NO117312B

NO117312B -

Info

Publication number: NO117312B
Application number: NO16955667A
Authority: NO
Inventors: H Lorenzen
Original assignee: Bbc Ag Sw
Priority date: 1966-09-01
Filing date: 1967-08-30
Publication date: 1969-07-28
Also published as: AT270794B; CH458509A; DE1538735B2; DE1538735A1

Description

Fremgangsmåte for fremstilling av pregnan- eller allopregnan-estere som har ioniserte grupper i 3- og/eller 21-stillingen.

Foreliggende oppfinnelse vedrører fremgangsmåte til fremstilling av visse nye steroide forbindelser som er inaktive som hormon og nyttige som sentralnervesystemdepressive midler, særlig som anestetiske midler.

Forbindelsene som fremstilles ifølge oppfinnelsen er de første steroider av prak-tisk brukbarhet som sentralnervesystemdepressive midler, og de er særlig brukbare som anestetiske midler, og de opp-viser fordeler fremfor tidligere kjente anestetika. Foreliggende oppfinnelse beror på den uventete oppdagelse at sentralnervesystemdepressive midler kan fremstilles ved å gjøre visse steroider som er inaktive som hormon, vannoppløselige ved tilkobling av en ionisert gruppe av en spesiell art. Det er visse variasjoner i virkningen av disse forbindelser, beroende på den in-dividuelle ioniserte gruppe, og da det kre-ves vannoppløselighet for deres anvendelse er den farmakologiske aktivitet av molekylet primært en funksjon av den steroide kjerne, og den ioniserte gruppe tjener i det vesentlige til å gjøre molekylet vann-oppløselig. Foreliggende oppfinnelse omfatter derfor en fremgangsmåte for fremstilling av sentralnervesystemdepressiv forbindelse, som er et steroid og som er gjort vannoppløselig ved tilkobling av en ionisert gruppe. Tilkobling av denne ioniserte gruppe ved 3- og/eller 21-stilling i det steroide molekyl er særlig nyttig.

Særlig av verdi er forbindelser som har følgende generelle formel

hvor D' og E' har den nedenfor definerte betydning. Denne generelle formel omfatter både forbindelser av pregnanserien (dvs. hvor H i 5-stillingen i den ovennevnte formel representeres som «-H») og forbindelser av de allopregnane seriene (dvs. hvor H i 5-stillingen i den ovennevnte formel representeres som «--H»),

D' kan være en enverdig gruppe og en toverdig gruppe. Når D' er enverdig, be-finner det seg naturligvis også et vann-stoffatom i 3-stilling, men når D' er en toverdig gruppe, er det ikke noe vannstoff.

D' og/eller E' er en polar gruppe, som

er et salt av en sur ester av en polykarbok-sylsyre eller et salt av en aminosyreester.

I foreliggende beskrivelse skal uttrykket «ionisert esters, tjene til å beskrive denne gruppetype. Det er to arter av «ioniserte estere», og hver av disse defineres i det følgende.

Den første art av «ionisert ester har formelen

hvor -L-er valgt fra gruppen bestående av -(CH2)n-, -0-(CH2)n- og - NH -

(CH2)n-, idet n er et tall fra 1 til 6 og M+ er en kation, utvalgt fra klassen bestående av Na+, K+, NH4+ og derivater av ammoniumionet, i hvilke substituentene er valgt

fra alkyl, hydroksyalkyl, acyloksyalkyl, aminoalkyl, aryl og arakyl-grupper, som inneholder opptil 10 kullstoffatomer i hver gruppe. Z-^ er en farmakologisk aksepterbar anion. De følgende formler skal tjene

til å vise en del av de forskjellige derivater av ammoniumionet.

N+ H3 CH3

N+ H2 (CH2H5)2

N+ HCH3 (C2H5)9

N+ (CH3)4

N+ H (CH3)2 CH2 - C(iH,

N+ H (C2H5)2 CH2 - CH^OH

N+ H (C2H5)2 CH2 - CH2 - NH,

Den annen art av «ionisert ester» har formelen

hvor -L- er valgt fra gruppen bestående av -(CH2)„-, -0-(CH2)„- og-NH-(CH2)n-, idet n er et helt tall fra 1 til 6, Y+ er en

ammoniumforbindelse, som er substituert med grupper valgt fra vannstoff, alkyl, hydroksyalkyl, aminoalkyl, aryl og aralkyl-

grupper, som inneholder opptil 10 kullstoffatomer i hver gruppe og Z^ er en «farmakologisk aksepterbar anion». Det følgende viser en del av de forskjellige formler for -Y+.

-N+ H3

-N+ H (CH3)2

-<N+> (C2H5)3

-N+ (CH3)2CH2-C6HS

-N+ (C2H5)2 CH2 - CH2OH

- N+ (CH3)2 CH2 - CH2 - NH.,

Uttrykket «farmakologisk aksepterbar anion» har en bestemt mening for fagfolk på området. Det er definert som en ikke giftig anion av en hvilken som helst av de enkle syrer som vanligvis anvendes i far-makologien for å nøytralisere basiske me-disinske midler, når saltene herav skal anvendes terapeutisk. Disse syrer omfatter f. eks. klorvannstoffsyre, bromvannstoff-syre, jodvannstoffsyre, svovelsyre, ravsyre maleinsyre. Den farmakologiske aktivitet av molekylet er primært en funksjon av kationet, idet anionet i det vesentlige tjener til å bevirke elektrisk nøytralitet.

Som nevnt ovenfor er i det minste en ionisert estergruppe alltid i molekylet. Enten D' eller E' kan være en annen gruppe. E' kan være hydroksyl eller vannstoff. D' kan være en ketogruppe, en hydroksylgruppe eller et oksim. Hydroksylgruppen ved D' eller E' kan være forestret med ikke ioniserte estergrupper (dvs. vanlige estergrupper, som acetat eller propionat av annen art enn ioniserte estergrupper), som inneholder fra 1—8 kullstoffatomer i den til-satte halvdel. Oksimgruppen ved D' kan også være forestret med vanlige (ikke ioniserte estergrupper), eller den kan være forestret med en ionisert estergruppe. Dette kan oppsummeres ved å si at D utvelges fra gruppen bestående av:

a) ioniserte estergrupper,

b) hydroksylgrupper og ikke ioniserte estere herav, som inneholder fra

1—8 kullstoffatomer i den tilkoblede del,

c) oksimgruppe, ikke ioniserte estere herav, som inneholder fra 1—8

kullstoffatomer i den tilkoblede del av ioniserte estere herav, og

d) ketogruppe,

og E er utvalgt fra gruppen bestående av

a) ioniserte estergrupper,

b) hydroksylgruppe og ikke ioniserte estere herav, som inneholder fra

1—8 kullstoffatomer i den tilkoblede del, og

c) hydrogen,

med i det minste en ionisert estergruppe

som alltid er tilstede i molekylet.

Den ioniserte estergruppe, hvorav i det minste en alltid er tilstede i hver forbindelse, gjør forbindelsen vannoppløselig på grunn av dens ioniske natur. Som det fremgår av det foran anførte er denne gruppe til stede på én av tre måter: 1. Den er tilknyttet kullstoff atomet i 21-stilling 2. Den er tilknyttet kullstoffatomet i 3-stilling, 3. Den er tilknyttet en oksimgruppe, som er tilknyttet kullstoffatomet i 3-stilling.

Undertiden er to ioniserte estergrupper, som kan være de samme eller forskjellige, til stede, og de mulige kombinasjo-ner er her (1) og (2), og (1) og (3), som ovenfor angitt.

Det har nu uventet vist seg at disse nye forbindelser er i besittelse av egenskaper som gjør dem meget verdifulle. De er sentralnervesystemdepressive midler, og de er inaktive som hormon. De er nyttige som anestetiske, antikonvulsive, berolig-gende, analgetiske og hypnotiske midler. Deres vannoppløselighet er slik at de kan administreres intravenøst i steril vandig oppløsning. De er også skikket for administrering på annen måte, som f. eks. oralt, subkutant og intramuskulært.

Foreliggende oppfinnelse omfatter derfor en fremgangsmåte for fremstilling av vannoppløselige sentralnervesystemdepressive midler som er inaktive som hormon og fremgangsmåten går ut på at det inn-føres en ionisert estergruppe i 3- og/eller 21-stilling i et steroid som har den generelle kjerne som fremgår av formel I..

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen fremstilles f. eks. fra ikke ioniserte estere, som har formelen

hvor X er -Cl, -OCH2CH2Cl, NHCH2CH2C1, -CH2C1 og -CH2CH2COOH. Disse ikke ioniserte estere, som er nye og verdifulle mellomprodukter, fremstilles selv ved behandling av 21-hydroksypregnan-3, 20-dion eller 21-hydroksyallopregnan-3, 20-dion med de respektive acylerende midler fosgen, (3-kloretylklorformat, (3-kloretylisocy-anat, kloracetylklorid og ravsyreanhydrid, ved de fremgangsmåter som er anført i de nedenfor nevnte eksempler. Forbindelsene 21-hydroksypregnan-3, 20-dion og 21 hydroksyallopregnan-3, 20-dion fremstilles ved hydrering av desoksykortikosteron, ved de fremgangsmåter som er anført i ek-semplene. Disse sistnevnte forbindelser er videre mellomprodukter, og er meget verdifulle, fordi de på grunn av sine fri hydroksylgrupper i 21-stilling er de foretrukne mellomprodukter for fremstilling av sure estere med ravsyreanhydrid. De fri alko-holer er derfor i besittelse av uventede fordeler like overfor forbindelser som er forestret i 21-stillingen som acetater, fordi de i motsetning til acetatene lett kan anvendes for fremstilling av sentralnervesystemdepressive midler.

Filtrering gjennom et Seitz-filter er en hensiktsmessig fremgangsmåte for steril-lisering av en oppløsning av en forbindelse ifølge oppfinnelsen. Forbindelsene kan også anvendes i vandig oppløsning, som inneholder andre oppløselige stoffer, f. eks. tilstrekkelig salt eller glykose til å gjøre den isotonisk. Forbindelsene kan kombineres med en stor variasjon av farmasøytisk brukbare midler, og valget av disse vil bero på den ønskede administreringsmåte. F. eks. kan forbindelsene administreres oralt i form av tabletter, som inneholder tablettdannende materiale, som stivelse eller forbindelsene administreres som en drikk eller suspensjon i et bæremiddel.

Fremgangsmåten for fremstilling av disse forbindelser skal klargjøres i de nedenfor anførte eksempler.

Det opptrer naturligvis variasjoner med hensyn til virkningene av forbindelsene ifølge oppfinnelsen alt etter de spe-sielle substituenter. Hver har imidlertid de tre felles egenskaper at de er inaktive som hormon, aktive som sentralnervesystemdepressive midler og at de er vannoppløse-lige.

Eksempel I. 21 - hydroksypregnan- 3, 20- dionhemisuccinat.

En oppløsning av 14 g 21-hydroksypregnan-3-, 20-dion og 14 b rekrystallisert ravsyreanhydrid i 140 ml tørr pyridin lot man henstå ved romtemperatur i 18 timer og derpå avkjølt i et isbad og helt i en fin strøm med 1,5 1 isvann. Oversky-tende pyridin ble nøytralisert med 3N klorvannstoffsyre og oppløsningen ytterligere fortynnet med 2 liter isvann. Det utfelte produkt ble filtrert, vasket med vann og tørket i vakuum ved 50° C, og man fikk 18 g av et fast stoff med smeltepunkt

192—195° C. Rekrystallisering av en liten prøve ga et analytisk rent materiale med smeltepunkt 200° C.

Et N,N'-tetrametyl-heksametylendi-aminsalt av hemisuccinat ble fremstilt som en klar oppløsning ved tilsetning av 200 mg hemisuccinat til 188 mg av diaminet og tilsetningen av blandingen til 10 ml vann. Ved lyofilisering fikk man saltet som et hvitt fast stoff.

Dimetylaminoetanol-, dietylaminoeta-nol-, dimetylbenzylamin-, trimetylamin-, prokain- og trietylaminsaltene av 21-hydroksypregnan-3, 20- dionhemisuccinat ble fremstilt ved lignende fremgangsmåte, nemlig tilsetning av en molekvivalent av succinatet til en molekvivalent av aminet og fortynning av den resulterende klare farveløse oppløsning til 50 mg med destil-lert vann. Alternativt ble klare, farveløse oppløsninger fremstilt ved anvendelse av molekvivalenter av natriumsaltet og amin-hydrokloridene av 21-hydroksypregnan-3, 20-dion.

Eksempel II.

21- hydroksypregnan- 3, 20- dion- natriumhemisuccinat.

En tørr blanding av 10 g av hemisuccinatet og 1.867 g natriumbikarbonat ble 200 ml vann tilsatt i små porsjoner under svak opphetning og evakuering. Man fikk en klar i det vesentligste farveløs oppløs-ning av natriumsaltet. Oppløsningen ble sterilisert ved filtrering gjennom et Seitz-filter etter tilsetning av Super-cel, og filtratet ble derpå lyofilisert i høyt vakuum. Det dunaktige hvite natriumsalt, 9,65 g, ble identifisert ved analyse og ved ultrafiolett spektrum — max 280 = 93,2.

Det vil sees at fremstillingen av 21-hydroksypregnan-3, 20-dion-natriumhemisuccinat fra desoksykortikosteron omfatter hydrering av den steroide kjerne i desoksykortikosteron, og innføringen av en ionisert estergruppe ved fremstilling av hemiravsyreesteren, som i eksempel II og ved å la det reagere med natriumbikarbonat, som i den innledende del av dette eksempel. Rekkefølgen av trinnene kan end-res, dvs. det er mulig å utføre hydrerings-trinnet etter at desoksykortikosteron er blitt omdannet til desoksykortikosteron-hemiravsyreester, eller etter at det er blitt omdannet til ionisert natriumhemiravsyre-ester. Generelt kan de nye ioniserte estere ifølge oppfinnelsen fremstilles ved å om-danne en ikke ionisert ester av et steroid til en ionisert ester av et slikt steroid, og hvis utgangsmaterialet er umettet, hydre-res utgangssteroidet, hvorved det fåes en pregnan- eller allopregnankjerne, enten før eller etter at den ioniserte estergruppe er innført.

Eksempel III.

21- hydroksypregnan- 3, 20- dion- dimetyl-aminoacetatmetoklorid.

Til en oppløsning av 21-hydroksypregnan-3, 20-dion i pyridin ble tilsatt to molekvivalenter av kloracetylklorid. Etter 12 timer ble kloracetatet isolert ved utfelning med et stort volum av ansyret isvann. Det filtrerte og tørkete kloracetat lot man reagere i dimetylformamidoppløsning med litt mer enn et mol trimetylamin. Omhyggelig fortynning av reaksjonsmediet resulterte i utfelning av det ønskete metoklorid, og dette ble identifisert ved analyse og dets lettoppløselighet i vann.

Eksempel IV: 21 - hydroksypregnan- 3, 20- dion- hemisuccinat- 3- oksim.

Til en oppløsning av 860 g 21-hydroksypregnan-3, 20-dion-hemisuccinat i 10 ml absolutt alkohol, som inneholdt 2 ml pyridin, ble tilsatt 140 mg hydroksylamin. Den klare gule reaksjonsblanding ble opphetet under tilbakeløp under kvelstoff i 2 timer og derpå fordampet i vakuum til et hvitt glassaktig produkt, som krystalliserte spon-tant ved knusning med 100 ml isvann og 40 ml metanol. Ved filtrering fikk man i det vesentligste rent oksim som veiet 828 mg og hadde et smeltepunkt på 105—110°C under spaltning. Omkrystallisering fra iso-propanol gav et analytisk rent produkt med smeltepunkt 105—109° C under spaltning. Analyse: Beregnet for: N, 3,13 pst. Funnet N, 3,71 pst.

Eksempel V.

3a, 21- hydroksypregnan- 20- on.

En oppløsning av 2 g 21-hydroksypregnan-3, 20-dion i 85 ml absolutt etanol ble omrørt i nærvær av 3 g W-2 Raneynikkel-katalysator i en atmosfære av vannstoff. Etter 20 timers forløp var noe mere enn en molekvivalent vannstoff absorbert, og vannstoffopptagelsen opphørte. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering på super-cel, og produktet ble erholdt ved fordampning av filtratet i vakuum. Produktet var karakterisert ved opptreden av intens hydroksyl-absorbsjon og karbonylabsorbsjon svarende til bare 1 ketonfunksjon i infra-rødt.

Eksempel VI.

3- a, 21 - dihydroksypregnan- 20- on- 21 -

hemisuccinat.

1 g 3a,21-dihydroksypregnan-20-on i 10 ml pyridin ble i 4 timer omsatt med 1,2

molekvivalenter ravsyreanhydrid. Produktet, som ble isolert ved fortynning og ansyring av reaksjonsblandingen, viste seg å være 21-monohemisuccinatet ved dets lett-oppløselighet i fortynnet bikarbonatopp-løsning og ved dets oksydasjon til 21-hydroksypregnan-3, 20-dion.

Disuccinatet erholdtes ved reaksjon av 3,21-dihydroksypregnan-20-on med 5 molekvivalenter ravsyreanhydrid ved 801 C □ver natten.

Eksempel VII.

3a, 21- dihydroksypregnan- 20- on- 21 - acetat.

En oppløsning av 4,4 g pregnandion - 21-acetat og 300 ml absolutt etanol ble hydrert over 5,24 g W-2 Raneynikkelkataly-sator. Etter 20 timer var en molekvivalent vannstoff absorbert. Produktet ble isolert ved fjernelse av katalysatoren ved filtrering og fordampning av filtratet til et ut-bytte av 4,6 g, smp. 169—175° C. Omkrystallisering av det på produkt fra metanol ga en analytisk prøve av hydroksyacetat, smp. 190,2—194,6° C. Dette ble identifisert ved analyse og ved identifisering av acetat og 1 karbonylbånd i det infrarøde spektrum.

3-hemisuccinat ble fremstilt fra det ovenfor angitte hydroksyacetat i overskudd av ravsyreanhydrid ved oppvarmning i py-ridinoppløsning til 80° C i 12 timer. Produktet ble isolert ved fortynning og ansyring og oppsamlet ved ekstraksjon i eter og fordampning til tørrhet. Det rå hemisuccinat ble knust i eter for å gi et krystallinsk produkt, smp. 179—181° C, og det var oppløselig i fortynnet natriumbi-karbonatoppløsning.

3-dietylaminoacetatetokloridet ble fremstilt fra 3-a-hydroksy-21-acetat ved dannelse av 3a-kloracetatet med kloroace-tylklorid i pyridin, etterfulgt av alkylering av det krystallinske kloracetat med trietylamin. Produktet ble identifisert ved analyse og ved dets oppløselighet i vann.

Eksempel VIII.

3, 20- pregnandion.

En oppløsning av 50 g progesteron i 950 ml etanol ble rystet voldsomt under en atmosfære av vannstoff i nærvær av 5 g 5 pst. palladium-på-kullstoffkatalysa-tor, og tilsetning av et slam bestående av 4 g kaliumhydroksyd i 80 ml vann. På min-dre enn 2 timer var omtrent en molekvivalent vannstoff absorbert og vannstoffopptagelsen opphørte. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering og filtratet ansyret med eddiksyre og fordampet i vakuum til et lite volum. Fortynning av utfellingen med 1 liter vann og filtrering ga 53 g av et nesten rent produkt med sm.p. 112— 116° C. Den rå utfelling ble oppløst i 250 ml aceton og krystalliseringen stimulert ved omhyggelig tilsetning av varmt vann. Det rene produkt ble erholdt i tre porsjoner, hver bestående av 34 g og med smp. 119—120° C og uten noen ultrafiolett ab-sorpsjon ved 240 my.

Eksempel IX.

3a- hydroksypregnan- 20- on.

10 g pregnandion ble oppløst i 50 ml etanol og hydrert over 5 g W-2 Raneynik-kelkatalysator. Produktet som man fikk etter filtrering og fordampning av filtratet til tørrhet, andro til 8,3 g, smp. 119—126°C. 7,2 g av det rå produkt ble omkrystallisert fra aceton-vann og metanol, for å gi en analytisk ren prøve, smp. 140,8—142,0° C, (a) D -f- 98,3°. Bare 1 karbonylbånd kunne iakttas i det infrarøde spektrum.

Eksempel X.

Pregnan- 3a- ol- 20- 20- on- 3- hemisuccinat.

En oppløsning av 500 mg pregnanolon og 500 mg rekrystallisert ravsyreanhydrid i 5 ml tørr pyridin ble behandlet under til-bakeløp under kvelstoff i 4 timer. Den rød-aktige oppløsning ble helt i isvann og nøy-tralisert med 3N klorvannstoffsyre. Det utfelte produkt ble fraskilt ved filtrering som et hvitt fast stoff og veiet 571 mg, smp. 203,4—208° C. Produktet var lettopp-løselig i fortynnet natriumbikarbonatopp-løsning.

Eksempel XI.

Pregnan- 3- oksim.

En oppløsning av 2,56 g pregnandion i 40 ml absolutt etanol, som inneholdt 4 ml

pyridin og 561 mg hydroksylaminhydro-klorid ble behandlet under tilbakeløp under kvelstoff i 2 timer. Fordampning i vakuum ga et hvitt, fast stoff, som ble knust med vann og tørket slik at man fikk 2,667 g monoksim, smp. 160,4—162,8° C. Analyse: Beregnet for C21H33OyN; 4,22 pst. N, funnet 4,48 pst. N."

3-hemisuccinatet ble fremstilt ved å oppvarme 1 g av oksimet og 1 g ravsyreanhydrid i 10 ml pyridin til 80° C i 12 timer. Produktet ble isolert ved fortynning med vann og ansyring.

Eksempel XII. 21 - hydroksypregnan- 3, 20- dion- if- dimetyl-aminoetylkarbonat.

En oppløsning av 1 g 21-hydroksypregnan-3, 20-dion i 5 ml benzen ble tilsatt dråpevis til en avkjølt, omrørt opp-løsning av 0,5 g fosgen i 5 ml benzen, som inneholdt 1 ml pyridin. Oppløsningen ble omrørt i 2 timer ved 25° C og fordampet til tørrhet i vakuum. Residuet var 21-hydroksypregnan-3, 20-dionklorformat. Det ble behandlet med 2 ml p-dimet<y>lamino-etanol og fikk henstå i 18 timer. Fortynning med vandig kaliumkarbonat utfelte (3-dimetylaminoetylkarbonatet, som ble ekstrahert med kloroform og etter fordampning av kloroformen, ble det omkrystallisert fra metanol. Forbindelsen dannet lett salter og kvaternære ammoniumforbindelser. F. eks. ble det omdannet til hydrobromidet med eterisk bromvannstoff og til metijodidet med metyljodid.

Eksempel XIII. 21 - hydroksypregnan- 3, 20- dion-^- dietylaminoetylkarbamat. 1 g 21-hydroksypregnan-3, 20-dion-kloroformat, hvis fremstilling er vist i den første halvdel av eksempel XII, ble behandlet med 2 ml (3-dietylaminoetylamin og fikk henstå i 18 timer. Fortynning med vandig kaliumkarbonat utfelte (3-dietyl-aminoetylkarbamatet, som ble ekstrahert ved kloroform, og etter fordampning av kloroformen omkrystallisert fra metanol. Forbindelsen dannet lett salter og kvaternære ammoniumforbindelser. F. eks. ble den omdannet til hydrobromidet med eterisk bromvannstoff og til metiodid med metyljodid.

Eksempel XIV.

Alternativ fremstilling av 21- hydroksypregnan- 3, 20- dion-^- dimetylaminoetyl-karbonat.

Skjønt den foretrukne fremgangsmåte for fremstilling av denne forbindelse er den som er anført i eksempel XII, er også følgende fremgangsmåte nyttig. Et halvt gram p-kloroetylklorformat ble tilsatt til en omrørt avkjølt oppløsning av 1 g 21-hydroksypregnan-3, 20-dion i 5 ml pyridin, og oppløsningen fikk henstå i 24 timer.. Den ble derpå omrørt i 20 ml iskold 3N svovelsyre og ekstrahert tre ganger med 15 ml kloroform. Etter vaskning med IN svovelsyre, vann og natriumbikarbonat-oppløsning ble kloroformekstraktet tør-ket over vannfritt natriumsulfat og fordampet til tørrhet i vakuum. Knusning av residuet med eter ga det krystallinske 21-hydroksypregnan-3, 20-dion-|3-kloroetyl-karbonat, som ble omdannet til dietylami-noetylkarbonatet ved behandling under til-bakeløp med en alkoholisk oppløsning av dietylamin i 2 timer. Blandingen ble av-kjølt, behandlet med mettet vandig kaliumkarbonat og ekstrahert med kloroform, som derpå ble fordampet for å gi produktet.

Eksempel XV.

Alternativ fremstilling av 21- hydroksypreg-nan- 3, 20- dion, fi- dietylaminoetylkarbamat.

Skjønt den i eksempel XIII er den foretrukne måte, skal det angis en annen fremgangsmåte for fremstilling av denne forbindelse. 1 g 21-hydroksypregnan-3, 20-dion ble oppløst i 5 ml dimetylformamid og behandlet med 0,6 g (5-kloroetylisocya-nat. Etter henstand i 18 timer ble blandingen helt i vann, og det utfelte produkt filtrert og vasket med vann. Produktet var 21-hydroksypregnan-3, 20-dion-(3-klor-etylkarbamat, som ble omdannet til dietylaminoetylkarbamat ved behandling under tilbakeløp med en alkoholoppløsning av dietylamin i 2 timer. Blandingen ble av-kjølt, behandlet med mettet vandig kaliumkarbonat og ekstrahert med kloroform, som derpå ble fordampet for å gi produktet.

Eksempel XVI.

Reaksjon av kloroformat med hydroksysyrer.

1 g 21-hydroksypregnan-3, 20-dionklorformat, fremstilt som vist i den første halvdel av eksempel XII, ble tilsatt til 5 ml pyridin, som inneholdt 0,5 g glykolsyre, og blandingen lot man henstå i 18 timer. Den ble derpå irørt i 20 ml iskold 3N svovelsyre og ekstahert tre ganger med 15 ml kloroform. Etter vaskning med IN svovelsyre og med vann ble kloroformekstraktet tørket over vannfritt natriumsulfat og fordampet til tørrhet i vakuum. Den resulterende forbindelse hadde formelen

hvor R står for et 3,20-pregnandion-21-yl-radikal. Behandling av denne forbindelse med fortynnet natriumbikarbonat ga et tilsvarende natriumsalt.

Disse reaksjoner ble også utført på en analog måte og med lignende resultat under anvendelse av andre hydroksysyrer.

Eksempel XVII.

Reaksjon av klorformat med aminosyrer.

Eksempel XVI ble gjentatt med unntagelse av et glycin ble anvendt istedenfor glykolsyre. Den resulterende forbindelse hadde formelen

hvor R står for 21-hydroksypregnan-3, 20-dion minus dets 21-OH-gruppe Behandling av denne forbindelse med fortynnet natriumbikarbonat gav det tilsvarende natriumsalt.

Disse reaksjoner ble også utført på analog måte og med lignende resultater under anvendelse av andre aminosyrer.

Eksempel XVIII. 21 - hydroksypregnan- 3, 20- dion- dietylami-noacetathydroklorid.

Til en oppløsning av 2 g av det tør-kete kloracetat av 21-hydroksypregnandion (eksempel III) i 20 ml tørr pyridin ble tilsatt i 1 ml dietylamin. Etter henstand over natten ved 60° C ble oppløsningen helt i vann, nøytralisert med natriumbikarbonat og ekstrahert med metylenklorid. Fordampning av ekstraktet ga 21-hydroksypregnandion-dietylaminoacetat som den ikke krystallinske fri base. Når basen ble oppløst i eterpetroleter og behandlet med klorvannstoffgass, utfeltes det krystallinske hydroklorid som et hvitt, fast stoff. Den angitte struktur ble bekreftet ved den lette oppløselighet av produktet i vann.

Eksempel XIX. 21 - hydroksypregnan- 3, 20- dion- piperadino-acetat- hydroklorid.

Fremgangsmåten etter eksempel XVIII ble gjentatt med unntagelse av at piperi-din erstattet dietylaminet.

Eksempel XX.

21- hydroksypregnan- 3- 20- dion- dietyl-aminoacetat- betobromid.

Den fri base (eksempel XVIII). 21-hydroksypregnan-3, 20-dion-dietylamino-acetat ble behandlet med overskudd av metylbromid ved romtemperatur i dim-etylformamidoppløsning. Fortynning av reaksjonsblandingen resulterte i utfelning av metobromidet.

Eksempel XXI.

21 - acetoksyallopregnan- 3, 20- dion.

10 g 21-acetoksy-A 5-pregnan-3 (3-ol-20-on ble oppløst i 50 ml redestillert dioksan og hydrert ved et trykk av 0,7 kg pr. cm2 i nærvær av 1 g 5 pst. palladium på ben-

kull. Hastigheten av opptagelsen av vannstoff sank hurtig etter adsorpsjon av 1 mol vannstoff og hydreringen ble avbrutt. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering. Fordampning av den filtrerte oppløsning til tørrhet ga et hvitt, krystallinsk residuum av 21-acetoksyallopregnan-3 p-ol-20-on, som ble oppløst i 40 ml eddiksyre-benzen (1:1) og oksydert direkte ved langsom tilsetning ved 5° C av 1,5 molekvivalenter kromsyreanhydrid i 25 ml iseddik. Fordampning av benzen-eddiksyren i vakuum til et lite volum og fortynning med 100 ml vann ga en hvit utfelning, som ble ut-vunnet ved filtrering. To omkrystalliserin-ger fra metanol ga i det vesentlige rent 21-acetoksyallopregnan-dion, smp. 190— 193° C.

Det samme produkt erholdtes ved en alternativ fremgangsmåte som følger: Ka-talytisk hydrering og desoksykortikosteron-acetat (2 g) over Pd(CaC03) katalysator i 50 ml etanol ved atmosfæretrykk ga etter fjernelsen av katalysatoren og oppløsnings-midlet et råprodukt med smeltepunkt 131— 142° C, som ble direkte kromatografert over 120 g Florisil. Fren benzenet og 1:10 eter-benzeneluatene ble isolert 21-acetok-sypregnandion, smp. 148—151° C. Fra de senere benzen-eter og eterfraksjoner ble isolert ved fordampning og omkrystallisering 21-acetoksyallopregnandion, smp. 190—193° C, hvilket var identisk med det materiale, som ble fremstilt fra 21-acetoksy-A 5-pregnan-3 p-ol-20-on. Det reneste 21-hydroksyallopregnan-3,20-dion ble fremstilt ved hydrolyse av 21-acetatforbin-delsen. Dette ble oppnådd ved behandling under tilbakeløp av 1 g av acetatet oppløst i 100 ml vandig metanol, som inneholdt natriumkarbonat. Etter ansyring av denne blanding ble forbindelsen 21-hydroksyallopregnan-3,20-dion isolert. Smeltepunkt for denne forbindelse er 155—157° C. De mest utpregete infrarøde maksima av denne forbindelse, når målingen ble utført i en ka-liumklortablett forekommer ved de føl-gende bølgelengder: 2,9, 3,22, 5,84, 6,85, 7,01, 7,16, 8,82 og 9,26. my.

Eksempel XXII.

21- hydroksyallopregnan- 3, 20- dion-natriumsuccinat.

1 g av det reneste 21-acetoksyallopregnan-3, 20-dion ble oppløst i 100 ml vandig metanol, som inneholdt natriumkarbonat og hydrolysert. 21-hydroksyallopreg-nandionet ble isolert etter ansyring, fortynning med vann og delvis fordampning. Det ble derpå tørket i vakuum, oppløst i 10 ml tørr pyridin, og ble reagert over natten med 1,0 g ravsyreanhydrid. Fortynning av reaksjonsblandingen med fortynnet syre og is og filtrering av det utfelte faste stoff ga 21 -hydroksyallopregnandionsuccinatet som en masse av ganske små nåler.

Natriumsaltet ble fremstilt ved å la 500 mg av det krystallinske succinat reagere med en ekvivalent av natriumbikarbonat i 3 ml vann.. Den fortynnete oppløs-ning (20 ml) ble frosset og lyofilisert ved høyt vakuum for å gi 21-hydroksyallopregnan-dionnatriumsuccinat som et hvitt, fast stoff, som viste seg å være et inaktivt anestetika ved intravenøs injeksjon på for-søksdyr.

På lignende måte ble fremstilt andre ioniserte estere av 21-hydroksyallopreg-nandion under anvendelse av betingelser, som var helt tilsvarende til fremstillingen av pregnanisomerene. Når steroidkjernen en gang var blitt fremstillet, var fremstillingen av de ioniserte estere i 21- og også i 3-stilling den samme i allopregnanseri-ene som i pregnanseriene, da isomerien i 5-stillingen ikke hadde noen virkning på disse reaksjoner.

Eksempel XXIII.

3fi- hydroksyallopregnan- 20- on- natrium-succinat.

En oppløsning av 1 g A 5.16-pregna-dien-3 (3-ol-20-on i 50 ml eddiksyre ble hydrert ved atmosfærisk trykk over 1 g av en aktiv 5 pst. palladium-på-benkullkata-lysator. Etter adsorpsjon av 2 mol vannstoff ble reaksjonen avbrutt og produktet 3 p-hydroksyallopregnan-20-on ble gjenvunnet ved filtrering av katalysatoren og fordampning av filtratet til tørr-het. Det omkrystalliserte produkt ble opp-løst i 10 ml pyridin og behandlet natten over med 1 g ravsyreanhydrid. Fortynning med 3N klorvannstoffsyre ga en hvit utfelning av 3p-hydroksyallopregnan-20-on-succinat, som ble gjenvunnet ved filtrering..

Natriumsaltet ble fremstillet ved å la den tørrete syre reagere med en molekvivalent natriumhydroksyd i 10 ml vann og lyofilisering til et hvitt, fast stoff.

Eksempel XXIV.

Farmakologisk prøving av typiske forbindelser med mus. 21- hydroksypregnan- 3, 20-dionnatriumhemisuccinat.

Når denne forbindelse ble injisert in-travenøst i en steril vandig oppløsning, var 21,7 mg pr. kg legemsvekt tilstrekkelig til å frembringe hypnose i 50 pst. Dette kan oppsummeres ved å si at HD50 = 21,7 mg/kg. Den dose som var nødvendig for å drepe 50 pst. (LD50) var 250 mg/kg. Dette betyr at det terapeutiske forhold (TF), hvilket er forholdet av LD50 til HD5f), var 11,5. (Det terapeutiske forhold av det vel kjente hypnotiske middel natriumpento-tal er ca. 5).

Når det ble administrert subkutant var HD5() av denne nye forbindelse omtrent 35 mg/kg. Ved oral administrering var HD50 100 mg/kg.

En ytterligere fordel ved denne forbindelse beror på det faktum at dyrene, som ble anestisert med den, kom seg igjen med et minimum av post-anestetisk de-presjon. 3 a- hydroksypregnan- 20- on- natrium hemisuccinat.

Når denne forbindelse ble injisert in-travenøst i en steril vandig oppløsning var HD50 av denne nye forbindelse 29 mg/kg. LD5n var ca. 115 mg/kg og det terapeutiske forhold var derfor ca. 4.

Ved oral administrering var HD.-„ ca. 100 mg/kg. 21 - hydroksypregnan- 3, 20- dion- procain-hemisuccinat.

Ved intravenøs injisering i en steril vandig oppløsning var HD50 av denne nye forbindelse ca. 37 mg/kg. Ved oral administrering var HD5n ca. 100 mg/kg.

21- hydroksy- 3, 20- dion- dietylamino-etanolhemisuccinat.

Denne forbindelse frembrakte, når den ble anvendt intravenøst, anestetisk effekt i doseringer så lave som 25 mg/kg. Administrert oralt ble det frembrakt anestetisk effekt ved doseringer så lave som 125 mg/ kg.

21- hydroksypregnan- 3, 20- dion- dimetyl-benzylaminhemisuccinat.

HD50 av denne forbindelse ved intra-venøs administrering var 19 mg/kg. Administrert oralt ble det frembrakt en anestetisk effekt i doseringer så lave som 125 mg/kg.

21- hydroksypregnan- 3, 20- dion- trietyl-aminhemisuccinat.

HD50 av denne forbindelse var 20 mg/

kg ved administrering intravenøst.

Eksempel XXV.

Farmakologiske prøver med hunder.

Hunder, som ble gitt intravenøse in-jeksjoner av 50 til 100 mg 21-hydroksypregnan-3,20-dion-natriumhemisuccinat

pr. kg. mistet bevisstheten i løpet av en

middels tid av 3—5 minutter og forble i

denne tilstand i 50-—120 minutter. Et to-talt antall av seks hunder mottok intrave-nøst 50 mg av denne forbindelse pr. kg.

legemsvekt. De forble generelt i denne til

stand av lett anestesi og reagerte like overfor smertestimulering. To av fire hunder,

som mottok 100 mg av forbindelsen pr.

kg legemsvekt, forble i en tilstand av kirurgisk anestesi i ca. to timer.

En kirurgisk operasjon (fjernelse av en

svult fra haken) ble utført på en hund

etter intravenøs injeksjon av 200 mg 21-hydroksypregnan-3,20-dion-natriumhemisuccinat pr. kg legemsvekt. Operasjonen varte i ca.. 40 minutter. Dyret tålte

operasjonen godt uten noen kamp. Hunden

kom seg uten komplikasijoner etter operasjonen.

En hund, som ble gitt intravenøs injeksjon av 250 mg 21-hydroksypregnan-3,

20-dion-natriumhemisuccinat pr. kg legemsvekt forble i en tilstand av kirurgisk

anestesi i omtrent 3 timer. Dyret kom seg

også fra anestesien.

Giftigheten ble også studert. En hund

fik daglig 50 mg/kg av en annen 100 mg/

kg 21-hydroksypregnan-3,20-dion-natriumhemisuccinat i en periode av 10 dager.

Hypnose eller lett anestesi ble iakttatt hele

tiden under ti dagers perioden med hunden som fikk 50 mg av forbindelsen pr.

kg. Hunden som fikk 100 mg/kg gikk også

over i en tilstand av anestesi etter hver

daglig injeksjon. Et påfallende fenomen,

som ble iakttatt med disse dyr, var at va-righeten av søvnen forble konstant under

hele tidagersperioden, med andre ord

kunne det ikke med disse dyr iakttas noen

tilvending til forbindelsen. Ved slutten av

de to dager ble begge hunder avlivet og

vev og organer ble undersøkt og det ble

tatt prøver for histopatologisk undersø-kelse. Rutinemessig hematologisk under-søkelse, omfattende hemoglobinbestem-melse, telling av hvite og røde blodlege-mer, leverfunksjonsprøver og kjemisk

blodundersøkelse av begge hunder ble ut-

ført ved begynnelsen og slutten av prøve-perioden. Alle disse resultater var innen-for normale variasjonsgrenser.

Eksempel XXVI.

Farmakologiske prøver med aper.

21-hydroksypregnan-3,20-dion-natriumhemisuccinat ble administrert til to aper. En ape ble gitt en dose på 50 mg pr. kg intravenøst. Apens øyelokk falt nesten øyeblikkelig ned og i løpet av 7 minutter var den i søvn. Apen reagerte ikke overfor prikking og den cornlale refleks var fraværende. En time etter administrerin-gen av det anestetiske middel, våknet apen og satte seg opp, men den var svakt attak-sisk. I løpet av 8 minutter var den i stand til å ta opp et eplestykke og transportere dette direkte til munnen uten noen attak-siske bevegelser. Dyret spiste normalt. 17 minutter etter at apen var våknet, var dyret helt normalt. Dyrets respirasjon og hjerte virksomhet endret seg ikke fra kon-trollprøven under perioden av anestesi.

Den annen ape fikk en dose på 100 mg pr. kg. Dens øyelokk falt ned og musk-lene ble avslappet nesten umiddelbart etter at forbindelsen var administrert. Etter 3 minutter lå dyret helt stille og reagerte ikke på øre- eller hudprikking. Den cor-niale refleks var fraværende og øynene var ubevegelige. Etter en time og 32 minutter rystet dyret på hodet og løftet det, etter at dens øre var stukket. Den var helt tyde-lig søvnig og ignorerte mat. Etter 4 minutter viste den en svak skjelving av ansikts-muskulaturen. Denne ble forsterket da dyret forsøkte å sette seg opp. 8 minutter etter at dyret våknet, var det meget ob-servant, men lå fremdeles stille. 3 minutter senere forandret apen stilling, satte seg på bakdelen, og den var meget våken. Det var ikke noen påtagelig forandring i hjertehastigheten eller respirasjonshastig-heten og arten av denne under hele perioden av forsøket.

Skjønt de foranstående illustrerende eksempler bare befatter seg med resulta-tene på mus, hunder og aper, må dette ikke tydes som en begrensning av oppfinnelsen, idet de nye forbindelser er nyttige for andre dyr, innbefattet mennesker, og er særlig nyttige og verdifulle for anvendelse i veterinærmedisin og medisinsk behandling av mennesker.

Claims

1. Fremgangsmåte for fremstilling av pregnan- eller allopregnanestere som har

ioniserte grupper i 3- og/eller 21-stillingen og som har sentralnervesystemdepressiv virkning, karakterisert ved at man lar en forbindelse av formelen: hvor D er en keto-, oksim- eller forestret oksimgruppe, en hydroksy- eller acylatgruppe som stammer fra en karboksylsyre som inneholder 1—8 kullstoffatomer, og E er en hydroksy- eller acylatgruppe som stammer fra en karboksylsyre som inneholder 1—8 kullstoffatomer, og hvor D og E kan være like eller forskjellige, reagere med en dikarboksylsyre, fortrinsvis ravsyre, av formelen: eller de funksjonelle derivater herav, hvor -L- er -(CH2)n-, -0-(CH2)„- eller -NH(CH2)n-, og n er et helt tall mellom 1 og 6, eller med en aminosyre av formelen hvor -L- og n har samme betydning som ovenfor og R er hydrogen, alkyl, hydroksyalkyl, acyloksylalkyl, aminoalkyl, aryl eller aralkyl, og de på denne måte dannete estere behandles med en natrium-, kalium-, ammonium- eller substituert ammonium-base, hvor substituentene er hydrogen, alkyl, hydroksyalkyl, acyloksyalkyl, aminoalkyl, aryl eller aralkyl eller resp. med en syre eller et alkyl-, hydroksyalkyl-, acyloksyalkyl-, aminoalkyl-, aryl- eller aral-kylhalogenid og innfører en farmakologisk aksepterbar anion ved behandling med den tilsvarende syre, og om nødvendig til-veiebringes pregnan- eller allopregnan-kjernen ved hydrering av en tilsvarende umettet kjerne.

2. Fremgangsmåte som angitt i på-stand 1, ved hvilken hemisuccinatet behandles med en natriumbase for å danne natriumsaltet.

3. Fremgangsmåte som angitt i på-stand 1, ved hvilken hemisuccinatet behandles med trietylamin for å danne tri-etylaminsaltet..

4. Fremgangsmåte for fremstilling av en ikke-ionisert steroid forbindelse som nyttes som utgangsmateriale ved utførel-sen av fremgangsmåten i henhold til på-stand 1, bestående i at man lar 21-hydroksypregnan-3,20-dion eller 21-hydroksyallopregnan-3,20-dion reagere med et acy-leringsmiddel for å sikre reaksjonen ved 21-stilling og dannelse av en forbindelse med den generelle formel: hvor X betegner -Cl, -OCH2CH2Cl,-NHCH2CH2Cl, -CH2C1 og -CH,CH,COOH. Anførte publikasjoner: