PL207834B1 - Związki na bazie peptydów, ich zastosowanie oraz zawierająca je kompozycja farmaceutyczna - Google Patents

Związki na bazie peptydów, ich zastosowanie oraz zawierająca je kompozycja farmaceutyczna

Info

Publication number
PL207834B1
PL207834B1 PL367273A PL36727302A PL207834B1 PL 207834 B1 PL207834 B1 PL 207834B1 PL 367273 A PL367273 A PL 367273A PL 36727302 A PL36727302 A PL 36727302A PL 207834 B1 PL207834 B1 PL 207834B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
cys
tfa
minutes
peptide
compound
Prior art date
Application number
PL367273A
Other languages
English (en)
Other versions
PL367273A1 (pl
Inventor
Alan Cuthbertson
Bård Indrevoll
Magne Solbakken
Colin Mill Archer
Torgrim Engell
Harry John Wadsworth
Original Assignee
Ge Healthcare As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB0116815.2A external-priority patent/GB0116815D0/en
Priority claimed from NO20014954A external-priority patent/NO20014954D0/no
Application filed by Ge Healthcare As filed Critical Ge Healthcare As
Publication of PL367273A1 publication Critical patent/PL367273A1/pl
Publication of PL207834B1 publication Critical patent/PL207834B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/6425—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the peptide or protein in the drug conjugate being a receptor, e.g. CD4, a cell surface antigen, i.e. not a peptide ligand targeting the antigen, or a cell surface determinant, i.e. a part of the surface of a cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/0002—General or multifunctional contrast agents, e.g. chelated agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/082—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the peptide being a RGD-containing peptide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są związki na bazie peptydów, ich zastosowanie oraz zawierająca je kompozycja farmaceutyczna.
Związki według wynalazku znajdują zastosowanie w leczeniu oraz w diagnostycznych technikach obrazowania. W szczególności, wynalazek dotyczy zastosowania takich związków na bazie peptydów w charakterze przenośników (inaczej wektorów) naprowadzających, które wiążą się z receptorami powiązanymi z angiogenezą, zwłaszcza z receptorami integrynowymi, jak na przykład receptor integrynowy ανβ3. Takie środki kontrastowe mogą więc być zastosowane na przykład do diagnozowania nowotworów złośliwych, chorób serca, endometriozy, chorób zapalnych, gośćca przewlekłego i mięsaka Kaposiego. Ponadto takie środki mogą być zastosowane w leczeniu tych chorób.
Nowe naczynia krwionośne mogą tworzyć się na drodze dwóch różnych mechanizmów: waskulogenezy i angiogenezy. Angiogeneza to powstawanie nowych naczyń krwionośnych na drodze tworzenia odgałęzień od już istniejących naczyń. Pierwotnym bodźcem do rozpoczęcia takiego procesu może być nieodpowiedni dopływ składników odżywczych i tlenu do komórek w tkance (hipoksja). Takie komórki mogą zareagować na zaistniałą sytuację poprzez wydzielenie czynników angiogennych, których istnieje wiele. Często cytowanym przykładem jest naczyniowy czynnik wzrostu śródbłonkowego (VEGF). Takie czynniki zapoczątkowują wydzielanie enzymów proteolitycznych, które powodują rozpad białek błony podstawnej jak też wydzielanie inhibitorów, które ograniczają działanie tych potencjalnie szkodliwych enzymów. Innym ważnym przejawem działania czynników angiogennych jest powodowanie migracji i podziałów komórek śródbłonka. Komórki śródbłonkowe przytwierdzone do błony podstawnej, która tworzy nieprzerwaną otoczkę naczyń krwionośnych po ich zewnętrznej stronie, nie ulegają mitozie. Połączonym wynikiem odszczepienia się komórek oraz sygnałów pochodzących z receptorów czynników angiogennych jest wywołanie ruchu, zwielokrotniania komórek śródbłonkowych i ich przegrupowania, i na końcu wytworzenia przez nie błony podstawnej wokół nowopowstałych naczyń.
Angiogeneza odgrywa ważną rolę we wzroście i przebudowie tkanek, włączając w to gojenie się ran i stany zapalne. Guzy nowotworowe, aby utrzymać tempo wzrostu, muszą rozpocząć angiogenezę gdy tylko osiągną rozmiary milimetrowe. Angiogenezie towarzyszą charakterystyczne zmiany w komórkach śródbłonkowych i ich otoczeniu. Powierzchnia tych komórek ulega przebudowie, która służy przygotowaniu do migracji, przy czym zostają eksponowane struktury wgłębne, w których błona podstawna uległa degradacji, a także rozmaite białka biorące udział w dokonywaniu proteolizy i w jej kontrolowaniu. W przypadku guzów nowotworowych powstająca sieć naczyń krwionośnych zazwyczaj jest nieuporządkowana, czemu towarzyszy tworzenie się gwałtownych załamań jak też przecieków tętniczo-żylnych. Hamowanie angiogenezy uważa się za obiecującą strategię w terapii przeciwnowotworowej. Wykorzystanie przemian towarzyszących angiogenezie jest też bardzo obiecujące w celach diagnostycznych, oczywistym przykładem czego są nowotwory złośliwe, ale taka koncepcja jest również bardzo obiecująca w odniesieniu do stanów zapalnych oraz różnorodnych chorób związanych ze stanami zapalnymi, włączając w to miażdżycę tętnic, gdzie makrofagi wczesnych miażdżycowych uszkodzeń tętniczych są potencjalnym źródłem czynników angiogennych. Czynniki te odgrywają też rolę w ponownym unaczynieniu dotkniętych zawałem części mięśnia sercowego, które występuje, jeśli zwężenie zawałowe ustąpiło w krótkim czasie.
Dalsze przykłady niepożądanych stanów związanych z neowaskularyzacją albo angiogenezą, rozwojem albo rozrostem nowych naczyń krwionośnych, zostały przytoczone poniżej. Dotyczy tego również publikacja WO 98/47541.
Choroby i wskazania do leczenia związane z angiogenezą to na przykład różne formy raka i przerzutu raka, na przykład rak sutka, skóry, okrężnicy i odbytnicy, trzustki, prostaty, płuca albo jajnika.
Inne choroby i wskazania to zapalenie (na przykład chroniczne), miażdżyca tętnic, gościec przewlekły postępujący i zapalenie dziąseł.
Dalsze choroby i wskazania związane z angiogenezą to wady rozwojowe tętniczo-żylne, gwiaździaki, nabłoniaki kosmówkowe złośliwe, glejaki, naczyniaki (wieku dziecięcego, kapilarne), wątrobiaki, rozrostowe endometrium, niedokrwistość mięśnia sercowego, endometrioza, mięsak Kaposiego, zwyrodnienie żółtej plamki dna oka, czerniak, nerwiaki niedojrzałe, choroba zaślepiająca tętnic obwodowych, zapalenie kości i stawów, łuszczyca, retynopatia (cukrzycowa, rozrostowa), twardzina skóry, nasieniaki i owrzodzeniowe zapalenie okrężnicy.
PL 207 834 B1
W angiogenezie uczestniczą receptory, które wystę pują wyłącznie w komórkach ś ródbł onka i tkankach otaczają cych. Do takich markerów należą receptory czynników wzrostu takie jak VEGF oraz rodzina receptorów integrynowych. Badania immunohistochemiczne wykazały, że rozmaite integryny, a zapewne przede wszystkim te należące do klasy av, są ekspresjonowane na wierzchołkowych powierzchniach naczyń krwionośnych [Conforti, G. et al. (1992) Blood 80: 37-446] i są dostępne jako cel dla ligandów znajdujących się w krwioobiegu [Pasqualini, R. et al. (1997) Nature Biotechnology 15: 542-546]. Integryna α5β1 odgrywa również ważną rolę w promowaniu tworzenia się matrycy fibronektynowej i w inicjowaniu dołączania się komórek do fibronektyny. Odgrywa ona też zasadniczą rolę w migracji komórek [Bauer, J.S. (1992) J. Cell Biol. 116: 477-487] oraz w inwazji nowotworów i przy przerzutach [Gehlsen, K.R. (1988) J. Cell Biol. 106: 925-930].
Integryna ave3 jest jednym z receptorów znanych z powiązania z angiogenezą. Można sądzić, że stymulowane komórki śródbłonka wykorzystują ten receptor do przetrwania w krytycznym okresie procesu angiogenetycznego, ponieważ antagoniści oddziaływania receptor integryny ave3/ligand indukują apoptozę i są inhibitorami wzrostu naczyń krwionośnych.
Integryny są cząsteczkami heterodimerycznymi, w których podjednostki α i β penetrują podwójną warstwę lipidową błony komórkowej. Podjednostka α posiada cztery domeny wiązania Ca2+ na łańcuchu pozakomórkowym, zaś podjednostka β posiada pewną liczbę pozakomórkowych domen bogatych w cysteinę.
Wiele ligandów, które występuję w procesach adhezji komórek (na przykład fibronektyna), zawiera sekwencję tripeptydową arginina-glicyna-kwas asparaginowy (RGD). Sekwencja RGD wydaje się działać jako pierwszorzędowe miejsce rozpoznania pomiędzy ligandami prezentującymi tę sekwencję a receptorami na powierzchni komórek. Generalnie uważa się, że oddziaływania drugorzędowe pomiędzy ligandem i receptorem zwiększają specyficzność oddziaływania. Te drugorzędowe oddziaływania mogą zachodzić pomiędzy tymi fragmentami ligandu i receptora, które znajdują się w bezpośredniej bliskości sekwencji RGD, albo w miejscach, które są odległe od sekwencji RGD.
Wiadomo, że peptydy RGD wiążą się z różnorodnymi receptorami integrynowymi i mają potencjalną zdolność do regulowania pewnej liczby procesów komórkowych, które mają ważne zastosowanie w warunkach klinicznych [Ruoslahti, J. Clin. lnvest., 87: 1-5 (1991)]. Zapewne najszerzej badane przejawy działania peptydów RGD i środków je naśladujących dotyczą ich zastosowania jako środków przeciwzakrzepowych, gdzie ich celem jest integryna GpIIbllla występująca w płytkach krwi.
Hamowanie angiogenezy w tkankach poprzez podawanie albo antagonistów ave3 albo antagonistów ave5, opisano na przykład w WO 97/06791 i WO 95/25543, gdzie zastosowano przeciwciała albo peptydy zawierające RGD. EP 578083 opisuje grupę monocyklicznych peptydów zawierających RGD, zaś WO 90/14103 zastrzega przeciwciała RGD. Haubner et al. w J. Nucl. Med. (1999); 40: 1061-1071 opisują nową klasę znaczników (tracer) naprowadzających na nowotwory, na bazie monocyklicznych peptydów zawierających RGD. Badania biodystrybucji z zastosowaniem autoradiograficznego obrazowania całego ciała ujawniły jednak, że peptydy znakowane jodem 125I miały bardzo szybki klirens z krwi i były wydalane głównie na drodze wątrobowo-żółciowej, co powodowało wysokie wartości tła.
Cykliczne peptydy RGD zawierające wielokrotne mostki opisano również w WO 98/54347 i W095/-14714. Peptydy pochodzące z przeprowadzonego in vivo biopanningu (WO 97/10507) zastosowano do różnorodnych prób naprowadzania. Sekwencja CDCRGDCFC (RGD-4C) była zastosowana do na-prowadzania do komórek leków takich jak doksyrubicyna (WO 98/10795), kwasów nukleinowych i adenowirusów (zobacz: WO 99/40214, WO 99/39734, WO 98/54347, WO 98/54346, US 5846782). Peptydy zawierające wiele reszt cysteinowych wykazują jednak tę niedogodność, że może w takim przypadku wystąpić wiele izomerów disiarczkowych. Peptyd zawierający 4 reszty cysteinowe, takie jak RGD-4C, ma możliwość utworzenia 3 różnych pofałdowanych form disiarczkowych. Takie izomery będą wykazywały niejednakowe powinowactwo do receptora integrynowego, ponieważ farmakofor RGD będzie zmuszony zająć 3 różne konformacje. Dalsze przykłady związków zawierających RGD, będących związkami na bazie peptydów znajdują się w opisach zgłoszeń patentowych PCT/NO-01/00146 i PCT/NO-01/00390, cytowanych tutaj w charakterze odnośnika.
Dlatego też wydajne naprowadzanie na receptory integrynowe związane z angiogenezą in vivo oraz obrazowanie takich receptorów wymaga selektywnego, wykazującego duże powinowactwo przenośnika na bazie RGD, który byłby odporny na działanie czynników chemicznych, a także trwały. Ponadto ważnym czynnikiem przy projektowaniu środków do obrazowania jest droga wydalania, z uwagi na potrzebę zmniejszenia problemów wynikających z obecności tła. Te rygorystyczne warunki są spełnione przez bicykliczne struktury opisane w obecnym wynalazku.
PL 207 834 B1
Przedmiotem wynalazku jest związek przedstawiony następującymi wzorami: związek I
związek II
związek III
oraz
PL 207 834 B1 związek IV
lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, przy czym czynnik chelatujący jest przedstawiony wzorem:
jak pokazano w każdym ze związków I do IV.
Korzystnie dowolna z reszt aminokwasowych w związku według wynalazku ma niezależnie konfigurację D albo L. Również korzystnie, czynnik chelatujący w związku według wynalazku zawiera nuklidy metali promieniotwórczych, paramagnetyczne jony metali, fluorescencyjne jony metali, jony metali ciężkich albo jony klasterowe, korzystniej czynnik chelatujący w związku według wynalazku zawiera 90Y, 99mTc, 111In, 47Sc, 67Ga, 51Cr, 177mSn, 67Cu, 167Tm, 97Ru, 188Re, 177Lu, 199Au, 203Pb, 141Ce albo 18F, a najkorzystniej 99mTc.
Przedmiotem wynalazku jest ponadto kompozycja farmaceutyczna zawierająca skuteczną ilość związku według wynalazku albo jego sól, wraz z jednym albo większą liczbą farmaceutycznie dopuszczalnych środków wspomagających, zaróbek lub rozcieńczalników.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie związku według wynalazku do wytwarzania środka kontrastowego.
Dostarczone przez niniejszy wynalazek związki należą do ujawnionej niniejszym grupy związków przedstawionych wzorem 1. Związki te wykazują powinowactwo do receptorów integrynowych, na przykład powinowactwo do integryny ανβ3.
Związki przedstawione wzorem I zawierają dwa mostki, z których jeden mostek tworzy wiązanie disiarczkowe, a drugi mostek zawiera wiązanie tioeterowe (siarczkowe), przy czym mostki te powodują zwijanie się fragmentu peptydowego w konfigurację „gniazdową”.
Związki według obecnego wynalazku mają więc co najwyżej jeden mostek disiarczkowy przypadający na ugrupowanie cząsteczki. Związki według obecnego wynalazku są zaskakująco trwałe in vivo oraz w warunkach stosowanych podczas znakowania, na przykład podczas znakowania technetem.
Ujawnione niniejszym nowe związki mogą być zastosowane do terapeutycznie skutecznego leczenia, jak też do celów obrazowania.
PL 207 834 B1
Ujawnione w niniejszym zgłoszeniu związki na bazie peptydów są przedstawione wzorem I:
W1 s-s ^-C (=0) -x1-x2-x3-g-d-x4-x5-x6-x7 S- (CH2)h (I) albo są fizjologicznie dopuszczalnymi solami takich związków, przy czym
G oznacza glicyn ę, i
D oznacza kwas asparaginowy, i
R1 oznacza -(CH2)n- albo -(CH2)n-C6H4-, w szczególności R1 oznacza -(CH2), i n oznacza dodatnią liczbę cał kowitą pomię dzy 1 a 10, i h oznacza dodatnią liczbę cał kowitą 1 albo 2, i
X1 oznacza resztę aminokwasu, który to aminokwas posiada boczny łańcuch funkcyjny, taki jak kwasowy albo aminowy, w szczególności kwas asparaginowy albo glutaminowy, lizyna, homolizyna, kwas diaminoalkanowy albo kwas diaminopropionowy,
X2 i X4 niezależnie oznaczają resztę aminokwasu zdolną do tworzenia wiązania disiarczkowego, w szczególnoś ci resztę cysteiny albo homocysteiny, i
X3 oznacza argininę, N-metyloargininę albo resztę naśladującą argininę, w szczególności X3 oznacza argininę, i
X5 oznacza hydrofobowy aminokwas albo jego pochodne, w szczególności resztę tyrozyny, fenyloalaniny, 3-jodotyrozyny albo naftyloalaniny i
X6 oznacza resztę aminokwasu zawierającą tiol, w szczególności resztę cysteiny albo resztę homocysteiny, i
X7 nie występuje albo oznacza homogeniczny fragment biomodyfikatora, w szczególności na bazie fragmentu składowego z monodyspersyjnego PEG, zawierający 1 do 10 jednostek owego fragmentu składowego, przy czym wymieniony biomodyfikator spełnia funkcję modyfikowania farmakokinetyki i szybkości klirensu z krwi wymienionych środków. Ponadto, X7 może oznaczać 1 do 10 reszt aminokwasu, na przykład glicyny, lizyny, kwasu asparaginowego albo seryny. może oznaczać jednostkę biomodyfikatora utworzoną przez polimeryzację struktury typu monodyspersyjnego PEG, kwasu 17-amino-5-okso-6-aza-3,9,12,15-tetraoksaheptadekanowego, przedstawionego wzorem II,
o o (II) w którym n jest równe liczbie cał kowitej od 1 do 10, oraz w którym jednostka C-koń cowa jest fragmentem amidowym,
W1 nie występuje albo oznacza fragment dystansujący, a w szczególności jest pochodną kwasu glutarowego i/albo bursztynowego i/albo jednostki na bazie glikolu polietylenowego i/albo jednostki o wzorze II
PL 207 834 B1
Z1 jest środkiem przeciwnowotworowym, czynnikiem chelatującym albo fragmentem reporterowym (znacznikiem), który może być przedstawiony jako czynnik chelatujący o wzorze III
w którym każda z grup R1, R2, R3, i R4 niezależnie jest grupą R;
każda grupa R niezależnie jest H albo grupą C1-10-alkilową, C3-10-alkiloarylową, C2-10-alkoksyalkilową, C1-10-hydroksyalkilową, C1-10-alkiloaminą, grupą C1-10-fluoroalkilową albo 2 albo większa liczba grup R, razem z atomami, do których są one dołączone tworzą pierścień karbocykliczny, heterocykliczny, nasycony albo nienasycony, albo może oznaczać czynnik chelatujący przedstawiony wzorami a, b, c i d.
Czynnik chelatujący w związkach według wynalazku jest przedstawiony wzorem e.
Koniugaty zawierające czynniki chelatujące przedstawione wzorem III mogą być znakowane radioizotopami w temperaturze pokojowej, w warunkach wodnych i przy pH bliskim neutralnemu pH, co daje dobrą czystość radiochemiczną RCP (ang. radiochemical purity). Ryzyko otwierania mostków disiarczkowych w komponencie peptydowym jest mniejsze w temperaturze pokojowej niż w temperaturze podwyższonej. Dalszą zaletą znakowania radioizotopami w temperaturze pokojowej jest uproszczona procedura, możliwa do przeprowadzenia w warunkach apteki szpitalnej.
PL 207 834 B1
Rola fragmentu dystansującego W1 polega na oddaleniu stosunkowo objętościowego czynnika chelatującego od centrum aktywnego składnika peptydowego. Fragment dystansujący W1 może też być stosowany do zwiększenia odległości pomiędzy objętościowym środkiem przeciwnowotworowym a centrum aktywnym sk ł adnika peptydowego.
Okazało się, że biomodyfikator X7 zmienia własności farmakokinetyczne związków i szybkość ich klirensu z krwi. Biomodyfikator wywołuje mniejszy wychwyt związków w tkance, to znaczy w mięśniu, wątrobie etc. i w ten sposób daje lepszy obraz diagnostyczny z uwagi na zmniejszenie zakłóceń przez tło. Wydalanie zachodzi głównie przez nerki, co stanowi dodatkową korzyść zastosowania biomodyfikatora.
Jednakże ujawnione niniejszym związki przedstawione wzorem I mogą również zawierać czynniki chelatujące Z1, według definicji w tabeli 1.
Z1 może zawierać fragment reporterowy, który zawiera nuklid promieniotwórczy. Dalsze definicje czynników chelatujących wyszczególniono w tabeli 1 poniżej.
PL 207 834 B1
Ρ = grupa zabezpieczająca (np. benzoilowa, acetylowa, etoksyetylowa EOE); Yi, Y2 zawiera odpowiednią grupę funkcyjną, taką, że może ona być skoniugowana do przenośnika peptydowego; szczególnie H (MAG3), albo łańcuch boczny dowolnego aminokwasu, w formie albo L albo D.
Yi, Y2, Y3 - zawiera odpowiednia grupę funkcyjną, taką, że może ona być skoniugowana z przenośnikiem peptydowym; szczególnie H, albo łańcuch boczny dowolnego aminokwasu, w formie albo L albo D.
PL 207 834 B1
PL 207 834 B1
PL 207 834 B1
W związkach przedstawionych wzorem I fragment Z1 może obejmować wiązanie izotopu 18F albo izotopu Cu, wprowadzanych do danego czynnika albo jako grupa prostetyczna, albo na drodze reakcji podstawienia albo addycji. Tak utworzony związek może więc być zastosowany do obrazowania w Emisyjnej Tomografii Pozytronowej (PET).
W zwią zkach przedstawionych wzorem I fragment Z1 moż e oznaczać ś rodek przeciwnowotworowy. W takim przypadku związek będzie kierował się na centrum angiogenne związane z rakiem i dostarczał środek przeciwnowotworowy do obszaru chorobowego.
Środek przeciwnowotworowy może być wybrany spośród cyklofosfamidu, chlorambucilu, busulfanu, metotreksatu, cytarabiny, fluorouracylu, winblastyny, paklitakselu, doksorubicyny, daunorubicyny, etopozydu, tenipozydu, cisplatyny, amsakiyny, docetakselu, ale również może zostać zastosowana szeroka gama innych środków przeciwnowotworowych.
PL 207 834 B1
Składnik peptydowy opisanych tutaj koniugatów nie posiada wolnych zakończeń aminowych ani karboksylowych. Wprowadza to do tych związków znaczący wzrost odporności na rozkład enzymatyczny i, w rezultacie, związki te wykazują zwiększoną trwałość in vivo w porównaniu z wieloma znanymi wolnymi peptydami.
W obecnym zastosowaniu, termin „aminokwas” odnosi się w jego najszerszym rozumieniu do proteogenicznych L-aminokwasów, D-aminokwasów, chemicznie modyfikowanych aminokwasów, N-metyloaminokwasów, Ca-metyloaminokwasów, do związków naśladujących aminokwasowy łańcuch boczny oraz nienaturalnych aminokwasów takich jak naftyloalanina. Korzystny jest dowolny aminokwas występujący w przyrodzie albo związki naśladujące takie występujące w przyrodzie aminokwasy.
W większości przypadków korzystnie jest, gdy wszystkie aminokwasy w peptydzie są w formie L. Jednakże w niektórych wykonaniach obecnego wynalazku jeden, dwa, trzy albo większa liczba aminokwasów w peptydzie występują w formie D. Włączenie takich aminokwasów występujących w formie D może mieć znaczny wpływ na trwałość związku w osoczu.
Zgodnie z wynalazkiem, dowolna reszta aminokwasowa przedstawiona na wzorach związków I-IV korzystnie może oznaczać aminokwas występujący w przyrodzie i, niezależnie, w dowolnej z konfiguracji D albo L.
Niektóre ze związków według obecnego wynalazku są przenośnikami na bazie RGD, wykazującymi wysokie powinowactwo. Stosowany tu termin „przenośnik na bazie RGD, wykazujący wysokie powinowactwo” odnosi się do związków o Ki < 10 nM, a w szczególności < 5 nM, według testu oznaczającego stopień kompetycyjnego wiązania do integryny ave3, przy czym wartość Ki jest wyznaczana przez kompetycję ze znanym ligandem o wysokim powinowactwie, echistatyną. Sposoby przeprowadzania takich testów kompetycyjnych są dobrze znane w stanie techniki.
Obecny wynalazek dotyczy też kompozycji farmaceutycznej zawierającej skuteczną ilość (na przykład ilość powodującą skuteczne wzmocnienie kontrastu obrazu przy obrazowaniu in vivo) związku według wynalazku albo jego soli, wraz z jednym albo większą liczbą farmaceutycznie dopuszczalnych środków wspomagających, zaróbek albo rozcieńczalników.
Ponadto, obecny wynalazek dotyczy kompozycji farmaceutycznej przeznaczonej do leczenia choroby, która to kompozycja zawiera skuteczną ilość związku według wynalazku, albo addycyjną sól takiego związku z kwasem, wraz z jednym albo większą liczbą farmaceutycznie dopuszczalnych środków wspomagających, zaróbek albo rozcieńczalników.
Do innych reprezentatywnych elementów dystansujących (W1) w związku o wzorze I należą polisacharydy budulcowe, polisacharydy zapasowe, kwasy poliaminowe i ich estry metylowe i etylowe, oraz polipeptydy, oligosacharydy i oligonukleotydy, które mogą, ale nie muszą zawierać ośrodki enzymatycznego rozszczepiania.
Fragmenty reporterowe (Z1) w środkach kontrastujących mogą być dowolnymi fragmentami umożliwiającymi detekcję bezpośrednią albo pośrednią, w trakcie procedury diagnostycznego obrazowania in vivo. Korzystnie środek kontrastujący zawiera jeden czynnik reporterowy (znacznik). Korzystne są fragmenty emitujące wykrywalne promieniowanie albo fragmenty mogące emitować takie promieniowanie na skutek działania powodującego emisję (na przykład na drodze rozpadu radioaktywnego).
W celach obrazowania metodą rezonansu magnetycznego, odpowiedni czynnik reporterowy jest albo izotopem o niezerowym spinie jądrowym (taki jak 19F) albo substancją mającą niesparowane spiny elektronowe i przez to mającą własności paramagnetyczne, superparamagnetyczne, ferrimagnetyczne albo ferromagnetyczne; w celach obrazowania świetlnego czynnik reporterowy ma właściwość rozpraszania światła (na przykład cząstka kolorowa albo niekolorowa), absorpcji światła albo emitowania światła; czynnik reporterowy stosowany w celach obrazowania magnetometrycznego ma wykrywalne właściwości magnetyczne; w celach obrazowania impedancją elektryczną czynnik reporterowy wywiera wpływ na impedancję elektryczną; ponadto czynnik reporterowy stosowany do scyntygrafii, SPECT, PET i tym podobnych jest nuklidem promieniotwórczym.
Można ogólnie stwierdzić, że czynnik reporterowy może być (1) chelatowalnym metalem albo wieloatomowym jonem zawierającym metal (to znaczy TcO, etc.), przy czym metal jest metalem o wysokiej liczbie atomowej (na przykład o liczbie atomowej większej od 37), tworem paramagnetycznym (na przykład metalem przejściowym albo lantanowcem) albo izotopem radioaktywnym, (2) związanym kowalencyjnie tworem niemetalicznym, który posiada centrum z niesparowanymi elektronami (na przykład tlen albo węgiel w trwałym wolnym rodniku), niemetalem o wysokiej liczbie atomowej, albo izotopem promieniotwórczym, (3) klasterowym skupiskiem wieloatomowym albo kryształem zawiera14
PL 207 834 B1 jącym atomy o wysokiej liczbie atomowej, wykazującym kooperatywne cechy magnetyczne (na przykład superparamagnetyzm, ferrimagnetyzm, albo ferromagnetyzm) albo zawierającym nuklidy promieniotwórcze.
Przykłady szczególnie korzystnych grup reporterowych (Z1) przedstawiono bardziej szczegółowo poniżej.
Chelatowany metaliczny czynnik reporterowy korzystnie wybrany jest z grupy obejmującej 90Y, 99mTc, 111In, 47Sc, 67Ga, 51Cr, 177mSn, 67Cu, 167Tm, 97Ru, 188Re, 177Lu, 199Au, 203Pb, 141Ce.
Możliwe jest chelatowanie jonów metali grupami chelatującymi znajdującymi się na fragmencie łącznika. Dalsze przykłady odpowiednich grup chelatujących ujawniono w opisach patentowych US 464-7447, WO 89/00557, US 5367080, US 5364613.
Sposoby łączenia wszelkich obecnych czynników chelatujących z metalem leżą w ramach umiejętności specjalisty. Metale mogą być włączone do fragmentu chelatującego dowolnym z trzech ogólnych sposobów: przez bezpośrednie wbudowanie, przez syntezę z fragmentów i/albo przez wymianę metalu (transmetalację). Korzystne jest bezpośrednie wbudowanie metalu.
Tak więc jest pożądane, aby jon metalu ulegał łatwo kompleksowaniu z czynnikiem chelatującym, na przykład już poprzez ekspozycję na działanie, albo zmieszanie wodnego roztworu fragmentu zawierającego czynnik chelatujący z solą metalu, w roztworze wodnym, korzystnie o pH w zakresie od około 4 do około 11. Solą może być dowolna sól, ale w szczególności sól jest rozpuszczalną w wodzie solą danego metalu, taką jak sól kwasu halogenowodorowego. Sole wybrane są w taki sposób, aby nie zakłócać wiązania się jonu metalu z czynnikiem chelatującym.
Fragment zawierający czynnik chelatujący korzystnie znajduje się w roztworze wodnym o wartości pH pomiędzy około 5 i około 9, bardziej korzystnie o wartości pH pomiędzy około 6 i około 8. W celu wytworzenia optymalnego pH, fragment zawierający czynnik chelatujący może być zmieszany z solami buforowymi, takimi jak cytrynian, węglan, octan, fosforan i boran. Korzystnie sole buforowe wybrane są w taki sposób, aby nie zakłócać zachodzącego później wiązania jonu metalu z czynnikiem chelatującym.
Następujące izotopy albo pary izotopów mogą być zastosowane zarówno do obrazowania jak i do terapii, bez koniecznoś ci zmiany sposobu znakowania izotopami promieniotwórczymi albo zmiany czynnika chelatującego: 47Sc21; 141Ce58; 188Re75; 177Lu71; 199Au79; 47Sc21; 131I53; 67Cu29; 131I53 i 123I53; 188Re75 i 99mTc43; 90Y39 i 87Y39; 47Sc21 i 44Sc21; 90Y39 i 123I53; 146Sm62 i 153Sm62; oraz 90Y39 i 111ln49.
Korzystne niemetaliczne czynniki reporterowe atomowe obejmują izotopy promieniotwórcze takie jak 123I, 131I i 18F jak również atomy o niezerowym spinie jądrowym takie jak 19F oraz ciężkie atomy, takie jak I.
W szczególności możliwe jest zastosowanie promieniotwórczych izotopów jodu albo fluoru. Na przykład, jeśli peptyd albo łącznik zawierają podstawniki, które mogą być chemicznie podstawione jodem albo fluorem w reakcji prowadzącej do utworzenia wiązania kowalencyjnego, jak na przykład podstawniki zawierające grupę hydroksyfenylową albo p-nitrobenzoilową, wówczas takie podstawniki mogą być znakowane sposobami dobrze znanymi w stanie techniki, odpowiednio za pomocą promie niotwórczego izotopu jodu albo fluoru. Takie indywidua mogą być użyte do zastosowań terapeutycznych albo do obrazowania diagnostycznego. Zarazem, metal dołączony do czynnika chelatującego znajdującego się na tym samym łączniku peptydowym może również być zastosowany do leczenia albo do diagnostycznego obrazowania.
Związki według wynalazku znakowane izotopem promieniotwórczym są przeznaczone do obrazowania nowotworów.
Ujawnione niniejszym środki diagnostyczne mogą być podawane pacjentom w celach obrazowania w ilościach wystarczających do uzyskania kontrastu pożądanego w danej technice obrazowania. Gdy rolę czynnika reporterowego spełnia metal, wówczas zazwyczaj dawki od 0,001 do 5,0 mmoli chelatowanego jonu metalu obrazującego na kilogram wagi ciała pacjenta są skuteczne w celu osiągnięcia odpowiednich wzmocnień kontrastu. Gdy czynnikiem reporterowym jest nuklid promieniotwórczy, wówczas dawki 0,01 do 100 mCi, korzystnie 0,1 do 50 mCi, są zazwyczaj wystarczające na 70 kg wagi ciała.
Dawkowanie związków według wynalazku w zastosowaniach leczniczych zależeć będzie od danego stanu chorobowego poddawanego leczeniu ale, ogólnie, będzie rzędu od 1 pmol/kg do 1 mmol/kg wagi ciała.
Związki według wynalazku w celach dawkowania mogą być zatem formułowane przy użyciu farmaceutycznie dopuszczalnych środków pomocniczych, nośników albo zaróbek, na sposób całkowiPL 207 834 B1 cie zgodny ze stanem techniki. Na przykład, związki te, ewentualnie z dodatkiem farmaceutycznie dopuszczalnych środków pomocniczych i zaróbek, mogą być przeprowadzone w zawiesinę albo rozpuszczone w medium wodnym, po czym utworzony roztwór albo zawiesina poddawane są sterylizacji.
Związki o wzorze I mogą być skuteczne w leczeniu stanów chorobowych, jak również wykrywalne w obrazowaniu in vivo. Na przykład, przenośniki umiejscowione na ugrupowaniu reporterowym mogą wykazywać skuteczność terapeutyczną, na przykład na skutek efektu radioterapeutycznego wywieranego przez nuklid promieniotwórczego czynnika reporterowego znajdującego się w fragmencie strukturalnym przenośnika.
Zastosowanie związków o wzorze I do wytwarzania kompozycji leczniczych (leków) oraz zastosowanie w sposobach leczenia i profilaktyki, korzystnie w leczeniu raka, w zastosowaniu do ciała ludzi albo zwierząt, jest również ujawnione niniejszym.
Dalsze przykłady czynników reporterowych, które mogą być zastosowane w kontekście obecnego zgłoszenia przytoczono na stronach 63-66 oraz 70-86 w WO 98/47541, przy czym ujawnienia przedstawione na tych stronach przytaczane są tutaj w całości w charakterze odnośnika. Niniejszym stwierdza się, że każdy poszczególny czynnik reporterowy albo jego część, które ujawniono na wyżej wymienionych stronach, uważa się za część opisu wynalazku zawartego w niniejszym zgłoszeniu.
Obecny wynalazek dotyczy zastosowania związku według wynalazku do wytwarzania środka kontrastowego stosowanego w sposobie diagnozowania obejmującym wprowadzenie owego środka kontrastowego do ciała ludzkiego albo ciała zwierzęcia i wytworzenie obrazu co najmniej części tego ciała.
Niniejszym opisano także sposób wytwarzania obrazu ciała ludzkiego albo zwierzęcego, który to sposób obejmuje wprowadzenie środka kontrastowego do owego ciała, na przykład do układu naczyń krwionośnych i wytworzenie obrazu co najmniej części tego ciała, do której ów środek kontrastowy dotarł, z zastosowaniem scyntygrafii, technik PET albo SPECT, przy czym w charakterze wyżej wymienionego środka kontrastowego stosuje się środek przedstawiony wzorem I.
Ponadto rozwiązania tu przedstawione umożliwiają wytwarzanie wzmocnionych obrazów ciała ludzkiego albo zwierzęcego, do którego uprzednio wprowadzono kompozycję środka kontrastowego zawierającą związek zdefiniowany wzorem I, przy czym wytwarzanie obrazu dotyczy co najmniej części ciała.
Opisano niniejszym również sposób monitorowania skutków leczenia ciała ludzi albo zwierząt za pomocą leku, w celu zwalczania stanu związanego z rakiem, w szczególności w celu zwalczania angiogenezy, na przykład skutków leczenia środkiem cytotoksycznym, który to sposób obejmuje wprowadzenie do ciała środka przedstawionego wzorem I oraz detekcję wychwytu owego środka przez receptory komórkowe, korzystnie przez receptory komórek śródbłonka, zwłaszcza przez receptory ave3, przy czym wprowadzenie środka i detekcja ewentualnie, ale i korzystnie, wykonywane są w sposób powtarzalny, na przykład przed leczeniem, w czasie leczenia i po leczeniu owym lekiem.
Związki według wynalazku mogą być syntezowane przy użyciu wszystkich sposobów znanych w syntezie chemicznej ale szczególnie użyteczna jest tu metodologia syntezy na fazie stałej według Merrifieid'a, wykorzystująca automatyczny syntezator peptydów [J. Am. Chem. Soc. 85: 2149 (1964)]. Przed poddaniem testowi przesiewowemu in vitro, peptydy oraz chelaty peptydowe mogą być oczyszczane przy użyciu wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) i charakteryzowane za pomocą spektrometrii masowej oraz za pomocą analitycznej HPLC.
Obecny wynalazek dodatkowo ilustrują następujące przykłady, które nie ograniczają jego zakresu.
Przykłady
P r z y k ł a d 1
Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys(cPn216-glutarylo)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6--Phe-Cys]-NH2
PL 207 834 B1 la) Synteza chelatu cPn216
W celu uzyskania szczegół ów dotyczą cych syntezy chelatu cPn216 i technetu. Czytelnika odsyła się do opisu zgłoszenia patentowego Wielkiej Brytanii GB0116815,2 lb) Synteza produktu pośredniego - kwas cPn216-glutarowy
cPn216 (100 mg, 0,29 mmola) rozpuszczono w DMF (10 ml), i porcjami dodano bezwodnik glutarowy (33 mg, 0,29 mmola), utrzymując mieszanie. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 23 godziny do uzyskania zupełnego przereagowania w kierunku pożądanego produktu. Czysty kwas otrzymano z dobrą wydajnością w wyniku wysokosprawnej chromatografii cieczowej w układzie faz odwróconych (RP-HPLC).
1c) Synteza estru tetrafluorotiofenylowego kwasu cPn216-glutarowego
Do mieszaniny związku kwas cPn215-glutarowy (300 mg, 0,66 mmola) i DMF (2 ml) dodano HATU (249 mg, 0,66 mmola) i NMM (132 μ|, 1,32 mmola). Mieszaninę mieszano przez 5 minut, po czym dodano tetrafluorotiofenol (119 mg, 0,66 mola). Roztwór mieszano przez 10 minut, a następnie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono układem 20% acetonitryl/woda (8 ml) i produkt oczyszczono za pomocą RP-HPLC. Po osuszeniu na drodze liofilizacji otrzymano 110 mg pożądanego produktu.
1d) Synteza ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-NH2
Peptyd ten syntezowano na automatycznym syntezatorze peptydów ABl 433A, rozpoczynając od żywicy Rink Amide AM, w skali 0,25 mmola, przy użyciu nabojów z 1 mmolem aminokwasu. Aminokwasy przed sprzęganiem aktywowano przy pomocy HBTU. Grupy aminowe N-końcowe poddano chloroacetylowaniu stosując roztwór bezwodnika kwasu chlorooctowego w DMF, w czasie 30 minut.
Jednoczesne odszczepienie peptydu od żywicy i usuwanie grup zabezpieczających z łańcuchów bocznych (za wyjątkiem tBu) przeprowadzono w TFA, zawierającym TIS (5%), H2O (5%) i fenol (2,5%), w czasie dwóch godzin.
Po przerobieniu otrzymano surowy peptyd (295 mg); analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,42 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej: obliczono M+H: 1118,5, znaleziono 1118,6.
PL 207 834 B1
1e) Synteza tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-NH2
ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-NH2 (295 mg) rozpuszczono w mieszaninie woda/acetonitryl. pH mieszaniny doprowadzono do pH 8 za pomocą roztworu amoniaku i mieszano przez 16 godzin.
Po przerobie otrzymano surowy peptyd (217 mg); Analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,18 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej: obliczono M+H: 1082,5, znaleziono 1082,6.
1f) Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-NH2
Do tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-NH2 (217 mg) dodano roztwór anizolu (500 μ!), DMSO (2 ml) i TFA (100 ml). Po 60 minutach TFA usunięto pod próżnią i peptyd wytrącono przez dodanie eteru dietylowego.
Surowy produkt (202 mg) oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC (kolumna Phenomenex Luna 10 μ C18 (2) 250 x 50 mm), stosując 0 - 30% B, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA, w czasie 60 minut, przy prędkości przepływu 50 ml/minutę. Po liofilizacji uzyskano 112 mg czystej substancji; Analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 5,50 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej: obliczono M+H: 968, znaleziono 971.
PL 207 834 B1
1g) Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH?CO-Lys(cPn216-glutaryl)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-NH2
Disiarczek [Cys2-6] tioeter cyklo[CH2CO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-NH2 (9,7 mg), chelat cPn216 (aktywny ester; 9,1 mg) i N-metylomorfolinę (6 μθ rozpuszczono w DMF (0,5 ml). Mieszaninę mieszano w ciągu 3 godzin.
Mieszaninę reakcyjną oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC (kolumna Phenomenex Luna 5 μ C18 (2) 250 x 21,2 mm), stosując 0 - 30% B, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA, w czasie 40 minut, przy prędkości przepływu 10 ml/minutę. Po liofilizacji uzyskano 5,7 mg czystej substancji; Analityczna HPLC: gradient 0 - 30% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detek-cja UV 214 nm; czas retencji produktu: 7,32 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej: obliczono M+H: 1407,7, znaleziono 1407,6.
P r z y k ł a d 2
Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH?CO-Lys(cPn216-glutaryl)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH? gdzie n= 1.
2a) Synteza kwasu 17-(Fmoc-amino)-5-okso-6-aza-3,9,12,15-tetraoksaheptadekanowego
Ten fragment składowy sprzęga się z fazą stałą wykorzystując reakcje grupy Fmoc. Przyłączona do fazy stałej forma tego fragmentu składowego jest dalej określana w formie skrótowej jako (PEG)n, gdzie n jest dodatnią liczbą całkowitą.
1,11-Diazvdo-3,6,9-troksaundekan
Roztwór bezwodnego glikolu tetraetylenowego (19,4 g, 0,100 mola) i chlorku metanosulfonylu (25,2 g, 0,220 mola) w bezwodnym THF (100 ml) utrzymywano pod argonem i chłodzono do 0°C w łaźni lodowo-wodnej. Do kolby wkroplono w ciągu 45 minut roztwór trietyloaminy (22,6 g, 0,220 mola) w bezwodnym THF (25 ml). Po upływie 1 godziny łaźnię chłodzącą usunięto i mieszanie kontynuowano przez 4 godziny, po czym dodano wodę (60 ml). Do mieszaniny dodano, w podanej kolejności, wodorowęglan sodu (6 g, do pH 8) i azydek sodowy (14,3 g, 0,220 mola). THF usunięto przez destylację i roztwór wodny ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną w ciągu 24 godzin (utworzyły się dwie warstwy). Mieszaninę ochłodzono i dodano eter (100 ml). Fazę wodną nasycono chlorkiem sodu. Fazy rozdzielono, fazę wodną ekstrahowano eterem (4 x 50 ml). Połączone fazy organiczne przemywano solanką (2 x 50 ml) i osuszono (MgSO4). Po przesączeniu i zatężeniu otrzymano żółty olej (22,1 g, 91%). Produkt ten był zastosowany w następnym etapie bez dodatkowego oczyszczania.
11-Azydo-3,6,9-trioksaundekanamina
Do intensywnie mieszanej mieszadłem mechanicznym zawiesiny 1,11-diazydo-3,6,9-trioksaundekanu (20,8 g, 0,085 mola) w 5% kwasie solnym (200 ml) dodano w ciągu 3 godzin roztwór trifenylofosfiny (19,9 g, 0,073 mola) w eterze (150 ml), w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną mieszano jeszcze w ciągu 24 godzin. Fazy rozdzielono i fazę wodną ekstrahowano dichlorometanem (3 x 40 ml). Fazę wodną ochłodzono w łaźni lodowo-wodnej i pH doprowadzono do pH = 12 przez dodanie KOH. Produkt wyekstrahowano dichlorometanem (5 x 50 ml). Połączone fazy organiczne osuszono (MgSO4). Po odsączeniu i odparowaniu rozpuszczalnika otrzymano żółty olej (14,0 g, 88%). Analiza
PL 207 834 B1 za pomocą spektrometrii masowej MALDl-TOF (matryca: kwas a-cyjano-4-hydroksycynamonowy) dała pik M+H przy 219, zgodnie z oczekiwaniem. Dalsza charakterystyka za pomocą spektroskopii 1H (500 MHz) i 13C (125 MHz) NMR potwierdziła strukturę produktu.
Kwas 17-azydo-5-okso-6-aza-3.9,12,15-tetraoksaheptadekanowy
Do roztworu 11-azydo-3,6,9-trioksaundekanaminy (10,9 g, 50,0 mmola) w dichlorometanie (100 ml) dodano bezwodnik diglikolowy (6,38 g, 55,0 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc. Analiza HPLC (kolumna Vydac 218TP54; rozpuszczalniki: A = woda/0,1% TFA i B = acetonitryl/0,1% TFA; gradient 4 - 16% B przez 20 minut; przepływ 1,0 ml/minutę; detekcja UV 214 i 284 nm) wykazała zupełne przereagowanie substratu do produktu o czasie retencji 18,3 minuty. Roztwór zatężono, co w wyniku dało ilościową wydajność produktu w formie żółtego syropu. Produkt poddano analizie za pomocą LC-MS (z jonizacją ES); uzyskano [MH]+ przy m/z 335, zgodnie z oczekiwaniem. Wyniki spektroskopii 1H (500 MHz) i 13C (125 MHz) NMR były zgodne ze strukturą produktu. Produkt zastosowano w następnym etapie bez dalszego oczyszczania.
Kwas 17-amino-5-oksa-6-aza-3,9,12,15-tetraoksatieptadekanowy
Roztwór kwasu 17-azydo-5-okso-6-aza-3,9,12,15-tetraoksaheptadekanowego (8,36 g, 25,0 mmola) w wodzie (100 ml) redukowano przy pomocy H2 (g)- Pd/C (10%). Reakcję prowadzono do momentu, gdy analiza LC-MS wykazała zupełne przereagowanie substratu (kolumna Vydac 218TP54; rozpuszczalniki: A = woda/0,1% TFA i B = acetonitryl/0,1% TFA; gradient 4 - 16% B przez 20 minut; przepływ 1,0 ml/minutę; detekcja UV 214 i 284 nm, jonizacja ES dająca M+H przy m/z 335 dla substratu i 309 dla produktu). Roztwór przesączono i stosowano bezpośrednio w następnym etapie.
Kwas 17-(Fmoc-amino)-5-okso-6-aza-3,9,12,15-tetraoksaheptadekanowy
Do wodnego roztworu kwasu 17-amino-5-oksa-6-aza-3,9,12,15-tetraoksaheptadekanowego otrzymanego w wyniku opisanej powyżej procedury (co odpowiada 25,0 mmola aminokwasu) dodano kwaśny węglan sodu (5,04 g, 60,0 mmola) i dioksan (40 ml). Wkroplono roztwór chlorku Fmoc (7,11 g, 0,275 mola) w dioksanie (40 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc. Dioksan odparowano (wyparka rotacyjna) i fazę wodną ekstrahowano octanem etylu. Fazę wodną zakwaszono przez dodanie kwasu solnego i wytrąconą substancję ekstrahowano chloroformem. Fazę organiczną osuszono (MgSO4), odsączono i zatężono. W wyniku uzyskano żółty syrop (11,3 g, 85%). Strukturę potwierdzono za pomocą analizy LC-MS (kolumna Vydac 218TP54; rozpuszczalniki: A = woda/0,1% TFA i B = acetonitryl/0,1% TFA; gradient 40 - 60% B przez 20 minut; przepływ 1,0 ml/minutę; detekcja UV 214 i 254 nm, jonizacja ES dająca M+H przy m/z 531, zgodnie z oczekiwaniem dla piku produktu przy 5,8 minuty). Analiza wykazała bardzo małą zawartość produktów ubocznych i substancję tę zastosowano bez dodatkowego oczyszczania.
2b) Synteza ClCH£CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)n-NH£, gdzie n = 1
NH2 Wzór cząsteczkowy = C58H98CIN15O17S3
Jednostkę PEG sprzężono manualnie z żywicą Rink Amide AM, wychodząc ze skali 0,25 mmola, stosując aktywację HATU. Pozostały fragment peptydowy dołączono na automatycznym syntezatorze peptydów ABl 433A, stosując naboje z 1 mmol aminokwasów. Przed sprzęganiem, aminokwasy wstępnie aktywowano za pomocą HBTU. Grupy aminowe N-końcowe poddano chloroacetylowaniu przy użyciu roztworu bezwodnika chlorooctowego w DMF, w czasie 30 minut.
Jednoczesne odszczepienie peptydu od żywicy i usuwanie grup zabezpieczających z łańcuchów bocznych (za wyjątkiem tBu) przeprowadzono w TFA, zawierającym TIS (5%), H2O (5%) i fenol (2,5%), w czasie dwóch godzin.
Po przerobie otrzymano surowy peptyd (322 mg); Analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,37 minuty. Dalszą
PL 207 834 B1 charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej: obliczono M+H: 1409, znaleziono 1415.
2c) Synteza tioeteru cvklo[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 1
ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)-NH2 (322 mg) rozpuszczono w mieszaninie woda/acetonitryl. pH mieszaniny doprowadzono do pH = 8 za pomocą roztworu amoniaku i mieszano w czasie 16 godzin.
Po przerobie otrzymano surowy peptyd; Analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,22 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej: obliczono M+H: 1373, znaleziono: 1415.
2d) Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 1
Do tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)-NH2 dodano roztwór anizolu (200 μΐ), DMSO (2 ml) i TFA (100 ml). Po 60 minutach TFA usunięto pod próżnią i peptyd wytrącono przez dodanie eteru dietylowego.
Surowy produkt (70 mg) oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC (kolumna Phenomenex Luna 5 μ C18 (2) 250 x 21,20 mm, stosowano 0 - 30% B, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA, w czasie 40 minut, przy prędkości przepływu 10 ml/minutę. Po liofilizacji uzyskano 46 mg czystej substancji. Analityczna HPLC: gradient 0 - 30% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,80 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej: obliczono M+H: 1258,5, znaleziono 1258,8.
PL 207 834 B1
2e) Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH?CO-Lys(cPn216-glutarylo]-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH, gdzie n = 1
Disiarczek [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)-NH2 (13 mg), chelat cPn216 (ester aktywny; 9,6 mg) i N-metylomorfolinę (8 μ!) rozpuszczono w DMF (0,5 ml). Mieszaninę mieszano w ciągu 2 godzin i 30 minut.
Mieszaninę reakcyjną oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC (kolumna Phenomenex Luna 5 μ C18 (2) 250 x 21,20 mm), stosując 0-30% B, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA, w czasie 40 minut, przy prędkości przepływu 10 ml/minutę. Po liofilizacji uzyskano 14,2 mg czystej substancji. Analityczna HPLC: gradient 0 - 30% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA
B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 7,87 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej: obliczono M+H: 1697,8, znaleziono 1697,9.
P r z y k ł a d 3
Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys(cPn216-glutarylo)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 2.
3a) Synteza ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)n-NH?_ gdzie n = 2
PL 207 834 B1
Peptyd zbudowano z fragmentów jak w przykładzie 2b), natomiast obydwie jednostki PEG sprzęgano manualnie.
Po przerobieniu otrzymano surowy peptyd; Analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,40 minuty.
3b) Synteza tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 2
ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)n-NH2, gdzie n = 2, rozpuszczono w mieszaninie woda/acetonitryl. pH Mieszaniny doprowadzono do pH 8 za pomocą roztworu amoniaku i mieszano przez 16 godzin.
Po przerobieniu otrzymano surowy peptyd (380 mg); Analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,28 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono za pomocą spektrometrii masowej: obliczono M+H: 1663, znaleziono 1670.
3c) Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 2
PL 207 834 B1
Do 380 mg tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 2, dodano roztwór anizolu (500 μθ i DMSO (2 ml) w TFA (100 ml). Po 60 minutach TFA usunięto pod próżnią i peptyd wytrącono przez dodanie eteru dietylowego.
Surowy produkt (345 mg) oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC (kolumna Phenomenex Luna 10 μ C18 (2) 250 x 50 mm, stosowano 0 - 30% B, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA, w czasie 60 minut, przy prędkości przepływu 50 ml/minutę. Po liofilizacji otrzymano 146 mg czystej substancji. Analityczna HPLC: gradient 0 - 30% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 7,42 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej, obliczono M+H: 1548,8, znaleziono: 1548,6.
3d) Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys[cPn216-glutarylo)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 2
Disiarczek [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)2-NH2 (146 mg), chelat cPn216 (ester aktywny; 110 mg) i N-metylomorfolinę (76 μ!) rozpuszczono w DMF (6 ml). Mieszaninę mieszano w ciągu 9 godzin.
Oczyszczanie mieszaniny reakcyjnej przeprowadzono za pomocą preparatywnej HPLC (kolumna Phenomenex Luna 10 μ C18 (2) 250 x 50 mm), stosując 0 - 30% B, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA, w czasie 60 minut, przy prędkości przepływu 50 ml/minutę. Po liofilizacji uzyskano 164 mg czystej substancji. Analityczna HPLC: gradient 0 - 30% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 8,13 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej, obliczono M+H: 1988,4, znaleziono: 1988,0.
PL 207 834 B1
P r z y k ł a d 4
Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys(cPn216-glutarylo)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 4.
4a) Synteza ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)n-NH2, gdzie n = 4
Peptyd zbudowano z fragmentów jak w przykładzie 2b), natomiast wszystkie cztery jednostki PEG sprzęgano manualnie.
Po przerobie otrzymano surowy peptyd; analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,5 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,50 minuty.
4b) Synteza tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 4
ClCH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys-(PEG)4-NH2 rozpuszczono w mieszaninie woda/acetonitryl. pH mieszaniny doprowadzono do pH = 8 za pomocą roztworu amoniaku i mieszano przez 16 godzin.
Po przerobie otrzymano surowy peptyd; analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu: 6,37 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono za pomocą spektrometrii masowej, obliczono [M+2H/2]: 1122,0, znaleziono: 1122,5.
PL 207 834 B1
4c) Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cvklo[CH2CO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n= 4
Do tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys(tBu)-Arg-Gly-Asp-Cys(tBu)-Phe-Cys]-(PEG)4-NH2 dodano roztwór anizolu (100 μΐ) i DMSO (1 ml) w TFA (50 ml). Po 60 minutach TFA usunięto pod próżnią i peptyd wytrącono przez dodanie eteru dietylowego.
Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC (kolumna Phenomenex Luna 5 μ C18 (2) 250 x 21,2 mm, stosowano 5 - 50% B, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA, w czasie 40 minut, przy prędkości przepływu 10 ml/minutę. Po liofilizacji otrzymano 12 mg czystej substancji. Analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detelccja UV 214 nm; czas retencji produktu: 4,87 minuty.
4d) Synteza disiarczku [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys(cPn216-glutarylo)-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)n-NH2, gdzie n = 4
Disiarczek [Cys2-6] tioeteru cyklo[CH2CO-Lys-Cys2-Arg-Gly-Asp-Cys6-Phe-Cys]-(PEG)4-NH2 (12 mg), chelat cPn216 (ester aktywny; 5,2 mg) i N-metylomorfolinę (2 μΐ) rozpuszczono w DMF (0,5 ml). Mieszaninę mieszano w ciągu 7 godzin. Oczyszczanie mieszaniny reakcyjnej przeprowadzono za pomocą preparatywnej HPLC (kolumna Phenomenex Luna 5 μ C18 (2) 250 x 21,20 mm), stosując 5 - 50% B, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA, w czasie 40 minut, przy prędkości przepływu 10 ml/minutę. Po liofilizacji uzyskano 8 mg czystej substancji; analityczna HPLC: gradient 5 - 50% B przez 10 minut, gdzie A = H2O/0,1% TFA i B = CH3CN/0,1% TFA; kolumna Phenomenex
PL 207 834 B1
Luna 3 μ C18 (2) 50 x 4,6 mm; przepływ 2 ml/minutę; detekcja UV 214 nm; czas retencji produktu:
5,17 minuty. Dalszą charakterystykę produktu przeprowadzono przy użyciu spektrometrii masowej, obliczono [M+2H]: 1284,6, znaleziono: 1284,9.
Lista sekwencji <110> Amersham Health AS < 120> Związek na bazie peptydu <130> NO 20014954 <150> NO20014954 <151> 2001-10-11 <160> 1 < 170> Patentln version 3.1 <210> 1 <211> 8 <212> PRT <213> Sekwencja nienaturalna <220>
<223> Peptyd syntetyczny <220>
<221> DISIARCZEK <222> (2)..(5) <223> Mostek disiarczkowy pomiędzy resztami aminokwasowymi 2 i 5.
<220>
<221> TIOETER <222> (1)..(8) <223> Mostek tioeterowy pomiędzy resztami aminokwasowymi 1 i 8.
<400> 1
Lys Cys Arg Gly Asp Cys Phe Cys 1 5
PL 207 834 B1

Claims (7)

1. Związek przedstawiony następującymi wzorami: związek I
PL 207 834 B1 lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, przy czym czynnik chelatujący jest przedstawiony wzorem:
PL 207 834 B1 jak pokazano w każdym ze związków I do IV.
2. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że dowolna z reszt aminokwasowych niezależnie ma konfigurację D albo L.
3. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że czynnik chelatujący zawiera nuklidy metali promieniotwórczych, paramagnetyczne jony metali, fluorescencyjne jony metali, jony metali ciężkich albo jony klasterowe.
4. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że czynnik chelatujący zawiera 90Y, 99mTc, 111In, 47Sc, 67Ga, 51Cr, 177mSn, 67Cu, 167Tm, 97Ru, 188Re, 177Lu, 199Au, 203Pb, 141Ce albo 18F.
5. Związek według zastrz. 4, znamienny tym, że czynnik chelatujący zawiera 99mTc.
6. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że zawiera skuteczną ilość związku określonego w zastrz. 1 albo jego sól, wraz z jednym albo większą liczbą farmaceutycznie dopuszczalnych środków wspomagających, zaróbek lub rozcieńczalników.
7. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1 do wytwarzania środka kontrastowego.
PL367273A 2001-07-10 2002-07-08 Związki na bazie peptydów, ich zastosowanie oraz zawierająca je kompozycja farmaceutyczna PL207834B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0116815.2A GB0116815D0 (en) 2001-07-10 2001-07-10 Improved chelator conjugates
NO20014954A NO20014954D0 (no) 2001-10-11 2001-10-11 Peptidbaserte forbindelser

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL367273A1 PL367273A1 (pl) 2005-02-21
PL207834B1 true PL207834B1 (pl) 2011-02-28

Family

ID=26246292

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL367273A PL207834B1 (pl) 2001-07-10 2002-07-08 Związki na bazie peptydów, ich zastosowanie oraz zawierająca je kompozycja farmaceutyczna

Country Status (17)

Country Link
US (3) US7521419B2 (pl)
EP (2) EP1404371B1 (pl)
JP (1) JP4510444B2 (pl)
KR (1) KR100932827B1 (pl)
CN (1) CN1622830A (pl)
AU (1) AU2002313616A1 (pl)
BR (1) BRPI0210886B8 (pl)
CA (1) CA2452923C (pl)
ES (1) ES2719088T3 (pl)
HU (1) HU230901B1 (pl)
IL (2) IL159310A0 (pl)
MX (1) MXPA04000173A (pl)
NO (1) NO333066B1 (pl)
NZ (1) NZ530156A (pl)
PL (1) PL207834B1 (pl)
RU (1) RU2303042C2 (pl)
WO (1) WO2003006491A2 (pl)

Families Citing this family (50)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2719088T3 (es) * 2001-07-10 2019-07-08 Ge Healthcare Ltd Compuestos con base peptídica para localizar receptores de integrina
GB0206750D0 (en) 2002-03-22 2002-05-01 Amersham Plc Radiofluorination methods
NO20030115D0 (no) 2003-01-09 2003-01-09 Amersham Health As Kontrastmiddel
WO2004069281A1 (en) * 2003-01-30 2004-08-19 The General Hospital Corporation Bifunctional molecules comprising at least one integrin-binding and their use in imaging and therapy of angiogenesis and related disorders
GB0305704D0 (en) * 2003-03-13 2003-04-16 Amersham Plc Radiofluorination methods
NO20033115D0 (no) * 2003-07-08 2003-07-08 Amersham Health As Peptid-baserte forbindelser
GB0317815D0 (en) 2003-07-30 2003-09-03 Amersham Health As Imaging agents
JP2007510643A (ja) * 2003-11-06 2007-04-26 ジーイー・ヘルスケア・アクスイェ・セルスカプ 医薬化合物
GB0416062D0 (en) * 2004-07-19 2004-08-18 Amersham Plc Improved N4 chelator conjugates
EP1699494A2 (en) 2003-11-24 2006-09-13 GE Healthcare AS Contrast agent imaging angiotensin ii receptors
EP1718145A4 (en) * 2004-02-02 2012-03-07 Biosight Ltd CONJUGATES FOR CANCER THERAPY AND DIAGNOSIS
EP1729823B1 (en) * 2004-03-04 2009-11-04 GE Healthcare AS Conjugates of angiotensin peptidic analogues and chelating agents for diagnosis and therapy
NZ551210A (en) * 2004-06-16 2009-10-30 Ge Healthcare As Peptide-based compounds
WO2005123768A1 (en) * 2004-06-16 2005-12-29 Ge Healthcare As Peptide-based compounds
GB0420344D0 (en) * 2004-09-14 2004-10-13 Amersham Plc Diagnostic compounds
GB0421308D0 (en) * 2004-09-24 2004-10-27 Amersham Plc Enzyme inhibitor imaging agents
BRPI0518328A2 (pt) * 2004-11-22 2008-11-11 Ge Healthcare As agente de contraste, composiÇço farmacÊutica, uso de um agente de contraste, mÉtodo para gerar imagens realÇadas de um corpo animal ou humano, e, kit para a preparaÇço de um composiÇço radiofarmacÊutica
GB0428012D0 (en) * 2004-12-22 2005-01-26 Hammersmith Imanet Ltd Radiolabelling methods
WO2006073314A1 (en) * 2005-01-06 2006-07-13 Ge Healthcare As Optical imaging
EP1986695B1 (en) * 2006-02-21 2015-06-03 Nektar Therapeutics Segmented degradable polymers and conjugates made therefrom
WO2007109580A1 (en) * 2006-03-17 2007-09-27 Mayo Foundation For Medical Education And Research Assessing lung nodules
US8148575B2 (en) 2006-04-20 2012-04-03 Hammersmith Imanet Limited Radiofluorinated compounds and their preparation
US20100069609A1 (en) * 2006-06-21 2010-03-18 Erik Arstad Chemical methods and apparatus
JP2009541288A (ja) * 2006-06-21 2009-11-26 ハマースミス・イメイネット・リミテッド 放射性標識方法
GB0615211D0 (en) * 2006-07-31 2006-09-06 Ge Healthcare Uk Ltd Asymmetric flouro-substituted polymethine dyes
WO2008026040A2 (en) * 2006-08-28 2008-03-06 Ge Healthcare Limited 68ga-labeled peptide-based radiopharmaceuticals
MX2009006028A (es) * 2006-12-11 2009-06-17 Ge Healthcare As Compuestos basados en peptido radiomarcado y usos de los mismos.
DE102007004283B4 (de) 2007-01-23 2011-03-03 Siemens Ag Magnetresonanz-Kontrastmittel mit eisenbindendem Protein
CN101720328A (zh) * 2007-06-20 2010-06-02 通用电气健康护理有限公司 标记方法
GB0718957D0 (en) * 2007-09-28 2007-11-07 Ge Healthcare Ltd Optical imaging agents
GB0722650D0 (en) 2007-11-19 2007-12-27 Ge Healthcare Ltd Novel imaging method
GB0814722D0 (en) * 2008-08-12 2008-09-17 Ge Healthcare Ltd Treatment monitoring
GB0905438D0 (en) * 2009-03-30 2009-05-13 Ge Healthcare Ltd Radiolabelling reagents and methods
GB0910013D0 (en) * 2009-06-10 2009-07-22 Ge Healthcare Ltd PET imaging of fibogenesis
FR2952300B1 (fr) * 2009-11-09 2012-05-11 Oreal Nouveaux colorants fluorescents a motif heterocyclique disulfure, composition de teinture les comprenant et procede de coloration des fibres keratiniques humaines a partir de ces colorants
EP2598175B1 (en) 2010-07-27 2020-05-20 Serac Healthcare Limited Radiopharmaceutical compositions
WO2013048996A1 (en) * 2011-09-30 2013-04-04 Ge Healthcare Limited Method for the purification of a peptide-based imaging agent precursor
US9353150B2 (en) 2012-12-04 2016-05-31 Massachusetts Institute Of Technology Substituted pyrazino[1′,2′:1 ,5]pyrrolo[2,3-b]-indole-1,4-diones for cancer treatment
GB201511036D0 (en) * 2015-06-23 2015-08-05 Guy S And St Thomas Hospital Nhs Foundation Trust Imaging method
CN108699110B (zh) * 2015-10-23 2023-04-28 特温特大学 整合素结合肽及其用途
WO2017197045A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 Movassaghi Mohammad Convergent and enantioselective total synthesis of communesin analogs
WO2018209239A1 (en) 2017-05-11 2018-11-15 Massachusetts Institute Of Technology Potent agelastatin derivatives as modulators for cancer invasion and metastasis
US10640508B2 (en) 2017-10-13 2020-05-05 Massachusetts Institute Of Technology Diazene directed modular synthesis of compounds with quaternary carbon centers
WO2020247054A1 (en) 2019-06-05 2020-12-10 Massachusetts Institute Of Technology Compounds, conjugates, and compositions of epipolythiodiketopiperazines and polythiodiketopiperazines and uses thereof
JP7230197B2 (ja) * 2019-06-11 2023-02-28 富士フイルム株式会社 環状ペプチド、細胞足場材、細胞分離材、及び、培地
CN113993882B (zh) 2019-06-11 2024-12-17 富士胶片株式会社 环肽、细胞支架材料、细胞分离材料及培养基
WO2022182415A1 (en) 2021-02-24 2022-09-01 Massachusetts Institute Of Technology Himastatin derivatives, and processes of preparation thereof, and uses thereof
GB202202919D0 (en) 2022-03-02 2022-04-13 Serac Healthcare Ltd Methods for imaging integrin expression
GB202310871D0 (en) 2023-07-14 2023-08-30 Amicoat As Materials with anti microbial coatings
WO2025233638A1 (en) 2024-05-10 2025-11-13 Serac Healthcare Ltd Radiopharmaceutical imaging method of adenomyosis

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4647447A (en) 1981-07-24 1987-03-03 Schering Aktiengesellschaft Diagnostic media
DE3869251D1 (de) 1987-07-16 1992-04-23 Nycomed As Aminopolycarbonsaeure und ihre derivate.
US5364613A (en) 1989-04-07 1994-11-15 Sieving Paul F Polychelants containing macrocyclic chelant moieties
IE901736L (en) 1989-05-17 1990-11-17 Fuller H B Licensing Financ Polypeptide-antibody conjugate for inhibiting cell adhesion
US5367080A (en) 1990-11-08 1994-11-22 Sterling Winthrop Inc. Complexing agents and targeting radioactive immunoreagents useful in therapeutic and diagnostic imaging compositions and methods
US5965107A (en) * 1992-03-13 1999-10-12 Diatide, Inc. Technetium-99m labeled peptides for imaging
EP0570493B1 (en) 1991-02-08 2000-01-05 Diatide, Inc. TECHNETIUM-99m LABELED POLYPEPTIDES FOR IMAGING
AU683833B2 (en) * 1992-01-03 1997-11-27 Rhomed Incorporated Protein- and peptide-metal ion pharmaceutical applications
ATE196094T1 (de) 1992-05-21 2000-09-15 Diatide Inc Technetium-99m markierte peptide zur bilderzeugung von thrombus
UA43823C2 (uk) 1992-07-06 2002-01-15 Мерк Патент Геселлшафт Міт Бесшренктер Хафтунг ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ ДЛЯ ІНГІБУВАННЯ ІНТЕГРИН <font face="Symbol">a</font><sub>V</sub><font face="Symbol">b</font><sub>3</sub>-ОПОСЕРЕДКОВАНОЇ КЛІТИННОЇ АДГЕЗІЇ КЛІТИН ССАВЦІВ, СПОСІБ ЛІКУВАННЯ ТА ПРОФІЛАКТИКИ ЗАХВОРЮВАННЯ, АСОЦІЙОВАНОГО З ПОРУШЕННЯМ АДГЕЗІЇ КЛІТИН, СПОСІБ БЛОКУВАННЯ ЗВ'ЯЗУВАННЯ ФІБРИНОГЕНОМ ІНТЕГРИНУ, КОМПОЗИЦІЯ ДЛЯ ЗАГОЄННЯ РАН
US5997843A (en) 1993-08-04 1999-12-07 Amersham International Plc Radiometal complexes that localise in hypoxic tissue
US5981478A (en) 1993-11-24 1999-11-09 La Jolla Cancer Research Foundation Integrin-binding peptides
US5753230A (en) 1994-03-18 1998-05-19 The Scripps Research Institute Methods and compositions useful for inhibition of angiogenesis
CN1148812A (zh) 1994-03-28 1997-04-30 尼科梅德成像有限公司 “脂质体”
US5846782A (en) 1995-11-28 1998-12-08 Genvec, Inc. Targeting adenovirus with use of constrained peptide motifs
GB9420390D0 (en) 1994-10-10 1994-11-23 Nycomed Salutar Inc Liposomal agents
DK0844874T3 (da) 1995-08-14 2006-01-16 Scripps Research Inst Fremgangsmåder og sammensætninger egnet til inhibering af alfa v beta 5-medieret angiogenese
ES2299232T3 (es) 1995-09-11 2008-05-16 La Jolla Cancer Research Foundation Moleculas que migran hacia un organo o tejido seleccionado in vivo.
PL327679A1 (en) 1996-01-10 1998-12-21 Nycomed Imaging As Contast medium
AU709778B2 (en) 1996-02-09 1999-09-09 Steinel Gmbh & Co. Kg Device for evaporating a liquid active substance
CA2265484C (en) 1996-09-10 2008-12-02 The Burnham Institute Tumor homing molecules, conjugates derived therefrom, and methods of using same
GB9708265D0 (en) 1997-04-24 1997-06-18 Nycomed Imaging As Contrast agents
CA2291323A1 (en) 1997-05-28 1998-12-03 Genvec, Inc. Alternatively targeted adenovirus
GB9711115D0 (en) 1997-05-29 1997-07-23 Inst Of Child Health Integrin-targeting vectors having enhanced transfection activity
RU2118354C1 (ru) * 1997-06-30 1998-08-27 Юрий Алексеевич Емец Композиция ингредиентов для настойки сладкой "шиповник на коньяке"
JP2002507391A (ja) 1998-02-06 2002-03-12 ザ ユーエイビー リサーチ ファンデイション 繊維ノブのｈｉループに異種ペプチドエピトープを含有するアデノウイルスベクター
AU2662999A (en) 1998-02-09 1999-08-23 Genzyme Corporation Nucleic acid delivery vehicles
CA2325342A1 (en) * 1998-04-08 1999-10-14 G.D. Searle & Co. Dual avb3 and metastasis-associated receptor ligands
DE69937996T2 (de) * 1998-05-15 2009-01-02 Ge Healthcare Ltd., Little Chalfont Markierte glutamin- und lysinanaloge
DE19929199A1 (de) 1999-06-25 2001-01-18 Hap Handhabungs Automatisierun Verfahren und Vorrichtung zum Herstellen eines dreidimensionalen Objektes
WO2001000146A1 (en) 1999-06-28 2001-01-04 The Procter & Gamble Company Cosmetic compositions
ATE298763T1 (de) * 2000-04-12 2005-07-15 Amersham Health As Integrinbindende peptidderivate
AU2001288847A1 (en) * 2000-09-07 2002-03-22 Biosyntema Inc. Conformationally constrained labeled peptides for imaging and therapy
NO20004795D0 (no) * 2000-09-26 2000-09-26 Nycomed Imaging As Peptidbaserte forbindelser
ES2719088T3 (es) * 2001-07-10 2019-07-08 Ge Healthcare Ltd Compuestos con base peptídica para localizar receptores de integrina
GB0116815D0 (en) * 2001-07-10 2001-08-29 Nycomed Amersham Plc Improved chelator conjugates
GB0305704D0 (en) * 2003-03-13 2003-04-16 Amersham Plc Radiofluorination methods
NO20033115D0 (no) * 2003-07-08 2003-07-08 Amersham Health As Peptid-baserte forbindelser
GB0317815D0 (en) * 2003-07-30 2003-09-03 Amersham Health As Imaging agents
NZ551210A (en) * 2004-06-16 2009-10-30 Ge Healthcare As Peptide-based compounds
WO2005123768A1 (en) * 2004-06-16 2005-12-29 Ge Healthcare As Peptide-based compounds
WO2006004429A2 (en) * 2004-07-02 2006-01-12 Ge Healthcare As Imaging agents comprising a non- peptidic vector linked to a fluorophore via a polyethylene glycol linker
GB0420344D0 (en) * 2004-09-14 2004-10-13 Amersham Plc Diagnostic compounds
WO2006073314A1 (en) * 2005-01-06 2006-07-13 Ge Healthcare As Optical imaging

Also Published As

Publication number Publication date
US8299030B2 (en) 2012-10-30
JP4510444B2 (ja) 2010-07-21
US7521419B2 (en) 2009-04-21
EP2347771A1 (en) 2011-07-27
NO333066B1 (no) 2013-02-25
RU2003137593A (ru) 2005-05-20
AU2002313616A1 (en) 2003-01-29
WO2003006491A3 (en) 2003-12-24
NZ530156A (en) 2007-04-27
BRPI0210886B8 (pt) 2021-05-25
ES2719088T3 (es) 2019-07-08
HUP0400974A2 (hu) 2004-08-30
PL367273A1 (pl) 2005-02-21
RU2303042C2 (ru) 2007-07-20
BR0210886A (pt) 2004-06-22
BRPI0210886B1 (pt) 2017-11-21
CA2452923C (en) 2012-02-07
CA2452923A1 (en) 2003-01-23
KR100932827B1 (ko) 2009-12-21
EP1404371B1 (en) 2019-03-13
JP2005507376A (ja) 2005-03-17
US7994134B2 (en) 2011-08-09
CN1622830A (zh) 2005-06-01
EP1404371A2 (en) 2004-04-07
US20120020882A1 (en) 2012-01-26
KR20040015797A (ko) 2004-02-19
NO20040084L (no) 2004-03-09
IL159310A0 (en) 2004-06-01
HU230901B1 (hu) 2019-01-28
US20090203584A1 (en) 2009-08-13
US20050070466A1 (en) 2005-03-31
IL159310A (en) 2013-07-31
MXPA04000173A (es) 2004-03-18
HUP0400974A3 (en) 2012-09-28
WO2003006491A2 (en) 2003-01-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2452923C (en) Peptide-based compounds for targeting integrin receptors
ES2244607T3 (es) Derivados peptidicos de union a integrina.
RU2355702C2 (ru) Агенты для визуализации
AU2001292456B2 (en) Peptide-based compounds
AU2001250683A1 (en) Peptide-based compounds
CN101538313A (zh) 肽基化合物
US8361443B2 (en) Peptide-based compounds

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification