NO180534B - Nonatetraensyrederivat, farmasöytisk preparat inneholdende dette, og anvendelser av derivatet - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører forbindelsen (all-E)-3,7-dimetyl-9-[3,5-dimetyl-2-(nonyloksy)-fenyl]-2,4,6,8-nonatetraensyre som har formelen

og dens farmasøytisk akseptable salter og dens farmasøytisk akseptable hydrolyserbare estere.

Oppfinnelsen omfatter også farmasøytiske preparater som inneholder ovennente forbindelser og en farmasøytisk akseptabel bærer, og anvendelse av forbindelsen med formel I, dens farmasøytisk akseptable salter og dens farmasøytisk akseptable hydrolyserbare estere, til fremstilling av farmasøytiske preparater for å nedsette talgsekresjon og forhindre eller behandle talg-relaterte forstyrrelser, så som akne. Det er kjent at inhibering av talgproduksjon og/eller sekresjon er effektivt ved behandling og/eller forebyggelse av lidelser,

som f.eks. akne. Lidelser forårsaket av øket talgsekresjon innbefatter også dermatologiske tilstander som seborré, inklu-dert flass, fet hud, fett hår, akne (whiteheads og black-heads).

Lokal og peroral administrasjon av forbindelsen med

formel I, dens farmasøytisk akseptable salter og dens farm-asøytisk akseptable hydrolyserbare estere, har effekt ved behandling av alle former for akne, herunder inflammatoriske og ikke-inflammatoriske former.

De farmasøytisk akseptable saltene innbefatter ethvert

salt som i kjemisk henseende er akseptabelt for forbindelsen med formel I og er humanmedisinsk anvendelig i et farmasøytisk akseptabelt preparat. Alle slike konvensjonelle, farmasøytisk akseptable salter av forbindelsen med formel I kan benyttes. Blant konvensjonelle salter som kan benyttes regnes base-

salter, som for eksempel alkalimetallsalter, så som natrium- eller kalium-, jordalkalimetallsalter som kalsium-eller magnesium- og ammonium- eller alkylammoniumsalter.

Forbindelsen med formel I kan administreres i form av dens farmasøytisk akseptable hydrolyserbare estere. En hydrolyserbar ester er i henhold til foreliggende oppfinnelse en som hydrolyseres under fysiologiske betingelser til forbindelsen med formel I. Enhver farmasøytisk akseptabel hydrolyserbar ester av forbindelsen med formel I kan benyttes i preparatene i henhold til oppfinnelsen. Slike estere er aromatiske estere som benzyl (OBzl) eller benzyl substituert med lavere alkyl, halogen, nitro, tio, eller substituert tio, dvs. lavere alkyl, t-butyl, cyklopentyl, cykloheksyl, cykloheptyl og 9-fluorenyl-metyl.

Forbindelsen med formel I og dens farmasøytisk akseptable salter og hydrolyserbare estere, kan fremstilles etter enhver kjent vanlig fremgangsmåte. Nærmere bestemt kan forbindelsen med formel I og dens farmasøytisk akseptable salter, fremstilles ved en fremgangsmåte som omfatter omsetning av en forbindelse med formel II

hvor Ph er fenyl og X" er et anion,

under Wittig-betingelser med en forbindelse med formel III

og, om ønskes, hydrolyse av alkylestergruppen for å oppnå karboksylsyren med formel I.

Farmasøytisk akseptable hydrolyserbare estere av forbindelsen med formel I kan fremstilles på konvensjonell måte fra forbindelsen med formel I, for eksempel ved omsetning av Forbindelse I med en alkohol.

Fremstillingen av forbindelser med formel I, estere og salter derav, er beskrevet mer detaljert nedenfor:

Eksempel 1

Trinn 1: Fremstilling av 2- hydroksymetyl- 4, 6- dimetylfenol (1)

En blanding av 24,4 g 2,4-dimetylfenol, 2,44 g pulveri-sert Na2C03, 7,8 g paraformaldehyd og 7,8 ml isopropanol, ble omrørt ved 90-100°C (bad-temperatur) i 5 timer. Etter avkjøl-ing til romtemperatur ble blandingen helt over i 200 ml IN NaOH og vasket med 4 x 50 ml = 200 ml diklormetan (Fisher). De kombinerte diklormetan-vaskevæskene ble ekstrahert med 20 ml vann. De kombinerte vandige lagene ble surgjort med 20 ml kons. HC1 (Fisher) og ekstrahert med 100 ml + 25 ml = 125 ml diklormetan. De kombinerte diklormetanekstraktene ble vasket med 50 ml saltvann, tørket over Na2S04 og konsentrert til tørrhet ved 50°C under høyvakuum for å gi 22,0 g (72,4%) rå

(1) som en brun olje.

Trinn 2: Fremstillin<g> av 2-( nonyloksy)- 3. 5- dimetylbenzen-metanol (2) . 22,0 g rå (1), 24,7 ml 1-bromnonan, 5,79 ml natrium-hydroksyd og 100 ml isopropanol ble tilbakeløpsbehandlet over natten. 100 ml vann og 100 ml heksan ble deretter tilsatt, heksanlaget vasket med 20 ml IN NaOH og de kombinerte vandige lagene ekstrahert med 50 ml heksan. Deretter ble de kombinerte heksanoppløsningene ekstrahert med 100 ml + 2 x 50 ml = 200 ml 95% metanol. De kombinerte metanolekstraktene ble konsentrert. Gjenværende vann ble fjernet azeotropt med 100 ml toluen.

Resten ble tørket ved 50°C under høyvakuum for å gi 28,1 g rå

(2) som en brun olje.

Trinn 3: Fremstillin<g> av 1-( klormetyl)- 3, 5- dimetyl- 2-( nonyloksy) benzen (3)

En blanding av 28,1 g (2), 28 ml isopropanol og 42 ml kons. HC1 ble forsiktig tilbakeløpsbehandlet over natten, blandingen avkjølt til romtemperatur og fortynnet med 140 ml heksan og 140 ml vann. Det organiske lag ble vasket igjen med 140 ml vann. Deretter ble det organiske lag vasket med 4 x 50 ml = 200 ml 90% vandig metanol. Heksanoppløsningen ble tørket over Na2S04 og konsentrert til tørrhet ved romtemperatur under høyvakuum for å gi 27,6 g (3) som en lysebrun olje.

Trinn 4: Fremstilling av ( all- E)- 3, 7- dimetyl- 9-\ 3 . 5- dimetyl-2-( nonyloksy) fenyll- 2, 4, 6. 8- nonatetraensyre-etylester (5)

27,6 g (3), 21,9 g trifenylfosfin og 93 ml toluen ble tilbakeløpsbehandlet over natten. Blandingen ble avkjølt med et is/vann-bad og deretter tilsatt 74,4 ml av en 1,0M t-BuOH-oppløsning av t-BuOK (0,8 ekv.) i løpet av 15 min., hvorpå den resulterende røde suspensjon ble omrørt i 1 time ved romtemperatur. Etter avkjøling til -10°C ble 15,5 g 7-formyl-3-metyl-okta-2,4,6-trien-l-syre-etylester (4) (tørket under høyvakuum før bruk) tilsatt ved hjelp av 15 ml toluen. Kjøle-badet ble fjernet og blandingen omrørt ved romtemperatur i 3 timer.

Reaksjonsblandingen ble vasket med 2 x 100 ml = 200 ml vann. De kombinerte vandige lagene ble ekstrahert med 50 ml toluen. Etter tørking over Na2S04, ble de kombinerte toluen-oppløsningene konsentrert til tørrhet under høyvakuum ved lavere temperatur enn 35°C. Residuet ble oppløst igjen i en blanding av 200 ml heksan, 200 ml metanol og 20 ml vann. Metanol-laget ble ekstrahert med 2 x 100 ml = 200 ml heksan. De kombinerte heksanoppløsningene ble konsentrert til tørrhet under høyvakuum ved lavere temperatur enn 35°C for å gi rå (5) som en rød olje. Denne ble oppløst i 100 ml etanol. Etter avkjøling med et is/vann-bad, ble en podekrystall av (5) tilsatt. Den resulterende suspensjon ble oppbevart i kjøleskap over natten. Det gule bunnfallet ble frafiltrert og vasket med 100 ml kald 95% etanol. Tørking ved romtemperatur under høy-vakuum ga 21,64 g av (5) som et gult faststoff.

Trinn 5: Fremstilling av ( all- E)- 3. 7- dimetyl- 9-\ 3 . 5- dimetyl-

2-( nonyloksy) fenyll- 2, 4. 6. 8- nonatetraensyre (I)

21,6 g av (5), 216 ml etanol og 19,1 ml (191 mmol) ION NaOH ble tilbakeløpsbehandlet i 20 minutter. Etter fjerning av varmekilden, ble reaksjonskolben nedsenket i et vannbad og tilsatt 19,1 ml eddiksyre mens blandingen enda var varm. Etter avkjøling til romtemperatur ble det tilsatt en podekrystall, hvoretter blandingen ble avkjølt med et is/vann-bad. Etter omrøring i 30 minutter ble den resulterende gule suspensjonen anbragt i fryseskap over natten.. Det gule faststoffet ble

frafiltrert og vasket med 100 ml kald 90% vandig EtOH. Tørking under høyvakuum ga 17,84 g rå (I) som et gult faststoff. Dette ble suspendert i 357 ml etanol. Deretter ble 4,5 ml kons. NH40H tilsatt. Etter oppløsning, ble 4,5 ml eddiksyre tilsatt og den resulterende suspensjon anbragt i fryseskap over natten. Det gule faststoffet ble frafiltrert, vasket med 100 ml kald 95% vandig EtOH og tørket ved romtemperatur under høyvakuum over natten for å gi 15,3 av (I) (ifølge HPLC 98,2% ren) som et gult faststoff. Dette materialet ble suspendert på nytt i 306 ml etanol. Deretter ble 3,8 ml kons. NH40H tilsatt. Etter oppløsning, ble det tilsatt 3,8 ml eddiksyre. Den resulterende suspensjon ble anbragt i et fryseskap over natten. Det gule faststoffet ble frafiltrert, vasket med 100 ml kald 95% vandig EtOH og tørket ved romtemperatur under høyvakuum over natten for å gi 13,56 g av (I) som et gult faststoff; ifølge HPLC-analyse 98,9% rent.

Anmerkning: Retinoidene, spesielt deres oppløsninger, bør i størst mulig utstrekning skånes mot lys!

I henhold til denne oppfinnelse kan ovennevnte forbindelse med formel I, eller dens farmasøytisk akseptable salter og dens farmasøytisk akseptable hydrolyserbare estere (med samlebetegnelsen "virkestoff i henhold til oppfinnelsen"), tilveiebringes med det formål å redusere talgsekresjon og akne-lesjoner, og således være anvendelig ved forebyggelse eller behandling av lidelser som akne, ved at den administreres i farmasøytisk akseptable perorale eller lokalt anvendelige preparater. Disse farmasøytiske preparatene i henhold til oppfinnelsen inneholder virkestoffet i henhold til oppfinnelsen, sammen med et forlikelig farmasøytisk akseptabelt bærermateriale. Ethvert konvensjonelt bærermateriale kan benyttes. Bærermaterialet kan være et organisk eller uorganisk, inert bærermateriale egnet for peroral administrasjon. Egnede bærere innbefatter vann, gelatin, gummi arabicum, laktose, stivelse, magnesiumstearat, talk, vegetabilske oljer, polyalkylenglykoler, vaselin og lignende. De farmasøytiske preparatene kan dessuten inneholde andre farmasøytisk virksomme midler. Ytterligere tilsetningsstoffer, så som smaksforbedrende midler, konserveringsmidler, stabilisatorer, emulgeringsmidler, buffere og lignende, kan tilsettes i overensstemmelse med akseptert galenisk praksis.

De farmasøytiske preparatene kan tilberedes i en hvilken som helst konvensjonell form, herunder: (a) en fast form for peroral administrering, så som tabletter, kapsler, piller, pulvere, granuler og lignende,- og (b) preparater for lokal administrasjon, så som oppløsninger, suspensjoner, salver, kremer, gel, mikroniserte pulvere, aerosoler og lignende. De farmasøytiske preparatene kan steriliseres og/eller inneholde adjuvanser, så som konserveringsmidler, stabilisatorer, fukte-midler, emulgeringsmidler, salter til variasjon av det osmotiske trykk og/eller buffere.

For lokal administrering på huden, fremstilles ovennevnte preparater fortrinnsvis som salver, tinkturer, kremer, gel, oppløsninger, lotions, spray, suspensjoner, shampo, hårsåper og lignende. I praksis kan enhver konvensjonell sammensetning som benyttes i hodebunn eller på hud, utnyttes i overensstemmelse med oppfinnelsen. Blant de foretrukne metoder for påfør-ing av preparatet inneholdende virkestoff i henhold til oppfinnelsen, er påføring av virkestoffet i henhold til oppfinnelsen i form av en gel, lotion eller krem. Det farma-søytiske preparat for lokal påføring på huden, kan fremstilles ved å blande ovennevnte virkestoff i henhold til oppfinnelsen, med ugiftige, terapeutisk inerte, faste eller flytende bærere som vanligvis benyttes i slike preparater. Disse preparatene bør inneholde minst 0,01 vekt% av virkestoffet i henhold til oppfinnelsen, beregnet på basis av preparatets totalvekt. Siden virkestoffet i henhold til oppfinnelsen er relativt ugiftig og lite irriterende, kan det i preparater for lokal anvendelse, inngå i mengder på mer enn 0,2%. Det er å foretrekke at disse preparatene inneholder ca. 0,01 til 0,2% virkestoff i henhold til oppfinnelsen, beregnet på basis av preparatets totalvekt. Det foretrekkes også å påføre disse preparatene på huden én eller to ganger per dag. Preparatene påføres etter behov. Virkestoffet i henhold til oppfinnelsen kan i praksis også påføres som vandig oppløsning eller som en alkoholoppløsning, f.eks. etylalkohol.

Ved fremstillingen av de ovenfor beskrevne lokalt anvendelige preparatene kan det benyttes tilsetningsstoffer som konserveringsmidler, fortykningsmidler, parfymer og lignende konvensjonelle stoffer som inngår i den farmasøytiske sammensetning av lokalt anvendelige preparater. Dessuten kan det i de lokalt anvendelige preparatene inngå antioksydanter. De konvensjonelle antioksydantene som kan benyttes i disse preparatene innbefatter N-metyl-a-tokoferolamin, tokoferoler, butylert hydroksyanisol, butylert hydroksytoluen, ethoxyquin og lignende.

Konvensjonelle parfymer og lotions som i alminnelighet benyttes i hårpreparater for lokal påføring, kan benyttes i henhold til oppfinnelsen. Om ønskes, kan dessuten konvensjonelle emulgeringsmidler benyttes i de lokalt anvendelige preparatene i henhold til oppfinnelsen.

Salve-formuleringer som inneholder virkestoffet i henhold til oppfinnelsen, kan omfatte blandinger av et halv-fast petroleumshydrokarbon og en flytende dispersjon av virkestoffet i henhold til oppfinnelsen.

Kremer som inneholder virkestoffet i henhold til oppfinnelsen, omfatter fortrinnsvis emulsjoner dannet av en vandig fase i et fuktemiddel, et viskositetsstabiliserende middel og vann, en oljefase av en fettalkohol, et halv-fast petroleumshydrokarbon og et emulgeringsmiddel og en fase som inneholder virkestoffet i henhold til oppfinnelsen dispergert i en vandig stabilisator-buffer-oppløsning. Stabilisatorer kan tilsettes det lokalt anvendelige preparat. Enhver konvensjonell stabilisator kan benyttes i henhold til oppfinnelsen. I oljefasen virker fettalkohol-komponentene som stabilisatorer. Disse fettalkohol-komponentene oppnås fortrinnsvis gjennom reduksjon av en langkjedet, mettet fettsyre med minst 14 karbonatomer. Krem-baserte farmasøytiske preparater som inneholder virkestoffet i henhold til oppfinnelsen, kan for eksempel være sammensatt av vandige emulsjoner som inneholder en fettalkohol, halv-fast petroleumshydrokarbon, 1,2-etylen-glykol og et emulgeringsmiddel.

En foretrukket peroral doseringsform omfatter tabletter, kapsler av hård eller myk gelatin, metylcellulose eller et annet egnet materiale som lett oppløses i fordøyelsestrakten. De perorale doseringer som i henhold til oppfinnelsen kan være aktuelle, vil variere med behandlende leges vurdering av den enkelte pasients behov. I alminnelighet benyttes imidlertid en døgndose på fra ca. 0,01 mg til ca. 3 mg per kg legemsvekt, og fortrinnsvis fra ca. 0,025 mg til ca. 1,5 mg per kg legemsvekt. Denne dose kan administreres i overensstemmelse med en doseringsforskrift fastsatt av legen ut fra pasientens behov.

Det ligger likeledes innenfor rammen av foreliggende oppfinnelse å inkorporere virkestoffet i henhold til oppfinnelsen i en hvilken som helst ønsket mengde for enteral administrering i en peroral enhetsdoseform. Det er imidlertid å foretrekke at preparatene formuleres på en slik måte at hver doseform inneholder fra ca. 1 mg til ca. 50 mg av virkestoffet i henhold til oppfinnelsen sammen med passende terapeutisk inerte fyllstoffer og fortynningsmidler. Særlig foretrekkes inkorporering av slike doser i myke gelatinkapsler og i

tabletter.

I henhold til foreliggende oppfinnelse kan virkestoffet i henhold til oppfinnelsen, som oppviser en uttalt talg-nedsettende og anti-akne aktivitet, derfor benyttes i ovennevnte farmasøytiske preparater for å nedsette talgsekresjon og for behandling av akne.

Behandlingsdosen avhenger av administreringsmåte og av den enkeltes alder, vekt og akne-tilstand.

Forbindelsen i henhold til oppfinnelsen ble undersøkt i flere akne-modeller som beskrevet nedenfor i Eksempel 2-4. Den var ugiftig i alle undersøkte doser.

Eksempel 2

In vitro- undersøkelse

Talgproduserende celler isoleres fra voksne personers talgkjertler, tatt fra ansiktshud som var fjernet under kosmetisk kirurgi, og dyrkes på et lag av 3T3 fibroblaster fra mus (Rheinwald & Green, 1975). Metoden er basert på arbeid av Karasek (1986) og innebærer selektivt uttak av epidermale keratinocytter med et elektro-keratom, hvilket etterfølges av enzymatisk og mekanisk dissosiasjon av talgproduserende celler fra talgkjertler (Doran et al., 1991).

Cellene dyrkes i Iscoves medium, inneholdende 10% føtalt kalveserum og 4 ( tg/ ml deksametason.

Cellene sås ut i et medium uten testforbindelsen og gis deretter testforbindelsen i friskt medium 24-48 timer etter opprinnelig utsåing. Kulturene gis friskt medium inneholdende testforbindelsen, hver 48. time. Høstningsdagen renses kulturene med 0,03% EDTA i PBS for kun å fjerne 3T3-fibro-blastene, hvorpå det foretas inkubering i 0,05% Trypsin/0,03% EDTA. Cellene suspenderes, blandes grundig for fremstilling av en enkeltcelle-suspensjon og telles i et hemocytorneter.

Samtlige testforbindelser behandles på følgende måte. Stamm-oppløsninger fremstilles som 10<2>M oppløsninger i DMSO og oppbevares ved -20°C i mørke. Oppløsningene benyttes aldri etter 1 måneds oppbevaring. Under den eksperimentelle bruk bringes alikvoter av oppløsningene til romtemperatur og benyttes ved fortynning til en passende konsentrasjon direkte i det komplette medium.

Forbindelsene ble undersøkt med henblikk på inhibering av proliferasjon av talgproduserende cellers vekst in vitro i følgende konsentrasjoner: IO'<6>, 10"<7>, 10"<8> og IO"<9> M. Resultatene er vist nedenfor (Tabell 1) som den mengde av forbindelse som er nødvendig for å inhibere proliferasjonen av talgproduserende celler 50% (ED50) i piM i forhold til en kontroll-kultur som kun ble behandlet med fortynningsmiddel. Disse resultatene viser at forbindelsen i henhold til oppfinnelsen inhiberer proliferasjonen av humane sebocytter.

Eksempel 3

Bestemmelse foretatt på tal<g>kjertler fra hamsterøre

Hannhamstere (Charles River Golden Syrian) med en vekt på mellom 150 og 160 gram, ble holdt i 1 måned etter ankomst, før dosering med testforbindelsene. Hamsterne ble gitt den ønskede dose enten av 13-cis-vitamin-A-syre eller Forbindelse I i prolylenglykol for undersøkelse av peroral dosering. Forbindelse I og 13-cis-vitamin-A-syre ble oppbevart ved 4°C beskyttet mot lys. Friske oppløsninger ble fremstillet hver uke.

Hamsterne ble gitt 0,2 ml medikamentoppløsning via oral intubering. Dyrene ble dosert daglig i 5 dager og etter 2 dagers opphold, igjen dosert i 5 dager inntil det var gitt 20 doser. Hamsterne ble veid ved doseringsregimets begynnelse og slutt.

Hamsterne ble avlivet ved C02-inhalasjon og ørene fjernet for histologisk vurdering. Det ene øret ble fiksert med 10% buffer-holdig formalin, behandlet for innkapsling i paraffin, oppsnittet og farvet med hematoksylin og eosin (H&E). Området med talgkjertler i tverrsnitt av hamsterører ble undersøkt ved billed-analyse under bruk av et Leitz TAS-Plus-system.

Data er angitt som gjennomsnittsarealet av 30-40 talgkjertler som % av kontroll- (oppløsningsmiddel-behandlede) snitt. Dataene er angitt i Tabell 2. Resultatene viser at forbindelsen i henhold til oppfinnelsen, når den administreres peroralt, reduserer størrelsen av de foreliggende talgkjertler fra hamsterøre.

Eksempel 4

Undersøkelse av utrikkel fra Rhino- mus

Rhino-mus av begge kjønn ble veid før forsøksstart. For undersøkelser av lokalt anvendelige testforbindelser, ble disse oppløst i 100% aceton og 100 fiL av oppløsningen anbragt på musenes rygg 1 gang per dag 5 ganger ukentlig i 3 uker. For perorale undersøkelser ble testforbindelsene oppløst i 100% propylenglykol og 100 jiL gitt ved oral intubering l gang per dag 5 ganger ukentlig i 3 uker. Den endelige kroppsvekt ble registrert ved avlivningen som ble foretatt ved C02-inhalasjon. En hudlapp fra ryggen ble skåret ut og behandlet etter his-tologiske metoder for å dekke hele objektglasset med vev. Utrikkelstørrelsen ble målt ved billed-analyse ved enten å benytte Leitz TAS-Plus-systemet eller Ultimage-systemet på en modifisert Macintosh datamaskin. Data er angitt som den pro-sentuelle forandring i forhold til oppløsningsmiddelbehandlet kontrollvev (Tabell 3 og 4). Disse resultatene viser at forbindelsen i henhold til oppfinnelsen reduserer størrelsen av Rhino-mus-utrikler når den administreres lokalt eller peroralt.

De følgende eksempler illlustrerer farmasøytiske preparater som inneholder forbindelsen med formel I i henhold til foreliggende oppfinnelse.

Eksempel 5

Perorale o<p>pløsninger

Formulering 1:

Formulering 2 :

Formulering 3 :

Formulering 4:

Formulering 5:

Eksempel 5 Kapsel- formuleringer

Frem<g>angsmåte: Oppvarm ingrediens 2 til ca. 70°C og løs opp ingrediens 2, 3, 4, 5 og 6 og bland inntil homogen oppløsning oppnås. Avkjøl til 30°C. Tilsett Forbindelse I og bland. Fyll over i myke gelatin-kapsler.

Formulering 2:

Fremgangsmåte: Ingrediens 1, 2, 3, 4 og 5 ble blandet og siktet. Den siktede pulverblandingen ble blandet på nytt i 5 minutter og fylt over i passende kapsler.

Eksempel 6

I. V. oppløsnin<g>er

Formulering 1:

Formulering 2:

Claims (7)

1. Forbindelse karakterisert ved formelen dens farmasøytisk akseptable salter og dens farmasøytisk akseptable hydrolyserbare estere.

2. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det inneholder en forbindelse ifølge krav 1 og en farmasøytisk akseptabel bærer.

3. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 ved fremstillingen av farmasøytiske preparater for nedsettelse av talgsekresjon eller forebyggelse av akne.

4. Anvendelse ifølge krav 3, hvor det farmasøytiske preparat er beregnet for peroral administrering.

5. Anvendelse ifølge krav 4, hvor det farmasøytiske preparat har form av en enhetsdose og inneholder fra 1 mg til 50 mg av nevnte forbindelse.

6. Anvendelse ifølge krav 3, hvor det farmasøytiske preparat er beregnet for lokal påføring.

7. Anvendelse ifølge krav 6, hvor nevnte preparat inneholder fra 0,01 vektprosent til 0,2 vektprosent av nevnte forbindelse.