NL7915009A - Werkwijze en reagens ter bepaling van het hemoglobine- -gehalte van bloed. - Google Patents

Werkwijze en reagens ter bepaling van het hemoglobine- -gehalte van bloed. Download PDF

Info

Publication number
NL7915009A
NL7915009A NL7915009A NL7915009A NL7915009A NL 7915009 A NL7915009 A NL 7915009A NL 7915009 A NL7915009 A NL 7915009A NL 7915009 A NL7915009 A NL 7915009A NL 7915009 A NL7915009 A NL 7915009A
Authority
NL
Netherlands
Prior art keywords
hemoglobin
blood
detergent
polyethylene glycol
reagent
Prior art date
Application number
NL7915009A
Other languages
English (en)
Original Assignee
Rolf Zander Dr Rer Nat Werner
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Rolf Zander Dr Rer Nat Werner filed Critical Rolf Zander Dr Rer Nat Werner
Publication of NL7915009A publication Critical patent/NL7915009A/nl

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/72Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
    • G01N33/721Haemoglobin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

j ί i WERKWIJZE EN REAGENS TER BEPALING VAN HET HEMOGLOBINE-GEHALTE VAN BLOED. j
De uitvinding heeft betrekking op een werkwijze en een reagens voor de fotometrische bepaling van het hemoglobine-gehalte van bloéd, waarbij bij menging met het bloedmonster een I karakteristieke verkleuring wordt verkregen. I
5 De kwantitatieve bepaling van hemoglobine in bloed is een van de meest veelvuldig uitgevoerde analyses in de klinische chemie. In de loop van deze eeuw zijn hiertoe verscheidene werkwijzen ontwikkeld, die echter voor wat betreft de i nauwkeurigheid, betrouwbaarheid en reproduceerbaarheid aanzien- ! 10 lijk van elkaar verschillen (zie de leerboeken der klinische j ! ! | chemie: Hallmann 1966; Henry 1964; Richterich 1971; Henry c.s. j 1974; Rick 1976): ! (1) Spectrofotometrische werkwijzen (als carboxy- hemoglobine, oxy-hemoglobine of cyaan-hemiglobine, als cyaan- j 15 hematine, zuur of alkalisch hematine, zowel als pyridine-hemo- j chromogeen); (2) Gasometrische werkwijzen (bepaling van de zuurstof- of koolmonoxyde-capaciteit); j (3) Chemische werkwijzen (bepaling van het j 20 ijzergehalte); j (4) Andere werkwijzen (refractometrie, dicht- heidsmeting, enzymatische reacties, zoals de pseudoperoxydase- j ac-tiviteit van het hemoglobine).
79T5ÖÖ9 2 \ j Van deze werkwijzen is de spectrofotometrische j ! ; j cyaan-hemiglobine-werkwijze algemeen aanvaard en deze werkwijze j heeft een wereldwijde toepassing gevonden. Nadat in de jaren 1953 ; | tot 1963 nagenoeg alle laboratoria deze werkwijze in plaats van ; ! : | 5 andere werkwijzen hadden ingevoerd (zie Spaander 1964; Sunderman i 1965) en een cyaan-hemiglobine-standaard was aanbevolen (Cannan j : ! 1968), werd deze werkwijze door de Deutschen Gesellschaft für | innere Medizin 1962 en het International Committee for
Standardization in Hematology (ICSH) 1967 aanbevolen. Sedert deze : 10 tijd geldt deze werkwijze als een routine-werkwijze. In Duitsland j heeft deze werkwijze de functie van een referentie-werkwijze, dat : wil zeggen dat andere werkwijzen slechts mogen worden toegepast wanneer de verhouding van de daarmee verkregen resultaten tot het ; resultaat van de referentie-methode bekend is (DIN voornorm 58 931). 15 De invoering van de cyaan-hemiglobine-werkwijze als standaardwerkwijze heeft er toe geleid dat in de vakwereld zich vooroordelen hebben ontwikkeld tegen andere methodes: "Hamiglobin-Cyanid ist das einzige bekannte stabile Hamoglobin- j
Derivat" (Richterich 1971); "alle übrigen Verfahren..... sind 20 abzulehnen" (Rick 1976); ".......Cyan-Hamiglobin (exaktester j
Nachweis)" (Hallmann 1966). |
Het principe van de cyaan-hemiglobine-werkwijze \
bestaat hierin, dat men het hemoglobine met kaliumferricyanide I
tot hemiglobine oxydeert en met kaliumcyanide in cyaan-hemiglobine 25 omzet. Daarbij wordt als reactie-oplossing een gemodificeerde zogenoemde Drabkin-oplossing toegepast, zoals deze oorspronkelijk werd beschreven door van Kapem en Zijlstra (van Kampen en Zijlstra, 1961; Zijlstra en van Kampen 1960).
Deze werkwijze bezit de volgende voorbeelden.
30 -(-1) Toepassing van een enkele, reactie-oplossing.
(2) Alle hemoglobine-derivatenmn het bloed worden omvat (desoxy-hemoglobine, oxy-hemoglobine, carboxy-hemoglobine, hemiglobine en in verregaande mate ook sülf-hamoglobine).
(3) Cyaan-hemiglobine bezit een breed en vlak 35 extinctie-maximum bij 540 nm, zodat ook met pretentieloze filter-fotometers betrouwbare resultaten kunnen worden verkregen.
7 91 5 Ö 0 9 \ s — 3 — (4) De wet van Lambert-Beer is óver een breed] meettraject geldig.
(5) De bereiding en de verzending van stabiele standaardoplossingen voor controle-doeleinden is mogelijk en de- 5 ze kunnen zowel uit kristallijn hemoglobine als ook uit gewassen erythrocyten worden bereid.
(6) Cyaan-hemiglobine is een stabiel hemo- I globine-derivaat, zodat de bepaling van de extinctie na enige minuten of pas na dagen kan geschieden. j 10 De cyaan-hemoglobine-werkwijze bezit de volgende! nadelen (zie Henry 1964, pag. 740). ; (1) De toxiciteit van de reactie-oplossing ver- ; eist bijzondere maatregelen bij de handhaving daarvan (toepassing -van automatischejipetten, zorgvuldige afscherming van de oplos- i 15 sing bij het uitgieten). j (2) De reactie-oplossing is niet gedurende lange! ! tijd stabiel, is lichtgevoelig en moet daarom op speciale wijze | worden opgeslagen (bruine flessen of dergelijke).
(3) De concentraties van de reactiecomponenten j 20 moeten exa ct worden aangehouden, hetgeen in het bijzonder geldt ! voor de buffer, die een gedefinieerde pH-waarde moet garanderen. \ (4) De reactietijden van de verschillende hemo-globine-derivaten zijn verschillend en gedeeltelijk aanzienlijk j te lang. Oorspronkelijke werd voor alle hemoglobine-derivaten | 25 een reactietijd van 3 minuten aangegeven (van Kampen en Zijlstra 1961), welke uitspraak in de daarnavolgende jaren werd gemodifi- ceerd,
In 1965 tonen Taylor en Miller aan dat de cyaan-; hemiglobine-vorming in het geval van carboxy-hemoglobine duide-30 lijk verlengd is en dienovereenkomstig aanzienlijke fouten bij de hemoglobine-bepaling moeten optreden. |
Van Kampen en Zijlstra stellen in 1965 een ] reactietijd voor van 90 minuten indien in het te onderzoeken j bloed rekening moet worden gehouden met carboxy-hemoglobine.
35 Rodkey toont in 1967 aan dat de omzetting van
HbCO in cyaan-hemiglobine bij kamertemperatuur 90-120 minuten 79 1 5 0 oT ....... ..............~~....... ......... ' '..... 4 ......
vergt, terwijl HbC^ slechts 10 minuten vereist. Deze auteur kan de' reactietijd voor de omzetting van HbCO in cyaan-hemiglobine tot 15 minuten verkorten door de concentratie van kaliumferricyanide te vervijfvoudigen.
5 Rice (1967) lost deze moeilijkheid op door de | oplossing op 56°C te verhitten. De reactie van HbCO tot cyaan- : hemiglobine is dan na 3-5 minuten voltooid.
Dat carboxy-hemoglobine zeer veel langzamer tot hemiglobine oxydeert dan andere derivaten (Hb, HbC^) wordt boven-10 dien bij de zogenoemde Hoppe-Seyler proef voor een kwalitatieve
HbCO-bepaling in bloed benut (zie Massmann 1954). Verder mogelijkheden tot fouten konden worden uitgesloten. Bijvoorbeeld werd een precipitatie van plasma-eiwitten en een daardoor veroorzaakte ; troebeling (zie bijvoorbeeld Green en Teal 1959) vermeden door 15 aan de reactie-oplossing een detergens toe te voegen (van Kampen en Zijlstra 1961).
De uitvinding beoogt te voorzien in een betrouw- j bare kwantitatieve werkwijze voor de bepaling van hemoglobine, die de genoemde voordelen van de bekende cyaan-hemiglobine-werk-20 wijze bezit, maar waarbij de genoemde nadelen daarvan zijn onder- j vangen.
De bovengenoemde doeleinden worden volgens de j uitvinding bereikt met een reagens, dat bestaat uit een waterige j alkalische oplossing, waaraan een in water oplosbaar, niet- j 25 ionisch detergens is toegevoegd, waardoor alle (in het bloed voor-' komende) hemoglobine-derivaten en heem-derivaten in een uniform-eindprodukt met een uitgesproken absorptie-maximum in het zichtbare traject van het spectrum worden omgezet. In het bijzonder j # ! worden detêrgentia toegevoegd, die tot een eindprodukt met een j 30 absorptie-maximum bij ongeveer 575 nm leiden. Verdere uitvoerings-j vormen en voorkeursuitvoeringsvormen van de uitvinding zullen j hieronder worden beschreven. j |
De bepaling van hemoglobine als alkalisch hema- ! tine werd voor het eerst in 1922 door WU beschreven. Deze werk- | 35 wijze was in zekere zin omslachtig: hemoglobine werd door toe-____________voeging van geconcentreerd zoutzuur in zuur hematine omgezet, dat 7915009 ......- 5 '
vervolgens door toevoeging van natronloog alkalisch werd gemaakt, J De voor een bepaling benodigde tijd bedroeg daarom ongeveer een uur. Het voordeel in vergelijking met andere werkwijzen, zoals zuur hematine, meethemoglobine of cyaan-hemiglobine zag WU
5' hierin, dat storingen door plasma-bestanddelen niet optraden. ! **«
Clegg en King (1942) beschreven een werkwijze voor de hemoglobine-bepaling via het alkalische hematine, waarbij i i ; als reactie-oplossing een 0,1 N. natronloog werd gebruikt, die j na toevoeging van het bloed gedurende 4-5 minuten in een waterbad j ^ van 100°C werd verhit. Deze procedure leek de auteurs nodig omdat foetaal hemoglobine en alkali-resistent volwassenen-hemoglo- [ bine een te trage kleurontwikkeling vertoonden.
Na 1942 was er een reeks van auteurs, die melding maakten van bevredigende resultaten bij toepassing van de ^ werkwijze met het alkalische hematine (King c.s. 1948; MacFarlane ; c.s. 1948; Donaldson c.s. 1951; King c.s. 1951; Scaife 1955).
Ook werden enige modificaties voorgesteld, bijvoorbeeld de toepassing van een andere golflengte (Scaife 1955) of een speciale j standaard (King 1947). i 20 .
Andere auteurs daarentegen verwierpen de werkwijze van het alkalische hematine vanwege de te lange reactietijden of vanwege de storende invloeden voor plasma-bestanddelen (Ponder 1942; Sunderman c.s. 1953). De zich tegelijkertijd alom verbreidende methode van het cyaan-hemiglobine verdrong de werk-25 wijze van het alkalische hematine meer en meer, zodat later zelfs van een "Besprechung des alkalischen Hamatins verzichtet werden konnte" (Legowsky en Boroviczeny 1962).
Ten opzichte van de klassieke werkwijzen op basis van alkalisch hematine onderscheidt zich de werkwijze vol- 30 .
gens de uitvinding hierin, dat een alkalisch hematine met bijzondere eigenschappen met betrekking tot het spectrum, de vormings-snelheid en de houdbaarheid ontstaat, welk hematine hieronder kortheidshalve als "alkalisch hematine D-575" zal worden aangeduid .
35 .
Ten aanzien van de uitvinding kunnen de vol- .............gende bijzonderheden en voordelen worden genoemd;_________ 7915009 6 .........
(1) Alle heem- en hemoglobine-derivaten worden j kwantitatief in een uniform reactieprodukt, alkalisch hematine D-575, omgezet en bij de fotometrische meting omvat: hemoglobine, oxy-hemoglobine, carboxy-hemoglobine, hemiglobine, sulf-hemiglo- 5 bine, cyaan—hemoglobine, foetaal hemoglobine zowel, als chloor-hemine.
(2) De vorming van het alkalische hematine D-575 na de toevoeging van het monster aan de reactie-oplossing is na j jq ten hoogste 2 minuten voltooid en het reactieprodukt vertoont nog j na weken dezelfde extinctie. Dit geldt zonder uitzondering voor alle onder (1) genoemde heem- en hemoglobine-derivaten.
(3) De gebruikte reactie-oplossing bezit ideale | eigenschappen: ^ (a) er is slechts ëën reaetievoplossing nodig, (b) de reactie-oplossing is onbeperkt houdbaar, (c) de handhaving van de reactie-oplossing is nagenoeg ongevaarlijk, j (d) de reactie-oplossing kan bij kamertempera- ' 2Q tuur in gebruikelijke glas- of kunststofva ten worden opgeslagen, (e) de reactie-oplossing is ongevoelig voor i licht, |
(f) de reactie-oplossing kan op eenvoudige wijze I
i ! worden bereid en is goedkoop, j ! \ | (g) de voor de reactie-oplossing gebruikte che- j micaliën zijn vervangbaar, dat wil zeggen ! j dat verschillende chemicaliën met hetzelfde i resultaat kunnen worden gebruikt. ! .. Er kan NaOH of eveneens KOH worden gebruikt; ! 30 ! als detergens kan bijvoorbeeïl worden gebruikt polyethyleenglycol- j p-t-octylfenolether (in het bijzonder polyethyleenglycol-mono- /p-(l.1.3.3-tetramethylbutyl)-fenyl/-ether, zoals verkrijgbaar onder de handelsnaam Triton X-100), polyethyleenglycollauryl- ether, polyethyleenglycolcetylethêr, polyethyleenglycololeylether en polyethyleenglycolstearylether.
(h) De concentratie van de reactiecomponenten 7915009 ~ 7 “ I NaOH en detergens is niet aan scherpe gren zen gebonden, dat wil zeggen dat een aanzienlijke afwijking van de optimale omstandigheden nagenoeg geen invloed uitoefent op j : 5 de uitvoerbaarheid van de werkwijze. Wanneer :
NaOH in het concentratietraject van 0,05 tot ; i 0,5 N. en die van het detergens van 1 tot 4 % | ; wordt gewijzigd verandert het spectrale ge- i drag van het reactieprodukt niet, maar wordt 10 uitsluitend de voor de bepaling benodigde | reactietijd van 1-2 minuten tot 5-10 minuten j verlengd. j | (i) De pH-waarde (zie de bovengenoemde NaOH- ! concentratie) en de temperatuur hebben in 15 een breed traject geen invloed op de uitvoerbaarheid van de werkwijze. | (k) In tegenstelling tot verdund bloed is het reactieprodukt alkalisch hematine D-575 intensief groen gekleurd (kleurindruk bij een j 20 lichtweglengte van 1-2 cm). Daaruit volgt | dat de voltooiing van de reactie op zijn ! minst ruwweg met het oog kan worden beoor- j deeld.
(l) Het alkalische milieu van de reactie-oplos- i j 25 sing is bijzonder geschikt voor een hemoglo- bine-bepaling (zieBarer en Gaffney 1957): j de erythrocyten worden volledig gehemolyseerd;, de erythrocyten-membranen worden opgelost en maken het daaraan geadsorbeerde hemoglobine
30 vrij en tenslotte wordt een precipitatie van I
i de plasma-proteïnen (troebeling) verhinderd.
(4) Het reactieprodukt alkalisch hematine D-575 vertoont ideale eigenschappen: j (a) De extinctie is voldoende groo-t om een 35 hemoglobine-bepaling met slechts 10-20 __________________________________ ______________ ___________________________microliter bloed ( bij toepassing van ge- 7915009 8 bruikelijke hoeveelheden reactie-oplossing, ; namelijk 2-5 ml) te kunnen uitvoeren.
(b) De wet van Lambert-Beer is over een breed traject geldig.
5 (c) Het spectrum van het reactieprodukt ver toont een breed maximum bij een golflengte van 575 nm (vandaar de aanduiding alkalisch i hematine D-575) zodat ook met pretentie- ! | loze filterfotometers betrouwbare bepalingen! kunnen worden uitgevoerd. Het spectrum is ! j j onafhankelijk van de concentraties van de
j I
reactiecomponenten in het bovengenoemde tra-j ject, en het onderscheidt zich duidelijk van ! dat van het alkalische hematine zonder toe- ^ voeging van een detergens. Het spectrale gedrag van alkalisch hematine D-575 is in | vergelijking met het spectrum van alkalisch hematine in figuur 1 weergegeven. De beide j
spectra werden verkregen door een cyaan-heimH
20 globine-standaardoplossing (212,4 mg/100 ml) met telkens hetzelfde volume 0,1 M. NaOH (vorming van alkalisch hematine) respectie- ; j velijk 0,1 M. NaOH met een toevoeging van 2,5 % decaethyleenglycol-p-t-octylfenyl-25 ether (vorming van alkalisch hematine D-575) te verdunnen. Bij deze samenstelling verkrijgt men optimale resultaten met betrekking tot de reactietijd. Terwijl het alkalische hematine in NaOH het in de literatuur veel-30 vuldig vermelde spectrum met een plateau tussen 550 en 600 nm vertoont (zie bijvoorbeeld Hunter 1951) vertoont het alkalische hematine D-575 in aanwezigheid van een niet-ionisch detergens een breed maximum bij 575 35 nm.
____ Dit effect wordt niet /verkregen met ionische 7915 Ö Ö 9 .- 9 -- detergentia: |
Terwijl anionische detergentia, zoals natrium-dodecylsulfaat, de karakteristieke band bij 575 nm niet vertoont treedt bij toepassing van kationische detergentia, zoals benzyl-5 diïsobutylfenoxyethoxydimethylammoniumchloride of dodecyldioxy-ethylbenzylammoniumchloride bij toevoeging van bloed een bruin neerslag op.
Het moet bij de werking van het niet-ionische ! I detergens om een niet-specifieke invloed gaan omdat deze van de 10 structuur daarvan onafhankelijk is (met betrekking tot de verandering van het hemoglobine-spectrum door indifferente oplosmiddelen wordt verwezen naar Heilmeyer 1933, pag. 116).
(5) Daar alkalisch hematine D-575 zeer stabiel is kunnen standaardoplossingen met bekende concentratie uit vol- 15 wassenen-erythrocyten, uit kristallijn hemoglobine en uit kris- ; | ;
tallijn chloor-hemine worden bereid. I
In het bijzonder de laatste werkwijze is voor de i i bereiding van een standaard zeer aanbevelenswaardig, omdat chloor-hemine een eenvoudige, exact gedefinieerde stof is (mole-20 cuulgewicht 651,97, bruto formule C^H^Cl Fe N^O^), in de beschreven reactie-oplossing zeer goed oplosbaar is èn duidelijk de typische spectrale eigenschappen van alkalisch hematine D-575 | vertoont, dat wil zeggen dat het kwantitatief in alkalisch hematine D-575 wordt omgezet. j 25 Als bijzonder voordeel kan worden genoemd dat i | de alom toegepaste cyaan-hemiglobine-standaardoplossingen even eens na een verdunning met de reactie-oplossing kunnen worden j gebruikt (figuur 1). Dit betekent dat een standaardisering van de nieuwe werkwijze met reeds bestaande standaards kan worden j 30 uitgevoerd. j
Hieronder zal een uitvoeringsvoorbeeld worden I
i beschreven. j
Een volume van 20,ul bloed wordt met een ge- j j kalibreerde capillair of een zogenoemde Sahli-pipet volledig ! 35 overgebracht in een ëënweg-meetcuvet, die 3 ml reactievloeistof bevat. De meetcuvet bestaat bijvoorbeeld uit glashelder poly- 7915 OW " 1 ' 10 styreen en bezit een kantlengte van 1 cm. Aan het bóveriuitëihdë’........j daarvan bevindt zich een kunststofafsluitkap, die normaal gesloten is en pas kort voor de uitvoering van de bepaling wordt geopend; De reactie-oplossing in de meetcuvet blijft gedurende j 5 maanden stabiel, zodat de cuvetten gedurende lange tijd kunnen worden opgeslagen. :
De reactie-oplossing bestaat bijvoorbeeld uit 0,1 M. NaOH in water met een toevoeging van 2,5 % decaethyleen- : t ! j glycol-p-t-octylfenylether. Dit detergens is bijzonder geschikt j ! 10 gebleken omdat het in vloeibare vorm is en daarom op eenvoudige j ! | wijze kan worden gehandhaafd. Na het iribrengen van het bloedmön- ! ster wordt het bloed door schudden van de meetcuvet met de reactie- ! oplossing gemengd. Daarbij treedt de omzetting van alle hemoglobi-; | ne-derivaten plotseling op. De oplossing kleurt zich direct inten- ! 15 sief groen. De meting van de extinctie in een fotometer bij een | golflengte van 575 nm kan na 1 minuut of op zijn hoogst na 2 minu-; | ten geschieden. Daar de extinctie dagenlang stabiel blijft kan de ! meting ook later worden uitgevoerd. Als fotometers kunnen in de j handel verkrijgbare filterfotometers worden gebruikt, waarbij het j 20 filter zodanig wordt gekozen, dat een smaller traject bij 575 nm wordt doorgelaten. Een geschikte filterfotometer is bijvoorbeeld beschreven in het Duitse Auslegeschrift 2.448,206. j
Wanneer bloed met een normale hemoglobine-concen-, tratie van ongeveer 16 g/100 ml wordt gebruikt dan verkrijgt men j 25 bij deze verdunningsverhouding een extinctie van ongeveer 0,46 ! bij de genoemde golflengte, gemeten tegen een met water gevulde cuvet met dezelfde laaglengte (1 cm). !
De vergelijking met een standaardoplossing (bij- | voorbeeld een 0,1 mM. chloor-hemine-oplossing in dezelfde reactie-; i 30 oplossing of een cyaan-hemiglobine-oplossing van bekende concentratie, verdund met hetzelfde volume van de reactie-oplossing) geeft j de gewenste hemoglobine-concentratie in g/100 ml. j
De relevante literatuur is hieronder aangegeven, j Barer, R. en Gaffnéy, F.M.: The use of dilute alkaline in 35 haemoglobinometry Glin. Chim. Acta 2, 140-156 (1957). j 79Τ5ΊΠΓ9 1 11 .........
Besdiuss der Deutschen Gesellschaft für Innere Medizin betref- ! fend Standardisierung der Hamoglobin-Bestimmung Arztl. Labor 8, 188 (1962).
Cannan, R.K.: Proposal for a certified standard for use in hemoglobinometry - second and final report J. Lab. Clin. Med. 52, 5 471-476 (1958).
Clegg, J.W. en King, E.J.: Estimation of haemoglobin by the alkaline haematin method, Brit. Med. J. 2, 329-333 (1942). j
Deutsche Normen: Bestimmung des Hamoglobingehaltes im Blut.
] DIN Vornorm 58 931 (1970). j j ! 10 Donaldson, R., Sisson, R.B., King, E.J., Wootton, I.D.P., j MacFarlane, R.G.,: Determination of haemoglobin. VII. Standardized' ! optical data for absolute estimation. Lancet 1, 874-881 (1951).
I MacFarlane, R.G., King, E.J., Wootton, I.D.P., Gilchrist, M.:
Determination of haemoglobin. III. Reliability of clinical and 15 other methods. Lancet 2, 282-286 (1948). I
Green, P. en Teal, C.F.J.: Modification of the cyanmethemoglobin reagent for analysis of hemoglobin in order to avoid precipitation of globulins. Am. J. Clin. Pathol. 32, 216-217 (1959).
Hallmann, L.: Klinische Chemie und Mikroskopie (10. Aufl.) i 20 Thieme, Stuttgart 1966.
Heilmeyer, L.: Medizinische Spektrophotometrie Fischer, Jena 1933.;
St
Henry, R.J.: Clinical Chemistry (1 ed.) Harper & Row, j
New York 1964,
Henry, R.J., Cannon, D.C., Winkelman, J.W.: Clinical Chemistry j 25 (2nd ed.) Harper & Row, New York 1974.
Hunter, F.T.: The quantitation of mixtures of hemoglobin derivatives bij photoelectric spectrophotometry. Thomas, Springfield 1951. International Comittee for Standardization in Haematology, j
Recommendations for haemoglobinometry in human blood. j 30 Brit. J. Haemat. 13, 71-75 (1967). j van Kampen, E.J. en Zijlstra, W.G.: Standardization of hemoglobinometry. II. The hemoglobincyanide method. Clin. Chim.
Acta 6, 538-544 (1961).
van Kampen, E.J. en Zijlstra, W.G.: In: Advances in Clinical 35 Chemistry, Vol. 8 p. 160 (Sobotka, H., Stewart, C.P., eds.), 7 91 5 Ö 0 9.......... ......“..................... ......“........"........
12 — ! Academic Press, New York 1965. ; I King, E.: Alkaline haematin method for haemoglobin determination, i ! Brit. Med. J. 2, 349-350 (1947).
I King, E.J., Gilchrist, M., Wootton, I.D.P., Donaldson, R., ! 5 Sisson, R.B., MacFarlane, R.G., Jope, J.M., O’Brien, J.R.P.,
Peterson, J.M., Strangeways, D.H.: Determination of haemoglobin, j j V. Precision of colorimetric methods. Lancet 2, 563-566 (1948). j King, E.J., Bartholomew, R.J., Geiser, M., Ventura, S., Wootton, ! I I.D.P., MacFarlane, R.G., Donaldson, R., Sisson, R.B.: 10 Determination of haemoglobin. VIII. Accuracy of methods applied j to abnormal bloods. Lancet 1, 1044-1045 (1951).
j Legowski, S. en v. Boroviczeny, K.G.: Exakte Hamoglobinbestimmung in der taglichen Praxis. Dtsch. Med. Wschr. 87, 1953-1960 (1962). Massmann, W.: Einige qualitative Kohlenoxydbestimmungen im Blut. -15 Dtsch. Med. Wschr. 79, 1140-1142 (1954).
Ponder, E.: Errors effecting the acid and the alkali hematin methods of determination hemoglobin. J.Biol.Chem. 144, 339-342 (1942). j
Rice, E.W.: Rapid determination of total hemoglobin as hemoglobin j 20 cyanide in blood containing carboxyhemoglobin. Clin. Chem. Acta 18; 89-91 (1967).
Richterich, R.: Klinische Chemie (3. Aufl.), Karger, Basel 1971. Rick, W.: Klinische Chemie und Mikroskopie (4. Aufl.) Springer, Berlin/Heidelberg/New York 1976.
25 Rodkey, F.L.: Kinetic aspects of cyanmethemoglobin formation from carboxyhemoglobin. Clin. Chem. 13, 2-5 (1967).
Scaife, J.F.: Stability of alkaline solutions of haematin.
Analyst 80, 562-565 (1955).
Spaander, J.: Die Verwertung von Blutuntersuchungen Strahlenschutz 30 i. Forschung und Praxis 4, 122-127 (1964).
Sunderman, F.W.: Status of chinical hemoglobinometry in the United States, Am.J.Clin.Pathol. 43, 9-15 (1965).
Sunderman, F.W., MacFate, R.P., MacFadyen, D.A., Stevenson, G.F., Copeland, G.E.: Symposium on clinical hemoglobinometry A.J.Clin.
35 Pathol. 23, 519-598 (1953).
_Iay_J..JDen Millér, J.D.M.: A source of error in the cyan- 7915009 13 -.......
* methemoglobin method of determination of hemoglobin concentration j in blood containing carbon monoxide. Am. J. Clin. Pathol, 43, i 265-271 (1965).
WU, H.: Studies of hemoglobin. I. The Advantage of alkaline 5 solutions for colorimetric determination of hemoglobin, J. Bio-chem. 2, 173-180 (1922).
Zijlstra, W.G. en van Kampen, E.J.: Standardization of hemo- globinoihetry. I. The extinction coefficient of hemoglobincyanide 540 at v = 540 m^u: · Clin. Chim, Acta 5, 719-726 (1960).
! 10 I ; j : I j i ; i i j j i ί j 7ΙΓ5Τ0Γ i

Claims (9)

1. Reagens voor de fotometrische bepaling van ; het hemoglobine-gehalte van bloed, dat bij menging met het bloedmonster een karakteristieke verkleuring geeft, met het kenmerk, | 5 dat het reagens omvat een waterige alkalische oplossing, waar- | aan een in water oplosbaar, niet-ionisch detergens is toegevoegd, I waardoor alle (in het bloed voorkomende) hemoglobine-derivaten en ί heem-derivaten in een uniform eindprodukt met een uitgesproken absorptie-maximum in het zichtbare traject van het spectrum wor-| 10 den omgezet.
2. Reagens volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het absorptie-maximum bij ongeveer 575 nm ligt.
3. Reagens volgens conclusies 1 of 2, met het kenmerk, dat de alkalische reactie-oplossing een 0,05-0,5 molaire 15 natron- of kaliloog is, waaraan 0,5-10 gew.% detergens is toegevoegd.
4. Reagens volgens conclusies 1-3, met het ken- j merk, dat het detergens een polyethyleenglycol-p-alkylfenylether | met de algemene formule H-(0-CH -CH~) -0-^^ -R is, waarbij j 20 7 = x = 12 en R een alkylrest van het type methyl, ethyl, propyl, ; «ί· I butyl, pentyl, hexyl, heptyl, octyl, 'nonyl, decyl, undecyl en dodecyl voorsteelt, of een polyethyleenglycol-lauryl-, -cetyl-, ! -oleyl- of -stearylether is. i
5. Reagens volgens conclusie 4, met het kenmerk, ί 25 dat het detergens decaethyleenglycol-p-t-octylfenylether is. j
6. Werkwijze ter bepaling van het hemoglobine- j gehalte van een bloedmonster onder toepassing van een reagens vol-; gens conclusies 1-5, waarbij het monster door toevoegen van een alkalische waterige oplossing wordt gehemolyseerd en het alkalische 30 hematine fotometrisch wordt bepaald, met het kenmerk, dat aan de j J ' " 1,1 - T— j waterige alkalische oplossing een in water oplosbaar, niet-ionisch; detergens wordt toegevoegd, waardoor alle (in het bloed voorkomende) hemoglobine-derivaten en heem-derivaten in een uniform eindprodukt met een uitgesproken absorptie-maximum in het zicht-_35 bare traject van het spectrum worden omgezet, waarbij de foto-----------------metrische-meting wordt- ui t-gevoerd .------------------------------ 7915009 ' ....... 15 -. i ψ >
7. Werkwijze volgens conclusie 6, met het kenmerk,1 dat door de reactie een alkalisch hematine wordt gevormd, dat een absorptie-maximum bij een golflengte van ongeveer 575 nm vertoont.
8. Werkwijze volgens conclusies 6 of 7, met het kenmerk, dat als alkalische oplossing van 0,05 tot 0,5 molaire natron- of kaliloog wordt gebruikt, waaraan 0,5 - 10 gew.% deter- I gens zijn toegevoegd.
9. Werkwijze volgens conclusies 6-8, met het 10 kenmerk, dat als detergens een polyethyleenglycol-p-alkylfenyl- ether, polyethyleenglycollaurylether, polyethyleenglycol-cetylether, polyethyleenglycololeylether of polyethyleenglycolstearylether wordt gebruikt. i I j i l I ! i i | ! ί 79IY0T1 .........
NL7915009A 1978-01-25 1979-01-19 Werkwijze en reagens ter bepaling van het hemoglobine- -gehalte van bloed. NL7915009A (nl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2803109 1978-01-25
DE2803109A DE2803109C2 (de) 1978-01-25 1978-01-25 Verfahren und Reagenz zur Bestimmung des Hämoglobingehaltes des Blutes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NL7915009A true NL7915009A (nl) 1980-06-30

Family

ID=6030310

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NL7915009A NL7915009A (nl) 1978-01-25 1979-01-19 Werkwijze en reagens ter bepaling van het hemoglobine- -gehalte van bloed.

Country Status (13)

Country Link
US (1) US4341527A (nl)
EP (1) EP0003340A3 (nl)
JP (1) JPS54148595A (nl)
AT (1) AT367204B (nl)
BE (1) BE47T1 (nl)
CH (1) CH646525A5 (nl)
DE (1) DE2803109C2 (nl)
ES (1) ES477103A1 (nl)
FR (1) FR2482729B1 (nl)
GB (1) GB2052056B (nl)
IT (1) IT1148290B (nl)
NL (1) NL7915009A (nl)
SE (1) SE445681B (nl)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4880749A (en) * 1984-06-05 1989-11-14 Eastman Kodak Company Analytical element and its use in a whole blood hemoglobin assay
JPS61148369A (ja) * 1984-12-06 1986-07-07 テクニコン・インストウルメンツ・コーポレイシヨン シアニドを含まないヘモグロビン試薬
US4772561A (en) * 1985-12-23 1988-09-20 Miles Inc. Test device and method of determining concentration of a sample component
US4800167A (en) * 1987-04-10 1989-01-24 Abbott Laboratories Reagent and process for the determination of hemoglobin in blood
EP0316453B1 (en) * 1987-05-29 1996-03-27 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Method for classifying leukocytes and reagents
JP2619900B2 (ja) * 1988-01-27 1997-06-11 東亜医用電子株式会社 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および方法
EP0729031A1 (en) * 1995-02-24 1996-08-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Set of reagents determining the content of total haemoglobin
DE19835243A1 (de) * 1998-08-04 2000-02-24 Lmb Technologie Gmbh Vorrichtung und Verfahren zum Bestimmen eines Hämoglobinwerts von Blut
DE102005060993A1 (de) * 2005-12-20 2007-06-28 Medisynthana Diagnostics Gmbh & Co. Kg Konversionsreagenz sowie Verfahren und Kit zur Bestimmung des Hämoglobins
US7560283B2 (en) * 2006-01-27 2009-07-14 Bio-Rad Laboratories, Inc. Storage-stable cellular whole blood composition containing elevated amounts of D-dimer
US9826736B2 (en) * 2010-08-12 2017-11-28 Professional Disposables International, Inc. Quaternary ammonium caprylyl glycol disinfectant wipes
CN112198265B (zh) * 2020-03-16 2023-07-14 广州金域医学检验中心有限公司 用于同时检测血液类样本中多种类固醇激素的预处理方法、检测方法及试剂盒
CN113008880A (zh) * 2021-02-26 2021-06-22 必为(上海)医疗器械有限公司 一种医疗器械残留血检测套装及其使用方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1422881A (fr) * 1963-08-16 1966-01-03 Warner Lambert Pharmaceutical Composition auxiliaire de diagnostic utilisable pour déterminer le cholestérol
BE790338A (fr) * 1971-10-20 1973-04-20 Mallinckrodt Chemical Works Compositions reactives de recherche sur des echantillons biologiques, et leurs procedes de preparation et d'utilisation
US3847545A (en) * 1972-05-18 1974-11-12 Baxter Laboratories Inc Diagnostic test for sickle-cell
US3964865A (en) * 1975-01-30 1976-06-22 Sigma Chemical Company Lyophilized human hemoglobin standard for colorimetric determination of total hemoglobin
US4011045A (en) * 1975-02-14 1977-03-08 Bonderman Dean P Turbidity reduction in triglyceride standards
US4050898A (en) * 1976-04-26 1977-09-27 Eastman Kodak Company Integral analytical element
ATE390T1 (de) * 1978-11-01 1981-11-15 Contraves Ag Verfahren zur verminderung der stoerung einer photometrischen messung durch lichtstreuung in einer zu messenden suspension und reagenz zur durchfuehrung des verfahrens.
DE2850603A1 (de) * 1978-11-22 1980-06-19 Merck Patent Gmbh Haemolysierloesung und verfahren zur haemolyse von blut

Also Published As

Publication number Publication date
ATA43279A (de) 1981-10-15
CH646525A5 (de) 1984-11-30
ES477103A1 (es) 1979-07-01
IT8086226A0 (it) 1980-04-01
FR2482729B1 (fr) 1987-05-07
IT1148290B (it) 1986-11-26
AT367204B (de) 1982-06-11
FR2482729A1 (fr) 1981-11-20
US4341527A (en) 1982-07-27
EP0003340A3 (de) 1979-09-05
SE445681B (sv) 1986-07-07
DE2803109C2 (de) 1987-02-26
JPS6342230B2 (nl) 1988-08-22
BE47T1 (fr) 1980-03-21
GB2052056A (en) 1981-01-21
DE2803109A1 (de) 1979-07-26
EP0003340A2 (de) 1979-08-08
JPS54148595A (en) 1979-11-20
GB2052056B (en) 1983-01-12
SE8002469L (sv) 1980-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Van Kampen et al. Spectrophotometry of hemoglobin and hemoglobin derivatives
Van Kampen et al. Standardization of hemoglobinometry II. The hemiglobincyanide method
Lubran The measurement of total serum proteins by the Biuret method
Martinen Improved micro-method for determination of serum bilirubin
US4642295A (en) Methods of determining fructosamine levels in blood samples
Zwart et al. Multicomponent analysis of hemoglobin derivatives with reversed-optics spectrophotometer.
US3964865A (en) Lyophilized human hemoglobin standard for colorimetric determination of total hemoglobin
JPH06258321A (ja) キャリブレーターの正確な希釈度を確認するためのタンパク質−色素コンジュゲート体
JP2982891B2 (ja) 標準物質およびその調製方法並びにそれを用いた品質管理方法
CA2720854C (en) Hemoglobin based bilirubin reference material
US4341527A (en) Process and reagent for determination of the hemoglobin content of blood
WO1993008684A1 (en) Process and device for measuring magnesium in biological fluids and method of preparing the device
EP0517914A1 (en) Reagent and methods for calcium determination.
US20040214243A1 (en) Differential determination of hemoglobins
Hertz et al. Direct spectrometric determination of the concentration of bilirubins in serum
Van Lente et al. Evaluation of a nephelometric assay for haptoglobin and its clinical usefulness.
Blumberg et al. Hemoglobin determined in 15 microL of whole blood by" front-face" fluorometry.
US5312760A (en) Fructosamine reagent and calibrator system
Ressler et al. Improved method for determining serum protein concentrations in the far ultraviolet.
JPS62137544A (ja) 試験片上の呈色領域の測光的評価法
US3477818A (en) Method for the determination of the bilirubin content of body liquids
JPS6118982B2 (nl)
KR102317339B1 (ko) 헤모글로빈 측정 시약 조성물 및 이를 이용한 헤모글로빈 측정방법
Morin A single nonaqueous diazo reagent for the rapid determination of bilirubin in serum without lipemic interference
JPH02122267A (ja) ヘモグロビン定量試薬キット及びそれを用いるヘモグロビン定量方法

Legal Events

Date Code Title Description
A1A A request for search or an international-type search has been filed
BB A search report has been drawn up
A85 Still pending on 85-01-01
BC A request for examination has been filed
BV The patent application has lapsed