PL224588B1 - Mikroukład do trójwymiarowej hodowli komórkowej - Google Patents
Mikroukład do trójwymiarowej hodowli komórkowejInfo
- Publication number
- PL224588B1 PL224588B1 PL406928A PL40692814A PL224588B1 PL 224588 B1 PL224588 B1 PL 224588B1 PL 406928 A PL406928 A PL 406928A PL 40692814 A PL40692814 A PL 40692814A PL 224588 B1 PL224588 B1 PL 224588B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- microcircuit
- polymer
- nanofiber
- polymer nanofibers
- nanofibers
- Prior art date
Links
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 title claims description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 52
- 239000002121 nanofiber Substances 0.000 claims description 50
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 9
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 7
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 claims description 6
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 claims description 5
- 238000001523 electrospinning Methods 0.000 claims description 4
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000331 Polyhydroxybutyrate Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 2
- 229910000394 calcium triphosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 2
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000001788 irregular Effects 0.000 claims description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 2
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 claims description 2
- RFWLACFDYFIVMC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;[oxido(phosphonatooxy)phosphoryl] phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O RFWLACFDYFIVMC-UHFFFAOYSA-D 0.000 claims description 2
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 claims description 2
- 239000005015 poly(hydroxybutyrate) Substances 0.000 claims description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims 2
- 239000000155 melt Substances 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 5
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 238000000206 photolithography Methods 0.000 description 4
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 3
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 description 3
- 238000002032 lab-on-a-chip Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- CXQXSVUQTKDNFP-UHFFFAOYSA-N octamethyltrisiloxane Chemical compound C[Si](C)(C)O[Si](C)(C)O[Si](C)(C)C CXQXSVUQTKDNFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004987 plasma desorption mass spectroscopy Methods 0.000 description 3
- -1 poly (dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 3
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000004035 construction material Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000007431 microscopic evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest mikroukład do trójwymiarowej hodowli komórkowej stosowany do prowadzenia badań z wykorzystaniem materiału biologicznego. Tego typu mikroukłady mogą znaleźć zastosowanie w szczególności w badaniach związanych z inżynierią tkankową.
Mikroukłady do hodowli komórek i prowadzenia badań cytotoksyczności, prezentowane w liter aturze, wykonane są zazwyczaj z materiałów, które jednocześnie stanowią materiał konstrukcyjny układu oraz miejsce wzrostu komórek. W polskim zgłoszeniu patentowym P.393251 w zależności od rodzaju analizowanych komórek stosowany jest hydrofobowy poli(dimetylosiloksan) lub hydrofilowe szkło. Mikrosystemy tego typu umożliwiają prowadzenie hodowli w ułożeniu 2D co nie daje możliwości uzyskania struktur umożliwiających przestrzenne ułożenie komórek, a tym samym prowadzenie badań w warunkach zbliżonych do warunków in vivo.
Z polskiego zgłoszenia patentowego P.399357 znany jest mikroukład umożliwiający hodowlę komórkową w ułożeniu 3D. Przywołany mikroukład składa się z dwóch płytek, których budowa wraz z elementami hodowlanymi nie oddaje w pełni warunków in vivo.
Celem wynalazku jest uzyskanie struktur umożliwiających przestrzenne ułożenie komórek w warunkach umożliwiających prowadzenie badań w warunkach bardzo zbliżonych do warunków in vivo.
Mikroukład według wynalazku stanowi hybrydowy system składający się z trzech połączonych ze sobą płytek polimerowych, korzystnie z poli(dimetylosiloksanu) PDMS oraz umieszczonych wewnątrz mikroukładu warstw nanowłókien polimerowych. Górna płytka polimerowa zawiera kanał wlotowy, rozchodzący się w mikrokanały przeznaczone do wprowadzania komórek do mikrostruktur. Ponadto w płytce tej znajdują się mikrokanały tworzące generator gradientu stężeń, oraz kanały wlotowe służące do wprowadzenia różnych stężeń badanych substancji i kanały wylotowe. Środkowa płytka polimerowa i dolna płytka polimerowa wykonane są z usieciowanego poli(dimetylosiloksanu), bez dodatkowych mikrostruktur. Środkowa płytka stanowi membranę, w której wywiercono otwory, tworzące macierz. Na dolnej płytce polimerowej umieszczono warstwy nanowłókien polimerowych o średnicy i położeniu analogicznym do otworów pozostałych dwóch płytek polimerowych tworzących macierz. Tak wykonane płytki polimerowe połączono ze sobą z wykorzystaniem plazmy tlenowej, w wyniku czego uzyskano mikrokomory hodowlane wypełnione nanowłóknami. Wytworzony i wysterylizowany mikroukład służy do przestrzennej hodowli komórek na nanowłóknach polimerowych.
Nanowłókna mogą być wykonane z dowolnych materiałów za pomocą metody elektroprzędzenia z roztworu lub stopu, lub inną metodą, która pozwala otrzymać struktury nanowłókniste. Nan owłókna mogą posiadać różną morfologię, geometrię i wymiary. Rozmiary włókien mogą zmieniać się od kilku nanometrów do kilku mikrometrów. Włókna mogą być o przekroju kołowym, prostokątnym lub nieregularnym. Mogą być typu rdzeń-otoczka. Włókna w nanowłókninie mogą być nieuporządkowane lub ułożone równolegle tworzyć trójwymiarowe struktury o różnej porowatości i różnych rozmiarach porów. Nanowłókniny mogą być wytworzone z dowolnego materiału zarówno biodegradowalnego np. polikaprolakton, polilaktyd, poliglikolid, polihydroksymaślan, chitosan jak i nie biodegradowalnego jak alkohol poliwinilowy. Mogą być mieszaniną polimeru syntetycznego i naturalnego, np. polilaktyd i kolagen. Może być materiałem kompozytowym np. polikaprolakton z dodatkiem nanocząstek hydroks yapatytu lub trójfosforanu wapnia. Możliwa jest również modyfikacja powierzchni nanowłók nin np. poprzez dołączanie różnych grup funkcyjnych lub białek, sterując tym samym właściwościami biologicznymi materiału. Nanowłókna mogą być zmodyfikowane w ten sposób, że zawierają na powierzchni lub w swojej objętości lub w rdzeniu (włókna typu rdzeń-otoczka) dodatkowo substancje czynne lub czynniki biologiczne, np. czynniki wzrostu.
Wytworzenie mikroukładu rozpoczyna się od zaprojektowania przebiegu mikrostruktur - masek, które następnie odtwarzane są w górnej płytce polimerowej za pomocą techniki fotolitografii i metody odlewu. Metoda fotolitografii polega na wytworzeniu tzw. pieczątki ze wcześniej zaprojektowanym wzorem, przy zastosowaniu materiału światłoczułego i naświetleniu go światłem UV. Mikrostruktury w górnej płytce polimerowej otrzymuje się poprzez wylanie płynnego prepolimeru na wykonaną pieczątkę, a następnie usieciowaniu go w temperaturze 70°C przez 60 min. Ponadto, odwzorowano m ikrokanały tworzące generator gradientu stężeń, zawierający kanały wlotowe służące do wprowadzenia różnych stężeń badanych substancji i kanały wylotowe. Korzystny mikroukład zawiera macierz 3x3 mikrokomór hodowlanych, w których znajduje się warstwa nanowłókien polimerowych, stanowiących
PL 224 588 B1 rusztowania przeznaczone do hodowli komórek. Do mikrokomór doprowadzona jest sieć mikrokanałów przeznaczona do równomiernego wprowadzenia komórek oraz substancji odżywczych.
Mikroukład według wynalazku charakteryzuje się tym, że stanowi on narzędzie umożliwiające hodowlę komórek w ułożeniu przestrzennym w mikroskali. Taki wzrost komórek zapewniony jest poprzez zastosowanie rusztowań wykonanych z opisanych powyżej nanowłókien polimerowych metodą elektroprzędzenia symulujących budowę i strukturę naturalnej macierzy pozakomórkowej. Integracja nanomateriałów w systemie Lab-on-a-chip daje możliwość hodowli komórek w warunkach zbliżonych do tych panujących in vivo. Tym samym oczekuje się, że zachowanie i reakcja hodowanych komórek będzie zbliżona do ich zachowania w organizmie. Taka konstrukcja Lab-on-a-chip umożliwia również w sposób szybki i syntetyczny badanie odziaływania biomateriału rusztowania z komórkami. Jednocześnie zmieniając właściwości nanowłóknin można w pewnym stopniu sterować zachowaniem komórek. Wzbogacając nanowłókniny w czynniki biologiczne można również badać wpływ tych czynników na komórki.
Opracowana metoda umieszczania nanowłókien w mikrostrukturach mikroukładu umożliwia testowanie wielu typów nowoopracowanych nanomateriałów, stanowiących rusztowania dla hodowli wielu typów komórek. Zastosowanie materiałów nanowłóknistych do modyfikacji miejsc mikroukładu, na których wzrastają komórki, pozwala na uzyskanie struktur umożliwiających przestrzenne ułożenie komórek, a tym samym prowadzenie badań w warunkach jeszcze bardziej zbliżonych do warunków in vivo. Wykorzystanie nanowłókien polimerowych w systemach Lab-on-a-chip pozwala na odtworzenie struktur substancji pozakomórkowych oraz analizę przestrzennego wzrostu komórek w mikroskali.
Zmieniając morfologię i skład chemiczny nanowłókien można sterować ich właściwościami mechanicznymi oraz fizyko-chemicznymi. Można otrzymać włókna o wysokiej lub niskiej sztywności. Można otrzymać struktury o hydrofobowych lub hydrofilowych właściwościach, o różnym kącie zwilżania.
Mikroukład według wynalazku został zilustrowany w przykładzie wykonania na rysunku, na którym Fig. 1 przedstawia mikroukład w widoku perspektywicznym przez pokazanie kolejnych warstw mikroukładu, Fig. 2 przedstawia przekrój poprzeczny jednej mikrokomory hodowlanej oraz Fig. 3 przedstawia mikroukład w rzucie ukośnym.
Mikroukład według wynalazku stanowi hybrydowy system składający się z trzech połączonych ze sobą płytek polimerowych - górnej 1, środkowej 2 i górnej 3, korzystnie z poli(dimetylosiloksanu) PDMS oraz umieszczonych wewnątrz mikroukładu warstw nanowłóknin polimerowych 4 z polikaprolaktonu PCL, otrzymanych metodą elektroprzędzenia. Wytworzenie mikroukładu rozpoczyna się od zaprojektowania w programie AutoCAD przebiegu mikrostruktur - masek, które następnie odtworzone zostały w górnej płytce polimerowej 1 za pomocą techniki fotolitografii i metody odlewu. Metoda fotolitografii polega na wytworzeniu tzw. pieczątki ze wcześniej zaprojektowanym wzorem, przy zastosowaniu materiału światłoczułego i naświetleniu go światłem UV. Mikrostruktury w płytce polimerowej 1 otrzymuje się poprzez wylanie płynnego prepolimeru na wykonaną pieczątkę, a następnie usieciowaniu go w temperaturze 70°C przez 60 min. Górna płytka polimerowa 1 zawiera kanał wlotowy 5, rozchodzący się w mikrokanały 6 o szerokości 100 μm i głębokości 50 μm przeznaczone do wprowadzania komórek do mikrostruktur 7a, o średnicy 1000 μm. Ponadto, odwzorowano mikrokanały tworzące generator gradientu stężeń 8, zawierający dwa kanały wlotowe 9a i 9b służące do wprowadzenia dwóch stężeń badanych substancji i trzy kanały wylotowe 10. Płytki polimerowe 2 i 3 stanowił usieciowany PDMS, bez dodatkowych mikrostruktur. W celu uzyskania płytek polimerowych 2 i 3 na powierzchnię o wymiarach 7,5 cm x 2,5 cm wylano 0,5 g (dla płytki 2) i 15 g (dla płytki 3) płynnego prepolimeru i następnie usieciowano. Środkowa płytka 2 stanowiła membranę o grubości 200 μm, w której wywiercono dziewięć otworów 7b, o średnicy 1000 μm, tworzących macierz 3x3. Na dolnej płytce polimerowej 3 umieszczono dziewięć nanowłóknin polimerowych 4, o średnicy 1100 μm, w taki sposób aby analogicznie do płytek polimerowych 1 i 2 tworzyły one macierz 3x3. Tak wykonane płytki polimerowe połączono ze sobą z wykorzystaniem plazmy tlenowej, w wyniku czego uzyskano mikrokomory hodowlane 7 o głębokości 200 μm i średnicy 1000 μm wypełnione nanowłóknami o średnicy ok. 500 nm 4. Wytworzony i wysterylizowany mikroukład posłużył do przestrzennej hodowli komórek na nanowłóknach polimerowych.
Do tak wykonanego mikroukładu wprowadzono zawiesinę nowotworowych komórek płuc człowieka - A549 o gęstości 106 komórek/ml w przepływie 15 μ^^. Mikroukład wraz z komórkami umieszczono w inkubatorze w 37°C i 5% CO2. Po 24 h inkubacji obserwowano adhezję komórek do podłoża, który stanowiły nanowłókniny polimerowe. W kolejnych dniach obserwowano wzrost i proliferację komórek. W celu potwierdzenia prawidłowego wzrostu komórek na nanowłókninach polimero4
PL 224 588 B1 wych przeprowadzono test żywotności. W tym celu, do mikroukładu wprowadzono roztwory barwników fluorescencyjnych: calceinę AM (CAM) oraz jodek propidyny (PI) w przepływie 2 μΙ/min. CAM wyznacza komórki żywe, wybarwiając je na zielono, PI komórki martwe, wybarwiając je na czerwono. Na podstawie analizy mikroskopowej (mikroskop odwrócony fluorescencyjny, Olympus IX) potwierdzono, prawidłową proliferację komórek, tym samym potwierdzając możliwość stosowania wytworzonego mikroukładu do prowadzenia hodowli komórkowych.
Claims (17)
1. Mikroukład do trójwymiarowej hodowli komórkowej, stanowiący hybrydowy system składający się z połączonych ze sobą płytek polimerowych, zawierających kanały wlotowe rozchodzące się w mikrokanały tworzące generator gradientu stężeń, kanały wlotowe rozchodzące się w mikrokanały przeznaczone do wprowadzania komórek do mikrostruktur i kanały wylotowe, znamienny tym, że składa się z trzech płytek - górnej płytki (1), środkowej płytki (2) oraz dolnej płytki (3) oraz umieszczonych wewnątrz mikroukładu warstw nanowłókien polimerowych (4), przy czym górna płytka polimerowa (1) zawiera kanał wlotowy (5), rozchodzący się w mikrokanały (6) przeznaczone do wprowadzania komórek do mikrostruktur (7a) oraz mikrokanały tworzące generator gradientu stężeń (8) oraz kanały wlotowe (9) i kanały wylotowe (10), zaś środkowa płytka polimerowa (2) stanowi membranę z otworami (7b), tworzące macierz a na dolnej płytce polimerowej (3) znajdują się warstwy nanowłókien polimerowych (4) o średnicy i położeniu analogicznym do otworów (7a) i (7b) pozostałych dwóch płytek polimerowych tworzących macierz a ponadto płytki polimerowe (1, 2, 3) połączone są ze sobą z wykorzystaniem plazmy tlenowej.
2. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) wykonane są za pomocą metody elektroprzędzenia z roztworu lub stopu.
3. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że rozmiary nanowłókien polimerowych (4) wynoszą od kilku nanometrów do kilku mikrometrów.
4. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) mają przekrój kołowy, prostokątny lub nieregularny.
5. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) są typu rdzeń-otoczka.
6. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są nieuporządkowane.
7. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są ułożone równolegle.
8. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie tworzą trójwymiarowe struktury o różnej porowatości i różnych rozmiarach porów.
9. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są wytworzone z materiału biodegradowalnego.
10. Mikroukład według zastrz. 9, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są wytworzone z polikaprolaktonu, polilaktydu, poliglikolidu, polihydroksymaślanu, chitosanu.
11. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są wytworzone z materiału niebiodegradowalnego.
12. Mikroukład według zastrz. 11, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są wytworzone z alkoholu poliwinilowego.
13. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są wytworzone z mieszaniny polimeru syntetycznego i naturalnego, korzystnie polilaktydu i kolagenu.
14. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są wytworzone z materiału kompozytowego.
15. Mikroukład według zastrz. 14, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są wytworzone z polikaprolaktonu z dodatkiem nanocząstek hydroksyapatytu lub trójfosforanu wapnia.
16. Mikroukład według zastrz. 1, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie są wytworzone z modyfikowanych powierzchniowo nanowłóknin poprzez dołączenie grup funkcyjnych lub białek.
PL 224 588 B1
17. Mikroukład według zastrz. 5, znamienny tym, że nanowłókna polimerowe (4) w nanowłókninie zawierają na powierzchni lub w swojej objętości lub w rdzeniu dodatkowo substancje czynne lub czynniki biologiczne takie jak czynniki wzrostu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL406928A PL224588B1 (pl) | 2014-01-24 | 2014-01-24 | Mikroukład do trójwymiarowej hodowli komórkowej |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL406928A PL224588B1 (pl) | 2014-01-24 | 2014-01-24 | Mikroukład do trójwymiarowej hodowli komórkowej |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL406928A1 PL406928A1 (pl) | 2015-08-03 |
| PL224588B1 true PL224588B1 (pl) | 2017-01-31 |
Family
ID=53723563
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL406928A PL224588B1 (pl) | 2014-01-24 | 2014-01-24 | Mikroukład do trójwymiarowej hodowli komórkowej |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL224588B1 (pl) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL127216U1 (pl) * | 2018-04-05 | 2019-10-07 | Politechnika Warszawska | Wielofunkcyjny mikrosystem przepływowy |
-
2014
- 2014-01-24 PL PL406928A patent/PL224588B1/pl unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL127216U1 (pl) * | 2018-04-05 | 2019-10-07 | Politechnika Warszawska | Wielofunkcyjny mikrosystem przepływowy |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL406928A1 (pl) | 2015-08-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mohanty et al. | Fabrication of scalable and structured tissue engineering scaffolds using water dissolvable sacrificial 3D printed moulds | |
| Chung et al. | Microfluidic fabrication of microengineered hydrogels and their application in tissue engineering | |
| Mondrinos et al. | Native extracellular matrix-derived semipermeable, optically transparent, and inexpensive membrane inserts for microfluidic cell culture | |
| Kang et al. | Digitally tunable physicochemical coding of material composition and topography in continuous microfibres | |
| US10928382B2 (en) | Microfluidic device and method for analysis of tumor cell microenvironments | |
| Nguyen et al. | Microfluidic approach for the fabrication of cell-laden hollow fibers for endothelial barrier research | |
| Ghorbanian et al. | Microfluidic direct writer with integrated declogging mechanism for fabricating cell-laden hydrogel constructs | |
| JP5801311B2 (ja) | 細胞培養用のマイクロスケール多流体流バイオリアクタ | |
| Morimoto et al. | Three-dimensional cell culture based on microfluidic techniques to mimic living tissues | |
| Sousa et al. | Surface Micro‐and Nanoengineering: Applications of Layer‐by‐Layer Technology as a Versatile Tool to Control Cellular Behavior | |
| US10758902B2 (en) | Method of fabricating semipermeable ultrathin polymer membranes | |
| Bae et al. | Bio-inspired configurable multiscale extracellular matrix-like structures for functional alignment and guided orientation of cells | |
| US20060141617A1 (en) | Multilayered microcultures | |
| Kitagawa et al. | Patterned hydrogel microfibers prepared using multilayered microfluidic devices for guiding network formation of neural cells | |
| Nadine et al. | Advances in microfabrication technologies in tissue engineering and regenerative medicine | |
| JP6628416B2 (ja) | 細胞培養方法 | |
| Kobuszewska et al. | Lab-on-a-chip system integrated with nanofiber mats used as a potential tool to study cardiovascular diseases (CVDs) | |
| US20190136172A1 (en) | Three-dimensional thin film structure having microparticles enclosed therein and method for manufacturing same | |
| He et al. | Layer-by-layer micromolding of natural biopolymer scaffolds with intrinsic microfluidic networks | |
| CN109810935A (zh) | 细胞分区培养的明胶甲基丙烯酰胺核壳微球的制备方法 | |
| Patel et al. | Micropatterned fibrous scaffolds for biomedical application | |
| Mazzitelli et al. | Optimised production of multifunctional microfibres by microfluidic chip technology for tissue engineering applications | |
| Jeong et al. | Microfluidic spinning of grooved microfiber for guided neuronal cell culture using surface tension mediated grooved round channel | |
| Zheng et al. | Precise manipulation of cell behaviors on surfaces for construction of tissue/organs | |
| PL224588B1 (pl) | Mikroukład do trójwymiarowej hodowli komórkowej |