Przedmiotem wynalazku jest sposób usuwania z ekstraktu komórkowego, zwlaszcza ekstraktu drozdzowego, kwasów nukleinowych do niskiej ich zawartosci. Ekstrakt komórkowy o niskiej zawar¬ tosci kwasów nukleinowych znajduje zastosowanie miedzy innymi w przemysle koncentratów spo¬ zywczych, miesnym, owocowo-warzywnym, chlod¬ niczym, gastronomicznym i do wyrobu dan die¬ tetycznych.Dotychczas ekstrakty komórkowe, tj. ekstrakty drozdzowe, ekstrakty plesniowe i ekstrakty bakte¬ ryjne, wytwarzano metoda autolizy, plazmolizy, termolizy badz hydrolizy kwasowej i enzymatycz¬ nej. Znany jest takze z polskiego opisu patento¬ wego nr 106 653 sposób wytwarzania ekstraktu drozdzowego metoda plazmolizy skojarzonej z auto- liza oraz z polskiego opisu patentowego nr 107 506 sposób wytwarzania ekstraktu drozdzowego meto¬ da termolizy skojarzonej z autoliza.W procesie plazmolizy produkty metabolizmu wy¬ twarzane w wyniku dzialania enzymów wewnatrz¬ komórkowych ekstrahowane sa z komórek takimi substancjami chemicznymi, jak sól kuchenna, octan etylu, octan amylu itp. Stosowane rozpuszczalniki organiczne wymywaja niektóre skladniki sciany ko¬ mórkowej, dzieki czemu staje sie ona latwo prze¬ puszczalna. W wyniku tego procesu, zachodzacego w temperaturze do 70°C, nastepuje dyfuzja tresci komórkowej do otoczenia.Proces autolizy polega na samotrawieniu komórek pod wplywem wewnatrzkomórkowych proteaz, li¬ paz i enzymów hydrolizujacych weglowodany.Rozkladowi ulegaja takie substancje zapasowe, jak glikogen, bialka i tluszcze. Czas trwania procesu 5 wynosi okolo 90 h i zachodzi w temperaturze do 80°C.W procesie termolizy wodna zawiesine komórek poddaje sie dzialaniu wysokich temperatur, nisz¬ czac sciany komórkowe i ulatwiajac ekstrakcje 10 substancji wewnatrzkomórkowych. Proces termo¬ lizy prowadzi sie w temperaturach 90—liOO°C, w czasie 1*—8 h.Proces hydrolizy prowadzi sie pod podwyzszo¬ nym cisnieniem w temperaturach powyzej 100°C. 15 Stosowanie tak otrzymywanych ekstraktów ko¬ mórkowych w przemysle spozywczym jest ograni¬ czone obecnoscia zawartych w nich kwasów nuklei¬ nowych, których ilosc waha sie od 7 do 12% w przeliczeniu na sucha mase i zalezy miedzy inny- 20 mi od rodzaju drobnoustrojów, metod hodowli i fazy wzrostu, skladu pozywki, temperatury itp.Zgodnie z danymi Food and Nutrition Board of the National Research Council for Proteins* dla czlowieka o wadze 70 kg dzienna dawka bialka 25 komórkowego nie powinna przekraczac 65 g, a Protein Advisory Group of the United Natioh System (PAG) zaleca, by dzienna dawka kwasów nukleinowych nie przekraczala 2 g. Gdyby bialko komórkowe bylo jedynym zródlem bialka spozyw- 30 czego, zawartosc kwasów nukleinowych winna byc 113 568113 568 3 w nim nizsza od 3% suchej masy, a w przypadku, gdy stanowi 50% pozywienia bialkowego — nizsza niz 6% suchej masy.Znane metody obnizania zawartosci kwasów nu¬ kleinowych dziela sie na cztery kategorie: — ograniczenie ich syntezy podczas procesu ho¬ dowli drobnoustrojów, — produkcja izolatów lub koncentratów bialka o obnizonej zawartosci kwasów nukleinowych, — hydroliza i ekstrakcja kwasów nukleinowych z komórek za pomoca róznego rodzaju chemi¬ kaliów, — usuwanie kwasów nukleinowych za pomoca egzo- lub endogennych enzymów.Zgodnie z danymi literaturowymi zawartosc kwa¬ sów nukleinowych w drozdzach mozna obnizyc, sto¬ sujac tzw. „szok termiczny" (Maul S. i wspólauto¬ rzy — „Nature" 1970, t. 228, s. 181; Ohta S. i wspól¬ autorzy — „Appl. Microb." 1971, t. 22, nr 3, s. 422); dodatek enzymów (Machek F. i wspólautorzy — „Adv. in Microb. Eng." Part 2, s. 977, wydanie J. Wiley a. Sons, New York, London 1974); alka¬ liczna ekstrakcje bialka i precypitacje kwasów nukleinowych kwasem solnym (Hedenskog G. i wspólautorzy — „Biotechnol. a. Bioeng." 1972, t. 14, s. 447; ibid. 1973, t. 15, s. 129) lub przez pod¬ grzanie drozdzy do 90°C przy ph = 2,0 (Simard R. i wspólautorzy — „Proc. of the IV Intern. Symp. on Yeasts, Vienna, Austria 1974, t. I, s. 147).Kwasy nukleinowe z ekstraktów drozdzowych usuwano, stracajac je po hydrolizie alkalicznej kwasami przy pH = 4,0 lub przez preeypitacje w, temperaturze 80—90°C (Hedenskog G. i wspól¬ autorzy — „Biotechnol. a. Bioeng." 1080, t. il2, s. 947; ibid 1972, t. 115, s. 129; Newell J. A. i wspól¬ autorzy — opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 3 867 555) lub zgodnie z opisem paten¬ towym RFN nr 2 359 900 dodatkiem nukleazy i po¬ przez alkaliczna hydrolize.Ekstrakcje kwasów nukleinowych za pomoca al¬ kaliów stosowali równiez Viikari i Linke (Proc.Biochem." 1977, t. 5) oraz Frencl, Machek i Sillin- ger (opis patentowy czeski nr 161 299), a ekstrakcje kwasami opisano w opisach patentowych RFN nr. nr 2 500 565, 2 513 944.Celem wynalazku jest sposób usuwania kwasów nukleinowych z ekstraktów komórkowych przezna¬ czonych do celów spozywczych, zwlaszcza z eks¬ traktów drozdzowych, do niskiej zawartosci kwa¬ sów nukleinowych w ekstraktach.Nieoczekiwanie, okazalo sie, ze kwasy nukleino¬ we mozna oddzielic od ekstraktu komórkowego po¬ przez poddanie tego ekstraktu w okreslonym czasie dzialaniu niskiej temperatury przy odpowiednim poziomie kwasowosci ekstraktu.Otrzymany w znany sposób plynny ekstrakt ko¬ mórkowy o zawartosci 3—ilG% suchej masy, majacy bezposrednio po odwirowaniu od scian komórko¬ wych temperature powyzej 50°C, schladza sie do temperatury 0—20°C, najkorzystniej do temperatury okolo 4°C lub okolo 10°C, zakwaema g kwasu siarkowego do poziomu pH = 4,0—6,0, naj¬ korzystniej 4,9 i przetrzymuje w tej temperaturze przez okres 10—25 h. W ten sposób z ekstraktu wytraca sie bialy osad mieszaniny kwasów nu¬ kleinowych, który nastepnie oddziela sie przy uzy- 5 ciu wirówki lub filtra, a ekstrakt zageszcza sie np. w wyparce do postaci plynu o zawartosci okolo 40% suchej masy, pasty o zawartosci okolo 65% suchej masy lub w suszarce rozpylowej do postaci proszku o zawartosci okolo 95% suchej masy, któ- io re to trzy rodzaje stanowia produkt koncowy.Otrzymany w ten sposób ekstrakt zawiera 1,5— —4,0% kwasów nukleinowych w suchej masie.Sposób usuwania z ekstraktu komórkowego kwa¬ sów nukleinowych wedlug wynalazku jest szczegó- 15 lowo opisany w ponizszym przykladzie wykonania.Przyklad. Do 500 dcm3 wody dodaje sie 400 kg prasowanych drozdzy piekarskich Saccha- romyces cerevisiae oraz 2 kg soli kuchennej i mie¬ sza sie do otrzymania jednorodnej zawiesiny. Za- 20 wiesine te podgrzewa sie do temperatury 50°C i zakwasza przez dodanie kwasu siarkowego do poziomu pH ¦= 5,6, po czym prowadzi sie proces termolizy skojarzonej z autoliza przez 24 h w tem¬ peraturze 50°C, a nastepnie przez 18 h w tempera- 25 turze 65^C i 9 h w temperaturze 80°C. Przed pod¬ niesieniem temperatury do 80°C do kadzi dodaje sie wode do objetosci 800 dcm3, a nastepnie calosc miesza sie przez 1J0 minut. Ekstrakt odwirowuje sie na goraco, przemywajac pozostale sciany komórko- 30 we 3-krotnie woda. Klarowny ekstrakt schladza sie do temperatury 5°C, zakwasza kwasem siarkowym do pH = 4,9 i przetrzymuje go w tej temperaturze przez 15 h. Wytracony bialy osad, stanowiacy mie¬ szanine kwasów nukleinowych, oddziela sie przy 35 uzyciu wirówki, ekstrakt drozdzowy zas zageszcza sie w wyparce prózniowej, a nastepnie w wyparce kulistej do zawartosci 65% suchej masy lub w suszarce rozpylowej do okolo 95i% suchej masy. 40 55 60 Zastrzezenie patentowe 1. Sposób usuwania z ekstraktu komórkowego, zwlaszcza 2 ekstraktu drozdzowego, kwasów nu¬ kleinowych do niskiej ich zawartosci, znamienny 4C tym, ze wytworzony w znany sposób ekstrakt ko¬ mórkowy zawierajacy 3—10% suchej masy schla¬ dza sie do temperatury 0—20°C, zakwasza sie go do wartosci pH = 4,0—6,0 i przetrzymuje w tej temperaturze przez 10—25 h, po czym wytracony „ osad, stanowiacy mieszanine kwasów nukleino- wych, oddziela sie od ekstraktu. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze ekstrakt schladza sie do temperatury okolo 4°C. 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze ekstrakt schladza sie do temperatury okolo 10°C. 4. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze schlodzony ekstrakt zakwasza sie dodatkiem kwasu siarkowego do wartosci pH = 4,9. 5. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze wytracony osad odwirowuje sie od ekstraktu, 6. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze wytracony osad oddziela sie od ekstraktu metoda filtracji.ZGK 5, Btm. zam. 9014 — 90 egz.Cena 100 zl PLThe subject of the invention is a method of removing nucleic acids to a low content from a cell extract, in particular yeast extract. Cellular extract with a low content of nucleic acids is used, among others, in the industry of food concentrates, meat, fruit and vegetables, chilled, gastronomic and for the production of dietary supplements. Previously, cell extracts, i.e. yeast extracts, mold extracts and bacterial extracts were prepared by autolysis, plasmolysis, thermolysis, or acid and enzymatic hydrolysis. There is also known from the Polish patent description No. 106 653 the method of producing yeast extract by the method of combined plasmolysis with autolysis and from the Polish patent description No. 107 506 the method of producing yeast extract by the method of thermolysis combined with autolysis. produced by the action of intracellular enzymes, are extracted from the cells with such chemicals as common salt, ethyl acetate, amyl acetate, etc. The organic solvents used werehes away some components of the cell wall, making it easily permeable. As a result of this process, which takes place at temperatures up to 70 ° C, cell contents diffuse into the environment. The autolysis process consists in self-digestion of cells under the influence of intracellular proteases, lypases and carbohydrate hydrolysing enzymes. fats. The duration of the process is about 90 hours and takes place at a temperature of up to 80 ° C. In the thermolysis process, the aqueous cell suspension is exposed to high temperatures, destroying the cell walls and facilitating the extraction of intracellular substances. The thermolysis process is carried out at temperatures of 90-100 ° C for 1-8 hours. The hydrolysis process is carried out under increased pressure at temperatures above 100 ° C. 15 The use of the thus obtained cell extracts in the food industry is limited by the presence of the nucleic acids contained in them, the amount of which varies from 7 to 12% in terms of dry weight and depends, among other things, on the type of microorganisms, culture and growth phase, nutrient composition, temperature, etc. According to the data of the Food and Nutrition Board of the National Research Council for Proteins * for a man weighing 70 kg, the daily dose of cellular protein should not exceed 65 g, and the Protein Advisory Group of the United The Natioh System (PAG) recommends that the daily dose of nucleic acids should not exceed 2 g. If the cell protein was the only source of food protein, the content of nucleic acids in it should be less than 3% of dry weight, and in the case of when it constitutes 50% of protein nutrition - less than 6% of dry matter. Known methods of reducing the content of nucleic acids fall into four categories: - limiting their synthesis during s the process of microbial cultivation, - production of protein isolates or concentrates with a reduced content of nucleic acids, - hydrolysis and extraction of nucleic acids from cells with the use of various types of chemicals, - removal of nucleic acids by means of exo- or endogenous enzymes. In the literature, the content of nucleic acids in yeasts can be reduced using the so-called "Thermal shock" (Maul S. et al., "Nature" 1970, vol. 228, p. 181; Ohta S. et al., "Appl. Microb." 1971, vol. 22, No. 3, p. 422); addition of enzymes (Machek F. et al. - "Adv. In Microb. Eng." Part 2, p. 977, J. Wiley a. Sons edition, New York, London 1974); alkaline extraction of the protein and precipitation of nucleic acids with hydrochloric acid (Hedenskog G. et al. - "Biotechnol. a. Bioeng." 1972, vol. 14, p. 447; ibid. 1973, vol. 15, p. 129) or by heating of yeasts to 90 ° C at ph = 2.0 (Simard R. et al. - Proc. of the IV Intern. Symp. on Yeasts, Vienna, Austria 1974, vol. I, p. 147). Nucleic acids yeast extracts were removed, losing them after alkaline hydrolysis with acids at pH = 4.0 or by preeipitation at 80-90 ° C (Hedenskog G. et al. - "Biotechnol. a. Bioeng." 1080, vol. il2 , p. 947; ibid. 1972, vol. 115, p. 129; Newell JA et al., U.S. Patent No. 3,867,555) or in accordance with German Patent Specification No. 2,359,900 by addition of nuclease and subsequent by alkaline hydrolysis. Extractions of nucleic acids with alkali were also used by Viikari and Linke (Proc. Biochem. "1977, vol. 5) and Frencl, Machek, and Sillinger (Czech Patent No. 161,299), and extractions by wasami are described in German patents no. No. 2,500,565, 2,513,944. The object of the invention is a method of removing nucleic acids from food-grade cell extracts, especially yeast extracts, to a low nucleic acid content in the extracts. Surprisingly, the acids turned out to be The nucleic acid can be separated from the cellular extract by subjecting the extract to low temperature for a certain period of time with an appropriate acidity level of the extract. The known liquid cell extract is obtained with a content of 3 µg% dry weight, which is to be obtained immediately after centrifugation from the walls cell temperature above 50 ° C, cooled to 0-20 ° C, most preferably to a temperature of about 4 ° C or about 10 ° C, acidify g of sulfuric acid to a pH level of 4.0-6.0, most preferably more preferably 4.9 and is kept at this temperature for a period of 10-25 hours. In this way, a white precipitate of the mixture of nucleic acids is precipitated from the extract, which is then separated using a centrifuge or filter and the extract is concentrated, for example, in an evaporator to a liquid with a content of about 40% dry matter, a paste with a content of about 65% dry matter or in a spray dryer to a powder with a content of about 95% dry matter, which are three types is the end product. The extract thus obtained contains 1.5-4.0% of nucleic acids by dry weight. The method of removing nucleic acids according to the invention from the cell extract is described in detail in the following embodiment. Example. 400 kg of Saccharomyces cerevisiae pressed baker's yeast and 2 kg of table salt are added to 500 dcm 3 of water and mixed until a homogeneous suspension is obtained. The suspension is heated to 50 ° C and acidified by adding sulfuric acid to the level of pH ¦ = 5.6, then the thermolysis process combined with autolysis is carried out for 24 hours at 50 ° C, and then for 18 h at 65 ° C and 9 h at 80 ° C. Before the temperature was raised to 80 ° C, water was added to the vat to a volume of 800 dm3, and then all mixed for 10 minutes. The extract is hot centrifuged, washing the remaining cell walls with water 3 times. The clear extract is cooled to 5 ° C, acidified with sulfuric acid to pH = 4.9 and kept at this temperature for 15 hours. The precipitated white precipitate, which is a mixture of nucleic acids, is separated using a centrifuge, the yeast extract it is concentrated in a vacuum evaporator and then in a spherical evaporator to 65% dry matter or in a spray dryer to approximately 95% dry matter. 40 55 60 Claim 1. A method for removing from a cell extract, especially a yeast extract, low-acid nucleic acids, characterized in that a cell extract prepared in a known manner, containing 3-10% dry weight, is cooled temperature is 0-20 ° C, acidified to a pH value of 4.0-6.0 and kept at this temperature for 10-25 h, then the precipitate, which is a mixture of nucleic acids, is separated from extract. 2. The method according to claim The method of claim 1, wherein the extract is cooled to a temperature of about 4 ° C. 3. The method according to p. A process as claimed in claim 1, characterized in that the extract is cooled to a temperature of about 10 ° C. 4. The method according to p. The method of claim 1, characterized in that the cooled extract is acidified by the addition of sulfuric acid to a pH value of 4.9. 5. The method according to p. A method according to claim 1, characterized in that the precipitate is centrifuged from the extract, The method of claim 1, characterized in that the precipitate is separated from the extract by filtration. ZGK 5, Btm. residing 9014 - 90 copies Price PLN 100 PL