PL198438B1 - Doustna kompozycja szczepionki przeciwko biegunce - Google Patents
Doustna kompozycja szczepionki przeciwko biegunceInfo
- Publication number
- PL198438B1 PL198438B1 PL348257A PL34825799A PL198438B1 PL 198438 B1 PL198438 B1 PL 198438B1 PL 348257 A PL348257 A PL 348257A PL 34825799 A PL34825799 A PL 34825799A PL 198438 B1 PL198438 B1 PL 198438B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- vaccine
- cfa
- etec
- defined amount
- coli
- Prior art date
Links
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 title claims abstract description 20
- 229940126578 oral vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 7
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 33
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 18
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 claims abstract description 11
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 claims abstract description 11
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical group P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 claims description 2
- 108010001506 colonization factor antigens Proteins 0.000 abstract description 4
- 101710121697 Heat-stable enterotoxin Proteins 0.000 abstract description 3
- 230000000688 enterotoxigenic effect Effects 0.000 abstract 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 15
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 12
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 12
- 229960005004 cholera vaccine Drugs 0.000 description 11
- 241001076388 Fimbria Species 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010012742 Diarrhoea infectious Diseases 0.000 description 1
- 206010060891 General symptom Diseases 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 241000607734 Yersinia <bacteria> Species 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N benzene-1,2-diamine;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.NC1=CC=CC=C1N RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000011143 downstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 229940023064 escherichia coli Drugs 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000037189 immune system physiology Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000016379 mucosal immune response Effects 0.000 description 1
- 238000001558 permutation test Methods 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0258—Escherichia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
- A61K2039/541—Mucosal route
- A61K2039/542—Mucosal route oral/gastrointestinal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55544—Bacterial toxins
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
1. Doustna kompozycja szczepionki przeciw E.coli pochodzenia jelitowego powoduj acej bie- gunk e u ludzi, znamienna tym, ze zawiera, zdefiniowan a ilosc co najmniej 100 µg trzech ró znych rodzajów antygenowych czynników kolonizacji (CFAs) wybranych z grupy obejmuj acej CFAI, CFAII (CS1, CS2 i CS3) i CFA IV (CS4, CS5 i CS6), na zabitej LT-negatywnej bakterii E.coli z wyeliminowa- nym genem koduj acym ciep lochwiejn a enterotoksyn e (LT), oraz zdefiniowan a ilosc co najmniej 0,5 mg podjednostki B toksyny cholery (CTB, przy czym kompozycja szczepionki jest oczyszczona z mo zliwych sta locieplnych enterotoksyn (ST) oraz no snik korzystnie fizjologicznie akceptowalny roz- twór buforowy. 2. Doustna szczepionka wed lug zastrz. 1, znamienna tym, ze zdefiniowana ilo sc ró znych ro- dzajów CFAs stanowi dla ka zdego rodzaju CFA od 100 do 300 µg i zdefiniowana ilo sc CTB stanowi od 0,5 do 2,0 mg. 3. Doustna szczepionka wed lug zastrz. 2, znamienna tym, ze zdefiniowana ilo sc ró znych ro- dzajów CFAs stanowi 200 µg CFA/I, 200 µg CS1, 150 µg CS2, 200 µg CS4 i 150 µg CS5 i 1,0 mg CTB a fizjologicznie akceptowalny roztwór buforowy stanowi buforowany fosforanem roztwór soli. PL PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy doustnej kompozycji szczepionki przeciwko biegunce. Wynalazek dotyczy zwłaszcza doustnej kompozycji szczepionki przeciwko E.coli pochodzenia jelitowego powodującej biegunkę u ludzi.
Tło wynalazku
Bakterie i wirusy wyrażają często na swojej błonie lub wewnątrz niej białka, które w pewnych warunkach zewnętrznych, funkcjonują jako nośnik podtrzymujący dla tego organizmu, w celu związania w specyficzny sposób lub przylegania do powierzchni. Taką powierzchnią może być ściana wewnętrzna przewodu żołądkowo - jelitowego, przełyku lub każda inna biologiczna powierzchnia lub błona w ludzkim lub zwierzęcym ciele, w którym organizm ten może znaleźć optymalne środowisko dla wzrostu. Tego rodzaju błonowe białka drobnoustrojów są często nazywane antygenowymi czynnikami kolonizacji (CFA) lub fimbriami. W literaturze, dla tego samego rodzaju substancji, stosowane są inne wyrażenia, takie jak pile, hemaglutyniny, białka nitkowate lub włókienkowe. Dla wygody w opisie będzie stosować się -„CFA-, w celu objęcia wszystkich tych rodzajów białek błonowych, które także mogą mieć charakter antygenowy. Dla większości organizmów, wytwarzanie tych CFA kontrolowane jest różnymi czynnikami środowiska zewnętrznego, a one z kolei mogą aktywnie regulować geny w plazmidowym DNA.
Wykazano, że wiele bakterii będących przedmiotem zainteresowania medycyny, wytwarza związane z błoną CFA. Wśród nich, najważniejszymi dla człowieka są organizmy, które kolonizują przewód żołądkowo - jelitowy i drogi oddechowe. Przykładami organizmów, które kolonizują przewód żołądkowo - jelitowy mikroorganizmy pochodzenia jelitowego (enterogeniczrie): Escherichia coli, Vibrio cholerae, Helicobacter pylori, Campylobacter, Shigellae, Salmonellae i Yersinia.
Przedmiotem szczególnego zainteresowania medycznego jest Escherichia coli (ETEC), ponieważ jest ona jedną z głównych przyczyn biegunki podróżnej oraz biegunki u dzieci, w krajach rozwijających się i powoduje więcej niż jeden bilion przypadków biegunki i co najmniej 1 milion przypadków śmierci rocznie wśród dzieci.
E.coli pochodzenia jelitowego charakteryzująca się tym, że wytwarza ciepłochwiejną enterotoksynę (LT) i/lub ciepłostałą enterotoksynę (ST).
W WO 92/14487 ujawniono sposób wytwarzania i zastosowanie doustnej szczepionki ETEC. Bakterie ETEC z CFAs i z ich subkomponentami (to jest antygenami CS) są hodowane w specjalnych warunkach. Są one następnie zabijane formaliną, i bakterie te mogą być stosowane jako doustna szczepionka przeciwko bakteriom ETEC. Dlatego antygeny CFA i CS będą działać jako antygeny w procesie immunologicznym zachodzącym w jelicie.
Istniały problemy z wyskalowaniem produkcji bakterii ETEC posiadających CFAs i rozwiązanie tych problemów było ujawnione w Międzynarodowym Zgłoszeniu Patentowym WO 95/33825.
Jak wykazano preparaty szczepionek ETEC zawierające podjednostkę B-toksyny cholery, która antygenowo jest podobna do ciepłochwiejnej toksyny ETEC oraz antygenowy czynnik kolonizacji ETEC, stymulowały odpowiedź immunologiczną śluzówki u szwedzkich wolontariuszy (Jertborn M., i wsp., Vaccine, 1997; 16;255-260).
Dla bezpieczeństwa produktu i skuteczności, kompozycja szczepionki musi być niezakaźna i musi zawierać zdefiniowane ilości aktywnych składników, które są takie same od wsadu do wsadu.
Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy nowej kompozycji szczepionki, która oparta jest na LT-negatywnych, zabitych bakteriach E.coli pochodzenia jelitowego, zawierających zdefiniowane ilości co najmniej trzech różnych rodzajów antygenów czynnika kolonizacji i podjednostkę B toksyny cholery (CTB), która jest antygenowo podobna do ciepłochwiejnej enterotoksyny ETEC. Następnie, kompozycja szczepionki jest oczyszczana z ewentualnych ciepłostałych enterotoksyn (ST).
LT-negatywne bakterie ETEC są albo wybierane laboratoryjnie z naturalnie genetycznie modyfikowanych szczepów lub otrzymywane techniką rekombinacji.
Ciepłostała enterotoksyna, która jest porównywalnie małym białkiem o 19 resztach aminokwasowych jest wymywana podczas dolno-strumieniowego przetwarzania kompozycji szczepionki.
Eliminacja możliwości wytwarzania przez bakterię ciepłochwiejnej enterotoksyny i usuwanie możliwości obecności ciepłostałej enterotoksyny oznacza bezpieczny produkt.
Zabijanie bakterii powinno być przeprowadzane w ten sposób, że antygenowe czynniki kolonizacji są zasadniczo zachowywane, na przykład przez średnią inaktywację formaliną.
PL 198 438 B1
A zatem, niniejszy wynalazek dotyczy kompozycji szczepionki doustnej przeciwko E.coli pochodzenia jelitowego, powodującej biegunkę u ludzi, która zawiera zdefiniowaną ilość co najmniej 100 ąg trzech różnych rodzajów antygenowych czynników kolonizacji (CFAs) wybranych z grupy obejmującej: CFAI, CFAII (CS1, CS2 i CS3) i CFAIV (CS4, CS5 i CS6), na zabitej LT-negatywnej bakterii E.coli z wyeliminowanym genem kodującym ciepłochwiejną enterotoksynę (LT), razem z zdefiniowaną ilością 0,5 mg podjednostki B toksyny cholery (CTB) przy czym kompozycja szczepionki jest oczyszczona z ewentualnych stałocieplnych enterotoksyn (ST), oraz nośnik, którym korzystnie może być roztwór buforowy.
W korzystnej postaci wynalazku zdefiniowana ilość różnych typów CFAs stanowi dla każdego rodzaju CFA od 100 do 300 ąg i zdefiniowana ilość CTB stanowi od 0,5 do 2,0 mg.
W najbardziej korzystnej postaci wynalazku, zdefiniowana ilość różnych rodzajów CFAs stanowi 200 ąg CFA/I 200 ąg CS1, 150 ąg CS2, 200 ąg CS4 i 150 ąg CS5 i 1,0 mg CTB i fizjologicznie akceptowalny roztwór soli buforowanej fosforanem.
Dawka kompozycji szczepionki będzie zawierała około 1011 bakterii.
Kompozycja szczepionki podawana jest osobom jako napój w szklance wody zawierającej bufor węglanowy taki jak wodorowęglan sodowy.
Doświadczenia
Oznaczanie ilości różnych antygenów czynników kolonizacji
Antygeny fimbriowe E.coli wykrywa się przez zastosowanie hamowania ELISA, zasadniczo tak jak opisano przez Lopez-Vidal Y., i wsp. w Journal of Clinical Microbiology, vol 26, 1967-1972 (1988). W skrócie, analizowaną próbkę bakteryjną inkubuje się razem z ustaloną ilością przeciwciała monoklonalnego skierowanego przeciwko CFA. Po inkubacji, mieszaninę przenosi się na płytki wstępnie pokryte CFA, na których pozostałe monoklonalne przeciwciało może wiązać się do CFA. Związane przeciwciało jest uwidaczniane przez dodanie peroksydazy chrzanowej skoniugowanej z imunoglobuliną anty-mysią. Jako substrat stosuje się dwuchlorowodorek o-fenylenodiaminy w buforze cytrynianowym. Gęstość optyczną mierzy się przy 450 nm na spektrofotometrze przyłączonym do komputera wyposażonego w oprogramowanie danych obniżenia gęstości. Obserwowana gęstość optyczna jest odwrotnie proporcjonalna do stężenia przeciwciała w próbce.
Sporządzanie kompozycji szczepionki
Partia utworzonej doustnej szczepionki ETEC pochodziła z mas zabitych formaliną monowalentnych szczepów odpowiednio CFA/I SBL szczep 101, CS1 SBL szczep 106, CS2 SBL szczep 107, CS4 SBL szczep 104, CS5 SBL szczep 105 i masy monowalentnej oczyszczonego rCTB.
Kompozycje
| Nazwy składników | Jednostka | Działanie |
| Substancje aktywne 1. Monowalentna masa ogólna: E. coli, CFA/I SBL-101, zabite formaliną 2. Monowalentna masa ogólna: E. coli, CS1 SBL-106, zabite formaliną 3. Monowalentna masa ogólna: E. coli, CS2 SBL-107, zabite formaliną 4. Monowalentna masa ogólna: E. coli, C34 SBL-104, zabite formaliną 5. Monowalentna masa ogólna: E. coli, CS5 SBL-105, zabite formaliną 6. Monowalentna masa ogólna: rCTB, oczyszczone | 2,0x102 pg fimbrii 2,0x102 pg fimbrii 1,5x102 pg fimbrii 2,0x102 pg fimbrii 1,5x102 pg fimbrii 1,0 pg | W celu wywołania odpowiedzi immunologicznej przeciwko bakteriom ETEc |
| Nośnik: 7. PBS (WHO) bufor, pH 7,2-7,4 | Tyle ile potrzeba do 6,0 ml | Bufor |
Szczepy SBL-104 i SBL-105 wytwarzały także CS6, lecz ilość jego nie była oznaczona. Szczep SBL-107 wytwarzał również CS3 lecz ilości jego nie oznaczano.
Pilotowe badania oceniające skuteczność i reaktogeniczność doustnej szczepionki ETEC - podjednostka B z zabitych całych komórek, według wynalazku, przeciwko biegunce podróżnej
Zbadano trzy grupy podróżnych z Austrii w podwójnych, ślepych losowych, kontrolowanych przez placebo badaniach pilotowych. Ponadto, dodatkowo do szczepionki ETEC włączono również doustną szczepionkę cholery - podjednostka B, z całych komórek, ponieważ poprzednio wykazano
PL 198 438 B1 zarówno u podróżnych z Bangladeszu (Clemens J., i wsp., J Infect Dis, 1988, 158:372-377) jak i u Finów podróżujących do Maroka (Peltola H., i wsp. Lancet, 1991, 338:1285-89) znaczącą ochronę przeciwko biegunce E.coli-LT.
Włączono całkowitą liczbę 250 wolontariuszy, dorosłych jak i dzieci, którzy zapisali się na wycieczkę do krajów tropikalnych i subtropikalnych (44 różne kraje w Afryce, Azji Ameryce Łacińskiej) z zamiarem pozostania tam co najmniej 7 do 23 dni. Dwunastu z nich wycofało się z powodu naruszenia protokołu, tak więc badana populacja obejmowała 238 osiem osób i objęta protokołem populacja całkowicie spełniła wszystkie jego wymagania, obejmowała 187 podróżnych. Dwie kolejne dawki szczepionki lub placebo były podane w przedziałach 7-21 dni, nie mniej niż 7 dni i nie więcej niż 30 dni przed odprawą. Objawy po szczepieniu i przypadki niepomyślne były wykazywane po obu dawkach. Wszyscy wolontariusze zaklasyfikowani do tych badań wyposażeni byli w dziennik codziennych zapisów w celu monitorowania epizodów biegunki podróżnej w czasie pobytu za granicą, oraz w środki przewożenia (Portagerm i Cary Blair probówki) dla zbierania próbek kału w przypadku biegunki. Podróżni byli poinstruowani co do dostarczenia natychmiast po powrocie ich dziennika podróży i probówek w środkach do ich przewozu. Próbki krwi do badania immunologiczności były pobrane od 73 wolontariuszy przed i po pierwszej i drugiej dawce szczepionki lub placebo. Po pierwszej dawce, próbkę zbierano natychmiast przed podaniem drugiej dawki i po drugiej dawce próbka krwi była pobierana po powrocie.
Preparatami podanymi trzem losowym grupom podróżnych były: szczepionka ETEC, zawierająca 1 mg rekombinowanej podjednostki B toksyny cholery plus 1011 zabitych formaliną bakterii ETEC z pięciu szczepów ETEC wyrażających najbardziej powszechne antygeny czynnika kolonizacji (CFA's), takie jak: CFA I, CFA II (CS1, CS2 i CS3) i CFA IV (CS4; CS5 i CS6); szczepionka cholery z całych komórek podjednostka B, (zarejestrowana w Szwecji od 1992 r.), zawierająca 1 mg rekombinantowej podjednostki B toksyny cholery i 10” zabitych całych komórek (Inaba, Ogawa, klasycznej i El Tor); placebo zabierające 10” zabitych E.coli K12. Preparaty były zawieszane w 4 ml buforu i każda dawka szczepionki lub placebo była podawana jako napój w 150 cm3 roztworu wodorowęglanu sodowego. Izolacja i charakteryzowanie bakterii ETEC i anty-CTB IgA ELISA były przeprowadzone, jak opisano (Jertborn M., i wsp. ibid).
250 wolontariuszy otrzymało jedną dawkę szczepionki lub placebo, z których 246 - otrzymało także dawkę drugą. Protokół badań został zatwierdzony przez miejscowy Komitet Etyki przed rozpoczęciem badań. Pisemne zgody wolontariuszy otrzymano przed losowaniem.
Wyniki reaktogeniczności są następujące: w sumie 43 wolontariuszy (17%) miało po pierwszej dawce od średnich do niewielkich żołądkowo - jelitowych lub ogólnych objawów; 13 (16%) w grupie placebo, 13 (16%) w grupie szczepionki cholery i 17 (20%) w grupie szczepionki ETEC. Po drugiej dawce 20 (8%) miało objawy, 6 (7%) w placebo, 7 (9%) w grupie szczepionki cholery i 7 (8%) w grupie szczepionki ETEC. Statystycznie nie było różnic w proporcji wolontariuszy zgłaszających objawy pomiędzy tymi grupami badanymi.
Ocena skuteczności szczepionki, przypadek biegunki ETEC był definiowany jako taki, przy którym we wstępnie badanych stolcach występują trzy lub więcej płynnych stolców oraz ETEC, lecz nie ma innych patogenów. W populacji Per Protocol w grupie placebo wystąpienie ETEC stanowiło 8% to jest 5 przypadków, 10% (6 przypadków) w grupie szczepionki cholery i 2% (1 przypadek) w grupie szczepionki ETEC. Skuteczność szczepionki biorąc pod uwagę szczepionkę ETEC w porównaniu do placebo była 79% (p=0,119) i w porównaniu do szczepionki cholery 84% (p=0,0496). Porównanie poziomów biegunki ETEC było wykonane jednostronnym dokładnym testem Fischera.
Wszystkie izolaty ETEC w protokole populacji Per Protocol wyrażały czynniki kolonizacji zawarte w szczepionce.
Szczepionka cholery jak porównano z grupą placebo nie dawała wykrywalnej ochrony przeciwko ETEC, ale trzeba wspomnieć, że tylko dwa przypadki ETEC w grupie szczepionki cholery spowodowane były bakteriami wytwarzającymi wyłącznie ciepłochwiejną enterotoksynę (LT) przeciwko której szczepionka cholery (poprzez jej podjednostkę-B) może teoretycznie działać.
Zatem, ze względu na fakt, że obecne w tej grupie były prawie wyłącznie szczepy LT-negatywne, szczepionka cholery wydaje się nie mieć żadnego skutku.
Pomimo tych wyników, trzeba pamiętać, że próbka stolca, uzyskana tak jak opisano, mogła być źródłem błędu. Przy używaniu środków do transportu, istnieje ryzyko straty wrażliwych patogenów, podczas gdy mniej wrażliwe, takie jak bakterie E.coli przeżywają, dając w wyniku fałszywe pozytywne przypadki biegunki ETEC (patrz definicja biegunki ETEC). Dlatego zatem proporcja biegunki ETEC
PL 198 438 B1 mogła być zawyżona. Jednakże jest nieprawdopodobnym, aby ewentualne fałszywe wyniki pozytywne były rozłożone nierównomiernie pomiędzy grupami badanymi.
Jeżeli chodzi o immunogeniczność, znaczący wzrost przeciwciał przeciwko podjednostce B toksyny cholery (CTB) można było wykazać przy pomocy środków anty-CTB IgA ELISA w grupie otrzymującej szczepionkę ETEC (średnia geometryczna zmian przed- i poszczepiennych: 7,8 do 58,7 po pierwszym i 62,6 po drugiej dawce; serokonwersja po drugiej dawce: 91%) i w grupie otrzymującej szczepionkę cholery (7,6 do 54,6 po pierwszej i 60,1 po drugiej dawce; serokonwersja 100%). Grupa placebo nie wykazywała żadnego znaczącego wzrostu odpowiedzi anty-CTB (7,9 do 8,3 po pierwszej i 11,8 po drugiej dawce; serokonwersja 29%).
Tak więc - jakkolwiek szczepionka WC CTB-cholery indukowała bardzo dobrą odpowiedź przeciwko podjednostce B - nie obserwowano znaczącego wpływu tej szczepionki na biegunkę ETEC. Można było głównie przypisać to temu, że większość szczepów ETEC izolowanych od tych wolontariuszy, wytwarzało jedynie ST (9 z 12) i dlatego nie można było zapobiegać za pomocą szczepionki cholery. Oczywiście przeciwciała anty-CFA są bardzo ważne zwłaszcza dla ochrony przeciwko biegunce spowodowanej przez jedynie ST-ETEC.
Obecne wyniki są pierwszymi dającymi podstawę ludziom do roboczej hipotezy, że immunogeniczność anty-CTA/CS indukowana doustną szczepionką ETEC może zabezpieczać przeciwko biegunce spowodowanej przez ETEC wytwarzającej tylko ST.
Claims (3)
1. Doustna kompozycja szczepionki przeciw E.coli pochodzenia jelitowego powodującej biegunkę u ludzi, znamienna tym, że zawiera, zdefiniowaną ilość co najmniej 100 pg trzech różnych rodzajów antygenowych czynników kolonizacji (CFAs) wybranych z grupy obejmującej CFAI, CFAII (CS1, CS2 i CS3) i CFA IV (CS4, CS5 i CS6), na zabitej LT-negatywnej bakterii E.coli z wyeliminowanym genem kodującym ciepłochwiejną enterotoksynę (LT), oraz zdefiniowaną ilość co najmniej 0,5 mg podjednostki B toksyny cholery (CTB, przy czym kompozycja szczepionki jest oczyszczona z możliwych stałocieplnych enterotoksyn (ST) oraz nośnik korzystnie fizjologicznie akceptowalny roztwór buforowy.
2. Doustna szczepionka według zastrz. 1, znamienna tym, że zdefiniowana ilość różnych rodzajów CFAs stanowi dla każdego rodzaju CFA od 100 do 300 pg i zdefiniowana ilość CTB stanowi od 0,5 do 2,0 mg.
3. Doustna szczepionka według zastrz. 2, znamienna tym, że zdefiniowana ilość różnych rodzajów CFAs stanowi 200 pg CFA/I, 200 pg CS1, 150 pg CS2, 200 pg CS4 i 150 pg CS5 i 1,0 mg CTB a fizjologicznie akceptowalny roztwór buforowy stanowi buforowany fosforanem roztwór soli.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE9804415A SE515285C2 (sv) | 1998-12-18 | 1998-12-18 | Oralt vaccin mot diarré |
| PCT/SE1999/002306 WO2000037106A1 (en) | 1998-12-18 | 1999-12-09 | Oral vaccine against diarrhea |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL348257A1 PL348257A1 (en) | 2002-05-20 |
| PL198438B1 true PL198438B1 (pl) | 2008-06-30 |
Family
ID=20413742
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL348257A PL198438B1 (pl) | 1998-12-18 | 1999-12-09 | Doustna kompozycja szczepionki przeciwko biegunce |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP1444987A3 (pl) |
| JP (1) | JP2002532562A (pl) |
| KR (1) | KR20010101233A (pl) |
| CN (1) | CN1330552A (pl) |
| AP (1) | AP1426A (pl) |
| AU (1) | AU778223B2 (pl) |
| BR (1) | BR9916278A (pl) |
| CA (1) | CA2352309A1 (pl) |
| CZ (1) | CZ20011947A3 (pl) |
| EE (1) | EE200100309A (pl) |
| HR (1) | HRP20010433A2 (pl) |
| HU (1) | HUP0104552A3 (pl) |
| ID (1) | ID29857A (pl) |
| IL (1) | IL143808A0 (pl) |
| IS (1) | IS5967A (pl) |
| MX (1) | MXPA01006200A (pl) |
| NO (1) | NO20012889L (pl) |
| NZ (1) | NZ527559A (pl) |
| OA (1) | OA11729A (pl) |
| PL (1) | PL198438B1 (pl) |
| SE (1) | SE515285C2 (pl) |
| TR (1) | TR200101542T2 (pl) |
| WO (1) | WO2000037106A1 (pl) |
| YU (1) | YU41701A (pl) |
| ZA (1) | ZA200104362B (pl) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2437899C (en) * | 2001-02-13 | 2012-05-15 | Gregory M. Glenn | Vaccine for transcutaneous immunization against etec-caused traveler's diarrhea |
| GB0121998D0 (en) * | 2001-09-11 | 2001-10-31 | Acambis Res Ltd | Attenuated bacteria useful in vaccines |
| EP1543836A1 (en) * | 2003-12-17 | 2005-06-22 | Berna Biotech AG | Recombinant Vibrio cholerae strain and vaccine comprising said strain |
| WO2008133926A1 (en) * | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Celldex Therapeutics, Inc: | V. cholerae hyperexpressing recombinant cholera toxin b subunit showing dual immunogenicity |
| CA2846354C (en) * | 2011-09-12 | 2023-04-25 | Scandinavian Biopharma Holding Ab | Vaccine for protection against etec-induced diarrhea comprising dmlt |
| EP2750701B1 (en) | 2011-09-12 | 2015-10-21 | Scandinavian Biopharma Holding AB | Method for increasing etec cs6 antigen presentation on cell surface and products obtainable thereof |
| RU2753410C2 (ru) * | 2020-01-14 | 2021-08-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ получения анатоксин-вакцины против эшерихиоза животных |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE9100556D0 (sv) * | 1991-02-26 | 1991-02-26 | Holmgren Jan | Preparation and use of formalin-killed colonization-factor-antigen (cfa)-expressing e coli organisms for vaccination against enteric infection/diarrhea caused by enterotoxigenic e coli bacteria in humans |
-
1998
- 1998-12-18 SE SE9804415A patent/SE515285C2/sv not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-12-09 WO PCT/SE1999/002306 patent/WO2000037106A1/en not_active Ceased
- 1999-12-09 JP JP2000589216A patent/JP2002532562A/ja not_active Withdrawn
- 1999-12-09 NZ NZ527559A patent/NZ527559A/en unknown
- 1999-12-09 AP APAP/P/2001/002174A patent/AP1426A/en active
- 1999-12-09 YU YU41701A patent/YU41701A/sh unknown
- 1999-12-09 HU HU0104552A patent/HUP0104552A3/hu unknown
- 1999-12-09 EE EEP200100309A patent/EE200100309A/xx unknown
- 1999-12-09 EP EP04010662A patent/EP1444987A3/en not_active Withdrawn
- 1999-12-09 TR TR2001/01542T patent/TR200101542T2/xx unknown
- 1999-12-09 AU AU30889/00A patent/AU778223B2/en not_active Ceased
- 1999-12-09 IL IL14380899A patent/IL143808A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-12-09 OA OA1200100151A patent/OA11729A/en unknown
- 1999-12-09 ID IDW00200101304A patent/ID29857A/id unknown
- 1999-12-09 CZ CZ20011947A patent/CZ20011947A3/cs unknown
- 1999-12-09 MX MXPA01006200A patent/MXPA01006200A/es not_active IP Right Cessation
- 1999-12-09 EP EP99964847A patent/EP1140159A1/en not_active Withdrawn
- 1999-12-09 CA CA002352309A patent/CA2352309A1/en not_active Abandoned
- 1999-12-09 HR HR20010433A patent/HRP20010433A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1999-12-09 KR KR1020017007484A patent/KR20010101233A/ko not_active Ceased
- 1999-12-09 CN CN99814553A patent/CN1330552A/zh active Pending
- 1999-12-09 PL PL348257A patent/PL198438B1/pl unknown
- 1999-12-09 BR BR9916278-4A patent/BR9916278A/pt not_active Application Discontinuation
-
2001
- 2001-05-28 ZA ZA200104362A patent/ZA200104362B/en unknown
- 2001-06-12 NO NO20012889A patent/NO20012889L/no not_active Application Discontinuation
- 2001-06-13 IS IS5967A patent/IS5967A/is unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ID29857A (id) | 2001-10-18 |
| YU41701A (sh) | 2005-07-19 |
| KR20010101233A (ko) | 2001-11-14 |
| SE515285C2 (sv) | 2001-07-09 |
| HRP20010433A2 (en) | 2002-06-30 |
| NO20012889D0 (no) | 2001-06-12 |
| ZA200104362B (en) | 2002-01-14 |
| IL143808A0 (en) | 2002-04-21 |
| EP1444987A2 (en) | 2004-08-11 |
| SE9804415L (sv) | 2000-06-19 |
| IS5967A (is) | 2001-06-13 |
| EP1140159A1 (en) | 2001-10-10 |
| NO20012889L (no) | 2001-06-12 |
| CA2352309A1 (en) | 2000-06-29 |
| WO2000037106A1 (en) | 2000-06-29 |
| PL348257A1 (en) | 2002-05-20 |
| AP1426A (en) | 2005-06-06 |
| SE9804415D0 (sv) | 1998-12-18 |
| HUP0104552A2 (hu) | 2002-04-29 |
| NZ527559A (en) | 2005-01-28 |
| EE200100309A (et) | 2002-08-15 |
| EP1444987A3 (en) | 2005-12-21 |
| MXPA01006200A (es) | 2002-04-17 |
| BR9916278A (pt) | 2001-09-04 |
| AU778223B2 (en) | 2004-11-25 |
| TR200101542T2 (tr) | 2001-10-22 |
| AU3088900A (en) | 2000-07-12 |
| CZ20011947A3 (cs) | 2001-12-12 |
| HUP0104552A3 (en) | 2002-08-28 |
| JP2002532562A (ja) | 2002-10-02 |
| CN1330552A (zh) | 2002-01-09 |
| OA11729A (en) | 2005-05-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kotloff et al. | Safety and immunogenicity of oral inactivated whole-cell Helicobacter pylori vaccine with adjuvant among volunteers with or without subclinical infection | |
| Simanjuntak et al. | Safety and immunogenicity of single-dose live oral cholera vaccine CVD 103-HgR in 5-9-year-old Indonesian children | |
| Katz et al. | Oral immunization of adult volunteers with microencapsulated enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) CS6 antigen | |
| Levine et al. | Host–Salmonella interaction: human trials | |
| Su-Arehawaratana et al. | Safety and immunogenicity of different immunization regimens of CVD 103-HgR live oral cholera vaccine in soldiers and civilians in Thailand | |
| Kotloff et al. | Deletion in the Shigella enterotoxin genes further attenuates Shigella flexneri 2a bearing guanine auxotrophy in a phase 1 trial of CVD 1204 and CVD 1208 | |
| Jertborn et al. | Safety and immunogenicity of an oral recombinant cholera B subunit—whole cell vaccine in Swedish volunteers | |
| Tacket et al. | Safety and immunogenicity of Live Oral Cholera Vaccine Candidate CVD 110, a Δ ctxA ctxA zot zot ace Derivative of El Tor Ogawa Vibrio Cholerae | |
| Stoll et al. | Local and systemic antibody responses to naturally acquired enterotoxigenic Escherichia coli diarrhea in an endemic area | |
| Åhrén et al. | Intestinal antibody response after oral immunization with a prototype cholera B subunit—colonization factor antigen enterotoxigenic Escherichia coli vaccine | |
| Qadri et al. | Safety and immunogenicity of an oral, inactivated enterotoxigenic Escherichia coli plus cholera toxin B subunit vaccine in Bangladeshi children 18–36 months of age | |
| Taylor et al. | Evaluation of a bivalent (CVD 103-HgR/CVD 111) live oral cholera vaccine in adult volunteers from the United States and Peru | |
| Qadri et al. | Reduced doses of oral killed enterotoxigenic Escherichia coli plus cholera toxin B subunit vaccine is safe and immunogenic in Bangladeshi infants 6–17 months of age: dosing studies in different age groups | |
| KR100628657B1 (ko) | ＡｒｏＣ, ＯｍｐＦ 및 ＯｍｐＣ 유전자 각각에 비복귀돌연변이로 약독화된 백신에 유용한 박테리아 | |
| LEVINE et al. | Pediatric diarrhea: the challenge of prevention | |
| US6558678B1 (en) | Preparation and use of formalin-killed colonization-factor-antigen (cfa)-expressing e. coli organisms for vaccination against enteric infection/diarrhea caused by enterotoxigenic e. coli bacteria in humans | |
| Sack et al. | Evaluation of Peru-15, a new live oral vaccine for cholera, in volunteers | |
| Lu et al. | L-DBF elicits cross protection against different serotypes of Shigella spp | |
| PL198438B1 (pl) | Doustna kompozycja szczepionki przeciwko biegunce | |
| Tacket et al. | Lack of immune response to the Vi component of a Vi-positive variant of the Salmonella typhi live oral vaccine strain Ty21a in human studies | |
| Kobayashi et al. | Tetravalent rhesus rotavirus vaccine in young infants | |
| Begue et al. | Immunogenicity in Peruvian volunteers of a booster dose of oral cholera vaccine consisting of whole cells plus recombinant B subunit | |
| Holmgren et al. | Enterotoxigenic Escherichia coli diarrhea in an endemic area prepares the intestine for an anamnestic immunoglobulin A antitoxin response to oral cholera B subunit vaccination | |
| Clemens et al. | Impaired immune response to natural infection as a correlate of vaccine failure in a field trial of killed oral cholera vaccines | |
| Gilligan et al. | Oral enteric vaccines—clinical trials |