MXPA00001237A - Un akgente terapeutico anti-cancerigeno de hexaoxido de arsenico (as4o5) de una substancia quimica natural y su composicion farmaceutica - Google Patents

Abstract

Esta invención es acerca de la identificación del HD-2, una sustancia química natural que se separóy purificóa partir de un producto natural, el Sinsuk, como hexaóxido de arsénico (AS4O6) y acerca de su eficacia terapéutica como un fármaco anti-cancerígeno y una composición farmacéutica, el hexaóxido de arsénico (AS4O6) una sustancia química natural obtenida del Sinsuk después de eliminar la propiedad tóxica, tiene una potente eficacia anti- cancerígena mediante su citotoxicidad directa sobre células tumorales y suprime la formación de nuevos vasos sanguíneos de las masas tumorales, lo que resulta en la completa cura de los cánceres malignos.

Description

UN AGENTE TERAPÉUTICO ANTI-CANCERÍGENO DE HEXAÓXIDO DE ARSÉNICO (As4Os) DE UNA SUBSTANCIA QUÍMICA NATURAL Y SU COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con la identificación de HD-2, una substancia química natural que se separó y purificó a partir de un producto natural , Sinsuk, como hexaóxido de arsénico (As406) y se relaciona con su eficacia terapéutica como un fármaco anti-cancerigeno y composición farmacéutica y, más particularmente, con el proceso de purificación de substancia química natural (hexaóxido de arsénico, As406) proveniente de Sinsuk al tiempo que se elimina la toxicidad y el novedoso efecto anti-cancerígeno del As406 y su composición farmacéutica mediante su citotoxicidad directa y la supresión de nueva angiogénesis en los lugares tumorales o alrededor de éstos .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN En general, actualmente se tienen disponibles diversos fármacos para la quimioterapia anti-cancerígena.

Los agentes de alquilación, tal como el cisplatino y la ciclofosfamida, manifiestan su efecto anti-cancerígeno al formar enlaces covalentes con los átomos de nitrógeno de los nucleótidos del ADN, debido a su elevada propiedad electrofílica del sitio activo. Los antimetabolitos, tal como 5-fluorouracilo, actúan al inhibir las enzimas involucradas en la biosíntesis de los ácidos nucleicos o al insertarse por sí mismos en las estructuras del ADN o del ARN. Algunos antibióticos, tales como la adriamicina, actúan en forma potente sobre el ADN para inhibir la función normal, lo que resulta en la supresión del crecimiento tumoral. Pero todos estos agentes anti-cancerígenos afectan no solamente las células tumorales patológicas sino también a las células normales saludables, especialmente las células de la médula ósea o del epitelio intestinal con elevada tasa de recambio, lo que provoca serias complicaciones y toxicidad, tales como la mielosupresión, la alopecia, las insuficiencias renales, náusea y vómito, neurotoxicidad, etc. Por otra parte, se ha conocido al arsénico como un potente agente carcinogénico ambiental, que afecta la piel y los pulmones frecuentemente . Se reporta que el arsénico se une a la estructura sulfhidrilo de las enzimas para inactivar las enzimas blanco, para inhibir las reacciones de fosforilación y de desfosforilación, mismas que son vitales para la regulación de las actividades enzimáticas y para provocar anormalidades en los cromosomas. Por lo tanto, se ha estudiado al arsénico principalmente desde el aspecto toxicológico, relacionado con estos reportes hasta la fecha. Pero en el pasado, el arsénico había sido utilizado como agente terapéutico tanto en la medicina oriental como en la occidental. Especialmente, en la medicina tradicional china, que incluye a la medicina coreana, el compuesto de arsénico había sido prescrito durante un largo tiempo para tratar algunas enfermedades fatales, por ejemplo, para erradicar la energía maléfica. En las viejas literaturas médicas de Corea y China, se describe que el arsénico se prescribió como una medicina con el nombre de Eungwhang, en la página 1234 o con el nombre de Bisang, en la página 1237 del TonEuiBoGam (NamSaDang) o en la Enciclopedia de la Medicina Oriental, en donde se describe que el arsénico se prescribió solamente después de reducir su toxicidad, debido a su extrema toxicidad. También se sabía que el arsénico tiene actividad destoxificante en contra de varias substancias tóxicas. Por ejemplo, se utilizó al arsénico en el manejo del choongak o el vómito y en la erradicación de los espíritus y la energía maléfica. En una vieja literatura de la medicina china en (BonChoKangMok (Enciclopedia de las Hierbas de la Medicina China) , páginas 12-16 del volumen 9) , se describen indicaciones y acciones farmacológicas del arsénico (con el nombre de whangwoong) , en donde se reporta que el arsénico tiene la acción de purificar la sangre. De este modo, se ha reconocido al arsénico como una medicina activa y se le ha utilizado durante largo tiempo pero, en Corea se reconoce al arsénico como un compuesto químico posiblemente dañino, con las características de los metales pesados y, de conformidad con esto, su uso está bastante limitado. El arsénico posee algunas características de los metales pesados, aunque no pertenece al grupo de los metales pesados y, por lo tanto, se ha evitado en la producción de medicinas. La exposición al arsénico conduce a la anemia, leucopenia y disfunciones del riñon y del hígado y la exposición crónica puede tener un efecto carcinogénico . En la medicina occidental, se prescribió el compuesto de arsénico para el tratamiento de varias enfermedades, que incluyen al reumatismo, la sífilis, la psoriasis, etc. y se ha sabido que una baja dosis del compuesto de arsénico tiene un efecto benéfico sobre las funciones fisiológicas del cuerpo humano, que incluyen la estimulación de la hematopoiesis, que coincide con las descripciones en las viejas literaturas de la medicina oriental. Pero en la medicina moderna, las indicaciones del compuesto de arsénico se han vuelto muy limitadas. Desde finales del siglo 19 hasta el comienzo del siglo 20, se ensayó el compuesto de arsénico para tratar la leucemia crónica y después de los años 1950, el melarsoprol, un compuesto orgánico de arsénico, el cual fue prescrito para la tripanosomiasis africana, es el único compuesto de arsénico en uso actualmente . Con base en estas propiedades farmacológicas del arsénico, recientemente se han hecho intentos para desarrollar un novedoso fármaco anti-cancerígeno y, actualmente, algunos estudios están logrando un rápido progreso en este campo. Después de la Revolución Cultural, China ha estado realizando esfuerzos considerables para estudiar la medicina tradicional, utilizando las herramientas científicas de la medicina occidental . En 1996 publicaron un informe, en colaboración con un equipo de investigación francés, que el trióxido de arsénico (As203) tenía un efecto excelente en el tratamiento de la leucemia promielocítica aguda. Los investigadores de la medicina occidental se maravillaron con este resultado, debido a que el trióxido de arsénico fue especialmente efectivo en el tratamiento de pacientes con leucemia, quienes habían sido refractarios a la quimioterapia convencional, desde la publicación de este artículo, más científicos médicos del Hemisferio Occidental se han interesado en el posible efecto anti-cancerígeno de los compuestos de arsénico. Con el estímulo de estos resultados, se han hecho esfuerzos considerables para integrar la medicina tradicional oriental y la moderna medicina molecular para interpretar los resultados de la medicina oriental en términos de la corriente principal de la moderna quimioterapia anti-cancerígena. Es extremadamente importante desarrollar compuestos químicos novedosos que tengan una efectiva eficacia anti-cancerígena sin ningún efecto secundario serio. La invención que se describe aquí tiene éxito en la separación y purificación del ingrediente activo al tratar una materia prima natural de arsénico, la cual había sido utilizada en la medicina oriental, a través de múltiples procesos. Adicionalmente, el estudio clínico indicó que la composición farmacéutica del hexaóxido de arsénico muestra una potente eficacia anti-cancerígena sin ningún efecto secundario obvio.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN De conformidad con lo anterior, la presente -1 •_ t invención proporcionará una substancia química natural y novedosa, hexaóxido de arsénico (As4Oe) , obtenido del Sinsuk, al tiempo que elimina la toxicidad. El otro objeto de la presente invención es dilucidar el mecanismo de acción de la eficacia anti-cancerígena de la substancia química natural y novedosa obtenida del Sinsuk. Otro objeto de la presente invención es describir el uso de la substancia química natural y novedosa para la terapia anti-cancerígena y su composición farmacológica. Para lograr los anteriores objetos de la presente invención, una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer comprende una cantidad farmacéuticamente efectiva de As406 como ingrediente activo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. De preferencia, la composición farmacéutica de la presente invención está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno en el útero. Alternativamente, la composición farmacéutica de la presente invención está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno del pulmón. Alternativamente, la composición farmacéutica de la presente invención está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno del seno maxilar. Alternativamente, la composición farmacéutica de la presente invención está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno del riñon. Alternativamente, la composición farmacéutica de la presente invención está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno de la vejiga urinaria. Para lograr estas ventajas de conformidad con el propósito de la presente invención, según se incorpora y se describe en forma general, primero separamos y purificamos una substancia química natural, HD-2, mediante el calentamiento repetido del Sinsuk que contiene al arsénico para eliminar la toxicidad, a lo que le siguió el análisis estructural . La substancia blanca obtenida mediante este procedimiento se probó en células tumorales clonadas de ratones y de seres humanos, para evaluar la eficacia anti-cancerígena de la substancia y para ver si los efectos anti-cancerígenos son provocados por la muerte de las células tumorales mediante el mecanismo de la apoptosis. Se evaluó la toxicidad del HD-2 después de la administración aguda al observar los síntomas clínicos de ratas después de una sola administración oral de una gran dosis y se evaluó la toxicidad del HD-2 después de la administración subaguda al observar los síntomas clínicos de ratas después de una lenta administración oral. Las células tumorales clónales, enfocadas a los pulmones, fueron inyectadas en forma intravenosa en ratones y se administró HD-2 en forma oral o por vía intravenosa. Posteriormente, se contó el número de las masas tumorales metastásicas en los pulmones para evaluar el efecto inhibidor de la substancia sobre la metástasis cancerígena. De manera similar, en ratones se inocularon intradérmicamente células de melanoma, seguidas por la administración oral del HD-2, después que se investigó el mecanismo anti-cancerígeno del HD-2 al contar el número de nuevos vasos sanguíneos formados en las masas tumorales o alrededor de las mismas. Se indujo el cáncer mediante la inyección del carcinógeno en ratones y se midió la eficacia supresora de tumores en estos ratones después de la administración oral del HD-2. También probamos una composición farmacológica preparada al mezclar varias hierbas de la medicina china con hexaóxido de arsénico, el cual se administró oralmente a los pacientes con cáncer en etapa terminal para evaluar la eficacia anti-cancerígena. De conformidad con un aspecto, la presente invención proporciona un agente anti-cancerígeno de hexaóxido de arsénico (As406) de una substancia química natural y su composición farmacéutica que comprende: 1) Separamos y purificamos una substancia química natural de color blanco, HD-2, mediante el calentamiento repetido del Sinsuk que contiene al arsénico y arsénico grado reactivo, lo que fue seguido por el análisis estructural para mostrar que ésta corresponde al hexaóxido de arsénico, As406. 2) Una substancia química natural, As406 obtenida mediante este procedimiento fue añadida al medio de cultivo para el desarrollo de células tumorales clonadas de ratones y de seres humanos, para evaluar la eficacia anti-cancerígena de la substancia. 3) Se estudió el mecanismo anti-cancerígeno del As406 para examinar si la eficacia anti-cancerígena se debía a la muerte de las células tumorales mediante el mecanismo de la apoptosis . 4) Se administraron oralmente y en forma aguda diferentes cantidades de la substancia química natural, As406, a ratas hembra y macho, para examinar la toxicidad aguda del hexaóxido de arsénico al observar las complicaciones manifestadas. 5) La misma cantidad de la substancia química natural, As406 se administró lentamente en forma oral a ratas hembra y macho, para examinar la toxicidad subaguda de la invención al observar las complicaciones manifestadas . 6) Células tumorales clónales, enfocadas a los pulmones, se inyectaron en forma intravenosa en ratones y se administró la substancia química natural, As4Oß, por vía oral o por vía intravenosa. Posteriormente, se contó el número de las masas tumorales metastásicas que aparecían en los pulmones para evaluar el efecto inhibitorio de las substancias sobre la metástasis cancerígena. 7) De manera similar, las células del melanoma maligno fueron inoculadas por vía intradérmica en ratones, seguidas por la administración oral del agente anti-cancerígeno natural, As406. Posteriormente, se estudió el mecanismo anti-cancerígeno al medir el tamaño de las masas tumorales y al contar el número de vasos sanguíneos recién formados en las masas tumorales o alrededor de las mismas. 8) El carcinógeno se inyectó en ratones para inducir los tumores malignos y se estudiaron los efectos anti-cancerígenos del agente anti-cancerígeno natural, As4Oß, al medir la incidencia y tamaño de tumores en el hígado y en los pulmones . 9) También preparamos la composición farmacéutica añadiendo varias hierbas de la medicina oriental al agente anti-cancerígeno natural, As406, en varias formas (tabletas, cápsulas y solución) . 10) Las tabletas preparadas según se describió anteriormente se administraron en forma oral a pacientes con cáncer en etapa terminal, que portaban un agente maligno del útero, pulmones, seno maxilar, riñon o vejiga urinaria, para evaluar la eficacia terapéutica del As4Os. El tamaño de los tumores y los ensayos clínicos fueron monitoreados utilizando tomografía computacional (CT) y formación de imágenes por resonancia magnética (MRI) . Se comprenderá que tanto la precedente descripción general como la siguiente descripción detallada son ejemplificativas y explicativas y se pretende que proporcionen una adicional explicación de la invención según se reivindica .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Los dibujos que la acompañan, mismos que se incluyen para proporcionar una comprensión adicional de la invención y que se incorporan en esta especificación y constituyen parte de la misma, ilustran modalidades de la invención y junto con la descripción sirven para explicar los principios de los dibujos: la Figura 1 muestra procedimientos esquematizados para la separación y purificación química del Sinsuk; la Figura 2 muestra el modelo estructural tridimensional del Sinsuk determinado mediante el análisis estructural; la Figura 3 muestra el transcurso del tiempo de la eficacia anti-cancerígena del Sinsuk (hexaóxido de arsénico, As4Oß) in vi tro; la Figura 4 muestra el resultado de la electroforesis en agarosa-gel que indica que el efecto anti-cancerígeno de la substancia química natural, As406, se debe al efecto de la apoptosis; la Figura 5 muestra el efecto inhibitorio del As406 en la neovascularización de la masa tumoral; la Figura 6 muestra que el As406 reduce la incidencia de hepatoma inducida por un carcinógeno (NDEA) ; la Figura 7 muestra que el As406 reduce la incidencia del cáncer de pulmón inducido por un carcinógeno (NDEA) ; la Figura 8 es un barrido o exploración de CT (Tomografía por Computadora) que muestra múltiples masas tumorales en el útero; la Figura 9 es un barrido de CT similar al de la Figura 8, que indica el desarrollo tumoral múltiple en el útero . la Figura 10 es una exploración de CT de un útero agrandado debido a la invasión de células tumorales en la etapa terminal del carcinoma uterino; la Figura 11 es otra exploración o barrido de CT del mismo paciente tomado en un ángulo diferente; la Figura 12 es un barrido de CT de un útero en etapa terminal de carcinoma uterino, que muestra varias sombras de aire que reflejan las perforaciones en la pared uterina. Esto indica la desaparición de la masa tumoral después de la administración del As406; la Figura 13 es una exploración de CT de una paciente con carcinoma uterino en etapa terminal, que muestra hallazgos similares a los de la Figura 12; la Figura 14 es una exploración de CT de una paciente con carcinoma uterino en etapa terminal, que manifiesta hallazgos similares a los de la Figura 13; la Figura 15 es una exploración de CT de una paciente con carcinoma uterino en etapa terminal, que manifiesta hallazgos similares a los de la Figura 14; la Figura 16 es una exploración de MRI (Formación de Imágenes por Resonancia Magnética) de un útero lleno de materia fecal que se escapó desde el recto a través de la abertura de la perforación uterina, que se formó después de la desaparición de la masa cancerígena; la Figura 17 es una imagen de MRI que manifiesta hallazgos similares a los de la Figura 16; la Figura 18 es una imagen de MRI de un útero después de la cura de la masa tumoral; la Figura 19 es una imagen de MRI de una paciente con carcinoma uterino en etapa terminal, que manifiesta hallazgos similares a los de la Figura 18; la Figura 20 es una imagen de MRI de un paciente con cáncer de pulmón en etapa terminal, que muestra los fluidos pleurales que llenan la cavidad pleural derecha ocasionada por el cáncer del pulmón derecho; la Figura 21 es una exploración de CT de un paciente con cáncer pulmonar en etapa terminal, que muestra una masa tumoral irregular en el pulmón derecho; la Figura 22 es una exploración de CT de un paciente con cáncer pulmonar en etapa terminal, que muestra el aumento en los nodos linfáticos del mediastino; la Figura 23 es una exploración de CT del mismo paciente como en la Figura 22; la Figura 24 es una exploración de CT del mismo paciente como en la Figura 23; la Figura 25 es una exploración de CT de un paciente con cáncer pulmonar en etapa terminal, que indica que el fluido pleural en la cavidad pleural derecha comenzó a contraerse volumétricamente después de la administración de la composición farmacéutica de As4Oe; la Figura 26 es una exploración de CT de un paciente con cáncer pulmonar en etapa terminal, que muestra que el fluido pleural de la cavidad pleural derecha se absorbió totalmente después de la administración de la composición farmacéutica de As406; la Figura 27 es una exploración de CT de un paciente con cáncer pulmonar en etapa terminal, que muestra la contracción del nodo linfático al tamaño normal, después de la administración de la composición farmacéutica de As406 ; la Figura 28 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 27; la Figura 29 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 28; la Figura 30 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 29; la Figura 31 es una exploración de CT de un paciente con cáncer que involucra al seno maxilar, en etapa terminal, que muestra que el seno maxilar derecho estaba lleno de masas tumorales; la Figura 32 es una exploración de CT del mismo paciente que en la Figura 31, tomada en un ángulo diferente; la Figura 33 es una exploración de CT de un paciente con cáncer, que involucra al seno maxilar, quien estaba recibiendo tratamiento para el cáncer en un hospital; la Figura 34 es una exploración de CT del mismo paciente que en la Figura 33; la Figura 35 es una exploración de CT de un paciente con cáncer que involucra al seno maxilar, en etapa terminal, que muestra que se curaron las masas cancerosas en la cavidad nasal derecha y en el seno maxilar después de la administración de la composición farmacéutica de As406; la Figura 36 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 35; la Figura 37 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 36; la Figura 38 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 37; la Figura 39 es un IVP (Pielograma Intra Venoso) de un paciente con cáncer de riñon en etapa terminal, que muestra una masa tumoral ubicada en la cavidad pélvica renal izquierda; la Figura 40 es un IPV del mismo paciente que en la Figura 39; la Figura 41 es un IVP de un paciente con cáncer de riñon en etapa terminal, que muestra una masa tumoral ubicada en la cavidad pélvica renal izquierda desarrollándose hacia la arteria renal; la Figura 42 son exploraciones de CT, tomadas a diferentes ángulos de los dos riñones de un paciente con cáncer de riñon en etapa terminal; la Figura 43 son exploraciones de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que demuestra los mismos hallazgos que en la Figura 42; la Figura 44 son exploraciones de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que demuestra los mismos hallazgos que en la Figura 43; la Figura 45 es una exploración de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que muestra la contracción de una masa cancerosa después de la administración de la composición farmacéutica de As4Os; la Figura 46 es una exploración de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que demuestra los mismos hallazgos que en la Figura 45; la Figura 47 es una exploración de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que demuestra los mismos hallazgos que en la Figura 46; la Figura 48 es una exploración de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que demuestra los mismos hallazgos que en la Figura 47; la Figura 49 es una exploración de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que muestra la marcada contracción de la masa cancerosa del riñon izquierdo, después de la administración de la composición farmacéutica de As406; la Figura 50 es una exploración de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que muestra la contracción de la masa tumoral en forma adicional a la de la Figura 49; la Figura 51 es una CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que muestra que el material de contraste con sombreado en blanco llenaba el espacio previamente ocupado por la masa tumoral en el riñon izquierdo; la Figura 52 es una exploración de CT de un paciente con carcinoma renal en etapa terminal, que muestra pequeñas masas tumorales que quedan en el riñon izquierdo y en la cavidad pélvica renal izquierda; la Figura 53 es una exploración de CT de un paciente con cáncer en la vejiga urinaria en etapa terminal, que demuestra las masas tumorales en un sombreado * i obscuro, ubicadas en la esquina derecha y en la pared izquierda de la vejiga urinaria; la Figura 54 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 53; la Figura 55 es una exploración de CT de un paciente con cáncer de vejiga en etapa terminal, que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 54, que muestra la masa tumoral en sombreado en blanco en la pared izquierda de la vejiga; la Figura 56 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 55; la Figura 57 es una exploración de CT de un paciente con cáncer de vejiga en etapa terminal, que muestra la desaparición de las masas tumorales después de la administración de la composición farmacéutica de As406; la Figura 58 es una exploración de CT de un paciente con cáncer de vejiga en etapa terminal, que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 57; la Figura 59 es una exploración de CT de un paciente con cáncer de vejiga en etapa terminal, que muestra que después del tratamiento, la vejiga urinaria parece normal ; la Figura 60 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 59; la Figura 61 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 60; y la Figura 62 es una exploración de CT que manifiesta los mismos hallazgos que en la Figura 61.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS Definiciones La presente invención proporciona composiciones anti-cancerígenas para el tratamiento de cánceres o de tumores en mamíferos, particularmente, en seres humanos, que comprende una cantidad efectiva de un compuesto anticancerígeno, hexaóxido de arsénico (As406) y un vehículo farmacéuticamente aceptable . Según se utiliza en la presente, el "compuesto anti-cacerígeno" es hexaóxido de arsénico (As406) El hexaóxido de arsénico se aisló y purificó a partir de Sinsuk. El agente anti-cancerígeno normalmente se mezcla con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Este vehículo puede ser un sólido o un líquido y el tipo se elige en forma general, con base en el tipo de administración que será utilizada. El As406 exacto se describe con detalle a continuación . Según se utiliza en la presente, "cáncer" se refiere a todos los tipos de cánceres o neoplasmas o tumores que se encuentran en los mamíferos. Según se utiliza en la presente, el término "que comprende" significa que en forma conjunta pueden utilizarse varios componentes en la composición farmacéutica de esta invención. Según se utiliza en la presente, un componente "farmacéuticamente aceptable" es aquel que es adecuado para su uso en seres humanos sin efectos secundarios indebidos y adversos (tales como la toxicidad, la irritación y la respuesta alérgica) . Según se utiliza en la presente, un "vehículo farmacéutico" es un solvente, agente de suspensión o excipientes farmacéuticamente aceptables para suministrar el compuesto anti-cancerígeno al animal o al ser humano. El vehículo puede ser un líquido o un sólido y se selecciona de acuerdo con la forma de administración que se tiene en mente. En una modalidad preferida de la presente invención, la composición comprende una mezcla de hexaóxido de arsénico e ingredientes de la medicina oriental como un vehículo farmacéuticamente aceptable . El método preferido para procesar las composiciones de la presente invención para su ingestión es mezclar y moler todos los ingredientes como polvos secos . Los ingredientes individuales se obtuvieron a partir de las fuentes que se indican más adelante. La mezcla de polvo seco puede procesarse entonces en forma adicional en forma de pildoras o tabletas comprimidas , etc . El polvo deseado se obtuvo al moler todos los ingredientes en una cantidad adecuada y en un molino adecuado hasta obtener un polvo fino. Los ingredientes de la medicina oriental de conformidad con la presente invención se describen en el Tratado de Medicina Oriental (Dongeibogam) . Según se utiliza en la especificación (y en las reivindicaciones) , los "ingredientes de la medicina oriental" de conformidad con la invención se definen adicionalmente como sigue : El Sinsuk, también conocido como Beesang en la medicina oriental, es un mineral natural tóxico para el humano, cuyo componente principal es As403. La Hodongroo (hodongjoo) es la resina endurecida del árbol Populus diversi folia Schrenk. Ésta se forma cuando la resina del árbol anterior se entierra en la tierra durante un tiempo largo. La Chunsangap es la escama del animal Manís pentadactyla L. que pertenece a la familia Manidae. La Baekchool es la rizoma de la planta Atractyloadeß macrocephale Koidz . El oowhang es el cálculo de la vesícula o del ducto biliar de la vaca amarilla, Bos taurus, que pertenece a la familia Bovidae. La Sahyang es la excreta secretada por el almizclero macho, Moschus moschiferus L. , que pertenece a la familia Cervide . El Shingok, también conocido como Shingook en la medicina oriental, es un fermento medicado, el cual es un sólido fermentado elaborado a partir de mezclas de granos de trigo en polvo y varias hiervas. La Moryo es la concha de la Ostrea gigas Thunberg, que pertenece a la familia Ostrediae. Sus componentes principales son CaC03, CaP04, CaS04 y queratina. La Yongnyehyang es la resina seca obtenida del Dryobalanops aromática Gaertn. La Yoohyang es la resina seca obtenida del árbol Boswellia neglecta M. La Milryak es la resina seca obtenida del árbol Co-Tirr.ip2o.ra myrrha, que pertenece a la familia Burseraceae. El Baekbongryung es el cuerpo del fruto del Poria cocos (Schw.) olf, que pertenece a la familia Ployporaceae . El Sangbaekpi, también conocida como raíz o corteza de mora, son las raíces o la corteza (opcionalmente se omitió la superficie de la misma) de la Morus alba L. o de otros árboles estrechamente relacionados pertenecientes a la familia Moraceae . Se seca y se muele para convertirla en polvo. El Galgeun es una preparación seca de las raíces de Pueraria thunbergiana . La Macheehyun es una preparación seca de la planta Portulaca olerácea L., que pertenece a la familia Portulacaceae . La Orneeja es el fruto obtenido de Schizandra chinensis (Turcz.) Baill, que pertenece a la familia Magnoliaceae . La Hyulgal, también conocida como Kiringal en la medicina oriental, es la resina seca obtenida del árbol Epipremnum pinnatum que pertenece a la familia Araceae. El Seokko es CaS04 • H20, que también es conocido como yeso. El Boongsa es borato de sodio (Na2B407 • 10H2O) y debe purificarse hasta una forma farmacéuticamente aceptable para su uso. La Hansooseok es un mineral llamado anhidrita.

En la medicina oriental, se le llama "Eungsooseok o Jakseok" . El ginseng vaporizado al rojo es la raíz del Panax ginseng, tratada haciéndola pasar por agua caliente. A continuación se hará referencia con detalle a las modalidades preferidas de la presente invención, cuyos ejemplos se ilustran en los dibujos acompañantes.

EJEMPLO 1: Separación y. Purificación de una Substancia Química Natural , HD-2 Una mezcla de 10-g de Sinsuk y 10-ml de etanol (C2H5OH) se calentó durante una hora y después se enfrió a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió un volumen adicional de 10 ml de etanol al Sinsuk frío y se repitió el calentamiento y enfriamiento secuencial varias veces. El producto de este procedimiento se lavó en 20-ml de agua destilada con agitación de 10 minutos y con sacudidas durante 10 minutos y a la misma se añadieron 2-ml de agua destilada. 1 minuto después, los precipitados se recolectaron por decantación. Este proceso de recolección se repitió tres veces . Después de almacenar los precipitados lavados a -40 °C durante 24 horas, los precipitados se descongelaron y se vaciaron en un papel filtro y se secaron entonces a temperatura ambiente . Como un producto final purificado se obtuvieron 9 gramos de una substancia blanca. La substancia blanca se purificó adicionalmente .; i para su destoxificación. La sal se colocó en una porcelana hecha de Caolín y se calentó para eliminar al componente acuoso. Después de enfriar a temperatura ambiente, la substancia blanca se colocó en la parte superior de la sal y se selló con un papel filtro y se calentó durante 1 hora. Después de enfriar a temperatura ambiente, se recolectó la substancia blanca. Este proceso se repitió 2 veces más. Finalmente, se obtuvieron 2 gramos de una substancia blanca, a la cual se le denominó HD-2 (ver Figura 1) .

EJEMPLO 2 ; Análisis Estructural de ______ Substancial Química Natural , HD-2 La substancia blanca obtenida en el EJEMPLO 1 se envió al Instituto Coreano de Ciencia y Tecnología para su análisis estructural, en donde fue identificada como una substancia con la fórmula empírica del As406 con la estructura tridimensional mostrada en la Figura 2. Los parámetros físicos y químicos del As406 se resumen en la Tabla 1. Las coordenadas atómicas (x 104) y los parámetros de desplazamiento isotrópico equivalentes (A2 x 103) se listan en la Tabla 2, las longitudes de enlace (A) y los ángulos de enlace (grados) se listan en la Tabla 3 y los parámetros de desplazamiento anisotrópicos se listan en la Tabla 4.

Tabla 1 Datos del Cristal y refinamiento de la estructura del As40G Tabla 2 Coordenadas atómicas (x 104) y parámetros de desplazamiento isotrópico equivalentes (A x 10 ) para el As40 Tabla 3 Longitudes de enlace [A] y ángulos [grados] para el As4Os Tabla 4 Parámetros de desplazamiento anisotrópico (A2 x 103) para el As406 EJEMPLO 3; Efecto Anti-cancerígeno del HD-2 sobre Células Tumorales Clonadas in vitro En la substancia química natural HD-2, obtenida en el Ejemplo 1, se evaluó la eficacia anti-cancerígena al examinar la citotoxicidad directa sobre células tumorales clonadas in vi tro. Como fármaco de control se utilizó el cisplatino.

Experimento 1: Efecto anti-cancerígeno del HD-2 sobre células tumorales clonadas de ratones y de seres humanos Células tumorales clonadas de leucemia P388, leucemia L1210, linfoma L5178Y, carcinoma de Colon26-M3.1 y melanoma B16-BL6 de ratones y de leucemia K562, carcinoma de hígado HEP-G2, cáncer de mama Hs578T, adenocarcinoma AN-3-CA, carcinoma de colon DLD y carcinoma epiteloide HeLa de seres humanos, se cultivaron en medio de cultivo EMM, DMEM o RMPI-1640 que contenía 7.5% de suero de bovino fetal (FBS) , según se describe en el manual ATCC. Después de colocar en cavidades de prueba de placas a las células tumorales clonadas a una densidad de Ixl04/100 µl, para examinar la citotoxidad de las dos substancias, se añadieron diversas concentraciones de HD-2 y cisplatino. Las células tumorales en las cavidades de prueba se incubaron en un incubador con 5% de C02 a 37°C durante 2 días. La eficacia anti-cancerígena de las dos substancias están indicadas como la concentración de la substancia de prueba que inhibe en 50% (ED50, 50% de la Dosis Efectiva) el crecimiento o desarrollo de las células tumorales, en comparación con el crecimiento o desarrollo de las células tumorales de control, en donde no se añadió ni HD-2 ni cisplatino. Los resultados (resumidos en la Tabla 5) indican que la citotoxicidad directa del HD-2, medida a las 48 horas de incubación era de 50±30 (media±DE) veces tan elevada como la del cisplatino.

Tabla 5 Efecto Citotóxico (EDS0) sobre células tumorales clonadas Experimento 2: Efecto anti-cancerígeno del HD-2 en células 3T3 -fibroblasto Para estudiar adicionalmente la citotoxicidad de cada substancia sobre células tumorales clonadas, en cavidades de prueba se cultivaron células 3T3 -fibroblasto según se describió en el experimento 1. Después de poner en las cavidades de prueba de placas a las células 3T3-fibroblasto a una densidad de lxl04/100 µl , para examinar los transcursos de tiempo (2, 4 y 6 horas después de la adición) de la citotoxicidad, los cuales se midieron mediante el método XTT, se añadieron diversas concentraciones de HD-2 y cisplatino. Según se muestra en la Figura 3, el cisplatino no mostró ningún efecto citotóxico hasta 24 horas después de la adición. Los ED50 del HD-2 fueron 1.10 µ g/ml y 0.21 µg/ml a 4 y 6 horas después de la adición, respectivamente, lo que sugiere que el HD-2 mostró un efecto inhibitorio sobre el crecimiento tumoral desde el comienzo de la fase . En la etapa de las 34 horas de tratamiento, el efecto se observó también en términos morfológicos. En este momento se observó la necrosis parcial de las células tumorales o la desaceleración del crecimiento tumoral. Por contraste, en el grupo del HD-2 se observó la necrosis completa de las células tumorales que provocaron cambios obvios en la morfología del tumor (tal como la ruptura de las paredes celulares) , lo que resultó en la pérdida de adhesividad de las células cancerígenas. Esto indica que el efecto destructor directo del HD-2 se manifestó en un periodo de administración corto, en comparación con el efecto de los agentes quimioterapéuticos convencionales, tal como el cisplatino. El EDS0 del HD-2 después de 34 horas de administración fue de 60 ng/ml, pero, el ED50 del cisplatino no pudo ser determinado, aunque después de 24 horas de la administración se observó la inhibición parcial del crecimiento tumoral. Al término del experimento (48 horas después de la administración) , los EDS0 fueron de 30 ng/ml y 8 µ g/ml para HD-2 y cisplatino, respectivamente. De este modo, la citotoxicidad del HD-2 es de aproximadamente 270 veces tan elevada como la del cisplatino.

EJEMPLO 4; Mecanismo del Efecto Citotóxico del HD-2 Se investigó adicionalmente la toxicidad del HD-2 para examinar si este efecto estaba relacionado con la muerte de las células tumorales mediante el mecanismo de la apoptosis. Se sembraron células HL-60 a una densidad de 2xl04 células/ml y la concentración adecuada del HD-2 se disolvió en el medio de cultivo, después de lo cual, se añadió cisplatino para el grupo de control positivo y se añadió medio de cultivo sin cisplatino al grupo de control negativo. Las células se centrifugaron después de 24 horas de incubación y las células precipitadas se lavaron con solución reguladora fisiológica (PBS) y se incubaron nuevamente en una solución reguladora (500 mM de Tris-Cl (pH 9.0), 20 mM de EDTA, 10 mM de NaCl, 1% de SDS y 500 mg/ml de proteinasa K) a 50°C durante 24 horas. El ADN se recolectó utilizando extracción con fenol del Usado celular obtenido con este tratamiento y se cargó sobre placa de gel de agarosa para la electroforesis . Según se muestra en la Figura 4, la segmentación del ADN a aproximadamente 180 pares de bases, que es un hallazgo típico de la apoptosis, se observó en concentraciones de HD-2 de 2.5 a 25 µg/ml.

EJEMPLO 5: Citoxicidad Asuda del HD-2 De conformidad con los criterios de evaluación de la toxicidad, descritos en el Artículo 96-8 de Notice on Food and Drug Safety (16 de abril de 1994) se evaluó la toxicidad aguda de la administración oral del HD-2. Se utilizaron ratas (de la cepa Sprague Dawley) para los experimentos animales. La dosificación de una administración oral única estuvo dentro del intervalo de 0.4 a 1.25 g/kg de peso corporal en ratas macho y de 0.4 a 0.625 kg/kg de peso corporal en ratas hembra. Las condiciones generales de los animales, los síntomas tóxicos y la mortalidad se midieron cada hora durante las 6 horas iniciales que siguieron a la administración única y una vez al día posteriormente durante 14 días . Se midieron los pesos corporales antes de comenzar el estudio, a los 7 días después de la administración y en la autopsia. Se estudiaron a las ratas que murieron para encontrar la causa de la muerte con la autopsia. Al término del estudio, se sacrificaron todas las ratas vivas con una sobredosis de anestesia de éter y se examinaron órganos principales buscando hallazgos patológicos a simple vista. Con la dosis máxima en las ratas macho (1.25 g/kg de peso corporal) La mortalidad alcanzó el 100% durante el periodo de estudio. Con una dosis elevada en ratas macho (0.85 g/kg de peso corporal) la mortalidad fue del 60% y con una dosis media (0.8 g/kg de peso corporal), la mortalidad fue del 10%. En las ratas hembra, la mortalidad fue del 100% con el grupo de dosis máxima (0.625 g/kg de peso corporal) , del 80% en el grupo de dosis alta (0.62 g/kg de peso corporal) y del 40% en el grupo de dosis media (0.58 g/kg de peso corporal) . Los síntomas clínicos dentro de los 3 días de la administración oral, variaron desde la depresión dependiente de la dosis a la disnea. Algunas ratas que manifestaron estos síntomas clínicos murieron, pero otras recuperaron el estado normal en un plazo dentro de 2 a 3 días de los síntomas clínicos. Los cambios en el peso no mostraron ninguna diferencia significativa entre los grupos de estudio y de control en todos los subgrupos de diferentes dosificaciones. La autopsia de las ratas que murieron durante el periodo de estudio revelaron hallazgos de estomago expandido e hígado distendido o de mayor volumen. Los hallazgos significativos relacionados con la administración del HD-2 no se observaron en la autopsia de las ratas sacrificadas al término del estudio. Con la administración oral del HD-2 en ratas Sprague-Dawley, la LD50 (50% de la Dosis Letal) fue de 0.81 g/kg de peso corporal en ratas macho y de 0.58 g/kg de peso corporal en ratas hembra. Los resultados se resumen en la Tabla 6.

Tabla 6 Mortalidad de ratas Sprague-Dawley macho y hembra después de la administración oral de HD-2 EJEMPLO 6; Toxicidad Subacruda del HD-2 De conformidad con los criterios de evaluación de toxicidad, descritos en el Artículo 96-8 de Notice on Food and Drug Safety (16 de abril de 1994) , se evaluó la toxicidad subaguda de la administración oral del HD-2. Para los experimentos se utilizaron ratas (de la cepa Sprague Dawley) como fue el caso para los experimentos de la toxicidad aguda. La dosificación de las administraciones orales fue de 100 (dosis alta) , 10 (dosis media) y 1 mg (dosis baja) por kg de peso corporal, que se administraron una vez al día durante 4 semanas (28 administraciones en total) . Durante el periodo de estudio se observaron los siguientes puntos: 1) Síntomas generales: Los síntomas generales, tales como anorquismo, salivación, diarrea, vómito, poliuria, anuria y cambio fecal y la severidad de estos síntomas se evaluó una vez al día durante el periodo de estudio. 2) Consumo de alimentos: Dos veces a la semana, la cantidad de alimento consumido y la cantidad restante se comprobaron por jaula. 3) Consumo de Agua: Dos veces a la semana, la cantidad de agua consumida y la cantidad restante se comprobaron por jaula. 4) Peso: Se midieron los pesos dos veces a la semana hasta el fin del estudio . 5) Análisis de orina: se recolectaron muestras de orina durante el periodo de estudio provenientes de cinco ratas seleccionadas aleatoriamente por subgrupo de estudio y se registraron la apariencia, el volumen y los colores. Utilizando estuches de análisis de orina (N-multistix de Amersham) , se midieron pH, gravedad, leucocitos, proteínas, cuerpos de cetona, urobilinógeno, glucosa y nitrógeno de urea sanguínea. ) Examen de los ojos: Se realizó el examen oftalmoscópico, de 5 ratas seleccionadas aleatoriamente por subgrupo de estudio para evaluar la apariencia externa, la cornea y el fundus o fondo del ojo. ) Análisis hematológico y bioquímico: para medir la cuenta de eritrocitos, la cuenta de leucocitos, la concentración de hemoglobina, el número de monocitos y linfocitos y el tiempo de coagulación sanguínea, se realizaron los análisis de sangre rutinarios. Se realizó el análisis bioquímico del suero para medir la actividad de la transferasa de albúmina, transaminasa de aspartato, fosfato alcalino y albúmina. ) Peso y tamaño de los órganos: De cada animal estudiado, se midieron el peso y el tamaño de los órganos principales, con respecto al peso corporal. Los órganos medidos incluyeron hígado, riñon, bazo, corazón, glándulas suprarenales, cerebro, glándula tiroides, ovarios y testículos. ) Examen patológico: los órganos se fijaron en formalina después de la medición del peso y el tamaño y los tejidos que se fijaron se cortaron en rebanadas de 5 mm utilizando un microtomo (AO Rotate Microtome) y se tiñeron con hematoxinina y eosina para el estudio microscópico.

Durante el estudio, no se observaron casos fatales y tampoco se observaron síntomas clínicos específicos, incluyendo cambios en el peso y consumo de agua y alimento. Tampoco se observó ninguna anormalidad significativa en el análisis de orina y en el examen de los ojos. El estudio hematológico y bioquímico no reveló ninguna diferencia significativa entre los grupos de estudio y de control. En el examen patológico en la autopsia, se observó hemosiderina ubicada en el citoplasma en el epitelio tubular próximo y la atrofia del epitelio tubular próximo del riñon en un grado leve en el grupo de dosis alta (100 mg/kg de peso corporal) pero no en los grupos de dosis media, de dosis baja y de control. Además de esto, no se observó ningún hallazgo patológico que tuviera propiedades dependientes de la dosis o que estuviera relacionado con la administración de HD-2. Estos resultados se resumen en la Tabla 7. Por lo tanto, la administración oral del HD-2 que duró 4 semanas no provocó ninguna anormalidad hematológica significativa en el grupo de dosis alta (100 mg/kg de peso corporal) pero se observó un hallazgo patológico moderado que sugería una ligera anormalidad renal. Sin embargo, en el grupo de dosis media no se observó esta patología.

Tabla 7 Parámetros bioquímicos de ratas hembra tratadas con dosis oral de HD-2 1 EJEMPLO 7 : Efecto del HD-2 sobre la Metástasis de Cáncer Experimento 1: Efecto inhibitorio del HD-2 administrado en forma oral sobre la metástasis de cáncer. Utilizando el modelo de ratón, se evaluó el efecto inhibitorio del HD-2 sobre la metástasis del cáncer con células tumorales clonadas y se comparó con el del cisplatino. Ya que la administración única de 500 mg/kg de peso corporal por día no tuvo ningún efecto secundario en ratas (ver EJEMPLO 5) , se estudió el efecto inhibitorio del HD-2 sobre la metástasis del cáncer utilizando una dosis menor a los 500 mg/kg de peso corporal. En ratones se inocularon células de melanoma B16-BL6 o células de carcinoma 26-M3.1 de colon y se contó el número de masas tumorales metastásicas que aparecían en los pulmones . Después de la inoculación de las células tumorales, se administraron varias dosis de HD-2 o cisplatino, un día después de la inoculación para encontrar la concentración i _v~____; óptima para la eficacia antimetastásica. Siete días después de la inoculación, se administró HD-2 o cisplatino para medir la eficacia terapéutica sobre la masa tumoral desarrollada. Según se muestra en la Tabla 8, la administración oral del HD-2 (de 0.1 a 10 mg) tuvo un significativo efecto antimetastásico en comparación con el grupo de control (grupo del cisplatino) . Se observó una actividad pico a una dosis de 1-mg con una eficacia a?ti-cancerígena muy elevada (86%) . En el séptimo día cuando las células tumorales inoculadas se establecieron completamente en los órganos blanco, la administración oral del HD-2 demostró una eficacia antimetastásica del 70%.. Esto indicó que la administración oral de HD-2 fue muy eficaz para el tratamiento del cáncer establecido.

Tabla 8 Efecto inhibitorio del HD-2 administrado en forma oral sobre la metástasis de cáncer Concentración, vía de número de masas metastásicas administración y día (taza inhibitoria (%) ) media ± DE intervalo Experimento 1 Grupo de control 122 ± 20 101 + 146 (inyección de Blß-BLß) HD-2 administración oral de lOmg +1 45 ± 25 (63.1) 72-23 administración oral de lmg +1 17 ± 9 *86.1) 8-29 administración oral de 0. lmg +1 75 ± 28 (38.5) 105-51 Experimento II. Grupo de control 162 ± 24 133-188 (inyección de B16-BL6 HD-2 administración oral de 10 mg +7 55 ± 13 (66.1) 40-67 administración oral de 1 mg +7 48 ± 19 (70.4) 26-69 administración oral de 0.1 mg +7 95 ± 23 (41.4) 118-72 Experimento 2 ; Efecto inhibitorio del HD-2 administrado en forma intravenosa sobre la metástasis En forma similar al experimento 1, el efecto inhibitorio del HD-2 sobre la metástasis de cáncer se comparó con el del cisplatino, utilizando células tumorales clonadas que poseían elevada capacidad metastásica. En este experimento, se administró HD-2 en forma intravenosa con dosis menores de 500 mg/kg de peso corporal por día. Según se resume en la Tabla 9, de 10 a 100 µg de HD-2 tuvieron una eficacia antimetastásica por encima del 90%, lo que sugirió que el HD-2 era más efectivo que el cisplatino en la misma dosis. Diez microgramos de HD-2 y cisplatino, la cual está considerada como una dosis óptima para inhibir la metástasis de cáncer en el 7o día de la inoculación de la célula tumoral, tuvieron un efecto anti-cancerígeno de 67.5% y 50.0%, respectivamente, cuando se administraron en forma intravenosa. Esto sugiere que la eficacia anti-cancerígena de HD-2 es mejor que la de los fármacos anti-cancerígenos convencionales y que el HD-2 también es efectivo en el tratamiento del cáncer completamente desarrollado en la etapa terminal .

Tabla 9 Efecto inhibitorio del HD-2 administrado en forma intravenosa sobre la metástasis de cáncer.

EJEMPLO 8 : Mecanismo Anti-cancerígeno del HD-2 in vivo El mecanismo in vivo del efecto anti-cancerígeno del HD-2 se estudió en ratones. Después de suspender 4xl05 células de melanoma B16-BL6 en PBS al 50%, éstas se inyectaron en forma intradermal en 2 sitios en la espalda de ratones C57BL/6 de 6 a 7 semanas de edad. Tres días después de la inyección tumoral, se proporcionó en forma oral un miligramo de HD-2 y se midieron el tamaño del melanoma inoculado y el número de vasos sanguíneos en los sitios de tumor y alrededor de los mismos. El grupo de control se trató con la administración oral de PBS . Según se demuestra en la Figura 5, el número de nuevos vasos sanguíneos, que se observaron en la proliferación de cáncer y en la metástasis, tendieron a disminuir después de la administración del HD-2. También disminuyó el tamaño de la masa tumoral sólida en forma significativa en proporción a la disminución en el número de nuevos vasos sanguíneos. Esto sugiere que el HD-2 suprime la invasión en los tejidos y la adhesión a los mismos lo que va de la mano con la formación de nuevos vasos sanguíneos.

EJEMPLO Efecto Inhibitorio del HD-2 Sobre la Oncoaénesis Inducida por el Carcinógeno Para examinar el efecto inhibitorio del HD-2 sobre la oncogénesis inducida por carcinógeno, en la cavidad peritoneal del ratón (cepa B6C3F1) , se inyectó N-nitrosodietilamina (NDEA) como un carcinógeno, a una concentración de 90 mg por kg de peso corporal para inducir 4 i el cáncer a las 2, 4, 8, 16 y 32 semanas después de la inyección del carcinógeno, se administraron por vía oral 100 g de HD-2 y la misma cantidad de agua destilada se inyectó en el grupo de control . Cuarenta y dos semanas después del tratamiento con NDEA se sacrificaron los ratones para medir la incidencia y el tamaño de los tumores formados en el pulmón e hígado. Según se muestra en la Figura 6, la incidencia del tumor hepático inducido por NDEA, se inhibió en forma efectiva después de la administración oral del HD-2. La incidencia del tumor hepático inducido por HD-2 era de más del 90% pero, después de la administración del HD-2, la incidencia disminuyó de 5 a 22%, a pesar de la variación que depende del periodo de administración del HD-2. De este modo, el HD-2 inhibió la oncogénesis inducida por carcinógeno en el hígado de 78 a 95%. El HD-2 también inhibió totalmente el hepatoma espontáneo, cuya incidencia está reportada en aproximadamente 20% sin la administración del HD-2. En el pulmón, el efecto inhibitorio del HD-2 sobre la reducción de la oncogénesis inducida por carcinógeno no fue tan drástica como en el hígado. Sin embargo, si a las 4 semanas después de la inyección del NDEA se suministró HD-2, se inhibió el 30% la oncogénesis inducida por carcinógeno. Adicionalmente, los cánceres espontáneos de pulmón fueron totalmente suprimidos por el HD-2, lo que indica que la administración oral de la dosis adecuada de HD-2, disminuye la incidencia de cánceres espontáneos. Según se muestra en la Figura 7, el número de masas tumorales en el pulmón fue de aproximadamente 2 en el grupo de HD-2, en comparación con 7 en el grupo de control, lo que señala la eficacia del HD-2 en la inhibición de la oncogénesis inducida por carcinógeno. Estos resultados sugieren que el HD-2 fue muy efectivo no sólo en el tratamiento sino también en la prevención de cánceres malignos .

EJEMPLO 10; Preparación de la Composición Farmacéutica Para la Terapia Anti-cancerígena 5 g del HD-2 se mezclaron con los siguientes ingredientes de la medicina china y se pulverizaron hasta la forma de polvo: 7 g de hodongjoo, 7 g de chunsangap, 10 g de baekchool, 3 g de woo hang, 3 g de sahyang, 5 g de shingok, 5 g de moryo, 3 g de yongnyehyang, 5 g de yoohyang, 5 g de molryak, 10 g de baekbongryung, 10 g de sangbaekpi, 10 g de galgeun, 5 g de macheehyun, 5 g de ohmeeja, 5 g de hyulgal, 5 g de seokko, 5 g de boongsa, 5 g de hansooseok, 7 g de ginseng vaporizado al rojo. Se añadió agua destilada al polvo para formar pildoras de 1 a 1.5 gramos para la administración oral. Estas pildoras se utilizaron para fabricar tabletas de aproximadamente 1.33 g convenientes de una sola dosis, las cuales se administraron a pacientes con cáncer en etapa terminal, tres veces al día para hacer un total de 4 gramos por día. La dosis efectiva de HD-2 puede depender de la fracción de los fármacos, de la edad, sexo y condiciones de salud del paciente. En general, la dosis normal fue de 50 g por kg peso corporal, con un límite superior de 160 a 330 g por kg de peso corporal. Aunque para preparar la composición farmacéutica para el ensayo clínico del HD-2 se utilizaron ingredientes de la medicina oriental, para este fin puede utilizarse cualquier composición farmacéutica. El hexaóxido de arsénico (AS406) sintetizado químicamente puede ser el substituto de HD-2, el cual se preparó mediante la separación y purificación de Sinsuk en este estudio.

EJEMPLO 11; Ensayo Clínico Sobre Varias Formas de Cánceres Malignos Para el estudio se seleccionaron pacientes con cáncer a quienes en el hospital y mediante exámenes clínicos profundos se les diagnosticaron cánceres de útero, pulmón, seno maxilar, riñon o vejiga urinaria y de los cuales la mayoría estaban en la etapa terminal de la enfermedad con una esperanza de supervivencia de 6 a 12 meses. Después de obtener el consentimiento del paciente o del tutor o custodio, para examinar la eficacia anti- cancerígena se administraron 3 veces al día las tabletas descritas en el EJEMPLO 10.

Experimento 1; Ensayo Clínico en una Paciente con Cáncer Uterino. A la persona del estudio (EunSook Park) se le diagnóstico cáncer cérvico uterino (diagnóstico final carcinoma celular escamoso) en octubre 1993 en Seoul National University Hospital aun después de la terapia anti-cancerígena repetida (8 veces) , las células cancerosas continuaron desarrollándose y afectaron a los nodos linfáticos, al recto y a la vejiga urinaria. Por lo tanto, la orina se recolectaba a través de un tubo insertado en el riñon derecho y la paciente estaba inmovilizada en la cama y era incapaz de tomar alimentos. El doctor le informó que su esperanza de supervivencia era menor de 3 meses . Las tabletas descritas en el EJEMPLO 10 se le administraron a EunSook Park durante 3 meses y se monitoreó el progreso o avance utilizando tomografía por computadora (CT) y formación de imágenes por resonancia magnética (MRI) . Las exploraciones de CT (Figuras 8 a 19) indicaron que después 'de la desaparición de la masa tumoral, se formaron perforaciones en las paredes del útero, la vejiga urinaria y el recto y que las heces del recto se escaparon hacia el útero a través de las aberturas perforadas, por lo que a la paciente se le practicó la colostomía en enero de 1996 Experimento 2 ; Ensayo Clínico en un Paciente con Cáncer de Pulmón La persona del estudio (KyungJoo Lee) fue una persona del sexo masculino de 30 años de edad y con tratamiento para la fiebre y el escalofrío con el diagnóstico de neumonía el 19 de marzo de 1996, sin ninguna mejoría en los síntomas. Se le diagnosticó cáncer de pulmón en etapa 4 (diagnóstico final: adenocarcinoma no diferenciado) en el Hospital SeongGa de Bucheon y el diagnóstico se confirmó en el Samsung Medical Center ubicado en Il onDong, de Seúl, con extensos exámenes adicionales . Los doctores le informaron de su limitado tiempo de vida de 6 a 12 meses. Las exploraciones de CT (Figuras 21 a 24) , realizadas el 21 de Marzo de 1996 en el Hospital ScongGa mostraron una masa tumoral irregular en el pulmón derecho, fluidos pleurales que llenaban la cavidad pleural derecha y nodos linfáticos agrandados en el mediastino. A KyungJoo Lee se le suministraron las tabletas preparadas, según se describió en el EJEMPLO 10, durante 8 meses, al tiempo que se monitoreaba el progreso de la unidad utilizando exploración con CT. Según se indica en las Figuras 25 a 30, la masa tumoral se contrajo gradualmente de tamaño hasta desaparecer completamente después de 8 meses de terapia con el fármaco.

Experimento 3 ; Ensayo Clínico en un Paciente con Cáncer del Seno Maxilar A la persona del estudio (HeeGon Kim) se le diagnosticó cáncer maligno que afectaba la cavidad nasal derecha y el seno maxilar (diagnóstico final: cystadenoma adenoide) en 1981, que era inoperable debido a la metástasis del hueso. Esta persona se había tratado con quimioterapia y terapia de radiaciones en el CheonJu Jesuit Hospital y en el Seoul National University hospital, pero la enfermedad empeoró. Se le recomendó prepararse para la muerte después de una exploración del CT del 5 de marzo de 1990. Según se muestra en las exploraciones de CT realizadas el 31 de marzo de 1990 (Figura 31 y 32) el seno maxilar derecho estaba lleno de masas tumorales y se observó también una masa tumoral en la cavidad nasal derecha. Los especialistas en cáncer del Seoul National University Hospital prescribieron la quimioterapia anti-cancerígena durante 2 meses pero las exploraciones del CT realizadas después de terminar la quimioterapia, indicaron el crecimiento adicional de las masas tumorales hasta afectar regiones cercanas al cerebro, a la órbita ocular derecha y a la cavidad nasal derecha e izquierda. A HeeGon Kim se le suministraron las tabletas preparadas según se describió en el EJEMPLO 10, durante 3 meses y el progreso de la enfermedad se verificó utilizando exploración por CT el 27 febrero de 1991 en el Seoul National University Hospital. Las exploraciones de CT (Figuras 35 a 38) indicaron que la mayoría de la masas tumorales se habían ido y que la cavidad nasal derecha y el seno maxilar estaban llenos del flujo normal de aire.

Experimento 4 ; Ensayo Clínico en un Paciente con Cáncer «3e Riñon A la persona del estudio (YongHa Lee) se le diagnosticó cáncer renal en etapa terminal en el departamento de urología del Pusan Merinol Hospital después de extensos exámenes que incluyeron la exploración por CT. Se le aplicó un tratamiento quirúrgico después de que se le comunicó su baja tasa de supervivencia del 20% incluso con nefrectomía total o radical . Las exploraciones de CT realizadas en rechazo (Figura 39 a 44) mostraron que el riñon izquierdo aparecía aumentado en comparación con el derecho y que la cavidad de la pelvis renal izquierda que no estaba llena del material de contraste, indicando masa tumoral en esa región. Los pielogramas intravenosos se efectuaron después de administrar las tabletas preparadas según se describe en el EJEMPLO 10. Los pielogramas intravenosos (Figuras 45 y 46) indicaron una marcada disminución de la masa tumoral después de 6 meses de la terapia con el fármaco y las exploraciones de CT (Figura 47 a 50) , demostraron una reducción del 80% de la masa tumoral. La nefrectomía izquierda se practicó en el Pusan Baek Hospital y se confirmó el carcinoma de las células renales mediante examen patológico. Con la administración adicional de tabletas, según se describieron en el EJEMPLO 10, durante 3 meses, las exploraciones de CT (Figuras 51 y 52) demostraron solamente pequeñas masas tumorales ubicadas en el riñon izquierdo y en la cavidad pélvica renal, indicando que la enfermedad estaba casi curada.

Experimento 5 ; Ensayo Clínico en un Paciente con Cáncer en la Vei iga Urinaria La persona del estudio (DaeJoong Kim) había estado sintiendo disuria desde junio de 1995 y se le trató la cistitis sin ninguna mejora. Se le diagnosticó cáncer en la vej iga urinaria en el Samsung Medical Center con un examen profundo, que incluía exploración con CT. Con los estudios adicionales en el Seoul JoongAng Hospital, las exploraciones de CT (Figuras 53 a 56) , mostraron masas tumorales en sombreado obscuro en la esquina derecha y pared izquierda de la vejiga urinaria y se estimó que la tasa de supervivencia era de aproximadamente 20% dentro de un año. Se le trató con tabletas preparadas según se * » describió en el EJEMPLO 10, durante 1 año. Las exploraciones de CT (Figuras 57 y 58) , realizadas en el Dongln Hospital de KangNeung en julio 1996, no indicaron evidencia de masa cancerosa y las exploraciones de CT (Figuras 59 a 62) , realizadas en el HyunDae Hospital el 18 de marzo de 1997, indicaron la total cura de la enfermedad sin ninguna sombra de masa tumoral. Según se muestra en los EJEMPLOS y en los experimentos antes descritos, el hexaóxido de arsénico (AS406) que se obtuvo mediante la separación y purificación a partir de un material natural, el Sinsuk, tuvo una potente eficacia anti-cancerígena tanto en experimentos in vivo como in vitro e inhibió en forma efectiva la metástasis del cáncer en experimentos con animales. Adicionalmente, el compuesto natural de arsénico (AS406) se mezcló con otros ingredientes de la medicina oriental para preparar tabletas para su administración oral. El ensayo clínico en pacientes con cáncer que portaban cáncer de útero, pulmón, seno maxilar, riñon o vejiga urinaria, indicó una marcada inhibición en la proliferación y metástasis de las células cancerosas después de la administración de tabletas hechas a partir de AS4Os . Esto sugiere que la invención podría ser utilizada como un fármaco anti-cancerígeno efectivo, que puede tener un gran impacto en el avance de la biomedicina.

Será evidente para los experimentados en la técnica que pueden realizarse diversas modificaciones y variaciones en un agente terapéutico anti-cancerígeno de hexaóxido de arsénico (AS406) de una substancia química natural y su composición farmacéutica de la presente invención, sin desviarse del espíritu o alcance de la invención, de este modo, se pretende que la presente invención cubra las modificaciones y variaciones de esta invención siempre que queden dentro del alcance de las reivindicaciones anexas y sus equivalentes .

Claims (7)

1. REIVINDICACIONES 1. El uso de AS406 para la manufactura de una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer.
2. 2. Una composición farmacéutica para el tratamiento de cáncer que comprende una cantidad farmacéuticamente efectiva de AS406 como un ingrediente activo y un vehículo farmacéuticamente aceptable .
3. 3. La composición farmacéutica según la reivindicación 2 , en donde ésta está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno del útero.
4. 4. La composición farmacéutica según la reivindicación 2, en donde ésta está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno del pulmón.
5. 5. La composición farmacéutica según la reivindicación 2, en donde ésta está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno del seno maxilar.
6. 6. La composición farmacéutica según la reivindicación 2, en donde ésta está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno del riñon.
7. 7. La composición farmacéutica según la reivindicación 2, en donde ésta está formulada como una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer maligno de la vej iga urinaria .