20± 1 25±2 26±2

104±10

128±5

144±7

Composé

Dose (M)

Nombre de cellules

(xlO4)

Total basai épithélium enveloppe

Témoin

108±10

9 3 ±8

15±2

8 8 ±8

X

10-1°

10-8

10"6

106±7 84±8 73±7

86±6 6 1±5 51±5

18± 1 2 3 ±3 22±2

100±9 122±8 142±11

E

10-1°

lO-8

10~6

86±4 82±3 78±3

63±2 53±2 41± 1

2 3 ±2 29± 1 21 ±2

114±5 141±5 -147±4

F

io-10 lO"8

io-6

103 ±5 97±3 84±4

8 1±3 SI ±2 5 5±2

22±2 29±1 2 9 ± 1

103 ±4 12 1±6 137±7

L'activité des composés de formule I comme agents pour le traitement des maladies de la peau hyperprolifératives peut également être mise en évidence par la détermination du nombre de kératinocytes humains cultivés et du nombre d'enveloppes formées, ainsi que du nombre de lignées cellulaires d'épithélioma malpighien spino-cellulaire (SCC-115)

13

cultivées en cultures, en présence de ces composés. Les résultats sont indiqués sur les tableaux 4 et 5 :

Tableau 4

Nombre

Traitement

Dose (M)

Nombre de kératinocytes d'enveloppes ( xlO—)

Témoin

189.49122

. 3

858 . 281185.70

(éthanol 0,

1%

)

Composé E

10"

12

187.36115

.33

1136.631 383.66

10"

10

175.34110

. 19

1444.871 312.47

10"

8

145.79115

.66

2113.6211049.33

10""

6

41.951 7

.53

1916.831 887.66

Témoin

148.73116

.23

2193.71 921.9

(éthanol 0,

1%

)

Composé A

10"

12

114.91110

.95

1662.21 420.1

10"

10

130.37124

. 32

3973.81 126.99

10"

8

120.67116

. 87

7235.21 55.5

10"

6

109.22115 Tableau

. 87 5

8323.51 157.6

Traitement

Dose (M)

Nombre de lignées cellulaires (SCC-15) (xiozi)

Témoin

7 . 35±1,. 75

Composé E

12

10

10"

8

10

6

10

6.98±1.68 5.8911.58 5 . 7 6 ± 1. 5 3 0.4010.98

Composé A 10~6 0.4910.13

Les résultats ci-dessus montrent que les composés de formule I provoquent la différenciation des cellules de la peau et sont donc utiles dans le traitement des affections

14

hyperplifératives de la peau, comme le psoriasis.

Afin de mettre en évidence 11 activité des composés de formule I comme agents pour le traitement des maladies néo-plasigues, on a évalué les effets anti-prolifératifs (AP) et provoquant la différenciation (PD) des composés A à 'F et les cellules des tumeurs HL-60 promyélocytiques humaines. Sur le tableau 6, est indiqué l'effet AP en pourcentage de réduction du nombre de cellules et en concentration DI5Q du composé qui réduisait le nombre de cellules de 50%. L'effet PD est exprimé en pourcentage des cellules différenciées et en concentration DE50 des composés qui provoquaient une différenciation de 50% des cellules.

Tableau 6

Concentration % de réduction DI5Q Cellules DE50

(xl0~8M) du nombre des (xlO~8M) différen- (xlO"8M)

cellules ciées (%)

Composé X

0.01

6

3

0.1

5

11

1

16

2

19

2

10

66

68

100

84

98

Composé A

»—( 0

0

10

3

0.1

33

16

1

84

0.2

92

0.2

10

85

97

100

85

98

15

10

15

Composé B

0.1 1 10 100 1000

Composé C

0.01 0.1 1 10 100

Composé D

0.1 1 10 100 1000

25 Composé E

0.01

0.1

1

30 10

20

10 8

14 82 95

18 20 81

85

86

12 12 17 46 95

6 59

80

81

35

0.3

150

0.07

5 4

6 93 95

3 19 92 97 99

1

2 17 31 97

9

50 96 98

32

0. 3

200

0. 1

16

Composé F

0.1 1 10 100 1000

13 10 8 58 95

70

4 12 21 55 91

Ces résultats indiquent que chacun des composés en question restreint la prolifération des cellules promyélocy-tiques humaines, in vitro, même s'ils ne sont pas toxiques vis-à-vis des cellules. En outre, les cellules se différencient vers un phénotype plus matures à des doses identiques à celles qui inhibent la prolifération. D'après ces résultats, on peut voir que chacun des composés étudiés est utile comme agent dans le traitement des maladies néoplasiques, comme la leucémie.

Les composés de formule I peuvent être administrés oralement pour le traitement de maladies néoplasiques ou pour le traitement des maladies de peau hyperprolifératives, à des animaux à sang chaud nécessitant un tel traitement, par exemple à un adulte humain, en doses dans l'intervalle d'environ 0,1 à 10 y.g par jour.

Pour le traitement des maladies de peau hyperprolifératives, on peut également administrer les composés de formule I localement à des animaux à sang chaud nécessitant un tel traitement, en doses d'environ 1 à 1000 ug par gramme de formulation topique par jour.

Les formes posologiques orales comprenant les composés de formule I peuvent être incorporées, par exemple, dans des gélules ou des comprimés, avec des véhicules pharmaceutique-ment acceptables. Des exemples de tels véhicules qui peuvent être incorporés dans des gélules sont les liants, comme la gomme adragante ou la gélatine; les excipients comme le phosphate dicalcique; les agents de désintégration comme

17

l'amidon de maïs; les lubrifiants comme le stéarate de magnésium; les agents édulcorants comme le saccharose; les agents aromatisants comme la menthe poivrée. Les comprimés peuvent être enrobés de Shellac, de sucre ou des deux. Un sirop ou un élixir peut contenir un agent édulcorant, du pa ra-hydroxybenzoate de méthyle et du para-hydroxybenzoate de propyle comme conservateurs, un colorant et un agent aromatisant.

Les formes posologigues topiques comprenant les composés de formule I englobent les pommades et les crèmes, y compris les formulations comportant des bases oléagineuses, adsorbables, hydrosolubles et de type émulsion, comme la la noline et les polyéthylèneglycols. Les formes posologiques topiques comprennent aussi les gels, les lotions, les poudres et les aérosols. Les compositions topiques peuvent également être employées dans le traitement des inflammations de la peau ou des muqueuses, par exemple la muqueuse qui tapisse la bouche ou celle du côlon inférieur.

Les lotions, c'est-à-dire les préparations liquides va riant de simples solutions à des préparations aqueuses ou hydroalcooliques contenant des substances finement divisées peuvent contenir des agents de mise en suspension ou de dis persion, comme les dérivés de la cellulose, par exemple 1'éthylcellulose ou la méthylcellulose; la gélatine ou les gommes, qui renferment l'ingrédient actif dans, un véhicule fait d'eau, d'un alcool ou de glycérine. Les gels sont des préparations semi-solides faites par gélification d'une solution ou d'une suspension de la substance active dans un véhicule. Les véhicules, qui peuvent être hydratés ou anhydres, sont gélifiés à l'aide d'un agent gélifiant, par exemple le carboxypolyméthylène, et neutralisés jusqu'à une consistance propre au gel, à l'aide d'alcalis, par exemple d'hydroxyde de sodium, ou d'aminés, comme la polyéthylèneco coamine.

Exemple 1

a) On agite à 0°C pendant 18 heures un mélange de 3,24 g de

[ 1 (R*),3aR*-(3afâ,4a,7aa) ]-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-4-hydroxy-3,7a-diméthyl-3H-indène-l-éthanol, de 30 ml de pyridine et de 3,51 g de chlorure de p-toluènesulfonyle. Après avoir ajouté de la glace et dilué avec de l'eau, on extrait le mélange avec du chlorure de méthylène. On lave la phase organique avec H2SO4 IN, NaHC03 saturé, puis on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:1:5) pour obtenir 4,61 g (82%) de 4-méthylbenzènesulfonate de [l(R*),3aR*-( 3a|3,4a,7aa) ] -3a, 4,5,6,7,7a-hexahydro-4-hydroxy-(3, 7a-diméthyl-3H-indène-l-éthanol, [a]D^l = +31,9° (c = 0,53, CHCI3).

b) A une solution de 4,61 g du produit de a) dans 22 ml de DMSO, on ajoute 1,10 g de cyanure de sodium et on chauffe le mélange à 90°C pendant 2 heures. Après l'avoir refroidi à la température ambiante, on pompe l'atmosphère du mélange pour éliminer le solvant, puis on le dilue à l'eau. On extrait le mélange avec de l'éther. On lave la phase organique avec de la saumure saturée, on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système chlorure de méthylène/hexane/acétate d'éthyle (86:7:7) pour obtenir 2,52 g (91%) de [1(R*),3aR*-(3aP,4a,7aa)]-

3a, 4,5,6,7, 7a-hexahydro-4-hydroxy-|3, 7a-diméthyl-3H-indène-l-propanenitrile, [aJD21 = + 29,2° (c = 0,65, CHCI3).

c) A un mélange de 6,85 ml d'hydrure de diisobutylaluminium dans l'hexane et de 5,2 ml de chlorure de méthylène, à -6°C, on ajoute une solution de 0,430 g du produit de b) dans 10 ml de chlorure de méthylène. On agite le mélange à -6°C pendant 55 minutes. Après avoir ajouté du chlorure d'ammonium saturé, on hydrolyse le mélange avec HCl 3N-éther (2:1). On extrait la phase aqueuse avec de l'éther. On lave les phases organiques avec de la saumure saturée, on les sèche et on les évapore. On chromatographie le résidu sur du gel de si

lice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:2) pour obtenir 260 mg (60%) de [ 1 (R*),3aR*-( 3a(3,4a,7aa) ]-3a, 4,5,6,7, 7a-hexahydro-4-hydroxy-(3, 7a-diméthyl-3H-indène-l-propanal, [a]D^2 = + 43,1° (c = 0,32, CHCI3).

d) On agite à 25°C pendant 31 heures un mélange de 1,77 g de triphénylphosphine, de 2,23 g de tétrabromure de carbone, de 441 mg de poussière de Zn et de 23 ml de chlorure de méthylène. On ajoute à ce mélange une solution de 0,430 g du produit de c) dans 38 ml de chlorure de méthylène et on agite le mélange pendant 18 heures. On dilue le mélange avec du pentane et on sépare par filtration la matière insoluble. On dissout la fraction insoluble dans du chlorure de méthylène et on dilue de nouveau la solution avec du pentane. Après filtration, on évapore les filtrats combinés. On purifie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane 1:4 pour obtenir 0,490 g (67%) de [l(R*),3aR*-

(3a3,4a,7aa)] -1-(4,4-dibromo-l-méthyl-3-butényl)-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-7a-méthyl-3H-indène-4-ol, [a]D22 = + 14,4° (c = 0,55, CHCI3).

e) A une solution de 0,680 g du produit de d) dans 31 ml de THF à -75°C, on ajoute goutte à goutte 3,77 ml d'une solution 1,6M de butyl-lithium dans l'hexane. On agite le mélange à -75°C pendant une heure et à 25°C pendant une heure. Après avoir ajouté de la saumure saturée, on dilue le mélange avec NaHC03 aqueux saturé et on l'extrait avec de l'éther. On lave la phase organique avec de la saumure saturée, on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/ hexane (1:4) pour obtenir 0,350 g (89%) de [l(R*),3aR*-

( 3a|3,4a,7aa) ]-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-7a-méthyl-l-( 1-méthyl-3-butynyl)-3H-indène-4-ol, [a]D22 = + 30,7° (c = 0,42,

CHCI3).

f) A une solution de 1,29 g du produit de e) dans 80 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 3,59 g de 1-(triméthylsilyl) imidazole. On agite le mélange à 25°C pendant 3 heu

res. Après avoir ajouté 40 ml d'eau et agité pendant 20 minutes, on extrait le mélange avec de l'acétate d'éthyle. On lave la phase organique avec de l'eau et de la saumure saturée, on la sèche et on l'évaporé. On purifie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:15) pour obtenir 1,70 g (99%) de [l(R*),3aR*-(3a0,4a,7aa)]-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-7a-méthyl-l-(1-méthyl-3-butynyl)-4-[(triméthylsilyl)oxy]-3H-indène, [a]D22 = + 39,7° (c = 0,30, CHC13).

g) A une solution de 1,70 g du produit de f) dans 48 ml de THF à -75°C, on ajoute goutte à goutte 6,01 ml de butyl-li-thium 1,6M dans l'hexane. Après avoir agité pendant 40 minutes, on ajoute 3,05 ml d'acétone et on agite le mélange à -75°C pendant 20 minutes et à 25°C pendant 75 minutes. Après avoir ajouté 40 ml d'un mélange 1:1 de KHCO3 2M et de tar-trate de sodium et de potassium 1M, on agite le mélange pendant 20 minutes, puis on l'extrait avec de l'acétate d'éthyle. On lave la phase organique avec de la saumure saturée, on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:5) pour obtenir 1,62 g (89%) de [l(R*),3aR*-

( 3a(3, 4a, 7aa) ] -3a, 4,5,6,7,7a-hexahydro-7a-méthyl-4- [ ( trimé-thyls ilyl)oxy]-3H-indène-1-y1)-2-méthy1-3-heptyne-1-ol, [a]D22 = + 39,7° (c = 0,30, CHCI3).

h) A une solution de 1,62 g du produit de g) dans 53 ml de THF, on ajoute 15,5 ml de fluorure de tétrabutylammonium 1M dans le THF. On agite le mélange pendant 50 minutes. Après l'avoir dilué avec NaHC03 semi-saturé, on évapore le mélange pour éliminer la plupart du solvant et on l'extrait avec de l'acétate d'éthyle. On lave la phase organique avec de la saumure semi-saturée, on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:1) pour obtenir 1,17 g (82%) de

[ 1 (R*),3aR*-(3a(3,4a,7aa) ]-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-l-( 1,5-di-méthyl-5-hydroxy-3-hexynyl)-7a-méthyl-3H-indène-4-ol, de

point de fusion 105-107°.

i) A une solution de 0,720 g du produit de h) dans 44 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 1,59 g d'acétate de sodium et 3,18 g de chlorochromate de 2,2'-bipyridynium. On agite le mélange pendant 2 heures. On ajoute ensuite 1,59 g supplémentaires de chlorochromate de 2,2'-bipyridynium et on poursuit l'agitation pendant 2 heures. Ensuite, après avoir ajouté 6 ml de 2-propanol, on dilue le mélange avec de l'eau et on l'extrait avec un système éther/acétate d'éthyle (1:1). On lave la phase organique avec de l'eau, H2SO4 IN, NaHCÛ3 saturé et de la saumure saturée. Après le séchage, on évapore la solution et on chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:1) pour obtenir 0,560 g (78%) de [ 1 (R*), 3aR*-( 3a|3,7aa) ]-3,3a,5,6,7,7a-hexahydro-l-(5-hydroxy-1,5-diméthyl-3-hexy-nyl)-7a-méthyl-4H-indène-4-one, [a]D22 = + 35,3°C (c = 0,36, CHCI3).

j) A une solution de 0,552 g du produit de i) dans 70 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 2,0 g de l-(triméthylsilyl) imidazole. Après avoir agité pendant 17 heures et ajouté 22 ml d'eau, on extrait le mélange avec de l'acétate d'éthyle. On lave la phase organique avec de l'eau et de la saumure saturée, puis on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:4) pour obtenir 0,693 g (99%) de [l(R*),3aR*-(3a0,7acO J-3,3a,4,6,7,7a-hexahydro-l-(1,5-diméthyl-5-[(triméthylsilyl)oxy]-3-hexynyl)-7a-méthyl-4H-indène-4-one, [a]D2® = + 29,5° (c = 0,20, CHCI3).

k) A une solution de 2,00 g d'oxyde de [3S-(lZ,3a,50) J-[2-[3,5-bis[[(1,l-diméthyl)diméthylsilyl]oxy]-2-méthylène-cy-clohexylidène]éthyl]diphénylphosphine dans 45 ml de THF à -75°C, on ajoute goutte à goutte 1,87 ml de butyl-lithium 1,6M dans l'hexane. Après avoir agité pendant 6 minutes, on ajoute goutte à goutte une solution de 0,693 g du produit de j) dans 26 ml de THF. Après avoir agité à -75°C pendant 70

minutes et ajouté un mélange 1:1 de tartrate de sodium et de potassium 1M et de KHCO3 2M, on extrait le mélange avec de l'acétate d'éthyle. On lave la phase organique avec de la saumure saturée, on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:15) pour obtenir 1,23 g (87%) de ( la, 3(3, 5Z, 7E) -1,3-bis [ [ ( 1,1-diméthyléthyl ) diméthylsilyl ] -oxy]-25-[(triméthylsilyl)oxy]-9,10-sécocholesta-5,7,10(19),16-tétraène-3-yne, [a]D23 = + 47,1° (c = 0,21, CHCI3).

1) A une solution de 0,228 g du produit de k) dans 11 ml de THF, on ajoute 1,92 ml de fluorure de tétrabutylammonium 1M dans le THF. On agite le mélange pendant 16 heures. Après l'avoir dilué avec de l'eau, on extrait le mélange avec de l'acétate d'éthyle. On lave la phase organique avec de la saumure semi-saturée et de la saumure saturée, on la sèche et on l'évaporé. On purifie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (3:1) pour obtenir 0,126 g (96%) de 1,25-dihydroxy-16-déhydro-23-didéhydrocho-lécalciférol, [a]p21 = + 21,5° (c = 0,20, MeOH).

Exemple 2

a) Comme le décrit l'exemple lk), mais en partant de 0,343 g d'oxyde de [5S—(1Z)]-[2-[5-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl ]oxy]-2-méthylènecyclohexylidène]éthyl]diphénylphos-phine et de 0,186 g du produit de l'exemple 1j), on obtient 0,205 g (80%) de (30,5Z,7E)-3[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl ] oxy]-2 5-[(triméthy1s ily1)oxy]-9,10-sécocholesta-5,7,10(19),16-tétraène-23-yne, spectro de masse m/e 580

(M+).

b) En traitant 0,248 g du produit de a) comme le décrit l'exemple 11), on obtient 0,153 g (91%) de 25-hydroxy-16-dé-hydro-23-didéhydrocholécalciférol, [a]D2l = + 99,6° (c = 0,25), MeOH).

Exemple 3

a) A un mélange de 0,146 g d'aluminohydrure de lithium, de

0,211 g de méthylate de sodium et de 6,5 ml de THF à 0°c, on ajoute goutte à goutte une solution de 0,180 g du produit de l'exemple lh) dans 13 ml de THF. On chauffe le mélange à 68°C pendant 16 heures et on le refroidit à 0°C. Après l'avoir dilué avec 13 ml d'éther et avoir ajouté 0,30 ml d'eau et 0,26 ml de NaOH aqueux à 10%, on agite le mélange à la température ambiante pendant une heure et on le filtre. On triture les solides avec de l'éther et on les filtre. On évapore les filtrats combinés et on les chromatographie sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:2) pour obtenir 0,179 g (99%) de

[ 1 (R*), 1 ( 3E) ,3a|3,4a,7aa) ]-(3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-l-(5-hy-dr oxy-1,5 -dimé thy 1 - 3 -hexeny 1 ) - 7 a-mé thy 1 - 1H- indène - 4 - o 1, [a]D21 = + 11,5° (c = 0,33, CHC13).

b) A une solution de 0,120 g du produit de a) dans 10 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 0,500 g de dichromate de pyridinium et 25 ml de p-toluènesulfonate de pyridinium. On agite le mélange pendant 135 minutes. Après avoir ajouté 40 ml d'éther, on agite le mélange pendant 5 minutes et on le filtre. On triture les solides avec de l'éther et on les filtre. On lave les filtrats combinés avec CUSO4 aqueux saturé, de l'eau, une solution aqueuse semi-saturée de NaHC03 et de la saumure saturée. On sèche la phase organique et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système d'acétate d'éthyle à 35% dans l'hexane pour obtenir 90 ml (76%) de [1(R*),1(3E),3a£,7aa)]-

(3,3a,5,6,7,7a-hexahydro-l-(5-hydroxy-1,5-diméthyl-3-hexé-nyl)-7a-méthyl-lH-indène-4-one, [a]D25 = + 30,6° (c = 0,17, CHCI3).

c) En traitant 0,099 g du produit de b) comme le décrit l'exemple 1j), on obtient 0,111 g (89%) de

[ 1 (R*), 1 ( 3E) ,3a(3,7aa) ]-3,3a,5,6,7,7a-hexahydro-l-( 1,5-diméthyl-5-[(triméthylsilyl)oxy]-3-hexényl)-7a-méthyl-4H-in-dène-4-one, [a]D24 = + 26,4° (c = 0,22, CHCI3).

d) Comme le décrit l'exemple lk), si l'on part de 0,265 g

24

d'oxyde de [3S-( 1Z,3a,5(3) ]-[2-[3,5-bis[ [ (1,1-diméthyl)-diméthylsily1]oxy]-2-raéthylènecyclohexylidène]éthy1]di-phénylphosphine et de 0,095 g du produit de c), on obtient 0,162 g (83%) de ( 1(3,3a,5Z,7E,23E)-1,3-bis[[( 1,1-diméthyléthyl ) dimé thylsily 1] oxy] -25-[(triméthylsilyl)oxy]-9,10-sécocholesta-5,7,10(19),16,23-pentaène, spectro de masse m/e 712 (M+).

e) En traitant 0,159 g du produit de d) comme dans l'exemple 11), on obtient 0,077 g (84%) de l,25-dihydroxy-16,23E-bis-dihydrocholécalciférol, [a]D24 = + 46,5° (c = 0,20, MeOH).

Exemple 4

a) Comme le décrit l'exemple lk), si l'on part de 0,225 g d'oxyde de [5S-(1Z)]-[2-[5-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthyl-silyl]oxy]-2-méthylènecyclohexylidène]éthyl]diphénylphos-phine et de 0,110 du produit de l'exemple 3c), on obtient 0,150 g (81%) de ( 3(3,5Z,7E,23E)-3-[[( 1,1-diméthyléthyl) -diméthylsilyl]oxy]-25-[(triméthylsilyl)oxy]-9,10-séco-cholesta-5,7,10(19),16,23-pentaène, [a]D24 = + 68,3° (c = 0,18, CHC13).

b) En traitant 0,144 g du produit de a) comme le décrit l'exemple 11), on obtient 0,076 g (78%) de 25-hydroxy-

16,23E-bisdéhydrocholécalciférol, [a]D22 = +62,5° (c = 0,20, MeOH).

Exemple 5

a) A une solution de 6,25 g de 3-bromopropionate d'éthyle dans 28 ml de THF à -20°C, on ajoute 28,8 ml de bromure de méthylmagnésium 2,8M dans l'éther. On agite le mélange à la température ambiante pendant 170 minutes. Après avoir ajouté 15 ml de chlorure d'ammonium aqueux saturé et 42 ml de HCl IN, on sépare la phase organique et on extrait la phase aqueuse avec de l'éther. On lave les extraits organiques avec de la saumure saturée, on les sèche et on les évapore. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système d'acétate d'éthyle à 30% dans l'hexane pour obtenir 2,57 g (45%) de 4-bromo-2-méthyl-2-butanol, spectro de masse

ra/e 151 (M+-CH3).

b) A une solution de 2,56 g de 4-bromo-2-méthyl-2-butanol et de 4,86 g d1imidazole dans 15 ml de N,N-diméthylformamide à 0°C, on ajoute 6,48 g de chlorotriéthylsilane. On agite le mélange à la température ambiante pendant 200 minutes. Après avoir ajouté de la glace, on dilue le mélange avec de l'eau et on l'extrait avec du pentane. On lave la phase organique avec de l'eau et de la saumure saturée, on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec du pentane pour obtenir 4,02 g (93%) de (3-bromo-l,1-diméthylpropoxy)triéthylsilane, spectro de masse m/e 265 (M+-CH3).

c) A une solution de 0,930 g de 4-méthylbenzènesulfonate de

[1-(R*),3aR*(3a0,4a,7aa)]-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-4-hydroxy-|3,7a-diméthyl-3H-indène-l-éthanol et de 1,10 g d'imidazole dans 73 ml de chlorure de méthylène à 0°C, on ajoute 0,580 g de chlorotriéthylsilane. On agite le mélange à la température ambiante pendant 1,5 heures. Après avoir ajouté de la glace, on dilue le mélange avec de l'eau et on l'agite pendant 20 minutes. On extrait la phase organique avec du chlorure de méthylène. On lave les extraits avec de l'eau,

Na2S04 IN, NaHC03 aqueux saturé et de la saumure saturée. Après séchage et évaporation, on purifie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:5) pour obtenir 1,22 g (100%) de 4-méthylbenzènesulfonate de [1(R*),3aR*-(3a3,4a,7aa)]-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-4-[(triéthylsilyl)oxy]-0,7a-diméthyl-3H-indène-l-éthanol, [a]D20 = + 46,1° (c = 0,31, CHC13).

d) A une solution de 3,08 g de (3-bromo-l,1-diméthylpro-poxy)triéthylsilane dans 31 ml de THF, on ajoute 0,282 g de magnésium. On chauffe le mélange à 68°C pendant 3,5 heures. On agite ensuite à 3°C pendant 30 minutes un mélange de 0,686 g d'iodure cuivreux et de la solution de Grignard susmentionnée. On ajoute à celle-ci une solution de 1,02 g du produit de c) et on agite le mélange à la température am

biante pendant 40 minutes. Après avoir ajouté un mélange de glace et d'eau, on extrait le mélange avec de l'éther. On lave la phase organique avec H2SO4 IN et NaHC03 aqueux saturé, on la sèche et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/ hexane (1:15) pour obtenir 1,80 g de 4-méthylbenzènesulfonate de [1(R*),3aR*-(3a0,4a,7aa)]-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-l-[1,5-diméthyl-5-[(triéthylsilyl)oxy]hexyl]-4-[(triéthyl-silyl)oxy]-7a-méthyl-3H-indène, spectro de masse m/e 479 (M+"Et).

e) A une solution de 1,60 g du produit de d) dans 5 ml de THF, on ajoute 2,00 ml de fluorure de tétrabutylammonium 1M dans le THF. On chauffe le mélange à 68°C pendant 50 minutes. Après refroidissement à la température ambiante, on dilue le mélange avec de l'eau et on l'extrait avec du chlorure de méthylène. On lave la phase organique avec de la saumure, on la sèche et on l'évaporé. On purifie le résidu sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/hexane (1:1) pour obtenir 0,420 g (79%) de [l(R*),3aR*-

( 3a|3, 4aa, 7aa)]~3a,4,5,6,7, 7a-hexahydro-4-hydroxy-a, a-e, 7a-tétraméthyl-lH-indène-l-pentanol,[a]D2l = + 12,0° (c = 0,25, CHCI3).

f) A une solution de 0,210 g du produit de e) dans 18 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 0,870 g de dichromate de pyridinium et 44 mg de p-toluènesulfonate de pyridinium. On agite le mélange pendant 175 minutes. Après avoir ajouté 50 ml d'éther, on agite le mélange pendant 5 minutes et on le fitre. On lave les solides avec CUSO4 aqueux saturé, de l'eau, NaHC03 aqueux semi-saturé et de la saumure saturée. On sèche la phase organique et on l'évaporé. On chromatographie le résidu sur du gel de silice avec un système d'acétate d'éthyle à 35% dans 1'hexane pour obtenir 0,175 g (84%) de [1(R*),3aR*-(3a0,4aa,7aa)]-3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-l-(5-hydroxy-1,5-diméthylhexyl)-7a-méthyl-4H-indène-4-one, [a]D2l = + 28,2° (c = 0,22, CHCI3).

27

g) Si l'on traite 0,168 g du produit de f) comme le décrit l'exemple 1j), on obtient 0,211 g (100%) de [l(R*),3aR*-

( 3a(3,7aa) 3 -3, 3a, 5,6,7,7a-hexahydro-l- ( 1,5-diméthyl-5-[(triméthylsilyl)oxy]hexyl]-7a-méthyl-4H-indène-4-one, [a]D20 = + 21,9° (c = 0,27, CHC13).

h) Comme le décrit l'exemple lk), si l'on part de 0,581 g d'oxyde de [3S-(lZ,3a,50)]-[2-[3,5-bis[[(1,1-diméthyl)-diméthylsilyl]oxy]-2-méthylènecyclohexylidène]éthyl]di-phénylphosphine et de 0,210 g du produit de g), on obtient 0,358 g (83%) de (la,30,5Z,7E)-1,3-bis[[(1,1-diméthyléthyl) diméthylsilyl]oxy]-25-[(triméthylsilyl)oxy]-9,10-sécocholesta-5,7,10(19),16-tétraène, spectro de masse m/e 714 (M+).

i) Si l'on traite 0,350 g du produit de h) comme le décrit l'exemple 11), on obtient 0,168 g (83%) de 1,25-dihydroxy-16-déhydrocholécalciférol.

[a]D20 = + 40,0° (c = 0,17, MeOH).

Exemple 6

a) Comme le décrit l'exemple lk), si l'on part de 0,383 g d'oxyde de [5Z-(1Z)]-[2-[5-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl ]oxy]-2-méthylènecyclohexylidène]éthyl]diphénylphos-phine et de 0,188 g du produit de l'exemple 5g), on obtient 0,245 g (78%) de (3a,5Z,7E)-3-[[(1,1-diméthyléthyl)diméthy1 silyl]oxy]-25-[(triméthylsilyl)oxy]-9,10-sécocholesta-5,7,10(19) ,16-tétraène, [a]D24 = + 67,5° (c = .0,20, CHC13).

b) Si l'on traite 0,239 g du produit de a) comme le décrit l'exemple 11), on obtient 0,135 g (83%) de 25-hydroxy-16-dé hydrocholécalciférol, [a]D23 = + 75,4° (c = 0,13, MeOH).

Les exemples A et B suivants illustrent la composition de gélules de gélatine molle pour administration orale et une crème topique.

28

Exemple A

mg/gélule

Composé E 0,001-0,010

Hydroxytoluène butylé 0,016

Hydroxyanisole butylé 0,016

Huile de noix de coco fractionnée 160,0

Exemple B

mg/g de crème

Composé E 0,01-1,0

Alcool cétylique 1,5

Alcool stéaryligue 2,5

Monostéarate de sorbitanne 2,0 Monostéarate de glycéryle et stéarate de polyoxyéthylène-glycol 4,0

Polysorbate 60 1,0

Huile minérale 4,0

Propylèneglycol 5,0

Para-hydroxybenzoate de propyle 0,05

Hydroxyanisole butylé 0,05

Solution de sorbitol 2,0

Edétate disodigue 0,01

Para-hydroxybenzoate de méthyle 0,18

Eau distillée q.s.p. 100 g

29

Claims

REVENDICATIONS 1.- Procédé de préparation d'un composé de formule

H0>°

R

I

dans laquelle R est un hydrogène ou un hydroxy et A est -C=C-, -CH=CH- de configuration E ou -CH2CH2-/

caractérisé en ce qu'il comprend la réaction d'un composé de formule I correspondant contenant, au lieu des deux ou trois groupes hydroxy, deux ou trois groupes hydroxy protégés, de formule dans laquelle R^ et R3 sont des groupes alkyle en C1-C4 et R2 est un groupe alkyle en C1-C4, aryle ou aryl(alkyle en avec un agent capable d'éliminer les groupes protecteurs.
2.- Procédé selon la revendication 1, pour la préparation d'un composé selon la revendication 1, choisi parmi :

le l,25-dihydroxy-16-déhydro-23-didéhydrocholécalciférol, le l,25-dihydroxy-16,23E-bisdéhydrocholécalciférol et le 1,25-dihydroxy-16-déhydrocholécalciférol.
3.- Procédé de préparation d'un médicament, en particulier pour le traitement des maladies hyperprolifératives de la peau, notamment le psoriasis, ou pour le traitement des maladies néoplasiques, notamment la leucémie, caractérisé en ce qu'il comprend la mise sous forme galénique d'une quantité efficace d'un composé selon la revendication 1 ou 2, en particulier pour l'administration orale ou topique.
4.- Utilisation d'un composé selon la revendication 1 ou 2,

-OSi(R^,R2,R3),

C1-C4)

30

pour la fabrication d'un médicament pour le traitement des maladies hyperprolifératives de la peau, notamment le psoriasis, ou pour le traitement des maladies néoplasiques, notamment la leucémie.
5.- Composés nouveaux, compositions nouvelles, intermédiaires nouveaux, procédés d'utilisation nouveaux tels que décrits ici, en particulier dans les exemples.
6. - Composé de formule dans laquelle A est -CH=CH- de configuration E, -CH2-CH2-ou, en particulier -C=C-, et R2 et R3 sont indépendamment des groupes alkyle inférieurs, en particulier méthyle.

11

O

Q R | Q ! N A

en —

contenant Renvois