PL197694B1 - Sposób suszenia kryształów białka - Google Patents

Sposób suszenia kryształów białka

Info

Publication number
PL197694B1
PL197694B1 PL350169A PL35016900A PL197694B1 PL 197694 B1 PL197694 B1 PL 197694B1 PL 350169 A PL350169 A PL 350169A PL 35016900 A PL35016900 A PL 35016900A PL 197694 B1 PL197694 B1 PL 197694B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
drying
water
crystals
protein crystals
protein
Prior art date
Application number
PL350169A
Other languages
English (en)
Other versions
PL350169A1 (en
Inventor
Rolf Deusser
Peter Krämer
Horst Thurow
Original Assignee
Sanofi Aventis Deutschland
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi Aventis Deutschland filed Critical Sanofi Aventis Deutschland
Publication of PL350169A1 publication Critical patent/PL350169A1/xx
Publication of PL197694B1 publication Critical patent/PL197694B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K1/00General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/62Insulins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K1/00General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/30Extraction; Separation; Purification by precipitation
    • C07K1/306Extraction; Separation; Purification by precipitation by crystallization
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C30CRYSTAL GROWTH
    • C30BSINGLE-CRYSTAL GROWTH; UNIDIRECTIONAL SOLIDIFICATION OF EUTECTIC MATERIAL OR UNIDIRECTIONAL DEMIXING OF EUTECTOID MATERIAL; REFINING BY ZONE-MELTING OF MATERIAL; PRODUCTION OF A HOMOGENEOUS POLYCRYSTALLINE MATERIAL WITH DEFINED STRUCTURE; SINGLE CRYSTALS OR HOMOGENEOUS POLYCRYSTALLINE MATERIAL WITH DEFINED STRUCTURE; AFTER-TREATMENT OF SINGLE CRYSTALS OR A HOMOGENEOUS POLYCRYSTALLINE MATERIAL WITH DEFINED STRUCTURE; APPARATUS THEREFOR
    • C30B29/00Single crystals or homogeneous polycrystalline material with defined structure characterised by the material or by their shape
    • C30B29/54Organic compounds
    • C30B29/58Macromolecular compounds
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C30CRYSTAL GROWTH
    • C30BSINGLE-CRYSTAL GROWTH; UNIDIRECTIONAL SOLIDIFICATION OF EUTECTIC MATERIAL OR UNIDIRECTIONAL DEMIXING OF EUTECTOID MATERIAL; REFINING BY ZONE-MELTING OF MATERIAL; PRODUCTION OF A HOMOGENEOUS POLYCRYSTALLINE MATERIAL WITH DEFINED STRUCTURE; SINGLE CRYSTALS OR HOMOGENEOUS POLYCRYSTALLINE MATERIAL WITH DEFINED STRUCTURE; AFTER-TREATMENT OF SINGLE CRYSTALS OR A HOMOGENEOUS POLYCRYSTALLINE MATERIAL WITH DEFINED STRUCTURE; APPARATUS THEREFOR
    • C30B33/00After-treatment of single crystals or homogeneous polycrystalline material with defined structure

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Metallurgy (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Drying Of Solid Materials (AREA)
  • Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Sposób suszenia kryszta lów bia lka z u zyciem wodnej zawiesiny kryszta lów bia lka, znamien- ny tym, ze zawiesin e kryszta lów bia lka suszy si e z u zyciem gazu susz acego w suszarce wirówkowej, przy czym gaz susz acy przed procesem suszenia nawil za si e wod a i kryszta ly bia lka po ods aczeniu z zawiesiny kryszta lów bialka laczy si e ze srodkiem osuszaj acym, stanowi acym mieszanin e wody i niewodnego rozpuszczalnika mieszaj acego si e z wod a w ka zdym stosunku i maj acego wy zsz a pr ez- nosc pary ni z woda. PL PL PL PL

Description

RZECZPOSPOLITA
POLSKA
Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 197694 B1 (21) Numer zgłoszenia: 350169 (13) (22) Data zgłoszenia: 15.01.2000 (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego:
15.01.2000, PCT/EP00/00287 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
03.08.2000, WO00/44767 PCT Gazette nr 31/00 (51) Int.Cl.
C07H 1/00 (2006.01) C07K 14/62 (2006.01) C07K 1/14 (2006.01) C07K 1/36 (2006.01) (54)
Sposób suszenia kryształów białka
(73) Uprawniony z patentu:
(30) Pierwszeństwo: SANOFI-AVENTIS DEUTSCHLAND GMBH, Frankfurt nad Menem,DE
27.01.1999,DE,19903125.8 (72) Twórca(y) wynalazku:
(43) Zgłoszenie ogłoszono: 18.11.2002 BUP 24/02 Rolf Deusser,Sulzbach,DE Peter Kramer,Eschborn,DE Horst Thurow,Kelkheim,DE
(45) O udzieleniu patentu ogłoszono: 30.04.2008 WUP 04/08 (74) Pełnomocnik: Zofia Sulima, Sulima Grabowska Sierzputowska, Biuro Patentów i Znaków Towarowych Sp.j.
(57) 1. Sposób suszenia kryształówbiałka z użyciem wodnej zawiesinykryształów białka, znamienny tym, że zawiesinę kryształów białka suszy się z użyciem gazu suszącego w suszarce wirówkowej, przy czym gaz suszący przed procesem suszenia nawilża się wodą i kryształy białka po odsączeniu z zawiesiny kryształów białka łączy się ze środkiem osuszającym, stanowiącym mieszaninę wody i niewodnego rozpuszczalnika mieszającego się z wodą w każdym stosunku i mającego wyższą prężność pary niż woda.
PL 197 694 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób suszenia kryształów białka z użyciem wodnej zawiesiny kryształów białka.
Wiele handlowych postaci preparatów zawiera białka. W szczególności białka jako substancje czynne są składnikiem niektórych farmaceutycznych środków leczniczych. Przy wytwarzaniu takich postaci preparatów celowe jest stosowanie białek w postaci krystalicznej. Obróbka takich białek jest łatwiejsza, a ponadto szczególnie białka w postaci suchych kryształów są trwalsze niż np. w postaci rozpuszczonej.
Przykładowo przy wytwarzaniu preparatu farmaceutycznego zawierającego hormon insulinę jako substancję czynną stosuje się białko insulinę w postaci krystalicznej. Wykrystalizowana insulina może być przechowywana np. w temperaturze -20°C przez kilka lat.
Znane są krystaliczne postacie białek o masie cząsteczkowej do kilkuset tysięcy daltonów, jak również peptydów o mniejszej masie cząsteczkowej. Sekwencja aminokwasów w białku może być albo identyczna z sekwencją występującą w naturze, albo może być ona zmieniona w stosunku do postaci naturalnej. Oprócz łańcucha aminokwasów, białka mogą zawierać jako łańcuchy boczne również grupy cukrowe lub inne ligandy. Białka można wyodrębniać ze źródeł naturalnych, albo można je wytwarzać genetycznie lub syntetycznie, albo otrzymywać z zastosowaniem tych procesów w połączeniu.
W roztworze wodnym białka mają bardziej lub mniej skomplikowaną strukturę trójwymiarową, wynikającą ze specyficznego, przestrzennego pofałdowania łańcuchów aminokwasów. Nienaruszona struktura białka ma zasadnicze znaczenie dla jego działania biologicznego. W procesie krystalizacji białek z roztworów wodnych struktura ta pozostaje w znacznym stopniu zachowana. Krystaliczna struktura białka jest zdeterminowana głównie przez sekwencję aminokwasów, ale mają na nią również wpływ wtrącenia substancji o małej masie cząsteczkowej, takich jak np. sole jonów metali i cząsteczki wody. Dla trwałości struktury krystalicznej konieczna jest zwłaszcza obecność określonej ilości międzykrystalicznych cząsteczek wody (wody krystalizacyjnej).
Przykładowo kryształy insuliny wymagają optymalnej resztkowej zawartości wody (około 1 - 7%). Jeśli przez przesuszenie kryształów osiąga się zbyt małą zawartość wilgoci, to z kryształów zostaje usunięta woda krystalizacyjna. Wpływa to niekorzystnie na trwałość chemiczną insuliny, wskutek czego dochodzi np. do powstania związków o dużej masie cząsteczkowej. Przypuszcza się, że część insuliny o dużej masie cząsteczkowej jest odpowiedzialna za immunologiczne reakcje nietolerancji tego związku. W skrajnym przypadku insulina może być tak bardzo zdenaturowana, że kryształy stają się nierozpuszczalne w środowisku wodnym. Natomiast jeśli w procesie suszenia otrzymuje się kryształy o zbyt dużej zawartości wilgoci, to pomiędzy poszczególnymi kryształami znajduje się za dużo wody. W tej wodzie międzykrystalicznej insulina częściowo się rozpuszcza. Trwałość rozpuszczonej insuliny jest jednak wyraźnie mniejsza niż stałych postaci tego związku.
Znany jest sposób suszenia kryształów białka, zwłaszcza kryształów insuliny, zgodnie z którym z zawiesiny kryształów wyodrębnia się kryształy przez filtrację i suszenie placka filtracyjnego pod próżnią, w temperaturze powyżej 0°C. Wiadomo również, że można przyspieszyć proces suszenia, zastępując przed suszeniem wodę międzykrystaliczną etanolem. Podczas suszenia krystalizat rozprowadza się w cienkich warstwach na blachach suszących, albo wstrząsa się je na filtrze.
Zgodnie z innym sposobem kryształy białka, np. kryształy insuliny, w postaci wodnej zawiesiny zamraża się na blachach suszących w temperaturze poniżej 0°C i następnie odparowuje pod próżnią ze stanu zamrożenia.
W obu wymienionych sposobach nie jest wystarczająco zapewnione osiągnięcie określonej lub optymalnej wilgotności resztkowej w wysuszonych kryształach. W obu przypadkach proces suszenia jest do końca kontrolowany kinetycznie i trzeba go przerwać we właściwym czasie dla uniknięcia przesuszenia. Praktyka pokazuje, że trudne jest określenie właściwego momentu przerwania suszenia. Resztkowa zawartość wilgoci w kryształach zależy nie tylko od grubości warstwy na blachach suszących, lecz także od wielkości kryształów (lub od ich powierzchni). Ponieważ proces krystalizacji prowadzi do powstania kryształów insuliny o bardziej lub mniej szerokim rozkładzie wielkości, w kinetycznie kontrolowanym procesie otrzymuje się wysuszone kryształy białka, stanowiące mieszaninę suchych małych i wilgotnych dużych kryształów.
Inna wada tych procesów polega na tym, że bardzo trudno jest zautomatyzować napełnianie i opróżnianie urządzeń stosowanych do suszenia. Ciągle jeszcze przy napełnianiu i opróżnianiu
PL 197 694 B1 w znacznym stopniu potrzebna jest praca ręczna, co powoduje ryzyko zanieczyszczenia zarazkami i obcymi cząstkami. Dlatego obecnie obowiązujące farmakopee wymagają, aby insulina krystaliczna przeznaczona do wytwarzania preparatów farmaceutycznych zawierała niewiele zarazków, ale nie musi być ich całkowicie pozbawiona.
Wynalazek dotyczy sposobu suszenia kryształów białka z użyciem wodnej zawiesiny kryształów białka, charakteryzującego się tym, że zawiesinę kryształów białka suszy się z użyciem gazu suszącego w suszarce wirówkowej, przy czym gaz suszący przed procesem suszenia nawilża się wodą i kryształy białka po odsączeniu z zawiesiny kryształów białka łączy się ze środkiem osuszającym, stanowiącym mieszaninę wody i niewodnego rozpuszczalnika mieszającego się z wodą w każdym stosunku i mającego wyższą prężność pary niż woda.
Korzystnie stosuje się środek osuszający zawierający rozpuszczalnik w ilości 10 - 80%, a zwłaszcza 15 - 60%.
Korzystnie jako rozpuszczalnik stosuje się alkohol lub mieszaninę alkoholi. Szczególnie korzystnie jako rozpuszczalnik stosuje się metanol, etanol, n-propanol lub izopropanol, a także ich mieszaniny.
Korzystnie jako gaz suszący stosuje się azot.
Korzystnie kryształy białka po odsączeniu z zawiesiny kryształów białka przeprowadza się w złoże fluidalne i poddaje suszeniu.
Korzystnie jako kryształy białka stosuje się kryształy insuliny zwierzęcej, insuliny ludzkiej lub analogów tych insulin.
Jako analogi insuliny określa się tutaj pochodne insulin występujących w naturze, a mianowicie insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, która przez podstawienie co najmniej jednej występującej w naturze reszty aminokwasu i/lub przez przyłączenie co najmniej jednej reszty aminokwasu i/lub grupy organicznej, odróżnia się od odpowiedniej, pod innym względem takiej samej, insuliny występującej w naturze.
Poniżej opisano sposób suszenia, w którym wszystkie istotne etapy przebiegają kolejno w urządzeniu (suszarce wirówkowej):
1. Odfiltrowanie kryształów z zawiesiny wodnej.
2. Przemywanie placka filtracyjnego.
3. Wymiana cieczy do przemywania na środek osuszający.
4. Odwirowywanie na sucho placka filtracyjnego.
5. Odrywanie placka filtracyjnego od filtra i przeprowadzanie go w złoże fluidalne.
6. Suszenie kryształów w złożu fluidalnym w nawilżonym strumieniu azotu.
7. Odprowadzanie wysuszonych kryształów do zbiornika przyłączonego za pomocą kołnierzy, pod wpływem nagłego wzrostu ciśnienia azotu.
Poniżej opisane doświadczenia przeprowadzono w dostępnej w handlu suszarce wirówkowej.
W opisanym procesie suszenia szczególnie korzystne jest, jeśli oderwany placek filtracyjny można przeprowadzić w złoże fluidalne. Doświadczenia wykazały, że bez wymiany wody międzykrystalicznej na poniżej opisane środki osuszające nie można wytworzyć złoża fluidalnego, ponieważ powstaje mieszanina heterogeniczna składająca się z większych lub mniejszych agregatów krystalicznych, co uniemożliwia równomierne suszenie.
Inne doświadczenia wykazały, że po wymianie wody międzykrystalicznej na czysty niewodny środek osuszający, np. 100% etanol lub 100% propanol, przy pozostawaniu w kryształach białka tylko wody międzykrystalicznej (wody krystalizacyjnej), możliwe jest wytworzenie złoża fluidalnego. Możliwe jest jednak, że podczas następnej fazy suszenia nie usunie się środka osuszającego w wystarczającym stopniu, nawet po długim czasie suszenia. Wysuszone produkty wykazują resztkową zawartość środka osuszającego powyżej 5%. Z drugiej strony, podczas suszenia częściowo zostaje usunięta woda krystalizacyjna.
Obecnie nieoczekiwanie stwierdzono, że po wymianie wody międzykrystalicznej na środek osuszający, stanowiący mieszaninę wody i niewodnej substancji, można wyeliminować wspomniane wady. Po wymianie wody międzykrystalicznej na poniżej opisane środki osuszające, z oderwanego placka filtracyjnego można wytworzyć złoże fluidalne i wysuszyć kryształy białka w zadowalającym stopniu. Z użyciem nawilżonego gazu suszącego, po czasie suszenia około 1 do 4 godzin, otrzymano produkty niezawierające agregatów krystalicznych i wykazujące resztkową zawartość niewodnych substancji poniżej 0,1%.
PL 197 694 B1
Niewodne substancje jako składniki odpowiednich środków osuszających cechują się tym, że w temperaturze około 40°C mają wysoką prężność pary (to znaczy wykazują wyższą prężność pary niż woda), mieszają się w każdym stosunku z wodą i w danych warunkach są chemicznie nieaktywne wobec białek. Alkohole, takie jak np. metanol, etanol, n-propanol i izopropanol, szczególnie dobrze spełniają te wymagania. Przydatne są również mieszaniny alkoholi.
Udział niewodnych substancji w odpowiednich mieszaninach z wodą w środku osuszającym wynosi korzystnie 10 - 80%, korzystniej 15 - 60%, a zwłaszcza 20 - 80%.
W opisanym sposobie suszenia, z użyciem suchego azotu jako gazu suszącego, proces suszenia jest do końca kontrolowany kinetycznie, wskutek czego mogą wystąpić wyżej opisane niekorzystne zjawiska.
Własne doświadczenia z użyciem wilgotnego azotu jako gazu suszącego wykazały, że proces usuwania wody z kryształów podczas fazy suszenia zostaje zatrzymany i że resztkowa zawartość wody w wysuszonych kryształach jest określona przez zawartość wody w gazie suszącym. To znaczy, pod koniec fazy suszenia ustala się równowaga termodynamiczna pomiędzy zawartością wody w gazie suszącym i zawartością wody w kryształach. Resztkowa zawartość wody w wysuszonych kryształach jest zatem niezależna od ich wielkości (lub od wielkości ich powierzchni).
Poza tym, doświadczenia z użyciem suchego azotu jako gazu suszącego wykazały, że nie można usunąć niewodnego składnika środka osuszającego w wystarczającym stopniu, nawet po długim czasie suszenia. Resztkowa zawartość niewodnego składnika w wysuszonych produktach była większa niż 1%.
Nieoczekiwanie stwierdzono, że w sposobie suszenia białek krystalicznych z użyciem gazu suszącego, resztkową zawartość niewodnego składnika środka osuszającego można zmniejszyć do wartości poniżej 0,1%, gdy stosuje się gaz suszący zawierający wodę. Proces suszenia prowadzi się w suszarce wirówkowej. W sposobie według wynalazku kryształy białka po odsączeniu z zawiesiny kryształów białka łączy się ze środkiem osuszającym, stanowiącym mieszaninę wody i niewodnego rozpuszczalnika mieszającego się z wodą w każdym stosunku i o wyższej prężności pary niż woda. Szczególnie korzystne jest przy tym, jeśli kryształy białka po odsączeniu z zawiesiny kryształów białka przeprowadza się w złoże fluidalne dla wysuszenia.
Własne doświadczenia z zastosowaniem opisanego sposobu suszenia wykazały, że z użyciem jałowej i niezawierającej obcych cząstek zawiesiny kryształów i wody do przemywania w procesie filtracji w warunkach jałowych, środka osuszającego i gazu suszącego, jak również po właściwym oczyszczeniu i wyjałowieniu suszarki wirówkowej otrzymywano wysuszony produkt, niezawierający zarówno zarazków, jak i obcych cząstek.
Poniżej dokładniej objaśniono sposób według wynalazku na podstawie podanych przykładów.
Budowa i sposób działania suszarki wirówkowej
Suszarka wirówkowa składa się z poziomo usytuowanego bębna wirówki z litym płaszczem. W bębnie znajduje się cylindryczny kosz sitowy, trwale połączony z bębnem. Przestrzeń pomiędzy porowatą powierzchnią płaszcza kosza sitowego i powierzchnią litego płaszcza bębna jest podzielona w kierunku promieniowym na kilka komór. W tylnej powierzchni czołowej bębna znajdują się otwory, tak że podczas wirowania bębna można doprowadzać z zewnątrz do komór gaz (np. gaz suszący), albo można odprowadzać na zewnątrz z komór ciecz (np. roztwór macierzysty z zawiesiny kryształów). Bęben jest zamknięty z przodu stemplem, obracającym się razem z bębnem. Gdy bęben jest w stanie spoczynku, stempel można przesunąć w kierunku osiowym. Gdy stempel jest cofnięty, otwiera się nieruchoma kołowa prowadnica wylotowa, która wtedy jest dostępna z wnętrza bębna wirówki. Po otwarciu bębna można go znów powoli obracać (dla usunięcia suchego produktu).
Suszarka wirówkowa, w której przeprowadzono doświadczenia, miała bęben o średnicy 400 mm i wysokości 200 mm, powierzchnia filtracyjna kosza sitowego wynosiła 0,25 m2, a wielkość porów wynosiła 10 „m.
Wirówkę napełnia się w kierunku osiowym produktem (zawiesiną kryształów) przy obracającym się bębnie (475 obrotów/minutę) przez wewnątrz pusty wał napędowy, przy czym tworzy się placek filtracyjny (białko krystaliczne) w postaci warstwy na płaszczu sita, a przesącz jest przeciskany przez płaszcz sita do komór i z komór przez dno bębna do nieruchomej przestrzeni zewnętrznej. Przesącz (roztwór macierzysty po krystalizacji) opuszcza wirówkę przez króćce wylotowe i jest odrzucany. Następnie placek filtracyjny w taki sam sposób przemywa się wodą. Potem wodę stosowaną do przemywania w taki sam sposób wymienia się na jeden ze środków osuszających wymienionych w przykładach. Po odwirowaniu na sucho placka filtracyjnego przy wyższych obrotach (1200 obroPL 197 694 B1 tów/minutę), odrywa się go od płaszcza sita przy niższych obrotach (6 obrotów/minutę) przez wdmuchiwanie azotu i oderwany produkt przeprowadza się w złoże fluidalne i suszy. W tym celu, przez dolne komory bębna i przez dolną część płaszcza sita doprowadza się z zewnątrz (przez otwory w dnie bębna) do wewnętrznej przestrzeni bębna pulsujący strumień azotu. Gaz suszący przepływa przez obracające się złoże fluidalne produktu i opuszcza bęben przez górną część płaszcza sita i górną komorę bębna. Po zakończeniu fazy suszenia cofa się stempel, wskutek czego otwiera się nieruchoma kołowa prowadnica wylotowa. Przy niskich obrotach i pulsujących nagłych skokach ciśnienia, strumień azotu podaje wysuszony produkt do prowadnicy wylotowej. Na końcu prowadnicy wylotowej azot kieruje się do cyklonu, a wysuszony produkt zbiera się w zasobniku.
Przed wprowadzeniem do suszarki wirówkowej gaz suszący (azot) nawilża się w oddzielnej aparaturze jałową parą wodną i ogrzewa do temperatury suszenia. Reguluje się temperaturę i zawartość wody w strumieniu azotu.
P r z y k ł a d 1
W krystalizatorze z mieszadłem poddano krystalizacji, z wodnego roztworu o pH 5,5, 1000 g insuliny świńskiej z dodatkiem jonów cynkowych. Po zakończeniu krystalizacji zawiesina (około 100 litrów) zawierała romboedryczne kryształy o średniej wielkości cząstek 25 um. Jak opisano w ogólnej części opisu, poddawaną mieszaniu zawiesinę kryształów podawano w ciągu około 30 minut do suszarki wirówkowej. Placek filtracyjny przemyto około 50 litrami wody, po czym wymieniono wodę stosowaną do przemywania na 70% wodny roztwór etanolu (środek osuszający). Po oderwaniu placka filtracyjnego od płaszcza sita, produkt wysuszono w złożu fluidalnym. Podczas suszenia gaz suszący wstępnie ogrzano do temperatury 40°C i nawilżono do zawartości wody 4 g na 1 kg azotu. Po 120 minutach zakończono suszenie i produkt odprowadzono do zasobnika. Analiza suchych kryształów białka wykazała resztkową zawartość wody 5% i resztkową zawartość etanolu poniżej 0,1 %.
P r z y k ł a d 2
W krystalizatorze z mieszadłem poddano krystalizacji w warunkach jałowych, z wodnego roztworu o pH 5,5, 1500 g insuliny ludzkiej z dodatkiem jonów cynkowych. Po zakończeniu krystalizacji zawiesina (około 150 litrów) zawierała romboedryczne kryształy o średniej wielkości cząstek 20 um. Suszarkę wirówkową przed napełnieniem przemyto kolejno 10% ługiem sodowym, wodą niezawierającą cząstek, 10% kwasem octowym i ponownie wodą niezawierającą cząstek. Następnie suszarkę wirówkową wyjałowiono parą niezawierającą cząstek. Jak opisano w ogólnej części opisu, poddawaną mieszaniu zawiesinę kryształów podawano w ciągu około 45 minut do suszarki wirówkowej. Placek filtracyjny przemyto około 50 litrami wody, po czym wymieniono wodę stosowaną do przemywania na 50% wodny roztwór etanolu (środek osuszający). Obie ciecze przedtem przefiltrowano w warunkach jałowych. Po oderwaniu placka filtracyjnego od płaszcza sita, produkt wysuszono w złożu fluidalnym. Podczas suszenia przefiltrowany w warunkach jałowych gaz suszący wstępnie ogrzano do temperatury 40°C i nawilżono do zawartości wody 3 g na 1 kg azotu. Po 150 minutach zakończono suszenie i produkt odprowadzono do zasobnika, tak jak opisano powyżej. Analiza suchych kryształów białka wykazała resztkową zawartość wody 4% i resztkową zawartość etanolu poniżej 0,1%. Produkt nie zawierał zarazków i obcych cząstek.
P r z y k ł a d 3
W krystalizatorze z mieszadłem poddano krystalizacji, z wodnego roztworu o pH 5,5, 1000 g insuliny ludzkiej z dodatkiem jonów cynkowych. Po zakończeniu krystalizacji zawiesina (około 100 litrów) zawierała romboedryczne kryształy o średniej wielkości cząstek 25 um. Jak opisano w ogólnej części opisu, poddawaną mieszaniu zawiesinę kryształów podawano w ciągu około 30 minut do suszarki wirówkowej. Placek filtracyjny przemyto około 50 litrami wody, po czym wymieniono wodę stosowaną do przemywania na 30% wodny roztwór etanolu (środek osuszający). Po oderwaniu placka filtracyjnego od płaszcza sita, produkt wysuszono w złożu fluidalnym. Podczas suszenia gaz suszący wstępnie ogrzano do temperatury 40°C i nawilżono do zawartości wody 5 g na 1 kg azotu. Po 120 minutach zakończono suszenie i produkt odprowadzono do zasobnika. Analiza suchych kryształów białka wykazała resztkową zawartość wody 6% i resztkową zawartość etanolu poniżej 0,1%.
P r z y k ł a d 4
W krystalizatorze z mieszadłem poddano krystalizacji, z wodnego roztworu o pH 5,5, 1000 g insuliny świńskiej z dodatkiem jonów cynkowych. Po zakończeniu krystalizacji zawiesina (około 100 litrów) zawierała romboedryczne kryształy o średniej wielkości cząstek 30 um. Jak opisano w ogólnej części opisu, poddawaną mieszaniu zawiesinę kryształów podawano w ciągu około 30 minut do suszarki wirówkowej. Placek filtracyjny przemyto około 50 litrami wody, po czym wymieniono wodę sto6
PL 197 694 B1 sowaną do przemywania na 72% wodny roztwór propanolu (środek osuszający). Po oderwaniu placka filtracyjnego od płaszcza sita, produkt wysuszono w złożu fluidalnym. Podczas suszenia gaz suszący wstępnie ogrzano do temperatury 40°C i nawilżono do zawartości wody 4 g na 1 kg azotu. Po 140 minutach zakończono suszenie i produkt odprowadzono do zasobnika. Analiza suchych kryształów białka wykazała resztkową zawartość wody 5% i resztkową zawartość propanolu poniżej 0,1%.
P r z y k ł a d 5
W krystalizatorze z mieszadłem poddano krystalizacji, z wodnego roztworu o pH 6,3, 1500 g insuliny di-Arg z dodatkiem jonów cynkowych. Po zakończeniu krystalizacji zawiesina (około 100 litrów) zawierała romboedryczne kryształy o średniej wielkości cząstek 20 „m. Jak opisano w ogólnej części opisu, poddawaną mieszaniu zawiesinę kryształów podawano w ciągu około 30 minut do suszarki wirówkowej. Placek filtracyjny przemyto około 50 litrów wody i wymieniono wodę stosowaną do przemywania na 25% wodny roztwór propanolu (środek osuszający). Po oderwaniu placka filtracyjnego od płaszcza sita, produkt wysuszono w złożu fluidalnym. Podczas suszenia gaz suszący wstępnie ogrzano do temperatury 40°C i nawilżono do zawartości wody 3 g na 1 kg azotu. Po 160 minutach zakończono suszenie i produkt odprowadzono do zasobnika. Analiza suchych kryształów białka wykazała resztkową zawartość wody 6% i resztkową zawartość propanolu poniżej 0,1 %.
P r z y k ł a d 6
W krystalizatorze z mieszadłem poddano krystalizacji, z wodnego roztworu o pH 5,5, 1000 g insuliny ludzkiej z dodatkiem jonów cynkowych. Po zakończeniu krystalizacji zawiesina (około 100 litrów) zawierała romboedryczne kryształy o średniej wielkości cząstek 25 „m. Jak opisano w ogólnej części opisu, poddawaną mieszaniu zawiesinę kryształów podawano w ciągu około 30 minut do suszarki wirówkowej. Placek filtracyjny przemyto około 50 litrami wody i wymieniono wodę stosowaną do przemywania na 15% wodny roztwór n-propanolu (środek osuszający). Po oderwaniu placka filtracyjnego od płaszcza sita, produkt wysuszono w złożu fluidalnym. Podczas suszenia gaz suszący wstępnie ogrzewano do temperatury 40°C. Zawartość wody w gazie suszącym na początku suszenia wynosiła 15%, a podczas suszenia zmniejszono ją do 8%. Po 120 minutach zakończono suszenie i produkt odprowadzono do zasobnika. Analiza suchych kryształów białka wykazała resztkową zawartość wody 6% i resztkową zawartość propanolu poniżej 0,1%.

Claims (11)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Sposób suszenia kryształów białka z użyciem wodnej zawiesiny kryształów białka, znamienny tym, że zawiesinę kryształów białka suszy się z użyciem gazu suszącego w suszarce wirówkowej, przy czym gaz suszący przed procesem suszenia nawilża się wodą i kryształy białka po odsączeniu z zawiesiny kryształów białka łączy się ze środkiem osuszającym, stanowiącym mieszaninę wody i niewodnego rozpuszczalnika mieszającego się z wodą w każdym stosunku i mającego wyższą prężność pary niż woda.
  2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się środek osuszający zawierający rozpuszczalnik w ilości 10 - 80%.
  3. 3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że stosuje się środek osuszający zawierający rozpuszczalnik w ilości 15 - 60%.
  4. 4. Sposób według zastrz. 1 albo 2, albo 3, znamienny tym, że jako rozpuszczalnik stosuje się alkohol lub mieszaninę alkoholi.
  5. 5. Sposób według zastrz. 4 ,zzamieenytym, żż jako roozuszzczlnik stosuje się metano..
  6. 6. Sposób według zastrz. 4 zaalieenatyyl, ,ż ejko roozuszzcalnikstosuja się etano..
  7. 7. Sposób według zaat^ 4 zaalieenatyyl, ,ż ejko roozuszzcalnikstosuja się n-prOpano..
  8. 8. Sposób według zaat^ 4 zaalieenatyyl, ,ż ejko roozuszzcalnikstosuja się izopoopano..
  9. 9. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako gaz suszący stosuje się azot.
  10. 10. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że kryształy białka po odsączeniu z zawiesiny kryształów białka przeprowadza się w złoże fluidalne i poddaje suszeniu.
  11. 11. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako kryształy białka stosuje się kryształy insuliny zwierzęcej, insuliny ludzkiej lub analogów tych insulin.
PL350169A 1999-01-27 2000-01-15 Sposób suszenia kryształów białka PL197694B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19903125A DE19903125B4 (de) 1999-01-27 1999-01-27 Verfahren zur Trocknung von Kristallen von Insulin oder Insulinanaloga
PCT/EP2000/000287 WO2000044767A2 (de) 1999-01-27 2000-01-15 Verfahren zur trocknung von proteinkristallen

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL350169A1 PL350169A1 (en) 2002-11-18
PL197694B1 true PL197694B1 (pl) 2008-04-30

Family

ID=7895502

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL350169A PL197694B1 (pl) 1999-01-27 2000-01-15 Sposób suszenia kryształów białka

Country Status (20)

Country Link
US (1) US6408536B1 (pl)
EP (1) EP1185548B1 (pl)
JP (1) JP4465120B2 (pl)
KR (1) KR100652471B1 (pl)
CN (1) CN1211397C (pl)
AT (1) ATE323101T1 (pl)
AU (1) AU764353B2 (pl)
BR (1) BRPI0007713B8 (pl)
CA (1) CA2361397C (pl)
CY (1) CY1105256T1 (pl)
CZ (1) CZ300915B6 (pl)
DE (2) DE19903125B4 (pl)
DK (1) DK1185548T3 (pl)
ES (1) ES2259994T3 (pl)
HK (1) HK1044548B (pl)
HU (1) HU226697B1 (pl)
PL (1) PL197694B1 (pl)
PT (1) PT1185548E (pl)
RU (1) RU2235730C2 (pl)
WO (1) WO2000044767A2 (pl)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19903125B4 (de) * 1999-01-27 2006-01-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Verfahren zur Trocknung von Kristallen von Insulin oder Insulinanaloga
GB0219815D0 (en) * 2002-08-24 2002-10-02 Accentus Plc Preparation of small crystals
DE102004049241A1 (de) * 2004-10-09 2006-04-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Trockner und Verfahren zum Steuern eines Trockners
EP1870649A1 (en) * 2006-06-20 2007-12-26 Octapharma AG Lyophilisation targetting defined residual moisture by limited desorption energy levels
US20090271021A1 (en) * 2008-04-28 2009-10-29 Popp Shane M Execution system for the monitoring and execution of insulin manufacture
RU2014124001A (ru) 2011-11-16 2015-12-27 Байер Интеллектуэль Проперти Гмбх Устройство для фильтрации, сушки и хранения твердых веществ из суспензии
EP3688024A4 (en) * 2017-09-26 2021-07-14 Biocon Biologics India Limited INTEGRATED AUTOMATED FILTRATION FOR SEPARATING, WASHING AND DRYING PEPTIDE CRYSTALS

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4139637A (en) * 1972-12-28 1979-02-13 Maurice Rouchy Quinone derivatives useful as medicaments
US4133716A (en) * 1976-11-22 1979-01-09 Crc Compagnia Ricerca Chimca, S.A. Method for the biosynthesis of a microbial insecticide
SU1490404A1 (ru) * 1987-01-06 1989-06-30 Казанский Химико-Технологический Институт Им.С.М.Кирова Центробежна сушилка
US5234503A (en) * 1987-02-02 1993-08-10 A.E. Saley Manufacturing Co. Integrated process for producing crystalline fructose and a high-fructose, liquid-phase sweetener
DE3717370A1 (de) * 1987-05-22 1988-12-01 Hoechst Ag Mischkristalle aus insulin und insulinderivaten, verfahren zur herstellung dieser mischkristalle, diese mischkristalle enthaltende pharmazeutische mittel und ihre verwendung zur behandlung von diabetes mellitus
DE4013388A1 (de) * 1990-04-26 1991-10-31 Titus Hans Joachim Zentrifugen-trockner
US5526581A (en) * 1992-10-30 1996-06-18 Philip Morris Incorporated Process for adjusting the moisture content of organic materials
ATE203998T1 (de) * 1993-04-27 2001-08-15 Hoechst Ag Amorphe monosphärische formen von insulinderivaten
US5597893A (en) * 1994-10-31 1997-01-28 Eli Lilly And Company Preparation of stable insulin analog crystals
US5544425A (en) * 1995-05-17 1996-08-13 Mallinckrodt Medical, Inc. Aggressive convective drying in a nutsche type filter/dryer
GB9522302D0 (en) * 1995-10-31 1996-01-03 Univ Liverpool Growth promoters
US5932212A (en) * 1996-05-24 1999-08-03 Altus Biologics, Inc. Crosslinked protein crystal formulations and their use as catalysts in organic solvents
US5743840A (en) * 1996-06-24 1998-04-28 Carr Separations, Inc. Centrifuge with a heating jacket for drying collected solids
EP1005490B1 (en) * 1997-03-20 2006-03-29 Novo Nordisk A/S Zinc free insulin crystals for use in pulmonary compositions
DE19903125B4 (de) * 1999-01-27 2006-01-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Verfahren zur Trocknung von Kristallen von Insulin oder Insulinanaloga

Also Published As

Publication number Publication date
HK1044548B (zh) 2006-01-20
ES2259994T3 (es) 2006-11-01
DE50012577D1 (de) 2006-05-24
HU226697B1 (en) 2009-07-28
HUP0105427A3 (en) 2003-12-29
CA2361397C (en) 2010-02-23
KR20010090012A (ko) 2001-10-17
BRPI0007713B1 (pt) 2016-06-14
AU2541800A (en) 2000-08-18
EP1185548B1 (de) 2006-04-12
RU2235730C2 (ru) 2004-09-10
CN1211397C (zh) 2005-07-20
AU764353B2 (en) 2003-08-14
PL350169A1 (en) 2002-11-18
JP2002535415A (ja) 2002-10-22
WO2000044767A3 (de) 2001-11-08
CY1105256T1 (el) 2010-03-03
JP4465120B2 (ja) 2010-05-19
WO2000044767A2 (de) 2000-08-03
BR0007713A (pt) 2001-11-27
DK1185548T3 (da) 2006-08-14
CA2361397A1 (en) 2000-08-03
DE19903125B4 (de) 2006-01-05
CZ20012630A3 (cs) 2001-10-17
HUP0105427A2 (hu) 2002-04-29
US6408536B1 (en) 2002-06-25
CZ300915B6 (cs) 2009-09-09
DE19903125A1 (de) 2000-08-10
PT1185548E (pt) 2006-06-30
EP1185548A2 (de) 2002-03-13
HK1044548A1 (en) 2002-10-25
ATE323101T1 (de) 2006-04-15
KR100652471B1 (ko) 2006-12-01
BRPI0007713B8 (pt) 2021-05-25
CN1344273A (zh) 2002-04-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2529798C2 (ru) Способ получения лекарственных соединений, содержащих дабигатран
US20080014280A1 (en) Amorphous pregabalin and process for the preparation thereof
CS259515B2 (en) Method of high-purity cephuroxymaxetile production
PL197694B1 (pl) Sposób suszenia kryształów białka
KR100647951B1 (ko) 리보플라빈의 정제 및 결정화 방법
US7060308B2 (en) Caralluma extract products and processes for making the same
WO2013005838A1 (ja) 医薬品原薬の無菌化精製装置
JPH0546361B2 (pl)
US20040009230A1 (en) Method for isolating and drying microparticles (microspheres or microcapsules) initially dispersed or suspensed in liquid phase
MXPA01007282A (en) Method for drying protein crystals
JP2000327562A (ja) リボフラビンを含む噴霧顆粒の製造方法
US20080014263A1 (en) Amorphous eprosartan mesylate and process for the preparation thereof
US20240199690A1 (en) Method for producing peptones comprising proteins and amino acids from mucous membranes of animals to be slaughtered, and the peptones themselves
RU2097409C1 (ru) Способ получения облепихового масла или его концентрата
RU2298939C2 (ru) Способ выделения белков из клеток костного мозга
BE885911A (fr) Appareil pour detoxiquer un liquide de l'organisme
WO2004113424A1 (ja) 難水溶性物質と水溶性高分子との共沈物の製造方法
Joshi Crasto et al.(43) Pub. Date: Jan. 17, 2008
LT4311B (lt) N-{4-[bis(2-chloretil)amino]fenilacetil}-l-fenilalaninas, jo gamybos būdas, farmacinė kompozicija ir vaisto forma
EP1761328A1 (en) Product comprising a beta-lactam antibiotic
PL232544B1 (pl) Sposób izolacji i kondycjonowania błon podskorupowych z jaj