ME01263B - Rekombinantno modifikovan plazmin - Google Patents
Rekombinantno modifikovan plazminInfo
- Publication number
- ME01263B ME01263B MEP-2010-187A MEP18710A ME01263B ME 01263 B ME01263 B ME 01263B ME P18710 A MEP18710 A ME P18710A ME 01263 B ME01263 B ME 01263B
- Authority
- ME
- Montenegro
- Prior art keywords
- polypeptide
- seq
- lysine
- polynucleotide
- sequence shown
- Prior art date
Links
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 title description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 42
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 42
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 42
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 18
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 18
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 18
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 9
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 9
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 108010015052 miniplasmin Proteins 0.000 claims description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 8
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims description 6
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 claims description 5
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 claims description 5
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 5
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 claims description 5
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims description 4
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims description 4
- 101000605403 Homo sapiens Plasminogen Proteins 0.000 claims description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 4
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 claims description 4
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 3
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims description 3
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 claims description 2
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 claims description 2
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 claims description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 claims description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims 1
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 4
- 229940126587 biotherapeutics Drugs 0.000 description 2
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 1
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000003801 alpha-2-Antiplasmin Human genes 0.000 description 1
- 108090000183 alpha-2-Antiplasmin Proteins 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 108010068982 microplasmin Proteins 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Description
"(12) PATENTNI SPIS<br /> 1 <br />me<br />B 01263 ME<br />(11)<br />ME 01263B (19) Crna Gora<br />(21) Broj prijave: P-2010-187<br />(22) Datum podnošenja prijave: 21. 04. 2005<br />(45) Datum objavljivanja patenta: 20. 06. 2013<br /> Glasnik : 12/2013<br /> (51) Me dunarodna klasifikacija MKP<br />C12N9/68<br />2006.01<br />C12N15/57<br />2006.01<br />C12N5/10<br />2006.01<br />(30) Me dunarodno pravo prvenstva<br />/ US / 60/564,472 22. 04. 2004<br />(86) Broj i datum me dunarodne prijave:<br />/ US / PCT/US2005/013562 21. 04. 2005<br />(96) Broj i datum prijave evropskog patenta:<br />/ EP / 05737862.2 21. 04. 2005<br />(73) Nosilac Patenta<br />, GRIFOLS THERAPEUTICS INC.<br />, 4101 Research Commons, 79 TW Alexander Drive<br />, Research Triangle Park, NC 27709 , US<br />(74) Zastupnik:<br />, MUGOŠA STANKOVI C, Ana<br />, Trg Republlike 13 , 81000 Podgorica , ME<br />(72) Pronalaza c<br />, HUNT, Jennifer, A.<br />, 8709 O'Neal Road , Raleigh, North Carolina 27613 , US<br />, NOVOKHATNY, Valery<br />, 4617 Wee Burn Trail , Raleigh, North Carolina 27612 , US<br />(54) Naziv:<br />me<br />REKOMBINANTNO MODIFIKOVAN PLAZMIN<br />en<br />RECOMBINANTLY MODIFIED PLASMIN<br />(57) Apstrakt:<br />mePatentni zahtevi <br />1. Polinukleotid koji sadrži (obuhvata) sekvencu nukleotida koja kodira polipeptid <br />koji ima pojedinac ni N-terminalni kringl domen koji je najmanje 90% identic an kringl 1 <br />domenu nativnog humanog plazminogena; i C-terminalni domen koji je najmanje 90% <br />identic an mestu (položaju) aktiviranja i domenu serinske proteaze humanog plazminogena, <br />pri c emu se ovaj polipeptid vezuje za imobilizovan lizin i može se aktivirati pomoc u <br />plazminogenskog aktivatora. <br />2. Polinukleotid prema zahtevu 1, pri c emu je ovaj kodirani polipeptid ustvari SEQ ID <br />NO: 2 sa ne više od 30 aminokiselinskih supstitucija. <br />3. Polinukleotid prema ztlnevu 1 ili 2, pri c emu je ovaj kodirani polipeptid najmanje <br />90% identic an sekvenci prikazanoj u SEQ ID NO: 2. <br />4. Polinukleotid prema jednom ocl zahteva 1-3, pri c emu je ovaj kodirani polipeptid <br />najmanje 95% identic an sekvenci prikazanoj u SEQ ID NO: 2. <br />5. Polinukleotid prema jednom ocl zahteva 1-4, pri c emu je ovaj kodirani polipeptid <br />najmanje 98% identican sekvenci prikazanoj u SEQ ID NO: 2. <br />6. Polinukleotid prema jednom od zahteva 1-5, pri c emu je ovaj kodirani polipeptid <br />ustvari sekvenca prikazana u SEQ 1D NO: 2. <br />7. Polinukleotid prema jednom od zahteva 1-6, pri c emu je nukleotidna sekvenca <br />ovog polinukleotida ustvari sekvenca prikazana u SEQ ID NO: 1 ili njena degenerisana <br />varijanta. <br />8. Polipeptid kodiran pomoc u nukleinske kiseline prema jednom od zahteva 1-7. <br />9. Polipeptid prema zahtevu 8, pri c emu ovaj polipeptid pokazuje fibrinolitic ku <br />aktivnost koja je inhibirana pomoc u a2-antiplazmina pri brzini inhibicije koja je najmanje <br />oko pet puta brža od brzine inhibieije fibrinolitic ke aktivnosti mini-plazmina pomoc u a2- <br />antiplazmina. <br />01263 B<br />210. Polipeptid prema zahtevu 9, pri c emu je ova brzina inhibicije najmanje oko deset <br />puta, dvadeset puta, trideset puta ili c etrdeset puta brža od brzine inhibicije mini-plazmina. <br />11. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-10, pri c emu je imobilizovan lizin ustvari <br />lizin koji je vezan za matricu c vrstog nosac a odabranu iz grupe koja se sastoji od lizin-<br />agaroze, lizin-hidrogela, lizin-umreženo vezane agaroze. <br />12. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-1 1, pri c emu je imobilizovan lizin ustvari <br />lizin-umreženo vezana agaroza. <br />13. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-12, pri c emu ovaj polipeptid pokazuje <br />manji vezivni afinitet za fibrinogen od vezivnog afiniteta mini-plazmina za fibrinogen. <br />14. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-13, pri c emu ovaj polipeptid pokazuje vec i <br />vezivni afinitet za parcijalno raskinut fibrin od vezivnog afiniteta mini-plazmina za <br />parcijalno raskinut fibrin. <br />15. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-14, pri c emu ovaj polipeptid ima <br />aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazana u SEQ ID NO: 2, i njene konzervativne <br />supstitucije (zamene). <br />16. Polipeptid prema zahtevu 15, pri c emu ovaj polipeptid ima argininski ostatak na <br />relativnom položaju analognom položaju 76 iz arninokiselinske sekvence prikazane u SEQ <br />ID NO: 2. <br />17. Ekspresioni vektor koji sadrži polinukleotid prema jednom od zahteva 1-7. <br />18. Gajena (kultivisana) c elija koja sadrži ekspresioni vektor iz zahteva 17. <br />TALECRIS BIOTHERAPEUTICS, INC. <br />Zastupnici: <br />01263 B<br />3plazmin <br />ugljeni hidrati <br />aktivacija <br />Ap i fibrinsko <br />c. <br />vezivno mesto <br />TALECRIS BIOTHERAPEUTICS, INC. <br />\t EP 1 740 698 Bl <br />6070 <br />REKOMBINANTNO MODIFIKOVAN PLAZMIN <br />Slika 1 <br />vezivno mesto <br />Slika 2 <br />delta-plazminogen <br />01263 B<br />4Slika 3 <br />-19 <br />mi:- .7471NzvVLLLIA,FLK3GC?:. \"'Ef2L:DDnriti7Ce.P.5Lgr;VIKKOLISA, ::2S15:?.1::?-'ANGF,SETXFT. <br />\"713 <br />Yfi SREQQCviHAX:NRKGs I T,TF::-IRDVVT.i-- , ::415kr.47..fi=37:4.5 , :.\",}03CiRd;'?1.S_RD- 1.4:1:§ -,~A4, - 4- ..ft, <br />13,5 \t 143 \t 153 \t 1 <br />..krin 1 1 <br />EL5 -.KrH.5, 5W,Z, ZILIKDSQ5:::'M.:TC:- . 17'SK,F7,11:Kr4T,KKM'CRNP DREZ.RPWZ:FIICIPNKRIJEL11D <br />kringl 2 <br />KL:UTPE ,P•6'.-::'.3P?Yet::::1;KG7r22., 'N'Yli.t3tVi.t..1,110\"Allre,::~ , Q:11.11'11.:2.c-k•11:-1::wPCKtILDEraYcR <br />EN:PCG,KRA rf.c.(.. .}-zrv,.!sov, -RwF3CKI \t PJ CJDZ <br />krin91 4 <br />krin21 5 <br />firTk;;GLF1Ek't4'YC7Wri41,'JVWPWCY7711?RZ!:LYD)'CZA'PCC:fs:P:E:' <br />F:PHS \t T .1-11\"R,F \t :i <br />11.11 \t L, <br />-; 91 <br />- <br />\t 1SEQ \t NO;15 <br />01263 B<br />5Slika 4 <br />CKTGNGENY R <br />a -t•IHtSG,ENY:15 <br />- a - LE G T* o 7'2'R <br />. EYEr:D3‘. -7F . k <br />(poredjano) <br /> <br />5 5 <br />P:SCQ \t NO: <br />1:SEC). 1. D <br />1) :40: <br />NO: <br />RY=ILEc.. <br />RL3I t›Rc <br />1: 7 ,W E <br />CtLR c <br />L2bYCOVIN <br />Slika 5 <br />59 <br />2o <br />- <br />2 \t 3 4 5 tvl <br />01263 B<br />60.07 <br />0,05 <br />C.D <br />co 0.04 <br />C\\1 <br />o 0.0:3 <br />0.02 <br />101 <br />1\\ 1 <br /> <br /> <br /> <br /> <br />14 <br />12 <br />2 <br />Slika 6 <br /> <br />0.8 <br />0,4 <br /> <br />OD 405 nm <br /> <br />0.2 <br />• <br />• <br /> <br />20 <br />vreme (sek) <br />Slika 7 <br />/ <br />0..00 <br />5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 50 <br />eluirana zapremina , ml <br />01263 B<br />72.0 <br />1.9 <br />1,8 <br />Slika 8 <br />1.4 <br />1.3 <br /> <br />0,01 \t 01 10 <br />delta-plazminogen, 1.1,M <br />Slika 9 <br />— <br />30 <br />- <br />01263 B<br />8Slika 10 <br />plazmin <br />Km 193 +/- 7 IL11/1 <br />k„t: 760 <br />mini-plazmin <br />Km 160 +I- 30 .tM <br />kc, t: 770 min-1 <br />mikro-plazmin <br />Km 145 +/- 13 iuM <br />k„t: 795 min-1 <br />delta-plazmin <br />Km 138 +/- 5 gM <br />kcat: 755 miril <br />01263 B<br />9p=0.03 <br />50 <br />%-no smanjenje 4°- <br />težine ugrušaka <br />30• <br />20- <br />10 <br />0 <br />Slika 11 <br />sumarni grafikon - 10 ugrušaka, 3 donatora <br />70 <br />60 - <br />slani rastvor <br />\t Pm \t APm <br />\t 1 mg \t 0.44 mg <br />01263 B<br />10"
Claims (18)
1. Polinukleoticl koji sadrži (obuhvata) sekvencu nukleotida koja kodira polipeptid koji ima pojedinačni N-terminalni kringl domen koji je najmanje 90% identičan kringl 1 domenu nativnog humanog plazminogena; i C-terminalni domen koji je najmanje 90% identičan mestu (položaju) aktiviranja i domenu serinske proteaze humanog plazminogena, pri čemu se ovaj polipeptid vezuje za imobilizovan lizin i može se aktivirati pomoću plazminogenskog aktivatora.
2. Polinukleotid prema zahtevu 1, pri čemu je ovaj kodirani polipeptid ustvari SEQ ID NO: 2 sa ne više od 30 aminokiselinskih supstitucija.
3. Polinukleotid prema zahtevu 1 ili 2, pri čemu je ovaj kodirani polipeptid najmanje 90% identičan sekvenci prikazanoj u SEQ ili) NO: 2.
4. Polinukleotid prema jednom od zahteva 1-3. pri čemu je ovaj kodirani polipeptid najmanje 95% identičan sekvenci prikazanoj u SEQ ID NO: 2.
5. Polinukleotid prema jednom od zahteva 1-4, pri čemu je ovaj kodirani polipeptid najmanje 98% identičan sekvenci prikazanoj u SEQ II) NO: 2.
6. Polinukleotid prema jednom od zahteva 1-5, pri čemu je ovaj kodirani polipeptid ustvari sekvenca prikazana u SEQ ID NO: 2.
7. Polinukleotid prema jednom od zahteva 1-6, pri čemu je nukleotidna sekvenca ovog polinukleotida ustvari sekvenca prikazana u SEQ ID NO: 1 ili njena degenerisana varijanta.
8. Polipeptid kodiran pomoću nukleinske kiseline prema jednom od zahteva 1-7.
9. Polipeptid prema zahtevu 8. pri čemu ovaj polipeptid pokazuje fibrinolitičku aktivnost koja je inhibirana pomoću cx2-antiplazmina pri brzini inhibicije koja je najmanje oko pet puta brža od brzine inhibicije fibrinolitičke aktivnosti mini-plazmina pomoću a2-antiplazmina.
10. Polipeptid prema zahtevu 9. pri čemu je ova brzina inhibicije najmanje oko deset puta. dvadeset puta, trideset puta ili četrdeset puta brža od brzine inhibicije mini-plazmina.
11. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-10, pri čemu je imobilizovan lizin ustvari lizin koji je vezan za matricu čvrstog nosača odabranu iz grupe koja se sastoji od lizin-agaroze, lizin-hidrogela, lizin-umreženo vezane agaroze.
12. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-11, pri čemu je imobilizovan lizin ustvari lizin-umreženo vezana agaroza.
13. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-12, pri čemu ovaj polipeptid pokazuje manji vezivni afinitet za fibrinogen od vezivnog afiniteta mini-plazmina za fibrinogen.
14. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-13, pri čemu ovaj polipeptid pokazuje veći vezivni afinitet za parcijalno raskinut fibrin od vezivnog afiniteta mini-plazmina za parcijalno raskinut fibrin.
15. Polipeptid prema jednom od zahteva 8-14, pri čemu ovaj polipeptid ima aminokiselinsku sekvencu kao stoje prikazana u SEQ ID NO: 2. i njene konzervativne supstitucije (zamene).
16. Polipeptid prema zahtevu 15, pri čemu ovaj polipeptid ima argininski ostatak na relativnom položaju analognom položaju 76 iz aminokiselinske sekvence prikazane u SEQ ID NO: 2.
17. Ekspresioni vektor koji sadrži polinukleotid prema jednom od zahteva 1-7.
18. Gajena (kultivisana) ćelija koja sadrži ekspresioni vektor iz zahteva 17.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US56447204P | 2004-04-22 | 2004-04-22 | |
| PCT/US2005/013562 WO2005105990A2 (en) | 2004-04-22 | 2005-04-21 | Recombinantly modified plasmin |
| EP05737862A EP1740698B1 (en) | 2004-04-22 | 2005-04-21 | Recombinantly modified plasmin |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ME01263B true ME01263B (me) | 2013-06-20 |
Family
ID=61767921
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MEP-2010-187A ME01263B (me) | 2004-04-22 | 2005-04-21 | Rekombinantno modifikovan plazmin |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| ME (1) | ME01263B (me) |
-
2005
- 2005-04-21 ME MEP-2010-187A patent/ME01263B/me unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lijnen et al. | Strategies for the improvement of thrombolytic agents | |
| Stolow et al. | Identification and characterization of a novel collagenase in Xenopus laevis: possible roles during frog development. | |
| Bump et al. | Inhibition of ICE family proteases by baculovirus antiapoptotic protein p35 | |
| Rasper et al. | Cell death attenuation byUsurpin', a mammalian DED-caspase homologue that precludes caspase-8 recruitment and activation by the CD-95 (Fas, APO-1) receptor complex | |
| Collier et al. | Alanine scanning mutagenesis and functional analysis of the fibronectin-like collagen-binding domain from human 92-kDa type IV collagenase. | |
| CA2563675A1 (en) | Recombinantly modified plasmin | |
| JPS61205487A (ja) | ヒトプロティンｃ活性の発現ベクター | |
| US5472692A (en) | Pro-urokinase mutants | |
| Exterkate | The lactococcal cell envelope proteinases: differences, calcium-binding effects and role in cheese ripening | |
| KR20100102135A (ko) | 재조합적으로 변형된 플라스민 | |
| JP2001520042A5 (me) | ||
| HUT61592A (en) | Process for producing deoxyribonucleic acid molecules and vectors for expressing zymogen forms of human c protein | |
| Lengyel et al. | Affinity purification of recombinant trypsinogen using immobilized ecotin | |
| Wang et al. | Improving the activity of immobilized subtilisin by site-directed attachment through a genetically engineered affinity tag | |
| Caputo et al. | Electrostatic reversal of serine proteinase substrate specificity | |
| Wang et al. | Production and characterization of bio-immobilized keratinase in proteolysis and keratinolysis | |
| JP3043403B2 (ja) | ヒトプラスミノーゲン変異体を発現させる方法及びその原料 | |
| Nomura et al. | Sea urchin hatching enzyme (envelysin): cDNA cloning and deprivation of protein substrate specificity by autolytic degradation | |
| ME01263B (me) | Rekombinantno modifikovan plazmin | |
| EP0529003B1 (en) | IgG-BINDING PROTEIN | |
| WO1998024886A1 (en) | Mast cell protease that cleaves fibrinogen | |
| Robache‐Gallea et al. | Partial purification and characterization of a tumor necrosis factor‐α converting activity | |
| Marti et al. | Determination of the complete amino‐acid sequence of porcine miniplasminogen | |
| Verstraete | The search for the ideal thrombolytic agent | |
| CA2064774C (en) | Culture methods for producing activated protein c |