PL213130B1

PL213130B1 - Kompozycja skojarzona

Info

Publication number: PL213130B1
Application number: PL344790A
Authority: PL
Inventors: Claudio Cavazza
Original assignee: Sigma Tau Healthscience Spa
Priority date: 1999-04-16
Filing date: 2000-04-07
Publication date: 2013-01-31
Also published as: CA2334919A1; NO20006285L; ITRM990230A1; TR200003688T1; JP2002542191A; NO20006285D0; IL139851A0; SK18852000A3; KR20010071467A; IS5740A; ES2232443T3; HU229272B1; CA2334919C; US6306392B1; WO2000062773A1; ATE282409T1; NZ509276A; HUP0102501A2; CN1300214A; PT1087762E

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest kompozycja skojarzona zawierająca propionylo L-karnitynę lub jej farmakologicznie akceptowalną sól, glutation i drożdże.

Niniejszy wynalazek dotyczy kompozycji do profilaktyki i/lub leczenia zmian tych narządów, które pełnią najbardziej intensywną funkcję metaboliczną, takich jak wątroba, nerki, układ sercowonaczyniowy i mózg.

Mówiąc dokładniej, taka kompozycja jest przydatna do leczenia lub profilaktyka hepatozy, nefropatii, uszkodzeń układu sercowo-naczyniowego lub mózgu, takich jak uszkodzenia spowodowane starzeniem się lub spowodowane zmianami metabolizmu tych narządów, lub spowodowane substancjami toksycznymi.

Odpowiednio, kompozycja może mieć formę i wywierać działanie jak suplement diety lub właściwy lek, w zależności od tego czy stosowana kompozycja ma na celu działanie podtrzymujące czy profilaktyczne, czy też ściśle lecznicze w stosunku do konkretnych osobników.

Dokładniej, niniejszy wynalazek dotyczy kompozycji, którą można podawać doustnie, pozajelitowo, doodbytniczo lub przezskórnie, która zawiera w skojarzeniu:

(a) propionylo L-karnitynę lub jej sól akceptowalną farmakologicznie, ewentualnie w skojarzeniu inną „karnityną”, przy czym przez „karnitynę” rozumie się L-karnitynę lub alkanoilo L-karnitynę wybraną z grupy zawierającej acetylo L-karnitynę, walerylo L-karnitynę i izowalerylo L-karnitynę i ich sole farmakologicznie akceptowalne; oraz (b) glutation lub drożdże zawierające glutation;

(c) drożdże bez glutationu, jeśli składnik (b)zawiera glutation.

Glutation (GSH), N-(N-L-L-y-glutamylo-cysteinylo)-glicyna, odgrywa ważną rolę w organicznych reakcjach redoks i detoksykacji. Glutation jest syntetyzowany w organizmie z kwasu glutaminowego i cysteiny, które w obecności ATP, tworzą γ-glutamylo-cysteinę, która ponownie w obecności ATP, reaguje z glicyną powodując powstawanie glutationu. Glutation jest wszechobecny w organizmie. Jednakże największe jego stężenia znajdują się w wątrobie, sercu i mózgu, to jest w tych narządach, w których reakcje metaboliczne, energetyczne i detoksykujące są bardziej istotne. Te tkanki zawierają również peroksydazę glutationu i reduktazę glutationu, które regulują system redoks związany z cyklem glutationu, zapewniając utrzymanie wystarczających ilości zredukowanego glutationu po jego utlenieniu.

Chociaż biochemiczne i detoksykacyjne działanie glutationu było znane od dawna, szczególnie przeciwko metalom ciężkim (które są jednymi z najważniejszych zanieczyszczeń środowiska) albo przeciwko lekom niszczącym wątrobę, takim jak paracetamol, dopiero niedawno naukowcy odkryli kluczową rolę glutationu pośród różnych systemów redoks, a także jego specyficzną rolę farmakologiczną. Bezpośrednie zaangażowanie glutationu w wywieranie działania ochronnego przeciw tworzeniu płytek miażdżycowych obserwowano poprzez bezpośredni pomiar w tych płytkach obecności związanego z glutationem systemu Iantyoksydant/prooksydant. Naukowcy ci ujawnili niskie stężenia glutationu i stosunkowo niską aktywność systemu redoks związanego z glutationem. Szczególnie wyraźnie występowało obniżenie stężenia peroksydazy glutationu i w tym samym czasie wzrost stężenia czynników utleniających. Te nieprawidłowości nie są jednak ewidentne w prawidłowej tkance naczyń.

Glutation odgrywa również główną rolę ochronną w chorobach wątroby. Ponadto glutation pośredniczy w działaniach chroniących wątrobę przed licznymi lekami. Donoszono również, że podwyższony glutation może zmniejszać odrzucanie przeszczepu wątroby.

Na poziomie nerwowo-mózgowym również rola samego glutationu różni się od roli innych lepiej znanych systemów redoks pod względem możliwości ochrony przed urazami tkanek i komórek w czasie starzenia, w chorobie Parkinsona lub chorobie Alzheimera. W rzeczywistości na poziomie mózgowym, glutation jest zdolny odgrywać różne role, a w szczególności rolę neurotransmitera. Niedobór glutationu może zwiększyć poziomy substancji cytotoksycznych i wyzwalać apoptozę różnych grup komórek neuronalnych.

Podczas starzenia obserwuje się wzrost procesów utleniania i spadek naturalnych substancji antyoksydacyjnych, a zwłaszcza glutationu, co w rezultacie powoduje, że niedobór glutationu może być uważany za jedną z przyczyn starzenia. Korzystna rola glutationu może być również obserwowana na poziomie jelitowym, gdzie jego obecność powoduje tworzenie wodorotlenków i nadtlenków lipidów,

PL 213 130 B1 spełniając istotną funkcję w detoksykacji jelitowej i w zapobieganiu chorobom związanym z wątrobą i jelitami.

L-karnityna i jej pochodne alkanoilowe są dobrze znane ze względu na ważną rolę, którą mogą odgrywać na poziomie metabolizmu, a w szczególności w odniesieniu do utleniania i wykorzystania kwasów tłuszczowych poprzez β-oksydację.

W rzeczywistości L-karnityna przyjęta z pożywieniem lub zsyntetyzowana przez organizm jest zatężana przez krew w narządach, które są najbardziej aktywne metabolicznie pod względem wykorzystania kwasów tłuszczowych, takich jak mięśnie szkieletowe i serce.

Niedobór L-karnityny może powodować miopatię, podczas gdy doustne podanie L-karnityny poprawia stan kliniczny w takich chorobach. L-karnityna spełnia również istotną funkcję w utlenianiu mitochondrialnym glukozy pod względem produkcji energii, co powoduje, że odpowiednie poziomy L-karnityny są niezbędne dla prawidłowego metabolizmu energetycznego na poziomie serca i mięśni.

Jej podawanie poprawia odporność na stres u osobników cierpiących na niewydolność wieńcową, jak również zwiększa przepływ przez naczynia wieńcowe, powodując poprawę efektów klinicznych zaburzeń kardiologicznych.

Innymi właściwościami biologicznymi L-karnityny i jej pochodnych alkanoilowych, a w szczególności propionylo L-karnityny, są jej zdolności do stabilizowania błon komórkowych i zabezpieczania ich przed uszkodzeniami wywołanymi przez procesy oksydacyjne.

Z opisu WO 98/41113 (PL 190526) znany jest leczniczo-odżywczy preparat zawierający propionylo-L-karnitynę i glutation. Z opisu EP 0797993A1 znana jest kompozycja farmaceutyczna stosowana do leczenia miedzy innymi poszerzenia mózgowego i chorób układu sercowo-naczyniowego zawierająca propionylo-L-karnitynę i glutation.

Przedmiotem wynalazku jest kompozycja, charakteryzująca się tym, że zawiera:

(a) propionylo L-karnitynę lub jej farmakologicznie akceptowalną sól; i (b glutation lub drożdże zawierające glutation;

(c) drożdże bez glutationu jeśli składnik (b) składa się z glutationu, przy czym stosunek wagowy (a):(b):(c) wynosi od 100:1:100 do 1:10:10.

Korzystnie składnik (a) kompozycji według wynalazku zawiera ponadto „karnitynę” wybraną z grupy zawierającej L-karnitynę, acetylo L-karnitynę, walerylo L-karnitynę, izowalerylo L-karnitynę lub ich farmakologicznie akceptowalne sole lub ich mieszaniny.

Korzystniej składnik (a) kompozycji według wynalazku zawiera mieszaninę L-karnityny, acetylo

L-karnityny i propionylo L-karnityny lub ich farmakologicznie akceptowalnych soli.

Korzystnie w kompozycji według wynalazku drożdże zawierające glutation zawierają od 7 do 10% wagowych glutationu.

Korzystnie w kompozycji według wynalazku stosunek wagowy (a):(b):(c) wynosi od 10:1:10 do 1:1:1.

Korzystnie kompozycja według wynalazku zawiera ponadto:

(d) co najmniej jeden prekursor biosyntezy glutationu, wybrany z grupy zawierającej kwas glutaminowy, cysteinę i magnez.

Korzystnie w takiej kompozycji według wynalazku stosunek wagowy (a):(d) wynosi od 1:1 do 1:0,5.

Korzystnie kompozycja według wynalazku zawiera:

(a) propionylo L-karnitynę lub jej farmakologicznie akceptowalną sól;

(b) glutation;

(c) drożdże bez glutationu wybrane z grupy zawierającej Saccharomyces eerevisiae i Saccharomyces fragilis;

(d) kwas glutaminowy, glicynę, cysteinę i magnez.

Korzystnie kompozycja według wynalazku zawiera:

(a) propionylo L-karnitynę lub jej farmakologicznie akceptowalną sól;

(b) drożdże zawierające 7-10% wagowych glutationu;

(c) kwas glutaminowy, glicynę, cysteinę i magnez.

Korzystnie kompozycja według wynalazku zawiera:

(a) mieszaninę L-karnityny, acetylo L-karnityny, propionylo L-karnityny lub ich farmakologicznie akceptowalnych soli;

(b) glutation;

(c) drożdże bez glutationu wybrane z grupy zawierającej Saccharomyces cerevisiae i Saccharomyces fragilis;

(d) kwas glutaminowy, glicynę, cysteinę i magnez.

PL 213 130 B1

Korzystnie kompozycja według wynalazku zawiera:

(b) drożdże zawierające 7-10% wagowych glutationu;

(c) kwas glutaminowy, glicynę, cysteinę i magnez.

Korzystnie w kompozycji według wynalazku farmakologicznie akceptowalna sól L-karnityny lub alkanoilo L-karnityny jest wybrana z grupy zawierającej:

chlorek; bromek; jodek; asparaginian; monoester kwasu asparaginowego; cytrynian; monoester kwasu cytrynowego; winian; fosforan; monoester kwasu fosforowego; fumaran, monoester kwasu fumarowego; glicerofosforan; glukozofosforan, mleczan; maleinian; monoester kwasu maleinowego; orotan; monoester kwasu szczawiowego; siarczan, monoester kwasu siarkowego; trichlorooctan; trifluorooctan i metanosulfonian.

Korzystnie kompozycja według wynalazku zawiera ponadto witaminy, koenzymy, substancje mineralne i antyoksydanty.

Korzystnie kompozycję według wynalazku stosuje się doustnie, w formie suplementu diety.

Korzystnie kompozycję według wynalazku stosuje się doustnie, pozajelitowo, doodbytniczo lub przez skórnie, w formie leku.

Obecnie niespodziewanie stwierdzono, że kompozycja skojarzona zawierająca jako składniki aktywne:

(a) propionylo L-karnitynę lub jedną z jej soli farmakologicznie akceptowalnych;

(b) glutation lub drożdże zawierające glutation;

(c) drożdże bez glutationu, jeśli składnik (b) składa się z glutationu;

jest niezwykle skuteczna w profilaktyce i/lub leczeniu nieprawidłowości metabolicznych najbardziej aktywnych narządów takich jak wątroba, nerki, układ sercowo-naczyniowy i mózg, zarówno jako wynik silnego efektu synergistycznego wywołanego przez jej składniki, jak i jako wynik ich zwiększonego pobierania przez tkanki, w szczególności glutationu. Taka kompozycja jest szczególnie użyteczna do profilaktyki i leczenia chorób wątroby, nerek oraz uszkodzeń sercowo-naczyniowych lub mózgowych, takich jak na przykład te spowodowane starzeniem lub też spowodowane zaburzonym metabolizmem wyżej wspomnianych narządów lub substancjami toksycznymi.

Wykazano również, że korzystnie składnik (a) kompozycji może także zawierać inną „karnitynę”, wybraną z grupy zawierającej acetylo L-karnitynę, walerylo L-karnitynę i izowalerylo L-karnitynę lub też ich sole akceptowalne farmakologicznie albo mieszaninę powyższych.

Korzystnie składnik (a) kompozycji składa się z mieszaniny karnityn, mieszaniny L-karnityny, acetylo L-karnityny i propionylo L-karnityny lub ich soli akceptowalnych farmakologicznie.

Kiedy składnik (b) składa się z glutationu, to składnik (c) będzie się wtedy składał z drożdży bez glutationu, wybranych z grupy zawierającej Saccharomyces eerevisiae i Saccharomyces fragilis. Inne przykłady takich drożdży są dobrze znane ekspertom z tej dziedziny.

Kiedy składnik (b) składa się z drożdży zawierających glutation, drożdże powinny zawierać korzystnie od 7 do 10% wagowych glutationu. Nieograniczającym przykładem odpowiednich drożdży zawierających glutation jest ekstrakt YH-Torula Yeast (Candida utilis), produkowany przez Kohjin, Japonia.

Stosunek wagowo-wagowy (a):(b);(c) mieści się w zakresie od 100:1:100 do 1:10:10, a korzystnie od 10:1:10 do 1:1:1.

Wykazano również, że zarówno efekt synergistyczny jak i pobieranie przez tkanki są jeszcze bardziej zwiększone jeśli kompozycja zawiera:

(d) co najmniej jeden z prekursorów biosyntezy glutationu, wybrany z grupy zawierającej kwas glutaminowy, glicynę cysteinę i magnez.

Optymalny wynik uzyskuje się wtedy kiedy wszystkie wyżej wspomniane prekursory są obecne w kompozycji.

W Korzystny stosunek (a):(d) wynosi od 1:1 do 1:0,5.

Składniki stanowiące kompozycję skojarzoną według wynalazku dają niespodziewany i zaskakujący synergistyczny efekt w ochronie organizmu przed I uszkodzeniami toksycznymi zarówno pochodzenia endogennego, takimi jak uszkodzenia metaboliczne spowodowane starzeniem, jak i pochodzenia egzogennego, takimi jak uszkodzenia spowodowane przez zanieczyszczenia środowiska lub przez inne czynniki uszkadzające. W szczególności, nowa kompozycja może być użyteczna w profilaktyce i leczeniu tych nieprawidłowości, które występują w związku ze starzeniem się, czy to

PL 213 130 B1 pochodzenia mózgowo-nerwowego czy też sercowo-naczyniowego, albo w sytuacjach zagrożenia miąższu narządów takich jak na przykład wątroba, które w wyniku ich działania metabolicznego i odtruwającego są bardziej narażone na uszkodzenia indukowane przez zewnętrzne czynniki toksyczne lub toksyczne metabolity.

Skuteczność nowej kompozycji polega zarówno na wyżej wspomnianym efekcie synergistycznym jak i na podwyższonych w aktywnych tkankach stężeniach jej składników, a szczególnie glutationu, w wyniku zwiększonego pobierania.

Kompozycja według wynalazku może być stosowana zarówno jako suplement diety lub dodatek do żywności o działaniu głównie profilaktycznym, jak i jako lek do leczenia stanów chorobowych. Efekty metaboliczne wywierane zarówno przez karnityny jak i glutation albo drożdże zawierające glutation i przez aminokwasy obecne w kompozycji są dobrze znane i niedobór takich składników w organizmie może powodować choroby nawet poważnej natury. Nie było jednak do przewidzenia, że ich skojarzenie mogłoby znacznie zwiększyć efekty i sprzyjać procesom pobierania, zwiększając w ten sposób ich stężenie w tkankach. W szczególności, z zastosowaniem tej kompozycji można leczyć różne postaci dolegliwości wątroby i mózgu, nieprawidłowości miażdżycowe i zatrucie spowodowane metalami ciężkimi, czynnikami chemoterapeutycznymi lub innymi lekami.

Zaskakujący efekt synergistyczny jaki daje skojarzenie „karnityn” i glutationu w obecności drożdży i aminokwasowych prekursorów glutationu oraz ich zwiększone pobieranie, wykazano w wielu testach farmakologicznych (spośród których kilka opisano niżej) wybranych ze względu na ich zdolność do dostarczenia wysoce prognostycznych wskazań w stosunku do praktycznego zastosowania tej kompozycji zarówno na polu profilaktyczno/żywieniowym jak i ściśle leczniczym.

Test toksykologiczny

Przed różnymi testami farmakologicznymi wykonano testy limitów tolerancji nowej kompozycji na zwierzętach.

Te testy toksyczności przeprowadzano zarówno na szczurach jak i myszach, podając różne kompozycje skojarzone w pojedynczej wysokiej dawce lub podając tym samym zwierzętom w sposób ciągły przez co najmniej sześćdziesiąt dni. W ten sposób obserwowano, że można podać doustnie kompozycję skojarzoną aż do 1 g/kg propionylo L-karnityny i acetylo L-karnityny razem z 500 mg/kg glutationu lub 2 g/kg drożdży zawierających 10% glutationu i również te same produkty razem z kwasem glutaminowym (100 mg/kg), glicyną (100 mg/kg), cysteiną (100 mg/kg) i magnezem 10 mg/kg bez pojawienia się jakichkolwiek sygnałów nietolerancji lub toksyczności. Również dobrze tolerowane jest przedłużone podawanie przez 60 dni 0,5 g/kg propionylo l-karnityny lub acetylo L-karnityny razem z 100 mg/kg glutationu lub z 1 g/kg ekstraktu drożdży zawierającego 10% glutationu również razem z kwasem glutaminowym (50 mg/kg), glicyną (50 mg/kg) i magnezem (5 mg/kg).

Po tych testach, badanie próbek krwi nie wykazało żadnych nieprawidłowości u badanych zwierząt. Również w czasie sekcji wykonane testy histologiczne głównych narządów nie wykryły żadnych zmian natury patologicznej w porównaniu ze zwierzętami kontrolnymi.

Testy farmakologiczne

Aby ocenić antytoksyczne i zapobiegające starzeniu efekty ochronne nowej kompozycji wobec wątroby, wybrano różne testy spośród tych, które nie tylko lepiej pasowały dla wykazania efektów farmakologicznych, ale były również wiarygodnie predyktywne dla celów ich praktycznego zastosowania zarówno jako kompozycji żywnościowej jak i leków na polu profilaktyki i leczenia chorób wątroby pochodzenia toksycznego lub metabolicznego i chorób spowodowanych starzeniem.

Test toksyczności spowodowanej acetaminofenem (paracetamolem)

Różne grupy samców myszy dostawały doustne dawki 600 mg/kg acetaminofenu, co jest dawką wystarczającą do spowodowania śmierci w ciągu 24 godzin u 50% tak traktowanych zwierząt.

W tym samym czasie, w którym podawano acetaminofen, jednej grupie zwierząt (grupie G) podawano glutation (G) a drugiej grupie (grupie YG) podawano drożdże zawierające 10% glutationu (YG); trzeciej grupie (grupie PC) podawano propionylo L-karnitynę (PC); czwartej grupie (grupie AA) podawano

PL 213 130 B1 kompozycję skojarzoną kwasu glutaminowego, cysteiny, glicyny i magnezu (AA); piątej grupie (grupie CC) podano pierwszą kompozycję skojarzoną według wynalazku, nazwaną „kompletną kompozycją skojarzoną” (CC), zawierającą PC+G+AA, podczas gdy szóstej grupie (grupie CYC) podano drugą kompozycję skojarzoną według wynalazku, nazwaną „kompletną skojarzoną kompozycją drożdżową) (CYC), zawierającą PC+YG+AA.

We wszystkich grupach obserwowano śmiertelność po 24 godzinach po podaniu. Wyniki testu podano w tabeli 1.

Wyniki tych testów wskazują, że podczas gdy częściowa ochrona przed śmiertelnością spowodowaną acetaminofenem osiągana jest po podaniu glutationu, to nie obserwuje się takiej ochrony po podaniu propionylo L-karnityny lub kombinacji aminokwasów. Drożdże zawierające glutation wykazują wyższy stopień ochronnej aktywności niż sam glutation. Kiedy podawana jest kompletna skojarzona kompozycja drożdżową, CYC, pojawia się całkowita ochrona, pokazując w ten sposób ewidentny synergizm pomiędzy glutationem, propionylo L-karnityną i innymi składnikami kompozycji skojarzonej.

Te efekty synergistyczne występują nawet wyraźniej kiedy myszom podaje się dawkę 900 mg/kg acetaminofenu, która powoduje 100% śmiertelność zwierząt. W tym wypadku, jedynie podanie kompletnej skojarzonej kompozycji drożdżowej CYC, chroni przed śmiercią ponad 50% potraktowanych zwierząt (patrz tabela 2).

Ochrona przed acetaminofenem w dawce 900 mg/kg uzyskana przez nową kompozycję była nawet wyraźniejsza, kiedy zwierzętom podawano przez 7 kolejnych dni przed podaniem acetominofenu różne składniki tej kompozycji skojarzonej (patrz tabela 3).

Te wyniki są prawdopodobnie związane z podwyższonym stężeniem glutationu i innych składników, spowodowanym zwiększonym poborem przez tkanki, związanym z obecnością drożdży jak również ze zwiększoną syntezą samego glutationu, spowodowaną obecnością większej ilości jego prekursorów.

T a b e l a 1

Zapobieganie	śmiertelności wywołanej (600 mg/kg%)	acetaminofen
Podawanie/grupy	zwierząt mg/kg	Śmiertelność
C	---	6/10
PC	100	6/10
G	50	4/10
YG	500	3/10
AA	130	5/10
CC	280	2/10
CYC	780	0/10

C = Kontrole

PC = Propionylo L-karnityna

G = Glutation

YG = Drożdże zawierające 10% glutationu

AA = Skojarzona kompozycja aminokwasów i magnezu (kwas glutaminowy 30 mg, cysteina 25 mg, glicyna 50 mg + magnez 5 mg)

CC = Kompletna kompozycja skojarzona=(PC+G+AA)

CYC = Kompletna skojarzona kompozycja drożdżową=(PC+YG+AA)

T a b e l a 2

Zapobieganie śmiertelności wywołanej acetaminofenem (900 mg/kg%)

Podawanie/grupy zwierząt	mg/kg	Śmiertelność
C	---	10/10
PC	100	10/10
G	50	7/10
YG	500	6/10

PL 213 130 B1

AA	130	9/10
CC	280	5/10
CYC	780 T a b e l a 3	3/10
Zapobieganie śmiertelności wywołanej acetaminofenem (900 mg/kg%) po wydłużonym wcześniejszym podawaniu kompozycji lub jej składników przez 7 kolejnych dni.
Podawanie	mg/kg	Śmiertelność
C		10/10
PC	100	9/10
G	50	5/10
YG	500	3/10
CC	130	9/10
AA	280	1/10
CYC	780	0/10

Test zatrucia tetrachlorkiem węgla (CCl4) wyizolowanych komórek wątroby szczura

Oprócz zatrucia acetaminofenem, ochronne i synergistyczne działanie wywierane przez różne składniki ™ kompozycji według wynalazku, jest również wykrywane na poziomie wątroby w stosunku do zatrucia CCl4. Komórki używane w tych testach były wyizolowanymi komórkami wątroby szczura po perfuzji kolagenazą zgodnie z metodą opisaną przez Seglen'a (Seglen F.O., Method Cell. Biol. Chem.

64:4747, 1989). Zbierano około 4-6 x 10⁸ żywych komórek wątroby, obliczając przez wyłączenie nieżywotnych komórek przy użyciu błękitu trypanu. W ten sposób wyizolowane komórki zawieszano ₂ w 25 cm² plastikowych pojemnikach w obecności antybiotyków i 10% inaktywowanej płodowej surowi-1 cy cielęcej. Do tak otrzymanej zawiesiny komórek dodawano CCl4 (10 mmol. L^-1), glutation (GSH 20 -1 -1 mg. L^-1), propionylo L-karnitynę (100 mg. L^-1), lub glutation w skojarzeniu z propionylo L-karnityną. Po 4 godzinach inkubacji oceniano procent martwych komórek na podstawie uwalniania dehydrogenazy mleczanowej, jak opisali Casini i wsp. (Casini i wsp., J.Biol.Chem., 257:6721,1982). Sprawdzenie ochronnego efektu przeciw zatruciu CCl4 wywieranego przez glutation, propionylo L-karnitynę i ich zastosowanie w skojarzeniu przeprowadzano poprzez badanie supernatantu z hodowli na zawartość aminotransferazy alaniny (Ala AT) i aminotransferazy asparaginy (Asp AT) (Automatyczny system testów biochemicznych Beckman 700-Encore 2).

Badanie cytologiczne komórek wątroby przeprowadzono zarówno pod mikroskopem świetlnym jak i elektronowym po utrwaleniu w 3% formalinie i parafinie dla mikroskopii świetlnej oraz w 3% glutaraldehydzie i 1% tetratlenku osmu dla mikroskopii elektronowej.

Wyniki tych analiz (patrz tabele 4, 5 i 6) pokazują, że zarówno glutation jak i propionylo L-karnityna są zdolne do redukcji toksycznych działań tetrachlorku węgla.

Niespodziewanie, lepszy efekt był otrzymywany dla kompozycji skojarzonej glutationu z PLC.

W tym wypadku, procent martwych komórek był zmniejszony praktycznie do zera. Wzrost stężeń enzymów wskazujących funkcjonalne uszkodzenia metaboliczne (Ala AT - Asp AT) był również nieoczekiwanie znacznie zmniejszany przez kompozycję skojarzonej glutationu i propionylo L-karnityny. Potwierdzenia intensywnego synergistycznego działania glutationu i propionylo L-karnityny dostarczyły również badania histologiczne, które, w mikroskopie świetlnym, ujawniły praktycznie całkowity zanik komórek nekrotycznych, a w mikroskopie elektronowym, pokazały zachowanie struktur wewnątrzkomórkowych, a w szczególności struktur mitochondriów i licznych rybosomów.

T a b e l a 4

Ochrona w zatrutych CCl4 hodowlach komórkowych wątroby

Traktowanie % komórek martwych

CCL4 85 ± 4

Glutation 55 ± 5

Propionylo L-karnityna 70 ± 7

Glutation + Propionylo L-karnityna 5 ± 3

PL 213 130 B1

T a b e l a 5

Ochrona w hodowlach tkankowych komórek wątroby zatrutych CCl4. Stężenia aminotransferazy alaniny (Ala AT nmol. min^-1L^-1 i aminotransferazy asparaginy (Asp AT nmol. min^-1L^-1) w supernatancie po 4 godzinach

Traktowanie	Ala AT	Asp AT
CCL4	26,5 ± 3,1	9,08 ± 0,7
Glutation	19,7 ± 2,5	7,5 ± 5,4
Propionylo L-karnityna	22,4 ± 2,8	8,9 ± 0,9
Glutation + Propionylo L-karnityna	7,7 ± 1,9	3,4 ± 2,1

Testy zatrucia wątroby spowodowane tetrachlorkiem węgla

Innym wskaźnikiem toksyczności tetrachlorku węgla w wątrobie jest wzrost stężenia wątrobowych triglicerydów. W tym teście również wykazano ochronną aktywność glutationu, propionylo L-karnityny, aminokwasów i drożdży, zarówno osobno jak i w kompozycji skojarzonej według wynalazku.

Zatrucie CCl4 wywoływano poprzez podanie szczurom na czczo dootrzewnowo zastrzyku 1 ml. kg^-1zawiesiny 20% CCl4 w oliwie. Przed zatruciem CCl4 szczurom podawano przez trzy kolejne dni glutation (G=50 mg/kg) lub propionylo L-karnitynę (PC=100 mg/kg) lub drożdże zawierające 10% glutation (YG=500 mg/kg) lub mieszankę aminokwasów (AA=kwas glutaminowy 50 mg, cysteina 25 mg, glicyna 50 mg, magnez 5 mg) lub kompletną kompozycję skojarzoną CC (CC=PC+G+AA) albo kompletną skojarzoną kompozycję drożdżową CYC (CYC=PC+YG+AA). Po podaniu CCl4, wątroby wycinano ze zdekapitowanych zwierząt i używano do pomiaru stężenia triglicerydów zgodnie z metodą opisaną przez Donabedian (Donabedian R.K., Clin. Chem., 20:632, 1974). Wyniki tych testów również wykazały znaczny synergizm pomiędzy glutationem i propionylo L-karnityną w ochronie wątroby przed zatruciem CCl4.

Jeszcze bardziej wyraźne było ochronne działanie kompozycji skojarzonej propionylo L-karnityny z drożdżami i kompleksem aminokwasów. W tym wypadku infiltracja wątroby triglicerydami właściwie praktycznie nie istniała, pokazując w ten sposób silny synergizm osiągany przez kompozycję według wynalazku (patrz tabela 6).

T a b e l a 6

Testy na wzrost triglicerydów wątroby wywoływany przez CCl4

CCL4 (ml. kg^-1)	Traktowanie	Tróglicerydy (mg. g^-1)
0	---	5,9 ± 0,4
1	---	26,9 ± 1,1
1	PC	20,2 ± 1,9
1	G	18,7 ± 2,1
1	YG	16,5 ± 1,2
1	AA	20,4 ± 2,1
1	CC	12,5 ± 1,4
1	CYC	9,9 ± 0,6

Ochrona przed doświadczalną hipertriglicerydemią u szczurów

Metoda używana w tym teście była opisana przez Carlsona (Carlson L.A.V., J. Atherosc. Res., 8:667, 1968) i zmodyfikowana jak opisano w Atherosclerosis, 16:349, 1972. Zgodnie z tym testem podanie doustne 3 g/kg fruktozy wywołuje u szczurów znaczny wzrost triglicerydów zarówno w wątrobie jak i surowicy pięć godzin po podaniu.

Celem tego testu była ocena czy podanie składników kompozycji według wynalazku, osobno lub razem, było w stanie doprowadzić do obniżenia tej nieprawidłowości triglicerydów, którą uważa się za podkreślenie poważnych dysfunkcji wątroby jak i miażdżycy naczyń.

W tym celu różne grupy szczurów traktowano glutationem (G=50 mg/kg), propionylo L-karnityną (PC=50 mg/kg) lub drożdżami zawierającymi 10% glutation (YG=500 mg/kg) lub mieszaniną aminokwasów (AA=kwas glutaminowy 50 mg, cysteina 25 mg, glicyna 100 mg, magnez 5 mg) lub skojarzoną

PL 213 130 B1 kompozycją tych różnych składników (w tych samych dawkach) bez drożdży (CC) lub z drożdżami (CYC). Traktowanie przeprowadzono doustnie na trzy dni przed podaniem fruktozy i przez trzy godziny po jej podaniu. Pięć godzin po podaniu fruktozy wszystkie zwierzęta uśmiercano i próbki krwi stosowano do badania triglicerydów zgodnie z metodą opisaną przez Donabedian (Donabedian R.K., Clin. Chem., 20:632, 1974). Wyniki tych testów wskazują, że zarówno glutation jak i propionylo L- karnityna mają mały wpływ na poziom triglicerydów surowicy indukowany przez podanie fruktozy, ale duży wpływ otrzymuje się jeśli te składniki podawane są w kompozycji skojarzonej, szczególnie w obecności drożdży. Znaczne obniżenie triglicerydów obserwowano rzeczywiście we krwi szczurów, którym podano kompletną kompozycję skojarzoną razem z drożdżami i aminokwasami, pokazując w ten sposób silny synergizm pomiędzy różnymi składnikami kompozycji skojarzonej (patrz tabela 7).

T a b e l a 7

Testy na hipertriglicerydemię (mg/100 ml) wywoływaną u szczurów

Kontrole	190 ± 6,7
G	180 ± 5,9
YG	175 ± 6,9
PC	185 ± 7,1
YG + PC	155 ± 8,1
AA	185 ± 6,5
CC	14 0 ± 4,3
CYC	133 ± 6,3

Testy doświadczalnej miażdżycy naczyń

Metoda użyta w tym teście była opisana przez Malinowa (Malinow M.R., Atherosclerosis, 48:105, 1983). Zgodnie z tym testem, podawanie przez 6 kolejnych tygodni samcom szczurów Wistar miżdżycogennej diety składającej się z 10% oleju bawełnianego, 24% kazeiny, 1% cholesterolu, 60% cukru i witaminy D2 200 mUST/g diety, powoduje głębokie zmiany miażdżycowe naczyń. Są one oceniane na poziomie aorty poprzez pomiar grubości aorty brzusznej przy użyciu metody morfometrycznej i intensywności barwienia wywoływanego Sudanem IV oraz oceny ich stopnia ciężkości systemem punktacji liczbowej od 1 do 5.

Ocena morfometryczna i intensywności barwienia Sudanem IV ponownie ujawniły, również w tych testach, znaczny synergizm pomiędzy glutationem (25 mg/kg) i propionylo L-karnityną (100 mg/kg), ale działanie ochronne było nawet bardziej widoczne kiedy stosowano kompletną skojarzoną kompozycję drożdżową. W grupie szczurów traktowanych CYC, występowanie powstawania miażdżycowych uszkodzeń naczyń właściwie było kompletnie zahamowane, pokazując również w tym wypadku synergistyczną aktywność różnych składników kompozycji skojarzonej według wynalazku.

Aktywność przeciw nefropatii indukowanej glicerolem

Metoda używana w tym teście była opisana przez Young (Young J.H.K., Meth. Find. Exp. Clin. Pharmacol., 13:23, 1991). Zgodnie z tym testem, wstrzyknięcie glicerolu powoduje niewydolność nerek i nefropatię u szczurów. Metoda ta używana była do oceny ochronnego działania kompozycji skojarzonej według wynalazku na nerki. Użyto samce szczurów Sprague-Dawley, którym po pozbawieniu ich przez 24 godziny pitnej wody, wstrzyknięto 10 cm³/kg 50% (wag./obj.) roztworu glicerolu w wodzie. Po wstrzyknięciu, tak potraktowanym zwierzętom pozwolono pić. Po 24 godzinach, pobierano próbki krwi zwierząt i po odwirowaniu, badano stężenie kreatyniny w osoczu (zgodnie z metodą opisaną przez Taussky H.H., Clin. Chem. Acta, 1:210, 1956) i mocznika za pomocą reakcji z diacetylomonooksymem (Henry R.Y., Cannon D.C. Eds., Clinical Chemistry, 2 Ed. Harper & Rowe, London 1974). Propionylo L-karnityna (100 mg/kg), glutation (50 mg/kg) lub drożdże zawierające glutation (500 mg/kg), aminokwasy (25 mg/kg każdego), drożdże (500 mg/kg) i ich skojarzenie w tych samych dawkach podawano codziennie przez trzy dni poprzedzające test. Wyniki tego testu (patrz tabela 8) wskazują, że zarówno propionylo L-karnityna jak i glutation mają umiarkowane działanie ochronne przed uszkodzeniami nerek spowodowanymi glicerolem, ale uzyskuje się większą wydajność poprzez zastosowanie ich w skojarzeniu, szczególnie w obecności drożdży. W obecności drożdży i dodatkowo aminokwasów, uzyskuje się praktycznie całkowitą ochronę, pokazując w ten sposób skuteczne wzmocnienie aktywności otrzymanej z zastosowaniem kompozycji skojarzonej, i nie tylko sy10

PL 213 130 B1 nergizm, który istnieje pomiędzy propionylo L-karnityną i glutationem, ale również dogodne działanie wywierane przez drożdże i aminokwasy na tę kompozycję skojarzoną.

T a b e l a 8

Działanie ochronne przed spowodowanym glicerolem uszkodzeniem nerek u szczurów

Traktowanie	Kreatynina (mg/ml)	Mocznik (mg/100 ml)
Kontrole	56,8 ± 7,7	22,2 ± 1,9
Glicerol	360,4 ± 55,2	116,7 ± 19,4
Propionylo L-karnityna	280,5 ± 22, 5	88,5 ± 11,5
Glutation	240,8 ± 20,9	79,9 ± 9,9
Propionylo L-karnityna + Glutation	185,5 ± 19,2	60,2 ± 6,5
Propionylo L-karnityna + Drożdże (10% glutation)	160,8 ± 16, 8	52, 5 ± 6,1
Aminokwasy	320,4 ± 50, 6	105,5 ± 14,9
Propionylo L-karnityna + Glutation + Amino kwasy + Drożdże	95,4 ± 9,2	38,4 ± 4,1

Wpływy na stężenie glutationu (GSH) u starych szczurów

Ponieważ wiadomo, że enzymatyczna i metaboliczna aktywność glutationu jest zmniejszona u starych szczurów i zmniejszenie to uważane jest za jedną z przyczyn starzenia się, oceniano wpływ podawania nowej kompozycji lub jej poszczególnych składników na stężenia glutationu w osoczu i wątrobie młodych i starych szczurów.

Do tego testu użyto dwie różne grupy szczurów: młode szczury (2-3 miesięczne) i stare szczury (8-10 miesięczne). Stężenie glutationu (GSH) obliczano w obu grupach zgodnie z techniką opisaną przez Moron (Moron M.S., Biochem. Biophys. Acta, 582:67, 1979) zarówno przed rozpoczęciem testu jak i po 15 dniach codziennego podawania propionylo L-karnityny (100 mg/kg), glutationu (50 mg/kg), propionylo L-karnityny z glutationem lub drożdżami zawierającymi 10% glutation (500 mg/kg), aminokwasami (500 mg/kg), lub kompozycji skojarzonej według wynalazku.

Po 15 dniach traktowania, badanie stężenia glutationu obecnego zarówno w wątrobie (patrz tabela 9) jak i osoczu (patrz tabela 10) pokazało wzajemne wzmacnianie propionylo L-karnityny i glutationu w przywracaniu normalnych stężeń glutationu u starych szczurów. Jednakże synergizm był nawet wyraźniejszy w obecności drożdży i aminokwasów, kiedy zmieszano je w kompozycję według wynalazku.

T a b e l a 9

Traktowanie	Wpływy na stężenie glutationu (ng GSH/mg białka) w wątrobach młodych i starych szczurów
Młode szczury czas	Stare szczury czas
0	15 dni	0	15 dni
Kontrole	11,5 ± 0,88	12,75 ± 0,91	8,70 ± 0,72	8,10 ± 0,63
Propionylo L-karnityna	11,25 ± 0,41	12,90 ± 0,71	7,9 ± 0,51	9,3 ± 0,46
Glutation	12,1 ± 0,36	12,85 ± 0,66	8,82 ± 0,69	9,90 ± 0,76
Proionylo L-karnityna + Glutation	12,70 ± 0,64	13,5 ± 0,55	8,10 ± 0,71	10,50 ± 0,40
Propionylo L-karnityna + Drożdże (10% Glutation)	11,73 ± 0,49	13,75 ± 0,62	8,75 ± 0,41	10,80 ± 0,71
Aminokwasy	11,25 ± 0,68	12,68 ± 0,41	8,90 ± 0,57	9,15 ± 0,68
Propionylo L-karnityna + Glutation + Aminokwasy +	11,35 ± 0,77	12,45 ± 0,59	8,25 ± 0,61	11,95 ± 0,85

drożdże

PL 213 130 B1

T a b e l a 10

Wpływy na stężenie glutationu (GSH) (mg GSH/dl) w osoczu u młodych i starych szczurów

Młode szczury Stare szczury

Podawanie czas czas

	0		15 dni		0		15 dni
Kontrole	2,12 ±	0,59	2,25 ± 0,39	1	,39 ±	0,49	1,35 ± 0,55
Propionylo L-karnityna	2,22 ±	0,29	2,39 ± 0,50	1	,40 ±	0,22	1,75 ± 0,20
Glutation	2,09 ±	0,31	2,35 ± 0,35	1	,26 ±	0,31	1,80 ± 0,41
Proionylo L-karnityna + Glutation	2,14 ±	0,21	2,40 ± 0,40	1	,22 ±	0,21	1,95 ± 0,35
Propionylo L-karni- tyna + Drożdże (10% Glutation)	2,20 ±	0,19	2,48 ± 0,33	1	,35 ±	0,33	2,05 ± 0,29
Aminokwasy	2,27 ±	0,27	2,42 ± 0,29	1	,33 ±	0,21	1,40 ± 0,34
Drożdże	2,10 ±	0,16	2,36 ± 0,26	1	,25 ±	0,16	2,25 ± 0,39

Wpływy na pobór i stężenie glutationu we krwi zwierząt z niedoborem glutationu

Celem tego testu było pokazanie, że kompozycja według wynalazku sprzyja pobieraniu glutationu w wyniku obecności drożdży.

W tym celu, zawartość glutationu we krwi grupy samców szczurów Sprague-Dawley obniżono poprzez podawanie dietylomaleinianu (DEM) zmniejszającego poziom glutationu, zgodnie z techniką opisaną przez Plummer (Plummer J., Chemical depletion of glutatione „in vivo”, Methods in Enzymo₃ logy, 77:50, 1981). DEM podawano dootrzewnowo głodzonym szczurom w dawce 1 cm³/kg. Pół godziny po wstrzyknięciu dietylomaleinianu, podawano doustnie sam glutation (50 mg/kg), lub drożdże zawierające 10% glutation (500 mg/kg), lub 50 mg/kg glutationu razem z 500 mg drożdży niezawierających glutationu. Inna grupa szczurów dostawała aminokwasowe prekursory glutationu (kwas glutaminowy 50 mg/kg, glicynę 50 mg/kg, cysteinę 50 mg/kg, magnez 10 mg/kg) lub kompletną kompozycję skojarzoną według wynalazku w tych samych dawkach jak opisano wyżej.

Po czterech godzinach pobierano próbki krwi od tak traktowanych zwierząt i mierzono stężenie glutationu w osoczu. Wyniki tych testów (patrz tabela 11) wskazują, że pobieranie glutationu znacznie wzrasta w obecności drożdży, niezależnie od tego czy drożdże zawierają glutation, czy też po prostu stosowane są w skojarzeniu z glutationem.

Obecność drożdży powodowała znaczny wzrost stężenia glutationu w osoczu u szczurów, u których stężenie to było obniżone poprzez wstrzyknięcie DEM.

Ten efekt był nawet bardziej widoczny, kiedy zwierzętom pozbawionym glutationu podawano kompletną kompozycję skojarzoną według wynalazku.

T a b e l a 11

Wpływy na stężenie glutationu (GSH) w osoczu(GSH mg/dl) u szczurów z niedoborem glutationu poprzez wstrzyknięcie dietylomaleinianu (DEM). Wartości mierzone 4 godziny po wstrzyknięciu.

Glutation (mg GSH/dl)

Kontrole	2,70 ± 0,41
DEM	0,61 ± 0,74
Propionylo L-karnityna	0,70 ± 0,54
Glutation	0,95 ± 0,88
Drożdże(10% glutation)	1,65 ± 0,90
Glutation + drożdże	1,85 ± 0,80
Aminokwasy	0,85 ± 0,70
Glutation + aminokwasy	1,10 ± 0,66
Propionylo L-karnityna + Glutation +Aminokwasy + Drożdże	2,15 ± 0,1

PL 213 130 B1

Niektóre nieograniczające przykłady kompozycji według wynalazku podano niżej.
1) Mieszanina karnityn	200 mg
(L-karnityna 50 mg,
acetylo L-karnityna 50 mg,
propionylo L-karnityna 50 mg,
izowalerylo L-karnityna 50 mg)
Drożdże (zawierające 7-10% glutationu)	200 mg
Kwas glutaminowy	50 mg
L-cysteina	50 mg
Glicyna	50 mg
Cytrynian magnezu	10 mg
2) Mieszanina karnityn	200 mg
(L-karnityna 50mg,
acetylo L-karnityna 50 mg,
propionylo L-karnityna 50 mg,
izowalerylo L-karnityna 50 mg)
Glutation (GHS)	50 mg
Kwas glutaminowy	50 mg
L-cysteina	50 mg
Glicyna	50 mg
Cytrynian magnezu	10 mg
Drożdże (Saccharomyces cerevisiae)	200 mg
3) Propionylo L-karnityna	200 mg
Drożdże (zawierające 7-10% glutationu)	200 mg
Kwas glutaminowy	50 mg
L-cysteina	50 mg
Glicyna	50 mg
Cytrynian magnezu	10 mg
4) Propionylo L-karnityna 200 mg
Glutation(GSH) 50 mg
Kwas glutaminowy 50 mg
L-cysteina 50 mg
Glicyna 50 mg
Cytrynian magnezu 10 mg
Drożdże (Saccharomyces cerevisiae)	200 mg
5) Propionylo L-karnityna	200 mg
Glutation	100 mg
Kwas glutaminowy	50 mg
L-cysteina	50 mg
Glicyna	50 mg
Cytrynian magnezu10 mg
Drożdże (Saccharomyces cerevisiae)	200 mg
6) Propionylo L-karnityna	200 mg
Drożdże (zawierające 7-10% glutationu)	300 mg
Kwas glutaminowy	50 mg
L-cysteina	50 mg
Glicyna	50 mg
Cytrynian magnezu	10 mg
7) Propionylo L-karnityna	200 mg
Glutation(GSH)	100 mg

PL 213 130 B1

Kwas glutaminowy

L-cysteina

Glicyna

Cytrynian magnezu β-karoten α-karoten

Koenzym Q10 selenometionina

Drożdże (Saccharomyces cerevisiae) mg 50 mg 50 mg 10 mg mg 5 mg mg 20 μg

200 mg

8) Propionylo L-karnityna

Drożdże (zawierające 7-10% glutationu) Kwas glutaminowy

L-cysteina

Glicyna

Cytrynian magnezu β-karoten α-karoten

Koenzym Q10

Wit. PP

Wit. B6

Wit. B12 selenometionina

200 mg 300 mg mg 50 mg 50 mg 10 mg mg 5 mg mg 25 mg 25mg

250 μq 20 μg

Przez farmakologicznie akceptowalną sól L-karnityny lub alkanoilo L-karnityny rozumie się jakąkolwiek sól tych aktywnych składników z kwasem, który nie daje niepożądanych lub toksycznych skutków ubocznych. Takie kwasy są dobrze znane ekspertom farmacji.

Nieograniczającymi przykładami stosownych soli są:

chlorek; bromek; jodek; asparaginian; monoester kwasu asparaginowego, monoester kwasu cytrynowego, cytrynian; winian; fosforan; monoester kwasu fosforowego, fumaran; monoester kwasu fumarowego; glicerofosforan; glukozo fosforan; mleczan; maleinian; monoester kwasu maleinowego; Worotan; monoester kwasu szczawiowego; siarczan; monoester kwasu siarkowego, trichlorooctan; trifluorooctan i metanosulfonian.

Lista soli akceptowalnych farmakologicznie zatwierdzonych przez FDA jest podana w Int. J. of Pharm. 33, (1986), 201-217; ta ostatnia publikacja jest tu włączona przez odesłanie.

Kompozycja według wynalazku może również zawierać witaminy, koenzymy, substancje mineralne i antyoksydanty.

Odpowiednie zaróbki potrzebne do przygotowania kompozycji z uwzględnieniem specyficznej drogi podawania, będą oczywiste dla ekspertów z dziedziny farmacji i przemysłu spożywczego.

Claims

1. Kompozycja skojarzona, znamienna tym, że zawiera:

(a) propionylo L-karnitynę lub jej farmakologicznie akceptowalną sól; i (b) glutation lub drożdże zawierające glutation;

2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że składnik (a) zawiera ponadto „karnitynę” wybraną z grupy zawierającej L-karnitynę, acetylo L-karnitynę, walerylo L-karnitynę, izowalerylo L-karnitynę lub ich farmakologicznie akceptowalne sole lub ich mieszaniny.

3. Kompozycja według zastrz. 2, znamienna tym, że składnik (a) zawiera mieszaninę

L-karnityny, acetylo L-karnityny i propionylo L-karnityny lub ich farmakologicznie akceptowalnych soli.

4. Kompozycja według zastrz. 1-3, znamienna tym, że drożdże zawierające glutation zawierają od 7 do 10% wagowych glutationu.

PL 213 130 B1

5. Kompozycja według zastrz. 1-4, znamienna tym, że stosunek wagowy (a):(b):(c) wynosi od 10:1:10 do 1:1:1.

6. Kompozycja według zastrz. 1-5, znamienna tym, że zawiera ponadto:

7. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że stosunek wagowy (a):(d) wynosi od 1:1 do 1:0,5.

8. Kompozycja według zastrz. 1 albo 6, znamienna tym, że zawiera:

(a) propionylo L-karnitynę lub jej farmakologicznie akceptowalną sól;

(b) glutation;

(d) kwas glutaminowy, glicynę, cysteinę i magnez.

9. Kompozycja według zastrz. 1, 4-6, znamienna tym, że zawiera:

(a) propionylo L-karnitynę lub jej farmakologicznie akceptowalną sól;

(b) drożdże zawierające 7-10% wagowych glutationu;

(c) kwas glutaminowy, glicynę, cysteinę i magnez.

10. Kompozycja według zastrz. 1, 3-6, znamienna tym, że zawiera:

(b) glutation;

(d) kwas glutaminowy, glicynę, cysteinę i magnez.

11. Kompozycja według zastrz. 1, 3-6, znamienna tym, że zawiera:

(b) drożdże zawierające 7-10% wagowych glutationu;

(c) kwas glutaminowy, glicynę, cysteinę i magnez.

12. Kompozycja według jednego z zastrz. 1-11, znamienna tym, że farmakologicznie akceptowalna sól L-karnityny lub alkanoilo L-karnityny jest wybrana z grupy zawierającej: chlorek; bromek;

jodek; asparaginian; monoester kwasu asparaginowego, monoester kwasu cytrunowego, cytrynian; winian; fosforan; monoester kwasu fosforowego, fumaran; monoester kwasu fumarowego; glicerofosforan; glukozo fosforan; mleczan; maleinian; monoester kwasu maleinowego; orotan; monoester kwasu szczawiowego; siarczan; monoester kwasu siarkowego, trichlorooctan; trifluorooctan i metanosulfonian.

13. Kompozycja według jednego z zastrz. 1-12, znamienna tym, że zawiera ponadto witaminy, koenzymy, substancje mineralne i antyoksydanty.

14. Kompozycja według jednego z zastrz. 1-13, znamienna tym, że stosuje się ją doustnie w formie suplementu diety.

15. Kompozycja według jednego z zastrz. 1-14, znamienna tym, że stosuje się ją doustnie, pozajelitowo, doodbytniczo lub przez skórnie w formie leku.