NO134656B - - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en analogifremgangsmåte ved fremstilling av nye bis-basiske ketoner av dibenzofuran, som utviser antiviral aktivitet. Forbindelsene som fremstilles i henhold til fremgangsmåten omfatter både den basiske form og farma-søytisk akseptable syreaddisjonssalter av basen, som er represen-tert av følgende generelle formel

hvor A er en forgrenet eller uforgrenet alkylenkjede med 1-6 carbonatomer, og hver Y er gruppen

(A)

1 2

hvor R og R hver er hydrogen, lavere alkyl

med 1-4 carbonatomer, eller

(B)

gruppen

eller farmasøytisk .akseptable syre-

addis jonssalter derav.

Forbindelsene som fremstilles i henhold til foreliggende fremgangsmåte er effektive for å inaktivere eller inhibere et vidtT antall forskjellige vira.

o

■ r Hver av de basiake ketongrupper, dvs. gruppen -C-A-Y, av formel I, kan være knyttet til en av benzenringene ,-. i det tricycliske ringsystém av dibenzofuran, ved utbytning av hvilke som helst av de fire hydrogenatomer i benzenringeh,-''--.<• til "hvilken slike atomer Ver knyttet. Således kan den ene av gruppene være knyttet til hvilken som helst av stillingene 1 - 4 i det tricycliske ringsystém, og den annen kan være knyttet til hvilken som helst av stillingene 6-9. Fortrinnsvis er den ene av de basiske ketongrupper knyttet til 2-stillingen, og den annen enten til 6- eller 8-stillingen i det tricycliske ringsystém.

Som det fremgår av formel I og dens beskrivelse kan for-

bindelsene ha strukturer hvori Y er gruppen

som vist mer fullstendig i formel II, eller Y kan være gruppen som er vist mer fullstendig i formel III.

I formlene II og III har de forskjellige symboler, dvs.

2

A, R „ og R * de tidligere angitte betydninger.

Hvert av symbolene A i forbindelsene av de ovenfor vi9te formler har betydningen en alkylengruppe med 1-6 carbonatomer, som kan være forgrenet eller uforgrenet, eksempelvis -CHD-(CH_) - , hvor s er et helt tall fra 0 til 5, eller en forgrenet kjede. Hver av al-kylengruppene som representeres av A kan være like eller forskjellige. Fortrinnsvis er disse grupper like. Som eksempel på alkylengrupper som kan representeres av A kan nevnes: methylen, 1,2-ethylen, 1,3-propylen, 1,4-butylen, 1,5-pentylen, 1,6-hexylen, 2-methyl-l,4-butylen, 2-ethyl-l,4-butylen, 3-methyl-l,5-pentylen.

Hver av aminqruppene i forbindelsene ifolae formel II.

dvs.

kan være en primær, sekundær eller tertiær amingruppe. Hver R1 . og R <2> er hver hydrogen eller lavere alkyl med 1-4 carbonatomer., Fortrinnsvis er hver av amingruppene som representeres av . en tertiær amingruppe.

Betegnelsen lavere alkyl som er anvendt under henvisning til forbindelsene av formel II, vedrører forgrenede eller ufor-grenede alkylgrupper med 1-4 carbonatomer. Som eksempler på lavere alkylgrupper som kan representeres av hver R^" eller hver R 2 i forbindelsene ifølge formel II kan nevnes: methyl, ' ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sek.-butyl.

Farmasøytisk akseptable syreadd^sjonssalter av de basiske forbindelser som fremstilles ifølge foreliggende oppfinnelse, er de av egnede inorganiske og organiske syrer. Egnede inorganiske syrer er eksempelvis saltsyre, hydrobromsyre, svovelsyre eller fosforsyre. Egnede organiske syrer er eksempelvis, carboxylsyrer, slike som eddiksyre, propionsyre, glycolsyre, melkesyre, pyrodrue-syre, malonsyre, ravsyre, fumarsyre, eplesyre, vinsyre, sitron-syre, ascorbinsyre, maleinsyre, benzoesyre, hydroxybenzoesyre, fenyleddiksyre, kanelsyre, salicylsyre, 2-fenoxybenzoesyre eller sulfonsyrer, slike som ntethansulfonsyré,'2-hydroxyethansulfonsyre. -Mono- eller di-salter kan dannes, og saltene kan være hydrerte eller i det vesentlige vannfrie.

Særlig foretrukne forbindelser med antiviral effekt ved oral administrering er: 2,8-bis(4-morfolinbutyryl)dibenzofuran, 2,8-bis £2-(diethylamino)acetyljdibenzofurandihydrokloridhemi-hydrat, 2,8-bis f2-(dimethylamino)-acetyl]dibenzofurandihydroklor-iddihydrat. Disse forbindelser er generelt mer aktive oralt enn de andre forbindelser som fremstilles ifølge fremgangsmåten. .. Analogifremgangsmåten ved fremstilling av forbindelsene er illustrert ved følgende reaksjonsskjerna: 1 det ovenfor viste reaksjonsskjema har A og Y de tidligere betydninger, hver Hal er enten klor, brom eller jod. Bis-(co-hal-bgenalkanoyl)dibenzofuran derivatet, 1, hvor substitusjonsstillingen er 2,8- eller 2,6- kan fremstilles ved Friedel-Craft-acylering av dibenzofuran. Av egnede acyleringsmidler som kan anvendes, kan f.eks. nevnes: kloracetylklorid, bromacetylbromid, 3-klorpropionylklorid, 4-klorbutyrylklorid, 5-klorvalerylklorid, 5-klor-4-methylvalerylklor- id, 5-klor-3-methylvalerylklorid.

Det er åpenbart for en fagmann at acetyleringsreaksjonen kan utfores i et antall opplosningsmidler og katalysert av et antall Lewis syrer. Reaksjonstemperaturen og reaksjonstiden kan varieres slik at der erholdes optimale reaksjonsbetingelser. En foretrukken fremgangsmåte er å omsette én ekvivalent dibenzofuran med 2,5 ekvivalenter av acyleringsmidlet i methylenklorid efterfulgt av en por-sjorisvis tilsetning av aluminiumklorid. Reaksjonstemperaturen holdes under 0"C under kontinuerlig omroring. Eftér fullstendig tilsetning kan temperaturen heves til 25 - 40°C i 12 - 36 timer. Reaksjonsblan-dingen opparbeides på vanlig måte ved spaltning av det dannede kom-pleks med isvann/HCl. Det erholdte produkt omkrystalliseres fra methylenklorid eller kloroform. Fremgangsmåten kan varieres slik. at der er en omvendt tilsetning av acetyleringsmiddel og Lewis-syre, eller en omvendt tilsetning av det aromatiske hydrocarbon og Lewis-syre. Det mere reaktive halogenderivat, dvs. bis (co-jodalkån-oyl)dibenzofuran kan fremstilles fra det tilsvarende bis-klorderivat under anvendelse av en halogenutbyttereaksjon under de betingelser som anvendes ved en Conant-Finkelstein reaksjon.

Av typiske aminer, 2, som er nyttige ved den ovenfor nevnte reaksjon kan eksempelvis nevnes: ammoniakk eller en forbindelse som er en potensiell kilde for ammoniakk, eksempelvis hexamethylentetramin, primære aminer, slike som ethylamin,. propylamin. ;

sekundære aminer, slike som diethylamin, morfolin,

Amineringen av bis-(co-halogenalkanoyl)dibenzofuran, 1, kan utfores under et antall forskjellige betingelser. F.eks. kan forbindelsen 1 oppvarmes sammen med et stort overskudd av aminet 2, overskuddet a» amiri tjener som reaksjonsmedium og som hydrogenhalogenidakseptor. Denne metode er spesielt egnet hvor der anvendes lett til-gjengelige aminer, overskuddet av amin kan lett fjernes fra reaksjons-blandingen, eksempelvis ved destillasjon under redusert trykk, eller ved vasking av produktet med vann; eller én ekvivalent av forbindelsen 1 omsettes med 4 ekvivalenter av aminet 2, som kan oppvarmes sammen i én eller flere av forskjellige typer opplosningsmiddel, eksempelvis et aromatisk opplosningsmiddel, slik som benzen, toluen, xylen eller ethere, slike som tetrahydrofuran, dioxan i eller ketoner, slike som aceton, butanon > eller

aprotiske opplosningsmidler som N,N-dimethylformamid, N,N-dimethyl-acetamid, dimethylsulfoxyd; eller blandinger av. disse, opp-losningsmid ler med vann. Reaksjonen mellom forbindelsen 1 hvor halo-genet er klor, og aminet 2, fremmes ofte ved tilsetning av enten natrium-eller kaliumjodid, idet jodidet anvendes enten i katalytiske-eller stokiometriske mengder. I visse tilfelle er det fordelaktig å anvende to ekvivalenter av aminet 2 for hver ekvivalent av bis-(co-ha-logenalkanoyl) dibenzofuran 1, idet der anvendes et overskudd av en

inorganisk base, slik som pulverisert natrium- eller kaliumcarbonat,

som en hydrogenhalogenidakseptor. Reaksjonen vil normalt forlbpe i 12 - 72 timer ved temperaturer på 20 - 150°C. Da der anvendes for-flyktige aminer, utfores reaksjonen best under trykk i egnede trykk-reaktorer eller autoklaver.

Der er funnet at forbindelsene som fremstilles ifolge foreliggende oppfinnelse er effektive ved inaktivering eller inhibering av et bredt antall arter av vira, og kan således anvendes som antivira-

le forbindelser. Disse forbindelser er effektive til å forhindre eller inhibere de karakteristiske virussykdomssymptomer i en vert, ved et bredt antall applikasjonsmetoder og sammensetninger. De kan administreres for en antiviral effekt på måter som underkaster verten, eller en slik vert og virus, for de aktive bestanddeler. Verten underkastes effekten av de aktive forbindelser ved å bringe sammen de aktive forbindelser og verten, f.eks. ved påforing eller ved å bringe verten i kontakt med slike aktive bestanddeler, el3e r ved enkelt å admi-nistrere de aktive bestanddeler, til verten. Dette innbefatter å un<i derka9te verten effekten av en slik aktiv bestanddel for infeksjon med en virus, dvs. profylaktisk anvendelse, såvel som å underkaste verten effekten av en slik bestanddel efter infeksjon, dvs. terapeutisk anvendelse. Således vil det i levedyktig biologisk vertsmateriale som underkastes effekten av de aktive forbindelser, formering av vira inhiberes når verten infiseres, for eller efter behandling med slike midler. Også administrasjon ad forskjellige veier av de aktive bestanddeler til en dyrevert, for eller efter infeksjon med en virus, forhindrer eller inhiberer formering av vira og utvikling av de forskjellige sykdomsbetingeiser, som er karakteristiske for den spesiel-

le virus.... „_ _..

Med betegnelsen "infeksjon" menes kun invasjon i verten av

en patogen virus. Med betegnelsen "vert" menes dyr som er istand til å fremme dannelse av interferon og som kan underholde formering av en virus. Fortrinnsvis er verten et varmblodig dyr eller patte-

dyr. Som eksempler på verter for forskjellige vira kan nevnes varmblodige dyr som fugler eller pattedyr, omfattende mus, rotter, marsvin, gerbil, fritter og lignende.

Aktivitetsmekanismen for de aktive bestanddeler er ikke

definitivt fastlagt. Imidlertid fremmer blant annet de aktive be-

stånddeler dannelse av interferon når en vert underkastes effekten av de aktive bestanddeler. Interferon er en kjent antiviral substans som er involvert ved inhibering av formering av vira i nærvær av en verts-celle. Noen av de vira hvis formering inhiberes av interferon er gitt i Horsfall and Tamm, "Viral and Rickettsial Infections of Man", 4.ut-gave (1965), J.B. Lippencott Company, sider 328 - 329.

Forbindelsene som fremstilles ifolge foreliggende fremgangsmåte kan administreres til dyr, slik som varmblodige dyr, og spesielt pattedyr for å forhindre eller inhibere infeksjoner av: picorna-virus, f.eks. encephalomyocarditis, myxovirus, f.eks, Influenza (Jap/305), arbovirus, f.eks. Semliki forste, Herpes virus gruppen, f.eks. herpes simplex og poxvira, f.eks. Vaccinia IHD. Når administrasjonen skjer for infeksjon, dvs. profylaktisk, er det foretrukket at administrasjonen skjer innen 0-96 timer for infeksjon av dyret med det patogene virus. Ved terapeutisk administrasjon for å inhibere en infeksjon, er det foretrukket at administrasjonen skjer innen en dag eller to efter infeksjon med den patogene virus.

Den administrerte dose vil være avhengig av den virus for hvilken behandling eller profylakti er onsket, arten av det involver-te dyr, dets alder, helse, vekt, grad av infeksjon og type av eventu-ell samtidig behandling, behandlingens hyppighet og naturen av den tilsiktede effekt. Eksempelvis kan den daglige dose av de aktive bestanddeler generelt være i området mindre enn 0,1 til over 5O0 mg/kg kroppsvekt. Eksempelvis kan dosenivåene for den administrerte aktive bestanddel være: intravenost 0,1 - IO mg/kg, intraperitonalt 0,1 - 50 mg/kg, subcutant 0,1 - 250 mg/kg, oralt IO - 250 mg/kg, intranasal inndrypning 0,1 - IO mg/kg og som aerosol 0,1 - IO mg/kg dyrevekt.

De følgende eksempler illustrerer fremstillingen av de nye forbindelser.

Eksempel i*

2, 8- bis( 4- morfolinbutyryl) dibenzofuran

En blanding av 17,0 g (0,045 mol) 2,8-bis(4-klorbutyryl)-dibenzofuran, 58,4 g (0,8 mol) morfolin og 2,0 g kaliumjodid i 500 ml butahon ble oppvarmet under tilbakelop 72 timer og derefter filtrert. Filtratet ble konsentrert til halvparten av det opprinnelige volum og derefter fortynnet med 600 ml vann. Det resulterende halv-faststoff ble renset ved kromatografering på noytralt aluminiumoxyd under anvendelse av methylenklorid som elueringsmiddel. Opplosningsmidlet ble

fjernet fra den oppsamlede fraksjon, hvilket ga et fast residuum som ble omkrystallisert fra pentan, hvilket ga den onskede forbindelse.

Sm.p. 98 - 99°C, EtOH 1% 147Q_

A. „ , .. J\ maks. ' lem

Eksempel 2

2,8-bis(diethylaminoacetyl)dibenzofurandihydrokloridhemi-hydrat

Til en blandiing av 25,0 g (0,078;mol) 2,8-bis (kloracetyl) dibenzofuran [m. Tomita,J.Pharm. Soc. Japan 5_6, 906-912 (1936)]

og 100 ml tetrahydrofuran avkjølt i et is/vannbad, ble tilsatt 100 ml diethylamin i løpet av 20 min. Blandingen ble kokt forsiktig under tilbakeløp 24 timer, og derefter filtrert varm. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, og det gjenværende faststoff ble utrørt

med ether og vasket. Filtratet ble behandlet med en etherisk opp-løsning av HC1, hvilket ga den ønskede forbindelse som ble omkrystallisert fra en blanding av methanol og ether, og derefter fra

ethanol og ether. Sm.p. 225 - 227°C (spaltn.) H20 254^ E<l%><1>250.

.. maks. 1 cm Eksempel 3

2,8-bis(dimethylaminoacetyl)dibenzofurandihydroklorid-dihydrat

En blanding av 24,5 g (0,076 mol) 2,8-bis(kloracetyl)-dibenzofuran, 350 ml tetrahydrofuran og 30,0 g (0,668 mol) dimethylamin (gass), ble oppvarmet til 60°C i 24 timer i en Paar trykkbombe. Efter avkjoling til romtemperatur ble: blandingen filtrert, og filtratet tdr-ket under vakuum. Det gjenværende faststoff ble omrort med ether,

filtrert, og filtratet behandlet med etherisk HC1, hvilket ga den on-skéde forbindelse som ble omkrystallisert fra en blanding av ethanol

J- ilbg butanon. Sm.p.

Fra US patentskrift 3.082.201 er det kjent beslektede forbindelser med antiviral aktivitet.

En representativ forbindelse ifølge US 3.082.201, nemlig dibenzofuran-2,8-bis-glyoxal (RMI-14.999) ble testet med hensyn til aktivitet overfor encefalomyocarditis virus av RNA picornavirus-typen i fem kombinasjoner av behandlingssystemer og doseringsnivåer, nemlig:

1) Profylaktisk og terapeutisk subcutan administrering,

2) Profylaktisk og terapeutisk subcutan administrering av

50 mg/kg kroppsvekt.

3) Profylaktisk og terapeutisk subcutan administrering av

10 mg/kg kroppsvekt.

4) Profylaktisk oral administrering av 250 mg/kg kroppsvekt.

5) Profylaktisk og terapeutisk oral administrering av

50 mg/kg kroppsvekt.

Den undersøkte forbindelse var inaktiv ved samtlige behandlingssystemer og doseringsnivåer.

I den etterfølgende tabell A er resultatene av tilsvarende forsøk utført med representative forbindelser ifølge oppfinnelsen angitt.

Som det fremgår av tabell A var forbindelsene aktive ved samtlige behandlingssystemer og doseringsnivåer.

Fra norsk patentskrift 131.836 er det likeledes kjent dibenzo-thiofenforbindelser som utviser antiviral aktivitet. Det er imidlertid funnet at foreliggende forbindelser må ansees som fordel-aktige i forhold til forbindelsene ifølge norsk patentskrift 131.836 på grunn av deres evne til å fremkalle meget høyere nivåer av serum interferon i verten 24 timer efter oral administrering.

bisy - Eksempelvis ga forbindelsen 2,8-/L 2-(dimethylamino) acetylj - dibenzofuran en titer på 25,600 enheter interferon i museserum 24 timer efter oral administrering åv 250 mg/kg av forbindelsen, mens den tilsvarende dibenzothiofenforbindelse, nemlig 2,8-bis- [2-(di-methylamino) acetyl] dibenzothiof en produserte en titer på bare 6400 enheter interferon i museserum 24 timer efter behandling med 250 mg/kg av forbindelsen.

"'Forsølt i - 5 viser in vivo antivirale forsok med forbindelsene, også betegnet som de aktive forbindelser som fremstilles i henhold til oppfinnelsen. I hvert av disse forsøk ble forbindelsene funnet å utvise antiviral effekt. I hvert av forsøkene utviste forbindelsene den antivirale aktivitet ved å forlenge den midlere

dddsdag for de behandlede dyr, sammenligning med kontroildyrene, under observasjonsperioden. Dosenivåene av forbindelsene som ble anvendt ifolge -forsøkene var i området 10 - 250 mg/kg av dyrets kropps

vekt hver gang forbindelsen ble administrert.

''* Tabell A viser de aktive bestanddeler som ble administrert i hvert forsøk Selv om det er antatt at overskriftene i forsøkene er selvforklarende, skal noen av overskriftene forklares som folger. Begrepet "behandling" var profylaktisk eller terapeutisk eller begge. Begrepet "volum" refererer seg til volumet pr. dose av den administrerte komposisjon som inneholdt den aktive bestanddel opp-1 lost i sterilt vann, som også inneholdt 0,15 % hydroxyethylcellulose.

Kontrolldyrene fikk den samme dose av det samme volum av nevnte bærer, men som ikke inneholdt den aktive bestanddel.

Claims (1)

1. Analogifremgangsmåte ved fremstilling av en forbindelse med antiviral effekt av den generelle formel hvor A er en uforgrenet eller forgrenet alkylenkjede med 1-6 carbonatomer, og hver Y er gruppen (A) hvor R 1 og R 2 hver er hydrogen, lavere alkyl med 1 - 4 carbonatomer, eller eller et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt derav, karakterisert ved at en forbindelse av formelen omsettes i et opplosningsmiddel med en forbindelse av formelen hvor A og Y har de tidligere angitte betydninger og Hal betyr klor, brom eller jod, og om onsket at den frie base av formel I omsettes med en farmakologisk akseptabel syre.

2. Fremgangsmåte ifolge krav 1 ved fremstilling av 2,8- . bis-[2-(diethylamino)acetyl]dibenzofuran, karakterisert; ved at 2,8-bis-(kloracetyl)dibenzofuran omsettes med diéthylamin. i3."■■y.v i Fremgangsmåte ifolge krav 1 ved fremstilling av 2,8-bis-[2-(dimethylamino)acetylJdibenzofuran, karakteri- ser t ved at 2,8-bis-(kloracetyl)dibenzofuran omsettes med dimethylamin.. :

4.V , Fremgangsmåte ifolge krav 1 ved fremstilling av 2,8-bis-(4-rabrfolinbutyryl)dibenzofuran, karakterisert ved at 2,8-bis(4-klorbutyryl)dibenzofuran omsettes med morfolin.