NO127236B

NO127236B -

Info

Publication number: NO127236B
Application number: NO7770A
Authority: NO
Inventors: Helmut Vorbrueggen; Peter Strehlke
Original assignee: Schering Ag
Priority date: 1970-01-09
Filing date: 1970-01-09
Publication date: 1973-05-28

Description

Fremgangsmåte ved fremstilling av 2-thio-pyrimidin-nucleosider.

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte ved fremstilling av forbindelser av den generelle formel:

hvor X er oxygen eller NH,

Y er nitrogen eller CH,

R er hydrogen, alkyl med 1-4 carbonatomer, halogen, nitro, nitril, laverealkylamino, laverealkoxy eller -fCH„) -CO-A hvor n er O. 1

v ^' n

eller 2, og A er alkoxy med 1-5 carbonatomer, amino eller lavere-

alkylamihb, og -

Z er en sukkerrest, karakterisert ved at man av en forbindelse av den generelle formel: hvor X, Y og R er som ovenfor angitt, med et silyleringsmiddel fremstiller den tilsvarende disilylforbindelse, idet der som silyleringsreagens kan anvendes forbindelser av den generelle formel:

hvor A1, A2 og A^ er laverealkyl, og B er en elektroforflyttende gruppe, som f.eks. halogen, acetamido eller trimethylsilylamino, eventuelt i nærvær av et tertiært amin, at disilylforbindelsen omsettes med et på vanlig vis beskyttet halogensukker i nærvær av sølvperklorat ved 0 - 6o°C til det beskyttede N^-nucleosidet, og at beskyttelsésgruppene på i og for seg kjent vis avspaltes, idet en estergruppe på den heterocycliske 6-ring eventuelt omvandles til en amidgruppe.

Som sukkerrest Z kommer fortrinnsvis de av ribose, 2-desoxy-ribose eller glucose på tale.

Omsetningen av den heterocycliske disilylforbindelse med det beskyttede halogensukker utføres mellom 0° og 60°C, fortrinnsvis ved værelsetemperatur og fortrinnsvis i benzen eller toluen. Som oppløsningsmiddel for reaksjonen kommer dessuten kloroform, acetonitril, nitromethan, dioxan eller tetrahydrofuran på tale. Vanlige beskyttelsesgrupper for halogensukker er f.eks. benzoyl, toluyl og acetyl. Beskyttelsésgruppene kan avspaltes f.eks. med alkoholiske oppløsninger av ammoniakk eller alkoholater.

Forløpet av denne modifiserte Hilbert-Johnson-reaksjon med beskyttede halogensukkere til 1^-nucleosider er høyst overraskende da der i litteraturen (J. Am. Chem. Soc. 22 (1957), 6446) ved analoge reaksjoner ikke er erholdt N-nucleosider, men bare O-gly-cosider.

Den nye fremgangsmåte gir i motsetning til de tidligere kjente fremgangsmåter ved fremstilling av slike forbindelser (Chem. Pharm. Bull. £ (1961), 709, 10 (1962), 308; Biochem. 2 (1968), 1427) de ønskede forbindelser i færre trinn og meget gode utbytter. Den nye fremgangsmåte åpner derfor en overraskende enkel vei til fremstilling av 2-thio-pyrimidin-nucleosider.

Dé ved foreliggende fremgangsmåte fremstilte forbindelser har cytotoksiske, antivirale^ enzymhemmende såvel som antihyperthyroide virkninger.

Eksempel 1

6.4 g 2-thiouracil kokes med 130 ml hexamethyl-disilazan, 1,5 ml trimethylklorsilan og 50 ml dioxan i 16 timer under tilbake-løp. Efter avdestillering av alle bestanddeler som koker opptil 12o°C/76o mm, destilleres residuet over et kulerør.

Kokepunkt l4o°C/p,4 torr. Utbytte 13,8 9 (kvantitativt) 2-t rimethylsilylthio-4-t rimethylsilyloxypyrimidin.

6,8 g 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilyloxypyrimidin opp-løses i 80 ml absolutt benzen og tilsettes en oppløsning av 12,1 g 1-klor-2,3,5-tri-O-benzoylribofuranose i 80 ml absolutt benzen. Ved tilsetning av en oppløsning av 5,2 g sølvperklorat i 100 ml benzen farves oppløsningen gul, og et hvitt bunnfall av sølvklorid felles.

Efter 1 times henstand ved værelsetemperatur i mørke ekstraheres blandingen med mettede oppløsninger av natriumhydrogencar-bonat, natriumthiosulfat og koksalt, en gang med hver og inndampes så til tørrhet.

Utbytte 15 g rått 2-thiouridin-tribenzoat.

Efter utkokning av råproduktet m ed 2 x 300 ml hexan fjernes rester av det uomsatte sukker, og man får således 10,5 g (73,5% av det teoretiske) av det tynnskiktsenhetlige, men ikke-krystallinske, produkt.

[a]p° = -28,4° (c = 0,5 i kloroform).

3.5 g 2-thiouridin-tribenzoat oppløses i 250 ml methanol mettet med ammoniakk og hensettes over natten. Derpå inndampes i

vakuum, residuet.Jf qrdeles i vann/eddiksyreester, og vannfasen ekstraheres så seks ganger med ether. Efter inndampning av vannfasen får man 1,65 g rått 2-thiouridin (kvantitativt utbytte), som orokrystalli-seres fra ethanol/vann.

Smeltepunkt 214 215°C.

[a]p° = +39,3° (c = 0,5 i vann).

Eksempel 2

IO g 2-thiouracil-5-eddiksyreethylester, lOO ml hexamethyl-disilazan og 1,5 ml trimethylklorsilan kokes under tilbakeløp i 2 timer. Opparbeidelsen skjer som i eksempel 1. 2-trimethylsilyl-thio-4-trimethylsilyloxy-pyrimidin-5-eddiksyreethylesteren koker ved 170°C ved et trykk på 0,1 torr, utbytte 14,8 9 (88% av det teoretiske) .

5,38 9 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilyloxy-pyrimidin-5-eddiksyre-ethylester og 7,22 g l-klor-2,3,5-tri-O-benzoyl-ribofuran-ose i 6o ml absolutt benzen tilsettes 3,11 g sølvperklorat i 30 ml absolutt benzen. Man rører i ytterligere 15 minutter ved værelsetemperatur og opparbeider som beskrevet i eksempel 1. Utbyttet ut-gjør 10,5 g. Fra acetpn/cyclohexan krystalliserer 7,8 9 (78% av det teoretiske) 2-thiouridin-5-eddiksyre-ethylester-tribenzoat. Smeltepunkt 118 - 120°C.

[a]p° = -83° (c = 0,5 i kloroform).

3,3 g 2-thiouridin-5-eddiksyre-ethylester-tribenzoat oppløses i 250 ml absolutt methanol og hensettes over natten ved værelsetemperatur med 5,25 ml 1 m natriummethylatoppløsning. Efter nøy-tralisasjon med "Dowex 50" (H+-formen) avdampes oppløsningsmidlet i vakuum, og residuet fordeles i eddiksyreester/vann. Vannfasen ekstraheres nok to ganger med eddiksyreester. Den vandige oppløs-ning behandles med kull, filtreres, inndampes, og residuet krystalliseres fra methanol/vann (4:1). Utbytte 1,18 9 (74% av det teoretiske) 2-thiouridin-5-eddiksyre-methylester. Smeltepunkt 195 - 197°C,

[a]p° = +19,8° (c = 0,5 i vann).

b) 500 mg 2-thiouridin-5-eddiksyre-ethylestertribenzoat oppløses i 40 ml konsentrert vandig ammoniakkoppløsning og omrøres i

16 timer ved 24°C. Oppløsningen inndampes, og residuet omkrystalliseres fra methanol. Man får 165 mg (68% av det teoretiske) 2-thio-

ur.idin-5-eddiksyreamid med smeltepunkt 217 - 218°C.

Eksempel 3

10 g 5-ethyl-2-thiouracil kokes med 100 ml hexamethyl-disilazan, og 2 ml trimethylklorsilan i 2 timer under tilbakeløp. Efter opparbeidelse som i eksempel 1, får man 17,5 Q 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilyloxy-5-ethylpyrimidin med smeltepunkt 120°C/0,01 torr.

4,7 g 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilyloxy-5-ethyl-pyrimidin omrøres med 6 g l-klor-3,5-di-0-p-toluyl-2-desoxy-ribo-furanose og 3,7 9 sølvperklorat i 1O0 ml benzen i 30 minutter ved værelsetemperatur. Efter opparbeidelse som i eksempel 1, fåes 7,1 g råprodukt (81% av det teoretiske).

Ved fraksjonert krystallisasjon fra eddiksyre-ethylester fåes (3-anomeren med smeltepunkt 199 - 202°C,

[a]^° = -82,5° (c = 0,5 i kloroform),

og a-anomeren (krystallisert fra aceton) med smeltepunkt 164 - 166°C,

[a]^° = +6° (c = 0,5 i kloroform) av 2-thio-5-ethyl-2'-desoxyuridin-ditoluylat. a) 450 mg-av den rene . (3-anomer hensettes med 80 ml ammoniakkmettet methanol i 48 timer ved værelsetemperatur. Der inndampes,

den gjenværende olje rystes med ether inntil nucleosidet er fullstendig krystallinsk, dekanteres, og produktet omkrystalliseres fra aceton/ether. Utbytte 180 mg (75% av det teoretiske). 2-thio-5-ethyl-2'-desoxyuridin smelter ved 187 - 188°C.

[a]p° = +6,5° (c =0,5 i MeOH).

b) 95 g l-klor-3,5-di-0-p-toluyl-2-desoxy-ribofuranose suspenderes i 150 ml benzen og tilsettes en oppløsning av 70,5 9 2-trimethyl-silylthio-4-trimethylsilyloxy-5-ethyl-pyrimidin og 250 ml benzen og tilsettes så under avkjøling en oppløsning av 54 9 sølvperklorat i 700 ml benzen. Der dannes straks et osteaktig bunnfall. Efter 30 minutter tilsettes 1 liter kloroform, sølvkloridet frasuges og filtratet nøytraliseres straks med mettet natriumhydrogencarbonat-oppløsning. Derpå rystes en gang med mettet natriumthiosulfatopp-løsning og med koksaltoppløsning, og der inndampes. Den erholdte blanding av anomerene kokes med 1 liter eddiksyreester/aceton (1,5:1), der avkjøles, og 6l,l g ren p-anomer av 5-ethyl-2'-desoxy-uridin-ditoluylat (smeltepunkt 196 - 198°C) frasuges. Der inndampes, og prosessen gjentaes, hvorved man igjen får 6,8 g av p-anomeren. Totalut byttet utgjør 56,5%. Fra lite aceton/ether krystalliseres

så 30 g av a-anomeren.

Eksempel 4

5 g 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsiiyloxy-5-ethyl-pyrimidin, fremstilt som i eksempel 3, oppvarmes med 5,72 g acetobromglucose og 3,8 g sølvperklorat<:>i 150 ml toluen i 75 minutter ved 6o°C og opparbeides så som i eksempel 1. Man får 6,1 g (85% av det teoretiske) tynnskiktsenhetlig, men ikke-krystallinsk 2-thio-5-ethyl-1-p-D-t<r>etraacetyl-glucopyranosyl-uracil. Efter forsåpning som i eksempel 1, får man i kvantitativt utbytte likeledes ikke-krysta1-linsk 2-thio-5-ethyl-l-|3-D-glucopyranosyl-uracil •

Efter behandling med pyridin-benzoylklbrid får man krystallinsk 2-thio-5-ethyl-l-|3-D-glucopyranosyl-uracil-tetrabenzoat i 80%-ig utbytte med smeltepunkt på 156 157°C.

[a]p° = +98,5° (c = 0,5 i kloroform).

Eksempel 5

5,2 g 2-thio-6-azauracil, lOO ml hexamethyldisilazan og 1,5 ml trimethylklorsilan gir efter 1 times tilbakeløpskokning og opparbeidelse som i eksempel 1, i kvantitativt utbytte 3-triméthyl-silylthio-5-trimethylsilyloxy-l ,2 ,/f-triazin med kokepunkt 120°C/0,1 torr.

11 g 3_trimethylsilylthio-5-trimethylsilyloxy-1,2,4-triazin,

20 g 1-klor-2,3,5-tri-0-berizoylribofuranose og 12 g sølvperklorat i 200 ml benzen omrøres over natten. Opparbeidelsen skjer som angitt i eksempel 1. Man får 18,5 g (78% av det teoretiske) krystallinsk 2-thio-5-azauridin-tribenzoat, som omkrystalliseres fra litt kloroform og ethanol og har et smeltepunkt på 173°C.

[a]p° =.-35,5° (c = 0,5 i kloroform).

12 g 2-thio-5-azauridin-tribenzoat forsåpes som angitt i eksempel 1, med 1,2 1 ammoniakkmettet methanol. Man får 4,6 g

(87% av det teoretiske) råprodukt. Efter omkrystallisasjon fra ethanol får man 3,7 g krystallinsk 2-thio-6-azauridin (70% av det teoretiske) med smeltepunkt 197,5°C,

[a]^° = -96,6° (c = 0,5 i vann).

Eksempel 6

18 g 2-thiothymin kokes med 200 ml hexamethyldisilazan (HMD) og IO ml trimethylklorsilan i 20 timer under tilbakeløp. Under normaltrykk avdestilleres så hovedmengden av HMD, derpå fjernes de siste rester av HMD ved 100°C/15 torr, og residuet destilleres i kulerør ved 120°C/0,02 torr. Man får 34,6 g (95,5% av det teoretiske) 2-t rimethylsilylthio-4-t rimethylsilyloxy-5-methyl-pyrimidin (2) .

Til en blanding av 34,6 g (2) i 250 ml benzen og 42,2 g 1-a-klor-3,5-di-0-p-toluyl-2-desoxyribofuranose (3) i 250 ml benzen (løses ikke fullstendig) tilsettes på en gang under isavkjøling 22,6 g sølvperklorat oppløst i 350 ml benzen, hvorved den til og begynne med blakke oppløsning blir klar. Éfter ca. IO' minutter begynner utskillelsen av sølvklorid. Efter 1 times omrøring i mørke tilsettes oppløsningen til mettet natriumhydrogencarbonatopp-løsning og rystes til nøytralisasjon.' Uten å avvente faseskill-elsen tilsettes ca. 20O ml mettet natriumthiosulfatoppløsning, der rystes igjen, og fasene skilles. Den organiske fase rystes med mettet natriumkloridoppløsning, tørres og inndampes. Det allerede krystallinske råprodukt oppløses i en blanding av..350 ml methanol og 150 ml aceton og oppbevares over natten i kjøleskap. De utskilte krystaller (11,6 g, 22%) smelter ved 197 - 201°C og er nesten ren 8-anomer av 2-thiothymidin-ditpluylat (4). Morluten inndampes og oppløses i ca. 250 ml methanol <p>g 50 ml eddiksyreester. Ved langsom avkjøling utskilles 15,5 g (.29%) krystaller av a-anomeren med smeltepunkt 182 - 184°C.

Analyse: a-anomeren:

[a]p° = +2,8° (c = 0,5, kloroform)

8-anomeren:

[a]D = -96,8° (c = 0,5, kloroform).

Den rene a-, hhv. B-anomer hensettes med 175 ganger mengden med ammoniakkmettet methanol i 2 dager ved værelsetemperatur, inndampes så i vakuum, dekanteres to ganger med ether, og det oljeaktige residuum krystalliseres. Man får 62% utbytte av a-2-thiothymidin med smeltepunkt 152 - 153°C ([a]^° = 51,5°, c = 0,58, methanol) og S-anomer i et utbytte på 82% (smeltepunkt 18'2 - 183°C, [a]p° = +16°, c = 0,5, methanol).

Eksempel 7

I en av 7,55 9 natrium og 205 ml ethanol friskt fremstilt natriumethylatoppløsning oppløses 24,9 9 thiourea. I løpet av 40 minutter tilsettes 40 g ethoxymethylenmalodinitril (holdt flyt-ende ved svak oppvarmning), og der kokes så i 6 timer under tilbake-løp. Derefter tilsettes 575 ml vann, oppløsningen syres med 60 ml iseddik og kokes i 5 minutter. De utfalte krystaller avsuges efter avkjøling av oppløsningen. Man får 57 9 (98%) 2-thio-5-cyano-cytosin (7). Forbindelsen er gulfarvet og kan omkrystalliseres fra dimethylformamid/vann. 10 g (7) finmales i morter og kokes med 500 ml dioxan/hexamethyl-disilazan (1:1) og 1 g ammoniumsulfat i 24 timer under til-bakeløp. Man får en olje (13,5 g, 70%) som krystalliserer lett og er 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilylamino-5-cyanopyrimidin (8)• En oppløsning av 15,2 g (8) og 24,7 9 l-klor-2,3,5-tri-0-benzoyl-ribofuranose (9) i 300 ml benzen tilsettes 10,7 g sølvper-klorat oppløst i 100 ml benzen ved værelsetemperatur. Man får et tykt bunnfall som omrøres i ytterligere 2 timer, der tilsettes 200 ml eddiksyreester og opparbeides pa vanlig måte. Man får 30,2 g rått 2-thio-5-cyanocytidin-tribenzoat (10). Produktet oppløses i litt methylenklorid og felles med meget ether. Der felles 20 g amorft materiale som omkrystalliseres ifra aceton/cyclohexan. Krystallene smelter ved l4l - l44°C, ([a= -50,7°)• 3 g (10) oppløses i 90 ml methanol og spaltes med 7,5 ml 1 m natriummethylatoppløsning. Reaksjonsblandingen hensettes i 3 timer ved værelsetemperatur, inndampes ved 30°C til halvt volum og hensettes over natten i kjøleskap. Der utskilles 1,12 g krystaller med smeltepunkt 192 - 195°C.

Analyse: 2-thio-5-cyanocytidin (C10H12N^0^S•CH^OH):

Ber.: C 4l,8 H 5,06 N 17,7 S 10,1

Funn.: C 42,2 H 5,50 N 17,4 S 9,85

Eksempel 8

En blanding av 206 g methoxyeddiksyre-methylester og 222 g maursyre-ethylester tildryppes i løpet av 8 timer til den isavkjølte suspensjon av 120 g natriumhydrid i olje (50%-ig). Reaksjonsblandingen oppbevares over natten i kjøleskap, derpå tilsettes 1 liter isvann, der ekstraheres med ether, og vannfasen syres under sterk avkjøling med fortynnet svovelsyre (1:1). Produktet ekstraheres med ether, etherfasen vaskes med kaliumhydrogencarbonatoppløsriing, tørres, inndampes og residuet fraksjoneres. Man får 66,4 9 formyl-methoxyeddiksyreester.

4o g formyl-methoxyeddiksyre-ethylester og \\ 2 g kaliumcarbonat tilsettes til en varm oppløsning av 23,2 g thiourea i 34 ml vann. Efter 2 timers omrøring tilsettes 200 ml vann. Blandingen bringes på pH 3 med konsentrert saltsyre, og det utfelte bunnfall frasuges. Man får 32 g (74%) 5-methoxy-2-thiouracil, som efter omkryst allisa-sjon fra vann smeltet ved 270°C under spaltning. 7 g 5-methoxy-2-thiouracil, 70 ml hexamethyldisilazan og 2 ml trimethylklorsilan kokes i 20 timer under tilbakeløp. Ved normaltrykk avdestilleres så alt lettkokende (inntil 125°C). Residuet befries ved vannstrålevakuum ved lOO°C varinbadtemperatur for lettkokende rester og destilleres så ved 0,05 torr og l40°C i kulerør. Man får 13,2 g krystallinsk 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilyl-oxy-5-methoxy-pyrimidin med smeltepunkt 64 - 65°C. 13 9 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilyloxy-5-methoxy-pyrimidin i 50 ml benzen, 20 g 1-klor-2,3,5-tribenzoyl-ribofuranose i 50 ml benzen og 9 g sølvperklorat i 150 ml benzen omrøres i 2 timer ved værelsetemperatur. Oppløsningen er først klar og grønlig, senere gul-lig. Efter ca. 5 minutter begynner utskillelsen av sølv-klorid. Man tilsetter 300 ml eddiksyreester, ryster nøytral med kaliumhydrogencarbonat, tilsetter så mettet natriumthiosulfatoppløs-ning og ryster igjen. En emulsjon som dannes, skilles ved filtrer-ing over kiselgur. Den organiske fase rystes to ganger med koksalt-oppløsning, tørres, kokes med kull og inndampes. Man får 22 g av en nesten farveløs olje. Denne oppløses i 20 ml kloroform og tilsettes 150 ml hexan. Denne prosess gjentaes med det utfelte materiale, og man får 19 g (73%) 5-methoxy-2-thiouridin-tribenzoat som farveløs harpiks, som ifølge tynnskiktskromatogram (eluerings-middel ether) er praktisk talt enhetlig.

2,6 g av det oljeaktige 5-methoxy-2-thiouridin-tribenzoat om-røres med lOO ml ammoniakkmettet methanol over natten. Man inndamper i vakuum, ryster residuet med eddiksyreester, hvorved 5-methoxy-2-thiouridin krystalliserer. Man filtrerer og får således 800 mg

krystaller. Fra eddiksyreesteren utskilles ved henstand over natten ytterligere 100 mg krystaller. Totalutbyttet utgjør 92%. Efter omkrystallisasjon fra ethanol smelter materialet ved 221 - 222 C.

Analyse: (<c>i0<H>l4<N>2°6<S>>

Ber.: C 41,4 H 4,82 N 9,65 S 11,0

Funn.: C 4l,3 H 4,99 N 9,68 S 11,5

[a]p° = +18,2 (c = 0,5 i H2d)

Eksempel 9

2Q g 2-thio-5.-methyl-6-azauracil kokes med 200 ml hexamethyldisilan og 10 ml trimethylklorsilan i 2 timer under tilbakeløp. Efter opparbeidelse analogt med eksempel 6 får man 38,7 g (97%) 3-trimethylsilylthio-5-trimethylsilyloxy-6-methyl-l,2,4-triazin (18) som en intenst gul olje med kokepunkt l6o°C/0,02 torr.

28,7 g (18), 50 g l-klor-2,3,5-tri-O-benzoylribofuranose og 20,7 g sølvperklorat omsettes i 400 ml benzen. Efter 30 minutters reaksjonstid hensettes oppløsningen over natten (+4°C) og opparbeides analogt med eksempel 7- Man får 77 g råprodukt som tynn-skiktskromatografisk i systemet kloroform/10% isopropanol er nesten enhetlig, og efter 1 ukes henstand uten oppløsningsmiddel krystalliserer delvis. Man triturerer med benzen og får 8,8 9 farveløse krystaller av 2-thio-5-methyl-6-azauridin-tribenzoat (1), som efter omkrystallisasjon fra benzen/methanol smelter ved 151 - 154°C. 20 g av det oljeaktige tribenzoat (19) omrøres med 6oo ml ammoniakkmettet methanol over natten ved værelsetemperatur. Den mørkebrune oppløsning inndampes og fordeles i ether/vann. Et ut-felt sort, smøraktig produkt oppløses i methylenklorid/methanol og tilsettes meget ether og vann. Vannfasen inndampes og ekstraheres nok to ganger med ether og eddiksyreester og inndampes så. Man får 7,5 g (80%) av et gult produkt.. Fra ethanol utvinnes så 0,8 9 amorft materiale, derpå krystalliserer 1,5 g 2-thio-5-methyl-6-azauridin (l6%), som ved omkrystallisasjon fra methanol smelter ved 218 - 220°C.

Analyse:

Ber.: C 39,3 H 4,73 N 15,3 S 11,6

Funn.: C 39,7 H 4,99 N 14,9 S 11,2

[a]p° = -84,2° (c = 0,5 i methanol).

Eksempel IO

30,6 g oxaleddiksyre-ethylester-thiosemicarbazon suspenderes

i 500 ml ethanol og tilsettes to ekvivalenter 1 n ethanolisk kalium-hydroxyd., Efter 5 minutter ved:værelsetemperatur innstilles pH på ca. 3 med konsentrert saltsyre, og oppløsningen, inndampes. Residuet kokes med eddiksyreester og.filtreres varm. Derpå avdampes eddiksyreesteren, og residuet omkrystalliseres fra vann. Man får 20 g (80%) 6-aza-2-thiouracil-5-eddiksyre-ethylester (20) med smeltepunkt 186 - 188°C.

10 g (20) kokes med lOO ml hexamethyldisilan og 1 ml trimethylklorsilan i 1 time under tilbakeløp. Efter opparbeidelse får man 12,9 g (77%) 3-trimethylsilylthio-5-trimethylsilyloxy-l,2,4-triazin-6-eddiksyre-ethylester (21) som en farveløs olje med kokepunkt 140°C/0,01 torr. 19,1 g (21), 23 g l-klor-2,3,5-tri-0-benzoyl-ribofuranose og 14,5 g sølvperklorat omsettes i 400 ml benzen (reaksjonstid 1 time). Efter opparbeidelse som i eksempel 7, får man 32 g 2-thio-6-aza-uridin-5-eddiksyre-ethylester-tribenzoat (22) som råprodukt, som ifølge tynnskiktskromatografi er praktisk talt enhetlig, men ikke kan fåes krystallinsk. Utbyttet er kvantitativt. 21 g (22) hensettes med 1 liter 0,1 m natriummethylat i methanol i 24 timer. Derpå nøytraliserer man med fortynnet methanolisk svovelsyre, frafiltrerer riatriumsulfatet og inndamper, og for-deler residuet i vann/ether. Vannfasen ekstraheres nok to ganger med ether og inndampes så i vakuum. Råproduktet oppløses i 50 ml vann, filtreres over 30 g "Dowex 50" (H<+>) (elueres med 250 ml vann), den brune oppløsning avfarves med kull og inndampes. Forbindelsen omkrystalliseres først fra acetonitril, og derpå fra ethanol. Man får 4 g (38%) 2-thio-6-azauridin-5-eddiksyre-methylester med smeltepunkt 127 - 129°C.

Eksempel 11

9,95 g 5-carbethoxy-2-thiocytosin og 10,8 g (13,4 ml) trimethylklorsilan i 50 ml benzen tilsettes 13,9 ml triethylamih dråpe-vis. Der omrøres ved værelsetemperatur i 21 timer, triethylamin-hydrokloridet frasuges under utelukkelse av fuktighet på en nut sch, og efter avdampning av benzenet i vakuum destilleres 2-trimethyl-silylthio-4-t rimethylsilyloxy-5-carbethoxy-pyrimidinet (kokepunkt l40°C/0,8 torr, utbytte 8,1 g (47%)). 11 g av produktet i 90 ml benzen, 16 g l-klor-2,3,5-tri-O-benzoyl-ribof uranose i 130 ml benzen og 7 g sølvperklorat i l50.ml benzen bringes sammen og omrøres i 30 minutter ved værelsetemperatur. Man opparbeider som i eksempel 1, og får 27 g oljeaktig råprodukt som ved kromatografi på den 30-dobbelte mengde kiselgur (eluerings-middel ether) fåes ren. Utbyttet av krystallinsk 1-(2 ,3 ,5-tri-0-benzoyl-ribofuranosyl)-5-carbethoxy-2-thiocytosin utgjør 13% av det teoretiske (smeltepunkt 153 - 155°C).

Analyse: (C^<H>^<H>^<O>^<S>)<:>

Ber.: C 61,5 H 4,51 N 6,53 S 4,97

Funn.: C 6l,l H 4,70 N 6,21 S 5,10

300 mg av tribenzoatet i 30 ml ethanol tilsettes 1,5 ml 1 m natriumethylatoppløsning og hensettes over natten. Derpå nøytrali-seres med "Dowex 50" (H+<->form), der inndampes, og residuet fordeles i vann/ether, vannfasen inndampes, og residuet krystalliseres fra ethanol. Man får 35 mg (23%) krystallinsk 5-carbethoxy-2-thiocytidin som ikke smelter under 200°C, men spaltes fra ca. 170°C.

Eksempel 12

7,35 g acetobromglucose, 8,1 g 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilylamino-5-carbethoxypyrimidin og 4,9 9 sølvperklorat om-røres i 200 ml benzen først ved værelsetemperatur over natten og så ved 60°C i 1 time. Efter opparbeidelse analogt med eksempel 1 får man 9 g (75%) råprodukt. Råproduktet kromatograferes på silicagel (20 ganger mengden). Med ether/pentan/t riethylamin (78:20:2) elueres 2,7 9.l-(B-D-tetraacetylglucopyranosyl)-5-carbethoxy-2-thiocytosin. Efter omkrystallisasjon fra ether/pentan (3:1) smelter forbindelsen ved 139 - l4l°C.

Analyse: (C21H27<N>3°11S):

Ber.: C47.7 H 5,11 N7.95 S6,06

Funn.: C 47,7 H 5,33 N 8,10 S 6,08

1,8 gav det krystallinske tribenzoat hensettes med 200 ml ammoniakkmettet methanol i 4,5 timer ved værelsetemperatur. Opparbeidelsen skjer på vanlig måte. Man får 60O mg krystallinsk l-(B-D-glucopyranosyl)-5-carbethoxy-2-thiocytosin (fra methanol/ ether) (49% av det teoretiske, smeltepunkt 118 - 120°C under sterk spaltning). Ifølge NMR-spektret foreligger ethylesteren.

Eksempel 13

14,7 g acetobromglucose oppløses i 300 ml absolutt benzen. Efter tilsetning av 13,2 g 3-trimethylsilylthio-5-trimethylsilyloxy-1,2 ,4-triazin oppløst i 48,3 ml absolutt benzen, tilsettes 8,3 g sølvperklorat i 100 ml benzen, og der omrøres i 3 timer ved værelsetemperatur. Der opparbeides som i eksempel 1. Fra ethanol krystalliserer 1-8-D-glucopyranosyl-2-thio-6-azauracil-2',3',4*,6'-tetra-O-acetat som farveløse nåler i et utbytte av 12,5 9 (68% av det teoretiske, smeltepunkt 225°C). ;Forsåpning av 5 9 av tetraacetatet analogt med eksempel 2, gir i 85%-ig utbytte (2,7 g) l-(8-D-glucopyranosyl)-2-thio-6-azauracilet med smeltepunkt 246 - 250°C under spaltning. ;Eksempel 14 ;1,5 g l-klor-2,3,4-tri-O-acetyl-ribopyranose oppløses i 70 ml absolutt benzen. Efter tilsetning av 1,7 9 3~trimethylsilylthio-5-trimethylsilyloxy-1,2,4-triazin i 6,04 ml absolutt benzen tilsettes 1,07 g sølvperklorat i 15 ml benzen ved værelsetemperatur. Efter en times omrøring ved værelsetemperatur opparbeides analogt med eksempel 1. Efter kullbehandling blir 1,35 g 1-8-D-ribopyrano-syl-2-thio-6-azauracil-2",3<*>,4'-tri-O-acetat tilbake som en amorf forbindelse som er enhetlig ifølge tynnskiktskromatografi.

620 ml av det oljeaktige triacetat hensettes med lOO ml 0,05 m natriummethylatoppløsning i methanol i 3 timer ved værelsetemperatur. Man nøytraliserer med en ionebytter (H+<->form), inndamper, oppløser residuet i vann og filtrerer oppløsningen over en ionebyttesøyle (H+<->form 1 x 10 cm). Efter inndampning av eluatet får man 300 ml 1-(8-D-ribopyranosyl)-2-thio-6-azauracil, med smeltepunkt 239 - 24l°C (fra methanol).

Eksempel 15

50 mmol (6,36 g) 2-thiocytosin kokes i en blanding av lOO ml hexamethyldisilazan, 60 ml dioxan og 1 ml trimethylklorsilan i 96 timer ved 150°C badtemperatur. Overskudd av blanding avdestilleres ved normaltrykk (kokepunkt inntil 128°C). Residuet destilleres i kulerør ved l6o°C luftbad og 0,01 torr. Destillatet er en lysegul seigtflytende olje.

Utbytte: 12,4 9 (91%) 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilylamino-pyrimidin.

45,5 mmol (12,4 g) 2-trimethylsilylthio-4-trimethylsilylamino-pyrimidin oppløses i 200 ml absolutt benzen og tilsettes en oppløs-ning av 55 mmol (26,46 g) 2' ,3' ,5'-tribenzoyl-ribofuranosylklorid i. 120 ml benzen. Til den dannede grønlig-blå oppløsning tilsettes 45,5 mmol (9,44. g) sølvperklorat. Oppløsningen f arves straks gul, og der utfelles et farveløst fnokket materiale. Suspensjonen om-røres i 18 timer ved 24°C, fortynnes så med kloroform og tilsettes 5 ml ethanol.. Efter tilsetning av mettet natriumhydrogencarbonat-oppløsning (inntil pH ca. 8) tilsettes natriumthiosulfat-inntil der dannes to klare faser. Den organiske fase fraskilles, og vannfasen ekstraheres flere ganger med kloroform. De forenede organiske faser tørres over natriumsulfat og inndampes. Residuet (30,68 g) kromatograferes på aluminiumoxyd (aktivitetstrinn II nøytral), og der fåes 19,8 g farveløs sirup som krystalliserer fra methanol.

Utbytte: 18,2 g (70%) 2-thiocytidintribenzoat. Smeltepunkt 193 - 195°C.

IO mmol (5,71 g) 2-thiocytidintribenzoat oppløses i 200 ml methanolisk ammoniakk, hensettes i 48 timer ved 24°C og inndampes. Residuet oppløses i vann og ekstraheres flere ganger med ether og inndampes. Residuet omkrystalliseres fra ethanol.

Utbytte: 2,12 g (82%) 2-thiocytidin med smeltepunkt 208 - 209°C. Man fikk også 2,07 9 (80%) 2-thiocytidin ved forsåpning av IO mmol (5,71 g) 2-thiocytidintribenzoat med 1,05 ml 1 m natrium-methylatoppløsning i 50 ml absolutt methanol.

Claims

Fremgangsmåte ved fremstilling av forbindelser av den generelle formel:

hvor X er oxygen eller NH,

Y er nitrogen eller CH,

R er hydrogen, alkyl med 1-4 carbonatomer, halogen, nitro, nitril, laverealkylamino eller laverealkoxy eller -(CHg) -CO-A hvor n er 0, 1 eller 2, og A er alkoxy med 1-5 carbonatomer, amino eller laverealkylamino, og

Z er en sukkerrest ,

karakterisert ved at man av en forbindelse av den generelle formel:

hvor X, Y og R er som ovenfor angitt, fremstiller den tilsvarende disilylforbindelse med et silyleringsreagens, idet der som silyleringsreagens kan anvendes forbindelser av den generelle formel:

hvor , A2 og A^ er laverealkyl, og B er en elektroforflyttende gruppe, som f.eks. halogen, acetamido eller trimethylsilylamino, eventuelt i nærvær av et tertiært amin, og at disilylforbindelsen omsettes med et på vanlig vis beskyttet halogensukker i nærvær av

sølvperklorat ved 0 - 60°C til det beskyttede N^-nucleosidet, og at beskyttelsésgruppene avspaltes fra den erholdte forbindelse på i og for seg kjent vis, idet en estergruppe på den heterocycliske 6-r_ing eventuelt overføres til en araidgruppe.