NO763601L

NO763601L -

Info

Publication number: NO763601L
Application number: NO763601A
Authority: NO
Inventors: F Haviv; A Patchornik
Original assignee: Yeda Res & Dev
Priority date: 1975-10-24
Filing date: 1976-10-22
Publication date: 1977-04-26
Also published as: CA1074783A; GB1509500A; JPS5253891A; IE43874B1; BE847550A; FR2328473A1; NZ182399A; SE7611778L; DK479976A; FR2328473B1; US4045438A; ES452638A1; IE43874L; DE2647515A1; AU1891876A; AU503552B2; US4118562A; NL7611706A; ZA766306B

Abstract

Fremgangsmåte ved fremstilling av nye antibiotica

Description

Foreliggende oppfinnelse angår nye cefalosporinderivater av generell formel I

hvori aryl er valgt fra fenyl og 2-ethienyl, Y er valgt fra hydrogen, klor,. brom, en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer og en lavere alkoxygruppe mad fra 1 til 4 carbonatomer forutsatt at når aryl er 2-thienyl, er Y hydrogen, Z er valgt fra en binding, oxygen, svovel og imino forutsatt at når aryl er'2-thienyl, er Z er binding, W er valgt fra hydrogen, methyl, amino, hydroxy, SO^H og COOR^, hvori R-, er valgt fra hydrogen og 5-indanyl, n er 0, 1 eller 2 forutsatt at når W er forskjellig fra hydrogen eller methyl og Z er for-■ skjellig fra en binding er n ikke lik null, R2-er valgt fra hydrogen og methoxy/M er valgt fra hydrogen, et farmasøy-tisk akseptabelt ikke-toksisk kation, alkanoyloxymethy1 hvori alkanoyldelen inneholder' fra 1 til 5 carbonatomer og kan Være rettkjedet eller forgrenet, alkanoylaminomethy1 hvori alkanoyldelen inneholder fra 1 til-5 carbonatomer og kan være rettkjedet eller forgrenet og hvori.aminonitrogenatomet kan være substituert med en alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer, alkoxycarbonylaminomethy1 hvori alkoxydelen inneholder fra 1 til 4 carbonatomer og kan være rett-

kjedet eller forgrenet og hvori aminonitrogenatomet kan være substituert med en alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer, p-(alkanoyloxy)-benzyl hvori alkanoyldelen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer og kan være rettkjedet eller forgrenet, og aminoalkanoyloxymethyl hvori alkanoyldelen inneholder fra 2 til 15 carbonatomer og aminonitrogenet kan være mono- eller di-substituert med en lavere

alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer, X er valgt fra hydrogen, acetoxy, .1,3,4-triadiazol-5-ylthio, 3-methyl--1,2,4-thiadiazol-5-ylthio,tetrazol-5-ylthio, 1-methyltetra-zol-5-ylthio, 2-methyl-1,3,4-oxadiazol-5-ylthio, 2-methyl-.1,3,4-thiadiazol-5-ylthio og 1,2,3-triazol-5-ylthio og farmasøytisk akseptable salter og individuelle optiske iso-merer derav.

I generell formel I kan substituentgruppen representert ved M i tillegg til å være hydrogen eller et farma-søytisk akseptabelt ikke-toksisk kation Også være alkanoyloxymethyl som representert ved strukturen:

hvori R 3 er en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer, alkanoylaminomethyl eller alkoxycarbonylarninomethy 1 som representert ved strukturen: hvori R^er valgt .fra en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer og en rettkjedet eller forgrenet alkoxygruppe med fra 1 til 4 carbonatomer og R^er valgt fra hydrogen og en lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer, p-(alkoanoyloxy)— benzyl som representert ved strukturen: hvori-Rg er en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med. fra 1 til 4 carbonatomer og aminoalkanoyloxy-met.hyl som representert ved gruppen:

hvori m er 0 til 5, hver av R-, og Rg er valgt fra hydrogen og lavere alkyl med fra- 1 til 4 carbonatomer, og hver av Rg og R.^q er valgt fra hydrogen og en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer.

Illustrative eksempler på rettkjedede eller for-grenede lavere alkylgrupper med fra 1 til 4 carbonatomer som Y, R^, R^, Rg, Rg og R-^q kan representere er methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl og tertiær butyl.

Eksempler på lavere alkylgrupper med fra 1 til 4 carbonatomer som R^, R-y og Rg kan representere er methyl, ethyl,, n-propyl og n-butyl.

Eksempler på lavere alkoxygrupper som Y kan representere er methoxy, ethoxy, n-propoxy og n-butoxy.

Illustrative eksempler på rettkjedede eller for-grenede lavere alkoxygrupper som R^kan representere er methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, sek-butoxy og n-butoxy.

I generell formel I kan substituentgruppen X representerer i tillegg til hydrogen og acetoxy, en hetero cyklisk thiogruppe valgt' fra 1,3,4-thiadiazol-5-ylthio, 3-methyl-l, 2 , 4-th.iadiazol-5-ylth.io, tetrazol-5-ylthio, 1-methyltetrazol-5-ylthio, 2-methyl-,13,4-oxadiazol-5-ylthio, 2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-ylthio eller 1,2,3-triazol-5-ylthio som representert ved følgende strukturer:

Når arylgruppén i forbindelsene av gerenn formel I representerer fenyl, kan hver av azidomethylsubstituenten og Y-substituenten individuelt være bundet til en hvilken som helst av stillingene 2 til og med 6 i fenylringen. Forbindelser av denne type kan representeres ved følgende generell formel II.

formel II

De foretrukne stillinger for binding av azidomethyl-substituenten i den ovenfor . angitte formel II er ortho- og para-stilling i fenylringen. I den ovenfor angitte formel II har substituentene som representert ved

Y, Z, n, W, M og X de tidligere angitte betydninger.

Når arylgruppen i forbindelsene av generell formel I representerer 2-ethinyl, er Y hydrogen og Z en binding. Forbindelser.av denne type kan representeres ved følgeride formel III.

formel III

I forbindelsene av den ovenfor angitte formel III kan azidomethylsubstituenten være bundet til '4- eller 5-stillingene, i thienylgruppen. I den ovenfor angitte formel III har substituentene som representert ved n, W, R2, M og X de tidligere angitte betydninger.

I forbindelsene av generell formel I - III er det tydelig at R2~substituenten kan være i enten cis eller trans til hydrogenatomet ved 6-stillingen i'cefalosporin. Forbindelsene av formel I - III hvori R2-substituenten er i cis-stillingen til det ovenfor angitte hydrogenatom er foretrukket.

Andre foretrukne utførelses former av denne oppfinnelse er: (A) forbindelser hvori W representerer hydrogen, hydroxy, amino, SO3H og COOR-^hvori R-^representerer hydrogen ved at slik substitusjon resulterer til forbindelser som har et bredere aktivitetsspektrum og/eller forbed-ret oral aktivitet f.eks. hvori: (1) forbindelser hvor W.representerer hydroxy er mer resistente overfor 3~lactamaseorganismer, (2) forbindelser hvori W representerer SO-^H eller COOR-^hvori representerer hydrogen har bredere gram-negativt spektrum, (3) forbindelser hvori W representerer NH2har forbed-ret oral aktivitet, (B) forbindelser hvori R2representerer methoxy er av sær-lig interesse ved at slike forbindelser utviser anti-bakteriell aktivitet overfor cefalosporinase-pdoruserende gram-negative organismer. (C) forbindelser hvori X representerer acetoxy, 2-methyl-1,3,4-thiadiazol-5-ylthio eller 1-methyltetrazol-5-ylthio. Av de foretrukne utførelsesformer angitt i (A), (B) og (C) er forbindelser hvori Z representerer en binding mer foretrukket.

De mest foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen, er de som representeres av følgende formel IV:

formel IV

hvori W er valgt fra hydrogen, hydroxy, amino, COOH eller SO-jH, x' er valgt fra hydrogen, acetoxy, 2-methyl, 1,3,4-thiadiazol-5-ylthio eller 1-methyltetrazol-5-ylthio og farmasøytisk akseptable salter derav.

I den ovenfor angitte formel.IV er foretrukne forbindelser forbindelser hvori hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene er i cis i forhold til hverandre.

De individuelle optiske isomer.er av forbindelsene ifølge oppfinnelsen hvori.W eller W er forskjellig fra

hydrogen også innbefattet innen oppfinnelsens ramme.

De ikke-toksiske syreaddisjonssalter av forbindelsene ifølge oppfinnelsen slik som mineralsyreaddisjons-salter, for eksempel hydrogenklorid, hydrogenbromid, hydro-genjodid, sulfater, sulfamat og fosfat, et organisk syre-addis jonssalt slik som for eksempel maleat, acetat, citrat, oxalat, succinat, benzoat, tartrat, fumarat, malat, mande-lat og ascorbat, er også innbefattet innen oppfinnelsens ramme.

Også innen oppfinnelsens ramme er de ikke-toksiske farmasøytisk akseptable salter av forbindelsene ifølge oppfinnelsen hvori W representerer COOH eller SO^H og forbindelser hvori M representerer hydrogen. Illustrative farmasøytisk akseptable salter av disse syrederivater er primære, sekundære eller tertiære aminer, for eksempel cyclohexylamin, ethylamin og pyridin.

De farmasøytisk akseptable kationer som kan representeres som gruppen M i forbindelsene av formel I - III innbefatter alkalimetallioner, for eksempel natriumion, kaliumion, kalsiumion såvel som ammonium og organiske amin-.kationer, for eksempel lavere alkylammoniumgrupper slik som triethylammonium og N-ethylpiperidin.

Saltsformene av forbindclser av formel I - III hvori M er et farmasøytisk akseptabelt kation fremstilles på kjent måte innen faget og kan dannes in situ eller ved omsetning av den tilsvarende syre med base, for eksempel natriumbicarbonat eller triethylamin.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan.administreres på lignende måte som de mange velkjente cefalosporin- ' forbindelser, for eksempel cefalexin, cefalothin eller cefaloglycin. De kan administreres alene eller i form av farmasøytisk e preparater enten oralt eller parenteralt og topisk til varmblodige dyr, dvs. fugler og pattedyr,. for eksempel katter, hunner, kuer, sauer og hester, og mennes-ker. For oral administrering kan forbindelsene administre res i form av tabletter, kapsler eller piller,eller i form av eliksirer eller suspensjoner. For parenteral administrering anvendes de best i form av.en steril :vandig opp-løsning som kan inneholde andre løsninger,, for eksempel tilstrekkelig fysiologisk saltvann eller- gluco.se til å

gjøre løsningen . isotonisk. For topisk administrering kan forbindelsene inkorporeres i kremer eller salver.

Illustrative eksempler på bakterier mot hvilke forbindelsene ifølge oppfinnelsen er aktive er Staphylococcus aureus, Salmonella schottmuelleri, Klebsiella pneumoniae, Diplococcus pneumoniae og Streptococcus pyogenes.

Et illustrativt eksempel på et cefalosporinderivat ifølge oppfinnelsen er 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]-oct-2-en-2-carboxylsyre. Ytterligere eksempler på forbindelser ifølge oppfinnelsen er angitt i de spesifike eksempler som er representative for forbindelsen.

Forbindelsene 'ifølge- oppfinnelsen hvori R-^er hydrogen fremstilles ved kobling av en 7-aminocefalosporan-syre eller et derivat derav av formelen:

formel V

hvori R2/ '-M og X har de tidligere angitte betydninger, med en syre av formel VI eller et funksjonelt derivat derav:

formel -VI

o

hvori aryl, Y, Z og n har de tidligere angitte betydninger, og W2er valgt fra hydrogen, methyl, amino, hydroxy, SO^H og COOH. Når substituentgr-uppen W2i den ovenf or angitte formel VI representerer en aminogruppe, kan egnede blokkerende grupper, for eksempel et syresalt slik som hydro-kloridsalt, en acylgruppe eller tertiær butoxycarbonyl an-venddes for å beskytte aminofunksjonen. Slike blokkerende grupper fjernes etter koblingsreaksjonen etter kjente metoder innen faget, for eksempel som beskrevet av Lemieux et al i US patentskrift 3 657 232.

Funksjonelle ekvivalenter av syrene representert ved formel VI innbefatter syrehalogenidene, f.eks. syrekloridet, syreanhydrider innbefattet blandede anhydrider med for eksempel alkylfosforsyre, lavere alifatiske monoestere av carbonsyre eller alkyl- eller arylsulfonsyrer. I tillegg kan syreazidet eller en aktiv ester eller thioester., f.eks. med p-nitrofenol, 2,4-dinitrofenol. eller thioeddik-syre anvendes eller den -fri syre som representert ved formel VI kan kobles med 7-aminocefalosporansyrederivatet • som representert ved formel V etter at syren først er omsatt med N,N<1->dimethylklorforminiumklorid eller ved anvendelse av et carbodiimidreagens, for eksempel N,N'-diisopropyl-carbodiimid,'N,N'-dicyclohexylcarbodiimid, eller N-cyclo-hexyl-N1 -(2-morfolinoethyl)-carbodiimid.

Koblingsreaksjonen utføres generelt i nærvær av et oppløsningsmiddel. Egnede oppløsningsmidler innbefatter ethylacetat, aceton, dioxan, acetonitril, kloroform, ethy-lenklorid, tetrahydrof us an og dimethylformamid. Som hydrofile løsningsmidler anvendes blandinger av disse løs-ningsmidler med vann for den ovenfor angitte, reaksjon. Koblingsreak.:-.jonen utføres generelt i'nærvær av base, f.eks. et alkalibicarbonat. Temperaturen for reaksjonen kan variere fra -10 til 100° C og reaksjonstiden kan variere fra 1/2 time til 10 timer. Cefalosporinproduktene isoleres etter kjente metoder.

Forbindelser av formel V hvori R2er hydrogen, M er hydrogen eller et farmasøytisk akseptabelt ikke-toksisk kation og .X er hydrogen eller acetoxy, er kommersielt tilgjengelig eller kan fremstilles etter velkjente metoder innen faget. De tilsvarende forbindelser hvori R2er methoxy kan fremstilles etter de generelle, prosedyrer som er beskrevet i US patetskrift 3 778 432.

Forbindelser av formel V hvori'M er alkanoyloxymethyl kan fremstilles ved omsetning av den tilsvarende syre i form av et salt slik som et alkalimetallsalt eller triethylammoniumsalt med en forbindelse av formelen:

hvori halo er klor eller brom, og R-^ er en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer etter den generelle prosedyre som er beskrevet i US patentskrift 3 655 658.

Forbindelser av formel V hvori M ér alkanoylaminomethyl eller alkoxycarbonylaminomethy1 fremstilles ved behandling av natriumsaltet av syrederivatene av formel V i et organisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid eller hexamethylfosforamid ved romtemperatur med* en ekvivalent-mengde av et alkanoylaminomethylhalogenid eller et alkoxy-carbonylaminomethylhalogenid i 1/2 time til 3 timer hvoretter blandingen heldes over i isvann. Det resulterende bunnfall isoleres etter kjente metoder.

Forbindelser av formel V hvori -M er p-.(alkanoyl-oxy)-benzyl fremstilles ved tilsetning av to ekvivalenter av p-(alkanoyloxy)-benzylalkoh91 til en suspensjon av natriumsaltet av syrederivatene av formel V i dimethylformamid eller hexamethylfosforamid. etthvoretter blandingen avkjøles til 0° C. 1,2 ekvivalenter av dicyclohexylcarbo-diimid og dimethylformamid tilsettes dråpevis til blandingen under omrøring. Blandingen omrøres ved 0° C i 1/2 til 3 ..timer og deretter i 2 - 5 timer ved romtemperatur. Det dannede dicyclohexylurea fjernes ved filtrering og filtratet fortynnes med kloroform, methylenklorid eller ethylacetat, vaskes med vann og tørkes under dannelse av produktet.

Forbindelser av formel V hvori M er aminoalkanoy1-oxymethyl fremstilles ved å blande en suspensjon av natriumsaltet av en syre av formel V og et overskudd av et egnet amin-beskyttet aminoalkanoyloxymethylhalogenid i et løsnings-middel slik som dimethylformamid, hexamethylfosforamid eller dimethylsulfoxyd i 2 - 96 timer. Blandingen fortynnes deretter med et løsningsmiddel slik som ethylacetat eller . methylenklorid, vaskes med vann, vandig base og deretter vann. Den organiske fase fraskilles og bunnfallet isoleres etter kjente metoder etterfulgt av avbeskyttelse av amingruppen under dannelse av produktet.

Forbindelser av formel V hvori X er en heterocyklisk thiogruppe som beskrevet for formel I fremstilles ved oppløsning av én ekvivalent av syren i form av et' salt slik som natriumsaltet hvori X er acetoxy i 500 til 200 ml vann ved en temperatur på fra 50 til 80° C under nitrogenatmosfære .hvoretter en ekvivalent av.en base slik som triethylammonium eller natriumbicarbonat og 1 til 3 ekvivalenter av en hensiktsmessig heterocyklisk thiol valgt fra en forbindelse av den følgende struktur:tilsettes:

Forbindelser av generell formel VI fremstilles ved behandling av en forbindelse av følgende formel:

Formel VII

2 hvori halo er klor eller brom, og aryl, Y, Z, n og W har de for formel VI angitte betydninger, med natriumazid eller kaliumazid i et løsningsmiddel slik som lavere alkohol, for eksempel methanol, ethanol, isopropylalkohol eller n-butanol, eller dimethylsulfoxyd, dimethylformamid eller vandige blandinger av disse løsningsmidler fra 1/2 time til 24 timer ved en temperatur varierende fra 0 til 125° C. Pro- . duktene kan isoleres etter kjente metoder. I enkelte til-feller kan det være hensiktsmessig å omdanne syren som re-' presentert ved formel VII til den tilsvarende methylester ved for eksempel behandling av syren med diazomethan ved -10° C og deretter omrøre blandingen i 10 til 30 minutter ved romtemperatur.

Nåo r substituentgruppen W 2i forbindelser av generell formel VII representerer amino, er aminogruppen beskyttet av en egnet blokkerende gruppe, for eksempel tertiær butoxycarbony1 før behandlingen med natriumazid eller kaliumazid. Den blokkerende gruppe kan fjernes etter kob-lingsreaks jonen ved en mild syrehydrolyse eller hydrogeno-lyse etter kjente metoder innen faget.

Forbindelsene av formel VII fremstilles .ved direkte halo-methylering•som beskrevet i-det etterfølgende av en syre av formelen:

Formel VIII hvori, aryl, Y, Z, n og W 2har de for formel VI angitte betydninger, som er kommersielt tilgjengelige aller erholdes ved velkjente metoder innen faget.

Når substituent-gruppen W 2 i forbindelsene av formel VIII representerer amino, er aminogruppen beskyttet med en egnet blokkerende gruppe slik som for eksempel ovenfor beskrevet i forbindelse me-d forbindelsen av generell formel VII.

De halo-methylerte derivater av forbindelsene av formel VIII erholdes'etl.er flere metoder. For eksempel vil en forbindelse av formel VIII med en kilde av formalde-hyd slik som paraformaldehyd, CICI^OCH^ eller formalinløsning, i nærvær av en Lewis-syre slik som ZnC^/AlCl^, SnCl^

eller ClSO^H i et løsningsmiddel slik som petroleumether, kloroform, carbontetraklbrid eller benzen ved en temperatur varierende fra -10 til 100° C under hvilket tidsrom hydrogenkloridgass eller hydrogenbromidgass bobles inn i reaksjonsblandingen, gi forbindelser av generell formel VII.

Reaksjonen mellom en syre av formel VIII med -34 - 38 % formalin i konsentrert saltsyre ved temperaturer varierende fra -10 til 100° C under hvilket tidsrom hydrogenkloridgass eller hydrogenbromidgass bobles gjennom reaksjonsblandingen, gir også forbindelser av generell formel

VII .

I tillegg vil ved omsetning av en. syre av formel VIII med trioxan i eddiksyre eller fosforsyre ved temperaturer på fra -10 til 100° C under hvilket tidsrom hydrogenbromid eller hydrogenkloridgass bobles gjennom reaksjonsblandingen gi forbindelser av generell formel VII.

Omsetning av en syre av formel VIII i nærvær av

en Lewis-syre slik som de ovenfor beskrevne, med klormethylether ved temperaturer på fraplO til 100° C eller omsetning av syren i eddiksyre eller konsentrert svovelsyre med diklormethylether i nærvær av sinkklorid- gi forbindelser av generell formel VII.

Forbr.naelsene av formel VII hvori W 2representerer COOH og aryl er fenyl, erholdes fortrinnsvis ved behandling av den tilsvarende diethylester av formel VIII med 40 % formalin i nærvær av vannfri sinkklorid eller at hydrogenbromidgass bobles inn i reaksjonsblandingen, etterfulgt av syrehydrolyse.

Forbindelser av formel VII hvori W 2representerer SO^H kan erholdes ved halo-methyleringsreaksjoner som er beskrevet ovenfor under anvendelse av syre av formel

2

VIII hvori W representerer SO^H eller carboxymethylesteren derav, i hvilket sistnevnte tilfelle den resulterende halo-methylerte forbindelse omdannes til den fri COOH ved syrehydrolyse.

Ved halomethylering av forbindelser av formel VIII hvori W 2 representerer OH kan det være fordelaktig å beskytte OH-gruppen før halomethyleringen som beskrevet av V.Reichert et al., Pharmazie 5, 10 (1950).

Forbindelser ifølge oppfinnelsen hvori R-^er 5-indanyl fremstilles ved omsetning av den tilsvarende syre, dvs. forbindelser av generell formel I hvori R-^ er hydrogen,, med 5-indanol i et inert løsningsmiddel i nærvær av N,N'-dicyclohexylcarbodiimid ved en pH på ca. 2,5 og en temperatur på fra 20 til 30° C. Ekvimolare mengder av reaktantene anvendes eller et svakt overskudd av 5-indanol kan anvendes. Den anvendte, molare mengde av N,N'-dicyclohexylcarbodiimid er ekvivalent med den molare mengde av 5-indanol. Egnede løsningsmidler for reaksjonen er dioxan, tetrahydrofuran, ethylacetat, dimethylformamid og methylenklorid.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan også fremstilles ved kjeding av et modifisert polystyren inneholdende nitrofenol eller hydroxysuccinimidgrupper med en syre av. generell formel VI ved den generelle prosedyre som er beskrevet i canadisk patent, 892 580 av 8. februar 1972 , ved anvendelse av en forbindelse av generell formel V i stedet for de der beskrevne penicillansyrederivater.

I tillegg kan forbindelsene ifølge oppfinnelsen hvori X representerer en heterocyklisk thiogruppé valgt fra 1,3,4-thiadiazol-5-ylthio, 3-methyl-l,2,3-thiadiazol-5-ylthio, tetrazol-5-ylthio, l-methyltétrazol-5-ylthio, 2-methyl-1, 3 , 4-oxadiazol-5-ylthio eller 2-methyl-l, 3 , 4-thiadiazol-5-ylthio-l,2,3-triazol-5-y1thio og M representerer hydrogen fremstilles ved omsetning av 3-[(acetyloxy)-methyl]-derivatet med den hensiktsmessige heterocykliske thiolgruppe som representert ved følgende: ... t Formel IX

Formel X

I de ovenfor angitte formler IX og X har substi-tuentgruppene aryl, Y, Z, n, W og R2 de for generell formel I angitte betydninger, og delen- S-hetero er valgt fra 1,3,4-thiadiazol-5-ylthio, 3-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio-tetrazol-5-ylthio, l-methyltetrazol-5-ylthio, 2-methyl-l,3,4-oxadiazol-5-ylthi'o, 2-methyl-l, 3 , 4-thiadiazol-5-ylthio eller 1,2,3-triazol-5-ylthio.

I den ovenfor angitte reaksjon løses en ekvivalent av natriumsaltderivatet i vann ved en temperatur på fra 24 til 90° C under nitrogenatmosfære etterfulgt av tilsetning av 1 ekvivalent av en base slik som triethylamin eller natriumbicarbonat og fra 1 til 3 ekvivalenter av he.terothiolderivatet hvoretter reaksjonsblandingen omrøres i fra 2 til 6 timer ved en temperatur på fra 25 til 90° C.

Forbindelser ifølge oppfinnelsen hvori M representerer alkanoylaminomethy1 eller alkoxycarbonylaminomethy1 og W er forskjellig fra COOH kan også fremstilles ved omsetning av den. tilsvarende syre i form av et salt slik som et alkalimetallsalt for eksempel .natriumsalteti; med 1,5 til 2,5 ekvivalenter av et egnet alkånoylaminomethylhalogenid eller alkoxycarbonylaminome.thylhalogenid som hver kan representeres ved strukturen:

hvori halo er valgt fra et reaktivt halogenatom slik som klor eller brom, R, er valgt fra en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer eller en rettkjedet eller forgrenet lavere alkoxygruppe med fra 1 til 4 carbonatomer og R^er hydrogen eller en lavere alkylgruppe med frå i til 4 carbonatomer. Reaktantene omrøres i 1 til 5 timer i dimethylformamid, hexamethylfosforamid eller et lignende løsningsmiddel ved en temperatur varierende fra 10 til 45° C hvoretter reaksjonsblandingen heldes i isvann og dekanteres. Det oljeaktige residuum taes opp i etOrga-nisk løsningsmiddel slik som ethylacetat, methylenklorid eller benzen, vaskes med base og deretter med vann og tørkes over magnesiumsulfat. Den organiske løsning fordampes i . tørrhet i vakuum under dannelse av den ønskede ester.

Før den ovenfor angitte forestringsreaksjon beskyttes forbindelser hvori. W representerer .arnino med blokkerende grupper slik ;;;om f. eks. tertiær butoxycarbonyl eller carbobenzyloxy, idet slike grupper fjernes etter forestringen etter kjente metoder innen faget, slik som etter de metoder som er beskrevet i det ovenfor angitte US patentskrift 3 657 232.

Forbindelser ifølge oppfinnelsen hvori M representerer p-(alkanoyloxy)benzyl og W er forskjellig fra COOH kan også fremstilles ved omsetning av molare ekvivalenter av den tilsvarende syre og en p-(alkanoyloxy)benzylalkohol hvori alkanoyldelen inneholder fra 1 til 4 carbonatomer og kan være rett].-.jedet eller forgrenet. Reaktangene løses i et organisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid eller hexamethylfosforamid og avkjøles til en temperatur på fra

-15 til 25° C hvoretter en ekvivalent mengde dicyclohexyl-carbodiimid i dimethylformamid eller hexamethylfosforamid dråpevis tilsettes til reaksjonsblandingen under omrøring. Omrøringen fortsettes i 1/2 til 2 timer ved temperaturer

på fra -15 til 25° C og deretter 4 til 6 timer ved fra 25 til 45° C. Det dannede dicyclohexylurea fjernes ved filtrering og filtratet fortynnes med kloroform, ethylacetat

eller methylenklorid og vaskes med vann.. 'Det organiske

o

lag tørkes og fordamper, under dannelse av produktet.

Forbindelser ifølge oppfinnelsen hvori M er alka- ' noyloxymethy1 og W er forskjellig fra COOH kan også fremstilles ved omsetning av den tilsvarende syre i form av et salt slik som et alkalimetallsalt eller triethylammoniumsalt med en forbindelse av formelen:

hvori halo er klor eller brom og R^er en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer ved den generelle prosedyre som er beskrevet i US patentskrift 3 655 658.

Forbindelser ifølge oppfinnelsen hvori M er aminoalkanoyloxymethyl og W er forskjellig fra COOH kan også fremstilles'ved blanding av en suspensjon av natriumsaltet av den tilsvarende syre og et overskudd av et egnet amin-beskyttet aminoa.l kanoyloxymethylhalogenid i et løs-ningsmiddel slik som dimethylformamid, hexamethylfosforamid eller dimethylsulfoxyd ' i 2 til 96 timer. Blandingen fortynnes deretter med et løsningsmiddel slik som ethylacetat eller methylénklorid, vaskes med vann, vandig base og deretter vann. Den organiske fase fraskilles og bunnfallet isolere:-, ved kjente metoder etterfulgt av avbeskyttelse av amingruppen under dannelse av produktet.

Forbindelser ifølge oppfinnelsen hvori R-^ er COOH kan også fremstilles ved solvolyse av en forbindelse

I o av formelen

Formel IX

hvori aryl, Y, Z, n, R 2, M og X har de for generell formel I angitre betydninger, halo er klor eller brom og W n er hydrogen, methyl, amino, hydroxy, SO^H eller COOH med

natriumaz.l.d eller kaliumazid i et løsningsmiddel slik som lavere alkohol, for eksempel methanol, ethanol, isopropylalkohol, n-butanol eller dimethylsulfoxyd, dimethylformamid eller vandige blandinger av disse løsningsmidler. Reaksjonen utføres i fra 1/2 time til 24 timer ved en temperatur på fra 0 til 125° C. - Produktene isoleres etter kjente metoder.

Forbindelser av formel XI erholdes ved kobling av en forbindelse av formel VII eller et reaktivt derivat derav med en forbindelse av formel V etter kjente metoder.

De følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen.

Eksempel 1

p- klormethylfenylacetylklorid

(A) Ved en temperatur på fra -10 til 0° C bobles hydrogenkloridgass gjennom en omrørt blanding av 102 g

fenyleddiksyre, 67,5 g paraformaldehyd og 67,5 g zinkklo-rid i 1000 ml petroleumether i 1 time. ' Omrøring fortsettes 1 løpet av 1 time ved romtemperatur hvoretter blandingen - kokes under tilbakeløp i 2 timeri hvilket tidsrom hydrogenkloridgass bobles inn i blandingen. Til reaksjonsblandingen. tilsettes 1000 ml hver av methylenklorid og vann. Den organiske fase fraskilles og den vandige fase ekstraheres to ganger med methylenklorid. De kombinerte organiske faser ekstraheres fire ganger med en mettet natriumbicarbo-natløsning. Den organiske nøytrale fase tørkes over vannfritt natriumsulfat, filtreres og løsningsmidlet fjernes under vakuum under dannelse av et nøytralt biprodukt som identifiseres i eksempel 5. Den basiske vandige fase fraskilles og surgjøres med kald konsentrert saltsyre til' pH 2 - 3 og ekstraheres deretter tre ganger med methylenklorid. Methylenkloridfraksjonen tørkes over vannfritt natriumsulfat, filtreres og løsningsmidlet fordampes. Det resulterende oljeaktige sure produkt kromatograferes på silicagel under anvendelse av benzen og benzen-aceton som elueringsmiddel under dannelse av p-klormethylfenyleddiksyre som omkrystalliseres fra varm kloroform med smeltepunkt 147 - 149° C.

(B) En blanding av 1 g p-klormethylfenyleddiksyre og 6 ml thionylklorid omrøres ved romtemperatur i 25 timer

hvoretter overskudd thionylklorid fjernes i vakuum under dannelse av p-klormethylfenylacetylklorid.

Når det i eksempel 1 (A) anvendes en syre valgt fra tabell I i stedet for fenyleddLksyre erholdes det respektive klormethylderivat som er oppført i tabell I som kan omdannes til syrekloridet ved den prosedyre som er beskrevet i eksempel 1 (B). Eksempel 2 p- klormethylfenylglyein .

En blanding av 2,03 g trifluoracetylert fenyl-glycin, 0,8 g sinkklorid i klormethylether oppvarmes ved 65° C i 12 timer. Overskudd av reagens fjernes under vakuum, og residuet løses i CH^C^, vaskes med mettet NaHCO.-j og deretter mettet natriumkloridløsning. Den nøy-trale organiske fase tørkes over Na2S04 og konsentreres

-til en olje som renses ved kolonnekromatografi under dannelse av methylesteren av p-klormethylfenylglycin som ved hydrolyse under anvendelse av en vandig .saltsyre gir syrekloridet. Syrekloridet omdannes til den fri syre ved justering av pH på den vandige løsning til ca. 5. På. tilsvarende måte kan de.klormethylderivater som er oppført i tabell II fremstilles fra den angitte syre.

Eksempel 3

P~ klormethylfenylmalonsyre

Når det i fremgangsmåten ifølge eksempel 1 (A) anvendes en ekvivalent mengde av f enylmalonsyredie.thyl-ester i stedet for fenyleddiksyre, erholdes p-klormethyl-fenylmalonsyrediethylester som gir den tilsvarende syre med syrehydrolyse. På lignende'måte kan de klormethyl-derivater som er oppført i tabell III fremstilles når den diethylester av den tilsvarende syre som er oppført i tabell III anvendes i stedet for fenylmalonsyrediethylester.

Eksempel 4

5- klomethyl- 2- thieny lace t y lk lo r id

2-thiofenecarboxylsyre behandles i en løsning av kloroform med k.lormethylether i nærvær av 0,9 til 2,2 ekvivalenter aluminiumklorid under dannelse av 5-klormethyl-2-. thienylcarboxylsyre. Behandling av den erholdte syre med overskudd av thionylklorid ved romtemperatur i ca. 16

timer gir syrekloridet som omsettes,med diazomethan under dannelse av det tilsvarende di.azoketon. En methanol-løsning av diazoketonet bestråles under nitrogen i ca. 1 time med en høytrykks kvikksølvlampe under anvendelse av et kvartsfilter. Methyl-5-klormethyl-2-thienylacetat erholdes etter opparbeidelse og kolonnekromatografi på silicagel. Acetatet hydrolyseres ved behandling med en 1:1 blanding av eddiksyre og konsentrert saltsyre ved romtemperatur over natten under dannelse av 5-klormethyl-2-thienyleddiksyre.

Når det i fremgangsmåten i eksempel 1 (B) anvendes 5-klormethyl-2-thienyleddiksyre i stedet for p-klor-methylf enyleddiksyre , erholdes 5-klormethy1-2-thienylacetyl-klorid.

Eksempel 5

o- hydroxymethylfenyleddiksyrelacton

Det nøytrale -biprodukt erholdt i eksempel 1 renses ved sublimering i vakuum (0,05 mm Hg ved 80° C) under dannelse av o-hydroxymethylfenyleddiksyrelacton med smeltepunkt 82° C.

Eksempel 6 o- brommethylfenylacetylklorid

Til en løsning av 5 ml iseddik mettet med hydrogenbromidgass tilsettes ved 0° C en løsning av 0,55 g o-hydrox<y>methylfenyleddiksyrelacton i 2 ml iseddik. Blandingen omrøres ved romtemperatur i 2 timer og kokes deretter under tilbakeløpskjøling i 1 time under hvilket tidsrom hydrogenbromidgass bobles inn i blandingen. Overskudd av lacton og løsningsmiddel fjernes under høyvakuum ved romtemperatur. Det resulterende oljeaktige residuum tritureres tre ganger med hexan under dannelse av o-brommethy1-fenyleddiksyre med smeltepunkt 110° C,

En løsning av 0,18 g o-brommethylfenyleddiksyre

i overskudd av thionylklorid omrøres ved romtemperatur i 18 timer hvoretter uomsatt thionylklorid fjernes under høyvakuum under dannelse av o-brommethylfenylacetylklorid som et oljeaktig residuum.

Eksempel 7

o- klormethyl- p- methoxymandelsyreklorid

En løsning av 1,1 g 2-klormethy1-4-methoxymandel-syre, erholdt ved den prosedyre som er beskrevet av B. Reichert et al., Pharmazie 5, 10 (1950), i 25.ml thionylklorid omrøres ved romtemperatur i ca. 16 timer hvoretter overskudd av thionylklorid fjernes under høyvakuum under dannelse av o-klormethy1-p-methoxymandelsyreklorid som en ol je .

Eksempel 8

3-[( acetyloxy)- methyl]- 7- amino- 8- oxo- 5- thia- l- azabicyclo-[ 4, 2, 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyre- pivalylox' ymethylester

Til 35 ml dimethylformamid tilsettes 7,5 g av natriumsaltet av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]-oct-2-en-2-carboxylsyre og løs-ningen omrøres ved'romtemperatur i ca. 30 minutter hvoretter 8 ml klormethylpivalat tilsettes. Omrøringen fortsettes ved romtemperatur i ca. 3 timer. Blandingen fortynnes med ethylacetat og vaskes med vann. Det organiske lag fraskilles og fordampes til tørrhet. Residuet omkrystalliseres fra '.ethylacetat under dannelse av 3-[(acetyloxy )methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2- en-2-carboxylsyre-pivalyloxymethylester.

Når på lignende måte en hensiktsmessig mengde av klormethylpropionatklormethylacetat eller klormethyl-butyrat anvendes i stedet for.klormethylpropionat, erhol-. des følgende produkter: 3- [(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4,2,0]oct-2-en-2-carboxylsyre-propionyloxymethylester, 3- [ (acetyloxy)methyl] -7-amino-8-oxo-6-thia-l-azabi.cyclo-[4,2,0]oct-2-en-2-carboxylsyre-acetyloxymethylester, 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-th.ia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-buryryloxymethylester.

Eksempel 9

3-[( acetyloxy) methyl]- 7- amino- 8- oxo- 5- thia- l- azabicyclo-: [ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyre- 2- amino- 3- methylbutyryl-oxymethylester

En suspensjon av 5 g 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxyl-na.triumsalt og 8,5 g N-tert-butoxycarbonyl-L-valinklor-methylester som fremstilles ved den generelle prosedyre som er beskrevet i tysk Off.skrift 2 236 620, blandes i 1.00 ml dimethylf ormamid og omrøres i 72 timer. Blandingen fortynnes med ethylacetat, vaskes med vann, med vandig bicarbonat.og igjen med vann. Det organiske lag tørkes . over magnesiumsulfat, filtreres og inndampes til tørrhet under dannelse av 3-[(acetyloxy)-methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-N-tert-butoxycarbonyl-2-amino-3-methyl-butyryloxymethylester fra hvilken den amin-beskyttende gruppe fjernes etter kjente metoder under dannelse av titelproduktet.

Eksempel 10

3-[( acetyloxy) methyl]- 7- amino- 8- oxo- 5- thia- l- azabicyclo-[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyre- N- ethoxycarbonyl- N- methyl-. aminomethylester

725 mg (2,5 mmol) av natriumsaltet av 3-[]acetyloxy ) methyl(-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre i 50 ml dimethylformamid behandles ved romtemperatur med 375 mg (2,5 mmol) N-klormethy1-N-methy1-urethan i 1 time. Blandingen heldes forsiktig i isvann og det utfelte faste materiale fjernes ved filtrering og vaskes med vann. Det faste'materiale løses i ethylacetat og vaskes med vandig natriumbicarbonat og deretter med vann.

Det organiske lag tørkes med magnesiumsulfat, filtreres

og fordampes til tørrhet i vakuum under dannelse av 3-[ (acetyloxy)methyl] -7-amino-8-oxo-5-thia-l--azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-N-ethoxycarbony1-N-methy1-aminomethylester.

Når i den ovenfor angitte prosedyre en passende mengde av N-methyl-N-propionylaminomethylklorid, N-butyrylaminomethylklorid, N-acetylaminomethylklorid eller N-methyl-N-ethoxycarbonylaminomethylklorid i stedet for N-klormethy1-N-methylurethan, erholdes de følgende forbindelser: 3-[(acetyloxy)methyl]-7-aminp-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-N-methyl-N-propionylamino-methylester,

3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-N-butyrylaminomethylester,

3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-N-acetylaminomethylester og 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-N-methyl-N-ethoxycarbonyl-aminomethylester.

Eksempel 11 3-[( acetyloxy) methyl]- 7- amino- 8- 6xo- 5- thia- l- azabicyclo-[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyr' e- p- pivalyloxybenzylester Til en suspensjon av 6,6 mmol 3-[(acetyloxy)-methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyrenatriumsalt i 35 ml dimethylformamid (DMF) tilsettes 2 ekvivalenter p-pivalyloxybenzylalkohol etterfulgt av avkjøling til 0° C, hvoretter 7,2 g mmol dicyclo-hexylcarbodiimid i 7,5 ml DMF tilsettes dråpevis under om-røring. Blandingen omrøres ved 0° C i 1 time og i ytterligere 4 timer ved romtemperatur. Det dannede dicyclohexylurea fjernes ved filtrering. Filtratet fortynnes med kloroform, vaskes med vann, tørkes over magnesiumsulfat, filtreres og fordampt-s i vakuum under dannelse av 3-

[ iacetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-p-pivalyloxybenzylester.

Når en passende mengde av p-(propionyloxy benzylalkohol, p-(acetyloxy)-benzylalkohol, eller p-(valeryloxy)-benzylalkohol anvendes i stedet for p-pivalyloxybenzylalkohol erholdes følgende produkter: 3-[(acetyooxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0] oct-2-en-2-carboxylsyre-p- (propionyloxy) benzylester,

3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-p-(acetyloxy)benzylester, og

3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[41.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-p-(valeryloxy)benzylester.

Eksempel 12

3-[( 2- methyl- l, 3, 4- thiadiazol- 5- ylthio) methyl]- 7- amino- 8-oxo- 5- thia- l- azabicyclo[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyre

I ca. 1 liter vann løses 0,1 mol av natriumsaltet av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4 . 2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre ved 70° C under nitrogenatmosfære. Til løsningen tilsettes 1 ekvivalent av natriumbicarbonat og 2 ekvivalenter av 2-methy1-1,3,4-thiadiazol-5-ylthiol. Blandingen omrøres ved 70° C i 3 timer hvoretter pH justeres til 3,5 og det resulterende bunnfall oppsamles under dannelse av 3-[(2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-ylthio)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabi-cyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre.

Når en ekvivalent mengde av 1,3,4-thiadiazol-5-ylthiol-, 3-methyl-l, 2 , 4-thiadiazol-5-ylthiol, tetrazol-5-ylthiol, l-methyltetrazol-5-ylthiol eller 2-methyl-l,3,4-oxadiazol-5-ylthiol- anvendes i stedet for 2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-ylthiol erholdes følgende produkter: 3-[(1,3,4-thiadiazol-5-ylthio)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre, 3[(3-methy1-1,2,4-thiadiazol-5-ylthio)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre,

3-[(tetrazol-5-ylthio)methy1]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-aza-bicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre,

3-[(l-methyltetrazol-5-ylthio)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-1- azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og 3[(2-methyl-l,3,4-oxadiazol-5-ylthio)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre.

Når det i fremgangsmåten ifølge eksempel 8 anvendes en passende mengde av 3-methyl-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2,0]oct-2-en-2-carboxylsyre i stedet for 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre, erholdes ' 3-methy1-7-amino-8-oxo-5-thia-l-.azabicyclo [4.2.0] oct-2-en-2-carboxylsyre-pivalyloxymethylester.

Eksempel 13

Når det i fremgangsmåten ifølge eksempel 12 anvendes passende mengder av natriumsaltet av det cefalosporinderivat og det heterocykliske thiolderivat som er opp-ført i tabell IV i stedet for natriumsaltet av 3-[(acetyloxy ) methyl] -7-amino-8-oxo-5-thi'a-l-azabicyclo [4.2.0] oct-2- en-2-carboxylsyre og 2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-ylthiol erholdes de i tabell IV angitte produkter.

Eksempel 14

p- azidomethylfenylacetylklorid

(A) En løsning av p-klormethylfenyleddiksyre (1,1 g) og 2 g natriumazid i 50 ml methanol kokes under tilbake-løpskjøling i 3 timer. Løsningsmidlet fjernes under vakuum.under anvendelse av en rotasjonsfordamper. Det faste residuum løses i en blanding av 250 ml methylenklorid og 50 ml kaldt vann og surgjøres langsomt med 10 %-ig HCl.til pH 2 - 3. Fasene skilles og den vandige fase ekstraheres to ganger med methylenklorid (2 x 50 ml). Alle de organiske ekstrakter kombineres, tørkes over natriumsulfat og konsentreres under vakuum under dannelse av et hvitt krystallinsk produkt som krystalliseres fra petroleumether-ether.'Smeltepunkt 85°. C. (B) Ved omrøring av en blanding av den således erholdte p-azidomethylfenyleddiksyre i thionylklorid ved

romtemperatur i 20 timer erholdes det tilsvarende syreklorid etter fjerning av overskudd av reagens under høy-vakuum ved romtemperatur.

Når det. i fremgangsmåten ifølge eksempel 14 (A)' anvendes en passende mengde av en syre som angitt i den etterfølgende tabell V i stedet for p-klormethylfenyleddiksyre, erholdes de respektive azidomethylderivater som er oppført i tabell V:

Eksempel 15

3-[( acetyloxy) methyl]- 7-[[ 2-[ 4-( azidomethyl) fenyl] acetyl]-amino]- 8- oxo- 5- thia- l- azabicyclo[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- car boxylsyre

En blanding av 1,38 g p-azidomethylfenylacetylklorid og 1,38 g 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre i 250 ml ethylacetat kokdes under tilbakeløpskjøling i„45 minutter.. Løs-ningsmidlet fjernet under vakuum ved 35° C under dannelse av et fast residuum som renses ved kromatograferi under anvendelse av 200 g silicagel og elueres med benzen-aceton under dannelse av 3-[(acetyloxy) methyl ]-7-'[ [ 2-[ 4-(azidomethyl) fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]-oct-2-en-2-carboxylsyre med smeltepunkt 135 - 136° C.

Når det i fremgangsmåten ifølge eksempel 15 anvendes en passende mengde av et syreklorid oppført i den etterfølgende tabell VI i stedet for p-azidomethylfenylacetylklorid erholdes det tilsvarende cefalosporinderivat som er oppført i tabell VI. De syrekloridderivater som er oppført i tabell VI erholdes fra de tilsvarende syrer som er oppført i tabell V ved'behandling med thionylklorid ved generelle prosedyre som er beskrevet i eksempel 14 (B).

Eksempel 16 7-[[ 2-[ 4-( azidomethyl) fenyl]- acetyl]- amino]- 3- methyl- 8- oxo-5- thia- l- azabicyclo[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyre

En blanding av 0,6 g p-azidomethylfenylacetylklorid og 0,6 g 7-amino-3-methyl-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre i 250 ml ethylacetat kokes under tilbakeløpskjøling i 50 minutter hvoretter løsnings-midlet fjernes under vakuum under dannelse av en oljeaktig residuum som renses ved kromatografi under anvendelse av 60 g silicagel og benzen-aceton som elueringsmiddel under dannelse av 7-[[ 2-[4-(azidomethyl)fenyl]acetyl]amino]-3-methyl-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oet-2-eri-2-carboxylsyre med smeltepunkt 154 - 155° C.

Eksempel 17

3-[( acetyloxy) methylj- 7-[[ 2-[ 4-( azidomethyl) fenyl] - 2- amino-acetyl] amino]- 8- oxo- 5- thia- l- azabicyclo[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2-carboxylsyre

p-azidomethylfenylglycin hvori aminogruppen er beskyttet med tertiær butoxycarbonyl behandles med isobutyl-■klorformiåt i nærvær av triethylamin. Ekvimolare mengder av det således erholdte blandede anhydrid og triethylamin-saltet av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-aza-bicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre omsettes ved 0° C i 4 timer. Det resulterende produkt isoleres og den amin-beskyttende gruppe fjernes ved syrehydrolyse under dannelse av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-aminoacetyl]-amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre.

Når en passende mengde av den. aminosyre som er oppført i den etterfølgende tabell VII anvendes i stedet for p-azidomethylfenylglycin i fremgangsmåten ifølge eksempel 17, erholdes det tilsvarende cefalosporinderivat som er oppført i etterfølgende tabell VII:

Eksempel 18

3-[( acetyloxy) methy1]- 7-[[ 2-[ 4-( azidomethyl) fenyl]- 2-carboxyacetyl1amino]- 8- oxo- 5- thia- l- azabicyclo[ 4. 2. 0] oct-2- en- 2- carboxylsyre

a-carboxy-p-azidomethylfenylacetylnitrofenylpolymer,

fremstilt ifølge den prosedyre som er beskrevet i kanadisk patentskrift 892 580 bærende. 4 mmol p-azidomethylfenylmalon-syre suspenderes i 8 timer i 20 ml tørr methylenkloridløs-ning inneholdende 1 mr.iol 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-tri-ethy lammoniumsalt som fremstilles fra 544 mg 7-aminocefalo-sporansyre (1 mmol) og 0,56 ml triethylamin (1 mmol) ved romtemperatur. Etter at bare spor av 7-aminocefalosporan-syre forblir, i løsning, hvilket bestemmes ved tynnskikts-kromatografi på cellulose i 70 %-ig vandig propanol, filtreres polymeren av og vaskes med tre porsjoner hver på 5 ml methylenklorid. De kombinerte filtrater fordampes og residuet løses-i 20 ml destillert vann. Denne løsning sur-gjøres til pH 2 ved tilsetning av 0,2 normal saltsyre og ekstraheres med ethylacetat. Den organiske løsning tørkes over natriumsulfat og fordampes ved romtemperatur. Det gjenværende faste materiale tørkes over natten over forfor-pentoxyd under vakuum under dannelse av 3-[(acetyloxy)-methyl] - [ [2-[4-(azabicyclo[4.2.0] oct-2-en-2-carboxylsyre .

Når det i fremgangsmåten ifølge eksempel 18 anvendes en passende mengde av en syre oppført i .den etter-følgende tabell' VIII i stedet for p-azidomethylfenylmalon-syre, erholdes de respektive cefalosporinderivater som er oppført i tabell VIII:

Når det i fremgangsmåten ifølge eksempel 15 anvendes en passende mengde av et syreklorid oppført i tabell IX i stedet for p-azidomethylfenylacetylklorid og en passende mengde av et 7-aminocefalosporinderivat oppført i etterfølgende tabell IX i stedet for 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre, erholdes det tilsvarende cefalosporinprodukt som er oppført i tabell IX. Syrekloridderivatene erholdes fra den tilsvarende syre som er beskrevet i eksempel 15.

Når det i fremgangsmåten iføgle eksempel 17.anvendes en passende mengde av et aminbeskyttet syreklorid opp-ført i den etterfølgende tabell X i stedet for p-azido-methylf enylglycin og en passende mengde av et cefalosporinderivat oppført i den etterfølgende tabell X i stedet for 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo-[4.2.0]6ct-2-en-2-carboxylsyre, erholdes det tilsvarende cefalcsporinprodukt som er oppført i tabell X. Når det i fremgangsmåten ifølge eksempel 18 anvendes en passende mengde av det syrederivat som er opp-ført i den etterfølgende tabell XI i stedet for p-azido-methylf enylmalonsyre og en passende mengde av et 7-amino-cef alosporinderivat som er oppført i den etterfølgende tabell XI stedet for 3-[(acetyloxy)methyl-]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo [4 . 2 . 0] oct-2-en-2-carboxylsyre-, erholdes det. tilsvarende cefalosporinprodukt som er oppført i tabell XI. Eksempel 19 3- [ ( ac etyloxy) methyl] - 7- [ [ 2-[ 4- ( azidomethyl) f enyl'] acetyl] - amino]- 8- oxo- 5- thia- l- azabicycTo[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyre (A) En blanding av 1 g 3-[(acetyloxy)methyl]-7-amino-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og 1 g p-klormethylfenylacetylklorid i 45 ml ethylacetat kokes under tilbakeløpskjøling i ca. 2 timer hvoretter løsnings-midlet fjernes under vakuum under dannelse av et gulbrunt amorft produkt som kromatograferes på silicagel under anvendelse av benzen-aceton som elueringsmiddel under dannelse av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(klormethyl)fenyl]acetyl] amino] -8-oxo-5-thia-l-azabicyclo [4 . 2 . 0] oct-2-en-2-carboxylsyre med smeltepunkt 164 - 165° C (spaltning). (B) En varm løsning av 1 g 3-[(acetyloxy)methy1]-7-[[2-[4-(klormethy1)fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabi-cyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og 2 g natriumazid i 80 ml methanol kokes under tilbakeløpskjøling i 4 timer hvoretter løsningsmidlet fjernes under høyvakuum ved romtemperatur. Residuet tritureres med 80 ml benzen-aceton (2:1) under dannelse av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]-oct-2-en-2-carboxylsyre med smeltepunkt 135 - 136° C.

På lignende måte kan andre forbindelser ifølge oppfinnelsen fremstilles ved .kobling av en passende halo-methylsubstituert syre oppført i tabell I, II, III og eksempel 2, 3, 4, 6 og 7 med passende 7-aminocefalosporin-derivater som er angitt, etterfulgt av behandling med natriumazid som beskrevet i prosedyren ifølge eksempel 19.

Eksempel 20

3-[( acetyloxy) methyl] - 7- [ [ 2-[ 4- ;( azidomethyl) f enyl] acetyl] - amino] - 8- oxo- 5- thia- l- azablcyclo [ 4. 2. 0] oct- 2- en", 2>carboxyl-syre- N- éthoxycarbonyl- N- methylaminomethylester

En blanding av 1,2 g av natriumsaltet av 3-[(acetyloxy ) methyl] -7-[[2-[4-(azidomethyl]fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og 0,5 g N-klormethyl-N-methylurethan i 40 ml dimethylformamid omrøres ved romtemperatur i 2 timer. Blandingen heldes over i isvann og dekanteres. Det oljeaktige residuum taes opp i 75 ml ethylacetat og vaskes med 5 ml fortynnet vandig natriumbicarbonat og 15 ml vann og tørkes deretter over magnesiumsulfat, filtreres og fordampes under dannelse av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]acetyl]-amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-N-ethoxycarbony1-N-methylaminoethylester.

Eksempel 21

3- [ ( acetyloxy) methyl].- 7- [ [ 2- [ 4- ( azidomethyl) fenyl] acetyl] - amino]- 8- oxo- 5- thia- l- azabicy clo[ 4. 2. 0] oct- 2~ en- 2- carboxylsyre- p- pivaiyloxybenzylester

Til en løsning av 1,8 g 3-[(acetyloxy)methy1]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-aza-bicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-hydroklorid i 25 ml dimethylformamid tilsettes 0,78 g p-pivalyloxybenzylalkohol etterfulgt av avkjøling til 0° C, hvoretter 3,7 mol dicyclo-hexylcarbodiimid i 7,5 ml dimethylformamid dråpevis tilsettes under omrøring. Reaksjonsblandingen omrøres i 1 time ved 0° C og i ytterligere 4 timer ved romtemperatur. Det dannede dicyclohexylurea fjernes ved filtrering. Filtratet fortynnes med kloroform og vaskes med vann. Det organiske lag tørkes deretter over magnesiumsulfat, filtreres og fordampes i vakuum under dannelse av en olje som tritureres med ether under dannelse av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre-p-pivalyloxyben-zylester.

Eksempel 2 2

3-[[ acetyloxy) methyl]- 7-[[ 2-[ 4-( azidomethyl) fenyl]- 2-( 5-indanyloxycarbonyl) acetyl] amino]- 8- oxo- 5- thia- l- azabi-cyclo[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyre

Til 25,3 mmol 3-[ (acetyloxy)methyl]-7-[.[ 2-[ 4-•.( azidomethyl) fenyl] -2-carboxyacetyl] amino] -8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre i 35 ml dioxan tilsettes 6N saltsyre for å gi en pH på 2,5. Deretter tilsettes 24,1 mmol N,N'-dicyclohexylcarbodiimid i 35 ml dioxan og blandingen omrøres ved romtemperatur i 15 til 20 minutter etterfulgt av tilsetning av 24,1 mmol 5-indano.l. Blandingen omrøres i 4 timer. Det dannede N,N'-dicyclohexylurea fjernes ved filtrering og filtratet ekstraheres tre ganger med methylisobutylketon. Det organiske ekstrakt vaskes med vann, tørkes over magnesiumsulfat og konsentreres til tørr-het i vakuum under dannelse av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-(5-indanyloxycarbonyl]-acetyl]-amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre.

Eksempel 23

3-[( 2- methyl- l, 3, 4- thiadiazol- 5- ylthio) methyl]- 7-[[ 2-[ 4-( azidomethyl) fenyl] acetyl] amino]- 8- oxo- 5- thia- l- azabicyclo-[ 4. 2. 0] oct- 2- en- 2- carboxylsyre

En løsning av 3 mmol 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre i 100 ml vann behandles med 3 mmol natriumbicarbonat og 6 mmol 2-methyl-1,3,4-thiadiazol-5-ylthio ved 70° C under nitrogen i 3,5 timer. Vannet fjernes i vakuum og residuet taes opp i methanol.. Et stort overskudd av acetonitril tilsettes for å utfelle produktet som isoleres ved filtrering og tørkes i en vakuumdesikator under dannelse av 3-[ [ 2-[ 4-(azido:-methyl)fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]-oct-2-en-2-carboxylsyre

På lignende måte kan andre forbindelser ifølge oppfinnelsen hvor 3-stillingen i cefalosporinringen er substituert med en heterocyklisk thiomethylgruppe, fremstilles fra den tilsvarende 3-[(acetyloxy)methyl]-substituert cefa-tlosporinforbindelse ved omsetning med et passende heterocyklisk thiolderivat som her beskrevet.

Claims

1. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av formel

hvori aryl er fenyl eller 2-thienyl, Y er hydrogen, klor, brom, en rettkjedet eller forgrenet lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer eller en lavere alkoxygruppe med fra 1 til 4 carbonatomer forutsatt at når aryl er 2-thienyl, er Y hydrogen, Z er en binding, oxygen, svovel eller imino forutsatt at når aryl er 2-thienyl, er Z en binding, W er hydrogen, methyl, amino, hydroxy, SO^ H eller COOR^ hvori R-^ er hydrogen eller 5-indanyl, n er lik null, 1 eller 2 forutsatt at når W er forskjellig fra hydrogen eller methyl, og Z er forskjellig fra en binding, er n ikke lik null, R2 er hydrogen eller methoxy, M er hydrogen, et farmasøytisk akseptabelt ikkev -toksisk kation, alkanoyloxymethyl hvori alkanoyldelen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer og kan være rettkjedet eller forgrenet, alkanoylaminomethy1 hvori alkanoyldelen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer og kan være rettkjedet eller forgrenet og hvori aminonitrogenatomet kan være substituert med en alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer, alkoxycarbpnylaminomethy1 hvori alkoxydelen inneholder fra 1 til 4 carbonatomer og kan være rettkjedet eller forgrenet og hvori aminonitrogenatomet kan være substituert med en alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer, p-(alkanoyloxy)benzyl hvori alkanoyldelen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer og kan være rettkjedet eller forgrenet, eller aminoalkanoyloxymethy1 hvori alkanoyldelen inneholder fra 2 til 15 carbonatomer og aminonitrogenet kan være mono- eller di-substituert med en lavere alkylgruppe med fra 1 til 4 carbonatomer, X er hydrogen, acetoxy, 1,3,4-thiadiazol-5-ylthio, 3-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio, tetrazol-5-ylthio, l-methyltetrazol-5-ylthio, 2-methyl-1,3,4-oxadiazol-5-ylthio, 2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-ylthio eller 1,2,3-triazol-5-ylthio, eller farmasøytisk akseptable salter derav, karakterisert ved at når R-^ er hydrogen(a) et derivat av formelen

kobles med en syre av formelen

eller et funksjonelt derivat derav hvori W^ er hydrogen, methyl, amino, hydroxy, S03 H eller COOH, og R 2, X, M, Y, aryl, Z og n har de ovenfor angitte betydninger, i nærvær av et løsningsmiddel valgt fra ethylacetat, aceton, dioxan, acetonitril, kloroform, methylenklorid, tetrahydrofuran og dimethylformamid og eventuelt i nærvær av en base .valgt fra alkalibicarbonat ved en temperatur på fra -10 til 100° C i fra 30 minutter til 10 timer forutsatt at når W 2er amino, beskyttes aminogruppen med en egnet blokkerende gruppe før koblingsreaksjonen, eller(b) et derivat av formelen

hvori halo er klor eller brom, W 2 er hydrogen, methyl, amino, hydroxy, S03 H eller COOH, og Y, aryl, Z, n, R2 , X og M har de ovenfor angitte betydninger, behandles med natriumazid i et alkoholisk løsningsmiddel ved en temperatur på fra 0 til 100° C i fra 30 minutter.til 6 timer og eventuelt når W 2 e- amino, at aminogruppen beskyttes med en egnet blokkerende gruppe før reaksjonen, eller(c) når R <1> er 5-indanyl, av den forbindelse av formel

2 hvor W er COOH, og Y, aryl, Z, n, W, R2 , X og M har de ovenfor angitte betydninger, omsettes med 5-indanyl i et inert løsningsmiddel i nærvær av N,N'-dicyclohexylcarbo-diimid ved en pH på ca. 2,5 og en temperatur på fra 20 til 30° C, eller(d) når X er forskjellig fra hydrogen eller acetoxy og M er hydrogen, at en ekvivalent av et derivat av formelen

hvori Y, aryl, Z, ri, W og R 2har de ovenfor angitte betydninger, løses i vann ved en temperatur på fra 25 til 90° C under nitrogenatmosfære etterfulgt av tilsetning av en ekvivalent av en base valgt fra triethylammonium eller natriumbicarbonat og fra en til tre ekvivalenter av et heterothiolderivat av formelen H-S-hetero hvori delen -S-. heterp er 1,3,4-thiadiazol-5-ylthio, 3-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio, tetrazol-5-ylthio, l-methyltetrazol-5-ylthio, 2-methyl-l,3,4-oxadiazol-5-ylthio, 2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-ylthio eller 1,2,3-triazol-5-ylthio, hvoretter reaksjonsblandingen omrøres i 2 - 6 timer ved en temperatur fra 25 til 90° C, og (e) når et farmasøytisk akseptabelt salt ønskes, at en forbindelse av formelen

hvori Y, aryl, Z, n, W, R2/ X og M har dé tidligere angitte betydninger, omsettes med en farmasøytisk akseptabel syre eller base.

2. Fremgangsmåte ifølge krav ved fremstilling av forbindelser av den i krav 1 angitte formel hvori aryl er fenyl.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 2 ved fremstilling av forbindelser hvori R2 er i cis-stilling.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser hvori aryl er 2-thienyl.

5. Fremgangsmåte ifølge krav 4, ved fremstilling av forbindelser hvori R2 er i cis-stilling.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved .fremstilling av forbindelser hvori W er hydrogen. .

7. Fremgangsmåte ifølge krav 6 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er' en binding.

8. Fremgangsmåte ifølge krav 6 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er oxygen.

9. Fremgangsmåte ifølge krav 6 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er, imino.

10. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser hvori W er methyl.

11. - Fremgangsmåte ifølge krav 10 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er- en binding.

12. Fremgangsmåte ifølge krav 10 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er oxygen eller svovel.

13. Fremgangsmåte ifølge krav 10 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er imino.

14. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser hvori W er hydroxy.

15. Fremgangsmåte ifølge krav 14' ved fremstilling av forbindelser hvori Z er en binding.

16. Fremgangsmåte ifølge krav 14 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er oxygen eller svovel.

17. Fremgangsmåte ifølge krav 14 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er imino.

18. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser hvori W er åmino.

19. Fremgangsmåte ifølge krav 18 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er en binding.

20. Fremgangsmåte ifølge krav 18 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er oxygen eller svovel.

21. Fremgangsmåte ifølge krav 18 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er imino.

22. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser hvori W er COOR1 eller S03 H.

23. Fremgangsmåte ifølge krav 22 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er en binding.

24. Fremgangsmåte ifølge krav 22 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er oxygen eller svovel.

25. Fremgangsmåte ifølge krav 22 ved fremstilling av forbindelser hvori Z er imino.

26. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av en base av formelen

hvori W er valgt fra hydrogen, hydroxy, amino, COOH og SO^ H, X <1> er valgt fra hydfogen, acetoxy, 3-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio og l-methyltetrazol-5-ylthio, og hvori hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene er cis i forhold til hverandre, og farmasøytisk akseptable salter derav.

27. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl] acetyl]-amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

28. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(2-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azido-. methyl)fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]-oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

29. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(l-methyl-tetrazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl)-fenyl]acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oet-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

30. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-[(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-. hydroxyacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2- en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

31. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3- (2-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl) fenyl]-2-hydroxyacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-aza-bicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav. •

32. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(l-methyl-tetrazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-" 2- hydroxyacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]-oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

33.. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3- [(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-amino-acetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oet-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

34. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(2-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl) fenyl]-2-aminoacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabi-cyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

35. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(l-methyltetrazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-aminoacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.o]oct-2- en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

36. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3- [(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl] -2-carboxyacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0] oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

37. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(2-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl) f enyl] -2-carboxylacetyl] amino] -8-oxo-5-thia-l-aza-bicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

38. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(l-methyltetrazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-carboxyacetyl] amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2- en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

39. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3- [(acetyloxy)methyl]-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-sulfo-acétyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

40. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(2-methyl-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl) fenyl]-2-sulfoacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabi-cyclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

41. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3-(1-methy1tetrazol-5-ylthio)-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-sulfoacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicyclo[4.2.0]oct-2- en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.

42. Fremgangsmåte ifølge krav 26 ved fremstilling av 3- methyl-7-[[2-[4-(azidomethyl)fenyl]-2-aminoacetyl]amino]-8-oxo-5-thia-l-azabicy.clo [ 4 . 2 . 0] oct-2-en-2-carboxylsyre og farmasøytisk akseptable salter derav.