PL199642B1 - Preparat bakteriofagowy o podwyższonej trwałości oraz zastosowanie blokowego kopolimeru tlenku etylenu i tlenku propylenu - Google Patents
Preparat bakteriofagowy o podwyższonej trwałości oraz zastosowanie blokowego kopolimeru tlenku etylenu i tlenku propylenuInfo
- Publication number
- PL199642B1 PL199642B1 PL356897A PL35689702A PL199642B1 PL 199642 B1 PL199642 B1 PL 199642B1 PL 356897 A PL356897 A PL 356897A PL 35689702 A PL35689702 A PL 35689702A PL 199642 B1 PL199642 B1 PL 199642B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- bacteriophage
- bacteriophages
- poloxamers
- poloxamer
- stabilizing agent
- Prior art date
Links
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 title claims abstract description 53
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 title claims description 8
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 12
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 claims description 40
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical group C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 claims description 13
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 11
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 9
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 6
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 229920005682 EO-PO block copolymer Polymers 0.000 abstract description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 5
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 description 5
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 4
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 3
- -1 for example Substances 0.000 description 3
- 125000006353 oxyethylene group Chemical group 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N N-Methyl-D-aspartic acid Chemical compound CN[C@@H](C(O)=O)CC(O)=O HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920002004 Pluronic® R Polymers 0.000 description 1
- 229920002509 Poloxamer 182 Polymers 0.000 description 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000003889 chemical engineering Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003026 cod liver oil Substances 0.000 description 1
- 235000012716 cod liver oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 210000001951 dura mater Anatomy 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003617 erythrocyte membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 238000012637 gene transfection Methods 0.000 description 1
- 210000004295 hippocampal neuron Anatomy 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 208000012947 ischemia reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 229940093426 poloxamer 182 Drugs 0.000 description 1
- 229940044476 poloxamer 407 Drugs 0.000 description 1
- 229920001987 poloxamine Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 210000003497 sciatic nerve Anatomy 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 229920000428 triblock copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/12011—Details dsRNA Bacteriophages
- C12N2795/12032—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Zaprezentowano preparaty bakteriofagowe o podwyższonej stabilności oraz nowe zastosowanie blokowych kopolimerów tlenku etylenu i tlenku propylenu do stabilizowania aktywności preparatów bakteriofagowych. Stabilizowane preparaty bakteriofagowe o podwyższonej trwałości znajdują zastosowanie w lecznictwie.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są preparaty bakteriofagowe o podwyższonej stabilności oraz nowe zastosowanie blokowych kopolimerów tlenku etylenu i tlenku propylenu. Stabilizowane preparaty bakteriofagowe o podwyższonej trwałości znajdują zastosowanie w lecznictwie.
Poloxamery to nazwa chemiczna określająca grupę związków będących trójblokowymi kopolimerami tlenku etylenu i tlenku propylenu. Cząsteczka posiada symetryczną budowę przedstawioną poniżej ch3
HO-(CH2CH2O)x -(CH2CHO)y -(CH2CH2O)x -h A B A
Część B tworzy hydrofobowy rdzeń zbudowany z glikolu polipropylenowego (y określa liczbę jednostek) polioksyetylowany (x liczba jednostek oksyetylenowych) na obu końcowych grupach hydroksylowych - części A. Krótki łańcuch węglowy jednostek oksyetylenowych stanowi o hydrofilowym charakterze modułów A.
Związki o analogicznej budowie lecz odwróconej kolejności modułów czyli B-A-B zwane są meroxapolami. Poloxamery i meroxapole zostały wprowadzone na rynek w latach 50-tych przez firmę BASF Corp. pod nazwą Pluronic S i Pluronic R.
Poloxamery są związkami amfifilowymi rozpuszczalnymi w wodzie i solwentach organicznych. Stosunek części hydrofobowej do hydrofilowej może być łatwo zmieniany co umożliwia uzyskanie szerokiej gamy związków o poszukiwanych właściwościach. Masa cząsteczkowa dostępnych na rynku poloxamerów zawiera się w przedziale od 1100 do 14000. Związki te z racji swych amfifilowych własności są dobrymi dyspersantami, emulgatorami, posiadają zdolność tworzenia żeli. Meroxapole w porównaniu do poloxamerów wykazują mniejsze właściwości pieniące (są stosowane jako antypieniacze) i nie tworzą żeli. Poloxamery znalazły szerokie zastosowanie w technice, medycynie, przemyśle kosmetycznym, badaniach naukowych.
Wykazano, że poloksamery tworzą kompleksy z DNA i białkami, jednocześnie są chemicznie względnie inertne i co bardzo istotne nietoksyczne dla zwierząt, ludzi oraz mikroorganizmów i komórek ekariotycznych. Asocjują z membranami biologicznymi. Poloxsamery wydatnie zwiększają transfekcje genowe i posiadają przy tym własności adjuwantowe. W związku z tym, prowadzone są badania nad zastosowaniem poloxsamerów do tworzenia szczepionek DNA. Poloxamer pełni rolę cząsteczki nośnikowej umożliwiającej wniknięcie cząsteczki DNA do komórki, chroni ją przed strawieniem, asocjuje z wytworzonym antygenem i pobudza wytworzenie odpowiedzi immunologicznej (Kabanov AV, Lemieux P, Vinogradov S, Alakhov V. Pluronic block copolymers: novel functional molecules for gene therapy Adv Drug Deliv Rev. 2002 Feb 21; 54 (2): 223-33. Review).
Żele tworzone przez poloxamery odznaczają się unikalnymi właściwościami, stan ciekły utrzymuje się w niskich temperaturach, żelifikacja następuje w temperaturach podwyższonych (co jest istotne w zakresie fizjologicznym). Żele poloxamerowe stosuje się np. w mikrobiologii do zestalania podłoży. Ochłodzenie płytki z hodowlą umożliwia oddzielenie mikroorganizmu od podłoża poprzez wirowanie. Inne badania koncentrują się nad zastosowaniem takich żeli do aplikacji leków i hormonów (Paavola, A.; Yliruusi, J.; Kajimoto, Y.; Kalso, E.; Wahlstrom, T.; Rosemberg, P., 1995. Controlled release of lidocaine from injectable gels and efficacy in rat sciatic nerve błock. Pharm. Res. 12, 19972002; Paavola, A.; Yliruusi, J.; Rosemberg, P., 1998. Controlled release and dura mater permeability of lidocaine and ibuprofen from injectable poloxamer-based gels. J. Cont. Rel. 52, 169-178.; Miyazaki,
S.; Yokouchi, C.; Nakamura, T.; Hashiguchi, N.; Hou, W.-M.; Takada, M., 1986. Pluronic F-127 gels as a novel vehicle for rectal administration on indomethacin. Chem. Pharm. Bull. 34, 1801-1808; Kim MR, Park TG. Temperature-responsive and degradable hyaluronic acid/Pluronic composite hydrogels for controlled release of human growth hormone. J Control Release 2002 Apr 23; 80 (1-3): 69-77). Roztwory poloksamerów wykazują zdolność do stabilizowania białek, dodanie poloxamerów (np. Pluronic F127) do roztworów peptydów i białek pomaga zachować ich aktywność biologiczną.
W związku z tym, stosuje się poloxamery w przemyśle farmaceutycznym do stabilizacji leków.
PL 199 642 B1
W biotechnologii wykorzystuje się bioreaktory (fermentory) do hodowli komórek eukariotycznych produkujących pożądane substancje, np. bioaktywne peptydy, przeciwciała. Jest to niezwykle trudny proces choćby ze względu na dużą wrażliwość komórek na bodźce mechaniczne. Stwierdzono, że silna agitacja, a zwłaszcza napowietrzanie, jest przyczyną śmierci znacznej liczby komórek, co powoduje duże straty. Dodatek poloxamerów do podłoża w znacznym stopniu redukuje negatywne efekty silnego mieszania i napowietrzania.
Surfaktanty poloxamerowe posiadają zdolność uszczelniania uszkodzonych czynnikami chemicznymi (toksyny) bądź fizycznymi (np. promieniowanie jonizujące, szok cieplny) błon komórkowych (Padanilam, J.T., Bischof, J.C., Lee, R.C., Cravalho, E.G., Tomkins, R.G., Yarmush, M.L., and Toner, M.'Effectiveness of Poloxamer 188 in Arresting Calcein Leakage From Thermally Damaged Isolated Skeletal Muscle Cells'. Annals of NYAS, Vol. 720, pp. 111-123, 1994; Merchant, FA, Holmes, W.H., Capelli-Schellpfeffer, M., Lee, R.C., and Toner, M. 'Poloxamer 188 Enhances Functional Recovery of Lethally Heat-Shocked Fibroblasts'. J Surg Res. 74: 1031-1040, 1998. Greenebaum, B., Carrillo, C.S., Hannig, J., Beckett, M. A., Weichselbaum, R.R. and Lee, R.C. 'Poloxamer 188 Prevents Acute Necrosis of Adult Skeletal Muscle Fibers after High-dose Irradiation'. Radiation Research (in press); Marks JD, Cromie W, and Lee RC. Nonionic surfactant prevents NMDA-induced death in cultured hippocampal neurons. Soc Neurosci Abs 24(1): 462, 1998; Palmer, J.S., Cromie, W. J and Lee, R.C. 'Surfactant Administration Reduces Testicular Ischemia-Reperfusion Injury'. J. Urology 159: (6) 2136-2139, June, 1998; Hannig J, Yu J, Beckett M, Weichselbaum R, and Lee RC. 'Poloxamine 1107 sealing of radiopermeabilized erythrocyte membranes' Int J M Rad Biol 75: 379-385, 1999).
Żelujący poloxamer, Pluronik F 68 zastosowano do oczyszczania przeciwciał monoklonalnych z pł ynu po hodowli komórek hybrydoma w systemie wodnej ekstrakcji dwufazowej. (Journal of Chemical Engineering of Japan, vol. 26 no 2 pp 183-188 (1993) TOSHIHIKO KITAHARA, MASAMICHI KAMIHIRAAND HIROSHI TAKEUCHI).
Zdolność poloxamerów do absorbcji na błonach biologicznych i tworzenia kompleksów z niektórymi białkami może być wykorzystana do wpływania na istotne procesy biologiczne, takie jak adhezja komórek do powierzchni (np. implantów), aglutynacja komórek, funkcjonowanie systemów transportu leków, takich jak liposomy, mikrokapsułki. Penetracja i klirens tych struktur w organizmie, wreszcie uwalnianie leku w odpowiednim czasie i lokalizacji, zależą w dużym stopniu od właściwości ich powierzchni. Poloxamery dają szerokie możliwości w uzyskiwaniu pożądanych właściwości (Chandaroy P, Sen A, Alexandridis P, Hui SW. Utilizing temperature-sensitive association of Pluronic F-127 with lipid bilayers to control liposome-cell adhesion. Biochim Biophys Acta. 2002 Feb 10; 1559 (1): 32-42.; Ahmed F, Alexandridis P, Shankaran H, Neelamegham S. The ability of poloxamers to inhibit platelet aggregation depends on their physicochemical properties.; Fichtner I, Kreuter J, Berndt A, Diederichs JE, Reszka R. Influence of surface-modifying surfactants on the pharmacokinetic behavior of 14C-poly (methylmethacrylate) nanoparticles in experimental tumor models. Pharm Res. 2001 Nov; 18 (11): 1613-9).
Bakteriofagi wykorzystywane w terapii powinny być pozbawione niekorzystnych zanieczyszczeń, takich jak przykładowo endotoksyny bakteryjne. Odpowiednie szczepy bakteryjne mogą być otrzymane i oczyszczane, na przykład metodami opisanymi w polskich zgłoszeniach patentowych dokonanych przez Instytut Immunologii i Terapii Doświadczalnej PAN we Wrocławiu: P. 348740 z dnia 18 lipca 2001, P 354822 z dnia 30 czerwca 2002, P.355355 z dnia 5 sierpnia 2002, albo międzynarodowym zgłoszeniu patentowym PCT/PL02/000053 z dnia 18 lipca 2002. Dotychczas znane preparaty bakteriofagowe, zwłaszcza wysokooczyszczone, tracą aktywność, szczególnie gdy są przechowywane w warunkach niekorzystnych. Nawet zamrażanie bakteriofagów w roztworze soli fizjologicznej nie chroni bakteriofagów przed utratą aktywności.
W opisie patentowym US 5,616,487 zaproponowano zastosowanie stabilizowanych wirusów, zmodyfikowanych poprzez wykorzystanie czynnika stabilizującego. Proces otrzymywania tego rodzaju stabilizowanego wirusa przeprowadzany jest poprzez hodowlę komórek produkujących wirusa w obecności czynnika stabilizującego, w temperaturze poniżej 37°C. Ujawniona stabilizowana kompozycja retrowirusów zawiera retrowirus i blokowy kopolimer a-hydro-(O-hydroksypoli-(oksyetyleno)poli(oksypropyleno)poli(oksyetylenu). Stabilizowana kompozycja zawiera ponadto cholesterol, olej z wątroby dorsza, octan d-a-tokoferolu oraz TWEEN 80™.
Jednakże, problem utraty aktywności bakteriofagów, charakteryzujących się odmiennymi właściwościami niż retrowirusy, pozostaje wciąż aktualny. W szczególności, bakteriofagi posiadają odmienną stabilność w roztworach. Pożądane jest zatem otrzymanie (oczyszczonych) preparatów bakte4
PL 199 642 B1 riofagowych, które cechowałyby się podwyższoną stabilnością, pozwalającą na ich długotrwałe przechowywanie, zwłaszcza w warunkach ambulatoryjnych czy aptecznych, bez utraty aktywności. Aby preparaty bakteriofagowe, zwłaszcza oczyszczone, mogły znaleźć zastosowanie w terapii koniecznym stało się opracowanie metody stabilizacji aktywności.
Nieoczekiwanie niniejszy wynalazek rozwiązuje problem stabilizacji aktywności preparatów bakteriofagowych.
Przedmiotem wynalazku jest preparat bakteriofagowy o podwyższonej trwałości, charakteryzujący się tym, że jako czynnik stabilizujący zawiera kopolimer blokowy tlenku etylenu i tlenku propylenu, przy czym korzystnie czynnik stabilizujący jest poloksamerem albo meroksapolem, w szczególności został on wybrany z grupy zawierającej: pluronic L-44, F 68, F 87, F108 i F127 co odpowiada odpowiednio poloxamerom o symbolach 124, 188, 237, 338 i 407.
Korzystnie preparat według wynalazku zawiera szczep bakteriofagowy wybrany spośród szczepów bakteriofagowych lizujących bakterie Gram-dodatnie i szczepów bakteriofagowych lizujących bakterie Gram-ujemne.
W szczególnie korzystnej realizacji wynalazku preparat według wynalazku zawiera zawiesinę bakteriofagów pozbawioną endotoksyn.
Korzystnie czynnik stabilizujący jest zawarty w stężeniach wyższych od 0,1%, a zwłaszcza w stężeniach od 2-5%.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie blokowego kopolimeru tlenku etylenu i tlenku propylenu do stabilizowania aktywności preparatów bakteriofagowych.
Korzystnie stosowanym kopolimerem jest poloksamer albo meroksapol, zwłaszcza wybrany z grupy zawierają cej: pluronic L-44, F 68, F 87, F108 i F127 co odpowiada odpowiednio poloxamerom o symbolach 124, 188, 237, 338 i 407. Korzystnie tak okreś lony kopolimer jest stosowany do stabilizowania preparatu bakteriofagowego, który zawiera szczep bakteriofagowy wybrany spośród szczepów bakteriofagowych lizujących bakterie Gram-dodatnie i szczepów bakteriofagowych lizujących bakterie Gram-ujemne, przy czym korzystnie preparat bakteriofagowy zawiera zawiesinę bakteriofagów pozbawioną endotoksyn. Korzystnie kopolimer stosuje się w stężeniach wyższych od 0,1%, zwłaszcza w stężeniach od 2-5%.
Dla lepszego zrozumienia istoty wynalazku została ona zilustrowana poniższymi przykładami. Błędne byłoby jednak ograniczanie zakresu wynalazku jedynie do tych przykładowych realizacji.
Jako czynniki stabilizujące zastosowano kopolimery blokowe pluronic, pluronic F 68, F 127 oraz poloxamer i poloxameru 188, 407 i 182. Dodanie tych polimerów sprawiało, że preparaty bakteriofagowe przechowywane w roztworze zachowywały niezmienioną aktywność przez wiele miesięcy.
P r z y k ł a d 1
Wyjściową zawiesinę bakteriofagów całkowicie lizującą bakterie szczepu Pseudomonas w rozcieńczeniu 103 zmieszano z roztworem pluronic'a F68 o stężeniu 50 mg/ml. Końcowe stężenie polimeru blokowego w próbce wynosiło 2%. Zawieszenie bakteriofagów w roztworze zawierającym pluronic skutkowało tym, że oczyszczone bakteriofagi nie traciły zdolności litycznej bakterii.
Bakteriofagi przechowywane w temperaturze 4°C zachowywały po pięciotygodniowym i dziesięciotygodniowym okresie przechowywania 100% aktywności litycznej.
Bakteriofagi przechowywane w bulionie hodowlanym przechowywane w +4°C nieznacznie traciły aktywność lityczną. Bakteriofagi przechowywane w roztworze soli fizjologicznej znacznie traciły aktywność po 22 dniach a po 35 dniach przechowywania były nieaktywne. Preparaty zamrażane -20°C zarówno w bulionie jak i w soli fizjologicznej traciły aktywność, natomiast preparaty mrożone w obecności pluronicu zachowywały aktywność biologiczną.
P r z y k ł a d 2
Wyjściową zawiesinę bakteriofagów całkowicie lizującą bakterie szczepu Pseudomonas w rozcieńczeniu 103 zmieszano z roztworem poloxameru o stężeniu 100 mg/ml. Końcowe stężenie polimeru blokowego w próbce wynosiło 1%. Zawieszenie bakteriofagów w roztworze zawierającym poloxamer skutkowało tym, że oczyszczone bakteriofagi nie traciły zdolności litycznej bakterii. Bakteriofagi przechowywane w temperaturze -20°C zachowywały po dwu miesięcznym przechowywaniu 100% aktywności litycznej. Bakteriofagi przechowywane w bulionie hodowlanym przechowywane w +4°C nieznacznie traciły aktywność lityczną. Obecność poloxameru w zawiesinie bakteriofagów sprawiała, że preparat zachowywał aktywność po zamrożeniu -20°C.
Claims (14)
- Zastrzeżenia patentowe1. Preparat bakteriofagowy o podwyższonej trwałości, znamienny tym, że jako czynnik stabilizujący zawiera kopolimer blokowy tlenku etylenu i tlenku propylenu, przy czym zachowuje on 100% aktywności litycznej bakteriofagów po 5 tygodniowym przechowywaniu w temperaturze 4°C.
- 2. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że czynnik stabilizujący jest poloksamerem albo meroksapolem.
- 3. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że czynnik stabilizujący został wybrany z grupy zawierającej: pluronic L-44, F 68, F 87, F 108 i F 127, co odpowiada odpowiednio poloxamerom o symbolach 124, 188, 237, 338 i 407.
- 4. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera szczep bakteriofagowy wybrany spośród szczepów bakteriofagowych lizujących bakterie Gram-dodatnie i szczepów bakteriofagowych lizujących bakterie Gram-ujemne.
- 5. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera zawiesinę bakteriofagów pozbawioną endotoksyn.
- 6. Preparat wedł ug zastrz. 1, znamienny tym, ż e zawiera czynnik stabilizujący w stężeniach wyższych od 0,1%.
- 7. Preparat według zastrz. 6, znamienny tym, że zawiera czynnik stabilizujący w stężeniach od 2-5%.
- 8. Zastosowanie blokowego kopolimeru tlenku etylenu i tlenku propylenu do stabilizowania aktywności preparatów bakteriofagowych, przy czym zachowuje on 100% aktywności litycznej bakteriofagów po 5 tygodniowym przechowywaniu w temperaturze 4°C.
- 9. Zastosowanie wedł ug zastrz. 8, znamienne tym, ż e stosowanym kopolimerem jest poloksamer albo meroksapol.
- 10. Zastosowanie według zastrz. 8, znamienne tym, że stosowany kopolimer został wybrany z grupy zawierającej: pluronic L-44, F 68, F 87, F 108 i F 127, co odpowiada odpowiednio poloxamerom o symbolach 124, 188, 237, 338 i 407.
- 11. Zastosowanie według zastrz. 8, znamienne tym, że preparat bakteriofagowy zawiera szczep bakteriofagowy wybrany spośród szczepów bakteriofagowych lizujących bakterie Gramdodatnie i szczepów bakteriofagowych lizujących bakterie Gram-ujemne.
- 12. Zastosowanie według zastrz. 8, znamienne tym, że preparat bakteriofagowy zawiera zawiesinę bakteriofagów pozbawioną endotoksyn.
- 13. Zastosowanie według zastrz. 8, znamienne tym, że kopolimer stosuje się w stężeniach wyższych od 0,1%.
- 14. Zastosowanie według zastrz. 13, znamienne tym, że kopolimer stosuje się w stężeniach od 2-5%.
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL356897A PL199642B1 (pl) | 2002-11-15 | 2002-11-15 | Preparat bakteriofagowy o podwyższonej trwałości oraz zastosowanie blokowego kopolimeru tlenku etylenu i tlenku propylenu |
| PCT/PL2003/000123 WO2004045645A2 (en) | 2002-11-15 | 2003-11-15 | A bacteriophage preparation of enhanced stability by application of a block copolymer of ethylene oxide and propylene oxide |
| AU2003286984A AU2003286984A1 (en) | 2002-11-15 | 2003-11-15 | A bacteriophage preparation of enhanced stability by application of a block copolymer of ethylene oxide and propylene oxide |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL356897A PL199642B1 (pl) | 2002-11-15 | 2002-11-15 | Preparat bakteriofagowy o podwyższonej trwałości oraz zastosowanie blokowego kopolimeru tlenku etylenu i tlenku propylenu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL356897A1 PL356897A1 (pl) | 2004-05-17 |
| PL199642B1 true PL199642B1 (pl) | 2008-10-31 |
Family
ID=32322590
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL356897A PL199642B1 (pl) | 2002-11-15 | 2002-11-15 | Preparat bakteriofagowy o podwyższonej trwałości oraz zastosowanie blokowego kopolimeru tlenku etylenu i tlenku propylenu |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| AU (1) | AU2003286984A1 (pl) |
| PL (1) | PL199642B1 (pl) |
| WO (1) | WO2004045645A2 (pl) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1812025B1 (en) | 2004-11-02 | 2012-09-05 | Chr. Hansen A/S | Stabilized bacteriophage formulations |
| AU2009322175B2 (en) * | 2008-12-05 | 2014-10-09 | Takeda Vaccines, Inc. | Compositions, methods and uses for inducing viral growth |
| US9603909B2 (en) | 2012-05-29 | 2017-03-28 | Intron Biotechnology, Inc. | Composition capable of improving stability of bacteriophage lysin proteins |
| DK4261274T3 (da) * | 2022-04-13 | 2025-06-23 | Merck Patent Gmbh | Meroxapoler til cellekultur |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB771653A (en) * | 1955-08-31 | 1957-04-03 | Medico Biolog Lab Ltd | Stabilized bacteriophages |
| US5616487A (en) * | 1994-09-15 | 1997-04-01 | Aastrom Biosciences, Inc. | Stabilized retrovirus compositions |
| US6322783B1 (en) * | 1996-08-26 | 2001-11-27 | Seishi Takahashi | Bacteriophages, method for screening same and bactericidal compositions using same, and detection kits using same |
| WO2000061726A1 (fr) * | 1999-04-09 | 2000-10-19 | Aventis Pharma S.A. | Composition destinee a la conservation d'adenovirus recombinants infectieux |
| JP5118798B2 (ja) * | 2000-03-07 | 2013-01-16 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | アデノウイルス製剤 |
-
2002
- 2002-11-15 PL PL356897A patent/PL199642B1/pl unknown
-
2003
- 2003-11-15 AU AU2003286984A patent/AU2003286984A1/en not_active Abandoned
- 2003-11-15 WO PCT/PL2003/000123 patent/WO2004045645A2/en not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL356897A1 (pl) | 2004-05-17 |
| AU2003286984A1 (en) | 2004-06-15 |
| AU2003286984A8 (en) | 2004-06-15 |
| WO2004045645A2 (en) | 2004-06-03 |
| WO2004045645A3 (en) | 2004-07-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhao et al. | Long-term storage of lipid-like nanoparticles for mRNA delivery | |
| Onaca et al. | Stimuli‐responsive polymersomes as nanocarriers for drug and gene delivery | |
| Andreana et al. | Freeze drying of polymer nanoparticles and liposomes exploiting different saccharide-based approaches | |
| EP2626130B1 (en) | Substance-encapsulating vesicle and process for producing the same | |
| US6805879B2 (en) | Stable polymer aqueous/aqueous emulsion system and uses thereof | |
| Kasper et al. | Development of a lyophilized plasmid/LPEI polyplex formulation with long-term stability—A step closer from promising technology to application | |
| JP2002504090A (ja) | 液体調合物における安定な粒子 | |
| EP1415648B1 (en) | Lyophilizing composition of drug-encapsulating polymer micelle and method for preparation thereof | |
| MXPA04009103A (es) | Preparacion de nanodispersiones estabilizadas, esteriles. | |
| WO2018204495A1 (en) | Nanolipoprotein particles and related compositions methods and systems for loading rna | |
| CN115671045B (zh) | 非肝靶向的核酸纳米制剂及其制备方法和应用 | |
| AU704292B2 (en) | Solubilisation methods | |
| Zasadzinski | Novel approaches to lipid based drug delivery | |
| Herrmann et al. | An ultrahydrating polymer that protects protein therapeutics and RNA‐lipid nanoparticles against freezing, heat and lyophilization stress | |
| PL199642B1 (pl) | Preparat bakteriofagowy o podwyższonej trwałości oraz zastosowanie blokowego kopolimeru tlenku etylenu i tlenku propylenu | |
| Yang et al. | Multipath Synergistic Immune Activation of Hydrogels Delivering STING Agonist and siXkr8 for Long‐Lasting Colorectal Cancer Therapy | |
| US20210077406A1 (en) | Composition and method for freeze-drying pharmaceutical composition containing anionic drug | |
| CN109745288B (zh) | 一种双药物共递送系统及其制备方法与应用 | |
| CN103142482B (zh) | 纳米粒子药物组合物的制备方法和纳米粒子药物组合物 | |
| CN1864665B (zh) | 内部包有药物的高分子胶束的制备方法 | |
| US8043610B2 (en) | Freeze-dried composition of inactivated virus envelope with membrane fusion activity | |
| US11077057B2 (en) | Polymer-grafted nanobins | |
| CN114053213B (zh) | 术后腔内化疗/免疫协同治疗的缓释凝胶递药系统及其制备方法和应用 | |
| CN119138404B (zh) | 一种细胞外囊泡保护剂及其应用 | |
| Garg et al. | Aquasomes: A Self Assembled Nanoparticulate Carrier Systems |