PL193577B1 - Odczynnik do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwi - Google Patents
Odczynnik do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwiInfo
- Publication number
- PL193577B1 PL193577B1 PL334793A PL33479399A PL193577B1 PL 193577 B1 PL193577 B1 PL 193577B1 PL 334793 A PL334793 A PL 334793A PL 33479399 A PL33479399 A PL 33479399A PL 193577 B1 PL193577 B1 PL 193577B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- reagent
- concentration
- reagent according
- buffer agent
- present
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 51
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 15
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 15
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 title claims description 31
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims abstract description 7
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 239000002357 osmotic agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims abstract description 5
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 20
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 18
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 18
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 claims description 15
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 15
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 11
- -1 amine acetates Chemical class 0.000 claims description 9
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 claims description 8
- 238000011002 quantification Methods 0.000 claims description 8
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 7
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Natural products OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 7
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 6
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 claims description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 claims description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- YFTVJZZMQIPLDM-UHFFFAOYSA-N 1,1-diethyl-2-propylhydrazine Chemical compound CCCNN(CC)CC YFTVJZZMQIPLDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 3
- KIWBPDUYBMNFTB-UHFFFAOYSA-N Ethyl hydrogen sulfate Chemical compound CCOS(O)(=O)=O KIWBPDUYBMNFTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 claims description 3
- NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N iminodiacetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC(O)=O NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 claims description 3
- 229930182493 triterpene saponin Natural products 0.000 claims description 3
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 claims description 3
- SIKVKSVSIZFRMA-UHFFFAOYSA-N 2-(2-hydroxyethylamino)ethanol;propan-1-amine Chemical compound CCCN.OCCNCCO SIKVKSVSIZFRMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000004673 fluoride salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 229930002600 steroidal saponin Natural products 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 7
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 abstract 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 abstract 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 14
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 7
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229930185210 Saponoside Natural products 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- QZTKDVCDBIDYMD-UHFFFAOYSA-N 2,2'-[(2-amino-2-oxoethyl)imino]diacetic acid Chemical compound NC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O QZTKDVCDBIDYMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FKJVYOFPTRGCSP-UHFFFAOYSA-N 2-[3-aminopropyl(2-hydroxyethyl)amino]ethanol Chemical compound NCCCN(CCO)CCO FKJVYOFPTRGCSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXFQFBNBSPQBJW-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-methylpropane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(C)CO UXFQFBNBSPQBJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000003270 potassium fluoride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000003385 sodium Chemical class 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/721—Haemoglobin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5094—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for blood cell populations
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
1. Odczynnik do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwi, znamienny tym, ze zawiera: - co najmniej jeden detergent typu kationowego wystepujacy w stezeniu od 0 do 50 g/l, - zwiazek typu glikozydu, korzystnie saponiny, wystepujacy w stezeniu od 0,5 do 20 g/l, - co najmniej jedna sól nieorganiczna, z wylaczeniem zwiazków cyjankowych, wystepujaca w stezeniu od 1 do 15 g/l i/lub czynnik osmotyczny, korzystnie mannit lub D-glukoze, wystepu- jacy w stezeniu od 0 do 30 g/l, oraz - srodek buforowy organiczny i/lub nieorganiczny dostosowujacy selektywnie pH odczynnika, albo do wartosci zasadniczo obojetnej, z pH w zakresie od 5 do 8, dla okreslenia ilosciowego i identyfikacji trzech podpopulacji leukocytów, którymi sa limfocyty, monocyty i krwinki biale obojetnochlonne, albo do wartosci zasadowej, z pH w zakresie od 8 do 12, dla ustalenia wielopierscieniowych granulocytów kwasochlonnych w dodatku do tych trzech pod populacji. PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest odczynnik do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwi, mający zastosowanie do analiz hematologicznych.
Pomiar stężenia hemoglobiny i oznaczania leukocytów, w szczególności niektórych podpopulacji leukocytów, ma zasadnicze znaczenie w diagnostyce niektórych patologii i to zarówno w medycynie jak i w weterynarii.
Hemoglobina jest chromoproteiną zawartą w krwinkach czerwonych krwi (erytrocytach).
Pomiar stężenia hemoglobiny wymaga więc użycia odczynnika do rozpadu komórkowego mogącego doprowadzić do rozpadu erytrocytów lub krwinek czerwonych, aby uwolnić hemoglobinę, w celu jej pomiaru.
Znane jest stosowanie w tym celu odczynników zawierających jony cyjanku, które mogą dokonać rozpadu erytrocytu i przetworzyć hemoglobinę w stabilny związek barwnikotwórczy, dla umożliwienia dokonania oznaczenia hemoglobiny przez pomiar kolorymetryczny. Odczynnik tego rodzaju opisany jest w szczególności w opisie patentowym US 3, 874, 852. Główną wadą tego odczynnika jest zastosowanie w nim cyjanku, a ponadto, nie umożliwia on identyfikacji i policzenia podpopulacji leukocytów zawartych w próbce krwi poddanej analizie.
W rzeczywistości sprawdza się, że oznaczenie podpopulacji leukocytów, w szczególności limfocytów, monocytów, krwinek białych obojętnochłonnych i granulocytów kwasochłonnych, ma zasadnicze znaczenie dla identyfikacji niektórych patologii.
Inne odczynniki, nie zawierające cyjanku, są przedmiotem wcześniejszych rozwiązań znanych ze stanu techniki, do oznaczania leukocytów w próbkach krwi.
Przykłady takich odczynników opisane są, na przykład, w europejskim opisie patentowym EP 0 325 710.
Zaletą tych odczynników jest to, że nie zawierają cyjanku, jednak mają one również tę niedogodność, że nie umożliwiają identyfikacji i dokładnego oznaczenia ilościowego podpopulacji leukocytów krwi.
Zatem, odczynnik według EP 0 325 710 umożliwia, na przykład, oznaczenie granulocytów kwasochłonnych znajdujących się w próbce krwi, ale nie umożliwia identyfikacji w sposób precyzyjny innych podpopulacji leukocytów.
Z kolei, europejski opis patentowy EP 0 424 871 opisuje odczynniki umożliwiające zróżnicowanie podpopulacji leukocytów. Jednak, odczynniki te napotykają niekiedy na trudności, aby pokonać napięcia błonowe, które występują w stanach patologii ludzkiej i w biologii weterynaryjnej.
Celem wynalazku jest uniknięcie wymienionych niedogodności.
W szczególności, celem wynalazku jest opracowanie odczynnika do analizy hematologicznej do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwi, który umożliwiałby zwłaszcza rozpad erytrocytów lub krwinek czerwonych, jak również pomiar hemoglobiny bez stosowania związków cyjankowych.
Celem wynalazku jest również opracowanie odczynnika, który umożliwiałby dokonanie całościowego oznaczenia ilościowego leukocytów, lub krwinek białych, identyfikację co najmniej jednej podpopulacji leukocytów i oznaczenie ilościowe co najmniej jednej takiej podpopulacji.
Celem wynalazku jest ponadto opracowanie odczynnika, który mógłby być stosowany zarówno w medycynie jak i weterynarii.
Dalszym celem wynalazku jest też opracowanie odczynnika, który mógłby wyeliminować trudności analizy związane z występowaniem napięć błonowych, które napotyka się w stanach patologii ludzkiej i w biologii weterynaryjnej.
Zgodnie z wynalazkiem, odczynnik do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwi charakteryzuje się tym, że zawiera:
- co najmniej jeden detergent typu kationowego występujący w stężeniu od 0 do 50 g/l,
- związek typu glikozydu, korzystnie saponiny, występujący w stężeniu od 0,5 do 20 g/l,
- co najmniej jedną sól nieorganiczną, z wyłączeniem związków cyjankowych, występującą w stężeniu od 1 do 15 g/l i/lub czynnik osmotyczny, korzystnie mannit lub D-glukozę, występujący w stężeniu od 0 do 30 g/l, oraz
- środek buforowy organiczny i/lub nieorganiczny dostosowujący selektywnie pH odczynnika, albo do wartości zasadniczo obojętnej, z pH w zakresie od 5 do 8, dla określenia ilościowego i identyfikacji trzech podpopulacji leukocytów, którymi są limfocyty, monocyty i krwinki białe obojętnochłonne,
PL 193 577B1 albo do wartości zasadowej, z pH w zakresie od 8 do 12, dla ustalenia wielopierścieniowych granulocytów kwasochłonnych w dodatku do tych trzech podpopulacji.
Korzystnie, detergent typu kationowego wybrany jest spośród związków obejmujących:
- aminy pierwszorzędowe, octany i chlorowodorki amin tłuszczowych,
- czwartorzędowe sole amoniowe i bromek trimetylocetylu amonu,
- amidy podstawionych diamin, jonizowane dodatnio siarczanem etylowym, dietanoloamino-propyloaminą, dietyloamino-propyloamidem, oraz
- amidy dietylenotriaminowe cyklizowane.
Korzystnie, związek typu glikozydu wybrany jest z grupy obejmującej saponiny triterpenowe albo steroidowe.
Korzystnie, sól nieorganiczna wybrana jest spośród związków obejmujących chlorek, siarczan lub fluorek sodowy lub potasowy.
Korzystnie, środek buforowy organiczny i/lub nieorganiczny wybrany jest spośród związków obejmujących:
- trietanoloaminę,
- uwodornione fosforany sodu i potasu,
-kwas N-[2-acetoamido]-2 iminodioctowy,
-kwas N-[karbamoilmetylu] iminodioctowy,
-2 amino-2-metyl propanediol-1,3,
- glicynę,
- węglan sodowy,
-kwas cytrynowy, oraz
- aminometan tris(hydroksymetylu).
Korzystnie, środek buforowy organiczny i/lub nieorganiczny występuje w stężeniu zawartym między 0% i 2% wagowych.
Korzystnie, środek buforowy dostosowuje pH odczynnika do wartości zawartej pomiędzy 5 i 8, albo do wartości zawartej pomiędzy 8 i 12.
Rozwiązanie według wynalazku przedstawiono na rysunku, w oparciu o ilustrację przeprowadzonej analizy hematologicznej, na którym fig. 1 i fig. 2 pokazują liczbę leukocytów według natężenia względnego, w badaniu wykonanym na automacie hematologicznym typu ABX-Micros, francuskiej firmy ABX, a fig. 3 do fig. 6 przedstawiają wyniki analizy rezystywnej, przy obserwacji od strony prawej do lewej wykresu następujących podpopulacji, ograniczonych strzałkami: limfocyty (LYM), monocyty (MO), granulocyty (GRA) i wielopierścieniowe granulocyty kwasochłonne (EOS).
Odczynnik hematologiczny według wynalazku zawiera zatem co najmniej cztery główne składniki, które umożliwiają osiągnięcie postawionych celów.
Detergent typu kationowego powoduje rozpad krwinek czerwonych lub erytrocytów, co umożliwia uwolnienie hemoglobiny, która może być następnie oznaczona przez pomiar adsorbancji.
Detergenty jonowe (anionowe i kationowe) stosowane są głównie po to, aby zdysocjować związki białkowe, i aby rozpuścić proteiny błonowe. Są one zwane środkami skażającymi.
Ponadto, wywierają one szybkie i wielostronne działanie na populacje komórek krwi (erytrocyty i leukocyty).
Związek typu glikozydu, w szczególności saponiny, powoduje rozpad krwinek czerwonych. Ponadto, spełnia on funkcję stabilizującą w stosunku do hemoglobiny, co umożliwia badanie hemoglobiny przy określonej długości fal. W szczególności, związek ten przyczynia się do niszczenia napięcia błonowego krwinek czerwonych.
Saponiny, zwane inaczej saponozydami, są glikozydami mogącymi doprowadzić do rozpadu erytrocytów, ale rozpad ten jest wolniejszy od rozpadu uzyskanego w obecności detergentów jonowych. Wówczas, gdy saponiny stosowane są wraz z innymi detergentami, umożliwiają one uzyskanie szybszego rozpadu erytrocytów, co ogranicza zniekształcenie leukocytów.
Ponadto, struktura chemiczna tego rodzaju związków, która charakteryzowana jest przez szkielet węglowy z wielokrotnym cyklem, umożliwia stabilizację fizyko-chemiczną pochodnych utleniania hemoglobiny.
Sól nieorganiczna wpływa na aktywność detergentu. Ponadto, konieczne jest stosowanie pomiaru przez rezystywność.
Czynnik osmotyczny spełnia głównie rolę leukoprotektora wówczas, gdy stosowany odczynnik ma obojętne pH, aby ułatwić różnicowanie podpopulacji leukocytów.
PL 193 577 B1
Wreszcie, środek buforowy jest składnikiem kluczowym, ponieważ pH odczynnika jest ważną cechą. W rzeczywistości, zależnie od wartości pH odczynnik umożliwia identyfikację jednej lub wielu podpopulacji leukocytów.
Wówczas, gdy odczynnik dostosowany jest do wartości w przybliżeniu obojętnej (pH zawarte pomiędzy 5 i 8) możliwe jest oznaczenie ilościowe oraz identyfikacja trzech następujących podpopulacji leukocytów: limfocyty, monocyty i neutrofile (krwinki białe obojętnochłonne).
Wówczas, gdy pH odczynnika dostosowane jest do wartości zasadowej (pH zawarte między 8 i 12) można ponadto identyfikować i oznaczać ilościowo wielopierścieniowe granulocyty kwasochłonne.
Stąd też, dla zastosowań wymagających identyfikacji wielopierścieniowych granulocytów kwasochłonnych, trzeba przystosować pH odczynnika do wartości zasadowej.
Natomiast, gdy identyfikacja taka nie jest wymagana, pH odczynnika dostosowane jest do wartości, która jest w zasadzie obojętna.
W odczynniku według wynalazku detergent korzystnie wybrany jest spośród związków, którymi są aminy pierwszorzędowe, octany i chlorowodorki amin tłuszczowych, czwartorzędowe sole amoniowe i bromek trimetylocetylu amonu, amidy podstawionych diamin, jonizowane dodatnio siarczanem etylowym, dietanoloamino-propyloaminą, dietyloamino-propyloamidem, oraz amidy dietylenotriaminowe cyklizowane.
Detergent występuje korzystnie w stężeniu zawartym pomiędzy 0 i 50 g/l, a korzystniej około 18 g/l.
Wśród związków typu glikozydu preferuje się przede wszystkim saponiny, zwane też saponozydami, triterpenowe albo steroidowe.
W odczynniku według wynalazku związek typu glikozydu korzystnie występuje w stężeniu zawartym pomiędzy 0,5 i 20 g/l, a korzystniej około 2 g/l.
Sól nieorganiczna korzystnie wybrana jest spośród następujących związków: chlorek, siarczan lub fluorek sodowy lub potasowy.
Sól nieorganiczna korzystnie występuje w stężeniu zawartym pomiędzy 1i 15 g/l, a korzystniej około 8 g/l.
Czynnik osmotyczny (leukoprotektor) korzystnie wybrany jest spośród mannitu, D-glukozy i podobnych związków.
Ten czynnik osmotyczny korzystnie występuje w stężeniu zawartym pomiędzy 0i 30 g/l, a korzystniej około 2,5 g/l.
Środek buforowy organiczny i/lub nieorganiczny korzystnie wybrany jest spośród związków, którymi są: trietanoloamina, uwodornione fosforany sodu i potasu, kwas N-[2-acetoamido]-2 iminodioctowy, kwas N-[karbamoilmetylu]iminodioctowy, 2 amino-2-metyl propanediol-1,3, glicyna, węglan sodowy, kwas cytrynowy, oraz aminometan tris(hydroksymetylu).
Środek buforowy występuje korzystnie w stężeniu zawartym pomiędzy 0% i 2% wagowych.
W pierwszym przykładzie wykonania wynalazku, środek buforowy dostosowuje pH odczynnika do wartości zawartej pomiędzy 5 i 8.
W innym przykładzie wykonania, środek buforowy dostosowuje pH odczynnika do wartości zawartej pomiędzy 8 i 12.
Wynalazek opisany jest w odniesieniu do następujących, przykładów wykonania.
Przykład 1
Przygotowuje się odczynnik z niżej wymienionych związków i o wskazanym stężeniu:
Związki
Chlorek sodowy
C15H34 NCl (detergent kationowy)
Saponiny triterpenowe
Węglan sodowy (środek buforowy)
Stężenie 9 g/l g/l 2 g/l g/l (0,2% wagowych)
Związki poddaje się mieszaniu, a pH dostosowuje się do wartości zasadowej zawartej pomiędzy 8 i 12, a mianowicie 10,5.
Za pomocą tak przygotowanego odczynnika przystępuje się do dwóch analiz hematologicznych stosując automat hematologiczny ABX-Micros sprzedawany przez francuską firmę ABX.
W tym celu, miesza się wstępnie określoną objętość analizowanej próbki krwi z określoną objętością rozpuszczalnika i wymienionego odczynnika.
W przykładzie tym wykonano pomiary na zwierzęcych próbkach krwi. Wyniki pomiarów przeprowadzonych na tych dwóch różnych próbkach krwi przedstawiono na fig. 1i 2.
PL 193 577B1
Na tych figurach przedstawiono wykres obrazujący liczbę leukocytów w funkcji natężenia względnego. Stwierdzono istnienie czterech podpopulacji leukocytów.
Chodzi tu o analizę rezystywną przy obserwacji od prawej do lewej strony wykresu następujących podpopulacji, ograniczonych strzałkami: limfocyty (LYM), monocyty (MO), granulocyty (GRA) i wielopierścieniowe granulocyty kwasochłonne (EOS).
Automat podaje następujące wyniki zliczania, które dla każdej podpopulacji leukocytów wskazują liczbę zliczonych komórek i odpowiadającą im zawartość procentową, dla każdej podpopulacji leukocytów.
Analiza 1 (fig. 1)
LYM : 3956 komórek 53,23%
MO : 420 komórek 5,65%
GRA : 2576 komórek 34,65%
EOS : 481 komórek 6,47%
Analiza 2 (fig. 2)
LYM : 1071 komórek 9,34%
MO : 805 komórek 7,00%
GRA : 8906 komórek 77,52%
EOS : 706 komórek 6,14%
Zatem, odczynnik z tego przykładu, umożliwia identyfikację i oznaczenie ilościowe każdej z czterech podpopulacji leukocytów wskazanych powyżej.
P r z y k ł a d 2
Stosuje się ten sam odczynnik jak w przykładzie 1 i przystępuje do podobnych analiz na dwóch różnych próbkach krwi ludzkiej. Pomiary dokonywane są za pomocą automatu hematologicznego
ABX-Vega firmy ABX.
Wyniki przedstawione zostały na fig. 3 i 4.
Dla próbki odpowiadającej fig. 3, analiza umożliwia identyfikację i oznaczenie ilościowe czterech następujących podpopulacji: limfocyty (LYM), monocyty (MO), granulocyty (GRA) i wielopierścieniowe granulocyty kwasochłonne (EOS). Te ostatnie reprezentują 5% całej populacji.
W przypadku próbki odpowiadającej fig. 4, analiza umożliwia identyfikację i oznaczenie ilościowe trzech następujących podpopulacji: limfocyty (LYM), monocyty (MO), granulocyty (GRA).
Ponadto, analiza ujawnia, że próbka nie zawiera wielopierścieniowych granulocytów kwasochłonnych (poziom 0%).
P r z y k ł a d 3
Stosuje się odczynnik podobny jak w przykładach 1 i 2, ale dostosowuje się go do pH obojętnego, a mianowicie 7,6%. Przystępuje się do podobnych analiz na próbce krwi ludzkiej. Pomiary wykonywane są za pomocą automatu hematologicznego ABX-Vega firmy ABX.
Wyniki pomiarów przedstawione są na fig. 5. Wykryto jedynie następujące trzy główne podpopulacje leukocytów: limfocyty (LYM), monocyty (MO) i granulocyty (GRA).
P r z y k ł a d 4
Stosuje się odczynnik podobny jak w przykładzie 3, a więc dostosowany do pH obojętnego. Przystępuje się do podobnych analiz na próbce krwi ludzkiej. Pomiary wykonywane są za pomocą automatu hematologicznego ABX-Micros firmy ABX.
Wyniki pomiarów przedstawione są na fig. 6. Podobnie jak w przykładzie 3, uwzględnione są tylko następujące trzy główne podpopulacji leukocytów: limfocyty (LYM), monocyty (MO) i granulocyty (GRA).
Claims (8)
1. Odczynnik do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwi, znamienny tym, że zawiera:
- co najmniej jeden detergent typu kationowego występujący w stężeniu od 0 do 50 g/l,
- związek typu glikozydu, korzystnie saponiny, występujący w stężeniu od 0,5 do 20 g/l,
- co najmniej jedną sól nieorganiczną, z wyłączeniem związków cyjankowych, występującą w stężeniu od 1 do 15 g/l i/lub czynnik osmotyczny, korzystnie mannit lub D-glukozę, występujący w stężeniu od 0 do 30 g/l, oraz
PL 193 577 B1
- środek buforowy organiczny i/lub nieorganiczny dostosowujący selektywnie pH odczynnika, albo do wartości zasadniczo obojętnej, z pH w zakresie od 5 do 8, dla określenia ilościowego i identyfikacji trzech podpopulacji leukocytów, którymi są limfocyty, monocyty i krwinki białe obojętnochłonne, albo do wartości zasadowej, z pH w zakresie od 8 do 12, dla ustalenia wielopierścieniowych granulocytów kwasochłonnych w dodatku do tych trzech pod populacji.
2. Odczynnik według zastrz. 1, znamienny tym, że detergent typu kationowego wybrany jest spośród związków obejmujących:
- aminy pierwszorzędowe, octany i chlorowodorki amin tłuszczowych,
- czwartorzędowe sole amoniowe i bromek trimetylocetylu amonu,
- amidy podstawionych diamin, jonizowane dodatnio siarczanem etylowym, dietanoloamino-propyloaminą, dietyloamino-propyloamidem, oraz amidy dietylenotriaminowe cyklizowane.
3. Odczynnik według zastrz. 1, znamienny tym, że związek typu glikozydu wybrany jest z grupy obejmującej saponiny triterpenowe albo steroidowe.
4. Odczynnik według zastrz. 1, znamienny tym, że sól nieorganiczna wybrana jest spośród związków obejmujących chlorek, siarczan lub fluorek sodowy lub potasowy.
5. Odczynnik według zastrz. 1, znamienny tym, że środek buforowy organiczny i/lub nieorganiczny wybrany jest spośród związków obejmujących:
- trietanoloaminę,
- uwodornione fosforany sodu i potasu,
-kwas N-[2-acetoamido]-2 iminodioctowy,
-kwas N-[karbamoilmetylu] iminodioctowy,
-2 amino-2-metyl propanediol-1,3,
- glicynę,
- węglan sodowy,
-kwas cytrynowy, oraz - aminometan tris(hydroksymetylu).
6. Odczynnik według zastrz. 5, znamienny tym, że środek buforowy organiczny i/lub nieorganiczny występuje w stężeniu zawartym między 0% i 2% wagowych.
7. Odczynnik według zastrz. 6, znamienny tym, że środek buforowy dostosowuje pH odczynnika do wartości zawartej pomiędzy 5 i 8.
8. Odczynnik według zastrz. 6, znamienny tym, że środek buforowy dostosowuje pH odczynnika do wartości zawartej pomiędzy 8 i 12.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9810010A FR2782166B1 (fr) | 1998-08-04 | 1998-08-04 | Reactif pour la mesure de l'hemoglobine et la determination des leucocytes dans un echantillon de sang |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL334793A1 PL334793A1 (en) | 2000-02-14 |
| PL193577B1 true PL193577B1 (pl) | 2007-02-28 |
Family
ID=9529384
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL334793A PL193577B1 (pl) | 1998-08-04 | 1999-08-04 | Odczynnik do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwi |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6114130A (pl) |
| EP (1) | EP0978724B1 (pl) |
| JP (1) | JP4278788B2 (pl) |
| KR (1) | KR100540518B1 (pl) |
| CN (1) | CN1198144C (pl) |
| AT (1) | ATE225508T1 (pl) |
| BR (1) | BR9903325B1 (pl) |
| DE (1) | DE69903236T2 (pl) |
| ES (1) | ES2184395T3 (pl) |
| FR (1) | FR2782166B1 (pl) |
| IL (1) | IL131024A (pl) |
| NO (1) | NO321924B1 (pl) |
| PL (1) | PL193577B1 (pl) |
| RU (1) | RU2226277C2 (pl) |
| TR (1) | TR199901791A2 (pl) |
| TW (1) | TW554171B (pl) |
| ZA (1) | ZA994655B (pl) |
Families Citing this family (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100575599B1 (ko) * | 2001-09-20 | 2006-05-03 | 주식회사 만도 | 차량용 토크센서 |
| JP2005534895A (ja) * | 2002-06-11 | 2005-11-17 | ケムパック エイ／エス | 異なるタイプの白血球細胞の同時計数のための溶解試薬、カートリッジおよび自動電子細胞カウンタ |
| US6869798B2 (en) * | 2003-04-17 | 2005-03-22 | Clinical Diagnostics Solutions, Inc. | Lytic reagent composition for leukocyte differential analysis |
| JP3910156B2 (ja) * | 2003-05-28 | 2007-04-25 | アークレイ株式会社 | 試料の安定化方法 |
| RU2247986C1 (ru) * | 2003-07-28 | 2005-03-10 | Государственное образовательное учреждение Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова | Способ определения детергента в пробе |
| US7465584B2 (en) * | 2005-01-24 | 2008-12-16 | Sysmex Corporation | Method and reagent for classifying leukocytes in animal blood |
| US20060216762A1 (en) * | 2005-03-24 | 2006-09-28 | Bayer Healthcare Llc | Extracting reagent for hydrophobic analyte in whole blood |
| FR2883972B1 (fr) * | 2005-03-31 | 2007-11-16 | C2 Diagnostics Sa | Procede pour l'analyse d'un echantillon de sang et appareil et reactif pour sa mise en oeuvre |
| US7235404B2 (en) * | 2005-05-04 | 2007-06-26 | Beckman Coulter, Inc. | Cyanide-free lytic reagent composition and method of use for hemoglobin and white blood cell measurement |
| CN101078720B (zh) * | 2006-05-22 | 2010-12-01 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 一种改进的用于对白细胞进行分类的试剂及方法 |
| CN101078721B (zh) * | 2006-05-23 | 2010-12-22 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 对白细胞进行分类的试剂及方法 |
| CN101349644B (zh) * | 2007-07-20 | 2012-06-27 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 一种白细胞分类试剂和其使用方法 |
| US8102161B2 (en) * | 2007-09-25 | 2012-01-24 | Tdk Corporation | Stable output in a switching power supply by smoothing the output of the secondary coil |
| US8835104B2 (en) | 2007-12-20 | 2014-09-16 | Fenwal, Inc. | Medium and methods for the storage of platelets |
| CN101475754A (zh) * | 2008-01-04 | 2009-07-08 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 不对称菁类荧光染料,组合物及在生物样品染色中的用途 |
| CN101602762B (zh) * | 2008-06-10 | 2013-10-16 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 不对称菁类化合物、其制备方法及应用 |
| CN101726579B (zh) * | 2008-10-17 | 2014-06-18 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 血液检测试剂和方法 |
| CN101750274B (zh) * | 2008-12-17 | 2014-06-25 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 白细胞分类计数试剂、试剂盒以及白细胞分类计数的方法 |
| CN101988082B (zh) * | 2009-07-31 | 2015-04-08 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 白细胞分类计数试剂、试剂盒及其制备方法和白细胞分类计数的方法 |
| AU2012240016B2 (en) | 2011-04-07 | 2016-11-10 | Fenwal, Inc. | Automated methods and systems for providing platelet concentrates with reduced residual plasma volumes and storage media for such platelet concentrates |
| CN103323318A (zh) * | 2013-06-18 | 2013-09-25 | 南京普朗医疗设备有限公司 | 一种血细胞分析仪稀释液 |
| JP2021524259A (ja) | 2018-05-25 | 2021-09-13 | クヴェッラ コーポレーション | 血液細胞の選択的ライシス及び微生物細胞の分離のための方法及び組成物 |
| CN114174826A (zh) * | 2019-09-19 | 2022-03-11 | 深圳迈瑞动物医疗科技有限公司 | 一种动物血液细胞分析方法、分析仪及存储介质 |
| US12498371B2 (en) | 2021-12-23 | 2025-12-16 | Hi Technologies Ltda | Formulation for total and differential counting of leukocytes in liquid medium and method of making and using same |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4250051A (en) * | 1978-12-26 | 1981-02-10 | Coulter Electronics, Inc. | Preservative for use in calibrator compositions for blood analysis |
| US4529705A (en) * | 1983-06-06 | 1985-07-16 | Coulter Electronics, Inc. | Reagent for combined diluting and lysing whole blood |
| US4751179A (en) * | 1984-05-31 | 1988-06-14 | Coulter Electronics, Inc. | Method and reagents for differential determination of four populations of leukocytes in blood |
| JP2836865B2 (ja) * | 1989-10-23 | 1998-12-14 | 東亜医用電子株式会社 | 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬 |
| FR2654721B1 (fr) * | 1989-11-17 | 1992-03-27 | Bedos Francois | Procede et installation pour la fabrication d'un amendement calcaire mixte pour sols agricoles des massifs granitiques. |
| FR2654744B1 (fr) * | 1989-11-20 | 1992-03-13 | Abx Sa | Reactif et methode d'utilisation de celui-ci pour la determination automatique en cytometrie de flux d'au moins une sous-population leucocytaire a partir du sang total. |
| US5242832A (en) * | 1990-03-01 | 1993-09-07 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Reagent for measurement of leukocytes and hemoglobin in blood |
| RU2052197C1 (ru) * | 1992-02-26 | 1996-01-10 | Акционерное общество закрытого типа Научно-производственное предприятие "Техномедика" | Способ определения концентрации гемоглобина в крови и реактив для лизирования клеток крови |
| JP3320869B2 (ja) * | 1993-12-22 | 2002-09-03 | シスメックス株式会社 | 白血球分析用試薬 |
| AU3094695A (en) * | 1994-07-14 | 1996-02-16 | Abbott Laboratories | Methods and reagents for cyanide-free determination of hemoglobin and leukocytes in whole blood |
| US5639630A (en) * | 1995-05-16 | 1997-06-17 | Bayer Corporation | Method and reagent composition for performing leukocyte differential counts on fresh and aged whole blood samples, based on intrinsic peroxidase activity of leukocytes |
| FR2735578B1 (fr) * | 1995-06-13 | 1997-09-05 | Hycel Groupe Lisabio | Reactif de lyse des erythrocytes, et son utilisation dans des procedes d'isolement et de discrimination des leucocytes |
-
1998
- 1998-08-04 FR FR9810010A patent/FR2782166B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-07-09 US US09/352,666 patent/US6114130A/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-14 KR KR1019990028439A patent/KR100540518B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1999-07-15 DE DE69903236T patent/DE69903236T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-15 AT AT99401781T patent/ATE225508T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-07-15 EP EP99401781A patent/EP0978724B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-15 ES ES99401781T patent/ES2184395T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-19 TW TW088112217A patent/TW554171B/zh not_active IP Right Cessation
- 1999-07-19 BR BRPI9903325-9A patent/BR9903325B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1999-07-20 ZA ZA9904655A patent/ZA994655B/xx unknown
- 1999-07-21 IL IL13102499A patent/IL131024A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-07-27 TR TR1999/01791A patent/TR199901791A2/xx unknown
- 1999-08-03 NO NO19993762A patent/NO321924B1/no unknown
- 1999-08-03 JP JP21964499A patent/JP4278788B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-08-03 RU RU99116974/15A patent/RU2226277C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-08-04 PL PL334793A patent/PL193577B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1999-08-04 CN CNB991118960A patent/CN1198144C/zh not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US6114130A (en) | 2000-09-05 |
| DE69903236D1 (de) | 2002-11-07 |
| CN1198144C (zh) | 2005-04-20 |
| KR100540518B1 (ko) | 2006-01-10 |
| FR2782166A1 (fr) | 2000-02-11 |
| NO321924B1 (no) | 2006-07-24 |
| ES2184395T3 (es) | 2003-04-01 |
| EP0978724A1 (fr) | 2000-02-09 |
| NO993762L (no) | 2000-02-07 |
| JP2000055913A (ja) | 2000-02-25 |
| TW554171B (en) | 2003-09-21 |
| ZA994655B (en) | 2000-01-27 |
| NO993762D0 (no) | 1999-08-03 |
| IL131024A0 (en) | 2001-01-28 |
| KR20000016936A (ko) | 2000-03-25 |
| FR2782166B1 (fr) | 2000-10-06 |
| BR9903325A (pt) | 2000-05-09 |
| PL334793A1 (en) | 2000-02-14 |
| EP0978724B1 (fr) | 2002-10-02 |
| DE69903236T2 (de) | 2003-06-05 |
| JP4278788B2 (ja) | 2009-06-17 |
| ATE225508T1 (de) | 2002-10-15 |
| TR199901791A2 (xx) | 2000-03-21 |
| RU2226277C2 (ru) | 2004-03-27 |
| BR9903325B1 (pt) | 2010-12-14 |
| IL131024A (en) | 2004-02-19 |
| CN1247982A (zh) | 2000-03-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL193577B1 (pl) | Odczynnik do pomiaru hemoglobiny i oznaczania leukocytów w próbce krwi | |
| US5486477A (en) | Reagent system for improved multiple species blood analysis | |
| US5817518A (en) | Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood | |
| US5116539A (en) | Reagent and method for measuring leukocytes and hemoglobin in blood | |
| JP4263247B2 (ja) | ヘモグロビン及び細胞分析のためのシアン化物不含溶解試薬組成物及び方法 | |
| US6664110B1 (en) | Erythroblast diagnostic flow-cytometry method and reagents | |
| DE69434942T2 (de) | Mehrzweckreagenzsystem zur schnellen lysierung von vollblutproben | |
| US5686308A (en) | Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood | |
| US20020182623A1 (en) | Reagent and process for the identification and counting of biological cells | |
| US5316951A (en) | Method for the improved determination of white blood cell subpopulations | |
| CZ100098A3 (cs) | Způsob rychlé automatizované identifikace a charakterizace reticulocytů erythrocytů a destiček v krvi, a činidlo pro tento způsob | |
| JPH01199161A (ja) | 白血球を定量且つ識別する方法 | |
| US5180677A (en) | Lysing reagent for leukocyte differentiation method | |
| US5843608A (en) | Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood | |
| JP4087560B2 (ja) | 赤芽球の識別方法 | |
| DE3854326T2 (de) | Aufbereitungstechnik für vollblutmuster. | |
| US6210969B1 (en) | Composition and method for differentiation of basophil and eosinophil subpopulations of leukocytes in blood | |
| US6214625B1 (en) | Composition and method for differentiation of basophils and eosinophils in blood | |
| DE69625581T2 (de) | Cyanidfreies Reagenz und Verfahren zur Bestimmung von Hämoglobin und Leukozytendifferenzierung | |
| EP1052512A2 (de) | Verfahren und Teilreagenz zur Bestimmung von Eisen | |
| EP0952453B1 (de) | Verfahren und Reagenz zur störungsfreien Bestimmung von Eisen | |
| US7026110B1 (en) | Reagent for determination of leucocytes and measurement of haemoglobin in a sample of blood | |
| Hayashi et al. | The micronucleus assay with rodent peripheral blood and acridine orange supravital staining | |
| CN1101979A (zh) | 血液分析用试剂(1) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20080804 |