NO762542L

NO762542L -

Info

Publication number: NO762542L
Application number: NO762542A
Authority: NO
Inventors: R C Erickson; R E Bambury
Original assignee: Richardson Merrell Inc
Priority date: 1975-07-22
Filing date: 1976-07-21
Publication date: 1977-01-25
Also published as: DK313076A; FR2318630A1; DE2632019A1; IL49720A; NL7608062A; IE43378B1; FR2318630B1; IL49720A0; CA1054146A; PH12108A; SE7608157L; IE43378L; BE844404A; AU1463676A; JPS5214796A; US3994876A; ES449604A1; ZA763205B

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte ved fremstilling av .nye 6-[ a-amino-oj-( 2 , 3-methylendioxyf enyl) - acylamido]penicillansyre-derivater som er særlig anvendbare ved behandling'av bakterieinfeksjoner ved oral administrering.

Penicillin-forbindelser tilhører en velkjent familie av antibiotica som har' vært anvendt i de siste år for behandling av infektiøse sykdommer. Et antall anvendbare penicillir ner er blitt erholdt ved å variere substitusjonen ved 6-stilling i penicillinkjernen. Søkningen fortsetter imidlertid etter nye forbindelser med en høy grad av aktivitet og en høy grad av stabilitet.

I et forsøk på å forbedre de eksisterende egenskaper til disse forbindelser, har .forsøkene vært rettet mot forbed-.

ring av substitusjonen ved 6-stillingen i penicillinkjernen. Det er funnet at nærvær av en a-amino-w-(2,3-methylendioxyfenyl)-acylamidodel ved 6-stillingen i en penicillinkjerne fører til visse nye penicillinderivater som har en forbedret aktivitet overfor, én eller flere gram-positive eller gram-negative mikroorganismer. Som antibakterielle midler er forbindelsene ifølge oppfinnelsen terapeutisk effektive ved behandling av infektiøse sykdommer fremkalt av gram-positive og gram-negative bakterier i fjærfe og dyr, innbefattet men-nesker. Ennvidere er disse forbindelser nyttige som dyrefor-supplement og som aktive bestanddeler i bakteriedrepende pre-parater anvendt som overflatedesinfeksjonsmidler.

US patentskrift 2 985 648 beskriver visse a-amino-benzylpenicillansyrederivater og er antatt å være den nærest kjente publikasjon. Ifølge dette patentskrift fremstilles dette penicillin ved omsetning av 6-aminopenicillansyre med et acyleringsmiddel slik som syreklorid, syrébromid, syre-anhydrid eller blandet anhydrid av et derivat av D-(-)-a-aminofenyleddiksyre hvori aminogruppen er beskyttet av en benzyloxycarbonyl eller annen egnet beskyttende gruppe. Etter fullførelse av acyleringsreaksjonen fjernes den beskyttende gruppe fra aminogruppen slik som ved reduksjon med hydrogen i nærvær av en katalysator.

Foreliggende oppfinnelse angår nye 6-[a-amino-to-(2,3-methylendioxyfenyl)acylamido]penicillansyre-derivater. Nærmere bestemt angår oppfinnelsen 6-[a-amino-u-(2,3-methylendioxyfenyl)acylamido]penicillan-derivater som er anvendbare som antibakterielle midler og som kan representeres av følgende formel: :—

hvori Z er valgt fra gruppen bestående av en sigmabinding, methylen og ethylen, R-^er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, formyloxymethyl og alkanoyloxymethyl hvori alkanoyl-gruppen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer, og de farmasøy-tisk akseptable salter derav.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen fremstilles ved kondensasjon av en a-araino-u-(2,3-methylendioxyfenyl)-alkan-syre med strukturen: med en 6-aminopenicillansyre med strukturen:

hvori Z og R-^er som ovenfor definert, og B er en blokkerende gruppe valgt fra gruppen bestående av benzyloxycarbonyl, carbomethoxypropen-2-yl, triklorethoxycarbonyl, p-methoxycarbobenzoxy, p-nitrocarbobenzoxy og saltsyresaltet. Disse blokkerende grupper fjernes etter kondensasjon under anvendelse av kjente metoder innen faget under dannelse av det ønskede 6-[a-amino-w-(2,3-methylendioxyfenyl)-acylamino]-penicillansyre-derivat ifølge oppfinnelsen (1).

Som det fremgår fra formel (1) ovenfor inneholder alle forbindelser ifølge oppfinnelsen en 1,3-benzodioxolring ved enden av acylamidosidekjeden.i 6-stillingen i penicillinkjernen. Med det formål å oppnå ensartet nomenklatur vil alle forbindelsene beskrevet her bli angitt som 2,3-methylendioxyf enylacylamidoderivater . Det skal også bemerkes at alle forbindelsene inneholder en obligatorisk aminosubstitu-ent som er i a-stilling i forhold til carbonylfunksjonen av amidgruppen.

Acylamidosidekjeden i seg selv kan varieres fra 2 til 4 carbonatomer i lengde som angitt med symbolet Z . Når således Z er en sigmabinding, angis acetamidosidekjeden og forbindelsene betegnes som 6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-acetamido]penicillansyrer. Uttrykket "sigmabinding" angir den vanlige enkeltbinding mellom to tilstøtende carbonatomer resulterende fra overlapping av deres tilsvarende orbitaler. Når Z er en sigmabinding erholdes en foretrukket serie av forbindelser. Når Z er methylen defineres 6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)propionamido]penicillansyre og når Z er ethylen defineres 6-[2-amino-4-(2,3-methylendioxyf enyl)butyramido]penicillansyre.

2-stillingen i penicillinkjernen er substituert enten med en carboxylsyre .eller en carboxylsyreester som angitt ved symbolet R-^hvor R^er representert med hydrogen, erholdes en foretrukket klasse av penicillansyrederivater.

Penicillansyreestrene erholdes når symbolet R-^representerer enten formyloxymethyl eller alkanoyloxymethyl-grupper. Uttrykket alkanoyl som anvendt i denne forbindelse innbefatter de grupper som har et totalt antall, på fra 1 til 5 carbonatomer slik som f.eks. acetyloxy, propionyloxy, butyryloxy, isobutyryloxy, 2-methylbutyryloxy, 3-methylbutyryloxy og 2,2-dimethylpropionyloxy. Disse estere gir molekylet forbedrede absorpsjonsegenskaper og er samtidig fysiologisk labile. Således absorberes disse estere lett fra den gastro-intestinale traktur og hydrolyseres enzymatisk til de tilsvarende penicillansyrer og gir derved god oral aktivitet.

De farmasøytisk akseptable salter av forbindelsene av formel (1) innbefatter de ikke-toksiske carboxylsyreåalter som dannes med en hvilken som helst egnet uorganisk eller organisk base. Illustrative eksempler på disse salter innbefatter de med alkalimetaller slik som f.eks. natrium og kalium, jordalkalimetaller slik som kalsium og magnesium, lette metaller fra gruppe HIA innbefattet aluminium, og organiske primære, sekundære og tertiære aminer som f.eks. trialkylaminer innbefattet triethylamin, procain, dibenzylamin, vinylamin, N,N'-dibenzylethylendiamin, dihydroabiethylamin, N-(lavere)-alkylpiperidin og ytterligere aminer som har vært anvendt for å danne ikke-toksiske salter med benzylpenicillin. Disse salter kan fremstilles under anvendelse av kjente metoder slik som å bringe løsningen av carboxylsyren i et polart løsnings-middel i kontakt med en støkiometrisk mengde av en vase for å nøytralisere denne.

Også innbefattet som farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter er de ikke-toksiske organiske eller uorganiske syreaddisjonssalter av baseforbindelsen av formel (1). Illustrative eksempler på uorganiske syrer som danner egnede salter innbefatter saltsyre, hydrobromsyre, svovelsyre og fosfor-syrer såvel som syremeta.llsalter slik som natrium-monohydrogen-

orthofosfat og kaliumhydrogensulfat. Illustrative eksempler

på organiske syrer som danner egnede salter innbefatter mono-, di- og tricarboxylsyrer slik som. f.eks. eddiksyre, glycolsyre, melkesyre, pyrodruesyre, malonsyre, ravsyre, glutarsyre, fumar-syre, eplesyre, vinsyre, sitronsyre, ascorbinsyre, maleinsyre, hydroxymaleinsyre, benzoesyre, p-hydroxybenzoesyre, fenyl-eddiksyre, cinnaminsyre, salicylsyre, 2-fenocybenzoesyre og sulfonsyrer slik som methansulfonsyre og 2-hydroxyethyansulfon-syre. Slike salter kan foreligge . enten i hydratisert eller hovedsakelig vannfri form.

I tillegg til de ikke-toksiske carboxylsyresalter og

de ikke-toksiske syreaddisjonssalter av baseforbindelsene, innbefatter uttrykket farmasøytisk akseptable salter indre, salter eller zwitterioner av forbindelsene av formel (I) som er amfotære av natur. Slike zwitterioner er farmasøytisk ekvivalent med enhver av de ovenfor angitte ikke-toksiske carboxylsyresalter eller organiske og uorganiske syreaddisjonssalter og faller altså innen'foppfinnelsens ramme.

Stereoisomeri fremkommer rundt det asymmetriske a-carbonatom til disse syrer. De foretrukne og mest aktive forbindelser ifølge oppfinnelsen er de som har D-konfigurasjon

ved a-carbonatomet i i sidekjeden i 6-stillingen og fremstilles fra de tilsvarende D-(-)-a-amino-w-(2,3-methylendioxyfenyl)-alkansyrer (II).

Illustrative spesifike baseforbindelser som omfattes

av formel (I) innbefatter: 6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-acetamido]-penicillansyre, formyloxymethyl-6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-acetamido] penicillanat,

acetyloxymethy1-6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-acetamido] penicillanat,

isopropionylocymethyl-6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-acetamido]penicillanat,

butyryloxymethyl-6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-acetamido]penicillanat,

pivaloyloxymethyl-6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-

acetamido]penicillanat,

6-t2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)-priopionåmido)-penicillansyre,

formyloxymethyl-6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)propion-amido]penicillanat,

acetyloxymethyl-6- [2-amino-3- ( 2 , 3-methylendioxyf enyl) -propion-amido]penicillanat,

propionyloxymethyl-6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl) - propionamido]penicillanat,

isobutyryloxymethyl-6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)-propionamido]penicillanat,

pivaloyloxymethyl-6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)-propionamido]penicillanat,

6-[2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)butyramido]penicillansyre, formyloxymethyl-6-[2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)butyr-amido] penicillanat / .

acetyloxymethyl-6-[2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)butyr-amido]penicillanat,

butyryloxymethyl-6-[2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl\-butyramido]penicillanat, •isobutyryloxymethyl-6-[2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)-butyramido]penicillanat og pivaloyloxymethyl-6-[2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)-butyramido]penicillanat.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen fremstilles ved omsetning av 6-aminopenicillansyre eller estere derav (III) med en a-amino-u-(2,3-methylendioxyfenyl)alkansyre (II). 6-aminopenicillansyre-utgangsmaterialet er en kommersielt til-gjengelig forbindelse som generelt erholdes ved enzymatisk hydrolyse av lett tilgjengelige penicilliner. Alternativt kan 6-aminopenicillansyre isoleres etter fjerning av de natur-lige penicilliner fra penicillinfermenteringsvæsker som er blitt berøvet side-kjedeforløpere slik som beskrevet f.eks. i US patentskrift 2 985 648.

a-amino-w-(2,3-methylendioxyfenyl)alkansyre-utgangs-materialehe fremstilles lett som illustrert i eksempel 2. Således kan forbindelsen 2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-eddiksyre, heretter kaldt 2,3-methylendioxyfenylglycln, er-

holdes fra 2,3-methylendioxybenzaldehyd ved omdannelse av den sistnevnte forbindelse til det tilsvarende hydantionderi-vat og etterfølgende hydrolyse derav.

Det vil forståes at visse forbindelser ifølge oppfinnelsen foreligger i forskjellige solvatiseringstilstander såvel som i forskjellige optisk aktive former. Vanligvis er de,nye forbindelser ifølge oppfinnelsen mer aktive i D-formen av aminosyren enn i L-formen eller DL-formen. Oppløsning av de racemiske a-amino-w-(2,3-methylendioxyfenyl)alkansyrer i deres optisk aktive isomerer kan utføres ved omdannelse til. kloracetamidoderivatene og etterfølgende hydrolyse derav under. anvendelse av et grisenyreacylasepreparat som illustrert i eksempel 3.

Generelt er a-amino-io- ( 2 ,3-methylendioxyf enyl) alkanr syrer koblet som deres funksjonelle ekvivalenter i form av acyleringsmidler for den primære aminogruppe i pensillansyre-delen. Funksjonelle derivater anvendt i koblingsreaksjonen innbefatter acylhalogenider, syreanhydrider, blandede anhydri-•der og særlig de blandede anhydrider fremstilt av sterkere syrer. I tillegg kan syreazid eller en aktiv ester eller thioester slik som p-nitrofenol, thiofenol eller thioeddiksyré anvendes.

Symbolet B representerer en' blokkerende gruppe av den type som anvendes enten i peptidsyntese eller i en hvilken som helst av de utallige synteser av a-aminobenzylpenicillin fra 2-fenylglycin. Særlig anvendbare blokkerende grupper innbefatter et proton som med a-aminohydrokloridsaltet. Alternativt kan en 3-ketoester, slik som methylacetoacetat, anvendes som beskrevet i britksk patentskrift.1 123 333. Den blokkerte aminosyre omdannes til et blandet anhydrid slik som f.eks. med ethylklorformiat og kondenseres deretter med en 6-amino-penicillansyre (III) . Fortrinnsvis ér den blokkerende gruppe B valgt fra gruppen bestående av benzyloxycarbonyl, carbomethoxy-propen-2-yl, triklorethoxycarbonyl, p-methoxycarbobenzoxy, p-nitrocarbobenzoxy og saltsyresaltet. Etter.: kobling fjernes disse blokkerende grupper ved velkjente metoder innen faget under dannelse av de ønskede forbindelser. Således kan f.eks.. benzyloxycarbonyl, p-methoxycarbobenzoxy og p-nitrocarbo-benzoxygruppen fjernes ved katalytisk hydrogenering. Selvsagt kan andre blokkerende.grupper for a-aminogruppen også anvendes og slike grupper innbefattes innen oppfinnelsens ramme.

De fri a-amino-w-(2,3-methylendioxyfenyl)alkansyrer kan også kobles til 6-aminopenicillansyre (III) ved at alkansyren først omsettes med N,N<1->carbonyldiimidazol, N,N<1->carbonyl-ditriazol eller en carbodiimid. Spesielt anvendbare carbodiimi-der innbefatter N,N'-dicyclohexylcarbodiimid, N,N<1->diisopropyl-carbodiimid eller N-cyclohexyl-N1 -(2-morfolinoethyl)carbodiimid.

Forbindelsen 6-aminopenicillansyre kan kobles som en fri. syre. Fortrinnsvis kobles den imidlertid i form av egnede salter eller lett hydrolyserte estere. Egnede salter innbefatter natrium eller trialkylammoniumsalter x hvilke alkyl-gruppen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer. Egnede estere innbefatter en hvilken som helst av de estere som er beskrevet i. US patentskrift 3 284 451 eller i en hvilken som helst av de silylestere som er beskrevet i US patentskrift 3 249 622. Etter koblingsreaksjonen fjernes generelt disse estere, under dannelse av produktene ifølge oppfinnelsen. Generelt utføres koblingsreaksjonen i nærvær av et egnet løsningsmiddel slik .som aceton, dioxan, kloroform, ethylenklprid og tetrahydro-furan. I visse tilfelle kan blandinger av vann og et vann-blandbart organisk løsningsmiddel med fordel anvendes. Tempe-raturen ved koblingsreaksjonen varieres fra -30° C til 100° C hvor den foretrukne temperatur er ved eller betydelig under ' romtemperatur. Reaksjonstiden varierer.fra 15 minutter.til s.å lenge som 36 timer. Fortrinnsvis anvendes en reaksjons-periode på fra 1 til 8 timer. Etter kondensasjonsreaksjonen isoleres produktene og renses under anvendelse av kjente metoder innen faget.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen innbefatter de forskjellige penicillansyreestre som er angitt ved symbolet R-^. Foretrukne estere ifølge oppfinnelsen innbefatter formyloxymethyl, acetyloxymethyl og pivaloyloxymethylestere. Disse estere fremstilles generelt ved kondensering av en a-amiho-oj-(2,3-methylendioxyfenyl)alkansyre av formel (II) med den tilsvarende 6-aminopenicillansyreester av formel (III)". Disse estere kan fremstilles i henhold til de prosesydrer som er beskrevet av Binderup et al., Journal of . Antibiotics 24, 767

(1971).

Nærvær av a-aminogruppen i forbindelsene ifølge oppfinnelsen har en gunstig effekt ved at den øker og forbedrer spektret av antimikrobiell aktivitet overfor visse gramnega-tive mikroorganismer. I tillegg tilføyer nærvær av a-aminogruppen visse ønskelige farmakologiske karakteristika til molekylet og øker derved dets orale aktivitet.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen er oralt og parenteralt aktive og har god antibakteriell aktivitet. Således er de. anvendbare antimikrobielle midler med et bredt spektrum av antimikrobiell aktivitet in vitro overfor standard laboratorie-mikroorganismer som anvendes for å fastslå aktiviteten overfor patogene bakterier. Det antibakterielle spektrum og den • minimale inhiberende konsentrasjon (MIC) for typiske forbindelser ifølge oppfinnelsen er bestemt ved én eller flere standard-metoder. Således ble eksempelvis seriefortynninger av forbindelsen testet i rør med naeringskraft eller i plater inneholdende et agarmedium. Serier av rør med næringskraft eller plater med agar inneholdende de forskjellige konsentrasjoner av testforbindelsen ble podet med de anvendte kulturer for bestemmelse av aktivitetsspekteret in vitro. Etter inkubering i. 24 timer ved 37° C ble. de podede rør eller agarplater under-søkt med hensyn til deres inhibering av bakterievekst for å fastslå MIC.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen utviser et bredt spektrum av antibakteriell aktivitet overfor både gram-positive og gram-negative organismer, f.eks. Diplococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Escherichia coli og Salmonella schottmuelleri. De kan anvendes som antibakterielle midler profylaktisk, f.eks. i rense- eller desin-fiserende komposisjoner, eller til å bekjempe patogene infek-sjoner fremkalt av organismer slik som de ovenfor angitte. Generelt kan de anvendes på samme måte som andre penicilliner. Således kan f.eks. en forbindelse av formel (I) anvendes i forskjellige dyrearter i én mengde på fra 1 til. 200 mg/kg daglig enten oralt eller parenteralt, i enkle eller oppdelte doser for å behandle bakterieinfeksjoner.. Opp til 600 mg av en forbindelse av formel (I) eller et fysiologisk akseptabelt salt derav kan inkorporeres i en oral doseringsform slik som

tabletter, kapsler eller eliksirer eller i en. injiserbar form i en steril vandig bærer fremstilt i henhold til konvensjonel-. le farmasøytiske metoder.

Den høye ihvitro antibakterielle aktivitet av de

nye forbindelser ifølge oppfinnelsen gjør dem ikke bare anvendbare som farmakologiske midler per se, men gjør dem også anvendbare som additiver til dyrefor., såvel som additiver i materioller som underkastes mikrobiell nedbrytning. Således er disse forbindelser også anvendbare på grunn av deres antibakterielle virkning i såper, shampooer og i topiske komposisjoner for behandling av sår og brannsår. I tillegg er disse forbindelser nyttige i rense- eller sanitaarkomposisjoner for fjøs eller meieriutstyr, hvori konsentrasjoner omfattende ca. 0,01 til 1 vekt%. av slike forbindelser kan anvendes iblan-det med suspendert eller løst i konvensjonelle inerte tørre eller vandige bærere for påføring under vasking eller sprøyting.

Oppfinnelsen beskrives nærmere i de etterfølgende eksempler.

Eksempel 1

2-( 2, 3- methylendioxyfenyl) acetaldehyd

En etherisk løsning av 19,6 ml (1,02 N) fenyllithium ble i nitrogenatmosfære satt til en etherisk suspensjon av 6,84 g (0,02 mol) trifenylmethoxymethylfosfoniumklorid fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet av Levine, J.Anv.Chem. Soc, 80, 6150 (1958). Blandingen oppvarmes forsiktig under omrøring inntil løsningen blir mørkerød. En løsning av 0,02 ' mol 2,3-methylendioxybenzaldehyd fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet av Smidrkal og Trojanek Z. Chem. 1973, 214, inneholdt i 40 ml ether, tilsettes dråpevis til den ovenfor angitte løsningsblanding i løpet av 15 minutter. Den resul-. terende blanding omrøres i ytterligere 2 timer, filtreres, og filtratet vaskes med ytterligere ether. Det kombinerte fil-trat og vaskevann vaskes med vann og tørkes over vannfritt kaliumcarbonat. Etheren fjernes ved fordampning og restoljen destilleres ved 0,1 mm under anvendelse av en Vigreaux-kolonne under dannelse av den ønskede vinylether. Vinyleteren omrøres med ca.- 10 volumer ether som på forhånd er blitt mettet med en .72 %-ig perklorsyreløsning. Etherløsningen vaskes med vann, vaskes med en fortynnet bicarbonatløsning, tørkes over vannfritt magnesiumsulfat, filtreres og etheren fjernes ved fordampning. Restoljen destilleres under høyvakuum under dannelse av 2-(2,3-methylendioxyfenyl)acetaldehyd.

Ved å følge den samme prosedyre men anvende substituert 2-(2,3-methylendioxyfenyl)acetaldehyd i stedet for 2,3-methylendioxybenzaldehyd, erholdes 3-(2,3-methylendioxyfenyl)-propionaldehyd.

Eksempel 2

2, 3- methylendioxyfenylglycin

En prøve av 2,3-methylendioxybenzaldehyd, fremstilt i henhold til prosedyren beskrevet av Smidrkal og Trojanek,

Z. (Chem. 1973, 214, omdannes til det tilsvarende hydantoin-derivat i henhold til den prosedyre som er beskrevet av Henze og Speer, J. Chem. Sov., 64, 522 (1942), ved behandling med ammoniumcarbonat og kaliumcyanid. Det således erholdte hydan-toin hydrolyseres med bariumhydroxyd som beskrevet i J. Chem. Soc, 1944, 629 under dannelse av.det ønskede 2,3-methylendioxyf enylglycin .

Ved å følge den samme prosedyre men anvende 2-(2,3-methylendioxyf enyl) acetaldehyd og 3-(.2, 3-methylendioxyf enyl) - propionaldehyd i stedet for 2,3-methylendioxybenzaldehyd, erholdes 3-(2,3-methylendioxyfenyl)alanin og 2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)smørsyre.

Eksempel 3

D- 2, 3- methylendioxyfenylglycin

D,L-2,3-methylendioxyfenylglycin omdannes til klor-acetamidoderivatet i henhold til den .prosedyre som er beskrevet av E. Fisher, Ber., 37, 2486 (1904). Ved å følge den.pro-. sedyre som er beskrevet av Birnbaum et al., J. Biol. Chem., 194, 455 (1952), suspenderes den kloracetylerte aminosyre i vann og pH på suspensjonen justeres til 7,5 med 2N lithium- hydroxyd. Løsningen inkuberes ved 37° C med et svinenyre-acylasepreparat inntil hydrolysen av L-stereoisomeren er fullført. pH på reaksjonsblandingen justeres til 5,0 og L-is.omeren separeres, fjernes ved filtrering. pH på filtratet justeres til 1,0 under anvendelse av konsentrert saltsyre og filtratet ekstraheres med kloroform. De kombinerte kloroform-ekstrakter tørkes over vannfritt natriumsulfat og fordampes under dannelse av kloracetylderivatet av D-isomeren. Klor-acetylgruppen fjernes ved hydrolyse under anvendelse av fortynnet saltsyre. pH på hydrolyseblandingen justeres til 5,5 og D-2,3-methylendioxyfenylglycinet oppsamles ved filtrering.

Ved å følgé den samme prosedyre oppløses de racemis-ka blandinger av 3-(2,3-methylendioxyfenyl)alanin og 2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)smørsyre i deres D- og L-isomerer.

Eksempel 4

Methylacetoeddikesterenamin og D-2,3-methylendioxyfenylglycin-natriumsalt

2,0 mmol D-2,3-methylendioxyfenylglycin oppløses ved oppvarming i en løsning av 108 mg natriummethoxyd (2,0 mmol) i 4,3 ml methanol av reagenskvalitet. 255 mg (0,24 ml, 2,20 mmol) methylacetoacetat tilsettes og blandingen kokes under tilbakeløpskjøling i 45 minutter. Methanolen fjernes praktisk talt fullstendig i vakuum. 5 ml benzen tilsettes og destilleres til.et lite restvolum. Tilsetning og destilasjon av benzen gjentas for å sikre fullstendig fjerning av methanol og vann. Det ønskede methylacetoeddiksyreesterenamin av D-2,3-methylendioxyfenylglycin krystalliserer over natten som natriumsaltet fra restvolumet av benzen, filtreres, vaskes med benzen og tørkes i vakuum.

Eksempel 5

6-[D-2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)acetamido]w penicillansyre

En løsning av 1,66 mmol av forbindelsen 6-aminopenicillansyre og 0,23 ml triethylamin i 2,5 ml vann fremstilles idet slutt-pH er lik 7,4. 0,85 ml aceton tilsettes og løsningen holdes ved -10° C' En løsning av 469 mg methyl-acetoacetatenamin av D-2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)- eddiksyre-natriumsålt (1,72 mmol) fremstilt som beskrevet i det foregående eksempel, i 4,25 ml aceton avkjøles til -20° C. En mikrodråpe av N-methylmorfolin tilsettes, etterfulgt av langsom tilsetning av 198 mg iskold ethylklorformiat. 0,4 3 ml vann tilsettes, som fører til en blakk løsning. Blandingen omrøres i 10 minutter ved -20° Ci Den blakke løsning av det blandede anhydrid tilsettes til løsningen av 6-aminopenicillansyre. Den klare løsning omrøres i 30 minutter 'ved -10° C, oppvarmes til romtemperatur og surgjøres med fortynnet HC1 til pH lik 2,0 og under god omrøring, og holdes ved denne pH i 10 mlhutter. Løsningen ekstraheres med 5 ml xylen. Den vandige fase skilles fra 5 ml aceton-methylisobutylketon og pH justeres til 5,0 med en IN natriumhydroxydløsning og avkjøles over natten. De resulterende krystaller filtreres, vaskes med vann og lufttørkes under dannelse av den ønskede 6-[D-2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)acetamido]penicillansyre.

Eksempel 6

2, 3- methylendioxyfenylalanylkloridhydroklorid

Forbindelsen 2,3-methylendioxyfenylalanin behandles med hydrogenklorid og fosforpentaklorid i henhold til den prosedyre som er beskrevet av Hartcasfle et al., J. Org. Chem., 31, 897 (1966) for fremstilling av fenylglycylkloridhydroklo-rid under dannelse av 2,3-methylendioxyfenylalanylklorid-hydroklorid .

Eksempel• 7

6- [ 2-amino-3- ( 2 , 3-methylendioxyf enyl) propionamido}-penicillansyre

Til en oppslémming av 0,01 mol 6-aminopenicillansyre i 50 ml kloroform tilsettes 4 ml N,0-bis-trimethylsilyl-acetamid. Blandingen omrøres inntil alt av det faste mate-riale løses, hvoretter 0,02 mol N,N-dimethylanilin tilsettes. Løsningen avkjøles til 5° C og en 0,01 mol porsjon av 2,3-methylendioxyfenylalanylkloridhydroklorid tilsettes. Blandingen omrøres ved 5 - 10° C i ca. 2 timer under nitrogenatmosfære. 50 ml vann tilsettes og pH på blandingen bringes til 2,0 med en vandig natriumbicarbonatløsning. Den vandige fase fraskilles, avfarves med benkull, filtreres og pH på filtratet justeres til 4,0 med fortynnet natriumhydroxyd-løsnkng. Den resulterende løsning avkjøles og det ønskede produkt som dannes, fjernes ved filtrering, vaskes med vann og aceton og lufttørkes under dannelse av 6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyf.enyl) propionamido] penicillansyre.

Ved å følge den samme prosedyre, men anvende 2,3-methylendioxyfenylglycylklorid-hydroklorid og 2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)butyrylklorid-hydroklorid erholdes 6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)acetamido]penicillansyre og 6-[2-amino-4-(2,3-methylendioxyfenyl)butyramido]penicillansyre.

Eksempel 8

Pivaloyloxymethyl-6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)-propionamido] penicillanat- hydroklorid

0,01 mol pivaloyloxymethyl-6-aminopenicillanat-hydroklorid suspenderes under tilstrekkelig omrøring i 50 ml vannfri kloroform ved en temperatur på ca. 0° C. 2,2 g natriumbicarbonat tilsettes etterfulgt av tilsetning av 0,01 mol 2,3-methylendioxyfenylalanylklorid-hydroklorid. Blandingen omrøres i ca. 4 timer ved 0° C, filtreres og filtratet fordampes til tørrhet i vakuum. Residuet løses i vann og lyofiliseres under dannelse av det ønskede pivaloyloxymethyl-6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)propionamido]penicillanat-hydroklorid.

Ved å følge den samme prosedyre men anvende formyloxymethyl-6-aminopenicillanat-hydroklorid, acetyloxymethyl-6-aminopenicillanat-hydroklorid og propionyloxymethyl-6-aminopenicillanat-hydroklorid i stedet for pivaloyloxymethyl-6-aminopenicillanat-hydroklorid erholdes formyloxymethyl-6-[2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)propionamido]penicillanat-hydroklorid , acetyloxymethyl-6-[2-amino-3-(2,3-metnylendioxy-fenyl)propionamido]penicillanat-hydroklorid. og propionyloxy-methyl-6-t2-amino-3-(2,3-methylendioxyfenyl)propionamido]-penicillanat-hydroklorid.

Claims

1.. Fremgangsmåte for fremstilling av 6-[a-amino-u-( 2 , 3-methylendioxyf enyl) acylamido] penicillansyre av formelen:

hvori Z er valgt fra gruppen bestående av en sigmabinding, methylen og ethylen, R^ er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, formyloxymethyl og alkanoyloxymethyl hvori alkanoyl-gruppen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer, eller et farma- søytisk akseptabelt salt derav, karakterisert ved at en 6-aminopenicillansyre av formelen:

hvor R-^ er som ovenfor definert, kondenseres i oppløsning med en a-amino-w-(2,3-methylendioxyfenyl)alkansyre av formelen:

hvori Z er som ovenfor definert og B er en blokkerende gruppe valgt fra gruppen bestående av benzyloxycarbonyl, carbometh-oxypropen-2-yl, triklorethoxycarbonyl,, p-methoxycarbobenzoxy-p-nitrocarbobenzoxy og saltsyresaltet, eller med en funksjo-nell ekvivalent av a-amino-w-(2,3-methylendioxyfenyl)alkansyre, hvilken funksjonelle ekvivalent er et acyleringsmiddel for den primære aminogruppe, idet kondenseringen av penicillan-syren og alkansyren eller dets funksjonelle derivat foretas ved en temperatur varierende fra -30° C til 100° C i tidsrom fra 15 minutter til 3 6 timer, hvoretter den blokkerende gruppe fjernes og det ønskede produkt gjenvinnes.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av. forbindelser av den ovenfor angitte formel i hvilken Z er en sigmabinding.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser av den i krav 1 angitte formel hvori R-^ er hydrogen.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av 6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)acetamido]penicillansyre.

5. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremgangsmåte av ace.tyloxymethyl-6- [2-amino-2- (2,3-methylendioxyf enyl) acetamido] - penicillanat.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av pivaloyloxymethyl-6-[2-amino-2-(2,3-methylendioxyfenyl)-acet- , amido]penicillanat.