PL206566B1 - Method for obtaining bio-preparation for degradation of the hydrocarbons belonging to fuel oil - Google Patents
Method for obtaining bio-preparation for degradation of the hydrocarbons belonging to fuel oilInfo
- Publication number
- PL206566B1 PL206566B1 PL372636A PL37263605A PL206566B1 PL 206566 B1 PL206566 B1 PL 206566B1 PL 372636 A PL372636 A PL 372636A PL 37263605 A PL37263605 A PL 37263605A PL 206566 B1 PL206566 B1 PL 206566B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- medium
- hydrocarbons
- amount
- biopreparation
- strains
- Prior art date
Links
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 title claims description 31
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 title claims description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 30
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 title claims description 13
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 title claims description 13
- 239000000295 fuel oil Substances 0.000 title 1
- 239000002283 diesel fuel Substances 0.000 claims description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 7
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 claims description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical group OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241001656677 Gordonia alkanivorans Species 0.000 claims description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 claims description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 3
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 claims description 2
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 2
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 claims description 2
- GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N sodium sulfide (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[S-2] GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 15
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 14
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 241000589291 Acinetobacter Species 0.000 description 1
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
Description
(12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 206566 (13) B1 (21) Numer zgłoszenia: 372636 (51) Int.Cl. (12) PATENT DESCRIPTION (19) PL (11) 206566 (13) B1 (21) Application number: 372636 (51) Int.Cl.
B09C 1/10 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01) C02F 3/34 (2006.01) (22) Data zgłoszenia: 07.02.2005 (54) Sposób otrzymywania biopreparatu do degradacji węglowodorów oleju napędowegoB09C 1/10 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01) C02F 3/34 (2006.01) (22) Date of notification: 07.02.2005 (54) Method of obtaining biopreparation for the degradation of diesel hydrocarbons
PL 206 566 B1PL 206 566 B1
Opis wynalazkuDescription of the invention
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania biopreparatu do degradacji węglowodorów oleju napędowego.The subject of the invention is a method of producing a biopreparation for the degradation of diesel hydrocarbons.
Znane są sposoby otrzymywania biopreparatów do degradacji węglowodorów oleju napędowego, polegające na wyselekcjonowaniu ze środowisk skażonych węglowodorami ropy naftowej szczepów bakterii o zdolności do degradacji węglowodorów, a następnie na namnożeniu tych szczepów w warunkach hodowli tlenowej w sterylnej pożywce zawierającej niewielkie iloś ci łatwo przyswajalnego źródła węgla, źródło azotu, fosforany, substancje wzrostowe oraz odpowiedni dodatek węglowodorów oleju napędowego. W sposobach tych wykorzystuje się szczepy bakterii z rodzaju Pseudomonas, Acinetobacter, Bacillus, Mycobacterium, Alcaligenes.There are known methods of obtaining biopreparations for the degradation of diesel oil hydrocarbons, consisting in the selection of bacterial strains contaminated with petroleum hydrocarbons with the ability to degrade hydrocarbons, and then multiplication of these strains under the conditions of aerobic culture in a sterile medium containing small amounts of easily digestible carbon source, nitrogen source, phosphates, growth substances and a suitable addition of diesel hydrocarbons. These methods use bacterial strains of the genus Pseudomonas, Acinetobacter, Bacillus, Mycobacterium, Alcaligenes.
Sposoby te są znane z czasopism: Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 2002, 28, 252-260, Canadian Journal of Microbiology 1995, 41, 767-775, Current Opinion in Biotechnology, 1999, 10, 234-239, 2001, 12, 237-241 i 2004, 15, 205-214, Biodegradation 1990, 1, 79-92, Applied Environmental Microbiology 2000, 6, 2392-2399, Acta Biotechnologica 1999, 19, 3, 213-223 i 2000, 20, 3-4, 313-333, Water Research 2000, 34, 15, 3845-3853.These methods are known from the journals: Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 2002, 28, 252-260, Canadian Journal of Microbiology 1995, 41, 767-775, Current Opinion in Biotechnology, 1999, 10, 234-239, 2001, 12, 237-241 and 2004, 15, 205-214, Biodegradation 1990, 1, 79-92, Applied Environmental Microbiology 2000, 6, 2392-2399, Acta Biotechnologica 1999, 19, 3, 213-223 and 2000, 20, 3- 4, 313-333, Water Research 2000, 34, 15, 3845-3853.
Sposób otrzymywania biopreparatu do degradacji węglowodorów oleju napędowego według wynalazku polega na tym, że ze środowiska skażonego węglowodorami ropy naftowej wyizolowuje się, korzystnie metodą racjonalnego skriningu, szczepy trzech gatunków bakterii. Gordonia alkanivorans S7, Micrococcus luteus A.32.1 i Pseudomonas circulans Bp, które namnaża się w formie mieszaniny w hodowli wstrząsanej w warunkach tlenowych, przy pH 6,5, w temperaturze 28°C, w czasie 72 godzin, w sterylnej pożywce zawierającej przyswajalne źródło węgla, azotu i fosforu, substancje wzrostowe oraz dodatek węglowodorów oleju napędowego w ilości 0,1-0,5% objętościowych. Otrzymany biopreparat ewentualnie stabilizuje się siarczkiem sodu lub ewentualnie odwirowuje i suszy w strumieniu sterylnego powietrza o temperaturze 45°C. Szczepy bakterii używa się w ilości 2-5 ml zawiesiny, zawierającej 109 komórek/ml, na 1 l pożywki. Jako przyswajalne źródło węgla stosuje się glukozę lub sacharozę w ilości 0,5-2,0 g/l pożywki, jako przyswajalne źródło azotu stosuje się azotan lub siarczan amonu w ilości przeliczonej na azot 0,6-1,5 g/l pożywki, zaś jako przyswajalne źródło fosforu stosuje się wodorofosforan sodu w ilości przeliczonej na fosfor do 1 g/l pożywki. Korzystnym jest także dodanie do pożywki ekstraktu drożdżowego w ilości 0,5-2,1 g/l pożywki. Nadto pożywka ewentualnie zawiera makroelementy w postaci jonów potasu i magnezu oraz mikroelementy w postaci jonów manganu, żelaza i wapnia.The method of obtaining a biopreparation for the degradation of diesel oil hydrocarbons according to the invention consists in isolating, preferably by rational screening, strains of three species of bacteria from the environment contaminated with petroleum hydrocarbons. Gordonia alkanivorans S7, Micrococcus luteus A.32.1 and Pseudomonas circulans Bp, which are grown as a mixture in an aerobic shake culture at pH 6.5, 28 ° C for 72 hours in a sterile medium containing an digestible source carbon, nitrogen and phosphorus, growth substances and addition of diesel oil hydrocarbons in the amount of 0.1-0.5% by volume. The obtained biopreparation is optionally stabilized with sodium sulphide or optionally centrifuged and dried in a stream of sterile air at a temperature of 45 ° C. Bacterial strains are used in the amount of 2-5 ml of suspension containing 10 9 cells / ml per 1 l of medium. As an absorbable source of carbon, glucose or sucrose in the amount of 0.5-2.0 g / l of the medium is used, as an absorbable source of nitrogen, nitrate or ammonium sulphate in the amount of 0.6-1.5 g / l of the medium is used, and as an absorbable source of phosphorus, sodium hydrogen phosphate in an amount converted to phosphorus up to 1 g / l of the medium is used. It is also advantageous to add 0.5-2.1 g / l of yeast extract to the medium. Moreover, the medium possibly contains macroelements in the form of potassium and magnesium ions and microelements in the form of manganese, iron and calcium ions.
Biopreparat otrzymany sposobem według wynalazku wykazuje wysoką zdolność do degradacji wszystkich węglowodorów wchodzących w skład oleju napędowego, zapewnia szybką ich biodegradację bez gromadzenia pośredników metabolizmu. Zawarte w nim szczepy bakterii namnażają się stosunkowo szybko, wykazują niewysokie wymagania pokarmowe jak chodzi o źródło azotu i fosforu, rozwijają się w szerokim zakresie natlenienia i wykazują uzupełniające się wymagania pokarmowe w stosunku do mieszaniny węglowodorów zawartych w oleju napędowym. I tak szczep Gordonia alkanivorans S7 wykazuje zdolność do degradacji stosunkowo szerokiej gamy węglowodorów, szczep Micrococcus luteus A.32.1 jest aktywny w stosunku do węglowodorów lżejszych, zaś aktywność Pseudomonas circulans BP ujawnia się w końcowej fazie procesu biodegradacji, w stosunku do węglowodorów resztkowych.The biopreparation obtained by the method according to the invention has a high ability to degrade all hydrocarbons included in diesel fuel, and ensures their rapid biodegradation without the accumulation of metabolism intermediaries. The bacterial strains contained therein multiply relatively quickly, show low nutritional requirements for the source of nitrogen and phosphorus, develop in a wide range of oxygenation and show complementary nutritional requirements in relation to the mixture of hydrocarbons contained in diesel fuel. Thus, the Gordonia alkanivorans S7 strain shows the ability to degrade a relatively wide range of hydrocarbons, the Micrococcus luteus A.32.1 strain is active against lighter hydrocarbons, and the activity of Pseudomonas circulans BP is revealed in the final stage of the biodegradation process, against residual hydrocarbons.
Sposób według wynalazku ilustrują poniższe przykłady nie ograniczając jego zakresu.The process of the invention is illustrated by the following non-limiting examples.
P r z y k ł a d IP r z k ł a d I
Pożywkę płynną, zawierającą w 1 l: 2 g glukozy, 2 g ekstraktu drożdżowego, 3 g azotanu amonu, 1,5 g wodorofosforanu sodu i olej napędowy w ilości 0,2% objętościowych, umieszczono w kolbach płaskodennych o pojemności 500 ml, wypełnionych 50 ml pożywki i po doprowadzeniu pH pożywki do wartości 6,5, sterylizowano ją w temperaturze 121°C w czasie 17 minut. Pożywki szczepiono kulturami bakterii Gordonia alkanivorans S7, Micrococcus luteus A.32.1 i Pseudomonas circulans Bp, wyizolowanymi ze środowiska skażonego węglowodorami ropy naftowej metodą racjonalnego skriningu, użytymi w ilości po 0,5 ml każdej z kultur zawierających 109 komórek w 1 ml. Hodowlę mieszaniny szczepów prowadzono na wytrząsarce mimośrodowej przy szybkości obrotów 200 rpm i amplitudzie 4,5 cm, w warunkach tlenowych, w temperaturze 28°C w czasie 72 godzin.The liquid medium, containing in 1 l: 2 g of glucose, 2 g of yeast extract, 3 g of ammonium nitrate, 1.5 g of sodium hydrogen phosphate and 0.2% by volume of diesel fuel, was placed in 500 ml flat-bottomed flasks filled with 50 ml of medium and after adjusting the pH of the medium to 6.5, it was sterilized at 121 ° C for 17 minutes. The media was inoculated with cultures of Gordonia alkanivorans S7, Micrococcus luteus A.32.1 and Pseudomonas circulans Bp bacteria, isolated from an environment contaminated with petroleum hydrocarbons by rational screening, in an amount of 0.5 ml of each culture containing 10 9 cells per ml. The strain mixture was grown on an eccentric shaker at 200 rpm and 4.5 cm amplitude, under aerobic conditions, at 28 ° C for 72 hours.
W celu sprawdzenia aktywności metabolicznej otrzymanego biopreparatu wobec węglowodorów oleju napędowego przygotowano pożywkę o składzie jak wyżej, ale zawierającą 6% objętościowych oleju napędowego, którą umieszczono w kolbach płaskodennych o pojemności 500 ml, po 40 mlIn order to check the metabolic activity of the obtained biopreparation towards diesel oil hydrocarbons, a medium with the composition as above, but containing 6% by volume of diesel fuel, was prepared, which was placed in flat-bottomed flasks with a capacity of 500 ml, 40 ml each.
PL 206 566 B1 pożywki w każdej i po wysterylizowaniu w warunkach jak wyżej, zaszczepiono otrzymanym biopreparatem użytym w ilości 2% objętościowych, po czym prowadzono hodowlę na wytrząsarce mimośrodowej o szybkości obrotów 200 rpm i amplitudzie 4,5 cm w czasie 18 dni. Wyniki hodowli były następujące:The medium in each and after sterilization under the conditions as above, was inoculated with the obtained biopreparation used in the amount of 2% by volume, and then it was cultivated on an eccentric shaker with a rotation speed of 200 rpm and an amplitude of 4.5 cm for 18 days. The breeding results were as follows:
- namnoż enie biomasy - 1,2 g/l,- biomass multiplication - 1.2 g / l,
- stopień zuż ycia wę glowodorów oleju ogół em, oznaczony metodą wagową , - 92%,- consumption degree of total oil hydrocarbons, determined using the weight method, - 92%,
- stopień degradacji węglowodorów aromatycznych, oznaczony metodą wagową - 68%,- degree of degradation of aromatic hydrocarbons, determined using the weight method - 68%,
- aktywność emulgacyjna - 0,490.- emulsifying activity - 0.490.
Otrzymany biopreparat użyto także do degradacji węglowodorów oleju napędowego obciążającego grunt o zawartości piasku 20% wagowych i stężeniu substancji organicznych 4,8% wagowych, przy czym zawartość oleju napędowego w tym gruncie była równa 4% wagowych. W tym celu do próbek gruntu wprowadzono otrzymany biopreparat w ilości 5% objętościowych oraz azotan amonu i wodorofosforan sodu po 1 g/kg sm gruntu. Biodegradację prowadzono 18 dni utrzymują c wilgotność podłoża na poziomie 30%. W 9 i 14 dniu procesu próbki zasilono dodatkowymi porcjami biopreparatu po 20 ml/kg sm gruntu. Oznaczenia zawartości węglowodorów po 18 dniach biodegradacji przeprowadzono metodą chromatografii gazowej, po uprzedniej ich ekstrakcji z matrycy gleby eterem naftowym. Stężenie węglowodorów aromatycznych oznaczono w drodze pomiaru absorbancji przy długości fali 254 nm. Wyniki biodegradacji były następujące:The obtained biopreparation was also used for the degradation of diesel oil hydrocarbons loading a soil with a sand content of 20% by weight and a concentration of organic substances 4.8% by weight, and the diesel oil content in this soil was equal to 4% by weight. For this purpose, the obtained biopreparation was introduced into the soil samples in the amount of 5% by volume, as well as ammonium nitrate and sodium hydrogen phosphate, 1 g / kg dry mass of soil. Biodegradation was carried out for 18 days while maintaining the substrate humidity at 30%. On day 9 and 14 of the process, the samples were supplemented with additional portions of the biopreparation, 20 ml / kg DM of soil each. Determinations of the content of hydrocarbons after 18 days of biodegradation were carried out by means of gas chromatography, after their prior extraction from the soil matrix with petroleum ether. The concentration of aromatic hydrocarbons was determined by measuring the absorbance at a wavelength of 254 nm. The biodegradation results were as follows:
- stopień degradacji węglowodorów ogół em - 84%,- degree of degradation of total hydrocarbons - 84%,
- stopień degradacji węglowodorów aromatycznych - 73%.- degree of degradation of aromatic hydrocarbons - 73%.
P r z y k ł a d IIP r z x l a d II
Biopreparat płynny przygotowano jak w przykładzie I. Następnie poddano go wirowaniu w temperaturze 4°C w czasie 20 minut przy szybkości obrotów 18000/minutę, po czym odwirowaną biomasę rozproszono w wodzie redestylowanej i powtórnie wirowano. Oddzielony biopreparat suszono w strumieniu sterylnego powietrza o temperaturze 45°C do osiągnięcia wilgotności poniżej 5%.The liquid biopreparation was prepared as in Example I. Then it was subjected to centrifugation at 4 ° C for 20 minutes at 18,000 rpm, after which the centrifuged biomass was dispersed in redistilled water and re-centrifuged. The separated biopreparation was dried in a stream of sterile air at a temperature of 45 ° C until the humidity was below 5%.
Otrzymany biopreparat, po uprzedniej jego rehydratacji tj. rozproszeniu 1 g sm komórek w 20 ml sterylnej wody destylowanej, użyto do biodegradacji węglowodorów oleju napędowego zawartego w poż ywce pł ynnej o skł adzie jak w przykł adzie I, w iloś ci 6% obję toś ciowych. Biopreparat dodano w ilości 5% objętościowych. Biodegradację prowadzono w warunkach analogicznych jak w przykładzie I. Wyniki biodegradacji prowadzonej 18 dni były następujące:The obtained biopreparation, after its rehydration, i.e. dispersion of 1 g DM of cells in 20 ml of sterile distilled water, was used for the biodegradation of hydrocarbons of diesel fuel contained in the liquid medium with the composition as in example I, in the amount of 6% by volume . The biopreparation was added in the amount of 5% by volume. Biodegradation was carried out in the same conditions as in Example 1. The results of the 18-day biodegradation were as follows:
- namnoż enie biomasy - 1,2 g/l,- biomass multiplication - 1.2 g / l,
- stopień zużycia węglowodorów ogółem, oznaczony metodą wagową, - 90%,- total hydrocarbon consumption, determined by the weight method, - 90%,
- stopień degradacji węglowodorów aromatycznych - 68%,- degree of degradation of aromatic hydrocarbons - 68%,
- aktywność emulgacyjna - 0,530.- emulsifying activity - 0.530.
Otrzymany biopreparat w stanie stałym zastosowano również do biodegradacji węglowodorów oleju napędowego obciążającego grunt o zawartości piasku 20% wagowych i stężeniu substancji organicznych 4,8% wagowych, przy czym zawartość oleju napędowego w tym gruncie była równa 4% wagowych. Biopreparat dodano do gruntu w postaci zawiesiny w wodzie destylowanej, zawierającej 1 g biopreparatu w 20 ml wody, stosując 50 ml zawiesiny na 1 kg sm skażonego gruntu oraz azotan amonu i wodorofosforan sodu po 1 g/kg sm gruntu. Proces biodegradacji prowadzono w czasie 18 dni utrzymując wilgotność podłoża na poziomie 30%. W 9 i 14 dniu procesu biodegradacji do gruntu dodano dodatkową porcję zawiesiny biopreparatu w ilości 20 ml/kg sm gruntu. Oznaczenie zawartości węglowodorów w gruncie po procesie biodegradacji przeprowadzono metodą chromatografii gazowej, po uprzedniej ich ekstrakcji z matrycy gleby eterem naftowym. Stężenie węglowodorów aromatycznych oznaczono w drodze pomiaru absorbancji przy długości fali 254 nm. Wyniki biodegradacji były następujące:The obtained solid biopreparation was also used for the biodegradation of diesel fuel hydrocarbons loading a soil with a sand content of 20% by weight and an organic substance concentration of 4.8% by weight, and the diesel oil content in the soil was 4% by weight. The biopreparation was added to the soil in the form of a suspension in distilled water, containing 1 g of biopreparation in 20 ml of water, using 50 ml of the suspension per 1 kg DM of contaminated soil and ammonium nitrate and sodium hydrogen phosphate, 1 g / kg DM of soil. The biodegradation process was carried out during 18 days with the substrate humidity at 30%. On the 9th and 14th day of the biodegradation process, an additional portion of the biopreparation suspension was added to the soil in the amount of 20 ml / kg DM of soil. Determination of the content of hydrocarbons in the soil after the biodegradation process was carried out by means of gas chromatography, after their prior extraction from the soil matrix with petroleum ether. The concentration of aromatic hydrocarbons was determined by measuring the absorbance at a wavelength of 254 nm. The biodegradation results were as follows:
- stopień degradacji węglowodorów ogół em - 78%,- degree of degradation of total hydrocarbons - 78%,
- stopień degradacji węglowodorów aromatycznych - 67%.- degree of degradation of aromatic hydrocarbons - 67%.
Claims (7)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL372636A PL206566B1 (en) | 2005-02-07 | 2005-02-07 | Method for obtaining bio-preparation for degradation of the hydrocarbons belonging to fuel oil |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL372636A PL206566B1 (en) | 2005-02-07 | 2005-02-07 | Method for obtaining bio-preparation for degradation of the hydrocarbons belonging to fuel oil |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL372636A1 PL372636A1 (en) | 2006-08-21 |
| PL206566B1 true PL206566B1 (en) | 2010-08-31 |
Family
ID=39592211
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL372636A PL206566B1 (en) | 2005-02-07 | 2005-02-07 | Method for obtaining bio-preparation for degradation of the hydrocarbons belonging to fuel oil |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL206566B1 (en) |
-
2005
- 2005-02-07 PL PL372636A patent/PL206566B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL372636A1 (en) | 2006-08-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Szymańska et al. | Endophytic and rhizosphere bacteria associated with the roots of the halophyte Salicornia europaea L.–community structure and metabolic potential | |
| Anderson et al. | Carbon assimilation and microbial activity in soil | |
| Kieft et al. | Changes in ester-linked phospholipid fatty acid profiles of subsurface bacteria during starvation and desiccation in a porous medium | |
| Szymańska et al. | Metabolic potential and community structure of endophytic and rhizosphere bacteria associated with the roots of the halophyte Aster tripolium L. | |
| Tuchman et al. | Differential heterotrophic utilization of organic compounds by diatoms and bacteria under light and dark conditions | |
| Findlay et al. | Effect of a free-living marine nematode (Diplolaimella chitwoodi) on detrital carbon mineralization | |
| Robertson et al. | Petroleum hydrocarbon contamination in boreal forest soils: a mycorrhizal ecosystems perspective | |
| Magic-Knezev et al. | Optimisation and significance of ATP analysis for measuring active biomass in granular activated carbon filters used in water treatment | |
| Di Gregorio et al. | Selenite precipitation by a rhizospheric strain of Stenotrophomonas sp. isolated from the root system of Astragalus bisulcatus: a biotechnological perspective | |
| Hinteregger et al. | Halomonassp., a moderately halophilic strain, for biotreatment of saline phenolic waste-water | |
| Hrenovic et al. | The effect of mineral carrier composition on phosphate-accumulating bacteria immobilization | |
| Chen et al. | Salt tolerance of Microcoleus vaginatus Gom., a cyanobacterium isolated from desert algal crust, was enhanced by exogenous carbohydrates | |
| Han et al. | Synergistic effects of Cd-loving Bacillus sp. N3 and iron oxides on immobilizing Cd and reducing wheat uptake of Cd | |
| Babu et al. | Degradation of caffeine by Pseudomonas alcaligenes CFR 1708 | |
| Setälä et al. | A microcosm study on the respiration and weight loss in birch litter and raw humus as influenced by soil fauna | |
| CN114107092A (en) | A phthalate-degrading endophyte Gordonella L191 and its application | |
| Filip et al. | Influence of clay minerals on growth and metabolic activity of Epicoccum nigrum and Stachybotrys chartarum | |
| Krallish et al. | Phenol degradation by immobilized cold-adapted yeast strains of Cryptococcus terreus and Rhodotorula creatinivora | |
| Chabbi et al. | The role of organic carbon excretion by bulbous rush roots and its turnover and utilization by bacteria under iron plaques in extremely acid sediments | |
| Palmroth et al. | Metabolic responses of microbiota to diesel fuel addition in vegetated soil | |
| CA2531182C (en) | Support for holding a complexed enrichment of degrading bacteria and manufacturing method thereof, novel bacteria and method of cleaning polluted environment and device thereof | |
| CN110121550A (en) | Method and product for biodegradable waste | |
| Kaneda et al. | Influence of soil quality on the growth of Folsomia candida (Willem)(Collembola) | |
| Nakamura et al. | A novel control process of cyanobacterial bloom using cyanobacteriolytic bacteria immobilized in floating biodegradable plastic carriers | |
| Filonov et al. | Growth and survival of Pseudomonas putida strains degrading naphthalene in soil model systems with different moisture levels |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20120207 |