NO830737L - Fremgangsmaate ved fremstilling av carboxyalkyl-dipeptider - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår carboxyalkyl-dipeptider substituert med grupper inneholdende en sulfamoyl-gruppe. Forbindelsene er anvendbare som antihypertensive midler ved behandling av kongestiv hjertesvikt og glaucoma.

Carboxyalkyl-dipeptider som er anvendbare som inhibitorer av angiotensinomdannende enzym og som antihypertensive midler er kjent fra publisert europapatentsøk-nad 12401 og 50800.

Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen er forbindelser av formel

og farmasøytisk akseptable salter derav, og de farmasøytisk akseptable salter av de frie forbindelser og estere, hvor R<1>og R 2 uavhengig er hydrogen eller lavere alkyl; gruppen er én av strukturene II til VIII hvori B er en mettet eller aromatisk ring, eller 3 4 5 en av R , R og R er en gruppe Z-(CH9). -, hvori Z har én av følgende verdier Zx 1 til Z-i /-v

Q

hvori R er Cl eller CF3;

R^ er hydrogen eller halogen;

R 7 er hydrogen, halogen, carboxy, hydroxy eller amino;

R 9 og R 10 er uavhengig hydrogen, lavere alkyl eller halo-12 lavere alkyl; R,, er hydrogen eller lavere alkyl; R er hydrogen, lavere alkyl eller fenyl lavere alkyl; og R 9 kan også være fenyl eller fenyl lavere alkyl;

og når R 3 er gruppen Z-(CH2) er

R<3>Z1-(CH2)1_6-, Z2-(CH2)1_6-, Z3-(CH2)1_6-,

Z<4->CH2-, Z5-(CH2)1_6-, Z6-(CH2)1_6-, Z7-(CH2)1_6-,

Z<8->(CH2)1_6-, Z<9->(CH2)1_6-, eller Z10-(CH2) 1_6~»

R 4 er lavere alkyl, benzyl, benzyloxy, benzylthio, fenoxy

eller fenylthio,

R^ er hydrogen; og gruppen

er én av strukturene

II til VIII;

og når R<4>er gruppen Z-(CH2)Q_g-, er

R<4>Z<1->(CH2)0_6-, Z<2->(CH2)0_6-, Z<3->(CH2)0_6<-,>

Z 4 (CH2)0_6-, Z 5 -(CH2)Q_6-, Z 6 -(CH2)0_6-, Z 7-(CH2)0_6-,

Z<8->(CH2)0_6-,<Z>9-(CH2)0_6- eller Z<10->(CH2)0_g- og

R 3 er hydrogen, lavere alkyl eller aminolavere alkyl og

er hydrogen

R^ er hydrogen; og gruppen

er én av strukturene

II til VIII;

og når R<5>er gruppen Z-(CH2) -, er R<5>Z<1>, Z<2>, Z<3>, Z<4>, Z<5>,Z<6>, Z<7>, Z<8>, Z9 eller Z<10>,

R 3 er hydrogen, lavere alkyl eller amino lavere alkyl og

R 4 er lavere alkyl, benzyl, benzyloxy, benzylthio, fenoxy eller fenylthio; og

gruppen

er én av strukturene II til VII.

En utførelsesform av oppfinnelsen omfatter forbindelser av formel I, dets estere og salter, hvori R<4>er gruppen Z-(CH2)p_g-. Blant disse forbindelser er visse grupper av forbindelser foretrukne:

.) forbindelser hvori gruppen

er gruppen av formel II, IV (hvori B er en mettet ring) eller VIII, 5 fortrinnsvis er R hydrogen; .) forbindelser hvori R<4>er Z-(CH2)0_6~, Z er Z<1>, Z<2>, Z<3>, Z<4>, Z<5>, Z<7,><Z8,>Z<9>eller Z<10>;

.) forbindelser hvori R^ 4 er Z 1-(CH2)2 Her 3~'

Z2-(CH2)2 eller 3-, Z3-(CH2)2 eller 3-,6Z*-(CH2)2 eller 3-, Z~(CH2 feller 3"' Z _(CH2)2 eller 3~' Z _(CH2>2 eller 3", Z °-(CH2)2 eller 3<-;>44

.) forbindelser hvori er Z j

1 2

.) forbindelser hvori R og R er hydrogen; .)' forbindelser hvori R 6 er hydrogen og R<7>er. hydrogen eller hydroxy; .) forbindelser hvori R<9>og R<10>er uavhengig hydrogen eller methyl; .) forbindelser hvori R o er klor; .) forbindelser hvori R 3 er methyl; c) forbindelser hvori R 1 og R 2 uavhengig er hydrogen eller lavere alkyl (fortrinnsvis hydrogen), gruppen

er gruppen av formel II eller IV, hvori B er en mettet ring og R<5>er hydrogen, R4 er Z<1->(CH2)3-, Z2-(CH2)3-eller Z 4 , R 6 og R7 ' er hydrogen og R 8 er klor; og R 3 er hydrogen, lavere alkyl eller amino lavere alkyl (fortrinnsvis methyl); .) av særlig interesse er forbindelser hvori R 1 og R 2 er hydrogen, gruppen

er gruppen av formel IV hvori B er en mettet ring, og R5 er hydrogen, R4 er Z1-(CH2)3- eller Z2-(CH2)3-, hvori RD (\ er hydrogen, R 7 er hydrogen eller hydroxy og R R er klor, og R 3 er methyl, fortrinnsvis i form av dets mono- eller di-ethylestere. Også analoge forbindelser hvori gruppen

er foretrukne.

En annen utførelsesform av oppfinnelsen omfatter forbindelser av formel I, dets estere og salter, hvori R<3>

er gruppen Z-(CH2)0_6~. Blant disse forbindelser er følgende grupper av forbindelser foretrukne:

.) forbindelser hvori gruppen

er gruppen av formel II, IV (hvori B er en mettet ring) eller vill; .) forbindelser hvori R<3>er Z<1->(CH2)4-, Z<2->(CH2)4~, Z<3->(CH2)4-, Z<4->CH2-, Z<5->(CH2)4-, Z<6->(CH2)4-, Z<7->(CH2)4",Z<8->(CH2)4-, Z<9->(CH2)4- eller Z<l0->(CH2)4<-;>.) forbindelser hvori R"*" og R<2>er hydrogen; .) forbindelser hvori R fi er hydrogen og R 7 er hydrogen eller hydroxy; .) forbindelser hvori R 9 og R 10 uavhengig er hydrogen eller methyl; .) forbindelser hvori R Qer klor; 4 .) forbindelser hvori R er benzyl eller ethyl; .) forbindelser hvori R 1 og R 2 uavhengig er hydrogen eller lavere alkyl (fortrinnsvis hydrogen), gruppen

er gruppen av formel II eller IV, hvori B er en mettet ring, og R er hydrogen, R er Z -(CH2)4~, Z -(CH2)4~ eller Z<4->CH2~, R6 og R<7>er hydrogen og R8 er klor og R<4>er

hvori m er null eller 1, 1) av særlig interesse er forbindelser hvori R og R er hydrogen, gruppen

er gruppen av formel IV, hvori B er en mettet ring

og R er hydrogen, R er Z -(CH2)4~ eller Z -(CH2)4~, hvori

R^ og R7 er hydrogen, R8 er klor; og R4 er benzyl, fortrinnsvis i form av dets mono- eller di-ethylester. Også de analoge forbindelser hvori gruppen

er eller

er foretrukne.

En andre utførelsesform av oppfinnelsen omfatter forbindelser av formel I, dets estere og salter hvori R 5 er gruppen Z-(CH2)q_6-. Blant disse forbindelser er følgende grupper av forbindelser foretrukne:

.) forbindelser hvori gruppen

er gruppen av formel II, VI (hvori B er en aroma-

tisk ring) eller IV (hvori B er en metet ring);

.) forbindelser hvori gruppen f

.) forbindelser hvori R<5>er Z<1>,Z<2>, :z<3>, Z<5>, Z<7>,Z°, Z<9>eller Z<10>; 1 2 .) forbindelser hvori R og R er hydrogen; 6 7 .) forbindelser hvori R er hydrogen og R er hydrogen eller hydroxy; .) forbindelser hvor R 9 og R 10 uavhengig er hydrogen eller methyl; .) forbindelser hvori R g er klor; .) forbindelser hvori R 3 er methyl; .) forbindelser hvori R 4 er benzyl eller ethyl; .) forbindelser hvori R 1 og R 2 uavhengig er hydrogen eller lavere alkyl, gruppen

er gruppen av formel III, IV, V, VI eller VII, R<4>er

hvori m er null eller 1, og R^ er Z og

Z<2>, hvori R<6>og R<7>er hydrogen og R<8>er klor, og R<3>er hydrogen eller lavere alkyl (fortrinnsvis methyl).

De lavere alkylgrupper innbefatter, om ikke annet er angitt, rettkjedede og forgrenede hydrocarbonradikaler fra 1 til 6 carbonatomer, f.eks. methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, t-butyl, pentyl, isopentyl, hexyl, cyclopropyl, cyclohexyl og lignende.

Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen danner estere. I disse estere kan hydroxygruppene i carbogruppene vist i formel I erstattes med de samme eller forskjellige grupper som er valgt fra alkoxy med fra 1 til 8 carbonatomer, fenoxy, fenylalkyloxy med fra 1 til 10 carbonatomer, -OCH20CO-alkyl med fra 3 til 8 carbonatomer, -OCH2CO-fenyl, -0 (CH2)K-0-fenyl, hvori K.. er 1 eller 2, og fenylringen kan være substituert med hydroxy, triflugrmethyl, alkoxy med fra 1 til 6 carbonatomer eller alkyl med fra 1 til 6 carbonatomer (fenylgruppen inneholder fortrinnsvis en substituent), og

-0 (CH2)K-0-nafthyl hvori K er 1 eller 2.

Foretrukne er alkylestere (alkylgruppen er som ovenfor definert) og arylestere, spesielt ethyl og benzylestere. Av særlig interesse er monoestrene hvori carboxy-

gruppen bundet til gruppen

er i den fri form.

Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen danner salter med forskjellige uorganiske og organiske syrer og baser som også er innen oppfinnelsens ramme. Slike salter innbefatter ammoniumsalter, alkalimetallsalter slik som natrium- og kaliumsalter (som er foretrukket), jordalkali-metallsalter slik som kalsium- og magnesiumsalter, salter med organiske baser, f.eks. dicyclohexylaminsalter, N-methyl-D-glucamin, salter med aminosyrer slik som arginin, lysin og lignende. Salter med organiske og uorganiske syrer, kan også fremstilles, f.eks. HCl, HBr, H2S04, H^PO^, methansulfonsyre, toluensulfonsyre, maleinsyre, fumarsyre og kamfersulfonsyre. De ikke-toksiske fysiologisk akseptable salter er foretrukne, selv om andre salter også er anvendbare, f.eks. ved isolering og rensing av produktet.

Oppfinnelsen innbefatter alle mulige stereoisomere av forbindelsene. Foretrukne stereoisomerer er de hvori den absolutte konfigurasjon ved hver av de tre carbonatomer er bundet til både en nitrogen- og en carbonylgruppe tilsvarer mest nær opp til den absolutte konfigurasjon av L-aminosyrer.

De foretrukne forbindelser inneholder en cis, synoctahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-del eller en 1,4-dithia-7-azaspiro[4,4]nonan-8(S)-carboxylsyre-del.

Ikke begrensende eksempler på foretrukne forbindelser fremstilt ifølge oppfinnelsen er: l-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoyl)-benzen-sulfonaminopentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2 (S)-carboxylsyre, 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamyl)benzamido-pen tyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre, 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-2-hydroxy-5-sulfamoyl)-benzamidopentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2 (S)-carboxylsyre, l-{Na-[1-(S)-ethoxycarbonyl-3-fenylpropyl]-Ne-[(4-klor-3-sulfamoyl)benzensulfonyl]-(S)-lysyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre, l-{Na-[l(S)-ethoxycarbonyl-3-fenylpropyl]-Ne-[(4-klor-3-sulf amoyl ).benzoyl] - (S) -lysyl}-cis , syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre,

7-(4-klor-3-sulfamoylbenzamido)-2-{N-[1(S)-1-(N-(1(S)-ethoxycarbonyl-5 (((4-klor-2-amino-5-sulfamylfenyl)carbonyl)amino)-pentyl)-(S)alanyl>-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre,

1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(7-klor-4-oxo-6-sulfamyl-2-fenyl-1,2,3,4-tetrahydrokinazolin-3-yl)pentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octanhydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre,

1-{N-[(S)-carboxy-5-(((4-klor-2-hydroxy-5-sulfamoylfenyl)-carbonylamino)pentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxysyre

1-{N-[1(S)-carboxy-5-(((4-klor-3-(N-methylsulfamoyl)fenyl)-carbonyl)amino]pentyl]-(S)-alanyl}-cis,cyn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre,

1-{N-[1(S)-carboxy-5-(((4-klor-3-sulfamoylfenyl)carbonyl)-amino)pentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre

eller de tilsvarende frie syrer eller estere herav.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved én eller flere av de metoder og reaksjoner som er angitt i de etterfølgende reaksjonsligninger. Reaktive grupper som ikke er innbefattet i de nedenfor beskrevne reaksjoner slik som amino- og carboxygrupper kan være beskyttet ved hjelp av metoder som er vanlig innen peptidkjemien før koblingsreak-sjonene og som deretter kan avbeskyttes under dannelse av de ønskede produkter. Racemater — hvis. slike erholdes ved disse fremgangsmåter - kan oppløses ved standard teknikker slik som kolonnekromatografi eller fraksjonell krystallisering.

A. For fremstilling av forbindelser av formel I hvori R"<*>" er hydrogen, kondenseres en ketoforbindelse (XIX) med et dipeptid (XX) under reduksjon.

2 3 4 5

I disse forbindelser er A, R , R , R og R som ovenfor definert og Pr betegner en fri eller beskyttet (f.eks. ved forestring) hydroxygruppe.

Ketoforbindelsen (XIX) kan kondenseres med dipep-tidet (XX) i vandig løsning, optimalt nær nøytral tilstand, eller i et egnet organisk løsningsmiddel (for eksempel CH^OH) i nærvær av et reduksjonsmiddel slik som for eksempel natriumcyanoborhydrid, under dannelse direkte av den ønskede forbindelse I (hvori R"<*>" er hydrogen) . Alternativt kan Schiff-basep:-.ellomproduktet, enaminet, eller aminol kataly-tisk reduseres under dannelse av produkt I, f.eks. med hydrogen i nærvær av palladium på carbon (f.eks. 10 % palladium på carbon) eller av Raney-nikkel. Forholdet mellom de dannede diastereomere produkter kan påvirkes ved valg av katalysator.

B. Alkylering av dipeptid (XX) ved hjelp av en forbindelse av formel (XXI)

hvori X er klor, brom, jod, alkansulfonyloxy eller aren-sulfonyloxy, R1, R2, R3, R4, R^ er som ovenfor definert for forbindelser av formel I og Pr betegner en fri eller beskyttet (f.eks. ved forestring) hydroxygruppe. Reaksjonen kan utføres under basiske betingelser i vann eller i et organisk løsningsmiddel. C. Kondensering av en aminosyre (XXII) med en aminosyre (XXIII)

1 2 3 4 5

hvori A, R , R , R , R , R er som ovenfor definert for forbindelser av formel I og Pr betegner en fri eller beskyttet (f.eks. ved forestring) hydroxygruppe.

Denne reaksjon er velkjent fra peptidkjemien. Reaksjonen kan utføres i nærvær av et kondenseringsmiddel slik som f.eks. dicyclohexylcarbodiimid (DCC), difenylfosforylazid (DPPA) og N,N-disuccinimidylcarbonat i CH^CN. Mens som ovenfor angitt, de reaktive grupper (f.eks. hydroxygrupper) beskyttes før koblingsreaksjonen utføres, kan aminogruppen i forbindelse (XXIII) aktiveres, f.eks. ved hjelp av tetraethyldifosfitt og/eller carboxygruppen i forbindelsen (XXII) kan aktiveres via mellomværende aktive estere slik som de som avledes fra 1-hydroxybenzotriazol, dets blandede anhydrid (avledet fra en klorcarbonsyreester), dets azid eller dicyclohexylcarbodiimid.

Denne fremgangsmåte kan særlig anvendes for frem-3 4 5

stilling av forbindelser hvori R , R eller R inneholder

14 1

eller er Z , spesielt hvori R er eller inneholder Z .

D. Kondensasjon av en aminoforbindelse (XXIV) med en ketoforbindelse (XXV)

under de betingelser som er beskrevet for prosess A.

1 2 3 4 5

A, R , R , R , R , R er som ovenfor definert for forbindelser av formel I og Pr betegner en fri eller beskyttet (f.eks. ved forestring) hydroxygruppe.

E. Alkylering av en aminoforbindelse (XXIV) ved hjelp av en forbindelse (XXVI) hvori X er klor, brom, jod, alkansulfonyloxy eller arensul-fonyloxy, A, R^", R2, R3, R4, R^ er som ovenfor definert for forbindelser av formel I, og Pr betegner en fri eller beskyttet (f.eks. ved forestring) hydroxygruppe. Reaksjonen kan utføres under de betingelser som er beskrevet for prosess B. F. For fremstilling av forbindelser av formel I, hvori én avR<3>,R<4>og R<5>er en gruppe Z-(CH2)0_g-, hvori Z er Z<5>,Z6,Z7,Z<8>,Z<9>eller Z<10>, fortrinnsvis Z<7>, Z<8>eller Z<9>: Kondensering av peptid av generell formel (XXX) med en forbindelse inneholdende den ønskede gruppe (XXXI)

hvori R"*", R2 og A er som definert for formel I, Pr er en beskyttet hydroxygruppe, W 3 , W 4 og r 3 er definert som R 3,R<4>ogR^ med den forskjell at én av W<3>, W 4 og W inneholder en NH2-gruppe isteden for den respektive Z^ til Z"*"°-gruppe; og W<6>er Z5, Z6,Z<7>, Z<8>, Z9 ellerZ<10>. Reaksjonen kan ut-føres i et inert organisk løsningsmiddel, f.eks.en alkohol (fortrinnsvis ethanol) ved tilbakeløpstemperatur.

Denne reaksjon kan eksemplifiseres ved følgende reaksjonsskjema:

G. For fremstilling av forbindelser av formel I hvori av R 3 , R 4 og R 5 er en gruDpe Z-(CH0)n ,-, hvori Z er Z ],

2 3 ' ^0-6

Zz eller Z :

Kondensering av et peptid av formel XXXII med en egnet substituert forbindelser av formel XXXIII hvori R 1 , R 2 og A er som definert for formel I, Pr er en beskyttet hydroxygruppe, W 7 , W 8 og W 9 er definert som R 3, 4 5 7 fl 9 R og R med den forskjell at én av W , W og W inneholder 12 3 en NH2~gruppe isteden for den respektive Z , Z eller Z - gruppe, og W " er

Denne kondensasjon kan eksemplifiseres ved følgen-de reaksjonsskjerna:

Reaksjonen kan utføres i et egnet løsningsmiddel (f.eks. THF, pyridin eller blanding av THF og triethylamin), vanligvis mellom 0° C og romtemperatur.

H. For fremstilling av forbindelser av formel I hvori én av R , R og R er en gruppe Z-(CH2)q_6-, hvori Z er Z<4>: kondensering av et peptid av formel (XXXVII) med et 3-halomethylbenzothiadiazin (XXXVIII)

1 2

hvori R , R og A er som definert for formel I, Pr er en

11 12 13

beskyttet hydroxygru<p>pe, W , W og W er definert somR<3>,R<4>og R<5>med den forskjell at én av W<11>, W"<1>"<2>og W<13>inneholder en -SH-gruppe isteden for den respektive Z 4-gruppe, og Hal er halogen, fortrinnsvis klor.

Reaksjonen utføres i et egnet løsningsmiddel (f.eks. DMF), fortrinnsvis i nærvær av triethylamin.

I. For fremstilling av forbindelser av formel I hvori én av R<3>, R4 og R<5>er en gruppe Z-(CH2)0_g-, hvor Z er Z<5>eller Z^: Kondensering av et peptid av formel XXXIX med en forbindelse av formel XXXX

1 2 9 10

hvori R , R , R , R og A er som definert for formel I,

Pr er en beskyttet hydroxygruppe, W"*"4, W og W"^ er definert somR<3>, R<4>og R<5>med den forskjell at én av W14, W15 og W<16>inneholder gruppen

5 6

istedet for gruppen Z eller Z . Reaksjonen kan utføres i et inert organisk.løsningsmiddel, f.eks. en alkohol, fortrinnsvis ethanol, under sure betingelser (f.eks. ved tilsetning av saltsyre) ved tilbakeløpstemperatur.

Utgangsforbindelsene i disse reaksjoner kan fremstilles etter kjente metoder.

Forbindelsen av formel XXII, hvori R"1" er hydrogen, kan for eksempel fremstilles ved omsetning av en ketoforbindelse (XIX) med en aminosyre (XXVII)

under de betingelser som er beskrevet i prosess A.

Alternativt kan forbindelsen av formel XXII fremstilles ved kondensering av XXIV med en ketosyre (XXVIII) eller ved kondensering

under de betingelser som er beskrevet for prosess B (X er som definert i prosess B)•

Forbindelsen XXII kan også fremstilles analogt med prosess G som ovenfor beskrevet.

Utgangsforbindelsen (XXXVII) i prosess H kan for eksempel, fremstilles fra en tilsvarende forbindelse hvori de respektive grupper W^, W"*"2 eller V}^^ er -SCHCgH^ ved reduksjon med natrium i flytende ammoniakk.

De ovenfor angitte prosesser etterfølges av frigivelse av beskyttede grupper ved kjente metoder. Beskyttede carboxygrupper som eksempelvis er beskyttet med fjernbare estergrupper [f.eks. Pr er alkoxy (methoxy, ethoxy, tertiær butyloxy), nitrobenzyloxy eller benzyloxy] frigis ved hydrolyse eller hydrogenering. (Reduktiv splitting av en forbindelse hvori én av de beskyttende grupper (Pr) er benzyloxy og den andre beskyttende gruppe er alkoxy vil gi en forbindelse hvori benzyloxygruppen er blitt erstattet med hydroxy men hvor alkoxygruppen ikke er blitt erstattet.) Hydrolyse kan utføres under sure betingelser (under anvendelse av for eksempel halogenhydrazid eller trifluoreddiksyre), under basiske betingelser eller ved hjelp av fotokjemisk hydrolyse. Aminogruppene kan beskyttes med beskyttende grupper slik som for eksempel formyl, t-butoxycarbonyl, carbobenzyloxy, tri- fenylmethyl og nitrofenylsulfenyl. Disse grupper kan fjernes under sure betingelser, f.eks. ved hjelp av en halogen-hydrosyre og/eller trifluoreddiksyre.

Estere erholdt ved de ovenfor angitte prosesser kan også omestres. Eksempelvis kan ethylestere omdannes til de tilsvarende benzylestere med benzylalkohol under sure betingelser.

Som ovenfor angitt eksisterer forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen i diastereoisomere former eller i blandinger derav. De ovenfor beskrevne synteser kan anvende racemater, enantiomerer eller diastereomerer som utgangsma-terialer. Enantiomere mellomprodukter kan erholdes ved opp-løsningsmétoder kjent innen faget. Når diastereomere produkter resulterer fra synteseprosedyrene, kan de diastereomere produkter separeres etter konvensjonelle kromatografiske eller franksjonerte krystallisasjonsmetoder (f.eks. som beskrevet i europetisk publisert søknad 12401).

Forbindelsene fremstilt-ifølge oppfinnelsen danner salter med forskjellige uorganiske og organiske syrer og baser som også er innen oppfinnelsens ramme. Slike salter innbefatter ammoniumsalter, alkalimetallsalter slik som natrium- og kaliumsalter (som er foretrukne)., jordalkali-metallsalter slik som calsium og mangesiumsalter, salter med organiske baser, f.eks. dicyclohexylaminsalter, N-methyl-D-glucamin, salter med aminosyrer slik som arginin, lysin og lignende. Også salter med organiske og uorganiske syrer kan fremstilles, f.eks. HCl, HBr, H2S04, R^PO^, methansulfonsyre, toluensulfonsyre, maleinsyre, fumarsyre og kamfersulfonsyre. De ikke-toksiske fysiologisk akseptable salter er foretrukne, selv om andre salter også er anvendbare, f.eks. ved isolering eller rensing av produktet.

Saltene kan dannes på konvensjonell måte, slik som ved omsetning av den fri syre eller fri baseform av produktet med én eller flere ekvivalenter av den egnede base eller syre i et løsningsmiddel eller medium hvori saltet er uløselig, eller i et løsningsmiddel slik som vann som deretter fjernes i vakuum eller ved frysetørking eller ved utbytting av katio-nene av et eksisterende salt med et annet kation på en egnet ionebytterharpiks.

Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen er anvendbare som antihypertensive midler i pattedyr, innbefattet mennesker, hvori blodtrykket er blitt unormalt forhøyet.

Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen kan kombineres med farmasøytiske bærere og administreres i et utall av velkjente farmasøytiske former egnet for oral eller parenteral administrering under dannelse av preparater anvendbare ved behandling av cardiovaskulære sykdommer og i særdeleshet hypertensjon i pattedyr.

Den effektive doser (EDrr.) av forbindelsene frem-

o u

stilt ifølge oppfinnelsen vil typisk være innen området fra 0,01 til 30 mg/kg, fortrinnsvis fra 0,1 til 10 mg/kg med pattedyrvekt, administrert i enkle eller oppdelte doser.

Den eksakte dose som skal administreres vil avhenge av hvor den bestemte forbindelse ligger innen det ovenfor angitte område, såvel som alder, vekt og tilstand på. pasienten.

Ved behandling av mennesker vil generelt forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen bli administrert til pasienter med behov for slik behandling i et doseområde på fra 5 til 500 mg pr. pasient, generelt gitt flere ganger, som således gir en total daglig dose på fra 5 til 2000 mg pr. dag.

Preparatet inneholdende forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen vil fortrinnsvis.-Inneholde fra 5 til 250 mg aktiv forbindelse pr. enhetsdose. Disse preparater administreres fortrinnsvis oralt. Typiske formuleringer for oral administrering er slike som tabletter, kapsler, siruper, eliksirer eller suspensjoner. Typiske injiserbare formuleringer innbefatter løsninger og suspensjoner.

De typisk akseptable farmasøytiske bærer for anvendelse i de ovenfor beskrevne formuleringer eksemplifiseres ved: Sukkere slik som lactose, sucrose, mannitol og sorbitol; stivelser slik som maisstivelse, tapiocastivelse og potetstivelse; cellulose og derivater slik som natrium-carboxymethylcellulose, ethylcellulose og methylcellulose; calsiumfosfater slik som dicalsiumfosfat og tricalsiumfosfat; natriumsulfat; calsiumsulfat, polyvinylpyrrolidon, polyvinyl- "alkohol; stearinsyre; jordalkalimetallstearater slik som magnesiumstearat og calsiumstearat, stearinsyre, vegetabilske oljer slik som peanøttolje, bomullsfrøolje, sesamolje, olivenolje og maisolje; ikke-ioniske, kationiske og anioniske overflateaktive midler; ethylenglycolpolymerer; beta-cyclodextrin; fettalkoholer og hydrolyserte cereale faste materialer såvel som andre ikke-toksiske forenglige fyllstof-fer; bindemidler, oppløsnende midler, buffere, konserverings-midler, antioxydanter, smøremidler, smaksgivende midler og lignende som vanligvis anvendes i farmasøytiske preparater.

De etterfølgende eksempler illustrerer fremstil-lingen av forbindelsene ifølge oppfinnelsen. Diastereomerene fremstilt som angitt i.det etterfølgende kan isoleres ved kolonnekromatografi eller ved fraksjonert krystallisering.

I de etterfølgende eksempler referer octahydroindol-2(S) - carboxylsyre til cis,syn-octahydroindol-2(S)-carboxylsyre, også angitt som 3a(S), 7a(S)-octahydroindol-2 (S)-carboxylsyre. Eksempel 1 l{ Na-[( 1( S)- ethoxycarbonyl- 3- fenylpropyl3- Ne-[(4-klor-3-sulfamoyl) benzensulfonyl]-( S)- lysyl)- cis, syn- octahydro- lH-indol- 2( S)- carboxylsyre

A. Omrør en suspensjon av 24,0 g Ne-benzyloxycarbonyl-(S)-lysin og 36,0 g ethyl-2-oxo-4-fenylbutanoatsyre i 2500 ml absolutt ethanol ved romtemperatur i 24 timer. Tilsett 16,0 g natriumcyanoborhydrid og omrør den resulterende blanding ved romtemperatur i 48 timer. Tilsett 80 ml vann og omrør den resulterende blanding ved romtemperatur i 72 timer. Konsentrer denne blanding i vakuum ved 30° C under dannelse av et hvitt residuum. Suspender residuet i 1200 ml isvann, tilsett konsentrert saltsyre for å opprettholde.pH på 2 - 4 og omrør denne blanding i 2 timer. Absorber denne vandige løsning på 2000 ml XAD-2-harpiks (Rohm&Haas Co.). Eluer harpiksen med 16 000 ml vann og deretter med 8000 ml absolutt ethanol. Konsentrer ethanolløsningen og kromatografer residuet på en kolonne av silicagel (3000 ml>60 - 200 mesh) og eluer med kloroform:isopropanol:7 % ammoniumhydroxyd 1:1:1 (organiske lag) under dannelse av et hvitt residuum. Kromatografer dette residuum på en kolonne av silicagel (3000 ml) , eluer med kloroform.: isopropanol : 7 % ammoniumhydroxyd 1:1:1 (organiske lag) under dannelse av fraksjoner A, B, C og D. Absorber fraksjon B på en kolonne av silicagel

(1500 ral) og eluer med. kloroform : isopropanol : 7 % ammoniumhydroxyd 1:1:1 (organisk lag) under dannelse av N-benzyloxycarbonyl-Na-[1(S)-carboethoxy-3-(fenyl)propyl]-(S)-lysin, et hvitt fast stoff, [a]2<6>+ 6,1° (ethanol), sm.p. 114 - 115° C.

B. Avkjøl-• en løsning av 1,9 g av produktet fra del A og 1,3 g cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-benzylester i 24 ral dimethylformamid til 0° C under nitrogen. Tilsett dråpevis en løsning av 0,9 g difenylfosforylazid i 6 ml dimethylformamid, etterfulgt av en løsning av 0,7 ml N-methylmorfolin i 6 ral dimethylformamid, også dråpevis, og omrør ved romtemperatur i 18 timer. Hell reaksjonsløsningen over i vann, juster til pH 8 med IN NaOH og ekstraher med ether. Tørk etherlaget over magnesiumsulfat og konsentrer under vakuum til en gul olje. Kromatografer oljen på silicagel (1000 ml, 60 - 200 mesh) , og eluer med hexan :. ethylacetat (1:2) under dannelse av l-{Na-[1(S)-carboethoxy-3-(fenyl)propyl]-Ne-benzyloxy-carbonyl-(S)-lysyl}-cis,syn- . octahydro-lH-indol-a(S)-carboxylsyre-benzylester, en gul olje.

C. Oppløs .1,60 g av produktet fra del B i 150 ml absolutt ethanol. Tilsett 0,75 g 10 %-ig palladium-på-carbon og hydrogener blandingen ved 3,5 kg/cm ved romtemperatur. Filtrer reaksjonsblandingen og konsentrer filtratet i vakuum under dannelse av l-{N<x-[1 (S)-ethoxycarbonyl-3-(fenyl)propyl-(S)-lysyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-2 6

carboxylsyrehydrat, et hvitt skum, [a]D -42,5 (ethanol).

D. Tilsett til 4,9 g l-{Na-[1(S)-[ethoxycarbonyl-3-fenylpropyl] (S)-lysyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2 (S)-carboxylsyre i 200 ml tetrahydrofuran og 2 g triethylamin ved - 5° C og 2,9 g 4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonylklorid og omrør den resulterende blanding ved romtemperatur. Konsentrer den resulterende blanding i vakuum og kromatografer residuet på en "Lobar' RP-8-kolonne, størrelse B (E.Merck) under acetonitril : vann som elueringsmiddel, under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 2

l-{ Na-[ 1( S)- ethoxycarbonyl- 3- fenylpropylj- Ne-[(4-klor-3-sulfamoyl)benzoyl1 -( S)- lysy] )-cisrs yn- octahydro-] H- i ndol- 2-( S)- carboxylsyre

Behandl 4,9 g l-{N<x [1 (S) -ethoxycarbonyl-3-f enyl-propyl]- (S)-lysyl}-cis,syn-octahydro-lH-indo1-2(S)-carboxylsyre (kan erholdes som beskrevet i Eksempel IA til 1C) i 200 ml tetrahydrofuran og 2,0 g triethylamin ved 0 - 5° C med 2,2 g 4-klor-3-sulfamoyl-benzoylklorid og omrør den resulterende blanding ved romtemperatur.. Konsentrer den resulterende blanding i vakuum og kromatografer residuet på en "Labor RP-8"-kolonne, størrelse B (E. Merck) under anvendelse av acetonitril : vann som elueringsmiddel, under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 3

l-{ Na-[( 1( S)- ethoxycarbonyl- 3- fenylpropyl]- Ne-[( 4- klor- 3-sulfamoyl) benzensulfonyl]-( S)- lysyl}-( S)- prolin

Anvend 2,17 g l-{Na-[1(S)-ethoxycarbonyl-3-fenyl-propyl ]-(S)-lysyl}-(S)-prolin i stedet for den respektive substituerte octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre i Eksempel ID under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 4

l-{ Na-[ 1 ( S)- ethoxycarbonyl- 3- fenylpropyl]- Ne -[( 4- klor- 3-sulfamoyl) benzoyl]-( S)- lysyl)-( S)- prolin

Anvend 2,17 g l-{Na-[1(S)-ethoxycarbonyl-3-fenyl-propyl]- (S) -lysyl}- (S) -prolin i stedet for den respektive substituerte octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre i Eksempel 2 under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 5

l-{ Na-[ 1( S)- carboxy- 3- fenylpropyl]- Ne-[( 4- klor- 3- sulfamoyl)-benzensulfonyl]-( S)- lysyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol- 2 ( S)-carboxylsyre

A. Tilsett til en løsning av 1,10 g l-{Na[l(S)-ethoxycarbonyl-3-fenylpropyl]-(S)-lysyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre .(fremstilt som beskrevet i Eksempel 1) i 100 ml methanol ved 0 - 5° C og 2,0 ml 2,5N natrium-hydroxydløsning og omrør ved romtemperatur i 24 timer. Tilsett 20 ml vann, konsentrer til det halve volum og omrør.i 24 timer. Konsentrer denne løsning i vakuum og absorber på "AG 50W-X2" (100 - 200 mesh, hydrogenform, Bio-Rad-harpiks) (50 ml). Anbrin angitte 50 ml harpiks på ytter-ligere 300 ml harpiks, eluer harpiksen med 1200 ml vann og eluer deretter med 4 .% pyridin i vann under dannelse av 1-/{Na- [1 (S)-carboxy-3-fenylpropyl] - (S) -lysyl }-cis ,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre, et hvitt fast materiale, sm.p. 165 - 166° C [a^-8-2 (ethanol).

B. Behandl 2,45 g av produktet fra trinn A med 1,4 5 g 4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonylklorid som beskrevet i Eksempel ID under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 6

1-{ Na-[ 1( S)- carboxy- 3- fenylpropyl]- Ne-[( 4- klor- 3- sulfamoyl)-benzoyl-( S)- lysyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol- 2( S)- carboxylsyre

Behandl 2,45 g av produktet fra Eksempel 5A med 1,1 g 4-klor-3-sulfamoylbenzoylklorid som beskrevet i Eksempel 2 under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 7

1-{ N-[ 1( S)- carboxy- 3- fenylpropyl]- S-[ 3-( 6- klor- 3, 4- dihydro-7- sulfamoyl- 1, 2, 4- benzothiadiazinyl- l, 1- dioxid) methyl]-( R)-cysteinyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol- 2( S)- carboxylsyre A. Omrør 10,5 g S-benzyl-L-cystein og 11,0 g 2-oxo-4-fenylsmørsyre-ethylester.i 1000 ml absolutt ethanol ved romtemperatur i 24 timer. Tilsett 5,2 8 g natriumcyanborhydrid og omrør den resulterende blanding ved romtemperatur i 48 timer. Konsentrer denne blanding i vakuum ved 30°«iC under dannelse av et hvitt residuum. Suspender residuet i isvann, tilsett konsentrert saltsyre for å opprettholde pH på

2 - 4 og omrør denne blanding i 1,5 - 2 timer. Absorber denne vandige løsning på XAD-2 (Rohm & Haas Co.) harpiks. Eluer harpiksen med vann og deretter med absolutt ethanol. Konsentrer ethanolløsningen og kromatografer .residuet på en kolonne av silicagel under anvendelse av kloroform : isopropanol : 7 % ammoniumhydroxyd 1:1:1 (organisk lag) under dannelse av N-[1(S)-carboethoxy-3-fenylpropyl]-S-benzyl-(R)-cystein. B. Behandl 4,0 g av produktet fra del A og 2,6 g cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-benzylester i 10 ml dimethylformamid ved 0° C under nitrogen med en løs-ning av 2,75 g difenylfosforylazid i 1,0 g N-methylmorfolin 1 10 ml dimethylformamid, og omrør ved romtemperatur i 18 timer. Hell reaksjonsløsningen over i vann, juster til pH 8 med IN NaOH og ekstraher med ether. Vask de kombinerte etherlag med vandig natriumkloridløsning, tørk etherlaget over magnesiumsulfat, filtrer og konsentrer i vakuum under dannelse av et residuum. Kromatofljrafer dette residuum på silicagel (60 - 200 mesh) under anvendelse av hexan : ethyl-acetåt under dannelse av 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-3-fenyl-propyl ]-S-benzyl-(R)-cysteinyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2-(S)-carboxylsyre-benzylester. C. Omrør produktet fra del B i 50 ml av en 15 - 20 %-g løsning av hydrobromsyre i eddiksyre under nitrogen i 2 timer, konsentrer deretter til tørrhet i vakuum ved romtemperatur. Triturer det resulterende residuum med ether under dannelse av 1-{N-ti(S)-(ethoxycarbonyl-3-fenylpropyl]-S-benzyl-(R)-cysteinyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-hydrobromid. D. Omsett 1,5 g av produktet fra del C i methanol med 3,0 ml 2,5N natriumhydroxyd ved romtemperatur i 24 timer og konsentrer den resulterende blanding i vakuum ved romtemperatur. Absorber residuet på AG 50W-X2 (100 - 200 mesh, hydrogenform, Bio-Rad) harpiks. Eluer harpiksen med vann og eluer deretter med 4 % pyridin i vann under dannelse av 1-{ N-11(S)-carboxy-3-fenylpropyl]-S-benzyl-(R)-cysteinyl}-cis, syn-octahydro-lH-indol-2.(S) -carboxylsyre-hydrobromid.

E. Behandl 1,0 g av produktet fra del D med 0,05 g natrium i 100 ml flytende ammoniakk. Fordamp og konsentrer den resulterende blanding under dannelse av 1-{N-[1(S)-carboxy-3-fenylpropyl]-(RJ-cysteinyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-indol-2(S)-carboxylsyre som natriumsaltet.

F. Omsett 0,4 g. av produktet fra -Trinn E i 20 ml dimethylformamid med 0,36 g 2-brommethyl-6-klor-3,4-dihydro-7-sulfamoyl-1,2,4-benzothiadiazin-l,1-dioxyd og triethylamin. Konsentrer den resulterende blanding og kromatografer på en AG 50W-X2-kolonne og eluer med.4 % pyridin i vann under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 8

1-{ N-[ 1( R)- carboxy- 2-[ S-(( 3-( 6- klor- 3, 4- dihydro- 7- sulfamoyl-1, 2, 4- benzothiadiazinyl- l, 1- dioxyd) methyl)) thio] ethyl]]-(S)-alanyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol- 2( S)- carboxylsyre A. Omrør 100 g S-benzyl-L-cystein-ethylester-hydroklorid, 132 g benzylpyruvat og 10 g 3A molekylsiler i 8 liter ethanol i 18 timer under nitrogen. Tilsett dråpevis en løs-ning av 52 g natriumcyanoborhydrid 1 100 ml ethanol, omrør ved romtemperatur i 24 timer, filtrer og konsentrer deretter filtratet ved romtemperatur under vakuum. Suspender det resulterende residuum i 100 ml vann og 500 ml ether og juster blandingen til pH 8 med IN HC1. Vask det organiske lag med mettet.natriumkloridløsning, tørk over natriumsulfat og filtrer. Juster filtratet til pH 2 med 3M etherisk HCl, dekanter supernatanten, vask det resulterende oljeaktige bunnfall med 200 ml ether og bland med mettet vandig natriumbicarbonat under dannelse av en løsning med pH 8. Ekstraher . blandingen med 1 liter ether, tørk etherlaget over natrium-sulf at og konsentrer ved romtemperatur under dannelse av N-[l-(R)-carboethoxy-2-(benzylthio)ethyl]-(R,S)-alanin-ben-zylester, en gul olje. Tynnskiktskromatografi i ethyl-acetåt : hexan (15:85) kan anvendes ved å separere de to isomerer (isomer A ved Rf = 0,36 og isomer B ved Rf = 0,28) eller prosedyren kan fortsettes med blandingen.

B. Tilsett 50 g av produktet fra del A til 1800 ml av en 15 - 2 0 %-ig løsning av hydrobromsyre-eddiksyre og oppvarm til 50° C i 20 timer. Konsentrer den resulterende blanding til tørrhet under vakuum og vask det resulterende oljeaktige residuum med ether inntil dette er fri for eddiksyre, under dannelse av N-[1(R)-carboxyethyl-2(benzylthio)-ethyl]-(R,S)-alanin-hydrobromid, en gul olje.

C. Avkjøl en løsning av 50,5 g av produktet fra del B og 33,4 g cis,syn-octahydroindol-2(S)-carboxylsyrebenzylester i 1 liter dimethylformamid til 0° C under nitrogen, tilsett dråpevis en løsning av 35,5 g difenylfosforylazid i 1 liter dimethylformamid, etterfulgt av en løsning av 33,4 g N-methyl morfolin i 200 ml dimethylformamid, også dråpevis, og omrør ved romtemperatur i 18 timer. Hell reaksjonsløsningen over i 3 liter vann, juster til pH 8 med IN NaOH og ekstraher med 4x1 liter ether. Vask de kombinerte etherlag med 1 liter vandig natriumkloDid, tørk etherlaget over magnesiumsulfat, filtrer og konsentrer under vakuum til en gul olje.

Kromatografer den resulterende olje på 2 kg silicagel (60 - 200 mesh) under anvendelse av ether : hexan (90:10). Oppsaml komponenter med Rf = 0,38 og Rf = 0,61 som indikert ved tynnskiktskromatografi på silicagel eluert med ether. Isomeren med Rf = 0,61 er 1-{N-[1(R)-carboethoxy-2-(benzylthio)ethyl]-(S)-alanyl}-cis,cyn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-benzylester.

D. Omrør 0,70 g av (S)-alanylproduktet fra del C og

25 ml av en 15 - 20 %-ig løsning av hydrobromsyre-eddiksyre under nitrogen i 2 timer, konsentrer deretter til tørrhet under vakuum ved romtemperatur. Triturer det resulterende residuum.med ether og filtrer under dannelse av 1-{N-[1(R)-carboethoxy-2-(benzylthio)ethyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-oetahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-hydrobromid som et brunfarvet fast materiale med sm.p. 124 - 125° C.

E. Tilsett til en løsning av 10,6 g av produktet fra Trinn D i 500 ml methanol, 24 ml 2,5N natriumhyd-oxydløsning og omrør ved romtemperatur i 24 timer. Konsentrer denne løsning i vakuum og absorber på AG 50W-2 (Bio-Rad) harpiks (100 - 200 mesh, hydrogenform). Eluer harpiksen med vann og eluer deretter med 4 % pyridin i vann under dannelse av 1-.{N- [1 (R) -carboxy-2- (benzylthio)ethyl]- (S) -alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre.

F. Behandl 4,22 g av produktet fra Trinn E med 0,23 g natrium i 200 ml flytende ammoniakk. Fordamp ammoniakken og absorber residuet på AG 50W-2 (Bio-Rad) harpiks (100 - 200 mesh, hydrogenform). Eluer harpiksen med vann og eluer deretter med 4 % pyridin i vann under dannelse av 1-{N-[1(R)-carboxy-2-(mercapto)ethyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre.

G. Omsett 2,2 g av produktet fra Trinn F i 20 ml dimethylformamid med 2,4 g 3-brommethyl-6-klor-3,4-dihydro- 7-sulfamoyl-1,2,4-benzothiadiazin-l,1-dioxyd og triethylamin. Konsentrer den resulterende blanding under dannelse av titelforbindelsen .

Eksempel 9

1-{ N-[ 1( S)- ethoxycarbonyl- 5-( 4- klor- 3- sulfamoyl)- benzen-sulfonaminopentyl]-( S)- alanyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol-2 ( S)- carboxylsyre

A. Oppløs 27,0 g ethylindol-2-carboxylat i 250 ml trifluoreddiksyre. Tilsett 2,05 g platinaoxyd, hydrogener blandingen ved 3,5 kg/cm 2 ved romtemperatur. Filtrer blandingen og konsentrer filtratet i vakuum under dannelse av et residuum. Suspender residuet i ether og behandl med kald, fortynnet natriumhyd-oxydløsning. Tørk det organiske lag over magnesiumsulfat og konsentrer dette under dannelse av ethyl-octahydroindol-2-carboxylat, en lys gul olje.

B. Oppløs 116 g 10-d-kamfersulfonsyre i 1 liter varra ethylacetat og tilsett en løsning av 86 g av produktet fra del A i 1 liter ethylacetat. La blandingen krystallisere, oppvarm til tilbakeløpstemperatur, avkjøl til romtemperatur og filtrer. Omkrystalliser filterkaken fra en blanding av 500 ml isopropanol og .1800 ethylacetat, filtrer og tørk kry-stallene under dannelse.av 2-(S)-carboethoxy-cis,syn-octa-.hydro-lH-indol, d-10-kamfersulfonat-, sm.p. 192 - 193° C. C. Oppslem 10 g av produktet fra del Bil liter ether, juster til pH 11 med vandig natriumhy.droxyd og omrør i 5 minutter. Vask det organiske lag med natriumkloridløs-ning, tørk over magnesiumsulfat, filtrer og fordamp i vakuum ved romtemperatur under dannelse av 2(S)-carboethoxy-cis,cyn-otanydro-lH-indol som en farveløs olje. Oppløs den resulterende olje i 50 ml methanol inneholdende 23 ml IN natriumhydroxyd, omrør ved 25° C i 30 minutter, juster til pH 7 med IN saltsyre og fordamp løsningsmidlet under dannelse av cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre. D. Avkjøl 23 ml benzylalkohol til 0° C under nitrogen og tilsett 5,95 g thionylklorid dråpevis i løpset av 15 minutter under opprettholdelse av temperaturen ved 0° C. Tilsett produktet fra del C, omrør i 1 time ved 0° C og om-rør deretter i 24 timer ved romtemperatur. Hell den resul terende blanding over i 500 ml ether, omrør i 1 time under nitrogen og la blandingen stå under nitrogen inntil løsningen er klar. Dekanter supernatanten, vask bunnfallet med 25 ml ether og oppslem * deretter bunnfallet i 200 ml. ether og juster til pH 8 - 9 med IN natriumhydroxyd. Omrør i 5 minutter, vask det organiske lag med natriumkloridløsning, tørk over magnesiumsulfat, filtrer og fordamp i vakuum ved romtemperatur under dannelse av cis,syn-octahydroindol-2(S)-carboxylsyre-benzylester som en farveløs olje (TLC i ether: en flekk, RF = 0,3).

E. Tilsett til 26 g av produktet fra Trinn D i 100 ml diklormethan og 7,8 ml pyridin 11,0 g pyruvoy.lklorid og om-rør den resulterende blanding ved romtemperatur. Ekstraher reaksjonsblandingen. med vann og tørk det organiske lag over magnesiumsulfat. Konsentrer diklormethanløsningen i vakuum og destiller residuet under dannelse av 1-pyruvoyl-cis,syn-octahydro-lH-indol-2 (S ) -carboxylsyre-benzy.léster.

F. Tilsett til 20 g av produktet fra Trinn E i 400 ml ethanol 2,0 g 10 %-ig palladium-på-carbon. og hydrogener ved 3,5 kg/cm 2ved romtemperatur. Filtrer deretter den resulterende blanding og konsentrer filtratet i vakuum under dannelse av 1-pyruvoyl-cis , syn-octahydro-lH-indol-2-(S)-carboxylsyre .

G. Omsett 6,20 g Nfc-(benzyloxycarbonyl)-L-ethylester

i 20 ml tetrahydrofuran med 4,8 g 1-pyruvolyl-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre og tilsett 20 ml molekylsiler nr. 4A (Rohm og Haas). Omrør den resulterende blanding 1 4 timer, tilsett 12 g natriumcyanborhydrid i 20 ml methanol og omrør reaksjonsblandingen i 20 timer. Filtrer, konsentrer til tørrhet og fordel residuet mellom vann og diklormethan. Absorber den vandige fase på sterk sur ionebytterharpiks og eluer med 4 % pyridin i vann under dannelse av 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-benzyloxycarbonylaminopentyl]-(R,S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre. Separer iso-merene på en kolonne av silicagel under anvendelse av CHCl^: isopropanol : 7% ammoniumhydroxyd 1:1:1 (organisk) som elueringsmiddel under dannelse av 1- N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-benzyloxycarbonylaminopentyl]-cis,syn-octahydro-lH-indol-2 (S)-carboxylsyre.

H. Hydrogener produktet fra Trinn G i 300 ml ethanol under anvendelse av 1 g 10 %-ig palladium-på-carbon ved 3,5 kg/cm 2ved romtemperatur. Filtrer blandingen og konsentrer filtratet under anvendelse av l-{ N- [1 (S)-ethoxycarbonyl-5-aminopentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre. I. Omsett 1,01 g av produktet fra Trinn H i 20 ml tetrahydrofuran og 0,25 g triethylamin med 0,75 g 4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonylklorid og omrør den resulterende blanding ved romtemperatur. Konsentrer den resulterende blanding i. vakuum og kromatografer residuet på en Lobar RP-8 (E. Merck)., kolonne størrelse B under anvendelse av acetonitril : vann som elueringsmiddel under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 10

1~{ N-[ 1( S)- ethoxycarbonyl- 5-( 4- klor- 3- sulfamoyl- benzamido-pen tyl] -( S)- alanyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol- 2 ( S)- carboxylsyre

Behandl 1,01 g l-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-aminopentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre, erholdt ifølge Eksempel 9H, i 20 ml tetrahydrofuran og 0,25 g triethylamin med 0,55 g 4-klor-3-sulfamoylbenzoyl-klorid og omrør den resulterende blanding ved romtemperatur. Konsentrer den resulterende blanding i vakuum .og .kromafcogra-fer residuet på en Lobar RP-8 (E. Merck) kolonne størrelse B under anvendelse av acetonitril : vann som elueringsmiddel

under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 11

1-{ N-[ 1( S)- carboxy- 5-( 4- klor- 3- sulfamoyl) benzamidopentyl]-( S)- alanyl}- cis- syn- octahydro- lH- indol- 2( S)- carboxylsyre

A. Tilsett til 4,04 g 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-aminopentyl]-(S)-alanyl}-cis-syn-octahydro-lH-indo1-2(S)-carboxylsyre i 100 ml methanol : vann 1:1 8 ml 2,5N NaOH ved 0 - 5° C og omrør deretter den resulterende blanding ved romtemperatur i 24 timer. Konsentrer den resulterende blanding og absorber, på en AG 50W-2 harpiks . (Bio-Rad)

(100 - 200 mesh, hydrogenform). Eluer harpiksen med vann, eluer deretter med 4 % pyridin i vann under dannelse av

l—[ N - (1 (S) -carboxy-5 -aminopentyl ] - (S) - alanyl} -cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre.

B. Omsett 0,95 gav produktet fra Trinn 11A med

0,55 g 4-klor-3-sulfamoylbenzoylklorid som.beskrevet i Eksempel 10 under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 12

l-{ N-[ 1( S)- carboxy- 5-( 4- klor- 3- sulfamoyl) benzensulfonamid-pentyl]-( S)- alanyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol- 2( S)- carboxylsyre

Behandl 0,95 g av produktet, fra Eksempel 11A med 0,75 g 4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonylklorid som beskrevet i Eksempel 91 under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 13

1~ C N-[ 1( S)- ethoxycarbonyl- 5-( 4- klor- 3- sulfamoyl)- benzen-sulfonamidpentyl]-( R, S)- alanyl}-( S)- prolin

A. Fremstill en løsning av.2,94 g Ne-benzyloxy-carbonyl-L-lysinethylester-hydroklorid i 10 ml vann og gjør denne basisk med 15 ml mettet vandig kaliumbicarbonat og ekstraher med CH^C^- Tørk ekstraktet over MgSO^og konsentrer til tørrhet. Oppløs residuet, Ne-benzyloxycarbonyl-L-lysinethylester, i 20 ml tetrahydrofuran og 555 mg pyruvoyl-prolin og tilsett 1,0 g pulverformet molekylsil. nr. 4A. Omrør blandingen ved romtemperatur i 4 timer. Tilsett 630 mg natriumcyanborhydrid i 1. ml methanol i løpet av 2 timer og omrør blandingen over natten. Filtrer.blandingen, konsentrer til tørrhet og fordel residuet mellom 10 ml vann og 15 ml CH2CI2. Absorber den vandige fase på en sterkt sur ionebytterharpiks og eluer med 4 % pyridin i vann under dannelse av 470 mg 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-benzyloxycarbonylamino-pentyl]-R,S)-alanyl}-S-prolin. Fjern den beskyttende gruppe ved hydrogenering i ethanol : vann 1:1 over 10 % Pd/C katalysator ved 2,8 kg/cm 2. Filtrer blandingen og bring filtratet til tørrhet. Kromatografer residuet i methanol på en LH-20 kolonne under anvendelse av det ønskede 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-aminopentyl]-(R,S)-alanyl}-(S)-prolin.

B. Kondenser 0,90 g av produktet fra Trinn A med

0,75 g 4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonylklorid som beskrevet i Eksempel 91 under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 14

l-{ N- [ 1 ( S) - ethoxycarbonyl- 5- ( 4- klor- 3- sulf amoyl) - ?benzamid-pentyl]-( R, S)- alanyl}-( S)- prolin

Omsett 0,90 g av produktet fra Eksempel 13A med

0,55 g 4-klor-3-sulfamoylbenzoylklorid som beskrevet i Eksempel 10 under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 15

1-{ N-[ 1( S)- carboxy- 5-( 4- klor- 3- sulfamoyl) benzen- sulfonamid-pentyl]- ( R, S) - alanyK - ( S)- prolin

A. Behandl 3,50 g av produktet fra Eksempel 13A i 100 ml methanol : vann, 1:1, med 8,0 ml 2,5N NaOH som beskrevet i Eksempel 11A under dannelse av l-{N-[1(S)-carboxy-5-aminopentyl]-(R,S)-alanyl}-(S)-prolin.

B. Kondenser 0,80 g av produktet fra Trinn A med

0,75 g 4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonylklorid som beskrevet i Eksempel 91 under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 16

l-{ N-[( S)- carboxy- 5-( 4- klor- 3- sulfamoyl) benzamidpentyl]-( R, S)- alanyl}~( S)- prolin

Omsett 0,80 g av produktét fra Eksempel 15A med 0,55 g 4-klor-3-sulfamoylbenzoylklorid som beskrevet i Eksempel 10 under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 17

7-( 4- klor- 3- sulfamoylbenzamido)- 2-{ N-[ l( S)- carboxy- 3- fenyl-propyl]- ( S)- alanyl}-!, 2, 3, 4- tetrahydroisokinolin- 3( S)-carboxylsyre

A. Oppløs 0,1 mol 1,2,3,4-tetrahydro-7-nitroisokinolin-3 (S)-carboxylsyreethylester i ethanol og tilsett løsningen til 10 %-ig palladium-på-carbon (1,0 g) i en hydrogeneringskolbe. Hydrogener blandingen ved 2,1 kg/cm ved.romtemperatur inntil reduksjonen er fullført som indikert ved tynnskiktskromatografi.. Fjern katalysatoren ved filtrering og fordamp løsningsmidlet under redusert trykk under dannelse av 7-amino-l,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3-(S)-carboxylsyre-ethylester .

(Fremstilling av 1,2,3,4-tetrahydro-7-nitroiso-kinolin-3(S)-carboxylsyre er beskrevet i US.patentskrift 4 064 274).

B. Behandl 0,1 mol 7-amino-l,2,3,4-tetrahydroisokino-lin-3 (S)-carboxylsyre-ethylester (Trinn A) med 0,5 mol benzylalkohol og 0,22 mol p-toluensulfonsyre i toluen ved tilbakeløpstemperaturen over natten. Fordamp løsningsmidlet under redusert trykk under dannelse av p-toluensulfonsyre-saltet av produktet. Tilsett dette salt til vandig natrium-bicarbonatløsning under omrøring. Ekstraher blandingen med kloroform, tørk ekstraktet med magnesiumsulfat.og fordamp løsningsmidlet under redusert trykk under dannelse av 7-amino-1,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3(S)-carboxylsyre-benzylester. C. Tilsett en løsning av 0,1 mol 4-klor-3-sulfamoyl-benzoylklorid i tetrahydrofuran til en løsning av produktet fra Trinn B i tetrahydrofuran inneholdende 0,1 mol triethylamin. Når reaksjonen er fullført som indikert ved tynnskiktskromatografi, fjernes triethylaminhydrokloridet ved filtrering, og fordamp løsningsmidlet ved redusert trykk. Rens residuet ved kromatografi under dannelse av 7-.(4-klor-3-sulfamoylbenzamido)-1,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3(S)-carboxylsyre-benzylester. D. Avkjøl en løsning av 0,01 mol N-[1 (S) ^-carboethoxy-3-fenylpropyl]-(S)-alanin og 0,01 mol av benzylesteren fra Trinn C i tørr dimethylformamid til 0° C. Tilsett 0,01 mol N-methylmorfolin under omrøring og tilsett deretter dråpevis under omrøring en løsning av 0,01 mol difenylfosforylazid i tørr dimethylformamid mens temperaturen holdes' ved 0° C. Omrør reaksjonsblandingen i 1 time ved 0° C og over natten ved romtemperatur.. Fortynn blandingen med ethylacetat og vask med vandig natriumbicarbonat. Tørk den organiske løs-ning med magnesiumsulfat og fordamp løsningsmidlet under redusert.trykk. Rens residuet ved kromatografi-under dannelse av 7-(4-klor-3-sulfamoylbenzamido0-2-{N-[1(S)-carboethoxy-S-f enylpropyl ] -(S)-alanyl}-l,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3-(S)-carboxylsyre-benzylester.

E. Tilsett en løsning av 0,01 mo av benzylesteren fra Trinn D i ethanol til 0,5 g 10 %-ig palladium-på-.carbon i en hydrogeneringskolbe. Hydrogener blandingen ved 4,2 kg/cm<2>ved romtemperatur inntil fjerningen av benzylgruppen er full- ført som indikert ved tynnskiktskromatografi. Fjern katalysatoren ved filtrering og fordamp løsningsmidlet under redusert trykk under dannelse av 7-(4-klor—3-sulfamoylbenzamido)-2- {N-[1(S)-carboe thoxy-3-fenylpropyl]-(S)-alanyl}-1,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3(S)-carboxylsyre.

F. Omrør en løsning av 0,01 mol av produktet fra Trinn E i vann inneholdende 0,022 mol natriumhydroxyd ved romtemperatur inntil reaksjonen er fullført som indikert ved tynnskiktskromatografi. Tilsett methanol til reaksjonsblandingen og tilsett deretter 0,0 22 ekvivalenter Dowex-50"(H+) under omrøring. Fjern harpiksen ved filtrering og fordamp løsningsmidlet under redusert trykk. Rens produktet ved kromatografi under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 18

7-( 4- klor- 3- sulfamoylbenzensulfonamido)- 2-{ N-[ 1( S)- carboxy-3- fenylpropyl]-( S)- alanyl}- 1, 2, 3, 4- tetrahydro- isokinolin-3( S)- carboxylsyre

A. Følg prosedyren beskrevet i Eksempel 17C under anvendelse av 4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonylklorid i stedet for 4-klor-3-sulfamoylbenzoylklorid under dannelse av 7-(4-klor-3-sulfamoylbenzoylklorid og under dannelse av 7-(4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonamido)-1,2,3,4-tetrahydroisokinon-3 (S)-carboxylsyre-benzylester.

B. Kobl produktet fra Trinn A med N-[1 (S)-carboethoxy-3-fenylpropyl]-(S)-alanin ved å følge prosedyren beskrevet i Eksempel 17D. Kromatografer det urene produkt under dannelse av 7-(4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonamido)-2-{N-[1 (S)-carboethoxy-3-fenylpropyl]-(S)-alanyl}-l,2,3,4-tetrahydro-isokinolin-3(S)-carboxylsyre-benzylester. C. Underkast benzylesteren fra Trinn.B hydrogenolyse som beskrevet i Eksempel 17E under dannelse av 7-(4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonamido)-2-{ N-[1(S)-carboethoxy-3-fenyl-propyl]- (S)-alanyl}-1,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3(S)-carboxylsyre. D. Behandl produktet fra^Trinn C med vandig natriumhydroxyd etterfulgt av Dowex-50<®>(H+) som beskrevet i Eksempel 17F under dannelse av titelforbindelsen.

Eksempel 19

5- ( 4- klor- 3- sulf amoylbenzamido) - 1-{ N-[ 1 ( S) - carboxy- 2- f enyl - propyl]-( S)- alanyl}- octahydro- lH- indol- 2- carboxylsyre A. Følg prosedyren beskrevet i Eksempel. 17A og anvend 5-nitroindol-2-carboxylsyre-ethylester i stedet for 1,2,3,4-tetrahydro-7-nitroisokinolin-3(S)-carboxylsyre-ethylester under dannelse av 5-aminoindol-2-carboxylsyre-ethylester.

B. Oppløs 5-aminoindol-2-carboxylsyre-ethylester i trifluoreddiksyre inneholdende Pt02«Hydrogener ved 4,2 kg/cm<2>på en Parr-rister i 24 timer. Destiller trifluoreddiksyren ved redusert trykk og oppløs residuet i ethylacetat. Filtrer og juster pH til 9 med IN NaOH. Tørk det organiske lag over MgSO^ og destiller løsningsmidlet under redusert trykk under dannelse av 5-aminooctahydro-lH-indol-2-carboxylsyre-ethylester. C. Ved å følge prosedyren beskrevet i Eksempel 17B og anvend 5-aminooctahydro-lH-indol-2-carboxylsyre-ethylester i stedet for 7-amino-l,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3(S)-carboxylsyre-ethylester under dannelse av 5-aminooctahydro-lH-indol-2- carboxylsyre-benzylester.

Ved analogt å følge prosedyrene beskrevet i Eksempel 17C, 17D, 17E og 17F erholdes 5-(4-klor-3-sulfamoylbenz-amido) octahy dro -lH-indol- 2 -carboxylsyre-benzylester, 5-(4-klor-3-sulfamoylbenzamido)-l-{N-[1(S)-carboethoxy-3-fenylpropyl]-(S)-alanyl}-octahydro-lH-indol-2-carboxylsyre-benzylester,

5- (4-klor-3-sulfamoylbenzamido)-l-{N-[1(S)-carboethoxy-3-fenylpropyl]-(S)-alanyl}-octahydro-lH-indol-2-carboxylsyre og titelforbindelsen.

Eksempel 20

5- ( 4- klor- 3- sulfamoylbenzensulfonamido)- 1-{ N-[ 1( S)- carboxy-3- fenylpropyl]-( S)- alanyl}- octahydro- lH- indol- 2- carboxylsyre A. Følg prosedyren beskrevet i Eksempel 18A- og anvend 5-aminooctahydro-lH-indol-2-carboxylsyre-benzylester i stedet for 7-amino-l,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3(S)-carboxylsyre-benzylester og 4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonylklorid i stedet for 4-klor-2-sulfamoylbenzoylklorid under dannelse av 5-(4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonamido)-octahydro-lH-indol-2-carboxylsyre-benzylester.

B. Følg prosedyren beskrevet i Eksempel 17D, 17E og 17F og erhold 5-(4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonamido)-1-{N-[1(S)-carboethoxy-3-fenylparopyl]-(S)-alanyl}-octahydro-lH-indol-2-carboxy1syre-ben zyle ster,

5-(4-klor-3-sulfamoylbenzensulfonamido-l-{N-[1(S)-carboethoxy-3-fenylpropyl]-(S)-alanyl}-octahydro-lH-indol-3-carboxylsyre og titelforbindelsen.

Eksempel 21

1-{ N-[ 1( S)- ethoxycarbonyl- 5-( 4- klor- 3- sulfamoyl- benzamido)-pentyl]-( S)- alanyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol- 2( S)- carboxylsyre- hydroklorid

A. N-[l(S)-ethoxycarbonyl-5-(benzyloxycarbonylamino)-pentyl]-(S)-alanin.

Oppløs 17 g N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(benzyloxy-carbonylamino)pentyl]-(S)-alanin,.t-butylester i 150 ml trifluoreddiksyre ved 5° C. Omrør ved romtemperatur i 5 timer og konsentrer deretter ved romtemperatur i vakuum. Triturer residuet med ether og tørk under vakuum under dannelse av titelforbindelsen.

B. 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(benzoylcarbonylamino)-pentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-benzylester.

Oppløs.i 5 ml DMF 0,7 g N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(benzyloxycarbonylamino)pentyl]-(S)-alanin, 0,325 g cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-benzylester, 0,24 g 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-hydroklorid og 0,20 g 1-hydroxybenzotriazol. Omrør denne løsning under nitrogen i 18 timer og konsentrer deretter ved romtemperatur i vakuum. Fordel mellom ether og vann. Tørk det organiske lag (MgSO^) og konsentrer::ved romtemperatur i. vakuum under dannelse av titelforbindelsen. C. 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-aminopentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn,octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre.

Oppløs i 80 ml ethanol 3,7 g 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5- (benzyloxycarbonylamino)pentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-benzylester. Tilsett til denne 1 g 20 %-ig palladiumhydroxyd på carbon. Hydrogener denne blanding ved 4,2 kg/cm 2 i 18 timer. Filtrer og konsentrer ved romtemperatur i vakuum. Triturer det oljeaktige residuum i ether og filtrer under dannelse av titelforbindelsen, sm.p. 160° C (spaltning), [a]<26>-40,7° (MEOH). D. 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoyl-benzamido) pentyl ]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-hydroklorid.

Oppløs 0,7 g 1-{N-[ (S)-ethoxycarbonyl-5-aminopentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre og 0,4 g triethylamin i 40 ml tetrahydrofuran og avkjøl til 5° C. Tilsett til denne løsning dråpevis en løsning av 0,48 g 4-klor-3-sulfamoylbenzoylklorid i 20 ml tetrahydrofuran. Omrør i 1 time ved 5° C og i 1 time ved 25° C. Filtrer og konsentrer i vakuum. Oppløs residuet i 200 ml diklormethan og surgjor med HCl-gass. Dekanter, og truturer residuet flere ganger med diklormethan under dannelse av titelforbindelsen, sm.p. 185° C, [ajj^-200 (MEOH).

Eksempel 2 2

1 ~{ N - [ 1 ( S) - e thoxyca rbonyl - 5- ( 4 - kl or-3-s ul f- arna yl ben z - amido) pentyl]-( S)- alanyl}- cis, syn- octahydro- lH- indol- 2( S)-carboxylsyre

A. N-t1(S)-ethoxycarbonyl-5-(benzyloxycarbonylamino)-pentyl]-(S)-alanin, t-butylester

Oppløs 60 g Ne-benzyloxycarbonyl-(S)-lysin, ethylester og 90 g t-butylbrompropionat og 22 g triethylamin i 200 ml DMF. Oppvarm denne løsning til 70° C i 18 timer. Konsentrer i vakuum og oppløs residuet i ethylacetat. Vask det organiske oag med vann og saltvann. Tørk det organiske lag (MgS04) og konsentrer i vakuum. Kromatografer residuet på silicagel (100 - 200 mesh) under anvendelse av ether : hexan (1:1) som løsningsmiddel. Eluer SR-isomeren og deretter titelforbindelsen. Tynnskiktskromatografi i ether : hexan,1:1, viser SR-isomeren ved 0,2 og SS-isomeren ved 0.1. B. N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-aminopentyl]-(S)-alanin-t-butylester.

Oppløs 10 g N-[l(S)-ethoxycarbonyl-5-(benzyloxy-carbonylamino )pentyl]-(S)-alanin, t-butylester i 40 ml ethanol. Tilsett 3,0 g 20 %-ig palladiumhydroxyd på carbon. Hydrogener ved 4,2 kg/cm i 18 timer. Filtrer og konsentrer i vakuum under anvendelse av titelforbindelsen. C. N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoylbenz-amido )pentyl]- (S)-alanin, b-butylester.

Oppløs 1,0 g N-[l(S)-ethoxycarbonyl-5-aminopentyl]-(S)-alanin, t-butylester i 50. ml THF. Tilsett 0,3 g triethylamin. Avkjøl til 5° C under nitrogen. Tilsett dråpevis under omrøring en løsning av 0,8 g 4-klor-3-sulfamoyl-benzoylklorid i 30 ml THF. Oppvarm til romtemperatur og om-rør i 10 timer. Filtrer og konsentrer i vakuum. Oppløs residuet i ethylacetat og vask med vann og saltvann. Tørk det organiske lag (MgS04) og konsentrer i vakuum under dannelse av titelforbindelsen. Rens ved kromatografi på silicagel under anvendelse av ethylacetat som elueringsmiddel.

D. N[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoylbenz-amido) pen tyl] - (S)-alanin, hydroklorid

Oppløs 0,75 g N-[l,(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoylbenzamido)pentyl]-(S)-alanin, t-butylester i.10 ml dioxan mettet med HCl-gass. Hold.blandingen ved romtemperatur i 18 timer. Konsentrer i vakuum og triturer residuet med ether under dannelse av titelforbindelsen.

E. 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoyl-benzamido) pen tyl] -(S) -alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2 (S)-carboxylsyre, benzylester

Oppløs i 20 ml DMF 0,75 g N-[1(S)-ethoxycarbonyl^ • 5 (4-klor-3-sulfamoylbenzamido)pentyl-(S)-alanin. HC1, 0,39 g cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre-benzylester, 0,40 g 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid HC1, 0,23 g 1-hydroxybenzotriazol og 0,15 g N-methylmorfolin. Omrør under nitrogen.i 18 timer, konsentrer til romtemperatur (0,03 mm) og fordel residuet mellom ethylacetat og vann. Tørk det organiske lag (MgSO^) og konsentrer i vakuum under dannelse av en olje. Kromatografer oljen på silicagel under anvendelse av ethylacetat som elueringsmiddel under dannelse av titelforbindelsen.

F. 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoyl-benzamido ) pentyl] - (S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2 (S)-carboxylsyre

Oppløs 0,05 g 1-{N-[1 (S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoylbenzamido]pentyl-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH- indol-2(S)-carboxylsyre-benzylester i 5 ml 20 %-ig HBr i iseddik og la løsningen stå i 4 timer. Konsentrer ved romtemperatur (0,03 mm) og triturer med ether under dannelse av produktet i form av dets hydrobromidsalt. Fremstill, den frie base ved oppløsning av hydrobromidsaltet i 20 % vandig ethanol og absorber på en sterk sur ionebytterkolonne (Bio-Rad AG 50w-XZ). Eluer med pyridin : vann 4:96 og konsentrer elueringsmidlet i vakuum under dannelse av titelforbindelsen. Fremstill HCl-saltet av titelforbindelsen ved tilsetning av titelforbindelsen til diklormethan og HC1-gass under dannelse av titelforbindelsen i form av dets hydroklorid, sm.p. 185° C, [a]26-20° (MEOH).

De etterfølgende forbindelser eksemplifiserer forbindelser av formel I som kan fremstilles etter de beskrevne prosesser og ovenfor angitte eksempler. Andre estere og de tilsvarende fri syrer er like betydningsfulle.

De etterfølgende eksempler på formuleringer beskri-ver i detalj sammensetninger som er illustrative for oppfinnelsen. Det vil være innlysende for fagmannen at mange modi-fikasjoner, både når det gjelder materialer og metoder kan utøves uten å avvike fra oppfinnelsens ramme.

I formuleringseksemplene er de aktive bestanddeler som følger: Aktiv bestanddel A: l-{Na-[l(S)-ethoxycarbonyl-3-fenylpropyl]-Ne-[(4-klor-3-sulfamoyl)benzensulfonyl]-(S)-lysyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre

Aktiv bestanddel B: 1-{N-[1(R)-carboxy-2-[S-((3-(6-klor-3,4-dihydro-7-sulfamoyl-1,2,4-benzothiadiazinyl-l,1-dioxyd)methyl))thio]ethyl]]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre.

Aktiv besatnddel C: 7-(4-klor-3-sulfamoylbenzamido)-2-{N-[l(S)-carboethoxy-3-Æenylpropyl]- (S)-alanyl}-l,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3(S)-carboxylsyre.

Formuerling 1

Bland den aktive bestanddel, lactose og maisstivelse jevnt og bland deretter magnesiumstearat i det resulterende pulver. Innkapsl blandingen i egnede todelte harde gelatinkapsler.

Formulering 2

Bland den aktive bestanddel med lactosen jevnt. Bland den mindre mengde av maisstivelse med vann og tilsett den resulterende mengde av maisstivelse pastaen, og bland deretter inntil en jevn våt masse dannes. Tilsett resten av maisstivelsen til den gjenværende våte masse og bland inntil jevne granuler dannes. Sikt granulene gjennom en egnet målemaskin under anvendelse av en 1,9 cm's rustfri stålsikt. Tørk de malte granuler i en egnet tørkeovn inntil den ønskede fuktighetsgrad erholdes. Mal de tørkede granuler gjennom en egnet målemaskin under anvendelse av en 16 mesh rustfri stålsikt. Bland i magnesiumstearatet og press den resulterende blanding til tabletter med ønsket form, tykkelse ,; .hardhet og oppløsningsgrad.

Formulering 3

Oppløs p-hydroxybenzoatene i en del av vann for injeksjon ved 60 - 70° C og avkjøl løsningen til 25 - 35° C. Innfør og oppløs alle de andre excipienter og den aktive bestanddel. Bring løsningen til et sluttvolum, filtrer gjennom en steriliserende membran og fyll i sterile beholde-re .

Bland den aktive bestanddel, lactose og maisstivelse jevnt og bland deretter magnesiumstearatet i det resulterende pulver. Innkapsl blandingen i egnede todelte harde gelatinkapsler.

Formulering 5

Bland den aktive bestanddel med lactosen jevnt. Bland den mindre mengde av maisstivelsen med vann og tilsett den resulterende maisstivelse pasta, og bland deretter inntil en jevn våt masse dannes. Tilsett resten av maisstivelsen til resten av den våte masse og bland inntil jevne granuler erholdes. Sikt granulene gjennom en egnet målemaskin under anvendelse av en 1,9 cm's rustfri stålsikt. Tørk de malte granuler i en egnet tørkeovn inntil det ønskede fuktighets-innhold oppnås. Mal de tørrede granuler gjennom en egnet målemaskin under anvendelse av en 16 mesh rustfri stålsikt. Bland i magnesiumstearat og press den resulterende blanding til ^tabletter til ønsket form, tykkelse, hårdhet og oppløs-ningsgrad.

Formulering 6

Oppløs p-hydroxybenzoatene i en del av vann for injeksjon ved 60 - 70° C og avkjøl løsningen til 24 - 35° C.

Tilsett og oppløs alle de andre excipienter og den aktive bestanddel. Bring løsningen til et sluttvolum, filtrer gjennom en steriliserende membran og fyll i sterile behol-dere .

Formulering 7

Bland den aktive bestanddel,- lactose og maisstivelse jevnt og bland deretter magnesiumstearatet i det resulterende pulver. Innkapsl blandingen i egnede todelte harde gelatinkapsler.

Formulering 8

Bland den aktive bestanddel med lactosen jevnt. Bland den mindre mengde av maisstivelsen med vann og tilsett den resulterende maisstivelse pasta, og bland deretter inntil en jevn våt masse dannes. Tilsett resten av maisstivelsen til resten av den våte masse og bland inntil jevne granuler erholdes. Sikt granulene gjennom en egnet målemaskin under anvendelse av en 1,9 cm's rustfri stålsikt. Tørk de malte granuler i en egnet tørkeovn inntil det ønskede fuktighets-innhold oppnås. Mal de tørkede granuler gjennom en egnet målemaskin under anvendelse av en 16 mesh rustfri stålsikt. Bland i magnesiumstearat og press den resulterende blanding til tabletter til ønsket form, tykkelse, hårdhet og oppløs-ningsgrad.

Formulering 9

Oppløs p-hydroxybenzoatene i en del av vann for injeksjon ved 60 - 70° C og avkjøl løsningen til 24 - 35° C. Tilsett og oppløs alle de andre excipienter og den aktive bestanddel. Bring løsningen til et sluttvolum, filtrer gjennom en steriliserende membran og fyll i sterile behol-dere.

Claims (11)

1. Forbindelse av formel t

og farmasøytisk akseptable estere derav og farmasøytisk 1 2 akseptable salter derav, hvori R og R uavhengig er hydrogen eller lavere alkyl; gruppen

ar én av strukturene II - VIII hvori B er en mettet eller aromatisk ring, eller 3 4 5 én av R , R og R er en gruppe Z-(CH2 )0 _6 -, hvori Z har en av følgende verdier 7?~ til Z^:

8 hvori R er Cl eller CF->; g R er hydrogen eller halogen; R 7 er hydrogen, halogen, carboxy, hydroxy eller amino;

9 10 R og R er uavhengig hydrogen, lavere alkyl eller halo- lavere alkyl; R^^ er hydrogen eller lavere alkyl;

R^2 er hydfogen, lavere alkyl eller fenyl- lavere alkyl; og Rq kan også være fenyl eller fenyl lavere alkyl; hvorved når R 3 er gruppen Z-( CE^)^_^-, er R <3> Z <1-> (CH2 )1 _6 -, Z <2-> (CH2 )1 _6 -, Z <3-> (CH2 )1 _6 -, Z —CH2 _, Z~ >— (CH2 ) — i Z^ — (CH2 ) ' Z — (CH2) ^_g*~ i Z8-(CH2)1_6-, Z9-(CH2)1_6- eller Z10-(CH2), R4 er lavere alkyl, benzyl, benzyloxy, benzylthio, fenoxy eller fenylthio,

5 R er hydrogen; og gruppen

er én av strukturene II - VIII; og når R <4> er gruppen Z-(CH2)Q_g-, er R <4> Z <1-> (CH2 )0 _6 -, Z <2-> (CH2 )0 _g-, Z <3-> (CH2 )0 _g-, z5-(CH2>0-6-' z6-(CH2)0-6-' z <7-> (CH2<>>0 -6 <-> ' Z <8-> (CH2 )0 _6 -, Z <9-> (CH2 )0 _6 - eller Z10-(CH2) 0_6~ og R 3 er hydrogen, lavere alkyl eller amino lavere alkyl og

5 R er hydrogen; og gruppen

er én av strukturene II -. VIII; og når R <5> er gruppen Z-(CH2 )0 _6~ , er R5Z1 , Z2, Z <3> , z4 , z <5,> Z <6> , Z <7> , Z8, Z9 eller Z <19> , R 3 er hydrogen, lavere alkyl eller amino lavere alkyl og R 4 er lavere alkyl, benzyl, benzyloxy, benzylthio, fenoxy eller fenylthio; og gruppen

er én av strukturene II til VII,.fortrinnsvis i form av den fri di-carbonsyre eller i form av dens alkylester, hvor alkylgruppen inneholder 1-6 carbonatomer, spesielt i form av dets monoester hvori carboxy gruppen bundet til gruppen

er i den fri form, og hvor fortrinnvis alle de foregående forbindelser er isomere med den absolutte konfigurasjon ved hver av de tre carbonatomer bundet til både et nitrogen- og en carbonylgruppe som svarer mest nær opp til den absolutte konfigurasjon av L-aminosyrer.

2) Forbindelse ifølge krav 1, karakteri-ksraev r1t , vhveod ri at Z R 4foerr treinn ngsvruips pe er Z-Z -i (C, HZ 09)°_ , "6Z ,- T , soZ m e: , deZ f7 i, neZ rR t , iZyq eller Z <10> ; R 4 er fortrinnsvis ZJ1 -(CH2)2el±er 3-, ZZ?-(CH2)2 eller 3 <->, Z <3-> (CH <2> )2 eller 3-, Z5-(CH2 eller 3-, Z7-(CH2)2 eller 3 <->,Z<8-> (C <H>2 )2 eller3 -, <Z9-> (CH2 )2 eller3 - eller <Z10-> (CH2 )2 eller 3 ' og hvori fortrinnsvis gruppen

er gruppen av formel II, IV (hvori B er en mettét ring) I eller VIII, og.r 5 er fortrinnsvis hydrogen.

3. Forbindelse ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at R og R er hydrogen og/eller når Z er av formel IX, X eller XI er R 6 hydrogen og R 7 er hydrogen eller hydroxy, og/eller når Z er av formel XIII eller XIV erR<9> ogR " <*> "^ uavhengig hydrogen eller methyl, og/eller R <8> i definisjonen av delen Z er klor, og/eller R er methyl.

4. Forbindelse ifølge krav 1 eller 2, k a r a k -1 2 terisert ved at R og R er hydrogen, gruppen

er gruppen av formel IV, hvori B er en mettet ring og R5 er hydrogen, R4 er Z <1-> (CH2 )3 - eller Z <2-> (CH2 )3~ , hvori R^ er hydrogen, R^ er hydrogen eller hydroxy ogR<8> er klor; og RJ 3 er methyl, o"g som fortrinnsvis er 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4~ klor-3-sulfamoyl)-benzen-sulfonaminopentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2 (S)-carboxylsyre, 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-3-sulfamoyl)-benzamido-pen tyl ]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre, 1-{N-[1(S)-ethoxycarbonyl-5-(4-klor-2-hydroxy-5-sulfamoyl)-benzamidopentyl]-(S)-alanyl}-cis-syn-octahydro-lH-indol-2 (S)-carboxylsyre, 1-{N-[1(S)-carboxy-5-(((4-klor-2-hydroxy-5-sulfamoylfenyl)-carbonyl)amino)pentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre, 1-{N-[1(S)-carboxy-5-(((4-klor-3-(N-methylsulfamoyl)fenyl)-carbonyl)amino)pentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre, 1-{N-[1(S)-carboxy-5-(((4-klor-3-sulfamoylfenyl)carbonyl)-. amino)pentyl]-(S)-alanyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S) - carboxylsyre, i den fri form eller i form av dens ester, fortrinnsvis i form av dens mono- eller di-ethylester.

5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R 3 er en gruppe Z-(CH2 )0 _g- som definert i krav 1, fortrinnsvis Z <1-> (CH2 )4 -, Z <2-> (CH2 )4 -, Z <3-> (CH2 )4<->,<Z4-> CH2 -, Z <5-> (CH2 )4 -, Z <6-> (CH2 )4 -,Z<7> -(CH2 )4 , Z <8-> (CH2 )4 -, Z <9-> (CH2)4 - eller Z1Q -(CH2 )4~ , og hvori gruppen

fortrinnsvis er gruppen av formel II, IV (hvori B er en mettet ring) eller VIII.

6. Forbindelse ifølge krav 5, karakterisert ved at R 1 og R 2er hydrogen, og/eller Z er av fi 7 formelen IX, X eller XI, R er hydrogen og R er hydrogen eller hydroxy,. og/eller når Z er av formel XIII eller XIV, er R <9> og R" <*> "^ uavhengig hydrogen eller methyl, og/eller R <8> i definisjonen av delen Z er klor, og/eller R 4 er benzyl eller ethyl.

7. Forbindelse ifølge krav 5, karakteri-1 2 sert ved at R og R er hydrogen, gruppen

er gruppen av formel IV, hvori B er en mettet ring og R <5> er hydrogen,R<3> er Z <1-> (CH2 )4 - eller Z <2-> (CH2 )4~ , hvori R 6 og R 7 er hydrogen, og R <8> er klor og R 4 er benzyl, og som fortrinnsvis er l-{Na- [ (S) -ethoxycarbonyl4.3-f enyl-propyl] -Ne-[(4-klor-3-sulfamoyl)-benzensulfonyl]-(S)-lysyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre eller l-{Na-[1(S)-ethoxycarbonyl-3-fenylpropyl]-Ne-[(4-klor-3-sulfamoyl)-benzoyl-(S)-lysyl}-cis,syn-octahydro-lH-indol-2(S)-carboxylsyre i den fri form eller i form av dens ester, fortrinnsvis i form av dens mono- eller di-ethylester.

8. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved atR ^ er en gruppe Z-(CH2)__fi- som definert i krav 1, fortrinnsvis Z1i , Z o , Z ~\ , Z R , Z 7 , Z r , Z 9 eller Z ln; hvori gruppen.

fortrinnsvis er gruppen av formel II, VI (hvori B er en aromatisk ring) eller IV (hvori P er en mettet ring), fortrinnsvis

9. Forbindelse ifølge krav 8, karakterisert ved at R 1 og R 2 er hydrogen, og/eller når Z er av fi 7 formelen IX, X eller XI er R hydrogen og R er hydrogen eller hydroxy, og/eller når Z er av formelen XIII eller XIV er R <9> og R^ uavhengig hydrogen eller methyl, og/eller R <®> i definisjonen av delen Z er klor, og/eller R er methyl og/ eller R <4> er benzyl eller ethyl, og hvor forbindelsen fortrinnsvis er

7- (4-klor-3-sulf amoylbenzamido.) -2-{N- [1 (S)-ethoxycarbonyl-3-fenylpropyl]-(S)-alanyl}-1,2,3,4-tetrahydroisokinolin-3(S)-carboxylsyre eller den tilsvarende 1-S-carboxyforbindelse.

10. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av formel I som definert i hvilket som helst av kravene 1-9, karakterisert ved at forbindelsen fremstilles ved en egnet•prosess valgt fra følgende prosesser a-i: a) for fremstilling av en forbindelse av formel I hvori R^" er hvdrogen: Kondensasjon av en ketoforbindelse(XIX) med et dipeptid (XX) under reduksjon

2 3 4 5 hvori A, R , R , R og R er som ovenfor definert og Pr betegner en fri eller en beskyttet hydroxygruppe; b) alkylering av et dipeptid (XX) ved hjelp av en forbindelse av formel (XXI) under basiske betingelser

hvori X er klor, brom, jod, alkansulfonyloxy eller aren-sulfonyloxy, A, R"*", R <2> , R <3> , R <4> , R"* er som ovenfor definert for forbindelser av formel I og Pr betegner en fri eller beskyttet hydroxygruppe; c) kondensasjon av en aminosyre (XXII) med en aminosyre (XXIII) i nærvær av et kondensasjonsmiddel hvori A,R<1> ,R<2> ,R<3> ,R<4> ,R<5> er som ovenfor definert for forbindelser av formel I, og Pr betegner en fri eller beskyttet (f.eks. ved forestring) hydroxygruppe; d) kondensasjon av en aminoforbindelse (XXIV) med en ketoforbindelse (XXV)

under de betingelser som er beskrevet for prosess a hvori A, b} ,R<2> , R <3> , R <4> , R^ er som ovenfor definert for forbindelser av formel I og Pr betegner en fri eller beskyttet (f.eks. ved forestring) hydroxygruppe; e) alkylering av en aminoforbindelse (XXIV) ved hjelp av en forbindelse (XXVI)

hvori X er klor, brom, jod, alkansulfonyloxy eller aren-10345 sulfonyloxy, A, R , R , R , R , R er som ovenfor definert for forbindelser av formel I og Pr betegner en fri eller beskyttet (f.eks. ved forestring) hydroxygruppe, under de betingelser som er beskrevet for prosess b); f) for fremstilling av en forbindelse av formel I, hvori én av R , R og R er en gruppe Z-(CH2 )0 _g-f hvori Z er Z <5> ,Z<6> , Z <7> , Z <8> , Z9 eller Zl0, fortrinnsvis Z <7> , Z8 eller Z <9> ; kondensering av et peptid av generell formel (XXX) med en forbindelse inneholdende den ønskede gruppe (XXXI) hvori R <1> , R <2> og A er som definert for formel I, Pr er en beskyttet hydroxygruppe, W <3> ,W<4> og W <5> er definert somR<3> , R <4> og R <5> med den forskjell at én av W <3,> W <4> og W <5> inneholder en NH2-gruppe. i stedet for den respektive Z <5> til Z <10-> gruppe; og W <6> erZ<5> ,Z6 ,Z7 ,Z 8,Z<9> og Z <10> ; g) for fremstilling av en forbindelse av formel I hvori én av R <3> , R <4> og R <5> er en gruppe Z-(CH2 )Q _6 -, hvori Z er Z <1>» Z2 eller Z <3> ; kondensasjon av et peptid av formelXXXII med en egnet substituert forbindelse av formel XXXIII

hvori R <1> , R <2> og A er som definert for formel I, Pr er en 7 8 9 3 beskyttet hydroxygruppe, W , W og W er definert som R , R m og R c , med den .forskjell at én av W 7 , W 8 og W 9 inneholder enNH~ -gruppe i stedet for den respektive Z 1, Z 2 eller Z 3-gruppe, „ <10> gruppe, og W er

h) for fremstilling av en forbindelse av formel I,"3 A C hvori én av R , R og R er en gruppe Z-(CH2 )0 _g-, hvori Z er Z4 : Kondensasjon av et peptid av formel (XXXVII) med et 3-halomethylbenzothiadiazin (XXXVII)

hvori R 1 , R 2 og A er som definert for formel I, Pr er en 11 12 JL3 3 beskyttet hydroxygruppe, W , W og w er definert som R , R <4> ogR<5> med den forskjell at én av W <11> , W <12> og W <13> inneholder en -SH-gruppe i stedet for den respektive Z <4-> gruppe, og Hal er halogen, fortrinnsvis klor; i) for fremstilling av en forbindelse av formel I, "3/1 £ hvori én av R , R og R er en gruppe Z-( CU0) n hvori Z r g u o er Z eller Z : Kondensasjon av et peptid av formel XXXIX med en forbindelse av formel XXXX

1 2 9 10 hvori R , R , R , R og A er som definert for formel I, Pr er en beskyttet hydroxygruppe, W"'" <4> , og W er definert 3 4 5 14 15 16 som R , R og R med den forskjell at én av W , W og W inneholder gruppen

i stedet for gruppen Z~* eller Z^ : etterfulgt om nødvendig av fjerning av de beskyttende grupper under dannelse av det ønskede produkt, og om ønsket, omdannel-se av den således erholdte forbindelse av formel I til dets ester og/eller frigivelse av forbindelsen av formel I fra dets ester eller fremstilling av et salt derav, og om ønsket, isolering av den foretrukne isomer.

11. Farmasøytisk preparat omfattende en forbindelse av generell formel I eller dets farmasøytisk akseptable salt éller ester derav som definert ifølge hvilket som helst av kranee 1-9, eller erholdt ved fremgangsmåten ifølge krav 10.