NO763773L - - Google Patents

Description

Oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte for forhindring og regulering av brystkjertelinfeksjoner hos husdyr, og mer spesielt vedrører oppfinnelsen en fremgangsmåte for behandling av mastitis hos kveg, forårsaket ved bakteriell infeksjon.

Det har lenge vært erkjent at opptreden av mastitis hos lakterende melkekuer har resultert i at betydelige mengder melk er blitt ødelagt. Eksempler på de organismer som vanligvis forårsaker bakteriell mastitis er E. coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus uberis, Streptococcus agalactiae. Tidligere har de mest effektive metoder for behandling av den kliniske tilstand gått ut på administrering av antibiotiske midler i melkekjertelen, f.eks. penicilliner, streptomycin, cefalosporiner og tetracykliner. Imidlertid har det vist seg at enkelte kuer blir immune mot en slik terapi. I noen tilfeller skyldes dette at sykdomsorganismen tilhører en stamme som er resistent overfor antibiotika. I andre tilfeller viser det seg at selv om den kausale bakterie ikke iboende er resistent når den isoleres, så presenterer den allikevel in vivo en slik sykdomstilstand at selv om den kan reduseres til et subklinisk nivå, så vil den konstant gjenfinnes i dyret en viss tid etter at behandlingen er stanset. Det menes at denne type tilstand forårsakes, i det minste delvis, av den kausale organisme som avsettes i buktningene i juret eller i cellene og blir fysisk utilgjengelig for antibiotika. Hvis tilstanden er et resultat av en infeksjon av en resistent organisme, så kan det være at selv forlenget behandling med bred-spektrede antibiotika ikke er effektiv.

Hvis infeksjonen er av den tilbakevendende type, så kan tilstanden reguleres ved normal terapi med antibiotika, men kuene kan aldri bli helt fri for sykdommen. Hvis en ku lider av denne tilstand, så er den ikke bare en upålitelig melkeprodusent, men utgjør også en konstant trusel om infeksjon til andre kuer i bølingen. Denne tilstand kan aldri løses tilfredsstillende, og det ender med at en slik ku må slaktes.

I de ovennevnte tilfeller forblir et vedvarende, høyt nivå av rest-antibiotikum, på grunn av den dose som kreves for å behandle selv ikke-resistente mikro-organismer, i juret og over-føres på sin side til melken. Følgelig må betydelige mengder melk tappes til kloakk etter at behandlingen er avsluttet, før nivået av antibiotikum i melken er redusert til et nivå som er akseptabelt for fortæring av mennesker. Derfor ødelegges melk ikke bare som et resultat av sykdommen, men også som et resultat av behandlingen.

I den hensikt å redusere denne tapte melkeproduksjon til et minimum er det svært viktig å forhindre eller undertrykke slike infeksjoner til subkliniske nivåer under laktasjonen. For å redusere det generelle infeksjonsnivå i en bøling og for å klare å fjerne all infeksjon før kalving, er det mulig å anvende preventiv antibiotisk terapi i melkekjertelen under dyrets av-venningsperiode eller "tørkeperiode". En slik behandling gir bare begrenset beskyttelse under laktasjonen. Som en ytterligere preventiv foranstaltning tilsettes av og til visse oralt absor-berte antibiotika til dyrefor. Imidlertid må, på bakgrunn av melkedyrs høye kroppsvekt og deres høye kost-gjennomgang, rela-tivt store mengder antibiotikum administreres for at man skal kunne opprettholde effektive nivåer av antibiotikum i dyret. Denne metode resulterer igjen bare i begrenset beskyttelse. På grunn av de forannevnte betraktninger søker man stadig etter forbedringer og nye metoder ved behandling av mastitis.

Det er nå oppdaget at visse betydelige forbedringer ved behandling av mastitis kan oppnås ved administrering i melke-kj ertelen av visse dobbeltstrengede polynukleotider slik at det nå er mulig å behandle immune mastitistUstander. Det menes at .polynukleotidene utøver sin effekt i det minste delvis ved sin evne til å stimulere den naturlige forsvarsmekanisme som er til stede i juret.

I henhold til oppfinnelsen tilveiebringes en fremgangsmåte for profylakse og behandling av bakteriell mastitis hos melkedyr, og fremgangsmåten omfatter å administrere til slike dyr et veterinærpreparat som omfatter en dobbeltstrenget ribonukleinsyre (dsRNA) eller et dobbeltstrenget derivat av en dobbeltstrenget ribonukleinsyre (dsRNA) eller et kompleks av en dobbeltstrenget ribonukleinsyre med en polybase sammen med en veterinær-akseptabel base via melkekjertelen.

Betegnelsen "dobbeltstrenget" brukes her anvendt på ribonukleinsyrer for å referere til det karakteristikum hvorved to ribonukleinsyremolekyler.er assosiert ved hydrogenbinding mellom komplimentære baser i hvert molekyl.

De dsRNA-forbindelser som kan anvendes i forbindelse med oppfinnelsen, kan være syntetiske eller av naturlig opprinnelse. Syntetiske dsRNA-forbindelser som er anvendelige ved fremgangsmåten, er poly I:poly C; poly A:poly U; poly Grpoly C; særlig polyI:poly C. Komplekser mellom syntetiske dobbeltstrengede ribonukleinsyrer og polybaser, som kan anvendes ved fremgangsmåten, er f.eks. komplekset mellom poly I:poly C eller poly A:poly U og DEAE dekstran, dimetrinbromid, positivt ladede proteiner og polyaminosyrer, f.eks. histon, polyarginin, poly-lysin og polyornatin som er beskrevet i US-patentskrifter nr. 3679654 og 3725545.

Det foretrekkes imidlertid å anvende en dobbeltstrenget ribonukleinsyre av naturlig opprinnelse, eller et dobbeltstrenget derivat derav, eller et kompleks derav med en polybase.

Betegnelsen "dobbeltstrenget ribonukleinsyre av naturlig opprinnelse" skal her bety enhver dobbeltstrenget ribonukleinsyre som kan isoleres fra en naturlig forekommende kilde, og utelukker syntetiske dobbeltstrengede ribonukleinsyrer som dem som er spesifisert ovenfor. Blant de spesifikke, naturlig forekommende kilder av dsRNA er for eksempel viruspartikler som finnes i viralt infiserte fungi, f.eks. Penicillia, f.eks. P. Chrysogenium, kfr. britisk patent nr. 1.170.929;

P. Stoloniferum, kfr. Bankes m.fl. i Nature 223 155 1968; og Aspergilli, f.eks. A. niger og A. foetidus; reovirus 3-viron og den replikative form av MS 2 kolifage og MU G mutante kolifage.

Betegnelsen "dobbeltstrenget derivat av en dobbeltstrenget ribonukleinsyre av naturlig opprinnelse" betyr enhver dobbeltstrenget ribonukleinsyre av naturlig opprinnelse som er blitt utsatt for kjemisk eller biokjemisk (f.eks. enzymatisk) omdannelse som forandrer den primære og/eller sekundære og/eller tertiære struktur, f.eks. de N-oksyder som er beskrevet i britisk patentskrift nr. 1284150 eller de alkali-modifiserte dsRNA-forbindelser i henhold til britisk patent nr. 1356263, eller de formaldehyd-modifiserte dsRNA-forbindelser som er beskrevet i britisk patentskrift nr. 1.411.748, forutsatt at det resulterende derivat bevarer en vesentlig grad av base-pardannelse mellom komplementære strenger.

Kompleksene mellom dsRNA av naturlig opprinnelse og polybaser som er egnet for anvendelse ved fremgangsmåten, er for eksempel slike mellom kvaternære aminopolymerer som er beskrevet i britisk patentskrift nr. 1410013 hvorav de som er mest egnet er de "vannløselige" komplekser som deri beskrevet, spesielt det kompleks som der er definert som C3.

De andre komplekser mellom dsRNA-forbindelser av naturlig opprinnelse og polybaser er de som er åpenbart i belgisk patentskrift nr. 834859 mellom dsRNA og polyarginin. Av disse er ett som er særlig egnet, det kompleks som er beskrevet der med molekylvekt for polyarginin på i alt vesentlig 6.500.

Enda en klasse av kompleks som er egnet for anvendelse ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen, er beskrevet i belgisk patentskrift nr. 824947.

Hvis et kompleks anvendes, foretrekkes det å anvende komplekset mellom dsRNA som stammer fra P. chrysogenum, og polyarginin.

Det foretrekkes imidlertid ved denne fremgangsmåte å anvende en dsRNA av naturlig opprinnelse, spesielt det som oppnås fra P. chrysogenum.

Denne fremgangsmåte kan anvendes for behandling av kveg-truende mastitis enten under laktering eller i den tørre periode. Alternativt kan behandlingen gis den tilsynelatende uinfiserte

ku i den tørre periode. Medikamentet administreres direkte til juret via strek-kanalen. Når kua lakterer, administreres medikamentet etter melking.

For behandling av den kliniske tilstand består en kur-dose, i overensstemmelse med fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen, i alt vesentlig av den daglige administrering av fra 0,1 til 50 mg av dsRNA eller et derivat eller kompleks derav,

pr. dag til den infiserte spene eller til hver av dé infiserte spener i juret. Med 50 mg av et kompleks av en dsRNA menes den mengde av komplekset som inneholder 50 mg dsRNA.

Den daglige dose av dsRNA er helst fra 5 til 30 mg pr. spene, men er fortrinnsvis 20 mg pr. spene.

Den nøyaktige mengde av dsRNA, derivatet eller komplekset derav, som skal administreres til dyret, samt behandlings-tiden er avhengig av graden av infeksjon og betennelse i juret. Administrering av de ovennevnte polynukleotider og deres derivater og komplekser forårsaker en viss lokal betennelse, i en dose som nærmer seg 50 mg pr. spene. Denne betennelse er synlig for en person som administrerer substansen. Det ville derfor være å foretrekke å administrere mindre doser i et mer forlenget tidsrom enn en stor dose i et kort tidsrom, slik at man ikke unødig skulle forverre en eventuell betennelse som blir forårsaket av infeksjonen. Behandlingen kan fortsette inntil juret produserer normal, uinfisert melk.

Når det gjelder klinisk mastitis er det ofte ikke nød-vendig å opprettholde administrering i hele tidsrommet som sykdomssymptomene er til stede i. Generelt vil administrering av dsRNA i et tidsrom av 3 dager være tilstrekkelig til å bevirke at sykdommen avtar.

For formålet med profylakse eller behandling av den subkliniske tilstand administreres en dose på mellom 0,1 og 50 mg, men mer egnet 0,1-20 mg, daglig til hver spene i juret i minst en del av, men mer passende i hele den tørre periode. Helst oppnås denne administrering ved anvendelse av et preparat med langsom avgivelse, som skal omtales nedenunder.

For formålene med slik administrering presenteres dsRNA som en vandig løsning eller en suspensjon for infusjon, eller som en flytende eller halvflytende salve for ekstrudering inn i juret. For infusjons formål tillages preparatet i sterilt pyrogenfritt vann, pyrogenfritt saltvann eller en pyrogenfri puffer som er akseptabel for administrering i melkekjertelen. For ekstruderings-formål tillages preparatet i en olje eller en oljeaktig ester som er akseptabel for administrering i melkekjertelen, f.eks. et di- eller triglycerid av en Cg - C1Q-fettsyre, eller alternativt kan et vannfritt medium, f.eks. propylenglykol, som er akseptabelt for en slik administreringsmåte, også anvendes. Om ønskes kan det vandige eller oljeaktige preparat også inneholde solubiliserings-, suspenderings-, dispergerings-, konserverings—, stabiliserings-, emulgerings- eller pufringsmidler.

For profylakseformål tillages dsRNA, derivatet eller komplekset derav egnet i en viskøs salve eller et granulat med langsom avgivelse.Egnede salver for administrering i melke-kj ertelen i kuenes tørre periode er kjent i antibiotisk terapi

i den tørre periode. Slike salver settes sammen slik at de til-later langsom frigjørelse av medikament.

Når det er sammensatt i et granulat med langsom fri-givelse, dispergeres dsRNA i en parenteralt akseptabel ikke-irriterende vokssubstans, f.eks. karnaubavoks, montanvoks, bi-voks og glycerider, f.eks. hydrogenert ricinusolje eller hydrogenert smult.

Disse granulater kan fremstilles ved kjente metoder.

I en egnet granuleringsteknikk (i henhold til Lachman m.fl.,

"The Theory and Practice of Industrial Pharmacy", Lea&Febieger, 1970, Ch. 12, s.322) blandes et bindemiddel, som omtalt ovenfor, og medikamentet i en planetarblander eller Z-blander, og et egnet organisk løsningsmiddel tilsettes for frembringelse av en blanding av granuleringskonsistens, som så moses gjennom en roterende granulator. Det resulterende granulat ovnstørkes og hammer-mølles til den ønskede størrelse. Andre fremgangsmåter for frem-stilling av granulat er forstøvningstørkning (se Lachman m.fl., "Theory and Practice of Industrial Pharmacy", Lea&Febiger 1970, s.403-5), forstøvningsinndampning, lavtemperatur-forstøvnings-tørkning, eller koaservering (se Lachman m.fl., "The Theory and Practice of Industrial Pharmacy",. 1970, s.393; og Ranney M.W., Microencapsulation Technology, 1969, Noyes Data Corporation,

New Jersey, U.S.A. Granulatet kan belegges med et konvensjonelt belegningsmiddel og administreres gjerne i en oljeaktig suspensjon eller emulsjon.

Alle disse preparater fylles fordelaktig i rør eller sprøytepakninger av konvensjonell type for administrering i melkekjertelen, dvs. at de utstyres med en kanyle-holder for infusjon direkte i melkekjertelen via strek-kanalen.

Alternativt vil dsRNA eller dobbeltstrengede derivater eller kompleks med en polybase tilføres for bruk som et fryse-tørket pulver som er egnet for oppløsning eller suspensjon i en vandig eller annen akseptabel parenteral bærer, spesielt pyrogenfritt saltvann. I slike tilfeller vil brukeren bli utstyrt med en to-delt pakning eller sprøyte eller en beholder med to pakninger, hvor den ene del eller pakning inneholder en avmålt mengde av dsRNA, et derivat eller kompleks derav og den annen inneholder en avmålt mengde vandig bærer. Den første del eller pakning vil hensiktsmessig inneholde en enhetsdose av medikament som tidligere omtalt, og den annen del eller pakning vil inneholde en mengde av vandig bærer. En hensiktsmessig mengde er tilstrekkelig slik at når den blandes, vil konsentrasjonen av dsRNA, derivatet eller komplekset derav være fra 0,1 til 10 mg ml

Den generelle fremgangsmåte i henhold til oppfinnelsen er også nyttig for å forbedre den totale effektivitet ved normal antibiotisk terapi. Det har vist seg at det er spesielt effek-tivt å kombinere polynukleotidbehandling med antibiotisk behandling snarere enn å anvende behandlingene separat.

For formålet med en slik kombinert behandling kan poly-nukleotidet administreres i et uavhengig eller et kombinert preparat. I den tørre periode kan den dobbeltstrengede ribonukleinsyre eller det dobbeltstrengede derivat derav eller kompleks derav med en polybase og antibiotikumet administreres samtidig. I laktasjonsperioden kan hvert medikament administreres enten alternativt eller samtidig etter melking. Dosen av antibiotikum som er hensiktsmessig, er den som normalt administreres når det dreier seg om klinisk mastitis.

Primært er de antibiotika som anvendes i kombinasjon med polynukleotidene, penicillin G og salter derav, spesielt prokainsaltet; halv-syntetiske penicilliner, f.eks. ampicillin, amoxycillin, carbenicillin, cloxacillin, flucloxacillin, ticarcillin, penicillin, talampicillin, nafcillin, dicloxacillin, oxacillin, methicillin, carfecillin; og blandinger av slike penicilliner, f.eks. ampicillin/cloxacillin, amoxycillin/ cloxacillin eller tiacarcillin/flucloxacillin, og deres veterinært akseptable salter og estere; cefalosporiner, f.eks. cefalonium og cefoxazol, deres veterinært akseptable salter og estere.

Egnede salter av ovennevnte penicilliner og cefalosporiner er deres natrium-, kalium-, benzatin- og prokain-salter.

Spesielt nyttige penicilliner er normalt ampicillin, cloxacillin, ampicillin/cloxacillin, amoxycillin/cloxacillin, og natrium- og kaliumsalter derav.

Et spesielt nyttig cefalosporin er cefoxazol.

For formålene med en slik behandling er det høyst fordelaktig å presentere medikamentene i et kombinert preparat.

For formålene med administrering i melkekjertelen tillages kombinasjonen av polynukleotid og antibiotikum i standard-. preparater for anvendelse i melkekjertelen, som tidligere omtalt. De samme betraktninger vedrørende hensiktsmessige og foretrukne dsRNA, dobbeltstrengede derivater og komplekser med polybaser, samt antibiotikum passer på disse preparater i likhet med på fremgangsmåten for behandling av mastitis med disse komponenter individuelt.

Blant de mulige kombinasjoner av antibiotika og polynukleotider har det vist seg at de som inneholder et halv-syntetisk penicillin, særlig cloxacillin, eller et halv-syntetisk cefalosporin, særlig cefoxazol, og dsRNA er det som stammer fra P. chrysogenum som referert til ovenfor.

Derfor, i et ytterligere aspekt inkluderer oppfinnelsen innen sin ramme veterinærpreparater som er egnet for administrering i melkekjertelen, omfattende et halv-syntetisk penicillin eller halv-syntetisk cefalosporin og den dsRNA som stammer fra P.chrysogenum i henhold til britisk patent nr. 1.170.929 som det er referert til her, i kombinasjon med en egnet veterinært akseptabel bærer.

Følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen.

I den hensikt å hjelpe på forståelsen av de følgende eksempler skal det påpekes at melken som produseres av dyr, inneholder et antall hvite celler som ligner dem som finnes i blodet. Nærværet av lokal irritasjon eller infeksjon i juret forårsaker økning i antall hvite celler som produseres i melken, og gir et mål på nivået av tilstedeværende infeksjon. Når det gjelder mastitis forårsaket av mikro-organismer, øker antall neutrofiler spesielt, men antall andre celletyper (for eksempel makrofager) øker også; dette kan utgjøre noe av vertsdyrets forsvarsmekanisme.

Eksemplene 1-6 illustrerer behandling av mastitis med en renset dobbeltstrenget ribonukleinsyre ekstrahert fra Penicillium chrysogenum ATCC 10002 som inneholder en stor mengde viruspartikler, som beskrevet i britisk patentskrift nr. 1.170.929.

Eksempel 1

En Jersey-ku hadde symptomer på mastitis i sin venstre bakspene (L.H.). Spenen var opphovnet og varm å ta på. Melken som ble produsert, inneholdt blodklumper. Bakteriell under-søkelse av melken viste at infeksjonen ble forårsaket av bakterien Streptococcus uberis. 20 mg dsRNA ble infusert i den infiserte spene i 5 ml pyrogenfritt saltvann daglig i 3 på-følgende dager. Bakteriologiresultatene er vist i tabell 1.

Det kan sees at ovennevnte behandling forårsaket reduk-sjon av infeksjonen og en oppløsning av den kliniske tilstand. På fjerde dag etter den tredje infusjon ble melkeprøvene sterile og normale av utseende.

Eksempel 2

En Jersey-ku som nylig hadde kalvet, viste 4 dager etter kalving en ikke-hemolytisk koliform infeksjon i høyre forspene (R.F.). Symptomene var nærvær av noen få, små klumper i melken og tegn påEscher. coli ved utstrykning.

R.F.-spenen ble infusert via strek-kanalen med 20 mg dsRNA i pyrogenfritt saltvann (C.T.3243) daglig i 3 påfølgende dager etter kveldsmelkingen. Celle-antallet og bakteriologien er vist i tabell 2. Etter første infusjon forsvant klumpene fra melken. Det høye antall hvite celler, 40.000.000, som ble funnet i melken før infusjon, avtok umiddelbart til normal verdi på

dag 13. Nivået av E. coli-infeksjon avtok inntil det totalt forsvant ved sjette melking etter siste infusjon (dag 5) da melken ble steril.

Eksempel 3

En ku hadde symptomer på mastitis i sin høyre bakspene forårsaket av en hemolytisk Coagulase +ve Staphylococcus-infeksjon og ble infusert med tre daglige doser av dsRNA i pyrogenfritt saltvann via strek-kanalen. Celle-antallet og bakteriologien er som vist i tabell 3.

Eksempel 4

En ku hadde symptomer på mastitis i sin venstre forspene forårsaket av en hemolytisk E. coli-infeksjon og ble infusert med doser av dsRNA i pyrogenfritt saltvann via strek-kanalen. Resultatene er vist i tabell 4.

Eksempel 5

Følgende preparater:-

a) dsRNA (20 mg) og cefoxazol (250 mg)

b) vannløselig kompleks i henhold til britisk patent nr. 1.410.013 (200 mg) og

cloxacillin (200 mg)

c) poly I:poly C (20 mg) og cloxacillin (200 mg) ble infusert i 5 ml pyrogenfritt saltvann, ett til

hver spene i juret på en uinfisert ku.

Antall hvite celler ble målt før og etter infusjonene og er gjengitt i tabell 5.

Dette var en normal ku uten mastitis, og det vil sees av tellingene av hvite celler at alle tre behandlinger produserte en bemerkelsesverdig respons i kroppens forsvarsmekanisme i kraft av den store økning i antall hvite celler som er tilgjengelige for å bekjempe infeksjonen.

Eksempel 6

Tre kuer som hadde kronisk mastitis forårsaket av hemolytisk coagulase-positiv staphylococcus ble utvalgt. Hver av disse kuer var kjent å være immun mot kombinert ampicillin/ cloxacillin-terapi.

Bakteriell undersøkelse viste at den første ku hadde stafylokokk-infeksjoner i høyre forspene (R.F.) og høyre bakspene (R.H.) og venstre bakspene (L.H.) i juret. Den annen ku hadde samme infeksjon i R.H.-spenen og L.H.-spenen i juret. Den tredje ku hadde en infeksjon bare i L.H.-spenen. En dose på 20 mg dsRNA i sterilt vann og 200 mg natrium-cloxacillin i sterilt vann (1 ml) ble administrert i rekkefølge til hvert infiserte jur i et tidsrom av tre påfølgende dager. Infeksjonene avtok,

og ti dager etter infusjonen viste bakteriell undersøkelse at R.H.- og L.H.-spenen til første ku hadde et lavt nivå av infeksjon. Alle gjenværende spener var klare.

Eksempel 7

Et oljebasert preparat av dsRNA ble laget på følgende måte:- En porsjon av dsRNA ekvivalent med 300 mg aktivt materiale ble dispergert inn i 45 g oljebase. Oljebasen besto av: 3 g porsjoner av preparatet ble fylt i engangs-sprøyter, hver inneholdende 20 mg aktivt materiale.

Toksisitet

Fullvoksne bavianer ble administrert med en dose av

20 mg/kg/dag av dsRNA i 28 dager i en første test og 10 mg/kg/dag i 28 dager i en annen test, og det inntraff ingen dødsfall. I en tredje test ble bavianer administrert 0,2 mg/kg/dag uten noen tilsynelatende dårlig effekt.

Kuer med 200 kg kroppsvekt er blitt administrert med opp til 50 mg/kg dsRNA intraperitonealt. Minimale bivirkninger ble observert, og det inntraff ingen dødsfall.

Claims (12)

1. Fremgangsmåte for forbedring av effektiviteten av antibiotiske preparater som er egnet for administrering i melkekjertelen hos kveg for profylakse og behandling av bakterie-mastitis, karakterisert vedblanding av en dobbeltstrenget ribonukleinsyre eller et dobbeltstrenget derivat derav eller et kompleks derav med en polybase og slike i og for seg kjente antibiotiske preparater for anvendelse i melkekjertelen.

2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,karakterisert vedat preparatet omfatter den dobbeltstrengete ribonukleinsyre poly I:poly C.

3. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,karakterisert vedat preparatet omfatter en dobbeltstrenget ribonukleinsyre av naturlig opprinnelse eller et kompleks mellom en polybase og en dobbeltstrenget ribonukleinsyre av naturlig opprinnelse eller et dobbeltstrenget derivat av en dobbeltstrenget ribonukleinsyre av naturlig opprinnelse.

4. Fremgangsmåte som angitt i krav 3,karakterisert vedat den dobbeltstrenget.e ribonukleinsyre stammer fra P. chrysogenum.

5. Fremgangsmåte som angitt i krav 3,karakterisert vedat komplekset er kompleksC3 som før definert.

6. Fremgangsmåte som angitt i krav 3,karakterisert vedat komplekset er mellom et polyarginin som har molekyl vekt i alt vesentlig på 6 500, og den dobbeltstrengete ribonukleinsyre som stammer fra P. chrysogenum.

7. Fremgangsmåte som angitt i kirav 1-6,karakterisert vedat antibiotikumet er et semisyntetisk penicillin eller semisyntetisk cefalosporin.

8. Fremgangsmåte som angitt i krav 7,karakterisert vedat antibiotikumet er cloxacillin.

9. Fremgangsmåte som angitt i krav 8,karakterisert vedat antibiotikumet er cefoxazol.

10. Fremgangsmåte som angitt i krav 1 til 9,karakterisert vedat blandingen utføres ved sekvensiell administrering av antibiotikum og dobbeltstrenget ribonukleinsyre eller dobbeltstrenget derivat derav eller et kompleks derav med en polybase til juret.

11. Sprøyte/kanylekombinasjon for anvendelse ved fremgangsmåten i henhold til krav 1,karakterisert vedat kanylen er av den type som er egnet for administrering i melkekjertelen og hvor sprøyten inneholder en enhetsdose av et preparat fremstilt i henhold til kravene 1 til 9.

12. Sprøyte/kanylekombinasjon som angitt i krav 11,karakterisert vedat kanylen er av den type som er egnet for administrering i melkekjertelen, og at sprøyten inneholder en enhetsdose av et preparat som omfatter en dobbeltstrenget ribonukleinsyre eller et dobbeltstrenget derivat derav eller et kompleks derav med en polybase.