MX2012015228A - El uso de ácido caftárico y bateria láctica en complemento alimenticio para regular la pigmentación de la piel. - Google Patents
El uso de ácido caftárico y bateria láctica en complemento alimenticio para regular la pigmentación de la piel.Info
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Abstract
La presente invención se relaciona generalmente con el campo de suplementos cosméticos y/o alimenticios. Más específicamente, la presente invención se enfoca a proporcionar el uso de al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y un microorganismo y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico, para mejorar el tono de la piel y evitar y/o tratar la hiperpigmentación de la piel y/o las imperfecciones de color de piel como las manchas de edad y otros desórdenes de la piel caracterizados por pigmentos anormales. También, la presente invención se enfoca a proporcionar un agente aclarador de piel.
Description
EL USO DE ÁCIDO CAFTÁRICO Y BACTERIA LÁCTICA EN COMPLEMENTO ALIMENTICIO PARA REGULAR LA PIGMENTACIÓN DE LA PIEL
La presente invención se refiere en general al campo de complementos alimenticios con fines estéticos. Más específicamente, la presente invención tiene como objetivo proporcionar el uso de un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y un microorganismo y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico, para prevenir y/o tratar la hiperpigmentación de la piel, imperfecciones del color de la piel tales como manchas de la edad y otros trastornos de la piel caracterizados por pigmentos anormales. La presente invención también tiene como objetivo mejorar el tono de la piel, así como proporcionar un agente para aclarar o blanquear la piel.
Antecedentes de la invención
El color de la piel se determina principalmente por la cantidad y tipo de melanina, un pigmento marrón presente en la piel. Cantidades menores de melanina resultan en un color de piel más claro, mientras que cantidades mayores resultan en un color de piel más oscuro. Además, la hiperpigmentación en la piel es causada por la sobreexpresion o acumulación de melanina en la piel. Como resultado, la vía involucrada en la producción de melanina ha sido el objetivo de muchos inhibidores a fin de poder reducir los niveles producidos. Una de las principales enzimas involucradas en la vía de melanina es la tirosinasa.
La síntesis de melanina es un proceso bajo control hormonal que incluye la hormona estimuladora de melanocitos (MSH) y los péptidos de hormona adrenocorticotrópica (ACTH) que se producen a partir de la proopiomelanocortina
precursora. Se simula por los daños del ADN que son causados también por radiaciones UVB.
Entonces, la exposición al sol con el transcurso del tiempo puede inducir
\
muchas reacciones bioquímicas en la piel, lo que conduce, por ejemplo, a quemaduras solares y bronceado. Otras consecuencias de la exposición al sol se acumulan con el transcurso del tiempo. Estos cambios pueden resultar en el desarrollo de manchas de la edad y crear un tono de piel desigual y manchado. Desafortunadamente, muchos de los productos comercialmente disponibles en el mercado actual son sólo poco efectivos o contienen agentes activos que son inestables y pierden su potencia cuando se incorporan en una fórmula final.
La capacidad de modificar la expresión del contenido de pigmentos en la piel y de promover un tono de piel uniforme o un tono de piel más claro es altamente deseada en la sociedad actual. Muchas personas desean modificar su tono de piel para reducir las manchas de la edad, etc., por razones puramente estéticas.
Como resultado, los esfuerzos por desarrollar composiciones efectivas se han enfocado en agentes que inhiben la actividad de la tirosinasa. Por ejemplo, una variedad de inhibidores de tirosinasa, tales como hidroquinona, vitamina C, cisteína, ácido kójico, arbutina y glutationa, entre otros, se han propuesto en composiciones tópicas. También se han sugerido una variedad de composiciones dermatológicas para mejorar la apariencia de trastornos de pigmentación tales como los observados en melasma, pecas, vitíligo, piebaldísmo, fenilcetonuría y similares, y/o con fines estéticos.
Además, el uso de composiciones de blanqueamiento de la piel se ha expandido ampliamente. Sin embargo, destruyen la melanina o inhiben su formación. Muchas de estas contienen fuertes químicos tales como peróxidos, ácidos o
formaldehídos o materiales tiolados. Las terapias menos rigurosas tienen otras desventajas.
Se han sugerido retinoides tópicos y corticosteroides tópicos como agentes de hipopigmentación, así como el tratamiento con láser y exfoliaciones químicas, pero estos no proporcionan las respuestas deseadas.
Otras composiciones sugirieron el uso de materiales naturales en la piel, que en algunos casos se han usado por siglos en Asia o Europa para blanquear la piel y áreas de la piel o mejorar la apariencia de la piel clara. Estos incluyen el uso de limón, naranja, pepino, ginkgo, algarroba, rosa mosqueta, hierba de geranio, canela, mejorana dulce, romero, etc.
Para combatir los trastornos relacionados con el pigmento anormal o para aclarar el tono de la piel se han propuesto varios compuestos que, cuando se aplican tópicamente a la piel, son capaces de reducir la actividad de tirosinasa y en consecuencia limitar la producción de melanina. Desafortunadamente, los tratamientos actualmente disponibles no son completamente satisfactorios, en particular en cuanto a los efectos secundarios que con frecuencia se asocian a los mismos, tales como efectos secundarios irritantes con ciertos agentes tópicos.
Por lo tanto sería altamente deseable tener preparaciones alternativas que no tengan las desventajas de aquellas descritas en la técnica anterior. En particular, sería altamente deseable desarrollar composiciones estéticas nutricionales para administrar por vía oral que tengan una estabilidad y eficacia mejorada para promover un tono de piel parejo o un tono de piel más claro.
También permanece una necesidad de agentes activos que sean efectivos para tratar y/o prevenir trastornos de pigmentación en la piel, en particular aquellos debido a factores del medio ambiente o del envejecimiento.
El objeto de la presente invención es satisfacer estas necesidades.
Compendio de la invención
Los inventores de la presente pudieron alcanzar este objetivo proporcionando una composición de un complemento alimenticio que comprende al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y una bacteria láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico.
Por lo tanto, de acuerdo con un primer objeto, la invención se refiere al uso estético de al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y una bacteria láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico, para tratar y/o prevenir trastornos de la pigmentación de la piel. Dichos trastornos de la piel son en particular aquellos debidos a la edad o a factores del medio ambiente (por ejemplo UV), tales como manchas de la edad. También pueden ser trastornos de la piel que se observan en melasma, pecas, vitíligo, piebaldismo, fenilcetonuria, y similares.
Los inventores de la presente han descubierto que un ingrediente que contiene ácido caftárico tratado con una bacteria láctica suprime de manera efectiva la formación de melanina, melanogénesis, a pesar del hecho que los extractos muestran poca o ninguna inhibición de la actividad de tirosinasa. El resultado es sorprendente e inesperado considerando el papel fundamental de la tirosinasa en la melanogénesis y el enfoque de los esfuerzos de desarrollo en la técnica anterior para inhibir esta enzima.
A los efectos de la presente invención, el término "piel" pretende significar la piel del rostro o del cuerpo.
A los efectos de la presente invención la expresión "cantidad efectiva" pretende significar una cantidad suficiente para obtener el efecto esperado.
A los efectos de la presente invención el término "prevenir" pretende significar el hecho de reducir el riesgo de que ocurra la manifestación del trastorno en consideración.
La presente invención también está dirigida al uso estético del ingrediente mencionado anteriormente como un agente activo para tratar y/o una composición para prevenir las imperfecciones en la piel, en particular para mejorar el tono de la piel o la complexión de la piel.
La presente invención también está dirigida al uso estético del ingrediente mencionado anteriormente como un ingrediente activo para tratar y/o prevenir las imperfecciones del pigmento de la piel. Como resultado, la complexión se vuelve más brillante y más homogénea, sin áreas de discromía o de sequedad.
La presente invención también está dirigida al uso estético de una cantidad efectiva de al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y una bacteria láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico, como un agente activo para blanquear o aclarar el tono de la piel.
Los inventores de la presente también han descubierto que el ingrediente de acuerdo con la invención mejora además la función de hidratación y/o de barrera de la piel.
Un uso de acuerdo con la presente invención también puede comprender el uso de al menos un ingrediente que contenga ácido caftárico y/o derivados y una bacteria láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico en combinación con una cantidad efectiva de al menos un agente activo para mejorar aun más la hidratación de la piel o envejecimiento de la piel, en particular como se describe más adelante.
De acuerdo con otro de sus aspectos, el objeto de la invención es un método, en particular un método estético, para tratar y/o prevenir imperfecciones del tono de la piel y los trastornos asociados con la hiperpigmentacion, en particular trastornos estéticos, en un individuo que comprende al menos un paso de administrar, a dicho individuo, al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y una bacteria láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico.
Las composiciones de acuerdo con la presente invención se administran oralmente. Esto tiene la ventaja de actuar globalmente en toda la piel, en sus capas profundas (dermis, hipodermis), por medio de un modo de administración rápido y relativamente no restrictivo. Específicamente, los metaboiitos y otros nutrientes activos son en particular distribuidos dentro de la matriz dérmica por medio del torrente sanguíneo. La administración oral también tiene la ventaja de ser un modo de administración rápido y relativamente no restrictivo.
Descripción detallada de la invención
Ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados
El ácido caftárico es
y sus derivados incluyen compuestos que exhiben al menos una alquilación C1 -C3 de un grupo OH y/o un grupo C02H. Por ejemplo, ambos grupos fenólicos OH pueden estar alquilados. Como alternativa y/o adicionalmente ambos grupos carboxilo se pueden transformar en los esteres de alquilo correspondientes. En una realización, todos los grupos OH y todos los grupos C02H están alquilados.
Los derivados típicos son compuestos en los que ambos grupos fenólicos OH están metilados y/o compuestos en los que ambos grupos carboxilos están metilados.
Además, los derivados típicos incluyen compuestos con la siguiente fórmula
en donde y/o R2 se seleccionan del grupo que consiste en H; CH3; arilo, tal como fenilo, bencilo, tolilo, o-xililalquilo; acilo C C3, aminoácidos, monosacáridos y/o R2 pueden ser idénticos o pueden diferir unos de otros.
Un derivado de ácido caftárico es el siguiente compuesto:
El ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados del mismo puede ser cualquier ingrediente que contenga ácido caftárico y/o derivados del mismo, de forma natural o agregada, pero es preferiblemente un alimento natural tal como lechuga, endivia, diente de león, uva, orujo de uva; o combinaciones o extractos de los mismos.
En una realización, el material vegetal se agrega a la composición estética oral en forma de un extracto, tal como un extracto de endivia. El extracto de endivia puede preparase de cualquier parte adecuada del material vegetal incluidos, por ejemplo, la raíz, la pulpa, similares o combinación de los mismos.
Los extractos adecuados de endivia a los efectos de la presente invención también son extractos que están comercialmente disponibles, tales como por ejemplo Leroux MS55 (comercializado por Leroux SAS, Francia).
En una realización preferida particular de la presente invención, los extractos adecuados de endivia pueden preparase mediante cualquier medio conocido en la técnica, por ejemplo, mediante extracción de vapor, extracción de disolvente, destilación, compresión o trituración. En particular, el extracto es obtenible mediante la extracción con un disolvente del material vegetal de endivia, mediante una extracción de agua o una extracción de alcohol/agua, por ejemplo mediante una extracción de etanol/agua o extracción de metanol/agua. El extracto puede usarse en forma líquida (por ejemplo Leroux MS55, Leroux MS70) o en forma de polvo (por ejemplo Leroux Sol B).
Para facilitar su manipulación, el material vegetal se encuentra preferiblemente en una forma seca y triturada o en polvo. Como se describe a continuación, los procesos utilizan endivia triturada y/o extractos de la misma. Sin embargo, se comprenderá que cualquier material de planta adecuado puede usarse en cualquier forma adecuada y agregarse al producto de acuerdo con la presente invención.
El extracto se procesa de modo que su sabor puede mejorarse. Por ejemplo, sabores amargos que son típicamente asociados con materiales vegetales, tales como la endivia, pueden eliminarse mediante el procesamiento de la planta en un extracto. El extracto también puede preparase de modo que la cantidad de agente bioactivo en el producto del extracto final pueda controlarse de manera deseable.
Debe apreciarse que el material vegetal puede procesarse para formar un extracto en una variedad de maneras diferentes y adecuadas. En general, el material vegetal, tal como la raíz de la endivia, está molido, en polvo o se proporciona en cualquier forma adecuada. El material vegetal puede entonces procesarse adicionalmente en una cantidad de diferentes etapas para producir el extracto del producto. En una realización, se realiza un procedimiento de desgrasado en el material vegetal para producir un extracto que resulta de grasas eliminadas del material vegetal. El procedimiento de desgrasado puede llevarse a cabo bajo cualquier condición del proceso de desgrasado adecuada con cualquier tipo y cantidad de disolvente adecuado incluyendo, por ejemplo, hexano.
En una realización, el extracto resultante del procedimiento de desgrasado puede procesarse adicionalmente mediante hidrólisis ácida para producir otro tipo de extracto de la planta que puede agregarse a la composición nutricional de la presente invención. El procedimiento de hidrólisis ácida puede llevarse a cabo bajo cualquier condición del proceso adecuada con cualquier tipo y cantidad de disolvente adecuado, incluyendo, por ejemplo, acetato de etilo.
En una realización, el extracto del procedimiento de desgrasado puede procesarse adicionalmente mediante un procedimiento de extracción de disolventes. La extracción de disolventes puede llevarse a cabo bajo cualquier condición del proceso adecuada y en la presencia de cualquier cantidad y tipo de disolvente adecuado. En una realización, el disolvente incluye una solución de metanol ("MeOH") y agua mezcladas en una proporción de volumen de 1 :1. La solución resultante del procedimiento de extracción de disolventes puede procesarse adicionalmente mediante la evaporación del disolvente en condiciones adecuadas para producir otro extracto. Alternativamente, la solución resultante puede tratarse con un agente adsorbente, tal como polivinilpolipirrolidona o similar, para atrapar polifenoles. El tratamiento del agente adsorbente puede llevarse a cabo bajo cualquier condición del proceso adecuada.
La cantidad de ácido caftárico o un extracto de planta que lo contiene en el producto dependerá de varios factores, tales como la naturaleza del extracto, la condición de la planta, la edad, condición y tamaño de la persona o animal a tratar, la frecuencia a la que el producto que se administrará y/o el tipo específico de trastorno o daño de la piel a tratar o prevenir o el efecto estético deseado.
Los inventores de la presente han encontrado que la efectividad del ácido caftárico o un extracto que lo contenga de acuerdo con la presente invención es generalmente dependiente de la dosis y sigue una curva de respuesta a la dosis. Si generalmente se van a prevenir trastornos de la piel o daños y el producto será usado frecuentemente, cantidades muy pequeñas de ácido caftárico o un extracto del mismo serán suficientes para alcanzar el efecto deseado. Si se va a tratar un trastorno grave del pigmento de la piel, mayores cantidades del ingrediente serán más apropiadas, aunque pequeñas cantidades también producirán un efecto.
En una realización preferida, el ingrediente se enriquece en ácido caftárico y/o derivados del mismo. Por ejemplo, el ingrediente y/o la composición pueden comprender ácido caftárico y/o derivados del mismo en una cantidad en el rango de 0,001 -99,99 % en peso de peso seco, preferiblemente 0, 1 -50 % en peso de peso seco, más preferiblemente 0,1-10 % en peso de peso seco. El ingrediente y/o la composición
pueden comprender el microorganismo y/o enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar un ácido tartárico y/o cafeico en una cantidad en el rango de 0,001 -99,99 % en peso de peso seco, preferiblemente 0,1 -50 % en peso de peso seco 10, más preferiblemente 0, 1 -10 % en peso de peso seco.
Generalmente, es preferible que el producto contenga endivia o un extracto del mismo en una cantidad en el rango de aproximadamente 0,1 g/l a 10 g/l, preferiblemente en el rango de 0,5 g/l a 3 g/l del producto. Si la cantidad total de un producto no puede medirse en litros, es preferible que el producto contenga endivia o un extracto del mismo en una cantidad en el rango de aproximadamente 0,1 g/kg a 10 g/kg, preferiblemente en el rango de 0,5 g/kg a 3 g/kg del producto.
Preferiblemente el producto contiene endivia o un extracto de la misma en una dosis diaria de 0,01 g-100 g, preferiblemente 0,25 g-10 g.
El ingrediente a mezclar con el ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados del mismo comprende una bacteria ácido láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar el ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico. Estos dos ingredientes pueden mezclarse brevemente antes del consumo o pueden proporcionarse como una composición lista para su consumo.
Microorganismos o enzima capaces de hidrolizar ácido caftárico
El ácido caftárico y/o sus derivados pueden hidrolizarse mediante una bacteria ácido láctica capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo. El paso de hidrólisis generará ácido tartárico y/o ácido cafeico.
Sin ánimo de restringirse a la teoría, los inventores creen que la hidrólisis ocurre como se describe en el esquema siguiente. Nótese que todos los pasos de reacción catalizados por la "enzima" también pueden ser catalizados por la bacteria ácido láctica descrita en la presente solicitud y/o combinaciones de la bacteria ácido láctica y enzimas.
Ácido caftárico
Ácido cafeico Ácido tartárico
Los inventores han encontrado en forma sorprendente que tratar un ingrediente que comprende ácido caftárico y/o derivados del mismo con una bacteria ácido láctica o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico resulta, por ejemplo, en una actividad mejorada del ingrediente.
Además, se ha encontrado que este tratamiento puede ocurrir in vivo cuando un humano o un animal ingiere una composición que comprende ácido caftárico y/o derivados del mismo en combinación con una bacteria ácido láctica capaz de hidrolizar ácidos clorogénicos para generar ácidos fenólicos.
Una bacteria ácido láctica preferida capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico es una bacteria ácido láctica probiótica que tiene una actividad esterasa, tal como clorogenato esterasa y/o feruloil esterasa, preferiblemente Lactobacillus o Bifidobacterium, por ejemplo L. johnsonii, B. longum y B. lactis (CNCM I-3446)., aun más preferiblemente Lactobacillus johnsonii La1 (CNCM 1-1225), B. longum BB 536 y B. lactis BB12.
B. longum BB 536 es comercializada por Morinaga Nutritional Foods, Inc.
B. lactis BB12 es comercializada, por ejemplo, por Chr. Hansen, DK-2970
Horsholm.
En una realización de la presente invención, la bacteria ácido láctica puede usarse en una forma no replicante.
La capacidad de una bacteria ácido láctica o una fracción de la misma de hidrolizar ácido caftárico puede evaluarse como se describió en detalle para L. johnsonii CNCMI-1225 (remítase a los ejemplos).
En otra realización, una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico para generar ácido tartárico y/o cafeico también se agrega a la bacteria ácido láctica. Preferiblemente, dicha enzima se selecciona del grupo que consiste en esterasas, tales como clorogenato esterasa, tanasa y/o feruloil esterasa. Puede agregarse en una cantidad tal que preferiblemente al menos 5%, al menos 30%, al menos 50% o al menos 75% de ácido caftárico presente en la composición se hidroliza antes y/o durante el consumo.
Enzimas adecuadas que pueden usarse en el marco de la presente invención incluyen, por ejemplo, esterasas, por ejemplo, clorogenato esterasa derivada de Aspergillus japonicus (comercializada por Kikkoman, Japón) y tanasa de Aspergillus oryzae (EC 3.1 .1.20) (comercializada por Kikkoman, Japón). La enzima puede estar presente como una enzima purificada (inmovilizada o no) o, por ejemplo, en forma de un lisado celular de un microorganismo. Las células adecuadas pueden ser por ejemplo células de los microorganismos mencionados anteriormente. Los métodos adecuados para producir un lisado celular son conocidos en la técnica.
La composición y/o los ingredientes de la invención deben formularse de modo tal que la cepa de la bacteria ácido láctica no fermente ni reaccione con la composición durante el almacenamiento. Esto puede alcanzarse, por ejemplo, mediante la formulación de la composición como un polvo seco y/o mediante la encapsulación de la bacteria ácido láctica de modo que se libere solamente cuando la composición se mezcla con al menos otro ingrediente o durante la digestión.
La bacteria ácido láctica debe estar presente en una cantidad suficiente para hidrolizar una cantidad sustancial de ácido caftárico para generar ácido tartárico y/o cafeico durante la digestión. La cantidad de bacteria ácido láctica y/o enzima necesaria puede ser determinada, por ejemplo, por expertos en la técnica, por ejemplo, dependiendo del objeto a tratar o de la velocidad a la cual debería liberarse el ácido tartárico y/o cafeico. Preferiblemente al menos 5%, tal como al menos 30%, al menos 50% o al menos 75% de ácido caftárico presente en la composición se hidroliza antes y/o durante el consumo.
Las composiciones de acuerdo con la invención pueden estar en cualquiera de las formas galénicas usualmente disponibles para el método de administración seleccionado.
Formas galénicas
Las composiciones de acuerdo con la invención pueden estar en cualquiera de las formas galénicas normalmente disponibles para el método de administración seleccionado. El portador puede ser de naturaleza diversa, dependiendo del tipo de composición en consideración.
Un complemento alimenticio para la administración oral puede estar presente en cápsulas, cápsulas de gelatina, cápsulas blandas, comprimidos, comprimidos recubiertos de azúcar, pildoras, pastas o pastillas, gomas o soluciones para beber o emulsiones, un jarabe o un gel. Dicho complemento puede incluir también un edulcorante, un estabilizador, un antioxidante, un aditivo, un agente saborizante y/o un colorante. La formulación del mismo se lleva a cabo por medio de los métodos usuales para producir comprimidos recubiertos de azúcar, cápsulas de gel, geles, hidrogeles para una liberación controlada, emulsiones, comprimidos o cápsulas.
En una realización la invención se refiere a un kit para tratar y/o prevenir trastornos de pigmentación de la piel y/o imperfecciones de la piel que comprende un tratamiento oral con una composición que contiene al menos un ingrediente que contiene ácido cicórico y/o derivados y una bacteria ácido láctica y/o enzima capaz de hidrolizar ácido cicórico para generar ácido tartárico y/o cafeico en un complemento alimenticio, combinado con un complemento alimenticio oral o composición tópica que contiene opcionalmente un microorganismo probiótico en forma muerta, viva o semi-activa, o un agente hidratante o antienvejecimiento.
El kit para preparar un complemento alimenticio comprende al menos dos partes:
a) una primera parte que comprende un ácido cicórico y/o derivados del mismo que contiene un ingrediente; y
b) una segunda parte que comprende una bacteria ácido láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido cicórico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico.
Los expertos en la técnica comprenderán que pueden combinar libremente todas las características de la presente invención descritas en la misma sin alejarse del alcance de la invención tal como se divulga. En particular, las características descritas para loa usos de la presente invención pueden aplicarse a la composición y/o al kit de la presente invención y viceversa.
Uso
Los productos de la invención pueden ser usados eficientemente para tratar o prevenir trastornos de pigmentación de la piel o aclarar estéticamente el tono de la piel, por ejemplo mediante la disminución de la producción de melanina. En efecto, se mostró que el ingrediente que contiene ácido caftárico tratado con la bacteria probiótica La-1 disminuye in vitro la síntesis de melanina (Ejemplo 1 , Figura 1 ). La producción de tirosinasa también disminuyó pero de forma limitada (Figura 2), lo que sugiere que la disminución en melanina no se debió a la inhibición de tirosinasa sino a mecanismos que actúan corriente arriba o corriente abajo de esta enzima.
Las composiciones de acuerdo con la presente invención tienen además un efecto positivo en fortalecer la barrera de la piel y mantener la hidratación de la piel.
Como resultado, las imperfecciones del pigmento se reducen y la complexión se vuelve más brillante y más homogénea, sin áreas de discromía o de sequedad.
Por lo tanto, de acuerdo con un objeto, la invención se refiere al uso estético de una cantidad efectiva de al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y una bacteria láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico, como un agente activo para tratar y/o prevenir trastornos de la pigmentación de la piel, en particular aquellos debido a la edad o factores del medio ambiente tales como UV.
Las presentes composiciones también pueden usarse como agente activo para blanquear o aclarar el tono de la piel, que es particularmente deseable para la población asiática.
Un uso de acuerdo con la presente invención también puede comprender el uso de las composiciones en combinación con una cantidad efectiva de al menos un agente activo para mejorar la hidratación de la piel o el envejecimiento de la piel, en particular como se describe más adelante.
De acuerdo con otro de sus aspectos, el objeto de la invención es un método, en particular un método estético para tratar y/o prevenir imperfecciones en el tono de la piel y los trastornos asociados con la hiperpigmentación, en particular trastornos estéticos, en un individuo, que compren al menos un paso de administrar, a dicho individuo, composiciones como se describió anteriormente.
El método de tratamiento estético de la invención puede llevarse a cabo en particular mediante la administración oral de la composición como se describió anteriormente. La administración oral comprende ingerir, en una o más ingestas, una composición oral como se definió anteriormente.
Puede comprender una aplicación única. De acuerdo con otra realización, la aplicación se repite, por ejemplo, 2 a 3 veces por día, durante un día o más, y generalmente por un periodo sostenido de al menos 4, o incluso 1 a 15, semanas.
Además, se pueden prever combinaciones de tratamiento opcionalmente con formas orales o tópicas para complementar o reforzar la actividad de las composiciones tal como se definen en la invención.
Por lo tanto, un tratamiento tópico u oral con una composición que contiene ácido caftárico de acuerdo con la invención, combinado con una composición oral o tópica que contiene opcionalmente otro ingrediente activo, en particular un microorganismo probiótico, u otros probióticos en forma muerta, viva o semi-activa o un agente hidratante o antienvejecimiento puede imaginarse como un kit. Los ingredientes se mezclan, antes de ser formulados, en el orden y en las condiciones determinadas fácilmente por los expertos en la técnica.
Los ingredientes se mezclan, antes de ser formulados, en el orden y en las condiciones determinadas fácilmente por los expertos en la técnica.
Otras ventajas y características de la presente invención son evidentes a partir de los siguientes Ejemplos y Figuras. Los ejemplos a continuación son por lo tanto presentados a modo de ilustración no taxativa del campo de la invención. En estos ejemplos, a menos que se indique de otra forma, los porcentajes son porcentajes en peso y los rangos de valores escritos en la forma "entre... y..." incluyen los límites superior e inferior especificados. El término "ufe" denota "unidad de formación de colonias". Esta es la unidad de medida usada para cuantificar las bacterias vivas.
Figuras
Figura 1 : Producción de melanina mediante melanocitos murinos pre-tratados con ácido caftárico + La1 vs. testigos (positivo/negativo).
Figura 2: Producción de tirosinasa mediante melanocitos murinos pre-tratados con ácido caftárico + La1 vs. testigos (positivo/negativo).
Figura 3: Síntesis de filagrina por queratinocitos epidérmicos primarios humanos pre-tratados con ácido caftárico + La1 vs. testigos (positivo/negativo).
EJEMPLOS
Ejemplo 1 : Hidrólisis de ácido caftárico
1 - Hidrólisis de ácido caftárico con clorogenato esterasa
Una solución de clorogenato esterasa (0,8 mg, 24 U/g, de Kikkoman Japón) en 100 µ? de solución amortiguadora (50 mM, pH 7,0) se agregó a una solución de ácido caftárico (0,57 mg) en 100 µ? de solución amortiguadora de fosfato (50 mM, pH 7,0). La mezcla se incubó entonces a 37 °C durante 4 hrs. Después del tiempo de reacción, la actividad enzimática se detuvo mediante un tratamiento de calor (5 min, 90°C) y la mezcla se centrifugó (Microcon YM10, 30 min, 14000 g). El sobrenadante se analizó entonces mediante HPLC. Una reacción testigo se llevó a cabo en paralelo en las mismas condiciones de reacción pero sin la enzima.
2- Hidrólisis de ácido caftárico con L johnsonii (La1 )
Se cultivaron (7,0 E08 ufc/ml) y centrifugaron (5000 g, 10 min) células de L johnsonü (CNCM 1-1225) y los granulados se resuspendieron en solución amortiguadora de fosfato (50 mM, pH 7,0) a una concentración de 0,61 g/ml. A 100 µ? de esta solución de células se agregaron 100 µ? de una solución de ácido caftárico (12 mM) y la mezcla se incubó a 37°C. Se retiraron muestras a diferentes tiempos de reacción, se centrifugaron (3000 g, 5 min), se filtraron a través de filtros de jeringa de un tamaño de poro de 0,45 pm (Millipore SLHA 025 BS) y se analizaron mediante HPLC.
Una reacción testigo se llevó a cabo en paralelo en las mismas condiciones de reacción pero sin la bacteria.
3- Hidrólisis de ácido caftárico con extracto de L johnsonii (células lisadas) Se cultivaron (7,0 E08 ufc/ml) y centrifugaron (5000 g, 10 min) células de L. johnsonii (CNCM 1-1225) y las grageas se resuspendieron en solución amortiguadora de fosfato (50 mM, pH 7,0) a una concentración de 0,61 g/ml. Las células se lisaron entonces usando el método de microesferas de vidrio. Se pusieron 600 µ? de preparación de células en un Mini-Beadbeater durante 1 min de agitación intensa, se enfrió en hielo, y se colocó otro min en el Mini-Beadbeater. El extracto de célula bruto (100 µ?) se agregó entonces a 100 µ? de una solución de ácido caftárico (12 mM, solución amortiguadora de fosfato 50 mM, pH 7,0) y la mezcla se incubó a 37°C. Se retiraron muestras a diferentes tiempos de reacción, se centrifugaron (3.000 g, 5 min), se filtraron a través de filtros de jeringa de un tamaño de poro de 0,45 pm (Millipore SLHA 025 BS) y se analizaron mediante HPLC.
4- Hidrólisis de ácido caftárico con una preparación de La1 secada por pulverización
Se disolvieron 10 mg de una preparación de La1 secada por pulverización (3,3 E09 ufc/g) en 100 µ? de solución amortiguadora de fosfato (50 mM, pH 7,0). A esta solución se agregaron 100 µ? de una solución de ácido caftárico (12 mM, solución amortiguadora de fosfato 50 mM, pH 7,0). La mezcla se incubó entonces a 37°C y se retiraron muestras a diferentes tiempos de reacción. Después de la centrifugación (3000 g, 5 min) y filtración (filtros de jeringa de un tamaño de poro de 0,45 pm, Millipore SLHA 025 BS) las muestras se analizaron mediante HPLC.
Análisis por HPLC
El análisis por HPLC-DAD de ácido caftárico y productos de hidrólisis se realizó en el sistema Agilent 1 100 equipado con la columna de fase inversa Atlantis C18 (4,6 x 100 mm, tamaño de partícula 3 pm) y un detector de arreglo de diodos. La columna se equilibró con agua que contenía 0,1% de ácido fórmico. Después de la inyección, un gradiente lineal con una composición de disolvente final de 55% de agua y 45% de acetonitrilo (que contenía 0,1 % de ácido fórmico) se llevó a cabo en 12 min a una tasa de flujo de 1 ml/min. Se monitorearon el ácido caftárico y ácido cafeico mediante UV a 320 nm y se cuantificaron usando curvas de calibración estándares.
RESULTADOS
Bacterias evaluadas
Tabla 1
En particular L. johnsonii (La1 ), B. longum BB 536 y B. lactis BB12 son capaces de hidrolizar ácido caftárico. Los mejores resultados en términos de tasa de reacción y rendimiento de la reacción se obtienen con L. johnsonii (La1 ).
Enzimas evaluadas
Tabla 2
Solo la clorogenato esterasa y feruloil esterasa fueron capaces de hidrolizar el ácido caftárico en ácidos cafeico y tartárico.
Hidrólisis de ácido caftárico con clorogenato esterasa
Tabla 3: Hidrólisis de ácido caftárico en ácidos cafeico y caftárico mediante clorogenato esterasa. Concentración en % relativo con respecto a referencia sin tratar a t=0
2- Hidrólisis de ácido caftárico con células nuevas de La1 Después de 4 hrs de tiempo de reacción todo el ácido caftárico se transformó en ácido cafeico y ácido tartárico según se analizó mediante HPLC.
3- Hidrólisis de ácido caftárico con extracto de La1 (células lisadas)
En comparación con las células enteras, la hidrólisis de ácido caftárico con células lisadas resultó en un aumento de la tasa de reacción. En efecto, después de solamente 2 hrs todo el ácido caftárico se transformó en ácido cafeico y ácido tartárico.
4- Hidrólisis de ácido caftárico con una preparación de La1 secada por pulverización.
Tabla 4: Hidrólisis de ácido caftárico en ácidos cafeico y tartárico mediante una preparación de L. johnsonii secada por pulverización. Concentración en % relativo con respecto a referencia sin tratar a t=0
Ejemplo 2: Efecto en la pigmentación de la piel
Para evaluar el efecto beneficioso potencial de los ingredientes hacia la des- o pro- pigmentación de la piel usamos un cultivo 2D de melanocitos murinos (B16) y realizamos 2 pruebas: 1 - evaluación de la producción de melanina y 2- evaluación de producción de tirosinasa.
1. Las condiciones del cultivo celular
Se cultivaron células B16 en DMEM 1 g/L de glucosa sin rojo fenol complementado con 10% de suero de ternero fetal, en una cámara humedecida a 37°C y que contenía 5% de C02.
2. La producción de melanina mediante la línea celular de melanocito muríno
B16
Las células se incubaron con los ingredientes seleccionados o las referencias de prueba (ácido kójico a 400 pg/mL) durante 72 horas, en presencia o ausencia de NDP-MSH un análogo de MSH. La cantidad total de melanina (extracelular e intracelular) se evaluó mediante medidas de la densidad óptica a 405 nm de cada muestra contra estándares de melanina en presencia o en ausencia de NDP-MSH.
3. La producción de tirosinasa mediante la línea celular de melanocito muríno
B16
Las células se incubaron con los ingredientes seleccionados o las referencias de prueba (Ácido kójico a 400 pg/mL) durante 48 horas. La producción de tirosinasa se evaluó mediante ¡nmunomarcación.
Ingredientes:
Los ingredientes seleccionados se enumeran en la Tabla 5 a continuación. El ácido caftárico ha sido pre-tratado con La-1 (cultivo de Lactobacillus Johnsonii CNCM I-1225, 1.19E10 ufc/g secada por pulverización) durante 24 horas en una termomezcladora a 40°C, en condiciones de agitación. Después de la incubación, las muestras se centrifugaron 5 minutos a 3000g. Después de este tratamiento el probiótico como tal no está más presente en la muestra. Sin embargo, la presencia de sus metabolitos no puede excluirse: Las concentraciones evaluadas de ácido caftárico también están indicadas en la
Tabla 5.
Tabla 5
Resultados
Los resultados están expresados en porcentaje con respecto al testigo.
La referencia evaluada (ácido kójico) indujo, como era esperado un descenso en la producción de melanina. La Figura 1 muestra la producción de melanina mediante melanocitos B16 tratados durante 72 horas con los ingrediente seleccionados.
El ácido caftárico tratado con el probiótico CNCM 1-1225 pareció ser eficiente para la des-pigmentación de la piel. En efecto, el ácido caftárico tratado con el probiótico disminuyó la producción de melanina en un 70% (Figura 1 ). La producción de tirosinasa también disminuyó mediante este ingrediente de forma limitada (aproximadamente 40%, Figura 2), lo que sugiere que la disminución en melanina se debió solo en parte a la inhibición de tirosinasa. Pueden existir mecanismos adicionales que actúen corriente arriba o corriente abajo de esta enzima.
Ejemplo 3: Efecto la función de barrera e hidratacion de la piel
El efecto beneficioso potencial de los extractos del Ejemplo 2 hacia la función de barrera de la piel e hidratacion de la piel se evaluó mediante el uso de cultivo 2D de queratinocitos epidérmicos primarios humanos y evaluamos sus síntesis de filagrina después del tratamiento con los ingredientes seleccionados.
Las condiciones del cultivo celular
Se cultivaron queratinocitos epidérmicos humanos en un medio de queratinocitos-SF testigo, en una cámara humedecida a 37°C y que contenía 5% de C02.
La síntesis de filagrina mediante queratinocitos epidérmicos humanos
Las células se incubaron con los ingredientes seleccionados o las referencias de prueba (CaCI2 a 1 ,5 m ) durante 144 horas. La producción de filagrina se evaluó mediante inmunomarcación.
Resultados
Los resultados se muestran en la Figura 3. El pre-tratamiento de las células con ácido caftárico + La1 mostró un aumento significativo de filagrina (280 % del testigo, Figura 3), sugiriendo que estos extractos pudieron fortalecer la barrera de la piel. Una barrera de la piel más fuerte asegura una mejor protección del cuerpo contra el medio ambiente y ataques de patógenos. También limita la pérdida de agua a través de la epidermis, asegurando así una hidratación de la piel apropiada.
Ejemplo 4: Cápsula
Pueden tomarse de una a tres cápsulas por día.
Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.
Claims (14)
1. El uso estético de una cantidad efectiva de al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y una bacteria ácido láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico para generar ácido tartárico y/o cafeico para la preparación de un complemento alimenticio oral para tratar y/o prevenir trastornos de la pigmentación de la piel y/o imperfecciones de la piel.
2. El uso de acuerdo con una de las reivindicaciones anteriores caracterizado porque los trastornos de la piel son aquellos observados en melasma, pecas, vitíligo, piebaldismo, fenilcetonuria y similares y/o manchas de la edad.
3. El uso de acuerdo con una de las reivindicaciones anteriores para mejorar el tono de la piel y/o complexión de la piel.
4. El uso estético de una cantidad efectiva de al menos un ingrediente que contiene ácido cicórico y/o derivados y una bacteria ácido láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido cicórico para generar ácido tartárico y/o cafeico para la preparación de un complemento alimenticio oral para aclarar y/o blanquear el tono de la piel.
5. El uso de acuerdo con una de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición mejora además la hidratación de la piel y/o la función de barrera de la piel.
6. El uso de acuerdo con una de las reivindicaciones anteriores, en donde el ácido caftárico que contiene el ingrediente es un alimento natural tal como lechuga, endivia, diente de león, uva, orujo de uva; o combinaciones o extractos de los mismos.
7. El uso de acuerdo con una de las reivindicaciones anteriores, que contiene . además una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico para generar ácido tartárico y/o cafeico.
8. El uso de acuerdo con una de las reivindicaciones anteriores, en donde la bacteria ácido láctica capaz de hidrolizar ácido caftárico para generar ácido tartárico y/o cafeico es una bacteria ácido láctica probiotica que tiene una actividad esterasa, tal como una actividad clorogenato esterasa y/o feruloil esterasa.
9. El uso de acuerdo con una de las reivindicaciones anteriores, en donde la bacteria ácido láctica se selecciona del grupo que consiste en L johnsonii, B. longum y B. lactis, en particular Lactobacillus johnsonii (CNCM 1-1225), B. longum BB 536 y B. lactis (CNCM I-3446) y B. lactis BB12.
10. El uso de acuerdo con una de las reivindicaciones anteriores, en combinación con una cantidad efectiva de al menos un agente activo para mejorar la hidratación de la piel o el envejecimiento de la piel.
1 1 . Un método de tratamiento estético que se usa para tratar y/o prevenir trastornos de la pigmentación de la piel y/o imperfecciones de la piel que comprende al menos un paso de administrar, a un individuo, una cantidad efectiva de al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y una bacteria ácido láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico para generar ácido tartárico y/o cafeico en un complemento alimenticio.
12. Un kit para tratar y/o prevenir trastornos de pigmentación de la piel y/o imperfecciones de la piel que comprende un tratamiento oral con una composición que contiene al menos un ingrediente que contiene ácido caftárico y/o derivados y una bacteria ácido láctica y/o enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico para generar ácido tartárico y/o cafeico en un complemento alimenticio, combinado con un complemento alimenticio oral o composición tópica que contiene opcionalmente un microorganismo probiótico en forma muerta, viva o semi-activa, o un agente hidratante o antienvejecimiento.
13. Un kit para preparar un complemento alimenticio que comprende al menos dos partes: a) una primera parte que comprende un ácido caftárico y/o derivados del mismo que contiene un ingrediente; y b) una segunda parte que comprende una bacteria ácido láctica y/o una enzima capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico.
14. El kit de la reivindicación 12, en donde la bacteria ácido láctica capaz de hidrolizar ácido caftárico y/o derivados del mismo para generar ácido tartárico y/o cafeico es una bacteria ácido láctica probiótica que tiene una actividad esterasa, tal como una actividad clorogenato esterasa y/o feruloil esterasa.
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