PL214648B1 - Zastosowanie analogów saponiny OSW-1 o uproszczonej budowie wykazujacych dzialanie cytotoksyczne - Google Patents
Zastosowanie analogów saponiny OSW-1 o uproszczonej budowie wykazujacych dzialanie cytotoksyczneInfo
- Publication number
- PL214648B1 PL214648B1 PL387235A PL38723509A PL214648B1 PL 214648 B1 PL214648 B1 PL 214648B1 PL 387235 A PL387235 A PL 387235A PL 38723509 A PL38723509 A PL 38723509A PL 214648 B1 PL214648 B1 PL 214648B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- methoxybenzoyl
- triethylsilyl
- osw
- acetyl
- saponin
- Prior art date
Links
- MPXTYZZFIJTPPA-JOQRFCRPSA-N [(2s,3r,4s,5r)-2-[(2s,3r,4s,5s)-3-acetyloxy-2-[[(3r,8s,9r,10r,13s,14r,16r,17s)-3,17-dihydroxy-10,13-dimethyl-17-[(2s)-6-methyl-3-oxoheptan-2-yl]-1,2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16-dodecahydrocyclopenta[a]phenanthren-16-yl]oxy]-5-hydroxyoxan-4-yl]oxy-4,5-dihydro Chemical class C1=CC(OC)=CC=C1C(=O)O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2[C@H]([C@H](O[C@H]3[C@]([C@@]4(C)CC[C@H]5[C@@]6(C)CC[C@@H](O)CC6=CC[C@@H]5[C@H]4C3)(O)[C@H](C)C(=O)CCC(C)C)OC[C@@H]2O)OC(C)=O)OC[C@@H](O)[C@@H]1O MPXTYZZFIJTPPA-JOQRFCRPSA-N 0.000 title description 8
- SYXUBXTYGFJFEH-UHFFFAOYSA-N oat triterpenoid saponin Chemical compound CNC1=CC=CC=C1C(=O)OC1C(C=O)(C)CC2C3(C(O3)CC3C4(CCC5C(C)(CO)C(OC6C(C(O)C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)CO6)OC6C(C(O)C(O)C(CO)O6)O)CCC53C)C)C4(C)CC(O)C2(C)C1 SYXUBXTYGFJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- -1 saponin compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 38
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims abstract description 31
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims abstract description 28
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 3
- MPXTYZZFIJTPPA-UHFFFAOYSA-N 3beta,16beta,17alpha-trihydroxycholest-5-en-22-one 16-O-(2-O-(4-methoxybenzoyl)-beta-D-xylopyranosyl)-(1-3)-(2-O-acetyl-alpha-arabinopyranoside) Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C(=O)OC1C(OC2C(C(OC3C(C4(C)CCC5C6(C)CCC(O)CC6=CCC5C4C3)(O)C(C)C(=O)CCC(C)C)OCC2O)OC(C)=O)OCC(O)C1O MPXTYZZFIJTPPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- MAGWLGAJMLWPLZ-UHFFFAOYSA-N OSW-1 Natural products COc1ccc(cc1)C(=O)OC2C(O)C(O)COC2OC3C(O)COC(OC4CC5C6CC=C7CC(O)CCC7(C)C6CCC5(C)C4(O)OC(C)C(=O)CCC(C)C)C3OC(=O)C MAGWLGAJMLWPLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 5
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 28
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 10
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000000041 C6-C10 aryl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 abstract 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 abstract 1
- 125000001999 4-Methoxybenzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1OC([H])([H])[H])C(*)=O 0.000 description 36
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 29
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 22
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 15
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 15
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 15
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 13
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 11
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 11
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 10
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 10
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 10
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 8
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N methanol-d1 Chemical compound [2H]OC OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;methanol Chemical compound OC.ClCCl WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 7
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 5
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZEYHEAKUIGZSGI-UHFFFAOYSA-N 4-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ZEYHEAKUIGZSGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 description 4
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-N heptanoic acid Chemical compound CCCCCCC(O)=O MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 3
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 241001454523 Quillaja saponaria Species 0.000 description 2
- 235000009001 Quillaja saponaria Nutrition 0.000 description 2
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 2
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 2
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 2
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 2
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000003849 large cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 2
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 2
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Substances C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008130 triterpenoid saponins Chemical class 0.000 description 2
- YFESOSRPNPYODN-RSMWSHJLSA-N (2s,3s,4s,5r,6r)-6-[[(4s,6ar,6bs,8r,8ar,9r,10r,14br)-9-acetyloxy-8-hydroxy-4,8a-bis(hydroxymethyl)-4,6a,6b,11,11,14b-hexamethyl-10-[(z)-2-methylbut-2-enoyl]oxy-1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14,14a-tetradecahydropicen-3-yl]oxy]-4-hydroxy-3,5-bis[[(2s,3r,4s, Chemical compound O([C@@H]1[C@H](O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)OC1CC[C@]2(C)C3CC=C4[C@@]([C@@]3(CCC2[C@]1(CO)C)C)(C)C[C@@H](O)[C@@]1(CO)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](C(CC14)(C)C)OC(=O)C(\C)=C/C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O.O([C@@H]1[C@H](O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)OC1CC[C@]2(C)C3CC=C4[C@@]([C@@]3(CCC2[C@]1(CO)C)C)(C)C[C@@H](O)[C@@]1(CO)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](C(CC14)(C)C)OC(=O)C(/C)=C/C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O YFESOSRPNPYODN-RSMWSHJLSA-N 0.000 description 1
- XIIAYQZJNBULGD-UHFFFAOYSA-N (5alpha)-cholestane Natural products C1CC2CCCCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 XIIAYQZJNBULGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RLYNGYDVXRKEOO-XQHVRGAUSA-N (e)-but-2-enoic acid Chemical compound C\C=C\C(O)=O.C\C=C\C(O)=O RLYNGYDVXRKEOO-XQHVRGAUSA-N 0.000 description 1
- SCCCIUGOOQLDGW-UHFFFAOYSA-N 1,1-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1N(C(=O)N)C1CCCCC1 SCCCIUGOOQLDGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRPZMMHWLSIFAZ-UHFFFAOYSA-N 10-undecenoic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCCC=C FRPZMMHWLSIFAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AXNVHPCVMSNXNP-GKTCLTPXSA-N Aescin Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](OC(=O)C)[C@]2(CO)[C@@H](O)C[C@@]3(C)[C@@]4(C)[C@@H]([C@]5(C)[C@H]([C@](CO)(C)[C@@H](O[C@@H]6[C@@H](O[C@H]7[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O7)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]7[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O7)[C@@H](C(=O)O)O6)CC5)CC4)CC=C3[C@@H]2CC1(C)C)/C(=C/C)/C AXNVHPCVMSNXNP-GKTCLTPXSA-N 0.000 description 1
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000006162 Chenopodium quinoa Species 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123780 DNA topoisomerase I inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229940124087 DNA topoisomerase II inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000580938 Sapindus Species 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000365 Topoisomerase I Inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000000317 Topoisomerase II Inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003080 antimitotic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003699 antiulcer agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N benzyl bromide Chemical compound BrCC1=CC=CC=C1 AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005574 benzylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- KHAVLLBUVKBTBG-UHFFFAOYSA-N caproleic acid Natural products OC(=O)CCCCCCCC=C KHAVLLBUVKBTBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- LDHQCZJRKDOVOX-NSCUHMNNSA-N crotonic acid Chemical compound C\C=C\C(O)=O LDHQCZJRKDOVOX-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N dmso dimethylsulfoxide Chemical compound CS(C)=O.CS(C)=O CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000000268 heptanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229910000489 osmium tetroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012285 osmium tetroxide Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran thf Chemical compound C1CCOC1.C1CCOC1 WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- LDHQCZJRKDOVOX-UHFFFAOYSA-N trans-crotonic acid Natural products CC=CC(O)=O LDHQCZJRKDOVOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195700 triterpenoid aglycone Natural products 0.000 description 1
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 125000003774 valeryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J17/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, having an oxygen-containing hetero ring not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
- C07J17/005—Glycosides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Immunology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są analogi saponiny OSW-1 o wzorze ogólnym 1, w którym R oznacza benzyl lub podstawiony benzyl, C1-18 alkanoil. C3-18 alkenoil, benzoil lub podstawiony benzoil, jako związki cytotoksyczne, potencjalnie przydatne do wytwarzania leku do leczenia chorób nowotworowych.
Saponiny są grupą naturalnych metabolitów składających się z części cukrowej połączonej ze steroidowym lub triterpenoidowym aglikonem. Związki te wykazują szerokie spektrum aktywności biologicznej i zastosowań. W przemyśle farmaceutycznym znalazły one zastosowanie między innymi jako:
• środki wspomagające wchłanianie właściwych preparatów farmaceutycznych (np. patent US 4501734 opisuje zastosowanie triterpenoidowych saponin z Sapindus mukurossi Gaertn. jako składnika wspomagających wchłanianie antybiotyków β-laktamowych) • leki wspomagające w szczepionkach przeciwko różnym chorobom (w tym celu powszechnie stosowane są triterpenowe glikozydy wyizolowane z Quillaja saponaria np. patent US 5057540, WO 91/04052, podobne zastosowanie znalazły także saponiny Quinoa. patent WO 9603998) • środki przeciwzapalne (np. aescin, saponina z nasion Aesculas hippocastanum; patent US 5118671) • środki przeciwwrzodowe (np. Glyceyrrhiza glabra saponiny; patent US 5166139) • leki przeciwnowotworowe (np. mieszanina steroidowych i triterpenoidowych saponin wyizolowanych m.in. z Quillaja saponaria Malina, zgłoszenie patentowe US 2005/0175623 A1, saponina OSW-1 patent CN 1951394, WO 2004091484, US 2005004044).
Saponina OSW-1, 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1 >3)-2'-O-acetylo-a-L-arabinopiranozyd 3e,16ei7a-trihydroksycholest-5-en-22-onu (wzór 2) należy do rodziny glikozydów cholestanowych wyizolowanych w 1992 roku przez grupę japońskich badaczy kierowaną przez Sashidę z cebulek śniedka 0rnithogalum saundersiae rosnącego w południowo-wschodniej Afryce (S. Kubo, Y. Mimaki, M. Terao, Y. Sashida, T. Nikaido, T. Ohmoto, Phytochemistry, 31, 3969 (1992)).
W testach National Cancer Institute przeprowadzonych na linii komórkowej ludzkiej leukemii HL-60, saponina OSW-1 wykazuje aktywność cytostatyczną w stężeniach nanomolowych (IC50 = 0.25 nM) i wielokrotnie przewyższa swoją aktywnością znane cytostatyki takie, jak adriamycyna, cisplatyna czy taksol. Jednocześnie jest stosunkowo mało toksyczna w stosunku do komórek zdrowych, np. dla normalnych
PL 214 648 B1 komórek płucnych IC50 = 1500 nM (Y. Mimaki. M. Kuroda, A. Kameyama, Y. Sashida, T. Hirano, K. Oka, R. Maekawa, T. Wada, K. Sugita. J. A. Beutler, Bioorg.& Med. Chem. Lett. 7, 633 (1997), Y. Zhou, C. GraciaPrieto, D.A. Carney, R. Xu, H. Pelicano, Y. Kang, W. Yu, C. Lou, S. Kondo, J. Liu, D.M. Harris, Z. Estrov. M.J. Keating, Z. Jin, P. Huang, J. Natl. Cancer Inst. 97, 1781 (2005)). Jej aktywność w porównaniu ze stosowanymi obecnie cytostatykami przedstawiono w Tabeli 1. Tabela 2 przedstawia aktywność OSW-1 w stosunku do różnych komórek nowotworowych. Badania in vivo przeprowadzone przez Mimaki i współpracowników wykazały, że jednorazowa dawka 0,01 mg/kg tego związku przedłużyła o 59% życie myszy z leukemią P388. Skuteczność saponiny OSW-1 w badaniach in vivo przeprowadzonych na myszach wykazali również naukowcy amerykańscy w patencie WO 2004091484.
T a b e l a 1. Porównanie aktywności cytostatycznej saponiny OSW-1 i stosowanych klinicznie cytostatyków
| Nazwa związku | PGI50 (średnia z 60 linii komórek rakowych) |
| cyklofosfamid | 3,7 |
| 5-fluorouracyl | 4,7 |
| cisplatyna | 5,7 |
| adriamycyna | 6,9 |
| taksol | 7,9 |
| OSW-1 | 9,1 |
T a b e l a 2. Aktywność cytostatyczna OSW-1 i niektórych stosowanych cytostatyków do wybranych linii komórek rakowych
| Linia komórek nowotworowych | IC50 gg/ml) | |||||
| OSW-1 | mitomycyna | adriamycyna | cisplatyna | kamptotecyna | taksol | |
| CCD-19Lu | 1.5 | 2 | 2 | 10 | 2 | 2 |
| P388 | 0.00013 | 0.01 | 0.003 | 0.05 | 0.005 | 0.01 |
| P388/ADM | 0.00077 | |||||
| P388/CPT | 0.00010 | |||||
| FM3A | 0.00016 | |||||
| A-549 | 0.00068 | |||||
| Lu-65 | 0.00020 | |||||
| Lu-99 | 0.00020 | 0.01 | 0.002 | 0.001 | 0.001 | 0.002 |
| RERF-LC-AI | 0.00026 | |||||
| CCRF-CEM | 0.00016 | 0.02 | 0.01 | 0.005 | 0.005 | 0.001 |
| CCD-19Lu (human normal pulmonary cell) A-549 (human pulmonary adenocarcinoma) P388 (mouse leukemia) Lu-65 (human pulmonary large cell carcinoma) P388/ADM (adriamycin-resistant P388) Lu-99 (human pulmonary large cell carcinoma) P388/CPT (camptothecin-resistant P388) RERF-LC-AI (human pulmonary squamous cell carcinoma) FM3A (mouse mastrocarcinoma) CCRF-CEM (human leukemia) |
Profil działania saponiny OSW-1 nie pasuje do żadnego z sześciu wyróżnionych przez badaczy amerykańskich mechanizmów działania cytostatycznego (środki alkilujące, inhibitory topoizomerazy I, inhibitory topoizomerazy II, antymetabolity RNA/DNA, antymetabolity DNA, środki antymitotyczne). W 2005 roku ukazały się pierwsze dane dotyczące mechanizmu jej działania w organizmie. Ustalono, że saponina OSW-1 powoduje zniszczenie błony mitochondrialnej i cristae w komórkach rakowych, zwiększa stężenie wapnia w cytoplazmie i indukuje Ca2+-zależną apoptozę (Y. Zhou, C. Gracia-Prieto, D.A. Carney. R. Xu, H. Pelicano, Y. Kang, W. Yu. C. Lou. S. Kondo, J. Liu, D.M. Harris, Z. Estrov, M.J. Keating, Z. Jin, P.
PL 214 648 B1
Huang, J. Natl. Cancer Inst. 97, 1781 (2005), J. Zhu, L. Xiong, J. Wu, Mol. Pharmacol. 68. 1831 (2005)).
Odmienny w porównaniu do innych cytostatyków mechanizm działania saponiny OSW-1 pozwala przypuszczać, że może okazać się ona skuteczna w walce z lekoopornymi odmianami nowotworów.
Do tej pory opisano kilka alternatywnych dróg syntezy tego naturalnego produktu (patenty: CN 101029070, CN 1844138, US 6753414; inne publikacje: S. Deng, B. Yu. Y. Lou. Y. Hui. J. Org. Chem. 64, 202 (1999), C. Guo, P.L. Fuchs, Tetrahedron Lett. 39, 1099 (1998), W. Yu, Z.J. Jin. Am. Chem. Soc. 123. 3369 (2001); ibid. 124, 6576 (2002), J.W. Morzycki, A. Wojtkielewicz. Carbohydr. Res. 337, 1269 (2002). Q. Xu, X. Peg, W. Tian, Tetrahedron Lett. 44, 9375 (2003), J.X.P. Liu, Y. Pan. Z. Guo, J. Org. Chem. 73, 157 (2008), M. Tsubuki, S. Matsuo, T. Honda, Tetrahedron Lett. 49, 229 (2008)). Jednakże tylko dwie z nich nie przewidują użycia na jednym z etapów syntezy, toksycznego i drogiego reagenta - czterotlenku osmu, co wydaje się być szczególnie istotne przy ewentualnym wykorzystaniu metody w przemyśle farmaceutycznym. Jedna z nich została zaproponowana przez zespół amerykański w 2002 roku (US 6753414). W drugiej metodzie opracowanej przez nasz zespół kluczowym etapem jest otwarcie pierścienia epoksydowego za pomocą H2O2/LiOH. Szczegółowe dane syntetyczne dotyczące tej metody zamieszczono w następujących publikacjach: J.W. Morzycki, A. Gryszkiewicz, I. Jastrzębska, Tetrahedron 57, 2185 (2001), J.W. Morzycki. A. Wojtkielewicz, Carbohydr. Res. 337, 1269 (2002) oraz w patencie PL 191517 B1.
Wysoka aktywność biologiczna, selektywność działania oraz nowy mechanizm działania saponiny OSW-1 sprawiają, że może stanowić ona potencjalnie bardzo dobry lek. Użycie tego związku w terapii przeciwnowotworowej opisane zostało w patentach: CN 1951394, WO 2004091484, US 2005004044. Synteza saponiny OSW-1, ze względu na skomplikowaną budowę tego związku, jest wieloetapowa i stosunkowo mało wydajna. Z tego względu prowadzone są badania nad syntezą analogów saponiny OSW-1 o uproszczonej budowie, ale zachowujących wysoką aktywność i selektywność związku macierzystego. Do tej pory otrzymano szereg analogów saponiny OSW-1, posiadających zmodyfikowany aglikon lub różniących się częścią cukrową oraz wyznaczono ich aktywność w stosunku do wybranych linii komórek rakowych (patenty: CN 1010899008, CN 101029072, WO 2005082924; inne publikacje: C. Guo. T.G. LaCour, P.L. Fuchs, Bioorg. Med. Lett., 9, 419 (1999), X. Ma. B. Yu, Y. Hui. D. Xiao, J. Ding, Carbohydr. Res. 329, 495 (2000), X. Ma. B. Yu, Y. Hui, Z. Miao, J. Ding, Carbohydr. Res. 334, 159 (2001), X. Ma, B. Yu, Y. Hui, Z. Miao, J. Ding, Bioorg. & Med. Chem. Lett. 11, 2153 (2001), H. Den, H. Wo, B. Yu, M.R. Jiang. J.R. Wu, Chin. J. Chem. 22, 994 (2004), J.W. Morzycki, A. Wojtkielewicz, S. Wolczyński, Bioorg. Med. Chem. Lett. 14, 3323 (2004). L. Deng, H. Wu. B. Yu, M. Jiang, J. Wu, Bioorg. Med. Chem. Lett. 14, 2781 (2004), Y. Matsuya, S. Masuda, N. Ohsawa, S. Adam, T. Tschamber, J. Eustachę, K. Kamoshita, Y. Sukenaga, H. Nemoto, Eur. J. Org. Chem. 797 (2005), B. Shi, P. Tang, X. Hu, J.O. Liu, B.Yu, J. Org. Chem. 70, 10354 (2005), P. Tang, F. Mamdani, X. Hu, J.O. Liu, B. Yu, Bioorg.& Med. Chem. Lett. 17, 1003 (2007); W. Peng. P. Tang, X. Hu, J.O. Liu, B. Yu. Bioorg.& Med. Chem. Lett. 17, 5506 (2007), T. Tschamber, S. Adam, Y. Matsuya, S. Masuda, N. Ohsawa, S. Maruyama, K. Kamoshita, H. Nemoto, J. Eustache, Bioorg.& Med. Chem. Lett. 17, 5101 (2007), A. Wojtkielewicz, M. Długosz, J. Maj, J.W. Morzycki, M. Nowakowski, J. Renkiewicz, M. Strnad, J. Swaczynova, A.Z. Wilczewska, J. Wójcik, J. Med. Chem. 50, 3667 (2007)).
W naszych dalszych badaniach okazało się, że przedstawione na wzorze 1 analogi saponiny OSW-1 ze zmodyfikowanym łańcuchem bocznym (23,24,25,26,27-pentanor-22-deokso-22-benzyloksy lub 23.24,25,26.27-pentanor-22-deokso-22-acyloksy pochodne saponiny OSW-1) wykazują znaczącą aktywność cytostatyczną w stosunku do różnych komórek rakowych. Związki te są łatwo dostępne z (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a,21-triolu opisanego w publikacji: J.W. Morzycki, A. Gryszkiewicz, I. Jastrzębska, Tetrahedron 57, 2185 (2001); wzór 3).
PL 214 648 B1
Aktywność cytostyczna tych związków była badana względem następujących linii komórek nowotworowych: białaczki T-Iimfoblastycznej (CEM); raka sutka (MCF-7), szpiczaka mnogiego (RPMI 8226), raka płuc (A-549), przewlekłej białaczki szpikowej (K562), raka szyjki macicy (HeLa), czerniaka złośliwego (G361), czerniaka (ARN 8), kostniakomięsaka (HOS). Patentowane związki okazały się wyraźnie mniej toksyczne w stosunku do komórek zdrowych (wartość IC50 dla prawidłowych ludzkich fibroblastów BJ była, w zależności od związku i linii komórek nowotworowych, 3-360 razy większa niż w przypadku komórek nowotworowych).
Wynalazek zostanie opisany na poniższych przykładach.
P r z y k ł a d 1.
Synteza 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1 -3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-21-benzyloksy-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a-triolu (wzór 1; R = benzyl; związek 1)
Regioselektywne benzylowanie (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16β,17α,21 -triolu.
Do oziębionego do 0°C roztworu (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a,21-triolu (0,5 g, 1,3 mmola, patent PL 191517 B1) w suchym THF (15 ml) dodano NaH (0,048 g, 1,5 eq) i mieszano przez 15 minut. Następnie dodano kroplami roztwór bromku benzylu (0,17 ml, 1,1 eq) w THF (2 ml) i kontynuowano mieszanie przez godzinę w temperaturze pokojowej. Po tym czasie nadmiar NaH rozłożono wodą i produkt wyekstrahowano eterem dietylowym. Ekstrakt przemyto wodą. osuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, rozpuszczalnik odparowano. Surowy produkt oczyszczono chromatograficznie stosując jako adsorbent żel krzemionkowy. Eter 21-0-benzylowy wyeluowano układem heksan-octan etylu (8 : 2).
(20R)-21-benzyloksy-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a,-diol (0,43 g, 70%) IR (CHCis) v = 3606, 3440, 1455, 1091 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CDCla, 25°C, TMS), δ = 7,34 (m, 5H), 4,54 (s, 2H), 3,92 (bs, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,70 (t, J = 9,0, 1H), 3,43 (dd, J1 = 3,2, J2 = 9,2, 1H), 3,33 (s, 3H), 2,78 (m, 1H), 1,04 (s, 3H), 1,01 (s, 3H), 0,95 (d, J = 7,1, 3H), 0,66 (m, 1H), 0,44 (dd, J1 = 5,1, J2 = 8,0, 1H); 13CNMR (100 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 137,3 (C), 128,6 (2CH), 127,9 (CH), 127,8 (2CH), 85,6 (C), 82,3 (CH), 80,9 (CH), 74,0 (CH2), 73,7 (CH2), 56,5 (CH3), 48,4 (CH), 47,6 (CH), 47,4 (C), 43,3 (C), 35,4 (C), 34,7 (CH2), 34,6 (CH), 34,5 (CH2), 33,37 (CH2), 33,36 (CH2), 30,4 (CH), 25,0 (CH2), 22,2 (CH2), 21,6 (CH), 19,3 (CH3), 13,4 (CH3), 13,0 (CH2), 12,9 (CH3) ppm.
Glikozylowanie za pomocą trichloroacetoimidu 2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1 -3)-2'-0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozylu
Do roztworu (20R)-21-benzyloksy-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a-diolu (0,19 g, 0,41 mmola) i trichloroacetoimidu 2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1 -3)-2'-0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozylu (0,46 g, 0,50 mmol; S. Deng, B. Yu, Y. Lou, Y. Hui, J. Org. Chem. 64, 202 (1999)) w suchym chlorku metylenu (10 ml) dodano 1,28 g sit molekularnych 4 A MS i mieszano przez 15 min w temperaturze pokojowej. Następnie obniżono temperaturę do -68°C (etanol/CO2) i dodano kroplami, w atmosferze argonu, 0,14 M roztwór TMSOTf (1,1 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze -40°C (acetonitryl/CO2) przez 30 minut, po czym reakcję rozłożono trietyloaminą (0,5 ml), odsączono sita molekularne i odparowano rozpuszczalnik. Surowy produkt oczyszczono chromatograficznie, stosując jako adsorbent żel krzemionkowy. Żądany glikozyd wyeluowano układem heksan - octan etylu (95 : 5).
16-0-{2-0(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1--3)-2'-0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-benzyloksy-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a-diolu (0,34 g, 66%)
IR (CHCl3) v = 3517, 3446, 3405, 1729, 1607, 1511, 1458, 1096, 909, 615 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 7,98 (d, J = 9,0, 2H), 7,32 (m, 5H), 6,91 (d, J = 9,0, 2H), 4,90 (m, 2H), 4,72 (d, J = 5,3, 1H), 4,57 (d, J = 12,0, 1H), 4,37 (d, J = 12,0, 1H), 4,18 (s, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,87 - 3,59 (m, 6H), 3,47 (dd, J1 = 4,0, J2 = 7,8, 1H), 3,32 - 3,25 (m, 3H), 3,30 (s, 3H), 2,74 (m, 1H), 1.85 (s, 3H), 1,10 (d, J = 7,2, 3H), 1,01 - 0,87 (m, 34H), 0,67 - 0,54 (m, 19H), 0,40 (dd, J1 = 5,1, J2 = 8,0, 1H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 168,7 (C), 164,6 (C), 163,3 (C), 137,9 (C), 131,8 (2CH), 128,4 (3CH), 128,1 (3CH), 127,8 (CH), 122,7 (C), 113,3 (2CH), 102,5 (CH), 100,7 (CH), 90,6 (CH), 87,3 (C), 82,4 (CH), 75,9 (CH2), 73,7 (2CH2), 73,5 (CH), 71,0 (CH), 70,8 (CH), 68,7 (CH), 64,6 (CH2), 56,4 (CH3), 55.4 (CH3), 48,0 (CH), 47,5 (CH), 46,6 (C), 43,3 (C), 35,5 (C), 35,0 (CH2), 34,5 (CH2), 33,9 (CH), 33,3 (CH2), 32,9 (CH2), 30,3 (CH), 25,0 (CH2), 22,3 (CH2), 21,7 (CH), 20,8 (CH3), 19,2 (CH3), 13,7 (CH3), 13,5 (CH3), 12,9 (CH2), 6,9 (3CH3), 6,83 (3CH3), 6,80 (3CH3), 5,03 (3CH2), 5,00 (3CH2), 4,9 (3CH2) ppm.
PL 214 648 B1
Odbezpieczenie grup funkcyjnych w glikozydzie
Do otrzymanego w poprzednim etapie glikozydu (0,018 g, 0,014 mmola) rozpuszczonego w mieszaninie: dioksan (2,8 ml) - woda (0,4 ml) dodano p-TsOHxH2O (0,002 g) i mieszano przez 1.5 godziny w 75°C. Następnie mieszaninę reakcyjną wylano do wody i produkt wyekstrahowano octanem etylu. Saponinę (0,015 g, 93%) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną dichlorometan - metanol (97:3).
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1 -3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozyd (20R)-21-benzyloksy-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a-triol (związek 1)
IR (CHCI3) v = 3434, 1738, 1722, 1606, 1512, 1454, 1068, 845 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CDCI3, 25°C, TMS), δ = 8,02 (d, J = 8,7, 2H), 7,28 (m, 5H), 6,96 (d, J = 8,7, 2H), 5,31 (brs, 1H) 4,90 (dd, J1 = 4,9, J2 = 6,7, 1H), 4,84 (dd. J1 = 6,8, J2 = 7,3, 1H), 4,70 (d, J = 6,5, 1H), 4,51 (d, J = 12,0, 1H), 4,19 (d, J = 12,0, 1H), 4,16 (dd, J1 = 4,5, J2 = 11,6, 1H), 4,02 (s, 1H), 3,94 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,87 (m, 3H), 3,72 (m, 2H), 3.52 (m, 4H), 3,45 - 3,38 (m, 4H), 2,85 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,01 (s, 3H), 0,99 (d, J = 9,0, 3H), 0,77 (s, 3H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCI3, 25°C, TMS), δ = 169,3 (C), 166,3 (C), 164,1 (C), 140,6 (C), 137,6 (CH), 132,2 (2CH), 128,4 (2CH), 128,2 (2CH), 127.9 (CH). 121,6 (CH), 121,3 (C), 113,9 (2CH), 101,9 (CH), 101,8 (CH). 90,5 (CH), 87,2 (C), 80,4 (CH), 75,4 (CH2), 74,5 (CH), 74,0 (CH2), 73,6 (CH), 71,8 (CH), 70,7 (CH), 69.7 (CH), 66,4 (CH), 64,6 (CH2), 63,3 (CH2), 55,5 (CH3), 49,7 (CH), 48,3 (CH), 46,2 (C), 42,3 (CH2, C), 37,2 (CH2), 36,4 (C), 35,1 (CH2), 33,8 (CH). 32,4 (CH2), 31,9 (CH), 31,6 (CH2), 29,7 (CH2), 20,6 (CH2, CH3), 19,4 (CH3),13,7 (CH3), 12,9 (CH3) ppm, ESI-MS m/z (%) 917,4 (MNa+).
P r z y k ł a d 2.
Synteza 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1--3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-21-benzoilo-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (wzór 1; R = benzoil; związek 2)
Usunięcie grupy benzylowej z 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1 - 3)-2'-0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-benzyloksy-20-metylo-6e-metoksy-3α,5α-cyklopregnano-16β,17α-diolu
Do mieszanego magnetycznie roztworu gIikozydu (0,5 g, 0,4 mmoIa) rozpuszczonego w mieszaninie octanu etyIu i bezwodnego etanoIu (v/v 1:1; 20 mI) dodano 10% Pd/C (0,53 g) i trietyloaminę (0,18 mI). Reakcje prowadzono w atmosferze wodoru (5 MPa) w 50°C przez 20 godzin. Następnie mieszaninę reakcyjną przesączono przez celit w celu usunięcia katalizatora i odparowano. Żądany aIkohoI (0,38 g, 82%) otrzymano w wyniku chromatografii koIumnowej na żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną heksan - octan etyIu (8 : 2).
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1 — 3)-2'-0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a,21-triolu (0,38 g, 82%)
IR (CHCl3) v = 3688, 3486, 1725, 1607, 1511, 1458, 1255, 1096 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 7,99 (d, J = 9,0, 2H), 6,91 (d, J = 9,0, 2H), 4,96 (dd. J1 = 4,9, J2 = 7,1, 1H), 4,91 (dd, J1 = 5,5, J2 = 6,9, 1H), 4,39 (d, J = 5,3, 1H), 4,36 (d, J = 4,9, 1H), 4,14 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,68 - 3,78 (m, 6H), 3,54 (dd, J1 =3,1, J2 = 11,0, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,32 (s, 3H), 3,24 (dd, J1 = 7,7, J2 = 11,4, 1H), 2,76 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 0,86 - 1,07 (m, 34H), 0,53 - 0,66 (m, 19H), 0,42 (dd, J1 = 5,1, J2 = 7,9, 1H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3. 25°C, TMS), δ = 169,1 (C), 164,8 (C),
163.3 (C), 131,9 (2CH), 122,6 (C), 113,4 (2CH), 102,3 (CH), 101,1 (CH), 89,5 (CH), 88,1 (C), 82,3 (2CH), 74,2 (CH), 71,3, (CH), 70,8 (CH), 67,7 (2CH2), 64,7 (CH2), 56,4 (CH3), 55,4 (CH3), 48,0 (2CH), 47,5 (2CH), 47,0 (C), 43,4 (C), 35,5 (C), 35,4 (CH), 34,71 (CH2), 34,67 (CH2), 33,3 (CH2), 32,9 (CH2),
30.3 (CH), 25,0 (CH2), 22,2 (CH2), 21,6 (CH), 20,8 (CH3), 19,2 (CH3), 13,6 (CH2), 13,0 (CH3), 12,4 (CH3), 6,9 (3CH3), 6,83 (3CH3), 6,81 (3CH3), 5,1 (3CH2), 5,0 (3CH2), 4,8 (3CH2) ppm.
Estryfikacja kwasem benzoesowym
Roztwór 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'-0acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e, 17a,21-triolu (0,049 g, 0,042 mmola), kwasu benzoesowego (0,006 g 0,049 mmola), DCC (0,01 g, 0,049 mmola) i DMAP (0,5 mg, 0,004 mmola) w chlorku metylenu (5 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Po zakończeniu reakcji N,N-dicykloheksylomocznik odsączono, a przesącz przemyto 5% roztworem kwasu octowego, wodą i wysuszono nad MgSO4. Rozpuszczalnik odparowano. Produkt oczyszczono za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną heksan - octan etylu (8,5 :1.5). Uzyskano 0,047 g (89%) 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1— 3)-2'-0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd}
PL 214 648 B1 (20R)-21-benzoilo-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a,21-triolu [1H NMR (400 MHz, CDCl3. 25°C, TMS), δ = 7,96 (m, 4H), 7,52 (m, 1H), 7,43 (m, 2H), 6,85 (d, J = 9,0, 2H), 5,06 (dd. J1 = 5,6, J2 = 8,1, 1H), 4,94 (t, 1H), 4,71 (d, J = 5,5, 1H), 4,36 (m, 2H), 4,01-4,08 (m, 5H), 3,85 (s, 4H), 3,40 - 3,71 (m, 6H), 3,31 (s, 3H), 3,24 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 0,88 - 1,26 (m, 34H), 0,42 - 0,65 (m, 20H)], który bez dalszej identyfikacji poddano reakcji usunięcia grup zabezpieczających.
Odbezpieczenie grup funkcyjnych w glikozydzie
Do otrzymanego w poprzednim etapie estru (0,047 g, 0,037 mmola) rozpuszczonego w mieszaninie: dioksan (2,8 ml) - woda (0,4 ml) dodano p-TsOHxH2O (0,002 g) i mieszano przez 1,5 godziny w 75°C. Następnie mieszaninę reakcyjną wylano do wody i produkt wyekstrahowano octanem etylu. Saponinę (0,030 g, 88%) oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną dichlorometan - metanol (97 : 3). 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-Dksylopiranozylo-(1 -3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozyd (20R)-21-0-benzoilo-20-metylopregn-5-eno-3e,-16e,17a,21-tetraol (związek 2)
IR (KBr) v = 3448, 1717, 1605, 1512, 1459, 1259, 1049 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CDCl3/MeOD, 25°C, TMS), δ = 7,80 (m, 4H), 7,45 (t, J = 7,4, 1H), 7,31 (m, 2H), 6,73 (d, J = 8,8, 2H), 5,18 (m, 1H),
4.94 (dd, J1 = 7,3 J2 = 9,2, 1H), 1H), 4,76 (t, 1H), 4,44 (d, J = 7,0, 1H) 4,23 (d, J = 7,2, 1H) 4,14 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,85 (m, 2H), 3,73 (s, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,44 - 3,59 (m, 5H), 3,35 (m, 2H), 3,17 (m, 1H), 1,67 (s, 3H), 0,94 (d, J = 6,9, 3H), 0,87 (s, 3H) 0.71 (s, 3H). ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3. 25°C, TMS), δ = 169,4 (C), 166,6 (C), 166,1 (C), 164,0 (C), 140,6 (C), 133,0 (CH), 132,1 (2CH), 130,1 (C), 129,4 (2CH), 128,5 (2CH), 121,5 (CH), 121,2 (C), 113,9 (2CH), 101,9 (CH), 101,3 (CH), 88,5 (CH), 86,9 (C), 79,7 (CH), 74,3 (CH), 73,5 (CH), 71,7 (CH), 70,5 (CH), 69,7 (CH), 68,8 (CH2), 66,7 (CH), 64,3 (CH2), 63,7 (CH2), 55,5 (CH3), 53,4 (CH2), 49,7 (CH), 48,5 (CH), 46,7 (C), 42,3 (CH2), 37,2 (CH2), 36,4 (C). 34,1 (CH), 32,5 (CH2), 31,8 (CH), 31,7 (CH2), 31,6 (CH2). 29,7 (CH2), 20,6 (CH3), 19,4 (CH3), 13,0 (CH3), 12,2 (CH3) ppm; ESI-MS m/z (%) 931,4 (MNa+); dla C49H64O16Na, obliczono: 931,40866; znaleziono: 931,40631.
P r z y k ł a d 3.
Synteza 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksy/op/ranozy/o-(1 -3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-21-0-(4-metoksybenzoilo)-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu ((wzór 1; R = 4-metoksybenzoil; związek 3)
Estryfikacja kwasem 4-metoksybenzoesowym
Estryfikacja 16-0-{2-0(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1->3)-2'0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a,21-triolu kwasem 4-metoksybenzoesowym została przeprowadzona analogicznie jak w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: heksan - octan etylu (84 :16)) otrzymano żądany ester z wydajnością 65%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'-0-acetylo4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-0-(4-metoksybenzoilo)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5acyklopregnanoo-16e,17a,21-triolu [1H NMR (400 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 8,07 (d, J = 8,8, 2H),
7.95 (d, J = 8,8, 2H), 6,96 (d, J = 8,8, 2H), 6,86 (d, J = 8,8, 2H), 5,06 (m, 1H), 4,95 (t, J = 6,1, 1H), 4,74 (m, 1H), 4,36 (m, 2H), 4,25 (dd, J1 = 3,4, J2 = 11,1, 1H), 4,12 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,85 (s, 4H), 3,60 - 3,75 (m, 4H), 3,37 (m, 1H), 3,31 (s, 3H), 3,24 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), 0,86 - 1,27 (m, 34H), 0,53 - 0,66 (m, 19H), 0,42 (m, 1H) ppm], który bez dalszej identyfikacji poddano reakcji usunięcia grup zabezpieczających.
Odbezpieczenie grup funkcyjnych w glikozydzie
Otrzymany w poprzednim etapie ester poddano reakcji z kwasem p-toluenosulfonowym, zgodnie z procedurą podaną w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej za żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: chlorek metylenu - metanol (94 : 6)) żądaną saponinę uzyskano z wydajnością 90%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-0-(4-metoksybenzoilo)-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (związek 3)
IR (CHCl3) v = 3588, 3384, 1738, 1724, 1715, 1607, 1512, 1259, 1196 cm-1; 1H NMR (400 MHz. CDCl3/ MeOD, 25°C, TMS), δ = 7,91 (d, J = 8,8, 2H), 7,87 (d, J = 8,8, 2H), 6,88 (d, J = 8,9, 2H), 6,85 (d, J = 8,9, 2H), 5,30 (m, 1H), 5,06 (dd, J1 = 6,7, J2 = 8,4, 1H), 4,89 (J1 = 7,0, J2 = 7,6. 1H), 4,63 (d, J = 6,5, 1H), 4,35 (d, J = 6,6, 1H), 4,26 (m, 1H), 4,11 (dd, J1 = 3,5. J2 = 11,0, 1H), 4,05 (dd, J1 = 4,5, J2 = 11,7, 1H), 3,95 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,61 - 3,71 (m, 4H), 3,45 (m, 2H), 3,34 (dd, J1 = 8,6, J2 = 11,6, 1H), 1,64 (s, 3H), 1,01 (d, J = 7,0, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,83 (s, 3H) ppm; 13C NMR (100 MHz,
PL 214 648 B1
CDCl3/MeOD, 25°C, TMS), δ = 169,5 (C), 166,6 (C), 165,7 (C), 163,8 (C), 163,5 (C), 140,6 (C), 131,9 (2CH), 131,4 (2CH), 122,4 (C),121.6 (C), 121,5 (CH), 113,71 (2CH), 113,69 (2CH), 102,4 (CH), 101,7 (CH), 88,4 (CH), 86,7 (CH), 79,7 (CH), 74,0 (CH), 73,1 (CH), 71,5 (CH), 70,5 (CH), 69,4 (CH), 68,5 (CH2), 67,4 (CH), 64,53 (CH2), 64,45 (CH2), 55,40 (CH3), 55,39 (CH3), 53,38 (C), 48,5 (CH), 46,6 (C), 42,0 (CH2), 37,2 (CH2), 36,4 (C), 35,1 (CH2), 34,0 (CH), 32,5 (CH2), 31,74 (CH), 31,69 (CH2), 31,3 (CH2), 20,5 (CH2), 20,4 (CH3), 19,3 (CH3), 12,9 (CH3), 12,1 (CH3) ppm; ESI-MS m/z (%) 961,4 (MNa+); dla C50H66O17Na, obliczono: 961,4198; znaleziono: 961,4209.
P r z y k ł a d 4.
Synteza 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1 -3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-21-pentanoilo-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (wzór 1; R = pentanoil;
związek 4)
Estryfikacja kwasem pentanowym
Estryfikacja 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1 -3)-2'-0acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano16e,17a,21-triolu kwasem pentanowym została przeprowadzona analogicznie jak w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: heksan - octan etylu (85 : 15)) otrzymano żądany ester z wydajnością 89%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1-3)-2'-0-acetylo-4-0trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-0-pentanoilo-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano16e,17a,21-triolu [1H NMR (400 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 7,99 (d, J = 8,9, 2H), 6,90 (d, J = 8,9, 2H), 4,96 (m, 2H), 4,74 (d, J = 5,3, 1H), 4,30 (d, J = 5,7, 1H), 4,00 - 4,22 (m, 6H), 3,87 (s, 3H), 3,66 3,82 (m, 4H), 3,31 (s, 3H), 3,24 (m, 3H), 2,75 (m, 1H), 2,46 (t, J = 7,4, 2H), 1,90 (s, 3H), 0,85 - 1,02 (m, 40H), 0,56 - 0,65 (m, 19H), 0.42 (m, 1H)], który bez dalszej identyfikacji poddano reakcji usunięcia grup zabezpieczających.
Odbezpieczenie grup funkcyjnych w glikozydzie
Otrzymany w poprzednim etapie ester poddano reakcji z kwasem p-toluenosulfonowym, zgodnie z procedurą podaną w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: chlorek metylenu - metanol (95 : 5), żądaną saponinę uzyskano z wydajnością 90%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1--3)-2'-0-acetylo--a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-0-pentanoilo-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (związek 4)
IR (CHCis) v = 3590, 3468. 1728, 1606, 1512, 1259, 1170 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 8,00 (d, J = 8,6, 2H), 6,94 (d, J = 8,6, 2H), 5,34 (m, 1H), 5,05 (m, 1H), 4,94 (t, J = 7.0, 1H), 4,76 (d, J = 6,0, 1H), 4,37 (d, J = 5,4, 1H), 4,16 (dd, J1 = 3,9, J2 = 11,5, 1H), 3,94-4,04 (m, 3H), 3,87 (s, 3H), 3,82 (m, 3H), 3,75 (m, 2H), 3,65 (m, 1H), 3,50 (m, 2H), 3,43 (m, 1H), 2,22 (t, J =
7,3, 2H), 1,83 (s, 3H), 1,01 (s, 3H), 0,908 (t, J = 7,2, 3H), 0,907 (d, J = 6,7, 3H), 0,84 (s, 3H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3, 25°C. TMS), δ = 173,1 (C), 169,4 (C), 166,1 (C), 164,1 (C), 140,6 (C), 132.1 (2CH), 121,5 (CH), 121,2 (C), 113,9 (2CH), 101,8 (CH), 101,4 (CH), 88,7 (CH), 86,9 (C), 79,7 (CH),
74.3 (CH), 73.6 (CH), 71,7 (CH), 70,4 (CH), 69,7 (CH), 68,4 (CH2), 66,6 (CH), 64,4 (CH2), 55,5 (CH3),
53.4 (CH, CH2), 49.7 (CH), 48,5 (CH), 46,6 (C), 42,3 (CH2), 37.2 (CH2), 36.4 (C), 34,9 (CH2), 34,1 (CH2), 33,7 (CH), 32,4 (CH2), 31,8 (CH), 31,7 (CH2), 31,6 (CH2), 26,9 (CH2), 22,2 (CH2), 20,6 (CH3),
19.4 (CH3), 13,7 (CH3), 12,9 (CH3), 12,2 (CH3) ppm; ESI-MS m/z (%) 911,5 (MNa+); dla C47H68O16Na, obliczono: 911,43996; znaleziono: 911,44275.
P r z y k ł a d 5.
Synteza 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1 —3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-21-O-heptanoilo-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (wzór 1; R = heptanoil; związek 5)
Estryfikacja kwasem heptanowym
Estryfikacja 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'--0acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e, 17a,21-triolu kwasem heptanowym została przeprowadzona analogicznie jak w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: heksan - octan etylu (85 :15), otrzymano żądany ester z wydajnością 80%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'-0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-heptanoilo-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopre-gnano16e,17a,21-triolu [1H NMR (400 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 7,99 (d, J = 8,8, 2H), 6,90 (d, J = 8,8,
PL 214 648 B1
2H), 5,02 (dd, J1 = 5,6, J2 = 7,5, 1H), 4,93 (dd, J1 = 5,8, J2 = 6,2, 1H), 4,75 (d, J = 5,1, 1H), 4,30 (d, J =
5.3, 1H), 4,12 (m, 2H), 3,99 (m, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,75 (t, J = 6,6, 1H), 3,66 (m, 3H). 3,35 (dd, J1 = 1,2, J2 = 10,1, 1H), 3,31 (s, 3H), 3,25 (dd, J1 = 7,3, J2 = 11,5, 1H), 2,76 (m, 1H), 2,36 (t, J = 7,5, 2H), 1,90 (s, 3H), 0,87 - 1,02 (m, 48H), 0,54 - 0,64 (m, 19H), 0,42 (dd, J1 = 5,2, J2 = 7,8, 1H) ppm], który bez dalszej identyfikacji poddano reakcji usunięcia grup zabezpieczających.
Odbezpieczenie grup funkcyjnych w glikozydzie
Otrzymany w poprzednim etapie ester poddano reakcji z kwasem p-toluenosulfonowym, zgodnie z procedurą podaną w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: chlorek metylenu - metanol (96 : 4), żądaną saponinę uzyskano z wydajnością 92%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1--3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-0-heptanoilo-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (związek 5)
IR (film) v = 3446, 1734, 1717, 1699, 1653, 1606, 1512, 1259, 1180 cm-1; 1HNMR (400 MHz, CDCl3/MeOD, 25°C, TMS), δ = 7,97 (d, J = 8,9, 2H), 6,91 (d, J = 8.9, 2H), 5,29 (m, 1H), 5,02 (dd, J1 =
6.4, J2 = 8,4, 1H), 4,91 (dd, J = 6,7, J2 = 7.7, 1H), 4,65 (d, J = 6,5, 1H), 4,29 (d, J = 6.4. 1H), 4,01 4,08 (m, 2H), 3,91 - 3,97 (m, 2H), 3,86 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,60 - 3,71 (m, 5H), 3,42 (m, 2H), 3,34 (dd, J1 = 8,6, J2 = 11,7, 1H), 1,72 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,90 (d, J = 7,0, 3H), 0,86 (m, 3H), 0,80 (s, 3H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3/MeOD, 25°C, TMS), δ = 174 (C), 169,5 (C), 165,7 (C), 163,8 (C), 140,6 (C), 132,0 (2CH), 121,6 (C), 121,4 (CH), 113,7 (2CH), 102,3 (CH), 101,7 (CH), 88,5 (CH), 86,7 (C), 79,7 (CH), 74,0 (CH), 73,2 (CH), 71,5 (CH), 70,5 (CH), 69,4 (CH), 68,3 (CH2), 67,2 (CH), 64,5 (CH2), 64,3 (CH2), 55,4 (CH3), 49,7 (CH), 48,5 (CH), 46,5 (C), 42,0 (CH2), 37,2 (CH2), 36,4 (C), 35,0 (CH2), 34,3 (CH2), 33,7 (CH), 32,4 (CH2), 31,73 (CH2), 31,68 (CH), 31,4 (CH2), 28,7 (CH2), 26,0 (CH2), 24,8 (CH2), 22,4 (CH2), 20,5 (CH2), 20,4 (CH3), 19,3 (CH3), 13,9 (CH3), 12,8 (CH3), 12,0 (CH3) ppm; ESI-MS m/z (%) 939,5 (MNa+); dla C49H72O16Na, obliczono: 939,47126; znaleziono: 939,47337.
P r z y k ł a d 6.
Synteza 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-20-metylo-(21-0-(undec-10-enoilo)-pregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (wzór 1; R = undec10-enoil; związek 6)
Estryfikacja kwasem undec-10-enowym
Estryfikacja 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a,21-triolu kwasem undec-10-enowym przeprowadzono analogicznie jak w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej za żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: heksan - octan etylu (87,5 : 12,5)) otrzymano żądany ester z wydajnością 63%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'-0-acetylo-4-0trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-20-metylo-6e-metoksy-21-0-(undec-10-enoilo)-3a,5acyklopregnano-16e,17a,21-triolu [1H NMR (400 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 7,99 (d, J = 8,7, 2H), 6,90 (d, J = 8,7, 2H), 5,82 (m, 1H), 4,93 - 5,02 (m, 4H), 4,75 (m, 1H), 4,31 (t, 1H), 4,12 (m, 2H), 4,01 (m, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,62 - 3,87 (m, 4H), 3,36 (m, 2H), 3,31 (s, 3H), 3,25 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 2,23 (m, 2H), 1,91 (s, 3H), 0,89 - 1,02 (m, 40H), 0,56 - 0,64 (m, 19H), 0,42 (m, 1H) ppm], który bez dalszej identyfikacji poddano reakcji usunięcia grup zabezpieczających.
Odbezpieczenie grup funkcyjnych w glikozydzie
Otrzymany w poprzednim etapie ester poddano reakcji z kwasem p-toluenosulfonowym, zgodnie z procedurą podaną w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: chlorek metylenu - metanol (95 : 5), żądaną saponinę uzyskano z wydajnością 95%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-20-metylo-21-0-(undec-10-enoilo)-pregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (związek 6)
IR (KBr) v = 3448, 1735, 1719, 1606, 1512, 1257, 1047 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CDCl3/MeOD, 25°C, TMS), δ = 7,95 (d, J = 8,9, 2H), 6,89 (d, J = 8,9, 2H), 5,77 (m, 1H), 5,27 (d, J = 4,6, 1H), 5,01 (dd, J1 = 6,7, J2 = 8,6, 1H), 4,95 (dd, J1 = 1,9. J2 = 17,1, 1H), 4,88 (m, 2H), 4,61 (d, J = 6,6, 1H), 4,25 (d, J = 6,6, 1H), 4,02 (m, 2H), 3,93 (m, 2H), 3,83 (s, 4H), 3,59 - 3,67 (m, 4H), 3,42 (m, 2H), 3,30 (m, 1H), 2,00 (m, 2H), 1,68 (s, 3H). 0,95 (s, 3H), 0,89 (d, J = 7,0, 3H), 0,77 (s, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3/MeOD, 25°C, TMS), δ = 174,0 (C), 169,4 (C), 165,6 (C), 163,7 (C), 140,5 (C), 139,0 (CH), 131,9 (2CH), 121,6 (C), 121,3 (CH), 114,0 (CH2), 113,6 (2CH), 102,3 (CH), 101,7 (CH), 88,3 (CH), 86,6 (C), 79,6 (CH), 73,9 (CH), 73,1 (CH), 71,3 (CH), 70,4 (CH), 69,3 (CH), 68,3 (CH2), 67,3 (CH), 64,6 (CH2), 64,4 (CH2), 55,3 (CH3), 49.6
PL 214 648 B1 (CH), 48,4 (CH), 46,5 (C), 41,9 (CH2), 37,1 (CH2), 36,3 (C), 35,0 (CH2), 34,2 (CH2), 33,6 (CH2, CH), 32,3 (CH2), 31,64 (CH), 31,60 (CH2), 31,2 (CH2), 29,2 (CH2), 29,1, (CH2), 29,0 (CH2), 28,9 (CH2), 28,8 (CH2), 24,8 (CH2), 20,4 (CH2), 20,3 (CH3), 19,2 (CH3), 12,7 (CH3), 11,9 (CH3) ppm; ESI-MS m/z (%) 993,5 (MNa+); dla C53H78O16Na, obliczono: 993,5188; znaleziono: 993,5186.
P r z y k ł a d 7.
Synteza 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1 -3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-21-O-[(£)-but-2-enoilo]-20-metylopregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (wzór 1; R = (E)-but-2-enoil; związek 7)
Estryfikacja kwasem E-but-2-enowym
Reakcja estryfikacji 16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo(1 -3)-2'-0-acetylo-4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozydu} (20R)-20-metylo-6e-metoksy-3a,5a-cyklopregnano-16e,17a,21-triolu kwasem (E)-but-2-enowym przeprowadzono analogicznie jak w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: heksan - octan etylu (82 : 18)) otrzymano żądany ester z wydajnością 95%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-3,4-di-0-trietylosililo-e-D-ksylopiranozylo-(1--3)-2'-0-acetylo4-0-trietylosililo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-0-[(£)-but-2-enoilo]-20-metylo-6e-metoksy-3a,5acyklopregn-16e,17a,21-triolu [1H NMR (400 MHz, CDCl3, 25°C, TMS), δ = 7,98 (d, J = 8,7, 2H), 7,08 (dd, J1 = 6,9. J2 = 15,5, 1H), 6,90 (d, J = 8,7, 2H), 5,77 (dk, J1 = 1,7, J2 = 15,5, 1H), 5,03 (m, 1H), 4,94 (t, 1H), 4,77 (m, 1H), 4,31 (t, 1H), 4,00 - 4,18 (m, 4H), 3,87 (s, 3H), 3,63 - 3,74 (m, 4H), 3,36 (m, 2H), 3,31 (s, 3H), 3,24 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 1,89 (s, 3H), 1,84 (d, J = 1,7, 3H), 0,87 - 1,02 (m, 34H), 0,52 0,66 (m, 19H), 0,42 (m, 1H) ppm], który bez dalszej identyfikacji poddano reakcji usunięcia grup zabezpieczających.
Odbezpieczenie grup funkcyjnych w glikozydzie
Otrzymany w poprzednim etapie ester poddano reakcji z kwasem p-toluenosulfonowym, zgodnie z procedurą podaną w przykładzie 2. Po oczyszczeniu za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (mieszanina eluująca: chlorek metylenu - metanol (94 : 6)) żądaną saponinę uzyskano z wydajnością 94%.
16-0-{2-0-(4-metoksybenzoilo)-e-D-ksylopiranozylo-(1—3)-2'-0-acetylo-a-L-arabinopiranozyd} (20R)-21-0-[(E)-but-2-enoilo]-20-metylo-pregn-5-eno-3e,16e,17a,21-tetraolu (związek 7)
IR (KBr) v = 3445, 1748, 1715, 1606, 1513, 1259 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CDCl3/MeOD, 25°C, TMS), δ = 7,94 (d, J = 8,9, 2H), 6,88 (d, J = 8,9, 2H), 6,86 (dd, J1 = 6,9, J2 = 15,5, 1H), 5,70, (dk, J1 = 1,7, J2 = 15.5, 1H), 5,26 (m, 1H), 5,01 (dd, J1 = 6,8, J2 = 8,8, 1H), 4,87 (dd, J1 = 6,98, J2 = 8,1, 1H), 4,59 (d, J = 6,8, 1H), 4,25 (d, J = 6,8 1H), 4.07 (dd, J1 = 6,4, J2 = 11,0. 1H), 4.00 (dd. J1 = 4,6, J2 =11,7, 1H), 3,86 - 3,95 (m, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,57 - 3,67 (m, 4H), 3,41 (m, 2H), 3,33 (t, d, J = 1,6, 1H), 3,28 (dd, J1 = 8,8, J2 = 11,7, 1H), 1,81 (dd, J1 = 1,7, J2 = 6.9, 1H), 1,63 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,90 (d. J = 7,0, 3H), 0.77 (s. 3H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3, 25°C. TMS), δ = 169,4 (C). 166,7 (C), 165,6 (C), 163,7 (C), 145,1 (CH), 140,5 (C), 131,9 (2CH), 122,2 (CH), 121,7 (C), 121,3 (CH), 113,6 (2CH). 102,4 (CH), 101,8 (CH), 88,1 (CH), 86,5 (C), 79,6 (CH), 74,0 (CH), 73,1 (CH), 71,3 (CH), 70,5 (CH), 69,3 (CH), 68,0 (CH2), 67,5 (CH), 64,8 (CH2), 64,5 (CH2), 55,3 (CH3), 49,6 (CH), 48,4 (CH), 46,5 (C), 41,8 (CH2), 37,1 (CH2), 36,3 (C), 35,1 (CH2), 33,8 (CH), 32,3 (CH2), 31,63 (CH), 31,59 (CH2), 31,1 (CH2), 20,4 (CH2), 20,3 (CH3), 19,1 (CH3), 17,8 (CH3), 12,7 (CH3), 11,8 (CH3) ppm; ESI-MS m/z (%)
895,4 (MNa+); dla C46H64O16Na. obliczono: 895,4092; znaleziono: 895,4117.
P r z y k ł a d 8.
Badanie aktywności biologicznej analogów saponiny OSW-1 (związki 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7) w stosunku do wybranych komórek nowotworowych
Ogólna procedura testu in vitro na aktywność cytotoksyczną
Aktywność cytotoksyczną analogów OSW-1 (związki 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7), według niniejszego wynalazku, zbadano in vitro na następujących liniach komórek nowotworowych: białaczki T- limfoblastycznej (CEM), raka sutka (MCF-7), szpiczaka mnogiego (RPMI 8226), raka płuc (A- 549), przewlekłej białaczki szpikowej (K562), raka szyjki macicy (HeLa), czerniaka złośliwego (G361), czerniaka (ARN 8), kostniakomięsaka (HOS) oraz prawidłowych ludzkich fibroblastów (BJ). Do hodowli linii komórek nowotworowych zastosowano medium hodowlane DMEM (Gibco BRL) z dodatkiem 10% płodowej surowicy cielęcej, 4 mM glutaminy, 100 U/ml penicyliny i 100 μg/ml streptomycyny. Hodowlę przeprowadzono w temperaturze 37°C w atmosferze o maksymalnej wilgotności, zawierającej 5% CO2. Do zawiesiny komórek nowotworowych 5 (ok. 1,25 x 105 komórek/ml) umieszczonych w 96-studzienkowych mikropłytkach hodowlanych, po 3 godzinach stabilizacji, dodano 20 μl roztworu badanego związku w DMSO. Do kultury kontrolnej dodano tylko
PL 214 648 B1
DMSO. Końcowe stężenie DMSO w mieszaninie, w żadnym z przeprowadzonych testów, nie przekroczyło 0.6%. Roztwory testowanych związków przygotowano bezpośrednio przed wykonaniem doświadczenia. W tym celu analogi saponiny OSW-1 rozpuszczono w DMSO, z roztworu podstawowego sporządzono roztwory robocze metodą 4-krotnych rozcieńczeń, najwyższe badane stężenie wynosiło 50 μΜ. Po 72 godzinach hodowli, komórki inkubowano z roztworem Kalceiny AM (Molecular Probes) przez 1 godzinę. Fluorescencję zdolnych do życia komórek mierzono za pomocą przyrządu Fluoroscan Ascent (Microsystems). Procent komórek, które przeżyły w każdej studzience płytki (TCS) obliczano z równania:
TCS = (OD w studzienkach z badanym związkiem/ Średnia OD w studzienkach kontrolnych) x 100%. Wartość IC50 (stężenie badanego związku letalne dla 50% komórek guza) wyznaczano z wykresu zależności TCS od stężenia badanej substancji. Otrzymane wyniki dla związków 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 zestawiono w tabeli poniżej.
T a b e l a 3. Wartości IC50 (μΜ) analogów saponiny OSW-1 otrzymane w testach cytotoksyczności w porównaniu do daunorubicyny
| związek | Linie komórek nowotworowych; IC50 (μΜ) | ||||||
| CEM | MCF7 | RPMI8226 | G361 | HeLa | A549 | BJ | |
| 1 | 0.02±0.001 | 0.6±0.1 | 0.009±0.002 | 0.75±0.8 | 0.2±0.01 | 0.1 ±-.05 | 3.1 ± 1.5 |
| 2 | 0.07±0.01 | 0.7±0.1 | 0.022±0.006 | 1.66±0.9 | 0.24±0.06 | 0.17±0.04 | 1.3±0.2 |
| 3 | 0.057±0.019 | 0.41 ±0.12 | - | - | - | - | 0.053±0.035 |
| 4 | 0.06±0.01 | 0.5±0.07 | 0.022±0.004 | 0.39±0.06 | 0.17±0.01 | 0.16±0.04 | 1.58±0.7 |
| 5 | 0.01 ±0.002 | 0.4±0.04 | 0.003±0.0005 | 1.28±0.2 | 0.03±0.002 | 0.02±0.005 | 1.1±0.3 |
| 6 | 0.0061 ±0.0012 | 0.029±0.012 | - | - | - | - | 0.02±0.01 |
| 7 | 0.34±0.04 | 0.84±0.51 | - | - | - | - | 0.32±0.20 |
| daunorubicyna | 0.62±0.01 | 0.14±0.012 | - | 0.67±0.002 | 670±31 | - | - |
(±OS, średnią wartość odchylenia standardowego wyznaczono z trzech niezależnych eksperymentów).
W opisie zostały użyte następujące skróty:
Ac - acetyl
DCC - dicykloheksylokarbodiimid
DMAP - 4-N,N-dimetyloaminopirydyna
DMSO - dimetylosulfotlenek
MBz -p-metoksybenzoil pGI50 - ujemny logarytm dziesiętny ze stężenia badanego związku, przy którym wzrost komórek guza został zahamowany o 50%. Wartość GI50 liczona ze wzoru GI50 = (T0 - Tx / NT0 - NTx) x 100% [gdzie, Tx - liczba komórek poddanych działaniu związku badanego po czasie x, T0 - w czasie początkowym, NTx - liczba komórek w serii kontrolnej (nie poddanych działaniu związku badanego) po czasie x, NT0 - w czasie początkowym]
OD - gęstość optyczna p-TsOH - kwas p-toluenosulfonowy
TES - trietylosilil
THF - tetrahydrofuran
TMS - trimetylosilil
Tf - trifluorometanosulfonyl
Claims (1)
- Zastrzeżenie patentoweZastosowanie analogów saponiny OSW-1 o wzorze ogólnym 1, w którym R oznacza benzyl lub podstawiony benzyl, C1-18 alkanoil, C3-18 alkenoil, benzoil lub podstawiony benzoil, do wytwarzania leku do leczenia chorób nowotworowych.PL 214 648 B1R = benzyl podstawiony benzyl C^ie alkanoil C3_iq alkenoil benzoil podstawiony benzoilRysunkiDepartament Wydawnictw UP RPCena 4,92 zł (w tym 23% VAT)
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL387235A PL214648B1 (pl) | 2009-02-09 | 2009-02-09 | Zastosowanie analogów saponiny OSW-1 o uproszczonej budowie wykazujacych dzialanie cytotoksyczne |
| NZ594217A NZ594217A (en) | 2009-02-09 | 2010-02-08 | Novel saponin compounds, methods of preparation thereof, use thereof and pharmaceutical compositions |
| AU2010210218A AU2010210218B2 (en) | 2009-02-09 | 2010-02-08 | Novel saponin compounds, methods of preparation thereof, use thereof and pharmaceutical compositions |
| EP10721628.5A EP2393826B1 (en) | 2009-02-09 | 2010-02-08 | Novel saponin compounds, methods of preparation thereof, use thereof and pharmaceutical compositions |
| CA2751263A CA2751263C (en) | 2009-02-09 | 2010-02-08 | Novel saponin compounds, methods of preparation thereof, use thereof and pharmaceutical compositions |
| US13/147,771 US8552161B2 (en) | 2009-02-09 | 2010-02-08 | Saponin compounds, methods of preparation thereof, use thereof and pharmaceutical compositions |
| PCT/CZ2010/000012 WO2010088866A2 (en) | 2009-02-09 | 2010-02-08 | Novel saponin compounds, methods of preparation thereof, use thereof and pharmaceutical compositions |
| ZA2011/05443A ZA201105443B (en) | 2009-02-09 | 2011-07-22 | Novel saponin compounds,methods of preparation thereof,use thereof and pharmaceutical compositions |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL387235A PL214648B1 (pl) | 2009-02-09 | 2009-02-09 | Zastosowanie analogów saponiny OSW-1 o uproszczonej budowie wykazujacych dzialanie cytotoksyczne |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL387235A1 PL387235A1 (pl) | 2010-08-16 |
| PL214648B1 true PL214648B1 (pl) | 2013-08-30 |
Family
ID=42542434
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL387235A PL214648B1 (pl) | 2009-02-09 | 2009-02-09 | Zastosowanie analogów saponiny OSW-1 o uproszczonej budowie wykazujacych dzialanie cytotoksyczne |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8552161B2 (pl) |
| EP (1) | EP2393826B1 (pl) |
| AU (1) | AU2010210218B2 (pl) |
| CA (1) | CA2751263C (pl) |
| NZ (1) | NZ594217A (pl) |
| PL (1) | PL214648B1 (pl) |
| WO (1) | WO2010088866A2 (pl) |
| ZA (1) | ZA201105443B (pl) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR3022907A1 (fr) * | 2014-06-27 | 2016-01-01 | Pf Medicament | Derives d'osw-1 et leur utilisation en tant que medicament |
| CA3109613A1 (en) | 2016-05-28 | 2017-12-07 | Rajiv Gandhi Centre For Biotechnology, An Autonomous Institute Under The Department Of Bio-Technology, Government Of India | Uttroside b and derivatives thereof as therapeutics for hepatocellular carcinoma |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4501734A (en) | 1981-03-06 | 1985-02-26 | Wakunaga Yakuhin Kabushiki Kaisha | Promotion of absorption of drugs administered through the alimentary system |
| US5166139A (en) | 1987-02-26 | 1992-11-24 | Indena, S.P.A. | Complexes of saponins and their aglycons with phospholipids and pharmaceutical and cosmetic compositions containing them |
| IT1203515B (it) | 1987-02-26 | 1989-02-15 | Indena Spa | Complessi di saponine con fosfolipidi e composizioni farmaceutiche e cosmetiche che li contengono |
| US5057540A (en) | 1987-05-29 | 1991-10-15 | Cambridge Biotech Corporation | Saponin adjuvant |
| GB8921470D0 (en) | 1989-09-22 | 1989-11-08 | Peptide Technology Ltd | Vaccines |
| US5688772A (en) | 1994-08-01 | 1997-11-18 | University Of Saskatchewan | Quinoa saponin compositions and methods of use |
| PL191517B1 (pl) | 2000-02-18 | 2006-05-31 | Inst Farmaceutyczny | Sposób otrzymywania pochodnych 16β, 17a-dihydroksy-steroidowych do syntez saponin OSW |
| US6753414B2 (en) | 2001-08-07 | 2004-06-22 | University Of Iowa Research Foundation, Inc. | Process for preparing saponin compounds |
| US20050004044A1 (en) | 2003-04-07 | 2005-01-06 | Board Of Regents | Use of orsaponin [3beta, 16beta, 17 alpha-trihydroxycholost-5-en-22-one 16-0-(2-0-4-methoxybenzoyl-beta-D-xylopyranosyl)-(1->3)-(2-0-acetyl-alpha-L-arabinopyranoside)] or OSW-1 and its derivatives for cancer therapeutics |
| CN1247610C (zh) | 2004-01-09 | 2006-03-29 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 虎眼万年青皂甙osw－1类型皂甙的23位杂原子取代的类似物及其合成方法和用途 |
| US20050175623A1 (en) | 2004-02-10 | 2005-08-11 | Zheng-Pin Wang | Saponins as anticancer agent |
| CN1844138A (zh) | 2006-05-12 | 2006-10-11 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 一种合成虎眼万年青皂甙的脱除保护基的方法 |
| CN1951394A (zh) | 2006-10-10 | 2007-04-25 | 上海中药创新研究中心 | 虎眼万年青皂甙osw－1在制备抗癌症药物中的应用 |
| CN101029070B (zh) | 2006-12-14 | 2010-05-19 | 上海中药创新研究中心 | 一种虎眼万年青皂甙osw-1的制备方法 |
| CN101029072A (zh) | 2007-04-06 | 2007-09-05 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 一类5,6－双氢－胆甾化合物 |
| CN101089008B (zh) | 2007-06-01 | 2010-05-19 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 虎眼万年青osw-1皂甙的无a、b环的双环类似物、合成方法和用途 |
-
2009
- 2009-02-09 PL PL387235A patent/PL214648B1/pl not_active IP Right Cessation
-
2010
- 2010-02-08 NZ NZ594217A patent/NZ594217A/xx not_active IP Right Cessation
- 2010-02-08 US US13/147,771 patent/US8552161B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2010-02-08 CA CA2751263A patent/CA2751263C/en not_active Expired - Fee Related
- 2010-02-08 WO PCT/CZ2010/000012 patent/WO2010088866A2/en not_active Ceased
- 2010-02-08 EP EP10721628.5A patent/EP2393826B1/en not_active Not-in-force
- 2010-02-08 AU AU2010210218A patent/AU2010210218B2/en not_active Ceased
-
2011
- 2011-07-22 ZA ZA2011/05443A patent/ZA201105443B/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA201105443B (en) | 2012-04-25 |
| EP2393826A2 (en) | 2011-12-14 |
| WO2010088866A3 (en) | 2010-11-18 |
| AU2010210218B2 (en) | 2013-10-10 |
| NZ594217A (en) | 2012-10-26 |
| US8552161B2 (en) | 2013-10-08 |
| CA2751263C (en) | 2015-02-03 |
| WO2010088866A2 (en) | 2010-08-12 |
| EP2393826B1 (en) | 2014-08-27 |
| PL387235A1 (pl) | 2010-08-16 |
| AU2010210218A1 (en) | 2011-08-04 |
| US20110311652A1 (en) | 2011-12-22 |
| CA2751263A1 (en) | 2010-08-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8785405B2 (en) | Compounds for treating cancer and other diseases | |
| AU2008244648A1 (en) | Blocking the migration or metastasis of cancer cells by affecting adhesion proteins and the uses of new compounds thereof | |
| Li et al. | Synthesis and anti-tumor activity of nitrogen-containing derivatives of the natural product diphyllin | |
| Chillemi et al. | Synthesis of amphiphilic resveratrol lipoconjugates and evaluation of their anticancer activity towards neuroblastoma SH-SY5Y cell line | |
| KR20230147042A (ko) | 광역학 요법 및 진단 | |
| JP6549544B2 (ja) | ガンおよび他の疾患を治療するための新規化合物 | |
| Ge et al. | New cinnamic acid-pregenolone hybrids as potential antiproliferative agents: Design, synthesis and biological evaluation | |
| Tan et al. | Syntheses and anti-cancer activities of glycosylated derivatives of diosgenin | |
| PL214648B1 (pl) | Zastosowanie analogów saponiny OSW-1 o uproszczonej budowie wykazujacych dzialanie cytotoksyczne | |
| Kaskiw et al. | Synthesis and cytotoxic activity of diosgenyl saponin analogues | |
| Lei et al. | Synthesis and anti-tumor activity of 14-O-derivatives of natural oridonin | |
| EP2526111A2 (en) | Aloe-emodin derivatives and use thereof for the treatment of cancer | |
| Wang et al. | Synthesis and preliminary anti-inflammatory activity exploration of novel derivatives of kirenol | |
| Guan et al. | Synthesis of 5 (6)-dihydro-OSW-1 analogs bearing three kinds of disaccharides linking at 15-hydroxy and their antitumor activities | |
| Tao et al. | Semi-synthesis of caudatin glycosides and study on their antiproliferative activities | |
| Wojtkielewicz et al. | Study on the reaction of diosgenin acetate with trimethylsilylazide catalyzed by Lewis acids | |
| KR20220164216A (ko) | 신규한 에르고스텐올 유도체 및 이의 용도 | |
| KR101873607B1 (ko) | 암 및 다른 질환들을 치료하기 위한 화합물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20140209 |