PL187288B1 - Sposób i urządzenie do pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcych - Google Patents
Sposób i urządzenie do pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcychInfo
- Publication number
- PL187288B1 PL187288B1 PL98344256A PL34425698A PL187288B1 PL 187288 B1 PL187288 B1 PL 187288B1 PL 98344256 A PL98344256 A PL 98344256A PL 34425698 A PL34425698 A PL 34425698A PL 187288 B1 PL187288 B1 PL 187288B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- sample
- sampling member
- receptacle
- animal
- samples
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 title abstract description 8
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 133
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 56
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 55
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 24
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 claims description 5
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 claims description 5
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 4
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 2
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 claims 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 5
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 abstract 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 15
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 14
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 5
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 5
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 4
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 4
- 108010001517 Galectin 3 Proteins 0.000 description 3
- 102100039558 Galectin-3 Human genes 0.000 description 3
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 244000144980 herd Species 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- 210000000080 chela (arthropods) Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009395 genetic defect Effects 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 229910000906 Bronze Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012863 analytical testing Methods 0.000 description 1
- 239000012805 animal sample Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012820 baking ingredients and mixes Nutrition 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000010974 bronze Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000007596 consolidation process Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- KUNSUQLRTQLHQQ-UHFFFAOYSA-N copper tin Chemical compound [Cu].[Sn] KUNSUQLRTQLHQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000013479 data entry Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- -1 for example Substances 0.000 description 1
- 238000004374 forensic analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000010448 genetic screening Methods 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 210000000003 hoof Anatomy 0.000 description 1
- 210000003284 horn Anatomy 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000007373 indentation Methods 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000009405 line breeding Methods 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 235000020991 processed meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000013777 protein digestion Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 235000021067 refined food Nutrition 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000009666 routine test Methods 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009966 trimming Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K11/00—Marking of animals
- A01K11/001—Ear-tags
- A01K11/003—Ear-tags with means for taking tissue samples, e.g. for DNA analysis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A22—BUTCHERING; MEAT TREATMENT; PROCESSING POULTRY OR FISH
- A22B—SLAUGHTERING
- A22B5/00—Accessories for use during or after slaughtering
- A22B5/0064—Accessories for use during or after slaughtering for classifying or grading carcasses; for measuring back fat
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A22—BUTCHERING; MEAT TREATMENT; PROCESSING POULTRY OR FISH
- A22B—SLAUGHTERING
- A22B5/00—Accessories for use during or after slaughtering
- A22B5/20—Splitting instruments
- A22B5/201—Removing the spinal cord or other nervous tissues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/02—Devices for withdrawing samples
- G01N1/04—Devices for withdrawing samples in the solid state, e.g. by cutting
- G01N1/08—Devices for withdrawing samples in the solid state, e.g. by cutting involving an extracting tool, e.g. core bit
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/02—Food
- G01N33/12—Meat; Fish
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Birds (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
3 U rzadzenie do pobierania i wstepnego preparow a- nia próbek tkanek zw ierzecych, zw laszcza próbek kom ó- rek zaw ierajacych DN A, zaopatrzone w czlon do pobiera- nia próbki, znam ienne tym , ze m a odbieralnik (1) próbki posiadajacy podstaw e (2), scianki boczne (3) zaopatrzone, w rejonie oddalonym od podstaw y (2), w elem enty (5) do m ocow ania czlonu (4) do pobierania próbki oraz posiada- jacy tym czasow a przykryw ke stanow iaca oslone pustego odbieralnika (1), przy czym czlon (4) do pobierania próbki stanowi, po pobraniu próbki i w prow adzeniu jej do odbie- ralnika (1) próbki, szczelne zamkniecie tego odbieralnika (1), i w tym polozeniu zam knietym przednie zakonczenie (7) czlonu (4) do pobierania próbki oddziela w odbieralniku (1) próbki co najm niej je d n a przestrzen (6, 6a) dla próbki, ograniczona ponadto podstaw a (2) i sciankami bocznym i (3) tego odbieralnika (1), zas w odbieralniku (1) próbki znaj- duje sie srodek zabezpieczajacy przed enzym am i rozklada- jacym i DN A , a ponadto odbieralnik (1) próbki je st pola- czony rozlacznie z plytka otw orow a (11) plakietki usznej m ajacej rów niez plytke kolcow a (10) i zaopatrzonej w oznaczenie potw ierdzajace tozsam osc zw ierzecia, przy czym odbieralnik (1) próbki jest zaopatrzony w takie samo oznaczenie potw ierdzajace tozsam osc zw ierzecia jak plakietka uszna, natom iast czlon (4) do pobierania próbki jest polaczony rozlacznie z plytka kolcow a (10) F ig 1 PL PL PL PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób i urządzenie do pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcych, zwłaszcza próbek komórek zawierających DNA.
Pobieranie dużej liczby próbek tkanek lub DNA jest konieczne do różnych badań i programów. W określonych warunkach muszą być zebrane informacje o całych populacjach zwierząt hodowlanych (np. dynamicznej biologicznie produkcji zwierzęcej) lub populacjach zwierzęcych scharakteryzowanych regionalnie albo według określonych cech.
W związku z tym, wskutek na przykład afery z BSE i problemów związanych z wykazaniem, że mięso i produkty mięsne pochodzą z nie zakażonych hodowli, wprowadzono w całej Unii Europejskiej obowiązkową identyfikację, w ramach której - wkrótce po urodzeniu - zwierzęta kolczykuje się mocując plakietkę uszną dla celów identyfikacyjnych. Plakietki mają indywidualne numery, które identyfikują każde zwierzę hodowlane. Zatem, po sprawdzeniu numeru możliwe jest, na przykład, późniejsze określenie w rzeźni, z którego gospodarstwa rolnego zwierzę pochodzi.
Jednakże te plakietki uszne nie są zabezpieczone przed fałszerstwem i mogą zostać zamienione, tak że system identyfikacyjny może być ominięty. Odbiorca lub pośrednik nie jest w stanie zapewnić, że zwierzę rzeczywiście pochodzi z danego gospodarstwa rolnego.
A zatem jest pożądany dostępny, prosty sposób analityczny, który zapewniałby niezależne potwierdzenie informacji od producentów, przetwórców i handlowców.
Ogólnie wiadomo, że każde zwierzę może być indywidualnie zidentyfikowane poprzez przetestowanie określonych fragmentów DNA („genetyczne linie papilarne”). W dziedzinie sądowniczej i w kontroli pochodzenia potomstwa zwierząt te nowe molekularne testy genetyczne są juz stosowane w analizach. Próbka odzwierzęca jest zwykle pobierana przez weterynarza, jako próbka krwi, i analizowana. Jednakże w przypadku większych populacji zwierzęcych jest to zbyt pracochłonne i niepraktyczne z ekonomicznego punktu widzenia.
Przy użyciu nowoczesnych sposobów wykrywania (PCR, sekwencjonowanie, itd.) można wykazać czy próbki pochodzą, czy nie, od danych indywiduów nawet mając bardzo małe próbki komórkowe. Testy mogą być przeprowadzone stosunkowo łatwo z pewnością przekraczającą 99,9%.
Jednak nakłady finansowe i nakłady pracy potrzebne do przeprowadzenia izolowania, gromadzenia, konserwowania, katalogowania i analizy tak licznych próbek są bardzo wysokie.
Z opisu WO 96/13214 jest znana igła do biopsji, mająca rurkę z wysuwanym zakończeniem, zaopatrzonym we wcięcie. Podczas pobierania próbki wysuwane zakończenie wprowadza się do tkanki. Następnie rurkę przesuwa się do przodu tak, że odcina ona próbkę tkanki usytuowaną we wcięciu zakończenia, po czym całość wyciąga się, próbkę wyjmuje się z wcięcia i analizuje się.
187 288
Z opisu US 5 741 177 jest znane narzędzie do pobierania próbek tkanek zwierzęcych mające pręt ze stożkową głowicą posiadającą w podstawie obrzeze wycinające próbkę oraz zagłębienie na próbkę i mające człon usuwający z narzędzia wyciętą próbkę. Wycinanie próbki następuje podczas ruchu wstecznego narzędzia.
Z opisu EP 0 734 768 jest znany sposób wiązania próbki ciekłego materiału biologicznego w stałym podłożu. Stosowane do tego celu urządzenie ma człon do pobierania próbki i naczynie z odpowiednim porowatym podłożem.
Celem wynalazku jest opracowanie sposobu i urządzenia do pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcych, umożliwiających łatwe i ekonomiczne pobranie tych próbek oraz odpowiednie ich zabezpieczenie i przechowywanie.
Sposób pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcych, zwłaszcza próbek komórek zawierających DNA, w którym pobiera się próbkę członem do pobierania próbki i umieszcza się w odbieralniku próbki, według wynalazku charakteryzuje się tym, że podczas zabiegu zakładania do ucha zwierzęcia plakietki usznej przeciska się przez ucho zwierzęcia człon do pobierania próbki, zaś końcem tego członu zwróconym do podstawy odbieralnika próbki pobiera się próbkę, następnie wprowadza się człon do pobierania próbki wraz z pobraną próbką do odbieralnika próbki i zamyka się szczelnie przestrzeń dla próbki, odizolowaną od otoczenia, ograniczoną przez podstawę, ścianki boczne odbieralnika próbki oraz wspomniany koniec członu do pobierania próbki, w której to przestrzeni wcześniej umieszcza się środek zabezpieczający przed enzymami rozkładającymi DNA, przy czym odbieralnik próbki zaopatruje się w takie samo oznaczenie potwierdzające tożsamość zwierzęcia jak plakietkę uszną.
Korzystnie, pobrane próbki bada się analitycznie i klasyfikuje się.
Urządzenie do pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcych, zwłaszcza próbek komórek zawierających DNA, zaopatrzone w człon do pobierania próbki, według wynalazku charakteryzuje się tym, że ma odbieralnik próbki posiadający podstawę, ścianki boczne zaopatrzone, w rejonie oddalonym od podstawy, w elementy do mocowania członu do pobierania próbki oraz posiadający tymczasową przykrywkę stanowiącą osłonę pustego odbieralnika, przy czym człon do pobierania próbki stanowi, po pobraniu próbki i wprowadzeniu jej do odbieralnika próbki, szczelne zamknięcie tego odbieralnika, i w tym położeniu zamkniętym przednie zakończenie członu do pobierania próbki oddziela w odbieralniku próbki co najmniej jedną przestrzeń dla próbki, ograniczoną ponadto podstawą i ściankami bocznymi tego odbieralnika, zaś w odbieralniku próbki znajduje się środek zabezpieczający przed enzymami rozkładającymi DNA, a ponadto odbieralnik próbki jest połączony rozłącznie z płytką otworową plakietki usznej mającej również płytkę kolcową i zaopatrzonej w oznaczenie potwierdzające tożsamość zwierzęcia, przy czym odbieralnik próbki jest zaopatrzony w takie samo oznaczenie potwierdzające tożsamość zwierzęcia jak plakietka uszna, natomiast człon do pobierania próbki jest połączony rozłącznie z płytką kolcową.
Człon do pobierania próbki jest, korzystnie, usytuowany na kolcu płytki kolcowej.
Plakietka uszna ewentualnie zawiera numer identyfikacyjny.
Człon do pobierania próbki ma, korzystnie, co najmniej jeden ostry brzeg na końcu zwróconym ku podstawie odbieralnika próbki.
Człon do pobierania próbki ewentualnie zwęża się na końcu zwróconym ku podstawie odbieralnika próbki.
Korzystnie, podstawa odbieralnika próbki ma występ w wewnętrznej przestrzeni odbieralnika, zaś człon do pobierania próbki na swym końcu zwróconym ku podstawie odbieralnika próbki jest dopasowany do występu tak, że występ wraz z członem do pobierania próbki stanowią zespół rozdrabniający materiał próbki. W szczególności, występ ma postać stożka.
Ewentualnie, występ łączy się ze ściankami bocznymi odbieralnika próbki tak, że w położeniu zamkniętym odbieralnik próbki jest podzielony na dwie przestrzenie dla próbki. Występ ma, w szczególności, postać stożka lub postać ścianki.
Odbieralnik próbki jest, korzystnie, połączony z uchwytem. W szczególności, uchwyt ma postać występu.
187 288
Człon do pobierania próbki ma, korzystnie, na końcu zwróconym tyłem do odbieralnika próbki, wydrążenie dla pręta.
Korzystnie, środek zabezpieczający przed enzymami rozkładającymi DNA stanowią alkalia, proteinaza K lub sito molekularne, w szczególności, proteinaza K jest oddzielona od odpowiedniego buforu membraną niszczoną przez człon do pobierania próbki.
Przedmiot wynalazku jest objaśniony, w przykładzie wykonania, z wykorzystaniem rysunków, na których: fig. 1 przedstawia przekrój odbieralnika próbki, fig. 2 - przekrój urządzenia według wynalazku, fig. 3 - plakietkę uszną przed zmontowaniem, w widoku perspektywicznym, a fig. 4 przedstawia schemat klasyfikacji bydła.
Przedstawiony na fig. 1 odbieralnik 1 próbki ma podstawę 2 i ścianki boczne 3, i jest zamknięty tymczasową przykrywką stanowiącą osłonę pustego odbieralnika, taką jak film lub membrana. Odbieralnik 1 próbki może być sam podzielony dodatkowymi membranami tak, że dwa lub więcej składników może być od siebie oddzielonych w odbieralniku 1 zanim zostaną użyte. Po pobraniu próbki, człon 4 do pobierania próbki, zamocowany w odbieralniku 1 za pomocą elementów 5, stanowi szczelne zamknięcie odbieralnika 1. Odbieralnik 1 próbki ma dwie przestrzenie 6, 6a dla próbki oddzielone, w położeniu zamkniętym, zakończeniem 7 członu 4 do pobierania próbki i ścianką separującą, taką jak występ 8 rozciągający się wzdłuż średnicy podstawy 2 na co najmniej dwie komory. Mogą być pobrane co najmniej dwie zupełnie różne próbki.
Zakończenie 7 członu 4 do pobierania próbki jest odpowiednio dopasowane do występu 8. W rezultacie pod wprowadzeniu członu 4 do pobierania próbki do odbieralnika 1 próbki, próbka jest silnie rozdrabniana i prasowana w przestrzeni dla próbki 6, 6a, ograniczonej przez podstawę 2 i ścianki boczne 3 odbieralnika próbki 1 jak również zakończenie 7 członu 4 do pobierania próbki.
Odbieralnik 1 próbki jest połączony z uchwytem 9, mającym postać występu z otworem do odpowiedniego umocowania. Zatem na przykład występ może być mocowany do szczypiec, gdy szczypce są używane do nałożenia plakietki usznej. Występ ma również zastosowanie przy pobieraniu numeru identyfikacyjnego, który jest taki sam jak plakietki usznej posiadającej płytkę kolcową 10 z kolcem lOa oraz płytkę otworową 11. Znakowanie może odbywać się ręcznie w bruzdach lub występ może być zawczasu oznakowany, np. wytłoczony, lub może być znakowany w tym samym czasie i mieć numer identyczny z numerem identyfikacyjnym naniesionym na płytkę plakietki usznej.
Jeśli konieczne (np. do dalszego ręcznego operowania próbkami) odbieralnik 1 próbki może być również tak uformowany, że powierzchnia odbieralnika 1 próbki, która definiuje przestrzeń dla próbki 6, 6a po zamknięciu członem do pobierania próbki 4, jest połączona połączeniem gwintowym z korpusem odbieralnika 1 próbki i dzięki temu może być łatwo odkręcana, umożliwiając łatwiejszy dostęp do próbki.
W korzystnym przykładzie urządzenia odbieralnik 1 próbki jest zamykany członem 4 do pobierania próbki w taki sposób, że otwarcie utworzonej przestrzeni dla próbki 6, 6a nie jest możliwe bez zniszczenia urządzenia. A zatem jest oczywiste, że operowanie pobraną próbką nie jest możliwe bez pozostawienia śladu.
W odbieralniku próbki znajdują się substancje do dezaktywacji składników proteinowych próbki tkanki i stabilizowania DNa.
Substancje do dezaktywacji protein (enzymy, DNA-zy itd.) próbki tkanki i do stabilizowania DNA mogą na przykład być wybrane z grupy obejmującej:
- proteinazę K (np. liofilizowaną do stabilizowania w trakcie przechowywania) i (oddzielnie umieszczony) bufor do trawienia protein,
- silne zasady,
- sita molekularne (np. E. Merck 0,2 nm nr 1.05704.0250, K 230045904 624, zdolność do absorpcji wody >20%), które są wyjątkowo higroskopijne i wysuszają próbkę tkanki po zetknięciu z nią (i ogrzewają ją), i wskutek tego dezaktywują (aby uchronić sita molekularne przed niepożądanym zaabsorbowaniem wilgoci z powietrza, mogą być na przykład przykryte gazem obojętnym, argonem i zamknięte filmem), oraz
187 288
- inne sl^ła^niki, które wspomagają deziddyevowanie składnika proteinowego i stabilizowanie DNA.
Sub-toacjo są tak npendpowdne, że nozo-tdją aktywne przez długi okres czasu, na przykład do jednego roku lub dłużej, i po wprowadzeniu próbki zapewniają dostateczną niezmienność DNA dla celów badań analitycznych przez co najmniej -z.ereg mie-ięcy do jednego roku.
Człon 4 do pobierania próbki może mieć jakąkolwiek po-tać, za pomocą której próbka może być pobrana i wprowadzona do odbieralnika 1 próbki, który to człon 4 -/.czelnie zamyka odbieralnik 1 próbki po wprowadzeniu. Dotyczy to pe-toci walca, -tożka, itd.
W korzy-tnym przykładzie wykonania urządzenia człon 4 do pobierania próbki je-t złożony z dwóch części, które przed użyciem -ą łączone rozłączaie ze -obą, a po użyciu rozłączoae. Może to na przykład być zreolizowoae za pomocą wą-kiego plo-tikoweee mo-tka z naznoczonym miej-cem do złamania. Człon 4 do pobierania próbki może być lity lub może od -wej tylnej -trony umożliwiać włożenia pręta, na przykład poprzez centralne wydrążenie 12, do którego może być wprowadzony -talowy pręt -zc/ypiec w celu umocowania w trakcie użycia.
Człon 4 do pobierania próbki pełni kilka funkcji. Za jego pomocą pobierana je-t próbka poprzez zadrapanie lub nakłucie tkanki zwierzęcia lub poprzez zanurzenie w płynach z ergonizmu, takich jak krew, limfa lub mocz.
Ucho zwier/ęcio je-t nakłuwane urządzeniem według waaolo/ku; czołowa część członu 4 do pobierania próbki może być uformowana z o-trym brzegiem, tak że poprzez pchnięcie przez ucho niewielka próbka tkanki je-t wypachond'wyci-kdao na zewnątrz.
Człon 4 do pobierania próbki z odpowiednim instrumentem, takim jak -zczance do plakietki u-znej, je-t aplikowany w tym -amym cza-ie co plakietka u-zna i je-t przeciskoay przez ucho zwierzęcia tak, że aplikowanie plakietki u-znej i pobieranie próbki odbywa -ię w ramach jednej operacji roboczej.
Plakietki u-zne -to-owane do identyfikacji zwykle złożone -ą z dwóch części, płytki mającej kolec 10 (płytki kolcowej) i płytki otworowej 11, która ma w przybliżeniu ten -am ro/mier co płytka kolcowa 10, lub może -toaewić mniej-zą płytkę, która je-t jedynie na tyle dużą aby zapobiec temu, aby kolec lOa wyślizgnął -ię poza ucho. Obie części -ą wykonane z kompatybilnego z tkanką materiału -yatetaczneeo, do -to-owonio w kontakcie z żywnością (np. peliuretoa - De-mopan 795 U firmy Bayer) lub częściowo z metalu (np. -tali nierdzewnej, mo-iądzu, brązu lub tym podobnych).
Do przyc/epienio plakietki u-znej mogą być użyte komercyjne -zczance do kolczykowoaio u-zu. Więk-zość do-tępnych -zczapiec tego typu, jeśli konieczne, może być łatwo zmodyfikowana poprzez dołączenie małej dodatkowej części, tak że odbieralnik 1 próbki zawi-a na -zczypcach po przyc/epieniu plakietki u-znej i łatwo może być pobrany. Ta dodatkowa część -tanowi na przykład małą gałkę, ponad którą wyprowadzony je-t otwór w uchwycie 9 z odbieralnikiem 1 próbki. Po wprowadzeniu plakietki u-znej do ucha, jeśli konieczne plakietka u-zna je-t -zybko wycofywana z chwytu -zc/apcomi, a gałka przytrzymuje uchwyt 9 z odbieralnikiem 1 próbki, -ztawab ze -zczypcami. Kolejno, uchwyt 9 może być łatwo wyciągnięty gałką i odbieralnik 1 próbki może być pobrany.
Człon 4 do pobierania próbki -zczelaie zamyka, po wprowadzeniu, odbieralnik 1 próbki i je-t utwierdzony za pomocą elementów 5 mocujących tak, że utrata materiału próbki oraz wprowadzenie materiału obcego nie je-t możliwe.
Odbieralnik 1 próbki jak również człon 4 do pobierania próbki mogą być wykonane z jakiegokolwiek odpowiedniego materiału, takiego jak, na przykład, metal lub materiał -yntetac/na wzmocniony włóknem -zklonam. Jeśli człon 4 do pobierania próbki je-t wykonany z materiału -yntetaczaegb, to może być u-ztywnieaa podcza- wprowadzania do ucha prętem metalowym użytych -zczypiec.
Za pomocą -po-obu i urządzenia według wynalazku możliwe je-t pobieranie próbek od zwier/ąt z jednocze-nym znakowaniem ideatafikocajaami plakietkami u-znymi i może być rutynowo przenrenodzoae bez znoczneee dodatkowego nakładu pracy i ko-ztów. O-zczędności wynikające z tego -ą zaeczae.
Dal-zą zaletą urządzenia według naaolo/ku, w porównaniu z tradycyjnymi rezwlązeniami, je-t uchwyt 9 w odbieralniku 1 próbki, który ma po-tać pła-kiego wy-tępu i może być
187 288 użyty do znakowania/identyfikacji próbki. Zazwyczaj znakowanie musi być przeprowadzone ręcznie na najczęściej okrągłej powierzchni zwykle walcowatych pojemników (np. probówkach Eppendorfa) przy znaczącym nakładzie pracy, a wynik znakowania jest trudny do odczytania. A zatem trudno jest zeskanować liczby lub dane przy zautomatyzowanym pobieraniu.
Rozwiązanie według wynalazku jest szczególnie korzystne, jeśli próbki są pobierane z materiału, który stanowi element całościowej struktury tak, że zwykle próbka musi być pobierana za pomocą instrumentu (noża, ostrej łyżki, skalpela itp.). Przy użyciu instrumentów wielokrotnego użytku niebezpieczeństwo zakazenia jest bardzo wysokie, jako że w bardzo czułych testach, takich jak PCR (łańcuchowa reakcja polimerazy) nawet pojedyncze komórki mogą prowadzić do zakazenia, a zatem i do fałszywych wyników. Przy użyciu urządzenia według wynalazku jedynie części jednorazowego użytku są w kontakcie z materiałem próbki.
Urządzenie według wynalazku może również, na przykład, być użyte do pewnego i bezpiecznego pobierania próbek płynów (krwi, moczu, śliny i innych). W tym przypadku płyn jest aplikowany do otwartego odbieralnika 1 próbki lub do czołowej części członu 4 do pobierania próbki i kolejno, na przykład za pomocą odpowiedniego narzędzia takiego jak szczypce, jest wciskany do odbieralnika 1 próbki. Próbki z powierzchni (skóra, błony śluzowe itd.) mogą być również pobierane, czysto, pewnie i z zabezpieczeniem identyfikacji z użyciem urządzenia według wynalazku, gdyz czołowa część członu 4 do pobierania próbki jest użyta jako „ostra łyżka” i szybko ściąga/zdrapuje powierzchnię.
Istotną zaletą rozwiązania według wynalazku jest to, że odbieralnik 1 próbki może być znakowany w tym samym czasie co plakietka uszna (płytka kolcowa 10, płytka otworowa 11), a zatem bezbłędnie identycznie jest znaczony przed przekazaniem użytkownikom lub właścicielom zwierząt. Znakowanie może na przykład być przeprowadzone za pomocą drukarki. Drukarka, w przypadku plastikowych plakietek usznych, nanosi (czarną) mieszankę uniwersalną, która wiąże się tak silnie z materiałem syntetycznym, że nie może być starta lub usunięta w trakcie normalnego użytkowania. Ponadto, odpowiednie części mają wydrukowane indywidualne numery.
Próbki pobrane za pomocą urządzenia według wynalazku są następnie doprowadzane do centralnego punktu zbiorczego, gdzie są analizowane. Gromadzenie 1 odbieralników próbek może być dokonywane niezaleznie od temperatury i czasu trwania transportu. Odbieralniki 1 próbek mogą być transportowane pocztą, kurierem, lub gromadzone w laboratorium lub przechowywane, niekłopotliwie i bez ryzyka.
Przeróbka próbek w laboratorium, pobieranie porcji, reakcje testowe i analizy mogą być zautomatyzowane w sterowanym systemie robotycznym. Numery identyfikacyjne próbek są rejestrowane i dalej przetwarzane za pomocą czytnika (skaner). Unikanie ręcznego wprowadzania danych pozwala na utrzymanie liczby błędów na pomijalnie niskim poziomie.
W celu przetwarzania lub analizowania DNA w próbkach, pobranych za pomocą urządzeń według wynalazku, odbieralniki 1 próbek są umieszczane na taśmie transportera tak, że skaner identyfikuje i rejestruje próbki. Dalej, kaniula jest wprowadzana od spodu do przestrzeni dla próbki 6, 6a i wtryskiwana jest ciecz, aby można było pobrać próbkę, a następnie jest pobierana porcja próbki. Miejsce pobrania może ponownie zostać zamknięte, tak że odbieralnik może być dalej przechowywany. Jeśli przestrzeń dla próbki 6, 6a została podzielona w odpowiedni sposób, to następnie dalsze próbki są dostępne do analizy w urządzeniu według wynalazku.
Izolowanie DNA może być zautomatyzowane wskutek zastosowania pipetującego robota (Biomec 2000, Beckman) i oczyszczania DNA z użyciem cząstek silikonowych (np. InstaGene Matrix, BIO-RAD). Reakcje testowe na tych próbkach również mogą być przeprowadzane automatycznie.
System niniejszym ujawniony do łatwego pobierania próbek i zautomatyzowanej analizy ma następujące zalety: dostarcza niezafałszowane dowody co do pochodzenia i tożsamości bydła i mięsa z tego bydła, na wszystkich stadiach przetwarzania do konsumpcji, a zatem i dowody pochodzenia z obszarów wolnych od BSE; zapewnia kontrolę a zatem i utrwalenie celowych programów sprzedazy, takich jak zwierząt w gospodarstwach ekologicznych, lub w parkach narodowych, lub identyfikację w klasie specjalnej; weryfikację i monitorowanie
187 288 dróg transportowych, okresów czasu i odległości dla całego transportu bydła; skuteczną kontrolę graniczną oraz śledzenie bydła w obrębie Unii Europejskiej oraz w eksporcie międzynarodowym; bezbłędną identyfikację całego sprzedawanego bydła hodowlanego, z potwierdzeniem tożsamości możliwym w każdym momencie, np. na aukcjach, wystawach itd.; kompletny dowód tożsamości wszelkiego urodzonego bydła oraz wykrywanie błędnych lub fałszywych dokumentów; całkowicie pewne dowody sądowe (również na podstawie już skonsumowanej wołowiny z treści żołądkowej po badaniu medycznym); całkowicie pewne monitorowanie (wybieranie) i kontrolę sanitarną; określanie mieszanek wołowiny we wszelkiej (przetworzonej) testowanej żywności, łącznie z pokarmem dla zwierząt; wykrywanie producentów lub rzeźni, gdzie zastosowano zabronione hormony lub aktywatory wzrostu; dowody pochodzenia innych produktów z hodowli bydła, takich jak skóry surowe, kości, rogi, kopyta, preparaty z organów, krew, itd.; dowody i testy zwierząt oraz pochodzenia inwentarza przy bezpośredniej sprzedazy mleka i produktów mlecznych; dokładną rejestrację wszystkich stad bydła i kierunków sprzedaży; dostępność próbek do szczegółowej analizy polimorfizmu DNA, pomiarów rozpiętości genetycznych i genetycznych programów skriningowych; optymalizację programów hodowlanych; pomiary rozpiętości genetycznych; badanie genealogii i przebiegu hodowli ras hodowlanych; analizy w ramach programów selekcji wspomaganych markerami (MAS); precyzyjne dowody na obecność i częstotliwość występowania szczególnych defektów genetycznych. Z punktu widzenia analizy sądowej, sposób i urządzenie według wynalazku mają dodatkową zaletę, że pobrana próbka nie może być zamieniona (podmieniona, sfałszowana) bez konieczności manipulowania przy odbieralniku próbki, które pozostawia widoczne ślady.
Poprzez gromadzenie i katalogowanie pobranych próbek, dalej stają się możliwe, bez istotnych nakładów finansowych, znakowania, badania pochodzenia, skrining defektów genetycznych, analizy populacji, detekcje mutacji, jak również skrining żywności, diagnostyki patogenów, diagnostyki transgeniczne, monitorowanie higieny w operacjach przetwarzania żywności itd.
Rozwiązania według wynalazku umożliwiają testowanie informacji genetycznej u wszystkich zwierząt i we wszystkich produktach zwierzęcych, aż do stadium konsumpcji. Przy użyciu urządzenia według wynalazku nakłady finansowe, temu działaniu towarzyszące, są wielokrotnie zmniejszone.
Nawet w żywności wysoce przetworzonej pochodzenia zwierzęcego (kiełbaski, przetworzone mięso, „Leberkas” (mięso mielone z przyprawami i innymi składnikami do pieczenia lub gotowe, świeżo upieczone, sznycle itd.) może być oznaczony gatunek i indywidualny specyficzny DNA. A zatem jest możliwe wykrycie zanieczyszczenie mięsa składnikami obcymi. Oczywiście jest również możliwe, za pomocą tego sposobu, niewątpliwe udowodnienie, ze dana żywność pochodzi od konkretnego zwierzęcia - jak podano - jeśli w gospodarstwie hodowlanym pobrano odpowiednią (pierwszą) próbkę.
W tym celu próbka z ucha musi być pobierana od każdego nowonarodzonego zwierzęcia hodowlanego do zarejestrowania dNa i przetransportowywana do centrum rejestracyjnego. Z użyciem (automatyzowanych) PCR DNa wykonywane są „linie papilarne” z primerów w mikroskali i rejestrowany jest bezbłędnie wzornik dla każdego zwierzęcia.
Dane te są przechowywane w centralnym rejestrze i z niego udostępniane. „Linie papilarne” z rutynowego testu mogą być znalezione po przesłaniu drugiej próbki, po zarejestrowaniu DNA, do porównania z pierwszą analizą w celu sprawdzenia zwierzęcia. Wynik ten jest zwykle uzyskiwany w trakcie jednego dnia. W skrajnych przypadkach, np. w trakcie transportu zwierząt lub kontroli granicznej analiza ekspresowa może być uzyskana po trzech godzinach. Numer zwierzęcia, tj. DNA -„linie papilarne” i wszystkie inne dane mogą być wywołane dla każdego zarejestrowanego zwierzęcia. Właściciel zwierzęcia, wszystkie zwierzęta sprzedane przez jednego właściciela lub z jednego stada mogą być namierzone. Rodzice zwierzęcia tj. w kilka lat po zarejestrowaniu wszelkiego narodzonego bydła, pokrewieństwo i numery potomstwa każdego z rodziców mogą być sprawdzone w takim rejestrze. Indywidualna rejestracja całkowitej populacji zwierząt hodowlanych jest czymś nowym. Każdy konsument, gość, klient, dealer, rzeźnik, przetwórca, właściciel lub inspektor może sprawdzić toz187 288 samość, a zatem i źródło pochodzenia zwierzęcia i produktu zwierzęcego (fig. 4). W takim teście jest konieczne pobranie drugiej próbki, na przykład z rzeźni, supermarketu lub nawet z przygotowanego posiłku (na przykład z restauracji, ze sznycla znajdującego się już na stole).
Dla zwierząt żywych, np. w celu sprawdzenia, że zwierzęta są transportowane w dopuszczalny sposób (odległość) rejestracja podobnie byłaby możliwa. Taki stopień pewności co do wyników testów, przy wystarczająco wysokiej częstości testowania, automatycznie prowadzi do ograniczenia oszustw do minimum, wskutek łatwości uzyskania pewnego, legalnego i bezbłędnego dowodu, oraz ryzyka wykrycia.
Wszystkie zamówienia, które mogą być wykonane w przyszłości w celu monitorowania poszczególnych grup zwierząt lub stad w celach prewencyjnych, kontroli epidemiologicznej lub testowania pod względem niedopuszczalnych substancji śladowych (hormony, aktywatory wzrostu itd.) u zwierząt, mogą być natychmiast przedsięwzięte z wykorzystaniem danych DNA uprzednio zebranych.
Jeśli indywidualna rejestracja z wykorzystaniem rozwiązania według wynalazku zostanie w kraju konsekwentnie podjęta, będzie możliwe natychmiastowe, tj. tego samego dnia, zareagowanie na pojawiające się problemy (np. podejrzenie o BSE u zwierzęcia, epidemia gorączki wśród nierogacizny, itd.), zapewniając zatem konsumentowi bezprecedensową ochronę i bezprecedensowe możliwości testów i monitorowania.
W szczególności stanie się możliwe, na przykład poprzez indywidualne rejestracje, pełne i niewątpliwe dowiedzenie, ze zwierzęta i produkty z „alternatywnej” produkcji rzeczywiście z niej pochodzą. Oznacza to, że każdy konsument może wymagać sprawdzenia informacji dotyczącej mięsa, nawet po długotrwałym transporcie i sprzedaży mięsa, poprzez przesłanie próbek (drugiej próbki).
Przedmiot wynalazku ilustrują niżej podane przykłady.
Przykład I
Indywidualne oznaczanie u bydła
Krowę oznakowano za pomocą typowej plakietki usznej. Do kolca płytki kolcowej dołączono człon do pobierania próbki, który miało postać stożka z ostrzem na stronie czołowej i cylindryczną podstawę oraz wgłębienie w podstawie do wprowadzenia kolca płytki kolcowej.
Odbieralnik próbki, wykonany jako całość z uchwytem, umieszczono na szczypcach w miejscu płytki otworowej tak, że tymczasowa przykrywka odbieralnika próbki, wykonana z syntetycznej folii, jest ułożona wzdłuż otworu płytki otworowej.
Z dala od odbieralnika próbki, uchwyt ma otwór do umocowania go w szczypcach.
Poprzez wciśnięcie kolca płytki kolcowej w ucho krowy, próbka przebijanego ucha jest wyciskana do odbieralnika próbki. Po wprowadzeniu i umocowaniu członu do pobierania próbki między występami wewnętrznych ścianek odbieralnika próbki, przestrzeń dla próbki jest szczelnie zamykana.
W odbieralniku próbki znajduje się sito molekularne (Merck, 0,2 nm nr 1.05704.0250), które zabezpiecza DNA pobranej próbki przed rozkładem.
„Linie papilarne” DNA i analizy PCR znanych genów, po uwolnieniu materiału genetycznego znajdującego się w odbieralniku próbki, mogą być podjęte po pół roku.
Przykład II
Skrining mutantów funkcjonalnych w hodowli specjalnych linii (np. świń 1.3Gal/Gal3 negatywnych do ksenotransplantacji)
Wskutek naturalnej szybkości mutacji, w populacji o dostatecznej wielkości pojedynczych osobników, każdy gen obecny w genomie zawiera nie tylko różne mutacje utajone, ale także z określonym prawdopodobieństwem mutacje, które powodują inaktywacje alleli. Według prawa Hardy-Weinberg'a liczba dominujących takich zmian w genotypie wywoływana przez mutacje jest maskowana przez osobniki heterozygotyczne.
W postępowaniu skriningowym zasadnicze znaczenie ma wykrycie, z wykorzystaniem odpowiednich analiz genetycznych, odpowiedniego miejsca genu w chromosomie, w dostępnej populacji świń (pojedynczego) zwierzęcia - nośnika heterozygotycznego, które niesie mutację. Następnie z tym zwierzęciem może być tworzona homozygotyczna negatywna linia,
187 288 linia, która ma te same i wymagane defekty genu jak linia generowana poprzez wykluczenie genu. Nie byłoby innej możliwości temu podporządkowanej.
Sugerowany sposób postępowania oznacza do pewnego stopnia skrining linii komórek macierzystych po rekombinacji z odpowiednim tworem, który nie zawiera markera. Różnica jest następująca: wszystkie komórki macierzystej linii komórkowej mają ten sam genotyp z wyjątkiem tych, które niosą zmianę lub rekombinację po jednorazowej mutacji. W skriningu populacji świń wszystkie analizowane genotypy są różne. Nie ulegały one mutacjom w celowy sposób, ale przenoszą mutacje, które w trakcie ewolucji i pracy hodowców zakumulowały się (o ile w stanie heterozygotycznym nie znalazły się pod wpływem selekcji negatywnej).
Wiadomo, że występują ilościowe różnice w ekspresji 1.3Gal/Gal3. Jako że analiza mutacji jest oparta na wyszukiwaniu mutacji już obecnych w zróżnicowanych populacjach, analizie poddaje się zwierzęta hodowlane. Jeśli zignoruje się nowe mutacje, to hodowane świnie mogą nieść jedynie mutacje, które były już obecne u ich rodziców. W praktycznej realizacji, zabezpieczenie i zgromadzenie próbek tkanek w systemie Typi-fix ma zasadnicze znaczenie dla powodzenia operacji, również finansowej. W trakcie analizy wyszukującej nosicieli mutacji należy założyć, że prawdopodobnie należy przetestować do 100000 genotypów w celu znalezienia zwierząt o potencjalnym niedoborze 1.3Gal/Gal3. Ze względu na koszt, zebranie indywidualnych próbek od 100000 świń, sposób według wynalazku jest sposobem z wyboru. Próbki trzeba tylko przetransportować do laboratorium (pocztą lub gromadząc próbki) i dalej tam poddać obróbce.
187 288
187 288
Fig. 3
187 288
Fig.4
Zindywidualizowane oznaczania DNA u bydła
I Be/und
Informacja
Protokół wyników
187 288
Departament Wydawnictw UP RP Nakład 50 egz.
Cena 4,00 zł.
Claims (17)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcych, zwłaszcza próbek komórek zawierających DNA, w którym pobiera się próbkę członem do pobierania próbki i umieszcza się w odbieralniku próbki, znamienny tym, że podczas zabiegu zakładania do ucha zwierzęcia plakietki usznej przeciska się przez ucho zwierzęcia człon (4) do pobierania próbki, zaś końcem (7) tego członu (4) zwróconym do podstawy (2) odbieralnika (1) próbki pobiera się próbkę, następnie wprowadza się człon (4) do pobierania próbki wraz z pobraną próbką do odbieralnika (1) próbki i zamyka się szczelnie przestrzeń (6, 6a) dla próbki, odizolowaną od otoczenia, ograniczoną przez podstawę (2), ścianki boczne (3) odbieralnika (1) próbki oraz wspomniany koniec (7) członu (4) do pobierania próbki, w której to przestrzeni (6, 6a) wcześniej umieszcza się środek zabezpieczający przed enzymami rozkładającymi DNA, przy czym odbieralnik (1) próbki zaopatruje się w takie samo oznaczenie potwierdzające tożsamość zwierzęcia jak plakietkę uszną.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że pobrane próbki bada się analitycznie i klasyfikuje się.
- 3. Urządzenie do pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcych, zwłaszcza próbek komórek zawierających DNA, zaopatrzone w człon do pobierania próbki, znamienne tym, że ma odbieralnik (1) próbki posiadający podstawę (2), ścianki boczne (3) zaopatrzone, w rejonie oddalonym od podstawy (2), w elementy (5) do mocowania członu (4) do pobierania próbki oraz posiadający tymczasową przykrywkę stanowiącą osłonę pustego odbieralnika (1), przy czym człon (4) do pobierania próbki stanowi, po pobraniu próbki i wprowadzeniu jej do odbieralnika (1) próbki, szczelne zamknięcie tego odbieralnika (1), i w tym położeniu zamkniętym przednie zakończenie (7) członu (4) do pobierania próbki oddziela w odbieralniku (1) próbki co najmniej jedną przestrzeń (6, 6a) dla próbki, ograniczoną ponadto podstawą (2) i ściankami bocznymi (3) tego odbieralnika (1), zaś w odbieralniku (1) próbki znajduje się środek zabezpieczający przed enzymami rozkładającymi DNA, a ponadto odbieralnik (1) próbki jest połączony rozłącznie z płytką otworową (11) plakietki usznej mającej również płytkę kolcową (10) i zaopatrzonej w oznaczenie potwierdzające tożsamość zwierzęcia, przy czym odbieralnik (1) próbki jest zaopatrzony w takie samo oznaczenie potwierdzające tożsamość zwierzęcia jak plakietka uszna, natomiast człon (4) do pobierania próbki jest połączony rozłącznie z płytką kolcową (10).
- 4. Urządzenie według zastrz. 3, znamienne tym, że człon (4) do pobierania próbki jest usytuowany na kolcu (lOa) płytki kolcowej (10).
- 5. Urządzenie według zastrz. 3, znamienne tym, że plakietka uszna zawiera numer identyfikacyjny.
- 6. Urządzenie według zastrz. 3, znamienne tym, że człon (4) do pobierania próbki ma co najmniej jeden ostry brzeg na końcu (7) zwróconym ku podstawie (2) odbieralnika (1) próbki.
- 7. Urządzenie według zastrz. 3, znamienne tym, ze człon (4) do pobierania próbki zwęza się na końcu (7) zwróconym ku podstawie (2) odbieralnika (1) próbki.
- 8. Urządzenie według zastrz. 3 albo 4, albo 6, albo 7, znamienne tym, ze podstawa (2) odbieralnika (1) próbki ma występ (8) w wewnętrznej przestrzeni odbieralnika (1), zaś człon (4) do pobierania próbki na swym końcu (7) zwróconym ku podstawie (2) odbieralnika (1) próbki jest dopasowany do występu (8) tak, ze występ (8) wraz z członem (4) do pobierania próbki stanowią zespół rozdrabniający materiał próbki.
- 9. Urządzenie według zastrz. 8, znamienne tym, ze występ (8) ma postać stożka.187 288
- 10. Urządzenie według zastrz. 8, znamienne tym, ze występ (8) łączy się ze ściankami bocznymi (3) odbieralnika (1) próbki tak, że w położeniu zamkniętym odbieralnik (1) próbki jest podzielony na dwie przestrzenie (6, 6a) dla próbki.
- 11. Urządzenie według zastrz. 10, znamienne tym, że występ (8) ma postać stożka.
- 12. Urządzenie według zastrz. 10, znamienne tym, ze występ (8) ma postać ścianki.
- 13. Urządzenie według zastrz. 3 albo 10, znamienne tym, że odbieralnik (1) próbki jest połączony z uchwytem (9).
- 14. Urządzenie według zastrz. 13, znamienne tym, że uchwyt (9) ma postać występu.
- 15. Urządzenie według zastrz. 3 albo 4, albo 6, albo 7, znamienne tym, że człon (4) do pobierania próbki ma, na końcu zwróconym tyłem do odbieralnika (1) próbki, wydrążenie (12) dla pręta.
- 16. Urządzenie według zastrz. 3, znamienne tym, że środek zabezpieczający przed enzymami rozkładającymi DNA stanowią alkalia, proteinaza K lub sito molekularne.
- 17. Urządzenie według zastrz. 16, znamienne tym, że proteinaza K jest oddzielona od odpowiedniego buforu membraną niszczoną przez człon (4) do pobierania próbki.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/EP1998/003075 WO1999061882A1 (de) | 1998-05-25 | 1998-05-25 | Vorrichtung und verfahren zur gewinnung und erst-aufbereitung von gewebeproben für die molekulargenetische diagnostik |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL344256A1 PL344256A1 (en) | 2001-10-22 |
| PL187288B1 true PL187288B1 (pl) | 2004-06-30 |
Family
ID=8166962
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL98344256A PL187288B1 (pl) | 1998-05-25 | 1998-05-25 | Sposób i urządzenie do pobierania i wstępnego preparowania próbek tkanek zwierzęcych |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1088212B1 (pl) |
| JP (1) | JP3836676B2 (pl) |
| KR (1) | KR100586106B1 (pl) |
| CN (1) | CN1196920C (pl) |
| AR (1) | AR019576A1 (pl) |
| AT (1) | ATE209342T1 (pl) |
| AU (1) | AU765204B2 (pl) |
| BG (1) | BG64014B1 (pl) |
| BR (1) | BR9815866B1 (pl) |
| DE (2) | DE59802771D1 (pl) |
| DK (1) | DK1088212T3 (pl) |
| EA (1) | EA002605B1 (pl) |
| ES (1) | ES2168765T3 (pl) |
| HU (1) | HUP0101861A3 (pl) |
| IL (2) | IL139890A0 (pl) |
| NZ (1) | NZ507811A (pl) |
| PL (1) | PL187288B1 (pl) |
| TR (1) | TR200003503T2 (pl) |
| UA (1) | UA66854C2 (pl) |
| WO (1) | WO1999061882A1 (pl) |
| YU (1) | YU73700A (pl) |
Families Citing this family (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10053022A1 (de) * | 2000-10-13 | 2002-05-02 | Biopsytec Gmbh | Ohrmarke mit Sicherheitsmerkmal |
| DE10055368A1 (de) * | 2000-11-08 | 2002-05-29 | Agrobiogen Gmbh Biotechnologie | Verfahren zur Kennzeichnung von DNA enthaltenden Proben mittels Oligonukleotiden |
| AU2002220940A1 (en) | 2000-11-15 | 2002-05-27 | Roy Caisley | System for tagging a biological object and for taking a sample of the biological object |
| ATE250852T1 (de) * | 2001-01-01 | 2003-10-15 | Agrobiogen Gmbh Biotechnologie | Modifizierte ohrmarken und verfahren zur gewebeentnahme |
| ATE249734T1 (de) * | 2001-02-21 | 2003-10-15 | Agrobiogen Gmbh Biotechnologie | Vorrichtung zur markierung von nutztieren mit gleichzeitiger gewebeprobenentnahme |
| DE10115790A1 (de) * | 2001-03-29 | 2002-10-17 | Hauptner Und Richard Herberhol | Tierohrmarkenzange |
| FR2823065B1 (fr) * | 2001-04-04 | 2004-08-13 | Chevillot Sa | Etiquette auriculaire de marquage des animaux avec systeme de prelevement de matiere organique |
| NL1018774C2 (nl) * | 2001-08-16 | 2003-02-18 | Injectile Technologies Gmbh | Werkwijze en inrichting voor het merken van dieren. |
| FR2829359B1 (fr) | 2001-09-13 | 2005-01-21 | Chevillot Sa | Pince auriculaire pour la pose d'etiquettes de marquage des animaux de rente et la realisation de prelevement de matiere biologique et etiquette adaptee a ladite pince |
| EP1300465A1 (de) * | 2001-10-08 | 2003-04-09 | Agrobiogen GmbH Biotechnologie | Verfahren und Vorrichtung zur Isolierung von RNS-Proben |
| FR2831388B1 (fr) * | 2001-10-25 | 2004-07-16 | Reyflex | Dispositif d'identification notamment pour animal, du type boucle, permettant de prelever un morceau de chair lors de la pose |
| FR2831390B1 (fr) * | 2001-10-29 | 2004-01-23 | Reyflex | Perfectionnement pour dispositif d'identification |
| RU2234088C2 (ru) * | 2002-06-19 | 2004-08-10 | ГУ Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера СО РАМН | Способ определения стабильности клеточных мембран эритроцитов |
| JP2005534943A (ja) * | 2002-07-30 | 2005-11-17 | エージー−アイディー ピーティーワイ リミテッド | 試料採取装置 |
| FR2845861B1 (fr) * | 2002-10-22 | 2005-01-21 | Chevillot Sa | Boucle avec prelevement de sang pour analyse adn |
| DE10313340B3 (de) * | 2003-03-25 | 2004-08-26 | GSF - Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit GmbH | Gewebestanzvorrichtung |
| DE102004005139A1 (de) * | 2004-02-02 | 2005-08-18 | Prisma Diagnostika Gmbh | Testelement und Verfahren zum Testen von Blut |
| US20080034626A1 (en) | 2004-02-25 | 2008-02-14 | Gottfried Brem | Tamper-Proof Tag |
| JP4813140B2 (ja) * | 2005-09-29 | 2011-11-09 | シスメックス株式会社 | 試料調製容器および試料調製キット |
| FR2906703B1 (fr) | 2006-10-06 | 2009-08-07 | Affflex Europ Soc Par Actions | Dispositif de prelevement de tissu biologique pour l'identification des animaux |
| DK1920651T3 (da) | 2006-11-08 | 2010-05-10 | Reinhard Nehls | System til at mærke et non-humans biologisk objekt og tage en prøve af det biologiske objekt |
| FR2917574B1 (fr) | 2007-06-22 | 2010-05-07 | Chevillot Sarl | Boucle auriculaire de marquage avec dispositif de prelevement de tissus |
| EP2050334B1 (en) | 2007-10-18 | 2017-04-05 | Allflex Europe SAS | An ear tag for marking an animal and for sampling tissue from said animal |
| DE102008007352B4 (de) | 2008-01-28 | 2010-04-22 | Prionics Ag | Vorrichtung zur Gewinnung, Konservierung und Lagerung von Probenmaterial mit einem Probenbehälter |
| DE102008034677B4 (de) | 2008-07-25 | 2012-05-16 | Gepe-Geimuplast Gmbh | Kennzeichnungs- und Probenahmevorrichtung für Tiere |
| BR112015001460A2 (pt) * | 2012-07-24 | 2017-07-04 | Cryoxtract Instr Llc | sonda de escavação, sistemas para colher núcleo de amostras congelados de uma pluralidade de amostras congeladas, para coletar alíquotas congeladas de amostras biológicas congeladas contidas em contêineres de amostras, para armazenar amostras de tecido congeladas, métodos de colher um núcleo de amostra congelada de uma amostra congelada, para aumentar a probabilidade de um operador usar apenas as sondas de escavação, para preparar e amostrar uma amostra de tecido em um contêiner de amostra de tecido, e de armazenamento de uma amostra de tecido, dispositivo portátil de escavação, bandeja, contêiner de amostra de tecido, kit para preparação de u,a a,ostra de tecido, transporte de tecido para suportar a amostra de tecido, e, combinação de transporte de tecido e dispositivo de escavação. |
| DE102012023491B4 (de) | 2012-12-03 | 2020-02-13 | Prionics Ag | Ohrmarke |
| DE102013007538B4 (de) * | 2013-05-03 | 2021-01-14 | Bizerba SE & Co. KG | Verfahren und Vorrichtung zur Qualitätssicherung von Lebensmitteln |
| DK3004833T3 (en) * | 2013-06-05 | 2019-04-23 | Snpshot Trustee Ltd | IMPROVEMENTS AND TISSUE SAMPLING |
| DE102014007410A1 (de) * | 2014-05-22 | 2015-11-26 | Prionics Ag | Probenbehälter mit Versiegelungsfunktion |
| ES2802453T3 (es) * | 2016-03-24 | 2021-01-19 | Allflex Europe Sa | Uso de una composición acuosa para la disolución de biomoléculas de una muestra de tejido |
| CN111165376B (zh) * | 2020-03-06 | 2024-12-06 | 北京科奥明生物技术有限公司 | 一种耳标及耳标钳 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4230001A (en) * | 1979-05-29 | 1980-10-28 | Erwin Noll | Tatooing pincers for marking ears of animals |
| US4534229A (en) * | 1982-05-06 | 1985-08-13 | Dickey-John Corporation | Method and apparatus for preparing a meat sample for determination of composition of same |
| JPH0823558B2 (ja) * | 1984-11-27 | 1996-03-06 | オ−ジエニクス リミテツド | 検定装置 |
| EP0590219A1 (de) * | 1992-10-02 | 1994-04-06 | SULZER Medizinaltechnik AG | Verfahren zum Zerkleinern von weichem Gewebe und Mittel zum Durchführen des Verfahrens |
| NZ272451A (en) * | 1994-06-28 | 1997-11-24 | Meat Research Corp | Animal tissue testing; portion of tissue removed from carcass tested by measurement of ph of sample after incubation |
| JP3678752B2 (ja) * | 1994-10-31 | 2005-08-03 | ボストン・サイエンティフィック・コーポレーション | バイオプシー針 |
| EP0734768B1 (de) * | 1995-04-01 | 2002-08-28 | Roche Diagnostics GmbH | Verfahren zur Bindung eines biologischen Materials |
-
1998
- 1998-05-25 IL IL13989098A patent/IL139890A0/xx active IP Right Grant
- 1998-05-25 DE DE59802771T patent/DE59802771D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 PL PL98344256A patent/PL187288B1/pl unknown
- 1998-05-25 HU HU0101861A patent/HUP0101861A3/hu unknown
- 1998-05-25 AU AU80201/98A patent/AU765204B2/en not_active Expired
- 1998-05-25 DE DE29824186U patent/DE29824186U1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 YU YU73700A patent/YU73700A/sh unknown
- 1998-05-25 EP EP98928317A patent/EP1088212B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 NZ NZ507811A patent/NZ507811A/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-05-25 JP JP2000551232A patent/JP3836676B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 EA EA200001073A patent/EA002605B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-05-25 CN CNB988141647A patent/CN1196920C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1998-05-25 TR TR2000/03503T patent/TR200003503T2/xx unknown
- 1998-05-25 AT AT98928317T patent/ATE209342T1/de active
- 1998-05-25 WO PCT/EP1998/003075 patent/WO1999061882A1/de not_active Ceased
- 1998-05-25 BR BRPI9815866-0A patent/BR9815866B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1998-05-25 DK DK98928317T patent/DK1088212T3/da active
- 1998-05-25 KR KR1020007013183A patent/KR100586106B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 ES ES98928317T patent/ES2168765T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 UA UA2000116630A patent/UA66854C2/uk unknown
-
1999
- 1999-05-26 AR ARP990102480A patent/AR019576A1/es active IP Right Grant
-
2000
- 2000-11-22 BG BG104976A patent/BG64014B1/bg unknown
- 2000-11-23 IL IL139890A patent/IL139890A/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BG104976A (en) | 2001-04-30 |
| BR9815866A (pt) | 2001-01-16 |
| EP1088212B1 (de) | 2001-11-21 |
| DK1088212T3 (da) | 2002-05-13 |
| YU73700A (sh) | 2002-10-18 |
| KR100586106B1 (ko) | 2006-06-02 |
| EP1088212A1 (de) | 2001-04-04 |
| IL139890A (en) | 2007-02-11 |
| NZ507811A (en) | 2003-03-28 |
| JP3836676B2 (ja) | 2006-10-25 |
| JP2002516669A (ja) | 2002-06-11 |
| EA200001073A1 (ru) | 2001-06-25 |
| PL344256A1 (en) | 2001-10-22 |
| AU8020198A (en) | 1999-12-13 |
| BG64014B1 (bg) | 2003-09-30 |
| KR20010106118A (ko) | 2001-11-29 |
| BR9815866B1 (pt) | 2010-08-24 |
| IL139890A0 (en) | 2002-02-10 |
| CN1196920C (zh) | 2005-04-13 |
| AR019576A1 (es) | 2002-02-27 |
| DE29824186U1 (de) | 2000-08-24 |
| CN1301341A (zh) | 2001-06-27 |
| HUP0101861A3 (en) | 2006-04-28 |
| TR200003503T2 (tr) | 2001-04-20 |
| WO1999061882A1 (de) | 1999-12-02 |
| HUP0101861A2 (hu) | 2001-12-28 |
| ES2168765T3 (es) | 2002-06-16 |
| UA66854C2 (uk) | 2004-06-15 |
| ATE209342T1 (de) | 2001-12-15 |
| EA002605B1 (ru) | 2002-06-27 |
| AU765204B2 (en) | 2003-09-11 |
| DE59802771D1 (de) | 2002-02-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6509187B2 (en) | Method and device for collection and preparation of tissue samples for molecular genetic diagnostics | |
| AU765204B2 (en) | Device and method for obtaining and initially preparing tissue samples for molecular genetic diagnosis | |
| CA2303243C (en) | Method and device for withdrawing biological samples | |
| CA2847152C (en) | Device and method for animal tracking | |
| Schwägele | Traceability from a European perspective | |
| JP4071497B2 (ja) | サンプリングシステム | |
| US20050228310A1 (en) | Sampling device | |
| US20200229402A1 (en) | Devices and methods for determining analytes | |
| JP2004144527A (ja) | 組織検体採取器具、組織保存容器一体型識別票及び固有識別票装着方法 | |
| MXPA00011698A (en) | Device and method for obtaining and initially preparing tissue samples for molecular genetic diagnosis | |
| Ipate et al. | Use rare breed for genuine foods in Romanian rural tourism and possibility of traceability the traditional products. | |
| DE29824494U1 (de) | Vorrichtung zur Gewinnung einer DNA-haltige Zellen enthaltenden Probe aus einem lebenden Subjekt, insbesondere Tier | |
| AU767822B2 (en) | Sampling system | |
| Porzig | Tissue Database: The basis for tracing of origin | |
| Chaisemartin | Traceability of typical products: possibilities and difficulties to trace out the specificities of typical products | |
| Felmer D et al. | Implementación de un sistema de trazabilidad molecular para la carne bovina basado en marcadores microsatélites | |
| WO2003000045A1 (en) | Animal identification system | |
| Hurnik | Traceability options for the Canadian pork industry. | |
| GB2224836A (en) | Detection of inserted DNA in transgenic animals | |
| Saikia et al. | Traceability of Meat and Meat Products |