PL210256B1 - Zastosowanie erytropoetyny w leczeniu chorób serca - Google Patents
Zastosowanie erytropoetyny w leczeniu chorób sercaInfo
- Publication number
- PL210256B1 PL210256B1 PL377590A PL37759003A PL210256B1 PL 210256 B1 PL210256 B1 PL 210256B1 PL 377590 A PL377590 A PL 377590A PL 37759003 A PL37759003 A PL 37759003A PL 210256 B1 PL210256 B1 PL 210256B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- erythropoietin
- protein
- use according
- conjugate
- erythropoietin protein
- Prior art date
Links
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 title claims abstract description 98
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 title claims abstract description 98
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 80
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 title claims abstract description 29
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 title claims abstract description 22
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 58
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims abstract description 29
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims abstract description 22
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 46
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 35
- 101000987586 Homo sapiens Eosinophil peroxidase Proteins 0.000 claims description 30
- 102000044890 human EPO Human genes 0.000 claims description 30
- 101000920686 Homo sapiens Erythropoietin Proteins 0.000 claims description 25
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 claims description 25
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims description 24
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 20
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 15
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims description 12
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 11
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 10
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 claims description 8
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000001995 reticulocyte Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 claims description 7
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 4
- 108010002601 epoetin beta Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 229960004579 epoetin beta Drugs 0.000 claims description 3
- 102100031939 Erythropoietin Human genes 0.000 description 36
- 108010092408 Eosinophil Peroxidase Proteins 0.000 description 35
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 19
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 16
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 16
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 16
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 14
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 13
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 13
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 13
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 12
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 10
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 10
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 9
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 8
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 8
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 8
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 8
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 6
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 6
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 6
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 6
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 6
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 5
- 108010048732 pegylated erythropoietin Proteins 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 5
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 4
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 4
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 4
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 3
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 3
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 3
- 108010053070 Glutathione Disulfide Proteins 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 102000007238 Transferrin Receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010033576 Transferrin Receptors Proteins 0.000 description 3
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N glutathione disulfide Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CSSC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- SEEYREPSKCQBBF-UHFFFAOYSA-N n-methylmaleimide Chemical compound CN1C(=O)C=CC1=O SEEYREPSKCQBBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 3
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 3
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 3
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 3
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 3
- ZRTJVRDXVSDKPX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-acetylsulfanylpropanoate Chemical group CC(=O)SCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZRTJVRDXVSDKPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQUWKZJWBCOHQH-UHFFFAOYSA-N 1-[2-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxy]ethyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound COCCOCCOCCN1C(=O)C=CC1=O WQUWKZJWBCOHQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000004476 Acute Coronary Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010003211 Arteriosclerosis coronary artery Diseases 0.000 description 2
- XVAPVJNJGLWGCS-ACZMJKKPSA-N Asn-Glu-Asn Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N XVAPVJNJGLWGCS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- HZZIFFOVHLWGCS-KKUMJFAQSA-N Asn-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HZZIFFOVHLWGCS-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- GXHDGYOXPNQCKM-XVSYOHENSA-N Asp-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O GXHDGYOXPNQCKM-XVSYOHENSA-N 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 2
- BYALSSDCQYHKMY-XGEHTFHBSA-N Cys-Arg-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CS)N)O BYALSSDCQYHKMY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- NCWOMXABNYEPLY-NRPADANISA-N Glu-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NCWOMXABNYEPLY-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- COSBSYQVPSODFX-GUBZILKMSA-N Glu-His-Cys Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N COSBSYQVPSODFX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- 208000018565 Hemochromatosis Diseases 0.000 description 2
- SGIIOQQGLUUMDQ-IHRRRGAJSA-N Leu-His-Val Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N SGIIOQQGLUUMDQ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- GCXGCIYIHXSKAY-ULQDDVLXSA-N Leu-Phe-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GCXGCIYIHXSKAY-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- GJJQCBVRWDGLMQ-GUBZILKMSA-N Lys-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GJJQCBVRWDGLMQ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010066427 N-valyltryptophan Proteins 0.000 description 2
- 101100205189 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-5 gene Proteins 0.000 description 2
- 108091006006 PEGylated Proteins Proteins 0.000 description 2
- VGFFUEVZKRNRHT-ULQDDVLXSA-N Pro-Trp-Glu Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O VGFFUEVZKRNRHT-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- ZZDYJFVIKVSUFA-WLTAIBSBSA-N Tyr-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O ZZDYJFVIKVSUFA-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 2
- QGFPYRPIUXBYGR-YDHLFZDLSA-N Val-Asn-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N QGFPYRPIUXBYGR-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 2
- UEHRGZCNLSWGHK-DLOVCJGASA-N Val-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O UEHRGZCNLSWGHK-DLOVCJGASA-N 0.000 description 2
- ZXYPHBKIZLAQTL-QXEWZRGKSA-N Val-Pro-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N ZXYPHBKIZLAQTL-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 2
- IOUPEELXVYPCPG-UHFFFAOYSA-N Valylglycine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NCC(O)=O IOUPEELXVYPCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 208000026758 coronary atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N cystamine Chemical compound CCSSCCN OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940099500 cystamine Drugs 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical group 0.000 description 2
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- FLCQLSRLQIPNLM-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-acetylsulfanylacetate Chemical compound CC(=O)SCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O FLCQLSRLQIPNLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- NJPMYXWVWQWCSR-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asn Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NJPMYXWVWQWCSR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- RDIKFPRVLJLMER-BQBZGAKWSA-N Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N RDIKFPRVLJLMER-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N Ala-Leu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- MFMDKJIPHSWSBM-GUBZILKMSA-N Ala-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MFMDKJIPHSWSBM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OLVCTPPSXNRGKV-GUBZILKMSA-N Ala-Pro-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 OLVCTPPSXNRGKV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N Arg-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- XNSKSTRGQIPTSE-ACZMJKKPSA-N Arg-Thr Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O XNSKSTRGQIPTSE-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- YNSUUAOAFCVINY-OSUNSFLBSA-N Arg-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O YNSUUAOAFCVINY-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- ANAHQDPQQBDOBM-UHFFFAOYSA-N Arg-Val-Tyr Natural products CC(C)C(NC(=O)C(N)CCNC(=N)N)C(=O)NC(Cc1ccc(O)cc1)C(=O)O ANAHQDPQQBDOBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRXIWXCXOARFNT-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O KRXIWXCXOARFNT-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N Asp-Arg-Val Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 1
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 1
- TULNGKSILXCZQT-IMJSIDKUSA-N Cys-Asp Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O TULNGKSILXCZQT-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- XLLSMEFANRROJE-GUBZILKMSA-N Cys-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N XLLSMEFANRROJE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKDIBBOKUAASNP-FXQIFTODSA-N Glu-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O LKDIBBOKUAASNP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- IWAXHBCACVWNHT-BQBZGAKWSA-N Gly-Asp-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IWAXHBCACVWNHT-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- GVVKYKCOFMMTKZ-WHFBIAKZSA-N Gly-Cys-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)CN GVVKYKCOFMMTKZ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022971 Iron Deficiencies Diseases 0.000 description 1
- WSGXUIQTEZDVHJ-GARJFASQSA-N Leu-Ala-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(O)=O WSGXUIQTEZDVHJ-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- RVVBWTWPNFDYBE-SRVKXCTJSA-N Leu-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RVVBWTWPNFDYBE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- BGZCJDGBBUUBHA-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BGZCJDGBBUUBHA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- XWEVVRRSIOBJOO-SRVKXCTJSA-N Leu-Pro-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O XWEVVRRSIOBJOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UCBPDSYUVAAHCD-UWVGGRQHSA-N Leu-Pro-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O UCBPDSYUVAAHCD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- CHJKEDSZNSONPS-DCAQKATOSA-N Leu-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CHJKEDSZNSONPS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GZRABTMNWJXFMH-UVOCVTCTSA-N Leu-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZRABTMNWJXFMH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- XZNJZXJZBMBGGS-NHCYSSNCSA-N Leu-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XZNJZXJZBMBGGS-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- 101001090725 Leuconostoc gelidum Bacteriocin leucocin-A Proteins 0.000 description 1
- IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N Lys-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- VCYJKOLZYPYGJV-AVGNSLFASA-N Pro-Arg-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VCYJKOLZYPYGJV-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ZKQOUHVVXABNDG-IUCAKERBSA-N Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 ZKQOUHVVXABNDG-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- RWCOTTLHDJWHRS-YUMQZZPRSA-N Pro-Pro Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 RWCOTTLHDJWHRS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- FHZJRBVMLGOHBX-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O FHZJRBVMLGOHBX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GOMUXSCOIWIJFP-GUBZILKMSA-N Pro-Ser-Arg Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GOMUXSCOIWIJFP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GMJDSFYVTAMIBF-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GMJDSFYVTAMIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 241001415846 Procellariidae Species 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Substances CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- JURQXQBJKUHGJS-UHFFFAOYSA-N Ser-Ser-Ser-Ser Chemical compound OCC(N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CO)C(O)=O JURQXQBJKUHGJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N Thr-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- VTMGKRABARCZAX-OSUNSFLBSA-N Thr-Pro-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O VTMGKRABARCZAX-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- UQCNIMDPYICBTR-KYNKHSRBSA-N Thr-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O UQCNIMDPYICBTR-KYNKHSRBSA-N 0.000 description 1
- BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N Thr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- ZHZLQVLQBDBQCQ-WDSOQIARSA-N Trp-Lys-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N ZHZLQVLQBDBQCQ-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- LYERIXUFCYVFFX-GVXVVHGQSA-N Val-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N LYERIXUFCYVFFX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000030570 cellular localization Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002019 disulfides Chemical class 0.000 description 1
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000925 erythroid effect Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 108010057760 hepatic sialoglycoprotein receptor Proteins 0.000 description 1
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 125000002346 iodo group Chemical group I* 0.000 description 1
- 230000010438 iron metabolism Effects 0.000 description 1
- 235000020796 iron status Nutrition 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229920001427 mPEG Polymers 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000008816 organ damage Effects 0.000 description 1
- YPZRWBKMTBYPTK-UHFFFAOYSA-N oxidized gamma-L-glutamyl-L-cysteinylglycine Natural products OC(=O)C(N)CCC(=O)NC(C(=O)NCC(O)=O)CSSCC(C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CCC(N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000012070 reactive reagent Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 1
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 150000003459 sulfonic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie erytropoetyny do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń dystrybucji żelaza w chorobach serca.
Znane są różne choroby, w których metabolizm żelaza jest nieprawidłowy. W niedokrwistości nie może być wytworzona wystarczająca ilość krwi ze względu na ogólny niedobór żelaza w organizmie. Innym stanem metabolicznym związanym z żelazem jest hemochromatoza, w której całkowite stężenie żelaza w organizmie jest wyższe od prawidłowego, co prowadzi do różnych stanów, takich jak np. niszczenie narządów.
Zaburzenia dystrybucji żelaza różnią się od opisanej powyżej niedokrwistości i hemochromatozy, ponieważ całkowite stężenie żelaza w organizmie jest prawidłowe. Z jednej strony żelazo jest gromadzone w różnych narządach, co może prowadzić do uszkodzeń, a nawet zniszczenia tych narządów. Z drugiej strony wykorzystanie żelaza, które występuje w prawidłowych ilościach, do tworzenia krwi jest zaburzone, co prowadzi do wtórnych objawów, które są porównywalne z tymi występującymi w niedokrwistoś ci.
Dotychczas nie było wiadomo, że istnieje wysokie prawdopodobieństwo wystąpienia zaburzeń dystrybucji żelaza u pacjentów chorujących na choroby serca. Zaburzenia dystrybucji żelaza można rozpoznać za pomocą różnych parametrów, które są powszechnie stosowane w diagnostyce stanu żelaza. Na podstawie pomiarów ferrytyny i rozpuszczalnego receptora transferyny można ocenić, czy u pacjenta cierpiącego na choroby serca całkowite stężenie żelaza jest prawidłowe. Jeżeli tak jest, to wówczas obniżone stężenie hemoglobiny w retikulocytach jest wskaźnikiem zaburzeń dystrybucji żelaza. Innym wskaźnikiem jest stale przedłużone podwyższone stężenie białka C-reaktywnego (CRP) u pacjentów cierpiących na choroby serca i wykazujących prawidłowe całkowite stężenie żelaza. Sposób diagnozowania zaburzeń dystrybucji żelaza opisali P. Lehmann, M. Volkmann, J. Lotz, A. Baldauf, R. Roeddiger, plakat przedstawiany na AACC/CSCC, Annual Meeting, 29 lipiec - 2 sierpień, 2001, Chicago, Illinois.
Dotychczas nie proponowano żadnego leczenia dla pacjentów z chorobami serca cierpiących na zaburzenia dystrybucji żelaza. Dlatego problemem leżącym u podstaw wynalazku jest umożliwienie leczenia zaburzeń dystrybucji żelaza w chorobach serca w celu zmniejszenia lub ograniczenia wspomnianych wyżej niedogodności. Nieoczekiwanie stwierdzono, że erytropoetyna ma korzystny wpływ na zaburzenia dystrybucji żelaza w chorobach serca. Tak więc powyższy problem został rozwiązany przez dostarczenie erytropoetyny do stosowania w leczeniu zaburzeń dystrybucji żelaza w chorobach serca.
Wynalazek dotyczy zatem zastosowania erytropoetyny do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń dystrybucji żelaza w chorobach serca.
Korzystne jest zastosowanie, w którym chorobę serca stanowi niedomoga serca.
Korzystnie białko erytropoetynę stanowi ludzka erytropoetyna, a zwłaszcza epoetyna α lub epoetyna β.
Korzystnie białko erytropoetyna jest eksprymowane przez aktywację endogennych genów.
Korzystnie białko erytropoetyna ma sekwencję aminokwasów SEQ ID NO: 1 lub SEQ ID NO: 2.
Korzystnie białko erytropoetyna ma sekwencję ludzkiej erytropoetyny zmodyfikowaną przez dodanie 1 - 6 miejsc glikozylacji.
Korzystnie białko erytropoetynę stanowi darbepoetyna α.
Korzystnie zdefiniowane powyżej białko erytropoetyna jest pegilowane.
Korzystnie białko erytropoetyna stanowi koniugat, który to koniugat zawiera białko erytropoetynę mające co najmniej jedną wolną grupę aminową oraz wykazującą aktywność biologiczną in vivo wywoływania zwiększenia wytwarzania retikulocytów i czerwonych ciałek krwi przez komórki szpiku kostnego, wybraną z grupy obejmującej ludzką erytropoetynę i jej analogi, które mają sekwencję ludzkiej erytropoetyny zmodyfikowaną przez dodanie 1 - 6 miejsc glikozylacji lub przegrupowanie co najmniej jednego miejsca glikozylacji; przy czym to białko erytropoetyna jest kowalencyjnie związane z n ugrupowaniami glikolu polietylenowego o wzorze -CO-(CH2)x-(OCH2CH2)m-OR, w którym grupa -CO każdego ugrupowania glikolu polietylenowego tworzy wiązanie amidowe z jedną z grup aminowych; R oznacza C1-C6 alkil, x oznacza 2 lub 3; m oznacza 450 - 900, n oznacza 1 - 3; oraz n i m są dobrane tak, że masa cząsteczkowa koniugatu minus białka erytropoetyny wynosi 20 - 100 kilodaltonów.
Szczególnie korzystnie stosuje się koniugat, w którym x oznacza 2, m oznacza 650 - 750, n oznacza 1, a R oznacza metyl.
PL 210 256 B1
Korzystnie białko erytropoetyna stanowi koniugat, który to koniugat zawiera białko erytropoetynę mające co najmniej jedną wolną grupę aminową oraz wykazującą aktywność biologiczną in vivo wywoływania zwiększenia wytwarzania retikulocytów i czerwonych ciałek krwi przez komórki szpiku kostnego, wybraną z grupy obejmującej ludzką erytropoetynę i jej analogi, które mają pierwotną strukturę ludzkiej erytropoetyny zmodyfikowaną przez dodanie 1 - 6 miejsc glikozylacji; przy czym to białko erytropoetyna jest kowalencyjnie związane z 1 - 3 ugrupowaniami niższo-alkoksy-glikolu polietylenowego, a każde ugrupowanie glikolu polietylenowego jest kowalencyjnie związane z białkiem erytropoetyną poprzez łącznik o wzorze -C(O)-X-S-Y-, w którym grupa C(O) tworzy wiązanie amidowe z jedną z grup aminowych, X oznacza -(CH2)k- lub -CH2(O-CH2-CH2)k-, k oznacza 1 - 10, Y oznacza
przy czym średnia masa cząsteczkowa każdego ugrupowania glikolu polietylenowego wynosi 20 - 40 kilodaltonów, a masa cząsteczkowa koniugatu wynosi 51 - 175 kilodaltonów.
Szczególnie korzystnie stosuje się koniugat erytropoetyny o wzorze:
w którym n oznacza liczbę całkowitą 1 - 3; m oznacza liczbę całkowitą 450 - 900; R oznacza C1-C6 alkil; X oznacza -(CH2)k- lub -CH2(O-CH2-CH2)k-, k oznacza 1 - 10 a P oznacza resztę białka erytropoetyny bez n grup aminowych tworzących wiązanie amidowe z X.
Przykładami chorób serca są np. wieńcowa choroba serca, miażdżyca tętnic, miażdżyca tętnic wieńcowych, ostry zespół wieńcowy, niewydolność serca, zastoinowa niewydolność serca i/lub niedomoga serca.
Jeżeli nie podano inaczej, poniższe definicje przedstawiono w celu zilustrowania i zdefiniowania znaczenia i zakresu różnych określeń stosowanych w opisie wynalazku.
Określenie „niższy alkil oznacza liniową lub rozgałęzioną grupę alkilową zwierającą 1 - 6 atomów węgla. Przykłady niższych alkili obejmują metyl, etyl i izopropyl, korzystnie metyl.
Określenie „niższy alkoksyl oznacza grupę R'-O-, w której R' oznacza niższy alkil jak zdefiniowany powyżej.
Określenie „zaburzenia dystrybucji żelaza w chorobach serca dotyczy zaburzenia dystrybucji żelaza, które występuje u pacjentów cierpiących na choroby serca. Zaburzenie dystrybucji żelaza można np. scharakteryzować jak opisano powyżej. W szczególności zaburzenie dystrybucji żelaza charakteryzuje się następującymi parametrami: stężenie rozpuszczalnego receptora transferyny [mg/l] podzielone przez log(stężenie ferrytyny [μ9/Ι] ) jest niższe niż 3,5 i jednocześnie stężenie białka
C-reaktywnego jest wyższe niż 5 mg/l.
PL 210 256 B1
Określenie „erytropoetyna lub „białko erytropoetyna dotyczy białka o aktywności biologicznej in vivo, pobudzającej komórki szpiku kostnego do zwiększenia wytwarzania retikulocytów i czerwonych ciałek krwi, wybranego z grupy obejmującej ludzką erytropoetynę i analogi, które zdefiniowano poniżej.
Określenie „pegilowana erytropoetyna (Peg-EPO lub PEG-EPO) dotyczy białka erytropoetyny, które jest kowalencyjnie związane z jedną do trzech pochodnych polietylenu, opisanych poniżej.
Wynalazek jest szczególnie użyteczny do wytwarzania kompozycji farmaceutycznych zawierających erytropoetynę jako składnik farmaceutycznie czynny. Określenie „erytropoetyna lub „białko erytropoetyna lub „EPO ma następujące znaczenie: w szczególności określenia te dotyczą glikoproteiny, np. ludzkiej erytropoetyny, np. o sekwencji aminokwasów przedstawionej jako SEQ ID NO: 1 lub SEQ ID NO: 2 lub o sekwencji aminokwasów zasadniczo do nich homologicznej, której właściwości biologiczne odnoszą się do stymulacji wytwarzania czerwonych ciałek krwi i stymulacji podziałów i róż nicowania ukierunkowanych prekursorów erytroidalnych w szpiku kostnym. Te okreś lenia stosowane w opisie obejmują takie białka celowo zmodyfikowane, np. przez ukierunkowaną mutagenezę lub przypadkowo przez mutacje. Określenia te obejmują także analogi zawierające 1 - 6 dodatkowych miejsc glikozylacji, analogi zawierające co najmniej jeden dodatkowy aminokwas na C-końcu glikoproteiny, przy czym dodatkowy aminokwas zawiera co najmniej jedno miejsce glikozylacji, oraz analogi o sekwencji aminokwasów zawierającej przegrupowanie co najmniej jednego miejsca glikozylacji. Określenia te obejmują zarówno naturalną, jak i rekombinowaną ludzką erytropoetynę. W korzystnej postaci wynalazku białkiem erytropoetyną jest ludzka erytropoetyna.
Jak przedstawiono szczegółowo poniżej, wytwarzanie i oczyszczanie EPO jest dobrze znane w dziedzinie wynalazku. Pod okreś leniem erytropoetyna rozumie się tu naturalne lub rekombinowane białko, korzystnie ludzkie, np. epoetynę α lub epoetynę β, uzyskane z dowolnego znanego źródła, takiego jak tkanki, synteza białek, hodowla komórkowa z naturalnymi lub rekombinowanymi komórkami. Określenie to obejmuje dowolne białka o aktywności erytropoetyny, takie jak muteiny lub białka zmodyfikowane w inny sposób. Rekombinowaną EPO można wytwarzać drogą ekspresji w liniach komórkowych CHO, BHK lub HeLa, z zastosowaniem technologii rekombinacji DNA lub drogą aktywacji endogennych genów. Ekspresja białek, w tym EPO, przez aktywację endogennych genów jest dobrze znane w dziedzinie wynalazku i ujawniona np. w opisach patentowych US nr 5733761, 5641670 i 5733746 oraz w publikacjach zgłoszeń międzynarodowych nr WO 93/09222, WO 94/12650, WO 95/31560, WO 90/11354, WO 91/06667 i WO 91/09955. Korzystne jest zastosowanie zdefiniowane powyżej, w którym białko erytropoetynę wytwarza się drogą ekspresji przez aktywację endogennych genów. Korzystnymi rodzajami EPO do wytwarzania produktów glikoproteiny erytropoetyny są rodzaje ludzkiej EPO. Korzystniej rodzajem EPO jest ludzka EPO o sekwencji aminokwasów przedstawionej jako SEQ ID NO: 1 lub SEQ ID NO: 2, korzystniej o sekwencji aminokwasów SEQ ID NO: 1.
Ponadto erytropoetyna może stanowić analog glikoproteiny zawierający 1 - 6 dodatkowych miejsc glikozylacji. Glikozylacja białka, jedną lub większą liczbą grup oligosacharydowych, występuje w specyficznych miejscach wzdłuż szkieletu polipeptydowego i znacząco wpływa na właściwości fizyczne białka, takie jak trwałość białka, wydzielanie, lokalizacja wewnątrzkomórkowa i aktywność biologiczna białka. Zazwyczaj występuje glikozylacja dwóch typów. O-Przyłączane oligosacharydy są przyłączane do reszt seryny lub treoniny, a N-przyłączane oligosacharydy są przyłączane do reszt asparaginy. Jednym z typów oligosacharydów, występującym zarówno wśród N-przyłączanych, jak i O-przyłączanych oligosacharydów, jest kwas N-acetyloneuraminowy (kwas sialowy), który należ y do grupy aminocukrów zawierających 9 lub większą liczbę atomów węgla. Kwas sialowy jest zazwyczaj resztą końcową zarówno w N-przyłączanych, jak i O-przyłączanych oligosacharydach, a ponieważ niesie ujemny ładunek, nadaje glikoproteinie właściwości kwasowe. Ludzka erytropoetyna, mająca 165 aminokwasów, zawiera trzy N-przyłączone i jeden O-przyłączony łańcuchy oligosacharydowe, które stanowią około 40% całkowitej masy cząsteczkowej glikoproteiny. N-Glikozylacja zachodzi przy resztach asparaginowych w pozycjach 24, 38, i 83, a O-glikozylacja zachodzi przy reszcie seryny w pozycji 126. Łańcuchy oligosacharydowe są zmodyfikowane końcowymi resztami kwasu sialowego. Enzymatyczne usunięcie wszystkich reszt kwasu sialowego z glikozylowanej erytropoetyny powoduje utratę aktywności in vivo, ale nie aktywności in vitro, ponieważ sialilacja erytropoetyny zapobiega jej wiązaniu przez wątrobowe białko wiążące i następującemu później klirensowi.
Określenie „erytropoetyna obejmuje analogi ludzkiej erytropoetyny z jedną lub większą liczbą zmian w sekwencji aminokwasowej ludzkiej erytropoetyny, które to zmiany powodują wzrost liczby miejsc przyłączania kwasu sialowego. Te analogi glikoproteiny można wytworzyć przez ukierunkowaPL 210 256 B1 ną mutagenezę wprowadzając addycje, delecje lub podstawienia reszt aminokwasowych, co zwiększa liczbę lub zmienia miejsca dostępne dla glikozylacji. Analogi glikoproteiny o zwiększonym poziomie kwasu sialowego w porównaniu z ludzką erytropoetyną wytwarza się dodając miejsca glikozylacji, które nie zaburzają drugorzędowej lub trzeciorzędowej konformacji wymaganej dla aktywności biologicznej. Glikoproteiny stosowane zgodnie z wynalazkiem obejmują także analogi o zwiększonym poziomie przyłączenia węglowodanów w miejscu glikozylacji, co zazwyczaj wynika z podstawienia jednego lub większej liczby aminokwasów w pobliżu miejsca N-przyłączania lub O-przyłączania. Glikoproteiny stosowane zgodnie z wynalazkiem obejmują także analogi zawierające jeden lub większą liczbę aminokwasów przyłączonych na C-końcu erytropoetyny, z utworzeniem co najmniej jednego dodatkowego miejsca dla węglowodanu. Białka erytropoetyny stosowane zgodnie z wynalazkiem obejmują także analogi o sekwencji aminokwasów zawierającej przegrupowanie co najmniej jednego miejsca glikozylacji. Takie przegrupowanie miejsca glikozylacji obejmuje delecję jednego lub większej liczby miejsc glikozylacji w ludzkiej erytropoetynie oraz dodanie jednego lub większej liczby niewystępujących naturalnie miejsc glikozylacji. Zwiększenie liczby łańcuchów węglowodanowych na erytropoetynie, a zatem i liczby kwasów sialowych na cząsteczkę erytropoetyny, może nadawać korzystne właściwości, takie jak zwiększona rozpuszczalność, zwiększona odporność na proteolizę, obniżona immunogenność, wydłużony okres półtrwania w surowicy oraz zwiększona aktywność biologiczna. Analogi erytropoetyny z dodatkowymi miejscami glikozylacji ujawniono bardziej szczegółowo w europejskim zgłoszeniu patentowym nr 640 619 (Elliot), opublikowanym 1 marca 1995 roku.
Zgodnie z wynalazkiem kompozycja farmaceutyczna korzystnie zawiera białka erytropoetyny o sekwencji aminokwasów obejmują cej co najmniej jedno dodatkowe miejsce glikozylacji, takie jak, lecz nie wyłącznie, erytropoetyny zawierające sekwencję ludzkiej erytropoetyny zmodyfikowanej przez modyfikację wybraną spośród poniższych:
Asn30Thr32 Asn 51Thr53
Asn57Thr59
Asn69;
Asn69Thr71;
Ser68Asn69Thr71;
Val87Asn88Thr90;
Ser87Asn88Thr90;
Ser87Asn88Gly89Thr90;
Ser87Asn88Thr90Thr92;
Ser87Asn88Thr90Ala162;
Asn69Thr71Ser87Asn88Thr
Asn30Thr32Val87Asn88Thr90;
Asn89Ile90Thr91;
Ser87Asn89Ile90Thr91;
Asn 136Thr138;
Asn 138Thr140;
Thr125; i Pro 124Thr125.
Stosowane w opisie oznaczenia dotyczące modyfikacji aminokwasów oznaczają, że jedna lub większa liczba pozycji w odpowiednim niemodyfikowanym białku (np. hEPO o SEQ ID NO: 1 lub SEQ ID NO: 2) wskazanych liczbą (liczbami) w indeksach górnych jest zmieniona na aminokwas(-y) podany(-e) bezpośrednio przed liczbą (liczbami) w indeksie górnym.
Białko erytropoetyna może także stanowić analog zawierający co najmniej jeden dodatkowy aminokwas na C-końcu glikoproteiny, przy czym dodatkowy aminokwas zawiera co najmniej jedno miejsce glikozylacji. Dodatkowy aminokwas może zawierać fragment peptydowy pochodzący z C-końca ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej. Korzystnie glikoproteina stanowi analog wybrany z grupy obejmującej (a) ludzką erytropoetynę o sekwencji aminokwasów Ser Ser Ser Ser Lys Ala Pro Pro Pro Ser Leu Pro Ser Pro Ser Arg Leu Pro Gly Pro Ser Asp Thr Pro Ile Leu Pro Gln, przyłączoną do C-końca; (b) analog (a) zawierający ponadto Ser87 Asn88 Thr90 EPO; oraz (c) analog (a) zawierający ponadto Asn30 Thr32 Val87 Asn88 Thr90 EPO.
Białko erytropoetyna może stanowić także analog o sekwencji aminokwasów zawierającej przegrupowanie co najmniej jednego miejsca glikozylacji. Przegrupowanie może obejmować delecję
PL 210 256 B1 któregokolwiek z miejsc przyłączania węglowodanu do N w ludzkiej erytropoetynie oraz addycję miejsca wiązania węglowodanu do N w pozycji 88 sekwencji aminokwasowej ludzkiej erytropoetyny. Korzystnie glikoproteina stanowi analog wybrany z grupy obejmującej Gln24 Ser87 Asn88 Thr90 EPO; Gln38 Ser87 Asn88 Thr90 EPO i Gln83 Ser87 Asn88 Thr90 EPO. Kolejnym analogiem jest darbepoetyna α.
W szczególności białko erytropoetyna w kompozycji farmaceutycznej opisanej powyż ej może także zawierać jego pegilowane pochodne. Pegilowane pochodne erytropoetyny i ich wytwarzanie są znane i opisane np. w WO 01/02017, EP-A-1064951, EP-A-539167, EP-A-605963, WO 93/25212, WO 94/20069, WO 95/11924, w US nr 556, EP-A-584876, WO 92/16555, WO 94/28024, WO 97/04796, US nr 5359030 i 5681811, US nr 4179337, japońskim opisie patentowym, WO 98/32466, US nr 5324650. Korzystna postać pegilowanej erytropoetyny odnosi się do opisanych poniżej pochodnych.
Ponadto kompozycje farmaceutyczne zawierają opisane powyżej koniugaty, przy czym zawartość koniugatów, w których n oznacza 1, wynosi co najmniej 90%, korzystnie co najmniej 92% lub korzystnie 96% wszystkich koniugatów kompozycji.
W szczególności powyższe koniugaty można przedstawić wzorem (I) P-[NHCO-(CH2)x-(OCH2CH2)m-OR]n (I) w którym P oznacza resztę białka erytropoetyny jak opisano powyżej (czyli bez grupy aminowej lub grup aminowych tworzących wiązanie amidowe z karbonylem przedstawionym we wzorze I), wykazującą aktywność biologiczną in vivo powodującą zwiększanie wytwarzania retikulocytów i czerwonych ciałek krwi przez komórki szpiku kości; R oznacza niższy alkil; x oznacza 2 lub 3; m oznacza około 450 - 900, n oznacza 1 - 3, z tym, że n i m są tak dobrane aby różnica masy cząsteczkowej koniugatu i masy czą steczkowej białka erytropoetyny wynosi 20 - 100 kilodaltonów. Korzystne są koniugaty, w których R oznacza metyl.
Symbol „m oznacza liczbę grup tlenku etylenu (OCH2CH2) w ugrupowaniu poli(tlenku etylenu). Pojedyncza podjednostka PEG (glikolu polietylenowego), tlenek etylenu ma masę cząsteczkową około 44 daltonów. Zatem masa cząsteczkowa koniugatu (z wyłączeniem masy cząsteczkowej EPO) zależy od liczby „m. W koniugatach stosowanych zgodnie z wynalazkiem „m oznacza około 450 - 900 (co odpowiada masie cząsteczkowej około 20 - 40 kilodaltonów), korzystnie około 650 - 750 (co odpowiada masie cząsteczkowej około 30 kilodaltonów). Liczba m jest wybrana tak, że powstały koniugat według wynalazku ma aktywność fizjologiczną porównywalną z niemodyfikowaną EPO, która to aktywność może być taka sama, wyższa lub stanowić część odpowiedniej aktywności niemodyfikowanej EPO. Masa cząsteczkowa „około pewnej liczby oznacza, że znajduje się ona w rozsądnych granicach blisko tej liczby, oznaczonej znanymi metodami analitycznymi. Liczba „m jest wybrana tak, że masa cząsteczkowa każdego ugrupowania glikolu polietylenowego kowalencyjnie połączonego z glikoproteiną erytropoetyną wynosi około 20 - 40 kilodaltonów, a korzystnie około 30 kilodaltonów.
W koniugatach stosowanych zgodnie z wynalazkiem liczba „n oznacza liczbę ugrupowań glikolu polietylenowego kowalencyjnie związanych z wolnymi grupami aminowymi (w tym z grupami ε-aminowymi aminokwasu lizyny i/lub grupą aminową N-końca) białka erytropoetyny przez wiązanie (wiązania) amidowe. Koniugat stosowany zgodnie z wynalazkiem może zawierać jedno, dwa lub trzy ugrupowania PEG na cząsteczkę EPO. Liczba „n oznacza liczbę całkowitą 1 - 3, korzystnie „n oznacza 1 lub 2, a jeszcze korzystniej „n oznacza 1. Korzystne koniugaty spośród koniugatów opisanych powyżej stanowią związki, w których x oznacza 2, m oznacza 650 - 750, n oznacza 1, a R oznacza metyl.
Związek o wzorze (I) można wytwarzać ze znanego związku polimerowego:
gdzie R i m mają wyżej podane znaczenie, drogą kondensacji związku o wzorze II z glikoproteiną erytropoetyną. Związki o wzorze (II), w których x oznacza 3, są estrami sukcynoimidylowymi kwasu α-niższo-alkoksy-polioksyetylenomasłowego (niższo-alkoksy-PEG-SBA). Związki o wzorze (II), w którym x oznacza 2, są estrami sukcynoimidylowymi kwasu α-niższo-alkoksy-poli-oksyetylenopropionowego (niższo-alkoksy-PEG-SPA). Można stosować dowolny znany sposób prowadzenia reakcji aktyPL 210 256 B1 wowanego estru z aminą, z wytworzeniem amidu. W reakcji opisanej powyżej przykładowe ugrupowanie estru sukcynoimidylowego jest grupą odszczepiającą się, powodującą powstanie amidu. Zastosowanie estrów sukcynoimidylowych, takich jak związki o wzorze II, do wytwarzania koniugatów z białkami, ujawniono w US nr 5672662 (Harris i in.), z 30 września 1997 r.
Ludzka EPO zawiera dziewięć wolnych grup aminowych, N-końcową grupę aminową i 8 grup ε-aminowych reszt lizyny. Gdy reagent pegilujący połączono ze związkiem SBA o wzorze II, stwierdzono, że przy pH 7,5 i przy stosunku białko:PEG wynoszącym 1:3 oraz w temperaturze reakcji 20 25°C, wytworzono mieszaninę mono- i di-pegilowanych, oraz śladowych ilości tri-pegilowanych produktów. Gdy reagentem pegilującym był związek SPA o wzorze II, w podobnych warunkach, z wyjątkiem tego, że stosunek białko:PEG wynosił 1:2, wytworzono głównie monopegilowane produkty. Pegilowaną EPO można podawać jako mieszaninę lub w postaci różnych pegilowanych produktów rozdzielonych metodą chromatografii kationowymiennej. Poprzez dobór warunków reakcji (np. stosunku reagentów, pH, temperatury, stężenia białka, czasu reakcji itd.), można zmieniać względne ilości różnych pegilowanych produktów.
Rodzaje erytropoetyny można także przedstawić wzorem (III)
P-[NH-CO-X-S-Y-(OCH2CH2)m-OR]n (III) w którym R może oznaczać dowolny niższy alkil. Korzystnym niższym alkilem jest metyl. X może oznaczać -(CH2)k- lub -CH2(O-CH2-CH2)k-, gdzie k oznacza około 1 - 10. Korzystnie k oznacza około 1 - 4, korzystniej k oznacza 1 lub 2. Najkorzystniej X oznacza -(CH2).
We wzorze 1, Y oznacza
We wzorze (III), liczba m jest wybrana tak, że powstały koniugat o wzorze (III) ma aktywność fizjologiczną porównywalną z niemodyfikowaną EPO, przy czym ta aktywność może być taka sama, wyższa lub stanowić część odpowiedniej aktywności niemodyfikowanej EPO. Liczba m oznacza liczbę ugrupowań tlenku etylenu w jednostce PEG. Pojedyncza podjednostka PEG -(OCH2CH2)- ma masę
PL 210 256 B1 cząsteczkową około 44 daltonów. Zatem masa cząsteczkowa koniugatu (bez masy cząsteczkowej EPO) zależy od liczby m. Masa cząsteczkowa „około konkretnej liczby oznacza, że jest ona rozsądnie bliska tej liczbie, oznaczonej znanymi metodami analitycznymi. Liczba m oznacza liczbę całkowitą około 450 - 900 (co odpowiada masie cząsteczkowej około 20 - 40 kilodaltonów), korzystnie m oznacza około 550 - 800 (około 24 - 35 kilodaltonów), a najkorzystniej m oznacza około 650 - 700 (około 29 - 31 kilodaltonów).
We wzorze (III), liczba n oznacza liczbę grup ε-aminowych aminokwasu lizyny w białku erytropoetynie, kowalencyjnie związanych z jednostką PEG wiązaniem amidowym. Koniugat według wynalazku może zawierać jedną, dwie lub trzy jednostki PEG na cząsteczkę EPO. Liczba n oznacza liczbę całkowitą 1 - 3, korzystnie n oznacza 1 lub 2, a najkorzystniej n oznacza 1.
Korzystne białka erytropoetyny o wzorze (III) są określone wzorami:
W najkorzystniejszej postaci wynalazku koniugat erytropoetyny jest określony wzorem:
przy czym w powyższym wzorze n oznacza liczbę całkowitą 1 -3; m oznacza liczbę całkowitą 450 900; R oznacza niższy alkil; X oznacza -(CH2)k- lub -CH2(O-CH2-CH2)k-, a P oznacza resztę białka erytropoetyny bez grupy aminowej lub grup aminowych, tworzących wiązanie amidowe z X.
Inne korzystne produkty glikoproteiny erytropoetyny są określone wzorami:
PL 210 256 B1
Korzystniejsze produkty glikoproteiny erytropoetyny są określone wzorem:
Te białka erytropoetyny można wytwarzać przez:
(a) poddawanie grupy ε-aminowej aminokwasu lizyny białka erytropoetyny o wzorze P-[NH2]n reakcji tworzenia wiązania kowalencyjnego z dwufunkcyjnym reagentem o wzorze Z-CO-X-S-Q, z wytworzeniem związku pośredniego z wiązaniem amidowym, o wzorze:
P-[NH-CO-X-S-Q]n w którym P oznacza białko erytropoetynę bez grupy aminowej tworzącej wiązanie amidowe, n oznacza liczbę całkowitą 1 - 3; Z oznacza grupę reaktywną, np. ugrupowanie estru karboksylowego NHS; X oznacza -(CH2)k- lub -CH2(O-CH2-CH2)k- gdzie k oznacza od 1 do około 10, a Q oznacza grupę zabezpieczającą, taką jak alkanoil, np. acetyl.
(b) poddawanie związku pośredniego z wiązaniem amidowym z etapu (a) reakcji tworzenia wiązania kowalencyjnego z aktywowaną pochodną glikolu polietylenowego o wzorze W-[OCH2CH2]m-OR, z wytworzeniem produktu glikoproteiny erytropoetyny o wzorze:
n w którym W oznacza postać Y reagującą z grupą sulfhydrylową; m oznacza liczbę całkowitą około 450 - 900; R oznacza niższy alkil, a Y ma wyżej podane znaczenie.
W tym sposobie dwufunkcyjnym reagentem jest korzystnie N-sukcynoimidylo-S-acetylotiopropionian lub N-sukcynoimidylo-S-acetylotiooctan, Z korzystnie oznacza N-hydroksysukcynoimid, a aktywowana pochodna glikolu polietylenowego W-[OCH2CH2]m-OR jest korzystnie wybrana z grupy obejmującej jodoacetylometoksy-PEG, metoksy-PEG-winylosulfon i metoksy-PEG-maleimid.
W szczególności białka erytropoetyny o wzorze (III) można wytwarzać przez kowalencyjne przyłączanie grup tiolowych do EPO („aktywację) oraz sprzęganie powstałej aktywowanej EPO z pochodną glikolu polietylenowego (PEG). Pierwszy etap wytwarzania pegilowanej EPO polega na kowalencyjnym przyłączeniu grup tiolowych przez grupy NH2- w EPO. Aktywację tę prowadzi się z użyciem dwufunkcyjnych reagentów z zabezpieczoną grupą tiolową i dodatkową grupą reaktywną, taką jak odpowiednio ugrupowania aktywnych estrów (np. estru sukcynoimidylowego), bezwodników, estrów kwasów sulfonowych, halogenków kwasów karboksylowych i kwasów sulfonowych. Grupa tiolowa jest zabezpieczona znanymi grupami, np. grupą acetylową. Te reagenty dwufunkcyjne mogą reagować z grupami ξ-aminowymi aminokwasów lizyny, tworząc wiązanie amidowe. Pierwszy etap reakcji przedstawiono poniżej:
EPO, n i X mają wyżej podane znaczenie, a Z oznacza znaną reaktywną grupę, np. podstawnik N-hydroksysukcynoimidowy (NHS) o wzorze:
PL 210 256 B1
Korzystnie aktywację grup ε-aminowych lizyny prowadzi się drogą reakcji z dwufunkcyjnymi reagentami zawierającymi grupę sukcynoimidylową. Reagenty dwufunkcyjne mogą zawierać różnego rodzaju grupy łączące, np. ugrupowania -(CH2)k- lub -CH2-(O-CH2-CH2-)k-, gdzie k oznacza około 1 - 10, korzystnie około 1 - 4, korzystniej 1 lub 2, a najkorzystniej 1. Przykładami takich reagentów są S-acetylotiopropionian N-sukcynoimidylu (SATP) i S-acetylotioctan N-sukcynoimidylu (SATA)
ester NHS kwasu acetylotioalkilokarboksylowego, taki jak
ester NHS kwasu 2-(acetylotio)-(etoksy)k-octowego, gdzie k ma wyżej podane znaczenie.
Wytwarzanie reagentów dwufunkcyjnych jest znane. Prekursory estrów NHS kwasu 2-(acetylotio)-(etoksy)k-octowego opisano w DE-3924705, natomiast wytwarzanie pochodnych związku acetylotiolowego opisał March, J. Advanced Organic Chemistry, McGraw-Hill, 1977, 375-376. SATA jest dostępny w handlu (Molecular Probes, Eugene, OR, USA i Pierce, Rockford, IL).
Liczbę grup tiolowych przyłączanych do cząsteczki EPO można wybrać ustalając parametry reakcji, czyli stężenie białka (EPO) i stosunek białko/reagent dwufunkcyjny. Korzystnie EPO jest aktywowana przez kowalencyjne połączenie z 1 - 5 grupami tiolowymi na cząsteczkę EPO, korzystniej 1,5 - 3 grupami tiolowymi na cząsteczkę EPO. Zakresy te odnoszą się do statystycznego rozmieszczenia grup tiolowych w całej populacji białka EPO.
Reakcję prowadzi się np. w wodnym roztworze buforowym, pH 6,5 - 8,0, np. w 10 mM fosforanie potasu, 50 mM NaCl, pH 7,3. Reagent dwufunkcyjny można dodać w DMSO. Po zakończeniu reakcji, korzystnie po 30 minutach, reakcję przerywa się przez dodanie lizyny. Nadmiar reagenta dwufunkcyjnego można oddzielić znanymi sposobami, np. przez dializę lub filtrację kolumnową. Średnią liczbę grup tiolowych przyłączonych do EPO można określić metodami fotometrycznymi opisanymi np. w Grasetti, D.R. i Murray, J.F., J. Appl. Biochem. Biotechnol. 119, 41 - 49 (1967).
Po powyższej reakcji prowadzi się kowalencyjne sprzęganie aktywowanej pochodnej glikolu polietylenowego (PEG). Odpowiednie pochodne PEG są aktywowanymi cząsteczkami PEG o średniej masie cząsteczkowej około 20 - 40 kilodaltonów, korzystniej około 24 - 35 kilodaltonów, a najkorzystniej około 30 kilodaltonów.
Aktywowane pochodne PEG są znane i opisano je np. w Morpurgo, M. i in., J. Bioconj. Chem. (1996) 7, str. 363 i następne, w odniesieniu do PEG-winylosulfonu. Do wytwarzania związków o wzorze I odpowiednie są PEG o łańcuchach liniowych lub rozgałęzionych. Do przykładowych reaktywnych reagentów PEG należą jodoacetylometoksy-PEG i metoksy-PEG-winylosulfon:
Stosowanie tych jodo-aktywowanych substancji jest znane i opisane, np. Hermanson, G. T. w Bioconjugate Techniques, Academic Press, San Diego (1996) str. 147-148.
PL 210 256 B1
Najkorzystniej cząsteczki PEG aktywuje się maleimidem, stosując (niższo-alkoksy-PEG-maleimid), taki jak metoksy-PEG-maleimid (MW 30000; Shearwater Polymers, Inc.). Struktura niższo-
Reakcja sprzęgania z niższo-alkoksy-PEG-maleimidem zachodzi po odszczepieniu in situ grupy zabezpieczającej grupę tiolową w wodnym roztworze buforowym, np. 10 mM fosforanie potasu, 50 mM NaCl, 2 mM EDTA, pH 6,2. Reakcję odszczepiania grupy zabezpieczającej można prowadzić np. za pomocą hydroksyloaminy w DMSO w 25°C, pH 6,2, przez około 90 minut. Do modyfikacji PEG stosunek molowy aktywowanego EPO/niższo-alkoksy-PEG-maleimidu powinien wynosić około 1:3 1:6, korzystnie 1:4. Reakcję można przerwać przez dodanie cysteiny i przereagowanie pozostałych grup tiolowych (-SH) z N-metylomaleimidem lub innymi odpowiednimi związkami zdolnymi do tworzenia wiązań disulfidowych. Ze względu na reakcję jakichkolwiek pozostałych aktywnych grup tiolowych z grupami zabezpieczają cymi, takimi jak ugrupowanie N-metylomaleimidu, lub inn ą odpowiednią grupą zabezpieczającą, glikoproteiny EPO w koniugatach według wynalazku mogą zawierać takie grupy zabezpieczające. Ogólnie w wyniku opisanej tu procedury otrzymuje się mieszaninę cząsteczek o róż nej liczbie grup tiolowych zabezpieczonych przez róż n ą liczbę grup zabezpieczaj ą cych, zależnie od liczby aktywowanych grup tiolowych glikoproteiny, które nie zostały sprzężone z PEG-maleimidem.
N-Metylomaleimid tworzy taki sam typ wiązań kowalencyjnych gdy stosuje się go do blokowania pozostałych grup tiolowych pegilowanego białka, natomiast w związkach disulfidowych będzie zachodzić wewnątrzcząsteczkowa reakcja wymiany sulfid/disulfid, prowadząca do sprzęgania przez mostki disulfidowe reagenta blokującego. Korzystne reagenty blokujące dla tego typu reakcji blokowania to utleniony glutation (GSSG), cysteina i cystamina. Podczas gdy z cysteiną nie wprowadza się do pegilowanego białka dodatkowego ładunku, to w przypadku stosowania takich reagentów blokujących, jak GSSG lub cystamina, zostaje wprowadzony dodatkowy ładunek dodatni lub ujemy.
Dalsze oczyszczanie związków o wzorze (III), w tym rozdział mono-, di- i tri-pegilowanych EPO, można prowadzić znanymi sposobami np. metodą chromatografii kolumnowej.
Pegilowane pochodne erytropoetyny korzystnie zawierają co najmniej 90% koniugatów mono-PEG. Zwykle pożądane są koniugaty mono-PEG glikoprotein erytropoetyn, gdyż zazwyczaj wykazują one wyższą aktywność niż koniugaty di-PEG. Udział procentowy koniugatów mono-PEG, a także stosunek mono- do di-PEG można regulować przez połączenie szerszych frakcji wokół wyeluowanego piku dla zmniejszenia udziału procentowego mono-PEG, albo połączenie węższych frakcji dla zwiększenia udziału procentowego mono-PEG w kompozycji. Około 90% koniugatów mono-PEG to ilość zapewniająca rozsądną wydajność i aktywność. Czasami mogą być wymagane kompozycje, w których np. co najmniej 92% lub co najmniej 96% koniugatów stanowią mono-PEG (n oznacza 1). Zgodnie z wynalazkiem udział procentowy koniugatów, w których n oznacza 1, wynosi 90 - 96%.
Kompozycje farmaceutyczne zawierające pegilowaną erytropoetynę są znane i opisane np.
w publikacji zgłoszenia międzynarodowego WO 01/87329. Kompozycje mogą zawierać 10 - 10000 μg białka erytropoetyny na ml, jak zdefiniowano powyżej. Korzystnie kompozycje zawierają 10 - 1000 μρ, np. 10, 50, 100, 400, 800 lub 2500 μρ/ml. Ponadto kompozycje według wynalazku mogą zawierać 10 - 10000 μg białka erytropoetyny na ml, 10 - 200 mmoli/l siarczanu, 10 - 50 mmoli/l fosforanu, pH
6,0 - 6,5. Ta kompozycja może także zawierać metioninę (do 20 mM), 1-5% poliolu (wag./obj.), do
0,1% Pluronic F68 (wag./obj.) oraz ewentualnie do 1 mM CaCl2. Przykładowo taka kompozycja zawiera 10 - 10000 μg białka erytropoetyny/ml, 40 mmoli/l siarczanu, 10 mmoli/l fosforanu, 3% mannitu
PL 210 256 B1 (wag./obj.), 10 mM metioninę, 0,01% Pluronic F68 (wag./obj.), pH 6,2. W innej postaci wynalazku, kompozycja może zawierać 10 - 10000 μg białka erytropoetyny na ml, 10 - 100 mmoli/l NaCl, 10 - 50 mmoli/l fosforanu, pH 6,0 - 7,0, ewentualnie 1 - 5% (wag./obj.) poliolu. Ponadto, ta kompozycja może także zawierać metioninę (do 20 mM), do 0,1% Pluronic F68 (wag./obj.) oraz ewentualnie do 7,5 μmola/l CaCl2. Konkretnie, kompozycja może zawierać 10 - 10000 μg białka erytropoetyny/ml, 100 mmoli/l NaCl, 10 mM metioninę, 0,01% Pluronic F68 (wag./obj.) oraz 10 mmoli/l fosforanu, pH 7,0.
Zgodnie z wynalazkiem powyższa kompozycja zawiera 10 -10000 μg białka erytropoetyny na ml, 10 - 50 mmoli/l argininy, pH 6 - 6,5, 10 - 100 mmoli/l siarczanu sodu. Dodatkowo ta kompozycja może zawierać metioninę (do 20 mM), do 0,1% Pluronic F68 (wag./obj.), ewentualnie do 1 mmola/l CaCl2 oraz ewentualnie 1 - 5% (wag./obj.) poliolu. Konkretnie, kompozycja ta może zawierać 10 10000 μg białka erytropoetyny/ml, 40 mmoli/l argininy, pH 6,2, 30 mmoli/l siarczanu sodu, 3% mannit (wag./obj.), 10 mM metioninę, 0,01% Pluronic F68 (wag./obj.) oraz ewentualnie 1 mmol/litr CaCl2.
Korzystnie kompozycje farmaceutyczne zawierają 10 - 10000 μg/ml erytropoetyny, korzystnie 25 - 2500 μg/ml erytropoetyny, oraz
a) 10 mM fosforan sodu/potasu, 100 mM NaCl, pH 7,0, albo
b) 10 mM fosforan sodu, 120 mM siarczan sodu, pH 6,2, albo
c) 10 mM fosforan sodu, 40 mM siarczan sodu, 3% mannitu (wag./obj.), pH 6,2, albo
d) 10 mM fosforan sodu, 40 mM siarczan sodu, 3% mannitu (wag./obj.), 10 mM metioninę, 0,01% Pluronic F68 (wag./obj.), pH 6,2, albo
e) 40 mM argininę, 30 mM siarczan sodu, 3% mannitu (wag./obj.), pH 6,2, albo
f) 40 mM argininę, 30 mM siarczan sodu, 3% mannitu (wag./obj.), 10 mM metioninę, 0,01% Pluronic F68 (wag./obj.), pH 6,2.
Kompozycje farmaceutyczne zawierają białko erytropoetynę w ilości 50, 100, 400, 800 lub 2500 μg/ml. Najkorzystniejsze kompozycje zawierają 10 mM fosforan sodu, 40 mM siarczan sodu, 3% mannitu (wag./obj.), 10 mM metioninę, 0,01% Pluronic F68 (wag./obj.), pH 6,2 lub 40 mM argininę, 30 mM siarczan sodu, 3% mannitu (wag./obj.), 10 mM metioninę, 0,01% Pluronic F68 (wag./obj.), pH 6,2. Dalsze szczegóły dotyczące takich kompozycji są znane z WO 01/87329.
Wynalazek umożliwia leczenie zaburzeń dystrybucji żelaza w chorobach serca przez podawanie skutecznej ilości białka erytropoetyny jak zdefiniowano powyżej. Jak wspomniano powyżej, chorobami serca są np. wieńcowa choroba serca, miażdżyca tętnic, miażdżyca tętnic wieńcowych, ostry zespół wieńcowy, niewydolność serca, zastoinowa niewydolność serca i/lub niedomoga serca.
W leczeniu zaburzeń dystrybucji żelaza w chorobach serca EPO może być podawana w dawce 150 U/kg masy ciała dwa razy w tygodniu. Dawka może różnić się w zależności od zapotrzebowania konkretnego pacjenta i może mieścić się w zakresie np. 100 - 200 U/kg. W zależności od okresu półtrwania stosowanej pochodnej EPO, dawka może być podawana np. 1 - 3 razy na tydzień. W zależności od zapotrzebowania konkretnego pacjenta lekarz może także wybrać inne dawkowanie.
Aktywność właściwą EPO lub koniugatów EPO można określić w różnych znanych testach. Aktywność biologiczna oczyszczonych białek EPO jest taka, że podanie białka EPO ludziom we wstrzyknięciu powoduje zwiększenie wytwarzania retikulocytów i czerwonych ciałek krwi przez komórki szpiku kostnego w porównaniu z pacjentami, którym nie podawano wstrzyknięć, lub pacjentami z grup kontrolnych. Aktywność biologiczną uzyskanych i oczyszczonych białek EPO lub ich fragmentów można przebadać metodami według Annable i in., Bull. Wld. Hlth. Org. (1972) 47: 99-112 i Pharm. Europa Spec. Issue Erythropoietin BRP Bio 1997(2). Inny sposób oznaczania aktywności białka EPO, test normocytemiczny na myszach, opisano w literaturze (Pharm. Europa Spec. Issue Erythropoietin BRP Bio 1997(2) i w monografii dotyczącej erytropoetyny, Ph. Eur. BRP).
Poniżej opisano figury rysunku powołane w opisie wynalazku.
Fig. 1: Struktura podstawowa ludzkiej EPO (165 aminokwasów) (SEQ ID NO: 1).
Fig. 2: Struktura podstawowa ludzkiej EPO (166 aminokwasów) (SEQ ID NO: 2).
Wynalazek zostanie lepiej zrozumiany po zapoznaniu się z poniższym przykładem ilustrującym wynalazek.
P r z y k ł a d
Mężczyznę w średnim wieku z chorobą serca bada się po cewnikowaniu serca pod kątem zaburzeń dystrybucji żelaza przez oznaczenie następujących parametrów - CRP (białka C-reaktywnego), ferrytyny i rozpuszczalnego receptora transferyny - jak opisali P. Lehmann, M. Volkmann, J. Lotz, A. Baldauf, R. Roeddiger, plakat przedstawiany na AACC/CSCC, Corocznej Konferencji, 29 lipiec PL 210 256 B1 sierpień , 2001, Chicago, Illinois, USA. Wyniki wskazywały na zaburzenia dystrybucji żelaza. Pacjenta leczono przez podskórne podawanie 150 U/kg Recormon™ (dostępnego w handlu białka erytropoetyny) dwa razy w tygodniu przez maksymalnie 12 tygodni. Następnie oznaczenie opisanych powyżej parametrów wskazało na złagodzenie zaburzenia dotyczącego niedoboru żelaza.
Wykaz sekwencji (1) INFORMACJA OGÓLNA:
(i) ZGŁASZAJĄCY:
(A) Nazwa: F. Hoffmann-La Roche AG (B) Ulica: 124 Grenzacherstrasse (C) Miasto: Bazylea (E) Kraj: Szwajcaria (F) Kod pocztowy(ZIP): CH-4070 (G) Nr telefonu: (61) 638 11 11 (H) Nr telefaxu: (61) 688 13 95 (I) Nr telexu: 962 292 hlr ch (ii) TYTUŁ WYNALAZKU:Zastosowanie erytropoetyny w leczeniu chorób serca (iii) LICZBA SEKWENCJI: 2 (iv) SPOSÓB ODCZYTU KOMPUTEROWEGO:
(A) TYP NOŚNIKA: dyskietka (3) KOMPUTER: kompatybilny z IBM PC (C) SYSTEM OPERACYJNY: WORD (D) OPROGRAMOWANIE: Patentln Release 2.0 <170> Patentln wersja 2.0 <210> 1 <211> 165 <212> PKT '213> Homo sapiens <400> 1
| Ala | Pro | Pro | Arg | Leu 5 | Ile | Cys | Asp | Ser | Arg 10 | Val | Leu | Glu | .Arg | Tyr 15 | Leu |
| Leu | Glu | Ala | Lys 20 | Glu | Ala | Glu | A.sn | Ile 25 | Thr | Thr | Gly | Cys | A.la 30 | Glu | His |
| Cys | Ser | lei | Asn | Glu | Asn | Ile | Thr 40 | Val | Pro | Asp | Thr | Lys 45 | Val | Asn | Phe |
| TV37 | Ala 50 | Trę | Lys | Arg | Met | Glu 55 | Val | Gly | Gin | Gin | Ala 60 | Val | Glu | Val | Trp |
| 'o._ n ó 5 | Gly | Leu | Ala | Leu | Leu 7 0 | Ser | Glu | Ala | Val | Leu 75 | Arg | Gly | Gin | Ala | Leu 80 |
| Leu | Vai | As 71 | Ser | Ser 85 | Gin | Pro | Trp | Glu | Pro 90 | Leu | Gin | Leu | His | Val 95 | Asp |
| Lys | Ala | Vai | Ser 100 | Giy | Leu | .Arg | Ser | Leu 105 | Thr | Thr | Leu | Leu | A.rg 110 | Ala | Leu |
| Giy | Ala | Gir. 115 | Lys | Glu | Ala | Ile | Ser 120 | Pro | Pro | .Asp | Ala | Ala 125 | Ser | Ala | Ala |
PL 210 256 B1
| Pro | Leu 130 | Arg | Thr | Ile | Thr | Ala 135 | Asp | Thr | Phe | Arg | Lys 140 | Leu | Phe | Arg | Val |
| Tyr 145 | Ser | Asn | Phe | Leu | Arg 150 | Gly | Lys | Leu | Lys | Leu 155 | Tyr | Thr | Gly | Glu | Ala 160 |
| Cys | Arg | Thr | Gly | Asp |
165 <210> 2 <211> 166 <212> PRT <213> Homo sapiens
| <400> 2 | Asp | Ser Arg Val 10 | Leu | Glu | Arg | Tyr 15 | Leu | |||||
| Ala | Pro | Pro | Arg Leu 5 | Ile | Cys | |||||||
| Leu | Glu | Ala | Lys Glu 20 | Ala | Glu | Asn | Ile Thr Thr 25 | Gly | Cys | Ala 30 | Glu | His |
| Cys | Ser | Leu 35 | Asn Glu | Asn | Ile | Thr 40 | Val Pro Asp | Thr | Lys 45 | Val | Asn | Phe |
| Tyr | Ala 50 | Trp | Lys Arg | Met | Glu 55 | Val | Gly Gin Gin | Ala 60 | Val | Glu | Val | Trp |
| Gin 65 | Gly | Leu | Ala Leu | Leu 70 | Ser | Glu | Ala Val Leu 75 | Arg | Gly | Gin | Ala | Leu 80 |
| Leu | Val | Asn | Ser Ser 85 | Gin | Pro | Trp | Glu Pro Leu 90 | Gin | Leu | His | Val 95 | Asp |
| Lys | Ala | Val | Ser Gly 100 | Leu | Arg | Ser | Leu Thr Thr 105 | Leu | Leu | Arg 110 | Ala | Leu |
| Gly | Ala | Gin 115 | Lys Glu | Ala | Ile | Ser 120 | Pro Pro Asp | Ala | Ala 125 | Ser | Ala | Ala |
| Pro | Leu 130 | Arg | Thr Ile | Thr | Ala 135 | Asp | Thr Phe Arg | Lys 140 | Leu | Phe | Arg | Val |
| Tyr | Ser | Asn | Phe Leu | Arg | Gly | Lys | Leu Lys Leu | Tyr | Thr | Gly | Glu | Ala |
150 155 160
Cys Arg Thr Gly Asp Arg 165
PL 210 256 B1
Claims (13)
1. Zastosowanie erytropoetyny do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń dystrybucji żelaza w chorobach serca.
2. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym chorobę serca stanowi niedomoga serca.
3. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, w którym białko erytropoetynę stanowi ludzka erytropoetyna.
4. Zastosowanie według zastrz. 3, w którym białko erytropoetynę stanowi epoetyna α lub epoetyna β.
5. Zastosowanie według zastrz. 1 - 4, w którym białko erytropoetyna jest eksprymowane przez aktywację endogennych genów.
6. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, w którym białko erytropoetyna ma sekwencję aminokwasów SEQ ID NO: 1 lub SEQ ID NO: 2.
7. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, w którym białko erytropoetyna ma sekwencję ludzkiej erytropoetyny zmodyfikowaną przez dodanie 1 - 6 miejsc glikozylacji.
8. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, w którym białko erytropoetynę stanowi darbepoetyna α.
9. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, w którym białko erytropoetyna zdefiniowane w zastrz. 3 - 8 jest pegilowane.
10. Zastosowanie według zastrz. 9, w którym białko erytropoetyna stanowi koniugat, który to koniugat zawiera białko erytropoetynę mające co najmniej jedną wolną grupę aminową oraz wykazującą aktywność biologiczną in vivo wywoływania zwiększenia wytwarzania retikulocytów i czerwonych ciałek krwi przez komórki szpiku kostnego, wybraną z grupy obejmującej ludzką erytropoetynę i jej analogi, które mają sekwencję ludzkiej erytropoetyny zmodyfikowaną przez dodanie 1 - 6 miejsc glikozylacji lub przegrupowanie co najmniej jednego miejsca glikozylacji; przy czym to białko erytropoetyna jest kowalencyjnie związane z n ugrupowaniami glikolu polietylenowego o wzorze -CO-(CH2)x(OCH2CH2)m-OR, w którym grupa -CO każdego ugrupowania glikolu polietylenowego tworzy wiązanie amidowe z jedną z grup aminowych; R oznacza C1-C6 alkil; x oznacza 2 lub 3; m oznacza 450 - 900; n oznacza 1 - 3; oraz n i m są dobrane tak, że masa cząsteczkowa koniugatu minus białka erytropoetyny wynosi 20 - 100 kilodaltonów.
11. Zastosowanie według zastrz. 10, w którym x oznacza 2, m oznacza 650 - 750, n oznacza 1, a R oznacza metyl.
12. Zastosowanie według zastrz. 9, w którym białko erytropoetyna stanowi koniugat, który to koniugat zawiera białko erytropoetynę zawierające co najmniej jedną wolną grupę aminową oraz wykazującą aktywność biologiczną in vivo wywoływania zwiększenia wytwarzania retikulocytów i czerwonych ciałek krwi przez komórki szpiku kostnego, wybraną z grupy obejmującej ludzką erytropoetynę i jej analogi, które mają pierwotną strukturę ludzkiej erytropoetyny zmodyfikowaną przez dodanie 1 - 6 miejsc glikozylacji; przy czym to białko erytropoetyna jest kowalencyjnie związane z 1 - 3 ugrupowaniami niższo-alkoksy-glikolu polietylenowego, a każde ugrupowanie glikolu polietylenowego jest kowalencyjnie związane z białkiem erytropoetyną poprzez łącznik o wzorze -C(O)-X-S-Y-, w którym grupa C(O) tworzy wiązanie amidowe z jedną z grup aminowych, X oznacza -(CH2)k- lub -CH2(O-CH2-CH2)k-, k oznacza 1 - 10, Y oznacza przy czym średnia masa cząsteczkowa każdego ugrupowania glikolu polietylenowego wynosi 20 - 40 kilodaltonów, a masa cząsteczkowa koniugatu wynosi 51 - 175 kilodaltonów.
PL 210 256 B1
13. Zastosowanie według zastrz. 12, w którym koniugat erytropoetyny ma wzór:
w którym n oznacza liczbę całkowitą 1 - 3; m oznacza liczbę całkowitą 450 - 900; R oznacza C1-C6 alkil; X oznacza -(CH2)k- lub -CH2(O-CH2-CH2)k-, k oznacza 1 - 10, a P oznacza resztę białka erytropoetyny bez n grup aminowych tworzących wiązanie amidowe z X.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP02026342 | 2002-11-22 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL377590A1 PL377590A1 (pl) | 2006-02-06 |
| PL210256B1 true PL210256B1 (pl) | 2011-12-30 |
Family
ID=32337998
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL377590A PL210256B1 (pl) | 2002-11-22 | 2003-11-17 | Zastosowanie erytropoetyny w leczeniu chorób serca |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7459436B2 (pl) |
| EP (1) | EP1565206B1 (pl) |
| JP (1) | JP2006512326A (pl) |
| KR (1) | KR100839302B1 (pl) |
| CN (1) | CN100531797C (pl) |
| AR (1) | AR042097A1 (pl) |
| AT (1) | ATE426411T1 (pl) |
| AU (1) | AU2003288081B2 (pl) |
| BR (1) | BRPI0316438C1 (pl) |
| CA (1) | CA2505524C (pl) |
| DE (1) | DE60326874D1 (pl) |
| ES (1) | ES2321928T3 (pl) |
| MX (1) | MXPA05005281A (pl) |
| PL (1) | PL210256B1 (pl) |
| RU (1) | RU2324494C2 (pl) |
| WO (1) | WO2004047858A1 (pl) |
Families Citing this family (45)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7214660B2 (en) * | 2001-10-10 | 2007-05-08 | Neose Technologies, Inc. | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
| US7173003B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-02-06 | Neose Technologies, Inc. | Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF |
| EP1615945B1 (en) | 2003-04-09 | 2011-09-28 | BioGeneriX AG | Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods |
| WO2005012484A2 (en) | 2003-07-25 | 2005-02-10 | Neose Technologies, Inc. | Antibody-toxin conjugates |
| AU2004268614C1 (en) * | 2003-08-27 | 2010-10-28 | Ophthotech Corporation | Combination therapy for the treatment of ocular neovascular disorders |
| US20080305992A1 (en) | 2003-11-24 | 2008-12-11 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin |
| JP2007514673A (ja) * | 2003-12-19 | 2007-06-07 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 慢性炎症性腸疾患の際の鉄分布障害の処置におけるエリスロポエチンの使用 |
| WO2006010143A2 (en) | 2004-07-13 | 2006-01-26 | Neose Technologies, Inc. | Branched peg remodeling and glycosylation of glucagon-like peptide-1 [glp-1] |
| EP1814573B1 (en) | 2004-10-29 | 2016-03-09 | ratiopharm GmbH | Remodeling and glycopegylation of fibroblast growth factor (fgf) |
| CA2593682C (en) | 2005-01-10 | 2016-03-22 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor |
| EP1871795A4 (en) | 2005-04-08 | 2010-03-31 | Biogenerix Ag | COMPOSITIONS AND METHOD FOR PRODUCING GLYCOSYLATION MUTANTS OF A PROTEASE-RESISTANT HUMAN GROWTH HORMONE |
| US20070105755A1 (en) | 2005-10-26 | 2007-05-10 | Neose Technologies, Inc. | One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides |
| EP2380435B1 (en) | 2005-08-31 | 2016-05-25 | Kaneka Corporation | Feline-derived erythropoietin and method for production thereof |
| US20070072795A1 (en) * | 2005-09-28 | 2007-03-29 | Anton Haselbeck | Treatment of neurodegenerative disorders |
| WO2007056191A2 (en) | 2005-11-03 | 2007-05-18 | Neose Technologies, Inc. | Nucleotide sugar purification using membranes |
| US10351615B2 (en) | 2006-02-03 | 2019-07-16 | Opko Biologics Ltd. | Methods of treatment with long-acting growth hormone |
| US7553941B2 (en) | 2006-02-03 | 2009-06-30 | Modigene Inc | Long-acting polypeptides and methods of producing same |
| US20150038413A1 (en) | 2006-02-03 | 2015-02-05 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
| US20140113860A1 (en) | 2006-02-03 | 2014-04-24 | Prolor Biotech Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
| US9249407B2 (en) | 2006-02-03 | 2016-02-02 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
| US8759292B2 (en) | 2006-02-03 | 2014-06-24 | Prolor Biotech, Llc | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
| US9458444B2 (en) | 2006-02-03 | 2016-10-04 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
| US8476234B2 (en) * | 2006-02-03 | 2013-07-02 | Prolor Biotech Inc. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
| US8304386B2 (en) * | 2006-02-03 | 2012-11-06 | Prolor Biotech, Inc. | Long-acting growth hormone and methods of producing same |
| US8450269B2 (en) | 2006-02-03 | 2013-05-28 | Prolor Biotech Ltd. | Long-acting growth hormone and methods of producing same |
| US8048849B2 (en) | 2006-02-03 | 2011-11-01 | Modigene, Inc. | Long-acting polypeptides and methods of producing same |
| US8048848B2 (en) | 2006-02-03 | 2011-11-01 | Prolor Biotech Ltd. | Long-acting interferons and derivatives thereof and methods thereof |
| US8946155B2 (en) | 2006-02-03 | 2015-02-03 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
| US10221228B2 (en) | 2006-02-03 | 2019-03-05 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
| US9187532B2 (en) | 2006-07-21 | 2015-11-17 | Novo Nordisk A/S | Glycosylation of peptides via O-linked glycosylation sequences |
| US20100075375A1 (en) | 2006-10-03 | 2010-03-25 | Novo Nordisk A/S | Methods for the purification of polypeptide conjugates |
| CN101796063B (zh) | 2007-04-03 | 2017-03-22 | 拉蒂奥法姆有限责任公司 | 使用糖聚乙二醇化g‑csf的治疗方法 |
| WO2008154639A2 (en) | 2007-06-12 | 2008-12-18 | Neose Technologies, Inc. | Improved process for the production of nucleotide sugars |
| CN103497247A (zh) | 2008-02-27 | 2014-01-08 | 诺沃—诺迪斯克有限公司 | 缀合的因子viii分子 |
| US12203113B2 (en) | 2009-07-09 | 2025-01-21 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
| US9663778B2 (en) | 2009-07-09 | 2017-05-30 | OPKO Biologies Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
| CN101870735B (zh) * | 2010-06-02 | 2013-06-12 | 北京精益泰翔技术发展有限公司 | 一种新型高糖基化促红细胞生成素免疫融合蛋白 |
| JP2015520128A (ja) | 2012-04-19 | 2015-07-16 | オプコ バイオロジクス リミテッド | 長時間作用性オキシントモジュリン変異体とその作製方法 |
| ES2882890T3 (es) | 2012-11-20 | 2021-12-03 | Opko Biologics Ltd | Método para aumentar el volumen hidrodinámico de polipéptidos mediante la unión a péptidos carboxi terminales de la gonadotrofina |
| EA201690212A8 (ru) | 2013-07-12 | 2016-08-31 | Офтотек Корпорейшн | Способы лечения или профилактики офтальмологических патологических состояний |
| US20150158926A1 (en) | 2013-10-21 | 2015-06-11 | Opko Biologics, Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
| WO2016092550A2 (en) | 2014-12-10 | 2016-06-16 | Opko Biologics Ltd. | Methods of producing long acting ctp-modified polypeptides |
| EP3988113A1 (en) | 2015-06-19 | 2022-04-27 | OPKO Biologics Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
| BR112019000610A2 (pt) | 2016-07-11 | 2019-07-02 | Opko Biologics Ltd | fator vii de coagulação de longa ação e métodos de produção do mesmo |
| EP4219537A4 (en) * | 2020-09-22 | 2025-03-26 | Jecho Laboratories, Inc. | Glycosylation-modified erythropoietin and use thereof |
Family Cites Families (41)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4179337A (en) * | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
| JPS57183508A (en) * | 1981-05-07 | 1982-11-11 | Nippon Piston Ring Co Ltd | Compound valve seat |
| IL77081A (en) | 1984-12-04 | 1999-10-28 | Genetics Inst | Dna sequence encoding human erythropoietin process for the preparation thereof and a pharmaceutical composition of human erythropoietin |
| US4745099A (en) * | 1985-02-06 | 1988-05-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Pharmaceutical composition for the treatment of the anemia of malignant tumors |
| KR880012235A (ko) * | 1987-04-10 | 1988-11-26 | 벤자민 에프.람버트 | 정상 포유동물의 헤마토크릿을 증가시키는 방법 |
| FR2646438B1 (fr) | 1989-03-20 | 2007-11-02 | Pasteur Institut | Procede de remplacement specifique d'une copie d'un gene present dans le genome receveur par l'integration d'un gene different de celui ou se fait l'integration |
| DE3924705A1 (de) | 1989-07-26 | 1991-01-31 | Boehringer Mannheim Gmbh | Heterobifunktionelle verbindungen |
| AU635844B2 (en) | 1989-11-06 | 1993-04-01 | Cell Genesys, Inc. | Production of proteins using homologous recombination |
| HK1000547A1 (en) | 1989-12-22 | 1998-04-03 | Merck Serono Sa | Endogenous gene expression modification with regulatory element by way of homologous recombination |
| US5272071A (en) * | 1989-12-22 | 1993-12-21 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Method for the modification of the expression characteristics of an endogenous gene of a given cell line |
| GB9001987D0 (en) * | 1990-01-29 | 1990-03-28 | Janssen Pharmaceutica Nv | Improved cyclodextrin based erythropietin formulation |
| US5324650A (en) * | 1990-03-20 | 1994-06-28 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Situ process for production of conjugates |
| US6565841B1 (en) | 1991-03-15 | 2003-05-20 | Amgen, Inc. | Pulmonary administration of granulocyte colony stimulating factor |
| JPH06506217A (ja) | 1991-03-18 | 1994-07-14 | エンゾン，インコーポレーテッド | ポリペプチドまたはグリコポリペプチドとポリマーとのヒドラジン含有結合体 |
| NZ244778A (en) | 1991-10-21 | 1994-03-25 | Ortho Pharma Corp | Peg imidates and protein derivatives thereof |
| US5641670A (en) | 1991-11-05 | 1997-06-24 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Protein production and protein delivery |
| US5733761A (en) * | 1991-11-05 | 1998-03-31 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Protein production and protein delivery |
| PT101031B (pt) * | 1991-11-05 | 2002-07-31 | Transkaryotic Therapies Inc | Processo para o fornecimento de proteinas por terapia genetica |
| ZA933926B (en) | 1992-06-17 | 1994-01-03 | Amgen Inc | Polyoxymethylene-oxyethylene copolymers in conjuction with blomolecules |
| CA2101361A1 (en) | 1992-08-27 | 1994-02-28 | Robert A. Snow | Low diol polyalkylene oxide biologically active proteinaceous substances |
| TW402639B (en) | 1992-12-03 | 2000-08-21 | Transkaryotic Therapies Inc | Protein production and protein delivery |
| NZ250375A (en) | 1992-12-09 | 1995-07-26 | Ortho Pharma Corp | Peg hydrazone and peg oxime linkage forming reagents and protein derivatives |
| US5359030A (en) * | 1993-05-10 | 1994-10-25 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized polypeptide compositions, therapeutic delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
| US5681811A (en) * | 1993-05-10 | 1997-10-28 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized therapeutic agent compositions, delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
| AU7097094A (en) | 1993-06-01 | 1994-12-20 | Enzon, Inc. | Carbohydrate-modified polymer conjugates with erythropoietic activity |
| CN1057534C (zh) | 1993-08-17 | 2000-10-18 | 柯瑞英-艾格公司 | 促红细胞生成素类似物 |
| US5643575A (en) | 1993-10-27 | 1997-07-01 | Enzon, Inc. | Non-antigenic branched polymer conjugates |
| RU2089214C1 (ru) * | 1994-01-06 | 1997-09-10 | Научно-исследовательский центр Санкт-Петербургского медицинского института им.акад.И.П.Павлова | Средство для снижения патологической проницаемости сосудов к белкам |
| US5672662A (en) * | 1995-07-07 | 1997-09-30 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications |
| DE19535571A1 (de) | 1995-09-14 | 1997-03-20 | Boehringer Mannheim Gmbh | Pharmazeutische Kombinationspräparate und deren Verwendung zur Behandlung von Hämodialysepatienten |
| AU5773798A (en) | 1997-01-29 | 1998-08-18 | Polymasc Pharmaceuticals Plc | Pegylation process |
| ATE222118T1 (de) | 1997-03-18 | 2002-08-15 | Roche Diagnostics Gmbh | Pharmazeutische kombinationspräparate enthaltend erythropoietin und eisenpräparate |
| EP0885613A1 (de) * | 1997-06-21 | 1998-12-23 | Roche Diagnostics GmbH | Verwendung von modifizierten Hämoglobinen zur Behandlung von Anämien und Kombinationspräparate umfassend Erythropoietin und modifiziertes Hämoglobin |
| DE19734293A1 (de) * | 1997-08-08 | 1999-02-11 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verwendung von pharmazeutischen Kombinationspräparaten enthaltend Erythropoietin und Eisenpräparate zur Behandlung von rheumatischen Erkrankungen |
| CZ299516B6 (cs) | 1999-07-02 | 2008-08-20 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Konjugát erythropoetinového glykoproteinu, zpusobjeho výroby a použití a farmaceutická kompozice sjeho obsahem |
| JO2291B1 (en) * | 1999-07-02 | 2005-09-12 | اف . هوفمان لاروش ايه جي | Erythropoietin derivatives |
| ATE291436T2 (de) | 2000-05-15 | 2005-04-15 | Hoffmann La Roche | Flüssige arzneizubereitung enthaltend ein erythropoietin derivat |
| US7078376B1 (en) * | 2000-08-11 | 2006-07-18 | Baxter Healthcare S.A. | Therapeutic methods for treating subjects with a recombinant erythropoietin having high activity and reduced side effects |
| US20020065214A1 (en) * | 2000-11-29 | 2002-05-30 | Adrian Iaina | Method of treating congestive heart failure |
| MXPA03005406A (es) * | 2000-12-20 | 2003-09-25 | Hoffmann La Roche | Conjugados de eritropoyetina. |
| WO2003025583A2 (en) | 2001-09-14 | 2003-03-27 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Differential diagnosis of disorders of iron metabolism |
-
2003
- 2003-11-12 US US10/706,701 patent/US7459436B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-17 MX MXPA05005281A patent/MXPA05005281A/es active IP Right Grant
- 2003-11-17 CN CNB2003801038773A patent/CN100531797C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-17 AT AT03779949T patent/ATE426411T1/de active
- 2003-11-17 JP JP2004554368A patent/JP2006512326A/ja active Pending
- 2003-11-17 KR KR1020057009185A patent/KR100839302B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-17 EP EP03779949A patent/EP1565206B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-17 DE DE60326874T patent/DE60326874D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-17 WO PCT/EP2003/012822 patent/WO2004047858A1/en not_active Ceased
- 2003-11-17 ES ES03779949T patent/ES2321928T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-17 BR BRPI0316438A patent/BRPI0316438C1/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-11-17 PL PL377590A patent/PL210256B1/pl unknown
- 2003-11-17 AU AU2003288081A patent/AU2003288081B2/en not_active Expired
- 2003-11-17 CA CA2505524A patent/CA2505524C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-17 RU RU2005119649/15A patent/RU2324494C2/ru active
- 2003-11-20 AR ARP030104288A patent/AR042097A1/es unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE426411T1 (de) | 2009-04-15 |
| BRPI0316438B1 (pt) | 2016-08-02 |
| KR20050085091A (ko) | 2005-08-29 |
| PL377590A1 (pl) | 2006-02-06 |
| US20040209802A1 (en) | 2004-10-21 |
| EP1565206A1 (en) | 2005-08-24 |
| CN100531797C (zh) | 2009-08-26 |
| BR0316438A (pt) | 2005-10-11 |
| BRPI0316438B8 (pt) | 2016-09-27 |
| AU2003288081A1 (en) | 2004-06-18 |
| RU2324494C2 (ru) | 2008-05-20 |
| JP2006512326A (ja) | 2006-04-13 |
| BRPI0316438C1 (pt) | 2021-05-25 |
| MXPA05005281A (es) | 2005-07-25 |
| CA2505524C (en) | 2017-02-07 |
| AR042097A1 (es) | 2005-06-08 |
| KR100839302B1 (ko) | 2008-06-17 |
| RU2005119649A (ru) | 2006-03-20 |
| WO2004047858A1 (en) | 2004-06-10 |
| AU2003288081B2 (en) | 2007-02-01 |
| ES2321928T3 (es) | 2009-06-15 |
| CA2505524A1 (en) | 2004-06-10 |
| CN1713919A (zh) | 2005-12-28 |
| US7459436B2 (en) | 2008-12-02 |
| EP1565206B1 (en) | 2009-03-25 |
| DE60326874D1 (de) | 2009-05-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL210256B1 (pl) | Zastosowanie erytropoetyny w leczeniu chorób serca | |
| JP5128048B2 (ja) | エリスロポエチンの使用 | |
| CN1901934B (zh) | 促红细胞生成素在治疗慢性炎症性肠病中铁分布紊乱中的用途 | |
| EP1432802B1 (en) | Pegylated and diglycosylated erythropoietin | |
| PL201754B1 (pl) | Koniugat zawierający glikoproteinę erytropoetynę, kompozycja koniugatów, środek farmaceutyczny, zastosowanie koniugatu lub kompozycji koniugatów i sposób wytwarzania koniugatu lub kompozycji koniugatów | |
| PL219131B1 (pl) | Ciekła kompozycja farmaceutyczna, sposób jej wytwarzania oraz jej zastosowanie |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| RECP | Rectifications of patent specification |